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UNIVERSIDAD PRIVADA DEL VALLE

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


BIOQUIMICA Y FARMACIA Evaluación
CAMPUS TIQUIPAYA

Tipos de siembra
Informe de Practica de Laboratorio
Nº 9
Grupo “A1”

Integrantes:
Karen Adriana Urquieta Carvajal
Lisbeth galilea Tarqui López
Docente: Dra. Cossette Sanchez
Canedo

Cochabamba 24 de abril del 2018

Gestión I – 2018
1. Marco teorico
La Sembrar o inocular es introducir artificialmente una porción de Muestra
(inóculo) en un medio adecuado, con el fin de iniciar un cultivo microbiano, para
su desarrollo y multiplicación. Una vez sembrado, el medio de cultivo se incuba a
una Temperatura adecuada para el crecimiento (1)
Tipos de siembra (placa) (2)

Siembra por inmersión: se coloca el inóculo en una placa o caja de Petri y sobre
el mismo se vierte el medio de cultivo previamente fundido. Este método se
utiliza para microorganismos aerobios.
Siembra en doble capa: se procede de la misma manera que por inmersión. Una
vez solidificado el medio se vierte una cantidad extra de medio necesaria para
cubrir la capa anterior (generalmente 10 ml. aprox.). Este método se utiliza para
microorganismos anaerobios facultativos y microaerofílicos.
Siembra en superficie: se vierte sobre una placa de Petri el medio de cultivo
fundido, se deja solidificar y se coloca sobre la superficie el inóculo. Con ayuda de
una espátula de Drigalsky se extiende el inóculo hasta su absorción total por el
medio de cultivo. Este tipo de siembra se recomienda para microorganismos
aerobios estrictos.
Siembra en estría: se vierte sobre una placa de Petri el medio de cultivo fundido
y se deja solidificar.

Tipos de siembra (Tubo) (2)

Siembra por dilución: Se toma el tubo de ensayo con medio líquido, como el
caldo simple. Se toma el material a diluir y se siembra en el tubo con el uso del
asa cargada con el material bacteriológico, se agita, con movimientos
moderados.
Siembra por estrías en superficie: Se siembra el material en la superficie de el
agar inclinado en un tubo de ensayo, allí se extiende por toda la superficie con el
asa bacteriológica, previamente esterilizada y cargada con el material a sembrar,
haciendo estrías no muy amplias, pero tampoco muy estrechas. Se inicia por la
parte más profunda de la superficie inclinada y se termina la estría en la parte
más cerca de la boca del tubo.
Siembra por punción
Como es obvio, el instrumento de siembra a emplear será la aguja de platino y el
medio de cultivo sólido, generalmente, en tubo de ensayo. Las manipulaciones y
la observancia de las precauciones de asepsia, son similares que cuando se utiliza
el asa. La particularidad que tiene este método, es que la aguja (con el inoculo)
debe atravesar perpendicularmente el medio de cultivo.
2. Objetivos
General
o Aprender a sembrar de manera correcta paso a paso con los diferentes
tipos de métodos de siembra también se debe de aprender a manejar
correctamente el material
Especifico
o Debemos aprender a preparar el material para la siembra
o La manera correcta de sembrar los microorganismos en las cajas
Petri y en tubos de ensayo
o Se debe de aprender la eliminación y el lavado del material de
pues de sus uso
3. Materiales: métodos
Materiales laboratorio
o Estufa
o Matraz Erlenmeyer
o Probeta
o Pizeta
o Varilla
o Mechero de gas
o Asa bacteriologica

o Cajas Petri
o Tubos de ensayo con tapa rosca
o Pipetas
o Pipeteado
o Papel sabana
o Auto clave

Materiales reactivos
o Agar nutritive
o Ager ma-conckey
o Agar EMB

Método de utilización del material


o La estufa ,Matraz Erlenmeyer ,Probeta, Pizeta, varilla se utilizó
para el preparado de los diferentes agares que se mencionan en
los reactivos primero se realizó los cálculos para la disolución se
encendió la estufa se colocó una determinada cantidad de agua
destilada en el Matraz luego se puso el tipo de agar que se
deseaba preparar dentro el matraz se lo removió asta mesclar
completamente y se la dejo en ebullición se lo tapo con un pedazo
de aluminio luego se la coloco en el autoclave.
o Con el papel sabana o aluminio se envolvió , las Cajas Petri, Tubos
de ensayo con tapa rosca, Pipetas, y se los puso en el Auto clave ,
con el material esterilizado se procedió a colocar con una pipeta y
se colocó los diferentes tipos agares en los tubos de ensayo con
tapa rosca también en las caja Petri.
o El las cajas Petri se realizó el cultivo con las diferentes muestras de
orina y eses esto fue con ayuda de un asa bacteriológica
o En el agra nutritive es de color amarillo se iso un barrido con el asa
bacteriológica muestra de orina
o Elen el agar maconckey es de color rosado pálido se hiso con el
asa bacteriológica un barrido de la muestra de orina
o El agar EMB es de color guindo se hiso el cultivo con el método de
estrías donde con una asa bacteriológica se hiso el método de
estrias con la muestra de eses

