Lab#1 PDF

Facultad de Departamento de
UNAN
Ciencias Fisiología
Carrera de Medicina Lab. Nº : 1
Managua Ciencias Revisión:
Médicas Seminario de Biología Página: 1 y 4
Colectivo de Semana del:
Bioquímica y Molecular
Biología Molecular 03-07 de Octubre 2016
EXTRACCIÓN DE ADN
TEMAS:
• Técnicas de extracción y purificación de ácidos nucleicos. • Aplicaciones clínicas del ADN
OBJETIVOS:
• Indicar las funciones biológicas del ADN.
• Demostrar la presencia de ADN en tejidos biológicos.
• Explicar los principios físico-químicos en que se basa la extracción y purificación del ADN.
• Indicar los usos del ADN genómico humano en el diagnóstico molecular, en genética forense e ingeniería
genética.
METODOLOGÍA
Previa la realización del laboratorio se les recomienda a los y las estudiantes leer y analizar la guía, en pro de
lograr un aprendizaje significativo.
En este laboratorio se hará la extracción del ADN de lentejas. Al finalizar la práctica se socializará los resultados y se
discutirán los mismos para consolidar los conocimientos teóricos relacionados con esta actividad
MATERIAL Y REACTIVOS
Equipos y Cristalería Reactivos
Balanza de compensación Agua destilada
Licuadora Alcohol al 70%
Beaker de 250 ml NaCl
Tubos de ensayo 13 x 100 mm Jabón líquido
Filtro para cafetera Guisantes (muestra de estudio)
Gradilla para tubos 13 x 100 mm Ablandador para carne
Reloj
Colador plástico
PROCEDIMIENTO DE EXTRACCIÓN DEL ADN EN LENTEJAS

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UNAN
Materiales Procedimientos
Comprar una bolsita de media libra de lentejas por

subgrupo de trabajo
Puede encontrar en el Supermercado
• Pesar 100 gramos de lentejas en un beaker.

• asarlos a la licuadora
• Agrega 200 ml de agua destilada bien fría (entre 0 y 4

0C) a los 100 g de lentejas que están en la licuadora
Agregar 1 gramo de NaCl.

• Licuar a la más alta velocidad por 15 segundos!!
• Colar el licuado resultante, haciendo uso de un beaker

de 250 mL, un colador de plástico preferiblemente.
• Preserva el líquido y elimina lo que queda en el
colador.
Si no tienes colador usa papel filtro de cafetera con un
embudo y has pasar el licuado poco a poco por el papel.
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• Agrega 30 ml de jabón líquido al filtrado que

tienes en el beaker.
• Mezcla suavemente (Solución resultante).
• Espera 10 minutos.
• Pasar a un tubo de ensayo aproximadamente

5 mL la solución resultante.
• Agrega 1 gramo de ablandador de carne, y
mézclalo suavemente unos 5 segundos.
• Inclina el tubo de ensayo y agrega

suavemente la misma cantidad de alcohol al
70-90% sobre la pared del tubo.
• Verifica que el Alcohol este a 4ºC al menos.
!!!NO MEZCLAR EL CONTENIDO DEL TUBO!!!
• Deja reposar 10 minutos.
• Observar la formación de las dos capas de la
solución acuosa y el alcohol.
EL ADN SE ENCUENTRA EN EL LIMITE DE ESA
PARTICIÒN.
• Con un hisopo de algodón o varilla de vidrio
puedes recuperar el ADN con cuidado.
• Verifica que has logrado extrae el ADN.
• Explica para que sirvió cada componente de la
mezcla que dio como resultado el producto
final
• Discute los resultados con el docente
PREGUNTAS PARA ORIENTAR EL AUTOESTUDIO
1. Describa los principios generales de extracción de ADN.

R: Para obtener ADN a partir de leucocitos totales (obtenidos de sangre periférica), células en
cultivo, tejidos animales, vegetales, levaduras y bacterias; se usa generalmente una técnica de
cuatro pasos secuenciales:
• El primer paso consiste en la lisis de las células y los núcleos.
• Luego, la separación del ADN a partir de sangre total involucra la lisis de eritrocitos, seguida por una
lisis de leucocitos y de sus núcleos.
• Las proteínas celulares son entonces removidas por un paso de precipitación salina, y
• Finalmente el ADN genómico es concentrado por precipitación con isopropanol.
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Métodos convencionales:
a. Extracción con tiocianato de guanidino – fenol – cloroformo (método de

chomczynski): Fundamento del método:
Extracción de ácidos nucleicos utilizando una solución del agente caotrópico de Tiocianato de
Guanidino que genera lisis celular y degradación de proteínas con la liberación de los ácidos
nucleicos.
Posteriormente el uso de solventes orgánicos fenol- cloroformo que permiten su separación de
restos de proteínas, lípidos y la posterior precipitación de los ácidos nucléicos usando etanol
o isopropanol.
b. Extracción con tiocianato de guanidino – fenol – cloroformo (método de

