métodos de esterilización Los microbios se eliminan, inhiben o matan por medio de agentes físicos o agentes químicos, otros incluyen

los agentes mecánicos. Los métodos de esterilización comprenden entonces, todos los procedimientos físicos, mecánicos y químicos que se emplean para destruir gérmenes patógenos. Los mas utilizados en la actualidad son los métodos físicos (calor, radiaciones, filtración, centrifugación) y los métodos químicos (agente químico) EBULLICIÓN TYNDALIZACION PASTEURIZACIÓN VAPOR A PRESIÓN (AUTOCLAVE) CALOR SECO FÍSICOS FLAMEADO INCINERACIÓN HORNO PASTEUR (AIRE CALIENTE) RADIACIONES IONIZANTES RADIACIONES RAYOS GAMMA RAYOS X RAYOS ULTRAVIOLETA

CALOR HÚMEDO

MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN

MECÁNICOS QUÍMICOS GASES

FILTRACIÓN SEDIMENTACIÓN OXIDO DE ETILENO OTROS

1.- MÉTODOS FÍSICOS 1.1.- Calor Húmedo. La utilización del calor y su eficacia depende de dos factores: el tiempo de exposición y la temperatura. Todos los microorganismos son susceptibles, en distinto grado, a la acción del calor. El calor provoca desnaturalización de proteínas, fusión y desorganización de las membranas y/o procesos oxidantes irreversibles en los microorganismos. El calor húmedo produce desnaturalización y coagulación de proteínas. Estos efectos se deben principalmente a dos razones: 1) El agua es una especie química muy reactiva y muchas estructuras biológicas son producidas por reacciones que eliminan agua y 2) El vapor de agua posee un coeficiente de transferencia de calor mucho más elevado que el aire. Ventajas del calor húmedo: -Rápido calentamiento y penetración -Destrucción de bacterias y esporas en corto tiempo

La aplicación del calor va seguida de un rápido enfriamiento.. o sea funcionando a la presión normal. procurando que su nivel no alcance a los objetos que se disponen sobre una rejilla de metal. Las bacterias que resisten una sesión de calefacción. que en la parte inferior recibe calor por combustión de gas o por una resistencia eléctrica. No es confiable en su totalidad este método por cuanto quedan las esporas b) Tyndalización: Esterilización por acción discontinua del vapor de agua a una temperatura de 100 oC en varias sesiones. Esta tapa posee tres orificios. dejando abierta la válvula de escape. c) Pasteurización: Es la aplicación de una temperatura inferior a 110 oC durante 30 minutos. El modelo más usado es el de Chamberland. otro para el escape de vapor en forma de robinete y el tercero. Se cierra asegurando la tapa.-No deja residuos tóxicos -Hay un bajo deterioro del material expuesto -Económico Desventajas: -No permite esterilizar soluciones que formen emulsiones con el agua -Es corrosivo sobre ciertos instrumentos metálicos Procedimientos: a) Ebullición: Se requiere un recipiente con agua. salmonella. Puede también realizarse a temperaturas más bajas. estreptococo y brucela) d) Vapor a presión (autoclave): Se realiza la esterilización por el vapor de agua a presión. pueden ser destruidas cuando la misma operación se repite con intervalos separados y en varias sesiones. 56º u 80º ocupara evitar la descomposición de las sustancias a esterilizar. ya que las bacte rias de la leche no forman esporas (bacilo tuberculoso. Estos efectos se deben a la transferencia de calor desde los materiales a los microorganismos que están en contacto con ést s. agujas e instrumentos de cirugía menor. Funcionamiento: Se coloca agua en la caldera. es esto tóxicos por niveles elevados de electrolitos. por las temperaturas elevadas. Se usa para prevenir las infecciones de origen lácteo y retasar la descomposición de la leche. Equipo: Consta de una caldera de cobre. Se basa en el principio de Tyndal.Calor Seco. esta se cierra en la parte superior por una tapa de bronce. hecha en determinadas condiciones. 1. para una válvula de seguridad que funciona por contrapeso o a resorte. Mediante este método se esterilizan inyectadoras. Esteriliza a 120º a una atmósfera de presión (estas condiciones pueden variar) y se deja el material durante 20 a 30 minutos. Se efectúa por medio del autoclave de Chamberland. sin ajustar los bulones y se da calor. fusión de membranas. dejando abierta la válvula de escape hasta que todo el aire se desaloje y comience la salida de vapor en forma de chorro continuo y abundante. Es la aplicación del calor mediante la ebullición del agua a presión atmosférica (100 oC). El calor seco produce desecación de la célula. uno par el a manómetro. El vapor a presión proporciona temperaturas altas con penetración y humedad en abundancia que facilitan la coagulación de las proteínas.2. sostenida por una camisa externa metálica. La acción destructiva del o calor sobre proteínas y lípidos requiere mayor temperatura cuando el material está seco o la actividad de agua del medio es baja. .

