Tabla de contenido

I. FUNDAMENTO DEL MÉTODO DE ANÁLISIS ............................................................... 2

II. DESCRIPCIÓN DE LA TÉCNICA EMPLEADA ............................................................... 4
II.1. Verificación de la calibración de espectrofotómetro con COCl2 en HCl al 1% ............... 4
II.2. Determinación del λmáx del KMNO4 ............................................................................... 4
II.3. Determinación cuantitativa de Mn en acero ...................................................................... 4
II.3.1. MUESTRA PROBLEMA .......................................................................................... 4
II.3.2. PREPARACIÓN DE PATRONES............................................................................. 5
II.3.3. SOLUCIÓN PATRÓN DE Mn .................................................................................. 5
III. REACCIONES QUÍMICAS IMPORTANTES ................................................................ 6
III.1. Tratamiento de la muestra del acero................................................................................. 6
III.2. Reacciones en el equipo de espectrometría ...................................................................... 6
IV. DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LOS INSTRUMENTOS Y LOS APARATOS
USADOS ....................................................................................................................................... 7
V. CÁLCULOS DETALLADOS .............................................................................................. 8
V.1. Concentraciones de las soluciones patrones ...................................................................... 8
V.2. %Mn en acero.................................................................................................................... 8
VI. TABLA DE DATOS Y RESULTADOS ........................................................................ 10
VII. GRÁFICOS ..................................................................................................................... 12
VIII. DISCUSIÓN DEL MÉTODO EMPLEADO .................................................................. 14
IX. DISCUSIÓN DE RESULTADOS OBTENIDOS ........................................................... 14
X. CONCLUSIONES .............................................................................................................. 15
XI. RECOMENDACIONES ................................................................................................. 15
XII. BIBLIOGRAFÍA ............................................................................................................. 16
XIII. ANEXOS......................................................................................................................... 17

1
I. FUNDAMENTO DEL MÉTODO DE ANÁLISIS

La espectrofotometría UV-Vis implica la espectroscopia de fotones en la región de

radiación ultravioleta-visible. Utiliza la luz en los rangos visible y adyacentes (el
ultravioleta (UV) cercano y el infrarrojo (IR) cercano.
En esta región del espectro electromagnético, las moléculas se someten a
transiciones electrónicas.

Ley de beer-lambert

La espectrometría UV-Vis se utiliza con mayor frecuencia en forma cuantitativa

para determinar las concentraciones de especies absorbentes en solución, usando la
Ley de Beer-Lambert:

donde A es la absorbancia medida, I0 es la intensidad de la luz incidente a una

determinada longitud de onda, I es la intensidad de transmisión, L la longitud de
ruta a través de la muestra, y c la concentración de las especies absorbentes. Para
cada especie y longitud de onda, ε es una constante conocida como absortividad
molar o coeficiente de extinción. Esta constante es una propiedad fundamental
molecular en un solvente dado, a una temperatura y presión particular, y tiene como
unidades 1/M * cm o, a menudo, U/M * cm.

La ley de Beer-Lambert es útil para la caracterización de muchos compuestos, pero

no sirve como relación universal para la concentración y absorción de todas las
sustancias. En moléculas complejas de gran tamaño, como los tintes orgánicos
(Xylenol Naranja o Rojo Neutro, por ejemplo), a veces se encuentra una relación
polinómica de segundo orden entre la absorción y la concentración.

Espectrofotómetro ultravioleta-visible

Mide la intensidad de luz que pasa a través de una muestra (I), y la compara con la
intensidad de luz antes de pasar a través de la muestra (Io). La relación I / Io se
llama transmitancia, y se expresa habitualmente como un porcentaje (%T). La
absorbancia (A) se basa en la transmisión:

A = - log (%T)

Las partes básicas de un espectrofotómetro son una fuente de luz (a menudo una
bombilla incandescente para las longitudes de onda visibles, o una lámpara de arco
de deuterio en el ultravioleta), un soporte para la muestra, una rejilla de difracción
o monocromador para separar las diferentes longitudes de onda de la luz, y un
detector. El detector suele ser un fotodiodo o un CCD. Los fotodiodos se usan con
monocromadores, que filtran la luz de modo que una sola longitud de onda alcanza

2
el detector. Las rejillas de difracción se utilizan con CCDs, que recogen la luz de
diferentes longitudes de onda en píxeles.

