New insights into the development of lymphoid tissues

Los órganos linfoides secundarios se desarrollan antes del nacimiento y su formación requiere la
interacción entre:
 las células inductoras del tejido linfoide que expresan la linfotoxina-α1β2
 las células organizadoras del estroma que expresan el receptor de la linfotoxina β

Los OLS (órganos linfoides secundarios) son importantes para el inicio de las respuestas
inmunitarias adaptativas, y también son sitios para la regulación de la tolerancia periférica.

Las ideas iniciales sobre los requisitos para la formación prenatal de órganos linfoides secundarios
provienen del descubrimiento de que los ratones deficientes en linfotoxina α carecen de todos los
ganglios linfáticos y placas de Peyer.

En general, las interacciones entre las células hematopoyéticas y las células no hematopoyéticas
que se producen durante la embriogénesis son esenciales para el establecimiento de tejidos
linfoides funcionales en ratones y humanos.

MALT se desarrolla de un modo similar desde un punto de vista de interacciones celulares, pero
existen diferencias moleculares.

Durante las reacciones inflamatorias crónicas se pueden desarrollar estructuras linfoides terciarias,
que son estructuralmente similares a OLS. Estas se pueden encontrar, por ejemplo, en pacientes
con aterosclerosis y artritis reumatoide. De esto se puede aprender mucho del proceso de
formación de ganglios linfáticos y placas de Peyer.

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Recientemente, se ha demostrado que la formación de ganglios linfáticos periféricos se inicia a
través de la inducción de la expresión de quimioquinas por las células estromales, que atraen a las
primeras células hematopoyéticas al sitio de formación de ganglios linfáticos.

En el desarrollo del parche de Peyer las señales reguladoras implicadas son las del sistema nervioso
en el desarrollo del intestino, estas tienen un papel en el inicio de la formación de la placa de Peyer.
Después de este evento iniciador, las interacciones entre las células hematopoyéticas y las células
estromales circundantes conducen a la generación de una estructura primitiva y definitiva que,
finalmente, da lugar a un órgano linfoide.

Desarrollo de ganglios linfáticos durante la embriogénesis

Los conocimientos de esto vienen de ratones que les faltan ganglio por ejemplo, esto ayudó a
entender que la interacción entre las células inductoras de tejido linfoide (LTi) y las células
organizadoras del estroma es crucial para el desarrollo de los ganglios linfáticos.

Las células organizadoras del estroma son células mesenquimales que dan lugar a diversos
subconjuntos de células estromales que están presentes en los órganos linfoides.

BOX 1: Las células estromales de los ganglios linfáticos son esenciales para la inducción de la
tolerancia de las células T a los antígenos restringidos a los tejidos periféricos. De particular interés
a este respecto son las células estromales EPCAM + GP38 - que expresan el regulador autoinmune
(AIRE). En el timo, AIRE se expresa mediante células epiteliales del timo medular y es responsable
de mediar la expresión de antígenos restringidos a tejidos periféricos. La presentación mediada por
MHC de antígenos restringidos a tejidos periféricos a los timocitos en desarrollo garantiza que las
células T autorreactivas se eliminen, un proceso denominado tolerancia central. En órganos
linfoides secundarios, las células extratímicas que expresan AIRE (son lo mismo pero en la periferia)
tienen un papel similar.

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Durante la formación del órgano linfoide expresan el receptor linfotoxina-β (LTβR), y las células LTi
hematopoyéticas expresan el ligando LTβR linfotoxina-α1β2 (LTα1β2). La interacción de estos dos
subconjuntos de células da como resultado la expresión regulada de:
 moléculas de adhesión:  Quimioquinas homeostáticas
o VCAM1 o CCL19
o ICAM1 o CCL21
o MADCAM1 o CXCL13
…Necesarios para la atracción y retención de células hematopoyéticas adicionales en el sitio del
desarrollo de los ganglios linfáticos. Sin embargo la agrupación inicial de células LTi, puede ocurrir
en ausencia de expresión de los receptores y ligando antes nombrados. Esto indica que hay otras
moléculas involucradas:
 Como los ganglios linfáticos siempre se desarrollan en la misma ubicación a lo largo de las
venas grandes, y con frecuencia en sitios de ramificación de los vasos sanguíneos, es
probable que estos sitios entreguen señales su desarrollo
 Datos recientes respaldan que esta señal de iniciación puede derivarse de neuronas, por lo
tanto esta podrían determinar la ubicación.

