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Preparado por:
Bryan Arturo Silverio Madriaza Andrade
Valparaíso
2016
Agradecimientos.-
Quisiera agradecer a la Doctora María Isabel Toledo Donoso por ser mi profesora
guía y me ha permitido desarrollar este trabajo entregándome muchas ideas y
herramientas, apoyándome en este proyecto de titulo y a lo largo de toda esta carrera, a
encontrar soluciones a mis problemas de manera individual para formarme como un
futuro profesional, por su paciencia y generosidad muchas gracias.
Por último pero no menos importante a Reda Saleh por ser mi profesor guía, por su
apoyo y entrega de material para poder realizar este proyecto a pesar de la distancia y los
inconvenientes, siempre tuvo buena disposición para ayudarme.
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ÍNDICE
1.- Introducción. .................................................................................................................. - 5 -
2.- Objetivos. ........................................................................................................................ - 7 -
2.1.- Objetivo general. .................................................................................................... - 7 -
2.2.- Objetivos específicos. .............................................................................................. - 7 -
3.- Estado del arte de las microdietas en la alimentación de peces marinos. ....................... - 8 -
3.1.- Antecedentes de las microdietas. ............................................................................. - 8 -
3.1.1.- Microdietas secas.................................................................................................. - 8 -
3.1.2.- Hojuelas. ............................................................................................................... - 8 -
3.1.3.- Dietas microencapsuladas. ................................................................................... - 9 -
3.2.- Elaboración de microdietas. .................................................................................. - 10 -
3.2.1.- Diseño de microdietas para cultivo larvario de Pejelagarto Atractosteus tropicus,
gill 1863. ........................................................................................................................ - 10 -
3.2.2.- Diseño de microdietas en cultivo experimental de larvas de dorada (Sparus
aurata). .......................................................................................................................... - 10 -
3.2.3.- Diseño de Microcápsulas para el cultivo larval de dorada (Sparus aurata) y
lenguado (Solea senegalensis). ...................................................................................... - 11 -
3.2.4.- Diseño dieta microencapsulada en cultivo larval de Odontesthes regia. ........... - 13 -
3.3.- Metodología de suministro de dietas. ................................................................... - 14 -
3.3.1.- Método directo................................................................................................... - 14 -
3.3.2.- Método de destete tardío. .................................................................................. - 14 -
3.3.3.- Método de destete progresivo. ............................................................................ - 14 -
3.4.- Estudios realizados con dietas microencapsuladas en alimentación de peces
marinos. ..................................................................................................................... - 15 -
3.4.1.- Cultivo larval de dorada (Sparus aurata) y lenguado (Solea senegalensis) con
dietas microencapsuladas. .............................................................................................. - 15 -
4.- Estado de las microdietas en Chile y su aplicación en el sector acuícola. .................... - 17 -
4.1.- Dietas microencapsuladas en Chile en el cultivo larval de Odontesthes regia .... - 17 -
y su aplicación en el sector acuícola. ............................................................................. - 17 -
4.2.- Microdietas para alimentación en la fase larval de Seriola lalandi en Chile. ....... - 19 -
5.- Problemáticas en el cultivo larval de Seriola lalandi en Chile. .................................... - 20 -
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6.- Metodología para la evaluación y aplicación de microdietas en el cultivo Seriola lalandi
en Chile. ........................................................................................................................... - 20 -
6.1.- Evaluación de digestibilidad de ingredientes para microdietas. ........................... - 20 -
6.2.- Aspectos a considerar en la elaboración de microdieta. ....................................... - 21 -
6.3.- Diseño experimental en el cultivo de larvas de Seriola lalandi. ........................... - 22 -
6.4.- Muestreo de parámetros biológicos ....................................................................... - 23 -
6.4.1- Análisis proximal................................................................................................. - 23 -
6.4.2.- Enzimas digestivas ............................................................................................ - 23 -
6.4.3.- Crecimiento ........................................................................................................ - 24 -
6.4.4.- Prueba de actividad y supervivencia ................................................................. - 24 -
7.- Conclusión..................................................................................................................... - 25 -
8.- Referencias. ................................................................................................................... - 26 -
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1.- Introducción.
