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Universidad Nacional de Ingeniería

Facultad de Ingeniería Ambiental


Escuela Profesional Ingeniería Sanitaria

DISTRIBUCIÓN
LABORATORIO N°1 UNIVERSAL DE LOS
MICROORGANISMOS
Microbiología Sanitaria I

CURSO: Microbiología Sanitaria I


PROFESOR: Ing. Jorge Tello Cebreros
ALUMNO: Barahona Chunga Carlos Jesús
CÓDIGO: 20134166E

Carlos Jesus Barahona


07 DE ABRIL DEL 2015
Universidad Nacional de Ingeniería
Microbiología Sanitaria I
Facultad de Ingeniería Ambiental
DISTRIBUCIÓN UNIVERSAL DE MICROORGANISMOS

DISTRIBUCIÓN UNIVERSAL DE LOS


MICROORGANISMOS

1. OBJETIVOS

 Reconocer la presencia de diferentes tipos de microorganismos presentes en la


naturaleza.
 Obtener conocimiento en la preparación de algunos medios de cultivo.
 Exponer los medios de cultivo a diferentes condiciones de contaminación y observar el
desarrollo y crecimiento de los microorganismos en los medios de cultivo utilizados.
 Aprender a usar correctamente los materiales del laboratorio y equipos básicos.

2. FUNDAMENTO TEÓRICO

Los medios de cultivo


Un cultivo es el producto del crecimiento de organismos o grupos de organismos, establecidos
con fines experimentales o industriales.
Un medio de cultivo es el sustrato o una solución de nutrientes que permite el desarrollo de
microorganismos. En las condiciones de laboratorio para realizar un cultivo, se debe sembrar
sobre el medio de cultivo elegido las muestras en las que los microorganismos van a crecer y
multiplicarse para dar colonias.
Los microorganismos son los seres más abundantes de la tierra, pueden vivir en condiciones
extremas de pH, temperatura y tensión de oxígeno, colonizando una amplia diversidad de nichos
ecológicos. Entre los requerimientos más importantes para su desarrollo están el carbono, el
oxígeno, nitrógeno, dióxido de carbono e hidrógeno. Muchas bacterias sin embargo necesitan del
aporte extra de factores de crecimiento específicos en forma de suero, sangre y extracto de
levadura entre otros.
Los medios de cultivo comunes que se utilizaron en el laboratorio son:
1. Agar nutritivo: Medio de cultivo utilizado para propósitos generales, para el aislamiento
de microorganismos poco exigentes en lo que se refiere a requerimientos nutritivos.
Su uso está descripto en muchos procedimientos para el análisis de alimentos, aguas y
otros materiales de importancia sanitaria.

Laboratorio N°1
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El agar nutritivo es una de las sustancias gelatinosas que se pueden usar en el fondo de
una placa de Petri. Este material contribuye a un entorno hospitalario para el crecimiento
microbiológico, proporcionando tanto comida para los organismos y una base para
crecer que no se degrade cuando se expone al crecimiento de microorganismos. El agar
nutritivo es diferente de otros medios de crecimiento en los que se usa agar, que es
derivado de algas, como el agente gelatinoso.
Por las características de sus componentes es un medio usado para el cultivo de
microorganismos poco exigentes en sus requerimientos nutricionales. No contiene
inhibidores del desarrollo bacteriano. La pluripeptona es la fuente de carbono y nitrógeno
para el desarrollo bacteriano. El agregado de cloruro de sodio permite el enriquecimiento
con sangre de carnero u otras sustancias para facilitar el cultivo de microorganismos
exigentes.

Generalmente contiene:

Fórmula (en gramos por litro) Instrucciones

Pluripeptona 5.0 Suspender 31 g de polvo por litro de agua


destilada. Mezclar y dejar reposar 5
Extracto de carne 3.0 minutos. Calentar suavemente agitando y
hervir 1 o 2 minutos hasta su disolución.
Cloruro de sodio 8.0 Distribuir y esterilizar a 121°C durante 15
minutos.
Agar 15.0

pH final: 7.3 ± 0.2


2. Caldo Nutritivo: Medio de cultivo utilizado para propósitos generales, para el desarrollo
de microorganismos con escasos requerimientos nutricionales. No contiene agar.
Medio no selectivo, contiene pluripeptona y extracto de carne que constituyen la fuente
de carbono y nitrógeno necesarias para el adecuado desarrollo bacteriano.
Generalmente contiene:

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Fórmula (en gramos por litro) Instrucciones

Pluripeptona 5.0 Emplear 8 g de polvo por litro de agua


destilada. Si es necesario, calentar hasta
Extracto de carne 3.0 disolver. Distribuir y esterilizar en autoclave
a 118-121°C durante 15 minutos.

pH final: 6.9 ± 0.2


3. Agar sabouraud: Medio utilizado para el aislamiento, identificación y conservación de
hongos patógenos y saprófitos. También es útil para el cultivo de levaduras.

