UNIVERSIDADE FEDERAL DE SANTA MARIA

CENTRO DE CIÊNCIAS NATURAIS E EXATAS

CURSO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS

Caderno Didático de
Biologia Celular (BLG 138)

Élgion Loreto

Departamento de Biologia -2005

 Sumário:

Página

Introdução 3

Primeira Parte
Uma breve revisão de Biologia Celular 4
A lógica da composição molecular dos seres vivos 4

Estruturas supra-moleculares e a emergência de novas propriedades 12

A organização celular: o conceito de célula mínima 16
Da célula procariótica para a célula eucariótica 24

Segunda Parte
Recomendações de ordem geral a serem observadas no uso do Laboratório. 27
O uso do microscópio óptico (mo) 29
Observando células de epitélio de escamas de cebola 40
Propriedades físico-químicas dos componentes da membrana plasmática. 41
Comparando células procariotas e eucariotas. 42
Um pouco de físico-química: pH 44
Estudando a passagem de solutos e solventes pela membrana plasmática. 47
Fracionamento celular :
centrifugação. 49
cromatografia 51
eletroforese 53
Observação de ciclose e cloroplastos em células de Elodea 54
Observando cílios e sistema de endomembranas 57
Preparação de lâminas permanentes 59
Observação de complexo de Golgi em lâminas permanentes de epidídimo 60
Observação de células musculares estriadas 61
Observação de mitose em ponta de raiz de cebola 62
Atividades de práticas de biologia como componente
de formação pedagógica.
atividade 1 – Biologia na cozinha. 65
atividade 2 - O uso de modelos didáticos e simulações 65

2
INTRODUÇÃO
Biologia Celular (BLG 138) é uma disciplina do primeiro semestre, e ministrada com duas
horas/aula (h/a) teóricas e duas h/a práticas semanais.
Os principais objetivos da disciplina são o dar ao aluno:
- uma visão atual da organização e funcionamento celular, assim como o domínio dos
conceitos básicos dessa área do conhecimento;
- uma visão histórica sobre as principais descobertas que levaram aos paradigmas atuais
dessas ciências;
- instrumentalização para busca de informação e atualização, de forma autônoma nessa
área do conhecimento;
- instrumentalização para o desenvolvimento de atividades didáticas de Biologia Celular,
para todos os níveis de ensino, incluindo as atividades práticas.

O presente Caderno Didático foi escrito para auxiliar a atingir os objetivos descritos acima.
Para tal, ele consta de duas parte:
1a) Uma breve revisão teórica atualizada, porém escrita em nível de ensino médio. Este
texto servirá de base para as primeiras semanas de aula teórica que consistirá de uma revisão
geral de Biologia Celular.
2a) Protocolos das aulas práticas. Estas atividades serão executadas durante as aulas
práticas e cabe ao aluno fazer o registro solicitado nos protocolos. Pensamos ser este material
uma posterior fonte de consulta para a execução de atividades didáticas.

O aprofundamento teórico, que se seguirá à revisão apresentada na primeira parte deste

Caderno Didático será feito a partir da seguinte bibliografia:

CARVALHO, H.F. e RECCO-PIMENTEL, S.M. A célula 2001. Barueri,SP, Ed. Manole, 2001.
JUNQUEIRA , L.C. e CARNEIRO, J. Biologia Celular e Molecular. 7a Ed. Rio de Janeiro,
Guanabara-Koogan, 2000.
DeROBERTIS, E.D.P. e DeROBERTIS, E.M.F. Bases da Biologia Celular e Molecular. 14 ed, Rio
de Janeiro, Guanabara-Koogan, 2003.
COOPER, G.M. A célula, uma abordagem molecular. 2 ed P. Alegre, Artes Médicas, 2001.
ALBERTS, B. e colaboradores. Fundamentos da Biologia Celular. P. Alegre, Artes Médicas,
1999.
ALBERTS, B. e colaboradores. Biologia Molecular da Célula. 4 ed. P. Alegre, Artes Médicas,
2004.

3
 Uma breve revisão de Biologia Celular
Unidade I
A lógica da composição molecular
dos seres vivos:
DE QUE SÃO FEITAS AS CÉLULAS?
Os conceitos primordiais para o
entendimento dos seres vivos são aqueles
relacionados aos tipos de moléculas que os
compõem. Os seres vivos são formados por
células e todas as células são constituídas
pelos mesmos componentes químicos,
organizados em uma “lógica” muito simples:
átomos se agrupam para formar moléculas,
estas, nos seres vivos são as vezes muito
grandes, e por isto chamadas
macromoléculas, que se associam para
formar as organelas e demais partes da
célula. (Figura 1).
Figura 1. Organização das estruturas
celulares a partir dos átomos.
1. A água e suas propriedades especiais
A água é a molécula mais abundante
nos sistemas vivos e perfaz 70%, ou mais, do
peso da maioria das formas de vida. Sempre
admitimos a água como um líquido inerte,
suave, conveniente para muitos propósitos
práticos. Embora seja quimicamente estável,
ela é uma substância com propriedades
incomuns. Na verdade, a água e seus
produtos de ionização, os íons H+ e OH-,
influenciam profundamente nas propriedades
de muitos componentes importantes das
células, como as enzimas, as proteínas, os
ácidos nucléicos e os lipídios.
de
A molécula da água é eletricamente
neutra, mas o arranjo dos átomos de
hidrogênio e oxigênio em forma de V torna
essa molécula um dipolo elétrico. Pela
presença dos dois pólos (+ e -) a água é dita
um solvente polar.
A água é melhor solvente do que a
maioria dos líquidos comuns. Quase todos os
sais minerais, podem ser dissolvidos na água
sob forma de íons, como por exemplo, os
íons de Na+, Cl -, K+, Mg++ . Estes íons, em
especial, são de fundamental importância no
controle da quantidade de água nas células
(pressão osmótica), e atuam também no
funcionamento de muitas enzimas e na
excitabilidade das células.
As moléculas orgânicas, que são as
moléculas mais importantes na constituição e
4
funcionamento dos seres vivos, podem que as moléculas biológicas podem ser
apresentar três diferentes comportamentos organizadas em apenas 4 classes. Além
com relação a água: a) são solúveis (se disso, deve-se levar em conta que as
solubilizam totalmente na água, como a moléculas orgânicas são formadas por,
maioria dos glicídios); b) são insolúveis (por aproximadamente, 30 componentes básicos.
exemplo, as gorduras neutras), ou c) são Entender esta classificação é fundamental
anfipáticos, isto é, possuem uma parte da para a compreensão da química da vida.
molécula que se dissolve na água e outra
As quatro classes de moléculas
que é insolúvel. Temos,como exemplo desse
orgânicas que estão presentes nas células
último tipo, os lipídios e proteínas que
são as seguintes:
compõem as membranas.
A) Glicídios (também chamados de
A forma e propriedades funcionais
açúcares ou carboidratos)
que as macromoléculas vão apresentar são
B) Ácidos nucléicos
profundamente influenciadas pelo modo com
C) Proteínas
que elas interagem com a água. Sendo
D) Lipídios (gorduras)
assim, esse líquido “inodoro, incolor e sem
As três primeiras classes formam
gosto” desempenha, no funcionamento
MOLÉCULAS POLIMÉRICAS, isto é , são
celular, um papel muito importante.
moléculas compostas por “unidades que se
repetem”, denominadas MONÔMEROS.
2. As moléculas orgânicas
Em uma primeira observação,
podemos constatar que os seres vivos são
quimicamente muito complexos. Suas
moléculas orgânicas são “gigantescas”
quando comparadas as moléculas “dos seres
brutos” e, além disso, são extremamente
variáveis. Por exemplo, um organismo bem
simples como uma bactéria, pode ter mais de
2.000 proteínas diferentes. Um ser humano
Figura 2. Formação de polímeros
deve ter em torno de 100.000 tipos de
proteínas.
Podemos resumir a composição das
Como poderemos estudar
macromoléculas orgânicas dos seres vivos
quimicamente estes seres, se, considerando
na Figura 3, em que encontramos os átomos
somente as proteínas, temos uma
que compõem cada classe de
diversidade tão grande ?
macromolécula, os monômeros de cada
Esta tarefa, que aparentemente é
classe e o polímero formado.
impossível, torna-se facilitada pelo fato de

5
 Devemos lembrar que na Figura 3 as No grupo dos glicídios, o principal
moléculas poliméricas aparecem formadas monômero é a glicose. Nas proteínas, os
por poucos monômeros, mas na realidade, monômeros são 20 diferentes aminoácidos
geralmente, elas são formadas por milhares e, nos ácidos nucléicos, são “basicamente”
deles. 8 nucleotídeos. Somando-se a estes alguns
tipos predominantes de lipídeos, teremos
então, aproximadamente os 30- 40
componentes químicos básicos, e suas
variações, que são predominantes nos
seres vivos.

2.1 PROTEÍNAS
As proteínas são as moléculas
responsáveis pelo funcionamento da
célula.

Praticamente todas as atividades da

Figura 3. Classes de moléculas presentes
nas células
Como podemos ver na Figura 3, seis
principais tipos de átomos vão formar todas
as moléculas orgânicas dos seres vivos.
Estes seis elementos se organizam em
aproximadamente 30 –40 tipos de moléculas
(os monômeros) que podem ser classificados
por sua estrutura química em 4 grupos.
célula e, portanto, de um organismo são
executadas por proteínas.
O transporte de substâncias é
realizado por proteínas, como por exemplo, a
HEMOGLOBINA que transporta oxigênio. O
movimento das organelas no interior da
célula, e mesmo o movimento proporcionado
pelos músculos, como um todo, é resultado
da interação de proteínas como a TUBULINA
e DINEIRA; a ACTINA e a MIOSINA. A
proteção do nosso corpo contra os
microrganismos que causam doenças é dada
pela ação de ANTICORPOS, que são
proteínas. Todas as reações químicas que,
constantemente, estão ocorrendo em nosso
organismo, são realizadas por proteínas
especiais chamadas de ENZIMAS. Enfim,
todo o funcionamento do nosso organismo se
dá graças à atividade das PROTEíNAS.
Cada uma dessas funções é
realizada por uma proteína diferente. Existe,

6
no corpo humano, cerca de 100.000 tipos
diferentes de proteínas, cada uma sendo
especialista em uma função.
As proteínas são construídas a partir
de 20 tipos de aminoácidos, que diferem
entre si através de uma parte da molécula,
chamada de radical.
estrutura primária . A substituição de um
único aminoácido em uma cadeia protéica,
provoca uma alteração na estrutura primária
dessa proteína. A conseqüência da
modificação pode ser grave, resultando em
uma nova proteína que não funcione
corretamente dentro da célula.
Chamamos de estrutura secundária a
interação entre os aminoácidos vizinhos um
uma cadeia polipeptídica. A interação entre
radicais + e – ou hidrofóbicos e hidrofílicos
fazem com que parte da cadeia se organize
em α hélice ou pregas (folhas) β.
Na Figura 5, está representada a
estrutura primária da ribonuclease bovina, que
é uma enzima que degrada o RNA. Na
estrutura primária, está explícito apenas qual é
a ordem dos aminoácidos que compõem uma
proteína, ou seja, qual é o primeiro, o segundo,
o terceiro... até o último aminoácido.

Figura 4 - Os 20 aminoácidos que compõe

as proteínas

As proteínas são formadas pela

união de 100 ou mais aminoácidos. O que vai
diferenciar uma proteína de outra é a
seqüência dos aminoácidos que a compõem.
Como existem 20 diferentes tipos desses
aminoácidos e as várias proteínas podem ter
comprimentos diferentes, temos uma
Figura 5. Estrutura primária da ribonuclease bovina
diversidade muito grande nessa classe de
macromoléculas (figura 4). Por exemplo, a A estrutura terciária de uma
enzima ribonuclease bovina é formada por proteína, por sua vez, é aquela que
124 aminoácidos, já a albumina do soro representa como é a sua forma
humano é formada por 528 aminoácidos. tridimensional. O formato da mioglobina, ou
A seqüência de aminoácidos que seja, sua estrutura terciária é representada
compõe uma proteína, recebe o nome de na da Figura 6. A estrutura terciária das

7
proteínas depende da seqüência
aminoácidos (estrutura primária).
Figura 6. Estrutura secundária
terciária da mioglobina.
Forma e Função das Proteínas
Para todo o lado que olhamos,
podemos observar que a forma dos objetos é
que ditam a sua função. Na Figura 7, temos a
representação de uma tesoura e de uma
colher. É muito difícil cortar um pano com
uma colher, ou comer sopa com uma
tesoura. A forma desses objetos é que
permite sua função.
de O modo como uma proteína irá
desempenhar a sua atividade dependerá de
sua forma tridimensional, ou seja, depende
de sua estrutura terciária, que em última
análise depende da seqüência de
aminoácidos que compõe a proteína
(estrutura primária).
A troca, acréscimo ou retirada de um
aminoácido PODE ocasionar alterações na
estrutura dessa proteína, alterando sua forma
e, portanto, sua função. A troca de um
aminoácido na proteína ribonuclease, por
exemplo, a substituição do terceiro
aminoácido (treonina) por uma glicina
resultará em uma proteína com outra forma
e
tridimensional e incapaz de executar sua
função.
Somos formados por aproximadamente 100
trilhões de células. As células são estruturas
muito organizadas cujo funcionamento é,
essencialmente, realizado por uma classe de
moléculas, as proteínas. São as proteínas
que irão dar forma as estruturas celulares,
transportar substâncias, realizar as reações
químicas necessárias a sobrevivência e
crescimento da célula, enfim são elas que
irão pôr as células a funcionar. Existem
milhares de proteínas diferentes em cada
célula. Cada proteína está envolvida em uma
função ou atividade específica. Diferentes
células apresentam proteínas diferentes, o
que explica as variações nas formas e
funções observadas em cada tipo celular

Portanto, para entender o

funcionamento celular temos que olhar com
Figura 7- Relação entre forma e função atenção para as proteínas. As proteínas são
cadeias de aminoácidos. Imagine uma

8
proteína como um colar de pérolas, cada
aminoácido sendo uma pérola. Existem 20
diferentes tipos de aminoácidos, o que
poderia ser representado em nosso colar por
pérolas de 20 cores diferentes. O número de
pérolas e a seqüência nas cores das pérolas
(aminoácidos) variam de proteína
proteína, como nos dois "colares" vistos na
Figura 8.
Figura 8: Diferentes proteínas
podem possuir diferentes números de
aminoácidos (como no exemplo aqui temos
um "colar" com 11 e outro com 9 contas). As
proteínas diferem também com relação a
seqüência de cores das contas do colar
(seqüência de aminoácidos).
O número de aminoácidos varia
de uma proteína para outra, as menores
tem em torno de 50 aminoácidos e as
maiores perto de 20.000. As proteínas se
dobram formando uma estrutura
tridimensional típica, ou seja
proteína tem uma forma definida que
depende da seqüência de aminoácidos
que possui. É essa forma que vai ser
responsável pela função da proteína.
Observe a sua volta diferentes
objetos e veja como a função de cada
um deles está relacionada à sua forma.
É a estrutura tridimensional que permitirá
a uma enzima (proteína que ativa
reações químicas) encaixar-se
perfeitamente ao seu substrato e alterá-
lo. Vamos a um exemplo: o fator VIII é
para
uma proteína de 2.531 aminoácidos e
está envolvida na coagulação sanguínea.
A ausência ou a redução da atividade
dessa proteína no sangue causa a
hemofilia clássica (hemofilia A), condição
em que a pessoa pode morrer devido à
hemorragia intensa e de longa duração,
desencadeada por qualquer pequeno
ferimento.
Há casos em que os hemofílicos
têm o fator VIII no sangue, porém, essa
proteína apresenta alguns dos seus
aminoácidos trocados ou faltando, e isso
causa uma alteração no formato
tridimensional dessa proteína, impedindo
que ela se ligue com as outras proteínas
envolvidas na coagulação sanguínea, ou
dificultando essa ligação.
Sabe-se também que algumas
substituições de aminoácidos na proteína
podem ter efeitos menos drásticos,
cada
provocando apenas uma pequena
alteração de forma do fator VIII, sem
comprometer o funcionamento de modo
muito intenso. Neste caso, a pessoa
pode ter um tempo de coagulação um
pouco maior do que a maioria dos
9
indivíduos, sendo, no entanto, normal e As Proteínas na Nossa Dieta
não hemofílica. As proteínas, enquanto
macromoléculas, não são essenciais na dieta
humana. Alguns monômeros que formam as