El Dorado o la Palometa (Seriola lalandi) es una especie que durante los últimos
años ha sido cultivada en gran medida, esto debido al mayor conocimiento científico-
técnico como también a una creciente demanda, convirtiéndose en una promisoria
especie para la acuicultura en Chile (Aguilera & Yany, 2013). El éxito comercial del
cultivo de peces marinos, como la dorada, depende en gran parte de una producción
controlada del stock de juveniles, denominada comúnmente alevinaje, en donde se
presentan las mayores dificultades del cultivo con una alta mortalidad (Buchet & cols.,
2000; Lazo, 2000; D’Abramo, 2002), esto producto del hundimiento larval en la etapa de
abertura de boca (Sakakura & Tsukamoto, 1998a,b), problemas nutricionales
(Kolkovskiet, 2001), canibalismo y comportamiento agresivo (Benetti, 1997, Sakakura &
Tsukamoto, 1997).
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En la última década, se han desarrollado estrategias de alimentación que reducen
al mínimo la etapa de alimentación con presas vivas, entregando desde que el pez
eclosiona dietas inertes para adelantar el tiempo de destete. Una alternativa de
alimentación inerte temprana son las microdietas, las que se presentan en diferentes
formatos (secas, hojuelas y microencapsuladas) (Lazo, 2000), siendo las microdietas
encapsuladas las que han entregado los mejores resultados (Yufera et al. 1999, Aguilera,
2009, Brintrup et al, 2012).
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2.- Objetivos.
1.- Analizar el estado del arte de las microdietas en la alimentación de peces marinos.
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3.- Estado del arte de las microdietas en la alimentación de peces marinos.
3.1.2.- Hojuelas.
Los ingredientes molidos se cuecen bajo presión junto con algún aglutinante y son
compactados a altas temperaturas (130-190°C) en un tambor rotativo. Se obtienen
hojuelas que pueden ser molidas fácilmente para obtener el tamaño adecuado para las
larvas. Sin embargo, este método tiene los mismos problemas de lixiviación que las
microdietas secas. Este tipo de dieta se usa comúnmente en la acuariofila.
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3.1.3.- Dietas microencapsuladas.
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3.2.- Elaboración de microdietas.
Para el diseño de las microdietas fue necesario realizar una evaluación de los
ingredientes proteínicos requeridos por la especie, se diseñaron dietas con la ayuda del
paquete de formulación de alimentos balanceados MIXIT–WIN v 5.0. Para esto fue
necesario que todos los macroingredientes se tamizaran previamente (< 150μm) y
mezclaran con los microingredientes por 30 min en una batidora de rotación
(BATHAMMEXMR 178716, México), posteriormente se adicionó a la mezcla de 35-40 %
de agua para después peletizar la masa (5mm de diámetro) en un molino de carne
(TOROREYMR M–22R1, N.L., México). Los pellets se cortaron manualmente y se
secaron en un horno (CORIAT, HC–35–D, Zapopan, Jalisco, México) a 40°C durante
12h.
Posteriormente, se molieron y tamizaron para mantener homogéneo el tamaño de
las partículas de las DMP (Dietas Micro Particuladas), en tres grupos: 300–500μm, 500–
800μm y 800–1000μm de acuerdo al tamaño de boca de las larvas. El alimento se
mantuvo congelado a –20°C hasta su uso (Frias-Quintana e.t al, 2010).
