Origen endosimbióntico de la mitocondria y el cloroplasto:

La mitocondria tiene dos membranas y dos espacios:

Tamaño de la mitocondria
Metabolismo anaeróbico vs. aeróbico
Todo lo que ocurre dentro de la mitocondria, desde el espacio
intermembranal hasta la matriz:
Ala, Cys, Gly,
Ser, Thr, Trp

-oxidación de ác. grasos

 En resumen, ¿qué tiene la mitocondria?

• Membrana externa: permeable a iones y pequeñas moléculas. Tiene algunas

proteínas principalmente porina y parte del aparato de importación de proteínas.

• Membrana interna: impermeable a casi todas las moléculas pequeñas e iones,

incluyendo H+. Rica en proteínas como las encargadas de la cadena respiratoria,
acarreadores, etc.

• Matriz mitocondrial:
• las enzimas del complejo de piruvato deshidrogenasa,
• enzimas del ciclo del ácido cítrico,
• enzimas de la -oxidación de ácidos grasos,
• enzimas de la oxidación de aminoácidos,
• DNA,
• Ribosomas,
• ATP, ADP, Pi, Mg2+, Ca2+, K+,
• intermediarios metabólicos solubles.

• Espacio intermembranal: citocromo c, H+.

Mitoproteoma: estudio de las proteínas que se encuentran en la
mitocondria de humanos

http://www.mitoproteome.org/html/data
base.html

Membrana externa: 41 entradas,

Membrana interna: 58 entradas,

Espacio intermembranal: 6 entradas,

Matriz mitocondrial: 101 entradas.

 La cadena respiratoria mitocondrial está formada por cuatro
complejos multiméricos que tienen grupos redox:

Complejo I: Complejo III: Complejo IV: Complejo II:

ubiquinol citocromo c
NADH ubiquinona citocromo c oxidasa Succinato ubiquinona
reductasa
reductasa reductasa
Componentes redox de la cadena respiratoria, acarreadores
móviles, grupos prostéticos
La ubiquinona es un acarreador móvil de electrones dentro de la membrana interna
 Diferentes grupos prostéticos de los complejos respiratorios

grupos hemo centros Fe-S

Diferentes grupos hemo de la cadena respiratoria
 Los cuatro
complejos
oxidoreductores
de la cadena de
transporte de
electrones
tienen distintos
E’º

Acoplado al
transporte de
electrones hay una
de H+ hacia el
espacio
intermembranal
Componentes proteicos de la cadena de transporte de electrones
 Purificación de los
complejos respiratorios:
El complejo I: NADH:quinol óxido-reductasa

Deshidrogenasas dependientes de
NAD o de FAD
 El complejo II:
Succinato:ubiquinona
deshidrogenasa

Tiene 4 subunidades
Cataliza la oxidación de
succinato a fumarato,
reduce a una quinona
 El complejo III ó complejo bc1
citocromo c1:
un cruce
transmembra-
nal, un hemo
covalentemen
te unido

citocromo b:
8 cruces
transmembra
Proteína fierro-
nales, dos
azufre: un
hemos
cruce
transmembra-
nal, un centro
2Fe-2S
QUINOL-CITOCROMO C (PLASTOCIANINA) ÓXIDO-REDUCTASA

Bos taurus Rhodobacter Chlamydomonas

pollo capsulatus reinhardthii
levadura Mastigocladus
conejo laminosus
 Reacción neta del complejo III catalizada por el ciclo Q

2QH2p + Qn + 2 citocromo cox + 2H+n

2Qp +QH2n + 2 citocromo cred + 4H+p

 Los sitios de reacción de la quinona
están en el citocromo b:

sitio Qp:
oxidación del quinol
grupos:
ubiquinol, FeS
hemo bL

sitio Qn:
reducción de la
quinona
grupos:
ubiquinona,
hemo bH
 El ciclo Q del bc1:
2H+ matriz
sitio Qn(-)
o
sitio de Q Qn.- QH2
reducción
de la quinona
e- -
eantimicina
citbH

citbL
QH
QH22
mixotiazol
sitio Qp(+)
o e- e- ISP
Q cit c1
sitio de Qp.-
oxidación
del quinol estigmatelina
cit c
.- 2H+
O2 O2 4H+ espacio intermembranal
 El complejo bc1 tiene una estructura dimérica:

citocromo c1

citocromo b

Proteína
Fe-S

grupos redox
• cristalizado en: bovino, conejo, pollo y levadura
 QuickTime™ and a
GIF decompressor
are needed to see this picture.
El complejo IV: citocromo c oxido-reductasa

