PRÁCTICA No 1

DETERMINACIÓN DEL pH
La mayoría de las células pueden funcionar únicamente dentro de límites
estrechos de pH y requieren por lo tanto sistemas amortiguadores que se
opongan a los cambios de pH que de otra forma ocurrirían a causa del
metabolismo. Los tres principales sistemas amortiguadores en los materiales
vivos son las proteínas, el bicarbonato y el fosfato. La importancia relativa de
cada uno depende del tipo de célula y del organismo.

DEFINICION DE pH.
La concentración de hidrogeniones en la mayoría de las soluciones es
demasiado baja y para evitar el uso de números con varias cifras decimales
Sørensen introdujo en 1909 el término pH como una forma muy adecuada
para expresar la concentración de hidrogeniones.
El pH se define como el logaritmo negativo de la actividad de hidrogeniones
(H+), pero en la práctica se torna generalmente la concentración de
hidrogeniones ya que la concentración y actividad son prácticamente las
mismas, excepto en soluciones fuertemente ácidas.
Los valores de pH se representan en una escala que va del 1 al 14. La medida
del pH se efectúa:
a. Mediante un pHmetro.
b. Papel indicador universal. el cual cambia de color según los
cambios de pH.
 ESCALA DE pH

[H+ ] pH [OH-] P(OH+

)
100(1) 0 10-14 14
10-1 1 10-13 13
10-2 2 10-12 12
10-3 3 10-11 11
10-4 4 10-10 10
10-5 5 10-9 9
10-6 6 10-6 8
10-7 7 10-7 ,..17

10-6 8 10-6 6
10-9 9 10-5 5
10-10 10 10-4 4
10-11 11 10-3 3
10-12 12 10-2 2
10-13 13 10-1 1
10-14 14 100(1) 0

En algunos casos se utiliza la expresión de p0H para

expresar la basicidad de una solución, siempre el
pH+p0H = 14.
 PROCEDIMIENTO

1. En un tubo de ensayo coloque las muestras disponibles para su

medición de pH.
2. Introducir el pHmetro dentro del tubo de ensayo para medir el pH.
3. En el mismo tubo de ensayo haga burbujear aire expirado en el agua
y determine el pH.

Tabular los resultados. Poner una cruz (X) al lado de los valores de pH
apropiados.

VALORES DE PH

Muestra 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 1 1 1 1
0 1 2 3 4
Saliva
Orina
Jugo de
naranja
Clara de huevo
Leche
Tomate
Coca cola

Responda.

1. ¿Qué sucede con el valor de pH cuando se hace burbujear aire expirado en

el agua?

El ph aumenta gradualmente por la reacción del oxigeno

2. ¿Qué efecto tiene el pH en la solubilidad de las sustancias?

El ph ayuda a una mejor mezcla de las mismas sustancias, cuando

el ph es parecido la solubilidad aumenta.
RESULTADOS.

El ph de distintas sustancias.

Agua destilada……7
Vinagre……2.2
HL……1.2
Jaboncillo……7.2
Hidróxido de sodio…..12.6
Frugos…3.6
Orina…..4.5-8

Se obtuvo resultados de los siguientes grupos

Grupo 1

-Agua destilada Ph=6.5

-Aagua destilada después de burbujear= 8.5

H2O + CO2 = H2CO3

Grupo 3

-Orina = 6.5 / 6.3

-Amilasa salival = 6/6.5

Grupo 4

-Orina = 5.9

-Amilasa = 6.9
 PRACTICA N° 02
DETERMINACIÓN DE GLICEMIA EN SANGRE
OBJETIVOS:

Determinar los niveles de glucosa en sangre.

Compara los valores de glicemia en ayunas y postprandial.

