Instituto Politécnico Nacional

Escuela Nacional de Ciencias Biológicas

Departamento de Bioquímica
Métodos de Análisis

Cromatografía de intercambio iónico

5QV2
Bernal Morales Héctor Enrique
Chavez Rico Pablo
Quevedo Moran Jessica Lizeth
Soltero Cárdenas Miguel Francisco
CROMATOGRAFÍA DE INTERCAMBIO IÓNICO

¿Qué es ?

Es un método que permite la

separación de moléculas basada
en las propiedades de carga
eléctrica que éstas poseen.
 Componentes del sistema

Muestra Fase móvil

Fase estacionaria
(Matriz de Columna de
intercambio iónico o vidrio
intercambiador
iónico)

Fracciones

Figura 1. Esquema de los componentes que participan en la cromatografía de

intercambio iónico en columna.
 FUNDAMENTO
● El principio básico de la cromatografía de intercambio iónico es que las moléculas cargadas de la muestra
interactúan con los intercambiadores iónicos de forma reversible.

● La separación mediante intercambiadores iónicos se realiza por lo general, en dos fases: en la primera las
sustancias a separar se unen al intercambiador utilizando condiciones que originan una unión fuerte y estable;
a continuación, se eluye de la columna con buffers de diferentes pH o diferente fuerza iónica, compitiendo los
componentes del buffer con el material por los sitios de unión.

R+ A - + B - R+ B - +
A-
 ETAPAS DE UNA SEPARACIÓN POR
CROMATOGRAFÍA DE INTERCAMBIO IÓNICO
•Etapa de Equilibrio
Toda la fase estacionaria se encuentra asociada a iones
complementarios (que pueden ser cloro o sodio).
Es la aplicación de la muestra y el lavado. El objetivo en este paso es que se dé el
intercambio iónico para que así las moléculas se unan a la fase estacionaria,
además de lavar todas las moléculas que no se unieron
Las moléculas captadas por el intercambiador son eluidas debido a cambios en la
composición del buffer. La elusión puede realizarse de la siguiente forma :
la más usual consiste en aumentar progresivamente la concentración de un contra
ión, de modo de desplazar el equilibrio de unión de la macromolécula hacia la forma
libre. El contraión es normalmente una sal, disuelta en eluyente (NaCl, KCl, etc).
Por último, se remueven las partículas que aún
están asociadas al intercambiador.
Intercambiadores iónicos
Hoy en día los intercambiadores iónicos
usados más ampliamente son resinas
poliméricas de estireno o ácido acrílico, con
grupos iónicos funcionales unidos a la
estructura del polímero. En función de la
carga de ese grupo, la resina será aniónica o
catiónica, y en función de su naturaleza se Figura 2. Representación esquemática
tratará de resinas catiónicas o aniónicas de las resinas intercambiadoras de
aniones y cationes. Tomada de: Reyna, V. El
fuertes o débiles. intercambio iónico y sus componentes químicos.
Disponible en
:https://tesis.ipn.mx/bitstream/handle/123456789/17311/
25-1-16715.pdf?sequence=1&isAllowed=y.
 Tabla 1. Resinas de Intercambio Iónico
TIPO INTERCAMBIADOR GRUPO FUNCIONAL NOMBRE COMERCIAL

CATIÓNICO Fuerte Ácido sulfónico Dowex50, Amberlita

IR120

Débil Ácido carboxílico Amberlita IRC 50

Rexyn 102

ANIÓNICO Fuerte Amonio cuaternario Ionac AGA-542

Amberlita IRA400

Débil Amina Amberlita IR 45

Rexyn 203
Propiedades de los intercambiadores iónicos
APLICACIONES
 Desaceitado por coalescencia. Un método ingenioso de desaceitado de condensado o de otras
soluciones contaminadas se lleva a cabo mediante el uso de una resina oleófila. El agua a tratar se filtra
flujo hacia arriba a través de un lecho de esta resina. El aceite se extrae a través de la resina, y gotitas de
aceite se forman gradualmente en la superficie de las perlas.
CONTAMINANTES EN AGUA
HEMOGLOBINA GLICOSILADA
El porcentaje de proteína unida a la glucosa es lo que se denomina hemoglobina glicosilada (HbA1).
Cuanto mayor es la cantidad de glucosa en la sangre, más se une a las proteínas, El porcentaje de
proteína unida a la glucosa es lo que se denomina hemoglobina glicosilada (HbA1). Cuanto mayor es la
cantidad de glucosa en la sangre, más se une a las proteínas
HEMOGLOBINA GLICOSILADA
El método de cromatografía de intercambio iónico se basa en la elusión diferencial de la hemoglobina
glicosilada por el cambio de carga que se produce en la molécula debido a la glicación del grupo amino
terminal de la cadena. Para realizar el procedimiento se utiliza carboximetil celulosa cargada
DETECCIÓN DE PORFIRINAS
La porfiria se refiere a un grupo de enfermedades hereditarias que impiden a su cuerpo producir
correctamente hemo, el pigmento rojo que contiene hierro. Una gran cantidad de hemo está presente
como hemoglobina en los glóbulos rojos y la médula ósea. La hemoglobina transporta oxígeno a todo el
cuerpo. Se necesitan ocho enzimas para crear hemo y, si falta alguna de ellas, el resultado puede ser un
tipo de porfiria. Método de Mauzerall-Granick, Se basa en la técnica de cromatografía de intercambio
iónico, en la cual se utilizan columnas con resinas aniónicas y catiónicas
Bibliografía
Cromatografía de intercambio iónico. 2005. Disponible en
http://tesis.uson.mx/digital/tesis/docs/22193/capitulo3.pdf [Fecha de consulta: 14/10/2018]

Mayolo-Deloisa, K., MartÍnez, L.M., Rito-Palomares, M., TÉCNICAS CROMATOGRÁFICAS Y SU

APLICACIÓN A ESTUDIOS DE CAMBIOS CONFORMACIONALES, ESTABILIDAD Y
REPLEGAMIENTO DE PROTEÍNAS. Revista Mexicana de Ingeniería Química [en linea] 2012, 11 (Sin
mes) : [Fecha de consulta: 14 de octubre de 2018] Disponible
en:<http://www.redalyc.org/articulo.oa?id=62026894006>

Reyna, B. (2014).El intercambio iónico y sus componentes químicos.(tesis profesional). Instituto

Politécnico Nacional. México, D.F. Disponible en:
https://tesis.ipn.mx/bitstream/handle/123456789/17311/25-1-16715.pdf?sequence=1&isAllowed=y. [Fecha
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