Se basa en las diferencias en la desnaturalización y renaturalización del ADN plasmídico y el
ADN cromosómico al aplicar NaOH en presencia de un detergente fuertemente aniónico como el
Dodesilsulfato de Sodio (SDS) y Acetato de potasio.
c. Extracción con tiocianato de guanidino – fenol – cloroformo (método de

Las células vegetales pueden lisarse con el detergente iónico bromuro de cetiltrimetil amonio
(CTAB), que forma un complejo insoluble con los ácidos nucleicos en medio hiposalino. De ese
modo, los polisacáridos, los compuestos fenólicos y los demás contaminantes permanecen en el
sobrenadante y pueden eliminarse por lavado.
2. Diga usted para qué utilizamos detergente en el procedimiento.
El detergente y el son utilizados para desintegrar la pared y membrana celular que cubren a las células. Lisis
celular por medio de detergentes es una manera más suave de romper la membrana celular. Los detergentes
rompen la barrera lipídica solubilizando las proteínas e interrumpiendo la interacción lípido-lípido,
lípidoproteína y proteína-proteína. Los detergentes, al igual que los lípidos, se asocian entre ellos y se unen
a superficies hidrofóbicas. Se componen de una cabeza polar hidrofílica y una cola no polar hidrofóbica. No
hay un protocolo estándar disponible. El detergente dependerá de la aplicación que se le quiera dar. Muchos
estudios en los que se usa electroforesis usan típicamente SDS para desnaturalizar las proteínas por
completo. La elección del detergente para la lisis celular dependerá también del tipo de célula. Es importante
tomar en cuenta además los buffer usados, el pH, la concentración de sal y la temperatura para la elección
del detergente correcto.
3. Diga usted para qué utilizamos alcohol en el procedimiento.
El ADN es una molécula muy larga y tiende agruparse. De ahí la facilidad para retirarla. Para aislar el ADN
hay que hacer que precipite en alcohol. El ADN es soluble en agua, pero cuando se encuentra en alcohol
precipita en la interface entre el alcohol y el agua. Además de permitirnos ver el ADN, el alcohol separa el
ADN de otros componentes celulares, los cuales son dejados en la solución acuosa.
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4. Diga usted qué tipo de enzimas contienen los suavizadores de carne y el jugo de piña y para qué
los utilizamos en este experimento.
El ablandador de carne, tiene enzimas proteolíticas, proteínas especializadas en la degradación de otras
proteínas y separarlas del ADN. Como las proteasas pueden romper los enlaces peptídicos, entre ellas
encontramos enzimas como la pepsina.
• La Papaína Es una enzima que se extrae del látex de la papaya antes de llegar a su maduración, y posee
características idóneas para el blanqueamiento y ablandamiento de las carnes.
• La Bromelina Se extrae del Ananas Comosus, o sea, piña y es probablemente el más conocido o usado. Es una
enzima proteolítica que contiene un grupo sulfídrico y ayuda a la desestructuración y rompimiento de las
proteínas de la carne y las convierte en aminoácidos más fáciles de digerir, por lo tanto desde su aplicación en
crudo, ayuda al reblandecimiento de la carne. Además la bromelina sirve como anti inflamatorio y nos ayuda en
la digestión de las grasas y a combatir las diarreas.
5. Diga usted cuántos usos se le puede dar al ADN una vez extraído.
Botánica: La extracción de ADN se utiliza en la modificación genética de las plantas. Muchas empresas agrícolas
utilizan la extracción genética para crear el ADN que luego modifican para que una determinada cepa genética de
un cultivo sea resistente a varias sustancias químicas o plagas. Un ejemplo es el número de líneas de semillas
fabricadas por la Corporación Monsanto, que son inmunes al herbicida Roundup. Al hacer los cultivos (remolacha,
