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Flujograma

Bioquímica Practica N°12

ENZIMAS ANTIOXIDANTES ENDÓGENAS


Grupo: Miércoles de 10 am – 2 pm Mesa 4
Alumna: Joselyn Mishel Arellano Quintanilla

A. OBTENCIÓN DEL HOMOGENIZADO CEREBRAL:

Usar en tampón de lisis


Se sonicó 30 seg. en baño de
Resuspender el tejido (tampón fosfato 50 mM pH 7.4
hielo y se centrifugó a 10000
cerebral hasta alcanzar una y antiproteinas [EDTA 1mM,
g por 15 min a 4°C. Recoger
concentración de 50 mg/ml. PMSF 1mM, peptatina 1 ug/ml
el sobrenadante.
y leupeptina 1 ug/ml])

B. CATALASA

El método se basa en el seguimiento de la descomposición de


H2O y O2 mediante espectrofotometría a 240nm (actividad
catalítica de la catalasa.

Escriba aquí la ecuación.

C. DETERMINACIÓN DE LA PRESENCIA DE LA CADENA DE CITOCROMOS:

Componentes 1 2 3 4
Homogenizado de corazón 0.0 1.0 1.0 1.0
Se trabajara con
Cianuro de sodio 0.1 M 0.0 0.0 0.5 0.0
4 tubos:
Malonato de sodio 0.1 M 0.0 0.0 0.0 0.5
Sol. P-Fenilendiamina 1.0 1.0 1.0 1.0
Buffer fosfato 0.1 M, pH 7.4 1.5 0.5 0.0 0.0

Observar la progesión
Agitar vigorasamente, Dejar en reposo 30 de las reacciones y el
para favorecer la min., agitando comportamiento de
difusión del oxigeno. continuamente. cada uno de los
sistemas.