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POLIMORFISMOS DE GENES

DE LA FASE I DE LA
BIOTRANSFORMACIÓN

setiembre 2017 Polimorfismos - Fase I 1


XENOBIÓTICOS

Prepared by Patricia Martin, Pharm.D.


setiembre 2017 Polimorfismos - Fase I 2
BIOTRANSFORMACIÓN
Los compuestos ingeridos, podrían
ser tóxicos si el organismo no los elimina

XENOBIÓTICOS

Efecto terapéutico
Tóxico
Atóxico

setiembre 2017 Polimorfismos - Fase I 3


¿DÓNDE SE BIOTRANSFORMAN?

setiembre 2017 Polimorfismos - Fase I 4


¿CÓMO SE ELIMINAN?
RESPIRACIÓN

VOLÁTIL

XENOBIÓTICO Liposoluble BIOTRANSFORMACIÓN

HIDROSOLUBLE

ORINA
HECES

SUDOR

setiembre 2017 Polimorfismos - Fase I 5


BIOTRANSFORMACIÓN HEPÁTICA
XENOBIÓTICO

Aumenta la polaridad de las


Fase I moléculas.

ROH
Aumenta su solubilidad en
Fase II agua. Inactiva su actividad
biológica.
R-O-Conj

Eliminación por orina/ sudor/ heces


setiembre 2017 Polimorfismos - Fase I 6
FASES BIOTRANSFORMACIÓN HEPÁTICA
Fase I
Hidroxilación
Epoxidación
Desalquilación
Desaminación
S- y N-oxidación
Fase II
Conjug. con Glutation
Metilación
Acetilación
Glucuronidación
Glucosidación
Sulfatación
Conjug. con aminoácidos
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ENZIMAS CYP EN METABOLISMO DE
DROGAS (HIGADO)

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Sondas para fenotipificación de
algunos CYPs
Cafeina CYP1A2
Dextrometorfano CYP2D6
Midazolan CYP3A4/5/7/43
Omeprazol CYP2C19
Warfarina CYP2C9

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VARIABILIDAD DE RESPUESTA A DROGAS:
INTERACCION GEN/ AMBIENTE
Genotipo Fenotipo
Gen (SNPs)) (hidroxilación enzimática)

Fenotipo CYP2D6
Test sustrato: DBQ
CYP2D6

4-OH-debrisoquina

Relación Metabólica

% debrisoquina
% 4-OH-debrisoquina

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Efectos del “hydroxysafflor yellow A” en la
expresión de isoenzimas CYP en ratas

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Efecto del ruibarbo sobre CYPs y el metabolismo
de saxagliptina en ratas

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Cuantificación génica por qPCR

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SUPER FAMILIA CYP
Es multigénica, categorias según secuencia
aminoacídica
Enzimas metabolizantes de drogas en las
familias CYP 1, 2, 3
CYP PM 45 - 60 kDa.
Dos ó más enzimas pueden catalizar el
mismo tipo de oxidación, especificidad de
sustratos amplia (redundancia)
CYP3A4 metaboliza muchas drogas

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SUPER FAMILIA CYP

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NOMENCLATURA
Familia, > 40% similitud aminoacídica,
CYP mas número arábigo; Ejm.
CYP1
Subfamilia, > 55% similitud
aminoacídica, se describe con una
letra; Ejm. CYP1A
Gen (enzima) indicado por número
arábigo; Ejm. CYP1A2

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CYP2C9 *1

CYP - P450 en mamíferos


2 - familia
C - subfamilia
9 - gen (ENZIMA)
*1 - perfil alélico

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Funciones de CYP en humano

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METABOLISMO DE ALGUNAS DROGAS
CYP Algunos sustratos
1A1 Caffeine, Testosterone, R-Warfarin
1A2 Acetaminophen, Caffeine, Phenacetin, R-Warfarin
2A6 17-Estradiol, Testosterone
2B6 Cyclophosphamide, Erythromycin, Testosterone
2C Acetaminophen, Tolbutamide (2C9); Hexobarbital, S-
Warfarin (2C9,19); Phenytoin, Testosterone, R-
Warfarin, Zidovudine (2C8,9,19);
2E1 Acetaminophen, Caffeine, Chlorzoxazone, Halothane
2D6 Acetaminophen, Codeine, Debrisoquine
3A4 Acetaminophen, Caffeine, Carbamazepine, Codeine,
Cortisol, Erythromycin, Cyclophosphamide, S- and R-
Warfarin, Phenytoin, Testosterone, Halothane,
Zidovudine
Adaptado de: Drug Metab Rev 34: 83-448, 2002

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METABOLISMO DE ACETOMINOFEN
Glucuronidacion (60%) Sulfatación (35%)
COCH 3
HN
COCH 3
COCH 3 HN
HN

O CO 2 H
O
OH O
OH SO 3 H
HO
OH
CYP2E1(5%)

COCH 3
N

Tóxico
O

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INTERACCIÓN DE DROGAS

CYP Sustrato
 Sustrato  Toxicidad
CYP Inhibidor

CYP Sustrato
 Sustrato  Eficacia
CYP Inductor

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Reacciones que catalizan las CYP
P450
R-H + O2 + 2e- + 2H+ R-OH + H2O

