Vademecum Completo Espanol PDF

LINEA TURBITEST AA
α1-Antitrypsin
C Método inmunoturbidimétrico para la determinación
de α1-antitripsina en suero o plasma
SIGNIFICACION CLINICA si fueran capaces de transmitir infección.

La α1-antitripsina es una glicoproteína de 52 kDa, producida Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
en los hepatocitos, que integra la familia de inhibidores de las de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
serinproteasas. Es el inhibidor de proteasas más importante Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
del organismo. Constituye la mayor parte de la banda α1- acuerdo a la normativa local vigente.
globulina en la electroforesis de proteínas séricas.
Actúa como inhibidor de la función de enzimas como la ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
tripsina, quimotripsina, plasmina, trombina y colagenasa. Su ALMACENAMIENTO
función más importante, sin embargo, es la inhibición de la Reactivos Provistos: estables en refrigerador (2-10oC) has-
elastasa leucocitaria, una enzima que actúa a nivel de los ta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No congelar.
alvéolos pulmonares.
El déficit de α1-antitripsina es un trastorno genético bien MUESTRA
descripto que conduce a la formación de una cantidad menor Suero o plasma heparinizado
a la normal de la enzima. a) Recolección: obtener la muestra de la manera usual.
Los individuos con déficit hereditario de α1-antitripsina pre- b) Aditivos: en caso de que la muestra a utilizar sea plasma,
sentan una variedad de manifestaciones clínicas, siendo las se recomienda el uso de heparina como anticoagulante.
más frecuentes las respiratorias como enfisema y pérdida c) Sustancias interferentes conocidas: no emplear mues-
progresiva del pulmón. tras hemolizadas, lipémicas o contaminadas.
En otras oportunidades la deficiencia de esta glicoproteína se Las muestras que poseen precipitados deben ser centrifu-
manifiesta por trastornos hepáticos como hepatitis neonatal, gadas previo a su ensayo.
hepatitis crónica activa, cirrosis y carcinoma hepatocelular. No se observan interferencias por hemoglobina hasta 1100 mg/dl,
Por otra parte, se ha observado que la α1-antitripsina se bilirrubina hasta 24 mg/dl, triglicéridos hasta 2800 mg/dl, ni factor
encuentra aumentada en procesos inflamatorios agudos, reumatoide hasta 300 UI/ml.
por lo que se utiliza su cuantificación como marcador de Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
fase aguda de la inflamación. drogas en el presente método.
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
FUNDAMENTOS DEL METODO muestra debe ser preferentemente fresca. Si el ensayo no
La α1-antitripsina reacciona con el anticuerpo específico es realizado en el día, la muestra puede ser conservada 48
formando inmunocomplejos insolubles. La turbidez causada horas a 2-10ºC o por períodos más prolongados de tiempo
por estos inmunocomplejos es proporcional a la concentra- a -20oC.
ción de α1-antitripsina en la muestra y puede ser medida
espectrofotométricamente. MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
- Espectrofotómetro
REACTIVOS PROVISTOS - Cubetas espectrofotométricas de caras paralelas
A. Reactivo A: buffer fosfato, pH 7,4. - Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados
B. Reactivo B: anticuerpos policlonales anti-α1-antitripsina - Tubos de Kahn o hemólisis
humana (cabra) en buffer fosfato, pH 7,4. - Cronómetro
REACTIVOS NO PROVISTOS CONDICIONES DE REACCION

- Solución fisiológica. - Longitud de onda: 340 nm
- Calibrador Proteínas nivel alto Turbitest AA de Wiener lab. - Temperatura de reacción: temperatura ambiente (25oC). El
control de la temperatura no es crítico, pudiendo oscilar
INSTRUCCIONES PARA SU USO entre 22 y 30oC.
Reactivos Provistos: listos para usar. - Tiempo de reacción: 15 minutos
- Volumen de muestra: 30 ul
PRECAUCIONES - Volumen final de reacción: 1830 ul
Los reactivos son para uso diagnóstico “in vitro”. Los volúmenes de muestra y reactivos pueden variarse
Todas las muestras de pacientes deben manipularse como proporcionalmente, sin que se alteren los factores de cálculo.
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Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios
PROCEDIMIENTO valores de referencia.
CURVA DE CALIBRACION
Realizar en tubos de Kahn, las siguientes diluciones LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
en solución fisiológica del Calibrador Proteínas nivel Ver Sustancias Interferentes conocidas en MUESTRA.
alto: 1:10; 1:20; 1:40; 1:80; 1:160, empleando solución Se recomienda realizar una recalibración completa, cuando
fisiológica como punto cero. se cambia de lote de reactivo o cuando el control de calidad
así lo determina.
Calibrador Proteínas diluido 30 ul Para preservar la integridad de los reactivos debe evitarse
Reactivo A 1500 ul todo tipo de contaminaciones, empleando para la medición
Homogeneizar y leer la absorbancia de cada dilución únicamente micropipetas perfectamente limpias y secas.
a 340 nm (DO1) llevando a cero con agua destilada.
Luego agregar: PERFORMANCE
a) Reproducibilidad: realizando replicados de muestras con
Reactivo B 300 ul distintos niveles de a1-antitripsina, se calculó la precisión
Mezclar e incubar 15 minutos a temperatura ambiente. intraensayo:
Leer la absorbancia a 340 nm (DO2), llevando el aparato Nivel D.S. C.V.
a cero con agua destilada. 33,2 mg/dl ± 1,2 mg/dl 3,7%
Calcular la diferencia de absorbancia (∆A = DO2 - DO1) 133,7 mg/dl ± 2,3 mg/dl 1,7%
para cada dilución del Calibrador Proteínas, incluyendo 312,1 mg/dl ± 7,3 mg/dl 2,4%
el punto cero.
Representar en papel milimetrado las diferencias de ab- b) Límite de detección: 10 mg/dl
sorbancia (∆A) en función de la concentración en mg/dl c) Rango de medición: 40 - 370 mg/dl
(g/l) del Calibrador Proteínas. d) Efecto prozona: no se evidencia efecto prozona hasta
PROCEDIMIENTO PARA MUESTRAS 2000 mg/dl de α1-antitripsina.
Realizar una dilución 1:10 de las muestras en solución
fisiológica. PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS
Referirse a las adaptaciones específicas de cada analizador.
Muestra diluida 30 ul
Reactivo A 1500 ul PRESENTACION
60 ml: - 1 x 50 ml Reactivo A
Homogeneizar y leer la absorbancia de cada dilución - 1 x 10 ml Reactivo B
a 340 nm (DO1) llevando a cero con agua destilada. (Cód. 1009351)
Luego agregar:
Reactivo B 300 ul - 1 x 10 ml Reactivo B
Mezclar e incubar 15 minutos a temperatura ambiente. (Cód. 1009636)
Leer la absorbancia a 340 nm (DO2), llevando a cero con
agua destilada. BIBLIOGRAFIA
- Dati, F et al. - Proteins-Laboratory testing and clinical use,
2005.
CALCULO DE LOS RESULTADOS - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
Calcular la diferencia de absorbancia (∆A = DO2 - DO1) co- AACC Press, 5th ed., 2000.
rrespondiente a cada muestra analizada. Interpolar esta ∆A
en la curva de calibración para determinar la concentración
en mg/dl (g/l) correspondiente a la muestra estudiada.
Las muestras con absorbancias superiores a la del Calibra-
dor Proteínas nivel alto deben ser diluidas con solución
fisiológica y procesadas nuevamente. Multiplicar el resultado
obtenido por el factor de dilución.
METODO DE CONTROL DE CALIDAD

Se recomienda el uso de Control Inmunológico nivel 1 o
Control Inmunológico nivel 2 Turbitest AA de Wiener lab.
El control deberá procesarse de la misma manera que las muestras.
VALORES DE REFERENCIA
90 - 200 mg/dl (0,9 - 2,0 g/l)
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Símbolos
Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
C
Este producto cumple con los requerimientos
previstos por la Directiva Europea 98/79 CE de
productos sanitarios para el diagnóstico "in vitro"
M Elaborado por:
P Representante autorizado en la Comunidad

Europea Nocivo
V Uso diagnóstico "in vitro"

Corrosivo / Cáustico
X Contenido suficiente para <n> ensayos
Irritante
H Fecha de caducidad
i Consultar instrucciones de uso
l Límite de temperatura (conservar a)
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico
Volumen después de la reconstitución

b Control Positivo
Cont. Contenido c Control Negativo
g Número de lote h Número de catálogo
M Wiener Laboratorios S.A.I.C.

Riobamba 2944
2000 - Rosario - Argentina
Wiener lab.
http://www.wiener-lab.com.ar
Dir. Téc.: Viviana E. Cétola
Bioquímica
Producto Autorizado A.N.M.A.T.
PM-1102-57 2000 Rosario - Argentina
864103100 / 03 p. 3/6 UR130730
LINEA TURBITEST AA
α2-Macroglobulin
de α2-macroglobulina en suero o plasma
SIGNIFICACION CLINICA MUESTRA

La α2-macroglobulina es una glicoproteína, de síntesis Suero o plasma heparinizado
hepática, perteneciente al grupo de las proteínas inhibido- a) Recolección: obtener la muestra de la manera usual.
ras de proteasas. Inactiva una gran variedad de proteasas b) Aditivos: en caso de que la muestra a utilizar sea plasma,
incluyendo serinas, cisteínas y metalo-proteasas. se recomienda el uso de heparina como anticoagulante.
La α2-macroglobulina tiene un rol importante en la inacti- c) Sustancias interferentes conocidas: no emplear mues-
vación de plasmina una vez que se consumió la α2-anti- tras hemolizadas, lipémicas o contaminadas.
plasmina. Las muestras que poseen precipitados deben ser centrifu-
Se encuentran niveles marcadamente elevados de α2-ma- gadas previo a su ensayo.
croglobulina en individuos con síndrome nefrótico. No se observan interferencias por hemoglobina hasta 1100 mg/dl,
Niveles disminuidos se encuentran en pacientes con pan- triglicéridos hasta 2500 mg/dl, bilirrubina hasta 13 mg/dl ni factor
creatitis aguda severa, tumores hepáticos, coagulación reumatoide hasta 300 UI/ml.
intravascular diseminada, malnutrición y gastroenteropatías. Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
drogas en el presente método.
FUNDAMENTOS DEL METODO d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
La α2-macroglobulina reacciona con el anticuerpo espe- muestra debe ser preferentemente fresca. Si el ensayo no
cífico formando inmunocomplejos insolubles. La turbidez es realizado en el día, la muestra puede ser conservada 48
causada por estos inmunocomplejos es proporcional a la horas a 2-10oC o por períodos más prolongados de tiempo
concentración de albúmina en la muestra y puede ser medida a -20oC.
espectrofotométricamente.
MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
REACTIVOS PROVISTOS - Espectrofotómetro
A. Reactivo A: buffer fosfato, pH 7,4. - Cubetas espectrofotométricas de caras paralelas
B. Reactivo B: anticuerpos policlonales anti-α2-macro- - Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados
globulina humana (cabra) en buffer fosfato, pH 7,4. - Tubos de Kahn o hemólisis
- Cronómetro
REACTIVOS NO PROVISTOS
- Solución fisiológica. CONDICIONES DE REACCION
- Calibrador Proteínas nivel alto Turbitest AA de Wiener - Longitud de onda: 340 nm
lab. - Temperatura de reacción: temperatura ambiente (25oC). El
PRECAUCIONES - Volumen final de reacción: 1870 ul
Los reactivos son para uso diagnóstico “in vitro”. Los volúmenes de muestra y reactivos pueden variarse
Todas las muestras de pacientes deben manipularse como proporcionalmente, sin que se alteren los factores de cálculo.
si fueran capaces de transmitir infección.
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos. PROCEDIMIENTO
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de CURVA DE CALIBRACION
acuerdo a la normativa local vigente. Realizar en tubos de Kahn, las siguientes diluciones
en solución fisiológica del Calibrador Proteínas nivel
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE alto: 1:10; 1:20; 1:40; 1:80; 1:160, empleando solución
ALMACENAMIENTO fisiológica como punto cero.
Reactivos Provistos: estables en refrigerador (2-10oC) has-
Calibrador Proteínas diluido 70 ul
ta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No congelar.
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Para preservar la integridad de los reactivos debe evitarse
Reactivo A 1500 ul
todo tipo de contaminaciones, empleando para la medición
Homogeneizar y leer la absorbancia de cada dilución a únicamente micropipetas perfectamente limpias y secas.
340 nm (DO1) llevando a cero con agua destilada. Luego
agregar: PERFORMANCE
a) Reproducibilidad: realizando replicados de muestras
Reactivo B 300 ul
con distintos niveles de α2-macroglobulina se calculó la
Mezclar e incubar 15 minutos a temperatura ambiente. precisión intraensayo:
Leer la absorbancia a 340 nm (DO2), llevando a cero con Nivel D.S. C.V.
agua destilada. 44,3 mg/dl ± 2,1 mg/dl 4,8 %
Calcular la diferencia de absorbancia (∆A = DO2 - DO1) 173,5 mg/dl ± 3,3 mg/dl 1,9 %
para cada dilución del Calibrador Proteínas, incluyendo 401,8 mg/dl ± 21,3 mg/dl 5,3 %
el punto cero.
Representar en papel milimetrado las diferencias de b) Límite de detección: 10 mg/dl.
absorbancia (∆A) en función de la concentración en mg/dl c) Rango de medición: 10 - 460 mg/dl.
del Calibrador Proteínas. d) Efecto prozona: no se evidencia efecto prozona hasta
4660 mg/dl de AMG.
PROCEDIMIENTO PARA MUESTRAS
PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS
fisiológica.
PRESENTACION
Reactivo A 1500 ul 60 ml: - 1 x 50 ml Reactivo A
Homogeneizar y leer la absorbancia de cada dilución a - 1 x 10 ml Reactivo B
340 nm (DO1) llevando a cero con agua destilada. Luego (Cód. 1009352)
agregar:
Reactivo B 300 ul - 1 x 10 ml Reactivo B
(Cód. 1009637)
Mezclar e incubar 15 minutos a temperatura ambiente.
BIBLIOGRAFIA
agua destilada.
2005.
- Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
CALCULO DE LOS RESULTADOS
AACC Press, 5th ed., 2000.
Calcular la diferencia de absorbancia (∆A = DO2 - DO1) co-
- Tietz Textbook of Clinical Chemistry - Burtis, C.; Ashwood,
E. 5th Edition WB Saunders, 2001.
Las muestras con absorbancias superiores a la del Calibrador
Proteínas nivel alto deben ser diluidas con solución fisiológica
y procesadas nuevamente. Multiplicar el resultado obtenido
por el factor de dilución.

