UNIVERSIDAD NACIONAL AMAZÓNICA DE MADRE DE DIOS

FACULTAD DE INGENIERÍA
ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA

“DETERMINACION DE LA DL50, DEL HONGO ENTOMOPATOGENO

(Beauveria Bassiana) CONTRA LA GARRAPATOSIS PROVOCADA POR
(Boophilus Microplus) EN GANADO BOVINO.”

Proyecto de tesis presentado por:

AROCUTIPA COAQUIRA, Sansón

Para optar el título profesional de:

MEDICO VETERINARIO Y ZOOTECNISTA

Asesor:

Med. Dr. Sc. GARCÍA TORO, Miguel

Co-Asesor:

Ing. LLERENA SALCEDO, julio

Puerto Maldonado, 2018

PERÚ.
 UNIVERSIDAD NACIONAL AMAZÓNICA DE MADRE DE DIOS

FACULTAD DE INGENIERÍA
ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA

“DETERMINACION DE LA DL50, DEL HONGO ENTOMOPATOGENO

(Beauveria Bassiana) CONTRA LA GARRAPATOSIS PROVOCADA POR
(Boophilus Microplus) EN GANADO BOVINO.”

Proyecto de tesis presentado por:

AROCUTIPA COAQUIRA, Sansón

Para optar el título profesional de:

MEDICO VETERINARIO Y ZOOTECNISTA

Asesor:

Med. Dr. Sc. GARCÍA TORO, Miguel

Co-Asesor:

Ing. LLERENA SALCEDO, julio

Puerto Maldonado, 2018

PERÚ.
 ÍNDICE

1. GENERALIDADES ...................................................................................... 1

1.1. TITULO ................................................................................................. 1

1.2. TESISTA ............................................................................................... 1

1.3. CARRERA PROFESIONAL ................................................................. 1

1.4. AREA DE INVESTIGACION ................................................................. 1

1.5. ASESORES: ......................................................................................... 1

1.6. FECHA DE INICIO Y FECHA PROBABLE DE TÉRMINO ................... 1

1.7. RESUMEN ............................................................................................ 2

2. PLANTEAMIENTO DE PROBLEMA........................................................... 3

2.1. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA .................................................. 3

2.1.1. Descripción del Problema:........................................................... 3
2.1.2. Formulación del Problema:.......................................................... 4
2.1.3. Delimitación de la Investigación ................................................. 4

2.2. JUSTIFICACION E IMPORTANCIA ..................................................... 5

2.3. OBJETIVOS .......................................................................................... 6

2.3.1. Generales: ..................................................................................... 6
2.3.2. Específicos:................................................................................... 6

3. MARCO TEORICO ...................................................................................... 7

3.1. ANTECEDENTES DE ESTUDIOS REALIZADOS................................ 7

3.2. MARCO TEÓRICO ............................................................................. 10

3.2.1. Generalidades de la garrapata Boophilus microplus: ............. 10
a. Clasificación taxonómica: ................................................................ 10
b. Ciclo biológico: ................................................................................. 11
c. Morfología: ......................................................................................... 14
3.2.2. Generalidades del hongo entomopatogeno Beauveria
Bassiana: .................................................................................................. 16

3.3. CONCEPTOS FUNDAMENTALES .................................................... 20

4. HIPOTESIS, VARIABLES, INDICADORES Y DEFINICIONES
OPERACIONALES .......................................................................................... 21

4.1. HIPOTESIS ......................................................................................... 21

4.1.1. General: ....................................................................................... 21
4.1.2. Específico: .................................................................................. 21

4.2. SISTEMA DE VARIABLES E INDICADORES ................................... 22

5. MATERIALES Y METODOS ..................................................................... 26

5.1. MATERIALES, EQUIPOS Y HERRAMIENTAS ................................. 26

5.1.1. Materiales y equipos de Laboratorio: ....................................... 26
5.1.2. Materiales e indumentaria de Campo: ...................................... 26
5.1.3. Materiales de Escritorio: ............................................................ 26

5.2. METODOLOGIA ................................................................................. 26

6. ANALISIS ESTADISTICO ......................................................................... 30

6.1. POBLACION ....................................................................................... 30

6.2. MUESTRA .......................................................................................... 30

6.3. TECNICA DE ANALISIS DE DATOS ................................................. 30

7. ASPECTOS ADMINISTRATIVOS Y PRESUPUESTALES ....................... 31

7.1. POTENCIAL HUMANO ...................................................................... 31

7.2. RECURSOS MATERIALES ................................................................ 31

7.2.1. Materiales de Laboratorio: ......................................................... 31
7.2.2. Materiales de Campo: ................................................................. 32
7.2.3. Materiales de escritorio: ............................................................ 33

7.3. RECURSOS FINANCIEROS .............................................................. 33

7.4. COSTOS ............................................................................................. 33

7.5. CRONOGRAMA DE ACCIONES ....................................................... 35

8. BIBLIOGRAFIA CONSULTADA ............................................................... 37

 1

CAPÌTULO I

1. GENERALIDADES
1.1. TITULO

“DETERMINACION DE LA DL50, DEL HONGO ENTOMOPATOGENO

(Beauveria Bassiana) CONTRA LA GARRAPATOSIS PROVOCADA
POR (Boophilus Microplus) EN GANADO BOVINO.”

1.2. TESISTA
Estudiante: Sanson Arocutipa Coaquira
1.3. CARRERA PROFESIONAL
Medicina Veterinaria y Zootecnia.
1.4. AREA DE INVESTIGACION
Salud Animal
1.5. ASESORES:

Asesor:

Med. Dr. Sc. GARCÍA TORO, Miguel

Co-Asesor:

Ing. LLERENA SALCEDO, julio

1.6. FECHA DE INICIO Y FECHA PROBABLE DE TÉRMINO

Inicio : 01 de Enero.
Final : 29 de febrero 2019.
 2

1.7. RESUMEN
El proyecto titulado “DETERMINACION DE LA DL50, DEL HONGO
ENTOMOPATOGENO (Beauveria Bassiana) CONTRA LA GARRAPATOSIS
PROVOCADA POR (Boophilus Microplus) EN GANADO BOVINO.”, tiene
como objetivo de hallar las DL50 patógena de Beauveria bassiana, contra la
garrapatosis en nuestra región. En cuyo lugar, el clima es favorable para el
desarrollo de la garrapata Boophilus Microplus. Dado que causa problemas en
las ganaderías; por pérdida de peso, anemia, baja producción, etc. Los
ganaderos han optado por el uso de fármacos garrapaticidas, pero su uso
excesivo tiene efectos residuales en la leche y causa resistencia de la plaga. El
uso de hongos entomopatógenos es una de las nuevas alternativas para el
control de garrapatas comprobado mediante diversos estudios actuando
patogénicamente y sin crear resistencia sobre ellas. Los micos insecticidas son
productos biológicos que se utilizan en forma comercial para el control de
plagas y con un alto potencial como controladores de insectos plagas en
cultivos agrícolas, forestales así como de insectos vectores de importancia para
la salud pública. Para llevar a cabo el desarrollo de la presente investigación se
realizará con 40 bovinos del Distrito las Piedras, con diferentes niveles de
infestación, con 4 aplicaciones de concentraciones diferentes con intervalos de
4 días (2 semanas). Esperamos resultados positivas a dosis mínimas.
 3

CAPITULO II

2. PLANTEAMIENTO DE PROBLEMA

2.1. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

2.1.1. Descripción del Problema:

Las garrapatas son el principal problema veterinario de la ganadería tropical

(Fernández, 2006), causando déficits importantes en la productividad
ganadera, debido a la morbilidad y la mortalidad que provocan en los animales,
alteraciones reproductivas y altos costos, ocasionados por su control, entre
otros (Nari, 2003).

