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TIPO DE ARTÍCULO

Plaquetas

Platelets

ARTÍCULO
Bermejo E
DE REVISIÓN

Instituto de Investigaciones Hematológicas “Mariano R. Castex”.


Academia Nacional de Medicina de Bs As, Dpto. de Hemostasia y Trombosis.

HEMATOLOGÍA
Volumen 21 Nº Extrarodinario: 10-18
emilse1950@hotmail.com Fisiología de la hemostasia normal
Agosto 2017

Palabras claves: plaquetas,


morfología plaquetaria,
mecanismos y función plaquetaria.

Keywords: platelets,
platelet’s morphology,
signaling and platelet function.

Las plaquetas son partículas celulares esenciales gacariocítico, que dará lugar, mediante el proceso
para el normal desarrollo de la hemostasia y cum- de la trombocitopoyesis, a la formación y liberación
plen un rol protagónico en los desórdenes tanto de plaquetas.
trombóticos como hemorrágicos. Las plaquetas
Estructura de la plaqueta en reposo
tienen su origen en la fragmentación citoplasmá-
Las plaquetas circulan en forma de lente biconve-
tica del megacariocito. Su estructura, sistema me-
xa (lenticular), se encuentran en una concentración
tabólico y mecanismos de señalización regulan su
que oscila entre 150 a 400 células x 109/L y tienen
fisiología. La participación de las plaquetas en nu-
un tamaño de 0,5 a 2,5 µm. El volumen plaquetario
merosas funciones fisiológicas y la sencilla manera
medio fluctúa entre 7 a 9 fL.
de obtención para su estudio, han fundamentado su
La ultraestructura plaquetaria está subdividida en
uso como modelo experimental de gran utilidad en
tres partes topográficas relacionadas con su función:
biología celular.
a) membrana plaquetaria (intra y extra celular)
Formación de plaquetas
b) gránulos y organelas intracitoplasmáticos (secre-
Aunque se ha aceptado universalmente que las pla-
ción plaquetaria)
quetas derivan de los megacariocitos, los mecanis-
mos por los cuales se forman y se liberan siguen c) citoesqueleto (proteínas motoras).
siendo controvertidos. En la fase final de la mega- a) Membrana plaquetaria (intra y extra celular)
cariocitopoyesis, una vez alcanzada la ploidía defi- La función plaquetaria principal es mantener la in-
nitiva, se produce la maduración del citoplasma me- tegridad vascular y frenar el sangrado. Para el desa-

