INTRODUCCIÓN

A LAS TÉCNICAS
DE ANÁLISIS
INSTRUMENTAL

Sergio Figueroa Arroyo

Alberto Valdés Tabernero
Ana Mª García Palomino
INDICE

INTRODUCCIÓN 3

INSTRUMENTOS PARA EL ANÁLISIS 5

COMPONENTES DE LOS INSTRUMENTOS 7

SELECCIÓN DE UN MÉTODO ANALÍTICO 9

- Definición del problema 9

- Características de funcionamiento de los instrumentos:

parámetros de calidad 10

CALIBRACIÓN DE LOS MÉTODOS INSTRUMENTALES 13

- Cuvas de calibración 13

- Método de la adición 14

- Métodos del patrón interno 16

BIBLIOGRAFÍA 18

2
INTRODUCCIÓN

La química analítica se ocupa de los métodos de determinación de la

composición química de la materia.

Estos métodos pueden agruparse según sean:

‐ Cuantitativos: informan de la identidad de las especies tratadas.

‐ Cualitativos: informan sobre la cantidad relativa de cada uno de los

componentes.

Además de esta clasificación, los métodos analíticos se pueden clasificar en dos

grandes grupos, atendiendo a la complejidad de los instrumentos utilizados. Se

distinguen:

‐ Métodos clásicos: son los más básicos, y han sido utilizados desde el principio

de la química. Permiten separar de la muestra el elemento que nos interesa. Los

más importantes son:

1) Precipitación: reacciones donde uno o más reactivos, al combinarse, generan

un producto insoluble.

2) Extracción: separación de una elemento disuelto en un disolvente, gracias a

otro disolvente en el que la solubilidad del elemento es mayor.

3) Destilación: separación de dos líquidos en una mezcla, tras aplicarles calor,

gracias a que tienen un punto de ebullición diferente.

Tras esta primera separación, el elemento resultante puede ser tratado para

determinarse cualitativa o cualitativamente:

‐ Cualitativamente: Se mezcla con reactivos que nos permiten identificar lo que

buscamos por olor, color, punto ebullición…

3
 ‐ Cuantitativamente: Una vez separado, se puede determinar su masa (por

gravimetría), su volumen (por volumetría),…

‐ Métodos instrumentales: se utilizan aparatos más complejos. Estos se empezaron

a utilizar a partir del siglo XX. Se basan en características físicas y químicas de

la materia:

Espectroscopía de emisión (rayos X, UV,

EMISION DE LA RADIACIÓN visible), fluorescencia, fosforescencia y

luminiscencia.

Espectrofotometría, fotometría (rayos X, UV,

ABSORCIÓN DE LA RADIACIÓN
visible, IR) y resonancia magnética nuclear.

DISPERSIÓN DE LA RADIACIÓN Espectroscopía de Raman.

REFRACCIÓN DE LA RADIACIÓN Refractometría, interferometría.

Métodos de difracción de rayos X y de

DIFRACCIÓN DE LA RADIACIÓN
electrones.

ROTACIÓN DE LA RADIACIÓN Polarimetría, dispersión rotatoria óptica.

POTENCIAL ELÉCTRICO Potenciometría.

CARGA ELÉCTRICA Culombimetría.

CORRIENTE ELÉCTRICA Polarografía, amperometría.

RESISTENCIA ELÉCTRICA Conductimetría.

MASA Gravimetría.

VELOCIDAD DE REACCIÓN Métodos cinéticos.

PROPIEDADES TÉRMICAS Gravimetría y volumetría térmica. Calorimetría.

RADIACTIVIDAD Métodos de activación y de dilución isotópica.

Tabla 1.1

4
Todos estos métodos transforman la información relacionada con las propiedades físicas

y químicas del elemento, en información que nosotros podemos interpretar.

INSTRUMENTOS PARA EL ANÁLISIS

Los aparatos (o instrumentos) usados por estos métodos son muy complejos, y

están formados por diversos componentes. Se tratará más adelante.

Entre el elemento a estudiar y los componentes del instrumento, hay un flujo de

información, al igual que entre los componentes del instrumento.