por ejemplo) resistentes al Roundup, el herbicida en cuestión puede ser rociado sobre los campos para matar las
malas hierbas, pero sin afectar la cosecha de remolacha.
Animales: La extracción de ADN es también el primer paso en la ingeniería genética de los animales. La ingeniería
genética de los animales es un tema muy amplio que va desde el cambio de un solo gen para que, en un ejemplo de
un laboratorio de investigación de Taiwán, un cerdo brille en la oscuridad. En el extremo más complejo de todo el
espectro de la ingeniería genética está la clonación de animales, un proceso del cual se pueden hacer animales
idénticos.
Farmacéuticos: La extracción de ADN se utiliza como el paso inicial en la fabricación de un número de productos
farmacéuticos. Los farmacéuticos hechos a través de la genética recombinante, incluyen la hormona de crecimiento
bovina (BVH) y la hormona del crecimiento humana (hGH). Además de un número de otras hormonas, una de las
más utilizadas es la insulina.
Diagnósticos médicos: El diagnóstico de ciertas condiciones médicas a menudo se pueden hacer a partir del ADN
extraído de un paciente. Las condiciones que pueden ser diagnosticadas mediante pruebas genéticas son la fibrosis
quística, anemia de células falciformes, síndrome de X frágil, la enfermedad de Huntington, el síndrome de
hemofilia A Down y la enfermedad de Tay-Sachs. Además de diagnosticar las enfermedades existentes, también es
común probar para ver si una persona es portadora de una enfermedad en particular, pero sin tenerla.
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Verificación de identidad: Un uso bien conocido para la extracción genética es la huella genética, un proceso en
el cual el material genético puede ser emparejado en una escena del crimen, por ejemplo. La verificación genética
ha trabajado tanto para colocar a una persona en la escena de un crimen, como para exonerar a las personas
condenadas erróneamente por un delito.
6. ¿Qué relevancia tiene el ADN en el diagnóstico clínico?
El ADN está cada día más presente en nuestras vidas. Los análisis genéticos son solicitados con más frecuencia por
nuestros médicos para conocer el origen de nuestras enfermedades y en algunos casos realizar terapias a medida en
función de nuestro perfil genético (medicina personalizada). Esta labor de diagnóstico se ha visto facilitada por un gran
avance en las tecnologías para el análisis del ADN:
• Las técnicas de array CGH (Hibridación Genómica Comparada) nos permiten comprobar si existe alguna región
de nuestro genoma en exceso o defecto como sucede en algunas enfermedades neurológicas (Ej. Autismo).
• Las técnicas de Secuenciación Masiva (NGS) permiten secuenciar en un tiempo record todo nuestro ADN e
identificar las mutaciones responsables de cualquier enfermedad.
• Las técnicas de diagnóstico prenatal (en fetos) y preimplantacional (en embriones) posibilitan identificar
enfermedades antes del nacimiento, e incluso será posible corregirlas muy pronto (tecnología CRISPR/Cas9).
Ahora no sólo es posible detectar ADN en el núcleo de nuestras células, sino también circulando por el torrente sanguíneo.
Esta nueva fuente de ADN (biopsias líquidas) está siendo de gran utilidad para el diagnóstico de procesos cancerosos sin
necesidad de métodos más agresivos como son las biopsias del supuesto tumor.
Estamos viviendo una nueva era en la medicina con mejores terapias y más efectivas en la cura de enfermedades y
basadas en las nuevas tecnologías del ADN. Esperemos que sólo se apliquen con este fin y no se utilicen con otro objetivo
como es la eugenesia. La comunidad científica velará por no caer en esta tentación como ya ha sucedido en otros
momentos de nuestra historia más reciente.
7. ¿Cuáles son las funciones biológicas del ADN?

