DEMANDA QUIMICA DE OXIGENO - REFLUJO CERRADO

1. DESCRIPCIÓN

La demanda química de oxígeno (DQO) determina la cantidad de oxígeno requerido para

oxidar la materia orgánica en una muestra de agua, bajo condiciones específicas de agente
oxidante, temperatura y tiempo.

2. FUNDAMENTO DEL MÉTODO

2.1 PRINCIPIO

Las sustancias orgánicas e inorgánicas oxidables presentes en la muestra, se oxidan mediante

reflujo cerrado en solución fuertemente acida (H2S04) con un exceso conocido de dicromato
de potasio (K2Cr207) en presencia de sulfato de plata que actúa como agente catalizador, y de
sulfato mercúrico (HgS04) adicionado para remover la interferencia de los cloruros. Después
de la digestión, el oxígeno consumido se determina mediante lectura espectrofotométrica a
una longitud de onda de 600 nm contra estándares.

El método de reflujo cerrado es más económico en el uso de reactivos de sales metálicas, pero
para obtener resultados reproducibles requiere la homogenización de muestras que
contengan sólidos suspendidos. Este método es aplicable para valores de DQO mayores de 50
mg/L, pero según la validación realizada, el límite se puede bajar a 20 mg/L.

Este método aplica para aguas potables, subterráneas, superficiales, lluvias, lavado de fruta y
residuales.

2.2 INTERFERENCIAS

Los compuestos alifáticos volátiles de cadena lineal no se oxidan en cantidad apreciable, en

parte debido a que están presentes en la fase de vapor y no entran en contacto con el líquido
oxidante; tales compuestos se oxidan más efectivamente cuando se agrega Ag2S04 como
catalizador. Sin embargo, este reacciona con los iones cloruro, bromuro y yoduro produciendo
precipitados que son oxidados parcialmente. Las dificultades causadas por las presencias de
los haluros pueden superarse en buena parte, aunque no completamente, por
acomplejamiento antes del proceso de reflujo con sulfato de mercurio (HgS04), que forma el
haluro mercúrico correspondiente, muy poco soluble en medio acuoso. Si bien se especifica 1
g de HgS04 para 50 mL de muestra, se puede usar una menor cantidad cuando la
concentración de cloruro sea menor de 2000 mg/L, mientras se mantenga una relación de
HgS04:Cl- de 10:1.

La técnica no se debe usar para muestras que contengan más de 2000 mg/L de CI-/L; existen
otros procedimientos diseñados para determinar la DQO en aguas salinas. El nitrito tiene una
DQO de 1,1 mg de 02/mg de N02 —N, y como las concentraciones de N02 - en aguas rara vez
es mayor de 1 o 2 mg N02 - esta interferencia es considerada insignificante y usualmente se
ignora. Para evitar una interferencia significante debido al nitrito, agregar 10 mg de ácido
sulfámico por cada mg de nitrito presente en el volumen de muestra usado; agregar la misma
cantidad de ácido sulfámico al blanco de agua destilada.
U N I D A D E S T E C N O L O G I C A S DE SANTANDER
Las especies inorgánicas reducidas, tales como ion ferroso, sulfuro, manganoso, etc., se oxidan
cuantitativamente bajo las condiciones de la prueba; para concentraciones altas de estas
especies, se pueden hacer las correcciones al valor de DQO obtenido, según los cálculos
estequiométricos en caso de conocer su concentración inicial.

3. TOMA DE MUESTRA Y ALMACENAMIENTO

Colectar las muestras en botella de vidrio preferiblemente; el uso de envases plásticos es

permisible si se asegura la ausencia de contaminantes orgánicos. Si la muestra tiene materia
orgánica biológicamente activa, el análisis debe realizarse inmediatamente, aunque
preservada a pH<2 por adición de ácido sulfúrico concentrado (generalmente 2 mL/L de
muestra) y mantenida bajo refrigeración puede analizarse entre 7 y 28 días después. Las
muestras que contengan sólidos sedimentables deben mezclarse con un homogeneizador para
obtener una muestra representativa. Lavar los tubos y sus tapas con ácido sulfúrico al 20%
antes de su primer uso, para prevenir la contaminación.

4. INSTRUMENTAL Y EQUIPOS

Espectrofotómetro.

Vidriería volumétrica en general.

Agitador magnético, magnetos y pera.

pHmetro.

Balanza analítica.

Tubos de digestión de 16x100 mm con tapa rosca de TFE.

Micro-reactor.