Medio de cultivo recomendado para el aislamiento y desarrollo de hongos,


particularmente los asociados con infecciones cutáneas (piel, pelo, etc.).

En el medio de cultivo, la pluripeptona y la glucosa, son los nutrientes para el desarrollo


de microorganismos. El alto contenido de glucosa, la presencia de cloranfenicol y el pH
ácido, favorecen el crecimiento de hongos por sobre el de bacterias.
Además, al medio de cultivo, pueden agregarse otros agentes selectivos de crecimiento.

Generalmente contiene:

Fórmula (en gramos por litro) Instrucciones

Pluripeptona 10.0 Suspender 65 g del polvo por litro de agua

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Glucosa 40.0 destilada. Reposar 5 minutos y mezclar hasta


uniformar. Calentar agitando frecuentemente
Cloranfenicol 0.05 y hervir 1 minuto hasta disolver. Distribuir y
esterilizar 15 minutos a 118-121°C. Mantener
Agar 15.0 en lugar fresco, pues la exposición al calor
hidroliza los componentes. Distribuir en
placas o en tubos con cierre hermético

pH final: 5.6 ± 0.2

MATERIAL CARACTERISTICAS VALOR NUTRITIVO


CRUDO
Con tiene las sustancias
solubles en agua de tejidos
Extracto de Extracto acuoso de carne magra de res animales, entre ellas:
carne concentrado en pasta carbohidratos, compuestos
orgánicos nitrogenados y
vitaminas solubles en agua y
sal.
S el producto que resulta de la digestión de los Fuente principal de nitrógeno
materiales proteicos, por ejemplo: carne, orgánico; puede contener
caseínas y gelatina, la digestión del material también algunas vitaminas y
Peptona proteico se efectúa con ácidos o enzimas ;sirve algunas veces
para hacer medios de cultivos bacteriológicos carbohidratos ,esto en
relación a la clase de
materiales proteico digerido
Se usa como agente
solidificante de los medios de
Carbohidratos complejos obtenidos de ciertas cultivo, se disuelve en
algas marinas procesadas para eliminar solución acuosa, gelificada
Agar sustancias extrañas cuando la temperatura baja a
45°C no se considera en agar
como nutriente para las
bacterias
Es una fuente muy rica en
Extracto de Es un extracto de solución acuosa de levaduras vitaminas B, también contiene
levadura , se obtienen comercialmente en polvo Nitrógeno orgánico y
compuesto de carbono.

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La esterilización
La esterilización es un método de eliminación total de todo tipo de organismo que asegura la
ausencia absoluta de cualquier forma viviente. Una esterilización deficiente o manipulación
incorrecta de materiales y medios de cultivo conlleva a contaminaciones, resultados erróneos o
pérdida del material biológico. Por ello, se requieren buenas prácticas de laboratorio para su
adecuado manejo.
Agentes físicos en la esterilización
 Calor

Todos los microorganismos son susceptibles, en distinto grado, a la acción del calor. El calor
provoca desnaturalización de proteínas, fusión y desorganización de las membranas y/o
procesos oxidativos irreversibles en los microorganismos.

La efectividad del calor como método de esterilización depende de:

 Temperatura
 Tiempo de exposición

 Calor Húmedo

El calor húmedo produce desnaturalización y coagulación de proteínas. Estos efectos se


deben principalmente a dos razones:

 El agua es una especie química muy reactiva y muchas estructuras biológicas (DNA,
RNA, proteínas, etc) son producidas por reacciones que eliminan agua. Por lo tanto,
reacciones inversas podrían dañar a la célula a causa de la producción de productos
tóxicos. Además, las estructuras secundarias y terciarias de las proteínas se
estabilizan mediante uniones puente de hidrógeno intramoleculares que pueden ser
reemplazadas y rotos por el agua a altas temperaturas.

