Está en la página 1de 40

ESPECTROMETRÍA DE MASAS

Dra B. Argüello - Mgter G.P. Scipioni


Qca Orgánica- Qca Analítica
La espectrometría de masas es una técnica microanalítica útil para identificar
y cuantificar compuestos desconocidos y estudiar la estructura molecular

Análisis Cualitativo y Cuantitativo

Análisis de Mezclas Complejas

Alta Sensibilidad

Técnica Rápida, Universal y Específica

Técnica Destructiva

Dra B. Argüello - Mgter G.P. Scipioni


Qca Orgánica – Qca analítica
PROCESO

m/z

e- m/z
M M.
+

m/z
m/z

Ionización m/z
Absorción de E

Descomposición
Unimolecular de M+.

Dra B. Argüello - Mgter G.P. Scipioni


Qca Orgánica- Qca Analítica
ESPECTRO DE MASAS
Gráfico que recoge y ordena en orden creciente de masa los
fragmentos obtenidos, indicando su abundancia relativa
Pico Base
CH3CO+
43
Ion Molecular
M+.

58
O

CH3+
H3C CH3
15
C2H3+

27

Dra B. Argüello - Mgter G.P. Scipioni


Qca Orgánica- Qca Analítica
ESPECTRÓMETRO DE MASAS (de analizador magnético 90º)

Dra B. Argüello - Mgter G.P. Scipioni


Qca Orgánica- Qca Analítica
FUENTES PARA PRODUCIR LOS IONES (fragmentos)
Impacto Electrónico o Ionización Electrónica (EI)

Técnica más utilizada para producir la ionización, fácil y efectiva.


Se aplica únicamente para analitos en fase gaseosa.
gaseosa
Causa fragmentación extensiva y generalmente no se observa el Ion Molecular
(IM).
El analito es introducido a la fuente a 10-6 mbar y es ionizado por un flujo de e- a
70eV.
Los e- son generados por emisión térmica de un filamento caliente y son
acelerados por un campo eléctrico produciendo una corriente (1 10-4 Amp).
La corriente provoca que la molécula neutra pierda un e- y forme un ion (radical
catión).
Cambiando la energía de ionización cambia la distribución de los fragmentos
iónicos.
Dra B. Argüello - Mgter G.P. Scipioni
Qca Orgánica- Qca Analítica
Resolución

Para los propósitos de identificación y análisis estructural, es suficiente que los


espectrómetros puedan diferenciar las masas de los fragmentos con una resolución
de una uma (baja resolución).
Por espectrometría de alta resolución es posible medir masas hasta su cuarta
decimal.
La HRMS permite diferenciar las masas de CO, N2, CH2N y C2H4 (todos tienen 28
uma).

La utilidad analítica de un espectrómetro de masas depende de la


resolución (R) del instrumento, o capacidad del mismo para
separar dos partículas de diferente masa.
R= m
∆m

Dra B. Argüello - Mgter G.P. Scipioni


Qca Orgánica- Qca Analítica
INTERPRETACIÓN
Ion Molecular (IM) o M+

El valor de masa del IM es la masa de los isótopos más abundantes de cada


elemento en la molécula.
El valor del IM no es el peso atómico.
Muchas veces el IM no es el mas abundante, sino otro ion el cual
corresponde al pico base.
La mayoría de los compuestos tienen masa par, a excepción de los que
cumplen con la regla del nitrógeno.
Regla del nitrógeno: cualquier compuesto con número impar de N tendrá
una masa molecular impar. Cualquier compuesto con número par de N
(incluso cero) tendrá una masa molecular par.

Dra B. Argüello - Mgter G.P. Scipioni


Qca Orgánica- Qca Analítica
La estabilización de la carga + y la tendencia a la fragmentación influyen en la
intensidad del M+.

Pueden producirse colisiones ión-molécula (proceso bimolecular) que provocan


partículas de mayor masa que el IM esperado, como por ejemplo la sustracción de
H para dar iones M +1.
+1

El pico M+1 es importante en éteres, ésteres, aminas, aminoésteres y nitrilos,


donde la especie protonada es estable.

La abundancia relativa de los fragmentos se relaciona con su velocidad de


formación y su velocidad de disociación en la descomposición unimolecular.

Dra B. Argüello - Mgter G.P. Scipioni


Qca Orgánica- Qca Analítica
FRAGMENTACIÓN

Homolítica

Cada e- ¨se mueve independientemente¨ y se generan un catión y un radical.

Heterolítica

El par de e- ¨se mueve en conjunto¨ y se generan un catión y un radical.