Macro pipeta volumétrica con escalas de graduación.

Puntas de desplazamiento de 5 mL.

5. REACTIVOS

Agua Destilada, filtrada bajo filtros de arena y carbón activado,

clorada, regulada con permanganato de potasio y desionizada.

Dicromato de potasio (K2Cr207).

Ácido sulfúrico concentrado (H2S04).

Sulfato de mercurio (HgS04).

 Sulfato de plata (Ag2S04).

Biftalato acido de potasio (HOOCC6H4COOK).

6. PREPARACIÓN DE REACTIVOS

Solución de digestión: a aproximadamente 500 mL de agua destilada agregar 10,216 g de

K2Cr207 previamente secado a 1032C durante dos horas, 167 mL de H2S04 concentrado, y
33,3 g de HgS04. Disolver, enfriar a temperatura ambiente y diluir a 1000 mL.

Reactivo de ácido sulfúrico: Agregar Ag2S04 a una cantidad de H2S04 concentrado en

proporción 5,5 g de Ag2S04/Kg H2S04 (aproximadamente 545 mL de ácido; 25 g para 2,5L de
ácido) dejar en reposo de 1 a 2 días para que se disuelva el Ag2S04.

Estándar de ftalato de potasio e hidrógeno: Triturar ligeramente y secar biftalato de potasio

(HOOCC6H4COOK) a 1202C durante 1 hora, disolver 425 mg en agua destilada y diluir a 1000
mL. El biftalato tiene una DQO teórica de 1,176 mg 02/mg y la solución tiene una DQO teórica
de 500 mg/L, es estable hasta 3 meses si se conserva refrigerada, igualmente para un estándar
de 1000 mg/L se requiere de 850 mg de ftalato de potasio.

7. PROCEDIMIENTO

Ingreso de la muestra al laboratorio, se agita vigorosamente. Se toman 2,5 mL de muestra y se

llevan a un tubo de 16x100 mm, luego se agrega 1,5 mL de solución de digestión y se termina
agregando cuidadosamente 3,5 mi de reactivo de ácido sulfúrico. Tapar herméticamente los
tubos e invertirlos varias veces con cuidado para mezclar completamente el contenido, no
olvidar los accesorios de protección, especialmente para los ojos. Colocar el tubo en el micro-
reactor a 150 C y dejar en reflujo cerrado durante dos horas, enfriar a temperatura ambiente.
9

Se lee la absorbancia a 600 nm y comparar con la curva de calibración. Se realiza un blanco

bajo las mismas condiciones, se lee su absorbancia. La curva se realiza con patrones de
biftalato con un rango alto mínimo de 500 mg/L o hasta donde muestre linealidad confiable. Si
el resultado se sale del límite superior de la curva de calibración, se debe tomar una alícuota
establecida y se repite el proceso hasta que el valor final quede en el intervalo de lectura. Si la
muestra no se piensa analizar de inmediato, se fija a pH<2 con ácido sulfúrico concentrado. Los
volúmenes a tomar de muestra y solución de digestión se deben realizar con la macro-pipeta
graduada y la respectiva punta de desplazamiento de 5 mL.
PROCEDIMIENTO PARA PATRONES COMO PARA MUESTRAS

i 2,5 mi |de muestra en un tubo de

16x100 mL

T _
J

| Adicionar 1,5 mf de solución de digestión + 3,5 mi de í

j reactivo de ácido sulfúrico J

Leer absorbancia a una longitud ! Digestión durante dos horas reflujo

de onda de 600 nm K" cerrado a 150°C en micro-reactor

9. CALCULOS Y RESULTADOS

Se interpolan los datos en la curva de calibración para obtener los resultados. No se debe
hacer corrección por blanco debido al alto valor de la absorbancia.

Desarrollo de la curva a partir del estándar de 1000 mg/L, los patrones son llevados a un
volumen final de 50 mL. Realizar una curva de calibración de Oppm, lOOppm, 200ppm, 300
ppm, 400ppm, 500ppm y 600ppm partiendo del patrón de lOOOppm.

10. SEGUIMIENTO Y CONTROL

Se realizan controles periódicos con patrones a partir de biftalato de potasio como 500 mg/L.
Cada lote de muestras se corre un patrón por duplicado y se lee una muestra por duplicado. Se
debe realizar curva nueva cada vez que se acabe la solución de digestión. Cada vez que se
realice curva nueva se hace una prueba de porcentaje de recuperación.

11. MANTENIMIENTO

Se debe llevar un buen control del tiempo de calentamiento y de la segundad de la digestión.