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rrollo de esta función, la superficie plaquetaria juega nado GP Ib-IX-V) es el receptor de unión de la
un rol crucial de contacto, primero asegurando la ad- superficie plaquetaria al subendotelio, mediante
hesión a los componentes del subendotelio expuesto el factor von Willebrand (VWF) y la trombina.
y luego favoreciendo la agregación y formación del El complejo GP Ib-IX-V es considerado el
trombo plaquetario. La plaqueta está rodeada por más importante de los receptores implicados
una membrana plasmática que se extiende a través en la adhesión. La inmunomarcación de los tres
de múltiples ramificaciones del sistema canalicular componentes de este complejo indica su presen-
conectado a la superficie (SCCS). cia sobre toda la superficie de las plaquetas en
A nivel de microscopía electrónica, la membrana reposo, ocasionalmente en el sistema canalicular
plaquetaria tiene un espesor de 20 nm y aparece y existe entre un 5 a 10% del total de marcación
como una unidad trilaminar de membrana formada inmunocolocalizado con el VWF en las membra-
por dos hojas densas separadas por un espacio cons- nas granulares.
tante. Al igual que otras membranas biológicas, está La conexión del complejo con la malla de actina
compuesta por proteínas y lípidos, principalmente se produce a través de una proteína de unión a
fosfolípidos y colesterol. El glicocálix o cubierta actina (ABP) y es particularmente importante en
plaquetaria está formado por cadenas de oligosa- la modulación del mecanismo de adhesión.
cáridos provenientes de glicolípidos, glicoproteínas b- La GP VI es el receptor para colágeno más
de membrana (GPs) y cadenas de polisacáridos pro- importante, está comprometido en los eventos
venientes de proteoglicanos de membrana. Además, tempranos de la función plaquetaria y participa
proteoglicanos plasmáticos y proteínas tales como en la activación y la agregación inducida por co-
la albúmina y el fibrinógeno forman parte del gli- lágeno.
cocálix y son incorporados por adsorción. La aso-
c- El complejo GP IIb-IIIa (αIIbβ3) es el princi-
ciación entre la membrana plaquetaria y los depó-
pal receptor en la agregación plaquetaria, su
sitos de proteínas plasmáticas constituye la primera
función principal es la de unir fibrinógeno y, en
línea de interacción de la plaqueta con su entorno y
condiciones de alto shear rate, al VWF. Este
participa activamente en el proceso de endocitosis
complejo se encuentra homogéneamente distri-
y almacenamiento de proteínas plasmáticas en los
buido sobre la superficie y en la membrana del
gránulos de secreción. El glicocálix es responsable
SCCS. Estudios realizados por inmunomarca-
de la carga negativa en la superficie plaquetaria, que
ción han demostrado la presencia de depósitos
provoca la repulsión de interacciones “no deseadas”
internos ubicados en la membrana externa de los
con otros elementos de la pared vascular o de la cir-
gránulos α que representan una cantidad mayor
culación sanguínea.
al 30% de GP IIb-IIIa. La función más impor-
Las invaginaciones de la membrana plaquetaria dan
tante de este pool interno es la incorporación y
origen a un sistema de canales y canalículos que
almacenamiento del fibrinógeno plasmático en
forma una extensa malla dentro del volumen cito-
los gránulos a.
plasmático. En esa superficie invaginada, el glico-
cálix está menos desarrollado; un ejemplo de ello es d- La GP IV (CD36) está involucrada en las pro-
la presencia mínima de la glicoproteína Ib (GP Ib) piedades de adhesión y agregación plaqueta-
comparada con la existente sobre la superficie celu- ria. Funciona como receptor de colágeno tipo II
lar. Además, las cadenas glicosiladas de las molé- y de trombospondina y participa en la transduc-
culas descriptas constituyen un bloqueo del SCCS, ción de señales. Por microscopía electrónica se
formando un filtro que controla la entrada de proteí- ha detectado GP IV sobre la superficie plaqueta-
nas plasmáticas. ria, en el sistema canalicular y en la membrana
Mediante microscopía electrónica se ha analizado la de los gránulos a.
distribución y la funcionalidad de las GPs en la su- e- El complejo GP Ia-IIa (a2β1) une colágeno,
perficie y a nivel intracelular, de las cuales las más mientras que GP Ic-IIa y GP Ic * -IIa (a5β1, a6β1)
relevantes son: unen laminina y fibronectina, respectivamente.
a- El receptor de adhesión formado por un comple- Otra forma de GP Ia-IIa, es el complejo a5β3
jo de tres GPs (GP Ib, GP IX y GP V; denomi- que está presente sobre la superficie en muy baja