Los métodos de control químico traen consigo peligros para la salud de las
personas, de los animales y del ambiente, lo que abre paso a métodos
alternativos de control de estos hematófagos. Beauveria bassiana es un
controlador biológico efectivo de muchas plagas, entre ellas las garrapatas y no
tiene los problemas asociados con el uso de productos químicos, como por
ejemplo el fipronil, ivermectina, cipermetrina, etc. El estudio evaluó la
susceptibilidad de garrapatas al hongo entomopatógeno B. bassiana en
condiciones de laboratorio y de campo. Las pruebas de laboratorio se llevaron
a cabo con larvas obtenidas de la oviposición de parásitos adultos recolectados
de animales infestados (Fernández, 2006)

Una de las alternativas de control biológico que se ha explorado en los últimos

años con resultados promisorios son los hongos entomopatógenos como
Metarhizium anisopliae, Isaria fumosorosea y Beauveria bassiana, los cuales
han demostrado ser patogénicos para varias especies de garrapatas (Zhioua et
al. 1997, Guedes-Frazzon et al. 2000).
 4

Dentro de estos, Metarhizium anisopliae y Beauveria Bassiana son los hongos

que han mostrado mayor patogenicidad contra Rhipicephalus (Boophilus)
Microplus bajo condiciones de laboratorio y de campo (Aguilar, 2010).

Debido a que en nuestra Región de Madre de Dios no existen estudios en

relación al control biológico de las garrapatas, y tampoco se realizaron pruebas
en la aplicación del hongo en animales a nivel nacional de esta manera, nace la
necesidad de validar los resultados obtenidos por otros investigadores, y
comprobar que efectivamente este método de control biológico es eficaz como
lo mencionan algunas investigaciones.

2.1.2. Formulación del Problema:

¿Cuál será la DL50 del hongo entomopatógeno Beauveria Bassiana en el

tratamiento de la garrapatosis de bovinos de trópico en campo?

2.1.3. Delimitación de la Investigación

El proyecto se llevara a cabo en 4 fundos:

Fundo Sol Naciente : Sr. Nicolás RUIZ VALDIVIA.

Fundo Alex : Sr. Efraín LIZARASO ROMERO
Fundo Otorongo : Sr. José Martin PEREZ ARAGON.
Fundo Buena Fortuna : Sr. Emilio MERCADO ROQUE.

Cada uno ubicado en el km 5.5, 14, 15, 21, respectivamente, Carretera

Interoceánica Puerto Maldonado – Planchón, del Distrito las Piedras de la
Provincia de Tambopata, Departamento de Madre de Dios.

Se seleccionaran 10 bovinos en cada fundo (los que se consideren que tengan

mayor carga parasitaria), de cualquier edad, sexo.
 5

2.2. JUSTIFICACION E IMPORTANCIA

Las garrapatas son ectoparásitos de hábitos hematófagos para la mayoría de

los vertebrados terrestres y constituyen uno de los parásitos de mayor
importancia económica para las explotaciones bovinas, en virtud de sus efectos
de actividad patógena, por acciones directas como: acción traumática, tóxica, e
infecciosa; y acciones indirectas como: disminución en la producción de carne
o leche, daño de pieles; favoreciendo la aparición de miasis, debilitamiento de
los animales, retardo en el crecimiento en los jóvenes, transmisión de agentes
infecciosos como babesiosis y anaplasmosis (Ruiz M. Nelson A. y Blanco N.
Rodrigo. 2009) (Linares, 2010).

Una garrapata adulta ingurgitada provoca la pérdida, aproximadamente, de 1g

diario de peso vivo en el animal (Jonsson et al. 2006). A partir de 20 garrapatas
por animal el daño empieza a tener efectos económicos por merma del peso o
de la producción de leche, efecto negativo sobre la fertilidad, debilitamiento que
favorece otras enfermedades (Junquera, 2012). Puede llegar a ingerir de 2 a
3mL de sangre, durante toda su vida parasitaria (Betancourt &
Rodríguez, 2003). Causando así la pérdida de peso de un bovino parasitado
del género Rhipicephalus se calcula en 0.26Kg garrapata por año Rodriguez –
Vivas 2005. Las pérdidas económicas mundiales por garrapatas fueron
estimadas en US$7 billones y de esos, un billón de dólares corresponde a
Latinoamérica (Castro et al. 2010).

El control de la Boophilus microplus, se ha convertido en un dilema los últimos

años ya que se ha creado resistencia en la plaga, mediante el uso excesivo e
inadecuado de productos químicos. El control tradicional de garrapatas
mediante compuestos químicos, además de ser costosa, conlleva riesgos de
contaminación ambiental, que genera residuos en los productos de origen
animal (Salada, 2005). Muchos productores, frente al problema de disminución
de eficiencia, cambian el producto sin criterio técnico, aumentan la dosis y
disminuyen el intervalo entre baños, terminando con una frecuencia semanal,
por último, recurren a un profesional veterinario, cuando la resistencia ya está
instalada y sea más difícil su manejo (Maribel Bravo et al. 2014).
 6

Si bien es cierto, el método rutinario para controlar las garrapatas, es el

tratamiento del ganado vacuno con productos químicos. Sin embargo, este
método de lucha presenta numerosas desventajas en la actualidad, entre las
cuales está la creciente aparición de poblaciones de garrapatas resistentes a
efecto toxico de las sustancias químicas.

Al final del proyecto se podrá comprobar la eficacia mortal del hongo

entomopatogeno Beauveria Bassiana, de esta manera se brindaría a la
población de ganaderos de nuestra región, una alternativa orgánica, efectiva y
amigable con el medio ambiente para el control de garrapatas. Este método de
control representa ciertas ventajas como: especificidad sobre las plagas y
enfermedades, bajo riesgo para el ser humano, animales benéficos y el
ambiente, bajo costo gracias a su potencial de permanencia por largos
periodos de tiempo en los cultivos al tiempo de permanencia ya que en los
cultivos es mayor si se compara con los productos químicos (Arenas, 2009).

2.3. OBJETIVOS
2.3.1. Generales:

Determinar la DL50, en campo, del hongo entomopatógenos Beauveria

bassiana, contra la garrapata Rhipicephalus Boophilus Microplus, en Bovinos
de trópico.

2.3.2. Específicos:

 Evaluar la efectividad del hongo entomopatógeno Beauveria bassiana

sobre las garrapatas Boophilus microplus.
 Evaluar la viabilidad de las conidias, por medio del crecimiento radial del
hongo entomopatógeno Beauveria bassiana entorno de las garrapatas
recolectadas posterior a la aplicación del tratamiento.
 Determinar el porcentaje disminuido de la población de garrapata inter-
aplicación.
 7

CAPITULO III

3. MARCO TEORICO
3.1. ANTECEDENTES DE ESTUDIOS REALIZADOS

Fernández, Jaime (2006) cuando realizo la “Evaluación de la eficiencia del

control de garrapatas (Boophilus microplus) con tres frecuencias de
aplicación de BAZAM® (Beauveria bassiana)”, en Honduras, evaluó la
susceptibilidad de garrapatas al hongo entomopatógeno B. bassiana en
condiciones de laboratorio y de campo (tratamiento biológico Vs Químico). Se
realizaron pruebas de campo en toretes y vaquillas infestados de garrapatas
con tres frecuencias de aplicación de B. bassiana. Dicha investigación al final
del ciclo de aplicaciones las poblaciones de garrapatas en los cuatro
tratamientos no presentaron diferencia significativa (P > 0.05). Hubo 73% de
control en relación a la población inicial con los tratamientos de frecuencia baja
(1 vez cada 2 semanas) y media (1 vez cada semana), 95% en el tratamiento
de frecuencia alta (2 veces cada semana) y 89% en el control químico.