Enzimas proteínas é que são considerados essenciais

As enzimas formam uma classe
especial de proteínas que tem como função
catalisar (acelerar) as reações químicas.
Cada enzima é especializada em
acelerar uma reação específica.
exemplo, a enzima amilase age sobre o
amido e o degrada até glicose. O amido, que
é a substância que vai ser alterada durante a
reação química, recebe o nome
SUBSTRATO.
Na enzima, existe uma região que se
liga especificamente ao substrato e a esta
região chamamos de SÍTIO ATIVO. Assim,
após a interação do substrato com o sítio
ativo, ocorre a reação química, sendo
liberado o PRODUTO da reação, que no
caso da amilase, é a glicose.
As enzimas não se alteram com a
reação química que promovem, saindo
intactas do processo, podendo ir localizar
mais substrato para catalisar nova reação
(Ver Figura 9).
para nutrição humana.
Os aminoácidos chamados de essenciais são
aqueles que nossas células não conseguem
produzir.
As proteínas presentes nos alimentos
Por
são degradadas no aparelho digestivo. Essa
degradação corresponde à separação da
cadeia polipeptídica em monômeros. Os
aminoácidos liberados são, então, levados
de
através do sangue para todas as células do
nosso corpo. Uma vez no interior de nossas
células, esses aminoácidos serão utilizados
para compor as nossas proteínas e fazer
funcionar o nosso organismo.
As proteínas de um bife eram
importantes no músculo da vaca. As
proteínas do ovo seriam importantes para o
pintinho que iria se desenvolver naquele ovo.
Se essas proteínas entrassem intactas em
nossa circulação, de nada adiantaria, pois
não estariam aptas a desempenhar as
funções que as nossas células devem
executar. Além do mais, como sabemos, toda
proteína estranha serve como antígeno, e
provavelmente, a absorção de uma proteína
de vaca ou de galinha provocaria uma reação
alérgica. Nosso sistema imune reconheceria
essas proteínas como estranhas ao

Figura 9 Esquema de uma reação enzimática organismo e criaria anticorpos contra elas.
As proteínas são moléculas muito
grandes. Por exemplo, o colágeno é
composto por aproximadamente 3.000

10
aminoácidos. Essa proteína fibrosa é o Resumindo o que foi apresentado
principal componente da matriz extracelular e sobre proteínas, podemos dizer que:
do tecido conjuntivo. Se considerarmos que a
molécula da água (que é bem menor que a
O funcionamento de um organismo
de um aminoácido) tem dificuldade de depende de suas proteínas.
atravessar a pele, como poderia ser
absorvida uma molécula de 3.000 O funcionamento de cada proteína
aminoácidos? Mas muitos cremes “vendem” depende de sua forma.
a idéia de que podemos “repor” o colágeno
que está faltando em nossa derme, usando A forma de uma proteína depende da
colágeno de galinha. Na verdade essa seqüência dos aminoácidos que a compõem.
proteína não consegue atravessar a pele e
A questão agora é explicar:
chegar na derme, onde normalmente está
Como o organismo estabelece seqüência
depositada. Caso isso acontecesse,
de aminoácidos que deve estar presente
provocaria uma reação alérgica (seria um em cada proteína?
antígeno).
Os aminoácidos são divididos em A seqüência de aminoácidos das
essenciais, isto é, aqueles que precisam proteínas “está escrita” (codificada) nos
fazer parte de nossa dieta, pois não temos a genes. Os genes são compostos de outro
capacidade de sintetizá-los e não essenciais tipo de molécula orgânica, os ácidos
(aqueles que podemos sintetizar). nucléicos.
A quantidade de proteínas
necessárias na dieta varia conforme a idade 2.2.ÁCIDOS NUCLÉICOS
e o estado fisiológico. Crianças, gestantes e Os ácidos nucléicos também são
lactantes necessitam mais proteínas do que macromoléculas poliméricas, formadas por
adultos. Um adulto jovem, com intensa monômeros chamados de nucleotídeos.
atividade física, deve consumir em torno de Cada nucleotídeo é formado por uma base
56g diária de proteínas. Os alimentos de nitrogenada, um açúcar (ribose ou
origem animal, como carne, leite e ovos são desoxirribose) e fosfato (Figura 10):
ricos em proteínas. Os vegetais também têm
proteínas porém em quantidades menores.
Por exemplo, uma fatia de pão de trigo
integral possui 2 gramas de proteína, mas
como essa é uma proteína de baixa
qualidade, um adulto jovem precisaria comer
72 fatias diárias para obter as 56 g de
proteínas.
Figura 10. Nucleotídeo

11
 Estes monômeros se unem para
formar dois tipos de polímeros, o DNA (ácido
desoxirribonucléico) e o RNA (ácido
ribucléico).
Os ácidos nucléicos são formados
pela união de nucleotídeos (Figura 11).
Figura 11- Molécula de ácido nucléico
1) Capacidade de replicação. Com o auxílio
de enzimas, a dupla hélice de DNA se abre,
formando fita simples e pode ser duplicada,
originando cópias exatamente iguais a
molécula original.
2) Capacidade de conter a informação da
seqüência de aminoácidos que compõe as
proteínas. As seqüências de nucleotídeos do
DNA determinam a estrutura primária das
proteínas.

Na molécula de DNA encontramos as

seguintes bases: adenina (A); citosina (C);
guanina (G) e timina (T) e são chamados de
desoxiribonucleotídeos, porque o açucar é a
desoxiribose. A molécula de DNA é formada
por uma cadeia dupla, tendo algumas
características importantes. Sempre
existir uma adenina em um lado da cadeia,
teremos uma timina no outro e sempre que
ocorrer uma citosina em um lado da cadeia,
teremos uma guanina no outro. Chamamos
isto de complementariedade das bases, ou
seja, as timinas sempre fazem par com as
adeninas e as citosinas sempre pareiam com
as guaninas.
Figura 12. Estrutura da molécula de DNA
mostrando a complementariedade das bases A=T;
C=G.
Duas propriedades importantes
resultam da estrutura do DNA:
que
Figura 13- Replicação da molécula de DNA
O RNA é uma molécula formada por uma
única cadeia, ou seja, é fita simples. Os
nucleotídeos do RNA são chamados de
Ribonucleotídeos porque o açúcar é a ribose.
No RNA a base uracila (U) substitui a Timina
do DNA. Os diferentes tipos de RNAs são
extremamente importantes para fazer com
que a informação genética contida no DNA
seja traduzida em uma seqüência de
aminoácidos, originando as proteínas (será
visto adiante).
2.3. GLICÍDIOS
Os glicídios, também chamados de
carboidratos ou açúcares são polióis de
aldeídos ou cetonas, divididos em:

12
a) Monossacarídeos - como por exemplo a As principais funções
glicose e a frutose. Os monossacarídeos desempenhadas pelos glicídios são:
podem unir-se formando dissacarídeos. Por -ENERGÉTICA: são fonte de energia
exemplo, a sacarose (açúcar de cana) é a para a célula (ou reserva de energia)
união de uma frutose e uma glicose. A - ESTRUTURAL: formam as paredes
maltose é formada pela união de duas das células vegetais
moléculas de glicose e a lactose (açúcar do -RECONHECIMENTO: estão
leite) é formada pela união de galactose e envolvidos no processo de reconhecimento
glicose. célula-célula nos tecidos dos animais
pluricelulares, através do glicocalix.

2.4. LIPÍDIOS
Os lipídios ou gorduras
desempenham importante papel na estrutura
e função celular. Há várias classes de
lipídios e cada uma possui funções biológicas
específicas.
Os ácidos graxos são a unidade
fundamental da maioria dos lipídios e junto
com os triglicerídios constituem as principais
gorduras neutras que funcionam como
reservas energéticas.

Figura 14 -Exemplo de alguns

monossacarídeos

b) Polissacarídeos - são formados pela

união de vários monossacarídeos (são
POLÍMEROS DE GLICOSE) Os três Fig 15 - Exemplos de ácidos graxos.
polissacarídeos mais importantes são o
AMIDO (reserva de energia dos vegetais), o Já os fosfolipídios e os
GLICOGÊNIO (reserva de energia dos esfingolipídios são lipídios derivados dos
animais) e a CELULOSE (constituinte da triglicerídios. Nesses lipídios, uma das
parede das células vegetais). A diferença cadeias de ácido graxo é substituída por uma
entre esses polissacarídeos está na ligação estrutura química POLAR. Desta forma,
química que une as glicoses.

13
estas moléculas terão uma parte polar
(hidrofílica) e uma parte apolar (hidrofóbica)
Os fosfolipídios e esfingolipídios são
componentes fundamentais das membranas
biológicas (será visto adiante).
Outra classe de lipídio é a dos
esteróides que podem ter função estrutural,
como o colesterol que é um componente da
membrana plasmática. Outra função
desempenhada pelos esteróis é a hormonal,
como por exemplo a testosterona,
progesterona.
ESTRUTURAS SUPRA-MOLECULA-
RES E A EMERGÊNCIA DE NOVAS
PROPRIEDADES
Um conceito importante para
entendimento dos seres vivos é o de
“propriedades emergentes”. Vejamos um
exemplo bem simples: um professor
demonstra a ação enzimática da amilase
salivar, através de um experimento muito
comum, que pode (e deve) ser realizado em
sala de aula. Nesse experimento, uma
solução de Maizena é fervida e distribuída
em dois frascos. Em apenas um dos frascos
adiciona-se um pouco de saliva e ,depois,
uma gota de lugol (ou solução de iodo) é
acrescentada em ambos os frascos.
Neste caso, a alteração de cor que
se observa no frasco é explicada pelo fato da
enzima presente na saliva ter
PROPRIEDADE de degradar o amido da
Maizena. Essa é uma propriedade catalítica
muito específica, a amilase desdobra o
amido em glicose.
Se ao invés de acrescentar saliva na
mistura, acrescentássemos os aminoácidos
que compõem a amilase, iria ocorrer a
reação de degradação do amido? É claro que
não. Uma pilha de tijolos não é o mesmo que
uma casa. Uma mistura de aminoácidos
isolados, não possui as propriedades da
proteína que poderia ser formada pela união
desses aminoácidos.
Para que uma proteína desempenhe
uma função definida, é necessário que ela
tenha uma forma específica. A estrutura
tridimensional de uma proteína é resultado
da união de aminoácidos em uma seqüência
também específica. Portanto, é a ligação
sucessiva de um aminoácido ao outro que irá
determinar a forma final de uma proteína e
o
sua capacidade funcional.
As macromoléculas apresentam
propriedades novas que não estão presentes
nos seus componentes isolados. A amilase,
por exemplo, tem a capacidade de degradar
o amido, porém esta propriedade não está
presente em nenhum dos aminoácidos que
compõem a amilase. Quando, pela união de
aminoácidos em uma seqüência específica, a
macromolécula amilase se forma, EMERGE
uma nova propriedade (capacidade de
degradar a amido) que não está presente nos
seus componentes.
As propriedades emergentes são um
atributo da forma esterioquímica da
a
macromolécula. Do mesmo modo que a
forma da tesoura confere a esse instrumento
uma propriedade nova (capacidade de
14
cortar), a forma da proteína amilase lhe Os ribossomos são estruturas
permite catalisar a reação amido➜glicose. capazes de auto-montagem, isto é, basta
Muito do funcionamento celular colocarmos todos os componentes juntos e,
depende das propriedade emergentes de em condições físico-químicas apropriadas,
suas macromoléculas. Mas as células não automaticamente as sub-unidades do
são formadas apenas de macromoléculas, ribossomo montam-se. É possível, portanto,
elas possuem também ESTRUTURAS desmontar e remontar os ribossomos em
SUPRAMOLECULARES. tubos de ensaio. E sempre, após a auto-
Estruturas supramoleculares são montagem, uma PROPRIEDADE nova
estruturas formadas por várias EMERGE : “os ribossomos são capazes de
macromoléculas. Um exemplo de estrutura fazer síntese de proteínas”.
supramolecular é o ribossomo (Figura 16). Todas as organelas intracelulares
Cada sub-unidade do ribossomo é formada são estruturas supramoleculares. A
por várias macromoléculas. A sub-unidade mitocôndria, por exemplo, é formada por um
maior é formada por 3 diferentes RNAs grande número de proteínas, lipídios, DNA,
ribossômicos: um com 120 nucleotídeos RNA... que formam suas membranas, os
(nts), outro com 160 nts e o terceiro com seus ribossomos, corpúsculos elementares,
4700 nts. Além dos RNAs a sub-unidade etc... Estas macromoléculas, ao se
maior apresenta 49 diferentes proteínas associarem, formam a mitocôndria que
(denominadas L1, L2, L3, ... até L49). Na possui propriedades novas que não estão
sub-unidade menor temos apenas um rRNA presentes nos componentes isolados. Por
de 1900 nts associado a 33 proteínas exemplo, a síntese quimiosmótica do ATP só
(denominadas S1, S2, ..até S33). é possível graças à estrutura da mitocôndria
que é dada pela totalidade de seus
componentes associados, e não pode ser
realizada apenas por um ou outro
componente da mitocôndria. Este é outro
exemplo de uma propriedade emergente, que
só se manifesta a partir do surgimento de
uma estrutura com organização
supramolecular.

