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MANUAL PRACTICAS

2017-00
DE LABORATORIO

Biología
PRÁCTICA N° 2.1

ARQUITECTURA CELULAR

1. PROPÓSITO
1.1 Observar las principales estructuras en células eucariontes, mediante el uso del microscopio
óptico y colorantes adecuados, identificando distintos organelos celulares.
1.2 Apreciar y comprender cada uno de los procesos implicados en la preparación de placas
(obtención de la muestra, montaje, fijación, tinción, lavado, secado, observación)

2. CONCEPTOS ANTECEDENTES

Cilios. _____________________________________________________________

Colorante básico. _____________________________________________________________


Cloroplastos. _____________________________________________________________

Membrana Celular. _____________________________________________________________

Microscopio. _____________________________________________________________

Núcleo. _____________________________________________________________
Pared Celular. _____________________________________________________________
Preparado en Fresco. ____________________________________________________________

3. PROBLEMATIZACIÓN
¿Todas las células eucariota tienen la misma forma y tamaño?
¿En todas las células se observan los mismos organelos ?

4. HIPÓTESIS PROPUESTA POR EL ALUMNOS

5. MATERIALES

Materiales que proporciona el laboratorio: Reactivos que proporcional el laboratorio


1 microscopio óptico. Azul de metileno.
1 pinza de disección. Lugol.
4 portaobjetos, 4 cubreobjetos.
1 gotero, 1 estilete
Materiales de estudio que proporciona el grupo: Material que proporciona el alumno
1 cebolla 1 plumón indeleble.
Nota: Esta cantidad de material rinde para todo el 1 navaja de afeitar
grupo de práctica Lápices de colores

6. DESARROLLO

1. Protozoos
Coloca una gota de cultivo de microorganismos sobre el portaobjetos, coloca una laminilla
o cubreobjeto y observa al microscopio empleando el objetivo de 10X y 40X. Si algunos
microorganismos se mueven tan rápidamente que se dificulta su observación usa una gota
de una solución azucarada sobre la gota de cultivo, luego colócale la laminilla y observa.
Realiza los esquemas.
2. Célula Vegetal.
Corta un bulbo de cebolla en cuatro partes. Observarás que cada parte se separa por sí sola
en capas llamadas catáfilas. Toma un de las catáfilas con la superficie cóncava hacia ti y
rómpela, entonces veras que se desprende con facilidad una capa muy delgada y
transparente que es la epidermis. Toma un fragmento de epidermis y colócala en un
portaobjetos. Aplica cinco gotas de azul de metileno, coloca un cubreobjetos sobre ella y
observa a menor y a mayor aumento. Dibuja.
3. Célula Animal.
3.1. Células epiteliales planas
Con un baja lenguas o un mondadientes, efectúa un raspado de la mejilla interna y
colócala sobre un portaobjetos tratando que el material quede bien extendido
(aunque no veas material en el mondadientes habrás colectado muchas células).
Separa el material colectado haciendo un frotis en el portaobjetos. Fija la muestra al
mechero. Cubre el preparado con azul de metileno. Observa la preparación al
microscopio con el objetivo 40X.
3.2. Célula cúbicas
Corte transversal de tiroides. Coloración H.E.
A menor aumento observe en la glándula tiroidea son los folículos tiroideos. Tienen
una forma redondeada u ovalada, de diferentes tamaños. Los folículos de un
tamaño intermedio están tapizados por un epitelio simple cúbico con células cúbicas
de núcleo redondo. Dentro de los folículos hay una sustancia rosada llamada
coloide.
3.3. Células cilíndricas
Corte transversal de intestino. Coloración H.E.
A menor aumento identifique las vellosidades intestinales. La mucosa está formada
por un epitelio y una lámina propia. A mayor aumento observe que el epitelio está
constituido por una sola capa de células cilíndricas que son de dos tipos: las
absorbentes o enterocitos con citoplasma rosado, núcleo ovalado ligeramente basal y
que en su borde apical o luminal presenta una banda acidófila birrefringente llamada
chapa estriada o borde en cepillo (a la microscopía electrónica son las
microvellosidades). Las otras células son las caliciformes o mucosecretoras que
tienen un citoplasma claro no coloreado y un núcleo basal
3.4. Células musculares
Corte transversal de lengua. Coloración H.E.
En la parte interna de la lengua observe la presencia de fascículos o haces de fibras
musculares cortadas longitudinal, transversal y oblicuamente. En los haces musculares
longitudinales las fibras musculares son largas y paralelas, con múltiples núcleos
ovalados de ubicación periférica y de color morado. En el sarcoplasma es posible
observar las estriaciones transversales, con las bandas claras (bandas I) y bandas
oscuras (bandas A). En los cortes transversales se observa el núcleo periférico y en el
sarcoplasma se observa las miofibrillas como puntos rosados.
3.5. Células nerviosas (Neuronas)
Corte transversal de médula espinal. Coloración Impregnación argéntica de Cajal.
Observe con el objetivo de mayor aumento, una región periférica más clara que
corresponde a la sustancia blanca (fibras nerviosas); y otra central, más oscura, con la
típica forma de H, que corresponde a la sustancia gris (cuerpos neuronales). Identifique
las células de forma estrellada (neuronas multipolares). Son grandes, de citoplasma
marrón ó naranja, con núcleo esférico, central, de color amarillo, en algunas se observa
un nucléolo marrón ó naranja. Entre las células se distingue una red de fibras marrones
oscuras a negras y haces de fibras hacia la porción externa (sustancia blanca).

7. RESULTADOS

Realiza los dibujos de tus observaciones al microscopio.

8. CONCLUSIONES

Establece tus conclusiones aceptando o rechazando la hipótesis, con base en tus resultados.

