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CULTIVO DE TEJIDOS VEGETALES

Descripción de laboratorio
Un laboratorio es un lugar físico que se encuentra especialmente equipado con diversos
instrumentos y elementos de medida o equipo, en orden a satisfacer las demandas y
necesidades de experimentos o investigaciones diversas, según el ámbito al cual pertenezca el
laboratorio en cuestión claro está. También es muy común que las escuelas, universidades o
cualquier otro reducto académico cuenten con un laboratorio en el cual se dictarán clases
prácticas u otros trabajos relacionados exclusivamente con un fin educativo.
La característica fundamental que observara cualquier laboratorio es que allí las condiciones
ambientales estarán especialmente controladas y normalizadas con la estricta finalidad que
ningún agente externo pueda provocar algún tipo de alteración o desequilibrio en la
investigación que se lleva a cabo allí, asegurándose así una exhaustiva fidelidad en términos de
resultados. La temperatura, la humedad, la presión atmosférica, la energía, el polvo, la tierra,
las vibraciones, el ruido, entre otros, son las cuestiones sobre las cuales más hincapié se hará,
para que estén absolutamente controladas y no contradigan la normalidad necesaria y exigida
de la que hablábamos.

Existe una importante diversidad de laboratorios, entre los más destacados se cuentan: el
laboratorio clínico, que es aquel en el cual se llevan a cabo análisis clínicos que tienen como
meta la prevención, el diagnóstico y el tratamiento de las enfermedades. Luego están aquellos
orientados al estudio y descubrimiento de algún tipo de evidencia científica como son los
biológicos y químicos.
Además, cada laboratorio y dependiendo del tipo de fin que lo estimule, debe contar con
material específico, que pude ser de vidrio, de porcelana de madera, como ser las probetas,
espátulas, mecheros, cucharillas, pinzas, ampollas y tubos de ensayo, entre otros.
La evolución y sofisticación que la mayoría de los laboratorios han logrado en los últimos años
tiene que ver con la creciente preocupación del ser humano por ir encontrando distintas
opciones o alternativas para paliar las afecciones que pululan y abundan en la humanidad, pero
que claro, requieren de una maquinaria y material cada día más desarrollado para avanzar
siempre y todos los días un paso más.
Área de preparación de medios de cultivos y trabajos químicos
Descripción
Un laboratorio de Microbiología es un lugar habilitado para manejar y estudiar microorganismos.
El trabajo debe realizarse de acuerdo con los estándares técnicos y de seguridad propios de un
laboratorio de Microbiología Clínica.
Es importante recordar que la finalidad es determinar los microorganismos presentes en la
muestra por lo que es preciso extremar las precauciones para evitar contaminaciones que den
lugar a resultados erróneos.
Todas las muestras deben ser manejadas con precaución por su potencial patogenicidad.
Para deshacerse del material contaminado se deben utilizar recipientes adecuados que deben
ser esterilizados posteriormente.
Nunca se puede tirar nada contaminado por el fregadero o al cubo de la basura común sin
haber sido esterilizado previamente.
El el laboratorio deben existir unas recomendaciones generales de limpieza y en caso de
vertidos:
Procedimientos de limpieza de superficies externas mediante papel humedecido con solución
desinfectante (alcohol 70%, desinfectante fenólico diluido, etc.). Aclarar con agua los restos de
desinfectante.
En caso de usar soluciones de hipoclorito en zonas metálicas, limpiar posteriomente para evitar
el efecto corrosivo.
En caso de derramamientos de material peligroso o formación de aerosoles: evitar inspiraciones
de esos aerosoles, esperar 30 minutos hasta que las partículas se hayan depositado y limpiar
con mascarilla, guantes y otros útiles protectores.
En caso de vertido de materiales, cubrir la superficie con desinfectante y posteriormente cubrir
con papel humedecido con desinfectante. Dejar durante 15 minutos y limpiar. En caso
necesario aclarar con agua.
En caso de derramamientos menores limpiar el material vertido mediante papel humedecido y
posteriormente aclarar, cuando sea necesario.
Los laboratorios deberán disponer de los aparatos e instrumental necesario para el correcto
desarrollo de su actividad.
Debe existir un procedimiento de control de calidad en el laboratorio de Microbiología Clínica
que implique la monitorización de los medios e instrumentos, con el fin de asegurar la adecuada
realización de los aislamientos, identificación y caracterización de los patógenos y la realización
precisa de las pruebas de sensibilidad a los antimicrobianos como referencia terapéutica. El
sistema de la calidad deberá contemplar la existencia de registros de formación de personal.
es imprescindible la existencia de un procedimiento sobre medidas de protección personal en el
manejo de equipos y aparatos.
Los equipos del laboratorio deben funcionar de forma que se asegure la reproducibilidad de los
resultados de las pruebas diagnósticas.
El laboratorio deberá estar bajo la dirección y responsabilidad de un facultativo con la
especialidad correspondiente, legalmente capacitado para realizar aquéllas determinaciones
clínicas que el laboratorio tenga autorizadas.
El personal técnico y sanitario del laboratorio deberá disponer la titulación adecuada para las
funciones que desarrolla de conformidad con la legislación vigente.