Figura 16 .Ribossomo dos eucariontes

15
UNIDADE II dependia exclusivamente do microscópio
óptico e de alguns corantes. Neste período, o
que mais chamava a atenção, quando se
A ORGANIZAÇÃO CELULAR observava uma célula, era a presença do
O tema de estudo da Biologia, a núcleo. Posteriormente, verificou-se que, no
VIDA é uma propriedade emergente de uma núcleo, estavam os cromossomos e inferiu-
supraestrutura: a célula. A Vida originou-se se que estes eram depositários dos genes.
na Terra a +/- 3.5 bilhões de anos atrás Assim, a idéia de que, no núcleo,
quando “montaram-se” as primeiras células. estava o controle do funcionamento celular é
O CONCEITO DE CÉLULA MÍNIMA relativamente antiga, porém por muito tempo
A definição mais comum para célula não foi possível saber exatamente como
é: “unidade morfo-fisiológica dos seres esse controle era exercido.
vivos”. Mas o que caracteriza uma célula?
Quais são os componentes MÍNIMOS para
que uma estrutura possa ser considerada
uma célula?
De uma forma geral, quando
perguntamos como é constituída e como
funciona uma célula, a resposta mais comum
é:
“...formada por membrana, citoplasma e Figura 17. Aspecto geral da organização
núcleo. A membrana reveste a célula, celular de um procarionte.
fazendo as trocas com o meio, o
citoplasma contém as organelas CARACTERÍSTICAS BÁSICAS DE UMA
responsáveis pelo funcionamento da CÉLULA (uma concepção atual)
célula e o núcleo controla este Se a descrição de uma célula como
funcionamento.” um conjunto de membrana, citoplasma e
Devemos considerar, entretanto, dois núcleo é uma visão originária do fim do
aspectos importantes: século passado, quais seriam as
1) As bactérias e demais procariontes são características da organização celular em
organismos celulares e não possuem núcleo; uma visão contemporânea?
2) Quando dizemos que o núcleo “controla” o Para responder essa questão temos
funcionamento celular, não fornecemos que pensar em características que sejam
nenhuma idéia de como isto ocorre. comuns a todas as células, sejam elas
Esta visão da constituição e procarióticas e eucarióticas.
funcionamento celular é originária do fim do São quatro as partes essenciais que
século passado e, nessa época, o estudo da podemos encontrar em toda célula:
estrutura e do funcionamento celular

16
① Membrana - delimita a célula, separando ambiente. Estas trocas são controladas pela
os demais elementos celulares do meio membrana plasmática. Por isto a principal
ambiente e regulando as trocas da característica da membrana é a
célula com o meio; PERMEABILIDADE SELETIVA.
② Maquinaria metabólica – conjunto de Assim, a membrana é permeável
enzimas e proteínas capazes de utilizar porque deixa passar substâncias através
a matéria e energia do meio ambiente dela, porém, faz isso seletivamente, ou seja,
para realizar as funções celulares; escolhendo o que deve entrar e sair da
③ Informação genética - informação de célula.
como, quando e onde montar as Para se entender como a membrana
proteínas da máquina metabólica e realiza esta função de permeabilidade
demais proteínas estruturais da célula seletiva, temos que estudar como a
④ Maquinaria de síntese protéica – é membrana é constituída quimicamente e
constituída por ribossomos, mRNAs e como estes componentes atuam.
tRNAs capazes de transformar a Os lipídios da membrana são
informação genética em maquinaria diferentes dos lipídios que são usados como
metabólica. reserva de energia (ácidos graxos e
Estes componentes celulares podem triglicerídios). Enquanto os lipídios
ser facilmente reconhecidos nos energéticos são insolúveis em água, os
Mycoplasma, um tipo de bactéria, que são os lipídios que compõe a membrana (chamados
seres celulares estruturalmente mais simples de fosfolipídios, esfingolipídios e outros) são
que conhecemos (Ver Figura 17). ANFIPÁTICOS, ou seja, têm uma parte da
molécula que é eletricamente carregada e
Vamos, a seguir, tratar de cada uma hidrofílica (solúvel em água), e outra parte
dessas partes que compõem o que podemos que é hidrofóbica (insolúvel em água) -
chamar de uma célula mínima. Figura 18.

MEMBRANA CELULAR

O que delimita a célula do resto do

universo é uma fina membrana LIPO- Figura 18- .Estrutura de um

PROTÉICA chamada membrana plasmática Fosfolipídio

ou membrana celular.
A célula não pode se isolar do meio Tendo esta característica anfipática,

em que se encontra, precisando manter uma os fosfolipídios, quando colocados em água,

constante troca de matéria e energia com o vão ter uma organização típica, formando

17
finas membranas em BICAMADAS, conforme proteínas da membrana também terão uma
representado na Figura 19. parte hidrofílica e uma parte hidrofóbica.

Figura 19 – Formação de bicamadas lipídicas

quando os fosfolipídios são colocados em água.

Desta forma, sempre que colocarmos

lipídios anfipáticos em água, formar-se-ão Figura 20. Estrutura das proteínas
“bolhas” e a água estará tanto do lado de da membrana
dentro da “bolha”, quanto do lado de fora
(Figura 19).
A água e todas as substâncias
hidrossolúveis, como os açúcares,
Por terem tanto regiões hidrofóbicas como
aminoácidos, nucleotídeos, por não serem
regiões hidrofílicas, as proteínas anfipáticas
solúveis em lipídios, não podem passar pela
vão se intercalar entre os fosfolipídios. (figura
camada hidrofóbica da membrana.
20 e 21)
O Modelo do MOSAICO
FLUÍDO das membranas biológicas explica
Como, então, a membrana realiza a sua
como se organizam e funcionam essas
função de permeabilidade seletiva?
membranas. Segundo este modelo, temos
Só existe permeabilidade seletiva
uma bicamada de lipídios com proteínas
graças à ação do outro componente das
intercaladas nesta bicamada.
membranas: as PROTEÍNAS. Como
As partes hidrofílicas dos
sempre, as atividades de funcionamento dos
fosfolipídios e das proteínas ficam voltadas
organismos estão relacionadas às proteínas.
para as superfícies interna e externa da
As proteínas das membranas
membrana em contato com a água. As partes
também são ANFIPÁTICAS, ou seja, elas
hidrofóbicas dos fosfolipídios e das
têm uma parte formada por aminoácidos
proteínas ficam na região interior da
polares (com carga elétrica) e outra parte
membrana (figura 21)
constituída preponderantemente com
aminoácidos apolares. Desta forma, as

18
 TRANSPORTE DE SUBSTÂNCIAS PELA
MEMBRANA
As substâncias passam pela
membrana de três formas diferentes:
1) Difusão simples: Algumas substâncias
como o O2, CO2, álcool e éter, por serem
solúveis tanto em água como em gorduras,
podem passar diretamente pelos
fosfolipídios. Para estas substâncias, a
Figura 21- Modelo do MOSAICO membrana não constitui uma barreira, e suas
FLUIDO da membrana biológica moléculas vão difundir de onde elas estão
mais concentradas para aonde estão menos
Este modelo é chamado de concentradas (1 na Figura 22).
MOSAICO, porque os componentes da
membrana se organizam como um mosaico
(associação de pequenas peças que se
encaixam ou sobrepõe para formar uma
estrutura). A denominação de Mosaico
FLUÍDO é justificada pelo fato de seus
componentes (fosfolipídios e proteínas) não
serem fixos na membrana, podendo
apresentar movimentos laterais.
Podemos resumir a atuação dos Figura 22 – Passagem de substâncias
componentes da membrana da seguinte através da membrana
forma:
a) OS FOSFOLIPÍDIOS atuam como uma A maioria das substâncias não pode
barreira, impedindo que as substâncias que atravessar livremente pela membrana e
estão dentro da célula saiam e evitando que precisam passar pelas proteínas. Essa
as substâncias que estão fora da célula passagem pode ocorrer de duas maneiras:
entrem. 2) Transporte passivo ou difusão
b) AS PROTEÍNAS funcionam como facilitada. O transporte passivo ocorre,
“portões” (tecnicamente chamados de quando uma substância está mais
CARREADORES ou POROS), por onde concentrada de um lado da membrana do
passam as moléculas; são as elas que que do outro, e há interesse da célula que
reconhecem as substâncias que devem esta substância passe pela membrana.
entrar ou sair da célula. Proteínas específicas, chamadas de
CARREADORES, permitem que essas

19
substâncias atravessem (geralmente através
de aberturas ou canais nas próprias NA INTERNET:
proteínas). Entenda melhor a membrana celular comparando-
No caso do transporte passivo, não a com bolhas de sabão:
há gasto de energia, porque é a favor do www.sbbq.org.br/revista/artigo.php?artigoid=41
gradiente de concentração ( 2 na Figura 22).
3) Transporte Ativo: Quando é do interesse
da célula transportar substâncias contra um
gradiente de concentração, (ou seja, de onde
tem pouco de uma substância para aonde já
existe bastante dessas mesmas moléculas) a
célula precisa gastar energia para fazer esse
transporte (3 na Figura 22).
Como podemos ver, somente
moléculas não muito grandes podem entrar e
sair da célula pelos carreadores. Moléculas
grandes como as proteínas, ácidos nucléicos BRINCAR COM BOLHAS DE SABÃO PODE
ou polissacarídeos, somente em condições AJUDAR A ENTEDER A
muito especiais podem passar pela
membrana.
Moléculas grandes
(macromoléculas), assim como estruturas
ainda maiores como vírus ou células não
passam diretamente pela membrana celular,
e só entram na célula através de
mecanismos de TRANSPORTE DE MASSA,
chamado endocitose (fagocitose e
pinocitose). Mas vale ressaltar que através
da fagocitose e pinocitose as substâncias ou
estruturas entram na célula, mas não
“passam a membrana” pois entram MEMBRANA SEGUNDO O MODELO
envolvidas em membrana. MOSAICO-FLUIDO

20
MAQUINARIA METABÓLICA os em energia ou em outras moléculas
estruturais da célula; as proteínas motoras

O que permite que uma lacto- que produzem movimento dos componentes

bactéria (bactéria do iogurte) se desenvolva celulares, etc...

tão bem no leite, transformando-o em iogurte No caso específico do exemplo que

e uma aceto-bactéria se procrie estamos trabalhando, a aceto-bactéria terá

maravilhosamente no vinho, transformando-o as proteínas de membrana para retirar do

em vinagre? Se colocarmos a bactéria do vinho os “nutrientes” apropriados. No interior

vinho no leite, ela não vai se desenvolver, o da célula, enzimas transformarão estes

mesmo acontecendo com a bactéria do nutrientes em mais macromoléculas de

iogurte, quando colocada no vinho. Por que aceto-bactéria. Enfim, possibilitam o “sonho

isto acontece? primordial” de toda aceto-bactéria: “tornar-se

Cada célula, mesmo simples como duas aceto-bactérias...”

uma bactéria, possui enzimas e outras

proteínas que a capacita a desempenhar as INFORMAÇÃO GENÉTICA
funções para as quais está adaptada. A
lacto-bactéria possui enzimas para quebrar a Porque uma aceto-bactéria colocada
lactose e as proteínas do leite. Já a aceto- no leite não produz as enzimas necessárias
bactéria possui enzimas para transformar o para usar o açúcar e as proteínas do leite
álcool em ácido acético e usar outros como nutrientes? Ou, colocando a mesma
nutrientes encontrados no vinho. Estas duas questão em um outro exemplo: sabemos que
bactérias possuem diferentes maquinarias a celulose é um polissacarídeo formado de
metabólicas que as tornam adaptadas para moléculas de glicose. No entanto, se por um
explorar recursos diversos. motivo qualquer só tivéssemos papel
As diferenças que ocorrem no (celulose) para comer, acabaríamos
funcionamento entre células são explicadas morrendo de inanição por falta de energia,
pela variação nas proteínas existentes nelas. embora estivéssemos ingerindo um polímero
Chamamos de maquinaria construído com “glicose”. Outros organismos,
metabólica o conjunto de enzimas e como cavalos, vacas ou baratas são capazes
proteínas que vão ser responsáveis pelo de aproveitar a glicose presente na celulose
funcionamento da célula (ou seja, pelo do papel. Nos dois exemplos, o que falta é a
metabolismo celular). Por exemplo, as informação genética de como fazer as
proteínas da membrana que captam enzimas necessárias para aproveitar uma
nutrientes do meio externo e os transportam determinada molécula como fonte de
para o interior da célula; as enzimas que vão nutriente.
transformar estes nutrientes, através de A informação genética está
complexas rotas bioquímicas, transformando- armazenada nas células sob forma de ácidos

21
nucléicos. Para todas as células seqüência de DNA que é essencial para uma
(procarióticas ou eucarióticas), a função específica. Três tipos de genes são
macromolécula informacional é o DNA. reconhecidos:
Somente alguns vírus apresentam suas
informações armazenadas sob forma de 1) genes que codificam para
RNA. proteínas. São transcritos para RNA
A informação genética total, mensageiro (mRNA) e subseqüentemente
carregada por um organismo ou célula, é traduzidos, nos ribossomos, para proteínas.
denominada de GENOMA. Por exemplo, na
nossa espécie, o genoma das células
somáticas é constituído por 46 moléculas de 2) genes que especificam RNAs
DNA. Cada uma dessas moléculas se funcionais, como os RNAs ribossômicos
organiza sob forma de um cromossomo, ou (rRNA); RNAs transportadores (tRNA) e
seja, cada cromossomo contém uma única RNAs que desempenham funções
molécula de DNA que é contínua, regulatórias na célula como os snoRNA e
começando em uma extremidade do miRNA.
cromossomo e prolongando-se sem
interrupção até a outra extremidade. Temos
também uma 47a molécula de DNA que é o 3) genes não transcritos. São
cromossomo mitocondrial. seqüências de DNA que, embora não sejam
O genoma de células mais simples, transcritas, desempenham alguma função.
como as bactérias, está organizado em um Por exemplo, os genes de replicação,
único cromossomo circular. Em torno de envolvidos na duplicação do DNA; genes de
2000 genes estão presentes no genoma de recombinação, que são seqüências
uma bactéria, como a Escherichia coli. envolvidas no processo de crossing-over;
O cromossomo bacteriano como de seqüências teloméricas, envolvidas na
6
E. coli possui aproximadamente 4,2x 10 proteção das extremidades dos
pares de bases. Ou seja, se contássemos o cromossomos...
número de diferentes nucleotídeos
ATCCGGTAACC... em uma das fitas do
DNA, este número seria de, Assim, o genoma contém um grande
aproximadamente, 4.200.000 nucleotídeos. É número de genes que, quando necessários,
na seqüência de bases desta imensa são ativados, ou seja, são copiados em RNA
molécula de DNA que “está escrito” a (ver Figura 23).
informação genética, nos genes dessa
bactéria.
Estudos moleculares recentes tem
ampliado o conceito de gene: é uma

22
 Figura 23) Exemplo hipotético do
genoma de um procarionte O genoma
contém muitos genes. Alguns são genes
para tRNA, outros para rRNA e outros ainda
codificam para polipeptídios (mRNA).

A transcrição de um gene depende

da região regulatória desse gene. Um dos Figura 24) Processo de transcrição dos genes
ribossômicos (rRNA); dos RNAs transportadores
principais elementos da região regulatória do tRNA e dos RNAs mensageiros mRNAs. È
gene é o sítio ou região promotora que mostrado também, a união de todos estes
componentes no processo de TRADUÇÃO, que
corresponde ao local de entrada da RNA é a síntese de proteínas.
polimerase. Essa enzima, responsável pela
transcrição de DNA em RNA, reconhece a
região promotora do gene, se associa a esse
conjunto de bases e passa a se deslocar pela
fita molde de DNA, fazendo a ligação entre
os ribonucleotídios complementares à fita de
DNA. No fim do processo de transcrição
temos uma fita de RNA que,após passar por
algumas modificações (processamento do
Figura 25 – Fluxo da informação genética
RNA), torna-se funcional e poderá executar
dentro da célula.
as diferentes funções necessárias à síntese
O DNA se duplica pelo processo chamado
de proteínas.
de transcrição. A informação nele contida
é copia em moléculas de RNA em um
processo chamado de transcrição. Os
RNAs participam do processo de síntese
de proteínas (tradução)

23
MAQUINARIA DA SÍNTESE PROTÉICA tenha uma trinca de bases que seja

No citoplasma existem todos os complementar as três bases do mRNA que

elementos necessários à síntese de estão naquele momento no sítio A. A região

polipeptídios, que chamamos de do tRNA que entra em contado com as bases

MAQUINARIA DE SÍNTESE PROTÉICA: do mRNA dentro do ribossomo é

denominada de anticódon. De um modo
simplificado, as moléculas de tRNAs são
> ribossomos
representadas como tendo em uma
>RNAs transportadores
extremidade a região do códon e na outra a
> RNA mensageiro região de ligação com o aminoácido. Os
tRNAs que possuem o mesmo anticódon
A seqüência de eventos que resulta transportam o mesmo aminoácido. Por
na síntese de uma proteína pode ser exemplo, se o anticódon for AAA, esse tRNA
resumida da seguinte forma : estará transportando para dentro do
c Transcrição do DNA em RNA (nos ribossomo o aminoácido fenilalanina. Alguns
1, 2 e 3 na Figura 21). aminoácidos são transportados por mais de
d Processamento do RNA para que um tipo de tRNAs. Por exemplo, os tRNAs
se torne funcional (ocorre em eucariontes). que possuem anticódons GCA, GCG, GCU

e Montagem do ribossomo - a ou GCC transportam (ver tabela do código

subunidade menor do ribossomo reconhece genético) para o ribossomo arginina. Desse

o início da fita de mRNA e se liga ao mRNA . modo, as três bases do mRNA (códon) que