PEREZ, Juan (2007). En su tesis de “El efecto de diferentes medios

biológicos en el control de garrapatas de bovinos”, se encontró que; a
partir de los resultados a nivel de laboratorio se hicieron ensayos en
condiciones de campo y se evaluó el efecto de Beauveria bassiana y
Verticillium lecanii en el comportamiento de las garrapatas en vacas en
pastoreo. Al evaluar los intervalos de 15 y 30 días para la realización de los
baños con los medios biológicos a los animales en pastoreo se pudo apreciar
que para aquellos cuya frecuencia era de 15 días se manifiesta una
disminución lineal de la cantidad de garrapatas promedios por cada animal.
Siendo los mejores resultados para Beauveria bassiana con una reducción del
69,14% con respecto a la carga inicial de garrapatas. Sin embargo, en los
intervalos de 30 días la disminución de la carga parasitaria no fue apreciable en
 8

los animales, Beauveria bassiana mostró una discreta disminución. Una de las
variables evaluadas fue el tiempo promedio de mortalidad (en días) de las
garrapatas, causadas por Beauveria bassiana y Verticillium lecanii,
encontrándose mortalidad tanto de los estadios inmaduros como de las
garrapatas adultas, de 8 y 9,2 días respectivamente para cada uno de los
medios, sin diferencias significativas. Las garrapatas muertas recolectadas de
los animales fueron trasladadas al laboratorio y fueron colocadas en cámara
húmeda, pudiéndose detectar en las mismas, la presencia de hifas de ambos
hongos. Asimismo se recolectaron adultos vivos de ambos tratamientos,
registrándose la cantidad de postura y su porcentaje de eclosión para
determinar el efecto de los hongos sobre sus progenies. En todos los casos se
observó una disminución significativa, tanto en el número de posturas como en
la cantidad de huevos por posturas.

Fernandez, Manuel; Berlanga, Angélica; Cruz, Carlos; Hernández, Víctor

(2010). En su investigación en laboratorio la “Evaluación de cepas de
Beauveria bassiana y Metarhizium anisopliae sobre la inhibición de
oviposición, eclosión y potencial reproductivo en una cepa triple
resistente de garrapata Rhipicephalus (Boophilus) microplus (Canestrini)
(Acari: Ixodidae)”, en Mexico. Se evaluaron los efectos de cuatro cepas de
Beauveria bassiana (Balsamo) Vuillemin, denominadas Bb-M13J15, Bb-
M14J18, Bb-M21J7, Bb-M5J5, y de nueve de Metarhizium anisopliae (Metsch.)
Sorokin, denominadas Ma-M12J15, Ma-M6J19, Ma-M5J15, Ma-M18J18, Ma-
M14J9, Ma-M1J15, Ma-M14J13, Ma-M4J9 y Ma-M5J18. Los resultados
obtenidos en el ensayo muestran que las cepas Ma-M14J9, Ma-M26J1, Ma-
M12J15, Ma-M1J15 de M. anisopliae y BbM5J5 de B. Bassiana tienen acción
patogénica para hembras repletas de la cepa de R. (B.) microplus triple
resistente, alcanzando un control sobre el potencial reproductivo de 90 % en
concentraciones menores a 37 x 106 de conidios/ml.

Bendeck, Noelia (2012). En su proyecto especial de graduación,

“Evaluación de Beauveria bassiana y Metarhizium anisopliae para el
control de Boophilus microplus en vacas del hato lechero de Zamorano”,
en honduras. Evaluó la efectividad de Beauveria bassiana sobre cuatro
 9

distintos estadios de Boophilus microplus y Metarhizium anisopliae; mediante la

implementación de la fórmula garrapata por día para determinar la dinámica
poblacional existente por tratamiento. Las pruebas se realizaron en vacas de
ordeño con el nivel crítico de infesta y con dos frecuencias de aplicación para
los tratamientos biológicos con Beauveria bassiana y Metarhizium anisopliae y
un tratamiento químico. La frecuencia de aplicación de Beauveria bassiana fue
de una vez por semana, una frecuencia de aplicación de una vez cada dos
semanas. La cantidad de garrapatas/día de metaninfa de Boophilus microplus
en los tratamientos de Beauveria bassiana y Metarhizium anisoplae fueron más
altas posiblemente por las frecuentes re infestaciones a las que las vacas
pudieron estar expuestas al ser trasladadas de un potrero a otro. Si se
establece una comparación entre los tratamientos de Beauveria bassiana se
observa una mejor efectividad en el tratamiento de Beauveria bassiana con
frecuencia de aplicación de cada dos semanas que el de una semana, lo que
nos demuestra que no hay una influencia significativa en la reducción de la
población de gónadro de acuerdo a la cantidad de aplicaciones, posiblemente
debido a que las vacas fueron expuestas a reinfestaciones naturales por el
traslado de un potrero a otro.

Tanto a nivel internacional y nacional los hongos son usados como mico
insecticidas. El entomopatógeno Beauveria bassiana está dentro de este grupo,
productos biológicos que son integrados como estrategia de manejo de plagas
debido a que son seguros para protección ambiental, por lo cual están siendo
usados en la agricultura extensiva, invernaderos, jardines, etc. Las principales
diferencias entre los mico insecticidas y los insecticidas químicos es que los
primeros están formulados con organismos vivos, por lo que deben extremarse
las precauciones en su producción, formulación y almacenaje, además como
agentes de control biológico su efecto no es inmediato ya que requieren de
condiciones ambientales favorables, como es la alta humedad para iniciar el
proceso infectivo y expresar su efectividad biológica en campo.

La aplicación del hongo sobre los animales (usados para el control de

ectoparásitos como las garrapatas), se puede decir que aún no se ha realizado
en nuestro país, por lo que no se encuentran información relevante.
 10

3.2. MARCO TEÓRICO

3.2.1. Generalidades de la garrapata Boophilus microplus:

a. Clasificación taxonómica:

Las garrapatas son ácaros artrópodos, comprendidas en dos familias: Ixodidae

o garrapatas duras y Argasidae o garrapatas blandas (Barker & Murrell, 2004).
Debido a su gran capacidad de adaptación y propagación las garrapatas del
género Rhipicephalus se extienden en diversas áreas geográficas de todo el
mundo. Organismos muy adaptados a la vida parasitaria, ya que son
chupadores de sangre que pueden llegar a pasar varios meses sin alimentarse.
Poseen un exoesqueleto duro que recubre su cuerpo segmentado y todas en
estado adulto poseen patas en número par (Rodríguez, 2009). De las cinco
especies que integran a nivel mundial el género Rhipicephalus, Rhipicephalus
Microplus presenta mayor importancia por su amplia distribución en gran parte
de America, Africa, Asia y Australia (Rodriguez-Vivaz et al, 2014).

Son ácaros cosmopolitas y ectoparásitos temporales obligados de reptiles,

anfibios, aves, mamíferos, incluyendo animales domésticos y silvestres. Por su
tamaño resultan observables a simple vista.