y componentes esenciales para la viabilidad de los microorganismos. estructuras proteicas y lipídicas. vacunas. Flameado: Consiste en la exposición directa del instrumento a una flama en forma directa por poco tiempo con el mechero de Bunsen. sondas. Desventajas: -Requiere mayor tiempo de esterilización.3. c).Ventajas del calor seco: -No es corrosivo para metales e instrumentos. y de sustancias viscosas no volátiles. se utilizan para la esterilización en quirófanos. b). cortan el circuito eléctrico.. debido a la baja penetración del calor. Se mantiene una temperatura estable mediante termostatos de metal.Radiaciones. a). por lo tanto son muy poco usados con fines de esterilización d). Rayos X: Penetran bien. etc. circula por la cavidad principal y por el espacio entre ambas cámaras. pero requieren mucha energía. Estufa (Horno Pasteur de aire caliente) Por medio de las estufas de doble cámara. 1. Puede esterilizar antibióticos. Rayos Gamma: Su empleo esta basado en los conocimientos sobre la energía atómica. el aire caliente generado por una resistencia. Los . etc. Radiaciones ionizantes: Producen iones y radicales libres que alteran las bases de los ácidos nucleicos. alimentos. El ADN absorbe una longitud de onda de 2600ª y libera energía ocasionado rearreglo de enlaces químicos son escasamente penetrantes y se utilizan para superficies. a). Entre los métodos que utilizan el calor seco como medio de esterilización se destacan: a). Este tipo de esterilización se aplica a productos o materiales termolábiles y de gran importancia en el campo industrial..4. -Permite la esterilización de sustancias en polvo y no acuosas. Su fin es evitar el vertido de material de alto riesgo en la basura. respecto al calor húmedo. Se utilizan a escala industrial por sus costos. que al dilatarse por el calor.Mecánicos. La acción de las radiaciones del tipo de radiación y el tiempo de exposición. El tamaño del poro dependerá del uso al que se va a someter la muestra. c). b). Incineración: Consiste en someter el material contaminado a altas temperaturas en hornos especiales para reducirlo prácticamente a cenizas. 1. Las radiaciones tienen gran penetrabilidad y se las utiliza para esterilizar materiales termolábiles (termosensibles) como jeringas descartables. su uso es muy costoso. a temperatura de 170º C para el instrumental metálico y a 140º C para el contenido de los tambores. dando lugar a mutaciones en los microorganismos que los incapacitan metabólicamente para producir una enzima esencial y sobreviniendo la muerte bacteriana. son pocos operativos para su empleo masivo. Filtración: En la filtración se usan membranas filtrantes con poros de un tamaño determinado. Rayos Ultravioletas: Afectan a las moléculas de DNA de los microorganismos.