Dra B. Argüello - Mgter G.P. Scipioni


Qca Orgánica- Qca Analítica
Los cationes con Nº par de e- se fragmentan para originar otro catión con Nº par de
e- y una molécula neutra.

La altura relativa del pico del IM es mayor para compuestos lineales y disminuye a
medida que incrementa la ramificación.

La altura relativa del pico del IM disminuye con el incremento del peso molecular en
una serie homóloga.

El clivaje está favorecido en carbonos más sustituidos (estabilidad de los


carbocationes terciarios mayor a los secundarios y primarios).

El sustituyente más grande de una ramificación es eliminado como un radical


debido a que puede adquirir estabilidad por deslocalización.

Dra B. Argüello - Mgter G.P. Scipioni


Qca Orgánica- Qca Analítica
HIDROCARBUROS

* Los lineales presentan conjuntos de picos separados en 14 unidades de masas


(CH2) de intensidad decreciente con el incremento de las masas de los fragmentos.
* El IM (M+) tiene intensidad baja.
* El pico [M-CH3] es débil.
* La ramificación da lugar a una ruptura en el punto de ramificación formándose un
carbocatión secundario o terciario.
* Se obtienen picos Picos CnH2n+1; CnH2n y CnH2n-1.

Dra B. Argüello - Mgter G.P. Scipioni


Qca Orgánica- Qca Analítica
* Los carbocationes pueden sufrir fragmentaciones posteriores por eliminación de H•

La intensidad relativa de los fragmentos


depende de la facilidad para formar cada ión
Dra B. Argüello - Mgter G.P. Scipioni
Qca Orgánica- Qca Analítica
alquenos

Los dobles enlaces favorecen el clivaje alílico dando un carbocatión alílico


estabilizado por resonancia.
Dra B. Argüello - Mgter G.P. Scipioni
Qca Orgánica- Qca Analítica
En los compuestos aromáticos con sustituyentes R, el clivaje se da en el
enlace β respecto del anillo, dando el catión bencilo (estabilizado por
resonancia) que se reordena a ion tropilio.

m/z 91

Ley de Huckel 4n+2 e-

Dra B. Argüello - Mgter G.P. Scipioni


Qca Orgánica- Qca Analítica
Los enlaces C-C junto a un
heteroátomo son clivados, dejando
la carga en el fragmento
conteniendo el heteroátomo.

Dra B. Argüello - Mgter G.P. Scipioni


Qca Orgánica- Qca Analítica
Patrón de degradación de los éteres

Ruptura
heterolítica

Dra B. Argüello - Mgter G.P. Scipioni


Qca Orgánica- Qca Analítica
AMINAS
Alifáticas

El IM de monoaminas alifáticas es impar y bastante débil.

El pico base proviene del clivaje C-C adyacente al N.

En aminas primarias sin sustituir en Cα, el pico base es m/z 30 (CH2NH2+)

La pérdida del sustituyente más voluminoso en Cα es la fragmentación predominante

Dra B. Argüello - Mgter G.P. Scipioni


Qca Orgánica- Qca Analítica
Para las alquil-arilaminas el clivaje del C –C adyacente al N es predominante.

Dra B. Argüello - Mgter G.P. Scipioni


Qca Orgánica- Qca Analítica
CETONAS
Alifáticas
El ión molecular suele ser intenso.
Los fragmentos más abundantes corresponden al clivaje en el C-C adyacente al
oxígeno. Se genera el ión acilio estabilizado por resonancia.

El pico base resulta de la pérdida del R más voluminoso (m/z 43) - metilcetonas.
Cuando la cadena alquílica unida al CO es C3 o mayor, el clivaje C-C ocurre con
migración de H (Reordenamiento McLafferty).
Dra B. Argüello - Mgter G.P. Scipioni
Qca Orgánica- Qca Analítica
Aromáticas

El pico del IM es importante.


importante

Las aril-alquil cetonas generan iones ArCΞO+ como pico base. Los iones RCΞO+ se
destacan para sustituyentes tomadores de e- en posición para en el anillo aromático.

Cuando el resto alquílico es C3 o mayor se produce el reordenamiento de McLafferty.