130 - 300 mg/dl (1,3 - 3,0 g/l)
valores de referencia.
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO

Ver Sustancias Interferentes conocidas en MUESTRA.
Se recomienda realizar una recalibración completa, cuando
se cambia de lote de reactivo o cuando el control de calidad
así lo determina.
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Símbolos
C
M Elaborado por:

Europea Nocivo

Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
864105300 / 03 p. 3/6 UR130730
Acid Solution
C Solución lavadora ácida para analizadores automáticos
APLICACIONES SIMBOLOS
Acid Solution es empleada en analizadores automáticos Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
para la limpieza de cubetas de lectura, agujas y circuitos reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
hidráulicos del instrumento.
C
Este producto cumple con los requerimientos previstos
por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios
REACTIVOS PROVISTOS para el diagnóstico "in vitro"
Acid Solution: solución de ácido clorhídrico 1 N.
P Representante autorizado en la Comunidad Europea
INSTRUCCIONES PARA SU USO
Acid Solution: listo para usar. También puede usarse V Uso diagnóstico "in vitro"
diluido siguiendo las indicaciones específicadas para cada
analizador.
PRECAUCIONES
El reactivo es para uso diagnóstico "in vitro". l Límite de temperatura (conservar a)
La solución es caústica. R36/38: irrita los ojos y la piel.
S24/25: evítese el contacto con los ojos y la piel. S26/28:  No congelar
en caso de contacto con la piel y los ojos, lávese inmedia-
tamente con abundante agua y acúdase a un médico. S37: F Riesgo biológico
usar guantes adecuados.
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales Volumen después de la reconstitución
de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
Cont. Contenido
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
acuerdo a la normativa local vigente. g Número de lote
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE M Elaborado por:

ALMACENAMIENTO
Acid Solution: estable a temperatura ambiente (< 25oC) Xn
Nocivo
hasta la fecha de vencimiento indicada en el envase.
Corrosivo / Caústico
NDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
REACTIVOS Xi
Irritante
La presencia de turbidez o partículas en suspensión es in-
dicio de deterioro del producto, en tal caso desechar. Evitar i Consultar instrucciones de uso
la contaminación con agentes externos.
Calibr. Calibrador
PRESENTACION
- 1 x 250 ml (Cód. 1999720) b Control
b Control Positivo
c Control Negativo
h Número de catálogo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
861281000 / 00 p. 1/2 UR100521
LINEA TURBITEST AA
C
AGP
Método inmunoturbidimétrico para la determinación
de α-1-glicoproteína ácida (AGP/orosomucoide)
SIGNIFICACION CLINICA triglicéridos hasta 25 g/l ni hemoglobina hasta 1 g/dl.

La proteína sérica α-1-glicoproteína ácida (AGP), también Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
llamada orosomucoide, es un reactante de fase aguda tem- drogas en el presente método.
prana. La determinación cuantitativa de AGP está centrada d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
en el monitoreo de recurrencia de tumores. muestra debe ser preferentemente fresca. Si el ensayo no
puede ser realizado en el mismo día la muestra puede ser
FUNDAMENTOS DEL METODO conservada 1 semana en refrigerador (2-10oC). En caso
La α-1-glicoproteína ácida reacciona con el anticuerpo es- que se deba procesar en un período más largo de tiempo,
pecífico formando inmunocomplejos insolubles. La turbidez conservarla a -20oC.
provocada por estos inmunocomplejos es proporcional a
la concentración de AGP en la muestra y puede medirse MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
espectrofotométricamente. - Espectrofotómetro.
- Cubetas espectrofotométricas de caras paralelas.
REACTIVOS PROVISTOS - Micropipetas y pipetas capaces de medir los volúmenes
A. Reactivo A: solución fisiológica tamponada, pH 7,5. indicados.
B. Reactivo B: anticuerpo monoespecífico anti-α-1-glicopro- - Tubos de Kahn o hemólisis.
teína ácida. - Reloj o timer.

- Solución fisiológica. - Longitud de onda: 340 nm
- Calibrador Proteínas nivel alto Turbitest AA de Wiener - Temperatura de reacción: temperatura ambiente (25oC). El
lab. control de la temperatura no es crítico, pudiendo oscilar
entre 22 y 30oC.
INSTRUCCIONES PARA SU USO - Tiempo de reacción: 30 minutos
Reactivos Provistos: listos para usar.
PRECAUCIONES PROCEDIMIENTO
Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
Todas las muestras de pacientes deben manipularse como
Realizar en tubos de Kahn, las siguientes diluciones en
solución fisiológica del Calibrador Proteínas nivel alto:
1:10, 1:20, 1:40, 1:80 y 1:160, empleando solución fisio-
de trabajo en el laboratorio de química clínica.
lógica como punto cero.
acuerdo a la normativa local vigente. Calibrador Proteínas diluido 80 ul
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE Reactivo A 800 ul

ALMACENAMIENTO Homogeneizar y leer la absorbancia de cada dilución
Reactivos Provistos: estables en refrigerador (2-10oC) has- a 340 nm (DO1) llevando el aparato a cero con agua
ta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No congelar. destilada. Luego agregar:
MUESTRA Reactivo B 120 ul

Suero o plasma heparinizado Mezclar e incubar 30 minutos a temperatura ambiente.
a) Recolección: obtener la muestra de la manera usual. Leer la absorbancia a 340 nm (DO2), llevando el aparato
b) Aditivos: en caso de que la muestra sea plasma, se a cero con agua destilada.
recomienda el uso de heparina como anticoagulante. Calcular la diferencia de absorbancia (∆A = DO2 - DO1)
c) Sustancias interferentes conocidas: no emplear sueros para cada dilución del Calibrador Proteínas, incluyendo
hemolizados o contaminados. el punto cero.
No se observan interferencias por bilirrubina hasta 20 mg/dl,
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b) Rango dinámico: se pueden obtener valores entre la
Representar en papel milimetrado las diferencias de concentración de calibrador más baja y más alta de la curva
absorbancia ∆A en función de la concentración en mg/dl de calibración (alrededor de 250 mg/dl).
(g/l) del Calibrador Proteínas. c) Límite de detección: la mínima concentración cuantifi-
PROCEDIMIENTO PARA MUESTRAS cable de AGP es 4 mg/dl.
Realizar diluciones 1:10 de las Muestras en solución
fisiológica. PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS
Para las instrucciones de programación consulte el manual
Muestra diluida 80 ul del usuario del analizador en uso.
Para la calibración, se debe utilizar Calibrador Proteínas
Reactivo A 800 ul
nivel alto Turbitest AA de Wiener lab.
Homogeneizar y leer la absorbancia a 340 nm (DO1)
llevando el aparato a cero con agua destilada. Luego PRESENTACION
agregar: 1 x 60 ml Reactivo A
1 x 5 ml Reactivo B
Reactivo B 120 ul (Cód. 1413261)
1 x 60 ml Reactivo A
Leer la absorbancia a 340 nm (DO2), llevando el aparato
1 x 5 ml Reactivo B
a cero con agua destilada.
(Cód. 1009341)
CALCULO DE LOS RESULTADOS 1 x 5 ml Reactivo B
Calcular la diferencia de absorbancia (∆A = DO2 - DO1) co- (Cód. 1009214)
en la curva de calibración para determinar la concentración 1 x 60 ml Reactivo A
en mg/dl (g/l) correspondiente a la muestra estudiada. 1 x 5 ml Reactivo B
Las muestras con absorbancias superiores a la del Calibra- (Cód. 1009638)
dor Proteínas nivel alto deben ser diluidas 1:2 con solución
fisiológica y procesadas nuevamente. Multiplicar el resultado BIBLIOGRAFIA
obtenido por dos. - Ichihara, K. et al - J. Clin. Lab. Anal. 10:110 (1996).
- Itoh, Y. et al - J. Clin. Lab. Anal. 11:39 (1997).
METODO DE CONTROL DE CALIDAD - Maynard, Y. et al - Clin. Chem. 32/5:752 (1986).
Control Inmunológico nivel 1 o Control Inmunológico - Dati, F - Journal of IFCC VIII/1:29 (1996).
nivel 2 Turbitest AA de Wiener lab. El Control es procesado - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
de la misma manera que las muestras. AACC Press, 4th ed., 2001.
50 - 120 mg/dl (0,50 - 1,20 g/l).
Cada laboratorio debe establecer sus propios valores de
referencia.
CONVERSION DE UNIDADES AL SISTEMA SI

AGP (mg/dl) x 0,2439 = AGP (umol/l)

La turbiedad y partículas en las muestras pueden interferir
con la prueba. Por lo tanto, las partículas que puedan resultar
de una coagulación incompleta o de una desnaturalización
de las proteínas, deben ser removidas por centrifugación
antes de proceder a su ensayo.
PERFORMANCE
a) Reproducibilidad: procesando simultáneamente 20
replicados de una misma muestra, se obtiene:
Nivel D.S. C.V.
27,9 mg/dl ± 1,30 mg/dl 4,66 %
71,2 mg/dl ± 0,81 mg/dl 1,14 %
149,8 mg/dl ± 3,67 mg/dl 2,45 %
870010000 / 03 p. 2/6
Símbolos
C
M Elaborado por:

Europea Nocivo

Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
Cert. Nº: 3011/98 2000 Rosario - Argentina
870010000 / 03 p. 3/6 UR120903
Albúmina
C Método colorimétrico para la determinación de
AA
albúmina en suero

Las proteínas son compuestos orgánicos macromoleculares, Suero
ampliamente distribuidos en el organismo. La albúmina es el a) Recolección: debe obtenerse suero libre de hemólisis.
principal contribuyente de las proteínas totales plasmáticas. b) Aditivos: no se requieren.
Entre sus múltiples funciones se pueden mencionar: c) Sustancias interferentes conocidas: no se observan
- transporte de una amplia variedad de sustancias como interferencias por bilirrubina hasta 200 mg/l, triglicéridos
hormonas esteroides, ácidos grasos, bilirrubina, catecola- hasta 9 g/l y hemoglobina hasta 700 mg/dl.
minas, que en forma libre son insolubles en medio acuoso; Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
- mantenimiento de la presión coloidosmótica, que estaría re- drogas en el presente método.
lacionado con su bajo peso molecular y su gran carga neta. d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: si no
Los aumentos anormales de albúmina son ocasionales y se se procesa inmediatamente el suero puede conservarse 3
relacionan casi siempre con la deshidratación que provoca días en refrigerador (2-10oC) o una semana en congelador (-4oC).
la reducción en el contenido del agua plasmática.
La hipoalbuminemia ocurre en condiciones patológicas tales MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
como pérdida excesiva de proteínas en el síndrome nefrótico, - Espectrofotómetro o fotocolorímetro.
desnutrición, infecciones prolongadas, quemaduras severas. - Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados.
Otras causas son disminución en la síntesis por una dieta - Tubos o cubetas espectrofotométricas de caras paralelas.
deficiente, enfermedad hepática o malabsorción. - Reloj o timer.
FUNDAMENTOS DEL METODO CONDICIONES DE REACCION

La albúmina reacciona específicamente (sin separación - Longitud de onda: 625 nm en espectrofotómetro o en
previa) con la forma aniónica de la 3,3',5,5'-tetrabromo fotocolorímetro con filtro rojo (620-650 nm)
cresolsulfon ftaleína (BCG). El aumento de absorbancia a - Temperatura de reacción: 15-28oC
625 nm respecto del Blanco de reactivo, es proporcional a - Tiempo de reacción: 10 minutos
la cantidad de albúmina presente en la muestra. - Volumen de muestra: 10 ul
- Volumen de Reactivo A: 2,5 ml
REACTIVOS PROVISTOS - Volumen final de reacción: 2,51 ml
A. Reactivo A: solución de BCG 0,3 mmol/l, buffer acetato
0,1 mol/l y polioxietilén lauril éter 0,9 g/l.
PROCEDIMIENTO
En tres tubos marcados B (Blanco), S (Standard) y D
(Desconocido), colocar:
Calibrador A plus / Proti 2 Suero Patrón de Wiener lab.
B S D
Reactivo Provisto: listo para usar. Calibrador / Suero Patrón - 10 ul -
Muestra - - 10 ul
PRECAUCIONES
El reactivo es para uso diagnóstico "in vitro". Reactivo A 2,5 ml 2,5 ml 2,5 ml
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales Mezclar con varilla. Mantener los tubos entre 15 y 28oC
de trabajo en el laboratorio de química clínica. durante 10 minutos. Leer en espectrofotómetro a 625 nm
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de o en fotocolorímetro con filtro rojo (620-650 nm) llevando
acuerdo a la normativa local vigente. a cero con el Blanco de Reactivo.
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
ALMACENAMIENTO ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL
Reactivo Provisto: es estable a temperatura ambiente hasta El color es estable 20 minutos por lo que la absorbancia
la fecha de vencimiento indicada en la caja. debe ser leída dentro de ese lapso.
864119022 / 02 p. 1/9
CALCULO DE LOS RESULTADOS basado en el mismo principio, obteniéndose el siguiente
Albúmina (g/dl)* coeficiente de correlación:
Albúmina (g/dl) = D x f f= r = 0.9942, pendiente b = 0,9933, intersección a = 0,0999
S
*Concentración de albúmina en el Calibrador A plus o en PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS
el Suero Patrón Para las instrucciones de programación consulte el manual
del usuario del analizador en uso.
Albúmina (g/dl) Para la calibración, se puede utilizar Calibrador A plus de
Relación A/G =
Prot. tot. (g/dl) - Alb. (g/dl) Wiener lab.
METODO DE CONTROL DE CALIDAD PRESENTACION

