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Tema05 PDF
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En la actualidad, son ya
centenares los antígenos de este
tipo que se han definido gracias a
las intensas colaboraciones
establecidas entre los laboratorios
que trabajan en histo-
compatibilidad, a través de los Workshops Internacionales de Histocompatibilidad que desde
1964 se celebran periódicamente.
TABLA 5.1
Diferentes tipos de HLA
HLA Formas
Clase I clásicas A, B y C
Clase II clásicas DR, DQ y DP
Otras G, E, F y CD1
Fig.:5.3
Fig.:5.4 La beta-2-microglobulina,
polipéptido idéntico al componente
sérico normal, es idéntica en todos los
individuos de la misma especie y los
genes que la codifican no se
encuentran en el MHC, situándose en
el cromosoma 16, en el hombre y en el
cromosoma 2 en el ratón. El análisis
estructural de la beta-2-microglubulina
revela que pertenece a la superfamilia
de las inmunoglobulinas, con una
notoria homología con el tercer dominio
constante de la cadena pesada de las
inmunoglobulinas. La cadena pesada,
por el contrario, es altamente variable
entre individuos de la misma especie,
siendo la responsable del polimorfismo
antigénico de las moléculas de
histocompatibilidad clase I (Figura 5.4).
Se distinguen tres zonas bien definidas,
una zona extracelular de mayor tamaño en la que se encuentran los determinantes antigénicos
de la molécula, una pequeña región transmembrana, hidrófoba, y finalmente una región
intracitoplasmática de unos 35 aminoácidos.
Fig.:5.5
Otras moléculas de histocompatibilidad
Existen otras moléculas de histocompatibilidad entre las que destacan de manera más
significativa: HLA-G, HLA-E y HLA-F, que presentan una gran homología con las moléculas
clásicas de MHC de clase I (HLA-A, -B y -C).
En humanos la familia de los genes de CD1 contiene 5 miembros: CD1A, CD1B, CD1C,
CD1D y CD1E, que se agrupan en dos grupos en base a la similitud de la secuencia de
aminoácidos entre ellas y entre especies. En general, las moléculas de CD1 se expresan
predominantemente en timocitos y en algunas APCs derivadas de médula ósea como las
células dendríticas. Se ha descrito que las células del epitelio intestinal expresan las moléculas
de CD1d.
GENÉTICA DEL COMPLEJO MAYOR DE HISTOCOMPATIBILIDAD
Como ya se ha dicho, los genes que codifican las moléculas cuya estructura y función
hemos estudiado, se encuentran agrupados en el genoma formando el Complejo Mayor de
Histocompatibilidad que se extiende aproximadamente 2-3 centimorgans (aproximadamente
4x106 pares de bases) y en el humano contiene al menos 50 genes distintos. Este grupo de
genes se encuentra organizado de forma diferente en las distintas especies, conociéndose con
precisión la organización genética del MHC en el hombre, sistema HLA, y el ratón, sistema H-2.
Recientemente se ha propuesto una nueva taxonomía para clasificar los distintos genes que
codifican las moléculas de histocompatibidad, (Tabla 5.2)
TABLA 5.2
Genes que codifican las moléculas de histocompatibidad
Nomenclatura antigua Nomenclatura actual
HLA A, B y C HLA clase Ia
HLA E, F y G HLA clase Ib
Localizadas en complejo HLA (MIC, HFE) HLA clase Ic
Moléculas localizadas fuera del complejo HLA HLA clase Id
Fig.:5.6
Este grupo de genes se heredan de acuerdo con las leyes de Mendel, como caracteres
codominantes simples. La región genética de un cromosoma que contiene todos los genes HLA
(a excepción de los que codifican la beta-2-microglobulina) se denomina haplotipo HLA (Figura
5.7).
Así pues un haplotipo HLA incluye los genes clase I: HLA-A, HLA-B y HLA-C y los
genes clase II: HLA-DR, HLA-DQ y HLA- DP. y otros loci que codifican moléculas implicadas en
el procesamiento de péptidos como son los genes TAP cuyos productos están implicados en la
transferencia de péptidos del citosol al retículo endoplásmico y los genes LMP que codifican
componentes del proteosoma responsable de transformar proteínas en péptidos que
posteriormente serán presentados en la superficie celular. Asimismo en esta región se
encuentran los genes que codifican algunos factores del complemento, la enzima
21-hidroxilasa, la citocina TNF-alfa y otros genes y pseudogenes con homología estructural con
los genes clase I y clase II con limitado polimorfismo y cuya función aun se encuentra
insuficientemente aclarada (Figura 5.8).
Fig.:5.8
Cada célula del organismo, (excepto las células germinales), poseen un haplotipo
procedente del padre y otro de la madre. La mayoría de los genes del MHC son altamente
polimórficos, es decir pueden ser estructuralmente diferentes entre individuos de la misma
especie. No obstante, como se vio al hablar de la estructura, existen zonas muy conservadas,
prácticamente idénticas en todos los individuos y zonas altamente variables.