M+

Dra B. Argüello - Mgter G.P. Scipioni


Qca Orgánica- Qca Analítica
ALDEHÍDOS
Alifáticos
Presentan picos débiles de IM.
La ruptura en el C-H genera el M – 1 y la ruptura en el C-C genera M – R (m/z 29,
CHO+).
En aldehídos C4 o mayores se da el reordenamiento de McLafferty.
En aldehídos lineales los picos de diagnóstico importantes son M – 18, M – 28
(pérdida de etileno) y M – 44 (pérdida de CH2=CH-OH)

Hexanal

m/z 86

Dra B. Argüello - Mgter G.P. Scipioni


Qca Orgánica- Qca Analítica
ALCOHOLES
+
ROH primarios muestran un pico alto correspondiente a H2C OH (m/z 31).
31)

R +
ROH secundarios y terciarios generan picos del tipo C OH (m/z 45),
R
H
+
59, 73, etc.) y C OH (m/z 59, 73, 87, etc.).
etc.)

COMPUESTOS HALOGENADOS
El ión M+2
* El Cl y el Br se presentan como mezclas de dos isótopos principales, el F y el I son
monoisotópicos.
* Un fragmento iónico o IM que contenga Cl presentará un isótopo a M + 2 a un tercio
de intensidad.
* Un fragmento iónico o IM que contenga Br presentará un isótopo a M + 2 de igual
intensidad.
* Un compuesto que contenga dos Cl, Cl dos Br ó un Cl y un Br mostrará un M + 4
debido a la presencia del IM conteniendo los dos átomos del isótopo más pesado.
* La abundancia del IM para haluros orgánicos es F < Cl < Br < I.

Se dan los siguientes procesos:

R-X+. → R+ + X. para X = I o Br

R-CH2CH2X+. → [RC=CH2]+. + HX más importante para X = Cl y F

R-CH2X+. → R. + CH2=X+ Dra B. Argüello - Mgter G.P. Scipioni


Qca Orgánica- Qca Analítica
Enlace más débil Pico base

Dra B. Argüello - Mgter G.P. Scipioni


Qca Orgánica- Qca Analítica
Dra B. Argüello - Mgter G.P. Scipioni
Qca Orgánica- Qca Analítica
Técnicas de Ionización (fuentes de iones)
Fuentes de fase gaseosa
Analitos térmicamente estables con Teb menores a 500 °C.
* Ionización por electrones (EI)
* Ionización Química (CI)

Fuentes de desorción
Analitos no volátiles y térmicamente inestables.
* APCI
* Bombardeo por Átomos Rápidos (FAB)
* Electrospray (ESI)
* Desorción Ionización de Matriz Asistida por Laser (MALDI)
Los equipos permiten dos formas de ionización

Dra B. Argüello - Mgter G.P. Scipioni


Qca Orgánica- Qca Analítica
Ionización por electrones

* Aplicada a analitos en fase gaseosa y masa de 103 daltons.


* La M se introduce a la zona de ionización a baja presión.
* Es ionizada por un haz de e- generados por emisión térmica de un filamento de tungsteno
o renio.
* Un potencial de 70 eV se aplica entre el filamento y el ánodo.
* Se produce fragmentación importante. Puede no registrarse el M+.
* Se puede hacer un espectro a 30 eV.
* Buena sensibilidad.

Dra B. Argüello - Mgter G.P. Scipioni


Qca Orgánica- Qca Analítica
Ionización Química

* La M gaseosa es ionizada por colisión con iones de un gas reactivo, generados por
IE.
* La relación de gas reactivo a M es de 103 a 104. Los gases reactivos son metano,
propano, isobutano, amoníaco. La presión del gas es 1 torr en la cámara.
* Se puede transferir un H+ o un H-.
* La M se introduce por sonda o por CG y se tiene menor fragmentación.

Dra B. Argüello - Mgter G.P. Scipioni


Qca Orgánica- Qca Analítica
Electrospray (ESI)
* P normal y T ambiente.
* La M se coloca en un emisor (capilar o aguja) o por bombeo (µL/min).
* Se producen gotitas cargadas que explotan al evaporarse el solvente: explosión de Coulomb.
* Se registran iones de carga múltiple (Compuestos de masa alta con m/z bajos).
* Se analizan péptidos, oligosacáridos, proteínas, polímeros sintéticos, carbamatos, aminas.
* Evitar compuestos no polares.

Dra B. Argüello - Mgter G.P. Scipioni


Qca Orgánica- Qca Analítica
Ionización por electrospray
(electronebulización)
Desorción-Ionización de Matriz Asistida por Láser (MALDI)
* La M esta absorbida en una matriz ácida (ácido nicotínico, urea, glicerol).
* Relación 1: 103 a 1: 105.
* Un pulso de láser se aplica a la matriz. Esta lo absorbe y genera un plasma (desorción-
Ionización).
* La ionización es por transferencia de protones desde la matríz.
* Láser : nitrógeno: 337 nm; Nd-Yag: 266 y 355 nm; dióxido de carbono: 10,6 µ.
* Se forman pocos fragmentos, si iones carga múltiple y el M+.
* Se usa en el análisis de proteínas, péptidos y polímeros.
* Desorción en cámara de vacío (placa)
* Desorción a P atmosférica.

