INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

UNIDAD PROFESIONAL INTERDISCIPLINARIA

DE BIOTECNOLOGÍA

Primer reporte de laboratorio.

EXTRACCIÓN Y CUANTIFICACIÓN DE
ACRILAMIDA EN SUELO CONTAMINADO.
Integrantes del equipo:
Cuellar Rodríguez Alfonso Ramón.
Lugo Rivera Dante Marco Ariel.
Palma Servín Carlos Ernesto.
Reyes Jiménez Juan Guillermo.
Vidal Sánchez Cinthya.

MÉTODOS INSTRUMENTALES AVANZADOS.

Equipo: 3.

Grupo:
6AV4.

Profesora:
Marina Olivia Franco Hernández.

Fecha de Entrega 18.09.16

 EXTRACCIÓN Y CUANTIFICACIÓN DE ACRILAMIDA
EN SUELO CONTAMINADO.
OBJETIVOS.
General: Desarrollar un método para la extracción y cuantificación de acrilamida en suelo y agua.
Específicos:
 Utilizar diferentes métodos analíticos para evaluar la degradación de Acrilamida en ambos tipos
de suelo.
 Evaluar la degradación de Acrilamida en un suelo de bosque y en un suelo salino.
 Comparar la degradación de la Acrilamida entre ambos suelos.
 Llevar a cabo el seguimiento de la degradación la Acrilamida con el paso del tiempo.

INTRODUCCIÓN.
El suelo es un componente importante de los bosques y los ecosistemas forestales puesto que
ayuda a regular importantes procesos eco-sistémicos, como la absorción de nutrientes, la
descomposición y la disponibilidad de agua. Los suelos proporcionan anclaje, agua y nutrientes a los
árboles. A su vez, los árboles y otras plantas y tipos de vegetación son un factor importante en la
creación de un nuevo suelo cuando las hojas y la vegetación se deterioran y descomponen.
Las relaciones entre los suelos y los bosques son mucho más complejas y de largo alcance, las
cuales pueden ser modificadas o alteradas de manera negativa por el efecto de algún contaminante
presente en el suelo. Normalmente, los contaminantes que más afectan a los suelos son aquellos que
presentan características fisicoquímicas que los hacen dañinos para el medio, como lo son los
compuestos orgánicos.
Los compuestos orgánicos presentes en el suelo sufren muchos cambios. Con el tiempo casi
todos se descomponen o se degradan como resultado de distintas reacciones químicas y microbiológicas
en el suelo. Algunos se descomponen a causa de la acción de la luz solar. Estos procesos tienen como
resultado la degradación final del compuesto en los compuestos minerales CO2, H2O, HCl, SO2, etc.
Cuando se degradan, algunos producen sustancias intermedias (metabolitos) cuya actividad biológica
puede tener también repercusiones ambientales.

ACRILAMIDA.
La acrilamida es un producto químico intermedio empleado en la síntesis de poliacrilamidas.
Se presenta como un polvo blanco cristalino. Es soluble en agua y se polimeriza rápidamente al alcanzar
el punto de fusión o al ser expuesto a la luz UV. La acrilamida sólida es estable a temperatura ambiente,
pero puede polimerizarse violentamente cuando se mezcla o expone a agentes oxidantes. Su fórmula
química es la siguiente:

Figura 1: Estructura química de la acrilamida.

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 A manera de resumen, la Tabla 1 presenta más información sobre este compuesto.

Tabla 1: Características de la Acrilamida

Sólido cristalino La Acrilamida puede reaccionar violentamente cuando
blanco o incoloro sin se derrite. Cuando se calienta puede emitir vapores
olor penetrantes.
La Acrilamida se usa para fabricar poliacrilamida,
compuesto que se usa principalmente para tratar
Se usa en la industria
efluentes de aguas residuales desde plantas de
tratamiento de aguas y procesos industriales.

