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 INTRODUCCIÓN

Las infecciones por estreptococos de grupo A constituyen cerca del 95% de las
infecciones por estreptococos Beta Hemolíticos en el hombre. Dichas infecciones son
comunes particularmente en niños de edad escolar y en raras ocasiones pueden dar
lugar a serias complicaciones no supurativas como la fiebre reumática y
glomerulonefritis.

Durante la invasión de los tejidos del paciente, los estreptococos de Grupo A ( y


algunas sepas de los grupos C y G) producen sustancias extracelulares de diferentes
tipos. Una de dichas sustancias tiene actividad enzimática y es capaz de producir lisis
(hemolisis) de los eritrocitos humanos y de conejo. Debido a que lábil en presencia de
oxígeno, se le llama estreptolisina O . Los anticuerpos que se producen contra esta se
llaman Antiestreptolisinas O.

ESTREPTOCOCOS

 Cocos gram +
 Pares o cadena
 Anaerobios facultativos
 No formadores de esporas
 Inmóviles
 Existen más de 30 especies las infecciones

CLASIFICACION:

 Lancefield: propiedades serológicas

 Según su capacidad hemolítica

 Según sus propiedades fisiológicas

DE ACUERDO A SU HEMOLISIS

 Alfa hemolíticos: hemólisis parcial


 Beta hemolíticos: hemólisis completa
 Gama hemolíticos: sin presencia de hemólisis

Se sabe que las infecciones por Streptococcus pyogenes estimulan la


producción de anticuerpos. Por esto se ha tratado de encontrar una vacuna,
pero los únicos anticuerpos protectores que se conocen son los dirigidos contra
la proteína M. Desafortunadamente existen muchos tipos serológicos entre los
cuales no hay reacción cruzada y esto hace difícil la inmunización.
Los anticuerpos contra la toxina eritrogénica si neutralizan el efecto de la
toxina, pero no previenen la infección, y debido a que existen tres tipos de esta
toxina en algunos casoso podría repetir un cuadro de escarlatina.

Los anticuerpos contra otros productos como antiestreptolisinas,


antihialuronidasas, antidesoxirribonucleasas B, anti-difosfo piridinucleotidasa y
anti-NADasa, solo nos son útiles para saber que el paciente será sensibilizado,
y se debe considerar que eventualmente a mayor sensibilización, mayor riesgo
de inducir un padecimiento por autoanticuerpos.

La prevención de la fiebre reumática debe hacerse con el tratamiento oportuno


de las faringitis y cuando estas se repinten con cierta frecuencia, administrar
penicilina, benzatinica por tiempo prolongado- en casos extremos durante
muchos años.

Otros estreptococos

Los estreptococos del grupo B de Lancefield forman una sola especie:


Streptococcus agalactiac. Estos se encuentran en varias especies animales, en
algunas de ellas produciendo infecciones similares a las causadas por el
Streptococcus pyogenes en el humano.
La fiebre reumática (FR) es una enfermedad inflamatoria, sistémica, caracterizada por
la existencia de lesiones que afectan al corazón, articulaciones, sistema nervioso
central, piel y tejido celular subcutáneo, como secuela de una infección faríngea por
estreptococo beta hemolítico del grupo A.

El sustrato morfológico es una reacción inflamatoria del mesénquima desencadenada,


en algunos individuos susceptibles, por los componentes celulares y/o los productos
extracelulares de distintos tipos de estreptococos del grupo A.

CRITERIOS DE JONES:

Criterios mayores

• Artritis: es el signo más frecuente, pues aparece en el 75% de los pacientes con
ataque agudo. Es una poliartritis de carácter agudo que afecta a las grandes
articulaciones (tobillos, rodillas, codos); es migratoria, errática, cambiando en pocos
días de una a otra articulación. Presenta signos inflamatorios con calor, rubor y
tumefacción con dolor intenso. Cuando existe derrame, este no es purulento. La artritis
cura sin dejar secuelas. Rápida respuesta a los salicilatos.

Carditis: es la afectación más grave, pudiendo acarrear la muerte en la fase aguda


o provocar graves secuelas valvulares. Se trata de una pancarditis que afecta a todas
las estructuras cardiacas, pero principalmente a las válvulas. La incidencia es del
40-50% y suele aparecer antes de la tercera semana. Puede tener cuatro
manifestaciones clínicas diferentes: aparición de un soplo cardiaco significativo que
antes no existía; la presencia de cardiomegalia; el fallo cardiaco congestivo y la
presentación de una pericarditis.