Celdas en óptimo estado, tubos sin fisuras y espectro calibrado.

12. BIBLIOGRAFÍA

Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater. APHA - AWWA - WEF. 21
ed. 2005. DQO: Reflujo Cerrado y Colorimétrico, SM 5220 D.

SKOOG, D.; Fundamentos de Química Analítica. Thomson, 2005.

 DEMANDA BIOQUÍMICA DE OXÍGENO

1. INTRODUCCION

La determinación de la demanda bioquímica de oxígeno es una prueba empírica en la que se

utiliza en procedimientos estandarizados de laboratorio para determinar los requerimientos
relativos de oxígeno de las aguas residuales, efluentes y contaminadas.
La prueba mide el oxígeno utilizado, durante un periodo de incubación especificado, para la
degradación bioquímica de la materia orgánica, y el oxígeno utilizado para oxidar la materia
orgánica, como sulfuros y el ion ferroso. Puede también medir el oxígeno utilizado para oxidar los
compuestos reducidos del nitrógeno.
El principio consiste en llenar con muestra, hasta rebosar, un frasco hermético del tamaño
especificado, e incubarlo a la temperatura establecida durante 5 días. El oxigeno disuelto medido
antes y después de la incubación, y la demanda biológica de oxígeno se calcula mediante la
diferencia entre el oxígeno disuelto inicial y el final.

2. FACTORES DE DILUCIÓN RECOMENDADOS

Agua industrial o urbana muy cargada mayor de 100

Agua residual depurada y bruta entre 100 y 20
Efluente tratado biológicamente entre20 y 4
Aguas fluviales entre4 y l

3. REACTIVOS

-Solución tampón fosfato: Disolver 0,85g de KH2HP04, 2,175g de K2HP04, 3,34g de Na2
HP04.7H20 y 0,17 g de NH4CI en agua destilada y enrasar a lOOmL.
- Solución de sulfato magnésico: Disolver 2,25 g de sulfato magnésico heptahidratado en agua
destilada y llevar a 100 mL.
- Solución de cloruro calcico: Disolver 2,75 g de cloruro de calcio y llevar a lOOmL con agua
destilada.
- Solución de cloruro férrico: Disolver 0,025 g de cloruro férrico y llevar a lOOmL con agua
destilada.

4. PREPARACIÓN DEL AGUA DE DILUCIÓN

Tomar un volumen adecuado de agua destilada y poner en un frasco de boca ancha y suficiente
capacidad. Añadir lmL/L de solución tampón de fosfato, sulfato de magnesio, cloruro de calcio y
cloruro de hierro. Completar con agua destilada hasta el volumen deseado.
El agua de dilución, antes de ser usada debe estar a una temperatura lo más próxima posible a
205C y también debe haberse saturado en oxígeno mediante agitación del recipiente.

5. TÉCNICA DE DILUCIÓN

Las diluciones deben ser tales que peritan obtener al cabo de los 5 días de incubación, un oxígeno
residual de al menos lmg/Ly una captación de oxígeno de al menos 2mg/L.
Para estar en estos rangos, debemos emplear un factor de dilución adecuado. Para calcular este
factor de dilución se recurre a la siguiente aproximación:
D.B.O. eór¡ca=
t D.Q.0./2 Factor Dilución = D.B.O. te ór¡ca/4

Cuando se preparen las diluciones de la muestra, hay que procurar burbujear lo menos posible,
para lo que dejaremos caer el agua de dilución resbalando por las paredes.
Caso que la dilución se prepare en probeta, poner en primer lugar la mitad del agua de dilución,
después añadir la muestra y por último, completar el volumen con agua de dilución, procurando
introducir en el sistema la menor cantidad de aire posible.

6. PROCEDIMIENTO

-Preparar las diluciones adecuadas de la muestra en frascos Winkler, así como un blanco con agua
de dilución.
-Determinar mediante electrodo selectivo el oxígeno disuelto.
-Incubar durante 5 días en oscuridad y a 20 C ± 1 C.
e 9

-Al cabo de estos 5 días, medir por el mismo procedimiento el oxígeno disuelto.

7. CÁLCULOS

D.B.O.5 = ( T « T ) * - (Do - D ) * (F -1)

0 5 5

T0= oxígeno disuelto inicial en la muestra.

T5=oxígeno disuelto a los 5 días en la muestra.
DO=oxígeno disuelto inicial en el blanco.
D5=oxígeno disuelto a los 5 días en el blanco.
F=factor de dilución.