Células inductoras de tejido linfoide

Células LTi (son las que forman tejido linfoide) derivan de células progenitoras IL-7Ra+ (ratón). Éstas
pueden dar origen a células B, T, NK, dendríticas y LTi.

Para que la célula progenitora IL-7Ra+ pueda diferenciarse a Pre-LTi, ID2 suprime E2A evitando que
se diferencie a una célula B. Por lo tanto en ratones que carecen de ID2, las células LTi no se
desarrollan y todos los linfonodos están ausentes.

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El rol inhibitorio en E2A se confirma ya que en ratones deficientes de ID2 y E2A, las células LTi,
linfonodos y placas de Peyer si se desarrollan, lo que sugiere que la generación de células LTi
depende del equilibrio entre estas dos moléculas.

En adición a la inhibición de proteínas E2A, la expresión de RORyt es necesario para la diferenciación

final de células LTi.

Célula progenitora IL-7Ra+ en humanos son iguales pero sin CD4+. Estas están presentes en el
ganglio linfático fetal humano y se ha demostrado que expresan LTα1β2. (o sea que encajan con la
explicación del mecanismo del título anterior)

El papel de las quimiocinas en la formación de grupos de células inductoras de tejido

linfoide
La mayoría de los ganglios linfáticos periféricos no se desarrollan
en ausencia de CXCL13 o su receptor CXCR5. En ausencia de
estos tampoco se desarrolla la agrupación inicial de células LTi.

Dado que CXCL13 es el evento iniciador, precede a la

señalización de LTβR (esto se observó en ganglios en formación
sin LTα)

CCL21: Derivado del endotelio linfático participa en la atracción

(funciona como guía) inicial de células LTi al lugar de desarrollo de ganglios linfáticos. Su receptor
es CCR7. Esto solo se vuelve aparente en combinación con la deficiencia de CXCL13, ya que los
ganglios linfáticos se forman normalmente en ratones deficientes en CCR7.

Además, el inicio del desarrollo de los ganglios linfáticos es independiente del endotelio linfático,
ya que los ratones deficientes de PROX1 que carecen de endotelio linfático, si generan cúmulos de
células LTi.

CXCL13 es la quimioquina más importante para el desarrollo de los linfonodos, debido a que en
ausencia de esto no se produce tejido linfoide. Esto es debido a que el CXCL13 producido por el
estroma, atrae a células LTi para que conformen el primer conglomerado de células LTi

Además de esto, existe otra quimioquina que es la CCL21 que es derivado de endotelio linfático que
marca el guiado de la localización del linfonodo al guiar la zona en donde se promoverá la
conglomeración de células LTi y de otras células hematopoyéticas

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El papel del ácido retinoico en la localización de los ganglios linfáticos

Se ha demostrado que el ácido retinoico es esencial para la inducción inicial de la expresión de

CXCL13, lo que sugiere su participación en el inicio del desarrollo de ganglios linfáticos

El ácido retinoico se deriva de la vitamina A (retinol). El retinol primero se convierte en retinal y

luego en ácido retinoico. La conversión de retinal en ácido retinoico es irreversible y está mediada
por RALDH (deshidrogenasas retinal), la principal de estas enzimas es RALDH2 (o ALDH1A2)

En ausencia de RALDH2, los grupos de células LTi no se forman,

lo que indica que la generación de ácido retinoico es crucial para
el inicio del desarrollo de los ganglios linfáticos.

Se ha demostrado que las fibras nerviosas que están cerca de los

ganglios linfáticos en desarrollo expresan RALDH2 y, por lo tanto,
es posible que, mediante la generación de ácido retinoico, puedan
ser responsables de la inducción de la expresión de CXCL13 por
las células estromales. CXCL13 atraería, a su vez, células LTi CD3-
CD4+ IL-7Rα+ que expresan CXCR5 al sitio de inicio de los ganglios
linfáticos.

Este modelo propone que la formación de ganglios linfáticos se

produce en el sitio de liberación de ácido retinoico. Sin embargo
en AR se expresa en varias partes y no explica por qué el inicio de
los ganglios linfáticos solo ocurre en ciertos sitios.

Neuronas motoras pueden ser una fuente de ácido retinoico

para especificar la ubicación del desarrollo del tejido linfoide
durante la embriogénesis.

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*Se ha demostrado que las neuronas motoras braquiales y lumbares en embriones de ratón expresan
RALDH2 a partir de E12.5 (el estadio en el que se inicia la formación de los ganglios linfáticos).
Además, estas neuronas motoras son una fuente paracrina de ácido retinoico para el mantenimiento
de las neuronas de las extremidades, lo que sugiere que también podrían proporcionar el ácido
retinoico necesario para el desarrollo de ganglios linfáticos en estas regiones (ganglios linfáticos
braquiales, axilares e inguinales). Si hay AR para las neuronas, debería haber para la formación de
ganglios linfáticos.

