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Juan Luis Timaná Lanfranco (20152627K), Gustavo Javier Pérez Contreras (20152646E)
Laboratorio de Química Orgánica II, PQ-322, FIPP
juanluistblull@gmail.com, gperezc152@gmail.com
RESUMEN
1. INTRODUCCIÓN
Formación de osazonas
Antes de la espectroscopia, una de las mejores maneras de identificar cetonas y aldehídos era la
conversión a hidrazonas cristalinas, especialmente fenilhidrazonas y 2,4-dinitrofenilhidrazonas. En su
trabajo exploratorio sobre las estructuras de los azúcares, Emil Fischer formó y usó derivados de
fenilhidrazona. De hecho, el uso constante de la fenilhidrazina provocó finalmente la muerte de
Fischer en 1919 por envenenamiento crónico con fenilhidrazina.
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Esquema 1. Síntesis de la fenilhidrazona
Sin embargo, los azúcares no forman los derivados de fenilhidrazona sencillos que podríamos
esperar. Dos moléculas de fenilhidrazina se condensan con cada molécula del azúcar para formar una
osazona, en la que los compuestos se han convierten en fenilhidrazonas. El término osazona se deriva
del sufijo -osa de un azúcar y la última mitad de la palabra hidrazona. La mayoría de las osazonas se
cristalizan con facilidad, con puntos de fusión bien definidos. Los puntos de fusión de los derivados de
osazona proveen pistas valiosas para la identificación y comparación de azúcares.
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En la formación de una osazona, el C1 y el C2 se convierten a fenilhidrazonas. Por tanto, una cetosa
forma la misma osazona que su aldosa relacionada. También observe que la estereoquímica en el C2
se pierde en la fenilhidrazona. Por tanto, los epímeros C2 forman la misma osazona.
Fischer descubrió también que la formación de osazonas no solo era útil para la identificación de
carbohidratos, sino también para la determinación de sus configuraciones, lo que es mucho más
importante. Un par de aldosas diastereomeras que solo difieren en configuración en torno al C-2 se
denominan epímeros Un modo de identificar un par de aldosas como epímeros, es por medio de la
formación de una misma osazona.
“La identificación de los carbohidratos por osazonas nos permitirá poner en práctica la teoría adquirida
sobre carbohidratos y sus reacciones en la clase de Química Orgánica II”.
Objetivo general: Evaluar las competencias procedimentales adquiridas teóricamente por los alumnos
en la asignatura de Química Orgánica.
Objetivos Específicos:
2. DISEÑO DE LA INVESTIGACIÓN
En un vaso de precipitado se mezcla la solución de fenilhidrazina con ácido acético glacial y agua. Por
otro lado, en tubos de ensayo se preparan los carbohidratos orgánicos a identificar mezclando los
siguientes compuestos: glucosa, fructosa, maltosa, sacarosa y lactosa. Se añade agua
independientemente a cada uno de los tubos de ensayo y se colocan en baño maría mezclándolos
previamente con la mezcla preparada de fenilhidrazina simultáneamente. Se comenzó a calcular el
tiempo. Pasada la media hora de calentamiento en ebullición se extrajeron los tubos de ensayo y se
dejó enfriar. Luego se separó el precipitado usando un equipo de filtración al vacío, con la finalidad de
tomar las muestras de los productos obtenidos y calcular el punto de fusión con el software vernier en
Logger Pro.
3. PARTE EXPERIMENTAL
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En un matraz Erlenmeyer de 125 mL se cargó con 1.25 g de NaOH, 12.5 mL de agua y 10 mL de etanol.
Posteriormente se agregó poco a poco y agitando 1.25 mL de benzaldehído y luego 0.5 mL de acetona,
la mezcla se agitó por unos 20 minutos aproximadamente con la ayuda de una bagueta, además se
controló la temperatura mediante baños de agua fría, en un rango de 20 – 25°C (figura1). Se observó
una coloración naranja que indicó la naturaleza de una solución alcalina. Seguidamente se pasó a añadir
50 gotas aproximadamente de HCl diluido hasta notar una coloración notablemente amarilla. Luego se
pasó a filtrar el precipitado mediante una filtración al vacío, mediante un lavado de agua (figura2).
Después se pasó a hacer la recristalización del precipitado en etanol a ebullición (figura3), se dejó
enfriar por unos minutos a temperatura ambiente hasta que se observó los cristales de color amarillo
(figura4). Seguidamente se volvió a filtrar por vacío para obtener un precipitado de color amarillo como
producto final que luego fue llevado al
horno para el secado por uno 5 minutos
aproximadamente; se tomó nota de la
masa del precipitado para el cálculo del
rendimiento de la reacción
correspondiente. Finalmente se calculó el
punto de fusión del precipitado para
determinar y analizar su pureza (figura7).
Figura 3. Etapa de la
recristalización.
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Figura 4. Cristales amarillos obtenidos por recristalización.
RF
3mL fenilhidrazina
3mL CH3COOH glacial
6mL H2O
Filtración al vacío de
cada osazona
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4. RESULTADOS
Finalizada la obtención de las osazonas de cada azúcar, se procedió a la medición del rango
de fusión de cada una.