Esta información está codificada en dominios de datos. Estos dominios pueden

ser eléctricos (cuando la codificación se realiza a través de señales eléctricas), o no

eléctricos (cuando no se requiere ninguna codificación eléctrica al comienzo o

terminación de un proceso)

Los dominios no eléctricos son los más utilizados por los métodos clásicos. Las

propiedades físicas y químicas analizadas por estos instrumentos son la longitud, la

densidad, la intensidad de la luz…

Por ejemplo, una balanza romana, en la que sabemos el peso al equilibrar los dos

brazos, una regla para medir, un matraz para saber el volumen, etc.

Aunque hay casos en los que un método instrumental también codifica su

información en dominios no eléctricos. Son aquellos en los que el comienzo y el fin

pertenecen a dominios no eléctricos, pero entre medias se dan procesos codificados por

dominios eléctricos. Esto es lo que ocurre con las balanzas electrónicas, ya que la masa

no está codificada eléctricamente, y el resultado obtenido en la pantalla, tampoco lo está.

Los dominios eléctricos, como su nombre indica, son aquellos codificados a

través de señales eléctricas, y dependiendo del almacenamiento de la información,

podemos distinguir:

5
‐ Dominios analógicos:

La información se codifica como una magnitud de una cantidad eléctrica

(tensión, intensidad, carga o potencia). Estas cantidades son continuas en amplitud y

tiempo, y se pueden registrar como funciones de ciertas variables (longitud de onda,

temperatura, campo magnético)

En estos dominios, la técnica más utilizada es la comparación de varias señales.

‐ Dominios del tiempo:

La información también se codifica como una magnitud de una cantidad

eléctrica, pero en este caso, la información se almacena como variación de la señal

con respecto al tiempo (en vez de la amplitud).

Lo que interesa es el tiempo que se tarda en hacer algo (período) o las veces que

se hace algo por unidad de tiempo (frecuencia).

‐ Dominios digitales:

La información se codifica en un esquema de dos niveles, pudiendo haber dos

estados en esta codificación: abierto o cerrado.

Estos dos estados son relativos, ya que dependen del límite que se establezca

entre ambos.

Así, cada dato analizado será un bit, que podrá estar abierto o cerrado.

Para mejorar este sistema se usan los números binarios. A cada intervalo de

tiempo se le asigna un 2x, siendo x intervalo. Si el bit está abierto, se multiplica el

intervalo 2x por 1, mientras que si está cerrado, por 0.

La mayoría de la información digital está codificada, transferida, procesada y

descodificada en sistema binario, dada su eficacia.

6
COMPONENTES DE LOS INSTRUMENTOS

Los más importantes son:

Generador de señales: Es de los más importantes, ya que proporcionan al elemento un

estímulo en forma de energía. Esta energía interacciona con el elemento a estudiar y

genera una respuesta.

En la tabla 1.1 se representan varias propiedades físicas y químicas de la materia.

Muchas de ellas necesitan de la energía de los generadores para poder ser estudiadas

(electromagnética, eléctrica, mecánica, nuclear,…), pero hay algunas que generan una

respuesta sin tener que ser tratadas (emisión de radiación, masa, carga eléctrica…)

Detector: es un dispositivo que identifica, registra o indica un cambio en las variables

del entorno (presión, temperatura, radiación…).

Transductor: es un dispositivo que convierte la información de dominios no eléctricos

en dominios eléctricos, y o viceversa.

Sensor: dispositivo que es capaz de diferenciar entre dos especies químicas.

Procesador de señales: dispositivo que recoge la información del transductor y la

adapta al dispositivo de lectura, ya sea amplificándola, filtrándola, etc.

Dispositivo de lectura: junto con el generador de señales, es el más importante.

Transforma las señales procesadas de dominios eléctricos, en señales inteligibles para el

observador.

