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INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS


DEPARTAMENTO DE BIOQUÍMICA
“DR. GUILLERMO CARVAJAL SANDOVAL”
BIOQUÍMICA GENERAL
GRUPO: 3FM01 SECCIÓN: 4
AUTORES: CABEZA ALEJANDRA.; MERCADO JOCELYN.
EFECTO DE LA CONCENTRACION DE SUSTRATO E INHIBIDOR SOBRE LA VELOCIDAD DE REACCIÓN

Introducción.
Uno de los factores que afectan la velocidad de una reacción catalizada por una enzima es la concentración del sustrato
[S]. El estudio de la concentración del sustrato es complicado porque a medida que avanza la reacción este se convierte
en producto. Un auxiliar para realizar esta medición es el cálculo de la velocidad de reacción.
“A concentraciones bajas de sustrato V0 aumenta casi linealmente con el incremento de [S]. A mayores concentraciones
de [S] el incremento de V0 es mínimo e inclusive se llega a apreciar que alcanza una meseta. Esto sucede cuando el
sustrato satura a la enzima por lo que se dice que se alcanza una velocidad máxima.” (Peña, 2004)
Muchas sustancias alteran la actividad enzimática, a las sustancias que alteran la actividad enzimática al combinarse con
el sustrato se les conoce como inhibidores; estos actúan por una amplia variedad de mecanismos. Los inhibidores
irreversibles o inactivadores se unen tan fuertemente a la enzima que bloquea su actividad de forma permanente.
Mientras que los inhibidores reversibles disminuyen la actividad de una enzima mediante la intersección reversible con
ella.
5 0.493 A
Objetivos.
 Percibir como afecta la concentración de sustrato 6 0.411 A
a la velocidad de reacción. *Se anexan graficas en papel milimétrico
 Determinar la Vmax.
 Determinar el tipo de inhibición producida por la Tabla 3. Velocidad de reacción (concentración del
sustrato.)
anilina sobre la actividad de la Invertasa.
Micro moles [Sustrato] Vo
5.38 0.1 0.538
Resultados.
9.47 0.2 0.947
Tabla 1. Concentración del sustrato.
11.85 0.3 1.185
Tubo Absorbancia 11.61 0.4 1..161
1 0.255 A 11.15 0.8 1.115
10.81 1.0 1.081
2 0.448 A
3 0.560 A Tabla 4. Velocidad de reacción (Inhibición Enzimática)
4 0.549 A Micro moles [Sustrato] Vo
4.53 0.1 0.453
5 0.527 A 7.35 0.2 0.735
6 0.511 A 10.30 0.3 1.030
10.77 0.4 1.077
10.43 0.8 1.043
Tabla 2. Inhibición Enzimática.
8.69 1.0 0.869
Tubo Absorbancia

1 0. 215 A Discusión.
De acuerdo a los resultados obtenidos de absorbancia se
2 0. 348 A pudo obtener por medio de la interpolación en nuestra
curva tipo de azucares reductores, la cantidad de
3 0.487 A
azucares reductores que se tenían en cada una de
4 0.509 A nuestras muestras problemas; con este resultado, se
calculó la velocidad de reacción para cada tubo y se  Peña, A. “Bioquímica” (2004) Editorial Limusa.
realizó la gráfica correspondiente. 2da Edición. México pp (195-199 ; 202-204)
Al reaccionar la sacarosa con la enzima en su sitio activo
se forma el complejo enzima-sustrato, donde la
producción de glucosa y fructuosa se da a partir de la
sacarosa, “al haber un aumento del sustrato la velocidad
de la reacción aumenta proporcionalmente, hasta llegar
a un punto donde las concentraciones de sustrato-
enzima son iguales, a esa área se le denomina Vmáx. A
partir de ese punto la velocidad se mantiene constante
ya que los sitios activos disponibles para el sustrato son
menores a la concentración de sustrato manteniendo la
velocidad constante.” (Horton, 1997) El inhibidor
utilizado en esta práctica fue anilina, el cual es un
inhibidor no competitivo, por lo tanto, su grafica se
muestra por debajo de la del sustrato, al ser un inhibidor
no competitivo la Vmáx con respecto al sustrato es
distinta, en cambio la Km debe ser igual.
La Vmáx obtenida en el experimento de la
concentración del sustrato fue de 1.185 UI, comparada
con la del Inhibidor que fue de 1.077 UI, la cual está
ligeramente por debajo, con esto podemos corroborar
que el inhibidor disminuye la velocidad de reacción a
comparación de una reacción donde solamente se usa
un sustrato. Este valor puede ser representado
gráficamente y se llega a visualizar como la meseta que
se forma en la gráfica de [S] vs Vo.
Al realizar la linealidad de la gráfica con el método de
Lineweaver-Burk se observó como el crecimiento era
proporcional lo que demuestra que el incremento de la
concentración del sustrato incrementa la velocidad de
reacción.

Conclusiones.
 La anilina es un inhibidor reversible no
competitivo.
 Las gráficas de la enzima con y sin inhibidor,
muestra que el inhibidor reduce la velocidad de
reacción.
 La concentración de sustrato aumenta la velocidad
de la reacción hasta llegar a ser constante.

Bibliografía.
 Chistopher, K; Marthews, F. (1999)
“Bioquímica” 3er Ed: Pearson Adisson Wesley
pp. (404-405).
 Horton, M; Scrimgeour, D. (1997) “Principios de
Bioquímica” 4ta Ed: Pearson Educación pp.
(242).