INTRODUCCIÓN:
La glucemia es la medida de concentración de glucosa libre en la sangre, suero
o plasma sanguíneo. Durante el ayuno, los niveles normales de glucosa oscilan
entre 70 y 100 mg/dL.
Cuando la glucemia es inferior a este umbral se habla de hipoglucemia; cuando se
encuentra entre los 100 y 125 mg/dL se habla de glucosa alterada en ayuno, y
cuando supera los 126 mg/dL se alcanza la condición de hiperglucemia. Constituye
una de las más importantes variables que se regulan en el medio interno
(homeostasis).
Muchas hormonas están relacionadas con el metabolismo de la glucosa, entre
ellas la insulina y el glucagón (ambos secretados por el páncreas), la adrenalina
(de origen suprarrenal), los glucocorticoides y las hormonas esteroides
(secretadas por las gónadas y las glándulas suprarrenales).
La hiperglucemia es el indicador más habitual de la diabetes, que se produce
como resultado de una deficiencia de insulina, en el caso de la diabetes de tipo I
o una resistencia a la insulina, en el caso de la diabetes de tipo II.
La hipoglucemia es un estado definido por una concentración de glucosa en la
sangre anormalmente baja, inferior a 50-60mg/100m1. Se suele denominar shock
insulínico, por la frecuencia con que se presenta en pacientes con diabetes
mellitus en tratamiento con insulina. Generalmente se asocia con alteraciones o
pérdida del conocimiento.

Etiología
La hipoglucemia muy a menudo es resultado del tratamiento para la diabetes
mellitus. A continuación se listan otros factores que deben considerarse en
cualquier paciente con hipoglucemia:
1. Fármacos: insulina de insulina (sobre todo clorpropamida, repaglinida,
nateglinida), alcohol, dosis altas de saliciatos, sulfonamidas, pentamidina,
quinina,quinolonas.
2. Enfermedad grave: insuficiencia hepática, renal o cardiaca; septicemia,
inanición prolongada.
3. Deficiencias hormonales: insuficiencia suprarrenal, hipopituitarismo.
4. Insulinoma: tumor de células B pancreáticas, hiperplasia de células B
(conocida como nesidioblastosis, ya sea congénita, o posterior a cirugía
gástrica o variatrica).
 5. Otras etiologias raras: tumores de células no B (tumores
mesenquiomatosos grandes o epiteliales que producen factor de
crecimiento similar a insulina II, otros tumores no pancreáticos), insulina o
anticuerpos contra el receptor para insulina, defectos enzimáticos
hereditarios.
La hipoglucemia puede deberse a diversas causas. En personas sanas suele ser
consecuencia de un ayuno muy prolongado debido a que el organismo sigue
utilizando glucosa, una vez que ya no queda glucógeno en el hígado para
producirla. Un ejercicio intenso acompañado de poca ingesta previa puede
provocar hipoglucemia. En personas que padecen diabetes mellitus es muy
habitual. En este caso, suele deberse a un fallo en la administración de insulina
exógena o de medicamento oral antiadiabético. Si se administra cuando no se ha
comido lo suficiente, los niveles de glucosa pueden bajar hasta producir una
hipoglucemia severa. En este tipo de pacientes también se puede producir por un
exceso de ejercicio unido a una escasa ingesta de alimentos ya que la actividad
física promueve la utilización de glucosa por los tejidos.
Hay que vigilarla especialmente en niños menores de 6 años, ya que puede
perjudicar al desarrollo cerebral.
También puede causar hipoglucemia el consumo de alcohol debido a los efectos
inhibidores de la neo glucogénesis hepática. Para que esto ocurra el glucógeno
hepático debe haberse consumido. Esto se da en el ejercicio intenso y en el ayuno
prologado.