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concentración (aproximadamente 100 copias por través de cuerpos multivesiculares hasta alcanzar su
plaqueta) y une proteínas adhesivas tales como tamaño y densidad definitiva.
fibrinógeno, fibronectina y VWF. Morfología.
f- La molécula de adhesión endotelio-plaque- Los gránulos maduros son generalmente redondos
ta (PECAM-1) y el CD9 son componentes del u ovoides, su diámetro es de 200 a 500 nm y están
plasma, de las membranas del sistema canali- rodeados por una unidad de membrana. La ultraes-
cular y, en menor proporción, de la superficie tructura es muy característica, la matriz puede divi-
de los gránulos α. El CD9 actúa como receptor dirse en tres zonas con diferentes densidades. En la
para fibronectina y podría estar comprometida zona nucleoide oscura se observa co-localización de
en la funcionalidad del receptor para factores proteoglicanos con proteínas plaquetarias específi-
de crecimiento. El PECAM-1 es una molécula cas tales como la b-trombomodulina y el factor pla-
de adhesión asociada con el citoesqueleto de las quetario cuatro (PF4). La zona clara, localizada en
plaquetas activadas y también se expresa en las la periferia y en forma opuesta a la anterior, contiene
células endoteliales. una a cinco estructuras tubulares de 20 a 25 nm, re-
gularmente espaciadas y alineadas. En estas estruc-
b) Gránulos y organelas intra-citoplasmáticas / turas se observa colocalizado el VWF en su forma
secreción multimérica de alto peso molecular. Finalmente, una
tercera zona intermedia está asociada con la marca-
Sistema tubular denso.
ción para fibrinógeno, trombospondina, albúmina y
Este sistema se origina a partir del retículo endo-
factores de crecimiento.
plasmático del megacariocito y está compues-
to por canales ubicados cerca de las cisteínas del Contenido.
SCCS. Contiene varias enzimas activas, tales como Los gránulos a contienen proteínas adhesivas, fac-
Ca2+-ATPasas y ciclooxigenasa 2 (COX-2). tores de crecimiento, inhibidores de proteasas, pro-
teoglicanos e inmunoglobulinas. En la Tabla 1 se
Gránulos de secreción.
muestra una clasificación de acuerdo a su funcio-
Las plaquetas contienen cuatro tipos de gránulos nalidad.
citoplasmáticos clasificados de acuerdo a su ultraes- La membrana de los gránulos a contiene diferen-
tructura, densidad y contenido: los gránulos α, los tes receptores moleculares, cuyos sitios de recono-
gránulos densos, los lisosomas y los peroxisomas. cimiento a ligandos están orientados hacía su lado
Gránulos α interno. Algunos como la P-selectina, la osteonec-
Los gránulos a son los más prominentes y los que tina y el GMP33 son receptores específicos y están
se encuentran en mayor número, aproximadamente ausentes en la membrana plasmática de la plaqueta
entre 50 a 80 por plaqueta. Se forman durante la en reposo. En particular, la P-selectina es indicadora
maduración temprana de los megacariocitos y apa- de activación plaquetaria cuando se la encuentra ex-
recen en la malla trans-Golgi en forma de pequeñas presada en la superficie celular.
vesículas y de gránulos inmaduros que transitan a
Tabla 1. Contenido de los gránulos alfa
Categorías Contenido de α gránulo Funciones
Proteínas VWF + pro-péptido, Fg, Fn, Vn, TSP-1, Interacciones de contacto celular,
adhesivas TSP-2, laminina-8 hemostasia primaria y constituyentes
de la matriz extracelular
Factores de Factor V/Va, factor XI, multimerina, proteína S, Generación de trombina, formación
la coagulación HMWK , proteasa, nexina-1 y -2, TFPI, del coágulo y proliferación de la matriz
y sus inhibidores inhibidor de proteína C, gas6 extracelular
Factores f Plasminógeno, PAI-1, u-PA, α2-antiplasmina, Producción de plasmina y
ibrinolíticos TAFI,α2-macroglobulina remodelación vascular
y sus inhibidores
Proteasas MMP-1, -2, -4, -9, ADAMTS13, ADAMS10, Angiogénesis, regulación de
y antiproteasas ADAMS17 (TACE), TIMPs 1–4, la coagulación y de mecanismos celulares
inhibidor plaquetario del FIX, C1 inhibidor,
α1-antitripsina.

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Categorías Contenido de α gránulo Funciones


Factores PDGF (A, B y C), EGF, IGF-1, VEGF (A y C), Quimiotaxis, proliferación celular
de crecimiento bFGF (FGF-2), HGF, BMP-2, -4, -6, CTGF, y angiogénesis
y mitogénicos SCUBE1, IGFBP3