Essa ligação permite que a subunidade maior ocupam o sítio A, ao selecionar qual o tRNA

se associe à subunidade menor, formando-se que permanecerá dentro do ribossomo,

assim um ribossomo capaz de realizar a determinam qual o aminoácido que será

síntese de proteínas. adicionado à cadeia polipeptídica. O primeiro

tRNA a ocupar o sítio A, deve ter anticódon
f Primeira ligação Peptídica - o
complementar à trinca AUG. Esses tRNAs
ribossomo se desloca sobre a fita de mRNA
sempre transportam uma metionina, portanto
e quando encontra nessa fita a seqüência de
esse é o primeiro aminoácido de toda a
base AUG, cria no seu interior, dois sítios,
síntese de proteínas. A metionina inicial pode
um destinado a receber os tRNAs que trazem
ser removida depois, o que significa que nem
os aminoácidos para serem ligados à cadeia
todas as proteínas funcionais terão esse
polipeptídica (sítio A) e outro que será
aminoácido presente no início da cadeia.
ocupado pelo transportador que mantém a
cadeia polipeptídica nascente (sítio P).
g Crescimento da cadeia

Qualquer tRNA pode entrar no ribossomo e polipeptídica - quando os sítios A e P estão

ocupar o sítio A, porém para que o tRNA ocupados por tRNAs, que tenham anticodons

permaneça nesse sítio é necessário que ele complementares ao mRNA, na parte superior

24
da subunidade maior do ribossomo, ocorre a
ligação entre os aminoácidos que esses
tRNAs transportam. Quando essa ligação
ocorre, o ribossomo se desloca sobre a fita
de mRNA e esse deslocamento corresponde
exatamente a três nucleotídios. Assim, a
cada ligação entre dois aminoácidos, um
novo códon ocupa o sítio A e determina a
entrada de um novo tRNA que trará o
próximo aminoácido a ser ligado. Com o
deslocamento do ribossomo, o tRNA que
trouxe o último aminoácido adicionado passa
a ocupar o sítio P e o tRNA, que antes estava
nesse sítio, é liberado pelo ribossomo,
podendo voltar a participar da síntese de
proteínas quando estiver de novo ligado a um
aminoácido específico. Por exemplo, na
Figura 26, no início da tradução, o sítio P
está ocupado pelo códon AUG e pelo tRNA
da metionina, e o sítio A está ocupado com o
códon UUU e o tRNA da fenilalanina. Após a
ligação entre os dois primeiros aminoácidos
(metionina e fenilalanina), com
deslocamento do ribossomo, o tRNA da
metionina perde sua ligação com esse
aminoácido e sai do ribossomo. O tRNA da
fenilalanina passa, então, a ocupar o sítio P
e se mantém ligado à fenilalanina, que por
sua vez está ligada à metiona. À medida que
o ribossomo se desloca, a cadeia
polipeptídica vai crescendo, sempre ligada ao
tRNA que acabou de fornecer o último
aminoácido.
Deve-se ressaltar que, logo após o
primeiro deslocamento do ribossomo, o
códon de iniciação AUG fica liberado e outro
ribossomo pode se associar ao mRNA e
iniciar a síntese de uma segunda cadeia
polipeptídica. É comum encontrar, no
citoplasma, vários ribossomos realizando
tradução a partir da mesma fita de mRNA.
Desse modo, a célula pode originar várias
moléculas da mesma proteína com um único
RNA mensageiro.
h Final da síntese - os ribossomos
seguem se deslocando na fita de mRNA e
quando o sítio A é ocupado por uma trinca
UAA, ou UAG ou UGA o crescimento da
cadeia polipeptídica é interrompido. Nenhum
tRNA possui anticodons complementares a
essas trincas e por isso esses codon são
chamados “sem sentido” e sinalizam o fim da
tradução. Depois que o ribossomo atinge um
desses codon, as subunidades se separam.
A subunidade menor pode, então, se
associar novamente com a parte inicial de
um mRNA, iniciando novamente um
processo de tradução.
o Através dos mecanismos de
transcrição e tradução, a informação genética
“se transforma” em maquinaria metabólica.
Assim, em uma célula simples como uma
lacto-bactéria, a informação contida no
genoma é traduzida, isto é, esta informação é
capaz de conduzir a síntese de um bom
número de proteína que estarão aptas a
utilizar os “nutrientes” presentes no leite, para
manter a estrutura celular e ainda criar mais
macromoléculas e permitir o crescimento
desta bactéria e posterior reprodução.
25
 Unidade III
DA CÉLULA PROCARIÓTICA PARA
A CÉLULA EUCARIÓTICA.

Podemos dizer que uma bactéria é

um bom exemplo de uma célula “mínima”.
Vimos anteriormente como atuam a
membrana, a maquinaria metabólica, a
informação genética e a maquinaria da
síntese protéica, para fazer uma bactéria
funcionar.
Mas se as bactérias são ditas
“células mínimas”, é porque existem células
Figura 26) Processo de tradução de
muito mais complexas, as eucarióticas.
uma proteína. A) montagem do ribossomo B)
O que elas possuem que não está
iniciação do processo de tradução C e D)
presente nas células bacterianas?
elongação da cadeia de aminoácidos. Cada
tRNA que se liga ao ribossomo, deixa um ªc Um sistema de membranas que

aminoácido. compartimentaliza as diversas funções da

célula, chamado de SISTEMA DE

A TABELA DO CÓDIGO GENÉTICO ENDOMEMBRANAS;

ªd Uma rede de proteínas
filamentosas que dão forma e mobilidade
para a célula, chamada de
CITOESQUELETO.

A INFORMAÇÃO GENÉTICA NOS EUCARIONTES

A informação genética dos
eucariontes apresenta algumas
peculiaridades. Nas células eucariontes o
DNA está sempre complexado com
proteínas. As proteínas que se associam ao
DNA são de dois tipos: as histonas ou
Diga que proteína resulta do seguinte mRNA: proteínas básicas e as proteínas ácidas.

Quando a célula não está em divisão

UUAUGGUUAGUCGUAGAUAUUGA
(durante a interfase), a molécula de DNA

26
apresenta seu grau mínimo de enrolamento,
constituindo a Cromatina. Conforme
podemos ver na Figura 27, a cromatina
apresenta vários graus de compactação: em
(A) temos a molécula de DNA com seu
–9
diâmetro de 2 namômetros (nm = 10
não associado a nenhum tipo de proteína. A
dupla hélice sem proteínas associadas não é
encontrada no núcleo das células, pois em
seu estado funcional o DNA eucariótico
sempre está ligado a proteínas. Em (B) a
molécula de DNA apresenta-se enrolada nas
histonas, formando as fibras
nucleossomos com 11 nm. Quando a célula
inicia o processo de divisão, pode-se notar
uma mudança no aspecto do núcleo. A
medida que a célula avança na fase de
prófase, é possível visualizar, no núcleo, uma
condensação progressiva da cromatina.
Figura 27- ver texto
Em (C) a fibra de nucleossomos se
enrola sobre si mesma, originando a fibra em
solenóide, em um formato de “fio de
telefone”; é nesse formato de solenóide que
a cromatina se encontra no núcleo na
m) interfase.
Algumas proteínas ácidas unem as
fibras da cromatina formando às alças de
cromatina (letra D na figura). As alças vão
sendo unidas em grupos cada vez mais
condensados, no centro da cromátide. No fim
desse processo, o cromossomo atinge seu
dos
grau máximo de dobramento, que
corresponde ao cromossomo metafásico, ou
seja, ele é observável na fase de metáfase
da divisão celular. (letras E e F na figura
abaixo).
Para dar uma idéia de como é longo
os fios de cromatina, apresentamos, na
Figura 28, a cromátide de um cromossomo
mitótico que teve as proteínas ácidas
removidas. Esse tratamento permitiu que as
alças constituídas pela fibra de cromatina se
desprendessem do centro da cromátide.
A informação genética está “escrita”
na seqüência de bases que o DNA
apresenta. O genoma nuclear de uma célula
humana contém, aproximadamente,
6.000.000.000 pares de bases, compondo as
46 moléculas de DNA dos cromossomos. O
menor cromossomo humano, o de número
21, possui 50.000.000 pares de bases. Você
pode imaginar isso?
27
 Ter genomas grandes é uma As principais vantagens da
característica dos eucariotes. Esses compartimentalização celular são:
organismos apresentam grandes  Permitir a separação e a associação dos
quantidades de DNA em suas células, mas sistemas enzimáticos;
boa parte desse DNA não é considerado  Aumentar a superfície interna da célula,
gene, pois não é transcrito, e não apresenta
aumentando o campo de ação enzimática e
função para a célula.
facilitando as reações químicas,
principalmente as que ocorrem em cadeia;
 Permitir diferentes valores do pH
intracelular.
Componentes do sistema de
endomembranas
ª Retículo endoplasmático:
O retículo endoplasmático é
constituído por endomembranas que limitam
túbulos (pequenos tubos) e cisternas
(cavidades em forma de sacos achatados).
O retículo endoplasmático é dividido em:

Figura 28 – visualização de uma cromátide em um cReticulo endoplasmático liso- tem a

cromossomo forma de túbulos, está envolvido em
transporte e armazenamento de substâncias,
SISTEMA DE ENDOMEMBRANAS
síntese de lipídios e desintoxicação celular;
dRetículo endoplasmático rugoso-
As células eucarióticas são
possui ribossomos aderidos a sua superfície
compartimentalizadas, isto é, possuem o
citoplasmática; como os ribossomos fazem a
citoplasma todo dividido em estruturas
síntese protéica, o retículo endoplasmático
membranosas. Cada compartimento tem a
rugoso está envolvido na síntese protéica,
sua função específica.
além de transporte e armazenamento de
As membranas que delimitam estas
substâncias (principalmente proteínas).
organelas são do tipo mosaico fluído. Assim,
ª Complexo de Golgi:
os lipídios destas membranas isolam os
É formado por várias vesículas ou cisternas
conteúdos destes compartimentos e as
achatadas em forma de discos. Nestas
proteínas controlam o que deve entrar ou sair
vesículas ocorre a maturação (modificações
de cada compartimento. Além disso,
químicas) de substâncias (principalmente
enzimas especificas proporcionam as
proteínas que foram sintetizadas pelos
reações químicas características do
ribossomos do retículo endoplasmático
funcionamento de cada organela.
rugoso). Após esta maturação, essas

28
proteínas terão dois destinos: c podem ser
enviadas para fora da célula (secreção);d
podem ser enviadas para outra organela
(lisossomo) para participar da digestão
intracelular.
Figura 29- -Sistema endomem-
branas da célula eucariótica
A Figura 29 apresenta o esquema de uma
célula eucariótica:
mp=memb. plasmática; ri= ribossomos; mi=
mitocôndrias; REG= retículo endoplasmático
granular (rugoso); REA= ret. end. agranular
(liso); c= centríolo; G= golgi; Li= lisossomos;
Pe= peroxissomos; vs= vesícula secretora;
ve= vesícula endocítica; mv=
microvilosidade.
Secreção celular:
Muitas células produzem substâncias
de exportação, isto é, são substâncias que
vão atuar fora da célula. Como exemplo,
temos as células glandulares. As células do
pâncreas produzem insulina, que é uma
proteína importante para todas as células do
organismo. A esta exportação de substância
chamamos SECREÇÃO CELULAR.
A secreção celular tem várias
FASES. Vamos ver o exemplo da secreção
da insulina para entendermos estas fases. A
insulina é uma proteína, portanto, tem uma
seqüência específica de aminoácidos. Esta
seqüência está codificada no gene da
insulina que está no núcleo da célula. n A
primeira fase da secreção celular ocorre
então, no núcleo da célula, onde o gene é
transcrito em RNA mensageiro (mRNA). o
Este mRNA é então processado e sai do
núcleo. No citoplasma, ele irá se ligar aos
ribossomos no retículo endoplasmático
rugoso (RER) e, lá, ocorre a síntese da
proteína (insulina) que entra no RER.p A
insulina é transportada do RER até o
Complexo de Golgi, onde sofrerá algumas
modificações (amadurecimento) e será
empacotada em vesículas.q As vesículas
produzidas pelo Complexo de Golgi,
chamadas vesículas secretoras, serão
levedas para fora da célula. Neste caso, a
insulina cairá na corrente sanguínea e será
levada para todas as células do organismo.
ª Lisossomos:
São vesículas que contém hidrolases
ácidas (enzimas digestivas que atuam em pH
ácido) e estão envolvidas no processo de
digestão intracelular.
29
 Digestão intracelular: às vezes o lisossomo primário
Chamamos de digestão intracelular a quebra envolve partes da própria célula, que por
de macromoléculas como proteínas, ácidos algum motivo não estão mais funcionais,
nucléicos e polissacarídeos em seus formando o AUTOFAGOSSOMO, que é um
respectivos monômeros, ocorrendo no lisossomo que digere uma parte da célula
interior da célula. Para fazer estas quebras, (AUTOFAGIA - auto= por si próprio / fagos=
são necessárias enzimas (PROTEASES, comer ).
DNAses, etc...). Estas enzimas não podem
ficar soltas no interior da célula, pois Como podemos notar, tanto na digestão
quebrariam as proteínas, DNA.... da própria celular como na secreção celular, nenhuma
célula. Por isso elas são isoladas no interior parte do sistema de endomembranas atua
de um compartimento, os lisossomos aonde sozinha, ao contrário, são processos em que
ocorre a digestão intracelular. várias partes do sistema de endomembranas
A digestão intracelular também atuam em conjunto.
ocorre em FASES: nop as três primeiras
fases da digestão são idênticas a secreção ª Peroxissomas:
celular, uma vez que para fazer digestão, Os peroxissomas ou microssomas são
precisamos enzimas que quebrem pequenas vesículas de forma esférica,
macromoléculas, e enzimas são proteínas, e semelhantes aos lisossomos, porém as
a mensagem de como fazer as proteínas enzimas que carregam são muito diferentes.
estão nos genes; q na quarta fase, ocorre a Os peroxissomas carregam OXIDASES
internalização do que vai ser digerido através (peroxidases, catalases e superoxido
da vesícula endocítica, ou seja, por dismutase) que são enzimas que quebram as
fagocitose ou pinocitose, a célula vai formas ativas do oxigênio (RADICAIS
internalizar o alimento dentro de uma LIVRES). Como exemplo de radicais livres
vesícula (vesícula endocítica) e r ocorre a podemos citar a água oxigenada (H2O2). A
união da vesicula endocítica com o lisossoma água oxigenada, chamada também de
primário (produzido no complexo de golgi, peróxido de hidrogênio é uma molécula muito
contendo as enzimas já prontas para atuar reativa, podendo reagir com as proteínas e
na digestão). Da união da vesícula endocítica outras macromoléculas quebrando-as. Por
com o lisossomo primário formar-se-á o isso muitas pessoas usam água oxigenada
lisossoma secundário, onde ocorrerá a para “branquear” os cabelos, pois a molécula
digestão. Após a digestão, os monômeros de H2O2 quebra a melanina que é uma
serão lançados para o hialoplasma (líquido proteína que dá a cor ao cabelo.
que envolve todos os compartimento do No interior de nossas células,
sistema de endomembrana), onde servirão milhares de reações químicas estão
para a célula montar novos polímeros. continuamente sendo realizadas, a estas

30
reações chamamos METABOLISMO. Muitas
reações metabólicas produzem,
normalmente, muitas formas reativas de
oxigênio do tipo da água oxigenada, ou
mesmo alguns mais reativos, como o
superoxido (O2-). Para impedir que estes
radicais livres degradem as nossas própria
proteínas e DNAs, as nossas células
Figura 30- Esquema trimensional do sistema
produzem algumas enzimas (oxidases) que
de endomembranas. Podemos ver o REG na
degradam estes radicais livres. Estas
forma de cisternas (sacos achatados) e o
enzimas são armazenadas nos
REL na forma de túbulos. O golgi também
PEROXISSOMAS.
apresenta a forma de cisternas, porém são
Crianças que nascem com um
menores e não possui ribossomos aderidos.
defeito genético em que estas enzimas não
são produzidas, morrem nos primeiros dois
anos de vida (Síndrome de Zellsweger).
CITOESQUELETO
ª Mitocôndria:
Um compartimento (organela) A habilidade da célula eucariótica em
citoplasmático muito importante é a adotar variedades de formas, assim como
mitocôndria, uma vez que este promover movimentos coordenados dos
compartimento está envolvido no processo componentes de seu interior, depende de
de transdução de energia (transferência de uma complexa rede de proteínas
energia provinda dos alimentos, filamentosas chamadas de
principalmente de moléculas de glicídios e CITOESQUELETO (Figura 31).
lipídios para a molécula de ATP - Adenosina
Tri-Fosfato. Citoesqueleto: rede de
proteínas filamentosas que dão
ª Núcleo: forma e movimento à célula
Este que é o maior compartimento do
sistema de endomembranas contém a
Diferente de um esqueleto feito de
informação genética, conforme já descrito
ossos, a rede de proteínas do citoesqueleto é
anteriormente.
muito dinâmica, reorganizando-se
continuamente. De fato, o citoesqueleto
poderia bem ser chamado de
“citomusculatura”, já que é responsável
pelas mudanças de forma das células, pelos

31
movimentos das células sobre um substrato
(movimento amebóide), atua na contração
muscular, assim como em todos os
movimentos intracelulares, tais como
transporte de organelas, segregação dos
cromossomos, etc...

