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UNMSM – FQIQ DPTO. ACAD.

DE QUÍMICA ORGÁNICA

UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

FACULTAD DE QUÍMICA E INGENIERÍA QUÍMICA

DEPARTAMENTO DE QUÍMICA ORGÁNICA

CURSO DE BIOQUÍMICA

PRÁCTICA EXTRACCION DE COLESTEROL DEL CEREBRO


Profesor: Mg. Juan Carlos Woolcott Hurtado

Horario: Sábado 8-12pm

Alumnos:

Alvarez Ninahuanca Sally Estefania 14070067

Flores Salsavilca B. 14070009

Puma Ticona Rhony Ulises 14070088

Rojas Barreto Jazmín 14070112

Fecha de realización de la práctica: 27 de otubre del 2018

Fecha de entrega de la práctica: 30 de octubre del 2018

Lima – Perú

2018 – II

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Contenido
RESUMEN ....................................................................................................................... 3
INTRODUCCION ............................................................................................................ 4
PRINCIPIOS TEORICOS ................................................................................................ 5
DETALLES EXPERIMENTALES .................................................................................. 7
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL .......................................................................... 8
REACCIONES ................................................................................................................. 9
ANALISIS Y DISCUSION DE RESULTADOS .......................................................... 10
CONCLUSIONES .......................................................................................................... 11
RECOMENDACIONES ................................................................................................ 12
BIBLIOGRAFIA ............................................................................................................ 13

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RESUMEN

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INTRODUCCION

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PRINCIPIOS TEORICOS
Metabolismo de los lípidos
Son un grupo de moléculas orgánicas en cuya composición química intervienen principalmente
los elementos C, H y O y, en menor proporción S y P. La característica común de todos ellos es
que son sustancias poco o nada solubles en agua, pero solubles en disolventes
orgánicos(cloroformo, éter, benceno, xilol, etc.)

Es un grupo muy heterogéneo, ya que no tienen en común ni la estructura de sus moléculas ni la


gran variedad de funciones que desempeñan.

Tanto en las plantas como los animales, los lípidos se almacenan en grandes cantidades como
triacil gliceroles neutros altamente insolubles.

Los lípidos funcionan como aislantes importantes de órganos internos delicados. Así mismo, el
tejido nervioso, la membrana plasmática y todas las membranas de las partículas subcelulares
como mitocondrias, retículo endoplasmático y núcleo tiene lípidos complejos como componentes
esenciales. Ellos pueden ser degradados rápidamente para satisfacer las demandas energéticas de
la célula.

Funciones de los lípidos.

1. Función energética: son carburantes metabólicos y forman depósitos de reserva


energética.
2. Función estructural: son constituyentes estructurales de las membranas biológicas.
3. Función vitamínica: vitaminas liposolubles A, D, E y K.
4. Función hormonal: hormonas esteroideas.

Clasificación de los lípidos según su estructura molecular:

1. Lípidos saponificables: son capaces de formar jabones al reaccionar con bases alcalinas
(NaOH y KOH). Agrupa a losácidos grasos y a sus derivados,ya sea mediante la
formación de enlaces éster con otras sustancias (triacilglicéridos,lípidos de membrana y
ceras), o mediante otras modificaciones(eicosanoides).
2. Lípidos insaponificables:carecen de enlace éster, por loque no forman jabones tras la
hidrólisis alcalina. Derivan desucesivas condensaciones deunidades de isopreno (una
molécula de cinco átomos decarbono), por lo que también reciben el nombre de
isoprenoides y agrupa a los terpenos y a los esteroides

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DETALLES EXPERIMENTALES
Materiales
 Cerebro de animal de laboratorio.
 Aceite vegetal.

Reactivos
 Cloroformo.
 Sulfato de calcio (yeso) en polvo.
 Ácido sulfúrico concentrado.
 Anhídrido acético.
 Estufa, mortero con pilón, lamina de vidrio.
 Tubos de ensayo embudo de vidrio papel filtro.