Quimioquinas, TGF-β1 y -β2, IL-1, RANTES (CCL5), Regulación de angiogénesis,


citoquinas y otros IL-8, MIP-1α, MIP-2, GRO-α, MCP-1, quimiotaxis, interacción celular,
MCP-3, PF4, β-TG, NAP-2, remodelación vascular
angiopoyetina-1, HMGB1, IL-6sR, endostatina,
osteonectina, dickkopf-1, osteoprotegerina
Proteínas Trombocidinas, quinocidinas Bactericida y fungicida
antimicrobianas
Glicoproteínas aIIbb3, avb3, GPIb, PECAM-1, constituyentes Adhesión y agregación plaquetaria,
de membrana de la membrana plasmática, receptores para endocitosis de proteínas, secreción,
agonistas primarios, P-selectina, TLT-1, inflamación, generación de trombina,
CD63, CD40L, TF, TRAIL, furina, interacción plaqueta-leucocito y
cellubrevina, syntaxina-2, clatrina plaqueta pared vascular
Otras 4-sulfato de condroitina, albúmina, Varias
inmunoglobulinas G y M, precursor de
amiloide b proteína, factor H de complemento,
semaforin 3A.

Gránulos densos (cuerpos densos) fluorescentes derivados de la quinidina, como la me-


Morfología. Los gránulos densos reciben este nom- pacrina.
bre por su opacidad natural en las tinciones con te- Contenido. Son organelas de almacenaje de sero-
tróxido de osmio y por su capacidad de ser visibles tonina, (un potente vasoconstrictor que, en un 90%
al microscopio electrónico en preparaciones no te- de su concentración circulante, se encuentra unido
ñidas. Se visualizan entre dos y siete gránulos den- a plaquetas), de cationes divalentes como Ca2+ y
sos por plaqueta, con un diámetro aproximado de Mg2+ y de un pool no metabólico de ADP y ATP. La
200 a 300 nm y presentan un cuerpo central denso membrana posee varios receptores, algunos como
rodeado por un halo claro. Se han desarrollado dos la GP53 (granulofisina-CD63) y otros comunes al
técnicas citométricas de observación al microsco- resto de las membranas tales como GPIIbIIIa y P-se-
pio electrónico, una basada en la opacidad produ- lectina. Después de la activación, el contenido de
cida por el contenido de serotonina y la otra usando los gránulos densos es secretado directamente por
acetato de uranilo para marcar el contenido de ADP fusión con la membrana plasmática y las proteínas
y ATP y visualizar las membranas de los gránulos. de membrana son translocadas a la superficie. Con
Los gránulos densos también pueden observarse por la utilización de nuevas tecnologías (proteómica) se
microscopía óptica de fluorescencia o por citome- han reportado distintas proteínas, la mayoría están
tría de flujo utilizando la incorporación de cristales descriptas en la Tabla 2.
Tabla 2. Contenido de los gránulos densos
Categorías Contenido de δ gránulo Funciones
Señalización Rho-GDP- inhibidor del dominio N terminal Regulador de proteínas Rho, movilización
celular de calcio-calmodulina, 14-3-3 zproteína y unión de calcio, activadores de
Tyr 3-hidroxilasas, unión de proteínas
a fosfatidilserina
Moléculas Ciclofilina A, grp78, proteína heat shock 70 kDa, Facilitan el ensamble de proteínas
chaperones disulfuro-isomerasa multiméricas, actúan en unión de
Ca2+ y ATP y catalizan uniones -S-S-
Citoesqueleto β actina, α1actina, proteína asociada a Involucran movilidad celular, reciclan
adenenilatociclasa, cofilina 1, filamina A, actina y cofilina, controlan la
precursor de gelsolin, kindin1, cadena liviana polimerización de actina, anclan
de miosina-2, pleckstrina, talina 1, proteínas de transmembrana a la actina,
transgelin 2, trombopoyetina cadenab, regulan cambio de forma y secreción,
tropomiosina, vinculina, pueden ser sustratos de PKC en la
reorganización del citoesqueleto, etc.

