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2018

“RECONOCIMIENTO DEL ADN EN UN


MODELO DE CÉLULA ANIMAL”

16/04/2018
“RECONOCIMIENTO DEL ADN EN UN MODELO DE CÉLULA ANIMAL” 16 de abril de 2018

FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA

Introducción:
Biología
La fecundación consiste en la activación del óvulo por parte del
espermatozoide con la característica de que ambas células deben de tener un
estado maduro. Este proceso importante permite llevar a cabo la formación de
Práctica N°07
una célula que se conoce como huevo o cigoto que da inicio al desarrollo o a
“RECONOCIMIENTO
través DEL ADN
de sucesivas divisiones EN UN MODELO
de segmentación. La DE CÉLULA
presente ANIMAL”
práctica describe
la fecundación externa in vitro del erizo de mar.

Integrantes

1. Aguirre Ñiquen, Keila


2. Coronel Angulo, Elizabeth
3. Ormeño Hernández, Stefhanya Del Pilar
4. Rivas Arbildo, Susset Geraldine
5. Romero Llanos, Melissa

Ciclo: Primero

Sección: FB1M2

Grupo: “D”

Docente: Dra. Macedo Aguirre, Sonia

Fecha de realización de la práctica: 04/05/2018

Fecha de entrega del informe: 15/05/2018

NOTA FECHA

EVALUACION Y CALIFICACIÓN:
Fecha:

b 16 de ABRILdel
2018
“RECONOCIMIENTO DEL ADN EN UN MODELO DE CÉLULA ANIMAL” 16 de abril de 2018

I. INTRODUCCIÓN:

Para la extracción del ADN del núcleo de las células, es necesario homogenizar las
levaduras en hidróxido de sodio (NaOH) y sodio duodecil sulfato (SDS). Este
tratamiento favorece la ruptura de la pared y de la membrana celular, además de
contribuir a la desnaturalización de las proteínas.

Con el fin de liberar el ADN de las proteínas, se utilizan una serie de agentes
desnaturalizantes, como el perclorato de sodio y la mezcla de cloroformo y alcohol
isoamilo. Después de agregar los agentes desnaturalizantes, se centrifuga la
solución y se obtienen dos fases: una orgánica y una acuosa, separadas por una
interfase de proteínas desnaturalizadas; en la fase acuosa se encuentra el ADN. La
mezcla de cloroformo y alcohol no solo desnaturaliza las proteínas, sino que
disuelve los lípidos de la muestra y aumenta la separación de las fases.

El ADN de la fase acuosa se recupera por precipitación. La precipitación en etanol


absoluto en presencia de una sal es un método muy utilizado en los procesos de
extracción de ADN. Luego, el ADN se disuelve en solución salina, y puede ser
almacenado para utilizarlo en experimentos posteriores.

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“RECONOCIMIENTO DEL ADN EN UN MODELO DE CÉLULA ANIMAL” 16 de abril de 2018

II. Logros de aprendizaje:


 Pudimos realizar la extracción de ADN de tejidos animales y vegetales y
reflexionar sobre la simpleza de su composición con sencillas técnicas.
 Pudimos Observar la estructura fibrilar del ADN.
 Pudimos Establecer la relación entre el proceso de extracción y
propiedades químico - físicas del ADN.

III. Material y Métodos

MATERIALES REACTIVOS
 Varilla de vidrio.  SDS El dodecilsulfato sódico (
cualquier detergente
concentrado)
 Arena. 
 Pedazos de tela para usar como 
filtro.
 Vasos precipitados de 200 ml o 
500 ml.
 Probeta. 
 Embudo. 
 Mortero y pilón. 
 Varilla de vidrio. 

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1. Triturar un fragmento pequeño de hígado de pollo en un mortero. Al triturar


se puedan romper las membranas y se liberen los núcleos sueltos.

2. Añadir al triturado, 50 ml de agua destilada. Remover hasta hacer una


especie de papilla o puré.

3. Filtrar varias veces


sobre una tela para separar los restos de tejidos que hayan quedado por
romper.

