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UNIVERSIDAD DE COLIMA

FACULTAD DE CIENCIAS MARINAS

DETERMINACION DE PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS EN


CAMARON BLANCO ADULTO (Penaeus vannamei) CULTIVADO EN
LABORATORIO.

TESIS
PARA OBTENER EL GRADO DE MAESTRIA EN ACUACULTURA

PRESENTA

ANA JUDITH MARMOLEJO RODRIGUEZ

ASESOR DE TESIS:
DR. ALEJANDRO OTTO MEYER WILLERER

ASESOR DE TESIS EXTERNO:


DR. FELIPE VAZQUEZ GUTIERREZ

CAMPUS EL NARANJO MANZANILLO, COLIMA, NOVIEMBRE DE 1999.


Facultad de Ciencias Marinas

M. en C. Sergio Alberto Lau Cham


Director de la Facultad de Ciencias Marinas
Presente.

Los que suscriben, Sinodales de la Comisión nombrada para examinar el


manuscrito de Tesis titulado:

“Determinación de plaguicidas organoclorados en camarón blanco


adulto Penaeus vannamei, cultivado en laboratorio”.

que presenta la candidato al Grado Académico de Maestría en Ciencias:


Area. Acuacultura, la C.

Ana Judith Marmolejo Rodríguez


Manifiestan su aceptación a dicho trabajo en virtud de que satisface los
requisitos señalados por las disposiciones reglamentarias y que s e han hecho
las correcciones que cada uno en particular consideró pertinentes.

Atentamente

Sinodal Propietario

_’
INDICE
Resumen i
Agradecimientos ii
Dedicatoria iV
Introducción 1
Antecedentes 6
Generales 6
Normatividad 13
Justificación 24
Objetivos 26
Material y Métodos 27
Localización del Área de Estudio 27
Procedencia de los camarones 27
Tratamiento de los camarones en laboratorio 28
Obtención de los camarones, agua y sedimento 29
Técnica Lab. Nutrición Fac. de Veterinaria 31
Técnica Instituto de Fisiol. Celular 32
Técnica Lab. Fisicoquímica ICMyL 33

Resultados 41
Patrones de plaguìcìdas organoclorados estándares 41
Patrones de plaguìcidas organofosforados estándares 42
Blanco 43
Camarón húmedo por la Técnica de Fac. Veterinaria 44
Camarón seco Técnica de Fisiol. Celular 45
Camarón Material de Referencia (Soxhlet) 46
Camaron Material de Referencia (Microondas) 47
Camarón Lab. Ciencias Mar. (Soxhlet) 48
Camarón Isla Navidad (Soxhlet) 49
Camarón Lab. de Ciencias Marinas (Microondas) 50
Camarón Isla Navidad (Microondas) 51
Plaguicidas en Agua 52 .’
Plaguicidas en Sedimento 53
Plaguicidas en Alimento 54

Discusión 55

Conclusiones 60

Recomendaciones 62

Bibliografía 64

Anexos 72
INDICE DE FIGURAS

Fig.1. Cromatograma de estándares con once plaguicidas organoclo:ados ............................ .41


Fig. 2. Cromatograma de la mezcla de estándares de tres plaguicidas organofosforados ..... ..4 2
Fig. 3. Cromatograma delanálisis de u n blanco de muestra y solventes .................................. .43
Fig. 4. Cromatograma de la técnica 1 ...................................................................................... ..4 4
Fig. 5. Cromatograma de la técnica 2 ...................................................................................... ..4 5
Fig. 6. Cromatograma de muestra de control MRE procesada con la técnica 3 ....................... .46
Fig. 7. Cromatograma de muestra de control SRM analizada con la técnica 4 ......................... .47
Fig. 8. Cromatograma de muestra de camarón del LCM UAG procesadas .............................. .48
Fig. 9. Cromatograma de muestra de camarón procedentes de Isla Navidad, Col.,
utilizando la técnica No. 3 ............................................................................................... 49
Fig. 10. Cromatograma de muestra de camarón del LCM UAG procesadas con
la técnica 4 ..................................................................................................................... .50
Fig. ll. Cromatograma de muestra de camarón de Isla Navidad, Col., utilizando
la técnica No. 4 ............................................................................................................... 51
Fig. 12. Cromatograma del análisis de agua marina de los estanques de cultivo de
camarón en el LCM, Barra de Navidad, Jal. .................................................................. ..5 2
Fig. 13. Cromatograma del análisis de sedimento marino de la laguna Barra de Navidad, Jal . . 53
Fig. 14. Cromatograma del análisis de alimento comercial para camarón adulto analizado
según la técnica 4 ........................................................................................................... 54
Fig. 15. Cobre determinado en cabeza y músculo de camarón de diferentes
fuentes y e n alimento para; camarón .............................................................................. 73
Fig. 16. Cadmio determinado en cabeza y músculo de camarón de diferentes
fuentes y en alimento para camarón .............................................................................. 74
Fig. 17. Níquel determinado en cabeza y músculo de camarón de diferentes
fuentes y en alimento para camarón .............................................................................. 75
Fig. 18. Plomo determinado en cabeza y músculo de camarón de diferentes
fuentes y en alimento para camarón .............................................................................. 76
Fig. 19. Cromo determinado en cabeza y músculo de camarón de diferentes
fuentes y en alimento para camarón .............................................................................. 77
Fig. 20. Extracción de plaguicidas en muestras de sedimento y alimento.
Método EPA D5369-93 .................................................................................................. 78
Fig. 21. Extracción de plaguicidas organoclorados en muestras de agua.
Método EPA 508 ......................... ................................................................................... 79
Fig. 22. Concentración de extractos de muestras de organismos, agua sedimento
y alimento ....... .............................................................................................................. 80
RESUMEN

Marmolejo-Rodríguez A. J. 1999. Determinación de plaguicidas organoclorados en


camarón blanco adulto (.Penaeus vannamei) cultivado en laboratorio. Tesis para
obtener el grado de Maestría en Acuacultura. Facultad de Ciencias Marinas,
Universidad de Colima.

Los camarones reproductores utilizados en el LCM de la Universidad Autónoma


Guadalajara ubicado en la Laguna de Barra de Navidad, en algunas ocasiones
disminuían la producción de larva, sospechándose la presencia de plaguicidas
como inhibidores. Se realizaron determinaciones de plaguicidas organoclorados
en agua, sedimento, alimento y camarones cultivados durante cinco meses. Una
vez cosechados fueron congelados, transportados a la UNAM, D.F. y analizados
en el ICML. Se probaron cuatro técnicas de extracción, de las cuales las más
apropiadas resultaron la del equipo soxhlet y aquella con microondas. Se inyectó
l L de cada muestra concentrada en un cromatógrafo de gases HP5890 con
columna capilar. Se contó con estándar de referencia certificado de camarón
liofilizado obtenido de la Internationa/ Atomic Energy Agency, Mónaco. LOS
cromatogramas no mostraron plaguicidas de los camarones analizados ni en
agua, sedimento y alimento. Se concluyó que ese cu!tivo de camarón en 1995 se
encontró libre de plaguicidas organoclorados y organofosforados.

ABSTRACT

Marmolejo-Rodríguez A. J. 1999. Determination of organochloride pesticides in


white adult shrimp (fenaeus vannamei) cultured in laboratory. Thesìs for Master
Degree in Aquaculture. Faculty of Marine Sciences, Colima University, México.

Adult reproducing shrimp utilized in the LCM laboratory of the Universidad


Autónoma Guadalajara in Barra de Navidad Lagoon, presented decrease of larvae
production, presuming the presence of pesticides as inhibitors. Pesticide
determinations were done in water, sediment, feed and shrimp that were cultured
during five months. Once they were harvested, they were frozen and transported to
the ICML of UNAM in Mexico City, where they were analysed. Four extracting
techniques were probed, those with soxhlet equipment and with microwaves were
t h e m o s t s u c c e s s f u l . I L o f extracted liquid w a s i n j e c t e d i n t o a g a s
chromatographer HP5890 equipped with a capilary column. A certificated
reference of liophilized shrimp (IAEA-Monaco) was used to standardize the
equipment. The obtained chromatogramms of the analyzed shrimp showed no
pesticides, nor did the water, sediment and feed samples. It was concluded, that
the shrimp culture in 1995 was free of organochloride and organofosfate
pesticides.
AGRADECIMIENTOS

El presente trabajo representa la culminación del esfuerzo conjunto de muchas


personas y varías instituciones sin las cuales no hubiera sido posible realizarse y
con las que estaré infinitamente agradecida. Las condiciones bajo las cuales
desarrollé este trabajo no son parecidas a las de la mayoría de los estudiantes de
este programa de maestría, sin embargo al concluir esta investigación veo que sí
bien estuve llena de retos desde el principio, me sirvíó aún mas para valorar la
delicada tarea que implica la investigación científica y el cumplimiento con altos
estándares académicos. El haber participado con el Dr. Felipe Vázquez Gutiérrez mi
asesor de tesis externo en la puesta en marcha de las técnicas analíticas en el
departamento de Cromatografía de Gases del Laboratorio de Fisicoquímica Marina
del Instituto de Ciencias del Mar y Limnología de la UNAM dedicada principalmente
a investígaciones de oceanología y Iimnología,donde ciertamente hubo grandes
retos que fueron más alla de una clásica ínvestigacíón de maestría, ésta situación
particular, aunque no apreciada en su verdadera dimensión por algunos, ayudó
singularmente a mi formación profesional. Por ello quíero agradecer al Dr.
Alejandro Meyer Willerer por su invaluable ayuda, por darme la seguridad de poder
trabajar en Instituciones de excelencia académica y por prestar ayuda inmediata e
incondicional en esta tesis cuando así se lo solicité, y poder ver editada finalmente
esta tesis, al Dr. Felipe Vázquez Gutiérrez por su persistente y persuasiva demanda
de un trabajo de alta calidad, su permanente disposición a discutir ideas y resolver
problemas de todo tipo. Para ambos su apoyo y guianza durante esta investigación
fueron escenciales para la consecución de las metas originalmente establecidas.

La participación de mis sinodales, M en C. Alberto Lau Cham, y M. en C. Carlos


Lezama Cervantes agradezco sus valiosos comentarios porque me alentaron a
concluir este estudio.

La investigación de mi tésis se vió fuertemente favorecida por la valiosa ayuda


prestada, por la M. en C. Carmen Márquez, del Instituto de Química quien me
enseñó Cromatografía de gases; del Dr. Gilberto Díaz-González, del ICMyL por
darme buenos tips.
La Dra. Victoria Chagolla del Instituto de Fisiología Celular, el MVZ Juan Orta del
Depto. de Nutrición de la Fac. De Veterinaria, La Dra. Vicenta Peña y el Téc.
‘Gerardo, del Instituto de Bíomédícas, la Quím en A. Alejandra Guerrero Rodríguez,
todos ellos de la UNAM, agradezco su tiempo y su ayuda académica.

También agradezco al Dr. Virender Sharma, de Texas A&M Uníversíty su interés en


publicar, su constante apoyo y disponibilidad fue ciertamente una gran aportación
a mí formacíón.

Deseo hacer un reconocimiento a la famila Navarro Ólíver por todos sus ánimos y
buena voluntad, asimismo a mí Madre Gloria Rodríguez Rueda por todo su ejemplo
y respaldo moral.

Muy especialmente agradezco a mi esposo Víctor René Magallanes Ordóñez, por


sus comentarios y orientaciones relacionadas con mi trabajo de tesis así como por
su apoyo incondicional para seguir con mis metas profesionales y...

. ..eternamente agradecida con Jesús por permitirme sentír su presencia en cada


microsegundo de mí vida.
iv

. ..a Pablo René


y a Román Vinicio o Ana Fabiola.
1. INTRODUCCIÓN

El uso extendido de contaminantes orgánicos como plaguicidas,


hidrocarburos, y bifenilos policlorados (PCB’s), ocasiona problemas de gran
complejidad, su persistencia es tal que ya se han encontrado en muchos
ecosistemas del planeta e incluso en sangre y secreciones de seres humanos,
por lo que es importante su estudio y seguimiento en todos los sistemas de vida
del planeta.

Se define como plaguicida a la sustancia o mezcla de ellas, destinada a


prevenir, destruir o controlar plagas incluyendo los vectores de enfermedad
humana o animal, las especies no deseadas de plantas o animales que ocasionan
daño duradero u otras que interfieren con la producción, procesamiento,
almacenamiento, transporte y comercialización de alimentos, artículos agrícolas
de consumo (como cereales en rama, azúcar de remolacha y semillas de
algodón), madera y sus productos, forraje para animales o productos que puedan
administrárseles para el control de insectos, arácnidos u otras plagas corporales.
Este término incluye sustancias destinadas al crecimiento de plantas, defoliantes,
desecantes, agentes para ralear frutas o sustancias para evitar la caída prematura
del fruto y productos aplicados a los cultivos, ya sea antes de la cosecha o
después de ella para prevenir su deterioro durante el almacenamiento o
transporte (FAO, 1990).

Descripciones parecidas han sido adoptadas por la Comisión del Codex


Alimentarius y por países del Consejo Europeo en 1984. Se excluyen los
fertilizantes, los nutrimentos de plantas y animales, los aditivos alimentarios y las
drogas para animales (Henao, et al., 1991). Algunos plaguicidas pueden ser de
orígen biológico, por ejemplo el Bacíllus thuringiensis, empleado en campañas de
salud pública para el control de los mosquitos que transmiten la malaria y el
Simulium Sp. vector de la oncocercosis.
2

La mayoría de los plaguicidas son de origen químico sintético y para su


venta comercial, combinan algún “ingrediente activo” que está elaborado para
combatir determinados tipos de plagas, con uno o varios ingredientes “inertes” que
diluyen el producto tóxico o constituyen su excipiente.