HIDROXILACIONES HIDROXILACIONES
ALIFÁTICAS AROMÁTICAS

EPOXIDACIONES DESALQUILACIONES

setiembre 2017 Polimorfismos - Fase I


CYP en tejido extrahepático
CYP TEJIDO

1A1 PULMÓN, RIÑÓN, INTESTINO, PIEL, PLACENTA

1B1 PIEL, RIÑON, PROSTATA, GLANDULA MAMARIA

2A6 PULMON, EPITELIO NASAL

2B6 INTESTINO, PULMON

2C INTESTINO, LARINGE, PULMON

2D6 INTESTINO

2E1 PULMON , PLACENTA

3A INTESTINO, PULMON, PLACENTA, FETO, UTERO, RIÑON

Drug Metab Rev 29:413-80, 1997

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Metabolismo de la codeína

90% 10%

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Diferencias en la expresión y función de
CYP

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Regulación del metabolismo

Proteina de unión al ácido retinoico celular o retinol,


Elementos de respuesta a ácido retinoico

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Regulación CYP3A

Diversas drogas se activan a través de complejos


heterodiméricos
Protejer contra xenobióticos
Causan interacciones entre drogas

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Inductores CYP3A
en Humano, Conejo y Rata

rifampicina

PCN

dexametasona

RU486

clotrimazol

troglitazona
tamoxifeno

1 3 5 7 9 11 13 15 17 19

Actividad reportada (veces)

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POLIMORFISMOS: CYP 2D6

• Responsable del
metabolismo del 30
%

Familia: CYP 2
Subfamilia: CYP 2D
Gen: CYP 2D6

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ANTIHIPERTENSIVOS B-BLOQUEANTES

CYP2D6
NEUROLEPTICOS
ANTIDEPRESIVOS

OPIACEOS

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CYP2D6

47 alelos …
24 … sin actividad
6 … baja actividad
*2 con múltiples
copias

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Relación del genotipo-fenotipo del
polimorfismo CYP2D6
GENOTIPO o o o

FENOTIPO PM IM EM URM
FRECUENCIA (5 - 10%) (10 -15%) (65-80%) (5 -10%)
(Caucásicos)
# of individuals

Increasing enzyme activity

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Concentraciones plasmáticas de nortriptilina
vs. copias de CYP2D6

setiembre 2017 Polimorfismos - Fase I Weinshilboum NEJM 2003 34


DOSIS SEGÚN GENOTIPO P450

Droga promedio PM EM UM Enzima


dosis (mg)
Propafenon 450 40% 130% CYP2D6
Amitriptyline 150 50 % 120% -”-
Tropisetron 10 30% 130% -”-
Nortriptyline 150 50% 140% 230% -”-
Metoprolol 100 30% 140% -”-
Lansoprazole 40 20% 110% CYP2C19
Omeprazole 40 20% 110% CYP2C19
S-Warfarin 3 20% 130% CYP2C9

setiembre 2017 Polimorfismos - Fase I 35


multiplication Incremento
CYP2D6*2xN
actividad

Defecto sitio
CYP2D6*4 Enzima inactiva
splicing

No hay
CYP2D6 CYP2D6*5 Delection
enzima

Pro34Ser
CYP2D6*10 Ser486Thr Enzima inestable

Thr107Ile Afinidad por el


CYP2D6*17 Arg296Cys sustrato reducida
Ser486Thr

PMs
Caucasicos Asiáticos africanos Etthiopianos -
Arabes
CYP2D6*2xN 1-5 0-2 2 10-16
CYP2D6*4 12 -21 1 2 1-4
CYP2D6*5 2-7 6 4 1-3
CYP2D6*10 1-2 51 6 3-9
CYP2D6*17 0 ND 34 3-9
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POBLACIONES LATINAS
VARIANTE MEXICO COLOMBIA

CYP2D6*2 19,9 % 37,0%

CYP2D6*4 11,6 % 19,4%

setiembre 2017 Polimorfismos - Fase I 37


Un 7% de la población española es ML

1 ¿Cual es el porcentaje de metabolizadores lentos en otras poblaciones?:

El 80% de los pacientes psiquiátricos (esquizofrénicos) son ML,

2 a) ¿Existe una asociación entre la enfermedad y los genotipos metabólicos


(CYP2D6) en el comportamiento?

b) ¿cómo influye el tratamiento?¿Se pueden prevenir interacciones y efectos


adversos?

3 EL RIESGO DE EFECTOS ADVERSOS, FALTA DE EFICACIA o


INTERACCIONES ES PARCIALMENTE PREVENIBLE, se podría
clasificar a los pacientes en base a probabilidad de riesgos?

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PREGUNTAS

setiembre 2017 Polimorfismos - Fase I 39


Perspectivas de la genómica funcional

Impacto de la
variación alélica
individual sobre la
identidad (ejm.
diversidad y grupo
étnico)
Efecto sobre la
atención primaria de
la salud (igualdad ?)

setiembre 2017 Polimorfismos - Fase I 40