R: Incluyen el almacenamiento de información (genes y genoma), la codificación de proteínas
(transcripción y traducción) y su autoduplicación (replicación del ADN) para asegurar la transmisión de la
información a las células hijas durante la división celular.
8. ¿Cuáles son las diferencias en cuanto a la extracción de ADN y ARN?
Extracción de DNA: Entre los métodos de purificación de DNA se destacan los que emplean gradientes de cloruro
de cesio y los que incluyen extracciones con solventes orgánicos en presencia del detergente catiónico CTAB
(bromuro de hexadeciltrimetilamonio). Los primeros tienen la ventaja de obtener DNA de muy buena calidad pero
son muy trabajosos y requieren una cantidad importante de bromuro de etidio. Los protocolos con CTAB son más
sencillos y se basan en la propiedad que posee este compuesto de solubilizar membranas celulares y complejar el
DNA a bajas concentraciones de NaCl. En el caso del trabajo práctico realizaremos la recuperación del DNA genómico
bacteriano a partir de una precipitación selectiva del RNA con LiCl utilizando una concentración de dicha sal que
deja en solución al DNA.
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Extracción de RNA: Existen variadas metodologías para la extracción de RNA. Son bastante comunes los protocolos
que incluyen isotiocianato de guanidinio o fenol para el lisado celular. Dichos compuestos inactivan RNAsas lo que
resulta muy favorable cuando se trabaja con muestras que poseen altos niveles de RNAsas endógenas. Una de las
metodologías más sencillas es la que utilizaremos en este trabajo práctico y consiste en la utilización de un
detergente suave como es el SDS par el lisado de las células que se combina con el calentamiento de la muestra de
manera de favorecer la solubilización del material. Posteriormente se realiza una desproteinización con cloroformo
y una precipitación diferencial con LiCl 2M.
9. Diga usted cuáles son las diferencias entre los procedimientos de extracción de ADN animal y ADN
vegetal.
Extracción del ADN en las plantas: El ADN genómico de las plantas es más difícil de extraer a causa de la pared
celular de la planta, que se elimina por homogeneización o mediante la adición de celulasa para degradar la
celulosa que forma la pared celular. Además, los metabolitos presentes en la célula vegetal pueden interferir con
la extracción de ADN genómico por la contaminación de la muestra de ADN durante el proceso de precipitación.
Extracción de ADN animal: Los leucocitos de sangre periféricos son una fuente principal de ADN genómico en
animales, pero la recogida de muestras es difícil ya que la sangre debe ser retirada del animal. La sangre contiene
una serie de compuestos como proteínas, lípidos, glóbulos blancos, glóbulos rojos, plaquetas y plasma, que
pueden contaminar la muestra de ADN. El contaminante principal del ADN de animal extraído por muestras de
sangre es hemo, el componente no proteíco de la hemoglobina.
Diferencias: Las diferencias entre el ADN de las plantas y los animales se encuentra en la secuencia de bases en la
hélice. Los compuestos que se encuentran en las células vegetales están ausentes en las células animales y las
secuencias de bases de ADN reflejan esto, puesto que el ADN genómico de la planta es a menudo mayor que el ADN
de los animales. Estas diferencias afectan los métodos de extracción, ya que impacta en el rendimiento y la pureza
del ADN.
10. Diga usted qué principio de extracción se usa para ADN plasmídico.
Extracción de ADN plasmídico por lisis alcalina:
Fundamento del método:
Este método explota las diferencias en las propiedades de desnaturalización y renaturalización entre el DNA
plasmídico (pequeños círculos de DNA cerrados covalentemente) y el DNA cromosómico (fragmentado). La
alcalinización con NaOH en presencia de un detergente fuertemente aniónico (SDS), provoca la lisis celular, la
desnaturalización del DNA cromosómico y de las proteínas, y la liberación de los plásmidos. Los plásmidos se ven
menos afectados por su pequeño tamaño y estructura superenrollada. La neutralización del medio en presencia
de una concentración alta de sal (acetato potásico), provoca que se cierre covalentemente el DNA plasmídico y la
precipitación de las proteínas (por el tratamiento con el detergente y la insolubilidad de la sal potásica del dodecil
sulfato) y la del DNA cromosómico (por reasociaciones aleatorias intracatenarias). Los agregados insolubles de
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proteínas y DNA cromosómico se separan por centrifugación del DNA plasmídico que queda en el sobrenadante