La agencia de Protección al Ambiente de Estados Unidos de Norteamérica


(EPA. 1991) por ejemplo, mantiene un registro de 1500 ingredientes activos, la
mayoría de los cuales se caracterizan por ser compuestos orgánicos. LOS
formuladores mezclan estos compuestos con uno o varios de aproximadamente
900 excipientes para elaborar los aproximadamente 50,000 plaguicidas
comerciales registrados para su empleo en los Estados Unidos de Norteamérica.

En general, rara vez se tienen en cuenta las consecuencias del empleo de


sustancias excipientes, aunque por si solas constituyen una gran parte del
producto comercial, y a veces sus efectos nocivos superan a los de los propios
ingredientes activos. Por ejemplo el tetracloruro de carbono y el cloroformo que
son sustancias tóxicas para el hígado y el sistema nervioso central, pueden
utilizarse como ingredientes “inertes” sin ser mencionados en la etiqueta del
/
producto (Henao, 1991).

Los efectos adversos de los plaguicidas para la salud pueden deberse


también a impurezas, tales como las dioxinas en ciertos herbicidas de tipo
clorofenoxi, la etilentiourea en los fungicidas a base de bisditiocarbamatos o el
isomalatión en el malatión. Entre los efectos provocados por estos productos
tenemos la neurotoxicidad, neuropatías, dermatitis, cáncer, teratogénesis, etc.
(Henao, 1991)
3

El conocer las ventajas y desventajas de utilizar plaguicidas, permite


determinar la conveniencia de utilizar productos menos persistentes, pero más
tóxicos, o buscar alternativas biológicas (biocontroles), que son menos peligrosas
para los seres vivos, pero desafortunadamente en la actualidad son menos
eficientes. Esto tiene relevancia debido a las tasas de mortalidad que se
presentan en países de América Latina, con especial interés en nuestro país
(CPEHS, 1986).

Los casos de intoxicación con plaguicidas se producen por utilizar


productos altamente tóxicos como los carbamatos, o demasiado persistentes
como los organoclorados. En muchos de los casos se manejan mezclas de
plaguicidas al libre arbitrio, sin que sean supervisadas por personal especializado,
reutilizándose los envases, y aplicándose los productos sin ninguna protección.
Es común encotrar residuos de compuestos organoclorados y organofosforados
en aguas de los pozos y en ríos. En las zonas agrícolas, los suelos pueden
contener residuos de plaguicidas utilizados en los cultivos. La persistencia de
estas sustancias fluctúan de unos meses a varios años (Albert, 1988).

Por otra parte, el problema de la reutilización en envases provoca


numerosas intoxicaciones tanto en seres humanos como en diversas especies. El
problema radica principalmente en que un residuo de plaguicida es catalogado
como peligroso (SEDESOL, 1994), por lo tanto se le debe dar un manejo especial
(lo cual no siempre sucede). En México la única empresa autorizada para el
confinamiento (forma de disposición final de residuos peligrosos) de este tipo de
residuos, es la empresa “Residuos Industriales Multiquim” que solo acepta
recipientes o contenedores de algunos plaguicidas como volatón, cupravit,
manzate, hinosan, racumin y hemacur (PROFEPA,1994).
4

Los plaguicidas organoclorados se encuentran distribuídos en el medio


ambiente y en cantidades considerables son introducidos al medio acuático
intencionalmente para controlar larvas de insectos indeseables o bien entran por
lixiviación a los sistemas de riego. También pueden provenir de las descargas
domésticas o industriales de las grandes ciudades.

El problema de la presencia de plaguicidas también se presenta en lugares


turísticos donde existen playas cercanas a una vegetación exhuberante, y que al
proliferar plagas, se ponen en práctica programas de fumigación para no tener un
impacto negativo sobre la afluencia turística.

Las tierras que son útiles para la agricultura se ven expuestas a ser
atacadas por plagas de insectos; por practicar el monocultivo (por no cultivarlas en
forma rotativa) con la presencia de alguna plaga, se utilizan estos biocidas para
proteger las siembras, pero al esparcir hidrocarburos organoclorados tales como
aldrín, lindano, dieldrin, DDT, DDD y DDE, se afectan también las aves
insectívoras y hasta el ser humano a través de los productos extraídos del campo.

La determinación de plaguicidas organoclorados en acuacultivos es


necesaria, debido a que éstos tienen una gran persistencia en el agua y en los
seres que la habitan. Son bioacumulables en peces, crustáceos y moluscos entre
otros, volviéndose tóxicos, según la cantidad que tiende a incrementarse (Galindo
Reyes, 1996, Díaz- González, 1992). Esto es de considerarse, ya que el consumo
de estos organismos con gran potencial alimenticio y de popularidad general a
nivel mundial, estando contaminados con alguno de estos pesticidas, provocarían
entre otros efectos carcinogénicos en el ser humano.
Se encuentran los plaguicidas sobre todo en acuacultivos, que de alguna
manera se ven afectados por actividades agrícolas. Estos campos agrícolas al
ser sometidos al uso de insecticidas, herbicidas y fungicidas para su buen
desarrollo, permiten el ingreso de los plaguicidas organoclorados y
organofosforados al agua de riego.

También con las precipitaciones pluviales se integran éstos a lagos, ríos o


esteros, de donde se toma el agua para los acuacultivos y son asimilados y
acumulados por los peces, crustáceos o moluscos.
6

2. ANTECEDENTES

2.1. Generales

Históricamente las primeras medidas para mitigar plagas fueron a base de


sales vegetales e inorgánicas. Desde el año 1000 a.C., se conocen formas de
mejorar la producción de alimentos, y el cuidado de las cosechas de insectos
nocivos. A continuación se describe el uso de plaguicidas a través del tiempo
según William (1967) y Hernández, (1982) en: García-Almanza, (1996).

Entre 1915-1920, se desarrollaron y se usaron varios insecticidas


arsenicales como resultado de la la.Guerra Mundial. En 1929, se utilizaron
compuestos del flúor como insecticidas de ingestión en sustitución de l o s
arsenicales no dejando residuos venenosos en las cosechas. El azufre, arsénico y
plomo se utilizó para eliminar gorgojos de plantas, y en 1929 se empleó la nicotina
para destruir piojos de plantas sin causar daño al follaje. En 1948 el empleo de la
rotenona en los Estados Unidos de Norteamérica en sustitución de las sales de
arsénico y plomo. En 1959 se empleó mundialmente el polvo de Piretro como
veneno para piojos y pulgas.

Dentro de los tóxicos orgánicos de amplio espectro, comienza en 1932 la


era moderna de los insecticidas orgánicos usando el éter tiocìano dietílico.

En 1939 se descubren las propiedades del DDT y entre 1940 y 1948


comienza el desarrollo y empleo de una gran variedad de insecticidas
organoclorados como BHC, Toxafeno, dieldrin, endrin, heptacloro, aldrín, lindano
y clordano.
7

En 1944 se abre la industria de los plaguicidas organofosforados, al


comercializar Bayer el paratión etílico. En 1949 sintetizan el primer piretroide
sintético Cinexin Y. En el periodo comprendido entre 1952-1965 se desarrolla el
uso de otros organofosforados como Usatión, Folimat, Asunto, Malatión, Naleo,
Dipterex, etc. En 1953 se comercializa el carbaryl como primer carbamato.

Desde 1956 se utilizan también hormonas y otros productos biológicos de


espectro restringido junto con el control biológico, mediante hormonas juveniles y
análogos sintéticos para controlar poblaciones de insectos. En 1959 se
identificaron las feromonas y en 1973 se sintetiza el Altosid juvenoide científico
siendo el primer agente morfogenético aprobado por la EPA. En 1976-1982
nuevos agentes químicos de este tipo son utilizados, como feromonas y
juvenoides.

En el primer mundo para utilizar un plaguicida, se requiere de muchas


horas y dinero en investigación previa. El costo puede variar desde el
descubrimiento hasta la comercialización, lo cual lleva un tiempo promedio de 8
años y en 1987 se estimó un costo promedio de 50 millones de dólares.

La introducción de plaguicidas en la actualidad es más dificil por la cantidad


de requisitos que se deben de cubrir y de justificar para ser utilizados. La
composición química tiene básicamente un ingrediente activo el cual puede ser un
compuesto inorgánico, como los derivados de cobre, azufre, zinc y alumnio,
compuesto orgánico donde la mayoría proviene de origen sintético, como los
plaguicidas, aunque también son considerados los de origen botánico como lo son
los extraídos de plantas. Los plaguicidas biológicos pueden ser virus,
microorganismos o derivados de su metabolismo, formulados como insumos, para
una plaga en particular.
8

Para aplicar un plaguicida es importante conocer su persistencia, SU


movilidad, los usos, el ingrediente activo, entre otras características.

La persistencia es la duración sin cambio molecular que experimenta el


plaguicida desde que entra al ambiente. Es importante notar que existen algunos
plaguicidas ligeramente persistentes que duran menos de 4 semanas como lo
son el malatión, metil paratión dentro de los organofosforados; Poco persistentes
de cuatro a 26 semanas como lo son el paratión, Timet; medianamente
persistentes de 27 a 52 semanas, y altamente persistentes con más de un año
y menos de veinte (organoclorados) y mas de veinte años como puede ser casos
específicos de aplicaciones del DDT. (CICOPLAFEST, SARH, SSA, SEDESOL,
SECOFI, 1994).

Su movilidad puede deberse a su dosificación aérea, la lixiviación de los


suelos cuando hay lluvias, y el arrastre por el viento en el caso de follajes.
También pueden presentar fotodescomposición, la cual se debe principalmente a
la radiación solar. La descomposición química puede ser por medio de reacciones
como oxidación, reducción, e hidrólisis, y pueden darse en el agua, en el suelo y
en el aire. Mediante estas reacciones se pueden descomponer algunos
plaguicidas y activar otros, dando lugar a la formación de compuestos inactivos o
de otros potencialmente más peligrosos para la vida. También puede haber
adsorción por coloides en el suelo, siendo los suelos arcillosos los más
susceptibles. (García-Almanza, 1996).

La actividad microbiológica es el principal medio para su degradación en el


suelo, y se ve afectada por la temperatura, humedad, pH, contenido de materia
orgánica y presencia de nutrimentos. Un suelo con buen contenido de nutrimentos
favorece el desarrollo de microorganismos y los plaguicidas orgánicos se
descomponen con mayor rapidéz.
9

El uso de los insecticidas puede variar desde agrícola, forestal, urbano


(areas domésticas, medios de transporte, lugares turísticos), jardinería (jardines y
plantas de ornato), salud pública, pecuarios (incluso para animales domésticos)
industriales (procesamiento de productos y subproductos y para el cuidado de
áreas industriales). (Díaz-González, 1992)

El ingrediente activo principal que los forma los clasifica en


organoclorados, organofosforados, carbamatos, de cobre, de azufre etc. La
formulación puede ser sólida, líquida y gaseosa.

Los plaguicidas organoclorados comprenden una pequeña parte de


sustancias orgánicas sintéticas, que se han utilizado en Estados Unidos desde
hace medio siglo para usos agrícolas y forestales. Estas a su vez afectan a los
organismos acuáticos, tanto en ríos y lagos y finalmente los que se encuentran en
zonas costeras (Mearns et a/.,1988).

En países desarrollados se han tomado serias medidas para reducir el


efecto futuro ocasionado por la acción de los plaguicidas como es el caso de la
cancelación del uso del DDT y el arochlor. También se han propuesto
descontinuar, es decir, utilizar el dieldrin hasta agotar existencias. La fábrica
productora del clordano puede decidir en cualquier momento eliminar este
producto del mercado, ya que se han revelado estudios de su toxicidad y
persistencia en el medio (FAO/UNEP,1991).

La estructura de la industria de los plaguicidas en México está conformada


por empresas que efectúan dos procesos productivos bien definidos, como las
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que fabrican los ingredientes activos (grado técnico), que para su procesamiento
requiere de materias primas básicas y productos intermedios que pueden ser
derivados de la industria petroquímica, metalúrgica, y de fermentación. Son
ingredientes de alta concentración y toxicidad, por lo que su manejo inadecuado
es muy riesgoso. (Albert, 1990)

También hay empresas formuladoras que se dedican a mezclar los


ingredientes activos con otros materiales (inertes, disolventes y emulsificantes)
para elaborar los productos terminados a diferentes concentraciones. Estos son
los que se aplican en la agricultura. (Albert, 1988)

En 1959 se comienzan a fabricar los agroquímicos en nuestro país (DDT,


BHC), los fungicidas a base de tiocarbamatos y algunos otros productos
inorgánicos. Desde entonces la industria se vio favorecida y creció gracias al
cultivo del algodón altamente tecnificado el cual requería grandes cantidades de
plaguicidas, (Toxafeno) pero también por la presencia de buenas condiciones
para instalar nuevas plantas químicas y la construcción de grandes obras de
irrigación que estimulaban el uso masivo de diversos insumos agrícolas. A pesar
del crecimiento de la industria el continuo aumento en la demanda de
agroquímicos provocó que durante los años sesenta se importaran 165 diferentes
productos (Restrepo, 1988). Para cubrir este déficit, el Gobierno Federal inició en
1968 un programa de fabricación de DDT, BHC y Toxafeno, a través de
Guanomex (hoy Fertilizantes Mexicanos FERTIMEX). Actualmente 35 empresas
conforman la industria de plaguicidas. Entre ellas destacan 11 que son solamente
importadoras mientras que 24 empresas producen los ingredientes activos, estas
últimas disponen de una capacidad de 62,000 toneladas por año. (García-
Almanza, 1996)
ll

Los plaguicidas importados provienen en su mayor parte de los Estados


Unidos, alrededor de 12,000 toneladas promedio anual, y poco más de un 10% de
Alemania, aunque también se importan de Suiza, Italia, Dinamarca, Israel, Japón,
Francia y el Reino Unido, en orden de importancia. ( Tycooly-lnternational 1982).

