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INFORME DE LABORATORIO

ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO DE
AGUAS POR FILTRACIÓN
Leidy Bibiana Cruz Hernández1
Lizzette Viviana Yate Ducuara 2
Ruby Patricia Suarez Poveda 3
Universidad Central- Facultad de Ingeniería y Ciencias Básicas

RESUMEN:
❖ Entender qué tipo de coliformes nos
apareció en cada una de las
1. OBJETIVOS diluciones, efectuadas.

OBJETIVO GENERAL 2. MARCO TEÓRICO

Realizar el análisis del método de filtración


por membrana y la confirmación con el
caldo bilis verde brillante para la detección
de Coliformes Totales, Coliformes fecales y 3. METODOLOGÍA
Escherichia coli en agua de diferente
procedencia.

OBJETIVOS ESPECÍFICOS

❖ Comprobar si el método cuantitativo


de filtración por membrana para
detección de coliformes totales y
fecales en agua de diferente
procedencia, es eficaz.

❖ Analizar en qué concentración de la


solución aparecen más colonias, ya
seas coliformes totales o fecales.

❖ Familiarizarnos con el
procesamiento de una muestra de
agua mediante la realización de
diluciones y recuento en placa de
microorganismos.

Carrera de ingeniería ambiental, Facultad de ciencias, universidad central de Colombia.


(lcruzh@ucentral.edu.co) 1, (lyated@ucentral.edu.co)2; (rsuarezp1@ucentral.edu.co)3
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Ilustración 2 -Diluciones-

Ilustración 1- Análisis
microbiológico de aguas por
filtración y prueba confirmativa de
microorganismos coliformes totales -
Fuente: Elaboración propia
Ilustración 3 - Análisis microbiológico
de aguas por filtración -Fuente:
Elaboración propia

4. MATERIALES Y REACTIVOS

Tabla 1. Materiales-Fuente: Elaboración


propia

ELEMENTOS PERSONALES
Bata blanca manga larga
Gorro

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Guantes de nitrilo
Tapabocas
Cinta pegante
Marcador Sharpie
Toalla de papel
Encendedor
Cinta de enmascarar
MATERIALES Y EQUIPOS
Agua (mín. 350 ml)
Cajas de Petri con medio EMB
Tubos con 10 ml de caldo bilis verde
brillante con campaña de Durham
Ilustración 5 – filtración de membrana de muestra de
Equipo de filtración al vacío estéril agua 10^-3(EMB)-Fuente: Elaboración propia
Membranas filtrantes estériles
Pinzas estériles Características Descripción
Tubos de ensayo para dilución macroscópicas 10^-3
Alcohol Medio en el que EMB
Papel secante o absorbente está sembrado
Papel film Color de las Rojo
Mecheros colonias
Textura Brillante, entre
mojada y viscosa.
5. RESULTADOS Y ANÁLISIS
Forma Puntiforme e
irregular
Filtración por membrana Bordes Ondulado
● EMB: Estado Físico Sólido

Se puede ver que en él la dilución 10^-3


las colonias que nos crecieron fueron
los coliformes totales, como no estaba
tan diluida las colonias se formaron de
manera agrupada, aunque eso también
pudo ocurrir al presentarse burbujas en
el momento de colocar la membrana en
el Agar EMB, generando que se
corrieran y agrupará más que todo los
bordes.

Ilustración 4 – filtración de membrana de muestra de


agua 10^-3(EMB)-Fuente: Elaboración propia

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los coliformes totales, estas se logran


apreciar en la mayoría del agar, las
colonias son más fáciles de distinguir y
de hacer el conteo.

Ilustración 5 – filtración de membrana de muestra de


agua 10^-5(EMB)-Fuente: Elaboración propia

Ilustración 6– Prueba confirmativa de microorganismos


coliformes totales de agua 10^-5(Caldo Bilis Verde
Brillante)-Fuente: Elaboración propia

Ilustración 5 – filtración de membrana de muestra de


agua 10^-5(EMB)-Fuente: Elaboración propia

Características Descripción
macroscópicas 10^-5
Medio en el que está EMB
sembrado
Color Rojo
Textura Brillante, rugosa,
casi arenosa.
Forma Puntiforme e Ilustración 7 – Prueba confirmativa de microorganismos
irregular. coliformes totales de agua 10^-5(Caldo Bilis Verde
Brillante)-Fuente: Elaboración propia
Elevación Umbilicada
Bordes Ondulado
Estado Físico Sólido Características Descripción
macroscópicas 10^-5
Se puede ver que en él la dilución 10^-5 Medio en el que Caldo bilis
las colonias que nos crecieron fueron está sembrado Verde Brillante

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Color Verde
translúcido
Estado Físico líquido

Ilustración 9 – Prueba confirmativa de microorganismos


coliformes totales de agua 10^-3(Caldo Bilis Verde
Brillante)-Fuente: Elaboración propia

Características Descripción
macroscópicas 10^-3
Medio en el que Caldo bilis
está sembrado Verde Brillante
Color Verde
translúcido
Estado Físico líquido

Ilustración 8 – Prueba confirmativa de microorganismos


coliformes totales de agua 10^-3(Caldo Bilis Verde 6. CUESTIONARIO
Brillante)-Fuente: Elaboración propia
❖ Indique la composición de los
medios de cultivo selectivos
Endo y sabouraud y las
características del tipo de
microorganismos que
esperamos encontrar en estos
medios, compárelo con sus
resultados.
Rta:
❖ Describa dos metodologías
diferentes a la filtración por
membrana que permitan

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realizar un análisis
microbiológico de aguas
Rta:
❖ Cuáles serían los problemas
de utilizar la técnica de
filtración por membrana, sus
desventajas
Rta: El análisis se puede
dificultar, puesto que interfieren
los altos niveles de turbiedad y
abundancia bacteriana, las altas
concentraciones de no
coliformes no permiten un
adecuado reencuentro y los
coliformes debilitados no tiene
mucha posibilidad de sobrevivir.

❖ Por qué el reactivo de Kovacs


modifica el color de E. coli
(fundamento)
Rta:
❖ Qué otros tipos de medios de
cultivo se pueden utilizar para
coliformes totales y fecales.
Rta:
❖ Existe otra forma de conocer la
calidad del agua.
Rta:

7. CONCLUSIONES

8. BIBLIOGRAFÍA

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