y conserva mayoritariamente su estructura nativa.
11. Explique usted por qué la concentración de ADN se mide a 260 nm.
Porque a 260 nm es la longitud de onda en la que se puede leer mejor su concentracion (del ADN) mediante
la tecnica de espectrofotometría. Los ácidos nucleicos tiene un máximo de absorción a una longitud de onda
de 260nm. A esta longitud por lo tanto, la absorción es proporcional a la concentración.
12. Indique usted qué tipo de contaminantes podemos encontrar en un extracto de ADN.
La calidad del ADN constituye un elemento crucial para esta técnica, la cual necesita un método de
extracción de ADN lo más estandarizado posible con el que se obtenga un ADN puro, no degradado, libre
de ARN y de inhibidores de la reacción en cadena de la polimerasa: porque cambios en la pureza afectan
los perfiles de amplificación y esto se manifiesta en la presencia de bandas falsas y en la poca
reproducibilidad del ensayo.
13. Explique usted por qué la medición de una muestra de ADN a 260/280 nos da información sobre la
pureza de la muestra.
Espectrofotometía: La concentración de DNA se puede estimar utilizando un espectrofotómetro de luz ultravioleta
(UV)a una longitud de onda de 260 nm, debido a que las bases púricas y pirimidínicas del ADN tienen la
propiedadde absorber la luz UV a esta longitud de onda. Es importante tener en cuenta que, dado el
emparejamiento de sus bases (puentes de hidrógeno), el ADN bicatenario absorbe menos que el monocatenario.
Una unidad dedensidad óptica (DO) a 260 nm equivale a 50 μg/ml de ADN de doble cadena, a 40 μg/ml de ARN y
ADN decadena simple, y a 33 μg de oligonucleótidos.La determinación de la pureza de ADN se establece mediante
la lectura de las absorbancias a 260,280 y 230 nm. En las preparaciones de ácidos nucléicos, son frecuentes las
impurezas de naturaleza proteica.Dado que los aminoácidos aromáticos (Phe, Tyr, Trp) absorben luz UV, la
presencia de proteínas lleva asobreestimaciones de la concentración de ácidos nucléicos. La concentración de
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proteína puede ser evaluada auna absorbancia de 280 nm, por lo que es posible estimar el grado de impurezas de
origen proteico a partir delcociente A260/A280. La presencia de proteínas en la muestra hará que el cociente A260
nm/A280 sea menor que el esperado para ácidos nucléicos puros. Una muestra pura debe presentar un radio de
absorbancia a260/280 nm que exceda el valor de 1.75 para propósitos analíticos (para ADN de doble hebra en
soluciones dealta pureza se espera A260/A280 ≥ 1.8). Si la muestra es impura deberán repetirse extracciones con
fenol pararemover dichas impurezas.Teniendo el valor de absorbancia a 230 nm, podemos obtener la razón
Abs230/Abs260, si ésta esmayor de 0.5, sugiere contaminación con fenol, cloroformo o carbohidratos.
Mediante espectrofotometría se puede determinar la concentración y la pureza de una muestra de ADN basándose
en la capacidad de absorbancia de un compuesto presente en una solución a una longitud de onda determinada.
De este modo la concentración de la muestra de ADN se calcula teniendo en cuenta el valor de absorbancia
obtenido a una longitud de onda de 260 nm. Mientras que la relación de absorbancias A260/280 y
A260/230 se utilizan para evaluar la pureza de las muestras.
La relación A260/280 es muy estable y se considera que un ADN de pureza óptima tiene un valor entre
1.8-2.0. Un ADN de pureza aceptable debe tener al menos una relación A260/280 > 1.6. Un valor A260/280
< 1.6 indica una posible contaminación por compuestos aromáticos como fenoles y proteínas. Un radio
A260/280 > 2.1 podría deberse a la presencia de ARN en la muestra.
A 230 nm absorben contaminantes como sales caotrópicas, fenoles o carbohidratos. En general, se
considera que el ADN es puro cuando el ratio A260/230 se sitúa en torno 1.5-2.2. Un ratio menor de 1.5
indicaría presencia de contaminantes en la muestra. No obstante, esta relación resulta mucho más variable
que la relación A260/280 dependiendo de factores como la concentración de ADN o de la composición del
tampón de resuspensión de la muestra.
14. Diga para qué fines se puede utilizar el ADN genómico humano.
EL MAPA GENOMA Y LAS ENFERMEDADES GENÉTICAS: Existen más de 4.000 enfermedades “de un solo
gen”, que siguen fielmente las leyes de Mendel y que pueden ser dominantes como la calvicie precoz,
recesivas, como el albinismo, o ligadas al sexo, como la hemofilia o el daltonismo. Las enfermedades
poligénicas son mucho mas.
Enfermedad de Alzheimer o enfermedad degenerativa del cerebro. Se localizaron varios marcadores de origen