Tabla . Puntos de fusión de las osazonas de cada azúcar.
Compuesto Rango de fusión
Osazona de glucosa 216.6 °C – 217.8 °C
Osazona de maltosa 206.1 °C – 207.2 °C
Osazona de lactosa 199.4 °C – 200.7 °C
Osazona de fructosa 216.3 °C – 217.6 °C
Osazona de sacarosa 216.5 °C – 217.5 °C
5. DISCUSIÓN DE RESULTADOS
Observando y comparando los rangos de fusión obtenidos para cada azúcar, se puede apreciar un
alto grado de similitud entre los rangos de fusión de la glucosa, la fructosa y la sacarosa.
Era de esperarse que la glucosa y la fructosa tengan puntos de fusión similares, debido a que ambos
compuestos son hexosas, una cetosa (fructosa) y una aldosa (glucosa), las cuales al reaccionar con la
fenilhidrazina dan la misma osazona.
En cambio, para el caso de la sacarosa, esta se hidroliza y se produce una mezcla de α-D-glucosa y
β-D-fructosa (azúcar invertida). Al momento de darse la formación de la osazona, esta parte ya sea de
la glucosa o de la fructosa, obteniéndose una misma osazona puesto que son hexosas.
6. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
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generando iones enolatos de forma regioselectiva. En este caso el producto es inevitablemente
la dibenzalacetona debido a que se utilizó una cetona simétrica.
Se utilizaron diferentes técnicas de laboratorio, y a su vez, un equipo de software Vernier con
la finalidad de calcular el punto de fusión del compuesto sintetizado.
Por el lado de las recomendaciones, es importante trabajar con reactivos de la mejor calidad,
lo cual no fue el caso en el experimento desarrollado. De la misma manera realizar un correcto
uso de los instrumentos de laboratorio al momento de manipularlos y realizar las técnicas en
cada uno de los procesos involucrados tales como disolver los reactivos, la correcta posición
del papel de filtro en el equipo de vacío y una buena lectura en el equipo vernier.
7. CUESTIONARIO
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Esquema . Formación de la osazona de la D-glucosa
Reacción de Benedict
Se basa en la reducción de Cu2+ a Cu+ en medio básico débil. Aunque es similar a la reacción de
Fehling, el medio básico débil (HNaCO3) y el estabilizante (citrato sódico) usados hacen que este test
sea más sensible y estable.
Procedimiento:
1. Pipetear en un tubo de ensayo 5mL del reactivo de Benedict.
2. Calentar a ebullición.
3. Añadir 1mL de la solución de azúcar, mezclar bien y volver a calentar a ebullición
Resultado:
Si la reacción da positiva aparece un precipitado rojizo, aunque si la cantidad de azúcar es pequeña
puede dar color anaranjado o rojizo.
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Reacción de Braun
Los azúcares reductores en medio alcalino pueden reducir el picrato, de color amarillo, a picramato,
de color rojo en medio alcalino (Na2CO3)
Prueba de Barfoed
En medio ácido, tan sólo los monosacáridos son capaces de reducir el Cu2+ a Cu+. El Cu+ producido
reduce al ácido fosfomolíbdico a un complejo de intenso color azul oscuro.
Procedimiento:
1. Pipetear en un tubo de ensayo: 1mL de solución de azúcar, 1mL de solución ácida de cobre.
2. Calentar a ebullición durante 3 minutos.
3. Enfriar en agua durante 2 minutos.
4. Añadir 1mL del reactivo de fosfomolibdato.
Resultado:
Si la prueba es positiva aparece un color azul oscuro muy intenso.
Los monosacáridos son capaces de reducir, en medio amoniacal, el ion Ag+ a Ag0 (plata metálica), que
se deposita en las paredes del tubo.
Procedimiento:
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1. Añadir en un tubo de ensayo: 1mL de AgNO3 al 1%, 1mL de NH3 al 30%, 1mL de solución de
azúcar.
2. Mezclar bien y calentar durante 2 minutos.
3. Dejar reposar.
Resultado:
Si el ensayo da positivo, la plata metálica se va depositando en la pared del tubo formando un espejo
(“espejo de plata”).
4. ¿Cuál de los siguientes azúcares dan positivo la prueba de Tollens o Fehlling? Explique
brevemente
8. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
[1] L. Wade, Química Orgánica Volumen 2, Séptima edición, México: Pearson Educación, 2011.
[2] R. N. B. R. T. Morrison, QUÍMICA ORGÁNICA Quinta edición, México: Addison Wesley Longman,
1998.
[3] C. Timaná de La Flor, Química Orgánica II - Guía de Laboratorio, Lima: UNI-FIP-Timaná, 2001.
La prueba se basa en que los azúcares reductores se condensan con reactivos como la fenilhidracina
en frío formando una fenilhidrazona. A 100 ªC y en presencia de un exceso de fenihidracina se lleva a
cabo otro tipo de reacción en donde participan los átomos de carbono número 1 en las cetosas,
dando lugar a la formación de osazonas.
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