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El polvo de calamar, los componentes solubles en agua de atrayentes y las
vitaminas hidrosolubles se mezclaron en un mortero, luego se combinaron los lípidos y
vitaminas solubles en grasa para obtener una mezcla homogénea, que se fusiono con la
mezcla de polvo. Finalmente, se añadió la gelatina disuelta en agua caliente a los
ingredientes previamente mezclados para formar una pasta que se comprimió en gránulos
(Severin, Suderm, Alemania) y se secó en una estufa a 38ºC durante 24 h (Ako,
Barcelona, España). Los pellets se molieron (Braun, Kronberg, Alemania) y se tamizó
(Filtra, Barcelona, España) para obtener varios tamaños de partícula entre 250 y 500μm.
Las dietas se prepararon y se analizaron para la composición proximal y el ácido graso en
los laboratorios del Grupo de Investigación en Acuicultura (GIA, Universidad de las
Palmas de Gran Canaria) (Saleh, 2013).
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Tabla 1: Ingredientes en la dieta en los diferentes experimentos utilizada para
microencapsulación.
Fig. 1 Microcápsulas con una dieta formulada para larvas de peces elaboradas mediante
polimerización de las proteínas integrantes de la dieta. Capsulas deshidratadas (A) y
Capsulas rehidratadas (B) (Yufera et al, 1999).
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3.2.4.- Diseño dieta microencapsulada en cultivo larval de Odontesthes regia.
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3.3.- Metodología de suministro de dietas.
Las dietas artificiales son suministradas una vez que las larvas presentan un estado
avanzado de desarrollo al comenzar la alimentación exógena, el cual se relaciona con el
grado de madurez de su sistema digestivo. Generalmente esta metodología se emplea en
especies de agua dulce y salmónida (Lazo, 2000).
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3.4.- Estudios realizados con dietas microencapsuladas en alimentación de peces
marinos.
3.4.1.- Cultivo larval de dorada (Sparus aurata) y lenguado (Solea senegalensis) con
dietas microencapsuladas.
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Fig. 2: Crecimiento de larvas de Sparus aurata durante los dos primeros meses de vida
alimentándose con dieta inerte desde el día 8 y una pequeña dosis de rotíferos hasta el día
30 (Yufera et al, 1999).
Las tasas de crecimiento obtenidas durante el primer mes de vida fueron del 10%
diario en peso seco. Incluso cuando el alimento inerte reemplazo al vivo durante la
segunda semana, esta tasa de crecimiento se mantuvo durante al menos 7 días (Yufera et
al, 1999), pero existieron limitaciones nutricionales que se mostraron a partir de la tercera
semana de vida. No obstante se destaca que la población de dorada desde el inicio de la
alimentación hasta su fase de juvenil se realizo casi exclusivamente con alimento
artificial, además se obtuvo crecimientos y supervivencia comparables a la alimentación
con dietas vivas. Al finalizar esta investigación Yufera et al., (1999) concluye que las
microcápsulas se presentan como una herramienta de gran utilidad, ya que pueden
modular su formulación y permiten el crecimiento larvario, quedando como evidencia de
que la Artemia podría ser retirada completamente de la cadena de alimentación en los
criaderos si la microdieta se diseña y produce a escala industrial, dejando de lado la
dependencia de la producción acuícola de este organismo que posee un suministro
fluctuante y de costes elevados.
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4.- Estado de las microdietas en Chile y su aplicación en el sector acuícola.
1
Proyecto FONDEF dirigido por Elizabeth del Carmen Galindo, Universidad Arturo Prat.
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En dicho proyecto las larvas de pejerrey de mar aceptaron el alimento
microencapsulado desde que comienzan su primera alimentación, sin necesidad de
agregar ningún tipo de alimento vivo, ya que las larvas tienen un tamaño de 0,65cm al
eclosionar y no necesitan rotíferos en su alimentación inicial, facilitando la ingesta del
alimento inerte (Brintrup et al, 2012).