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Categorías Contenido de δ gránulo Funciones


Glicólisis Aldolasa, aenolasa 1, GAPDH, Convierte: F-1, 6-DP en GAP y DHAP,
lactato dehidrogenasa B, piruvatokinasa piruvato en GAP, GAP en 1,3 BPG,
piruvato en lactato y fosfoenolpiruvato.
Relacionadas Precursor de beta-tromboglobulina, FXIII, Neutralización de heparinas (asociada a
a la función precursor de la cadena alfa de fibrinógeno, α gránulos), cross-linking de las cadenas
plaquetaria región C de la cadena Ig gamma, factor plaquetario de fibrina, polimerización de fibrina,
4, glicoproteína II, precursores de proplaquetas, actúan como cofactor en la agregación
albúmina sérica, precursor de trombospondina-1 y son receptores para fibrinógeno y
fibronectina.
Lisosomas proteínas motoras, tales como quinesina y dineína.
Morfología. La función de los microtúbulos está comprometida
con el mantenimiento de la forma discoidea de las
Son gránulos pequeños con un diámetro inferior plaquetas en reposo. Durante el cambio de forma,
a 300 nm, poseen una estructura homogénea y se los microtúbulos se contraen y centralizan las orga-
encuentran en número reducido. La función de las nelas de secreción en la cercanía del sistema canali-
enzimas lisosomales durante la activación plaque- cular. En paralelo, fragmentos de microtúbulos apa-
taria está dada por sus interacciones con la pared recen en la periferia celular formando seudópodos.
vascular y por la digestión de los componentes de La malla de actina puede ser subdividida en dos
la matriz subendotelial. Dentro de la plaqueta cum- componentes: el esqueleto submembranoso y los
plen una función autofágica eliminando fragmentos filamentos citoplasmáticos. Se encuentran debajo
citoplasmáticos. Distintas GPs, como las proteínas de la membrana plaquetaria o rodeando la banda de
lisosomales asociadas a la membrana (LAMP-1, microtúbulos. Su función está relacionada con los
LAMP-2) y CD63, están presentes en la membrana cambios de forma de la plaqueta, el reordenamiento
lisosomal y son redistribuidas a la superficie después de complejos de GPs (Ib-IX-V) y la formación de
de la activación plaquetaria producida por estímulos pseudópodos.
fuertes como la trombina. La actina es el mayor componente del citoesqueleto
Peroxisomas y representa el 20% del contenido proteico plaqueta-
Además de los tres tipos de gránulos descriptos, rio. Se distribuye en dos formas, la primera son mo-
mediante técnicas citoquímicas se han observado nómeros globulares de actina (G-actina) y la segun-
actividades de peroxidasa y catalasa, lo que posi- da está formada por filamentos de actina (F-actina).
blemente indica la existencia de pequeños gránulos Varias proteínas, GPs y GPs de trans-membranas
similares a los peroxisomas descriptos en otros tipos (filamina A (ABP-280), talina, K-actina, miosina I
celulares. y II) están asociadas a la malla citoplasmática de ac-
Citoesqueleto / proteínas motoras tina. Estas proteínas tienen como función la estabi-
El citoplasma está organizado espacialmente por lización del esqueleto cuando las plaquetas están en
una malla de proteínas estructurales llamada en su reposo y favorecen el entrecruzamiento de las pro-
conjunto citoesqueleto, que está compuesta princi- teínas de membrana con la malla de actina.
palmente por tubulina y polímeros de actina; cumple Activación plaquetaria
una función dual, tanto estática como dinámica. Las
plaquetas no estimuladas circulan en forma discoidea Activación de la membrana plaquetaria
y cambian a esféricas cuando son activadas, lo que Una vez ocurrida la activación de las plaquetas, los
permite asegurar una función hemostática correcta. constituyentes de la membrana plasmática comien-
El citoesqueleto está formado por dos estructuras: un zan a reorganizarse y a exponerse como superficies
conjunto de microtúbulos cercano a la membrana y catalíticas para las proteínas plasmáticas: los fosfo-
una malla densa de filamentos de actina. lípidos aniónicos cambian su posición asimétrica y
son reorientados desde el interior a la capa externa
Microtúbulos. para facilitar la formación del coágulo. El citoesque-
Están compuestos por moléculas de tubulina, que leto se contrae en forma simultánea y la membrana
son heterodímeros relacionados a dos polipéptidos plaquetaria cambia su forma, contribuyendo a la for-
globulares; la a y b tubulina y están asociados con mación de pseudópodos.