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PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
Moler cuidadosamente en un mortero de 3g de cerebro con una cantidad de doble yeso.
El homogenizado espeso se distribuyó de manera uniforme, con una espátula sobre la
placa de vidrio y luego secado cuidadosamente a 60°C en la estufa. La masa seca las raspa
de la lámina sobre un mortero seco, se procede a moler bien y luego se pasó a un tubo de
ensayo seco. Se agregó al tubo de ensayo una cantidad de cloroformo y se agito durante
10 minutos. Se filtró el extracto clorofórmico obtenido en un tubo de ensayo seco a través
de un papel filtro. El extracto se conservó para el los análisis correspondientes.

Reacción de Guppert-salkowski
En un tubo de ensayo se tomó una pequeña cantidad de extracto clorofórmico del cerebro
y cuidadosamente por las paredes del tubo se agregó una pequeña cantidad de ácido
sulfúrico concentrado. El tubo se agita débilmente y se observa un anillo color rojo-pardo
luego el líquido paso a un color naranja y rojo-violeta.

Se hizo el mismo procedimiento para el análisis del aceite y la mantequilla. Se observó


para el caso de la mantequilla un mayor cambio en la intensidad de coloración así como
la formación del anillo rojo-pardo.

Componente
Material Reacción Coloración Resultado
investigado
+ H2SO4 Anillo Contiene
Cerebro Colesterol
concentrado pardo colesterol
+ H2SO4 Anillo Contiene
Aceite Colesterol
concentrado pardo colesterol
Contiene
+ H2SO4 Anillo
Mantequilla Colesterol colesterol en
concentrado pardo
mayor proporción

Reacción de Lieberman-Buchard
En un tubo de ensayo seco se agregó 1 mL de extracto clorofórmico y se añadió 10 gotas
de anhídrido acético y 2 gotas de ácido sulfúrico concentrado. Se observa que al inicio se
torna de color rojo pero en un breve tiempo este pasa a color verde.

Se hizo el mismo procedimiento para el análisis del aceite y la mantequilla. Se observó


para el caso de la mantequilla un mayor cambio en la intensidad de coloración.

Componente
Material Reacción Coloración Resultado
investigado
C4H6O3 + H2SO4 Contiene
Cerebro Colesterol Verde
concentrado colesterol
C4H6O3 + H2SO4 Contiene
Aceite Colesterol Verde
concentrado colesterol
Contiene
C4H6O3 + H2SO4
Mantequilla Colesterol Verde colesterol en
concentrado
mayor proporción

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REACCIONES

Reacción de Guppert-salkowski

Reacción de Lieberman-Buchard

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ANALISIS Y DISCUSION DE RESULTADOS


Reacción de Guppert-salkowski
El colesterol por acción de agentes deshidratantes como el ácido sulfúrico se transforma
en colestireleno, compuesto de dobles enlaces conjugados que presentan coloración rojo-
violeta.

La capa superior que consta de cloroformo se vuelve de un rojo azulado a rojo cereza,
mientras que la capa de ácido sulfúrico se vuelve amarilla el cual con fluorescencia tiende
a color verde.

Reacción de Lieberman-Buchard
Es un reactivo utilizado en un ensayo colorimétrico para detectar el colesterol, lo que da
un color verde intento. Se basa en la deshidratación y oxidación del colesterol por ácido
sulfúrico. Como resultado de esto, dos moléculas de colesterol, después dos moléculas de
agua se unen entre sí en el tercer átomo de carbono formando sustancias que corresponde
a las formulas generales de C54H86 y C54H88.

Este color comienza como un color rosa violáceo y progresa de un verde claro y luego de
color verde muy oscuro. El color es debido al grupo hidroxilo (-OH) de colesterol
reaccionar con los reactivos y el aumento de la conjugación de la instauración en el anillo
fusionado adyacente.

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CONCLUSIONES

 Se identificó el colesterol mediante las reacciones de Guppert-salkowski y


Lieberman-Buchard, los cuales son método colorimétrico por que dan un cambio de
coloración en presencia del colesterol, los colores observados fueron rojo-violeta y
verde respectivamente.
 Se encontró mayor cantidad de colesterol en la mantequilla respecto al análisis del
cerebro y el aceite, esto debido a la intensidad de color verde observado.

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RECOMENDACIONES

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BIBLIOGRAFIA

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ANEXOS

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