Código: FR-GME-025

FORMATO GUÍA PROTOCOLO DE PRÁCTICA Versión: 02

Proceso: Fecha de emisión: Fecha de versión:

Gestión de los Medios Educativos 26-Mar-2010 28-Jun-2010

Sección 1. DATOS DE LA ASIGNATURA

Nombre de la asignatura Nombre del docente
Electiva III: Bioprocesos PAOLA ANDREA BAUTISTA DUARTE
Nombre de la práctica
1 Diluciones seriadas y aislamiento de microorganismos

Fecha de práctica Hora No. de grupos

12/08/17 8:00-12:00 8
Sección 2. PROGRAMA DE TRABAJO
Objetivo general

Realizar el recuento de microorganismos heterótrofos, enterobacterias, hongos y levaduras, de un compost

Conceptos previos

Sección 3. LISTADO DE MATERIALES REACTIVOS Y EQUIPO

Materiales Equipos Reactivos

3 Pipeta graduada 1ml 1 Incubadora 5 tubos con 9ml de agua destilada estéril

1 Pipeteador 1 balanza 3 cajas de agar plate count o Agar nutritivo

1 Gradilla 3 cajas de agar cetrimide o King B

1 Asa de Driglasky 3 cajas de Mac Conkey

3 cajas de PDA o Sabourod

 Código: FR-GME-025
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Sección 4. PROCEDIMIENTO (preferiblemente en diagrama de flujo)

Diluciones seriadas y recuento de viables en placa

o Prepare en una gradilla una serie de 5 tubos que contendrán (9 ml) de solución salina estéril.
o Etiquete los tubos con la dilución de 10-1 hasta 10--5.
o Para la primera dilución (10-1), tome 1 gr de la muestra del compost y transfiéralo al primer tubo con 9ml
de solución salina.
o Agite bien el tubo y con una nueva pipeta estéril transfiera 1ml de este al segundo tubo marcado como
10-2, repita el proceso hasta completar 10-5

Figura 1. Diluciones seriadas

o Una vez realizada la serie de diluciones, se realizara la siembra en placa de las diluciones 10-3, 10-4 y 10-5.
Para esto tome con una nueva pipeta (0,1ml) de la dilución y colóquela sobre una placa de agar
correspondiente.
o Extienda la gota sobre toda la placa con ayuda de una asa de digralsky que es esterilizada previamente
tras sumergirla en alcohol y quemándolo en la llama del mechero.
o Incube las placas en posición invertida a 35ºC durante 24-48 horas.(para bacterias) y a 25°C durante una
semana para hongos y levaduras
o Después del tiempo de incubación aparecerán colonias que son conocidas como unidades formadores
de colonia (UFC).

Sección 5. POLÍTICAS DE LA PRÁCTICA

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 Conocer y aplicar el reglamento del laboratorio.

 Es obligatorio para cualquier usuario del laboratorio portar y utilizar los elementos de seguridad personal (bata,
guantes, gafas y una toalla de manos).
 El estudiante debe consultar con anterioridad las fichas de seguridad de los reactivos que se van a utilizar durante la práctica.
 El docente debe radicar en la jefatura de laboratorio esta guía con ocho (8) días de anterioridad, ya sea en medio
físico o por correo electrónico.
 La entrega de materiales, equipos y reactivos se realizara hasta quince (15) minutos después de empezada la clase,
igualmente la entrega de los mismos debe realizarse diez (10) minutos antes de finalizar la práctica experimental.
 El laboratorio no realizará entrega de ningún tipo de material a los estudiantes después del tiempo estimado.
 Los estudiantes deben entregar al laboratorio su carnet estudiantil para reclamar o solicitar cualquier material, equipo o
reactivo.
 Cualquier daño o pérdida de equipos o materiales será responsabilidad del estudiante que haya causado el daño. Sin
embargo se recomienda al docente la supervisión constante de los estudiantes. En caso de ausencia del docente en el
laboratorio informar al jefe de laboratorios o a los monitores para mantener controlada la práctica experimental.
 En el caso de cancelación por parte del docente de la práctica experimental informar a la Coordinación de laboratorios con
suficiente anterioridad para poder disponer del laboratorio.
DOCENTE LABORATORIO
Fecha de diligenciamiento: Fecha de radicación:
Firma Firma

Pasos para el diligenciamiento de este formato

1. Esta solicitud debe ser diligenciada a mano, en letra imprenta clara, evitando enmendaduras y/o tachones.

2. Debe ser diligenciado por el docente responsable de la práctica especificando en cada sección los datos de la misma.

3. Radicar en la jefatura del laboratorio con mínimo tres días hábiles de anterioridad el formato, debidamente diligenciado
y darle a conocer a sus estudiantes con antelación en qué consiste la práctica y los elementos que se utilizarán.