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UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR

FACULTAD DE CIENCIAS AGRÍCOLAS


INGENIERÍA AGRONÓMICA
NUTRIMENTOS DE PLANTAS
Integrantes: Cuenca Joe Docente: Ing. José Espinosa
Espinoza Jessica
Estrella Karen
Gómez Joselyn
Semestre: Quinto A
Fecha: 22/05/2018
Práctica Nº2
1. TEMA: DETERMINACIÓN DE FÓSFORO (P) FOLIAR EN DISTINTOS
TEJIDOS VEGETALES

2. INTRODUCCIÓN
El P se clasifica como un nutriente primario, razón por la cual es comúnmente deficiente en
la producción agrícola y los cultivos lo requieren en cantidades relativamente grandes. El
fósforo (P) es un nutriente de baja solubilidad y movilidad en los suelos, que se encuentra
generalmente en situaciones de deficiencia para el crecimiento vegetal, y sólo puede ser
repuesto mediante la fertilización. La concentración total de P en los cultivos varía de 0.1 a
0.5 % (Munera, 2012)
El fósforo es constituyente del ATP (Adenosin Tri Fosfato), ácidos nucleicos, fosfolípidos y
ciertas enzimas, este elemento cumple una función importante en el sistema de transferencia
de energía dentro de la planta. Así mismo, es esencial para el crecimiento radical, en el
proceso de floración y en la formación de frutas y semillas. El fosforo es absorbido por la
planta principalmente como ion ortofosfato primario (H 2 PO 4 ) , pero también se absorbe
como ion fosfato secundario (HPO4 ) y no es reducido dentro de la planta, la absorción de
esta última forma se incrementa a medida que se sube el pH (Balta, 2015)
El P juega un papel vital virtualmente en todos los procesos que requieren transferencia de
energía en la planta. Los fosfatos de alta energía, que son parte de la estructura química de la
adenosina difosfato (ADF) y de la ATF, son la fuente de energía que empuja una multitud de
reacciones químicas dentro de la planta. La transferencia de los fosfatos de alta energía del
ADF y ATF a otras moléculas (proceso denominado fosforilación), desencadena una gran
cantidad de procesos esenciales para la planta (IPNI, 2017)
El análisis fitoquímico o análisis del tejido vegetal, se refiere habitualmente, al análisis
químico de hojas (foliar), pero es una analítica aplicable a cualquier tejido de la planta
(ramillas, flores, frutos, otros). En el caso de las hojas, esta técnica de diagnóstico es
ampliamente reconocida para determinar las concentraciones de nutrientes y con ello evaluar
el estado nutricional de la especie vegetal. (Bonomelli, 2017)
3. PRINCIPIO ANALÍTICO
3.1. Digestión húmeda de la muestra de tejido vegetal
La muestra de tejido seca y molida se trata con una mezcla de ácido nítrico (HNO3) y ácido
perclórico (HClO4) para destruir la materia orgánica liberando dióxido de carbono (CO2)
como gas y dejando en solución los minerales para que puedan cuantificarse.
3.2. Determinación de P en tejidos vegetales
El método para la determinación del contenido de P en los tejidos vegetales es colorimétrico.
La solución obtenida por la digestión de los tejidos se pone en contacto con una solución de
metavanadato de amonio (NH4VO3) y molibdato de amonio [(NH4)6Mo7O24. 4H2O]
conocida como solución de Barton’s. El P de la solución, en presencia del vanadio (V+5) y
el molibdeno (Mo+6), forma un complejo llamado fosfo-vanadomolibdato de color amarillo
que puede ser valorado colorimétricamente a una longitud de onda de 400 nm.
4. OBJETIVOS
4.1. OBJETIVO GENERAL
• Determinar el porcentaje de fósforo existente en las hojas de 4 distintos tejidos
vegetales a través del método colorímetro.
4.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS
• Ejecutar de manera adecuada los procedimientos para la determinación de Fósforo
(P) foliar
• Realizar una comparación del resultado de los 4 distintos tejidos vegetales obtenido
con la tabla de niveles críticos para la determinación de Fósforo foliar.

