LABORATORIO N° 5: INTERACCIONES MICROBIANAS

ELIANA QUINTANA BAYONA CODIGO: 1611190

WANDERLEY VANEGAS PARADA CODIGO: 1611282

DOCENTE: AZULA SANGUINO QUINTERO

UNIVERSIDAD FRANCISCO DE PAULA SANTANDER

FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS Y DEL AMBIENTE
INGENIERÍA BIOTECNOLÓGICA
SAN JOSE DE CÚCUTA
2018
1. Procedimiento

COMENSALISMO

 SEMILLAS

Retirara semillas con

ayuda de pinzas
Depositar en cajas de petri agar
nutritivo y agar saboraud.

Agra Nutritivo Agar Saboraud

Incubar 37°C/24-48 Incubar30°C/ 3 a 5

horas días
  TALLOS Y HOJAS

Realizar cortes de tallos y

hojas

Depositar en solución de hipoclorito de

sodio al 5% por 5 minutos y retirarlos

Depositar los trozos por separado (tallos y

hojas) en cajas Petri con agares

Incubar: 37°C /24/48 horas Tallos Hojas Tallos Hojas Incubar: 30°C /3-5 días

AGAR AGAR
NUTRITIVO SABORAUD
 PRUEBA DE ANTAGONISMO

AGAR SABORAUD

METODO DE SIEMBRA METODO DE SIEMBRA

DUAL IGARASHI

L L

T F F

INCUBAR A 30°C/ 3-5 DÍAS

2. RESULTADOS

1. Estudio micro flora epífita (comensalismo):

 Semillas (fruto de Higo):

Formación de
colonias por AGAR NUTRITIVO
contaminación

 En esta prueba de semillas de higo, no se

logró evidenciar nada ya que el fruto no
estaba en condiciones aptas para la para
el sembrado (fruto verde y las semillas no
habían cumplido su respectiva
maduración).
 Se logró observar el crecimiento de tres
colonias de un microorganismo
contaminante (hongo), debido a distintos
manejos de la práctica como el mal
sembrado, contaminación por aire, mal
manipulación de los equipos.

AGAR SABORAUD

No se logro obtener un buen resultado

de muestra debido a que el fruto de
higo no estaba en condiciones óptimas
de sembrado, aparte de eso se
evidencio una contaminación de
hongos con unas morfologías
Crecimientos de macroscópicas como :
hongos
contaminantes  Textura: algodonos, cremosos.
 Color: cremoso, blancos, negros.
 Forma: circular- irregular.
  Tallos y hojas (planta de higo):
Morfologías
homogéneas

Colonia
contaminante

AGAR NUTRITIVO

En esta prueba se observa que hubo colonias homogéneas en los tallos, estos se realizaron
con un corte redondo y delgado. En las hojas también se observan colonias, pero se
debieron colocar los fragmentos hojas uniformemente y separados para favorecer el
crecimiento del cultivo microbiano, para que este pudiera desplazar su crecimiento mejor
sin que la colonia inhiba toda la muestra.

 También se pudo observar una pequeña colonia de contaminación en la parte del cultivo
de hojas.

Morfología macroscópica:
 Borde: Entero-dentado
 Color: crema
 Detalle óptico: Opaco, cremoso
 Forma: Circular-irregular
 superficie: Lisa
 Elevación: Plana
 AGAR SABORAUD

MICROORGANISMOS CONTAMINANTES

MORFOLOGIA IRREGULAR

 Se presentó crecimiento de un hongo, su morfología macroscópica es:

 Color: Blanco, negro.

 Textura: Algodonosa.
 Forma: Circular-irregular

 El resto son varias morfologías pero ninguna es por crecimiento de hongos

homogéneos, debido a que el fruto de higo estaba en condiciones muy verdes y por esto
afectó los resultados de la prueba.

 También se observó varios contaminantes ya sea por la contaminación del aire o mal
sembrado del cultivo, o la misma muestra lo produjo pero los resultados obtenidos no
fueron los esperados para este análisis.
 2. Antagonismo (competencia):

 Método Dual:

T
F
Se presencia como Observamos como Fusarium
Trichoderma viride inhibe s.p realiza su crecimiento
casi por completo el medio hacia atrás, dando a entender
de cultivo microbiano, que huye o repele del
atacando visiblemente al crecimiento de Trichoderma
hongo Fusarium s.p. viride.

Inbicion de Fusarium s.p hacia la parte derecha del cultivo microbiano

Se aprecian las características macroscópicas

esenciales de los hongos estudiados, a la
T izquierda se observa a Trichoderma viride de
F color verde están completamente formadas, el
resto que hay presente aún no han realizado
completamente su desarrollo, y en la derecha se
identifica a Fusarium s.p de color blanco con
precipitado rosado, inhibiendo su crecimiento de
Trichoderma viride hacia la parte derecha.

Crecimiento de Trichoderma viride

 Método Igarashi:

Como se describió anteriormente,

en el centro se encuentra
Fusarium s.p y alrededor de este
se formó el crecimiento de
Trichoderma viride el cual inhibe
el crecimiento del primero.

Crecimiento fusarium s.p

3. Antibiograma :

Se presentó crecimiento en el medio de

cultivo de salmonella y un halo de
inhibición < de 17 mm, ya que el halo
midió en total 15 mm y se le resto los 4
mm que mide el sensidisco de
Amikasina 30µg, dando un total de 11
mm de halo, llegando a la conclusión de
que la bacteria trabajada es resistente a
este antibiótico.

