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LICENCIATURA EN ENFERMERÍA

MICROBIOLOGIA
UNIDAD: V

INVESTIGACION: TECNICA DE ELISA Y SUSTANCIAS PARA COMBATIR
LOS VIRUS

Docente: Química: María Beatriz Quintana González
Alumna: 14 Susana María López Ontiveros

Cd. Obregón Son., a Abril de 2018.

TECNICA DE ELISA Durante una infección. Cada anticuerpo se compone de una cadena de polipéptido pesada y ligera. Los anticuerpos policlonales son heterogéneos en estructura y varían en su capacidad para unirse a antígenos. Los anticuerpos obtenidos a partir de animales. un individuo presenta una respuesta de anticuerpos que eventualmente resulta en la producción de moléculas de IgG en el plasma que se unen a diversas partes del agente infeccioso. y serán detectados por la técnica de ELISA. se unirán a los antígenos adsorbidos en los pocillos de una microplaca y permanecerán allí después del lavado. Si estos anticuerpos están presentes en la muestra. tales como conejos. los anticuerpos se producen en respuesta a la presencia de una respuesta antigénica. Por el contrario. Todos los anticuerpos pertenecen a un grupo de proteínas séricas conocidas como globulinas. Los anticuerpos que tienen una alta afinidad por los antígenos no específicos pueden dar reacciones cruzadas no deseadas. pero también se han adaptado para detectar con éxito muestras que contienen antígenos. en respuesta a un antígeno se conocen como anticuerpos policlonales. los anticuerpos con constantes de unión débiles pueden no ser tan sensibles. En general. Tales anticuerpos también pueden dar resultados falsos negativos. Los siguientes pasos son los pasos básicos de la reacción del ELISA: . Los test de ELISA (acrónimo del inglés Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay: ‘ensayo por inmunoadsorción ligado a enzimas’) fueron desarrollados originalmente para la medición de anticuerpos. Este experimento de ELISA ha sido diseñado para detectar un anticuerpo dirigido contra un antígeno.

El substrato 2 (S2) se añadirá a las filas 3 y 4. o albúmina de suero bovino. La solución de sustrato utilizada para la reacción de ELISA es casi incolora. Los antígenos pueden ser lisados. El substrato 2 (S2) contiene peróxido de hidrógeno y (ABTS). La Peroxidasa convierte el peróxido a H2O + . PASO 3 Una solución que puede o no puede contener el anticuerpo primario se añade a los pocillos. el substrato 1 (S1) se añadirá a todos los pozos en las filas 1 y 2. La peroxidasa posee una alta actividad catalítica. La enzima unida al anticuerpo secundario es una peroxidasa. PASO 2 Los pocillos son lavados para eliminar los antígenos no unidos. en consecuencia. Este acoplamiento no afecta significativamente a la especificidad de unión y afinidad del anticuerpo o la actividad enzimática de la peroxidasa. En ciertos casos. una proteína específica o una mezcla de ambos. PASO 4 Una solución que contiene el anticuerpo secundario se añade a continuación a los pocillos. aunque algunas sustancias pueden exhibir una unión diferencial. PASO 6 Después de lavar los pocillos. Muchos co-sustratos donantes de hidrógeno pueden ser utilizados por la peroxidasa que se desarrollan color tras la oxidación. No hay especificidad involucrado con el proceso de adsorción a los pocillos. La peroxidasa convierte el peróxido a H2O + O2 utilizando el salicilato como el donante de hidrógeno. Si está presente en la solución. PASO 5 Los pocillos son lavados para eliminar los anticuerpos secundarios no unidos.PASO 1 Los antígenos son añadidos a los pocillos donde algunos permanecen adsorbidos a los pocillos por enlaces hidrófobos después de los lavados. El substrato 1 (S1) contiene peróxido de hidrógeno y salicilato de amino. la amplificación de una muestra positiva puede ocurrir durante varios órdenes de magnitud. Si el anticuerpo primario se ha mantenido unido bien. entonces el anticuerpo secundario se unirá a él y permanecerán unidos después del lavado. Los lugares no ocupados de las paredes de los pocillos son bloqueados con proteínas como gelatina. El salicilato oxidado es marrón y se puede observar fácilmente en los pocillos positivos. La solución de sustrato añadido es casi incolora. los antígenos pueden unirse covalentemente al plástico usando luz UV. el anticuerpo primario se unirá al antígeno adsorbido en el pozo y permanecerá después del lavado. Los anticuerpos secundarios se purifican y se unen de de forma covalente a las enzimas tales como peroxidasa.