Corea minor o de Sydenham: se considera manifestación tardía de la FR, con un


intervalo de uno a seis meses; afecta más a niñas cerca de la adolescencia y, en
ocasiones, puede ser la única manifestación de la enfermedad.

Criterios menores

Son manifestaciones clínicas y analíticas con menor especificidad diagnóstica:


• Síndrome febril: en el ataque agudo la fiebre suele ser alta o moderada y dura unos
10-15 días; se controla bastante bien con salicilatos.

• Artralgias: en la fase aguda se producen dolores en varias articulaciones sin signos


objetivos de inflamación. Es muy importante no confundir artralgia con artritis para
aplicar correctamente los criterios de Jones.
Reactantes de fase aguda: la velocidad de sedimentación globular (VSG) y la
proteína C reactiva (PCR) están elevadas, habitualmente, por encima de 50 mm y con
la PCR de más de 50. Las mucoproteínas también están aumentadas. Cursa con
leucocitosis, elevación del complemento y alteraciones en el proteinograma con las
alfa-2 y las gammaglobulinas aumentadas.

• Alteraciones en el ECG: se comprueba unalargamiento del espacio P-R que traduce


un enlentecimiento de conducción AV.
REACCIONES DE NEUTRALIZACION

La neutralización es una reacción antígeno-anticuerpo en la cual los efectos


perjudiciales de una exotoxina bacteriana o de un virus pueden ser bloqueadas por
anticuerpos específicos. Este método está considerado de referencia para cualquier
estudio serológico pues es el que más se correlaciona entre la respuesta "in vitro" y la
respuesta "in vivo". En esta prueba se puede valorar la capacidad que tienen los
anticuerpos presentes en un suero problema para neutralizar la actividad biológica de
un antígeno.

Prueba de las Antiestreptolisinas actividad biológica

Se utiliza para evidenciar la presencia de anticuerpos contra la estreptolisina O de una


de las enzimas producidas por estreptococo, que tiene el poder de destruir los
glóbulos rojos in vitro cuando se encuentran en forma reducida Altos títulos de
anticuerpos se detectan por medio de la neutralización de la acción lítica de la enzima
sobre los glóbulos rojos.

Fundamento: Si se agrega estreptolisina O a glóbulos rojos se producirá hemólisis, y


esto indicara que no se ha estado en contacto con la bacteria. Cuándo el suero del
paciente contiene anticuerpos (ASLO) y se pone en presencia de la estreptolisina (Ag),
se producirá una reacción Ag−Ac, hasta neutralizar todo el Ag, el eritrocito no se lisa
en el cual se ha estado en contacto con la batería y por lo tanto es una reacción de
neutralización.
 OBJETIVO

Determinar la prueba de anticuerpos antiestreptolisinas O en una reacción de


neutralización

 MÉTODO

ANTIESTREPTOLISINAS EN SUERO MÉTODO DE NEUTRALIZACIÓN

1.-Diluir suero de la muestra 1:50 ( 0.1mL suero + 4.9mL solución amortiguadora)

2- Colocar 7 tubos y adicionar los siguientes volúmenes

Tubo 1 2 3 4 5 6 7

Solución 0.6 0.5 0.5 0.5 0.5 1.0 1.25


Amortiguadora
(mL)

3.- Realizar diluciones al doble con volúmenes de 0.5 a partir del tubo 1 y desechar el volumen
de 0.5mL del tubo 5, los tubos 6 y 7 son testigos de la prueba

Suero ( 1:50) 0.4 0.5 0.5 0.5 0.5 - -

Dilución 1:125 1:250 1:500 1:1000 1:2000 - -


resultante

4.- Adicionar estreptolisina O activada (reducida )

0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 -

5.- Incubar a 37°C por 15 minutos

6.- Adicionar glóbulos rojos O al 5%, ml


Tubos 1 2 3 4 5 6 7

0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25 0.25

7.- Incubar a 37 °C por 45 minutos agitando suavemente cada 10 minutos

8.- Centrifugar a 1500 rpm por 1 minuto y realice la lectura


Resultados
Los resultados se obtienen tomando la última dilución donde no hay hemolisis. El tubo 6 es el
testigo positivo de hemolisis y el tubo 7 es el testigo negativo de hemolisis.
Los resultados se reportan en unidades Todd, que corresponde a la inversa de la dilución en
donde se presenta hemolisis.