Las garrapatas según Smith 2007 y Rodríguez 2009 pertenecen a: (Rodriguez-

Vivas et al, 2006)

Phylum : Arthropoda
Subphylum : Chelicerata
Clase : Arachnida
Subclase : Acari
Orden : Parasitiformes Acarina
Suborden : Ixodidos
Superfamilia : Ixodoidea
Familia : Ixodidae.
Géneros : Riphicephalus
 11

Las especies conocidas no alcanzan el millar y se dividen en dos familias:

Ixodidae (garrapatas duras) o verdaderas, poseen escudo corto en la hembra y
largo en el macho, el capítulo está implantado en la parte anterior del cuerpo de
todas las especies, y Argasidae (garrapatas blandas) o falsas garrapatas, las
cuales no poseen escudo. El capítulo está localizado en la parte inferior del
cuerpo de las ninfas y los adultos, mientras que en las larvas se encuentra en
la parte anterior [ (Quiroz R.H., 1999) y (FAO., 1987) ].

b. Ciclo biológico:

El ciclo biológico en la garrapata Boophilus microplus ocurre entre el

hospedero, la vegetación y el suelo de un sitio específico. Las garrapatas,
durante su vida, pasan por cuatro etapas: huevos (incuba de 17 a 21 días),
larva (7 a 10 días), ninfa 5 a 6 dias) y adulto (1 a 3 dias). [ (Fernández, 2006) y
(Pérez, 2007) ].

La duración del ciclo varía dependiendo de las condiciones climáticas y de la

oportunidad que tengan las larvas de llegar a sus hospedadores. En cambio la
parte del ciclo que se cumple sobre el animal (ciclo parasítico) no varía, ya que
las condiciones ambientales las crea la humedad y el calor del cuerpo del
bovino. Esta etapa se lleva a cabo entre 23 y 24 días, tiempo calculado desde
el momento en que la larva alcanza al hospedador hasta que se transforma en
la hembra ovígera o teleógina (repleta de sangre y huevos) que abandona al
hospedador para caer al suelo (Betancur, 2006).

El ciclo biológico puede considerarse en dos fases: la parasitaria o parasítica,

durante la cual la garrapata se nutre del animal, y la fase no parasítica en la
que la garrapata pasa en el suelo. Este período de vida libre, según (Furlong et
al., 2003), comprende cuatro etapas: la preoviposición, la oviposición, la
incubación y el período de sobrevivencia de las larvas en el pastizal.

Cuentan con un aparato bucal especial que les permite perforar la piel del
hospedador y succionar sangre. Pero no todos los estadios del ciclo biológico
 12

de la garrapata se alimentan, de hecho existen momentos dentro del ciclo que

se realizan en el medio ambiente, tales como: las mudas de algunas especies
de garrapatas y la deposición de huevos. Esto no significa que sean parásitos
de ciclo indirecto, ya que cuentan sólo con un hospedador para poder cumplir
con su ciclo biológico (Rodriguez et al, 1987).

La evolución de esta especie de garrapata se caracteriza por ser de un solo

huésped, es decir, que todas sus fases evolutivas se desarrollan sobre la
superficie corporal de los bovinos (Betancur, 2006).

De una fase a otra se lleva a cabo el proceso de ecdisis o desprendimiento del

exoesqueleto; la fase parasita se inicia en el suelo (larva), luego trepa a las
plantas más cercanas y más tarde al hospedero animal; tanto en los animales
como en el suelo, la garrapata está sujeta a cambios ambientales. El adulto se
deja caer del hospedero una vez que realiza la copula (Fernández, 2006).

El tiempo requerido para la puesta de huevos está influenciado por la

temperatura. Cuando ésta oscila entre los 24 y los 36 grados centígrados el
tiempo que necesitan las hembras para poner sus huevos está entre los 14 y
los 21 días. Cuando la temperatura es de 20 grados el tiempo requerido es más
largo, y cuando es de 15 grados, el tiempo de postura se extiende aún más
(Betancur, 2006).

Ovoposición:

La kenogína (hembra fecundada y repleta) desova y aglutina de una vez entre

2 500 a 3 500 huevos en el suelo, gracias a la secreción protectora de una
glándula que ella posee aproximadamente entre el tercer y quinto día de
haberse desprendido del hospedero; entre las tres y cuatro semanas
posteriores (Furlong et al., 2003). Los huevos son pequeños y esféricos, de
color marrón amarillento o marrón-oscuro. Las hembras mueren después de
poner todos sus huevos. El desarrollo siguiente está influenciado por las
condiciones de temperatura; el tiempo frío causa prolongación de la evolución,
 13

especialmente para la eclosión de huevos y el período de pre-oviposición de la

hembra alimentada (Ortiz & Franco, 2005).

Incubación:

El período de incubación de los huevos puede variar entre 21 y 27 días en

verano hasta 80 días en invierno, tiempos luego de los cuales se originan
larvas de tres pares de patas, cuya supervivencia cambia dependiendo de
condiciones medioambientales como altitud, humedad y temperatura, pueden
estar por varios meses en el pasto sin alimentarse [ (Ortiz & Franco, 2005) y
(Azebedo, 2005)].

Larvas:

En la primera etapa (4-5 días de nacida) no tienen toda la vitalidad ya que sus
órganos de fijación y piezas bucales no están desarrollados. Una vez que
maduran y ocurre la fase de encuentro. Con el fin de alimentarse las larvas
utilizan los pastos para subirse al bovino, trepan al bovino y comienzan su vida
parasitaria. Cuando las larvas de garrapata infestan al animal huésped,
generalmente, pican de inmediato y comienzan a alimentarse. Sin embargo, los
dos primeros días después de la infestación, las larvas se alimentan de manera
intermitente y con frecuencia se desprenden y se mueven de un lugar a otro en
el animal; después de ingerir una buena cantidad de sangre y fluidos de los
tejidos, aproximadamente a los cuatro días se produce la primera muda y se
transforman en meta-larva, de este estadio nace la ninfa (Parra et al, 1999).

Ninfas y Adulto:

Las ninfas poseen cuatro pares de patas, en el noveno día de vida parasitaria
realizan la muda y se convierten en meta-ninfa, estas son también
hematófagas, y deben alimentarse de sangre para poder seguir
desarrollándose (Ortiz & Franco, 2005). En el día 14 ocurre la diferenciación
sexual, dando lugar a los meandros; los cuales se transforman a las 24 h en
gonandros o machos aptos para la fecundación. La transformación en adulta de
 14

la hembra ocurre dos días después del macho y se le denomina neogina, la

cual a las 24 h pasa a partenogina, apta para ser fecundada, si ello se produce
se transforma en teleogina aproximadamente entre el día 18 y 21. Con el
desprendimiento de la teleogina termina la fase parasitaria, convertida en
kenogina, luego de la puesta total de los huevos muere (Espaine y Lines, 1983;
Parra et al., 1999). [ (Espaine C. & R. Linares, 1983) y (Parra et al, 1999)].

En el estadio adulto hay dimorfismo sexual, lo que quiere decir que la hembra
es mucho más grande que el macho (Ortiz & Franco, 2005).

Copula:

Las garrapatas del género Rhipicephalus copulan en la superficie corporal de

sus huéspedes. Una vez las hembras se han alimentado de sangre y terminan
su repleción, desprenden su aparato chupador, se dejan caer al suelo y allí
buscan las condiciones ecológicas óptimas para realizar la postura de huevos;
este proceso se inicia casi siempre en las noches y termina con la caída de las
hembras al suelo, poco después de que aparece la luz del nuevo día. Luego de
caer, las hembras se desplazan entre 20 y 120 cm. Para depositar sus huevos,
acción que realizan, por lo general, en lugares protegidos como debajo de
piedras, suelos de tierra, entre maderos o grietas (Betancur, 2006).

c. Morfología:

La garrapata Rhipicephalus (Boophilus) microplus es un artrópodo conocido

como garrapata dura, morfológicamente de cuerpo generalmente ovalado,
aplastado y con una capa o placa dura quitinizada (escutum o escudo) que
cubre la parte anterior de la región dorsal de la hembra y casi toda la superficie
dorsal del macho, siendo así también la región macroscópica externa visible
representada por el capitulum (gnatosoma) y las patas (Nuñez et al., 1982).
 15

El capitulum está localizado en la parte terminal anterior del cuerpo, es corto y

ancho con márgenes laterales redondeados. Está formado por la “basis
capituli” que articula con el cuerpo, los quelíceros en dorsal (para cortar y
perforar piel), el hipostoma dentado, o probóscide armados con dientes en
hilera, en ventral (para fijación y succión) y los palpos segmentados
(sensoriales o táctiles) (Hagen y Kopp, 1999; Drugueri, 2004).

