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Fisiología bacteriana
Luis A. Merino
Fisiología bacteriana
Las bacterias son capaces de realizar una serie de transformaciones químicas mediante reac-
ciones enzimáticas que se traducen en síntesis de nuevos productos, transporte, movimiento y
duplicación celular
Se considera crecimiento bacteriano al aumento ordenado de todos los componentes celula-
res con el consiguiente aumento del número de células bacterianas, o sea que el resultado final
del crecimiento bacteriano es la duplicación celular.
El crecimiento bacteriano se inicia con la captación de nutrientes a partir del medio ambiente y
los pasos intermedios entre la captación de nutrientes y la división celular constituyen el meta-
bolismo bacteriano. El metabolismo bacteriano está compuesto de dos etapas: una de sínte-
sis o Anabolismo y una de destrucción o Catabolismo.
Durante el anabolismo o fase anabólica las sustancias simples se convierten en sustancias
complejas y durante el catabolismo o fase catabólica las sustancias complejas se convierten en
sustancias simples.
Nutrición bacteriana
Las bacterias deben obtener del medio ambiente los sustratos que serán utilizados para su
crecimiento. Nutrición bacteriana es el proceso mediante el cual las bacterias captan nutrien-
tes a partir del medio que las rodea. Dichos nutrientes deben estar en solución, aún aquellos
que son gaseosos. Si bien los constituyentes generales de las bacterias son muy similares, la
capacidad de captación de nutrientes y de síntesis de nuevos productos es muy variable entre
distintas especies bacterianas Todas las bacterias necesitan para desarrollar ciertos elementos
básicos como ser C, P, S, N y agua.
Aunque muchas bacterias sólo requieren adicionalmente algunas moléculas simples para cre-
cer (como ser aminoácidos y azúcares) y son consideradas nutricionalmente no exigentes
(Pseudomonas, Escherichia, Staphylococcus), existen otras consideradas nutricionalmente
exigentes que requieren además compuestos más complejos como vitaminas y cofactores para
poder desarrollar (Haemophilus, Neisseria). Ciertas bacterias son incapaces de producir y al-
macenar su propia energía por lo que deben tomarla a partir de la célula que se encuentran
infectando y se denominan bacterias energéticamente exigentes (Chlamydias y Rickettsias).
Los dos primeros grupos mencionados son capaces de desarrollar en medios fabricados artifi-
cialmente en el laboratorio (in vitro) mientras que el último grupo sólo desarrolla en medios de
cultivos que contengan células vivas.
Absorción de nutrientes
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A través de la membrana no sólo ingresan sustancias sino que muchas son eliminadas a través
de ellas, tanto en procesos activos como pasivos.
En la figura de la izquierda se
presentan ejemplos de los
mecanismos de transporte
transmembrana mencionados.
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No todas las especies bacterianas son capaces de producir todas las exoenzimas, por lo que el
estudio de la producción de algunas de ellas es útil en la identificación de los géneros y espe-
cies.
Requerimientos de O2 y CO2
Bacterias aerobios estrictas: necesitan una concentración de alrededor del 21% de oxígeno
para poder desarrollar. (Pseudomonas, Mycobacterium, Corynebacterium)
Bacterias microaerófilas: sólo necesitan alrededor de un 5% de oxígeno para desarrollar.
Mayores concentraciones inhiben su desarrollo. (Campylobacter, Helicobacter)
Bacterias anaerobios obligadas o estrictas: son incapaces de sobrevivir en presencia de
oxígeno, es decir requieren un 0% de oxígeno (Fusobacterium, Clostridium)
Bacterias anaerobias aerotolerantes: pueden sobrevivir, aunque no crecer, en presencia de
hasta un 0,5% de oxígeno. (Actinomyces, Propionibacterium)
Bacterias anaerobias facultativas: son capaces de crecer en una atmósfera tanto con o sin
oxígeno. (Streptococcus, Staphylococcus, Enterobacteriaceae)
Bacterias capnófilas: son bacterias aerobias que necesitan además para crecer un 5-10%
de CO2. (Neisseria, Haemophilus)
Para estudiar en el laboratorio los requerimientos de oxígeno de las bacterias, se coloca la bac-
teria en un medio de cultivo en un tubo profundo (Tubo 1) y se lo incuba durante 24 horas a
37ºC. Al cabo de ese tiempo se observa el sitio en el cual desarrolló la bacteria.