Estructura de un laboratorio de Microbiología Clínica

Área administrativa
Área de recepción de muestras
Área de extracción que deberá:
Disponer de material de un solo uso para contacto con muestras biológicas.
Disponer de un área de extracciones y toma de muestra, una sala de espera para los pacientes
y los servicios de higiene correspondientes.
Disponer de personal legalmente autorizado para la toma de muestras.
Disponer de un manual de extracción, toma y transporte de muestras.
El manual antedicho deberá ser elaborado por el responsable
Área de trabajo: análisis y procesado de muestras
El puesto de trabajo debe debe de estar limpio y ordenado

El material necesario debe prepararse antes de empezar a trabajar y colocarse de forma


adecuada para que se facilite su utilización asi se evitarán accidentes y se minimizará el riesgo
de contaminación
Nunca se debe pipetear con la boca. Utilizar siempre elementos manuales o automáticos.
Todo el material utilizado debe estar estéril.
1. Elementos y materiales más frecuentes de un laboratorio de Microbiología Clínica

1.1. Mesas de laboratorio y fregadero

1.2. Vitrinas y armarios


1.3. Mechero Bunsen
Todas las manipulaciones deben realizarse en un radio de 10-15cm de la llama del mechero
(zona aséptica).
En caso de utilizar mechero nunca se debe coger material por encima de la llama
Antes de comenzar a trabajar se procurará disponer de todo el material necesario para el
procesamiento de la muestra
Tomar las medidas necesarias para evitar la contaminación de las muestras o/ y cultivo por
microorganismos ambientales

1.4. Gradillas

1.5. Estufa de incubación


Es una cámara de temperatura controlada para cultivo de microorganismos.

Se utiliza para facilitar el desarrollo de los microorganismos a su temperatura óptima de


crecimiento (generalmente 35-37º).

1.6. Frigorífico o cámaras refrigeradas

Se utilizan para conservar tanto materiales (medios de cultivo, reactivos) como


microorganismos.
Generalmente están a una temperatura fija de 4ºC.

1.7. Congeladores
Se utilizan para la conservación de reactivos y microorganismos a temperaturas inferiores a
0ºC, llegando a -80ºC (los más frecuentes son -20º, -40º y -80º).

1.8. Microscopio óptico

1.9. Centrífuga
Aparato que aplica sobre los tubos una fuerza centrífuga lo que permite la separación de los
distintos componentes de la muestra mediante la precipitación en el fondo del tubo de las
partículas en suspensión.

1.10. Cámaras de seguridad biológica (ver practica 2)

1.11. Desionizador de agua.


La mayor parte de los trabajos que se realizan en un laboratorio de Microbiología Clínica
necesitan la utilización de agua pura con el fin de evitar cualquier tipo de interferencia. Entre
otra características debe: estar exenta de materiales en

1.12. Contador de colonias: Es un aparato que mediante la iluminación de la placa y una lupa,
nos permite observar con mayor nitidez las colonias y por tanto facilita su recuento.
1.12. Contador de colonias: Es un aparato que mediante la iluminación de la placa y una lupa,
nos permite observar con mayor nitidez las colonias y por tanto facilita su recuento.