Un espectrofotómetro puede ser único o de doble haz. En un instrumento de un solo

haz (como el Spectronic 20), toda la luz pasa a través de la célula muestra. La Io
debe medirse retirando la muestra. Este fue el primer diseño, y todavía está en uso
en la enseñanza y laboratorios industriales.

En un instrumento de doble haz, la luz se divide en dos haces antes de llegar a la

muestra. Un haz se utiliza como referencia, y el otro haz de luz pasa a través de la
muestra. Algunos instrumentos de doble haz tienen dos detectores (fotodiodos), y
el haz de referencia y el de la muestra se miden al mismo tiempo. En otros
instrumentos, los dos haces pasan a través de un bloqueador que impide el paso de
un haz. El detector alterna entre la medida del haz de muestra y la del haz de
referencia.

3
II. DESCRIPCIÓN DE LA TÉCNICA EMPLEADA

Materiales

 Pipetas volumétricas de 1, 2, 3, 5 y 10ml

 Fiolas de 250, 150 y 50ml
 Vasos de 250, 150 y 50ml
 Pisetas
 Propipetras

Reactivos

 Mezcla de Ácidos (partes iguales de acido nítrico, acido fosforico y agua)

 Ácido Fosfórico
 Agua
 Sal de Mohr QP
 Peryodato de Potasio ( KIO4 ) QP
 Solución patrón de Manganeso (0.20mg de manganeso por mL). Se disuelve
0.6153g de MnSO4.H2O QP y se lleva a enrase en fiola de 1 litro.

II.1. Verificación de la calibración de espectrofotómetro con COCl2 en HCl al 1%

Con la solución de CoCl2 en HCl 1% se hacen medidas entre el rango de 480nm a
540nm, con las lecturas obtenidas se traza el gráfico de % T vs. λ y el de absorbancia
vs. λ. Usar como blanco la solución de HCl al 1%. Los valores obtenidos y la forma
de la curva se comparan con el catálogo del fabricante.

II.2. Determinación del λmáx del KMNO4

Obtener la curva de absorción máxima con uno de los patrones que se preparan.
Usando el blanco para ajustar a 0A. Efectuar en el rango de 480nm a 555nm de
longitud de onda.

II.3. Determinación cuantitativa de Mn en acero

II.3.1. MUESTRA PROBLEMA
Se preparó una solución muestra, para la cual se pesó aproximadamente
0.1173g de la muestra y luego se realizó el tratamiento químico (se sigue

4
 el tratamiento de la FIGURA 1 para patrones pero sin agregar el patrón de
Mn)

II.3.2. PREPARACIÓN DE PATRONES

Para la curva de calibración se preparan 4 soluciones (B, P1, P2, P3) y

se sigue el tratamiento químico indicado en la FIGURA 1.

FIGURA 1

II.3.3. SOLUCIÓN PATRÓN DE Mn

Se disuelve 0.1540g de MnSO4 y se lleva a enrase a una fiola de 250
mL, se procede a homogenizar la solución por inmersión.

5
III. REACCIONES QUÍMICAS IMPORTANTES
III.1. Tratamiento de la muestra del acero
Dilución de la muestra con los ácidos H3PO4 + HNO3 + Agua:

Fe 2  HNO3  Fe 3  NO2  NO
MnO  HNO3  Mn  2  NO2  NO

Al realizar la disolución de la muestra, la mezcla de ácidos H3PO4 + HNO3:

actúa sobre los componentes dejándolos en estados iónicos, donde el ácido
nítrico actúa tanto en la muestra de acero como en el de manganeso y el ácido
fosfórico va a acomplejar al ión férrico dando un complejo incoloro, cuya
reacción es la siguiente:

2PO 43  Fe 3  Fe(PO 4 )2 

3

Complejo incoloro

( NH4 )2 Fe(SO4 )2  6H 2O

Agregación de Sal de Mohr:

La adición de sal de Mohr es para dar las mismas condiciones a la muestra patrón
con el fin de igualar el contenido de hierro de los patrones con el hierro contenido
en la muestra de acero a determinar.