Procesar 2 niveles de un material de control de calidad - 6 x 60 ml (Cód. 1009300).
(Standatrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas - 6 x 60 ml (Cód. 1009601).
de albúmina, con cada determinación. - 6 x 120 ml (Cód. 1690008).
- 8 x 50 ml (Cód. 1009240).
Se determinó el contenido de albúmina en suero de personas BIBLIOGRAFIA
sanas, de ambos sexos, con alimentación mixta normal y - Doumas, B.T.; Watson, W.A. & Biggs, H.G. - Clin. Chim.
edades entre 17 y 40 años. Acta 31/1:87 (1971).
Se obtuvieron los siguientes rangos: - Pastewka, J.W. & Ness, A.T. - Clin. Chim. Acta 12:523
Albúmina: 3,5 a 4,8 g/dl (1965).
Relación A/G: 1,2 a 2,2 - Rodkey, F.L. - Clin. Chem. 11/4:478 (1965).
Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios - Watson, D. & Nankiville D.D. - Clin. Chim. Acta 9/4:359
valores de referencia. (1964).
- Kachmar, J.F. - “Fundamentals of Clinical Chemistry”. Tietz,
CONVERSION DE UNIDADES AL SISTEMA SI Saunders, pág. 210 (1970).
Albúmina (g/dl) x 10 = Albúmina (g/l) - Rojkín, M.L.; Olguín de Mariani, M.C.; Drappo, G.A. y Sosa,
C.F. - Bioq. Clin. VIII/4:241 (1974).
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA. AACC Press, 4th ed., 2001.
- Webster, D.- Clin. Chim. Acta 53/1:109 (1974).
PERFORMANCE - NCCLS document "Evaluation of Precision Performance of
Los ensayos fueron realizados en analizador automático Clinical Chemistry Devices", EP5-A (1999).
Express Plus(*).
a) Reproducibilidad: procesando de acuerdo al documento
EP5A del NCCLS (National Committee on Clinical Laboratory
Standards), se obtuvo lo siguiente:
Precisión intraensayo (n = 20)
Nivel D.S. C.V.
3,47 g/dl ± 0,073 g/dl 2,10 %
2,70 g/dl ± 0,067 g/dl 2,48 %
5,23 g/dl ± 0,117 g/dl 2,23 %
Precisión total (n = 20)

Nivel D.S. C.V.
3,43 g/dl ± 0,137 g/dl 3,99 %
2,80 g/dl ± 0,100 g/dl 3,57 %
b) Recuperación: agregando cantidades conocidas de
albúmina a distintas muestras se obtuvo una recuperación
entre 98 y 100 %.
c) Límite de detección: depende del fotómetro empleado
y de la longitud de onda. De acuerdo con la sensibilidad
requerida para un ∆A mínimo de 0,001, el menor cambio de
concentración detectable será de 0,01 g/dl.
d) Linealidad: la reacción es lineal hasta 7 g/dl.
e) Correlación: se determinó el valor de albúmina en 123
muestras con Albúmina AA de Wiener lab. y un kit comercial
(*)
Marca registrada de Ciba Corning Diagnostics 864119022 / 02 p. 2/9
Símbolos
C
M Elaborado por:

Europea Nocivo

Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
864119022 / 02 p. 3/9 UR1200830
Albúmina Bovina 30%
Reactivo auxiliar para la determinación de grupos
sanguíneos
APLICACIONES
- Estudios de dadores y pacientes antes de una transfusión PROCEDIMIENTO
de sangre. Existen diversos métodos serológicos de determinación
- Pruebas perinatales como las que se llevan a cabo ante una de grupos sanguíneos en los que se utiliza albúmina,
posible enfermedad hemolítica del recién nacido. cualquiera de los cuales puede ser empleado.
- Determinación del fenotipo de la mayoría de los grupos En particular, el siguiente resulta recomendable:
sanguíneos en los que se utilicen anticuerpos incompletos. 1- Agregar a un tubo de hemólisis 1 gota de suspensión
- Investigación serológica de anemia hemolítica autoinmune. al 5% en solución fisiológica de glóbulos rojos lavados.
2- Centrifugar 20 segundos a 3.500 rpm y descartar el
FUNDAMENTOS DEL METODO sobrenadante.
Los anticuerpos completos aglutinan los glóbulos rojos al 3- Agregar 4 gotas de suero a probar al botón de gló
unirse a sus antígenos específicos, mientras que los anti bulos rojos.
cuerpos incompletos no pueden producir esta aglutinación. 4- Mezclar perfectamente e incubar a 37oC durante 60
La Albúmina Bovina 30% se emplea en estos casos co minutos.
mo agente potenciador, que permite que se evidencien las 5- Agregar 2 gotas de Albúmina Bovina 30%.
aglutinaciones. 6- Incubar nuevamente el tubo durante 30 minutos a
37oC.
REACTIVO PROVISTO 7- Resuspender las células y observar macroscópica
Albúmina Bovina 30%: solución de albúmina sérica bovi mente si se produjo aglutinación.
na al 30%.
REACTIVOS NO PROVISTOS PRESENTACION

Reactivos para la determinación de grupos sanguíneos. - 1 x 10 ml (Cód. 1443151).
INSTRUCCIONES PARA SU USO BIBLIOGRAFIA

Albúmina Bovina 30%: lista para usar. - American Association of Blood Banks - “Technical Manual”
- Seventh Edition. Lippincott Company, 1977.
PRECAUCIONES
El reactivo es para uso diagnóstico "in vitro".
acuerdo a la normativa local vigente.
ALMACENAMIENTO
El Reactivo Provisto es estable en refrigerador (2-10oC) hasta
la fecha de vencimiento indicada en la caja.
INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS

REACTIVOS
Desechar el reactivo si se observa contaminación del mismo.

- Centrífuga
- Baño de agua a 37oC
- Tubos de hemólisis
870020000 / 01 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:

Europea Nocivo

Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
Disp. Nº: 1075/89 2000 Rosario - Argentina
870020000 / 01 p. 2/4 UR110519
LINEA LIQUIDA
ALP 405
C Método cinético optimizado (DGKC y SSCC) a 405 nm,
AA
para la determinación de fosfatasa alcalina
SIGNIFICACION CLINICA Reactivo A con 1 parte de Reactivo B (ej.: 4 ml Reactivo A

La fosfatasa alcalina es una enzima ampliamente distribuida + 1 ml Reactivo B).
en el organismo. Hidroliza los monoésteres del ácido orto-
fosfórico en medio alcalino. INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
En el adulto proviene en parte del hígado (fracción termoesta- REACTIVOS
ble) y en parte del hueso, sistema reticuloendotelial y vascu- Cuando el espectrofotómetro es llevado a cero con agua
lar (fracción termolábil), dando lugar a distintas isoenzimas. destilada, lecturas de absorbancia del Reactivo único (pre-
La actividad sérica de fosfatasa alcalina ósea, en condi- mezclado) superiores a 0.900 D.O. son indicio de deterioro
ciones normales, alcanza su mayor actividad en los niños del mismo.
en edad de crecimiento (llegando a triplicar los niveles
del adulto) debido a que esta isoenzima se localiza en los PRECAUCIONES
osteoblastos (relacionados con la calcificación y formación Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
de estructuras óseas). También es fisiológico el aumento Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
que se produce al final del primer trimestre del embarazo, a de trabajo en el laboratorio de química clínica.
expensas de la isoenzima placentaria que en este período Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
alcanza niveles máximos (aproximadamente el doble de los acuerdo a la normativa local vigente.
valores normales).
Entre las patologías que afectan la actividad sérica de fos- ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
fatasa alcalina, se pueden citar: carcinomas metastásicos ALMACENAMIENTO
en hígado y en hueso (productores de enzima), colestasis Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10oC)
biliar, fenómenos osteoblásticos, trastornos de malabsorción hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. Una vez
acompañados de lesiones ulcerosas (donde la deficiencia abiertos, no deben permanecer destapados y fuera del refri-
de vitamina D produce osteomalacia con el consecuente gerador por períodos prolongados. Evitar contaminaciones.
aumento de fosfatasa alcalina ósea) e incluso lesiones en Reactivo único (premezclado): estable 1 mes en refrigera-
vías de reparación tales como infarto agudo de miocardio, dor (2-10oC) a partir de la fecha de su preparación.
infarto pulmonar o renal.
MUESTRA
FUNDAMENTOS DEL METODO Suero o plasma heparinizado
La fosfatasa alcalina (ALP o monoéster ortofosfórico fosfohi- a) Recolección: se debe obtener suero de la manera usual.
drolasa, EC. 3.1.3.1.) hidroliza al p-nitrofenilfosfato (p-NFF), b) Aditivos: en caso de que la muestra a emplear sea plas-
que es incoloro, produciendo fosfato y p-nitrofenol a pH ma, debe usarse heparina como anticoagulante.
alcalino. La velocidad de aparición del anión p-nitrofenolato c) Sustancias interferentes conocidas:
(amarillo) a 405 nm, es proporcional a la actividad enzimática - No se observan interferencias por bilirrubina hasta 16 mg/dl,
de la muestra. lípidos hasta 1000 mg/dl de triglicéridos, ni heparina hasta
50 UI/ml.
REACTIVOS PROVISTOS - Hemólisis moderadas (hasta 200 mg/dl) no producen in-
A. Reactivo A: solución de buffer DEA (dietanolamina), terferencias pero hemólisis muy intensas pueden producir
conteniendo sales de magnesio. variaciones en los resultados.
B. Reactivo B: solución conteniendo p-nitrofenil fosfato Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
(p-NFF). drogas en el presente método.
Concentraciones finales d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento:
DEA........................................................................ 1,0 mol/l emplear suero preferentemente fresco. En caso de no
Mg....................................................................... 0,5 mmol/l efectuarse el ensayo dentro de las 6 horas posteriores a su
p-NFF................................................................... 10 mmol/l obtención, la muestra debe conservarse congelada (-20ºC).
INSTRUCCIONES PARA SU USO MATERIAL REQUERIDO (no provisto)

Reactivos Provistos: listos para usar. Estos pueden usarse - Espectrofotómetro.
separados o como Reactivo único, mezclando 4 partes de - Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados.
864119522 / 02 p. 1/9
- Cubetas espectrofotométricas de caras paralelas. METODO DE CONTROL DE CALIDAD
- Baño de agua a la temperatura de reacción seleccionada. Procesar 2 niveles de un material de control de calidad
- Cronómetro. (Standatrol S-E 2 niveles) con actividades conocidas de
fosfatasa alcalina, con cada determinación.
CONDICIONES DE REACCION
- Longitud de onda: 405 nm VALORES DE REFERENCIA
- Temperatura de reacción: 25, 30 ó 37oC. Ver los VALORES En adultos normales (edades entre 20 y 60 años) se obser-
DE REFERENCIA correspondientes a cada temperatura. van los siguientes rangos:
- Tiempo de reacción: 3 minutos y 20 segundos
- Volumen de muestra: 10 ul Temperatura 25oC 30oC 37oC
Los volúmenes de muestra y de Reactivo pueden variarse Valores en
proporcionalmente, sin que se alteren los factores de cálculo. adultos (U/l) 40-190 45-213 65-300
Debido al proceso osteoclástico, la isoenzima ósea se en-

PROCEDIMIENTO I cuentra aumentada en la niñez y adolescencia (hasta los 18
años, aproximadamente) proporcionando valores de fosfata-
TECNICA CON REACTIVO UNICO
sa alcalina más elevados que en los adultos. En condiciones
En una cubeta mantenida a la temperatura de reacción
normales se consideran los siguientes valores límites:
seleccionada colocar:
Temperatura 25oC 30oC 37oC
Reactivo único 1,0 ml
Preincubar unos minutos. Luego agregar: Valores en niños y
adolescentes (U/l) hasta 400 hasta 450 hasta 645
Muestra 10 ul
La IFCC recomienda que cada laboratorio establezca sus
Mezclar inmediatamente y disparar simultáneamente el
propios valores de referencia eligiendo grupos de personas
cronómetro. Esperar 20 segundos y leer la absorbancia
en base a criterios establecidos, acorde con el contexto de
inicial. Registrar la absorbancia luego de 1, 2 y 3 minutos
su población.
de la primera lectura. Determinar la diferencia promedio
de Absorbancia/min (∆A/min), restando cada lectura de la
anterior y promediando los valores. Utilizar este promedio
ALP (U/l) x 0,017 = ALP (ukat/l)
para los cálculos.
Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
Los anticoagulantes comunes (tales como EDTA disódico,
Fosfatasa alcalina (U/l) a 405 nm = ∆A/min x 5.460
oxalato, citrato o fluoruro) producen inhibición de la actividad
de fosfatasa alcalina.
El reactivo puede colorearse en presencia de trazas de
PROCEDIMIENTO II
soluciones de limpieza a base de hipoclorito. Asegurarse
TECNICA CON REACTIVOS SEPARADOS de enjuagar abundantemente con agua desmineralizada
En una cubeta mantenida a la temperatura de reacción todo el material que pueda estar en contacto con hipoclorito,
seleccionada colocar: incluyendo las agujas y conexiones de los analizadores,
cuando se emplea la técnica automática.
Reactivo A 1,0 ml
Muestra 10 ul PERFORMANCE
Preincubar unos minutos. Luego agregar: Los ensayos fueron realizados en analizador Express Plus(*)
Reactivo B 0,25 ml EP15-A del CLSI (ex-NCCLS), se obtuvo lo siguiente:
Mezclar inmediatamente y disparar simultáneamente el Precisión intraensayo
cronómetro. Esperar 20 segundos y leer la absorbancia
Nivel D.S. C.V.
inicial. Registrar la absorbancia luego de 1, 2 y 3 minutos
119 U/l ± 2,6 U/l 2,2 %
de la primera lectura. Determinar la diferencia promedio
347 U/l ± 2,6 U/l 0,7 %
de Absorbancia/min (∆A/min), restando cada lectura de la
anterior y promediando los valores. Utilizar este promedio Precisión total
para los cálculos. Nivel D.S. C.V.
119 U/l ± 2,9 U/l 2,4 %
347 U/l ± 3,2 U/l 0,9 %
Fosfatasa alcalina (U/l) a 405 nm = ∆A/min x 6.812 b) Linealidad: la reacción es lineal hasta 1.500 U/l. Para
(*)
valores superiores debe repetirse la determinación, previa SIMBOLOS
dilución del suero 1/5 ó 1/10 con solución fisiológica. Corregir Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
los cálculos multiplicando por el factor de dilución empleado. reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
c) Límite de detección: el mínimo cambio de actividad de- Este producto cumple con los requerimientos previstos
tectable de ALP que puede distinguirse de cero es de 18 U/l.
C por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios
para el diagnóstico "in vitro"
Para las instrucciones de programación consulte el manual P Representante autorizado en la Comunidad Europea
PRESENTACION
Equipo para 100 ml conteniendo:
- 4 x 20 ml Reactivo A Fecha de caducidad
- 1 x 20 ml Reactivo B H
(Cód. 1361402)
- 5 x 20 ml Reactivo A  No congelar
- 2 x 12,5 ml Reactivo B
F Riesgo biológico
(Cód. 1009301)
Equipo para 100 ml conteniendo: Volumen después de la reconstitución
- 4 x 20 ml Reactivo A
- 1 x 20 ml Reactivo B Cont. Contenido
(Cód. 1009241)
g Número de lote
- 4 x 40 ml Reactivo A M Elaborado por:
- 1 x 40 ml Reactivo B
(Cód. 1361403) Nocivo

