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UNIVERSIDAD DE CALDAS

FACULTAD DE CIENCIAS EXACTAS Y NATURALES


LABORATORIO DE BIOQUÍMICA GENERAL

SOLUCIONES AMORTIGUADORAS

Objetivo

- Realizar los cálculos para preparar una solución amortiguadora con un pH definido
- Preparar una solución amortiguadora

Fundamentación teórica

Las soluciones amortiguadoras, también llamadas reguladoras o buffer, contiene ya sea un


ácido débil y alguna sal del ácido, o una base débil y alguna sal de la base. Es posible
agregar cantidades considerables de un ácido fuerte o una base fuerte a una solución
reguladora y tener solo un pequeño cambio en el pH resultante. Éstas características no son
exhibidas por el solvente en forma individual. Tales soluciones se usan en muchos
experimentos bioquímicos en los cuales se necesita controlar exactamente el pH.

El mantenimiento del pH dentro de ciertos límites estrechos, es un factor determinante para


el normal funcionamiento de células, tejidos, órganos y organismos. Cambios bruscos
podrían significar daños irreparables e incluso la muerte. Los tres principales sistemas
amortiguadores en los seres vivos son las proteínas, el bicarbonato y el fosfato.

La acción reguladora del pH por parte de estas soluciones amortiguadoras está expresada
por la ecuación de Henderson- Hasselbalch y se puede deducir que depende de dos factores:
Uno es el valor pKa (logaritmo negativo de la constante de disociación de un ácido débil) y
el otro es la proporción de sal a ácido que están interviniendo en el equilibrio. Esta
ecuación es válida para un intervalo de pH entre 4 y 10 en el que los hidrogeniones y los
hidroxilos no contribuyen significativamente a la concentración iónica total.

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Siendo:
pKa: la fuerza que tienen las moléculas al disociarse (es el logaritmo negativo de
la constante de disociación ácida de un ácido débil)
[A-]: concentración de la forma salina
[HA]: concentración de la forma ácida

Los ácidos débiles en solución se ionizan sólo ligeramente y se obtiene ´pr tanto un
verdadero equilibrio entre el ácido y la base conjugada. Si HA representa un ácido débil:

Ácido débil Base conjugada


Forma ácida Forma ácida

Algunas consideraciones o reglas de uso práctico acerca del empleo de ésta ecuación en la
preparación a nivel de laboratorio de las llamadas soluciones buffer son las siguientes:

1. El sistema amortiguador (forma ácida/forma salina) se selecciona de acuerdo al pH


requerido. Se debe relacionar el valor de pH con el equilibrio entre la forma ácida y
salina cuyo valor de pK se aproxime más al buscado.
2. Cuando las concentraciones en el equilibrio de las formas ácidas y salinas sean
iguales, primero: el valor de la pKa es igual al del pH ya que al aplicar la ecuación
hallamos que el cociente forma salina/ forma ácida es 1.0 y el logaritmo de 1 es 0, y
segundo: bajo éstas condiciones se logra el mayor poder amortiguador de la
solución.
3. Si se toma como base lo indicado por Plummer de que en la práctica las soluciones
se usan en un intervalo de pH de ± 1 alrededor de pK, entonces las relaciones en que
se deben encontrar las formas salinas/ formas ácidas en dichas soluciones se hallan
desde 1/10 a 10/1, o sea 0,1 a 10. Fuera de estos rangos el poder amortiguador se
reduce notablemente.
4. Cuando a una solución amortiguadora se adiciona un ácido fuerte, entonces el
sistema reacciona disminuyendo las cantidades de sal y aumentando las del ácido, y

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si se agrega una base fuerte, entonces disminuyen las moles ácidas y aumentan las
salinas. Con esto la relación salina/ácida se mantienen cercana, lo que no sucede
cuando se adiciona el ácido o base fuerte a un solvente como es el caso del agua; en
este último caso los cambios de pH serían bruscos.
5. La concentración indicada para el buffer es la concentración total de las moléculas
que se hallan en forma ácida más aquellas en forma salina.

Preparación se soluciones amortiguadoras de pH

De manera general, las soluciones amortiguadoras se pueden preparar de dos maneras:

1. Mediante neutralización: Este caso es más frecuente para ácidos. Es necesario


entonces obtener las formas salinas y ácidas mediante adiciones de bases fuertes como
KOH o NaOH.
a. Ácido monoprótico: (caso del ácido acético) en este caso se hace necesario
obtener la forma salina mediante la neutralización de un solo protón:

En este caso se deben emplear ciertas cantidades de moles de ácido y de base para obtener las
moles en forma salina y una cantidad adicional de ácido que proporcione las moles en forma
ácida requeridas.

b. Ácido poliprótico: En este caso si el equilibrio requerido está regido por la


primera constante de disociación o pK1, entonces el procedimiento es similar al
anterior. Si el equilibrio se halla en la segunda o tercera constante es necesario
tener presente que las moles totales (ácidas + salinas) debe provenir del ácido.

Para obtener cantidades en el equilibrio donde rige pK, hay que efectuar la neutralización de un
protón para obtener así las moles que se necesitan en forma

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ácida y se deben neutralizar (en otras cantidades adicionales del ácido) dos
protones del ácido puro para así poder obtener las moles de la forma salina.

Sistema en equilibrio pK2 de un ácido diprótico H2A

Para elaborar un sistema de equilibrio con pK3 necesariamente se requiere un ácido triprótico
y se deben efectuar la neutralización de dos protones para la forma ácida y tres protones para
la forma salina.

Sistema en equilibrio pK3 de ácido triprótico H3A

2. A partir de las formas ácidas y salinas ya elaboradas: Esto quiere decir que las
sustancias se consiguen como reactivos químicos en sus respectivos envases. En este
caso solo se requiere hacer los cálculos respectivos para tomas cantidades de reactivos
que van a proporcionar las moles que deben existir en forma ácida y en forma salina;
para el caso de sustancias con dos o más constantes de disociación es importante tener
precaución en seleccionar bien estas dos formas.

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Al preparar la disolución de las sustancias, estas deben tener un volumen inferior al
solicitado. Luego se afora hasta el volumen pedido y finalmente se comprueba el pH con el
potenciómetro.
pk1 pK2 pK3
Ácido fosfórico 2,1 7,2 12,3
Ácido cítrico 3,1 4,8 5,4
Ácido acético 4,8 --- ---
Ácido carbónico 6,4 10,3

Ejercicios

Realice los cálculos necesarios para preparar las siguientes soluciones, además describa que materiales,
reactivos y procedimiento a seguir en cada caso:

1. Preparar 250 ml de buffer fosfato con un pH de 2.5 y una concentración de 0.1 M


2. Preparar 100 mL de buffer carbonato con un pH de 6.8 y una concentración de 0.5 M

El propósito de esta práctica es que se pueda preparar una solución amortiguadora a un pH establecido,
por tanto, los cálculos deben ser correctos para que la solución amortiguadora responda a las
características señaladas.

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