Figura 32- Microtúbulos

Os microtúbulos se distribuem pelo interior

da célula, a partir de uma região central
chamado centro celular, aonde nas células
animais encontra-se o centríolo.

Estes microtúbulos citoplasmáticos

são importantes em estabelecer a forma da
célula, pois, ao se irradiarem a partir do
Figura 31. Célula vista ao microscópio, centro da célula, atuam como se fossem
evidenciando a rede de proteínas do
citoesqueleto “estacas ou colunas”.
Os microtúbulos citoplasmáticos
ªDIVISÕES DO CITOESQUELETO: também estão envolvidos em movimento dos
O citoesqueleto pode ser dividido em componentes internos das células. Existem
três classes de componentes: os proteínas enzimáticas, como a dineína e a
microtúbulos, os microfilamentos e os cinesina que quebram ATP e usam a
filamentos intermediários. Essas classes energia liberada para promover movimento.
diferem em relação ao tipo de proteína que Estas proteínas ligam-se às “organelas” que
as compõe, ao padrão de distribuição no precisam ser transportadas no interior da
interior da célula e quanto às funções célula, e usam os microtúbulos como se
desempenhadas na célula. fossem “trilhos”, transportando as organelas
até seu destino.
ªMICROTÚBULOS Além de constituir uma rede
citoplasmática, os microtúbulos podem
São tubos ocos, de 25 nm, formados formar ORGANELAS MICROTUBULARES.
por uma proteína globular, a TUBULINA. Neste caso, muitos microtúbulos e proteínas
Milhares destas proteínas irão se unir motoras se unem para formar uma estrutura
(polimerizar) formando os microtúbulos. com uma finalidade específica. Por exemplo,

32
durante a divisão celular, um feixe de são responsáveis por movimentos
microtúbulos se estende de um pólo da intracelulares (ex.: ciclose e movimentos
célula até o outro, estes microtúbulos amebóides). Essa função é executada
servirão como “trilhos” por onde as proteínas principalmente por uma proteína motora, a
motoras levarão os cromossomos para os MIOSINA, que também usa o ATP como
pólos da célula. fonte de energia e produz movimentos ao se
Cílios e flagelos (ex.: flagelo da ligar e “puxar” as fibras de actina.
“cauda” do espermatozóide), são formados
por muitos microtúbulos e proteínas motoras.
As proteínas motoras fazem com que os ªFILAMENTOS INTERMEDIÁRIOS
microtúbulos apresentem movimentos Os filamentos intermediários são
rítmicos, dando capacidade de deslocamento filamentos com um diâmetro em torno de 10
para a célula. Cílios e flagelos têm uma nm, formado por vários tipos de proteínas,
organização peculiar: nove pares de sendo a mais importante delas a
microtúbulos formarão um feixe em volta de QUERATINA.
um par central. Os filamentos intermediários
ªMICROFILAMENTOS filamentos associam-se a proteínas da
Os microfilamentos são formados, membrana plasmática e formam ligações
principalmente por uma proteína chamada entre células vizinhas, mantendo-as unidas.
ACTINA. Esta, é uma proteína globular, mas Nas células epiteliais, por exemplo, os
ao polimerizar-se formará longos filamentos filamentos intermediários são mais
de 5 a 9 nm. Estes filamentos formam uma abundantes pois a união entre as células
rede logo abaixo da membrana plasmática, deve ser mais forte.
servindo de sustentação para essa estrutura
que é muito fina e frágil.
DO UNICELULAR AO PLURICELULAR

Durante o processo evolutivo, alguns

Figura 33 – Microfilamentos
organismos tomaram o caminho de formar
colônias de muitas células. Posteriormente,
cada célula foi se especializando em uma
determinada função. Este caminho levou ao
surgimento de seres pluricelulares.
A rigor, todas as células dos
pluricelulares contém a MESMA
INFORMAÇÃO GENÉTICA. Como então a
Além de serem importantes para dar maquinaria metabólica de uma célula
forma à célula, os microfilamentos também

33
muscular é tão diferente daquele de um
neurônio?
A medida que ocorre o
desenvolvimento dos organismos
pluricelulares, diferentes genes serão
ativados. ( VER FIGURA 34) As células vão
sofrer um processo chamado de
diferenciação, tomando as suas várias
funções. Embora todos os genes estejam
presentes em todas as células, nas células
musculares apenas alguns genes são ativos
(são transcritos) e então só as proteínas
codificadas pelos genes transcritos estão
presente nessas células. Já em uma célula
nervosa, embora possua os mesmos genes
da célula muscular, outros genes estão
ativos, resultando a tradução de outras
proteínas.

FIGURA 34 – Diferenciação celular que

corre no desenvolvimento de organismos
pluricelulares.

34
 PRÁTICAS DE BIOLOGIA CELULAR*
Recomendações de ordem geral a serem
observadas no uso do Laboratório**
A manutenção do material colocado
a sua disposição depende de sua boa
vontade e do seu senso de responsabilidade
pessoal. O microscópio que você usa custou
elevado preço, cuida dele como se fosse seu.
Dedique 3 minutos finais de cada aula
para limpar as objetivas com lenço de
papel (se foi usado óleo de imersão),
assim como a sua bancada.
Freqüentemente você deverá fazer
desenhos ilustrativos das preparações
observadas. Para tal, traga folhas de papel
ofício, ou um caderno de desenho. Exatidão
nos detalhes, limpeza e capricho serão
levados em conta mais do que habilidade
para a arte de desenhar. Nunca desenhe
algo incógnito que veja sob o microscópio.
Compare aquilo que é visto sob o
microscópio com ilustrações de livros,
quadros ou outras fontes. Não se limite
apenas a copiar figuras, examine o material
colocado a sua disposição.
Os roteiros de aulas práticas que
estão incluídos neste caderno devem ser
lidos CUIDADOSAMENTE antes que
qualquer trabalho seja iniciado. Discuta suas
dúvidas com o professor. Procure estar
sempre em dia com os trabalhos das aulas
práticas.
PONTOS A SEREM OBSERVADOS AO
DESENHAR:
Porque se exige um bom desenho:
1) para obrigar a observar.
2) para que a observação possa ser corrigida
por outra pessoa.
1
3) para que fique um registro da observação
efetuada que possa ser consultada
posteriormente.
**Copia parcial da introdução de MANARA,
N.T.F.(mimeografado, sem data).
FORMA CORRETA DE REALIZAR OS
DESENHOS EXIGIDOS
NAS AULAS PRÁTICAS.
1) Todos os desenhos e as anotações
deverão ser feitos com lápis HB, ou similar,
com a ponta fina. Tenha a mão uma borracha
macia.
2) Não esqueça a data e o aumento
usado.
3) Guarde as folhas arquivadas, junto ao
caderno didático.
4) Escreva sempre com letras de
imprensa.
5) Não encha o campo de desenhos. Os
espaços em branco facilitam a compreensão
e posterior estudo do tema.
6) Os desenhos devem ser proporcionais
ao observado. Não faça desenhos muito
pequenos.
7) As setas indicadoras dos elementos
desenhados deverão ser linhas suaves, feitas
com régua e paralelas ao borde inferior da
folha.
8) A utilização de formas geométricas
(Figura 2.1) é artifício para facilitar a
representação do objeto. Sobre esta base se
1
Mais detalhes de algumas das práticas aqui
descritas podem ser encontradas no livro:
LORETO, E.L.S. & SEPEL, L. M.N. Atividades
experimentais e didáticas de Biologia Molecular
e Celular. Ribeirão Preto, SBG. 2003. 2a ed.
www.sbg.org.br
35
trabalhará, até obter a maior semelhança
possível com o observado.
9) Na Figura 2.2, encontrará um exemplo
de proporção, formas, espaços, distâncias e
grossuras dos traços.
10) Antes de começar a desenhar o
contorno dos objetos:
a) observe bem o preparado. Estude-o
e interprete-o;
b) determine exatamente o espaço que
vai ocupar o desenho, marcando com linha
suave;
c) observe a relação que guardam
entre si os elemento a desenhar, isto é, sua
proporção, tamanho e forma, fixe-os com
linhas auxiliares dentro do contorno geral
(Figura 2.2).

Figura 2.1 – Observação da linha e forma na hora de desenhar

Figura 2.2 – Cuidados no fazer o desenho quanto à proporção, forma, e espaço.

36
 1a Aula
O USO DO MICROSCÓPIO ÓPTICO (MO)

O mundo microscópico é fascinante. O microscópio foi um aparelho que muito contribuiu

para o desenvolvimento da Biologia Celular. Por esse motivo iniciamos as atividades práticas
dessa disciplina descrevendo um microscópio óptico e dando algumas dicas para o seu uso
adequado.
Uma célula animal típica tem 10 a 20 µm de diâmetro, ou ao redor de 5 vezes menos do
que a menor partícula visível ao olho nu. Portanto, a descoberta de que os animais e vegetais
eram compostos por agregados de células individuais, ou a existência de pequenos seres
unicelulares, não foi possível até que bons microscópios fossem fabricados, no início do século
XIX.
As células animais não são apenas pequenas, mas são descoloridas e translúcidas;
conseqüentemente, a descoberta de sua organização interna dependeu, também, do
desenvolvimento, na última metade do século XIX, de uma variedade de corantes que tornaram
várias partes da célula visíveis.
O microscópio tem por objetivo produzir imagens aumentadas de objetos tão pequenos
que, ao exame da vista desarmada, não poderiam ser vistos. Tem ainda como escopo, revelar
detalhes texturais imperceptíveis a olho nu.
Devemos lembrar que os objetos são vistos por duas razões fundamentais: 1) porque
absorvem a luz; 2) por causa da diferença entre o seu índice de refração e o do meio que os
envolve. Quanto maior a diferença, mais facilmente o objeto será visto. Assim, as células e seus
componentes, para serem observados ao microscópio devem ser tratados por reagentes especiais,
do que resulta sua coloração, isto é, os componentes celulares passam a absorver luz
diferentemente, tornando-se bem visíveis.
Chamamos de limite de resolução (LR) a capacidade máxima de ver dois objetos como
distintos. O LR depende do comprimento de luz usado e da abertura numérica do sistema de
lentes. Dentro da faixa de luz visível o LR é de 0,4 µm para o violeta e 0,7 µm para o vermelho. Em
termos práticos, bactérias e mitocôndrias (+/- 0,5 µm) são geralmente os menores objetos vistos ao
M.O.
Na Figura 2.3 temos um microscópio, em que são indicadas as suas principais partes. Um
microscópio compõe-se de um sistema óptico (condensador, objetivas e oculares), corpo do
microscópio (mesa, tubo, platina...) e fonte de iluminação (que nos microscópios mais antigos não
fazem parte do microscópio).
O condensador tem por objetivo prover uma iluminação uniforme. Geralmente é dotado de
um diafragma que permite controlar a quantidade de luz que incidirá sobre a preparação a ser

37
observada. Em muitos aparelhos, a intensidade e “qualidade” da luz também pode ser controlada
através de um parafuso que permite subir ou baixar o condensador.
Duas lentes ou conjuntos de lentes permitem o aumento da imagem da preparação, são as
lentes oculares e as objetivas. As oculares, como o próprio nome diz, ficam próximas ao olho do
observador. Já as objetivas ficam próximas ao objeto a ser observado. As objetivas são afixadas
em um sistema rotativo, o revólver, que permite que sejam trocadas com facilidade. Quanto maior
o tamanho da objetiva, maior o aumento que ele proporciona. As objetivas e oculares, trazem
escrito no seu corpo, várias informações e entre elas o seu valor de aumento. O aumento final
dado por um conjunto de lentes é obtido multiplicando o aumento da objetiva pelo aumento da
ocular. Assim, se o aumento da objetiva é de 10X e a ocular também é de 10X o aumento final é
de 100 vezes.
Como proceder para focalizar no microscópio:
1) Mova o revolver de modo a deixar a objetiva panorâmica (menor aumento) na posição
de observação, e abaixe totalmente a mesa.
2) Coloque a lâmina na mesa (platina), fixando-as com as garras do charriot (obs: a
lamínula deve estar voltada para cima).
3) Ligue o sistema de iluminação e ajuste o charriot de modo a centrar o material a ser
observado na região iluminada do orifício da platina.
4) Olhe pela ocular ao mesmo tempo em que a mesa é lentamente elevada, girando o
parafuso macrométrico, até que a preparação esteja focalizada. Use o micrométrico para fazer o
ajuste fino do foco.
5) Mova a lâmina usando o charriot de forma a encontrar campos interessantes a serem
observados. Interprete o que estas vendo, registre e se necessário desenhe.
6) Quando mais detalhes de uma região da lâmina são necessários, utilize as objetivas de
maior aumento (10X; 40X). Para tal, basta girar o revólver e fazer um ajuste fino do foco com o
micrométrico.
PARA USAR A OBJETIVA DE 100X, se faz necessário colocar uma gota de óleo de
imersão entre a lamínula e a lente. Focalize mexendo somente o micrométrico.
Após o uso da lente de imersão não esqueça de retirar o óleo da objetiva e também da
preparação.
Outros lembretes importantes:
Cada pessoa tem uma distância entre os seus olhos. Para que possamos olhar em
microscópios binoculares (com duas oculares), estes possuem um sistema de regulagem da
distância interorbital, ou seja, um mecanismo que permite movimentar os dois canhões para a
medida exata da distância entre os olhos de cada usuário. Além disso, ao menos uma das
oculares tem uma regulagem de foco independente. Assim, ao começar a observação em um
microscópio binocular, primeiro focalize olhando somente a ocular que não tem regulagem,
posteriormente, focalize com a outra ocular, girando o controle de foco da ocular.
A iluminação, é de fundamental importância na visualização ao microscópio óptico. Após a
focalização, movimente o condensador e o diafragma deste, até encontrar a iluminação ideal.

38
 Ao encerrar as observações ao microscópio não esqueça de deixa-lo com a platina
abaixada, com a objetiva panorâmica, e desligado.

Procedimento:
1) Corte um pedaço de jornal que contenha algumas letras, coloque sobre uma lâmina e
leve ao microscópio.
2) Focalize algumas letras. O que acontece? Desenhe.
3) Mude as objetivas. O que acontece? Desenhe.
4) Pegue um fio de cabelo, coloque entre lâmina e lamínula. Leve ao microscópio, observe
e desenhe.