Generador Detector Procesador Dispositivo

de señales Transductor de señales de lectura
Sensor

7
 COMPONENTES DE LOS INSTRUMENTOS

FUENTE SEÑAL TRANSDUCTOR DOMINIO PROCESADOR

INSTRUMENTO LECTURA
ENERGIA ANALÍTICA DE ENTRADA DE DATOS DE LA SEÑAL

Lámpara de Haz de luz Corriente

Fotómetro Fotocélula Escala de medida Ordenador
Wolframio atenuado eléctrica

Espectrómetro de Radiación UV o Tubo foto- Potencial Amplificador,

Llama Ordenador
emisión atómica visible multiplicador eléctrico monocromador

Fuente de
Corriente de la Corriente
Culombímetro corriente Electrodos Amplificador Ordenador
celda eléctrica
continua
Actividad de Potencial Amplificador,
pH metro Muestra Electrodos de vidrio Ordenador
protones eléctrico digitalizador
Tubos de
Difractómetro de Radiación Imagen
rayos X, Película fotográfica Revelador químico Ordenador
rayos X difractada latente
muestra

Comparador de Señal del Respuesta visual

Luz solar Color Ojo humano Cerebro humano
color nervio óptico al color

Tabla 1.2

8
SELECCIÓN DE UN MÉTODO ANALÍTICO

En este apartado vamos a ver como se realiza la elección de un método analítico

y sus correspondientes herramientas.

DEFINICIÓN DEL PROBLEMA

Necesitamos definir con claridad la naturaleza del problema analítico y para ello

hay que responder las siguientes preguntas:

1. ¿Qué exactitud requiere?

2. ¿De cuanta muestra se dispone?

3. ¿En qué intervalo de concentraciones está el analito?

4. ¿Qué componentes de la muestra interfieren?

5. ¿Cuáles son las propiedades físicas y químicas de la matriz de la muestra?

6. ¿Cuántas muestras hay que analizar?

La respuesta a la primera pregunta nos definirá el tiempo y el esmero que hay

que dedicar. Las dos siguientes determinan lo sensible que debe ser el método y al

intervalo de concentraciones que debe adaptarse. La cuarta nos dice la selectividad que

se requiere, la quinta es importante ya que según el estado del analito (sólido, liquido o

gaseoso ) se aplicara el método más apropiado. Respecto a la sexta pregunta, sí hay que

analizar pocas muestras solemos usar un método largo y que requiera poco o ningún

tratamiento, por el contrario si el número de muestras es elevado invertimos más dinero

y tiempo en la instrumentación.

Con las respuestas a estas preguntas y conociendo las características de los

instrumentos podemos escoger un método frente a otro.

9
CARACTERÍSTICAS DE FUNCIONAMIENTO DE LOS INSTRUMENTOS;

PARÁMETROS DE CALIDAD

A continuación vamos a definir los criterios cuantitativos que se utilizan para

definir si un determinado método instrumental es o no adecuado para resolver un

problema analítico. Estas características se conocen con el nombre de parámetros de

calidad y se expresan en términos numéricos. Estos parámetros permiten reducir la

elección de los instrumentos a tan sólo unos pocos y entonces la selección entre ellos ya

se hace con los criterios cualitativos de funcionamiento que se enumeran a continuación:

1. Velocidad

2. Facilidad y comodidad

3. Habilidad del operador

4. Coste y disponibilidad del equipo

5. Coste por muestra

Precisión

Es el grado de concordancia mutua entre los datos que se han obtenido de una

misma forma. La precisión nos va a indicar la medida del error aleatorio o

indeterminado de un análisis. En la siguiente tabla vemos los parámetros de calidad de

la precisión:

Sesgo

Mide el error sistemático de un método analítico.

Sesgo = μ – x1

Para determinar la exactitud hay que analizar uno o varios materiales de

referencia cuya concentración de analito es conocida. Los resultados de dichos análisis

tendrán tanto errores aleatorios como sistemáticos pero con un número suficiente de

determinaciones, se puede determinar la media (para un nivel de confianza dado). La

10
diferencia entre la media y la concentración del analito indicada en el material de

referencia se puede atribuir al sesgo.

En un método analítico, se intenta identificar las causas del sesgo y su

eliminación mediante el uso de blancos y el calibrado del instrumento.

Sensibilidad

Capacidad de un método de diferenciar pequeñas variaciones en la

concentración del analito. Está limitada por dos factores: la pendiente de la curva de

calibrado y la reproducibilidad o precisión del sistema de medida. Entre dos métodos

que tengan igual precisión, será más sensible aquel cuya curva de calibrado tenga

mayor pendiente.

Otra definición de sensibilidad, es la pendiente de la curva de calibrado, a la

concentración objeto de estudio (suelen ser lineales).