Los palpos actúan como soporte para adherirse al hospedador y estos están
conformados por cuatro segmentos; en el último se encuentra el órgano palpal
(grupo de 9 setas con poro terminal que funcionan como quimiorreceptores) por
medio del cual la garrapata detecta en la piel las zonas más delgadas y con
mayor irrigación sanguínea antes de comenzar a alimentarse (Núñez et al.,
1982; Parra et al., 1999).

Morfológicamente, las especies de la familia Ixodidae se caracteriza por poseer

capitulo siempre en posición terminal (visible dorsalmente) y escudo dorsal en
todos los estados biológicos. El dimorfismo sexual es acentuado (escudo
pequeño y corto en hembras, larvas y ninfas, no sobrepasando la región media
del cuerpo; mientras que en machos el escudo es largo y se extiende hasta la
margen posterior). En las hembras se observan áreas porosas; hipostoma
denticulado en la mayoría de los géneros, en muy pocos casos con
crenulaciones. El último artículo o segmento del palpo de la pata IV está en
posición ventral, situado en una cavidad en la extremidad distal del artículo III.
Las placas espiriculares están situadas posteriormente a la pata IV (García,
2011).

La garrapata en su estado de larva posee tres partes de patas y en su estado

de ninfa o adulto tiene cuatro pares. Las patas se articulan con el cuerpo
mediante una estructura muy resistente denominada coxa. Cada pata está
dividida en seis segmentos, coxa, trocánter, fémur, tibia, protarso y tarso,
terminando este último en un par garras y una almohadilla (Parra et al, 1999).

Estos ácaros presentan dos partes diferentes visibles, el tronco globoso y

extremidades articuladas. La parte anterior, no es una cabeza propiamente
 16

dicha, ya que el cuerpo de la garrapata es una sola masa, tiene un conjunto de

pies móviles que forman el gathosoma y una base que mide 4 mm de largo por
0.9 mm de ancho, por encima de este, se observan dos depresiones llamadas
aéreas porosas de las cuales sobresalen dos ganchos denominados quelíceros
que ayudan a romper la piel del hospedero (Bazán, 2002).

Por debajo de los quelíceros, que aparecen en número par en forma de hoz y
los ocelos a los lados, se observa una prolongación de la base de gathosoma
llamado hipostoma, presenta una formula dentaria de 3/3, 4/4 que facilita la
acción de perforar la piel del hospedero y además participa como órgano de
fijación, consta de un par de pedipalpos conformado por cuatro segmentos.
Cada pedipalpo desempeña dos funciones: una ayuda a proteger las partes
suaves de la boca, la otra funciona como órgano sensorial (Bazán, 2002).

Enseguida aparecen las extremidades con seis artejos: coxa, trocánter, fémur,
tibia, pretarso y tarso. Es necesario señalar que los adultos y las ninfas poseen
estigmas y se sitúan en el último para de coxas, mientras que las larvas
carecen de ellas, además presentan dimorfismo sexual, siendo el macho de
menor tamaño que la hembra. Cada extremidad mide en promedio de 10 a 12
mm en las hembras y de 3 a 4 mm en los machos. La parte posterior del acaro
se denomina propodosoma (Bazán, 2002).

El sistema de protección o cutícula posee tres capas: epicuticula, mesocuticula

y endocuticula, en ella se aprecian poros, canales o espiráculos. La primera
capa contiene; lípidos, sustancias cementantes, cuticulina y polyfenol que
cumplen la alta función de protección al desecarse. Este sistema de protección,
tiene la particularidad de sufrir elongaciones de hasta 20 veces su tamaño
original cuando esta replete de sangre (Bazán, 2002).

3.2.2. Generalidades del hongo entomopatogeno Beauveria Bassiana:

El hongo hyphomycete, Beauveria bassiana (bálsamo) Vuillemin es un

patógeno que infecta naturalmente numerosos insectos. Es considerado como
 17

una de la especies más promisorias por su potencial como agente biocontrol de

insectos (España, 2000).

a. Taxonomía:

Es un hongo imperfecto de la (Pozo, 2012):

División : Ascomycota.
Clase : Sordariomycetes.
Orden : Hypocreales.
Familia : Clavicipitaceae.

Este hongo, tanto en cultivo puro como en insectos, presenta un micelio

algodonoso de color blanco y tiene una esporulación abundante de color crema
con apariencia polvorienta, lo que le da el nombre con el que se le conoce
comúnmente “muscardina blanca” (Pozo, 2012).

b. Morfología:

Tiene el micelio hialino y septado que se ramifica formando conidióforos que

crecen en forma de racimos. Cada conidióforo está compuesto por una célula
conidiógena cuya base es abultada y conforme se aleja de la base se produce
un adelgazamiento (forma de cuello de botella) del cual surge otra estructura
llamada esterigma en forma de zigzag. En ésta se insertan los conidios (uno
por cada quiebre del zigzag), que son globosos a subglobosos de 2 a 3 x 2 a
2.3 µm. (Pozo, 2012).

c. Mecanismo de acción:

Los hongos actúan por contacto, invaden el cuerpo del insecto y causan la
muerte (Fernandez, 1997). La forma de penetración de los hongos es
generalmente a través del tegumento del hospedero (Fargues y Vey, 1974;
(Zacharuk, 1981)), existen casos particulares en que los orificios naturales
como: tracto digestivo, las partes bucales, el orificio anal, tracto genital y la
 18

tráquea o espiráculos son usados por el hongo para su invasión (Delmas,

1973); Schabel, 1976).

El proceso se inicia cuando el conidio o esporas se adhiere a la superficie del

insecto y por atracción de las enzimas llamadas lipasas y quitinazas desarrollan
una clava que penetra la epicutícula y la cutícula, libera enzimas tóxicas que
llegan a la hemolinfa, lo que produce la muerte del insecto, el hongo continua
invadiendo y colonizando el interior del cadáver hasta que lo invade
completamente, manifestando desarrollo micelial externamente para luego
esporular (Charnley, 1992; Galindo, 2005).

Una vez que el hospedero muere, los hongos emergen de su cuerpo para
producir conidias, las cuales son llevadas por el viento, la lluvia o por otros
insectos y pueden expandir la infección. Los insectos enfermos dejan de
alimentarse, caen en estado letárgico, pueden morir relativamente rápido, en
unos cuantos días, estos pueden ser encontrados sobre el follaje o el suelo,
cubiertos por micelios y emergiendo por las articulaciones y segmentos del
cuerpo (Galindo, 2005).

El proceso de infección de los entomopatógenos sobre los ixòdidos,

principalmente en la fase de huevo, se inicia con la adhesión de la espora
sobre el corion y después de dos a cuatro días se observan las hifas de forma
filamentosa emergiendo del huevo. Estas son de color verde olivo para M.
anisopliae, blanco algodonoso para B. bassiana y rosado para P.
fumosoroseaus (Galindo et al., 2001).