Irritante
(Cód. 1009602)

BIBLIOGRAFIA
- Bessey, O.A. ; Lowry, O.H. y Brock, M. . - J. Biol. Chem. Calibr. Calibrador
164, 231 (1946).
- Bowers, G.N. Jr. and Mc Comb, R.B. - Clin. Chem. 12:70
(1966).
b Control
- Mc Comb, R.B.; Bowers, G.N. Jr - Clin. Chem. 18/2:97 (1972). b Control Positivo
- D.G.K.C. - Z. Clin. Chem. u. Klin. Biochem. 8: 658 (1970);
9: 464 (1971); 10: 182 (1972). c Control Negativo
- S.S.C.C. - Scand. J. Clin. Lab. Invest. 33/4:291 (1974).
- I.F.C.C. - Clin. Chem. 22/3: 384 (1976). h Número de catálogo
- International Union of Biochemistry Nomenclature Commit-
tee - Clin. Chim. Acta 96/1-2: 157 (1979).
- Young, D.S. - Clin. Chem. 21/5: 246 D (1975).
- I.F.C.C. - Clin. Chim. Acta 87/3: 459F (1978).
- Demaría, I.; Setta, F.; Lorenzo, L. - Rev. Asoc. Bioq. Arg. 54/3 (1990).
- Schlebusch, H.; Rick, W.; Lang, H. and Knedel, M. - Dtsch.
Med. Wschr. 99:765 (1974).
- Rick, W. - Klinische Chemie und Mikroskopie, p.294, 6th
ed., Springer Verlag, Berlin (1990).
- NCCLS document "Evaluation of Precision Performance of M Wiener Laboratorios S.A.I.C.
Clinical Chemistry Devices", EP5-A (1999). Riobamba 2944
- NCCLS document "Evaluation of Linearity of Quantitative http://www.wiener-lab.com.ar
Analytical Methods", EP5-A (1986). Dir. Téc.: Viviana E. Cétola
Bioquímica
Cert. Nº: 4386/01
Wiener lab.
2000 Rosario - Argentina
864119522 / 02 p. 3/9 UR120830
ALP 405
C cinética optimizada
Para la determinación de fosfatasa alcalina. DGKC y SSCC
SIGNIFICACION CLINICA INSTRUCCIONES PARA SU USO

La fosfatasa alcalina es una enzima ampliamente distribuida Reactivo A: disolver un comprimido de Reactivo A con 2,5 ml
en el organismo. Hidroliza los monoésteres del ácido orto- de Reactivo B. Agitar hasta disolución completa.
fosfórico en medio alcalino. Reactivo B: listo para usar. Tapar inmediatamente después
En el adulto proviene en parte del hígado (fracción ter- de usar.
moestable) y en parte del hueso, sistema reticuloendotelial
y vascular (fracción termolábil), dando lugar a distintas INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
isoenzimas. REACTIVOS
La actividad sérica de fosfatasa alcalina ósea, en condi- Cuando el espectrofotómetro ha sido llevado a cero con
ciones normales, alcanza su mayor actividad en los niños agua destilada, lecturas de absorbancia del Reactivo A
en edad de crecimiento (llegando a triplicar los niveles reconstituido mayores a 0,700 D.O. son indicio de deterioro
del adulto) debido a que esta isoenzima se localiza en los del mismo.
osteoblastos (relacionados con la calcificación y formación
de estructuras óseas). También es fisiológico el aumento PRECAUCIONES
que se produce al final del primer trimestre del embarazo, a Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
expensas de la isoenzima placentaria que en este período Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
alcanza niveles máximos (aproximadamente el doble de los de trabajo en el laboratorio de química clínica.
valores normales). Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
Entre las patologías que afectan la actividad sérica de fos- acuerdo a la normativa local vigente.
fatasa alcalina, se pueden citar: carcinomas metastásicos
en hígado y en hueso (productores de enzima), colestasis ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
biliar, fenómenos osteoblásticos, trastornos de malabsorción ALMACENAMIENTO
acompañados de lesiones ulcerosas (donde la deficiencia Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10oC)
de vitamina D produce osteomalacia con el consecuente hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
aumento de fosfatasa alcalina ósea) e incluso lesiones en Reactivo A reconstituido: estable una semana en refrige-
vías de reparación tales como infarto agudo de miocardio, rador (2-10oC), a partir del momento de su reconstitución.
MUESTRA
FUNDAMENTOS DEL METODO Suero
La fosfatasa alcalina (ALP o monoéster ortofosfórico fosfohi- a) Recolección: se debe obtener suero de la manera usual.
drolasa, EC. 3.1.3.1.) hidroliza al p-nitrofenilfosfato (p-NFF), b) Aditivos: no se requieren.
que es incoloro, produciendo fosfato y p-nitrofenol a pH 9,8. c) Sustancias interferentes conocidas:
La velocidad de aparición del anión p-nitrofenolato (amarillo) a - Hemólisis visibles o intensas pueden ser causa de ligeras
405 nm, es proporcional a la actividad enzimática de la muestra. variaciones en los resultados.
La dietanolamina (DEA), regula el pH de la reacción y actúa - Los anticoagulantes comunes (tales como EDTA disódico,
como aceptor del fosfato liberado por la fosfatasa (transfos- oxalato, citrato o fluoruro) producen entre 50 y 90% de
forilación), observándose como resultado una activación de inhibición de la actividad de fosfatasa alcalina.
la reacción. La DEA reúne las mejores condiciones en cuanto - Existen algunas drogas que pueden alterar los niveles
a activación y capacidad tamponante cuando se emplea p- séricos de fosfatasa alcalina, por lo que es conveniente
NFF como sustrato; por tal razón, la DGKC y la SSCC la han interrogar al paciente sobre toda medicación que esté
seleccionado para el desarrollo de sus métodos optimizados. recibiendo.
Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
REACTIVOS PROVISTOS drogas en el presente método.
A. Reactivo A: comprimidos para determinaciones individua- d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento:
les, conteniendo cada uno p-NFF suficiente para determinar emplear suero preferentemente fresco. En caso de no
una concentración final de 10 mmol/l. efectuarse el ensayo dentro de las 6 horas posteriores a su
B. Reactivo B: solución de dietanolamina 1 mol/l, pH 9,8 obtención, la muestra debe ser congelada (-20ºC).
(a 25oC), conteniendo sales de magnesio 0,5 mmol/l. Si el suero es mantenido a temperatura ambiente o en re-
870030000 / 01 p. 1/6
frigerador (2-10oC) se observan aumentos de actividad de normales se consideran los siguientes valores límites:
fosfatasa alcalina del 5 al 30% en 24 horas.
MATERIAL REQUERIDO (no provisto) Valores en niños y
- Espectrofotómetro. adolescentes (U/l) hasta 400 hasta 450 hasta 645
- Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados.
- Cubetas espectrofotométricas de caras paralelas. La IFCC recomienda que cada laboratorio establezca sus
- Baño de agua a la temperatura de reacción seleccionada. propios valores de referencia eligiendo grupos de personas
- Cronómetro. en base a criterios establecidos, acorde con el contexto de
su población.
- Longitud de onda: 405 nm CONVERSION DE UNIDADES AL SISTEMA SI
- Temperatura de reacción: 25, 30 ó 37oC. Seleccionar la ALP (U/l) x 0,017 = ALP (ukat/l)
temperatura de acuerdo al instrumental.
- Tiempo de reacción: 3 minutos LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
- Volumen de muestra: 20 ul Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
- Volumen de Reactivo A (Sustrato): 2,5 ml
- Volumen final de reacción: 2,52 ml PERFORMANCE
Los volúmenes de muestra y de Reactivo A pueden variarse a) Reproducibilidad: procesando replicados de las mismas
proporcionalmente, manteniendo la relación 1:125. muestras en un mismo día, se obtuvieron los siguientes
datos:
Nivel D.S. C.V.
PROCEDIMIENTO 296 U/l ± 9,15 U/l 3,1 %
En una cubeta mantenida a la temperatura de reacción 923 U/l ± 14,6 U/l 1,6 %
seleccionada colocar:
b) Linealidad: la reacción es lineal hasta 1.360 U/l. Para
Reactivo A reconstituido 2,5 ml valores superiores debe repetirse la determinación, previa
Preincubar unos minutos. Luego agregar: dilución del suero 1/5 ó 1/10 con solución fisiológica. Corregir
los cálculos multiplicando por el factor de dilución empleado.
Muestra 20 ul c) Límite de detección: depende del fotómetro empleado.
Mezclar inmediatamente. Leer la absorbancia inicial y De acuerdo con la sensibilidad requerida, en espectrofotó-
disparar simultáneamente el cronómetro. Registrar la metro a 405 nm (con cubetas de caras paralelas de 1 cm
absorbancia luego de 1, 2 y 3 minutos de la primera de espesor, reproducibilidad ± 2 nm, luz espuria ≤ 0,5 %,
lectura. Determinar la diferencia promedio de Absorban- semiancho de banda ≤ 8 nm) para un ∆A/min de 0,001 el
cia/min (∆A/min), restando cada lectura de la anterior y mínimo cambio de actividad detectable será de 7 U/l.
promediando los valores. Utilizar este promedio para
los cálculos. PRESENTACION
- 50 determinaciones (50 x 2,5 ml) (Cód. 1361401).
CALCULO DE LOS RESULTADOS BIBLIOGRAFIA

Fosfatasa alcalina (U/l) a 405 nm = ∆A/min x 6.812 - Bessey, O.A. ; Lowry, O.H. y Brock, M. . - J. Biol. Chem.
164, 231 (1946).
METODO DE CONTROL DE CALIDAD - Bowers, G.N. Jr. and Mc Comb, R.B. - Clin. Chem. 12:70
Procesar 2 niveles de un material de control de calidad (1966).
(Standatrol S-E 2 niveles) con actividades conocidas de - Mc Comb, R.B.; Bowers, G.N. Jr - Clin. Chem. 18/2:97
fosfatasa alcalina, con cada determinación. (1972).
- D.G.K.C. - Z. Clin. Chem. u. Klin. Biochem. 8: 658 (1970);
VALORES DE REFERENCIA 9: 464 (1971); 10: 182 (1972).
En adultos normales (edades entre 20 y 60 años) se obser- - S.S.C.C. - Scand. J. Clin. Lab. Invest. 33/4:291 (1974).
van los siguientes rangos: - I.F.C.C. - Clin. Chem. 22/3: 384 (1976).
- International Union of Biochemistry Nomenclature Commit-
Temperatura 25oC 30oC 37oC tee - Clin. Chim. Acta 96/1-2: 157 (1979).
Valores en
40-190 45-213 65-300 AACC Press, 4th ed., 2001.
adultos (U/l)
- I.F.C.C. - Clin. Chim. Acta 87/3: 459F (1978).
Debido al proceso osteoclástico, la isoenzima ósea se en- - Demaría, I.; Setta, F.; Lorenzo, L. - Rev. Asoc. Bioq. Arg.
cuentra aumentada en la niñez y adolescencia (hasta los 18 54/3 (1990).
años, aproximadamente) proporcionando valores de fosfata-
sa alcalina más elevados que en los adultos. En condiciones
870030000 / 01 p. 2/6
Símbolos
C
M Elaborado por:

Europea Nocivo

Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo
Wiener lab.
Riobamba 2944
Bioquímica
Disp. Nº: 54/82 - 5671/99 2000 Rosario - Argentina
870030000 / 01 p. 3/6 UR120531
LINEA LIQUIDA
Amilasa 405
C Método cinético a 405 nm para la determinación de
AA
amilasa en suero, plasma u orina. Sustrato CNPG3
SIGNIFICACION CLINICA INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS

La amilasa, producida principalmente en el páncreas exó- REACTIVOS
crino y en las glándulas salivales, escinde los enlaces α-1-4 El Reactivo A puede presentar una coloración amarillenta
glucosídicos de los polisacáridos (almidón y glucógeno). que no afecta su funcionamiento.
Se encuentra elevada en el suero de pacientes con pan- Cuando el espectrofotómetro ha sido llevado a cero con
creatitis aguda alcanzando los valores más elevados entre agua destilada, las lecturas de absorbancia del Reactivo A
las 24 y 30 horas posteriores al ataque, declinando luego superiores a 0,500 D.O. (a 405 nm) son indicio de deterioro
para volver a los niveles normales entre las 24 y 48 horas del mismo.
siguientes.
También se ve aumentada en este caso la excreción MUESTRA
urinaria de la enzima, persistiendo la hiperamilasuria 3 a Suero, plasma heparinizado u orina
5 días, luego de que la actividad sérica ha alcanzado los a) Recolección: si se utiliza suero, obtener de la manera
niveles normales. usual. Separar el suero del coágulo lo más rápidamente
También es posible encontrar valores aumentados en cual- posible. En caso de usar plasma éste debe ser heparinizado.
quier caso de "abdomen agudo" o intervención quirúrgica en Si se emplea orina, la determinación puede efectuarse en
regiones próximas al páncreas. una muestra de orina ocasional.
La parotiditis bacteriana y paperas se asocian también con b) Aditivos: en caso de usar plasma, debe utilizarse hepa-
elevaciones en los niveles de amilasa sérica. rina para su obtención. Si se usa orina ver d).
c) Sustancias interferentes conocidas: no se observan
FUNDAMENTOS DEL METODO interferencias por bilirrubina hasta 22 mg/dl (220 mg/l),
La α-amilasa hidroliza el sustrato definido 2-cloro-p-nitrofenil- hemoglobina hasta 180 mg/dl, triglicéridos hasta 1400 mg/dl
α-D-maltotriósido (CNP-G3) para liberar 2-cloro-p-nitrofenol (14 g/l), ni heparina hasta 50 U/ml.
(CNP), formándose 2-cloro-nitrofenil-α-D-maltósido (CNP- En el caso de orina no debe agregarse ácido clorhídrico
G2), maltotriosa (G3) y glucosa. El CNP absorbe a 405 nm y la como conservador.
velocidad de aparición del color es directamente proporcional Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
a la actividad enzimática. drogas en el presente método.
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: en
REACTIVOS PROVISTOS suero la amilasa es estable durante una semana a tempe-
A. Reactivo A: solución conteniendo CNP-G3 2,25 mmol/l, ratura ambiente (si se evita la contaminación bacteriana) o
cloruro de calcio 5 mmol/l, cloruro de sodio 70 mmol/l, tiocia- varios meses refrigerada.
nato de potasio 900 mmol/l y buffer MES pH 6, 100 mmol/l. En orina, si la muestra no se procesa en el día, es conve-
niente ajustar el pH aproximadamente a 7 (con hidróxido de
INSTRUCCIONES PARA SU USO sodio) dado que el pH ácido inactiva la enzima irreversible-
Reactivo A: listo para usar. mente. A pH 7 puede conservarse refrigerada por lo menos
10 días sin pérdida de actividad, si no existe contaminación
PRECAUCIONES bacteriana.
El Reactivo A es para uso diagnóstico "in vitro".
R20/21/22: nocivo por inhalación, por ingestión y en contacto MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
con la piel. - Espectrofotómetro.
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales - Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados.
de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos. - Cubetas espectrofotométricas de caras paralelas.
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de - Baño de agua a la temperatura de reacción seleccionada.
acuerdo a la normativa local vigente. - Cronómetro.
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE CONDICIONES DE REACCION

ALMACENAMIENTO - Longitud de onda: 405 nm
Reactivo Provisto: estable en refrigerador (2-10oC) hasta - Temperatura de reacción: 25, 30 ó 37oC
la fecha de vencimiento indicada en la caja. - Tiempo de reacción: 2 minutos
864120022 / 01 p. 1/9
A) 25-30oC
En una cubeta mantenida a la temperatura seleccionada,
Amilasa (U/l) x 0,017 = Amilasa (ukat/l)
colocar:
Reactivo A 2 ml LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
Preincubar 3-4 minutos. Luego agregar: Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
No pipetear con la boca.
Muestra 100 ul Constituye una causa de resultado erróneo la contaminación
Mezclar inmediatamente y leer absorbancia luego de 1 del Reactivo A con saliva, dada la elevada actividad amilásica
y 2 minutos. Determinar la diferencia entre la segunda de la misma. En tal caso, descartar el Reactivo.
y la primera lectura. Utilizar este valor para los cálculos. Evitar el contacto con elementos de goma (tapones, contra-
Se pueden disminuir proporcionalmente los volúmenes tapas) que deterioran el Reactivo A.
usando 1 ml de Reactivo A y 50 ul de Muestra.
PERFORMANCE
B) 37oC a) Reproducibilidad: procesando simultáneamente repli-
Como la actividad a esta temperatura es mayor, emplear cados de una misma muestra en un mismo día se obtienen
50 ul de Muestra. Seguir el procedimiento según A). los siguientes valores:
Se pueden disminuir los volúmenes usando 1 ml de
Reactivo A y 20 ul de Muestra. Nivel D.S. C.V.
51 U/l ± 0,978 U/l 1,9 %
467 U/l ± 2,139 U/l 0,46 %
CALCULO DE LOS RESULTADOS b) Sensibilidad: depende del fotómetro empleado. En es-
Amilasa (U/l) = ∆A/min x factor* pectrofotómetro a 405 nm con cubetas de caras paralelas de
Temperatura Reactivo A Muestra Factor 1 cm de espesor, para un ∆A/min de 0,001 el mínimo cambio
de actividad detectable será de 4 U/l (a 37oC).
25-30oC
2 ml 100 ul 1.628
c) Linealidad: la reacción es lineal hasta una actividad de
1 ml 50 ul 1.628
amilasa de 2000 U/l. Para valores superiores, usar muestra
37oC 2 ml 50 ul 3.178 diluida con solución salina, repetir la determinación y multi-
1 ml 20 ul 3.953 plicar el resultado por el factor de dilución.
*los factores están calculados de acuerdo a la siguiente
fórmula general: PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS
VT Para las instrucciones de programación consulte el manual
Factor = del usuario del analizador en uso.
VM x b x εCNP x 10-3
donde: PRESENTACION
VT: volumen total - 3 x 10 ml (Cód. 1021404)
VM: volumen de muestra - 3 x 10 ml (Cód. 1009326)
b: paso óptico - 4 x 20 ml (Cód. 1009243)
εCNP: coeficiente de absortividad milimolar del CNP - 4 x 20 ml (Cód. 1009603)
10-3: factor de conversión (absortividad milimolar a micro-
molar) BIBLIOGRAFIA
- Rauscher, E. et al - Clin. Chem. 31/1:14, 1985.
METODO DE CONTROL DE CALIDAD - Tietz, N. - Clinical Guide to Laboratory Tests - W.B. Saun-
Si la muestra a ensayar es suero, procesar 2 niveles de un ders Co., 1983.
material de control de calidad (Standatrol S-E 2 niveles) con - Lorenzo, L.; Demaría, I.; Setta, F.; Taborda, M. - 44th Na-
actividades conocidas de amilasa, con cada determinación. tional Meeting, AACC, 19-23 julio, 1992, Chicago, Illinois.
Clin. Chem. 38/6:935, Abs. 3, 1992.
VALORES DE REFERENCIA - Sociedad Española de Bioquímica Clínica y Patología
Temperatura 25oC 30oC* 37oC Molecular - Química Clínica 15/1:51, 1996.
Suero hasta 84 U/l 100 U/l 125 U/l - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
Orina ocasional hasta** 455 U/l 540 U/l 680 U/l AACC Press, 4th ed., 2001.
- NCCLS document “Evaluation of the Linearity of Quantita-
* Calculados tive Analytical Methods”, EP6-P (1986).
** Estos valores de referencia se obtuvieron de una población
sana (n = 40), de ambos sexos, con edades comprendidas
entre 17 y 40 años, con una dieta mixta normal, sin síntomas
de enfermedad aparente.
864120022 / 01 p. 2/9
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn
Representante autorizado en la Comunidad

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
864120022 / 01 p. 3/9 UR120830
Amilasa 405
C cinética unitest y AA
Método cinético a 405 nm para la determinación de
amilasa en suero, plasma y orina
SIGNIFICACION CLINICA Para reducir posibles contaminaciones del reactivo con

La amilasa, producida principalmente en el páncreas exó- amilasa salival, no debe pipetearse con la boca el Reactivo
crino y en las glándulas salivales, escinde los enlaces α 1-4 B ni el Reactivo A reconstituido.
glucosídicos de los polisacáridos (almidón y glucógeno). Se Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
encuentra elevada en el suero de pacientes con pancreatitis de trabajo en el laboratorio de química clínica.
aguda alcanzando los valores más elevados entre las 24 y Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
30 horas posteriores al ataque, declinando luego para volver acuerdo a la normativa local vigente.
a los niveles normales entre las 24 y 48 horas siguientes.
También se ve aumentada en este caso la excreción urinaria ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
de la enzima, persistiendo la hiperamilasuria 3 a 5 días, ALMACENAMIENTO
luego de que la actividad sérica ha alcanzado los niveles Reactivos Provistos: estables en refrigerador (2-10oC)
normales. También es posible encontrar valores aumenta- hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
dos en cualquier caso de "abdomen agudo" o intervención Reactivo A reconstituido: estable 15 días a temperatura
quirúrgica en regiones próximas al páncreas. ambiente y 60 días refrigerado (2-10oC).
La parotiditis bacteriana y paperas se asocian también con
elevaciones en los niveles de amilasa sérica. INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
REACTIVOS
FUNDAMENTOS DEL METODO Cuando el espectrofotómetro ha sido llevado a cero con
La α-amilasa hidroliza el sustrato definido 2-cloro-p-nitrofenil- agua destilada, las lecturas de absorbancia del Reactivo A
α-D-maltotriósido (CNP-G3) para liberar 2-cloro-p-nitrofenol reconstituido superiores a 0,500 D.O. (a 405 nm) son indicio
(CNP), formándose 2-cloro-nitrofenil-α-D-maltósido (CNP- de deterioro del mismo.
G2), maltotriosa (G3) y glucosa. El CNP absorbe a 405 nm
y la velocidad de aparición del color es directamente propor- MUESTRA
cional a la actividad enzimática. Suero, plasma u orina
El uso de este sustrato definido, sustancia de estructura a) Recolección: si se utiliza suero, obtener de la manera
y peso molecular conocido, posibilita la expresión de los usual. Separar el suero del coágulo lo más rápidamente
resultados en U/l y no requiere enzimas auxiliares. posible. En caso de usar plasma éste debe ser heparinizado.
Si se emplea orina, la determinación puede efectuarse en
REACTIVOS PROVISTOS una muestra de orina ocasional.
A. Reactivo A: viales conteniendo CNP-G3. b) Aditivos: en caso de usar plasma, debe utilizarse hepa-
B. Reactivo B: buffer MES pH 6; 100 mmol/l. rina para su obtención. Si se usa orina ver d).
Concentraciones finales c) Sustancias interferentes conocidas: hemólisis, anti-
CNP-G3............................................................. 2,25 mmol/l coagulantes (citrato, oxalato y EDTA). En el caso de orina
Acetato de calcio.................................................... 6 mmol/l no debe agregarse ácido clorhídrico como conservador.
Cloruro de sodio................................................... 70 mmol/l No se observan interferencias por bilirrubina hasta 200 mg/l,
MES.................................................................... 100 mmol/l hemoglobina hasta 0,5 g/dl y triglicéridos hasta 13 g/l.
Tiocianato de potasio......................................... 900 mmol/l Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
INSTRUCCIONES PARA SU USO d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: en
Reactivo B: listo para usar. suero la amilasa es estable durante una semana a tempe-
Reactivo A; preparación: reconstituir cada vial con el vo- ratura ambiente (si se evita la contaminación bacteriana) o
lumen de Reactivo B indicado en el rótulo. Tapar y agitar varios meses refrigerada.
hasta disolución completa. En orina, si la muestra no se procesa en el día, es conve-
niente ajustar el pH aproximadamente a 7 (con hidróxido de
PRECAUCIONES sodio) dado que el pH ácido inactiva la enzima irreversible-
Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro". mente. A pH 7 puede conservarse refrigerada por lo menos
El Reactivo B contiene tiocianato de potasio. R20/21/22: 10 días sin pérdida de actividad, si no existe contaminación
nocivo por inhalación, por ingestión y en contacto con la piel. bacteriana.
870040000 / 00 p. 1/6
MATERIAL REQUERIDO (no provisto) METODO DE CONTROL DE CALIDAD
- Espectrofotómetro. Si la muestra a ensayar es suero, procesar 2 niveles de un
- Micropipetas y pipetas capaces de medir los volúmenes material de control de calidad (Standatrol S-E 2 niveles) con
indicados. actividades conocidas de amilasa, con cada determinación.
- Baño de agua a la temperatura de reacción seleccionada. VALORES DE REFERENCIA
- Cronómetro. Temperatura 25oC 30oC* 37oC
Suero hasta 84 U/l 100 U/l 125 U/l
CONDICIONES DE REACCION Orina ocasional hasta** 455 U/l 540 U/l 680 U/
- Longitud de onda: 405 nm
- Temperatura de reacción: 25, 30 ó 37oC * Calculados
- Tiempo de reacción: 2 minutos ** Estos valores de referencia se obtuvieron de una población
sana (n = 40), de ambos sexos, con edades comprendidas
entre 17 y 40 años, con una dieta mixta normal, sin síntomas
PROCEDIMIENTO de enfermedad aparente.
A) 25-30oC
En una cubeta mantenida a la temperatura seleccionada,
colocar:
Reactivo A reconstituido 2 ml Amilasa (U/l) x 0,017 = Amilasa (ukat/l)
Preincubar 3-4 minutos. Luego agregar:
Muestra 100 ul Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
Mezclar inmediatamente y leer absorbancia luego de 1
Constituye una causa de resultado erróneo la contaminación
y 2 minutos. Determinar la diferencia entre la segunda
del Reactivo con saliva, dada la elevada actividad amilásica
y la primera lectura. Utilizar este valor para los cálculos.
de la misma. En tal caso, descartar el Reactivo.
Se pueden disminuir proporcionalmente los volúmenes
Evitar el contacto con elementos de goma (tapones, contra-
usando 1 ml de Reactivo A reconstituido y 50 ul de
tapas) que deterioran el Reactivo A.
Muestra.
B) 37oC PERFORMANCE
Como la actividad a esta temperatura es mayor, emplear a) Reproducibilidad: procesando simultáneamente repli-
50 ul de Muestra. Seguir el procedimiento según A). cados de una misma muestra en un mismo día se obtuvo:
Se pueden disminuir los volúmenes usando 1 ml de Nivel D.S. C.V.
Reactivo A reconstituido y 20 ul de Muestra.
50,6 U/l ± 1,76 U/l 3,48 %
417,3 U/l ± 6,29 U/l 1,51 %
CALCULO DE LOS RESULTADOS Procesando la misma muestra en días diferentes, se obtuvo:
Amilasa (U/l) = ∆A/min x factor* Nivel D.S. C.V.
Temperatura Reactivo A Muestra Factor 48,0 U/l ± 2,65 U/l 5,53 %
389,9 U/l ± 7,62 U/l 1,95 %
25-30oC 2 ml 100 ul 1.628
1 ml 50 ul 1.628 b) Límite de detección: depende del fotómetro empleado y
de la longitud de onda. En espectrofotómetros con cubetas de
37oC 2 ml 50 ul 3.178
caras paralelas de 1 cm de espesor, para un ∆A/min de 0,001
1 ml 20 ul 3.953
el mínimo cambio de actividad detectable será de 1,6 U/l (a 25oC).
*los factores están calculados de acuerdo a la siguiente c) Rango dinámico: el rango útil de lectura se extiende hasta
fórmula general: 0,250 D.O. Para valores superiores se debe utilizar muestra
VT diluida con solución fisiológica (en caso de orina diluir 1/10)
Factor = y corregir consecuentemente los resultados.
VM x b x εCNP x 10-3
donde: PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS
VT: volumen total Para las instrucciones de programación consulte el manual
VM: volumen de muestra del usuario del analizador en uso.
b: paso óptico
εCNP: coeficiente de absortividad milimolar del CNP PRESENTACION
10-3: factor de conversión (absortividad milimolar a micro- Amilasa 405 cinética unitest:
molar) - 20 x 2 ml (40 ml Reactivo B) (Cód. 1021402).
870040000 / 00 p. 2/6
Amilasa 405 cinética AA: SIMBOLOS
- 3 x 10 ml (40 ml Reactivo B) (Cód. 1021403). Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
BIBLIOGRAFIA
- Rauscher, E. et al - Clin. Chem. 31/1:14 (1985).
C
- Tietz, N. - Fundamentals of Clinical Chemistry - W.B. por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios
Saunders Co. (1970). para el diagnóstico "in vitro"
- Lorenzo, L.; Demaría, I.; Setta, F.; Taborda, M. - 44th Na-
tional Meeting, AACC, 19-23 julio, 1992, Chicago, Illinois.
Clin. Chem. 38/6:935, Abs. 3, 1992.
- Sociedad Española de Bioquímica Clínica y Patología
Molecular - Química Clínica 15/1:51, 1996. Contenido suficiente para <n> ensayos
X
AACC Press, 4th ed., 2001. H Fecha de caducidad
 No congelar
F Riesgo biológico
Cont. Contenido
g Número de lote
M Elaborado por:
Xn
Nocivo
Xi
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
Amilasa 405 cinética unitest:
disp. Nº: 2525/95 - 334/00
Amilasa 405 cinética AA:
disp. Nº: 5234/98 - 967/02 2000 Rosario - Argentina
870040000 / 00 p. 3/6 UR110912
Amilokit
Para la determinación de amilasa en suero u orina
SIGNIFICACION CLINICA ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE

La amilasa, producida en el páncreas exócrino y en las ALMACENAMIENTO
glándulas salivales, escinde los enlaces α 1-4 glucosídicos Reactivos Provistos: estables a temperatura ambiente
de los polisacáridos (almidón y glucógeno). (<25ºC), hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
Se encuentra elevada en el suero de pacientes con pan- Una vez abiertos, son estables un año en refrigerador (2-10oC).
creatitis aguda, alcanzando los valores más elevados entre
las 24 y 30 horas posteriores al ataque, declinando luego INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
para volver a los niveles normales entre las 24 y 48 horas REACTIVOS
siguientes. La lectura del control (C) no debe sufrir variaciones mayo-
También se ve aumentada en este caso la excreción res del 10%. Toda caída repentina de sus valores indicará
urinaria de la enzima, persistiendo la hiperamilasuria 3 a contaminación del sustrato con saliva.
5 días, luego de que la actividad sérica ha alcanzado los
niveles normales. MUESTRA
También es posible encontrar valores aumentados en cual- Suero u orina
quier caso de "abdomen agudo" o intervención quirúrgica a) Recolección: obtener suero de la manera usual.
en regiones próximas al páncreas. Si la muestra a utilizar es orina, debe obtenerse de la siguien-
Las parotiditis bacterianas y paperas se asocian también con te forma: el paciente debe orinar descartando esta micción,
elevaciones en los niveles de amilasa sérica. 2 horas después vuelve a orinar y recoge toda la orina. Esta
muestra, que corresponde a 2 horas de diuresis, se diluye
FUNDAMENTOS DEL METODO a 200 ml con agua.
El sustrato, almidón tamponado, se incuba con la muestra, La determinación se efectúa con 20 ul de esta dilución,
produciéndose la hidrólisis enzimática. Esta se detiene obteniéndose el resultado directamente en Unidades Ami-
por el agregado de reactivo de iodo, que al mismo tiempo lolíticas/hora.
produce color con el remanente de almidón no hidrolizado. Debido a las grandes variaciones de la diuresis en los cua-
La disminución de color respecto de un sustrato color (sin dros agudos compatibles con diagnóstico de pancreatitis,
muestra) es la medida de la actividad enzimática, que se la determinación de amilasuria sobre muestras simples
expresa en Unidades Amilolíticas (Smith & Roe) /decilitro de orina carece de valor por lo que debe determinarse la
(UA/dl), comparables con las Unidades Sacarogénicas excreción horaria.
(Somogyi)/decilitro. b) Aditivos: no se requieren.
c) Sustancias interferentes conocidas: los citratos y oxa-
REACTIVOS PROVISTOS latos inhiben la actividad enzimática.
A. Reactivo A: solución de almidón 500 mg/l, tamponada a Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
pH 7 con buffer fosfatos 0,1 mol/l en CINa 0,15 mol/l. drogas en el presente método.
B. Reactivo B: solución 0,01 eq/l de iodo en ácido clorhí- d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: si la
drico 0,02 mol/l. determinación no puede efectuarse de inmediato, la muestra
puede conservarse hasta una semana en refrigerador (2-
INSTRUCCIONES PARA SU USO 10oC) sin pérdida de actividad.
Antes de utilizar el Reactivo A, agitarlo suavemente unos MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
segundos para homogeneizar cualquier eventual depósito - Espectrofotómetro o fotocolorímetro.
de almidón en el fondo del frasco. - Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados.
- Baño de agua a 37oC.
PRECAUCIONES - Reloj o timer.
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales CONDICIONES DE REACCION
de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos. - Longitud de onda: 640 nm en espectofotómetro o en foto-
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de colorímetro con filtro rojo (610-660 nm).
acuerdo a la normativa local vigente. - Temperatura de reacción: 37oC
870050000 / 01 p. 1/6
- Tiempo de reacción: 7 minutos y 30 segundos Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios
- Volumen de muestra: 20 ul valores de referencia.
- Volumen final de la reacción: 10 ml
Como la actividad amilásica de la saliva es 700 veces ma-
PROCEDIMIENTO yor que la del suero, deben evitarse contaminaciones con
En 2 tubos marcados C (Control) y D (Desconocido) aquella. El sustrato debe medirse con pipeta de 5 ml o bien
colocar: de 1 ml de doble aforo. No debe soplarse por la pipeta, la
C D mínima contaminación con saliva deteriora definitivamente
el sustrato.
Reactivo A 1 ml 1 ml El color de la reacción de Amilokit no es azul debido a un
Dejar unos minutos en baño de agua a 37oC y agregar: exceso de iodo que, con el ClH del Reactivo B, son nece-
sarios para asegurar la completa inhibición de la reacción
Muestra - 20 ul enzimática, la estabilidad del color y para eliminar la influen-
Incubar a 37 C. A los 7 minutos y medio exactos, agregar:
o
cia de las proteínas en la reacción de color.
Reactivo B 1 ml 1 ml
PERFORMANCE
Mezclar por agitación suave. Retirar los tubos del baño a) Reproducibilidad: procesando replicados de las mismas
y agregar: muestras en un mismo día se obtuvieron los siguientes
Agua destilada 8 ml 8 ml resultados:
Mezclar por inversión. Leer en fotocolorímetro con filtro Nivel D.S. C.V.
rojo o en espectrofotómetro alrededor de 640 nm, llevan- Suero 85 UA/dl ± 1,1 UA/dl 1,2 %
do a cero el aparato con agua destilada. 240 UA/dl ± 2,5 UA/dl 1,1 %
Orina 160 UA/dl ± 0,9 UA/dl 0,6 %

ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL 930 UA/dl ± 3,2 UA/dl 0,3 %
El color de la reacción es estable durante 1 hora por lo que
la absorbancia debe ser leída dentro de ese lapso. Si la b) Rango dinámico: cuando la actividad amilasa es superior
temperatura ambiente es superior a 25oC, la lectura deberá a 600 UA/dl debe repetirse el ensayo diluyendo la muestra
efectuarse dentro de los 20 minutos. 1/10 con agua destilada o solución fisiológica.
c) Límite de detección: depende del fotómetro empleado.
CALCULO DE LOS RESULTADOS En espectrofotómetro a 640 nm con cubetas de caras pa-
ralelas de 1 cm de espesor, para un ∆A/min de 0,001 D.O.
C-D
Amilasa (UA/dl) = x 1000 el mínimo cambio de actividad detectable será de 2 UA/dl.
C
Unidades: una Unidad Amilolítica (UA) es la cantidad de PRESENTACION
enzima contenida en 100 ml de muestra, que puede hidro- - 25-40 determinaciones (Cód. 1021001).
lizar 10 mg de almidón en 30 minutos, en las condiciones
de la reacción. En esta técnica se incuban 20 ul de muestra BIBLIOGRAFIA
con 0,5 mg de almidón contenidos en 1 ml de Sustrato 1 - Huggins, C. & Russell, P.S. - Ann. Surg. 128:668 (1948).
durante 7 minutos y medio, lo que equivale a incubar 100 ml - Sachar, L.E. - Am. J. Clin. Path. 22:117 (1952).
de suero con 10.000 mg de almidón durante 30 minutos. Si - Smith, B.W. & Roe, J.H. - J. Biol. Chem. 179:53 (1949).
todo el almidón fuera hidrolizado, la actividad amilásica de - Van Loon, E.J.; Likins, M.R. & Seger, A.J. - Am. J. Clin.
la muestra sería de 1000 UA/dl. Para obtener las unidades Path. 22:1134 (1952).
de actividad amilásica, la fracción de almidón digerido se - Tietz, N. - Fundamentals of Clinical Chemistry - W.B.
multiplica por 1000. Saunders Co - (1970).
VALORES DE REFERENCIA AACC Press, 4th ed., 2001.
Suero Orina
Condición clínica
(UA/dl) (UA/hora)
Normal < 120 < 260
Pancreatitis aguda 300 a 12.000 más de 900
Pancreatitis crónica hasta 200 más de 300
Parotiditis 200 a 350 350 a 750
Parotiditis c/ complicación
pancreática más de 350 más de 750
Procesos abdominales
agudos (sin pancreatitis) normal normal
870050000 / 01 p. 2/6
Símbolos
C
M Elaborado por:

Europea Nocivo

Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo
Wiener lab.
Riobamba 2944
Bioquímica
870050000 / 01 p. 3/6 UR101201
Anti-A, Anti-B o Anti-AB
monoclonal
Reactivos para la determinación de grupos sanguíneos ABO

