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UNIVERSIDAD DE LAS FUERZAS ARMADAS

Departamento de Ciencias de la Vida y la Agricultura

Bioseguridad

Integrantes: Balseca Karol Fecha: 16/01/2018

NRC: 3326 Docente: Dr. Francisco Flores

Rosa transgénica resistente a Colletotrichum Gloeosporium expresada por el gen resistente


de Arabidopsis thaliana

La rosa es una planta perenne que forma tallos florales continuamente, con variaciones en
cantidad y calidad (Hoog, 2001), las rosas pertenecen a un género (Rosa) que contiene
aproximadamente 350 especies aceptadas actualmente. Estas plantas son de gran interés
ornamental, Ecuador es uno de los países que exportan gran cantidad de estas plantas, por ende,
se busca mejorar las especies de estas plantas, haciéndolas más resistentes a la antracnosis,
mediante un proceso transgénico por Agrobacterium, puesto que este método es el más común en
intercambio genético en plantas a excepción de monocotiledóneas, es económico y de fácil uso.

Muchas veces se ha pensado que las plantas transgénicas son malas, pero hay que conocer bien
que es una planta transgénica, una planta transgénica es aquella cuyo genoma el ser humano a
manipulado mediante ingeniería genética para conseguir una nueva característica como seria
volverla resistente a la sequía, insectos o herbicidas (Fenoll & Gonzales, 2010)

El gen defensina de Arabidopsis thaliana es un péptido antimicrobiano que proporciona


protección a una amplia gama de agentes patógenos, su peso molecular va entre 5 a 7 kDa, y
longitud de 45 a 55 aminoácidos, que tiene la capacidad de inhibir efectivamente el crecimiento
de microorganismos fitopatógenos (ROJAS & ZAMORA, 2010), son ricos en cisteína y tienen
actividad antifúngica, antibacteriana, antivírica o insecticida. (Tesfave, y otros, 2013)

La antracnosis producida por el hongo Colletotrichum Gloeosporium es una de las enfermedades


fúngica más importante en cuanto a deceso económico, se da a temperaturas entre 13° y 26° (
Gonçalves, da Silva, Soares, Gonela , & Kvitschal, 2007), puede presentarse durante todo el ciclo
de cultivo, los síntomas que presenta son lesiones en los tallos y en las ramas decoloraciones
oscuras, las lesiones debilitan el tallo lo que provoca que la planta se quiebre en el sitio de la
lesión, cuando la infección es severa se forman manchas necróticas en los tejido adyacentes a las
nervaduras (Schwartz, Corrales, & Correa, 1981)

Ilustración 1 Antracnosis en rosas (Guiadejardineria, 2012)


Epidemiología

Puede transportarse de planta a planta y de cultivo a cultivo, de diversas formas como el viento o
la lluvia, las esporas son liberadas de cuando los existe abundante humedad, y el salpicado de las
gotas de lluvia es un medio de diseminación, la severidad de esta enfermedad está relacionada
con las condiciones climáticas, esta se inactiva cuando el clima es seco y las temperaturas se
encuentran entre 18 y 28°C (Rios, 2010), cuando la incidencia de la enfermedad es baja se
requiere una aplicación de fungicidas, cuando los ataques son severos son necesarias aplicaciones
semanales (Timmer, 2000), gracias a todas estas características descritas, se considera al
fitopatógeno de grado 2, ya que como menciona (René, 2004), un microorganismo de riesgo 2 es
aquel que no presenta mayor riesgo de una epidemia cuando se diseminan accidentalmente, y
existen tratamientos efectivos y no pueden sobrevivir a climas desfavorables.

Método

Metodo Indirecto

Sistema Agrobacterium: tienen la capacidad de integrar establemente parte de su material


genético dentro del genoma hospedador, este organismo induce la formación de tumores en
plantas, durante el proceso de infección introduce en la célula vegetal una parte de su DNA el
cual será integrado al genoma de la planta. (Fonseca, Arango, & Afanador, 2005).

El segmento de DNA transferido es conocido como la región T-DNA y se encuentra en el


plásmido de la bacteria llamado plásmido Ti, para que se dé la transferencia efectiva de esta región
es necesaria la expresión de los genes vir (Díaz & Chaparro, 2012)

Los tres particulares que este organismo presenta son: 1) Además de transferir un fragmento de
ADN a las células vegetales es capaz de integrarlo 2) los genes de su ADN, son reconocidos por
la célula vegetal y se expresan 3) Posee genes codificadroes de enzimas metabolizadoras de
opinas (Christian, 2012)

En pasos más sencillos la transferencia del gen pdf1 gen de resistencia de la Arabidopsis se
la relizaria de la siguiente manera

1. Se introduce el gen de interés (pdf1) en el plásmido


2. Se introduce el plásmido en la Agrobacterium, aquí el gen de resistencia ingresara
al cromosoma bacteriano
3. Gracias a la bacteria el gen se introducirá en el cromosoma de la célula vegetal.
4. El gen se multiplicará al igual que la célula
5. Se generarán algunas plántulas con el gen modificado
6. Las plántulas seleccionadas se cuidarán hasta su desarrollo de manera in vitro hasta
transferirlas al suelo
Ilustración 2 Transformación de la planta (Agro, 2012)

Dado el procedimiento de transformación se procederá a detectar el transigen mediante PCR a


tiempo real y como este se ha expresado mediante el ARN para conocer cómo se va
desarrollando el transgénico

Liberación al ambiente

Este transgénico podría salir al ambiente ya que su magnitud de severidad de daño es


insignificante, pero al manejarlo se deber tener ciertas medidas de bioseguridad y estrategias de
manejo, como:

 Etiquetado de material que diga que es un organismo genéticamente modificado


 Capacitación de personal autorizado
 Establecimiento de barreras biológicas
 Establecimiento de polígono de siembra fuera de una zona centro de origen y diversidad
genética
 Generar información sobre la presencia de microorganismos no blanco presentes antes,
durante y después de la liberación en el sitio (Espinosa & Mora, 2015)

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