En adultos ixódidos y dípteros es poco conocido su mecanismo de infección.

Samsinokova et al. (1974) señalan que los adultos infectados por hongos no
muestran signos particulares previos, solo hasta después de su muerte, cuando
las condiciones higrotérmicas son adecuadas, el hongo emerge del interior del
tegumento para formar cuerpos hifales y posteriormente esporulan en la
superficie, transformándose en un nuevo foco de infección.
 19

La importancia del control biológico con entomopatógenos, en huevo de

garrapatas, radica en que este primer estado biológico está como fase libre en
pradera y no ha causado daño al hospedero, por lo que en este período
pudiera implementarse la aspersión de estos hongos en pradera para su
control, además de que la fase de huevo es más susceptible a los hongos
(Galindo, 1988; Lezama y Hernández, 1989).

Onofre et al. (2001) refieren que el hongo M. flavoviride var. flavoviride cepa
CG291 efectiva en adultos de B. microplus con las concentraciones de 1x107 y
1x108 conidias/mL incubadas a 270 C y 80% de humedad relativa por 7 días
demostró que reduce la ovoposición y el porcentaje de eclosión en 100% de
control. Para la garrapata adulta Rhipicephalus appendiculatus (Kaaya et al.,
1996) encontró que M. anisopliae y B. bassiana inducen altas mortalidades de
hembras confinadas en la oreja sobre becerros de cebú, así como en
condiciones de laboratorio y bolsas de nailon (tetrapacks) en campo, las
modalidades fueron simulares.

Cultivo infectivo:

El modo de acción de este hongo entomopatógeno consta de diferentes

etapas. Cuando las esporas microscópicas del hongo entran en contacto con
las células de la epicutícula del insecto, estas se adhirieren e hidratan. Las
esporas germinan y penetran la cutícula del insecto. Una vez dentro, las hifas
crecen destruyendo las estructuras internas del insecto y produciendo su
muerte al cabo de unas horas. Tras ello, si las condiciones ambientales son
favorables, pueden emerger del cadáver esporas del hongo con capacidad
para ser propagadas de nuevo y reinfectar a nuevos insectos (Wikipedia.,
2015)

Utilización:

Algunos productos basados en el poder entomopatógeno de Beauveria

bassiana se están empleando como Insecticidas biológicos o Biopesticidas
registrados, si bien deben tenerse en cuenta tanto el poder patógeno de cada
 20

una de las cepas como la concentración de los productos y los tipos de

formulación que protegen las esporas vivas del hongo. Actualmente se utilizan
como insecticidas específicos bajos nombres comerciales como Bioster, entre
otros. Estos pesticidas son considerados amigables con el ambiente por su
especificación, ya que su efecto sobre los humanos, sobre la vida silvestre,
sobre los polinizadores y sobre muchos otros insectos beneficiosos es mínimo
o casi nulo. BIOSTER produce casi todos los controladores biológicos y Humus
Plus y puedes encontrarlos en Venezuela buscando BIOINSUMOS O ABONOS
NATURALES (Wikipedia., 2015).

3.3. CONCEPTOS FUNDAMENTALES

Boophilus Microplus: En Cuba hace más de treinta años que comenzaron los
primeros ensayos con este entomopatógeno, y actualmente se produce con
gran calidad [Linares y Pérez, 1995]. La cepa de Beauveria bassiana más
extendida en la producción es LBb-1. Anualmente se entrega una réplica de
transferencia 1 a los laboratorios provinciales de sanidad vegetal con el fin de
que estos la repliquen y a su vez entreguen la cepa a los Centros
Reproductores (CREE).

Beauveria Bassiana: Beauveria bassiana es uno de los hongos

entomopatógenos más usados a nivel mundial como control biológico debido a
su estabilidad fuera del hospedante, su amplio rango de hospedantes y su
facilidad para producir epizootias en condiciones naturales [Lecuona, 1996;
Moore et al., 1996].

Control biológico: es un método de control de plagas, enfermedades y

malezas que consiste en utilizar organismos vivos con objeto de controlar las
poblaciones de otro organismo (Wikipedia, 2015.).
 21

CAPITULO IV

4. HIPOTESIS, VARIABLES, INDICADORES Y DEFINICIONES

OPERACIONALES

4.1. HIPOTESIS

4.1.1. General:

Hallar la DL50 media del hongo entomopatógeno Beauveria Bassiana contra la

garrapata Boophilus Microplus, sea efectiva con las dosis mínimas.

4.1.2. Específico:

 Que el hongo entomopatógeno Beauveria Bassiana sea efectiva en dosis

mínimas.
 Que las garrapatas infectadas, presenten crecimiento radial de hongo
entomopatógeno Beauveria Bassiana.
 Que el porcentaje disminuido de la población de garrapatas Boophilus
microplus sea alta, inter aplicaciones.
 22

4.2. SISTEMA DE VARIABLES E INDICADORES

PROBLE OBJETIVOS HIPÓTESIS VARIABLE OPERACIONALIZACION DE LAS VARIABLES

MA S
 23

INSTRUMENT
INDICADOR FUENTE
O
 Porcentaje.
O. General: H. general: Dosis del
mortalidad
Determinar la DL50, Ha: Que la dosis letal hongo
¿Cuál Beauveria
en campo, del hongo media del hongo Beauveria  Fichas de
será la bassiana por  Microsc
entomopatógenos entomopatógeno bassiana. control
dosis conteo. opio
Beauveria bassiana, Beauveria Bassiana contra Mortalidad de  Laboratorio
letal  Observació  Estereo
contra la garrapata la garrapata Boophilus las  Campo
media de n de scopio
Rhipicephalus Microplus, sea efectiva con garrapatas (observación)
Beauveri esporulación.
Boophilus Microplus, las dosis mínimas. Boophilus
a  Fichas de
en Bovinos de trópico. microplus.
Bassiana control.
en el H. específicas: Mortalidad  Observación de
O. Especifico
tratamien H1: Que el hongo de las las garrapatas
H1: Evaluar la
to de la entomopatógeno garrapatas recolectadas
efectividad del hongo  Microsc  Laboratorio
garrapato Beauveria bassiana sea en días. post aplicación
entomopatógeno opio  Campo
sis en efectiva, causando la Dosis del del hongo.
Beauveria bassiana (observación)
campo? muerte de las garrapatas a hongo  Fichas de
sobre las garrapatas
los pocos días de haber Beauveria control.
Boophilus microplus.
aplicado el controlador bassiana.
 24

biológico.

H2:
Evaluar la viabilidad
Mortalidad
de las conidias, por
de las
medio del crecimiento H2: Que las garrapatas  Porcentaje.
garrapatas
radial del hongo infectadas; muertas, Mortalidad de la  Microsc
Boophilus  Laboratorio
entomopatógeno presenten crecimiento garrapata. opio
microplus  Fichas de
Beauveria bassiana radial del hongo  Tiempo de  Estereo
Esporulació control
entorno de las entomopatógeno esporulación. scopio
n del hongo
garrapatas Beauveria bassiana.
Beauveria
recolectadas posterior
bassiana.
a la aplicación del
tratamiento.
H3: Determinar el H3: Que el porcentaje Mortalidad de
 Porcentaje.
porcentaje disminuido disminuido de la población garrapata  Laboratorio
mortalidad de  Estereo
de la población de de garrapatas Boophilus inter-  Fichas de
Boophilus scopio
garrapata inter- microplus sea alta, inter aplicación control
microplus.
aplicación. aplicaciones. (adultas y
 25

ninfas)

Fuente: elaboración propia (2015).