Questões a serem respondidas:

1) Como se calcula a aumento final que estamos vendo em um microscópio?
2) Porque a imagem vista em um microscópio é invertida?
3) O que é microscopia de fluorescência? Para que serve?
4) O que é microscopia de contraste-de-fase? Para que serve?
5) Descreva o processo de focalização de Köhler
6) O que é um estereomicroscópio?
7) O que é microscopia eletrônica? Descreva o funcionamento de um microscópio eletrônico e
compare o seu funcionamento com o do microscópio óptico.

Figura 2.3 – Partes do microscópio

39
2a aula
observando células de epitélio
de escamas de cebola
Um dos materiais mais apropriados para um primeiro contato com as células é uma
preparação “a fresco” de epitélio de escamas de cebola. É uma prática extremamente simples e as
células desse material são grandes de tal forma que com qualquer microscópio mesmo rudimentar
permite a visualização dessas células. Com um microscópio de uma boa óptica é possível observar
o núcleo, nucléolo, plasmólise, parede celular, e plasmodesmos.

OBSERVANDO OSMOSE EM CÉLULAS VEGETAIS

1) Retire a epiderme de uma escama de cebola e coloque sobre uma lâmina com uma gota
de azul de metileno (0,3%). Preste atenção para retirar o epitélio exterior da escama, pois este tem
uma única camada de células enquanto o da camada inferior tem várias camadas o que dificultará
a observação. Espere 1 minuto para corar e depois retire o excesso de corante com uma gota de
água.
2) Cubra com uma lamínula. Cuide para não ficar bolhas de ar e que fique líquido entre a
lâmina e a lamínula. Seque a lâmina principalmente a face de baixo (sem a lamínula) pois se esta
ficar úmida, vai grudar na mesa do microscópio dificultando o movimento do “charriot”.
2) Observe e desenhe as células de epiderme de cebola, indicando a parede celular, o
núcleo e o nucléolo.
3) Coloque em um dos lados da lamínula uma gota de uma solução saturada de NaCl ou
sacarose (ou glicerina). Observe, descreva e desenhe o que aconteceu.
4) Identifique os plasmodesmos, e a parede celular.

Responda as seguintes questões:

1) Faça um desenho com todas as partes observadas.Não esqueça as legendas,

aumentos e a data.
2) Qual o formato das células observadas?
3) Para que serve o azul de metileno?
4) O que aconteceu quando colocamos as células em uma solução hipertônica? Por que?
5) O que é plasmólise?
6) O que são plasmodesmos?
7) O que é a parede celular? No que ela difere da membrana plasmática?

40
PARA FAZER EM CASA (As questões e desenhos dessa atividade deve ser entregue junto com as
questões e desenhos da segunda aula)

PROPRIEDADES FÍSICO-QUÍMICAS DOS COMPONENTES DA

MEMBRANA PLASMÁTICA.
Material necessário: 3 recipientes (copo, vidro de remédio...); 1 colher; azeite; água;
detergente colorido (azul, verde ou vermelho); solvente orgânico (acetona, gasolina, éter ou água-
raz); açúcar e sal.
As macromoléculas que compõe os seres vivos podem ser classificadas em 2 tipos:
polares, sendo solúveis em água (hidrossolúveis) e as apolares que são insolúveis em água, mas
solúveis em solventes orgânicos como éter, clorofórmio, cetonas... (lipossolúveis).

Procedimento:
1) Em um recipiente com um pouco de azeite de cozinha (que é um lipídio- portanto
apolar), coloque uma pitada de açúcar (que é um glicídio). Mexa bem. O que aconteceu? Por que?
- Repita com sal de cozinha, o que aconteceu? Por que?

2) Em um recipiente, coloque um pouco de acetona ou éter ou água-raz ou gasolina (todos

estes são solventes apolares). Coloque uma colher de açúcar. Agite. O que aconteceu? Por que?
- Repita com uma gota de azeite. O que aconteceu? Por que?

3) Em 3 recipientes, coloque:

no 1o: 1/2 de água, 1/2 de azeite

no 2o: 1/2 de azeite, metade de detergente colorido (azul ou vermelho)
no 3o: 1/3 de água, 1/3 de azeite e 1/3 de detergente colorido.
Agite os líquidos com uma colher e observe por 5 minutos ou mais. Descreva o
que aconteceu?
As membranas biológicas são formadas, principalmente, por lipídios e proteínas
anfipáticas, ou seja, moléculas com uma parte apolar (lipossolúveis) e uma parte polar
(hidrossolúvel) como os detergentes. Portanto são, hidrossolúveis e lipossolúveis ao mesmo
tempo.

41
Responda:
a) Faça um desenho de como são organizadas as moléculas anfipáticas de detergentes
em uma bolha de sabão.
b) Faça um desenho de como são organizadas as moléculas de lipídios e proteínas nas
membranas plasmáticas (Consulte os modelos nos livros de Biologia Celular).
c) Que propriedades podemos esperar da Membrana Biológica segundo o modelo do
Mosaico Fluído ?
d) Qual a função dos lipídios (fosfolipídios) nas membranas biológicas segundo o modelo
do M-F ?
e) Qual a função das proteínas nas membranas biológicas segundo o modelo M-F?

3a Aula:
COMPARANDO CÉLULAS PROCARIOTAS E EUCARIOTAS.

Os seres vivos podem ser classificados em dois grandes grupos: os procariontes e os

eucariontes, conforme a organização da célula que os compõe. O objetivo desta prática é de
comparar células procariotas e eucariotas, suas semelhanças e diferenças. Ao microscópio óptico,
o que mais chama a atenção, é a grande diferença de tamanho que existe entre as células
procariontes e eucariotes típicas. É claro que podemos encontrar células procariontes, como
algumas algas cianofícias, que possuem tamanho próximo ou mesmo maior que algumas células
eucariontes. Entretanto, a regra é que os procariontes geralmente têm células bem menores que
os eucariontes.
Outra diferença bem marcante é a presença do núcleo nos eucariontes e a sua ausência
nos procariontes. Internamente, não só a presença do núcleo difere os procariontes dos
eucariontes, mas sim uma intensa compartimentalização das diversas funções celulares em
organelas envoltas por membranas, o sistema de endomembranas que caracteriza as células
eucariontes. Porém, via de regra, o sistema de endomembranas é de difícil visualização ao
microscópio óptico, sendo mais bem observado ao microscópio eletrônico.
Nesta atividade, vamos colocar lado-a-lado células bacterianas (uma típica célula
procarionte) e células da mucosa da bochecha (representando uma típica célula eucarionte).

42
Material necessário:
Lâmina, lamínula, palito de fósforo, placa com bactérias, alça de platina, lamparina, álcool
70%, corante azul de metileno 0,05%, papel filtro, copo Becker 250 ml (ou vidro de Nescafé),
microscópio.
Procedimento:
1) Com uma alça de platina, encoste levemente em uma colônia de bactérias na placa de
Petri.
2) Esfregue a alça na lâmina até espalhar bem as bactérias.
3) Fixe as bactérias pelo calor, passando a lâmina na chama de uma lamparina, com as
bactérias voltadas para cima, tomando o cuidado para a lâmina não aquecer demais (controle nas
costas da mão).
4) Com um palito de fósforo, raspe a bochecha, posteriormente,esfregue o palito em cima
da região da lâmina em que previamente foram colocadas as bactérias.
5) Fixe as células em álcool 70% por 1 minuto.
6) Coloque uma gota de corante (azul de metileno 0,3%) e espere 1 minutos.
7) Tire o corante, deixando passar um pequeno fluxo de água, sob a torneira.
9) Cubra com lamínula, seque os lados da lâmina e observe ao microscópio.
Questões a serem respondidas:
1) Compare as células procariotas e eucariotas (observe e desenhe):
a) Quanto ao tamanho - Faça um desenho com as relações de tamanho, não esquecendo
de anotar o aumento usado.
b) Quanto à forma.
c) Quanto à presença de núcleo.
d) Porque fixamos as bactérias na chama ?
e) Qual a função da fixação em álcool ?
f) Qual a função de cada um dos componentes do corante?

2) Quais seres vivos chamamos de procariontes? Quais os que representam os

eucariontes?
3) Que outras diferenças existem entre as células procariotas e as eucariotas, mas que não
puderam ser vistas ao microscópio óptico? O que precisamos fazer para poder detectar estas
diferenças?

43
Para fazer na cozinha (2)
UM POUCO DE FÍSICO-QUÍMICA:
(as questões dessa atividade devem ser respondidas e entregues junto com as da 3a aula)

O que é pH ?

INFORMAÇÕES TEÓRICAS:
Muitas moléculas estão continuamente formando íons. A água, por exemplo, forma os íons
H+ e OH-, que permanecem por algum tempo nesta forma iônica e voltam a se associar para
formar nova molécula de água. A molécula de água ao se dissociar, forma quantidades iguais de
íons H+ e OH- .
Algumas moléculas formam quantidades desiguais de íons H+ ou OH-. Por exemplo:
a) HCl (ácido clorídrico) forma os íons H+ e Cl - . Sempre que a dissociação de uma molécula em
seus íons forma prótons H+, ela é um ÁCIDO.
b) NaOH (hidróxido de sódio) forma os íons Na+ e OH-. Sempre que a dissociação de uma
molécula em seus íons forma hidroxilas OH-, ela é uma BASE.

O pH (potencial de Hidrogênio) é uma medida da quantidade de prótons H+ presentes em

uma solução. Quanto mais prótons H+, mais ácida é a solução. Quanto mais hidroxilas (OH-)
mais básica, ou alcalina é a solução. A água, como tem igual quantidade de H+ e OH- é dita
NEUTRA.
Chamamos de ESCALA DE pH as variações na quantidades de prótons H+, que varia de 1
a 14. As soluções com pH abaixo de 7 são ditas ácidas e as acima de 7 são as básicas (alcalinas).
A água tem pH 7,0.
Ácido Neutro Base
pH 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14
Quando, em uma solução ácida, vamos gradativamente acrescentando uma base,
forma-se Sal e Água e o pH da solução vai subindo até ficar neutro e posteriormente continua
subindo tornando-se básica.

44
 Agora, se começarmos a adicionar um ácido em uma solução básica, o pH vai diminuindo,
torna-se neutro e passa a ácido.

EXPERIMENTOS PARA DEMONSTRAR ALTERAÇÃO DE pH

Algumas substâncias podem mudar de coloração dependendo do pH da solução.

Podemos usar esta propriedade para demonstrar alterações de pH.

45
 I . Preparando a atividade:

Material Necessário para Execução do Experimento:

- Folhas de Repolho Roxo,
- Ácido acético (3%) ou vinagre
- Hidróxido de sódio (0,1 M), ou uma solução feita com umas escamas de soda cáustica (2 ou 3)
em 10 ml de água (+/- 3 colheres); em último caso pode se usar leite de magnésia.
- Frascos incolores / transparentes para a visualizar as alterações de coloração
- Conta-gotas ou pipetas (no mínimo um para cada solução)

Preparo das Soluções-

A) Infusão de repolho roxo:

Picar bem 2 a 3 folhas de repolho roxo (correspondente a uma xícara), colocar em água
fervente e esperar alguns minutos, para que a água torne-se colorida.

PROCEDIMENTO:

1. Colocar, em quatro frascos transparentes um pouco da solução de repolho roxo

2. Acrescentar algumas gotas de vinagre. Observe o que acontece.
3. Acrescente agora algumas gotas de solução de NaOH (ou solução de soda cáustica).
Acrescente tanta gotas até que não mude mais de cor.
4. Volte a adicionar gotas de vinagre.
5. Volte a adicionar NaOH.
6. Comparar e registrar as colorações obtidas.
OBS.: O fenômeno de alteração de cores é reversível portanto, ocorrendo toda vez que o pH
ultrapassa o ponto de viragem do indicador.

Responda as questões:

1) Quais são os pHs que encontramos no sangue, na urina e no estomago humano?

2) O pH do sangue sofre variações? Existe algum mecanismo de controle do pH no sangue?
3) E dentro da célula, as diferentes organelas têm o mesmo pH? Dê exemplos.
4) O que acontece com as proteínas quando temos pequenas alterações de pH ? E quanto as
proteínas são submetidas a grandes alterações de pHs, como quando colocadas em um meio com
pH muito ácido ou muito alcalino?
5) Localize 5 propriedades biológicas associadas com pH?

46
4 a Aula

ESTUDANDO A PASSAGEM DE SOLUTOS E SOLVENTES

PELA MEMBRANA PLASMÁTICA.

As células de qualquer organismo estão cobertas pela membrana celular. A constituição

dessa membrana promove a passagem controlada de substâncias e o conseqüente equilíbrio
dinâmico dentro do organismo.
A água e outros íons pequenos podem passar sem gasto de energia (transporte passivo)
pelas membranas biológicas (M.B).
Uma das formas de transporte passivo é a osmose, que vem a ser a passagem do solvente
de uma solução menos concentrada para a solução mais concentrada, através de uma membrana
semi-permeável.
Observação importante:
O uso de sangue em aulas práticas, deve ser feito com muita cautela, principalmente
depois do aparecimento da AIDS. Mas pensamos que isto, ao invés de ser um obstáculo, deve ser
um componente a mais para a formação dos alunos. Devemos fazer uso de agulhas estéreis, o
chamar a atenção para que todos evitem, de toda maneira, usar a lâmina dos colegas, ficando
restrito a manipulação do seu próprio sangue. O professor, e todos os que vão manipular sangue,
devem, sem exceção, usar luvas descartáveis. Após a atividade, todo o material deve ser
desinfectado com álcool.

Material necessário:
Lâmina, lamínula, agulha hipodérmica descartável, lâmina de barbear, conta gotas, água
destilada, soro fisiológico (NaCl 0,9%), solução hipertônica (solução saturada de NaCl e/ou
açúcar); papel filtro, MO, luvas descartáveis, água sanitária, algodão, glicerina.

Procedimento:
1) Coloque uma gota de soro fisiológico em duas lâminas limpas (o uso de soro fisiológico
e opcional, se a gota de sangue for de um volume razoável -uma gota grande- não se faz
necessário o uso de soro fisiológico).
2) Fazer um pequeno furo na ponta de um dedo, com uma agulha descartável estéril e
colocar uma gota de sangue sobre cada lâmina (todas as agulhas devem ser dispensadas em um
frasco com uma solução 20% de água sanitária).
3) Cubra com lamínula e observe ao MO. Descreva e desenhe as hemácias.

47
 4) Em uma das lâminas, com um conta-gotas coloque uma gota de uma solução
hipertônica em um dos lados da lamínula e encoste um papel filtro do outro lado para substituir o
soro da lâmina. Dessa forma, o papel filtro puxará um pouco do sangue da lâmina e no outro lado,
um pouco da solução hipertônica entrará em contato com as células sanguíneas.
5) Observe ao MO, principalmente na região da lâmina onde as hemácias mais entraram
em contato com a solução hipertônica que as hemácias “murcharam”, ficando crenadas.
6) Na outra lâmina, repita o mesmo procedimento anterior, só que em vez de solução
saturada, use água destilada. Observe na região da lâmina onde as hemácias mais entraram em
contato com a solução hipotônica que as células estão túrgidas, quase estourando (e as vezes
realmente “estouram”).

Terminada esta parte da prática, as lâminas devem ser mergulhadas em uma solução de
água sanitária 20% (ou álcool 96 GL) por no mínimo 1/2 hora, para depois ser limpo e
reaproveitadas. Cada aluno deve passar um algodão com álcool, na mesa e demais partes
manuseadas do microscópio.

1) O que é osmose? quando ocorre?

2) Porque ocorre hemólise (as hemácias estouram) quando as colocamos em água destilada?
3) Porque as hemácias ficam crenadas na presença de uma solução hipertônica?