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Cambio de forma y agregación de actina se expanden y contraen, dando como re-


Morfología. sultado la secreción de moléculas pro-coagulan-
Luego de la activación ocurrida frente a una injuria tes y factores de crecimiento que contribuyen a la
de la pared vascular o por la adhesión a un sustrato, reparación de la injuria vascular.
las plaquetas sufren una serie secuencial de cambios 4- Luego de la secreción, las plaquetas “exhaustas”
morfológicos: forma esférica, adhesión por filopo- incrementan pasivamente los agregados forma-
dios cortos y largos, adhesión por lamelopodios y fi- dos. La proteína P-selectina del gránulo α que
nalmente, la consolidación completa de la adhesión. se expresa durante la activación es blanco de las
La prolongación de lamelopodios es posible por el células polimorfonucleares y de los monocitos/
reordenamiento del citoesqueleto y por un ensam- macrófagos. Finalmente, estas células fagocíticas
ble masivo de actina con fragmentación de la malla “limpian” la zona de los restos plaquetarios y de
periférica de actina por plecstrina. Los fragmentos fibrina.
resultantes de actina están unidos a la membrana Receptores plaquetarios
por las conexiones ABP-GP Ib-/IX-V. Además de La activación de los sitios de unión a ligandos en la
la formación de lamelopodios, las plaquetas activa- GP IIb-IIIa (αIIbβ3) es producida por distintos meca-
das forman filopodios superficiales, que permiten la nismos de señalización que se inician por la unión
unión entre plaquetas y la formación de agregados de agonistas a las proteínas G constituidas por siete
sólidos. Estas proyecciones están contenidas por ra- segmentos transmembrana (STRs).
milletes de filamentos de actina largos y difieren de Muchos de estos agonistas provienen del contenido
los que forman lamelopodios por no depender de la plaquetario: la serotonina, que estimula la plaqueta a
fragmentación. través de un receptor de tipo 5-HT-2; el tromboxano
Las diferentes estructuras participan en distintas A2 (TxA2), producto de la metabolización del ácido
funciones dentro de los procesos adhesivos: la for- araquidónico (AA) que se une a un receptor especí-
mación de lamelopodios detiene el drenaje vascular fico de tromboxano (TP-1,-2) y el ADP liberado de
adhiriéndose a la superficie injuriada y la formación los gránulos densos que se une principalmente a dos
de filopodios permite la unión a fibrina y a otras pla- receptores de tipos P2Y1 y P2Y12.
quetas para formar el coágulo plaquetario tridimen- Otros agonistas posibles son hormonas liberadas por
sional. Finalmente, los cambios de forma son reco- otros tejidos, incluyendo la adrenalina (epinefrina),
nocidos por cuatro etapas claramente identificables: que se une a receptores plaquetarios adrenérgicos de
1- Se despolimerizan los microtúbulos, se incremen- tipo α2 y la vasopresina proveniente de la hipófisis.
ta la cantidad de F-actina, se deforma la mem- Finalmente, la trombina corta a su receptor STR (re-
brana plaquetaria, se originan los lamelopodios y ceptor activador de proteasas, PAR 1,4) formando
finalmente éstos facilitan la adhesión entre ambos un nuevo péptido N-terminal que se unirá a la por-
bordes de la injuria vascular. ción C-terminal del receptor.
2- Otras plaquetas son reclutadas, lo que permite Mecanismos intracelulares
consolidar la formación de la monocapa. Éstas Una de las respuestas tempranas dependientes de
son activadas a través de receptores G-heterotri- proteínas G es la activación de la fosfolipasa C-beta
méricos, lo que resulta en la activación de la inte- (PLC-β). Esta enzima es responsable de la hidróli-
grina αIIbβ3 (señalización del interior al exterior), sis del fosfatidil-inositol produciendo diacilglicerol,
permitiendo la unión al fibrinógeno (señalización que activa una proteína quinasa C (PKC) que catali-
del exterior al interior) y la polimerización de la za la fosforilación de proteínas, la secreción de grá-
red de filamentos de actina. Finalmente, con la nulos y la expresión del receptor para fibrinógeno.
formación de numerosos filopodios, las plaquetas Otro producto de la hidrólisis catalizada por la PLC
se agregan y se consolidan entre sí formando un es el inositol-fosfato, que se une al sistema tubular
espeso trombo plaquetario. denso y estimula la liberación de Ca2+. Además, la
3- Las plaquetas se contraen a través de cordones fosforilación del fosfatidil-inositol en la porción D-3
de actina también llamados “fibras de tensión”, del anillo de inositol producida por otra quinasa, la
ancladas en las zonas de adhesión. Estas cuerdas fosfatidilinositol 3 quinasa (PI3K), es importante en