genético en los cromosomas 1, 14, 19 y 21, que provocan diferentes tipos de Alzheimer, desde el tipo I hasta el IV.
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Cáncer de colon. Un alelo mutante en el cromosoma 2 que aparece con frecuencia en determinados cánceres de
colon, llamado MSH2, produce una enzima similar a las enzimas bacterianas reparadoras del ADN, por lo que su
carencia o mal funcionamiento podrían explicar el desarrollo incontrolado de las células cancerigenas.
Cáncer de pulmón. Un gen en el cromosoma 3, llamado SCLC1, predispone a padecer cáncer de pulmón. Pero éste
depende del ambiente en la inmensa mayoría de los casos.
Corea de Huntington. Es provocada por un gen dominante localizado en el cromosoma 4; mediante un análisis de
sangre se puede detectar la presencia del alelo.
Displasia diastrófica. Es una anormalidad del crecimiento caracterizada por huesos curvados, extremidades cortas
y deformaciones en las articulaciones, los pies y las manos. Se ha descubierto un gen, en el cromosoma 5, asociado
con esta enfermedad. Ha recibido el nombre de DTD.
Diabetes juvenil. La diabetes es una enfermedad metabólica crónica que las células pancreáticas sinteticen insulina,
la hormona que controla el nivel de glucosa en la sangre. La diabetes, o del Tipo I es la más severa. Con esta
enfermedad se asoció el gen llamado IDDM1, localizado en el cromosoma 6.
Obesidad. Los científicos pudieron determinar una proteína mutada en los ratones obesos. Se trata del polipéptido
denominado leptina. Esta misma proteína se encuentra en el hombre. Es codificada por un gen localizado en el
cromosoma 7.
Fenilcetonuria. Rara enfermedad metabólica causada por una deficiencia en la enzima fenilalanina-hidroxilasa, que
en el hígado en las personas sanas. Es una enfermedad monogénica localizada en el cromosoma 12.
Enfermedad poliquística del riñón.
Cáncer de páncreas. Es provocado por un gen, llamado DPC4, localizado en el cromosoma 18, cuyo producto
proteico recibió el nombre de “supresor del carcinoma pancreático”.
Distrofia miotónica. Enfermedad hereditaria de los músculos. Está asociada con una secuencia repetida de
nucleótidos en el cromosoma 19.
Inmunodeficiencia severa combinada. Enfermedad monogénica bien caracterizada. Se manifiesta por la
incapacidad del sistema inmunitario de sintetizar anticuerpos que permitan neutralizar cualquier infección. El gen
que codifica esta inmudeficiencia se localiza en el cromosoma 20.
Esclerosis lateral amiotrófica. Es un trastorno neurológico degenerativo que provoca la progresiva inutilización
de las neuronas motare del cerebro. localizó en el cromosoma 21 un gen ligado a este tipo de e: S0D1 y presentaba
una mutación recesiva.
Distrofia muscular de Duchenne. Crecimiento anormal de los músculos. E1 paciente muere hacia los veinte años,
por paro cardíaco o pulmonar. Está ligada al sexo, por lo que su frecuencia de aparición es mucho mayor en varones,
y su gigantesco gen se loe en el cromosoma X.
Malformación de los testículos. El cromosoma Y está prácticamente vacío, en comparación con su compañero, el
X. Uno de los pocos genes que pudieron localizarse en el cromosoma Y es el llamado factor determinante de los
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testículos, o TDF. Se trata de una “factor de transcripción”. El TDF es capaz de unirse a determinados genes (no
necesariamente en el cromosoma Y), cuyos productos proteicos son necesarios para la formación de los testículos
durante el crecimiento fetal, lo que detrmina el futuro del individuo. (Fuente: BIOLOGÍA Aciva Polimodal Puerto de
Palos)
15. Cuando realizamos una extracción de ADN, aparte de concentración y pureza, qué otros parámetros de calidad
de la extracción de ADN se deben investigar.
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PROCEDIMIENTO DE EXTRACCIÓN DEL ADN EN LENTEJAS

Comprar una bolsita de media libra de lentejas por

• Pesar 100 gramos de lentejas en un beaker.

• Agrega 200 ml de agua destilada bien fría (entre 0 y 4

Agregar 1 gramo de NaCl.

• Colar el licuado resultante, haciendo uso de un beaker

• Agrega 30 ml de jabón líquido al filtrado que

• Pasar a un tubo de ensayo aproximadamente

• Inclina el tubo de ensayo y agrega

PREGUNTAS PARA ORIENTAR EL AUTOESTUDIO

1. Describa los principios generales de extracción de ADN.

a. Extracción con tiocianato de guanidino – fenol – cloroformo (método de

b. Extracción con tiocianato de guanidino – fenol – cloroformo (método de

c. Extracción con tiocianato de guanidino – fenol – cloroformo (método de

7. ¿Cuáles son las funciones biológicas del ADN?

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