4. Discusión/resultados
Resultados

En el agar de ma conckey es de color rosa pálido se hiso una


siembra de barrido se puede observar los puntos rosados que son
colonias por lotanto el resultado es que si es tolerante a la lactosa
donde las bacterias son gran negativas
En el agar nutritive es el amarillo este medio de cultivo no es
selectivo donde crece todo tipo de muestras excepto los exigentes
se observó como se formo las colonias de color blancos levaduras
En el agar EMB es el de color guindo se iso un sembrado de medio
selectivo de eses en este medio de cultivo es gran(-) se observa la
presencia de colonias iridiscentes esto es el efecto de los aceites
en una determinada posición se observa como brilla como un
aceite sucio
Posterior a los diferentes tipos de cultivo en caja Petri se seleccionó una caja Petri
y una sola colonia para cultivar en los diferentes tubos de ensayo que contenían
los diferentes tipos de agar

El tubo verde es citrato negativo no reacciono porque


tenía que colocarse de un color azul completo
El tubo rojo esto es un cultivo en pico de flauta agar
inclinado es negativo para los 3 pero si hay un
crecimiento bacteriano colonia de color blanco
El tubo color café suavito se observa la turbidez canal
de inoculación (+) , indol motilidad no se observa
nada de color negro
El tubo de color amarillo se obtuvo una fermentación
de azucares, acido sulfúrico (-) proporción de gas (+)
esto indica que es escherichia coli

Discusión:
En el grupo en la mayoría de los cultivos de placa en el agar ma.conchey no
salieron positivo salieron negativito en su mayoría no se puedo observar las
colonias rosadas los cultivos de agar EMB de color guindo fue un cultivo de
eses en este la mayoría lo hiso bien se observaban las colonias iridiscentes
En el agar nutritive que es el amarillo se observó el crecimiento de colonias de
levaduras uno puntos blancos
En el cultivo de los tubos en el agar nutritive salió en su mayoría fermentación
de azucares, ácido sulfúrico negativo proporción de gas positivo
En todos los tubos de color verde salió negativo ninguno reacciono
En los tubos rojos en algunos no se observo reacción pero en la gran mayoría si
se observó la reacción de las colonias se colocaron de color amarillo patito y se
esparcieron por todo el tubo

5. Conclusión
Se aprendió como los diferentes tipos de cultivos para que sirven y que
clase de bacterias puede crecer en los diferentes tipos de agares también
se identificó como se clasifican con el atlas bacteriano según el TSI y el
SIM y como se interpreta los diferentes reacciones de los tubos que se
dieron
6. Cuestionario
 Indique tres razones principales por las cuales se deben tomar
precauciones en la siembra de microrganismos
 Se debe evitar hablar al momento de la siembra o utilizar
barbijo
 Desinfectar el asa bacteriológica
 Trabajar cerca al fuego
 Diferenciar.
Siembra de aislamiento :
Es la separación de un determinado microorganismo del resto de
microorganismos que le acompañan, el método mas usual es la siembre por
estría sobre un medio de cultivo solido adecuado dispuesto en una placa Petri
Siembra de re-alistamiento:
Es para los aislamientos, hasta obtener cultivos puros; es decir, presenten la
misma morfología y microscópicamente correspondan a un solo tipo de
bacteria, Sólo en este momento se puede proceder a la identificación de la
especie bacteriana mediante el traspaso de 1 sola colonia a una batería de
medios diferenciales
Siembra de recuento total de microorganismos:
Elegir de entre todas las placas las dos correspondientes a aquella dilución que
presenten un número de entre 30 y 300 colonias /placa (esto proporciona una
precisión estadística suficiente y no es engorroso de hacer). Es un recuento de
bacterias para ver el aproximado de cantidad de los microorganismos

 Que características deben tomarse en cuenta para determinar si


sus aislamientos han sido efectivos?
Se observa como cresen las colonias y estas no ben sobre ponerse

 En el caldo lactosa do y caldo verde bilis brillante ,como se


evidencia el crecimiento bacteriano
 El Caldo Lactosado es utilizado para el cultivo de Salmonella y
organismos coliformes en agua, productos lácteos, alimentos y
productos farmacéuticos. En este se observa la motilidad de las
bacterias
 Caldo ver bilis brillante
Este se convierte de color azul la gran mayoría o en su totalidad
7. Bibliografía
(1) Microbiología. Wix.com publicado el 25 de marzo de 2016
disponible en:
http://labdemicrobiologia.wixsite.com/scientist-site/t-cnicas-
y-tipos-de-sembrado
(2) Métodos de siembra publicado el 13 de septiembre de 2011
disponible en: http://metodosdsiembras.blogspot.com/