 RESULTADOS

TUBO1 TUBO2 TUBO3 TUBO 4 TUBO5 TUBO6 TUBO7

Reacción de
1:125 1:250 1:500 1:1000 1:2000 neutralización
La La estreptolisina O La estreptolisina O La estreptolisina La estreptolisina La
en contacto
estreptolisin se une a los se une a los O se une a los O se une a los estreptolisina
con la
a O se une eritrocitos lo que eritrocitos lo que eritrocitos lo que eritrocitos lo que O se une a los
bacteria
a los produce lisis produce lisis produce lisis produce lisis eritrocitos lo Streptococo
eritrocitos que produce
Pyogenes
lo que lisis
produce
lisis
Fig.-1

Fig.-2

TUBO1 TUBO2 TUBO3 TUBO 4 TUBO5 TUBO6 TUBO7


Reacción de
1:125 1:250 1:500 1:1000 1:2000 neutralización
Reacción de Reacción de Reacción de La estreptolisina O La estreptolisina O La
en contacto
neutralización neutralización en neutralización se une a los se une a los estreptolisina
con la
en contacto contacto con la en contacto eritrocitos lo que eritrocitos lo que O se une a los bacteria
con la bacteria con la bacteria produce lisis produce lisis eritrocitos lo
Streptococo
bacteria Streptococo Streptococo que produce
Pyogenes
Streptococo Pyogenes Pyogenes lisis
Pyogenes

 ANÁLISIS DE RESULTADOS

La estreptolisina O se une a los eritrocitos la cual produce hemolisis, y esto indica que
no ha estado en contacto con la bacteria Streptococo Pyogenes (Fig.-1, los tubos se
observan con sobrenadante rojo). Del mismo modo si se tiene antiestreptolisinas O,
en menor cantidad con la estreptolisina O, se da la reacción de neutralización pero no
en todas las estreptolisina O, por lo que se ve la lisis de los eritrocitos.
Los resultados que obtuvieron los equipos: 2, 3,6 y 7, en esta práctica, fue menor o
igual a 125 unidades Todd, no se determinó el título si lo hubo. La dilución 1:125, la
más concentrada no alcanza a neutralizar, la estreptolisina O, por lo que se piensa que
posiblemente sea un valor menor o igual a 125 unidades Todd.

Cuando el suero del paciente contiene anticuerpos (ASLO) y se tiene cantidades


proporcionales de estreptolisina O (Ag) se produce una reacción Ag-Ac y esta
neutraliza, y el eritrocito no se lisa, lo cual indica que ha estado en contacto con la
bacteria Streptococo Pyogenes (Fig.-2, los tubos se observan incoloros, tubos 1-3 y 7
no hay lisis de los eritrocitos).Para los resultados de la figura dos: el Titulo es de 500
unidades Todd. (Tubo3; último tubo reacción de neutralización). En este caso el
equipo 8 obtuvo 1000 unidades Todd, se piensa que estuvo la persona en contacto
reciente con la bacteria.

Títulos < a 200 . Contacto del individuo con el estreptococo en un período de 6 meses.
Títulos > a 500 . Contacto reciente con la bacteria en un período de 3 semanas.
Valores altos: indican infección estreptocócica recurrente o prolongada. Probable
fiebre reumática aguda o glomerulonefritis post estreptocóccica.

 CONCLUSIÓN

El examen por antiestreptolisinas O se basa en la capacidad de estos anticuerpos en


el suero del paciente, usado en distintas diluciones, para neutralizar una preparación
estandarizada de estreptolisina O, impidiendo su actividad hemolítica. El título es el
último tubo que muestra ausencia de hemolisis.

EL anticuerpo antiestreptolisina O (ASLO) se encuentra presente en casi todas las


personas en títulos bajos, debido a que las infecciones estreptocócicas son comunes.
Sin embargo un título alto o creciente de antiestreptolisina O, indica una infección
reciente por infecciones estreptococo β-hemolítico del grupo A, por lo que es
importante diagnosticarla. Se pudo determinar la prueba de anticuerpos
antiestreptolisinas O en una reacción de neutralización en el laboratorio y es una de
las pruebas de apoyo diagnostico cuando la sugieren en la historia y los signos
clínicos.

 BIBLIOGRAFÍA
 Stites D. Inmunología Básica y Clínica. 7ª ed. México: El Manual Moderno;
1993.
 Brooks G. Microbiología Médica. México: Editorial El Manual Moderno; 1999.
 Garibay A. Manual de prácticas de inmunología. 2006. Editorial Unison 2006.
 www.aeped.es/protocolos/ Fiebre reumatica y artritis postestreptococócica.
 Florentino s.la inmunologia en el diagnostico clinico.editorial Javeriano 1994.