Además, se ha informado que los pares craneales IX, X y XI están estrechamente relacionados con
el desarrollo de ganglios linfáticos en la región de la cabeza y el cuello. La formación de estos
nervios tiene lugar durante el mismo período embrionario que el inicio de la formación de ganglios
linfáticos y también depende del AR.

VeGF-C (factor de crecimiento endotelial vascular típico de la molécula de guía linfática C) como su
nombre lo dice es necesario para la formación del sistema linfático, pero además en necesario para
los progenitores neurales, lo que indica que estos sistemas utilizan moléculas similares para
desarrollarse adecuadamente y pueden influirse mutuamente.

El rol de la familia de TNF en el “crosstalk” celular

Para la formación de los ganglios linfáticos son necesarios una serie de pasos. Una vez reclutadas
las células LTi, se requiere la expresión de LTα1β2 en estas células para que puedan formar
interacciones productivas con las células organizadoras estromales [LTβR (+)].

Para el paso de LTi → LTα1β2 se han identificado una serie de moléculas:

 IL-7
 TRANCE (o TNFSF11 y RANKL), la sigla en inglés significa “citoquina relacionada con el TNF
inducida por activación”

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Se ha propuesto que la formación de clusters celulares de LTi, permite la señalización de señales
debidas a TRANCE, por medio de la presencia del receptor de este, conocido como TRANCER (o
TNFRSF11A y RANK).

LTi expresa tanto TRANCE como TRANCER, y la activación de la señalización mediada por
TRANCER en estas células lleva a la inducción de la expresión de LTα1β2
Las células LTα1β2 (+) son capaces de interactuar con las LTBR (+) (que son células organizadoras
del estroma), lo que lleva a la inducción de quimoquinas, moléculas de adhesión, citoquinas y
factores linfoangiogénicos.

 Las quimoquinas generadas atraen más células hematopoyéticas (LTi) que son atrapadas
(retenidas) por las moléculas de adhesión producidas por las LTBR (+).
Por medio de la señalización del LTβR, las células estromales también son inducidas a expresar
TRANCE e IL-7, lo que lleva a una mayor inducción de LTα1β2 en las nuevas LTi que van llegando,
generando un feedback positivo constante. Además, las células organizadoras estromales dan
origen a varios linajes celulares encontrados en los linfonodos maduros, como lo son: células
foliculares dendríticas, células reticulares fibroblásticas y endotelio tanto vascular como linfático.

Desarrollo prenatal de la placa de Peyer

Órgano linfoide secundario presente en el intestino delgado, contiene folículos de LB separados por
áreas de LT que contienen células presentadoras de antígenos. Su desarrollo ocurre antes del
nacimiento y requiere la entrada de células hematopoyéticas al intestino.

Son esenciales para este proceso las células LTi y CD45+IL-7Rα–CD4–CD3–CD11c+ (conocidas
cortamente como C11c+). Estas células CD11c+ expresan el receptor de tirosin kinasa RET, la que es
necesaria para la formación de los clusters en el intestino, que incluyen tanto las LTi como las células
estromales VCAM1+.

Las células CD11c+RET+, expresan niveles mayores de LTβ, por lo que se cree serían capaces de
inducir la expresión de LTα1β2 en las LTi, las que después interactuarían con células estromales LTβR

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(+), generando un proceso similar al visto con los linfonodos, pero esta vez, con el desarrollo de la
placa de Peyer.

Las LTβR generan IL-7, la que es capaz de atraer e inducir LTα1β2 en las LTi, perpetuando el proceso
y asegurando el crecimiento de la placa de Peyer al seguir atrayendo LTi.

C11c+ se encuentran en un número muy pequeño en las células de los linfonodos en desarrollo, por
lo que el crecimiento de estos no está determinado por C11c+ si no que por las LTi.

Los ligandos de RET son los responsables de la inducción de LTα1β2 en las células de la placa
de Peyer, mismo rol que genera TRANCE en la formación de los linfonodos

Desarrollo del tejido linfoide asociado a mucosa (MALT)

Los MALT distintos a la placa de Peyer, como el NALT (nasofaringe), el TALT (tracto lagrimal) o los
criptoparches o SILT (intestino delgado, pero de forma solitaria), ocurren posterior al nacimiento y
sus requerimientos relacionados con la formación del tejido linfoide varían de un tipo de mucosa a
la otra.