A diferencia de los trabajos realizados por Yufera et al., (1999) y Muñoz (2007),
los resultados de supervivencia obtenidos en el pejerrey de mar con la dieta
microencapsulada para los primeros 30 días de cultivo (etapa considerada crítica en un
cultivo larval) indican un valor superior al 70%, con una diferencia significativamente
mayor (p < 0,05) a la que se obtuvo alimentando con nauplios de artemia, que no supera
el 10% (Fig.3). Finalmente, se puede concluir que es posible sustituir el alimento vivo
utilizado actualmente en las experiencias del cultivo experimental de pejerrey de mar
(Odontesthes regia) con alimento micro encapsulado, sin etapa de adaptación, lo que
podría contribuir a realizar estudios para el cultivo comercial intensivo de la especie
(Brintrup et al, 2012).
Fig. 3: Supervivencia larvas alimentadas con microdietas v/s alimento vivo (Brintrup et
al, 2012).
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4.2.- Microdietas para alimentación en la fase larval de Seriola lalandi en Chile.
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5.- Problemáticas en el cultivo larval de Seriola lalandi en Chile.
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funcional cuando esta ocurre, provocando que la digestión ácida a base de pepsina no
pueda llevarse a cabo y en lugar de esta se produzca una digestión alcalina (Díaz & cols.,
1995). Esta digestión es regulada principalmente por la hormona peptídica
Colecistoquinina (CCK), que regula la liberación de la bilis y enzimas digestivas
pancreáticas entre otras, mostrando influencia sobre la actividad motora peristáltica,
regulación del vaciad intestinal y estomago (Ronnestad, 2002). Para esto es necesario
realizar una evaluación de los ingredientes proteínicos requeridos por la especie, además
de un análisis químico proximal, perfil de aminoácidos y ácidos grasos de la especie.
Existen dos formas de obtener larvas para realizar los estudios de digestibilidad in
vitro de Seriola lalandi, la primera es obtener las larvas mediante el proceso de desove
inducido de reproductores en cultivo y una segunda es a través de la captura de larvas
silvestres mediante la utilización de mallas de zooplancton de 250 a 500μm de apertura de
malla. Cuando las larvas son obtenidas del medio silvestre estas se mantienen en tubos
Eppendorf de 5 ml con agua de mar y se las conserva a una temperatura de -5°C
(Brintrup, 2012). Si las larvas provienen de un cultivo, las muestras se toman a los 9, 15 y
31 días después de la eclosión manteniéndose de la misma forma. La diferencia de días es
para evaluar si existen variaciones en los requerimientos nutricionales dependiendo de la
edad de las larvas.
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los 55-60% en base seca (Lazo, 2000). También se deben incluir péptidos y amino ácidos
libres de bajo peso molecular que podría ayudar en la digestión y absorción de proteínas
en las larvas (García-Ortega, 2000). Por último debe considerarse a su vez los lípidos,
ácidos grasos, carbohidratos, vitaminas y minerales para satisfacer los requerimientos
nutricionales de la especie.
El agua de mar debe ser filtrada (37 ppm de salinidad) a una velocidad creciente
de 0,4 - 1,0 L/min para asegurar una buena tasa de renovación durante todo el ensayo. El
agua debe entrar desde el fondo del tanque y salir desde la parte superior para asegurar la
una óptima circulación del agua.
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recomienda realizarla con una duración de 30 días después de ocurrida la eclosión del pez,
(Saleh, 2013).
El suministro de las dietas se debe realizar cada 45 minutos desde las 8:00 a 19:00.
Durante los dos primeros días de alimentación experimental, las larvas se deben alimentar
con rotíferos, dos veces al día, con una densidad de 1 individuo/ml. Para garantizar la
disponibilidad de alimento, el suministro de las microcápsulas se recomienda que alinicio
sea de 2,5g y aumentando en 0,5g cada semana.
Para lograr determinar la longitud total y el peso seco de todo el cuerpo, se debe
tomar muestras de 30 larvas vivas en ayuno de 12 horas en un comienzo, a la mitad y
finalizado el experimento (Saleh, 2013).
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6.4.3.- Crecimiento
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7.- Conclusión
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8.- Referencias.
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