La poliacrilamida es un homo-polímero de la acrilamida que puede ser sintetizada en forma de

cadena lineal o entrecruzada, e incluso se emplea junto con otros monómeros como el acrilato de
sodio para formar distintos co-polímeros.
Se emplea fundamentalmente como floculante en el tratamiento del agua de suministro a las
poblaciones y en el procesado de la pulpa de papel. También se ha comercializado como acondicionador
de suelos llamado “Krilium” por Monsanto en la década de 1950. A menudo se utiliza para el uso
hortícola y agrícola bajo diversos nombres comerciales.
La forma aniónica de poliacrilamida reticulada se utiliza con frecuencia como acondicionador
de suelos en terrenos agrícolas y de la construcción para el control de la erosión, con el fin de proteger
la calidad del agua de los ríos y arroyos cercanos. Por lo tanto, la acrilamida se puede encontrar en
distintos medios, como se puede ver en la Tabla 2.

Tabla 2: Presencia de la Acrilamida en el ambiente.

La Acrilamida puede entrar al agua potable si se usa
Se encuentra en el poliacrilamida en el proceso de tratamiento del agua. Se
aire y el agua puede encontrar en suelos, pero raramente se encuentra
en el aire.
Degradada
Si la acrilamida entra al suelo o al agua, será degradada
rápidamente en el
rápidamente por bacterias.
suelo y el agua

Gracias a los microorganismos presentes en el suelo, la acrilamida es degradada con el paso del
tiempo, aunque cabe recalcar que, mientras esta se encuentre en el suelo o agua, representará un riesgo
para la salud y los ecosistemas debido a su peligrosidad.
En varios estudios se ha demostrado que la acrilamida daña el material genético de las células
y que también induce tumores en animales tras un largo periodo de administración. Los estudios en
animales han demostrado también efectos sobre la reproducción, en particular, disminución de la
fertilidad en el macho.
Así se ha llegado a la conclusión de que la acrilamida es un genotóxico carcinógeno para el que
no es posible determinar un nivel de exposición seguro. Se debe asumir que existe algún riesgo, aunque
sea pequeño, incluso a niveles de exposición muy bajos.

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 En conjunto, y considerando toda la información de relevancia disponible, la Agencia
Internacional para la Investigación sobre el Cáncer (IARC) ha catalogado a la acrilamida como
"probablemente carcinógeno para los humanos".

METODOLOGÍA.
La forma de trabajo desde el inicio del experimento se desarrolla en forma semanal. Se tienen
4 tratamientos con diferentes contenidos, para poder ser comparados tras aplicárseles la misma
metodología (aunque en algunos casos difiere la metodología aplicada a cada tipo de suelo para que los
resultados sean comparables). Dichos tratamientos se enuncian en la tabla 3.
Tabla 3: Tratamientos del experimento.
Clave Significado
SCB Suelo Control de Bosque
SCS Suelo Control Salino
SBA Suelo de Bosque con Acrilamida
SSA Suelo Salino con Acrilamida

Como se observa en la Tabla 3 se tienen dos tratamientos control para poder evaluar la
diferencia entre una cinética llevada a cabo sin contaminante (SCB, SCS) respecto de la que sí lo posee
(SBA, SSA). De cada una de los 4 tratamientos se toman 5 muestras para 5 tiempos diferentes, lo cual
en total corresponde a 20 unidades experimentales. A cada muestra obtenida cada semana se le da cierto
tratamiento (explicado posteriormente) por triplicado, es decir que se tienen 3 repeticiones por cada
tiempo, lo cual constituye 15 unidades destructivas (ver tabla 4).

Esto significa que cada unidad sólo se usa una vez para el experimento tras lo cual se desecha.
Cabe decir que los equipos de trabajo se dividieron en función del tratamiento que les correspondió,
aunque dos equipos (contando al equipo 4 que elabora este reporte) utilizan Suelo de Bosque con
Acrilamida.
Tabla 4: Resumen de unidades y muestras para el experimento.
Número Tiempo Unidades Destructivas por Unidades experimentales
de (días) tiempo trabajadas en cada tiempo
muestra
1 0 3 4
2 7 3 4
3 14 3 4
4 28 3 4
5 42 3 4
Total 15 20

Cada una de las 15 unidades experimentales destructivas físicamente se encuentra en un

frasco grande de l 𝐿 de capacidad, de plástico. Dentro de cada frasco se tienen 2 frascos pequeños de
plástico. Uno posee 20 𝑔 de suelo con Acrilamida, y otro 10 𝑔. Adicionalmente y para una técnica que
se discutirá posteriormente, se coloca dentro de la misma unidad experimental otro frasco de plástico
con 20 𝑚𝐿 de NaOH a concentración 1 N.