El mercado de los plaguicidas en el país ha ido en constante aumento; en


1960 se vendieron 14,000 toneladas y 34,000 toneladas seis años después. La
Asociación Mexicana de Estudios para la Defensa del Consumidor, calculó que en
1986 se vendieron en México alrededor de 60 mil toneladas. Dentro de IOS
volúmenes vendidos los insecticidas ocuparon en promedio 51%, los herbicidas
31%, los fungicidas 15% y el 3% restante, otros (Restrepo, 1988).

Con frecuencia la prensa y las publicaciones especializadas recogen


denuncias sobre intoxicación de personas y daños al medio en todo el país. En el
agro las cosas son mas difíciles, se ha llamado la atención sobre el uso anárquico
y elevado de plaguicidas y se enfatiza la falta de protección a los trabajadores del
campo. ( Rosales-Hoz, 1979).

Desde el punto de vista sanitario, muchas de las enfermedades humanas


en los trópicos pueden ser transmitidas por huéspedes intermedios como lo son
malaria, enfermedad de Chagas, dengue, oncocercosis, filariasis, tripanosomiasis,
esquitosomiasis, leishmaniasis, p e s t e , fiebre amarilla y tifo, aunque la
contaminación por residuos de plaguicidas organoclorados puede tener efectos
adversos a largo plazo para la salud humana. Estos efectos se irán descubriendo
en personas expuestas a estos productos durante lapsos prolongados y en
cantidades considerables. Existen estudios donde se relacionan la salud humana
con el incremento de estos productos en la naturaleza o con el uso de estos
pesticidas en la casa o jardín, ya que se introduce por medio de la respiración o
de la alimentación.
12

En los mamíferos se acumula en tejidos con mayor cantidad de lípidos,


como es el caso de la leche materna, hígado y cerebro (Albert y Bárcenas, 1988).
Un estudio reciente efectuado por el World Healfh Organizafion (WHO) sobre DDT
en la leche materna mostró mas akos niveles en países en subdesarrollo, que en
países europeos desarrollados. En estos últimos se controla el uso del DDT desde
hace una década (Infernafional Mussel Wafch Commifee, 1992). Aunque el uso
de este producto esté prohibido o severamente restringido, en muchos países se
mantiene su aprobación para las campañas de salud pública.

En la acuacultura hay monitoreos para evaluar la concentración de


pesticidas organoclorados, como es el caso del proyecto “Mussel Wafch Projecf’ ,
donde utilizan bivalvos como indicadores biológicos, por su habilidad de
concentrar la mayoría de los contaminantes y por sus hábitos sedentarios
(Infernfafional Musselwafch Commifee, 1992). Otros estudios utilizan el músculo
de Plafichfhys flesus para monitorear la contaminación por plaguicidas en áreas
costeras (Cossa et al., 1992).

En México se han realizado muy pocos estudios de plaguicidas en cultivos


de camarón. En la Bahía Santa María y en el estero de Teacpan, en el Estado de
Sinaloa, se encontraron plaguicidas en agua, sedimento, en almejas y en
camarones, sobresaliendo la concentración de lindano con un nivel
potencialmente dañino, al sobrepasar el límite permisible por la “Federal Water
Pollution Control Administration of the United States” (FWPA) (Galindo Reyes et
al., 1996). En camarón y en el agua del estero de Urías Sinaloa, se encontraron
cantidades de plaguicidas potencialmente peligrosos, siendo una zona agrícola
con un buen potencial acuícola. (Galindo Reyes, 1992).

Algunos niveles de concentración corresponden a los causales de daños


fisiológicos y bioquímicos de camarones, por lo que la contaminación por
13

plaguicidas está relacionada con el lento crecimiento y diversas patoligías en


estos organismos. El consumo humano de este alimento marino podría
representar un riesgo para la salud porque el factor de bioacumulación de los
plaguicidas encontrados en la Bahia de Ohuìra Sinaloa tienen un rango de 3.6 a
675 ppb. Estos fueron encontrados en 6 de 20 estaciones donde se obtuvieron
camarones y los analitos presentes fueron Aldrin, Endrin, Methyl Paratión, DDT y
Lindano. (Galindo Reyes et al., 1999).

Para poder determinar los plaguicidas que están en agua, sedimento y en


organismos o tejidos de organismos, se tiene que extraer y concentrar cada
muestra para poder detectar hasta cantidades en el orden de partes por billón
(ppb). Para esto sirve la cromatografía, que es una herramienta bastante útil y que
permite medir estos compuestos con una excelente precisión. Con el detector de
Captura de Electrones se pueden observar límites mínimos de plaguicidas
organoclorados en bajas concentraciones (ppb). En el caso de los plaguicidas
organofosforados si no se tiene el detector de Nitrógeno-Fósforo, se puede usar el
detector de ionización de flama, el cual permite cuantificar en orden de partes por
millón (ppm) (Hewlett Packard, 1992).

2.2. NORMATIVIDAD

2.2.1. Internacional

El Principio de Información y Consentimiento Previo (PIC) se desarrolla a


partir del intercambio de información que se fomenta en el código donde el
Artículo No. 9 establece, que cualquier país que tome una decisión para prohibir o
restringir severamente un plaguicida con objeto de proteger la salud y el ambiente,
14

debe notificar a la FAO de inmediato para que proporcione a las autoridades


competentes la información referida. Se deberá informar la identidad del producto
con el nombre químico específico del principio activo, un resumen de las acciones
adoptadas y sus fundamentos, y en caso de restricciones de uso, el nombre y
dirección del punto de contacto,si se requiere. Si un plaguicida ha sido objeto de
prohibición o restricción y el país se encuentra inscrito en el PIC, ese plaguicida
no será exportado a dicho país.

Listado del Registro Internacional de Productos Químicos Potencialmente


Tóxicos según el Principio de Información y Consentimiento Previos (PIC)
(FAO/UNEP,1991).

Aldrín Clordano Clordimeform


Cihexatin Dieldrín Dinoseb
DDT Dibromuro de etileno EDB Fluoracetamida
Hexacloruro de benceno Heptacloro Mercurio Inorgánico.

@CH)
Mercurio Orgánico Paraquat Paratión etílico
Paratión Metílico 2,4,5, T
15

Candidatos al procedimiento de información y Consentimiento previo PIC.

Aldicarb Amitrol Bromuro de Metilo


Compuestos de Arsénico Captafol Carbofurán
Clorobencilato Cloropicrina Demetón (Systox)
Diclorvox Dicofol Endosulfán
Estricnina Fluoracetato de Sodio Fosfamidón
I I

Generadores de Fosfina Lindano Metamidofos


I I

Metadomil Metoxicloro Mirex


Monocrotofos Pentaclorofenol Pirofosfato de tetraetilo
(TEPP).

Plaguicidas de los cuales se cree que su ingrediente activo ya no será producido


distribuido o utilizado.

Compuestos de Plomo Dibromocloropropano Endrín


(DBCP)
Kelevan Leptofos Nitrofen
Shraden Strobano Sulfato de Talio
Telodrín Toxafeno

La red Internacional de Acción sobre Plaguicidas (Pesticide Action Network


Internafional-PAN) es una coalición de grupos de ciudadanos en todo el mundo
para detener el mal uso de los plaguicidas y promover el control sustentable de
16

plagas. La campaña internacional de la Docena Sucia fue lanzada el 5 de Junio


de 1985 como la primera acción conjunta de PAN, (PAN Internafional, 1990).

Para esta campaña fueron seleccionados varios productos basándose en varios


criterios:
Riesgos comprobados para los seres humanos o el ambiente
Uso extensivo especialmente en los países en vías de desarrollo existencia
de prohibiciones y
Restricciones en países exportadores e importancia como ejemplos de
otros aspectos más amplios de los problemas que ocasionan los plaguicidas en el
nivel internacional.

Esto es para garantizar que la seguridad de la salud humana y del


ambiente sean consideradas como prioridades en todas las decisiones políticas
sobre plaguicídas, acabar con el uso de plaguicidas si no se cuenta con las
medidas de seguridad adecuadas, eliminar las dobles normas en el comercio
global de plaguicídas y generar apoyo para la investigación y utilización de
métodos seguros y sustentables de control de plagas. Colectivamente, los
plaguicidas de la docena sucia causan intoxicaciones, muerte y destrucción
ambiental cada año. Entre este grupo de plaguicidas se encuentran :

Aldicarb (Temik) Canfeclor (Toxafeno) Clordano


Heptacloro Clordimeform DBCP
DDT Aldrín, Dieldrín y Endrín EDB
1 I

HCH (BCH) Lindano 1Paraquat


Paratión Metil-paratión Pentaclorofenol
2,4,5,~
17

2.2.2. Nacional.

La Ley General del Equilibrio Ecológico y la Protección al Ambiente (SEDESOL,


1994), establece:

Según el artículo lo. Esta Ley es reglamentaria de las disposiciones de la


Constitución Política de los Estados Unidos Mexicanos que se refieren a la
preservación y restauración del equilibrio ecológico, así como a la protección al
ambiente, en el territorio nacional y las zonas sobre las que la nación ejerce su
soberanía y jurisdicción. Sus disposiciones son de orden público e interés social y
en sus objetivos está establecer las bases para la prevención y el control de la
contaminación del aire, agua y suelo.

2.2.2.2. Características de los compuestos analizados:


A continuación se listan algunas características de los analitos que fueron
buscados en las muestras (SEDESOL, 1994; CICOPLAFEST, 1994):

El DDT (CAS 50-29-3)


S u f ó r m u l a m o l e c u l a r e s C14H9Cl5. S i n ó n i m o s p-p’DDT, 2,2,bis(p-
clorofenil)l ,l ,l tricloroetano, Diclorodifeniltricloroetano. ENT 1506, Dicofano,
Clorofenotano Guesarol y Neocid.

El DDT y sus metabolitos son tóxicos y cancerígenos con largo tiempo de


persistencia en suelos y agua. En los humanos la exposición por DDT es por
ingestión de comida contaminada. En el aire y agua y de consumo, SU
concentración es insignificante, y la cantidad es menor de 0.01 mglaño. La
18

concentración para la protección de animales marinos debe ser de O.OOlpg/L en


un promedio de 24 horas y nunca exceder 0.13 pg/L. En el humano
preferentemente debe ser de cero. Puede penetrar por inhalación, absorción de la
piel, por ingestión y por contacto con piel y ojos. El DDT es moderadamente más
tóxico en el hombre que en otros organismos, sin embargo su solubilidad en agua
es baja (0.0012ppm) y es mas alta en grasa (100,000 ppm). Es un producto que
puede dividirse de tal manera que el DDE (metabolito = tiene propiedades
similares. Ambos compuestos son altamente persistentes en los organismos
vivientes. Es un plaguicida restringido, de uso oficial, forma parte del registro del
PIC y de la docena sucia.

LD 50 oral, es de 250 mg/kg. Su ingestión diaria admisible (EPA) es de


0.021 mg/persona. Su límite permisible para agua de abastecimiento O.O5mg/L.
Su límite máximo permisible para cuerpos de agua (EPA) es de O.O02pg/L. Los
síntomas incluyen parálisis de la lengua, labios y cara, confusión, convulsiones,
\
vómitos, irritación de la piel y ojos atacando al Sistema Nervioso Central, hígado,
riñones y piel.

DDD (CAS 72-54-8)

Sinónimo: 1,2, Dicloro-2,2-di(P-clorofenil)etano, T D E , Rotano. T i p o


insecticida organoclorado, metabolito del DDT. Su uso es agrícola, existe baja
toxicidad en mamíferos, LD50 (oral, ratas) es de 5000mg/kg.

En cuanto a efectos a la salud altera el sistema nervioso central y se


considera tóxico para aves y peces ya que es fuertemente bioacumulable en su
tejido (Factores de bioconcentración reportados en el rango de 933-6500 veces).
Es altamente persistente en suelo, sedimentos y agua ; su vida media reportada
es aproximadamente de 190 años también es extremadamente tóxico en
invertebrados acuáticos.
19

DDE (CAS 72-55-9)

Su nombre químico es 1 ,l ,-diclore-2.2-bis(p-clorofenil)etileno. es un


Insecticida, tiene algunos isómeros como pp DDE: 1 ,l ,dicloro 2,2-bis (p-clorofenìl),
etileno.

Es altamente persistente en suelo y sedimentos pero no en agua. Su vida


media es de 15 años en suelos y más de 1100 días en sedimentos como el DDT y
el DDE, es altamente bioacumulable con factor de concentración en tejido de
peces y es altamete tóxico en una gran variedad de vertebrados e invertebrados
acuáticos.

DIELDRIN (CAS 60-57-I)

Fórmula moleklar Cl2 HI8 Cl 6 0. Su punto de fusión 175176°C. Sólido


cristalino, cancerígeno y tóxico.
Sinónimos 1,2,3,4,10,10 hexacloro-6, 7- Epoxy 1,4,4a,5,6,7,8,8a-Octahidro-
1,4endo-exo-5,8-dimetanonaftaleno, Octalox, Heod, ENT-16225. Es un
compuesto que junto con el aldrín pertenecen al grupo de los insecticidas
hidrocarbonados.