1.13. Balanzas
1.14. Baños termostáticos: son recipientes que contienen agua y un sistema de regulación de la
temperatura. Se utilizan para atemperar medios de cultivo o incluso para incubar cultivos de
microorganismos.

1.15. Agitador/ mezclador

1.16. Jarras de anaerobios:


Recipientes que se usan para conseguir una atmósfera libre de oxígeno para el cultivo de
microorganismos anaerobios
1.17. Asas de siembra:
Se utilizan para sembrar. Pueden ser metálicas o de plástico, curvas o rectas (para la siembra
por picadura).

1.18. Ph-metros:
1.18. Ph-metros:

1.19. Material fungible

Placas de Petri: recipientes para la preparación de medios de cultivo sólidos

Placas de Petri con medio sólido

Tubos con medio líquido


Tubos con medio sólido

Pipetas de vidrio, de plástico y pipeteadores.


Pipetas

Pipeteador automático Pipeteador manual

Pipetas automáticas (micropipetas) y puntas de pipeta:


Se utilizan para pipetear pequeñas cantidades de líquidos.
Se utilizan con puntas desechables de distinto tamaño y color según la micropipeta. Existen
cuatro tamaños: de 0,5-2µm; de 2-20 µm; de 20-200 µm y de 200-1000 µm.
Se utilizan para la extensión de microorganismos sobre la superficie de un medio de cultivo en
placa Petri.

Portas y cubres
Para realizar las observaciones al microscopio.
Vasos de precipitados y matraces

Cucharas y espátulas:
Se utilizan para pesar muestras o medios de cultivo.
Área de limpieza de material y eliminación de residuos

Zona donde se procede a la esterilización mediante autoclave del material utilizado. El material
desechable se elimina y con el material reciclave se procede a la eliminación de residuos y
lavado. De esta manera el material queda dispuesto para ser utilizado.

Área de esterilización
Procedimiento por el que se consigue la muerte de todos los organismos vivos y formas de
resistencia en un objeto o producto tratado.

Autoclave
Es el equipo más utilizado.
Es un procedimiento de esterilización mediante calor húmedo. Se realiza en al autoclave
durante 15 ó 20 min, según el volumen, a 115°C ó 121°C, según la naturaleza del material que
se desee esterilizar.
Autoclavado: es un procedimiento en el que se emplea vapor a presión (a 1 atmósfera). Como
tiene gran poder de penetración la temperatura y el tiempo utilizado son menores que los que
se emplean con el horno Pasteur (121º C, 15-20 minutos).
Se utiliza para esterilizar: Medios de cultivo, ropa, material de plástico resistente al calor
húmedo, objetos de metal que no se alteren con la humedad y sobre todo material de vidrio.
Horno de Pasteur: emplea altas temperaturas (160-180º C) durante un tiempo prolongado (1.5 a
3 horas). Debido a su poca capacidad de penetración se usa para esterilizar vidrio y metales.
Actúa principalmente desnaturalizando las proteínas y secundariamente oxidando los
compuestos celulares.
Área de preparación de medios de cultivos y trabajos químicos

Área de seguridad microbiológica

Debe ser una zona diferenciada y aislada para la manipulación de microorganismos


susceptibles de formar aerosoles potencialmente infecciosos.

Instrumentación analítica para Seguridad Alimenticia


Las pruebas de seguridad alimenticia incluyen análisis de aditivos, residuos, contaminantes y
toxinas en productos y alimentos agrícolas, con un importante enfoque en el cumplimento y
aplicación de las reglamentaciones. La necesidad de efectuar pruebas alimenticias aumenta
rápidamente, impulsada por la liberalización del comercio mundial, un creciente entorno
regulador y una mayor conciencia pública sobre cuestiones de seguridad alimenticia.

Instrumentación analítica para Seguridad Nacional


Agilent tiene una larga historia de colaboración con el gobierno de EEUU, otros gobiernos
internacionales, instituciones militares, entidades de aplicación de leyes y agencias
relacionadas con la salud en la detección, identificación confirmación y desactivación de
agentes para una ofensiva biológica y química, así como compuestos industriales tóxicos.