 El vapor de agua posee un coeficiente de transferencia de calor mucho más elevado


que el aire. Por lo que, los materiales húmedos conducen el calor mucho más
rápidamente que los materiales secos debido a la energía liberada durante la
condensación.

El autoclave es el aparato más comúnmente utilizado en los laboratorios para esterilizar


cultivos y soluciones que no formen emulsiones con el agua y que no se desnaturalicen a
temperaturas mayores a 100 °C. Una temperatura de 121 °C (una atmósfera de
sobrepresión) con un tiempo de exposición mayor a 15 minutos sirve para destruir
organismos formadores de esporas.

 Calor seco

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El calor seco produce desecación de la célula, efectos tóxicos por niveles elevados de
electrolitos, procesos oxidativos y fusión de membranas. Estos efectos se deben a la
transferencia de calor desde los materiales a los microorganismos que están en contacto con
éstos. El aire es mal conductor del calor, y el aire caliente penetra más lentamente que el
vapor de agua en materiales porosos. La acción destructiva del calor sobre proteínas y
lípidos requiere mayor temperatura cuando el material está seco o la actividad de agua del
medio es baja. Esto se debe a que las proteínas se estabilizan mediante uniones puente de
hidrógeno intramoleculares que son más difíciles de romper por el calor seco.

La estufa de esterilización es el artefacto utilizado en los laboratorios para esterilizar por


calor seco. Se requiere mayor temperatura y tiempo de exposición que el autoclave. La
temperatura varía entre 120° y 180°C, requiriéndose distintos tiempos de exposición. A
140°C se necesitan por lo menos 5 horas de exposición, mientras que a 160°C se requieren
al menos 2 horas de exposición.

Sirve para esterilizar material de vidrio. El papel y el algodón no pueden ser esterilizados a
más de 160°C.

Existen otras formas de eliminar microorganismos por calor seco. La incineración se utiliza
para destruir material descartable contaminado. La acción directa de la llama elimina a los
microorganismos cuando se lleva al rojo el material de metal como ansas, lancetas, agujas
de disección.
 Radiaciones

Su acción depende de:

- Tipo de radiación
- Tiempo de exposición
- Dosis

 Ionizantes

Producen iones y radicales libres que alteran las bases de los ácidos nucleicos,
estructuras proteicas y lipídicas, y componentes esenciales para la viabilidad de los
microorganismos. Tienen gran penetrabilidad y se las utiliza para esterilizar materiales
termolábiles (termosensibles) como jeringas descartables, sondas, etc. Se utilizan a
escala industrial por sus costos. No se utilizan para medios de cultivo o soluciones
proteicas porque producen alteraciones de los componentes.

 Ultravioletas

Afectan a las moléculas de DNA de los microorganismos debido a que forman dímeros
de pirimidinas adyacentes que inducen errores en la duplicación y por lo tanto la pérdida
de la viabilidad de las células. Son escasamente penetrantes y se utilizan para
superficies.

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3. PROCEDIMIENTO

3.1.Preparación de Medios de Cultivo

 Agar Nutritivo (Concentración: 23 g en 1 litro)


Se utilizó 2.76 g de agar en 120 ml de agua.

 Caldo Nutritivo (Concentración: 8 g en 1 litro)


Se utilizó 1.07 gr de caldo en 135 ml de agua.

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 Agar Sabouraud (Concentración: 65 g en 1 litro)


Se utilizó 4.88 g de agar en 75 ml de agua.

 Disolvemos el agar nutritivo en la estufa hasta que disuelva por completo, hasta una
temperatura entre 70 y 90°C.

 El Caldo Nutritivo no lo calentamos, sólo lo vaciamos a los tubos de ensayo.

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 Disolvemos el agar sabouraud en la estufa hasta que disuelva por completo, hasta una
temperatura entre 70 y 90°C.

3.2.Procedimiento Experimental

PROCEDIMIENTO A: Grupo 1 y Grupo 3

Laboratorio N°1
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1. Colocamos agar nutritivo fundido en los 4 tubos de ensayo y numeramos 4 placas Petri.
(Los petris estériles números 1,2 y 3 y el no estéril con 4). Esto lo realizan dos grupos
(Grupo 1 y Grupo 3).