ES persistente en el medio ambiente con vida media reportada entre 175


días y 3 años) y tiene una volatilidad extremadamente baja (a presión de vapor de
0.000000178 mm de mercurio a 20 “C y una baja solubilidad en agua (186pgIL a
25-19°C). El dieldrín es extremadamente no polar, resultando tener una elevada
afinidad por las grasas, lo cual explica la razón de su retención en la grasa de los
20

animales, en la cera de las plantas y otras sustancias orgánicas en el medio


ambiente por eso se puede decir que es bioacumulable en la cadena alimenticia.
En animales marinos la concentración no debe exceder de 0.71ug/L y en los
humanos es de cero. Su determinación en agua puede ser por extracciones con
cloruro de metileno seguido por cromatografía de gases. Sus rutas de entrada son
por inhalación, absorción en la piel, contacto con piel y ojos, ingestión. LOS
síntomas que pueden causar son vómitos, náuseas, convulsiones, coma entre
otros. Ataca al Sistema nervioso central, hígado riñones y piel.

ALDRIN (CAS 309-00-Z)

Sólido cristalino, Cl2 HI 8 Cl6. Punto de fusión 104°C. Sinónimos HHDN.


1,2,3,4,10,10-hexacloro, 1,4,4a,5,8,8a-hexahidro-1,4,-endo-exo-5,8,- dimetano-
naftaleno.

Es carcinógeno y su exposición puede ser por aire, agua y alimentos


debido a su persistencia en el medio ambiente. Su concentración en aguas no
debe excederse de 3.0 ug/L para aguas marinas el límite es de 1.3 ug/L. Las rutas
de exposición son por inhalación, absorción de la piel, ingestión, irritación de IOS
ojos y contacto por piel. Ataca principfiente al Sistema nervioso central, riñones,
hígado y piel. El aldrin es muy estable térmicamente y su descomposición no se
aprecia a 250 “C, puede ser degradado por actividad con metales como el sodio
en alcohol.

Este analito es entre moderadamente a altamente persistente en suelos


donde rápidamente se convierte en dieldrin. Su vida media se ha estimado entre
20 días a 1 año.
21

CLORDANO (CAS 57-74-9)

Sustancia líquida, flamable, cancerígena, muy peligrosa y contaminante


tóxico. Su fórmula molecular es Cl0 H6 Cl8
Sinónimos 1,2,4,5,6,7,8,8-octacloro-2,3,3a,4,7,a-hexahidro-4,7-metano-l H-
indeno, o también como octacloro.

Es el modelo general de insecticidas del grupo de hidrocarburos policíclicos


clorados, llamados insecticidas ciclodienos. Es un insecticida de casas y jardines
que afecta principalmente a niños como resultado del consumo de leche materna.

En agua subterránea donde hay biodegradación, la vida media ha sido


reportada arriba de 7.6 años y en suelo puede ser de más de 20 años.

La concentración máxima para la protección de la vida marina es de


O.O04yg/L en un promedio de 24 horas y no debe exceder de 0.09 pg/L. Para
proteger la salud humana la concentración debe ser de cero. Las rutas de entrada
en el cuerpo humano son por in&ación, absorción en la piel, ingestión y contacto
con la piel y ojos. Entre los efectos que puede producir están la visión borrosa,
confusión, ataxia, delirio, dolor abdominal, náuseas, vómitos, diarrea, irritabilidad,
convulsiones, anurias, etc.

LINDAN0

Sinónimo: 1,2,3,4,5,6-hexaclorociclohexano (isómero gama), es de uso agrícola,


sólido, su solubilidad es de 10 ppm en agua, es un plaguicida restringido en
México, forma parte de la docena sucia y es candidato al registro del PIC
(Principio de Información y Consentimiento Previo). La ingestión diaria admisible
22

según la EPA es de O.O035mg/persona, el límite para agua de abastecimiento


también de acuerdo con la EPA es de O.O05mg/L. Siendo el límite máximo
permisible para cuerpos de agua (EPA) de 0.020 pg/L. El límite permisible para
agua potable según la NOM-127 es de 2pg/L.Afecta al sistema nervioso, es tóxico
para los peces. En cuanto al tratamiento/disposición: Tratamiento en suelos
(aerobio-anaerobio) encapsulación y relleno sanitario, e incineración a altas
temperaturas. Su L.D. 50 (oral) es de 88 mg/kg.

MALATION

SU nombre químico es 5-(1,2-bis(Etioxicarbonilo)etil) O,O-dimetilfosforoditionato.

El uso principal es agrícola, pecuario en jardinería y urbano, es un


insecticida organofosforado de contacto, y es poco persistente.

Su vida media es en suelo de 168-72 horas, en aire de 9.8-1.0 horas, en


agua superficial de 1236-100 horas, en agua subterránea de 2,472-200 horas. Se
biodegrada en cuanto a sus propiedades físicas es líquido, de color amarillo o

café obscuro, es ligeramente soluble en agua. /

Su toxicología LD50 (oral, ratas) es de lOOmg/kg. Su ingesta diaria


admisible segun la CICOPLAFEST, (1994) es de 0.02 mg/kg. El criterio de la
calidad del agua de abastecimiento es de O.lpg/L. Su límite máximo permisible
para cuerpos de agua (EPA) es de 0.008 pg/L.

En cuanto a efectos a la salud es moderadamente peligroso, irritante


dérmico y de mucosas y del tracto digestivo, es inhibidor de la colinesterasa, daña
al sistema nervioso central, produce cianosis, y daño al miocardio. Es altamente
tóxico para peces y abejas. Su tratamiento y disposición es en suelos (anaerobio),
relleno sanitario (solo en pequeñas cantidades) y disposición después de
incinerarlo a altas temperaturas.

Nombre químico: 1 ,l ,Dimetil-4.4’-bipiridium bis (metil sulfato)


Sinónimos: Gramoxones, Dextronax, Esgram, Weedol, metilviologen. SU
USO es agrícola el tipo es herbicida orgánico y desecante del grupo de IOS
bipiridilos de contacto y postemergente. Es poco persistente, sólido de color
amarillo, inodoro, es muy soluble en agua, muy ligeramente soluble en alcohol e
insoluble en hidrocarburos. Su toxicologia LD50 (oral, ratas) es de 150mg/kg,
ingesta diaria admisible según CICOPLAFEST, (1994) es de 0.004mgIkg. Provoca
muerte por ingestión si se ingiere una solución de 114ml al 20%. Es un plaguicida
restringido en México, restringido por la ONU, forma parte del PIC y de la docena
sucia. En cuanto a efectos a la salud es moderadamente peligroso, si se ingiere
produce fibrosis pulmonar, es irritante ocular y dérmico, provoca daño al
miocardio, también produce alteraciones respiratorias severas asi como edema
pulmonar. Es tóxico para peces y aves, en suelos aerobio, anaerobio (mezclar
con detergente casero y enterrar en suelo de arcilla) como tratamiento para los‘
suelos.
24

2.3 JUSTIFICACIÓN:

El propósito de realizar un estudio sobre plaguicidas es debido a que en las


últimas décadas se ha detectado la presencia de estos compuestos químicos en
casi cualquier parte de nuestro ambiente, lo cual trae consecuencias muy
peligrosas para el ser humano.

Entre los agentes químicos ambientales que pueden afectar el material


genético y causar malformaciones congénitas y mutaciones, se encuentran los
plaguicidas, siendo la anencefalia una de las afecciones relacionadas con estos
productos, ATSDR, 1995. En nuestro país, se han presentado niños recién
nacidos con problemas de anencefalia, relacionado con la contaminación por
plaguicidas (SSA, 1994).

Existen contados estudios en México sobre la determinación de plaguicidas


en cultivos de camarón. Se desconoce si existen trabajos con reproductores de
Penaeus vannamei o Lifopenaeus vannamei como propuesto por Pérez Farfante
y Kensley (1997). No se ha determinado el efecto que ocasionan éstos en
distintos eslabones de la cadena trófica costera, por lo que es importante SU
seguimiento para poder controlar su uso.

Además son contados los trabajos publicados donde se pueda conocer la


contaminación por plaguicidas a nivel nacional. En la zona comprendida entre los
Estados de Jalisco, Colima y Michoacán no se encontraron reportes de estudios
de mediciones de plaguicidas a nivel de la costa ni de crustáceos extraídos del
mar.
25

L OS principales contaminantes de los alimentos en México son IOS


plaguicidas organoclorados y sus productos de biotransformación, en segundo
lugar están los residuos de plaguicidas organofosforados (Albert, 1990).

La presencia o ausencia de cantidades detectables de plaguicidas


organoclorados en camarón se podrá afirmar con el presente trabajo y en caso de
enoctrarse estos analitos, cuantificar en forma confiable, ya que los agricultores
del valle de Cihuatlán utilizan plaguicidas biodegradables para sus plantaciones
de coco, limón y plátano.

La presencia de plaguicidas puede deberse a la contaminación del agua


con la que fueron regados tales cultivos y arrastrados al Río Marabasco llegando
a la Laguna de Barra de Navidad, que forma el límite entre los Estados de Cólima
y Jalisco. También se podrá deber a los ingredientes del alimento suministrado
durante su cultivo. Otra causa puede ser la inclusión de estos plaguicidas en el
sedimento que los adsorbe del agua a través del tiempo.

Dada la necesidad de vender productos con un alto valor comercial, se


justifica encontrar camarones libres de plaguicidas de plaguicidas que cumplan
con los requerimientos internacionales y que se puedan por lo tanto exportar. Esto
justifica el presente estudio en donde se aplican técnicas de Química Analítica
ambiental . También es necesario efectuar los análisis correspondientes del agua
y del sedimento de la zona, ya que se podrán efectuar estudios de construcción
de granjas camaronícolas en un futuro cercano y con mayor seguridad de contar
con fuente de agua y sedimento que cumplen con las normas nacionales e
internacionales.
26

3. OBJETIVO GENERAL

Determinar cuantitativamente la presencia de plaguicidas organoclorados


en camarones blancos adultos Litopenaeus vannamei (Boone) (Mopenaeus
vannamel) cultivados y madurados en laboratorio bajo condiciones controladas.

3.1. OBJETIVOS ESPECíFICOS:

3.1.1. Determinar la concentración de plaguicidas como aldrín, lindano, dieldrín,


DDT, DDE y DDD en el músculo y en la cabeza del camarón blanco del Pacífico,
mantenido en cautiverio bajo condiciones óptimas de cultivo durante por cuatro
meses en agua tratada por dos diferentes sistemas de filtración y preparación.

3.1.2. Evaluar la concentración de plaguicidas en el agua que se utiliza para el


cultivo de esos camarones.

3.1.3. Detectar la concentración de plaguicidas en el sedimento de la Laguna de


Barra de Navidad, Jal., de donde se obtiene el agua para el cultivo de IOS
camarones.

3.1.4. Encontrar la concentración de plaguicidas en el alimento suministrado a los


camarones durante su cultivo.

3.15 Investigar posibles fuentes de plaguicidas que se lleguen a detectar en los


organismos cultivados con agua de la Laguna de Barra de Navidad.
27

4. MATERIALES Y METODOS

4.1 Localización del área de estudio :

El cultivo de camarón y su respectiva reproducción en cautiverio, se


desarrollaron en el Laboratorio de Ciencias Marinas de la Facultad de Ciencias
Naturales y Agropecuarias de la Universidad Autónoma de Guadalajara (U.A.G.),
con sede en Barra de Navidad, que se localiza al sur deL Estado de Jalisco. Esta
es una zona donde desemboca temporalmente el Río Marabasco que atraviesa la
zona agrícola montañosa y el valle fértil de Cihuatlán entre los Estados de Colima
y Jalisco. El agua proveniente de la Laguna de Barra de Navidad, fue introducida
por medio de una bomba de 3 caballos de fuerza a través de una red hidráulica,
fue previamente tratada con Na2EDTA (1 Ippm) a fin de disminuir el grado de
toxicidad de metales pesados como lo recomienda Castille et al.,(l981). Y según
análisis realizados presenta condiciones óptimas de salinidad, oxígeno disuelto y
nutrientes para su cultivo (Liñán Cabello, 1995).

4.2. Procedencia de camarones :

En este estudio se realizaron mediciones en organismos cultivados, en


agua, en sedimento y en alimento único suministrado. Los organismos
reproductores fueron transportados de un centro de acopio en el Puerto de San
Blas Nayarit, hasta las instalaciones del “Laboratorio de Ciencias Marinas”, en
Barra de Navidad, Jal., Facultad de Ciencias Naturales y Agropecuarias de la
Universidad Autónoma de Guadalajara.
28

4.3. Tratamiento de camarones vivos dentro del Laboratorio.

Los organismos fueron aclimatados y observados durante 20 días en unas


instalaciones en Isla Navidad, Colima, fuera del Laboratorio de Ciencias Marinas
(U.A.G.), Al final de este periodo los camarones se trasladaron a las
instalaciones del Laboratorio, en donde fueron separados por tanques en el lapso
de la cuarentena y posterior a ella, los camarones obtuvieron dieta comercial
dividida en tres raciones diarias.

LOS camarones se mantuvieron en las instalaciones del Laboratorio con el


fin de iniciar desoves con cuatro diferentes tratamientos alimenticios. Se
seleccionó un tratamiento con alimento comercial, para que se pudieran
comparar con aquellos camarones que se quedaron en Isla Navidad con el mismo
alimento comercial. Los camarones que se mantuvieron en Isla Navidad se
utilizarían para reponer los que se murieran antes del inicio del experimento en el
Laboratorio. Esta corrida duró cuatro meses al igual que los camarones
guardados en Isla Navidad.