 26

CAPITULO V

5. MATERIALES Y METODOS

5.1. MATERIALES, EQUIPOS Y HERRAMIENTAS

5.1.1. Materiales y equipos de Laboratorio:

 Incubadora.  Cucharilla.
 Balanza Analítica.  Agua destilada.
 Placas Petri.  Hongo Beauveria Bassiana.
 Pinzas.

5.1.2. Materiales e indumentaria de Campo:

 Bovinos.  Botas.
 Galón de 25Lt.  Mameluco.
 Mochila de aspersión.  Guantes.
 Frascos para muestra.  Vernier.
 Aceite Vegetal.  Cámara.

5.1.3. Materiales de Escritorio:

 Tableros.
 Hojas bon A4.
 Lapiceros.
 Plumón indeleble.

5.2. METODOLOGIA

5.2.1. Ámbito de Estudio:

El lugar de estudio será en el distrito de Tambopata, provincia de Tambopata,

en el departamento de Madre de Dios, ubicado en la amazonia sur del Perú
 27

entre las coordenadas de altitud: 186 m.s.n.m, latitud sur: 120 35’ 36”, longitud
oeste: 69010’ 36”, con una temperatura ambiental y precipitaciones anuales
30.6°C y 19.7°C y 2200 mm, con una área de 22 218,561 km2, El estudio se
realizará en los meses de diciembre del 2015 al febrero del 2016.

5.2.2. Método de investigación:

Se usaran 40 animales, los cuales serán escogidos al azar, pero que presenten
garrapatosis, ninfas y adultas. Estos animales serán distribuidos en cinco
grupos de 2 bovinos en cada fundo; para cada uno de los tratamientos, cada
grupo fue un tratamiento y cada vaca una unidad experimental.

Todos los tratamientos serán aplicados mediante un baño de aspersión manual

con una bomba de mochila de 16 L y usando 2.5 Lt de solución por vaca. Los
tratamientos biológicos se aplicaran a una solución de 1200 ppm (1.2 g/Lt.) con
1mL/Lt. de adherente natural (aceite vegetal). (Bendeck, 2012).

5.2.3. Población y Muestra:

A través de conteos visuales, se monitoreara la población inicial de garrapatas

antes de realizar las aplicaciones de los tratamientos en todos los animales.
Después de cada aplicación del hongo, se recogerá 5 muestras de garrapatas
por bovino, para ver a los cuantos días muere la garrapata y ver la esporulación
del hongo. De esta manera determinaremos la dosis letal media en campo.

La población y muestra de garrapatas con la que voy a trabajar, es con el total

de garrapatas del conteo inicial; antes de la primera aplicación con el
tratamiento. Para ello se contabilizaran ninfas y adultas.

5.2.4. Recolección de Datos:

Se usara un marco construido de plástico manejable con dimensiones de 25 ×

25 cm para muestrear el Cabeza, Cuello, Pecho, Ingle Inser. Cola y Otros, se
marcó para evitar variabilidad en la ubicación. Estos lugares fueron
 28

seleccionados debido a la alta susceptibilidad de infesta. Contando la cantidad

de garrapatas vivas por estadios dentro del marco. Las aplicaciones y los
muestreos se realizaron durante 16 días.

Para la recolección de datos, se elaborara una ficha de registro (anexos 01)

para el conteo semanal previo a las aplicaciones de los tratamientos. Se
elaborara una ficha de registro diario en laboratorio, para llenar datos de las
garrapatas llevadas al laboratorio.

5.2.5. Procesamiento de Datos:

Se usara un diseño completamente al azar (DCA) con cuatro tratamientos más

un testigo y 4 repeticiones de Beauveria bassiana por tratamiento (cada cuatro
días). Se utilizará el Procedimiento de Análisis de Varianza (ANDEVA).

Para el análisis de los resultados por fundo, se aplicara diseño completamente

al azar (DCA), para demostrar:

- Comparar el comportamiento de los tratamientos.

- Estimar medias de tratamiento.
- Estimar diferencias entre tratamientos.
- Predecir el comportamiento de los tratamientos.

REPETICIONES T1 T2 T3 T4 TEST.
5
SEMANA 1 REP 1
REP 2
SEMANA 2 REP 3
REP 4

Y un diseño de bloques completamente al zar (BCA), para homogenizar los

datos de los 4 fundos.
 29

Repeticion Fundo 01 Fundo 02 Fundo 03 Fundo 04

es
Repeticion T T T T T T T T T T T T T T T T
es 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4
Rp. 1
Rp. 2
Rp. 3
Rp. 4

Habrá 2 hospederos (2 bovinos), en cada unidad experimental. Formando 5

grupos de 2 lo que hacen un total de 10, en cuatro fundos; la población de
hospederos con los que se trabajara son 40.

Tratamiento ml ppm 10 8 con/ml

Trat. 1 532 4256 8.29
Trat. 2 399 3192 6.21
Trat. 3 266 2128 4.14
Trat. 4 133 1064 2.07
Trat. 5 t t t

Se prepararan 532 mL de la solución madre con 4256 ppm del inóculo; a

continuación se tomaran 399 mL de ésta solución que se mezclaron con 133
mL de agua estéril para obtener 532 mL de solución con una concentración de
3192 ppm y se procederá de la misma manera hasta obtener la solución 1064
ppm (Fernández, 2006).

Trat. 1 = 5 Lt.H2O + 532 ml de solución con 4256 ppm (4.26 g/L) de Beauveria
.bassiana
Trat. 2 = 5 Lt.H2O + 399 ml de solución con 3192 ppm (3.19 g/L) de Beauveria
.bassiana
Trat. 3 = 5 Lt.H2O + 266 ml de solución con 2128 ppm (2.13 g/L) de Beauveria
.bassiana
 30

Trat. 4 = 5 Lt.H2O + 133 ml de solución con 1064 ppm (1.1 g/L) de Beauveria
.bassiana
Test. 5 = 5 Lt.H2O + agua estéril testigo

CAPITULO VI

6. ANALISIS ESTADISTICO

6.1. POBLACION

Para este ensayo se seleccionaron animales que presentaban una infección

considerable de garrapatas (>20 garrapatas/animal) en zonas como son
cabeza, cuello, pecho, ingle Inser. Cola y Otros. Se monitorearan garrapatas en
estadio de ninfas y adultas, con un tamaño de 4 mm o mayor, midiendo una y
estimando visualmente el resto al realizar los conteos. Y para determinar mi
población de garrapatas con la que se trabajara, será a base del primer conteo.

6.2. MUESTRA

Sera la totalidad de la población inicial, así sacar un promedio de garrapatas

por bovino al comienzo de la investigación.

6.3. TECNICA DE ANALISIS DE DATOS

La técnica de análisis de datos es experimental, prospectivo y longitudinal

analítico. Consiste en realizar operaciones a la que se someterá los datos con
la finalidad de alcanzar los objetivos de la investigación. Será “cuantitativa”,
puestos que nuestros resultados en la colección de datos serán numéricos al
contabilizar las garrapatas vivas inter-aplicacion.

El análisis de los datos será descriptivo, ya que describiremos la acción de la

Beauveria bassiana sobre Boophilus microplus. El nivel de análisis, será un
análisis “ligado a las hipótesis planteadas”, puesto que cada una de las
hipótesis planteadas será objeto de verificación. Cuando los datos recolectados
 31

son de naturaleza cuantitativa, esta verificación se realiza con la ayuda de

herramientas estadísticas, como las hipótesis que se desea verificar.