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la regulación de la activación de la integrina αIIbβ3 . DAG-GEFI (Ca2+ and diacylglycerol regulated


El segundo mecanismo involucra la vía de los eico- guanine nucleotide exchange factor I, Ca2+ y diacil
sanoides. Se inicia por activación de fosfolipasa A2 glicerol reguladora del factor 1 del intercambio del
(PLA2), que libera AA de los fosfolípidos de la mem- nucleótido guanina).
brana plaquetaria, lo que constituye el paso limitante CalDAG-GEFI controla la activación Rap1b, pe-
para la síntesis de prostanoides y leucotrienos. queña proteína unida a GTP que cumple un rol crí-
El incremento intracelular de los niveles de Ca2+ me- tico en la activación de la integrina IIbIIIa y en la
diado por IP3, está directamente relacionado con la función plaquetaria.
activación plaquetaria, dado que muchas de las enzi- CalDAG-GEFI media una activación rápida y re-
mas comprometidas en los mecanismos de transduc- versible de Rap1b, en tanto que la activación lenta
ción de señales, tales como PLA2, PLC y la quinasa y sostenida, requerida para una activación completa
de la cadena liviana de la miosina son dependientes de la integrina, es iniciada por PKC y dependien-
de Ca2+. te del ADP liberado. Además, datos recientes de-
muestran que CalDAG-GEFI también participa en
Nuevos mecanismos intracelulares la activación de PKC vía Rap1b por un mecanis-
(Los esquemas 1 y 2 son adaptaciones de las citas 5, 9 y 11) mo dependiente de la generación de tromboxanos.
Vía Rap1b - CalDAG-GEF1 (Ver esquema 1) En función de los hallazgos experimentales se ha
A pesar de la importancia primordial del Ca2+ como propuesto un modelo de activación plaquetaria en el
segundo mensajero, es poco lo que se conoce acer- cual CalDAG-GEFI sería el nexo entre el Ca 2+, la
ca de los mecanismos que regulan la fluctuación del generación de tromboxanos, la liberación del conte-
calcio intraplaquetario. Recientemente se ha iden- nido granular y la activación de las integrinas.
tificado una proteína Ca2+ sensible, llamada Cal-

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Vía proteína Rho (Ver esquema 2) tas, provocando sangrado o trombosis.