2. Vaciamos el tubo de agar nutritivo en cada uno de las placas Petri.

3. Luego que el agar ha solidificado, destapamos y exponemos la Placa N°1 en los


ambientes del Laboratorio de Microbiología (Grupo 1) y en los ambientes del Centro de
Estudiantes (Grupo 3) por 15 minutos.

4. La Placa N°2 se divide en cuatro zonas (Grupo 1 y Grupo 3 lo realizan):


a. Zona A: Pelo.
b. Zona B: Huella Digital.
c. Zona C: Inoculador estéril.
d. Zona D: Inoculador no estéril.

5. A continuación, invertimos las placas y las incubamos por 48 horas.

PROCEDIMIENTO B: Grupo 2, Grupo 4 y Grupo 5

N°1: Pipeta estéril


N°2: Pipeta no
estéril
N°3: Pipeta estéril

1 2 3

Laboratorio N°1 N°1: Tubo estéril


vacío
10 N°2: Tubo estéril
vacío
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1. Usando una pipeta estéril, transferir el caldo nutritivo de un tubo al tubo de prueba estéril
N°1.

2. Usando una pipeta no estéril, transferir el caldo nutritivo del segundo tubo a un tubo de
prueba estéril N°2.

3. Usando una pipeta estéril, transferir el caldo nutritivo del tercer tubo a un tubo de prueba
no estéril N°3.

4. Incubar los tubos de prueba por 48 horas a 37°C.

PROCEDIMIENTO C:

1. Este procedimiento lo realizan todos los grupos

2. En la placa Petri estéril N°4 vertimos agar sabouraud y lo exponemos a diferentes


ambientes por 15 minutos:

a. Placa Petri G-1: Laboratorio Microbiología

b. Placa Petri G-2: Centro de Estudiantes FIA

c. Placa Petri G-3: Baño FIA

d. Placa Petri G-4: Biblioteca FIA

3. Anotamos la fecha y hora a la que expusimos las placas.

4. Incubamos a temperatura ambiente por 3 a 5 días.

4. RESULTADOS

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Placa
Nro.
Placa Nro. 1 Placa Nro. 4
GRUPO 1 Placa Nro. 2 estéril 3
estéril no estéril
estéri
l
Ambiente: Sector A Sector B Sector C Sector D NO NO ABRIR
Número de Laboratorio (Pelo) (huella (inoculador (inoculador ABRIR
16 - 1 - 4 - 57
colonias
(8) 10mm
(1)1cm
(1) 3mm
(1)1.7cm (3) 1 mm
Tamaño - 1mm - - (2) 1cm
(1)1.3cm (1) 2mm
(54)1mm
(1)0.5cm
(1)0.25cm
Margen o (2)liso
Ondulante - Liso - Liso -
borde (55)ondulante
Elevación Plana - Plana - Plana - plana
Cromogéne
Crema - crema - crema - Crema
sis
Caracteres Opaco y
Opaco - Opaco - opaco -
ópticos translúcida
PR OCEDIMIENTO A: Colonias de bacterias desarrolladas en placas en medio agar nutritivo

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Placa n°
Placa n° 1 Placa n° 2 Placa n° 3
GRUPO 3 4 no
estéril estéril estéril
estéril
Sector C: Sector D:
AMBIENTE: Sector Sector B:
Inoculador Inoculador no No abrir No abrir
Centro de estudiantes FIA A: Pelo Huella
Estéril estéril

N° de
6 7 0 0 3 0 15
colonias

X1= 1 mm X1= 2mm


X2= 3mm X2= 4mm 0.1 mm
Tamaño - - - -
X3= 3mm X3= 1mm X1=1mm

X1= liso X1=ondulante


X1=liso (4) liso
Margen o X2= liso Liso X2=liso
X2=ondulante - - - (11)
borde X3= liso X3=liso
X3=liso ondulante

X1= plana X1=plana X1=convexa


X2= plana X2=plana X2=convexa Plana
Elevación Plana - - -
X3= plana X3=plana X3=convexa

X1=naranja X1=crema
X1= blanca
Cromogéne X2= rosado Blanco X2=crema
X2= blanca - - -
sis X3= rosado X3=crema Crema
X3= crema

X1= opaca X1=opaca X1=opaca


Caracteres X2= opaca X2=opaca Opaca X2=opaca (9)
- - -
ópticos X3= opaca X3=opaca X3=opaca translúcidas
(6) opacas

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PROCDEMIENTO B: Crecimiento de bacterias en caldo nutritivo