Sirve para esterilizar material termosensibles como el descartable (goma. pero su población microbiana disminuye notablemente. amino. Es utilizado en la esterilización gaseosa. Se fundamenta e el hecho de que la densidad de muchas bacterias es algo mayor d e 1. papel. en consecuencia. También l aire puede ser sometido a una limpieza exhaustiva provocando su paso a través de materiales capaces de retener los microorganismos y partículas en suspensión Tipos de filtros: 1. a).Filtros profundos o Filtros de profundidad: Consisten de un material fibroso o granular prensado. etc. Este método es útil para identificar microorganismos en muestras de agua potable y otras sustancias. evitando el paso de toda partícula con un tamaño mayor al del poro. y luego un enjuague de 10 minutos. Aldehídos: Son agentes alquilantes que actúan sobre las proteínas. metal. 2.. incluyendo al bacilo de la tuberculosis. . y la retención se debe principalmente al tamaño de la partícula. etc. La filtración se utiliza para emulsiones oleosas o soluciones termolábiles. Oxido de etileno: Es un agente alquilante que se une a compuestos con hidrógenos lábiles como los que tienen grupos carboxilos. drogas diagnósticas. En este tipo de filtros la retención de las partículas se produce por una combinación de absorción y de retención mecánica en la matriz. b). c). soluciones intravenosas. Destruye todos los microorganismos incluso virus. bombas cardiorrespiratorias. equipos electrónicos. las esporas y los virus. 2. radiofármacos. Estos compuestos destruyen las esporas. Son filtros con orificios muy regulares que atraviesan la membrana verticalmente. Funcionan como tamices. Es muy peligroso por ser altamente inflamable y explosivo. etc. medios para cultivos celulares. Glutaraldehído: Consiste en preparar una solución alcalina al 2% y sumergir el material a esterilizar de 20 a 30 minutos.Membranas filtrantes: Tienen una estructura continua.MÉTODOS QUÍMICOS Estos métodos provocan la perdida de viabilidad de los microorganismos. o pegado dentro de los canales de flujo.Filtros de huella de nucleación (Nucleoporo): Son películas muy delgadas de policarbonato que son perforadas por un tratamiento conjunto con radiación y sustancias químicas. y soluciones de antibióticos y vitaminas. y además cancerigeno. estos últimos están en el límite de separación según el diámetro de poro que se utilice.0. Su usa para esterilizar aceites. generalmente en la industria farmacéutica. destruye la bacteria en estado vegetativo.. -Otros: b).. es un agente microbiano de amplio espectro. algunos tipos de pomadas. provocando una modificación irreversible en enzimas e inhiben la actividad enzimática. sulfhidrilos. Partículas más pequeñas al tamaño del poro quedan retenidas en la matriza del filtro debido a efectos electrostáticos. plástico. Es utilizado este método para identificar microorganismos en muestras de agua potable y otras sustancias. plegado. se depositan en el fondo del recipiente que las contiene quedando el líquido sobrenadamente no estéril del todo. Sedimentación: Es un método por el cual los microorganismos son eliminados de depósitos hídricos. 3.. activado.filtros que se utilizan pueden no retener virus o micoplasmas. hidroxilos.). soluciones oftálmicas. En el laboratorio la sedimentación se acelera por centrifugación.