48
5a aula

FRACIONAMENTO CELULAR

O emprego do microscópio, seja o microscópio óptico ou eletrônico, geralmente fica restrito

à descrição das estruturas celulares. Para o estudo da composição química dos componentes
celulares e interpretação das interações entre estes componentes para explicar o funcionamento
celular, se faz necessário o emprego de outras metodologias que não o uso do microscópio. O
estudo bioquímico dos componentes celulares requer a separação e o isolamento cuidadoso das
várias organelas e macromoléculas celulares. As 3 principais técnicas usadas para isto são a
centrifugação, cromatografia e eletroforese.

1) ORGANELAS E MACROMOLECULAS PODEM SEM SEPARADAS POR

CENTRIFUGAÇÃO.

As células podem ser rompidas de várias maneiras, como por choque osmótico, vibrações
ultrasônicas, forçadas a passar por um pequeno orifício ou homogeneizadas por força mecânica.
Quando cuidadosamente aplicadas, estes procedimentos deixam as organelas como núcleo,
mitocôndrias, complexo de Golgi, peroxissomos... intactos. Assim como muitas vesículas derivadas
do retículo endoplasmático, chamadas microssomos, mantém muito de suas propriedades
bioquímicas originais.
Como todos estes componentes tem grandes diferenças de tamanho, eles podem ser
separadas por centrifugação.
Postos em um tubo a girar em altas rotações, os vários componentes vão sofrer a ação da
força centrífuga. Os componentes maiores como células intactas e núcleos vão sedimentar
primeiro no fundo do tubo (p/ ex: 1000 rpm por 5'); rotações medianas em maior tempo farão
sedimentar componentes um pouco menores como mitocôndrias, lisossomas e peroxissomas
(20.000 rpm por 10'). Altas rotações em tempos ainda maiores (80.000 rpm por 3 horas)
sedimentam ribossomos e grandes macromoléculas.
Ver esquema de fracionamento por centrifugação em Junqueira e Carneiro (2000).

Material Necessário:
Folhas de Tradescantia; gral e pistilo; tubos de centrífuga; pipetas Pasteur; centrífuga;
soro fisiológico; SDS 10% (sódio-duodecil-sulfato) ou detergente, água destilada. lâmina, lamínula
e microscópio.

49
Procedimento:
Primeira parte: Observação de um corte transversal de folha de Tradescantia
1) com uma gilete afiada, corte transversalmente uma folha de Tradescantia, o mais fino
possível.
2) Coloque o corte em uma lâmina com uma gota de água, cubra com lamínula e leve ao
microscópio.
3) Observe: a) que células tem pigmento roxo. Desenhe
b) Que células tem cloroplastos. Identifique os cloroplastos e desenhe.

Segunda Parte: Fracionamento por centrifugação.

1) Coloque 3 ml de soro fisiológico em um gral;

2) Esmague nesta solução 3 a 4 folhas de Tradescantia com um pistilo;
3) Coloque o líquido em um tubo de centrífuga e centrifugue rapidamente (15 seg) para retirar
fibras de celulose e restos de tecidos;
4) Transfira o sobrenadante para um novo tubo, e centrifugue por 5 minutos a 7.000 rpm.
6) Desenhe e descreva o que encontramos no tubo após a centrifugação.
7) Passe o sobrenadante para um novo tubo.
8) Ressuspenda o precipitado com dois ml de soro fisiológico.
9) Faça uma lâmina com o sobrenadante e com o precipitado, observe ao microscópio e
desenhe.
10) Acrescente uma gota de SDS 1% ou detergente no tubo com líquido verde, agite por um
minuto.
11) Centrifigue os tubos, sobrenadante e o precipitado (agora ressuspenso) por 5 mim a 7.000.
12) Observe e desenhe o que encontramos nos tubos
13) Faça uma lâmina com o precipitado do tubo verde.

Responda as questões:
1) Que método usamos para romper as células, nesta prática?
2) Porque usamos soro fisiológico e não água?
3) O que encontramos no sobrenadante após a primeira centrifugação? E no precipitado?
4) Por que usamos o SDS?
5) Por que o sobrenadante agora é verde e o precipitado incolor?
6) o que é uma ultracentrífuga?
7) Faça um esquema de fracionamento celular, que você poderia fazer se tivesse uma
ultracentrífuga, e desejasse fracionar hepatócitos nos seus vários componentes.
6a aula

50
 FRACIONAMENTO MOLECULAR POR CROMATOGRAFIA

Como podemos isolar uma proteína ou uma outra molécula da célula?

Para o desenvolvimento da Biologia Celular, foi crucial obter as moléculas que compõe a
célula, como as proteínas, em seu estado puro, isto é, isolado das outras moléculas da célula. Mas
mesmo uma bactéria bem simples possui mais de 2000 tipos de proteínas, como podemos isolar
só uma enzima que nos interesse?
Um dos métodos mais utilizados para este fim é a cromatografia de coluna, na qual uma
mistura de moléculas em solução é aplicada na parte superior de uma coluna, que contém uma
matriz sólida, porosa. Posteriormente, um grande volume do solvente passa pela coluna e é
coletado em tubos separados, à medida que emerge na parte inferior da coluna. As diferentes
moléculas são retardadas diferencialmente, pela sua interação com a matriz, moléculas diversas
atravessam a coluna com velocidades diferentes e são então fracionados em uma série de tubos.

Depois de passar em algumas dessas colunas, a enzima de nosso interesse estará

isolada de todas as outras moléculas, em um dos diferentes tubos que foram coletados.

Atividade experimental:

1- Coloque um pequeno pedaço de esponja na ponta de uma pipeta Pasteur.

51
2- Faça uma solução de Sílica gel em um copo volumétrico ou becker, usando água de torneira
levemente acidulada com 1 gota de vinagre para cada 10 ml. Com um conta-gotas, coloque a
resina (sílica gel) na coluna. A este procedimento chamamos empacotamento da coluna.
3- Em um gral, coloque uma folha de manto-de-viuva (Tradescantia), com umas gotas de água-
acidulada e esmague com o pistilo.
4- Colocar aproximadamente um ml desse líquido na coluna
5- Com uma pipeta de Pasteur coloque água na ponta superior da coluna e observe que um líquido
roxo começa a descer, enquanto uma camada verde se deposita na ponta superior da coluna.
Após algum tempo começa a pingar uma solução roxa (antocianina). Colete amostra desta fase.
6- Substitua o líquido que passa pela coluna, coloque etanol na parte superior da coluna e observe
que o pigmento verde começa a descer
7- Quando começar a pingar o pigmento verde, colete uma amostra deste.

Responda:
1) Faça um desenho esquemático representando o experimento e explique-o.
2) Porque o pigmento roxo é diluído primeiro na coluna?
3) Por que o pigmento verde fica retido não coluna enquanto estava passando água pela coluna?
4) Por que ele desceu na presença de álcool?
5) Qual a localização intracelular das antocianinas?
6) Qual a localização intracelular das clorofilas?
7) Qual a solubilidade desses pigmentos?

ISOLAMENTO DE DNA NA COZINHA

Em um laboratório de Biologia Molecular, o primeiro passo para se estudar um gene é o

isolamento do DNA. Você também pode fazer isto na sala de aula ou em sua cozinha.

Procedimento:

1) Pique uma cebola grande (250g) em pequenos pedaços (ou rale com um ralador). Faça uma
solução misturando 10 ml de detergente de louça, 1/2 colher de sopa de sal e complete com água
até 100 ml. Aqueça a solução até +/- 60oC e adicione esta mistura ao picadinho de cebola,
deixando 10 minutos em banho-maria a 60oC.

52
2) Resfrie rapidamente a mistura colocando o recipiente em uma bacia contendo água e gelo. Coe
a mistura em um filtro de papel para café, aparando o filtrado em um vidro.
3) Adicione delicadamente álcool (gelado) no filtrado de cebola, deixando o etanol escorrer pela
parede do vidro. Observe a formação de fios esbranquiçados que sobem para onde está o álcool.
Estes fios correspondem aos ácidos nucléicos - DNA e RNA.
4) Você pode retirar o DNA da solução enrolando em um bastão.
5) Deixe o bastão secar ao ar e coloque o bastão em um tubo com água para re-dissolver o DNA.
Aplique este DNA no processo de eletroforese explicado a seguir.

Atividades Propostas e Perguntas

1) Faça um desenho esquemático com todas as fases do experimento. - Em detalhe, mostre o que
vai acontecendo com as células e com as macromoléculas.
2) Porque usamos detergente?
3) Qual a função do sal e da água quente?
4) Por que baixamos a temperatura, aplicando gelo?
5) Por que coamos em um filtro de café?
6) Qual a finalidade de acrescentarmos o álcool?

7a aula

ELETROFORESE

Moléculas que possuem carga elétrica, como as proteínas e os ácidos nucléicos, podem
ser separadas por eletroforese. Eletroforese é o movimento de moléculas eletricamente carregadas
em um campo elétrico.
Geralmente, em um processo eletroforético, as proteínas ou ácidos nucléicos são
colocadas a migrar sob um campo elétrico, no interior de um suporte gelatinoso (um gel) de
poliacrilamida, agarose ou amido.

A seguir será apresentado o processo de eletroforese vertical para separação de proteínas. O que você
virá em aula será eletroforese horizontal de ácidos nucléicos, preste atenção na aula e faça as devidas
observações das diferenças entre a técnica descrita para proteínas e a feita em aula para DNA.

53
 As amostras contendo uma mistura de proteínas são aplicadas em um gel. Posteriormente uma
corrente elétrica é aplicada neste gel por algumas horas, as proteínas mais negativas e menores
migrarão mais rapidamente que as positivas e maiores.

Posterior a migração, o gel é colocado em uma solução contendo corantes específicos

para proteínas (A). Após a coloração, podemos visualizar diferentes bandas que correspondem a
proteínas que possuem cargas ou tamanhos diferentes (B).
Alguns processos de eletroforese podem revelar mais de 1000 diferentes proteínas em um
único gel. Esta grande sensibilidade torna esta técnica muito útil para identificar quais as proteínas
são responsáveis por diferenças genéticas ou fisiológicas em qualquer organismo.

Atividade experimental:
1) Montar um gel de agarose 0,8% da seguinte forma:
Ferver em microondas 0,8 gramas de agarose, em 100 ml de uma solução tampão (TAE) e
após fundir a agarose, acrescentar 25 microlitros de Brometo de etídio. (usar luvas sempre que
usar esta droga, pois ela é cancerígena).
Colocar a agarose ainda quente em uma placa com um pente

54
 Esperar esfriar e colocar o gel na cuba eletroforética de gel horizontal
2) Misturar 5µl de uma solução de DNA com 5µl de uma solução de tampão de amostra
(Glicerina e azul de bromofenol) . Aplicar com uma micropipeta em um dos pocinhos do gel.
3) Ligar a fonte de eletroforese a 100 volts e deixar o azul de bromofenol migrar
aproximadamente 3 cm
4) Observar o gel no transluminador ultravioleta (UV).

RESPONDA e Faça os desenhos do que foi visto em aula.

1) Quantas diferentes bandas foi possível ver em cada aplicação?
2) Quem migrou mais rápido o DNA ou o RNA? Porquê?
3) Por que os ácidos nucléicos migram em direção ao pólo positivo?
4) Qual a função do azul de bromofenol?
5) O que é uma solução tampão?
6) Por que colocamos brometo de etídio no gel?
7) Quais as semelhanças e diferenças dos processos de eletroforese horizontal de ácidos
nucléicos e o sistema de eletroforese vertical de proteínas descrito?

8a Aula
OBSERVAÇÃO DE CICLOSE E CLOROPLASTOS EM
CÉLULAS DE Elodea

Elodea é uma planta usada como ornamental em aquários, facilmente adquirida em lojas
que vendem produtos para aquariofilia. É uma monocotiledônea pertencente à família
Hydrocharitaceae. As folhas dessa planta são ótimas para observação de ciclose que é o
movimento contínuo do citoplasma no interior da célula, assim como de cloroplastos.
Geralmente, os componentes das células são incolores. Por isso, ao se observar direto ao
microscópio, pouco se pode observar de seus constituintes. Para se superar este problema,
geralmente fazemos uso de corantes que vão evidenciar alguma parte da célula.
Os cloroplastos, organela presente somente nas células vegetais e responsáveis pela
fotossíntese, são naturalmente corados. Em virtude disto, e também por serem organelas bastante
grandes, os cloroplastos podem ser facilmente visualizados ao microscópio.
As folhas de Elodea apresentam apenas duas camadas de células, em que se pode
observar com facilidade os cloroplastos.
As células eucariontes possuem um citoesqueleto que promove o movimento dos
componentes no interior da célula. Às vezes estes movimentos são correntes citoplasmáticas que
chamamos CICLOSE. Se todos os componentes do interior da célula são incolores, é muito difícil
se observar os movimentos citoplasmáticos. A presença dos cloroplastos que são naturalmente

55
corados torna possível a visualização da ciclose. Devemos lembrar que a ciclose é o movimento do
citoplasma causado pela ação do citoesqueleto. Os cloroplastos são levados por essa corrente do
citoplasma.

Procedimento
1) Com o auxílio de uma pinça ou gilete, retire uma folha de Elodea.
2) Em uma lâmina para microscopia com uma gota de água, coloque a folha de Elodea, por
sobre a gota.
3) Cubra com lamínula, e leve ao microscópio para observação.
4) Observe o tamanho e forma dos cloroplastos. Geralmente após alguns minutos de
observação, podemos ver a ciclose. Descreva como é a ciclose.

Observação de ciclose em células do pêlo estaminal de Tradescantia (manto-

de-viuva).

As células do pêlo estaminal de manto-de-viúva (trapoeraba) também apresentam ciclose

bastante ativa. Vale salientar que nessas células existe a presença de um grande vacúolo. O
citoplasma da célula fica restrito a alguns canais internos da célula, o restante é ocupado pelo
vacúolo.

Procedimento:

1) Com uma pinça, retire um pêlo do estame de uma flor de manto-de-viúva.

2) Coloque sobre a lâmina com uma gota de água e cubra com uma lamínula.
3) Observe ao microscópio, desenhe e descreva a ciclose.

56
Responda as questões:
1) Por que podemos ver facilmente os cloroplastos, mas não outros componentes do
sistema de endomembranas como o complexo de Golgi, retículo endoplasmático ou
mitocôndrias?
2) Que parte do citoesqueleto está envolvida na ciclose? De que forma?
3) Por que a ciclose nas células da Elodea ocorrem no interior de toda a célula enquanto
na célula da Tradeschantia ocorre apenas dentro de estruturas que lembram “canais”?

9a Aula

OBSERVANDO CÍLIOS E SISTEMA DE ENDOMEMBRANAS

Podemos observar com facilidade a atuação do citoesqueleto, através dos cílios e dos
pseudópodes em protozoários de vida livre. Nos Paramecium podemos ver os cílios e em Amoeba
os pseudópodes. Além disso, vários componentes do sistema de endomembranas, como vacúolos
digestivos (e pulsátil em Paramecium) são também facilmente observáveis.
Paramecium é o nome genérico de um protozoário ciliado muito comum em mananciais de
água como os açudes e riachos. Estes protozoários são de fácil cultivo, se alimentando
principalmente de bactérias, pequenas algas e outros protozoários menores. Podem ser mantidos
em recipientes com um pouco de água e uma pequena pitada de leite em pó (+/- 60mg para cada
100 ml de água). Como a qualidade da água é importante para este protozoário, devemos trocar
um pouco da cultura velha (mais ou menos a metade) por água nova com leite, a cada semana.
Assim, podemos manter infinitamente o Paramecium. Outro meio de cultivar este ciliado é colocar
um pouco de gérmen de trigo na água a cada semana, e sempre trocando a metade do volume da
cultura por água nova a cada semana.
Por ser de fácil cultivo e apresentar cílios e o sistema de endomembranas facilmente
observável, além de ter uma taxa de reprodução assexual bem alta, este protozoário é um
excelente recurso para atividades práticas de Biologia Celular. Antes, porém, de descrever estas

57
práticas, vamos mencionar alguns aspectos importantes sobre a biologia e estrutura dos
Paramecium.
As espécies mais comuns de Paramecium possuem em torno de 0,5 mm de comprimento.
Os ciliados são excepcionais entre os eucariontes, uma vez que possuem no mínimo dois núcleos
com funções distintas. O macronúcleo participa das atividades do dia a dia como crescimento,
metabolismo e reprodução. O micronúcleo permanece relativamente dormente até que a célula
entre em reprodução sexuada. Os Paramecium possuem dois tipos de reprodução; a) divisão
binária: em condições favoráveis a célula se divide em duas. As duas novas células,
geneticamente idênticas, crescem rapidamente e voltam a se dividir. Mantendo as condições
favoráveis estes organismos podem se dividir duas a três vezes em um dia; b) conjugação: em
condições ambientais desfavoráveis, dois indivíduos de sexos diferentes entram em contato e
formam uma ponte citoplasmática temporária, por meio da qual trocam micronúcleos.

