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INFORME 01
DOCENTE:
CURSO
Microbiología Ambiental
AUTOR:
OBJETIVOS
microorganismos
se define como la capacidad que posee un objetivo para distinguir la distancia mínima entre dos
puntos del objeto para que se puedan visualizar como dos puntos separados. El poder de resolución
depende de la longitud de onda (λ) del haz de luz utilizado y de la apertura numérica del objetivo
empleado. El máximo poder de resolución en un microscopio de luz emitida es de 0.2 μm, por lo
que se requiere de una amplificación entre 1000-1400x, mientras que el poder de resolución del ojo
humano es de aproximadamente 0.2 mm. Para aprovechar esta ventaja de los microscopios, se han
Según Madison B. (2001), existe una gran variedad de tinciones que pueden ser aplicadas dentro
Un colorante se define como una sustancia capaz de dar color a células, tejidos, fibras, etcétera,
la región ultravioleta o visible; dicho de otra forma, es la capacidad que tiene la molécula para que
sus electrones absorban energía o luz visible, se exciten y emitan diversos colores de acuerdo con
la longitud de emitida como resultado del cambio en el nivel energético (Fung D. 1998)
Según Ronay V. (2011), afirma que, aunque los microorganismos vivos se pueden observar
directamente en fresco al microscopio óptico, la mayoría de las veces es necesario teñirlos para que,
por medio del uso de colorantes, sea mucho más fácil su identificación;6 además, la presencia de
ciertas estructuras, así como su reacción a determinadas técnicas, nos permite clasificar a las
El control de calidad de los métodos tintoriales es importante, ya que así se asegura que la
preparación de la muestra haya sido adecuada, el método físico con mayor utilización en
microbiología es el calor seco, que consiste en exponer directamente la laminilla a la flama del
mechero, con esto se logra detener los procesos vitales de las células y los microorganismos para
Para la presente práctica se tuvo que poner mucha atención al docente encargado del
área, quien fue el Ingeniero Zady Casillo. Quien nos dios la información detallada de la
- Microscopio optivo
- Cubre objetos
- Agua estancada
- Pipeta pauster
- Mechero
- Azul de metileno
- Lugol
- Agua destilada
- Mondadientes
Primera fase.
Montaje en vivo.
En esta primera fase procedió a tomar una gota de la muestra, el cual fue puesto
directamente en el portaobjetos.
Seguidamente se puso el cubreobjetos de una forma inclinada para un buen montaje de
la muestra, para esto se dispuso a agar la muestra con la mano derecha y el cubreobjetos
con la otra mano, se hizo todo esto para tener un mejor resultado.
Seguidamente se prosiguió a poner la muestra en el microscopio para su posterior
visualización.
P.T.L.: 400 X
Descripción:
10 X Mediano Aumento
P.T.L.: 1000 X
Descripción:
su mismo lugar, también se pudo ver algunas algas de menor tamaño , pero en este punto
no se podía distinguir muy bien que eran algunos organismos de color oscuro.
40X Mayor Aumento
P.T.L.: 4000 X
Descripción:
entre ellos, ya que sus movimientos eran muy diferentes, algunos de trasladaban
rápidamente de un lugar a otro, mientras que otros solo giraban en un determinado lugar,
otros iban en línea casi recta. Con este mayor aumente se pudo ver mas con mas claridad a
Segunda fase.
Fijación de muestras
Para este proceso, se dispuso usar dos muestras diferentes, unos fue tomada del agua
estancada y la otra de la secrecion dental, la primera muestras que es del agua estancada se
En primer lugar se tomó una pequeña muestra (cual llamaremos M1) y se pudo en el
portaobjetos, seguidamente fue exparcida con la ayuda del mondadiente quedando de una
hacer la fijación de muestra mediante el pase del portaobjetos al fuego directo del mechero.
Segunda fase.
Tinción simple
Para este proceso, se usó los colorantes de Azul de Metileno y el Lugol, se procedio a
Lugol, a ambas muestras se les dejo caer unas gotas de colorante y esta se dejo puesto en un
Después de dejarlos durante un minuto se procedió a lavar las muestras de una forma
inclina para que el agua no cayese de forma directa y esta no pueda ser alterado por la caída
del agua.
Después del lavado de ambas muestras, se siguió con el secado para así pode poner la
muestra en el microscopio, este secado fue necesario para no dañar los instrumentos.
Finalmente se puso una gota de agua en cada muestra para un mejor montaje que nos
Una vez teniendo ya listas las dos muestras se procedió a mirar en el microscopio con los
4X Panoramico M 1
P.T.L.: 400 X
Descripción:
10 X Mediano Aumento M 1
P.T.L.: 1000 X
Descripción:
P.T.L.: 4000 X
Descripción:
microrganismos, ya que al parecer la fijación de había alterado su forma de cada uno de los
microrganismos, se lograba ver las diferencias entre ellos solamente por la notación de su
4X Panoramico M 2
P.T.L.: 400 X
Descripción:
10 X Mediano Aumento M 2
P.T.L.: 1000 X
Descripción:
P.T.L.: 4000 X
Descripción:
lugares había más tinción que en otras, por lo que se propone que la extensión debió ser
mas cuidadosa.
RESULTADOS
Cada observación a diferencia distancia, nos dio una mejor vista, ya que nos acerca cada
Las coloración obtenidas por las diferentes tinciones nos ayudo de forma positiva en la
que no tenía movimiento pudiéndolos visualizarlos más claramente a cada uno de ellos.
DISCUCIONES
No se puso pudo ver a 100 x ya que no se contaba con los materiales para dicho
procedimiento.
La fijación de las muestras, los cuales fueron pasados por el mechero de alcohol no fueron
las adecuadas, ya que su llama de fuego era luminosa y esto dejaba una mancha en el
portaobjetos al momento de pasar por fuego, alterando así de una forma a los resultados de
las muestras
CONCLUSION
Si se pudo aprender las técnicas de preparación, fijación y coloración le las muestras para
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
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