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4. Añadir al filtrado un volumen igual de cloruro sódico 0,2 mM. Con esto
conseguimos producir el estallido de los núcleos para que queden libres las
fibras de cromatina.

5. A continuación se añade 1 ml de SDS (SodioDodecilSulfato-Detergente). Así


nos quedará el ADN libre de las proteínas que tiene asociadas.

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6. Añadir 40 ml de alcohol de 96° frío. Hay que hacerlo de forma que el alcohol
resbale por las paredes del vaso y se formen dos capas. En la interface,
precipita el ADN

7. Introducir el alcohol por las paredes del vaso de precipitación.

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8. Observar el resultado.

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IV. Resultados

Capa de
ALCOHOL

INTERFASE

con el ADN

Capa de
FILTRADO

En la práctica de laboratorio extracción del ADN animal, se identificó


y se obtuvieron los siguientes resultados:

Al extraer el ADN del tejido animal, del hígado de pollo el cual se


encuentra en el interior del núcleo celular, disperso y muy
replegado, unido a proteínas para formar la cromatina, donde fue
necesario homogeneizar el tejido y romper las células para separar
el núcleo, además de la envoltura nuclear para liberar su contenido,
se separó el ADN de las proteínas que lo protegen y se precipito
para extraerlo de la solución. Una vez realizado esto, el ADN iba
apareciendo poco a poco en la interfase agua-alcohol en forma de
grumos blancos. Es así que se obtuvieron finalmente hebras blancas
que corresponden a miles de fibras de ADN.

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V. Conclusiones:

 Se logró correctamente extracción y separación del ADN a partir de


tejido anima (hígado), con la separación de interfaces y
seguidamente la obtención de hebras blancas que corresponden a
miles de fibras de AD.
 En la extracción del ADN animal se puso de manifiesto su estructura
fibrilar y el grupo de arrollamiento, que permite el empaquetamiento
en el núcleo celular de las largas de esta moléculas.
 Los métodos de extracción del ADN permiten obtener ácidos
nucleicos purificados a partir de diversas fuentes para después
realizar análisis específicos de modificación genética mediante la
reacción en cadena de la polimerasa. Para extraer los ácidos
nucleicos material biológico es preciso provocar una lisis celular,
inactivar las nucleasas celulares y separar los ácidos nucleicos de los
restos de células .Es posible romper la membrana celular e
inactivación de las nucleasas, los restos de células se eliminan fácil
mente por filtración o precipitación.

VI. Cuestionario.

1.-¿COMO SE COMPONE UN NUCLEOTIDO?

Un nucleótido es un ensamblado de tres componentes:

Bases nitrogenadas: derivan de los


compuestos heterocíclicos aromáticos purina y pirimidina.

Bases nitrogenadas purínicas: son la adenina (A) y la guanina (G). Ambas forman parte
del ADN y del ARN.

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Bases nitrogenadas pirimidínicas: son la timina (T), la citosina (C) y el uracilo (U). La
timina y la citosina intervienen en la formación del ADN. En el ARN aparecen la citosina
y el uracilo.

Bases nitrogenadas isoaloxacínicas: la flavina (F). No forma parte del ADN o del ARN,
pero sí de algunos compuestos importantes como el FAD.

Pentosa: el azúcar de cinco átomos de carbono; puede ser ribosa (ARN)


o desoxirribosa(ADN). La diferencia entre ambos es que el ARN sí posee un grupo OH
en el segundo carbono.

Ácido fosfórico: de fórmula H3PO4. Cada nucleótido puede contener uno (nucleótidos-
monofosfato, como el AMP), dos (nucleótidos-difosfato, como el ADP) o tres
(nucleótidos-trifosfato, como el ATP) grupos fosfato.

2.-¿EN QUE DIFIEREN EL ADN Y EL ARN?