Si la bacteria desarrolló sólo en la superficie o sea en contacto con el oxígeno, la bacteria es
aerobia estricta (Tubo A). Si en cambio sólo se verifica desarrollo en la profundidad del medio e
cultivo, la bacteria es anaerobia estricta (Tubo B). Una bacteria microaerófila desarrollará a cier-
ta distancia de la superficie, donde la concentración de oxígeno es baja (Tubo C) y una bacteria
anaerobia facultativa desarrollará en todo el volumen del medio de cultivo (Tubo D)
24 hs 37 ºC
Tubo 1 A B C D
Las bacterias requieren diferentes temperaturas para desarrollar y sobrevivir. Esta característica
es importante para comprender ciertas características patógenas de las bacteria, para entender
sobre la forma en que las bacterias pueden transmitirse desde el medio ambiente al hombre y
para mantener las muestras clínicas a la temperatura adecuada hasta su procesamiento en el
laboratorio.
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Requerimientos de pH
El conocimiento del pH óptimo para el desarrollo de las bacterias permite conocer los equilibrios
y cambios posibles dentro de los diferentes ecosistemas bacterianos existentes en el organis-
mo, ya que existen bacterias que se aseguran un ambiente ácido para impedir el desarrollo de
bacterias neutrófilas y alcalófilas.
Obtención de energía
Para poder desempeñar los procesos metabólicos, las bacterias, como todos los seres vivos
deben producir y almacenar energía para luego poder reutilizarla. Sólo el grupo mencionado
más arriba (energéticamente exigentes) es incapaz de obtener energía por sí solos.
Moléculas complejas
Metabolitos intermedios
Moléculas complejas
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1. Glucólisis
2. Decarboxilación oxidativa
3. Ciclo de Krebs
4. Transporte de electrones
Durante el proceso de forman productos tóxicos (O2- y H2 O2) que deben ser transformados
por la bacteria productora en O2 y agua mediante enzimas como la peroxidasa y la superóxido-
dismutasa. Este mecanismo es utilizado por las bacterias aerobias y anaerobias facultativas
en aerobiosis.
1. Glucólisis
2. Decarboxilación oxidativa
3. Ciclo de Krebs
4. Transporte de electrones
Durante el proceso no se liberan productos tóxicos. Este mecanismo es utilizado por las bacte-
rias anaerobias obligadas y las anaerobias facultativas en anaerobiosis.
1. Glucólisis
2. Degradación del piruvato
3. Productos con alta energía: ácido láctico, propiónico, butírico, acético,
alcohol etílico, etc.
Este mecanismo es utilizado por las bacterias anaerobias estrictas y anaerobias facultativas
en anaerobiosis.
Para estudiar el metabolismo energético de las bacterias, se siembran con la bacteria en estu-
dio dos tubos conteniendo glucosa y un indicador de pH, uno de los cuales se cubre con vaseli-
na líquida de manera tal de impedir que el medio de cultivo se ponga en contacto con el oxíge-
no ambiental (Tubos 1 y 2). Luego de 24 hs. de incubación a 37 ºC se observa lo ocurrido en
ambos tubos. Un cambio de color de verde a amarillo en el medio de cultivo indica que la bacte-
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ria a desarrollado y utilizado la glucosa como fuente de energía, produciendo una acidificación
del medio con el consiguiente cambio en el color del indicador de pH.
Si el cambio de color se evidencia en el medio expuesto al aire, significa que la bacteria utilizó
la glucosa en presencia de oxígeno, es decir tubo lugar una oxidación (Tubo A) y la bacteria es
oxidadora. Si el cambio de color ocurre en el medio tapado con vaselina, la utilización de la
glucosa se realizó en ausencia de oxígeno, es decir ocurrió una fermentación (Tubo B) y la bac-
teria es fermentadora. Si no se registra cambio en ninguno de los tubos, significa que la bacte-
ria es no glucidolítica, es decir, no es capaz de utilizar la glucosa como fuente de energía.
24 hs a 37ºC
Tubos 1 y 2 A B C
Medios de Cultivo
Según su consistencia
Medios sólidos, poseen una sustancia solidificante que generalmente es agar-agar, una
sustancia que solidifica a temperatura ambiente y sólo sirve de soporte para los nutrientes.
