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3.

NUTRICIÓN MICROBIANA

Ejercicio 4
Jueves 22 de Junio

1. Agar de MacConkey (MAC).

El Agar de MacConkey es un medio selectivo y diferencial; Es selectivo para las


bacterias Gram negativas y permite diferenciar las bacterias que tienen la capacidad
de fermentar la lactosa de otras que no lo pueden hacer.

Componentes Concentración Medio sin inocular


g/litro
Bacto peptona 17.0
Proteosa peptona 3.0
Lactosa 10.0
Mezcla de sales biliares 1.5
Cloruro de sodio 5.0
Agar 13.5
Rojo neutro 0.03
Cristal violeta 0.001

Peptona - una fuente de proteínas, aminoácidos para el crecimiento microbiano.

Sales biliares - Inhibe la mayoría de las bacterias Gram-positivas, excepto


Enterococcus y a bacterias Gram negativas que no son entéricas.

Lactosa - disacárido formado por glucosa y galactosa unidas por enlace beta
glucosídico, algunas bacterias pueden fermentar a la lactosa con formación de los
productos finales ácidos.

Cristal violeta - Inhibe ciertas bacterias Gram-positivas seleccionando así los Gram
negativos.
Rojo neutro - Indicador de pH

Problema - Si se inoculan muestras en el agar MacConkey, se obtienen las siguientes


colonias:

a. ¿Explique porque las colonias de la imagen tienen ese color?

b. En la siguiente imagen indique porque las colonias de Eschericia coli y Salmonella


son diferentes en el medio de MacConkey.
2. Agar Enterico Hektoen (HE).

HE Agar es un medio moderadamente selectivo utilizado en procedimientos cualitativos


para el aislamiento y cultivo de microorganismos entéricos gram-negativos,
especialmente Shigella y Salmonella de una variedad de especímenes clínicos y no
clínicos.

Componentes Concentración Medio sin inocular


g/litro
Proteosa pentona 12.0
Extracto de levadura 3.0
Sales biliares 9.0
Lactosa 12.0
Sacarosa 12.0
Salicina 2.0
Cloruro de sodio 5.0
Tiosulfato de sodio 5.0
Citrato férrico de 1.5
amonio
Agar 14.0
Azul de bromotimol 0.065
Fucsina ácida 0.1

Sales biliares - Inhibe la mayoría de las bacterias Gram-positivas, excepto


Enterococcus y a bacterias Gram negativas que no son entéricas.

Lactosa, sacarosa y salicina - proporcionan carbohidratos fermentables para


estimular el crecimiento y la diferenciación de los entéricos.

Tiosulfato de sodio - proporciona una fuente de azufre.

Citrato de amonio férrico - proporciona una fuente de hierro, la producción de sulfuro


de hidrógeno a partir de tiosulfato sódico se observa por la reacción de sulfuro de
hidrógeno con el hierro que producen un precipitado negro.

Azul de Bromotimol y colorantes ácidos de fuchsina - tienen una toxicidad menor


que la de muchos otros medios para microorganismos entéricos, dando como resultado
una mejor recuperación.
Problema - Si se inoculan muestras en el agar Hektoen, se obtienen las siguientes
colonias:

a. Se inoculó a Salmonella enterica var enteritidis. Explique a que se debe que las
colonias no cambien el color del medio y se observen con un punto negro al centro.
2. ¿Porqué las colonias de Escherichia coli cambian el color del medio y sus colonias
no presentan punto negro como las de Salmonella?