Oxidación del Mn con la adición de peryodato de potasio.

2Mn 2  5IO4  3H2O  2MnO 4  5IO 3  6H

III.2. Reacciones en el equipo de espectrometría

En el proceso de absorción de radiación electromagnética una especie, en un
medio transparente, capta selectivamente ciertas frecuencias de la radiación
electromagnética. El fotón absorbido hace pasar la especie M a un estado
excitado M*:

M + h  M*

6
 Tras un corto periodo, se pierde la energía de excitación, generalmente en forma
de calor, y la especie vuelve a su estado fundamental.

IV. DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LOS INSTRUMENTOS Y LOS

APARATOS USADOS
Espectrofotómetro GENESYS 20:

El espectrofotómetro GENESYS 20 es un instrumento fácil de usar que ejecuta

mediciones de absorbancia, % de transmitancia y concentración dentro del rango de
longitud de 325 a 1100 manómetros. Sus características incluyen:

 Pantalla digital de dos líneas, 20-caracteres.

 Teclado al tacto con chasquido para indicar que la tecla a sido oprimida

 Porta celdas disponibles para un amplio rango de cubetas, tubos de ensayo y

celdas de paso largo.

 Impresora interna opcional.

 Interfaz RS232.

7
V. CÁLCULOS DETALLADOS
V.1. Concentraciones de las soluciones patrones
𝑚𝑔
𝐶𝑀𝑛 = 200 𝑝𝑚 ( )
𝐿
Calculando la concentración para el patrón 1:
2𝑚𝐿
𝐶1 = 200 𝑝𝑝𝑚 × 𝑓𝑑 = 200𝑝𝑝𝑚 × = 4.00 𝑝𝑝𝑚
100𝑚𝐿

Solución 𝐶𝑀𝑛 (ppm) A

B 0 0
P1 4 0.036
P2 10 0.13
P3 20 0.403

V.2. %Mn en acero

Con los datos de concentración y absorbancia se grafica la curva de calibración
(ver grafica N03) y aplicamos el ajuste por mínimos cuadrados.

A = mC + b → Y = mX + b

A: absorbancia

C: concentración

x y x x
2
yi p  xi yi   xi y
b i i i i
m i

p x   x  2
i i
2
p x  2
i  x 
i
2

Tambien hallamos la correlacion:

nb y  nm xy  ( y ) 2
r
n y 2  ( y ) 2

De la gráfica …:

b= 0.0753

m=0.0234

r=0.9829

8
 A= 0.0234C - 0.0753 (*)

Para calcular el %de Mn en acero la muestra se preparó con 0.1173g de acero llevados a
un volumen de solución final de 100ml teniendo como absorbancia valor igual a 0.107,
remplazando este valor en la ecuación de la curva de calibración (*)

0.107 = 0.0234C - 0.0753 → C= 7.79ppm

Calculando el W(Mn) en la muestra:

𝑚𝑔
𝑊(𝑀𝑛) = 𝐶 × 𝑉 = 7.79 × 0.1𝐿 = 0.779 𝑚𝑔
𝐿
𝑊(𝑀𝑛) 0.779
%𝑀𝑛 = 𝑊𝑚𝑢𝑒𝑡𝑠𝑟𝑎 × 100 = 117.3 × 100 =0.66%

%𝑀𝑛 = 0.66%

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VI. TABLA DE DATOS Y RESULTADOS

TABLA 1: DATOS DE LA CALIBRACIÓN CON CoCl2 EN HCL AL 1%

A Λ
0.382 450.000
0.520 460.000
0.613 470.000
0.695 490.000
0.760 500.000
0.845 510.000
0.907 520.000
0.874 530.000
0.765 540.000
0.597 550.000
0.428 560.000
0.276 570.000
0.180 580.000
0.120 590.000
0.091 600.000
0.082 610.000
0.073 620.000
0.066 630.000
0.062 640.000
0.059 650.000
0.056 660.000
0.047 670.000
0.047 680.000
0.035 690.000
0.029 700.000

