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BLOQUE III

OBJETIVO 9: Señalar los sistemas buffers más importantes para la regulación del pH
intracelular y extracelular.

SISTEMAS BUFFERS O AMORTIGUADORES

LIQ. EXTRACELULAR
Bicarbonato HCO3 - / H2CO3

LIQ. INTRACELULAR
Fosfato HPO4 = / H2PO4 –

En el líquido extracelular

Buffer Bicarbonato:
El bicarbonato es un tampón fundamental en el organismo y normalmente está presente
en los fluidos biológicos como bicarbonato sódico (siendo el sodio el principal ion
positivo en los fluidos extracelulares) Es el amortiguador más importante del plasma y
es también la primera línea de defensa del organismo cuando gana o pierde protones,
es un sistema muy eficaz debido a que: la producción de CO2 en tejidos es constante; La
relación HCO3 - / H2CO3 es muy alta (20/1), lo que le proporciona una alta capacidad
tampón frente a los ácidos; es un sistema abierto, con lo que el exceso de CO2 puede
ser eliminado por ventilación pulmonar de manera rápida, la concentración de H2CO3
se mantiene constante por la eliminación de CO2. Además, el HCO3 - puede ser
eliminado por los riñones mediante un sistema de intercambio con solutos.

En el líquido intracelular

Buffer Fosfato:
Se trata de un tampón inorgánico que se encuentra en los líquidos intracelulares y
mantiene el pH en torno al 6,86 debido al equilibrio existente entre un ácido débil; el
dihidrógeno fosfato (DHP) y su base: el monohidrógeno fosfato (MHP). Ambos
compuestos mantienen un equilibrio entre sí, pudiendo el DHP liberar un protón y
transformarse en MHP, (la reacción se desplaza hacia la derecha), y el MHP puede unirse
aun protón para originar una molécula de DHP, (la reacción se desplaza hacia la
izquierda).

H2PO4- ⇄ HPO4-2 + H+

Es decir, a pH fisiológico, las especies del fosfato con capacidad de tamponar


son H2PO4- y HPO4-2 ya que su valor de pK es de 6,8.
Así pues, para el tampón fosfato: pH = 6,8 + log HPO4-2 / H2PO4-
A pH fisiológico de 7,4 la concentración de HPO4-2 (un 80%) es 4 veces superior a la de
H2PO4- (un 20%). Así pues, el tampón fosfato es un sistema muy eficaz para amortiguar
ácidos.
La concentración de fosfato en la sangre es baja (2 mEq/L) por lo que tiene escasa
capacidad de tamponar si lo comparamos con otros tampones como el bicarbonato. En
cambio, a nivel intracelular, las concentraciones de fosfato son elevadas lo que le
convierte en un tampón eficiente. Las grandes cantidades de fosfato dentro de las
células corporales y en el hueso hacen que el fosfato sea un depósito grande y eficaz
para amortiguar el pH.

OBJETIVO 10. Comparar los sistemas que mantienen el equilibrio ácido-base del
organismo.
SISTEMA RESPIRATORIO.
Los pulmones constituyen la segunda línea de defensa contra los trastornos del
equilibrio acido-base, actúa en un rango de tiempo de minutos a horas. El mecanismo
de compensación pulmonar es rápido gracias a que la eliminación del CO2 proveniente
del H2CO3 se lleva cabo merced a la enzima anhidrasa carbonica. Esta enzima
intraeritocitaria es muy activa, la reacción que cataliza:

CO2 + H20 = H2CO3

es de tal magnitud que alcanza el equilibrio en menos de un segundo, menos del tiempo
que permanece en la sangre en el lecho capilar.
Cuando el pH de los líquidos cerebrales (LCR e intersticial) alcanza niveles cercanos a 7.2
los quimiorreceptores del bulbo raquídeo estimulan la ventilación pulmonar de tal
manera que se produce una marcada hiperventilación que es máxima cuando se alcanza
el valor de 7.0.
Si la concentración de H2CO3 en la sangre aumenta, se produce aumento en la pCC>2
con la consecuente estimación del centro respiratorio, lo que condiciona una
disminución de la pCO2 del aire alveolar.
Estos dos hechos tienden a llevar de nuevo la relación HCO-3/ CO2 a su valor normal de
20:1, con lo que el pH recupera el valor de 7.4.
SISTEMA RENAL.
Contribuye la tercera línea de defensa con un tiempo de respuesta de horas a días, es
de los mas lentos pero también es de los mas eficaces y completos. Son varios los
mecanismos por los cuales el riñón excreta H+ y retiene HCO-3 :
A – Reabsorción de bicarbonato. Del túbulo proximal depende la mayor parte de la
reabsorción de los 4500 mOsm que filtra el glomérulo. El H2CO3 formado se disocia en
HCO-3 y H+. El H+ es secretado hacia la luz tubular intercambiado por Na+ el cual
reabsorbe junto con el ion HCO-3.
B – Acidificación de la orina. Para que se excrete orina una ácida, los ácidos débiles como
el fosfato se eliminan bajo la forma de fosfato monosódico. En el liquido extracelular, a
pH 7.4 la relación HPO/H2PO4 es de 4:1, pero en la orina a un pH ácido (5.4), esta
relación se invierte y pasa a ser de 4:100. Es decir que la orina se eliminan grandes
cantidades de fosfato monosódico.
C – Producción de ion amonio. El amoniaco es una base débil que difunde libremente a
través de las membranas celulares y capta iones H para formar amonio NH4, este
amonio es difundible a través de las membranas celulares y su concentración depende
del pH de los compartimentos. Dos factores determinan la excreción de amonio; el
primero lo constituye el pH urinario. Conforme el pH de la orina disminuye, mas NH3 es
producido por el lumen tubular para formar NH4, el cual se elimina en la orina. El
segundo factor lo constituye la acidosis metabólica crónica que estimula la utilización
renal de glutamina, favorece la producción de NH3 y aumenta la excreción de NH4.