Instrumentación analítica para Medicina Forense


Agilent es el principal proveedor mundial de sistemas de GC/MS para agencias
gubernamentales, universidades, hospitales y laboratorios privados para el rastreo de drogas y
toxicología. Al igual que en la industria ambiental, los sistemas de cromatografía de líquidos/
espectrometría de masas (LC/MS) de Agilent se empiezan a emplear para análisis forenses
como un complemento de la cromatografía de gases/ espectrometría de masas (GC/MS).
De manera más práctica, los usos de la instrumentación analítica en la medicina forense han
sido mostrados en diversas series de televisión, entre las cuales se encuentra el programa
estadounidense C.S.I, serie que se transmite en televisión cerrada y cuyo desarrollo está
orientado a la investigación policíaca de casos criminales resueltos en su totalidad gracias a la
investigación forense. En este programa se utilizan diversos equipos marca Agilent
desarrollados para análisis puntuales de infinidad de muestras pequeñas como cabello, sangre
o agua entre otras más, lo que en muchas ocasiones lleva a la instrumentación analítica a
terrenos similares a la ciencia ficción por lo increíble de la precisión y certeza con la que trabaja
permitiendo así una mejor y más rápida resolución de los casos.
Instrumentación analítica para la Industria Farmacéutica
La espectrometría de masas juega un importante rol en el ciclo de vida completo de un fármaco,
desde el descubrimiento hasta el desarrollo, la manufactura, hasta el Aseguramiento/Control de
Calidad (QA/QC). En el descubrimiento de fármacos, los sistemas de MS son apropiados para
obtener información que identifique y caracterice los candidatos a fármacos producidos por
química de combinación o extraídos de productos naturales. La LC/MS es una herramienta
fundamental para verificar la calidad del compuesto de un fármaco durante su fabricación.
La calidad de un medicamento, la dosis terapéutica e inclusive el empaquetado se derivan de
los análisis de instrumentación analítica con GC o LC.

Instrumentación analítica para Proteómica


La proteómica es el análisis de proteínas a gran escala para investigar enfermedades y
descubrir fármacos. El análisis de MS es la herramienta principal para la investigación basada
en proteómica. Además de los instrumentos de espectrometría de masa (MS) para identificar y
cuantificar las proteínas en muestras biológicas, Agilent desarrolló un conjunto integrado de
potentes herramientas para ayudar a los investigadores a preparar, separar, analizar, identificar
e interpretar las muestras de proteínas complejas.
Los genes son los bloques básicos de construcción de la vida, pero no cuentan la historia
completa de cómo funciona un organismo. Las proteínas, los productos finales del ADN
traducido, desempeñan un papel importante en la función de la célula y en los procesos
farmacológicos. Cuando intervienen en una enfermedad, la mayoría de los químicos de los
fármacos se unen a una proteína para causar un cambio en la célula, órgano o cuerpo.
La proteómica, el estudio de las proteínas, puede aportar información importante sobre los
procesos biológicos al analizar el conjunto completo de las proteínas producidas por una célula,
tejido u organismo. Este conocimiento puede acelerar el intercambio de información biológica
para lograr fármacos avanzados para padecimientos comunes, como cáncer o trastornos
cardiovasculares.
Además de las proteínas como objetivos adecuados para los fármacos, muchas de las nuevas
medicinas prescritas hoy en día realmente se basan en proteínas (en vez de estar hechas de
químicos).
ÁREA DE ESTERILIZACIÓN
Debe existir una espacio para el autoclave vertical u horizontal, el tamaño de este dependerá
del volumen del material que se procese. Esta área debe incluir espacio para estufas,
secadoras y un lavadero de agua fría y caliente.

Equipo y material utilizado en el área de lavado y esterilización:


Bibliografía
http://annymojica.blogspot.com/2012/02/21-medios-de-cultivo.html

http://www.usc.edu.co/index.php/descripcion-de-los-laboratorios

http://www.santiagoapostol.net/FQ/Laboratorio/MaterialdeLaboratorio_d.htm

https://www.quiminet.com/articulos/instrumentacion-analitica-y-su-areas-2741873.htm

http://www.rmh.com.mx/es/Cleanroom%20Espanol.pdf