TABLA 2: DATOS PARA LA DETERMINACIÓN DEL λmáx DEL KMNO4

A Λ
0.061 480.000
0.062 490.000
0.085 500.000
0.103 510.000
0.114 520.000
0.132 530.000
0.120 540.000
0.119 550.000

10
TABLA 3: DATOS DE LA CURVA PATRÓN
Concentración
Sustancia (ppm) Λ
P1 4 0.036
P2 10 0.13
P3 20 0.403

11
VII. GRÁFICOS

GRÁFICO 1: VERIFICACIÓN DE LA CALIBRACIÓN CON CoCl2 EN HCL AL 1%

Absorbancia(A) vs. λ
1.000
0.900
0.800
0.700
0.600
0.500
A

0.400
0.300
0.200
0.100
0.000
0.000 100.000 200.000 300.000 400.000 500.000 600.000 700.000 800.000
λ

Λmáx= 520

GRÁFICO 2: DETERMINACIÓN DEL λmáx DEL KMNO4

Absorbancia(A) vs. λ
0.140

0.120

0.100

0.080
A

0.060

0.040

0.020

0.000
470.000 480.000 490.000 500.000 510.000 520.000 530.000 540.000 550.000 560.000
λ

Λmáx=530

GRÁFICO 3: CURVA PATRÓN PARA DETERMINAR EL %Mn EN ACERO

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 Absorbancia(A) vs. λ
0.45
0.4 y = 0.0234x - 0.0753
R² = 0.9829
0.35
0.3
0.25
A

0.2
0.15
0.1
0.05
0
0 5 10 15 20 25
λ

13
VIII. DISCUSIÓN DEL MÉTODO EMPLEADO

La utilización de este método tiene alto grado de sensibilidad ya que se puede

determinar partes por millón de muchas sustancias, o inclusos de cantidades menores.
Uno de los errores que se pueden cometer con facilidad es provocado por el hecho
de sacar y poner repetidamente el blanco del espectrofotómetro de haz simple puede
generar errores de tipo instrumental.
La precisión y la exactitud, además del procedimiento y tratamiento de la muestra,
también depende del instrumento que se utilice. En este caso se usó un
espectrofotómetro “SPECTRONICS GÉNESYS 20”, el cual es de haz simple. Los
espectrofotómetros de haz doble, además de automatizar el proceso de medición,
también disminuye el error en las mediciones ya que el hecho de sacar y poner
repetidamente el blanco del espectrofotómetro de haz simple puede generar errores
de tipo instrumental.

IX. DISCUSIÓN DE RESULTADOS OBTENIDOS

Se halló la longitud de onda máximo del COCl2.6H2O en la calibración del

instrumento, este valor no se pudo comparar con el del catálogo del fabricante.
La longitud de onda máximo en la solución estándar 2 se utilizó para medir la
absorbancia de los demás patrones a ese mismo valor y de la misma manera para la
muestra problema, si hubiera una variación por un error de tipo instrumental la
longitud cambiaría y por ende la concentración.
La ecuación de la ley de Beer hallada experimentalmente tiene un coeficiente de
linealidad de 0.9829, los resultados hallados para la curva no caen estrictamente en
una recta debido a errores en el laboratorio como en la preparación de la solución
madre o en las muestras.

14
X. CONCLUSIONES

La cantidad de Mn en la muestra de acero determinada por espectrometría Uv-Vis

fue de 0.66%.

XI. RECOMENDACIONES

 La mayor parte las sustancias inorgánicas no absorben en el visible y se deben por

lo tanto producir un color por adición de un reactivo.
 Las ventanas de las celdas de absorción se deben mantenerse escrupulosamente
limpias, pues tanto las huellas digitales como rastros muestras anteriores pueden
ser causa de error considerable en determinaciones cuantitativas.
 Previamente a la medida, las superficies de la celda se limpian tisu
 En un análisis espectrofotometrico se requiere el uso de cubetas del material según
la longitud de onda a utilizar.

15
XII. BIBLIOGRAFÍA
 -. Strobel Howard A.”Instrumentación Química” Editorial Limusa, 1979.

 Alexéiev VN. “Semimicroanálisis Químico Cualitativo” Editorial

MIR,Moscú,1975

 Skoog D. West D., Principios de Análisis Instrumental, 5ta Edición, Ed. Mac
Graw Hill, México 2001. Páginas: 730, 735, 751-755, 759-766,776, 777.

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XIII. ANEXOS

17