3. Análisis de resultados :

 Antagonismo (competencia):
Fusarium spp. Es un hongo filamentoso aislado de plantas y suelo. Se encuentra como
microbiota normal en arroz, frijol, soya y otros cultivos. Además de ser un contaminante
común y fitopatógeno. Este género contiene más de 20 especies de las cuales las más
comúnmente aisladas son F. solani, F. oxysporum y F. moniliforme. (Tangarife, 2016)
La actividad fungicida hace que T. viride sea útil como control biológico contra los hongos
patógenos de las plantas, proporciona protección contra Rhizoctonia, Pythium e incluso
Armillaria. Se encuentra de forma natural en el suelo y es eficaz como un aderezo de
semillas para el control de las semillas y las enfermedades transmitidas por el suelo,
incluidas las especies de Rhizoctonia solani, Macrophomina phaseolina y Fusarium.
Cuando se aplica al mismo tiempo que la semilla, coloniza la superficie de la semilla y
mata no solo los patógenos presentes en la cutícula, sino que también proporciona
protección contra los patógenos transmitidos por el suelo.
Teniendo en cuenta lo anterior y los resultados obtenidos en el laboratorio podemos decir
que se cumple el hecho que Trichoderma viride ataca a Fusarium s.p, demostrando que él
primero sirve como controlador biológico contra Fusarium s.p él cual sería el patógeno a
controlar.

 Flora epifita o flora comensal:

Las semillas en el agar nutritivo presentaron crecimiento bacteriano de colonias alrededor
de cada semilla, se presente contaminación por parte de un hongo que creció sobre las
colonias; mientras que en el agar saboraud el medio las semillas fueron cubiertas por
hongos contaminantes.
Los tallos y hojas en el agar nutritivo hubo presencia de crecimiento bacteriano por
contaminación ambiental; en el agar saboraud se presentó crecimiento de hongos
contaminantes con las mismas características, blanco esponjado, que al ser todos iguales se
dedujo que pertenecen a la flora epifita de el árbol pero no se logra observar con mucha
precisión.

 Antibiograma:

La amikacina es un antibiótico semisintético del grupo de los aminoglucósidos, derivado de

la Kanamicina, de acción bactericida.
Como todos los antibióticos aminoglucósidos, la kanamicina se une a la subunidad S30 del
ribosoma bacteriano, impidiendo la transcripción del DNA bacteriano y, por tanto, la
síntesis de proteínas en los microorganismos susceptibles. (VADEMECUM, 2003)
Salmonella es resistente a este antibiótico al igual que algunas bacterias grampositivas,
AMIKACINA es activa, in vitro, en contra de especies de estafilococos productores y no
productores de penicilinasa, incluyendo las cepas resistentes a la meticilina. Sin embargo,
en términos generales, los aminoglucósidos presentan una menor actividad en contra de
otros organismos grampositivos: Streptococcus pyogenes, enterococos y Streptococcus
pneumoniae (anteriormenteDiplococcus pneumoniae). AMIKACINA es resistente a la
degradación por parte de la mayoría de las enzimas inactivadoras de los aminoglucósidos
que afectan a la gentamicina, tobramicina y kanamicina. Los estudios in vitro, demuestran
que el sulfato de AMIKACINA, en combinación con un antibiótico beta-lactámico, actúa
en forma sinérgica en contra de muchos organismos gramnegativos que son de importancia
clínica, como Proteus rettgeri, Providencia stuartii, Serratia marcescens o Pseudomonas
aeruginosa.
4. Conclusiones

 Se logró analizar y observar el crecimiento de micro flora epifita de acuerdo a la

interpretación fenotípica presente en tallo, hojas y semillas de la planta a la cual se
realizó el estudio, que en este caso fue la planta de higo con su respectivo fruto.

 En algunas pruebas de siembra no se logró obtener los resultados esperados, debido a

que en primera condición se utilizó el fruto del higo que no estaba en condiciones
óptimas de maduración, también se presentó algunos microorganismos contaminantes
por distintos factores de contaminación como el aire, mal sembrado del cultivo, o
microorganismos provenientes de la muestra.

 Se presenció existencia de antagonismo entre Trichoderma viride vs Fusarium s.p, ya

que el primero se usa como controlador biológico de hongos patógenos en lo que se
encuentra Fusarium s.p.

 Se interpreta la importancia que tiene la mecanismo de acción en el antagonismo,

abarcando interés el interés que tiene para Trichoderma viride el control de diferentes
fito patógenos en este caso Fusarium s.p minimizando el daño en el cultivo.
5. Bibliografía

 http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/5a_interaccionesmicrobianas_17670.pdf

 http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/5a_interaccionesmicrobianas_17670.pdf

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online. obtenido de scielo - scientific electronic library online:
http://www.scielo.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=s0034-
98872004001000003
 https://es.scribd.com/doc/283567637/interacciones-entre-poblaciones-microbianas

 https://es.slideshare.net/eduardobobadillaatao35/informe-41304048

 tangarife, v. (30 de abril de 2016). aprende en línea plataforma academica

para prepago y posgrado . obtenido de aprende en línea plataforma
academica para prepago y posgrado :
http://aprendeenlinea.udea.edu.co/lms/moodle/mod/page/view.php?id=1008
13
 vademecum. (17 de septiembre de 2003). obtenido de vademecum:
http://www.iqb.es/cbasicas/farma/farma04/a043.htm