A comienzo del siglo pasado, Landsteiner descubrió que los Los reactivos se proveen listos para usar. No deben diluirse.
individuos podían ser agrupados en A, B, AB u O de acuerdo
a la presencia (grupos A, B, o AB) o ausencia (grupo O) de ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
antígenos fuertemente inmunogénicos en la superficie de ALMACENAMIENTO
los glóbulos rojos. También demostró la existencia de anti- Los Reactivos Provistos son estables en refrigerador (2-
cuerpos (aglutininas) dirigidos contra los antígenos A y B y 10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
que el suero de un individuo no contiene anticuerpos para No congelar.
el antígeno presente en sus propios glóbulos rojos pero sí Períodos prolongados de almacenamiento a temperaturas
contra los que no posee. Actualmente se han identificado fuera de este rango pueden acelerar la pérdida de la actividad
subgrupos de los grupos A y B. de los reactivos.
Todas estas observaciones revelaron la importancia de la Evitar los cambios térmicos repetidos y limitar a lo estricta-
compatibilidad ABO en la práctica transfusional. mente necesario la exposición de los reactivos a temperatura
ambiente.
FUNDAMENTOS DEL METODO En estas condiciones de uso y conservación, los reactivos,
La determinación de grupos sanguíneos del sistema ABO después de su apertura, son estables hasta la fecha de
se efectúa enfrentando los glóbulos rojos del paciente con expiración indicada en la caja.
anticuerpos monoclonales Anti-A, Anti-B o Anti-AB. La
aglutinación o no de los hematíes ensayados frente a cada INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
uno de los reactivos indica la presencia o ausencia de los REACTIVOS
correspondientes antígenos. Desechar los reactivos cuando se observe contaminación
de los mismos. Si bien la azida de sodio se adiciona como
REACTIVOS PROVISTOS bacteriostático, se recomienda inspeccionar los reactivos
Anti-A, Anti-B o Anti-AB monoclonal: reactivos prepa- visualmente antes de usarlo. No deben utilizarse si presen-
rados a partir de anticuerpos monoclonales de clase IgM tan turbidez.
secretados por líneas celulares de hibridoma de ratón en Los reactivos no deben utilizarse si presentan precipitados
una solución tamponada conteniendo < 1 g/l de azida sódica o partículas.
como conservante. Los clones involucrados y la coloración
de cada producto se detallan en la siguiente tabla: MUESTRA
Nombre del Glóbulos rojos o sangre entera
Línea(s) Celular(es) Color
Producto a) Recolección: la sangre debe ser obtenida asépticamente,
con o sin anticoagulante.
Anti-A BIRMA-1 Azul
Puede analizarse sangre obtenida por punción digital para
Anti-B LB-2 Amarillo
la técnica en placa. Para evitar la coagulación de la sangre
Anti-AB BIRMA-1/ES-4/ES-15 Incoloro
al utilizar esta técnica, se la debe mezclar rápidamente con
Estos antisueros se caracterizan por su alta potencia, avidez el reactivo a ensayar.
y especificidad. Para los ensayos con sangre de cordón, los glóbulos rojos
Al no ser de origen humano, no existen riesgos de infección deberán lavarse previamente con solución fisiológica.
por HIV, HBV o HCV. b) Aditivos: pueden emplearse como anticoagulantes:
EDTA, heparina, ACD (ácido cítrico, citrato, dextrosa),
REACTIVOS NO PROVISTOS CPD (citrato, fosfato, dextrosa) o CPDA-1 (citrato, fosfato,
De acuerdo a la técnica empleada puede requerirse adi- dextrosa, adenina). Puede utilizarse Anticoagulante W de
cionalmente: Wiener lab.
- Solución fisiológica c) Sustancias interferentes conocidas: las muestras que
- Solución fisiológica tamponada con buffer fosfatos (PBS) presentan hemólisis o contaminación microbiana, no deben
pH 7,0 ± 0,2 ser analizadas.
- Solución fisiológica de baja fuerza iónica (LISS) d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento:
870060000 / 01 p. 1/8
una vez obtenidas, las muestras deben ser analizadas lo
antes posible. Si el análisis no se realiza inmediatamente, para evitar que el reactivo se seque por evaporación.
conservar las mismas entre 2-10oC. Si se utilizó heparina o Cuando se observa aglutinación débil debe repetirse
EDTA, la tipificación debe llevarse a cabo dentro de las 48 la prueba utilizando la técnica en tubo (por centrifuga-
horas de extraídas. Las muestras recogidas con ACD, CPD ción). Pueden agregarse 2 volúmenes de reactivo a 1
o CPDA-1 pueden ser ensayadas hasta los 35 días a partir volumen de muestra para resaltar la aglutinación, sin
de su extracción. Si se emplean coágulos, deberá efectuarse riesgos de falsos positivos.
la tipificación dentro de los 7 días de obtenida la muestra.
La sangre de donantes puede ser analizada hasta su fecha II- TECNICA EN TUBO (por centrifugación)
de vencimiento. 1) A una gota de Reactivo Anti-A, Anti-B o Anti-AB
monoclonal colocada en un tubo de hemólisis rotula-
MATERIAL REQUERIDO (no provisto) do, agregar 1 gota de suspensión de glóbulos rojos
- Centrífuga al 3-5%.
- Tubos de hemólisis 2) Mezclar y centrifugar 20 segundos a 1000 g.
- Placas 3) Agitar el tubo para despegar las células y examinar
- Palillos mezcladores descartables macroscópicamente la presencia o ausencia de aglu-
tinación. La observación puede facilitarse si se emplea
PRECAUCIONES una fuente de luz difusa.
Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro" y está
estrictamente reservado para uso profesional por personal III- TECNICA EN TUBO (por sedimentación)
calificado con comprobada competencia en inmunohema- 1) A una gota de Reactivo Anti-A, Anti-B o Anti-AB
tología. monoclonal colocada en un tubo de hemólisis rotula-
No utilizar los reactivos fuera de la fecha de vencimiento. do, agregar 1 gota de suspensión de glóbulos rojos
La azida puede reaccionar con las cañerías de plomo o cobre al 3-5%.
generando compuestos explosivos. Al eliminar el reactivo, se 2) Mezclar e incubar durante 60 minutos a temperatura
debe dejar correr grandes cantidades de agua. ambiente.
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales 3) Agitar el tubo para resuspender las células y
de trabajo en el laboratorio de química clínica. examinar macroscópicamente la aglutinación. La
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de observación puede facilitarse si se emplea una fuente
acuerdo a la normativa local vigente. de luz difusa.
Las reacciones en tubo deben ser leídas inmediata-
mente e interpretar los resultados sin demora.
PROCEDIMIENTO
Estos reactivos han sido estandarizados según los pro-
cedimientos detallados a continuación; su desempeño en INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS
el uso mediante otras técnicas no puede ser garantizado. Técnica en placa
La suspensión de glóbulos rojos a ensayar debe ser Reacción positiva: los hematíes aglutinan en segundos y
preparada con solución fisiológica, PBS o LISS. permanecen aglutinados al balancear la placa. Indica la
presencia del antígeno eritrocitario correspondiente.
I- TECNICA EN PLACA Reacción negativa: no se observa aglutinación a los 2
Preparar una suspensión de glóbulos rojos al 10%. minutos, indicando ausencia del antígeno correspondiente.
Como alternativa puede emplearse una suspensión al
35-45% en plasma del mismo paciente o sangre entera. Técnica en tubo
1) Colocar en una placa limpia y rotulada, una gota de Lectura: golpear suavemente el tubo para desprender el
Reactivo Anti-A, Anti-B o Anti-AB monoclonal y agregar sedimento y examinar macroscópicamente la presencia o
al lado 1 gota de suspensión de glóbulos rojos. ausencia de aglutinación.
El gotero provisto dispensa un volumen de 50 ± 5 ul. Es Reacción negativa: no se observa aglutinación a los 2 mi-
importante que se mantenga la relación reactivo:células nutos, indicando ausencia del antígeno corespondiente. La
en todos los sistemas de ensayo. resuspensión de los glóbulos rojos es homogénea.
2) Mezclar el Reactivo y los glóbulos con un palillo des- Reacción positiva: los hematíes aglutinan en segundos y
cartable cubriendo un área circular de 2 cm de diámetro permanecen aglutinados una vez resuspendidos. Indica la
y balancear la placa continuamente durante 2 minutos. presencia del antígeno eritrocitario correspondiente.
Observar aglutinación visible macroscópicamente hasta En casos dudosos se recomienda esperar 2 minutos.
los 2 minutos. La observación puede facilitarse si se Todos los resultados obtenidos en las pruebas de glóbulos
emplea una fuente de luz difusa. No debe emplearse rojos (directas), excepto las realizadas sobre muestras de
microscopio. sangre de infantes, deben ser confirmadas por una prueba
La prueba debe ser interpretada dentro de los 2 minutos sobre suero (inversa), usando eritrocitos tipificados A1, A2, B
y O. En la siguiente tabla se muestran los perfiles esperados:
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Prueba directa Prueba inversa disminuir en intensidad durante el almacenamiento, espe-
(Glóbulos rojos) (Suero) Grupo cialmente en aquellas muestras coaguladas o extraídas con
EDTA. Los mejores resultados se obtienen con muestras
Anti-A Anti-B Anti-AB Cél. A1 Cél. A2 Cél. B Cél. O frescas.
- - - + + + - O
+ - + - - + - A PRESENTACION
- + + + + - - B Anti-A monoclonal: frasco x 10 ml (Cód. 1443152).
+ + + - - - - AB Anti-B monoclonal: frasco x 10 ml (Cód. 1443154).
Anti-AB monoclonal: frasco x 10 ml (Cód. 1443153).
Cualquier discrepancia entre las pruebas directa e inversa
debe ser investigada y resuelta antes de informar el grupo BIBLIOGRAFIA
sanguíneo. - Wiener AS. - Blood Groups and Transfusion - Charles C.
Thomas 1943.
METODO DE CONTROL DE CALIDAD - Moore, S. et al. - “Int. Symp. on Monoclonal Antibodies:
El control de calidad puede efectuarse ensayando glóbulos Standardization of their Characterization and use” - París,
rojos tipificados. Debe realizarse un control de los reactivos France, 1983. Develop. Biol. Standard 57:49-59.
al comienzo de cada jornada de trabajo con glóbulos rojos - Widmann F.K. ed Technical Manual 10th Ed Washington DC,
A1, A2, B y O. American Association of Blood Banks 1990, Chapter 11.
- Race R. R and Sanger R. - Blood Groups in Man, 6th Edition
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO Oxford Blackwell Scientific Publishers 1975:178.
Pueden obtenerse resultados erróneos debido a: - Issitt P.D. Applied Blood Group Serology 3rd Edition, Mont-
- Contaminación de los materiales empleados en la prueba. gomery Scientific Publications, Miami, Florida, USA, 1985,
- Temperatura incorrecta de incubación. Chapter 10.
- Reducción del tiempo de incubación recomendado. - Issit, P.D and Anstee, D.JApplied Blood Group Serology - 4th
- Neonatos: los antígenos A y B no se encuentran totalmente Ed. Montgomery Scientific Publications, 1998.
expresados en el recién nacido. Por esta razón deben - Pittiglio DH, Baldwin AJ, Sohmer PR. - Modern blood ban-
extremarse los cuidados, sobre todo en los prematuros. king and transfusion practices - Philadelphia: FA. Davis,
- La reactividad Anti-A y Anti-B puede verse reducida y even- 1987, c.1983.
tualmente estar ausente del suero o plasma de pacientes - Walker Rh, ed. Technical manual. 11th edition. Bethesda:
muy jóvenes, adultos mayores o inmunosuprimidos. American Association of Blood Banks, 1993.
- Leucemias u otros desórdenes malignos. - Garraty G, Postoway N. et al. - Spontaneous agglutination
- Pacientes recientemente transfundidos con cantidades sus- of red cells with a positive direct antiglobulin test in various
tanciales de sangre de grupo no idéntico, pueden mostrar media. - Transfusion 24:214-217, 1984.
una reacción serológica de campo mixto. - Voak D., et al. - Monoclonal anti-A and anti-B development
- Reacciones falsas positivas: se han observado problemas as cost effective reagents. - Med. Lab. Sci. 39, 109-122,
ocasionados en la tipificación de los grupos sanguíneos 1982.
ABO debido a anticuerpos que reaccionan con drogas, - Rouger Ph. et Salmon Ch. La pratique des groupes san-
colorantes, compuestos químicos o con partículas de sílica guins et groupes érythrocytaires, 1981.
coloidal liberadas de vidrios de mala calidad. - Mollison P.L ,Blood Transfusion - 10ème édition Blackwell
- Aglutininas frías: en presencia de aglutininas frías, el lavado Science Ed., 1997.
de los glóbulos rojos 4-6 veces con solución fisiológica, - Moore S. et al. - A Mouse Monoclonal Antibody with Anti-A
resulta generalmente suficiente para obtener células aptas (B) Specificity Which Agglutinates AXCells. - Vox Sang,
para la tipificación. En muy raras ocasiones se requiere Vol. 47, pp. 427-434, 1984.
un calentamiento a 37oC durante 10 minutos antes de los -Technical Manual of the American Association of Blood
lavados mencionados. Como control, se coloca una gota Banks. 10th edition 1990.
de estas células con 2 gotas de solución fisiológica. No
debe producirse aglutinación.
- Las pruebas en lámina no están recomendadas para la
determinación de subgrupos débiles.
- Si se emplea la técnica en tubo, una agitación excesiva
puede disgregar las aglutinaciones débiles y producir
resultados falso-negativos.
- Es importante emplear la fuerza g recomendada durante la
centrifugación, ya que una excesiva centrifugación puede
conducir a dificultades para resuspender el botón celular,
mientras que una centrifugación insuficiente puede resul-
tar en aglutinaciones que se disgregan con demasiada
facilidad.
- La expresión de algunos antígenos eritrocitarios puede
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Símbolos
C
M Elaborado por:

Europea Nocivo

Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
Disp. Nº: 1076/89 (Anti-A)
Disp. Nº: 1073/89 (Anti-B)
Disp. Nº: 1071/89 (Anti-A,B) 2000 Rosario - Argentina
870060000 / 01 p. 4/8 UR151119
Anti-D (Rho)
monoclonal
IgG/IgM
Reactivo para la detección de antígeno D (Rho)

