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08-04-2016

Morfología I
Histología Embriología
Carrera de Odontología

MICROSCOPÍA Y PLANOS DE
CORTE

Objetivo

Conocer distintos planos de corte en modelos biológicos


-Conocer características de los distintos tipos de
microscopios (MO y ME)

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Planos de corte

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Tipos de Microscopio

M. Óptico M. Electrónico
Campo claro
Transmisión
Campo Oscuro
Barrido
Contraste de fase
Confocal
Fluorescencia

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Microscopía óptica

ojo

Lente
ocular

Lente
objetivo

Muestra
Condensador

Fuente
de Luz

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Cabezal o tubo
Lentes oculares
brazo

columna
Revolver o
portaobjeto
Carro vernier Lentes
objetivos
interruptor
Platina
potenciómetro

macrométrico
condensador
micrométrico

diafragma Carro de
desplazamiento
Pie o
Fuente de soporte
iluminación

Fuente de luz

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Lentes objetivos

Longitud del Tubo

Espesor del
cubreobjeto
Abertura Numérica
Aumento

Lente Objetivo

60x 1.4 AN

Aceite de
Inmersión

Cubreobjeto
Muestra

Portaobjeto

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Abertura Numérica

Lente objetivo

AN= n (sen )
Cono de luz

n=Índice de refracción
AN=Abertura Numérica
sen =Seno de la abertura angular

Abertura numérica (AN): Capacidad del objetivo de aprovechar el mayor número


de rayos para formar la imagen.

Indice de Refracción
Lente objetivo

Aceite de Aire
Inmersión
n=
Cubreobjeto
1.52 n=
n=1.52 1.0n =
Muestra 1.52

n=1.52 n=1.33

Portaobjeto

Indice de Refracción: Cuando los rayos luminosos inciden oblicuamente sobre un medio
transparente, o pasan de un medio a otro de distinta densidad,
experimentan un cambio de dirección.

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AN= n (sen )

n = 1,0 (aire)
sen  = sen 15º

0,25 = 1,0 x (sen 15º)

AN = 0,25

Magnificación 10x

AN= n (sen )

n = 1,0 (aire)
sen  = sen 30º

0,50 = 1,0 x (sen 30º)

AN = 0,50

Magnificación 40x

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AN= n (sen )

n = 1,0 (aire)
sen  = sen 74,7º

0,95 = 1,0 x (sen 74,7º)

AN = 0,95

n = 1,5 (aceite inmersión)

sen  = sen 74,7º

1,44 = 1,5 x (sen 74,7º)


Magnificación 100x AN = 1,44

Lente ocular

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Poderes del Microscopio

Poder de resolución

R:0,61 
AN
n: 1,5
AN: n (sen )
AN: 1.5 sen 74,7º = 1,44

0,2 m : 0,61 
1,44

Poder de resolución: Capacidad de mostrar la imagen en sus detalles más finos.


Está en relación inversa con el límite de resolución.
Limite de resolución: Menor distancia que debe existir entre dos objetos para
que puedan visualizarse por separado.

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Poder de Aumento

Aumento lente ocular x Aumento lente objetivo = Aumento total

10x x 5x = 50x
10x x 10x = 100x
10x x 40x = 400x
10x x 100x = 1000x

Aumento total: La imagen que observamos es el producto entre el aumento del


objetivo y el del ocular.

Poder de Definición

Poder de definición: Es la capacidad del objetivo de formar imágenes


de contornos nítidos y definidos

Aberración Cromática

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Aberración Esférica

Poder de Penetración

Distancia Focal: 10x  10m


40x  1 - 2 m
100x  0.5 m

Poder de penetración: Es la propiedad de permitir la observación simultánea de varios


planos del preparado. Es inversamente proporcional a la
escala de aumento.
Distancia focal: Es la distancia de la lente objetiva al preparado, cuando está enfocado.
Disminuye cuando aumenta el objetivo.

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Tipos de Microscopio Ópticos

a) Microscopio de Fluorescencia

NRK ('Normal Rat Kidney Fibroblasts'). Fluoresceína (verde)

Tetrametilrodamina (rojo)

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b) Microscopio de Barrido Confocal

PtK2 (marsupial kidney epithelial cells)

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c) Microscopio de Contraste de Fase


Microscopia de Campo Claro Microscopia de Contraste de Fase

Microscopia de Contraste de fases Microscopia de Campo oscuro


interferencial de Nomarski

Microscopia Electrónica
a) Microscopia Electrónica de Transmisión

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b) Microscopia Electrónica de Barrido

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