TABLA 5.3
Lista de antígenos HLA clase I y II
A B C D DR DQ
A1 B5 B51(5) Cw1 Dw11(w7) DR1 DQ1
A2 B7 B5102 Cw2 Dw12 DR103 DQ2
A203 B703 B5103 Cw3 Dw13 DR2 DQ3
A210 B8 B52(5) Cw4 Dw14 DR3 DQ4
A3 B12 B54 Cw5 Dw15 DR4 DQ5(1)
A9 B13 B53 Cw6 Dw16 DR5 DQ6(1)
A10 B14 B54(22) Cw7 Dw17(w7) DR6 DQ7(3)
A11 B15 B55(22) Cw8 Dw18(w6) DR7 DQ8(3)
A19 B16 B56(22) Cw9(w3) Dw19(w6) DR8 DQ9(3)
A23(9) B17 B57(17) Cw10(w3) Dw20 DR9
A24(9) B18 B58(17) Dw21 DR10
A2403 B21 B59 Dw22 DR11(5)
A25(10) B22 B60(40) Dw23 DR12(5)
A26(10) B27 B61(40) Dw24 DR13(6) DP
A28 B2708 B62(15) Dw25 DR14(6) DPw1
A29(19) B35 B63(15) Dw26 DR1403 DPw2
A30(19) B37 B64(14) DR1404 DPw3
A31(19) B38(16) B65(14) DR15(2) DPw4
A32(19) B39(16) B67 DR16(2) DPw5
A33(19) B3901 B70 DR17(3) DPw6
A34(10) B3902 B71(70) DR18(3)
A36 B40 B72(70) DRW51
A43 B4005 B73 DRW52
A66(10) B41 B75(15) DRW53
A68(28) B42 B76(15)
A69(28) B44(12) B77(15)
A74(19) B45(12) B78
A80 B46 B81
B47 Bw4
B48 Bw6
B49(21)
B50(21)
Fig.:5.9
Loci HLA-A, B, C.
La región que codifica las moléculas de clase I está dividida en tres loci, conocidos
como A, B y C, que codifican tres tipos de cadenas pesadas para las distintas moléculas de
clase I. Algunos de estos genes han sido estudiados mediante técnicas de hibridación de DNA
y se ha demostrado que se encuentran divididos en exones e intrones, encontrándose una
estructuración homóloga a los genes que codifican la b-2 microglobulina, las inmunoglobulinas
y otros tipos de proteínas.
• Gen HLA-E: Este gen presenta una secuencia parecida a la molécula Qa1
murina, que une péptidos hidrofílicos de la secuencia leader de las moléculas MHC
clásicas. Se expresa en pequeñas cantidades en la superficie de la célula, y su
expresión está regulada por la presencia de las otras moléculas de
histocompatibilidad presentadas en la superficie celular y es TAP dependiente.
• Gen HLA- F: Este gen es muy similar en estructura y secuencia a los genes de
las moléculas clásicas. Se transcribe en una gran variedad de células y tejidos
presentando un polimorfismo limitado.
• Gen HLA-G: Este gen presenta la estructura típica de la HLA clase I y su
expresión parece estar restringida a la placenta y se asocia con funciones de
carácter tolerogénico.
Región HLA-D
En la región D se localizan los genes que codifican las moléculas HLA-DR, HLA-DQ y
HLA-DP. Su análisis bioquímico demuestra que se trata de moléculas de clase II compuestas,
como ya hemos indicado, por una cadena a y otra b.
Las moléculas HLA-DR y HLA-DQ se estudiaron por serología y los antígenos HLA-DP
fueron inicialmente definidos por estudios funcionales, mediante estimulación secundaria de
linfocitos previamente sensibilizados (PLT).
Tanto las familias DQ como DP contienen dos pares de genes, es decir dos genes a y
dos genes b, próximos entre sí y todos polimórficos. Sólo uno de estos pares, DQA1 y DQB1 y
DPA1 y DPB1, codifican las cadenas a y b de las moléculas de clase II HLA-DQ y HLA-DP
respectivamente. Los otros 2 pares de genes DQA2, DQB2 y DQB3 (pseudogen) y DPA2 y
DPB2 poseen un limitado polimorfismo y no se encuentran expresados en la superficie celular.
Además existe otra subregión que contiene un gen a, denominado DNA, y un gen beta, DOB,
que podrían codificar un nuevo tipo de moléculas clase II.
Por otra parte también se han localizado una nueva pareja de genes, HLA-DM, no
polimórficos, que se encuentran implicados en el proceso de procesamiento y presentación de
antígeno como se expone en el próximo capítulo. Cada uno de estos genes esta estructurado
en secuencias de intrones y exones relacionados con los dominios estructurales de la proteína
codificada por ellos.
Tipaje HLA.
Se denomina tipaje HLA, al análisis llevado a cabo en el laboratorio para conocer los
alelos HLA de un determinado individuo mediante métodos serológicos, análisis de genes por
biología molecular (Figura 5.11). y métodos celulares.