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INICIO DEL EXPERIMENTO.

Cada tratamiento requirió entonces la siguiente cantidad de suelo.

𝑚𝑎𝑠𝑎 𝑑𝑒 𝑠𝑢𝑒𝑙𝑜 𝑈𝑛𝑖𝑑𝑎𝑑𝑒𝑠 𝐸𝑥𝑝𝑒𝑟𝑖𝑚𝑒𝑛𝑡𝑎𝑙𝑒𝑠

= (10 𝑔 + 20 𝑔) × 15 = 450 𝑔
𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙 𝑟𝑒𝑞𝑢𝑒𝑟𝑖𝑑𝑎 𝐷𝑒𝑠𝑡𝑟𝑢𝑐𝑡𝑖𝑣𝑎𝑠

Cada equipo tamizó 450 𝑔 de suelo en una maya de plástico con abertura de
aproximadamente 0.5 𝑚𝑚 para tener el suelo con un menor tamaño de partícula y eliminar cualquier
resto de mayor tamaño. Posteriormente se pesaron los 10 𝑔 y los 20 𝑔 para cada frasco de l 𝐿. Cabe decir
que todos los pesos determinados se hicieron en balanza analítica.

El suelo acondicionado presentó un color café oscuro, característico de los bosques.

Por su parte la cantidad de Acrilamida adicionada en cada frasco fue 1 % de la cantidad de

suelo que se tenía, por lo que para el frasco con 10 𝑔 se agregaron 0.1 𝑔 y para el de 20 𝑔 se agregaron
0.2 𝑔.

El % de humedad del suelo se determinó al meter 20 𝑔 de suelo húmedo sobre una caja Petri
a una estufa durante 24 horas y posteriormente pesar el suelo de nuevo (suelo seco), obteniéndose un
valor final de 9.2 𝑔. Finalmente se aplicó la siguiente ecuación:

𝑃𝑆𝐻 − 𝑃𝑆𝑆
%𝐻 = × 100
𝑃𝑆𝐻

𝑃𝑆𝐻 = Peso del suelo húmedo (𝑔).

𝑃𝑆𝑆 = Peso del suelo seco (𝑔).

El cálculo del % de humedad con los datos experimentales es el siguiente:

20 𝑔 − 9.2 𝑔
%𝐻 = × 100 = 𝟓𝟒 %
20 𝑔

Posteriormente se determinó la Capacidad de Retención de Agua (CRA) del suelo. Para ello
se colocaron 20 𝑔 de suelo sobre un papel filtro húmedo en un embudo de filtración. Se agregó alrededor
de 100 𝑚𝐿 de agua y se tapó el papel filtro para evitar pérdidas de agua por evaporación. Tras 24 ℎ de
reposo se pesó el filtro con suelo húmedo. También se realizó esto con un blanco de papel filtro sin
muestra de suelo. Se aplicó la siguiente fórmula.

𝑚ℎ − 𝑚𝑠 − 𝑚𝑓 − 𝑎𝑓
𝐶𝑅𝐴 = 100 ×
𝑚𝑠

𝑚ℎ = Masa de la muestra húmeda después de 24 h (𝑔).

𝑚𝑠 = Masa de suelo seco (𝑔).
𝑚𝑓 = Masa de papel filtro seco (𝑔).
𝑔𝐻2𝑂
𝑎𝑓 = 𝑔 de agua absorbida por 𝑔 de papel filtro (𝑔 ).
𝑝𝑎𝑝𝑒𝑙

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 El cálculo de la CRA para el tratamiento SBA con los datos experimentales obtenidos es el
siguiente.