los ojos. por ejemplo. A diferencia de los antibióticos de amplio espectro.  Amantadina está entre los diversos medicamentos antivirales que se pueden usar para tratar y prevenir la gripe. Los medicamentos antivirales son avances relativamente recientes.  Acyclovir es una medicina que se puede usar para tratar la varicela. la garganta y los conductos respiratorios donde pueden causar un resfriado común. Todos los niños padecen de una enfermedad viral eventualmente. las medicinas antivirales tienden a ser más específicas y atacar virus específicos. Estos son algunos ejemplos de medicamentos antivirales que a veces se recetan para niños. poliomielitis). los genitales o el cerebro. El médico puede decirle cuándo es necesario un medicamento antiviral con prescripción. si su hijo tiene un resfriado común.O2 usando el ABTS como el donador de hidrógeno. que incluye la nariz. El ABTS oxidado es verde y puede ser fácilmente observado en los pocillos positivos. Los virus también pueden causar enfermedades más graves como el síndrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA). Acyclovir puede aliviar las molestias y acelerar la cura de las úlceras herpéticas. Debido a que hay vacunas disponibles para proteger a su hijo contra algunas infecciones virales (por ejemplo. así como los síntomas relacionados con las infecciones de herpes que pueden afectar la piel. la boca. El virus herpes simplex permanecerá latente en el cuerpo y puede volver a causar síntomas en el futuro. Un Western blot de muestras de ELISA positivos se utiliza para confirmar el tamaño y cantidad de antígeno. Se elaboran para prevenir la infección o acortar la duración de las infecciones al prevenir que el virus se disperse. dolor de garganta y sinusitis. SUSTANCIAS CON LAS QUE SE COMBATEN LOS VIRUS Las infecciones virales no se curan con antibióticos y tanto los niños como los adultos normalmente se recuperan con solo esperar que la enfermedad siga su curso natural. sólo deje que siga su curso natural. aunque no pueden matar los virus que ya existen. Diferentes inmunizaciones con el mismo antígeno en el mismo animal también pueden producir afinidades de unión variables. varicela. que con frecuencia se usan contra una amplia variedad de organismos bacterianos. Estos medicamentos son más útiles cuando se inician inmediatamente después de que aparecen los . Estas medicamentos no son apropiadas para todas las infecciones virales. hepatitis y rabia. pero no mata el virus. asegúrese de que esté totalmente protegido con todas las vacunas recomendadas por La American Academy of Pediatrics. Muchas infecciones virales afectan las vías respiratorias. El uso de anticuerpos monoclonales dirigidos contra un único epítopo elimina esta variabilidad. pero ahora hay disponible un número cada vez mayor de estos medicamentos para combatir a los virus. gripe.

las infecciones bacterianas a veces ocurren como una complicación secundaria de una enfermedad viral. llamadas medicamentos antirretrovirales.  Ribavirina e Interferón son medicamentos antivirales que a veces se recetan para adultos que desarrollan hepatitis crónica. En estos casos. Amantadina solo es eficaz para tratar un tipo de virus de la gripe. Su uso en niños es limitado. el medicamento se debe iniciar los primeros 2 días de la enfermedad. El retrovirus más conocido. síntomas de gripe en su hijo. virus de inmunodeficiencia humana (VIH). se usan para combatir las infecciones causadas por un tipo específico de virus llamado un retrovirus. En general. es responsable del SIDA. Recuerde que aunque las enfermedades virales no se deben tratar con antibacterianos. . Otras medicinas. los antibacterianos se usan para tratar la infección bacteriana. influenza A.

pdf .REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS https://www.healthychildren.aspx http://bioted.org/spanish/health-issues/conditions/treatments/paginas/tips- for-treating-viruses-fungi-and-parasites.es/protocolos/INTRODUCCION-ELISA.