El ADN y el ARN son un tipo de polinucleótidos presentes en todos los seres vivos. A
diferencia del ARN, que es una cadena simple, el ADN es una estructura de doble
hélice. Químicamente, el ADN consiste en azúcar desoxirribosa y el ARN está
compuesto de azúcar ribosa. Del mismo modo, la timina que está presente en el ADN
es reemplazada por uracilo en el ARN. El ADN se considera portador de toda la
información hereditaria y se transcribe en ARN que luego codifica para la proteína en
un proceso conocido como traducción.

3.- ELABORA UNA TABLA COMPARATIVA ENTRE ADN Y ARN.

ADN ARN

(ACIDO DESOXIRRIBONUCLEICO) (ACIDO RIBONUCLEICO)

TIPO DE PENTOSA El ADN usa desoxirribosa El ARN usa Ribosa

FUNCION El ADN es responsable de almacenar y guardar El ARN ayuda a transportar la


la información genética. información para así lograr la
creación de proteínas, desde el
núcleo hasta los ribosomas.

ESTRUCTURA Cuenta con una doble hélice. Tiene dos hebras A diferencia del ADN, el ARN es
de nucleótidos que consisten en su grupo de lineal, de una sola hélice.
fosfatos, azúcar de cinco carbonos y cuatro
bases nitrogenadas: adenina, timina, citosina y Está compuesto por su grupo de
guanina. fosfatos, azúcar de cinco carbonos y
cuatro bases nitrogenadas: adenina,
uracilo (no timina), guanina y

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citosina.

EMPAREJAMIENT La adenina siempre se une a la timina (A-T) y la La adenina siempre se une al uracilo
O DE LAS BASES citosina a la guanina (C-G). (A-U) y la citosina siempre se una a la
NITROGENADAS guanina (C-G).

UBUCACION Se localiza dentro del núcleo de las células y en Depende del tipo de ARN, pero por
las mitocondrias. lo general se les encuentra en el
núcleo de las células, en el
citoplasma y en los ribosomas.

ESTABILIDAD Cuando se encuentra en ambientes alcalinos es Cuando se encuentra en ambientes


estable. alcalino no es estable.

PROPAGACION El ADN es capaz de replicarse a sí mismo. El ARN es sintetizado por el ADN


cuando es necesario.

CARACTERISTICA La geometría de la hélice del ADN tiene la La geometría de la hélice del ARN
UNICA denominada forma B. Está protegido dentro del tiene la denominada forma A. Las
núcleo, y está “sellado herméticamente”. Sin cadenas de ARN son
embargo, puede verse afectado por la constantemente hechas, deshechas,
exposición a los rayos ultravioletas. rotas y reutilizadas. Es mucho más
resistente que el ADN a los rayos
ultravioletas.

4.-¿DE QUE OTRO TIPO DE CELULAS QUE CONFORMAN UN TEJIDO,SE PODRIA


SEPARAR EL ADN?

Se puede extraer el ADN de células animales o vegetales poniendo de


manifiesto la estructura en forma de largas cadenas de esta molécula.

El ADN que se encuentra en los genes es un componente de todas las células.


Una vez rotas las células, todo el material celular queda libre y, en presencia de
detergente, se separan los componentes en base a su solubilidad. El ADN se
precipita con alcohol y se separa del resto de los componentes.

Tejidos vegetales :Tejido epitelial (cebolla,ajo.tomate,platano maduro,piña,etc)

Tejidos animales ( hígado de pollo,trozos de carne)

Muestras biológicas que contienen células:


sangre,cabello,uñas,saliva,semen,cordon umbilical,liquido amniotico

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VII. Referencias:
 https://es.wikipedia.org/wiki/T%C3%A9cnica_del_sud%C3%A1n_III
 http://metabolismolipidos.blogspot.pe/2008/05/enzimas-que-
participan-en-la-digestion.html
 https://es.wikipedia.org/wiki/Emulsi%C3%B3n
 https://es.wikipedia.org/wiki/Sales_biliares
 http://www.monografias.com/trabajos91/informe-experimento-extraccion-
adn/informe-experimento-extraccion-adn.shtml#conclusioa

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