S = mc + S (blanco)

La sensibilidad de calibrado como parámetro de calidad, tiene el inconveniente

de no tener en cuenta la precisión de las medidas individuales. La sensibilidad analítica

(γ = m/Ss), tiene la ventaja de ser relativamente insensible a los factores de

amplificación (ej: al aumentar la ganancia de un instrumento por un factor de cinco, el

valor de m se incrementará en cinco veces. Esto vendrá acompañado de un aumento en

Ss, y por tanto la sensibilidad analítica, se mantendrá prácticamente constante. Es

independiente de las unidades de medida de S. Una desventaja es que depende de la

concentración.

11
Límite de detección

Es la mínima o máxima concentración del analito que se puede detectar para un

nivel de confianza dado. El límite depende de la relación entre la magnitud de la señal

analítica y el valor de las fluctuaciones estadísticas de la señal del blanco. Por tanto, a

no ser que la señal analítica sea mayor que la del blanco, no será posible detectar con

certeza esta señal.

Sm = S(blanco) +ks(blanco)

Experimentalmente, Sm se puede determinar realizando veinte o treinta medidas

del blanco, durante un amplio periodo de tiempo.

Intervalo lineal

Este parámetro va desde la concentración mas pequeña a la que se puede realizar

en medidas cuantitativas hasta la concentración a la que la curva de calibrado se desvía

de la linealidad. Para las medidas cuantitativas se toma como límite inferior la que

corresponde a diez veces la desviación estándar de las medidas repetidas en un blanco.

Para que un método analítico sea útil, debe tener un intervalo lineal de, al menos,

dos órdenes de magnitud.

Selectividad

Indica el grado de ausencia de interferencias con otras especies que contiene la

matriz de la muestra. Lamentablemente ningún método analítico está totalmente libre

de esas interferencias y se suele realizar diversas etapas para minimizar sus efectos.

La selectividad viene definida por los “coeficientes de selectividad”, que pueden

variar desde cero (no hay interferencia) hasta valores bastante superiores a uno. Cuando

el coeficiente es negativo la interferencia causa una reducción en la intensidad de la

señal del analito.

12
 Los coeficientes de selectividad son parámetros de calidad útiles para informar

sobre la selectividad de los métodos analíticos. Desafortunadamente no se usan mucho

excepto para caracterizar el funcionamiento de los electrodos selectivos de iones.

CALIBRACIÓN DE LOS MÉTODOS INSTRUMENTALES.

Todos los métodos instrumentales, excepto el método gravimétrico y el

culombimétrico, necesitan una calibración, proceso en el que se va a relacionar la señal

analítica medida con la concentración del analito.

Los tres métodos más frecuentes son:

- Curvas de calibrado.

- Método de la adición estándar.

- Método del patrón interno.

Curvas de calibrado

También llamadas curvas de patrón externo o curvas analíticas.

Para aplicar este método, se introducen en el instrumento varios patrones con

concentraciones conocidas del analito y registramos la señal instrumental.

Normalmente la señal se corrige con la señal obtenida con el blanco. Dicho

blanco contiene todos los componentes de la muestra original excepto el analito.

Los datos obtenidos se representan en una gráfica en la que tendremos la señal

del instrumento corregida frente a la concentración de analito.

En determinadas ocasiones, tenemos representaciones lineales en un amplio

intervalo de concentraciones (intervalo útil) y contienen menos error que las no lineales.

13
Éstas precisan de un elevado número de datos de calibrado para establecer con mayor

precisión la relación entre la respuesta del instrumento y la concentración.

La ecuación de la curva de calibrado la obtendremos por el método de los

mínimos cuadrados y nos permitirá calcular directamente la concentración de las

muestras.

El éxito del método dependerá de la exactitud que tengan las concentraciones de

los patrones y de lo que se parezca la matriz (conjunto de los diferentes componentes

que constituyen una muestra analítica) de los patrones a la de las muestras que se

analizan.

Método de la adición estándar.

Método muy útil para analizar muestras complejas en las que la probabilidad de

que se produzcan efectos debidos a la matriz es considerable.

Puede aplicarse de diferentes maneras. Una de las más habituales es la adición

de distintos volúmenes de una disolución patrón a varias alícuotas de la muestra del

mismo tamaño. Este proceso se llama adición de muestra. Después, cada disolución se

diluye a un volumen fijo antes de realizar la medida.