Dra B. Argüello - Mgter G.P. Scipioni


Qca Orgánica- Qca Analítica
Introducción de la Muestra
Inserción Indirecta (Vaporización Directa)
* El analito en fase gaseosa se introduce en la región de ionización.
* Aplicable a gases, líquidos y sólidos con elevada Pv.
* Las muestras gaseosa se ingresan entre 2 válvulas y luego se expanden.
* Las muestras líquidas se ingresan en un contenedor mediante una jeringa y luego se
vaporizan.
* Mediante bombas de vacío se mantiene la P en 10-4 a 10-5 torr.

Dra B. Argüello - Mgter G.P. Scipioni


Qca Orgánica- Qca Analítica
Inserción por Sonda Directa (DIP)
* Introduce líquidos de baja PV y sólidos. La T es > que en la vaporización directa
* La muestra se coloca en un soporte de muestra o sonda y se introduce mediante un sistema de
vacío. La cantidad de M es del orden de ng.
* La M se coloca sobre la superficie de un tubo de vidrio o de Al, alambre fino o copa.
* Permite insertar carbohidratos, esteroides, polímeros de baja Masa Molar, especies
organometálicas.

Dra B. Argüello - Mgter G.P. Scipioni


Qca Orgánica- Qca Analítica
Cromatografía Gaseosa
* Los componentes separados de una mezcla son analizados e identificados por EM.
* Identificación y cuantificación de moléculas orgánicas volátiles. Contaminantes: pesticidas,
insecticidas, olores y sabores (alimentos), productos farmacéuticos.

* El flujo de gas carrier que ingresa al EM es pequeño


* Columnas capilares de vidrio sirven de interfases.
* Membranas de siliconas de 0,05 mm de espesor

Separador Jet
Dra B. Argüello - Mgter G.P. Scipioni
Qca Orgánica- Qca Analítica
Cromatografía líquida
* Útil para introducir compuestos sensibles a la T no separables por CG
* La muestra es ionizada desde la fase condensada (ESI)
* Aplicada a compuestos muy polares, iónicos, termolábiles y macromoléculas.

Dra B. Argüello - Mgter G.P. Scipioni


Qca Orgánica- Qca Analítica
Analizadores de Masa
* Separan o resuelven los iones de acuerdo a su relación m/z
* Pueden ser continuos o de pulso
* Continuos: Se van ajustando los campos (voltaje) para que los distintos iones
lleguen al detector
- Sector Magnético (simple y doble enfoque)
- Cuadrupolo
* Pulsos: Los iones llegan todos juntos al detector
- Trampa de Iones (Trap)
- Tiempo de Vuelo (TOF)

Dra B. Argüello - Mgter G.P. Scipioni


Qca Orgánica- Qca Analítica
Cuadrupolo
• Equipos mas compactos, menos caros y mas robustos
• Emplean tiempos de barrido del orden de 100 ms
• Compuesto por 4 barras cilíndricas (electrodos), paralelas en 2 grupos
• Un par conectado al polo + y el otro par al polo –. Afectadas por una corriente alterna
de radiofrecuencias variable y por una corriente continua, que generan un campo
oscilante.
• El par + (plano xz) es el filtro de masa elevada y el par – (plano yz) es el filtro de
masa baja.
• Los iones de trayectoria estable en ambos planos llegan al detector
• Permite la resolución de una unidad de masa

Dra B. Argüello - Mgter G.P. Scipioni


Qca Orgánica- Qca Analítica
Tiempo de Vuelo (TOF)
• Los iones se analizan de acuerdo al tiempo que tardan en llegar al detector (1 a 2 m) desde
la fuente
• Son producidos por pulsos de 0,25 μs por laser (MALDI).
• Son acelerados por un pulso eléctrico de 103 a 104 V
• Sus velocidades varían de acuerdo a su masa (chocan secuencialmente contra el detector)
• Analizador rápido (1 a 30 μs), sensibilidad alta pero menor resolución que el cuadrupolo.
• Mayor rango de masas

TOF lineal

TOF de reflexión
(reflectron)
Dra B. Argüello - Mgter G.P. Scipioni
Qca Orgánica- Qca Analítica