Fig.:5.11
La mayoría de los genes del HLA son altamente polimórficos, como ya se explicó en el
apartado anterior, y cada especificidad definida en la superficie celular representaría un alelo
diferente a nivel genómico. Así se han descrito numerosos alelos para los diferentes loci HLA.
Método Serológico.
Las técnicas de biología molecular más usadas (no las únicas) para detectar polimorfismos
en el ADN utilizan los métodos de:
La secuenciación directa del ADN no es práctica para su uso rutinario. Actualmente son
utilizadas técnicas de PCR-SBT en la que se secuencian los fragmentos amplificados mediante
PCR.
Fig.:5.13
Métodos Celulares
En la parte 5' no traducida de los genes se encuentran las áreas reguladoras (llamadas
elementos cis) constituidas por el promotor (área estrictamente necesaria) y los aumentadores
e inhibidores que modulan la expresión basal de los genes. El promotor suele estar situado a
una distancia de unas 300 bases desde el inicio de la transcripción, mientras que los
aumentadores o inhibidores se encuentran a distancias variables. Sobre estas áreas cis se fijan
unas proteínas llamadas factores de transcripción (elementos trans) que son necesarios para
que se active la polimerasa II, enzima que inicia la transcripción. En muchos casos, la
inducción de la expresión de los genes se debe a modificaciones post-transtraducionales de
estas proteínas como son la fosforilación o la glicosilación. Hasta ahora no se conoce el
mecanismo exacto de la expresión de los genes de clase I y II aunque se han descrito algunos
de sus elementos cis y trans.
Fig.:5.14
Otros genes de esta región y de interés en la respuesta inmune son los genes que
codifican
Fig.:5.15
Se localiza en el brazo corto del cromosoma 17 e incluye varios loci, entre ellos los K,
IA, IE, S y D. Como en el humano, cada locus contiene uno de varios genes alternativos. Los
genes K y D codifican para los antígenos de clase- I (K y D), equivalentes a los humanos HLA-
A y HLA-B. Los loci IA e IE (análogos a los antígenos D en el humano) contienen a los genes
Aa/Ab y Ea/Eb que codifican a los antígenos MHC de clase III (Ia e Ie). Dentro del complejo H-2
también está insertada una región S donde se encuentran los genes correspondientes a los
antígenos de clase III (C2 y C4). Como en el humano, los genes H-2 se heredan en bloque
(como haplotipos), son codominantes y se segregan siguiendo las leyes de Mendel (Figura
5.16).
Fig.:5.16
En la tabla 5.4 se muestran los distintos haplotipos H-2 de las cepas murinas mas
comunes y en la figura 5.17. se compara la organización del complejo de histocompatibilidad
murino con los de las diferentes especies.
TABLA 5.4
Haplotipos H-2 en ratones
Fig.:5.17
Tipo Cepa de ratón
a A/J B10.A
b C57BL;C57BL/6;
d BALB/c; DBA/2;
f A.CA B10.M
g B10.D2(R103)
h B10.A(2R); B10.A(4R)
i B10.A(5R)
j WB
k CBA;C3H;B10.BR
m AKM
o C3H.OH, C3H.OL
q DBA/1
z NZW
TABLA 5. 5
Principales funciones de las moléculas de histocompatibilidad
HLA-I Presentación de antígenos a CD8 y marcador de diferenciación.
HLA-II Presentación de antígenos a CD4 y marcador de activación celular.
HLA-G Posible función inductora de tolerancia.
CD1 Educación tímica de los linfocitos T (timocitos y células dendríticas).
HLA Y ENFERMEDAD
TABLA 5. 6
Principales enfermedades asociadas a HLA
Enfermedad Alelo RR
Espondilitis anquilopoyética B27 70
Uveitis anterior aguda B27 10
Hemocromatosis idiopática A3 7
Hiperplesia adrenal congénita B47 10
Enfermedad de Behcet B5 4
Narcolepsia DR2 30
Dermatitis herpetiforme DR3 17
Pénfigo vulgar DR4 15
Enfermedad Good-Pasture DR2 14
Enfermedad celiaca DR3 12
Artritis reumatoide DR4 4
Las causas de esta asociación HLA y enfermedad no son conocidas completamente.
Por ejemplo en espondilitis anquilopoyética (EA), enfermedad invalidante y que afecta a las
articulaciones de la columna principalmente, y en la que se ha descrito una fuerte asociación
con HLA-B27, se ha podido observar que ciertos péptidos antigénicos de origen articular
serian capaces de formar un complejo con HLA-B27 específicamente que induciría fenómenos
de autoinmunidad, bien por generar en la molécula B-27 modificaciones conformacionales que
la harían no ser reconocida como propia, bien por generar complejos HLA-péptido con cierta
similitud con antígenos bacterianos que provocarían reacciones cruzadas autoagresivas en
individuos HLA-B27, previamente sensibilizados a tales antígenos bacterianos.
BIBLIOGRAFÍA