SIEMBRA Y AISLAMIENTO DE BACTERIAS

Las bacterias son microorganismos procariotas que presentan un tamaño de unos

pocos micrómetros (por lo general entre 0,5 y 5 μm de longitud) y diversas formas,
incluyendo filamentos, esferas (cocos), barras (bacilos), sacacorchos (vibrios) y hélices
(espirilos), Las bacterias son los organismos más abundantes del planeta. Son ubicuas,
se encuentran en todos los hábitats terrestres y acuáticos.
El aislamiento y obtención de cultivos puros posiblemente hayan sido las bases más
importantes en el desarrollo de la Microbiología. Los primeros trabajos en Microbiología
se hicieron en unas condiciones experimentales que no permitían tener la certeza de
que se hubieran obtenido cultivos puros, este problema fue solucionado en el
laboratorio del famoso microbiólogo alemán Roberto Koch. Descubrió que debería
emplearse un medio sólido en lugar del líquido si se deseaban obtener cultivos
microbianos puros.
Los cultivos puros son aquellos que contienen un solo tipo de microorganismo. El modo
de obtener estos cultivos consiste en obtener colonias aisladas, que provienen de una
sola célula (son clones). Los cultivos puros son esenciales para poder estudiar las
características de los microorganismos y para poder identificarlos con seguridad.
Sin embargo, cada vez se va conociendo más sobre el funcionamiento de las
comunidades bacterianas lo que debe hacernos reflexionar sobre el hecho de que un
cultivo puro supone unas condiciones no naturales y que, por consiguiente, las
fisiologías de los microorganismos en ambientes naturales pueden ser diferente a la que
presenta en condiciones de cultivos puros.

Johann Samuel Schroeter notó que las bacterias crecían sobre la superficie de materiales
diversos, incluyendo la superficie de una papa cortada. Aquí las bacterias daban lugar a
la formación de una masa relativamente grande a la que después se le denominó
colonia. Cuando estas colonias individuales fueron examinadas al microscopio, se
encontró que cada una de ellas estaba formada por cantidades enormes de bacterias;
pero el asunto más importante era que todos los organismos de una misma colonia
pertenecían a la misma especie.
Aparentemente, las células individuales habían caído del aire, tocando la superficie de
la papa en un cierto lugar, multiplicándose ahí hasta producir millones de individuos,
con lo que las colonias se hacían visibles a simple vista. Todas las bacterias de una sola
colonia habrían derivado de una sola célula, y, por lo tanto, cada colonia constituía un
cultivo puro
CARACTERISTICAS DE LOS CULTIVOS PUROS

 Las colonias deben ser iguales en forma, tamaño y color.

 Que no existan formas inhibidas.
 Al microscopio deben tener un aspecto común.
 Tiene que tener iguales propiedades tintoriales
 Deben ser bioquímicamente y fisiológicamente iguales.
 Una regla importante es no coger nunca de la primera colonia.
AISLAMIENTO: Es la separación de un determinado microorganismo del resto que le
acompañan. Técnica usada en laboratorio de microbiología para la transferencia de un
microorganismo de un ambiente a otro, con la finalidad de inducir s crecimiento para su
identificación.
SIEMBRA: procedimiento que consiste en colocar y acondicionar al microorganismo en
un medio de cultivo adecuado de acuerdo a sus exigencias nutricionales, para que en
condiciones óptimas de temperatura y tiempo de incubación pueda desarrollar y
multiplicarse en el laboratorio. La siembra se realiza con dos finalidades: para hacer un
aislamiento y para realizar un transporte.
OBJETIVOS

 OBJETIVO GENERALES:
-Realizar de manera correcta el proceso para realizar la siembra y aislamiento de
las bacterias en el cultivo puro.

 OBJETIVOS ESPECÍFFICOS
-Reconocer cada uno de los medios de cultivo.
- Aislar dos microorganismos por la técnica de siembra de dilución por estría
y obtener un cultivo axénico o puro.
-Reconocer la diferencia entre los procesos de Aislamiento, Siembra y Trasplante
de los microorganismos.

MATERIALES

o Medios de cultivo en placa.

o Mechero.
o Asa bacteriológica.
o Muestra de yogurt.
o Muestra de jugo de papaya.
o Muestra de jugo de piña.
o Muestra de café.
o Agar nutritivo.
o Agar Mac Conkey.