las cuales pueden disponerse en el fondo de una caja envueltas en gasa o algodón. Desventajas: No se pueden esterilizar objetos que contengan celulosa. que son cajas de doble fondo. goma. e). Es el método de esterilización más caro de entre los descritos. madera o instrumental con lúmenes largos y estrechos. que ejerce la acción biocida. plásticos. metal. etc. Las pastillas de formalina a temperatura ambiente esterilizan en 36 hs. Puede esterilizar plástico. aniónicos y anfóteros Órgano Mercuriales Colorantes Desinfectantes y/o sterilizantes Cloro y Compuestos clorados Aldehídos Oxido de Etileno . sin embargo. AGENTES QUÍMICOS ESTERILIZANTES los agentes químicos esterilizantes que destruyen patógenos suelen denominarse desinfectantes.Este método tiene la ventaja de ser rápido y ser el único esterilizante efectivo frío. Alcoholes Iodo Antisépticos Agentes catiónicos. líquidos. Posee como ventajas: No deja ningún residuo tóxico. algodón. humedad. El material no precisa aireación. son útiles para destruir microorganismos en el medio humano o animal. etc. Los agentes desinfectantes que pueden aplicarse tópicamente en la superficie corporal se les designa con el nombre de antiséptico. 3. d) Formaldehído: Se utilizan las pastillas de paraformaldehido. que después pueden ser expuesta al calor para una rápida esterilización (acción del gas formaldehído). los cuales en su gran mayoría son tóxicos para el ser hu mano. El ciclo de esterilización dura entre 54 y 75 minutos. vidrio. Esterilización por gas-plasma de Peróxido de Hidrógeno: Es proceso de esterilización a baja temperatura la cual consta en la transmisión de peróxido de hidrógeno en fase plasma (estado entre líquido y gas). en donde se colocan las pastillas y se calienta hasta los 60° C y pueden esterilizar materiales de látex. Se convierte en agua y oxígeno al final del proceso. También pueden ser usadas en Estufas de Formol. goma.

Mecanismo de Acción: 1. GRUPO C: Esporas bacterianas y virus resistentes. Por el contrario. cubierta que se Para cada producto destruyen fácilmente debe considerarse con los productos. Es imprescindible emplear las concentraciones recomendadas. entre ellos los que causan la hepatitis. así como la duración de esta acción. CONCENTRACIÓN TIEMPO TEMPERATURA PH ESTADO DE VIDA Varia de un microorganismo a otro y de un desinfectante a otro.. Los factores que se estudian influyen en la capacidad de los desinfectantes químicos para actuar sobre os microorganismos. FACTORES QUE AFECTAN A LOS DESINFECTANTES. un producto es menos activo cuanto más diluido está. La desinfección es un proceso gradual que requiere tiempo para consolidarse. ACCESIBILIDAD DE LAS BACTERIAS Para que el producto sea efectivo debe alcanzar la célula bacteriana. sangre y Se debe asegurar Siempre deben pus pueden que todas las áreas reemplazarse depuse reaccionar con a desinfectar del segundo dia ya que algunos tengan una se deterioran desinfectantes y exposición progresivamente disminuir su adecuada al capacidad para producto (envases interactuar con los cerrados) microorganismos. por separado la acción del pH GRUPO B: Los más difíciles de destruir. Debe limpiarse bien el área que se ha de desinfectar . Y CLASE DE MICRO ORGANISMO A altas temperaturas En la interacción de Existen en los se incrementa la los desinfectantes microorganismos acción bacteriana. corrosivo y costoso. de no hacerlo su utilización es inútil. y pueden GRUPO A: Formas aumentar o vegetativas y virus con disminuir su acción.Absorción superficial por coloides proteicos Unión del producto a grupos activos de NUMERO DE BACTERIAS A ELIMINAR A mayor numero se debe incrementar el tiempo de exposición PRESENCIA DE EXPOSICIÓN DETERIORO DEL SUSTANCIAS ADECUADA DESINFECTANTE EXTRAÑAS La tierra.Compuestos Fenólicos Acidos y Alcalis 4. el desinfectante ha de permanecer en contacto con el material contaminado el tiempo suficiente para que sea efectivo. uno demasiado concentrado puede originar la coagulación en la superficie de las materias orgánicas e impide la penetración del producto en el interior de la bacteria y puede ser irritante. con los algunas variaciones en La mayoría se llevan microorganismos la susceptibilidad. acidez y la grupos: alcalinidad del medio. se a temperatura es importante la clasifican en los tres ambiente.