FISIOPATOLOGÍA
En términos generales, la hipoglucemia es el resultado de dos factores:
• Un exceso de insulina activa en el cuerpo.
• Una respuesta fisiológica correctiva que es imperfecta, generalmente, el
glucagón y la adrenalina (las dos hormonas responsables de mantener la glucemia
dentro del rango de 70-100 mg/dL).
Cuando el cuerpo produce glucagón y adrenalina, logra corregir cualquier exceso
de insulina (que haga bajar demasiado los niveles glucémicos) y logra avisarnos
de que no hay suficiente glucosa circulando para permitir la función normal del
cuerpo. Pero el proceso de corrección es imperfecto o ausente en la mayoría de
las personas con DM. Por este defecto, el azúcar en sangre baja a niveles
hipoglucémicos cuando la insulina esté activa y presente en una cantidad excesiva
para la cantidad de carbohidrato presente en la sangre. Si se ingiere una dosis de
insulina (o medicamento oral) demasiado grande para la alimentación ingerida,
puede haber un episodio de hipoglucemia. Si la cantidad de actividad física es
mayor a la prevista, la cantidad de insulina o medicamento oral presente en el
cuerpo puede resultar excesiva, lo cual podría iniciar un episodio de hipoglucemia.
También se puede dar un episodio de hipoglucemia si la persona con DM1óDM2
toma la insulina o el medicamento oral y luego decide no comer en las siguientes
horas. La manera más confiable de saber si se tiene, o se está cerca de tener, un
episodio de hipoglucemia es utilizando el medidor casero de glucosa.
Cuadro clínico: Se producen sensaciones muy variadas como:
Nerviosismo, Sudor, Temblores, Polifagia
Confusión, Cefalea, Pérdida de memoria, Desorientación
Diaforesis (sudoración Iris), Visión borrosa, Cansancio injustificado, Mareos
Un síntoma que identifica esta condición temporal es un dolor en el centro del
pecho, lo mejor es tomar un refresco o un dulce para elevar los niveles de glucosa
en la sangre.
Si no se ingieren hidratos de carbono, se puede sufrir de convulsiones, pérdida de
conciencia, coma, daño cerebral y muerte.
Clasificación

Clasificación de la Moderada Severa

hipoglucemia
Glucemia < 50 mg/100 ml < 3º mg/100 ml
Sintomatología Taquicardia, Confusión mental,
Sudoración, Parestesias Convulsiones y coma.
faciales, irritabilidad La hipotermia es leve
progresiva y sensación (32,3 a 35 ˚C.
de hambre.

Tratamiento
Para el "shock insulínico", el tratamiento de elección sería la administración
inmediata de glucosa o glucagón.
• La eliminación del insulinoma mediante la cirugía es indudablemente el
tratamiento de elección, pues en muchos de los casos se puede realizar la
enucleación del tumor; pero en otro porcentaje bastante considerable, ha de
practicarse una hemipancreatectomia. En aquellos casos en los que la cirugía no
resulte posible o reaparezcan los síntomas debe recurrirse al tratamiento médico,
que también se aplicará durante el periodo en que se estudia la morfología del
tumor; no así cuando se practican estudios de funcionalidad, ya que la mayoría de
los fármacos utilizados se basan en la inhibición de la síntesis de insulina, su
secreción endógena, o ambas,
Fármacos utilizados:
1. Diazóxido: Derivado de las benzotiadiazinas cuyo mecanismo de acción se basa
en la activación de los canales de potasio sensibles al ATP, lo que evita su cierre
(efecto opuesto a la sulfonilurea), por lo que en el ámbito de las células b produce
una inhibición de la secreción de insulina (pero no un bloqueo de su síntesis), y al
nivel del receptor de la insulina en los órganos diana, inhibe la utilización periférica
de la glucosa. Se ha empleado previo a la intervención quirúrgica o como
tratamiento paliativo en insulinomasmetastáticos. La dosis es de 3 a 8 mg/kg/día
por via oral, con una dosis máxima de 400 a 600 mg.
2. Octreótido: Es un análogo de la somatostatina que se utiliza principalmente
como inhibidor de la hormona del crecimiento en la acromegalia.
3. Glucocorticoides: Se recomiendan como inmunosupresores en el
tratamiento de la hipoglucemia de etiología autoinmune.
Prevención
Para evitar recaídas se recomienda que se cambien los hábitos alimenticios del
paciente para que haya glucosa disponible en sangre a lo largo de lodo el día.
Están aconsejadas comidas reducidas y con mayor frecuencia (5 o 6 veces al día),
que incluyan hidratos de carbono de digestión y absorción lenta. En lo posible
habría que evitar el consumo de alcohol y los azúcares de rápida absorción.
Hiperglucemia o hiperglicemia significa cantidad excesiva de glucosa en la
sangre. Es el hallazgo básico en todos los tipos de diabetes mellitus, cuando no
está controlada o en sus inicios. El término opuesto es hipoglucemia.
La hiperglucemia y la resistencia a la insulina tienen efectos sobre la evolución de
los pacientes: disminuyen la resistencia a la infección, favoreciendo la
sobreinfección por bacterias gram-negativas y por hongos, favorecen la aparición
de polineuropatias y de disfunción multiorgánica y, en definitiva, incrementan la
tasa bruta de mortalidad de los pacientes.
Debido a un calco léxico, muchos médicos utilizan en vez de «glucemia» la palabra
antietimológica «glicemia» (término inexistente en castellano, según la Real
Academia Española).