La diferencia entre los dos tratamientos consistió únicamente en el


tratamiento que se le dio al agua. En Isla Navidad el agua es bombeada
directamente de la Laguna de Barra de Navidad a un sistema de almacenamiento
en tinacos previa filtración por filtro de arena. En el Laboratorio de Ciencias
Marinas el agua se extrae de un pozo de 4 metros de profundidad y a 10 metros
de la playa, pero dentro de la Laguna. Posteriormente el agua es filtrada por
arena, por cartucho de 10 y 1 vrn de poro y una adición de ll ppm de Na
gETA, tratada por Luz Ultravioleta y finalmente almacenada en depósito obscuro.
29

4.4. Obtención de camarones, agua, sedim,ento y transporte.

Para el análisis de plaguicidas se obtuvieron del Laobratorio 5 kg de


camarones (estos fueron comprados a la U.A.G.) se colectaron vivos de dos
cultivos en estanques bajo condiciones controladas. Uno se efectuó en Isla
Navidad, Col. Con filtración sencilla por arena y sin otro tratamiento previo, y el
otro se efectuó en el Laboratorio de Ciencias Marinas (U.A.G.) ubicado en Barra
de Navidad, Jal.

Una vez congelados los dos lotes de camarón a -15”C, congelados junto
con el agua colectada en el Lab. Ciencias Marinas y de Isla Navidad así como el
sedimento de la Laguna de Barra de Navidad fueron transportados vía aérea a la
Ciudad de México, hasta su procesamiento.

4.5. Manejo y análisis de muestras :

Es de gran importancia enfatizar las medidas de higiene previas al


análisis, esto es porque cualquier contaminación presente puede alterar el
.
contenido del cromatograma.

Los reactivos deberán ser grado plaguicida (G.P.), y verificarse mediante un


blanco. El reactivo cuando ya tiene mucho tiempo y fue destapado, puede generar
impurezas que al inyectar directamente casi no se observan o se ven unos picos
muy pequeños, pero después del proceso estos picos se concentran en un 1 :120-
200% y estos picos que se veían pequeños, crecen considerablemente al grado
de que pueden interferir en el cromatograma cuando se pretende analizar la
muestra.
30

Por este motivo existe un sistema de limpieza, el cual consiste en lavar el


material de vidrio (ya que para nada se utilizan materiales de origen plástico) con
jabón “Extran” diluído al 5% y se enjuaga con abundante agua, luego con mezcla
crómica dejando de 15min a 2 hrs el material. Posteriormente enjuagar, dejar
escurrir hasta sequedad y luego enjuagar con diclorometano grado plaguicida, (0
para residuos orgánicos), y de preferencia colocarlo en un horno a 5OO”C,
(Recordar que a mas de 700°C se puede fundir el vidrio) poner una capa de
papel aluminio enjuagado en la superficie de la boca del frasco y se cierra. Esto
mismo es para matraces erlenmeyer, pipetas, frascos colectores de muestra,
viales, etc. los matraces volumétricos no se someten al calentamiento del horno o
mufla. Pero este y todo el material se debe enjuagar generosamente con el mismo
solvente inmediatamente después de usarse.

Las jeringas (marca Hewlett Packard y Hamilton) de 10l~L de inyección


para el cromatógrafo se lavaron con solvente (acetona-metano1 1 :l) en un baño
ultrasónico. Las jeringas se encuentran calibradas con sus respectivos émbolos
por lo que no deben de intercambiarse. También al cabo de un mes de uso, es
conveniente lavarlas con ácido acético al 40% pasándose una corriente de éste
por la jeringa y posteriormente enjuagarse con agua grado plaguicìda,
succionando con un matraz kifasatto ayudado con vacío y sus respectivas
trampas de humedad. Esto se debe realizar cada 20 inyecciones, y después de
cada inyección se deberá enjuagar 30 veces con acetona grado plaguicida.
31

Las cuatro técnicas en relación a la extracción en tejido de camarón, son :

0 Realizada Eon el apoyo del Laboratorio de Nutrición de la Facultad de


Veterinaria UNAM.
Q Aprendida en el Laboratorio del Instituto de Fisiología Celular UNAM.
Q La que se montó con el equipo soxhlet en el laboratorio de Fisicoquímica
Marina UNAM de acuerdo a las técnicas del ASTM, 1993., EPA, 1992,
GERGJ 992.
0 La que se realizó con el equipo de extracción de compuestos orgánicos
por tecnología de microondas.

4.51. Laboratorio de Nutrición de la Facultad de Veterinaria - UNAM

Se le inyectó estándar interno a un camarón testigo y a otro no,


posteriormente se licuó con éter de petróleo, se filtró con fibra de vidrio preparada,
que consiste en un calentamiento en mufla a 500°C por 5 horas, colocada en un
embudo previamente lavado y se concentró con aire. Se pasó por una columna
cromatográfica de Icm de diámetro empacada con florisil activado y desactivado
para purificación, se reconcentró con aire y se inyectó en el cromatógrafo. El
florisil se activa colocándolo sobre un filtro whatman en un filtro Gooch en un
matraz kitasatto, se le agrega a saturación agua destilada libre de plaguicidas, (el
agua libre de plaguicidas se puede preparar si es que no se compra, realizando
una extracción con embudos de separación utilizando agua destilada. Se realizan
3 extracciones con 20mL de cloruro de metileno para un litro de auga destilada y
se puede considerar como agua libre de plaguicidas) y se filtra.
32

El filtrado se reparte en una o varias cápsulas de porcelana y se mete a la


mufla a 660°C por 6 horas y posteriormente se coloca en una estufa a 130°C y se
deja toda la noche (12 horas). Después se deja reposar en temperatura ambiente
y en una hora se puede utilizar.

El florisil se desactivó con el 5% de agua libre de plaguicidas en rotavapor


hasta que se homogenize, esto es para dar a las moléculas una textura apropiada
para que al pasar el extracto y eluír con solventes, éste se purifique
adecuadamente. La desactivación se debe hacer antes de usarse y no se debe
utilizar el florisil desactivado después de 7 días.

El sulfato de sodio anhidro se coloca en una mufla y se somete a una


temperatura de 440°C por 4 horas. Y se guarda en un frasco previamente lavado,
El Sulfato de sodio es más estable, puede durar hasta un mes pero de preferencia
se prepara cada 15 días.

4.5.2. Laboratorio de Fisiología Celular - UNAM.

El método Foltch.

El camarón se puso a secar a 60°C en una estufa por 8 horas.


Se colocó un mortero dentro de un recipiente plástico más grande donde tenía
hielo seco y NaCI. Dentro del mortero se realizó la maceración del camarón con
ayuda de nitrógeno líquido para que éste lo cristalice y pudiera hacerse polvo. La
extracción se efectuó mediante maceración con nitrógeno líquido y utilizando
posteriormente una mezcla 2 : 1 cloroformo-metano1 aproximadamente 50mL/g se
esperaron 2 dias para que se extrajeran los lípidos ( hasta que el tejido deja de
flotar y se precipita hasta el fondo del recipiente. Se filtró en buchner, se recogió el
filtrado en un vaso de precipitado previamente tarado . Se realizó una diálisis : El
33

vaso se llenó de agua y se metió en un reciupiente lleno de agua. Asi se hace una
extracción. Los vasos quedaron parados en el fondo del recipiente). Después de
12 horas aproximadam&te se sacaron los vasos y se retiró la mayor cantidad de
agua posible, se agregó Cloroformo hasta que cambió el color blanco. Se evaporó
a sequedad con luz infraroja y se pesó. para la extracción de los analitos se
purificó el extracto y se concentró con nitrógeno.

4.53. Laboratorio de Fisicoquímica en el Instituto de Ciencias del Mar y


Limnología de la UNAM.

Primero se separaron las cabezas, el cefalotorax, telson, pleopodos etc. del


músculo y se trató por separado.

Las muestras consistieron en :


a). Camarones de Isla Navidad, sin marca, músculo.
b). Camarones de Isla Navidad, sin marca, cabeza, telson, cefalotorax, pleópodos.
c). Camarones del Laboratorio, con marca, músculo.
d). Camarones del Laboratorio, con marca, cabeza, telson, cefalotorax, pleópodos

En el Instituto de Investigaciones biomédicas-UNAM se liofilizaron los


camarones 125g peso húmedo correspondieron a 20g en peso seco. Para la
liofilización se tuvieron que moler con un homogenizador de tejido los camarones
agregándole un poco de agua hasta formar una especie de pasta, la cual fue
congelada con acetona y CO2 sólido y distribuída en toda la superficie del
contenedor del vidrio del vaso especial del liofilizador, ahí se colocó a una presion
reducida aprox. loe-3 mbar y temperatura -46°C controladas, y se dejó por 24
horas. Al día siguiente se recolectó la muestra seca.
34

4.4.3.1. Extracción con equipo soxhlet.

Se colocaron el”l cartuchos de acetato de celulosa de 90X33mm, 20 g del


camarón liofilizado y se realizó la extracción con 300mL de cloruro de metileno por
18 horas y 16 ciclos por hora, se concentró en equipo kuderna-danish colocado en
un baño maría a una temperatura de 64°C para que en la parte superior de la
columna Snyder de tres bolas, se tuviera una temperatura de 34°C que es el
punto de ebullición del cloruro de metileno a la altura de la Ciudad de México. Se
purificó con florisil adicionándole 2.5cm de sulfato de sodio anhidro para evitar
humedad y se eluyó con IOOml de diclorometano, el cual se concentró en kuderna
danish, se secó con gas nitrógeno y se le adicionó ImL de MTBE (Metil ter-butil-
eter). Esto se realizó por duplicado.

Es importante hacer notar que se contó con un material de referencia de


tejido de camarón con fines de certificación de la técnica.

4.5.3.2. Extracción por microondas

La separación y clasificación de muestras de camarón, además de la


liofilización, fueron iguales que las descritas en 453.1. Se utilizó un sistema de
microondas para extracción por solventes modelo MES 1000, de Materiales y
Equipos Falcón S.A. de C.V. el cual reemplaza totalmente el uso del sistema
soxhlet, reduce el tiempo de extracción a menos de 30 minutos, posee la
capacidad para correr 12 muestras simultáneamente, reduce el volumen de
solvente a 50ml por muestra, mejora la eficiencia de extracción siendo superior a
los métodos tradicionales cuando se trata de muestras pequeñas (5g máximo),
controla y reproduce estrictamente las condiciones de extracción y mejora la
reproducibilidad.
35

Para la extracción, se colocaron 5 gramos de muestra y se les adicionaron


50ml de una mezcla de 1 :l acetona-hexano y se sometió a una presión de 30
psi por 30 minutos (2weces). Esto se realizó por triplicado, tanto al material de
referencia, como las muestras.

El material de referencia que se utilizó fue el MA-A-YOC. Estos estándares


se compraron en el Laboratorio Internacional de Radioactividad Marina de la IAEA
(Infernafional Atomic Energy A g e n c y ) e n M ó n a c o . Y s u c o s t o e s d e
aproximadamente $350 dólares por 200g de músculo de camarón.

La preparación del estándar de referencia en el Laboratorio de Mónaco


SRM-MA-A-3/0C fue realizado por personal calificado que se dedica a preparar
estándares de referencia. Su preparación se describe a continuación : 200 kg de
camarones congelados fueron colectados y cada organismo fue tratado de la
manera siguiente : El abdomen fue separado del cefalotorax el cual fue
descartado. La cutícula fue removida y sólo el músculo fue conservado, luego el
tejido suave fue congelado y liofilizado. El tejido fue tratado en material de acero y
vidrio solamente (evitando el contacto con plástico). Se realizó una
homogenización en un tambor rotatorio por una semana, posteriormente se
prepararon alícuotas de 25g las cuales fueron almacenadas en frascos de vidrio.

Se realizó una prueba de homogenidad y se obtuvo una variación entre el


13% y 22% de los diferentes compuestos. El agua contenida del material
liofilizado como determinación de secado a peso constante de 105°C de un
7.8%. Sin embargo el contenido de la mezcla puede cambiar con la humedad
ambiental y el tiempo.
36

Estos materiales son muy útiles para saber la presición que tiene una
técnica, ya sea la que se este realizando o cuando se quiere probar una nueva.
Por lo tanto los extractos y son comparados con los resultados de
referencia.

ANALITO CONCENTRACIÓN (ppb) DESV. ESTÁNDAR


HCB 0.32 +- 0.12
LINDAN0 3.2 +- 3.5
pp’ DDE 4.7 +- 3.4
pp’ DDD 0.81 +-0.76
pp. DDT 3.2 +-3.5
4LDRIN 0.7 +-.05
4LFA HCH 15
HEPTACLORO. 2.4

Aparte de este estándar de referencia, se contó con un Kit de 20


plaguicidas, el Z-004 del Accustandard, el cual cuenta con 10 mg de cada
compuesto con un 99% de pureza, a excepción del toxafeno que es grado técnico.
En este Kit venían el aldrín, lindano, ppDDT, ppDDD, ppDDE, de los cuales se
inyectaron al cromatógrafo primero uno por uno para ver cada tiempo de retención
por separado, posteriormente se hicieron mezclas de aproximadamente 8
compuestos ;; esto es debido a que el clordano y el toxafeno ocupan mucho
espacio en el cromatograma e interfiere con los otros compuestos. El peso de
estos analitos se realizó en una microbalanza con precisión +0.000001g, ubicada
en el Instituto de Investigaciones Biomédicas. Esto fue con extremo cuidado, con
la debida precaución de usar mascarilla de carbón activado, guantes de latex, sin
tocar absolutamente nada de los analitos con la piel, pelo etc. ya que no se debe
olvidar que son carcinogénicos, mutagénicos y la simple presencia en condiciones
propicias puede desarrollar la enfermedad.
37

Se pesaron aproximadamente de 0.0007g - O.OOlg de cada analito y se


aforó en los matraces de IOmL. Posteriormente se hicieron diluciones para que se
tuvieran concentraciones de 0.5, 1,5,10 ~15, partes por billón.