PROCEDIMIENTO
TÉCNICA PARA LA SIEMBRA:
La técnica para el aislamiento comienza preparando
un inóculo de siembra, que es la deposición de una
pequeña porción de la muestra en el medio o en los
medios de cultivo adecuado, en función de las
especies microbianas que se espera encontrar. Por
eso existen distintos métodos o tipos de siembra, en
función de la muestra de partida, del medio en el que
se siembra y de la finalidad del estudio. Describiremos
la siembra para inoculación y la siembra para
aislamiento.
Siembra para inoculación: la inoculación consiste en
tomar una pequeña porción de la muestra y diluirla para dispersarla y que crezca
con más facilidad en el medio de cultivo. Se puede inocular en medio líquido o
en medio sólido.
Siembra para aislamiento: la finalidad de este tipo de siembras es la de obtener
cultivos puros. Se siembra en placa de Petri que contienen medios de cultivo
sólidos.
Existen varios tipos de siembras para aislamiento, la que realizaremos es la
Siembra en estría o zigzag.
 1. Colocamos la caja de Petri en la palma de la mano ligeramente inclinada;
con la mano contraria, se manipula el asa bacteriológica previamente
esterilizada por flameado directo a la llama que emana el mechero, con
ella se recoge el material de cultivo, para luego colocarlo en un área
periférica de la caja haciendo movimientos en forma de zigzag para
homogeneizar el inóculo.
2. El asa bacteriológica debe ser nuevamente flameada y enfriada a
continuación, se realizará una estría partiendo de la primera y
arrastrando los microorganismos presentes en ella hacia el extremo
contrario de la superficie del agar.
3. Se repite el paso dos por tres veces recordando flamear y enfriar el asa
bacteriológica cada vez que se culmine una estría, con el objetivo de ir
reduciendo la carga microbiana arrastrada por la argolla.
4. Se realizó el mismo proceso para las muestras de yogurt, jugo de papaya,
jugo de piña y café.

PROCEDIMIENTO PARA REALIZAR LA OBSERVACIÓN:

o Primero, colocamos una gota de agua sobre la placa, luego extraemos

con ayuda del asa bacteriológica una pequeña muestra de la colonia
bacteriana y se realiza el extendido inmediatamente, el agua es para que
este no se vea sobrepuesto y para que esté en suspensión.
o Realizamos la tinción Gram para luego poder llevar nuestra muestra a
observación en el microscopio.
RESULTADOS:

 Se logró observar el crecimiento de bacterias en todas las placas en las

que se realizó la técnica del estriado como son, las muestras de café, jugo
de papaya, jugo de piña y yogurt.
 Al realizar la observación respectiva en el microscopio se evidencio la
presencia de bacterias tales como son:
 Coliformes (de color rojizo)
 No coliformes (en el Agar Mac Conkey
 staphylococcus aureus (en el Agar Nutritivo)

 Los microorganismos que se pudieron identificar son los siguientes:

 staphylococcus Gram + en racimos
 staphylococcus Gram-
 hongos levaduriformes
 bacillos Gram- y Gram +
 espirilos.

CONCLUSIONES

 Logramos realizar de manera correcta el proceso de la siembra y

aislamiento de las bacterias en el cultivo puro, realizando la técnica del
estriado tanto en el Agar Nutritivo como en el Agar Mac Conkey.
 Al realizar la siembra nos dio como resultado la formación de colonias
sobre las placas de agar nutritivo. Pudimos observar las
diferentes características de las diferentes bacterias como su forma y
tamaño.
BIBLIOGRAFÍA:

o https://es.slideshare.net/rebecaoloarte/tecnicas-de-siembra-de-
microorganismos?next_slideshow=1
o http://microbiologia3bequipo5.blogspot.pe/2014/10/cultivo-puro.html
o http://www.academia.edu/9286004/cultivo_de_microorganismos
 ANEXOS:

Muestra de jugo de papaya. Muestra de jugo de piña y yogurt

Crecimiento de bacterias en Agar Crecimiento de bacterias en Agar
Mac Conkey Nutritivo

Todas las muestras con su respectivo Proceso del estriado para el aislamiento
crecimiento bacteriológico de las bacterias