5. MATERIALES
5.1 . Digestión húmeda de la muestra de tejido vegetal
• Materiales
– Material vegetal seco, molido y tamizado
– Erlenmeyer de 125 ml y boca angosta
– Núcleos de ebullición
– Plancha de digestión
– Papel filtro Whatman cuantitativo No.1
– Espectrofotómetro UV-visible
– Piceta
– Pipetas de 5 y 25 ml
• Reactivos
– Ácido nítrico (HNO3)concentrado
– Ácido perclórico (HClO4) al 72%
– Solución de ácido nítrico 0.1 N
– Agua destilada

5.2. Determinación de P en tejidos vegetales

• Materiales
– Espectrofotómetro UV visible
– Pipetas
– Vasos de precipitación de 100 ml
• Reactivos
– Reactivo de Barton’s (metavanadato y molibdato)
– Solución estándar de P de 10 ppm
– Agua destilada

6. PROCEDIMIENTO
6.1 . Digestión húmeda de la muestra de tejido vegetal
– Pesar 0.125 gramos de material vegetal seco y molido, colocar en un Erlenmeyer de 50 ml
de capacidad.
– Agregar 2,5 ml de la mezcla de ácido nítrico-perclórico relación 5:1
– Adicionar 3 núcleos de ebullición para reducir la formación de espuma.
– Colocar los erlenmeyers en una plancha de digestión y someter a las muestras a las
siguientes temperaturas y tiempos:

Temperatura (°C) Tiempo (minutos)


100 10
150 15
180 20

Alrededor de los 100 °C se evaporan los humos pardos del ácido nítrico y alrededor de los
180 °C se observa la reacción del ácido perclórico, que se manifiesta por la presencia de
humos blancos y la reacción violenta del ácido.
La digestión está completa cuando no hay ningún tipo de humo y la solución se vuelve
transparente.
– Dejar enfriar y añadir 12,5 ml de agua destilada y agitar la solución para lavar los lados del
Erlenmeyer.
– Filtrar la solución utilizando papel filtro Whatman cuantitativo No.1. En este filtrado se
encuentran los minerales (P, K, Ca, Mg, Mn, Cu, Fe, Zn). Se toman alícuotas de esta solución
para el análisis químico correspondiente.
6.2 Determinación de P en tejidos vegetales

Tomar 1 ml del filtrado (de la digestión húmeda).


– Agregar 8 ml de agua destilada y 1 ml del reactivo de Barton’s y agitar.
– Realizar una curva de calibrado tomando 0.5, 1.0, 1.5, 2.0 ml de una solución patrón de P
de 10 ppm a la que se le debe añadir 0.5 del reactivo Barton’s para desarrollo del color. Aforar
todos los puntos de la curva con agua destilada hasta 5 ml como se indica en al siguiente
Cuadro:

Cuadro 1. Curva de P que servirá de referencia para determinar el contenido de P en


las muestras.

N° e Volumen de la Volumen de Volumen del Concentración


estándar solución agua reactivo de de P
madre (ml) (ml) color ppm
(ml)
1 0 9 1 0
2 1 8 1 1
3 2 7 1 2
4 3 6 1 3
5 4 5 1 4

– Agitar y esperar 10 minutos para el desarrollo del color amarillo.


– Leer en el fotocolorímetro a una longitud de onda de 400 nm.
– Construir la curva de calibración con las siguientes concentraciones de P: 0-1-2-
3-4 ppm.
– Interpolar los datos de absorbancia de la muestra con los valores de concentración de P de
la curva para obtener la concentración del elemento en la muestra. Si se multiplican estos
valores por 0.1 el contenido de P se expresa en porcentaje.
– Escribir los valores finales de la determinación de P en el Cuadro 2.

7. RESULTADOS

Cuadro 2. Resultados de la determinación de P en tejido vegetal.


MUESTRA N° P(ppm) P(%)
Aguacate 1,719 0,17
Fréjol 2,097 0,21
Manzana 2,896 0,29
Rosas 2,349 0,23

Transformación de ppm a porcentaje


1,719 x 0,1=0,17
2,097 x 0,1=0,21
2,896 x 0,1=0,29
2,349 x 0,1=0,23

Cuadro 3. Niveles críticos para la determinación de Fósforo (P) foliar


Cultivo Deficiente Bajo Medio Alto
Aguacate 0.05 0,08 0,25 0,30
Fréjol 0,25 0,35 0,75 0,80
Manzana 0,10 0,15 0,24 0,30
Rosas 0,10 0,30 0,60 1,00

Gráfica 1. Concentración de Fósforo (P) Foliar vs Absorbancia

Concentraciones de Absorbancia
P (ppm)
0 0
1 0.0918
2 0.1844
3 0.2851
4 0.381

Concentración de Fósforo (P) Foliar vs Absorbancia

0.45
y = 0.0955x - 0.0026
0.4 R² = 0.9997
0.381
0.35

0.3
0.2851
Absorbancia

0.25

0.2
0.1844
0.15

0.1 0.0918

0.05

0 0
0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4 4.5

Concentraciones de P (ppm)
8. CONCLUSIONES

• Se logró determinar el porcentaje de fósforo (F) en los tejidos vegetales de aguacate,


fréjol, manzana y rosas a través del método colorímetro por destilación húmeda.
• Al comparar el cuadro de niveles críticos para la determinación de Fósforo (P)
foliar con los resultados obtenidos podemos observar que en cuanto al aguacate con
un 0,17% esta entre los niveles bajo y medio; el fréjol con el 0,21% indica un déficit
de P; la manzana con un 29% presenta un procentaje entre medio y alto finalmente
la rosa con un 0,23% tiene niveles bajos de fósforo.
• Se logró desarrollar de manera adecuada los procedimientos para la determinación
de fósforo foliar en los diferentes tejidos vegetales.
• De acuerdo a la gráfica Concentración de Fósforo (P) Foliar vs Absorbancia se
obtuvo una r2 =0,997, resultado que se aproxima a 1 lo cual indica que existe un
ajuste lineal perfecto, es decir que los datos obtenidos no varían demasiado del valor
estándar.