Los estándares y los analitos de la curva de calibración fueron diluídos en


MTBE (Metil Terbutil Eter) en frascos de 10 mL, esto fue para trabajar con el
mismo solvente del estracto final de las muestras o en otras palabras, para tratar
de igualar matrices.

4.5.4. Extracción de plaguicidas organoclorados en sedimento.

El sedimento fue extraído por soxhlet y por microondas, la técnica fue muy
similar, sólo que se realizó una maceración en mortero con mazo y liofilización en
el caso del soxhlet utilizándose 50 gramos como muestra. Se realizó también un
blanco (sulfato de sodio anhidro) con estándar interno para ambos casos. Esta
técnica para evaluar plaguicidas organoclorados en sedimento fue según
GERG(1992), ASTM, (1991), E.P.A. (1990) y en soxhlet. Para la extracción con
microondas según Onuska et al (1993). Estos autores mostraron que un proceso
de extracción en períodos de 30 segundos repetido en una secuencia de 5 veces
provee generalmente mejor recuperación que 8 horas de extracción por equipo
soxhlet. ..

4.5.5.Extracción de plaguicidas organoclorados en agua.

El agua fue tratada como lo marca el Método 508 de la EPA,(1990) y en


Métodos Normalizados, (1989).

Se colocó en un embudo de separación por duplicado de 600 mL y se


realizaron 3 extracciones con 25ml de diclorometano, juntando un volumen final
38

de 75mL el cual fue concentrado en Kuderna danish hasta 2ml. Después fue
secado y purificado respectivamente con sulfato de sodio anhidro y florisil activado
y desactivado, eluyéndolo con IOOml de hexano y luego fue reconcentrado en
Kuderna danish hasta 5ml y secado con nitrógeno hasta sequedad. Se le adicionó
1 mL de Metil Terbutil Eter y posteriormente se inyectó al cromatógrafo de gases.

4.5. Cromatografía de gases.

La Cromatografía de gases es una separación física entre dos o más


compuestos, basada en su distribución diferencial entre dos fases, una de las
cuales es estacionaria (columna) y la otra es móvil (gas).

Para el análisis de plaguicidas organoclorados, la EPA (1991), recomienda


utilizar como fase estacionaria una columna capilar ultra 2 de 25 metros de
longitud con 0.32mm de diámetro interno y 0.52pm de grosor de capa de 5% fenil
metil silicón. Las muestras fueron analizadas en un cromatógrafo de gases
Hewlett Packard 5890 Series ll equipado con un detector de Captura de
Electrones, con fuente de poder Níquel 63 acoplado a una computadora Vectra
486 con un software llamado “chemstation”. Para organofosforados se utilizó el
detector de flama (FID) éste detecta plaguicidas organofosforados del orden de
ppm porque el detector nitrógeno-fósforo (NP) no lo contenía el equipo.

Existen dos formas de mover los analitos desde el inyector hacia el


detector, una utilizando un gas acarreador y la otra variando la temperatura.
Gracias al uso de estos equipos, esto es bastante controlable, por lo que los
tiempos de retención varían en 0.001 minutos. Como gas acarreador se utilizó
helio grado cromatográfico (27mL/min). Con un flujo de 27ml/min. La volatilidad
39

de la muestra es muy importante, también que el extracto se encuentre limpio de


impurezas que puedan interferir en la identificación. Se requiere entrenamiento y
experiencia para ,el manejo del equipo. Los compuestos con muy alto peso
molecular >600 UMAS, no pueden ser analizados, esto es debido a la longitud de
la columna y por la temperatura máxima que ésta soporta.

La temperatura es muy importante, porque provoca que se genere una


volatilización de los compuestos al entrar por el inyector, el cual estuvo a una
temperatura de 320°C. Es en esa parte donde se introdujo un microlitro ( IpL) de
estándar (y/o muestra) y en ese microlitro es en donde se encuentran los analitos.
Al entrar al puerto de inyección se volatilizan y se separan los compuestos,
mismos que son arrastrados a través de la columna ; primero los más volátiles y
los de más alto peso molecular o mayor número de enlaces fueron mas lentos, en

entrar a la columna y por lo tanto llegarían después para ser detectados y generar
una señal cualificable y cuantificable.

En la columna también debe existir una afinidad entre la fase y la matriz


que deberá ser relacionada con la polaridad de los compuestos para que se
puedan separar cuando ciertos compuestos tienen alta polaridad, estos no son
volátiles, por lo que no se pueden analizar al igual que algunas sales.

La polaridad en cromatografía es muy importante ya que los compuestos


orgánicos que pasan por el grosor de capa de la columna deben ser no polares a
éste, es decir que no exista posibilidad de adsorberse en las paredes de la
columna y que pueda entorpecer la exactitud en la detección. El solvente en el
que se recomienda mantener el extracto final es el MTBE (Metil terbutil éter),
como sugiere la EPA (1990), Método 508, aunque también puede ser el
isooctano, o en su defecto el hexano.

Se buscan solventes que sean no polares a la columna, que tengan un


punto de ebullición bajo, que salgan al principio del cromatograma sin generar una
40

señal grande (compuestos clorados para captura de electrones), es decir que el


detector de captura no los vea, como es el caso del MTBE.

El inyector, el detector y la columna se encuentran dentro de un horno, el


cual tiene un termostato calibrado de tal manera que puede subir gradualmente
como se le indique la temperatura del horno y al mismo tiempo mantener a una
temperatura constante el inyector y el detector, 20-30°C más elevada que la
temperatura máxima de la rampa diseñada para el cromatograma.

Para el presente estudio, se inyectó un microlitro iniciando con una


temperatura de 8O”C, la cual subió 30°C por minuto hasta alcanzar 190°C
posteriormente subió 6°C por minuto hasta alcanzar 300°C y ahí se quedo por 5
minutos. En total la corrida duró por lo tanto 25 minutos aproximadamente. Los
plaguicidas organoclorados salen desde el minuto 8 hasta el minuto 22.

Para darle mantenimiento al detector, se recomienda subir la temperatura a


unos 300°C sin cerrar el gas acarreador (helio) y el gas auxiliar (nitrógeno) y
dejarlo así de 4 a 12 horas, si éste no presenta la señal del equipo baja, digamos
menor de 30 unidades (meV), se deberá seguir calentando e inyectando solventes
como hexano, o metanol. La acetona no se recomienda porque actúa con la capa
de S%fenil metil sílicon, y se diluyen los silanos o xilanos de la misma fase
estacionaría y son detectados.

Para dar mantenimiento a las columnas se recomienda una vez


desconectadas del inyector y detector, llenar los metros de la misma con
cloroformo y dejarla en reposo durante uno o dos días. Posteriormente se recoge
con gas y en un recipiente se recupera el cloroformo y se somete a un
calentamiento con 230°C por 4 o 6 horas.
41

5. RESULTADOS
5.1. Patrones de plaguicidas organoclorados estándares.
En la Fig.1 se presenta la mezcla de estándares de once plaguicidas
organoclorados. Éstos fueron comprados al Accustandard. La mezcla se diluyó
con MTBE para obtener concentraciones del orden de 15 ppb. Las Condiciones
del cromatógrafo se mantuvieron con las mismas características que las descritas
en Materiales y Métodos.

8000 -

7000
l-
6000 $
0 5 10 1’5 20 25
Tiempo de retención (minutos)

Fig. 1 Cromatograma de estándares con once plaguicidas organoclorados.


Cromatografía : Detector de Captura de Electrones temp. Iny. 32O”C, Temp.
Detector 33O”C, Inicio 80°C 1 min. Sube 30°C hasta 120°C y a una velocidad de
6°C por minuto hasta 300°C.
42

5.2. Patrones de plaguicidas organofosforados estándares.


En la Fig. 2 se presenta la mezcla de 3 plaguicidas organofosforados. Marca
Accustandard. Ca mezcla se diluyó con MTBE para tener concentracciones de
ISppm.

1.0 e 4
3

l /
5 1'0 15 20 25 $0
Tiempo de retención (minutos)

Figura 2. Cromatograma de la mezcla de estándares de tres plaguicidas


organofosforados. Detector de Flama (FID) Temperatura del Inyector 280°C
Temperatura del Detector 280°C Temperatura inicial 50°C 1 minuto, y sube a 8 “C
por minuto hasta 270°C.
43

5.3. Cromatograma del blanco de muestra para la calibración del equipo.


En el Laboratorio de Fisicoquímica Marina del ICMYL-UNAM, se extrajo de
acuerdo a la técnica. Presenta el cromatograma obtenido de una extracción que
se efectuó coti sulfato de sodio anhidro con el objeto de tratar de encontrar
impurezas, ya sea en la columna 0 en los solventes 0 material en general
utilizados.

1.1 e4-

1 .O e4-

8000 .-
8
2
7000 -

6000 -
0 10 1’5 20 25
Tiempo de retención (Minutos)

Figura 3. Cromatograma del análisis de un blanco de muestra y solventes.


Detector de Captura de Electrones temp. lny. 320X, Temp. Detector 33O”C, Inicio
80°C 1 min. Sube 30°C hasta 120°C y a una velocidad de 6°C por minuto hasta
300°C.
44

5.4. La Fig. 4 muestra un Cromatograma de Camarón. En el Laboratorio de


Nutrición de la Facultad de veterinaria UNAM se extrajo de camarón entero
húmedo utilizando como solvente el éter de petróleo y se concentró el extracto
con aire. Posferiormente se secó con sulfato de sodio anhidro, se purificó con
florisil y se reconcentró con aire. Finalmente se inyectó el producto disuelto en
MTBE.

1.0 e4

.z 9000

8000

7000

6000 -
// / / * * I
I , * /
0 55 10 11 55 20
20 2255
Tiempo de Retención (Minutos)

Figura 4. Cromatograma de la Técnica 1.


Detector de Captura de Electrones. Temp. Iny. 32O”C, Temp. Detector 33O”C,
Rampa : Inicio 80°C 1 min. Sube 30°C hasta 120°C y a una velocidad de 6°C por
minuto hasta 300°C.
45

54.1. En el Instituto de Fisiología Celular-lJNAM se extrajo de camarón entero


secado en estufa a una temperatura menor de 60”Cm macerado con ayuda de
nitrógeno Iíquid; y la extración se realizó con una mezcla de cloroformo-metanol.
La concentraciónfue con gas nitrógeno (Grado Cromatográfico), el secado con
sulfato de sodio anhidro y la purificación con florisil, la reconcentración también
fue con gas nitrógeno. (Técnica 2).

::
1.1 e4- n

1.0 e4-
I
*d
9000 -

8000--

6000
1’0 15 i0 25
Tiempo de Retención (Minutos)

Figura 5. Cromatograma de la técnica 2.


Detector de Captura de Electrones. Temp. Iny. 32O”C, Temp. Detector 33O”C,
Rampa : Inicio 80°C 1 min. Sube 30°C hasta 120°C y a una velocidad de 6°C por
minuto hasta 300°C.
46

5.4.2. En el Laboratorio de Fisicoquímica Marina ICMyL-UNAM se extrajeron


plaguicidas organoclorados del músculo de camarón liofilizado del Material de
Referencia Estándar (MRE) con equipo Soxhlet. La extracción utilizo como
solvente cloruro de metileno, y se concentró con Kuderna-Danish . El secado y la
purificación se llevaron a cabo como en la técnica 2. La reconcentración con
kuderna danish y gas nitrógeno y la elución de los analitos con MTBE.

1
1.1 e4-

1.0 e4-

9000 -

2
8000--

I I I I
5 10 15 20
Tiempo de Retención (Minutos)

Figura 6. Cromatograma de muestra de control MRE procesada con la técnica 3


Detector de Captura de Electrones. Temp. Iny. 32O”C, Temp. Detector 33O”C,
Rampa : Inicio 80°C 1 min. Sube 30°C hasta 120°C y a una velocidad de 6°C por
minuto hasta 300°C.
47

5.4.3. De igual forma en éste mismo Laboratorio se extrajo de músculo de


\
camarón liofilizado del Material de Referencia Estándar con horno de
microondas. ‘La extracción utilizó como solvente acetona :hexano 1 :l, y se
concentró con equipo rotavapor. El secado y la purificación se llevaron a cabo
como en la técnica No. 2, la reconcentración con rotavapor y gas nitrógeno y la
elución de los analitos se llevó a cabo con MTBE.

1.1 e4

l.Oe4 1 ,

9000-1
1 I II

8000 i 18

6000 4
0 ii 1’0 1'5 20 25
..

Figura 7. Cromatograma de la muestra de control SRM analizada por la técnica 4.


Detector de Captura de Electrones. Temp. Iny. 32O”C, Temp. Detector 33O”C,
Rampa : Inicio 80°C 1 min. Sube 30°C hasta 120°C y a una velocidad de 6°C por
minuto hasta 300°C.
48

54.4. Asimismo se extrajo de músculo de camarón liofilizado del Laboratorio de


Ciencias Marinas UAG en Barra de Navidad, Jal., con equipo soxhlet. La
extracción utilizó como solvente el cloruro de metileno y se concentro y
reconcentró con kuderna danish, el secado y la purificación de acuerdo a la
técnica 2, la reconcentración con kuderna danish y gas nitrógeno y la elución de
los analitos se llevó a cabo con metil terbutil éter.