. pero no son eficaces contra las esporas. 6. Los agua jabonosa tiene la mas efectivos son el propiedad de emulsionar mercurio (mercuriocromo y y dispensar aceites y mertiolate). Staphylococcus aureus y Pseudom onas aeruginosa. Las . Hay dos clases de compuestos colorantes que tienen especial interés como agentes antimicrobianos y son los colorantes del trifenilmetano y algunos derivados de la acridina. en aplicaciones oftálmicas. En el laboratorio. ya que tensión superficial en actúan desnaturalizándolos incrementan el poder al combinarse con las humectante del agua. Tienen los alcoholes acción limpiadora al remover los lípidos acumulados METALES PESADOS DETERGENTES COLORANTES Son empleados para la tinción de bacterias o indicadores. plata (nitrito de polvo. En soluciones diluidas es eficaz en la piel y no daña los tejidos si su exposición es menor a una hora CRESOLES Se obtienen de la destilación del carbón. el proteínas celulares. Este método compara la eficacia de los desinfectantes a probar contra la del fenol para cepas bacterianas de Salmonella Typhi.. el Yodo tiene propiedades esporicidas.las proteínas extrañas2.5. se presume que involucra la halogenización de las unidades de tirosina de las enzimas y otras proteínas para su actividad por una parte. os colorantes se emplean para la identificación de bacterias. así como en irrigaciones de la vejiga Causan daño a os Los jabones reducen la microorganismos. es corrosivo y de olor desagradable. por su actividad bacteriostática y bactericida tienen aplicabilidad en medicina. de acción rápida. los microorganismos son plata) y cobre (sales) atrapados por el jabón y HALÓGENOS: el cloro y el arrastrados por el agua yodo se emplean como antisépticos y desinfectantes el cloro es germicida inespecífico potente. fungidas y antivirales importantes. se puede mezclar con jabones. y liberando oxígeno por otra produciendo la oxidación de los constituyentes celulares de los microorganismos.EVALUACIÓN DE LOS DESINFECTANTES Y ANTISÉPTICOS: El método oficial para evaluar un desinfectante es el método de coeficiente de fenol. son eficaces contra células bacterianas vegetativas. no es irritante para la piel y deja una película protectora en la piel después de su aplicación. SOLVENTES ORGÁNICOS Incluye el tolueno y los alcoholes. Su acción es alterar la estructura y función de las membranas plasmáticas y desnaturalizar proteínas. Estos productos se emplean ampliamente en hospitales y clínicas. Es bactericida a altas concentraciones y bacteriostático a bajas concentraciones. Por los posibles daños al cerebro (absorción y paso al torrente sanguíneo) su uso se ha restringido un poco. El cloroformo y el tolueno son empleados como aditivos en soluciones que se desean mantener libres de gérmenes. Los alcoholes corresponden a los desinfectantes y antisépticos. Se pueden mezclar con jabones sin perder su efectividad germicida HEXACLOROFENO Es eficaz contra estafilococos y estreptococos.PRINCIPALES GRUPOS DE DESINFECTANTES QUÍMICOS FENOL Y SUS DERIVADOS El fenol es un producto también llamado ácido carbólico. En el campo de la medicina se les usa en el tratamiento de las quemaduras y heridas. es completamente toxico para los tejidos.