Etimología
Etimológicamente hyper- en griego significa "demasiado"; -glyc- en griego significa
"dulce"; - einia significa "de la sangre".
Valores en sangre
En ayunas la glucosa sanguínea de una persona no debe exceder de 126 mg/dl,
y 200 mg/dl el resto del tiempo.
Mantener durante años los niveles altos de glucosa en sangre contribuye a agravar
seriamente las complicaciones a largo plazo de la diabetes.
La hemoglobina glucosilada (HbA 1c) mide la glucosa o azúcar que se encuentra
unida a la hemoglobina y como tal es una medida del grado de elevación media
de la glucosa en sangre durante los tres meses anteriores a la obtención de la
misma; es un parámetro de laboratorio (bioquímico) importantísimo e
imprescindible para el control de la diabetes. (V.N. 5% - 6%)
Preparación para el examen
El examen se puede hacer de las siguientes maneras:
• En ayunas (durante al menos 8 horas)
• En cualquier momento del día (monitoreo aleatorio)
Razones por las que se realiza el examen:
El examen de glucemia también se utiliza para monitorear a personas que se
sospecha que padecen diabetes.
También se puede hacer si usted presenta:
• Un aumento en la frecuencia de la necesidad de orinar
• Visión borrosa
• Confusión o un cambio en la forma como usted normalmente habla o se
comporta
• Episodios de desmayo
• Convulsiones (por primera vez)
Si se tiene alguno de los siguientes factores de riesgo:
• Sobrepeso (índice de masa corporal, o IMC, de 25 o más alto) y otros
factores de riesgo.
• Presión arterial de 140/90 mm Hg o superior, o niveles malsanos de
colesterol.
• Miembro de un grupo étnico de alto riesgo (afroamericanos,
hispanoamericanos, nativos americanos, asiáticos americanos o nativos de las
islas del Pacifico).
• Mujer que dio a luz a un bebé que pesa 9 libras (lb) o más, o que tuvo
diabetes gestacional.
• Poliquistosis ovárica
• Pariente cercano con diabetes (por ejemplo, un padre, hermano o
hermana).
Los niños de 10 años de edad o más que tienen sobrepeso y al menos 2 de los
factores de riesgo mencionados anteriormente deben ser examinados para
detectar diabetes tipo 2 cada 3 años, incluso si no tienen síntomas.