Cuando la cantidad de la muestra es limitada, las adiciones estándar pueden

hacerse por adiciones sucesivas de volúmenes del patrón a un único volumen del

problema exactamente medido. Las medidas se van haciendo en la muestra original y

después de cada adición del patrón en la muestra.

La matriz de la muestra será casi idéntica después de cada adición y la única

diferencia será la concentración de analito o la concentración de reactivo, en el caso de

que se haya añadido un exceso de reactivo analítico.

14
 En este método tenemos varias alícuotas Vx de la disolución problema con una

concentración cx que se transfieren a matraces aforados de Vt. A cada una de ellos se

añade un volumen variable (Vs, mL) de una disolución patrón del analito que tiene una

concentración conocida cs. Se añaden los reactivos adecuados y se diluyen hasta un

volumen determinado. Se realizan las medidas y obtenemos una señal S en el

instrumento.

La representación de S en función de Vs es una línea recta de la forma,

S = m · Vs + b

Para determinar m y b utilizamos el método de los mínimos cuadrados y cx la

obtenemos de la siguiente expresión,

cx = b · cs/ m · Vx

La gráfica de los datos también la podemos realizar manualmente y la parte recta

de la misma se extrapola hasta el origen. La diferencia entre el volumen añadido de

patrón en el origen y el valor del volumen en el punto de intersección de la línea recta

con el eje de las x (Vx)0 es el volumen del patrón que equivale a la cantidad de analito

en la muestra.

La intersección con el eje de las x corresponde a la señal cero del instrumento,

por lo que,

S = kVscs/ Vt + kVxcx/ Vt = 0

Despejando tenemos que,

cx = - (Vs)0 cs/ Vx

15
 Método de la adición estándar

1,2

S, absorbancia
0,9

0,6

0,3

0
-10 -5 0 5 10 15 20 25

Vs, mL

Método del patrón interno.

En un análisis, el patrón interno es la sustancia que se añade a todas las

muestras, blancos y patrones de calibrado en una cantidad fija. También puede ser un

componente mayoritario de las muestras y los patrones que está en una concentración lo

suficientemente elevada como para que se pueda considerar que es la misma en todos

los casos.

El calibrado es una representación gráfica del cociente entre la señal del analito

y la señal del patrón frente a la concentración de analito de los patrones. En las muestras,

este cociente lo usaremos para calcular la concentración de analito a partir de la curva

de calibrado.

Si elegimos y usamos adecuadamente un patrón interno, compensaremos

algunos errores aleatorios o sistemáticos. Si las señales del analito y del patrón interno

tienen una respuesta proporcional al error aleatorio instrumental y a las fluctuaciones

del método, la relación entre las señales será independiente de las fluctuaciones. Si

16
ambas señales se modifican de la misma manera por el efecto de la matriz, también

compensaremos en ambas dichos efectos.

Cuando el patrón interno es el componente mayoritario de las muestras y de los

patrones, también compensaremos los errores que se producen en la preparación de la

muestra, disolución y filtrado.

El mayor problema al aplicar el método del patrón interno es encontrar una

sustancia adecuada e incorporarla a las muestras y a los patrones de forma reproducible.

Además deberá tener una señal similar a la del analito en la mayoría de los casos pero

suficientemente diferente como para que ambas señales sean diferenciables por el

instrumento. Nos debemos asegurar la ausencia del patrón interno en la matriz y que la

única procedencia del patrón sea la cantidad añadida.

Un ejemplo muy usado, es el litio como patrón interno en las determinaciones de

sodio o potasio en suero sanguíneo, ya que su comportamiento químico es similar al de

ambos analitos y no aparece de forma natural en la sangre.

El método del patrón interno se usa con frecuencia, para determinar los

elementos traza en metales por espectroscopia de emisión.

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BIBLIOGRAFÍA

‐ “Principios de análisis instrumental” 5ª edición. D. A. Skoog, F. J. Holler, T. A.

Nieman. Editorial: McGraw Hill (2000).

‐ “Introducción al análisis instrumental”. L. Hernández, C. González. Editorial

Ariel Ciencia (2002).

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