Informe de Laboratorio I de Fisicoquímica

“Esterilización por calor Húmedo”

Trabajo Práctico: equilibrio de fases

Alumnos: Bermedo, Lucia Belén

Salas, Micaela

Fecha de realización: 17/04/2017

RESUMEN

En el siguiente informe se presenta el resultado obtenido en la realización del

trabajo de esterilización por calor húmedo de una muestra de agua
contaminada de pérdida cloacal. Para ello se utilizó el vapor de agua de una olla
a presión conectada a un manómetro, que nos permitió leer los valores de la
presión ejercida en su interior durante distintos tiempos. Una vez finalizada la
esterilización se cultivo la muestra en agar y se comparo con otra muestra sin
esterilizar para verificar visualmente la efectividad del procedimiento.

OBJETIVOS

El objetivo del trabajo consistió en determinar variaciones de presión en un ciclo

de esterilización por calor húmedo a presión superior a la normal, como así
también comprobar la resistencia de la muestra a dicho proceso.

MARCO TEÓRICO

La esterilización es la eliminación de toda forma de vida viable de un medio o

material, lo que se lleva a cabo generalmente por medios físicos. En la práctica,
la muerte de un microorganismo se alcanza cuando no es posible detectarlo en
un medio de cultivo en el cual ha mostrado que es capaz de proliferar. El
proceso de esterilización es un proceso dinámico que se ve influenciado por el
grado inicial de contaminación que puede tener el material de partida, así como
por los equipos y condiciones de trabajo, que deben estar controladas
adecuadamente para ser desfavorables a la introducción y desarrollo de
microorganismos
El calor húmedo destruye los microorganismos que pueden estar presentes en
una muestra. El principal método de esterilización es empleando calor húmedo
por vapor a presión y se lleva a cabo en un autoclave. Una autoclave es un
recipiente metálico de paredes gruesas con un cierre hermético que permite
trabajar a alta presión para realizar una cocción o una esterilización con vapor
de agua. Con la autoclave, la presión elevada permite que el agua alcance
temperaturas superiores a su punto de ebullición. La temperatura y el vapor
actuando conjuntamente producen la coagulación de las proteínas de
los microorganismos, entre ellas las esenciales para la vida y la reproducción de
estos, llevando así a su destrucción.

Cuando se utiliza este método es importante controlar en el autoclave la relación

entre la temperatura, la presión y el tiempo de exposición, ya que éstos son
factores críticos en el proceso. Esta relación la podemos establecer mediante la
ecuación de Clausius-Clapeyron gracias al equilibrio liquido-vapor establecido
dentro de la autoclave (olla).

Sólo cuando el vapor se coloca bajo presión, es cuando su temperatura aumenta

por encima de los 100 ºC y esto permite alcanzar las temperaturas de
esterilización (120 ºC).
MATERIALES

- Olla a presión con manómetro adaptado

- Cronometro
- Probeta de 1L
- Mechero
- Trípode
- Papel de aluminio
- Cinta testigo para autoclave
- Muestra de agua contaminada cloacal
- Agua

DATOS Y/O OBSERVACIONES EXPERIMENTALES

Datos: Tomamos como Presión y Temperatura de referencia 1 atm y
373 K

Observación: durante el purgado el sistema se mantuvo abierto para poder

eliminar el aire. Luego de 10 minutos se observo que solo la fuga de manera
uniforme de vapor de agua, entonces colocamos la válvula para generar un
sistema aislado con un equilibrio de fases liquido-vapor de agua.

Durante esta etapa de purgado la presión en el manómetro no varió. Recién una

vez cerrado el sistema, la presión comenzó a aumentar durante el
calentamiento.

Cuadro con los datos de la etapa de Purgado y calentamiento:

Tiempo Presión Presión Temperatura

(min) leída real (ºC)
(atm) (atm)
0 0 1,0079

2 0 1,0079

4 0 1,0079

6 0 1,0079

8 0 1,0079

10 0 1,0079

10,5 0,0750 1,0829

11 0,1600 1,1679

11,5 0,2400 1,2479

12 0,3200 1,3279

12,5 0,4200 1,4279

13 0,5000 1,5079

13,5 0,5800 1,5879

14 0,6800 1,6879
 14,5 0,7800 1,7879

15 0,7800 1,7879

15,5 0,7800 1,7879

A partir de los 15,5 min comenzó la etapa de esterilización y

verificamos que durante 20 minutos la presión se mantuvo constante
en 0,7800 atm.

Tabla con los datos de la etapa de enfriamiento:

Tiempo Presión Presión Temperatura

(min) leída real (atm) (ºC)
(kg/cm^2)
36 0,6800 1,6879
36,5 0,6400 1,6479
37 0,5800 1,5879
37,5 0,5400 1,5479
38 0,4800 1,4879
38,5 0,4600 1,4679
39 0,4200 1,4279
39,5 0,3800 1,3879
40 0,3400 1,3479
40,5 0,3000 1,3079
41 0,2400 1,2479
41,5 0,2000 1,2079
42 0,1800 1,1879
42,5 0,1600 1,1679
43 0,1400 1,1479
43,5 0,0750 1,0829
 44 0,0500 1,0579
44,5 0,0250 1,0329
45 0 1,0079

GRAFICOS

Grafico de Presión real versus Tiempo:

P (atm)
2
1.8
Calentamien Esterilizacion
1.6
to Enfriamiento
1.4
1.2
Purgad Presión real (atm)
1
o Apago del
Cerrado de la
0.8 mechero
valvula
0.6
0.4
0.2
0 Tiempo
0 10 20 30 40 50 (min)