Resultados normales
Si le hicieron un examen de glucemia en ayunas, un nivel entre 70 y 100 mg/dL se
considera normal.
Si le hicieron un examen de glucemia aleatorio, un resultado normal depende de
cuándo fue la última vez que comió. La mayoría de las veces, el nivel de glucemia
estará por debajo de 125 mg/dL.
Significado de los resultados anormales
Si en un examen de glucemia en ayunas se determina:
• Un nivel de 100 a 125 mg/dL significa que se tiene una alteración de la
glucosa en ayunas, un tipo de prediabetes. Esto incrementa el riesgo de desarrollar
diabetes tipo 2 con el tiempo.
• Un nivel de 126 mg/dL o mayor casi siempre significa que el paciente tiene
diabetes.
Si se a realizaron un examen de glucemia aleatorio y se determina:
• Un nivel igual o superior a 200 mg/dL a menudo significa que tiene diabetes.
Para confirmar se ordenara un examen de glucemia en ayunas, un examen de
HIDA1c o una prueba de tolerancia a la glucosa según el resultado del examen de
glucemia aleatorio.
• En alguien que tiene diabetes, un resultado anormal en el examen de
glucemia aleatorio puede significar que la diabetes no está bien controlada.
Otros problemas de salud también pueden provocar un nivel de glucosa en la
sangre superior a lo normal, por ejemplo:
• Hipertiroidismo.
• Cáncer pancreático.
• Hinchazón e inflamación del páncreas (pancreatilis).
• Estrés debido a un traumatismo, accidente cerebrovascular, ataque
cardíaco o cirugía.
• Tumores raros, por ejemplo feocromocitoma, acromegalia, síndrome de
Cushing.
• Un nivel de glucosa en la sangre inferior a lo normal (hipoglucemia) puede
deberse a:
• Hipopituitarismo (un trastorno de la hipófisis).
• Glándula suprarrenal o glándula tiroides hipoactiva.
• Tumor del páncreas (insulinoma, muy poco común).
• Muy poco alimento.
• Demasiada insulina u otros medicamentos para la diabetes.
• Enfermedad renal o hepática.
• Pérdida de peso después de una cirugía para adelgazar.
• Ejercicio vigoroso.
Algunas medicinas pueden elevar o bajar el nivel de glucosa en la sangre. Para
algunas mujeres jóvenes delgadas, un nivel de azúcar en sangre en ayuno menor
a 70 mg/dl puede ser normal.

MÉTODO
Método de glicemia enzimática del Laboratorio Wiener Lab.
Fundamento del método:
Glucosa + O2 a H20 --------GOD------> ácido glucónico + H20
2 H2O2 + 4-AF + fenol -------POD-------> quinona coloreada + 4 H20
Reactivos:
A. Reactivo A: solución de 4-aminolenazona 25 mrno1/1 en Buffer Tris 0,92
mol/I.
B. Reactivo B: solución de fenol 55 mmol/l.
C. Reactivo C: solución de glucosa oxidasa (1000 U/mi) y peroxidasa (120
U/m1).
S. Standard: solución de glucosa 1 g/1.

Procedimiento:
En tres tubos de ensayo colocar:
Blanco (B) Standard (S) Muestra (D)
Standard - 20 ul -
Muestra - - 20 ul
Reactivo 2 ml 2 ml 2 ml

Incubar 10 min. A 37°C y leer la Abs. a 505 nmA.

Calculo de los resultados:
1,00 𝑔/𝑙
Glucosa g/I = D x f donde f =
𝑆

Conversión de unidades:
Glucosa (0) = Glucosa (mg/dl) x 0.01
Glucosa (mg,d1) x 0,0555 = Glucosa (mmo1/1)
RESULADOS.

Sacando el suero por centrifugación de los distintos grupos.

Blanco = 0.063
Estándar = 0.365

Pospandrial Ayunas

G1 0.318 0.549

G2 0.369 0.417

G3 0.511 0.579

G4 0.330 0.320

G1 0.318 – 0.063 = 0.255

0.549 – 0.063 = 0.486

AxF =3.31 glucosa g/l 0.486 x 3.31 = 1.6 g/l = 160 mg/dl

0.255 x 3.31 = 0.24 g/l = 24 mg/dl

G2 0.306 x3.31 = 1.01 = 101 mg/ dl

0.354 x 3.31 = 1.17 = 117 mg/dl

G3 0.448 x 3.31 = 1.48 = 148 mg/dl

0.516 x 3.31 = 1.70 = 170 mg/dl

G4 0.267x3.31 = 0.88 = 88 mg/dl

0.257x3.31 = 0.85 = 85mg/dl

PRACTICA No 3
PRUEBA DE TOLERANCIA A LA GLUCOSA

ORAL OBJETIVOS.