9. ACTIVIDAD DE REFORZAMIENTO

1. Porqué todas las células observadas son distintas?


2. A través de que estructuras penetran los colorantes en las células?
3. Cuál es la función de la pared celular en los vegetales?
4. Cuál es la posición del núcleo en las células que has observado?
5. Cuáles son las funciones del enterocito, neurona y miocito?

10. FUENTES DE CONSULTA


PRÁCTICA N° 2.2

OBSERVACIÓN DE BACTERIAS

1. PROPÓSITO

1.1 Identificar bacterias en base a su forma.

2. CONCEPTOS ANTECEDENTES

Bacilos. _____________________________________________________________
Cápsula. _____________________________________________________________
Conjugación. _____________________________________________________________
Nucleoide. _____________________________________________________________
Plásmido. _____________________________________________________________

3. PROBLEMATIZACIÓN

¿ Todas las bacterias son iguales?

4. HIPÓTESIS PROPUESTA POR EL ALUMNOS

5. MATERIALES

Materiales que proporciona el laboratorio: Reactivos que proporcional el laboratorio


Microscopio Colorantes para tinción:
Mechero de alcohol. Solución de cristal violeta al 1%.
Portaobjetos. Solución de safranina al 0,5%.
Alcohol acetona y Lugol
Aceite de inmersión
Materiales de estudio que proporciona el grupo: Material que proporciona el alumno
Muestras bacterianas de origen natural: 1 plumón indeleble.
yogurt, vinagre, sarro dental . 1 caja de fósforo
Nota: Esta cantidad de material rinde para todo
el grupo de práctica
6. DESARROLLO

I. Bacterias del sarro dental


El sarro dental es un depósito consistente y adherente localizado sobre el esmalte de los
dientes. Está constituido principalmente por restos proteicos, sales minerales y
bacterias junto con sus productos metabólicos. La flora bacteriana de la cavidad bucal es
muy variable dependiendo de las condiciones que se den en el momento de hacer la
preparación, pero suelen abundar bacterias saprófitas, pudiéndose observar gran
variedad de morfologías: espiroquetas, cocobacilos, diplococos y bacilos.
1. Con un mondadientes tomar una pequeña porción de sarro dental y extiéndala en
círculo sobre el portaobjetos.
2. Dejar secar y fijar con calor.
3. Colorea con la solución de violeta de cristal durante 1 minuto.
4. Lave con una mínima cantidad de agua corriente.
5. Aplique la solución de yodo por 1 minuto. Lave con agua corriente.
6. Decolore con solución de alcohol acetona agregando gota a gota sobre el portaobjeto
inclinado hasta que todo el colorante haya sido eliminado.
7. Lave con agua corriente.
8. Cubra con safranina (contraste) por 1 minuto. Recomendación: No se exceda en el
colorante. Lave y seque al aire.
9. Examine las preparaciones con objetivo de inmersión y máxima iluminación para
distinguir los colores.
10. Haga dibujos coloreados y registre la reacción de cada uno de los organismos

II. Bacterias del yogurt


El yogur es un producto lácteo producido por la fermentación natural de la leche. A escala
industrial se realiza la fermentación añadiendo a la leche dosis del 3-4% de una asociación
de dos cepas bacterianas: el Streptococcus termophilus, poco productor de ácido, pero muy
aromático, y el Lactobacillus bulgaricus, muy acidificante. En esta preparación se podrán,
por tanto, observar dos morfologías bacterianas distintas (cocos y bacilos) y un tipo de
agrupación (estreptococos, cocos en cadenas). Además, el tamaño del lactobacilo facilita la
observación aunque no se tenga mucha práctica con el enfoque del microscopio.
1. Realizar el frotis disolviendo una mínima porción de yogurt en una pequeña gota de
agua.
2. Fijar con metanol para eliminar parte de la grasa.
3. Colorear siguiendo los pasos 3) a 8) de la coloración anterior.
4. Observar al máximo aumento del microscopio.

III. Bacterias del vinagre


El vinagre es una solución acuosa rica en ácido acético resultante de la fermentación
espontánea del vino o de bebidas alcohólicas de baja graduación. La acetificación del vino es
producida por bacterias aeróbicas del ácido acético, principalmente Acetobacter aceti,
aunque también Gluconobacter. Se trata de bacilos rectos con flagelos polares.
1. Tomar con un gotero una pequeña porción de vinagre natural o de la telilla que se forma
sobre la superficie de los vinos agriados.
2. Extender la muestra en el portaobjetos con una gota de agua y hacer el frotis.
3. Dejar secar y fijar con calor.
4. Colorear según el procedimiento antes indicado. Observar con el objetivo 100X. Dibujar.

7. RESULTADOS

Realiza los dibujos de tus observaciones al microscopio.

Observación: Observación: Observación:


Muestra: Muestra: Muestra:
Coloración: Coloración: Coloración:
Aumento: Aumento: Aumento:

8. CONCLUSIONES

Establece tus conclusiones aceptando o rechazando la hipótesis, con base en tus resultados.

9. ACTIVIDAD DE REFORZAMIENTO

1. Qué tipos de morfología y agrupación aparecen en los frotis de los cultivos?


2. Todas las bacterias son patógenas?
3. Qué formas de bacterias predominaron en tus observaciones?
4. Qué especies de Lactobacilos son de importancia médica ?
5. Qué especies de Streptococcus son de importancia médica ?
6. Porqué hay que eliminar el sarro dental ?

10. FUENTES DE CONSULTA


Lámina 1. Imágenes de protozoos comunes

Lámina 2. Imágenes de bacterias

Bacterias en yogurt: Bacterias en vinagre: Bacterias en sarro:


Lactobacillus sp. Acetobacter sp. Streptococcus mutans

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