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LA CÁMARA DE NEUBAUER, O HEMATOCITOMETRO. Se trata de una gruesa placa de cristal con forma de portaobjetos, de unos 30 x 70 mm y unos 4 mm de grosor. En una cámara simple, la porción central, que es donde se realiza el conteo, está dividida en 3 partes. a de Neubauer.Esta cámara de contaje está adaptada al microscopio de campo claroo al de contraste de fases. e trata de un portaobjetos que tiene doszonas ligeramente deprimidas y que en el fondo de las cuales se hamarcado con la ayuda de un diamante una cuadr!cula de dimensionesconocidas. e cubre la cámara con un cubrecámaras que se adhierepor simple tensi"n super#cial.Luego se introduce el l!quido a contar, al que generalmente se hasometido a una diluci"n previa con un diluyente, por capilaridad entrela cámara y el cubrecámara$ puesto que tiene dos zonas esto permitehacer dos recuentos simultaneamente. %ara contar las células seobserva el ret!culo al microscopio con e l aumento adecuado y secuentan las celulas.&on base en la cantidad de células contadas, conociendo el volumende l!quido que admite el campo del ret!culo, se calcula laconcentraci"n de células por unidad de volumen de la muestra l!quidainicial. II. OBJETIVOS 'prender a utilizar la cámara Neubauer , y similares para elrecuento de levaduras. (ealizar el recuento de )icroorganismos &onocer el funcionamiento general de la cámara neubauer cámara en un microscopio "ptico y se procede al conteo,eligiendo para ello los cuadrados apropiados. e debe elegir uncriterio para de#nir qué células se cuentan y cuáles no, cuandolas mismas quedan sobre uno de los bordes del cuadrado. na vez contadas las células se calcula la concentraci"n en lamuestra original, considerando0 la diluci"n de la muestra hechapara el sembrado, la cantidad de cuadrados considerados, eln7mero de células contadas y el volumen de muestra debajode cada cuadrado. IV. MATERIALES Y MÉTODOS *ata de laboratorio. uantes de late3. )icroscopio compuesto o fotonico. &ámara de Neubauer. V. PROCEDIMENTO %reparaci"n de la muestra0 Lavar la cámara y el cubre con agua destilada y alcohol de FAG. ecar bien con papel suave. %oner el cubreobjetos encima de la cámara.*+ -E&N L +' /E 'L+E)N- 0 +N . N+' % )'(E/'C %reparaci"nde muestras Esterilizar losmateriales Homogenizar removiendo bien el cultivo en donde residen laslevaduras. -omar con pipeta una muestra. %oner la punta de la pipeta en una de las dos ranuras de la cámara ypor capilaridad, las levaduras se distribuirán en la cámara. i se crea una cámara de aire repetir la operaci"n desde el principio. Iijar la cámara de recuento en la platina del microscopio para realizarla observaci"n microsc"pica. Esperar unos minutos antes de contar para que las levaduras sedepositen en la cámara. %reparativos del microscopio0 El enfoque del microscopio se empieza con el objetivo de menoraumento que posteriormente pasaremos a uno de más. e centra elobjetivo del microscopio a ojo en el centro te"rico de la cruz de lacámara, luego se coloca el objetivo lo más cerca posible delcubreobjetos pero sin tocarlo y posteriormente se irá alejándolo hastaque la imagen sea la más clara y n!tida posible. e aconseja trabajara C44 aumentos. %ara contabilizar las levaduras totales se aconseja siempre hacer lamedia de levaduras contenidas en varios grupos de cuadros. Las cámaras tienen C44 cuadrados 7tiles.*+ -E&N L +' /E 'L+E)N- 0 +N . N+' % )'(E/'6 ,bservaci"nenmicroscopio &ontabilizar lasmuestras VI. CONCLUSIONES El conteo en cámara es efectivo, siempre y cuando se realice conuna muestra, para no realizar este conteo con muchas muestras deconcentraci"n desconocida podemos valernos de una curva patr"n,leyendo muestras ya contabilizadas en un espectrofot"metro, as! alleer 'bs. /e una mezcla podemos determinar la concentraci"n porinterpolaci"n en la curva patr"n. 'l obtener diferentes muestras en relaci"n al tiempo con las queconstruimos la curva patr"n también calcular la velocidad dereproducci"n y as! utilizar los ). .en procesos estandarizados. Iactores como la homogenizaci"n de y 8o de la muestra o azultripán, resuspensi"n de la muestra, e3actitud y presi"n de losvol7menes tomados por las micropipetas, y la d estreza de lapersona para contar las células pueden afectan los resultados, porlo que son muy importantes estos aspectos, para obtenerresultados con#ables. e consider" que los factores anterioresfueron controlados adecuadamente dentro de lo posible ;calibraci"ndudosa de las micropipetas< pero lo resultados están dentro de unrango aceptable.*+ -E&N L +' /E 'L+E)N- 0 +N . N+' % )'(E/'A VII. BIBLIOGRAFIA 1.-ecnicas y métodos de laboratorio cl!nico. aonzales de*uitrago J. 544C egunda edici"n. Ediciones )asson. *arcelona,EspaBa. parte +++, pag.5K D5KF5.'natomia patol"gica. teves ', LoMe J. 5441 segunda edici"n alespaBol. Ediciones Harcourt, )adrid EspaBa. &apitulo 16,enfermedades de los ganglios linfáticos, %ag 214D211.

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