 Determinar y cuantificar los valores de glucosa sanguínea.

 Realizar la prueba de tolerancia a la glucosa oral y analizar e
interpretar los resultados.

El test (o prueba) de tolerancia orca: a la glucosa, también denominado test (o

prueba) de sobrecarga oral de la glucosa, es una prueba médica cuyo objetivo
es diagnosticar o excluir la diabetes y cuadros metabólicos relacionados, corno
la resistencia a la insulina.
La prueba consiste en la toma inicial de una muestra de sangre (en ayunas de 10 a
12 horas). Seguidamente se ingiere una solución glucosada (usualmente algún
jugo) con 75 gramos de glucosa y se aguarda en reposo dos horas, momento en
que se realiza una nueva extracción de sangre. En ocasiones el examen incluye
una extracción a la hora. Según los valores de glucemia obtenidos a las 2 horas.

Resultados normales

Valores sanguíneos normales para una prueba de tolerancia a la glucosa

oral con 75 utilizada para detectar diabetes tipo 2 en personas que no
estén embarazadas:

Ayunas: 60 a 100 mg/c1L

 1 hora: menos de 200 mg/dl.
 2 horas: menos de 140 mg/dl.

Los ejemplos anteriores son mediciones comunes para los resultados de estos
exámenes. Los rangos de los valores normales pueden variar ligeramente entre
laboratorios. Algunos laboratorios utilizan mediciones diferentes o analizan
distintas muestras. Hable con el médico acerca del significado de los resultados
específicos de su examen.

Significado de los resultados anormales

Un nivel de glucosa superior a lo normal puede significar que usted tiene

prediabetes, diabetes o diabetes gestacional.
Entre 140 y 200 mg/dL, se denomina alteración de la tolerancia a la glucosa. El
médico puede llamar a esto "prediabetes", y significa que usted está en mayor
riesgo de padecer diabetes con el tiempo.

Un nivel de glucosa de 200 mg/d1 o superior se usa para diagnosticar la diabetes.

Consideraciones

El estrés debido, por ejemplo, a traumatismo, accidente cerebrovascular, ataque

cardíaco o cirugía puede elevar su nivel de glucosa en la sangre y el ejercicio
vigoroso puede disminuirlo.

Algunos medicamentos pueden elevar o disminuir el nivel de glucosa en la sangre.

Antes de que le hagan el examen, hágale saber al médico si está tomando algún
tipo de medicamentos.
Los medicamentos que pueden producir intolerancia a la glucosa abarcan:

 Betabloqueadores (corno propanolol)

 Ciertos antipsicóticos
 Corticosteroides (como prednisona)
 Epinefrina
 Estrógenos
 Glucagón
 Isoniazida
 Litio
 Anticonceptivos orales (pastillas anticonceptivas)
 Fenotiazinas
 Fenitoína
 Salicilatos, incluido el ácido acetilsalicílico (aspirin)
 Diuréticos tiazídicos (como hidroclorotiazida)
 Triamtereno
 Antidepresivos tricíclicos
DIAGNOSTICO

Modificaciones de la ADA 2011.

Test Normal Incremento de Diabetes

riesgo de
Diabetes.

Glucemia en <100 mg/dl 100-125 mg/dl ≥ 126 mg/dl

ayunas (glucosa basal
alterada.

Glucemia a las 2 <140 mg/dl 140 – 199 mg/dl ≥ 200 mg/dl

horas en PTGO (intolerancia a la
(75g glucosa) glucosa.