Observando os cílios e o sistema de endomembranas:

Nos Paramecium podemos observar com facilidade a atuação do citoesqueleto, através

dos cílios, assim como o movimento intracelular dos vacúolos digestivos e contrátil. Além disso,
vários componentes do sistema de endomembranas, como vacúolos digestivos e pulsátil são
também facilmente observáveis.
Material necessário:
Cultura de Paramecium; microscópio, lâmina – lamínula; infusão de cigarro.
Procedimento:
1) Encher um tubo de centrífuga com uma cultura de Paramecium. Centrifugar por 60
segundos.
2) Retirar o sobrenadante, deixando apenas uma pequena gota de meio líquido.
3) Acrescentar, na gota que restou no tubo em que os Paramecium foram centrifugados,
uma gota de uma solução de “narcótico” feito da seguinte maneira: ( deixar um cigarro em infusão
em 30 ml de água por 12 horas). A finalidade desta infusão de cigarro e diminuir a atividade dos
Paramecium , uma vez que estes protozoários são muito rápidos e sem este narcótico é muito
difícil segui-los ao microscópio.
Outra opção é colocar alguns fios de algodão entre a lâmina e a lamínula. Os Paramecium
não podem nadar tão livremente entre os fios de algodão, facilitando a sua observação.

4) Faça um desenho com as principais partes de um Paramecium.

5) Observe o batimento dos cílios e desenhe (observe e descreva os tricocistos)
6) Identifique e observe a contração dos vacúolos contráteis.
7) Identifique os vacúolo digestivo.

58
 8) Identifique e desenhe o citostoma e a citofaringe. (O que são fagossomas e onde estes
se formam nos Paramecium ?
9) Faça um desenho comparando a ultra-estrutura de um cílio e de um centríolo.

10a Aula
PREPARAÇÃO DE LÂMINAS PERMANENTES (aula demonstrativa).

Estruturas biológicas grandes não podem ser vistas diretamente ao microscópio, por que a
luz não pode atravessá-las. Precisamos, então, fazer cortes o mais fino possível, para que a luz
possa passar pelas estruturas, e assim ser visto ao microscópio. Para sofrer tais cortes, o material
deve ser fixado, emblocado em parafina ou outra resina e, imerso neste suporte, cortado em
pequenas "fatias", através de um aparelho chamado micrótomo. Posteriormente este material é
corado e a lâmina é montada.
Nesta prática, vamos visitar os laboratórios de anatomia vegetal do Dep. de Biologia, em
que lâminas permanentes de vegetais são preparadas.
Preste atenção as explicações (e faça as perguntas que achar necessário) e
posteriormente responda as seguintes questões:

1) O que é a fixação do material? Qual a função da fixação?

2) Álcool etílico, clorofórmio, formol, ácido acético, ácido pícrico, e ácido ósmico são as
principais substâncias usadas como fixadores. Quais são as principais características de cada um
destas quanto a sua capacidade de fixação?

59
 3) As substâncias citadas na pergunta anterior, geralmente não são usadas em conjunto,
constituindo fluídos fixadores. Alguns destes fluídos são muito usados, como o Fluido de Carnoy; o
F.A.A; o Bouin. Diga qual a composição destes fixadores e suas características.
4) Porque desidratamos o material em uma série alcoólica antes de emblocar em parafina?
5) Para que emblocar em parafina?
6) Que outros suportes ou estratégias podem sem usadas no lugar do emblocamento em
parafina?
7) O que é orientação do corte?
8) Para que re-hidratar o material antes de cora-lo?
9) Qual a importância do uso de corantes na preparação de lâminas?
10) O que significam: coloração vital; corante acidófilo; corante basófilo?
11) Entre os principais corantes podemos citar: Carmim; hematoxilina; azul de metileno;
Cristal violeta (violeta genciana); Eosina; Fast Green; Fucsina ácida, safranina; Sudan black; diga
quais as características principais destes corantes (que estruturas eles coram, solubilidade,
concentrações usadas...)

11a Aula

OBSERVAÇÃO DE COMPLEXO DE GOLGI EM LÂMINAS

PERMANENTES DE EPIDÍDIMO.

Material fornecido: lâminas permanentes de epidídimo de rato.

Procedimento:
1) Localize e desenhe as células nos túbulos de epidídimo.
2) Observe e desenhe a posição do núcleo.
3) Observe e desenhe a posição e a forma do complexo de Golgi.

Responda as questões:
1) Por que foi escolhido o epidídimo para observar o complexo de Golgi? Que outro tipo de
célula poderia ser usada?
2) Que método de coloração foi usada e por que?
3) Como se forma o Complexo de Golgi?

60
Observação de neurônios em cerebelo de camundongo.

Material fornecido: lâminas permanentes de cerebelo de camundongo.

Procedimento:
Observe ao microscópio a região entre as substâncias branca e cinzenta, nela existem
alguns neurônios gigantes em que podemos ver perfeitamente o corpo celular (com núcleo), o
axônio e dendritos.
Responda:

1)Observe e desenhe estas células, suas partes, e descubra como são chamadas estas
células.
2)Qual a relação existente entre forma e função nestas células?

12a Aula
OBSERVAÇÃO DE CÉLULAS MUSCULARES ESTRIADAS

O desenho esquemáticos de células presente nos livros são muito comuns e úteis. Porém,
muitas vezes os alunos tem dificuldade de reconhecer que em um ser pluricelular, a diferenciação
celular é a regra. Muitas células acabam com formatos muito diferentes. As células musculares
estriadas esqueléticas são um exemplo.
Células musculares estriadas são células muito longas, polinucleadas apresentando os
núcleos na periferia da célula. O citoesqueleto é hipertrofiado, sendo que os microfilamentos de
actina e miosina, vão ocupar a maior parte da fibra muscular, constituindo estruturas específicas
das células musculares estriadas, que são os sarcômeros. Essas estruturas é que dão uma
aparência estriada a essas células quando vistas ao microscópio.

Material necessário:
Lâmina, lamínula, agulha histológica e lâmina de barbear, abelhas (ou outro inseto grande),
solução de verde Janus (0,7% em etanol 70%).

61
Procedimento:
1) Com uma gilete, abra o tórax de uma abelha, vespa ou outro inseto voador grande
(previamente morta em vapores de éter).
2) Com uma agulha histológica retire algumas fibras musculares e transfira para uma
lâmina com uma gota de corante.
3) Cubra com lamínula, deixe corar por 3 minutos, e observe ao microscópio.

Alguns questionamentos :
a) Como estão organizados os sarcômeros e como estes funcionam? (faça um desenho).
b) Quais as fases da contração muscular?
c) Como está organizado o citoesqueleto em uma célula muscular lisa?
d) Relacione as regiões estriadas que podemos ver nas fibras musculares com o sarcômero.
e) Qual a função do Verde Janus?

13 a aula
OBSERVAÇÃO DE MITOSE EM PONTA DE RAIZ DE CEBOLA,
Allium cepa (2n = 16).

COLETA E FIXAÇÃO DAS PONTAS DE RAÍZES DE CEBOLA

O procedimento mais fácil é encher um frasco com água colocar a cebola com a parte das
raízes imersa na água (figura abaixo) e esperar até que as raízes comecem a crescer.
Dependendo da época isso pode ocorrer em 24 horas ou em alguns dias.

62
 Quando as raízes tiverem atingido pelo menos cinco milímetros poderão ser facilmente
destacadas do bulbo, com auxílio de uma lâmina de barbear, estilete ou mesmo agulha. Não é
necessário deixar as raízes crescerem mais do que os cinco milímetros, pois o material que nos
interessa está na ponta.

As pontas de raiz devem ser imediatamente fixadas em solução de álcool e ácido acético
(3:1). Essa solução não dever ser estocada, recomenda-se que seja preparada no momento em
que vai ser usada.
O tempo mínimo que as pontas de raiz devem ficar no fixador é duas horas, as vezes, se o
material fica muito tempo no fixador ocorre um amolecimento excessivo do tecido dificultando a
preparação da lâmina.
Após o tempo de imersão no fixador as pontas de raiz podem ser estocadas em álcool 70%
(de preferência em refrigerador) ou então preparadas para a observação das mitoses.

2. HIDRÓLISE DO MATERIAL FIXADO

Transferir as pontas de raiz de cebola para uma solução de ácido clorídrico 1N e deixar em
imersão por 15 minutos. Depois disso lavar em água (imersão por um ou dois minutos); remover o
excesso de água com um papel absorvente e transferir para uma lâmina de microscopia.

3. COLORAÇÃO
Antes de adicionar o corante sobre a ponta de raiz, pode-se remover (ou simplesmente
romper com uma agulha) a parte mais extrema do material (correspondente à região da coifa), pois
isso facilitará a coloração e a observação ao microscópio.
Para coloração um dos corantes mais usados é a orceína acética 2% (outros corantes
produzem o mesmo efeito e podem substituir a orceína). Uma gota desse corante é suficiente para

63
uma boa coloração, desde que se espere no mínimo vinte minutos, antes de “bater” ou “esmagar”
o tecido.
Ao colocar a lamínula deve-se cuidar para deixar o menor número possível de bolhas de ar
para que a observação do material não seja prejudicada.
Depois que o corante atuou sobre o tecido pode-se envolver a lâmina com um papel filtro e
pressionar com o dedo polegar a região onde está a lamínula. Esse movimento fará com que o
tecido se espalhe pela lâmina e seja possível observar camadas de células isoladas. Nesses
grupos de células é que será possível observa as mitoses. Não se deve colocar uma quantidade
muito grande de tecido na lâmina pois isso ira dificultar o espalhamento. Dois milímetros de ponta
de raiz produz material suficiente para observação.
Outra forma de realizar o espalhamento é segurar a região da lamínula com um papel
absorvente e bater com um lápis borracha ou com a ponta da tampa de uma caneta.
Após o esmagamento do material, a lâmina deve ser observada inicialmente em menor
aumento (x10), para que se localize rapidamente onde estão as células em divisão.

5. LAMINAS SEMI-PERMANENTES
As lâminas que estiverem boas podem ser temporariamente conservadas (uma semana)
se forem vedadas com esmalte para unhas ou cola para câmera de pneu de bicicleta.

6. LÂMINAS PERMANENTES
As lâminas semi permanentes podem ser transformadas em permanentes, para isso basta
remover o vedante (esmalte ou cola) e colocar as lâminas no freezer até que seja possível soltar a
lamínula.
Após a remoção da lamínula, mergulhar rapidamente as lâminas em alcool absoluto e
deixar secar. Colocar uma gota de Resina para microscopia (Permonte; Entelan ou Balsamo do
Canadá) na região onde está o material. Fechar com uma lamínula e deixar secar.
Procedimento:
1) Pegue uma raiz já fixada
2) Hidrólise: coloque as pontas de raiz em uma solução 1N de HCl por 5 min.
3) Lavagem: deixe as raÍzes em água por 5 min.
4)Corte com uma gilete +/- 3mm da ponta da raiz, logo após os 2 primeiros mm (coifa).
5) Coloque este material em uma lâmina com uma gota de orceina acética, deixe corar por
5 minutos.
6) Cubra com uma lamínula, colocando a lâmina entre papel higiênico e aperte fortemente
para espalhar o material ( com o polegar).
7) Vede as bordas da lamínula com luto (ou esmalte de unha).
8) Observe ao microscópio.

64
Questões:
a) Descreva e desenhe o que ocorre na: interfase; prófase; metáfase; anáfase; telófase.
b) O que é uma célula 2n=16?
c) O que é centrômero e qual sua função?
d) O que são cromátides? o que representam?

Vvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvvv

Atividades de Práticas de Biologia como componente de formação

pedagógica.

Atividade 1 –
Biologia na cozinha.

A cozinha de nossa casa pode ser um excelente laboratório. As “experiências” feitas nas 2a e 3a
aula são exemplos disso. Em grupos, a turma elaborará um experimento relacionado ao programa
de biologia celular e apresentará em aula em data a ser marcada.

Atividade 2:

O USO DE MODELOS DIDÁTICOS E SIMULAÇÕES.

(com marcação da data para apresentação dos modelos)
Simulações e modelos didáticos são excelentes recursos didáticos, principalmente se
conseguimos colocar os alunos a construir os modelos ou montar as simulações.
Os modelos didáticos, por representarem bidimensionalmente ou tridimensionalmente de
modo macroscópico estruturas e/ou funções, permitem um entendimento mais fácil de fenômenos
microscópicos que de outra forma são apresentados e entendidos apenas de forma abstrata. Os
modelos permitem uma “visualização” das estruturas, tornando o assunto “mais concreto”. Desta
forma os modelos facilitam o aprendizado e a discussão sobre o tema em estudo.
As simulações correspondem à representação dinâmica de processos, com ajuda de materiais e
dos alunos. Nas simulações, podemos, por exemplo imprimir uma longa seqüência de DNA em

65
papel e com a participação dos alunos pedir que eles encontrem uma seqüência correspondente
ao sítio de clivagem de uma enzima de restrição. Podemos pedir que os alunos cortem com
tesoura este sítio e posteriormente o mesmo sítio de um plasmídeo. Posteriormente podemos
simular como seria uma reação de ligação de todos esses fragmentos, e uma transformação
bacteriana com os plasmídeos gerados. Por fim podemos discutir conceitos como clonagem de
genes e bancos genômicos.

Apresentamos exemplos de alguns dos modelos que podem ser construído na página
www.ufsm.br/auladebio

BIBLIOGRAFIA COMPLEMENTAR PARA A PARTE PRÁTICA:

LORETO, E.L.S. & SEPEL, L. M.N. Atividades experimentais e didáticas de Biologia Molecular e
Celular. Ribeirão Preto, ed. Da Sociedade Brasileira de Genética. 2003. 2a ed.
www.sbg.org.br
DEPARTAMENTO DE BIOQUÍMICA, UFPR. Bioquímica: aulas práticas. 5 ed.Curitiba, Ed. da
UFPR, 1997.
JORDÃO, B.Q e colaboradores. Práticas de Biologia Celular. Londrina, Editora UEL, 1998.
JUNQUEIRA, L.C.U e JUNQUEIRA, L.M.M.S. Técnicas Básicas de Citologia e Histologia. São
Paulo, Ed. Santos, 1983.
MANARA, N.T.F. Roteiro de aulas práticas de citologia vegetal. Santa Maria, Faculdade de
Agronomia-UFSM, (mimeografado-sem data).
MELLO, M.L.S. e VIDAL, B.C.; Práticas de Biologia Celular. São Paulo, Edgar Blücher, 1980.
POLIZELI, M.L.T.M., Manual Prático de Biologia Celular. Ribeirão Preto, Holos editora, 1999.
QUESADO, H.L.C. e colaboradores. Biologia: Práticas. Fortaleza, Edições UFC, 1996.
SLATER, J. Experiments in molecular biology. Clifton, N.J., The Humana Press, 1986.
VALLE, F.C., Práticas de citologia e genética. Rio de Janeiro, MEDSI, 2001.

66