En respuesta al daño vascular causado por shear Estos mecanismos descriptos y muchos otros son
stress o por otros factores protrombóticos se desen- propuestos para interpretar los mecanismos de se-
cadena un proceso coordinado de activación intra- ñalización, los nuevos enfoques que se están apli-
celular que involucra a distintas proteínas de seña- cando utilizan modelos matemáticos para ayudar
lización. La adhesión/activación de los receptores la comprensión de la biología plaquetaria. Estos
específicos (GP IIb-IIIa, GP Ib-IX-V, GP VI) unidos pueden tomar dos formas distintas: las que utilizan
o no a sus ligandos y de los receptores acoplados un enfoque de arriba hacia abajo “top-down”, por
a proteína G (PAR1,4; TPα,β; P2Y12), generan ca- medio del cual se modelan las propiedades de siste-
minos de señalización complejos que finalizan con mas complejos pero relativamente intactos; y aque-
la respuesta plaquetaria (agregación/liberación) y llos que utilizan un enfoque “reduccionista”, con lo
en última instancia con su actividad procoagulan- cual se modelan relativamente pocos aspectos de la
te y protrombótica. Pleines, utilizando un modelo señalización o función plaquetaria, pero en mayor
en ratones, identificó el rol funcional de la proteína detalle. Por ejemplo, el enfoque de “top-down” ha
RhoA en plaquetas, propuso un mecanismo por el revelado detalles importantes de cómo los trombos
cual los receptores asociados a las proteínas de se- de plaquetas se organizan en un “núcleo” denso y
ñalización efectúan un proceso de regulación en la altamente activado de plaquetas que exponen PS.
activación que conlleva a la formación del trombo. Los modelos reduccionistas, en cambio, se centran
Este hallazgo favorece el conocimiento de los de- en la señalización de Ca2+, ya que es fácil de medir
fectos plaquetarios provocados por la desregulación con alta resolución temporal y cuantificar, y es un
del mecanismo propuesto, dado que afectaría el ta- punto de integración de la señal para muchas vías
maño, la forma, la cantidad y calidad de las plaque- plaquetarias. Los modelos de Ca2+ han demostrado

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TIPO DE ARTÍCULO

ser útiles en la comprensión de cómo las plaquetas 6. Blair P1, Flaumenhaft R. Platelet alpha-gran-
organizan eventos funcionales importantes, como ules: basic biology and clinical correlates. Blood
la exposición a PS, en distintas subpoblaciones. El Rev. 2009 Jul;23(4):177-89.
modelado de los procesos que regulan los niveles
7. Golebiewska EM, Poole AW. Platelet secretion:
de Ca2+ citosólico ha proporcionado información
from haemostasis to wound healing and beyond.
sobre el mecanismo de entrada y liberación de Ca2+
Blood Rev. 2015 May;29(3):153-62.
de los depósitos del sistema tubular denso (DTS) y
a través de receptores IP3. Tambien, estos modelads 8. De Pascale MR, Sommese L, Casamassimi A,
matemáticos han ayudado a la comprensión de la Napoli C. Platelet derivatives in regenerative
regulación de quinasa corriente abajo de GPVI y el medicine: an update. Transfus Med Rev. 2015
papel importante de las fosfatasas en la regulación Jan;29(1):52-61.
negativa y en la modulación de la transducción de 9. Bergmeier W, Stefanini L. Novel molecules in
señales. Es importante destacar que estos complejos calcium signaling in platelets. J Thromb Hae-
modelos matemáticos tendrán que ser validados por most. 2009 Jul;7Suppl 1:187-90.
el uso de diferentes donantes de plaquetas, con el fin
de reflejar la variabilidad en la respuesta de plaque- 10. Hagedorn I, Vögtle T, Nieswandt B. Arterial
taria dentro de la población humana. thrombus formation. Novel mechanisms and
En resumen, la función plaquetaria involucra un targets. Hämostaseologie. 2010; 30: 127-35.
conjunto de etapas, cambio de forma, secreción y 11. Pleines I, Elvers M, Strehl A et al. Rac1 is essen-
activación de sitios de unión a ligandos en la integri- tial for phospholipase C-gamma2 activation in
na αIIbβ3, todas relacionadas al proceso de adhesión. platelets. Pflugers Arch. 2009 Mar;457(5):1173-
El resultado final será la interacción plaqueta-pla- 85.
queta y la formación del tapón hemostático formado
12. Nurden AT. Thrombus stability on the vessel
por los agregados plaquetarios. La consolidación
wall. Blood. 2008; 112: 4-5.
del trombo requiere de la acción conjunta de dos
receptores plaquetarios centrales, el GPIIb/IIIa y el 13. Bye A.P, Unsworth AJ, and  Gibbins JM. Platelet
GPIb-IX-V y de sus principales ligandos, el fibrinó- signaling: a complex interplay between inhibito-
geno y el VWF. ry and activatory networks. J Thromb Haemost.
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