GRUPO 2 Tubo estéril Tubo estéril Pipeta Tubo no estéril


Pipeta estéril (1) no estéril (2) Pipeta estéril (3)

Cantidad de
No hay crecimiento Abundante *
crecimiento
Distribución de
No hay distribución Anillo *
crecimiento
Olor Imperceptible Fétido *

Tubo estéril Tubo estéril Pipeta Tubo no estéril


GRUPO 4
Pipeta estéril (1) no estéril (2) Pipeta estéril (3)

Cantidad de
No hay crecimiento Abundante Escaso
crecimiento
Distribución de Uniformemente
No hay crecimiento Turbidez
crecimiento distribuido
Olor Aromático Pútrido Pútrido

Tubo estéril Tubo estéril Pipeta Tubo no estéril


GRUPO 5
Pipeta estéril (1) no estéril (2) Pipeta estéril (3)

Cantidad de
** ** Escaso
crecimiento
Distribución de
** ** Sedimento
crecimiento
Olor ** ** Aromático

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**: No había tubos de ensayo para realizar el experimento.


*: Se rompió el tubo de ensayo.

5. CUESTIONARIO

1. ¿Qué factores influyen en la flora microbiana del aire? Explique


Los factores que influyen en la flora microbiana del aire son: la humedad relativa, la temperatura,
el oxígeno, la materia orgánica y las radiaciones.
Humedad Relativa
Es el factor más importante para la presencia de microorganismos, ya que si la humedad del aire
decrece, disminuye el agua disponible para los microorganismos, lo que causa deshidratación y
por lo tanto mueren muchos de ellos. A mayor altitud, las condiciones son mejores para la
evaporación y algunas esporas pueden germinar en las nubes. La humedad relativa de la
atmósfera varía de una 10-20% en las regiones desérticas. El límite menor para el crecimiento
de hongos es el 65%, Las bacterias requieren de una mayor humedad.
Temperatura

Está muy relacionada con la humedad relativa, por lo que es difícil separar los efectos que
producen ambas. La temperatura en Ia troposfera varía de 40°C cerca de Ia superficie, a —80°
C en Ias capas altas, alcanzándose temperaturas de congelación entre 3-5 K. La congelación no
destruye los microorganismos pero no pueden multiplicarse. Diversos estudios muestran que el
incremento de la temperatura disminuye la viabilidad de los microorganismos

Oxígeno

Se ha observado una correlación negativa entre Ia concentración de oxígeno y la viabilidad, que


aumenta con la deshidratación y el tiempo de exposición. La causa de Ia inactivación podría ser
los radicales libres de oxígeno.

Materia orgánica

La atmósfera contiene muy poca concentración de materia orgánica, y en la mayoría de los


casos, es insuficiente para permitir el crecimiento heterotrófico. El agua disponible es escasa por
lo que, incluso el crecimiento de microorganismos autótrofos está limitado.

Radiaciones

La inactivación que producen en los microorganismos depende de la longitud de onda e


intensidad de Ia radiación. Las de longitud de onda corta (rayos X, rayos (y) contienen más
energía, son ionizantes y alteran o destruyen el ADN de los microorganismos. Otros factores,
como Ia humedad relativa, concentración de oxígeno y Ia presencia de otros gases, influyen en
el efecto que producen Ias radiaciones sobre los microorganismos. La forma de interacción es

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poco conocida, pero la desecación y congelación pueden proteger a los organismos de las
radiaciones.

La exposición a radiaciones de corta longitud de onda como la luz ultravioleta, es la principal


causa de pérdida de viabilidad de los microorganismos que entran en la atmósfera. Las
radiaciones ultravioletas aumentan con la altura, debido a una menor retención, lo que causa
mutaciones y la muerte de los microorganismos. Algunos se protegen de los efectos letales de Ia
radiación por los pigmentos que producen, así corno por el polvo y las gotas de saliva y moco,
debido al escaso poder de penetración de Ia luz ultravioleta.

En la estratosfera hay una capa con una gran concentración de ozono que mata a los
microorganismos, pero al mismo tiempo, actúa absorbiendo Ia radiación ultravioleta. Por todas
estas razones, la estratosfera constituye una barrera para los microorganismos vivos
procedentes de la troposfera.

2. ¿Qué grupo de agentes causa la mayor incidencia de enfermedades


respiratorias?
Diversos virus son los causantes de las principales infecciones de las vías respiratorias, entre
ellos podemos destacar a los rinovirus y los coronavirus, representan al 50% de los virus que
causan enfermedades respiratorias.