9. CUESTIONARIO

1) ¿ En qué parte de las plantas jóvenes se localiza la mayor concentración de


Fósforo?
El fósforo se encuentra en mayor proporción en las hojas jóvenes, flores y semillas en
desarrollo.

2) ¿Cuales son los síntomas de deficiencia de P en las plantas de maíz y palma


africana?

SÍNTOMAS DE DEFICIENCIA DE FÓSFORO


MAÍZ PALMA AFRICANA
Generalmente la deficiencia de fósforo La deficiencia de fósforo conduce a
aparece cuando las plantas son muy crecimiento retardado y más bajas
jóvenes. El síntoma se presenta como una proporciones de brotes/raíces.
mancha de color rojizo púrpura en las Los síntomas incluyen color verde
hojas. El fósforo también controla el oscuro en las hojas más viejas. Aparecen
tamaño del tallo y la formación de la áreas moradas y necrosadas en las
mazorca. Una muy buena indicación de márgenes de las hojas. La deficiencia da
como resultado baja producción de
deficiencia de fósforo es la presencia de
frutos, semillas y flores de mala calidad
tallos torcidos y débiles que no tienen
Al contrario de la mayoría de otros
mazorcas o éstas son pequeñas (INPOFOS, nutrientes, las hojas con deficiencia de P
2018) no muestran síntomas específicos en la
palma de aceite fuera de una longitud
reducida. Otro síntoma visible de
deficiencia de P en palma de aceite es el
crecimiento retardado con hojas cortas
de color verde oscuro. El diámetro del
tronco y el tamaño del racimo también
se reducen, y las palmas muestran una
forma pronunciada de pirámide debido
al agotamiento progresivo de P.
(Rahma, 2010)

3) ¿Cómo se mueve el fósforo dentro de la planta y por lo tanto en que partes de


la planta se manifiesta inicialmente los síntomas de deficiencia de este
nutriente?. Explique.

Cabe destacar que el fósforo es un nutrimento móvil en la planta y en este sentido ubicación
de los síntomas de las carencias nutricionales en las plantas dependerá del grado y la
velocidad de traslado de los nutrimentos desde las hojas viejas hacia las partes nuevas. Los
nutrimentos difieren notablemente en cuanto a su movilidad dentro de la planta.
El fósforo se traslada rápidamente desde las hojas viejas a las partes nuevas. En consecuencia,
los síntomas de la carencia de estos elementos se producen inicialmente en las hojas más
viejas (CIMMYT, 2018).

10. BIBLIOGRAFÍA

Balta, A. (2015). ABSORCIÓN Y CONCENTRACIÓN DE NITRÓGENO, FÓSFORO Y POTASIO EN SACHA


INCHI. Obtenido de http://www.iiap.org.pe/upload/publicacion/PUBL1446.pdf

Bonomelli, C. (2017). Análisis de tejidos vegetales como herramienta de control nutricional en


frutales. Obtenido de http://www.redagricola.com/pe/analisis-tejidos-vegetales-
herramienta-control-nutricional-frutales/

CIMMYT. (2018). Centro Internacional de Mejoramiento de Maíz y trigo. Obtenido de Movilidad de


nutrientes: http://wheatdoctor.org/es/movilidad-de-nutrientes

INPOFOS. (2018). Problemas de maíz. Obtenido de https://semillastodoterreno.com/wp-


content/uploads/2012/03/Fertilizacion-Maiz.pdf

IPNI. (2017). International Plant Nutrition Institute. Obtenido de Informaciones agrómicas del
Fósforo: http://www.ipni.net/publication/ia-
lahp.nsf/0/7600F971E3B3EF0085258013005D62E2/$FILE/Art%204.pdf
Munera, G. (2012). El fósforo elemental indispensable para la vida vegetal. Obtenido de
http://repositorio.utp.edu.co/dspace/bitstream/handle/11059/5248/el%20fosforo%20ele
mento.pdf?sequence=1

Rahma, Z. (2010). El papel del fósforo en el desarrollo sostenible de la palma de aceite (Elaeis
Guineensis, Jacq.) .

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