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PRÁCTICA N° 04: CRECIMIENTO POBLACIONAL EN LEVADURAS

Saccharomyces cerevisiae
I. INTRODUCCIÓN

Una población es un conjunto de individuos de una misma especie que ocupa un hábitat
determinado en un momento específico, entre los cuales existe un intercambio de información
genética entre los individuos e interacciones entre ellos.
Toda población biótica, microscópica o macroscópica, de bacterias, protozoarios, hongos,
plantas o animales, posee un conjunto de propiedades como la reproducción.
Por lo que existen formas o patrones de Crecimiento como el crecimiento exponencial o en forma
de J o crecimiento sigmoideo o en forma de S.
La levadura Saccharomyces cerevisiae es un microorganismo eucariontes ubicuo, con una alta
adaptabilidad fisiológica, que emplea la respiración aerobia al igual que la fermentación
alcohólica para metabolizar la glucosa como fuente de energía.
Que en condiciones de laboratorio se desarrolla, primero con una fase de adaptación inicial donde
la población aumentará lentamente, etapa conocida como fase lag o fase lenta, y continuará el
crecimiento con el desarrollo de la fase logarítmica o exponencial (Fase log) para concluir con la
fase estable o de equilibrio, donde se da la propiedad de la población conocida como
CAPACIDAD DE CARGA, PORTE, SOPORTE O SUSTENTO (k).

En la presente práctica, se tiene como objetivo que el estudiante analizará el desarrollo de una
levadura, además de observar el incremento de los individuos en el cultivo y aplicar la curva de
crecimiento en la población de levaduras

II. MATERIALES Y METODOLOGIA

A. Materiales:
Por la cátedra Por el Estudiante
 Microscopio óptico  Levadura (100 g)
 Solución de azul de metileno  Azúcar rubia (50 g)
 Agua destilada  Laminas porta objeto
 Baño María a 37°C  Laminillas cubreobjeto
 Cocina eléctrica
 Hematocitómetro
 Pipeta Pasteur
 Tubos de vidrio
 Pipeta de ensayo
 Matraz
 Bagueta

B. Metodología:
1. Medio de Cultivo:
 Prepare dos matraces erlenmeyer de 250 ml con 100 ml de medio azúcar rubia
 Preparación del medio de azúcar rubia (colocar 200 g de azúcar rubia en 1000 ml de agua
destilada)
2. Suspensión de levadura:
 Pesar 0.5 g de levadura seca y adicionar 10 mL de agua destilada en un tubo de ensayo,
mezclar hasta obtener una suspensión uniforme
 Sacar 1ml del cultivo preparado y adicionar 10 mL de agua destilada en un tubo de
ensayo, mezclar hasta obtener una suspensión uniforme.
 Realizar conteo en cámara de Neubauer, de cada una de las suspensiones.
 Anotar la cuenta de levaduras y calcular el número de células por mL.
3. Incubación:
 Transfiera 10 mL de suspensión de levaduras cada una en un matraz y colocarlos a una
incubadora a 37°C agitar cada 10 minutos.
 Realice observaciones a los 30 minutos, 60 minutos, 90 minutos, tomando 1 mL de
muestra
4. Conteo de Levaduras:
 A la muestra de 1 mL con levaduras adicionar 0.1 ml de azul de metileno (2 gotas) y
homogenizar
 De la solución homogénea. Colocar una alícuota en el hematocitómetro realice el
conteo al microscopio. (Anexo 01)

III. RESULTADOS. Elaboración de los cuadros y figuras que ilustren el experimento desarrollado.

Figura N° 01: Ilustrar el experimento de crecimiento de Levaduras

Figura N° 02: Ilustrar en método de conteo de levaduras

Cuadro N° 01: Curva de Crecimiento de Levaduras

IV. DISCUSIÓN: Desarrollar el siguiente cuestionario:

1. ¿Cuáles son las propiedades que presenta una población ecológica?


2. ¿Qué entiende por crecimiento poblacional microbiano?
3. ¿Cuántas y cuáles son las formas de reproducción que tiene Saccharomyces cerevisiae?
4. ¿Cuáles de las fases de la curva de crecimiento observo en práctica?
5. ¿En cuál de los experimentos se creció más rápido la levadura?

V. CONCLUSIONES

VI. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS


ANEXO

CONTEO EN CÁMARA DE NEUBAUER PARA LEVADURAS

Para utilizar la cámara de Neubauer realice el siguiente procedimiento:

 Limpie la cámara y la laminilla de cuarzo suavemente con alcohol


 Coloque la laminilla sobre la cámara en forma vertical
 Proceda a llenar la cámara, es recomendable llenarla con una micropipeta o con una jeringa ya
que la cámara se llena con una gota.
 Para el conteo, llevar la cámara al microscopio y enfoque en panorámico y pasar a mediano y
luego a mayor aumento donde se realizará el conteo, donde se visualiza cada uno de los campos
y con la ayuda del carro del microscopio se recomienda contar cuatro esquinas y el cuadro del
centro. En conclusión:

Células/mL = Total de células contadas * 50 000

 Para determinar el número de células en la muestra original hay que multiplicar por la dilución