1 .Oe
9000
6000-JIL
7000
6 0 0 0

Tiempo de Retención (minutos)

Figura 8. Cromatograma de muestras de camarón del Labratorio de Ciencias


Marinas UAG procesadas. Condiciones Cromatográficas : Detector de Captura de
Electrones. Temp. Iny. 32O”C, Temp. Detector 33O”C, Rampa : Inicio 80°C 1 min.
Sube 30°C hasta 120°C y a una velocidad de 6°C por minuto hasta 300°C.
49

54.5. También se extrajo músculo de camarón liofilizado de Isla Navidad, Col.,


UAG, con equipo soxhlet. El liofilizado se trató con cloruro de metileno, y se
concentró con equipo kudema danish . El secado y la purificación se llevaron a
cabo como en la técnica 2, la reconcentración con kuderna danish y gas
nitrógeno y la elución de los analitos con MTBE.

1.6e

1.5e

1.4e

1.3e

1.2e

l.le

1 .Oe

9 0 0 0

8 0 0 0
,_

Sig. 1 in C:\HPCHEM\l\DATA\JUDITHO3.D

Figura 9. Cromatograma de muestras de camaron procedentes de Isla Navidad,


Col, utilizando la Técnica No. 3. Condiciones cromatográfìcas : Detector de
Captura de Electrones. Temp. Iny. 32O”C, Temp. Detector 33O”C, Rampa : Inicio
80°C 1 min. Sube 30°C hasta 120°C y a una velocidad de 6°C por minuto hasta
300°C.
5.4.6. En el Laboratorio de Fisicoquímica Marina ICMyL UNAM se extrajo de
músculo de camarón liofilizado del Lab. de Ciencias Marinas, Barra de Navidad,
Jal. UAG con horno de microondas. La extracción utilizó como solvente
acetona-hexano 1 :l , y se concentró con rotavapor. El secado y la purificación
como en la técnica 2. Reconcentración con rotavapor y gas nitrógeno y la
elución de los analitos con MTBE.

4
1.1 e4-

I I I 1
5 10. 15 20

Tiempo de retench (Minutos)

Fig. 10 Cromatograma de muestras de camaron del Lab. de Ciencias Marinas


UAG. Procesadas con la técnica 4. Condiciones Cromatográficas : Detector de
Captura de Electrones. Temp. Iny. 32O”C, Temp. Detector 33O”C, Rampa : Inicio
80°C 1 min. Sube 30°C hasta 120°C y a una velocidad de 6°C por minuto hasta
300°C.
51

5.4.7. Aquí mismo se extrajo músculo de camarón liofilizado de Isla Navidad Col.,
UAG. Se llevó la extracción con horno de microondas utilizando como solvente
acetona-hexano 1 :l , y se concentró con rotavapor y gas nitrógeno y la elucion de
los analitos se llevó a cabo con MTBE.

Sio2;. 1 in C :lHP C HEWI\ ~\,DATA~\JUDITHO~ .D

Figura ll. Cromatograma de muestras de camarón de Isla Navidad, Col.,


utilizando la técnica 4. Condiciones cromatográficas : Detector de Captura de
Electrones. Temp. Iny. 320X, Temp. Detector 330X, Rampa : Inicio 80°C 1 min.
Sube 30°C hasta 120°C y a una velocidad de 6°C por minuto hasta 300°C.
52

5.4.8. En el Laboratorio de Fisicoquímica Marina ICMyL- UNAM se extrajo la


fracción soluble con cloruro de metileno de una muestra de agua marina como lo
indica el método 508 de la EPA (1991). Se concentró con equipo kuderna danish.
El secado y la purificación se llevaron a cabo como en la técnica 2, la
reconcentración con kuderna danish , y la elución de los analitos se llevó a cabo
con MTBE. Se presenta a continuación el cromatograma obtenido de la muestra
de agua marina de los estanques de cultivo de camarón en el Laboratorio de
Ciencias Marina,. Barra de Navidad, Jal. UAG.

1.1 e4

1.0 e4

9000

.i$ 8000

7000

6000
0 5 10 1’5 2 0 2 5
Tiempo de retención (minutos)

Figura 12. Cromatograma del análisis de agua marina de los estanques de cultivo
de camarón en el Laboratorio de Ciencias Marinas, Barra de Navidad, Jal.
Detector de Captura de Electrones. Temp. Iny. 32O”C, Temp. Detector 33O”C,
Rampa : Inicio 80°C 1 min. Sube 30°C hasta 120°C y a una velocidad de 6°C por
minuto hasta 300°C.
53

5.6. Cromatograma del sedimento.


En el Laboratorio de Fisicoquímica Marina del ICMyL UNAM. Se extrajo de
acuerdo a la Técnica 3. Se presenta a continuación el cromatograma obtrenido de
muestra de sedimento de la Laguna de Barra de Navidad, Jal.

¿3000-
1 ’ 1 1 ’ ’ ’ m I ’ I
0 5 1 0 1 6 2 0
Tiempo de Retención (Minuh)

Esi=. 1 í n C:\HPCHEM\l\DATA\JUDITHO8.D

Figura 13 Cromatograma del análisis de sedimento marino de la Laguna de Barra


de Navidad, Jal., Condiciones cromatográficas : Detector de Captura de
Electrones. Temp. Iny. 32O”C, Temp. Detector 33O”C, Rampa : Inicio 80°C 1 min.
Sube 30°C hasta 120°C y a una velocidad de 6°C por minuto hasta 300°C.
54

5.7. Cromatograma de alimento para camarón.


En el Laboratorio de Fisicoquímica Marina del ICMyL-UNAM se extrajo de acuerdo
a la técnica 4. Se presenta a continuación el cromatograma obtenido de muestra
de alimento comercial para camarón suministrado a camarones adultos en el
Laboratorio de Ciencias Marinas UAG. Barra de Navidad, Jal.

c3
c-2
0
.-LL --,---- C--
C?OOO
eooo i .~---+.---~-----l-- ---T--(----
0 5 10 1 5 SC 35
Timpa de Rst*“cion (Mnutorl

Figura 14. Cromatograma del análisis de alimento comercial para camarón adulto,
analizado según la técnica 4. Condiciones Cromatográficas : Detector de Captura
de Electrones. Temp. Iny. 32O”C, Temp. Detector 33O”C, Rampa : Inicio 80°C 1
min. Sube 30°C hasta 120°C y a una velocidad de 6°C por minuto hasta 300°C.
55

6. DISCUSIÓN

El cromatograma 1 donde se muestran los estándares de plaguicidas


organoclorados nos indica que se encuentran en una elevada pureza, algo muy
importante es el factor de respuesta el cual es proporcional al número de cloros
presentes en cada molécula. Los tiempos de retención son los que nos van a
permitir realizar comparaciones con los siguientes resultados.

El cromatograma 2 nos muestra los 3 plaguicidas organofosforados que


fueron observados en el detector de ionizacion de flama (FID), éstos fueron
detectados en concentraciones de 20 ppm para paraquat, y encontramos una
mejor respuesta en el caso del malatión y etil paratión con 6 y ll ppm
respectivamente.

El blanco (cromatograma 3) se realizó únicamente para revisar que todo el


material tanto de cristalería, como reactivos, columna y cromatógrafo estuvieran
en óptimas condiciones de uso.

Debido a que no se contaba con una técnica expérimental para la


extracción y determinación de plaguicidas en el Laboratorio de Fisicoquímica
Marina, se buscó la posibilidad de trabajar en el laboratorio de nutrición de la
facultad de Veterinaria, UNAM. En éste laboaratorio se han montado técnicas
para la determinación de espécies de origen terrestre o marino, sin embargo
nunca se había efectuado en camarones peneidos lo cual fue muy buen
comienzo. También se tuvo la posibilidad de efectuarlo en el Laboratorio de la
Dra. Chagolla del Instituto de Fisiología Celular y se efectuó la técnica que ellos
nombran Foltch para la extracción de compuestos orgánicos (ácidos grasos) a
partir de partes de animal.

Se probó una tercera técnica la cual estaba aplicada únicamente a


sedimentos y consultando con el Laboratorio de Química Marina Ambiental de la
56

Universidad de Texas A&M en la que por medio de equipo soxhlet y gracias a que
se consiguió una liofilizadora en el Instituto de Investigaciones Biomédica, se
liofilizó el tejido de los camarones y se tuvo una materia prima diferente, ya
pulverizada, la cual permitió una homogenización del tejido mejor para la
extracción de los analitos. Cabe mencionar que las pruebas de textura y de
apariencia coinciden con el Iiofilizado del músculo y el estándar de referencia.

Al final de estas 3 técnicas, un seminario de Extracción de compuestos


orgánicos por microondas impartido por personal de Equipos Falcón, fue el
catalizador para realizar una tuerta prueba, ya que este equipo fue prestado por
aproximadamente 6 meses al Laboratorio de Fisicoquímica Marina y requería el
material liofilizado lo cual ya estaba listo. En la extracción se gastó mucho menos
material, menos solventes a pesar de que logramos hacer varias réplicas.

La Técnica utilizada en la Facultad de Veterinaria UNAM, fue aceptable,


aunque la cantidad de camarón requerida fue mínima (un Camarón entero 25g
peso húmedo), sin embargo la cantidad utilizada de solventes grado reactivo fue
alta y susceptible a la contaminacion al efectuar el secado del extracto con aire así
como la reconcentración. El equipo presentó buena resolución solo que generó
una variación en la línea base producto del sangrado de la columna el cual pudo
deberse al tipo de solvente (eter de petróleo grado analítico). El sangrado de la
columna que presenta el cromatograma se detectó a una temperatura de 100 f
30°C ya que esta es la temperatura en los primeros minutos del cromatograma.
Este detalle no se observó en el Laboratorio del Instituto de Fisiología Celular, en
donde aparte de utilizar reactivos con la pureza requerida, la concentración se
realizó con nitrógeno. Se puede decir que fue la técnica más costosa por el
exceso de reactivo para poca muestra. La duración fue de 48 horas, el USO de
Nitrógeno líquido, los solventes y el gas nitrógeno utilizado en las concentraciones
incrementó aún más el costo.
La extracción por equipo soxhlet fue buena, buena resolución, los picos se
separaron bien, pero se utilizó un 300% más de reactivo comparándola con la
técnica microondas, además del tierno que fue largo unas 18 horas.
Comparándola con la técnica 4 de soxhlet se puede utilizar más muestra, que en
la técnica 4 de microondas.

La extraccion por microondas de las muestras de camarón analizadas por


la técnica 4 de microondas comparadas con las analizadas por las otras técnicas
resultó excelente en cuanto a recuperación, ahorro de solventes y de tiempo. Las
muestras de agua y la de sedimento no presentaron plaguicidas organoclorados
por lo menos en los límites mínimos permisibles del equipo y estándares con que
se trabajaron. Se consiguieron los estándares de los plaguìcìdas que se tenía
conocimiento, que existían en la región y se inyectaron. No se detectó la
presencia de Malatión, clordano, paratión , y paraquat, tanto en organismos, como
en agua y sedimento. Si se hubiese encontrado en almenos una de las matrices
antes mencionadas, se cuestionaría la posible ausencia en las demás.

En los cromatogramas de camarón del 6-14 existen picos que no fueron


identificados los cuales pueden corresponder a compuestos orgánicos del mismo
camarón y/o del alimento como ácidos grasos u otros plaguicidas de los que no se
tuvo estándar hasta ese momento.

Para eliminar cualquier duda de la veracidad de los resultados presentdos


en este trabajo, se efectuaron 10 análisis de un estándar de referencia certificado
por Standard Referente Material MA-A.3/OC que se consiguó en el Laboratorio
Internacional de Radioactividad Marina de la IAEA (Internatíonal Afomic Energy
Agency) y que consistió en músculo de camarón liofilizado y contaminado con 8
analitos, los cuales se muestran en la Tabla 1 en Material y Metodos. En cada
cromatograma se observaron los ocho analitos que la IAEA garantizaba su
presencia.
58

Además por las mismas fechas se examinaron 38 muestras de agua y


sedimento extraídos de la zona agrícola del Estado de Oaxaca utilizando la
técnica de embudo de separación y soxhlet respectivamente. La detección se
efectuó con las mismas características del equipo de cromatografía que sugiere el
Departamento de Cromatografía de Gases del Laboratorio del ICMyL UNAM, que
fue el mismo aparato, que el utilizado para el presente trabajo. En diez de las 38
muestras no se encontró ningun plaguicida, en las restantes 28 muestras se
encontró DDD, DDT, lindano, aldrìn, delta-BHC, toxafeno, etilparation, heptacloro
y paraquat (García-Almanza, 1996).

Otro trabajo que se efectuó en el mimo equipo, detectó cantidades a nivel


significativo y superiores al nivel máximo permitodo por la Ley del Equilibrio
Ecológico y Protección al ambiente (LEGEPA) de la Constitución Política de los
Estados Unidos Mexicanos. Este trabajo se desarrolló en agua y sedimento de la
presa de Valsequillo, Puebla, México, detectándose el heptacloro, aldrín, dieldrín,
y el ppDDT (Vázquez et al. 1996). Los límites de detección del equipo para una
muestra de 5 g son del orden de 0.01 ppb, esto se logra gracias a la sensibilidad
del detector de captura de electrones.

En cuanto a la posible fuente de contaminación por plaguicidas puede ser


porque el Valle de Cihuatlán presenta una zona platanera extensa de vegetación,
también por Insecticidas caseros utilizados por los habitantes de Barra de
Navidad, así como los alimentos que llegan al lugar que se encuentren demasiado
fertilizados, al ser depositados los desperdicios al basurero municipal si no se
hace con el debido cuidado también pueden contaminar un área.