3. ¿Qué enfermedades son transmitidas por el aire?


Gran número de infecciones humanas y animales se transmiten por el aire y causan enfermedad,
principalmente, en el aparato respiratorio. Estas enfermedades fácilmente se transmiten a través
de las actividades diarias del hombre. A continuación se explica algunas de muchas
enfermedades transmitidas por el aire.
 Tuberculosis
 Es una infección bacteriana contagiosa que compromete principalmente a los
pulmones, pero puede propagarse a otros órganos. La especie de bacterias más
importante y representativa causante de tuberculosis es Mycobacterium
tuberculosis o bacilo de Koch, perteneciente al complejo Mycobacterium
tuberculosis. La TBC es posiblemente la enfermedad infecciosa más prevalente
en el mundo.

 Carbunco pulmonar
 Producida por inhalación de esporas de Bacillus antrhacis, es una enfermedad
grave, con una elevada mortalidad. La infección en los humanos compromete
con mayor frecuencia la piel, el tracto gastrointestinal o los pulmones. Conocida
desde la antigüedad, ha sido causa de brotes epidémicos y casos esporádicos
entre diversos grupos de trabajadores (ganaderos, cardadores de lana,
curtidores) y en laboratorios de investigación en guerra bacteriológica.

 Meningitis

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 Es un tipo de infección del sistema nervioso central. Las infecciones


neurológicas son uno de los problemas más graves de la medicina, pues la
supervivencia del paciente depende fundamentalmente de que se detecten de
manera precoz para proceder inmediatamente al tratamiento específico. La
trascendencia de las diferentes infecciones del sistema nervioso es muy
variable. Aunque es cierto que hay algunas que solo requieren reposo en cama,
las más importantes son aquellas en las que la vida del paciente corre un
verdadero peligro o pueden dejar secuelas importantes que incapaciten para
siempre al enfermo.

La forma más conocida de meningitis, por su intensa gravedad, es la de


causa bacteriana. Pero hay otro tipo de infecciones que también pueden llegar
hasta el sistema nervioso y producir meningitis. De esta forma, otras posibles
causas de meningitis son las infecciones de origen vírico (producidas por virus),
que son las más habituales y más benignas; y las de origen fúngico (provocadas
por hongos como la candida o el cryptococcus, y que son mucho más
infrecuentes).

 Faringitis
 La faringitis es la inflamación de la mucosa que reviste la faringe. Generalmente
le acompañan síntomas como deglución difícil, amígdalas
inflamadas y fiebre más o menos elevada. Las posibles causas de la faringitis
son las infecciones víricas, infecciones bacterianas o reacciones alérgicas. Los
principales agentes causantes bacterianos son Streptococcus
pyogenes y Haemophilus influenzae, entre otros.

4. ¿Cuáles son las características principales de: Rhizobium nigricans, Alternaria,


Saccharomyce cerevisiae?

 Rhizobhium nigricans

 Más conocida como el “moho negro del pan”


 También afecta a frutas, hortalizas frescas, tomates y decolora
cereales.
 Puede causar infecciones si no se tiene cuidado.
 Puede causar reacciones alérgicas concretas.
 Posee esporas que flotan alrededor en el aire.
 Utilizado en la producción de cortisona e hidrocortisona.
 Es capaz de hidrolizar el almidón y producir el almidón.

 Alternaria

 Es un hongo del reino Fungi, Filo ascomycota.


 Conocidas como alérgenos en los humanos.
 Pueden causar rinitis alérgica y asma.

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 Presencia en el aire, en los interiores y exteriores de edificios.


 Sus esporas están en suspensión en el aire, en el suelo y en el
agua.
 Pueden crecer en colonias visibles de color negro o gris

 Saccharomyce cerevisiae
 Es un hongo unicelular, división Ascomycota.
 Conocida como la “levadura de la cerveza”.
 Es uno de los modelos más adecuados para estudiar problemas
biológicos.
 Destacan por un sencillo y versátil sistema de transformación de
ADN.
 Presenta dos fases biológicas: haploide y diploide.
 Utilizada en la producción de cerveza, pan y vino, gracias a su
capacidad de generar dióxido de carbono y etanol durante el
proceso de fermentación.
 Este microorganismo se ha utilizado como modelo simple de la
célula eucariota.