Radiaciones. 8. Todos los frascos deberán ser debidamente identificados en su superficie. El calor seco también es de poco uso en el área hospitalaria. Debidamente esterilizado antes de introducir la solución.1. Los métodos de esterilización utilizados en el área hospitalaria tendrán como fin eliminar o inhibir los microorganismos patógenos. sobre todo por el hecho de que requiere mayor tiempo de esterilización.MÉTODOS DE ESTERILIZACIÓN UTILIZADOS EN EL HOSPITAL UNIV ERSITARIO DE CARACAS. 7.1..2. 8. La utilización del calor húmedo.1 Calor Húmedo. El método de la filtración solo es utilizado en el área de laboratorios de microbiología del hospital. Las radiaciones en el área hospitalaria son utilizadas.. .1. sobre todo por los nuevos avances en técnicas de esterilización y desinfección.1.4.1.condiciones de esterilización de este método son descritas en el procedimiento oficial y deben ser obedecidas para obtener resultados válidos. Del método del calor húmedo solo se utiliza en el área hospitalaria el vapor a presión a través del autoclave (esterilización por el vapor de agua a presión que esteriliza a 120º a una atmósfera de presión dejando el material durante 20 a 30 minutos).3. van a comprender estos métodos todos los procedimientos físicos químicos. Los frascos deben ser de vidrio con tapón antirreflujo. Durante un tiempo de utilizó para flamear las agujas en la aplicación de vacunas. Los tapones de corcho no deben utilizarse. respecto al calor húmedo y debido a la baja penetración del calor. sobre todo en los laboratorios y en las tomas de muestra para hemocultivos (flameado de la punta de la inyectadora antes de vaciar el contenido en el medio de cultivo). Las soluciones de desinfectantes deben ser estériles y manipularse asépticamente. debido al auge de las inyectadoras desechables ésta practica se eliminó.Calor Seco. 8. pues son permeables a los gérmenes. sobre todo el método de la Ebullición (recipiente con agua a presión atmosférica de 100 oC) y la Tyndalización (esterilización por acción discontinua del vapor de agua a una temperatura de 100 oC en varias sesiones) dejó de utilizarse desde hace mucho tiempo en el área hospitalaria. Entre los métodos que utilizan el calor seco como medio de esterilización el flameado aún se utilizan en el Hospital Universitario. La sedimentación también es utilizada en el área de laboratorio.....PRECAUCIONES CON LOS DESINFECTANTES Todas las soluciones deben ser preparad por personal especializado y en un as ambiente adecuado. pero no con fines de esterilización 8. 8. 8.MÉTODOS FÍSICOS. Se utiliza por ser un método rápido y efectivo ya que el vapor a presión proporciona temperaturas altas con penetración y humedad en abundancia que facilitan la coagulación de las proteínas de los microorganismos. sobre todo por medio de la centrifugación.Mecánicos.

es eficaz como antiséptico. incluyendo las esporas y los virus. el Yodo tiene propiedades esporicidas.2. que como se dijo antes.3. pero no son eficaces contra las esporas. . El oxido de etileno provoca la perdida de viabilidad de los microorganismos. papel. son eficaces contra células bacterianas vegetativas. etc. de acción rápida. cancerigeno y corrosivo. plástico. se presume que involucra la halogenización de las unidades de tirosina de las enzimas y otras proteínas para su actividad por una parte. jabones) y antisépticos (alcohol.MÉTODOS QUÍMICOS En el Hospital Universitario se utilizan los gases para esterilizar. por ser un agente microbiano de amplio espectro. Tienen los alcoholes acción limpiadora al remover los lípidos acumulados. Su uso está restringido al área de quirófanos por su peligrosidad (es inflamable. El povidine es una mezcla de jabón y yodo. yodo. detergentes. equipos electrónicos.8. Los alcoholes corresponden a los desinfectantes y antisépticos. Se utiliza para esterilizar material termosensibles como el descartable (goma. el agua jabonosa tiene la propiedad de emulsionar y dispensar aceites y polvo. los microorganismos son atrapados por el jabón y arrastrados por el agua.. en específico el Oxido de etileno. bombas cardiorrespiratorias. es un agente alquilante. con el fin de destruir agentes patógenos. gerdex. metal. etc. Se utiliza por su efectividad ya que destruye todos los microorganismos. destruye la bacteria en estado vegetativo. povidine). El cloro y el yodo se emplean como antisépticos y desinfectantes el cloro es germicida inespecífico potente. 8. del área quirúrgica del Hospital.). AGENTES QUÍMICOS ESTERILIZANTES En el área hospitalaria del Clínico Universitario se utilizan desinfectantes (cloro. explosivo. fungidas y antivirales importantes. Los jabones reducen la tensión superficial en incrementan el poder humectante del agua.

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