TECNOLÓGICO DE ESTUDIOS SUPERIORES DE ECATEPEC

Lactobacillus delbrueckii para sacarosa en

matraz con tapón de algodón.

Ingeniería de Biorreactores.

María Aurora Martínez Trujillo.

Equipo:

Martínez Loyola Yotzelin

Mijares Pliego Ileana Patricia

Lactobacillus delbrueckii
Es una bacteria Gram-positiva mejor conocida como bacterias del ácido láctico,
la fermentación del azúcar de la leche en ácido láctico. Se encuentra
normalmente en la leche y puede ser una causa natural de acidificación.

Lactobacillus delbrueckki se encuentra en forma de bastones, con un pH ácido,

tiene propiedades de un probiótico. (Ruiz Diaz, 2015).

Lactobacillus delbrueckki.
Medios de cultivo utilizados para hacer crecer el
microorganismo.
Para mantener el cultivo puro y vivo se inocula aproximadamente 0.5g de
liofilizad en 50 ml de caldo MRS incubándolo a 48ºC durante 24 horas, después
se hacen inoculaciones cada tercer día, en un nuevo caldo MRS.

COMPOSICIÓN GENERAL DEL MEDIO DE CULTIVO

Extracto de levadura 30 g/L
MgSO4 7H2O 0.1 g/L
MgSO4 0.05 g/L
K2HPO4 2 g/L
Melaza 22 g/L

COMPOSICION GENERAL DEL MEDIO DE CULTIVO. FUENTE DE

CARBONO (Bonilla, Escobar, Guarin, &Mahecha, 1995)

COMPOSICIÓN GENERAL DEL MEDIO DE CULTIVO

Glucosa 7% a 14% (p/v)
Suero de Sangre de res 22%
Tiamina 0.005%
Agua destilada 1 Litro
Substancias reguladoras de pH Carbonato de calcio
Método utilizado para cuantificar la biomasa durante el cultivo.

Se utilizaron dos métodos para la cuantificación de biomasa;

 Peso seco
 Turbidimetria

Diagrama de cuantificación de biomasa por peso

seco.

Determinación de biomasa
por peso seco.

Se toma un medio de cultivo

donde se ha sembrado el
microorganismo.

Este medio de volumen conocido se

filtrará mediante una membrana de Se calcinará hasta peso constante
0.22 micras de diámetro de poro.

Con este dato se realizará una

curva de calibración para las
determinaciones posteriores de
biomasa por densidad óptica.
Diagrama de Turbidimetrìa.

Toma de muestra cada 24

horas.

Hacer diluciones
para su respectiva
homogeneización

Homogeneizar las muestras en

el vòrtex

Leer la
densidad
óptica (DO)
de la
suspensión a
640 nm

Calibrar el equipo con

blanco hecho con la misma
dilución.
PLANEACION DEL CULTIVO POR LOTE DE ACUERDO A LA ECUACION DE
MONOD. (ANEXO 1).

Extracto de levadura1g/L, sulfato de

PREPARACION
Amonio 7g/L, KH2PO4 g/L, Sacarosa
DE CULTIVO
15 G/L pH 7

ESTERILIZACIÒN Pipetas, tubos, frascos de muestreo,

DE MATERIALES y matraz.

COLOCAR LOS
CULTIVOS EN TUBOS. Colocar 3ml de cultivo e inocular con
lactobacillus delbrueckii 0.3ml en cada
INCUBAR E INOCULAR tubo, incubar a 34 C.

TOMAR Tomar 2 tubos a tiempo cero, tomar

ABSORBANCIA POR abs, centrifugar por 10 min a 10000
DUPLICADO Y rpm.
CENTRIFUGAR

MEDIR ph A TUBO 1 Medir muestras y titular con

MEDIR AZÙCAR A fenolftaleína hasta que vire.
TUBO 2

TOMAR MUESTRA
Diluir 1:20 con agua destilada y medir
CADA HORA,
1ml de muestar con 1ml de agua
TENIENDO EN
destilada.
CUENTA EL DESFASE
DE 12 HORAS

Cálculos, gráficas y tablas discusión y

ANALISIS DE RESULTADO conclusión.
ANEXOS

Anexo 1

Monod (1942), estudió el efecto de la composición de un medio de cultivo libre

de sustancias inhibitorias sobre la velocidad específica de crecimiento. Las
ecuaciones básicas que describen la interacción entre el crecimiento de los
microorganismos y el sustrato limitante del crecimiento son:

Donde KS es la constante de saturación, que es la concentración de sustrato

para la cual la velocidad específica de crecimiento es la mitad del valor
máximo.

En la tabla siguiente se presentan los valores de la constante de

saturación, KS , correspondientes al crecimiento de algunos microorganismos
en diversos sustratos. Los valores relativamente altos de KS de la glucosa
indican que este sustrato es una de las fuentes de carbono y energía
"preferidas" por muchos microorganismos. Sin embargo, para otros
microorganismos existen mejores sustratos que la glucosa.

Valores de la constante de saturación para algunos microorganismos

Organismo Sustrato Ks, (mg/l)

Escherichia Glucosa 6,8.10-2
Aspergillus Glucosa 5,0
Candida Glicerol 4,5
Saccharomyces Glucosa 25,0
Klebsiella Dióxido de carbono 0,4
Candida Oxígeno 4,5.10-1
Aspergillus Arginina 5,0.10-1
Cryptococcus Tiamina 1,4.10-7
Algunas limitaciones para varios sustratos o componentes del medio de cultivo
se describen por:

Donde cSi representa la concentración de los nutrimentos limitantes y cei la

concentración de los componentes promotores del crecimiento.

En el caso de medios con múltiples fuentes de carbono, una vez se agota un

sustrato, la célula adapta sus "rutas metabólicas", catalizadas por enzimas, a la
siguiente fuente de carbono y, después de un nuevo período de adaptación se
reinicia el crecimiento. Este fenómeno se conoce como crecimiento diauxico.
BIBLIOGRAFIA

Bonilla, M., Escobar, c., Guarin, R., & Mahecha, M (1995).

Lactobacillusdelbruickki bulgaricus. Revista Colombiana de ciencias Quimico
Farmaceuticas, 19.

Ruiz diaz, N(2017 de Mayo de 2015). Recuperado el 2 de Marzo de 2018, de

lactobacullis delbrueckki: http://www.botica.com.py/prospecto-
digital/2016/11/16/lactobacillus.delbrueckii/

https://smbb.mx/congresos%20smbb/veracruz01/TRABAJOS/AREA_II/CII-
44.pdf