Los seis meses que se encontraron los camarones en acondicionamiento y


reproducción, si es que traían plaguicidas los pudieron haber perdido con la
ecdysis. También como estos analitos son lipofílicos, también se pudieron haber
perdido en la ovoposición de las hembras, ya que los huevecillos contienen
grasas.
59

En el anexo se incluyen los resultados para metales pesados realizados


para el mismo estudio, esto se hizo porque la presencia de metales pesados se
sospechaba por la cercanía del Río Marabasco y un estudio realizado por Llanger
O.S.G., 1994 trata el efecto de metales pesados Cd, Cu, Pb y Zn y agentes
quelantes EDTA y DTPA en zoea Penaeus Vannamei. También Meyer-Willerer
(comuniciación personal, 1996) observó, que cuando no se aplicaba el EDTA,
dejaban de reproducirse los camarones. Entre los resultados destaca el Cadmio
en los tres tipos de camarones encontrando concentraciones de hasta 13 ppm en
lo que son cabezas, y músculo, el cual es un valor que rebasa ampliamente el
límite máximo permitido. También en el alimento se encontró la presencia de Cu,
Zn, Cr, Pb y Cd. La técnica incluye absorción atómica por ionización de flama y
digestión de las muestras por microondas.

La extracción de plaguicidas se evaluó de varias maneras.

1. Inyectando estándar interno a la muestra de tejido de camarón liofilizado y al


término del proceso en la inyección, se observó el porcentaje de recuperación
superior al 90% (93%) en el caso de la extracción por microondas.

2. Inyectando estándar interno a la muestra de tejido de camarón liofilizado y al


término del proceso en la inyección se obtuvo un porcentaje de recuperación del
87% con el equipo soxhlet.

3. El caso del estándar de referencia, en la extración por microondas por


triplicado, se obruvieron excelentes concentraciones mediante una curva de
calibración realizada con los mismos estándares por seprarado y la desviación
estándr fue menor en todos los casos que la requerida en la etiqueta del estándar
de referencia.
60

7. CONCLUSIONES.

0 No se encontraron ninguno de los siguientes plaguicidas tales como aldriín,


lindano, dieldrin, DDT, DDE, y DDD en el músculo y en la cabeza del camarón
cultivados tanto en Isla Navidad como en el Laboratorio de Ciencias Marinas,
condicion que puede deberse a que los camarones estuvieron seis meses en
condiciones controladas.

~3 El agua donde permanecieron los camarones del Laboratorio de Ciencias


Marinas UAG fue tratada con EDTA y con filtros ultravioleta antes de la llegada
al tanque aunque fue tratada, no mostró contaminación por plaguicidas.

Q El sedimento tampoco fue encontrado con plaguicidas y éste nos indicaría la


posible acumulación respecto al tiempo.

3 El alimento no presentó contaminación por plaguicidas lo cual nos indica que SU

consumo tampoco sería tóxico en ese sentido.

~3 La mejor técnica de extracción fue con el uso de microondas, aunque la compra


del equipo es costosa, permite garantizar la extracción en corto tiempo y con
pocos consumibles, la técnica de soxhlet también resultó buena, solo que
porque implica mayor tiempo y tres veces mas reactivos y consumibles que en
la anterior.

~3 La técnica a base de microondas también resultó ser la mas adecuada cuando


se trata de tejidos deshidratados de organimos porque al trabajar con tejido de
camarón liofilizado podemos contar con una mayor cantidad de muestra de
peso relativamente bajo.
61

0 Esta técnica de microondas no se recomiendo tanto para sedimentos porque el


peso de la muestra no debe exceder de 5 gramos, (recomendable 1 gramo),
esto resulta útil para organismos porque al ser liofilizados reducen hasta una
quinta parte su peso original y para lograr una buena homogenización del
sedimento entre más muestra se tenga es más representativo el resultado.

0 La técnica utilizada en la facultad de veterinaria es buena, pero es mejor


trabajar con columnas capilares que empacadas y con reactivos grado
plaguicida.

@ La técnica del Instituto de Fisiología Celular, en cuanto a timpo dura varios


dias, y los reactivos se necesitan en mayor cantdidad que en la técnica del
soxhlet, duró varios días la extracción por lo que resulta incomparable con la
técnica por microondas, además de que requiere de la utilización de gas
nitrógeno, y nitrógeno líquido, y el cual resulta aún más costoso y de operación
delicada.

@ Los picos que se observan y no son reconocidos pueden ser otros plaguicidas
de los que no se tuvo el estándar para su identificación, así como también
pueden ser compuestos orgánicos del mismo camarón.

~3 Es necesario dar seguimiento a estudios en cuanto a los compuestos


organofosforados, porque estos son menos persistentes pero mucho más
tóxicos.
62

8. RECOMENDACIONES.

Q Dar seguimiento realizando estudios sobre plaguicidas (química analítica


ambiental) en esa región y en la zona agrícola de los Estados de Jalisco y
Colima ya que si continúa la construcción de granjas para acuacultura se
puede asegurar la comercializacion del producto con miras a exportación si se
encuentra exenta de contaminación.

Q Efectuar una vigilancia constante para evitar que se sigan usando plaguicidas
prohibidos.

0 Proporcionar campañas de información a los usuarios de plaguicidas para que


adquieran los conocimientos para un manejo y uso seguro de los plaguicidas.

0 Evitar que se reutilicen los envases de plaguicidas, porque esto ocasiona desde
leves infecciones hasta envenenamientos a las personas que los operan.

Fs Utilizar aparte de FID y ECD el detector de Nitrógeno-Fósforo NP para


identificar minimas concentraciones de organofosforados y carbamatos.

~3 Analizar en estudios similares los extractos en un espectrofotómetro de masas


para asegurar la presencia de los plaguicidas organoclorados.

~3 Proponer normas para algunos plaguicidas que se siguen utilizando en México


y que ya son prohibidos en otros países por ser carcinogénicos, teratogénicos,
mutagénìcos entre otros.
63

Q Efectuar una vigilancia constante para evitar que se sigan usando plaguicidas
prohibidos.

Q Proporcionar campañas de información a los usuarios de plaguicidas para que


adquieran los conocimientos para un manejo y uso seguro de los plaguicidas.

0 Evitar que se reutilicen los envases de plaguicidas, porque esto ocasiona desde
leves infecciones hasta envenenamientos a las personas que los operan.

Q Utilizar aparte de FID y ECD el detector de Nitrógeno Fosforo, para identificar


mínimas concentraciones de organofosforados y carbamatos.

@ Analizar en estudios similares los extractos en un espectrofotómetro de masas


para asegurar la presencia de los plaguicidas organoclorados.

@ Proponer normas para algunos plaguicidas que se siguen utilizando en México


y que ya son prohibidos en otros países por ser cancerígenos, teratogénicos
mutagénicos, entre otros.
64

9. LITERATURA CITADA :

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ANEXO
73

Fig. 15. Cobre determinado en cabeza y músculo de camarón de diferentes


fuentes y en alimento para camarón.

El cobre es un ión que probablemente no provocó la reabsorción de la hueva de


camarones hembra en el LCM de la UAGuadalajara, Barra de Navidad, Jal., en el
año de 1995 al entrar al estadío IV de maduración. La cantidad de cobre reportada
para langostino bajo condiciones normales BS entre 0.1 y 167 mg/Kg de peso
húmedo con una media de 20.4 mg/Kg (Sikorski E.E. 1994. Tecnología de los
productos del mar: recursos, composición nutritiva y conservación. Ed. Acribia,
España, tabla 13, página 67).
74

14
12
10
8
6
4
2
0

Fig. 16. Cadmio determinado en cabeza y músculo de camarón de diferentes


fuentes y en alimento para camarón.
.
El cadmio puede ser el ión que provocó la reabsorción de la hueva de camarones
hembra en el LCM de la UAGuadalajara, Barra de Navidad, Jal., en el año de 1995
al entrar al estadío IV de maduración. La adición de ll mg/L de sal disódica del
ácido etilen-diamin-tetraacético ( Na2 l EDTA) neutralizaba este efecto. La cantidad
de cadmio reportada para langostino bajo condiciones normales es entre 0.0 y 0.2
mg/Kg de peso húmedo (Sikorski E.E. 1994. Tecnología de los productos del mar:
recursos, composición nutritiva y conservación. Ed. Acribia, España, tabla 13,
página 67).
75

0 99
0 98
0 j7
03 6
01 5
0 14
0 33
0 !2
0 31

Fig. If. Níquel determinado en cabeza y músculo de camarón de diferentes


fuentes y en alimento para camarón.

El níquel también puede ser el ión que provocó la reabsorción de la hueva de


camarones hembra en el LCM de la UAGuadalajara, Barra de Navidad, Jal., en el
año de 1995 al entrar al estadio IV de maduración. La adición de Il mg/L de sal
disódica del ácido etilen-diamin-tetraacético (Na2 l EDTA) neutralizaba este efecto.
La cantidad de níquel reportada para langostino bajo condiciones normales es
entre 0.0 y 0.1 mg/Kg de peso húmedo (Sikorski E.E. 1994. Tecnología de los
productos del mar: recursos, composición nutritiva y conservación. Ed. Acribia,
España, tabla 13, página 67).
76

Fig. 18. Plomo determinado en cabeza y músculo de camarón de diferentes


fuentes y en alimento para camarón.

Ii¡ plomo. es otro ión que pudo provocar la reabsorcicjn de la hueva de camarones
hembra en el LCM de la UAGuadalajara, Barra de Navidad, Jal., en el año de 1995
al entrar al estadío IV de maduración. La adición de ll mg/L de sal disódica del
ácido etilen-diamin-tetraacético (Na2 l EDTA) neutralizaba este efecto. La cantidad
de plomo reportada para langostino bajo condiciones normales es entre 0.3 y 11.6
mg/Kg de peso húmedo con una media de 1.6 mg/Kg (Sikorski E.E. 1994.
Tecnología de los productos del mar: recursos, composición nutritiva y
conservación. Ed. Acribia, España, tabla 13, página 67).
77

0 7
1
J

0 61
/

015
014
013
012
0 I1
0

Fig. 19. Cromo determinado en cabeza y músculo de camarón de diferentes


fuentes y en alimento para camarón.

El cromo es otro ión que pudo provocar’ la reabsorción de la hueva de camarones


hembra en el LCM de la UAGuadalajara, Barra de Navidad, Jal., en el año de 1995
al entrar al estadío IV de maduración. La adición de 11 mg/L de sal disódica del
ácido etilen-diamin-tetraacético (Na2 l EDTA) neutralizaba este efecto. La cantidad
de plomo reportada para langostino bajo condiciones normales es 0.1 mg/Kg de
peso húmedo (Sikorski E.E. 1994. Tecnología de los productos del mar: recursos,
composición nutritiva y conservación. Ed. Acribia, España, tabla 13, página 67).
78

SECAR LA MUESTRA A APROX.


70°C LENTAMENTE

MOLER 10 g DE MUESTRA SECA


CON 15 g DE SULFATO DE SODIO ANHIDRO

COLOCAR EN DEDAL DE EXTRACCIÓN


Y PONER UN TAPON DE FIBRA DE VIDRIO

DIGERIR EN EQUIPO DE EXTRACCIÓN


SOXHLET USANDO COMO SOLVENTE
CLORURO DE METILENO

1 PURIFICAR EL EXTRACTO CON FLORISIL 1


I I

CONCENTRAR EN KUDERNA DANISH


(Ver diagrama de concentración)
I
1INYECTAR EN CROMATÓGRAFO DE GASES 1

Fig. 20. Extracción de plaguicidas en muestras de sedimento y alimento. Método


EPA D5369-93.
79

I1UNA ALíCUOTA
TOMAR EL EMBUDO DE SEPARAC!QN
DE 40mL DE AGUA MUESTREADA

I
1 AGREGAR 24 mL DE CLORURO DE METILENO )
I 1

b+ AGITAR VIGOROSAMENTE DURANTE


2 o 3 MINUTOS

DEJAR REPOSAR HASTA VER SEPARACIÓN


DE FASES
(Aproximadamente 10 minutos)

1 RECUPERAR FASE ORGÁNICA EN 1


I MATRAZ ERLENMEYER I

INYECTAR EN CROMATÓGRAFO
DE GASES CON DETECTOR
DE CAPTURA DE ELECTRONES

Fig. 21. Extracción de plaguicidas organoclorados en muestras de agua


Método EPA 508.
80

L
UNIR TIJBO CONCENTRADOR AL
MATRAZ DE LA KUDERNA DANISH (K.D.)
ANADIR 4 PERLAS DE EBULLICIÓN

PONER EL EXTRACTO DE LA MUESTRA


EN EL MATRAZ DE LA K.D.

UNIR LA COLUMNA SNYDER AL MATRAZ


DE LA K.D.

INSTALAR LA K.D. EN BAÑO MARíA


A 60 - 65°C SUMERGIENDO EL TUBO
CONCENTRADOR TRES CUARTAS
PARTES DE SU LONGITUD

- - -
CONCENTRAR HASTA OBTENER UN VOLUMEN
“APARENTE” DE 2 mL

RETIRAR LA K.D. DEL BAs!O MARZA


E S P E R A R A Q U E S E ENFR/E P A R A Q U E E S C U R R A
EL CONCENTRADO DE LA COLUMNA AL CONCENTRADOR

MEDIR VOLUMEN DEL CONCENTRADO


GUARDAR EN UN VIAL CON TAPÓN DE TEFLÓN

INYECTAR EN ALMACENAR EN CONGELADOR


CROMATOGRAFO DE GASES A 4°C

Fig. 22. Concentraciin de extractos de muestras de organismos, agua, sedimento


y alimento.