5. ¿Qué clase de nutrientes proporciona c/u de los ingredientes del caldo nutritivo,
agar saboraud y agar nutritivo?

MATERIAL CARACTERISTICAS VALOR NUTRITIVO


CRUDO
Con tiene las sustancias
solubles en agua de tejidos
Extracto de Extracto acuoso de carne magra de res animales, entre ellas:
carne concentrado en pasta carbohidratos, compuestos
orgánicos nitrogenados y
vitaminas solubles en agua y
sal.
S el producto que resulta de la digestión de los Fuente principal de nitrógeno
materiales proteicos, por ejemplo: carne, orgánico; puede contener
caseínas y gelatina, la digestión del material también algunas vitaminas y
Peptona proteico se efectúa con ácidos o enzimas ;sirve algunas veces
para hacer medios de cultivos bacteriológicos carbohidratos ,esto en
relación a la clase de
materiales proteico digerido
Se usa como agente
solidificante de los medios de
Carbohidratos complejos obtenidos de ciertas cultivo, se disuelve en
algas marinas procesadas para eliminar solución acuosa, gelificada
Agar sustancias extrañas cuando la temperatura baja a

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45°C no se considera en agar


como nutriente para las
bacterias
Es una fuente muy rica en
Extracto de Es un extracto de solución acuosa de levaduras vitaminas B, también contiene
levadura , se obtienen comercialmente en polvo Nitrógeno orgánico y
compuesto de carbono.

6. DISCUSIONES

 En la comparación de placas (placas Petri N°2, en el sector D, del procedimiento A),


entre el Grupo 1 y Grupo 3, se evidenció crecimiento en la placa perteneciente al Grupo
1, más no en el Grupo 3. Según la teoría, se debió evidenciar crecimiento debido a que
se inoculó con un inoculador no estéril. Para corregir esto, se tiene realizar nuevamente
el experimento.

 Si se ha evidenciado crecimiento en la parte superior del tubo, es un crecimiento


AERÓBICO. Por lo general la distribución de crecimiento es en forma de anillo.

 Si se ha evidenciado crecimiento (sedimento) en la parte inferior del tubo, es un


crecimiento ANAERÓBICO.

 Si se ha evidenciado formación por la parte central del tubo, el crecimiento ha sido


UNIFORMEMENTE DISTRIBUIDO. En este caso hacemos referencia a la turbidez.

 Si en el traspaso del caldo a través de la pipeta estéril hacia el tubo estéril, el medio de
cultivo es transparente del mismo color que el tubo de ensayo, entonces NO EXISTE
DESARROLLO BACTERIIANO.

 Si en el traspaso del caldo a través de la pipeta estéril hacia el tubo no estéril, el medio
de cultivo ha cambiado de color y se ha formado sedimento en la parte inferior del tubo,
entonces SI EXISTE DESARROLLO BACTERIANO.

 Si en el traspaso del caldo a través de la pipeta no estéril hacia el tubo estéril, el medio
de cultivo ha cambiado de color y se desarrollan natas en la superficie líquida del tubo y
sedimentos en la parte inferior, entonces también EXISTE DESARROLLO
BACTERIANO.

7. CONCLUSIONES

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 El desarrollo y crecimiento de bacterias se diferencian de acuerdo al entorno o medio


donde se encuentren.

 La presencia y desarrollo de bacterias se evidenció por la formación de sedimento en el


fondo del tubo de ensayo.

 La humedad es una condición importante para que se evidencien desarrollo de los


microorganismos.

 En un ambiente, a mayor número de personas, existirá mayor contaminación


microbiológica.

8. RECOMENDACIONES

 Retirar las placas y los tubos de acuerdo al tiempo planificado, para evitar así un
incremento o disminución de los microorganismos.

 En caso de no obtener los resultados esperados de acuerdo a la teoría, realizar otra vez
el experimento para poder corroborar lo que normalmente debe pasar.

 Tener mucho cuidado cuando se realiza la esterilización con el inoculador, ya que si no


se esteriliza de la manera adecuada, seguirá existiendo presencia microbiana.

9. ANEXOS

9.1. ¿Qué es una placa Petri?