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NALT y TALT
La formación de NALT ocurre incluso en ausencia de LTα1β2 o TRANCE, por lo que no son necesarios
para la creación de este MALT. Incluso puede generarse en ausencia de las quimoquinas CXCL13,
CCL19 y CCL21. Sin embargo, si requiere de la presencia de LTi y células NK.

En el caso de la formación del TALT, también ocurre postnatalmente, sin embargo, su formación
puede ocurrir en ausencia de LTi y de forma independiente de la señalización mediada por LTβR.

Formación de los criptoparches (SILT)

Ocurren postnatalmente, 2 semanas post nacimiento, acumulándose LTi en la lámina propia. Estos
acúmulos pueden crecer y diferenciarse hacia folículos de LB de mayor tamaño que se conocen
como SILT.

Requiere la presencia de la microflora en el lumen intestinal, de la expresión de LTα1β2 y CXCL13

por las células dendríticas. También requiere para su crecimiento la acción de CCR6 y su ligando
CCL20 para la migración de nuevos LB hacia los SILT. CCL20 aparece en las células epiteliales sobre
el folículo de LB, en respuesta a LTα1β2.

Sería dependiente de la expresión de ROR(gamma)t por parte de los LTi.

Estructuras linfoides en la cavidad peritoneal

Una población de células linfoides asociadas a tejido adiposo (LIN–CD3–CD4–KIT+SCA1+) que son
similares a LTi, se encuentran alojadas en la grasa mesentérica y producen citoquinas similares a las
producidas por el LTh2.

No se sabe cuál es el origen de este tipo celular, pero si se sabe que aumentar en tamaño y número
a medida que se envejece.

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Lo mismo ocurre con los “sitios lechosos” (milky spots) en la zona de los omentos en ratones, donde
se encuentran principalmente LB tipo B-1, que se cree es un órgano linfoide secundario único, cuyo
origen ocurre de forma independiente a los LTi y LTα , pero requiere de CXCL13 para su formación.

Según yo, esta tabla es preguntable, porque tiene todo lo que se hablaba de los tiempos de creación
y si dependía o no de ciertos factores.

Formación de órganos linfoides terciarios

Los órganos linfoides terciarios (también conocidos como estructuras linfoides ectópicas) se
generan en sitios de inflamación crónica en un proceso que se conoce como neogénesis linfoide.
Tienen compartimientos de LB organizados, con centros germinales, además de compartimientos

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de LT en los que se encuentran las células presentadoras de antígeno. Usualmente también
contienen vénulas endoteliales altas.

Al generarse en zonas de infección patogénica, estos órganos linfoides ayudan a neutralizar los
patógenos al facilitar la generación de células plasmáticas que produzcan anticuerpos vs un
patógeno específico. En este caso generan un efecto protector, como por ejemplo, en los pulmones
cuando se genera una respuesta frente al virus de la influenza.

Sin embargo, si se producen en zonas de presentación de autoantígenos, pueden llevar la

destrucción innecesaria de tejido, como es el caso de las insulinitis en el pancreas, que desencadena
finalmente una DM I. De hecho se ha visto que el bloqueo de su generación en el pancreas puede
evitar el desarrollo de diabetes, y su promoción puede desencadenarla.

Por otro lado, se ha demostrado en modelo de melanomas, que al secretar CCL21, las estructuras
linfoides terciarias atraen LTi, que son capaces de promover la tolerancia (al inducir actividad Th)
frente a estas células tumorales y evitar una respuesta inmune frente al tumor.

Se ha visto que CXCL13 esta frecuentemente presentada en órganos linfoides terciarios, siendo
producida por las células estromales, de forma similar a lo que ocurre en los órganos linfoides
secundarios. No se sabe si este CXCL13 tiene que ver con las fibras nerviosas como ocurre en otros
casos de infalamación.

Se cree que LTβR tendría un rol crucial en la formación de estos órganos linfoides, y en la potencial
tolerancia frente a ciertas estructuras.

Conclusiones
 El desarrollo prenatal del tejido linfoide involucra células LTi interactuando con células
estromales.

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 El tejido linfoide no solo sirve para generar la respuesta inmune, sino que también tienen
rol en el control de la autorreactividad.
 Existen roles postnatales tanto para las LTi como para las células estromales.
 Durante la formación del tejido linfoide, ocurre “crosstalk” entre el SN incipiente, las células
hematopoyéticas y las estromales.
o Además, se cree que un proceso similar podría ocurrir postnatalmente y tendría
relevancia para el funcionamiento del sistema inmune.

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