OBJETIVO 11: Analizar los resultados obtenidos en la parte A de su experimento.

CUADRO DE RESULTADOS
Tubos pH inicial pH final Observaciones
1 7 3 El pH disminuye
2 7 11 El pH aumenta
3 4 4 No hubo cambio
4 4 4 No hubo cambio

Se utilizaron 4 tubos, en el tubo Nº1 y 2 se agregó 9 ml de agua destilada, y en los tubos


Nº 3 y 4 se adicionó 4.5 ml de ácido acético 0.1 N y 4.5 ml de acetato de sodio 0.1 N. Al
tubo Nº 1 y 3 se agregó 1ml de HCl y a los tubos Nº 2 y 4 se les agregó 1ml de NaOH.
En el cuadro se muestran las variaciones de pH en las sustancias. Desde el punto
bioquímico esto se debe, al efecto que ejercen los sistemas buffers o tampones en la
regulación o mantenimiento del pH óptimo, en el caso del tubo Nº1 este contenía agua
destilada la cual carece de propiedades amortiguadores tiene un pH 7(neutro) por tal
razón que al agregar ácido clorhídrico, la solución aumenta su acidez ya que su
concentración de H+ aumenta, su pH disminuye. El tubo Nº 3 contenía una solución
buffer por tal razón no varió cuando se le adicionó el HCl. Al tubo Nº2 y 4 se les agregó
una base, en el primero, el resultado fue un cambio brusco de aumento de pH, y en el
segundo, no hubo cambio, o fue pequeño.
En conclusión al tener la concentración de un par amortiguador, si se le agrega un ácido
o una base fuerte, este reaccionará de manera que no se presenten cambios bruscos en
el pH original, siendo de importancia humana para evitar enfermedades por alteraciones
bioquímicas del cuerpo, tales como acidosis, alcalosis y diversos trastornos.
OBJETIVO 12: Explicar la acción de los amortiguadores mediante curvas de titulación
analizando dentro de qué valores de pH ejercerá un buffer su máxima acción
amortiguadora, si se conoce el valor de pKa del ácido que lo forma.
EFICACIA AMORTIGUADORA
Podemos definir la capacidad amortiguadora de un tampón como la cantidad de ácido
o base fuerte que puede neutralizar sufriendo un desplazamiento de pH de una unidad
(Figura de la derecha). Resulta evidente que la eficacia amortiguadora está vinculada a
dos factores:

 la concentración absoluta del sistema


 la proporción relativa de las formas disociada y sin disociar

Un sistema de acético y acetato concentrados (1M en cada componente, por ejemplo)


tendrá el mismo pH que el mismo sistema a concentración 0,01M (100 veces más
diluído). Sin embargo, la capacidad amortiguadora será mayor en el sistema más
concentrado. En efecto, si añadimos 0,1 moles de HCl al sistema 1M (cuyo pH es 4,76),
se transforman 0,1 moles de NaAc en HAc, y su pH baja a 4,67. En cambio, en el sistema
0,01M, la adición de HCl lo desborda por agotamiento del NaAc y queda HCl libre, lo que
provocará un fuerte descenso del pH.
La capacidad amortiguadora es máxima cuando el cociente sal/ácido es próximo a la
unidad (Figura de la derecha). Si tenemos 50 moléculas de acético y 50 de acetato, el pH
será igual al pK. A partir de este punto:
Si añadimos 41 moléculas de NaOH, después de reaccionar con el ácido habrá 91
moléculas de sal (50 + 41) y nueve de ácido (50 - 41). La relación sal/ácido ha pasado de
un valor 1 a un valor aproximado de 10, con lo cual, el pH habrá variado en una unidad
(pH=pK+1).
Si en este momento añadimos 8 moléculas de NaOH, reaccionaran con otras tantas de
acético, y tendremos un total de 99 moléculas de sal (91+8) y 1 molécula de ácido (9 -
8). La relación sal/ácido es aproximadamente de 100, y el pH=pK+2
Con una molécula más de NaOH se agota el sistema (100% sal) cualquier adición de
NaOH provocará grandes cambios en el pH
De modo análogo, se observa que partiendo de un valor sal/ácido de uno (pH=pK), al
añadir 41 moléculas de HCl se obtiene un pH = pK – 1 con 8 moléculas más, el pH = pK –
2. La siguiente molécula de HCl agotaría el sistema (100% ácido), cualquier adición de
HCl provocará grandes cambios en el pH
La eficacia máxima del amortiguador, tanto para neutralizar ácidos como bases está en
la zona de pH de mayor pendiente, que es la zona que abarca la flecha discontinua de la
figura superior:
El máximo de la curva de la eficacia del amortiguador frente a bases está en el punto
pH=pK-1/2. En este punto, la proporción de sal es del 24%, y hay que añadir un 52% de
NaOH para que que el pH suba a pK+1/2, donde el porcentaje de la base es del 76%
El máximo de la curva de la eficacia del amortiguador frente a ácidos está a pH=pK+1/2,
donde el % de la sal es del 76%, y admite un 52% de ácido para disminuir el pH en una
unidad (pH=pK-1/2), donde el porcentaje de la sal es del 24%
A medida que nos alejamos de esa zona, la capacidad amortiguadora decrece.

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