Complejo de Paraccocus
La reacción de reducción de oxígeno y el bombeo de protones por el complejo IV:

Espacio
intermembranal

Membrana
interna

Matriz
 La cadena respiratoria mitocondrial:
(los complejos cristalizados)

2H+
cit c
1/2 O2

+ 4H+ H2O

QH2 QH2
Q

Fumarato

Succinato H+
H+

ADP+Pi
ATP
 El acoplamiento quimio-osmótico:
cómo resulta la síntesis de ATP a partir
de la oxidación de sustratos
El autor de la hipótesis quimiosmótica:
La fuerza protón-motriz:
 Mitchell P. (1961) Nature 191, 141
2.-Generación de la fuerza protón-motriz
Energía química Energía
mitocondria y luminosa
++++ ++++
bacterias aeróbicas cloroplasto y
bacterias
----- ----- fotosintéticas

H+ H+
3.- ADP
Pi
Acoplamiento
H+ H+= + RT/nF pH
Quimi-osmótico
ATP
Rotación del
Y flagelo

1.- Membrana
impermeable
4.-transporte a protones
acoplado H+ X H+
Simport Ca++ antiport
uniport
Qué es la fosforilación oxidativa:
 CLOROPLASTO MITOCONDRIA
Jagendorf A.T. & Uribe E. (1966) Thayer, W.S. & Hinkle, P. C. (1975)
Brookhaven Symp. In Biol. 19, 215 JBC 250, 5330
Tres sistemas
de
transducción
de energía
Síntesis de ATP por la ATPsintasa:
una máquina molecular de síntesis.
El complejo V: La
ATP sintetasa

F1: 3α, 3β,

1γ, 1δ, 1ε

Fo: 10-14 c,
1a, 2b.
Los segmentos F1, Fo cristalizados:
Walker J.E. et al (1994)
Nature 370, 621

F1

F0
Diferencias estructurales dadas
por la unión de ATP, ausencia de
ATP ó ADP y Pi.
La ATP sintasa vista desde la
zona que ve hacia el espacio
intermembranal.
 La síntesis de ATP
Mecanismo de requiere de movimiento
liberación del en el segmento F1
ATP por el sector ocasionado por la
F1 de la subunidad en
ATPsintasa movimiento.
Comprobación de que la subunidad gira
Noji H. et al (1997) Nature 386, 299
Rotación del filamento de actina en cuadros
 (2004)
NATURE 427, 465.

La síntesis de ATP
puede ser hecha
mecánicamente sin el
sector Fo
Para ver esta película, debe disponer de QuickTime™ y de un descompresor Sorenson Video 3.
Otras proteínas mitocondriales
Proteínas mitocondriales que no tienen que ver con la cadena respiratoria
La mitocondria es un organelo que importa la gran mayoría
de sus proteínas.
Proteínas de la cadena respiratoria que están codificados en el genoma
mitocondrial
El genoma mitocondrial humano
Cristales de oxaloacetato en mitocondrias de pacientes con miopatías mitocondriales
Cómo se estudia el transporte
de proteínas a la mitocondria
El sistema translocador de proteínas en bacterias:
Proteínas secretadas como toxinas:
El sistema de importación
de proteínas en la
mitocondria:
Importando una proteína citosólica a la mitocondria
 Estudio in vitro
del transporte de
una proteína a la
que se le ha
unido el
inhibidor
metotrexato
 Sitios de
unión entre
la membrana
interna y la
externa
Péptidos señal
de proteínas
mitocondriales
 El complejo III
Ubiquinol:citocromo c
reductasa
 El complejo III:
ubiquinol:citocromo c oxido-reductasa

Estequiometría neta del ciclo Q