𝑔𝐻 𝑂
20 𝑔 − 9.2 𝑔 − 1.3192 𝑔 − 1.2238 𝑔 2
𝑝𝑎𝑝𝑒𝑙
𝐶𝑅𝐴 = 100 × = 𝟖𝟗. 𝟕𝟓 %
9.2 𝑔

Lo cual significa que esos 20 𝑔 de suelo tienen un 100 % de agua retenida. Se busca que las
muestras estén a un 40 % de su Capacidad de Retención de Agua. Como el tipo de suelo boscoso tiene
un alto grado de humedad, se asume que su CRA es alto también. Por lo que la actividad de agua llega
a ser un factor que puede interrumpir la formación de la acrilamida. (FAO, 2004) Un pequeño incremento
de la cantidad final de agua (del 1% al 2%) se ha visto que reduce la formación de acrilamida
(Nekazaritzako & Euskal, 2005) Por lo que la cantidad de agua que es necesario adicionar para ello se
calculó de la siguiente forma para un total de 100 𝑔 de suelo.

100 𝑔𝑠𝑢𝑒𝑙𝑜
𝑚𝐻2 𝑂 = 40 %𝐶𝑅𝐴 × = 44.5682 𝑔𝐻2 𝑂
89.75 %

Para los frascos con 20 y 10 𝑔 de suelo respectivamente, la proporción calculada fue la

siguiente.

44.5682 𝑔𝐻2 𝑂
𝑚𝐻2 𝑂 = 20 𝑔𝑠𝑢𝑒𝑙𝑜 = 8.9136 𝑔𝐻2 𝑂 𝑝𝑎𝑟𝑎 20 𝑔
100 𝑔𝑠𝑢𝑒𝑙𝑜

44.5682 𝑔𝐻2 𝑂
𝑚𝐻2 𝑂 = 10 𝑔𝑠𝑢𝑒𝑙𝑜 = 4.4568 𝑔𝐻2 𝑂 𝑝𝑎𝑟𝑎 10 𝑔
100 𝑔𝑠𝑢𝑒𝑙𝑜

Todo esto se homogenizó con un agitador de vidrio para cada frasco pequeño. Una vez
teniendo los componentes se acomodó cada unidad destructiva como ya se describió. Se elaboraron
etiquetas para cada unidad con; Grupo, Asignatura, Equipo, Fecha, Número de Unidad Experimental,

Figura 2. Representación de cada Unidad Experimental Destructiva y su contenido

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REFERENCIAS.
ATSDR. (2012). Resumen de Salud: Acrilamida. Obtenido de Agencia para Sustancias Tóxicas y el
Registro de Enfermedades: https://www.atsdr.cdc.gov/es/phs/es_phs203.pdf
FAO. (2004). Comisión del Codex Alimentarius. Obtenido de Organización de las Naciones Unidas
para la Alimentación y la Agricultura:
ftp://ftp.fao.org/codex/meetings/CCFAC/ccfac36/fa36_34s.pdf
FAO. (2015). Los bosques y suelos forestales contribuyen de manera esencial a la producción agrícola
y la seguridad alimentaria mundial. Obtenido de Organización de las Naciones Unidas para la
Alimentación y la Agricultura: http://www.fao.org/soils-2015/news/news-detail/es/c/285875/
FAO. (s.f.). Apéndice 2: Parámetros de los plaguicidas que influyen en los procesos que tienen lugar
en el suelo. Obtenido de Depósito de Documentos de la FAO:
http://www.fao.org/docrep005/x2570s/x2570s08.htm
Nekazaritzako, E., & Euskal, F. (2005). Acrilamida. Obtenido de Elika: Seguridad Alimentaria:
http://www.elika.net/datos/riesgos/Archivo5/Acrilamida%202005.pdf
UPRM. (s.f.). ¿Qué es la acrilamida? Obtenido de Universidad de Puerto Rico Sede Mayagüez:
http://www.uprm.edu/biology/profs/velez/acrilamida.htm