La placa de Petri es un recipiente redondo,


de cristal o plástico, con una cubierta de la
misma forma que la placa, pero algo más
grande de diámetro, para que se pueda
colocar encima y cerrar el recipiente, aunque
no de forma hermética. Es parte de la
colección conocida como «material de vidrio».
Se utiliza en Microbiología para cultivar
células, observar la germinación de las
semillas o examinar el comportamiento de
pequeños animales.

Laboratorio N°1
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Universidad Nacional de Ingeniería
Microbiología Sanitaria I
Facultad de Ingeniería Ambiental
DISTRIBUCIÓN UNIVERSAL DE MICROORGANISMOS

Fue construida en el año de 1877 por el bacteriólogo alemán Julius Richard Petri cuando
trabajaba como ayudante de Robert Koch, el premio Nobel descubridor del bacilo de
la tuberculosis.
Se utiliza en los laboratorios principalmente para cultivar bacterias, mohos y otros
microorganismos, soliéndose cubrir el fondo con distintos medios de cultivo (por ejemplo agar,
que entonces suele llamarse placa de agar) según el microorganismo que se quiera cultivar.
Si se quieren observar colonias, durante el tiempo de incubación del microorganismo sembrado
en la placa ésta se mantiene boca abajo, es decir, apoyada sobre la tapa. De este modo, el agar
queda en la parte superior y al condensarse el vapor de agua que generan los microorganismos
por su metabolismo, cae sobre la tapa, evitando que los microorganismos se diluyan,
manteniéndose fijos al sustrato.

9.2. ¿Qué es un contador de colonias?


Un contador de colonias es un instrumento
utilizado para contar colonias de bacterias o de
otros microorganismos que crecen en una placa
de agar. Los primeros contadores sólo eran
superficies iluminadas sobre las que se colocaba
la placa, con las colonias marcadas con
un rotulador en la superficie externa de la placa
mientras el operador realizaba el recuento
manual. Los contadores más recientes intentan
contar las colonias por vía electrónica, mediante
la identificación de áreas individuales de
oscuridad y luz, de acuerdo a los umbrales
definidos por el usuario, contando los puntos en
los que se aprecia contraste, o de modo automático mediante registro electrónico tras presionar
con cualquier tipo de marcador.
Estos contadores se utilizan para estimar la densidad de microorganismos en un cultivo líquido.
Una dilución adecuada, o varias diluciones en serie dentro del rango estimado apropiado, se
propaga utilizando una técnica estéril en la placa de agar, que se incuba en las condiciones
adecuadas para el crecimiento hasta que aparecen las colonias individuales. Cada colonia marca
el lugar donde se colocó un solo organismo originalmente, con lo que el número de colonias en
la placa es igual al número de organismos en el volumen de líquido existente en la placa. Esta
concentración se extrapola a partir de la dilución practicada sobre el cultivo original, para estimar
la concentración de organismos existentes en ese cultivo inicial.

Laboratorio N°1
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Microbiología Sanitaria I
Facultad de Ingeniería Ambiental
DISTRIBUCIÓN UNIVERSAL DE MICROORGANISMOS

Cada vez que se cuenta una colonia el instrumento da tres señales: una señal audible, una
marca sobre la cápsula y además, en la pantalla numérica. El máximo número de colonias que
pueden ser efectivamente contadas con una sola placa está comprendido entre 100 y 1.000,
dependiendo del tamaño de la colonia y el tipo de organismo.

10.BIBLIOGRAFÍA
 Manual de Prácticas de laboratorio Microbiología General , Universidad Autónoma
Metropolitana Unidad Iztapalapa-División de Ciencias Biológicas de la Salud
(Fundamento Teórico)

 http://es.wikipedia.org/wiki/Placa_de_Petri (Anexos, Qué es una placa Petri)

 http://es.wikipedia.org/wiki/Contador_de_colonias (Anexos, Qué es el contador de


colonias)

 El aire: hábitat y medio de transmisión de microorganismos , M.C. de la Rosa, M.A.


Mosso y C. Ullán. Observatorio Medioambiental Vol.5, 2002 ( Cuestionario, Pregunta 3)

 http://www.upch.edu.pe/ehas/medicina/enfermedades%20infecciosas/semana%202-
6.htm (Cuestionario, Pregunta 2)

 http://www.microinmuno.qb.fcen.uba.ar/SeminarioMedios.htm (Cuestionario, Pregunta 1)

 Conceptos y Práctica de Microbiología General , Alberto Rojas Triviño. Año 2011.


Universidad Nacional de Colombia. ( Fundamento Teórico)

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