CAPITULO VII

7. ASPECTOS ADMINISTRATIVOS Y PRESUPUESTALES

7.1. POTENCIAL HUMANO

Para la investigación de tesis, el grupo de trabajo estará conformado por 4

personas, las que se encargaran de realizar al mismo tiempo el proceso de
aplicación de los tratamientos establecidos cada uno de un Fundo. A cada uno
de ellos ayudara un capataz de cada fundo. De igual manera se trabajara en el
laboratorio, haciendo responsable de su muestra colectada después de la
aplicación, y verificar la evolución.

7.2. RECURSOS MATERIALES

7.2.1. Materiales de Laboratorio:

MATERIALES Y EQUIPOS DE LABORATORIO

CANTIDAD PRECIO TOTAL
UNITARIO
Incubadora. 1 S/. S/.
6,500.00 6,500.00
Balanza Analítica. 1 S/. S/.
550.00 550.00
Placas Petri. 80 S/. S/.
5.00 400.00
Pinzas. 5 S/. S/.
15.00 75.00
Cucharilla. 1 S/. S/.
8.00 8.00
 32

Destilador de agua 1 S/. S/.

3,500.00 3,500.00
Hongo Beauveria 156Kg S/. S/.
Bassiana. 8.00 1,248.00
TOTAL S/. S/.
10,586.00 12,281.00

7.2.2. Materiales de Campo:

MATERIALES E INDUMENTARIA DE CAMPO

CANTIDA PRECIO TOTAL
D UNITARIO
Galón de 25Lt. 4 S/. S/.
10.00 40.00
Mochila 4 S/. S/.
pulverizadora. 750.00 3,000.00
Frascos para 80 S/. S/.
muestra. 1.50 120.00
Aceite Vegetal. 1 S/. S/.
5.00 5.00
Botas. 4 S/. S/.
25.00 100.00
Mameluco. 4 S/. S/.
140.00 560.00
Guantes. 4 S/. S/.
12.00 48.00
Vernier. 4 S/. S/.
30.00 120.00
Cámara. 1 S/. S/.
600.00 600.00
TOTAL S/. S/.
3,073.50 4,593.00
 33

7.2.3. Materiales de escritorio:

MATERIALES DE ESCRITORIO
CANTIDAD PRECIO TOTAL
UNITARIO
Tableros. 4 S/. S/.
10.00 40.00
Hojas bon A4. 500 S/. S/.
0.10 50.00
Lapiceros. 4 S/. S/.
2.00 8.00
Plumón 4 S/. S/.
indeleble. 3.50 14.00
TOTAL S/. S/.
15.60 112.00

7.3. RECURSOS FINANCIEROS

El trabajo de investigación estará financiado por el “proyecto Control Biológico

de Garrapatas (Boophilus Microplus) con el uso de Hongos Entomopatógenos
(Beauveria bassiana) en los centros de producción pecuaria en la provincia de
Tambopata departamento de Madre de Dios, Código PIMEN-8-P-050-065-14”

7.4. COSTOS

El proyecto de investigación estará valorizado en S/. 16,986.00

34
 35

7.5. CRONOGRAMA DE ACCIONES

AÑO 2015 2016

NOVIEMBRE DICIEMBRE ENERO FEBRERO OCTUBRE
1 … 30 1 … 21 … 29 … 31 15 … 24 … 31 1 … 21 22 … 29 1
Elaboración de
mi perfil de X X X X X
tesis.
Presentación
de mi perfil de X X X
tesis.
Aprobación de
mi perfil de X
tesis
Ejecución de la
X X
investigación
Aplicación de
X X X
tratamientos
Final del último
X
tratamiento.
 36

Colección de
X X
datos.
DL50 en
campo X
halladal.
Proceso de
datos X X X
estadísticos.
Resultados. X
Presentación
X X
de la Tesis.
Sustentación. X
 37

CAPITULO VIII

8. BIBLIOGRAFIA CONSULTADA

Aguilar, B. J. (2010). Del hongo entomopatogeno Metarhizium anisopliae (Ma

14) sobre el control de larvas de Rhipicephalus (boophilus) Microplus.

Arenas, Y. B. (2009). Utilizacion de hongos entomopatogenos para el control

del Salivazo aeneolamia varia (Hemiptera: Cercopidae). Programa de
variedades entomologica cenicaña.

Barker, S., & Murrell, A. (2004). Systematics and evolution of ticks with a list of
valid genus and species names Parasitology.

Bazán, T. M. (2002). Efecto de Metarhizium anisopliae (Deuteromycotina:

Hyphomycetes) en el control biologico de Boophilus microplus Canestrini
(Acari: Ixodidae) en ganado bovino estabulado. Tecomán, Colima.

Bendeck, M. N. (2012). EVALUACION DE Beauveria bassiana Y Metarhizium

anisopliae PARA EL CONTROL DE Boophilus microplus EN VACAS DE
HATO LECHERO DE ZAMORA. Honduras: Zamorano.

Betancur, H. O. (2006). Aspectos basicos para el control de la garrapata del

ganado bovino (Boophilus microplus). Cordoba: Publicación de Novartis
de Colombia S.A.

Delmas, J. (1973). Influence de lieu the contamination tegumentarie sur le

developpement de la micose a Beauveria tenella (Delac). Siem (Fungi
imperfecti) chezles larves du coleoptere Melolontha melolomtha.

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 41

ANEXOS 01

FICHA DE CONTEO DE GARRAPATAS Boophilus microplus

A. DEL PROPIETARIO:
Nombre
DNI
Fundo N°
Dirección Distrito Provincia
Ubicación
Este (Lat.) Norte (Long.) Altitud
(UTM)

B. CARGA PARASITARIA POR ANIMAL:

Ident: Fecha Dif. Cont ant. Total
Garrapata Inser.
Cabeza Cuello Pecho Ingle OTROS
Edad: Cola
Ninfas
Sexo: Adultas
 42

Observaciones
Ident: Fecha Dif. Cont ant. Total
Garrapata Inser.
Cabeza Cuello Pecho Ingle OTROS
Edad: Cola
Ninfas
Adultas
Sexo:
Observaciones
Ident: Fecha Dif. Cont ant. Total
Garrapata Inser.
Cabeza Cuello Pecho Ingle OTROS
Edad: Cola
Ninfas
Adultas
Sexo:
Observaciones
Ident: Fecha Dif. Cont ant. Total
Garrapata Inser.
Cabeza Cuello Pecho Ingle OTROS
Edad: Cola
Ninfas
Adultas
Sexo:
Observaciones
Ident: Fecha Dif. Cont ant. Total
Garrapata Inser.
Cabeza Cuello Pecho Ingle OTROS
Edad: Cola
Ninfas
Adultas
Sexo:
Observaciones
Ident: Fecha Dif. Cont ant. Total
Garrapata Inser.
Cabeza Cuello Pecho Ingle OTROS
Edad: Cola
Ninfas
Adultas
Sexo:
Observaciones
Ident: Garrapata Fecha Dif. Cont ant. Total
 43

Inser.
Cabeza Cuello Pecho Ingle OTROS
Edad: Cola
Ninfas
Adultas
Sexo:
Observaciones
Ident: Fecha Dif. Cont ant. Total
Garrapata Inser.
Cabeza Cuello Pecho Ingle OTROS
Edad: Cola
Ninfas
Adultas
Sexo:
Observaciones
Ident: Fecha Dif. Cont ant. Total
Garrapata Inser.
Cabeza Cuello Pecho Ingle OTROS
Edad: Cola
Ninfas
Adultas
Sexo:
Observaciones
Ident: Fecha Dif. Cont ant. Total
Garrapata Inser.
Cabeza Cuello Pecho Ingle OTROS
Edad: Cola
Ninfas
Adultas
Sexo:
Observaciones
Fuente: Ficha de registro adaptada del: