UNIDAD ESPECIALIZADA EN ENERGÍAS RENOVABLES

Ingeniería en Energías Renovables

LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA

Nombre del estudiante: Abraham Ignacio Espinosa Hernández

Fecha:16 de Mayo del 2018

Práctica No. 8

TINCIÓN DE LEVADURAS CON AZUL DE METILENO

(Agregar una breve introducción acerca de levaduras)

Las levaduras son microorganismos unicelulares , que se reproducen asexualmente por
gemación en la mayoría de los casos , aunque también lo hacen por fisión sexualmente
por formación de esporas, estas al multiplicarse con facilidad en la naturaleza , su
aislamiento requiere de tiempo ya que las diferentes especies de levaduras se
encuentran entremezcladas , de modo que integran comunidades mixtas.
Por esta razón, para poder estudiar un tipo de levadura, especifico es necesario
producir un cultivo puro, es decir , un cultivo en el que solo haya una especie, en el
laboratorio es posible cultivar levaduras en un medio agar (sustancia solidificante que
se extrae de algas marinas )enriquecido con nutrientes apropiados.

OBJETIVO DE LA PRÁCTICA:

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1. Identificar la morfología de las colonias en cultivos puros de levadura.

2. Comprender la diferencia entre una observación de levaduras en fresco y fijada a
la flama en una laminilla.
3. Observar la morfología de las levaduras al microscopio.
4. Practicar en el uso del microscopio.
MATERIAL Y EQUIPO:
 Microscopio óptico
 Aceite de inmersión
 Portaobjetos
 Cubreobjetos
 Piseta con agua destilada
 Pipetas Pasteur
 Mechero Bunsen
 Solución de Azul de metileno en agua
 Papel arroz o papel óptico
 Cultivos de levadura en medio sólido y líquido

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DESARROLLO Y OBSERVACIONES DE LA PRÁCTICA:

(Describe las actividades que desarrollaste en la práctica, te recomiendo agregar
imágenes de las evidencias)
Se tomó una muestra de la levadura (Saccharomyces cerevisiae) en medio líquido y
aplicándola sobre un porta objetos y cubriéndola (cubre objetos) se observó al
microscopio primero con el 40x para la localización después 100x con aceite de
inmersión.

Levadura en medio liquido 100x

Para la observación de levaduras con tinción (azul de metileno) primero se aplicó una
gota de agua destilada en el porta objetos después se toma una muestra con el asa

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bacteriológica de la levadura en medio solido de la placa Petri, una vez tomada te aplica
sobre el porta objetos diluyendo la muestra sobre el agua destilada, después se
procede a fijar la muestra en el porta objetos aplicando calor con el mechero hasta
conseguir un aspecto de sedimento , una vez fijada se aplica una gota de azul de
metileno y se deja reposar durante 5 minutos y se quita el exceso enjuagando con la
piseta con agua destilada se deja secar.

Se hizo la observación de levaduras en el microscopio con aumento 100x con aceite de

inmersión.

Levadura con tinción (azul de metileno)100x

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CONCLUSIÓN DE LA PRÁCTICA:
(¿Qué conclusiones personales puedes obtener de lo realizado en la práctica?, ¿Cuál
es el principal conocimiento que te aporta?)
Con la tinción de levadura medio líquido con azul de metileno se puede hace un conteo
de levaduras y con la tinción de levadura fijada a porta objetos se puede observar la
morfología y las células con vida.

Las levaduras teñidas de un azul intenso son levaduras muertas

CUESTIONARIO:

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(Investiga y resuelve las siguientes preguntas, recuerda agregar la referencia de donde

obtuviste la información)
1. ¿Qué otras tinciones pueden utilizarse en levaduras?
R:Con naranja de acridina. Las células vivas se ven de color verdoso y las
dañadas aparecen amarillo anaranjado.
https://www.youtube.com/watch?v=rH1mT_Q4u1U
Tinción de Gram
Tinción Ziehl-Neelsen
Tinción de Schiff

2. ¿Cuántas veces es más grande una levadura que una bacteria?

R: Las levaduras suelen ser hasta 10 veces más grandes que una bacteria.

Las levaduras son organismos unicelulares y tienen un tamaño que oscila entre 2
y 10 micras de ancho y 4 y 50 micras de largo, variando según la especie.
Las bacterias se presentan bajo distintas formas, siendo las más habituales los
cocos, estreptococos, bacilos, espirilos y vibrios, razón por la que su tamaño
puede variar groseramente entre los 0,1 y los 5 micrómetros (µm).

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3. ¿Cuál es el fundamento de las pruebas de viabilidad en levaduras utilizando azul

de metileno?
R: El objetivo del método es proveer una estimación del porcentaje de células
vivas presentes en una muestra de levaduras.

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