Al inicio de la Microbiología como ciencia sólo se podía obtener las bacterias en medios líquidos
pero era muy difícil y a veces hasta imposible obtener en forma aislada dos bacterias que se
encontraban juntas en una muestra. El desarrollo de medios de cultivos sólidos marca un hito
importante dentro de la ciencia médica debido a que a partir de su aplicación en el diagnóstico
de las enfermedades infecciosas se ha podido recuperar a las bacterias en forma aislada para
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Según su composición
Según su finalidad
Medios para aislamiento primario: son medios sólidos que se usan para obtener bacterias
aisladas a partir de una muestra clínica. Son ejemplos de medios de aislamiento primario los
siguientes: Agar nutritivo, Agar sangre, Agar chocolate, Agar Eosina-Azul de Metileno
(E.M.B.), Agar Salmonella-Shigella (S.S.), Agar Manitol Salado, etc.
Medios de enriquecimiento: son medios líquidos en los cuales se siembra inicialmente la
muestra para aumentar el número de bacterias antes de ser subcultivado a un medio sólido.
Son ejemplos de medios de enriquecimiento los siguientes: Caldo selenito, Caldo Cerebro-
Corazón, Caldo Tioglicolato
Medios de identificación: son medios líquidos o sólidos que permiten estudiar alguna carac-
terística metabólica de la bacteria como ser producción de enzimas. Son ejemplos de me-
dios de identificación los siguientes: Agar triple azúcar hierro (TSI), Agar citrato, Agar urea,
etc.
Aislamiento primario
Una vez obtenida la muestra clínica, para realizar el diagnóstico etiológico de la enfermedad
infecciosa, o sea, para aislar al agente causal de la misma, es necesario sembrar (inocular) la
muestra en medios de cultivo sólidos (y eventualmente líquidos si se desea realizar un enrique-
cimiento previo) (Ver figura inferior)
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Muestras clínicas
Medios de cultivo
Sólido Líquido
Inicio de
la siembra
Incubar 24 hs
a 37ºC
Final de
la siembra
Duplicación bacteriana
El tiempo necesario para que se observen las colonias en un medio de cultivo adecuado y bajo
condiciones de temperatura y atmósfera correctas dependerá del tiempo de duplicación celu-
lar de la bacteria en estudio. En la figura siguiente se esquematiza un proceso de duplicación
bacteriano.
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A continuación se presentan ejemplos de tiempos de división y del tiempo mínimo que debe
esperarse para observar colonias en los medios de cultivo.
Debido a que las bacterias se duplican en cada generación, la población bacteriana a través
del tiempo aumentará en forma exponencial de 2.
Si se presenta el número de bacterias en función del tiempo, tendremos una curva exponencial
pero si representáramos el ciclo vital de un grupo de bacterias tendríamos cuatro fases (Ver
figura siguiente):
Número de
bacterias
2
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1
Tiempo
1. Fase de latencia: las bacterias se adaptan al medio en el que se encuentran, en este perío-
do el número de células no varía. El tiempo de adaptación es variable para las diferentes
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bacterias. En esta etapa, por ejemplo, las esporas bacterianas se transforman en células
vegetativas.
2. Fase exponencial: es aquí donde se inicia la multiplicación bacteriana, el número de bacte-
rias aumenta exponencialmente y es aquí donde se liberan las enzimas y toxinas.
3. Fase estacionaria: llega un momento en que existe una competencia por los nutrientes ya
que estos van disminuyendo en su concentración y las bacterias dejan de crecer. En este
período las bacterias esporuladas comienzan a esporular. Algunas bacterias mueren pero
otras se dividen por lo que el número de células se mantiene sin variaciones.
4. Fase de muerte: el número de bacterias comienza a disminuir debido a que las bacterias
que mueren supera al número de bacterias que se dividen.
En la práctica, este modelo de crecimiento bacteriano nos sirve para conocer cuánto tiempo
deberá ser incubado un medio de cultivo con el objeto de que las bacterias en estudio siempre
se encuentren en la fase de crecimiento exponencial, ya que es allí cuando se manifiestan to-
das sus propiedades bioquímicas y patogénicas.
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