Las observaciones de Levine y Stetson en 1939 y de Lands- El reactivo se provee listo para usar. No debe diluirse.
teiner y Wiener en 1940 establecieron las bases para el
conocimiento actual de la importancia clínica en la detección ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
de los anticuerpos anti-D. ALMACENAMIENTO
Aproximadamente el 15% de los individuos de raza blanca y El Reactivo Provisto es estable en refrigerador (2-10oC) hasta
el 8% de los individuos de raza negra carecen del antígeno D la fecha de vencimiento indicada en la caja. No congelar.
y son fácilmente estimulados cuando reciben este antígeno, Períodos prolongados de almacenamiento a temperaturas
ya sea por transfusión o durante el parto, produciendo anti-D. fuera de este rango pueden acelerar la pérdida de la acti-
Algunos individuos presentan una disminución cuantitativa en vidad del reactivo.
la expresión de su antígeno D, llamados D débiles (antigua- Evitar los cambios térmicos repetidos y limitar a lo estricta-
mente Du). Otros, en cambio, presentan una variación cuali- mente necesario la exposición a temperatura ambiente del reactivo.
tativa en la expresión de dicho antígeno, denominados como En estas condiciones de uso y conservación, el reactivo,
D parcial. Dentro de este grupo se encuentra la categoría después de su apertura, es estable hasta la fecha de expi-
DVI, caracterizada por poseer una mínima cantidad de epitopes. ración indicada en la caja.
El antígeno D es altamente inmunogénico siendo respon-
sable de severas reacciones post-transfusionales y de la INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
enfermedad hemolítica del recién nacido. REACTIVOS
Existen más de 40 antígenos diferentes identificados dentro Desechar el reactivo cuando se observe contaminación del
del sistema Rh. Sin embargo, es el antígeno D el que posee mismo. Si bien la azida de sodio se adiciona como bacterios-
mayor importancia en la clínica después del sistema ABO. tático, se recomienda inspeccionar el reactivo visualmente
antes de usarlo. No debe utilizarse si presenta turbidez. El
FUNDAMENTOS DEL METODO
reactivo no debe utilizarse si presenta precipitados o partículas.
Los glóbulos rojos del paciente se ponen en contacto con
suero anti-D (anti-Rho). Si existe en la superficie del eritrocito
MUESTRA
el antígeno correspondiente, se producirá una aglutinación
Glóbulos rojos o sangre entera
visible macroscópicamente.
a) Recolección: obtener la sangre en forma aséptica con
El componente IgM anti-D del reactivo produce aglutinación
o sin anticoagulante. Puede analizarse sangre obtenida
directa de los glóbulos rojos portadores del antígeno D nor-
por punción digital para la técnica en placa. Para evitar la
mal. En la mayoría de los casos los D débiles no se aglutinan
directamente con este reactivo. coagulación de la sangre al utilizar esta técnica, se la debe
El componente IgG anti-D del reactivo puede detectar las mezclar rápidamente con el reactivo.
variantes débiles (detecta DVI) mediante la prueba indirecta b) Aditivos: pueden emplearse como anticoagulantes: he-
con anti-globulina. parina, EDTA, ACD (ácido cítrico, citrato, dextrosa), CPD (ci-
trato, fosfato, dextrosa) o CPDA-1 (citrato, fosfato, dextrosa,
REACTIVO PROVISTO adenina). Puede utilizarse Anticoagulante W de Wiener lab.
Anti-D (Rho): mezcla de anticuerpos monoclonales humaniza- c) Sustancias interferentes conocidas:
dos IgM/IgG (Blend) perteneciente a los clones TH-28 (secretor - Los glóbulos rojos recubiertos con inmunoglobulinas o
de IgM) y MS-26 (secretor de IgG), en una solución tampo- fracciones del complemento pueden dar reacciones fal-
nada conteniendo < 1 g/l de azida sódica como conservante. samente positivas. Cuando se sospecha esta situación
deberá realizarse una Prueba de Antiglobulina Directa.
REACTIVOS NO PROVISTOS - La hemólisis marcada interfiere.
De acuerdo a la técnica empleada puede requerirse adi- d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: las
cionalmente: muestras deberán ser analizadas lo antes posible, evitando
- Solución fisiológica. de esta manera falsos positivos o negativos derivados de
- Suero Anti-humano (poliespecífico) de Wiener lab. la conservación incorrecta o de contaminación bacteriana.
- Buffer PBS pH 7,0 ± 0,2. Si el análisis no se puede realizar en el momento, las
- Solución salina de baja fuerza iónica (LISS). muestras se deben conservar refrigeradas (2-10oC). Si se
870080000 / 01 p. 1/6
utilizó EDTA o heparina para su obtención, la tipificación
debe llevarse a cabo dentro de las 48 horas. Las muestras marse utilizando la técnica en tubo.
Las técnicas en placa no están aconsejadas para la
obtenidas con ACD, CPD o CPDA-1, pueden ser ensayadas
detección de muestras D débil o D parcial.
hasta los 35 días de extraída. Si se emplean coágulos,
deberá efectuarse la tipificación dentro de los 7 días de II- TECNICA EN TUBO
obtenida la muestra. Preparar una suspensión de glóbulos rojos al 3-5%
Si los glóbulos rojos son almacenados por períodos prolon- en plasma o suero autólogos, PBS pH 7,0 ± 0,2, LISS
gados pueden observarse reacciones débiles. 1,5-2% o en solución fisiológica.
Para los ensayos con sangre de cordón, los glóbulos rojos 1) Colocar una gota de Anti-D (Rho) en un tubo de
deben lavarse previamente con solución fisiológica. hemólisis rotulado.
2) Agregar una gota de la suspensión de glóbulos
MATERIAL REQUERIDO (no provisto) rojos a probar.
Dependiendo de la técnica a utilizar, podrán ser necesarios: 3) Mezclar y centrifugar 20 segundos a 1.000 g.
- Centrífuga 4) Agitar el tubo para despegar las células y examinar
- Tubos de hemólisis macroscópicamente la presencia o ausencia de aglu-
- Placa de vidrio tinación. La observación puede facilitarse si se emplea
- Palillos mezcladores descartables una fuente de luz difusa.
Las reacciones aparentemente negativas deben incu-
PRECAUCIONES barse a 37oC durante 15-30 minutos, luego centrifugar
Este reactivo es para uso "in vitro" y está estrictamente y volver a leer como se describió en 4). Las muestras
reservado para uso profesional por personal calificado con que aún en estas condiciones resulten negativas deben
comprobada competencia en inmunohematología. ser investigadas respecto al antígeno D débil.
No utilizar el reactivo fuera de la fecha de vencimiento. Efectuando la técnica en tubo, en caso de resultado
La azida puede reaccionar con las cañerías de plomo o cobre indeterminado o negativo, se puede continuar con el
generando compuestos explosivos. Al eliminar el reactivo, paso 4 de la prueba antiglobulina indirecta para D débil.
se debe dejar correr grandes cantidades de agua.
III- PRUEBA ANTIGLOBULINA INDIRECTA PARA D DEBIL
Preparar una suspensión al 3-5% de glóbulos rojos
en plasma o suero autólogos, o solución fisiológica.
El reactivo y las muestras deben descartarse de acuerdo a
1) Colocar una gota de Anti-D (Rho) en un tubo de
la normativa local vigente.
hemólisis rotulado.
2) Agregar una gota de la suspensión de glóbulos rojos.
3) Mezclar e incubar a 37oC durante 15-30 minutos.
PROCEDIMIENTO 4) Lavar las células 3-4 veces con solución fisiológica
Este reactivo ha sido estandarizado según los procedi- o PBS pH 7,0 ± 0,2 descartando perfectamente la
mientos detallados a continuación; su desempeño en el solución salina residual o sobrenadante y resuspender
uso mediante otras técnicas no puede ser garantizado. las células luego de cada lavado.
I- TECNICA EN PLACA 5) Agregar 2 gotas de Suero Anti-humano (poliespe-
Preparar una suspensión de glóbulos rojos al 40-50% cífico), mezclar y centrifugar 20 segundos a 1000 g.
en plasma/suero autólogos, PBS pH 7,0 ± 0,2 o solu- 6) Agitar ligeramente el tubo para despegar las células
ción fisiológica. También puede emplearse sangre entera. y examinar macroscópicamente presencia o ausencia
1) Colocar una gota de Anti-D (Rho) sobre una placa de aglutinación. La observación puede facilitarse si se
de vidrio limpia y rotulada. emplea una fuente de luz difusa.
2) Agregar al lado una gota de la suspensión de Nota: las muestras que dan positivo el test de Coombs
glóbulos rojos a probar. Debe mantenerse la relación directo no pueden ser analizadas por la prueba antiglo-
antisuero:células en todos los ensayos. bulina indirecta.
3) Mezclar el antisuero y los glóbulos rojos con un
palillo descartable en un área de 2 cm de diámetro y
balancear constantemente la placa durante 2 minutos. INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS
Observar macroscópicamente la presencia o ausencia La observación de aglutinación (con cualquiera de las técni-
de aglutinación. La observación puede facilitarse si se cas empleadas) indica presencia del antígeno D; la reacción
emplea una fuente de luz difusa. es positiva y el individuo será clasificado como Rh positivo.
Si el período de observación es mayor a 2 minutos, La aglutinación de los glóbulos rojos en estudio con el
efectos de la evaporación del reactivo pueden conducir reactivo anti-D por la prueba antiglobulina indirecta para
a resultados equivocados (débilmente positivos). D débil, indica que los glóbulos pertenecen a la variedad
Algunas muestras D débiles o D parcial pueden no D débil (siempre que los glóbulos rojos resulten Coombs
aglutinar cuando se utiliza la técnica en placa. Ante directo negativo).
resultados indeterminados o negativos deben confir- La no aglutinación con el reactivo Anti-D en la prueba anti-
globulina indirecta para D débil indica ausencia del corres-
870080000 / 01 p. 2/6
pondiente antígeno; la reacción es negativa y el individuo SIMBOLOS
será clasificado como Rh negativo. Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
METODO DE CONTROL DE CALIDAD Este producto cumple con los requerimientos previstos
El control de calidad de los reactivos es esencial y debe reali-
zarse al comienzo de cada jornada de trabajo, con cada serie
de determinaciones de grupo Rh y con pruebas individuales.
Como mínimo deberían emplearse: glóbulos rojos R1r como P Representante autorizado en la Comunidad Europea
control positivo y glóbulos rojos rr como control negativo.
Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA. X Contenido suficiente para <n> ensayos
La determinación no puede efectuarse sobre glóbulos rojos
que dan lugar a test de Coombs directo positivo.
Pueden obtenerse resultados más rápidos y mejor visuali-
zación precalentando la placa a 45-50oC. l Límite de temperatura (conservar a)
Los resultados anormales pueden ser consecuencia de:  No congelar

- Contaminación bacteriana o química de las muestras, de
los reactivos o del material. F Riesgo biológico
- Medicación o patología del paciente que provoque reacción
cruzada. Volumen después de la reconstitución
- Preparación de los glóbulos rojos diferente a la recomendada.
- Agitación insuficiente que provoque una resuspensión Cont. Contenido
incompleta de los glóbulos rojos.
- Agitación demasiado fuerte que disgregue los aglutinados. g Número de lote
- Demoras en la lectura.
M Elaborado por:
PRESENTACION
Nocivo
- 1 x 10 ml (Cód. 1443155).
BIBLIOGRAFIA
- Levine P., Stetson R.E. - "An unusual case of intragroup
Irritante
agglutination" - J. Amer. Med. Assoc. 113:126-127, 1939.
- White WD, Issitt CH, McGuire D. - "Evaluation of the use of albu-
min controls in Rh phenotyping" - Transfusion 14:67-71; 1974. i Consultar instrucciones de uso
- Race , R.R. and Sanger, R. - “Blood Groups in Man” - 6th ed.
Calibr. Calibrador
Oxford Blackwell Scientific Publications, pág. 178, 1975.
- Moore B.P.L. - Serological and immunological methods of
the Canadian Red Cross Blood Transfusion Service, 8th ed.
b Control
Toronto, Hunter Rose 1980. b Control Positivo

- Garraty G. et al. - "Spontaneous agglutination of red cells
whith a positive direct antiglobulin test in varius media" - c Control Negativo
Transfusion 24:214-217, 1984.
- Issit P.D. Applied Blood Group Serology 3rd ed., Montgomery h Número de catálogo
Scientific Publications, Miami, Florida, USA, Chapter 10, 1985.
- Guidelines for compatibility testing in hospital blood banks.
Cli. Lab. Haem. 9:333-341, 1987.
- Tippett P. - "Sub-Divisions of the Rh (D) antigen" - Med.
Lab. Sci. 45:88-93, 1988.
- Widmann F.K. ed Technical Manual 10th ed. Washington DC,
American Association of Blood Banks, Chapter 11, 1990.
- Walker RH., ed. Technical Manual, 11th ed. Bethesda, MD,
American Association of Blood Banks, Chapter 11, 1993.
- Jones J., Scott ML., Voak D. - "Monoclonal anti-D specificity
and Rh D structure: criteria for selection of monoclonal
anti-D reagents for routine typing of patients and donors" M Wiener Laboratorios S.A.I.C.
Riobamba 2944
- Transfusion Medicine 5:171-184,1995.
Wiener lab.
- Vengelen V., ed. Technical manual. 13th ed. Bethesda: Dir. Téc.: Viviana E. Cétola
American Association of Blood Banks, 1999. Bioquímica
870080000 / 01 p. 3/6 UR110504
Anticoagulantes
C Anticoagulante W
Anticoagulante G
Anticoagulante TP
Anticoagulante W se cantidades menores de anticoagulante. Usar 20 ul para

APLICACIONES volúmenes de hasta 2,5 ml y 50 ul para recoger hasta
Para utilizar en hematología y química sanguínea. Las san- 7 ml de sangre.
gres recogidas con ácido etilendiaminotetraacético (EDTA) Cuando se requiera extrema exactitud, puede secarse
muestran notable estabilidad de los elementos celulares, sin previamente el anticoagulante en frascos “ad hoc” en
evidencias de hemólisis hasta los 8 días de conservación. estufa a 37 ó 50oC, evitándose el error mencionado.
El recuento globular, la hemoglobina, reticulocitos, plaquetas Si se utilizan médula ósea o líquidos de punción hemá-
y hematocrito, no muestran variaciones por 24 y 48 horas en ticos (LCR, ascíticos, etc.), usar la proporción indicada
sangres mantenidas a temperatura ambiente y refrigerador para sangre.
respectivamente. La eritrosedimentación y los extendidos
para exámenes morfológicos diferenciales pueden efectuar-
se en sangres mantenidas entre 3 y 6 horas a temperatura LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
ambiente o 24 horas en refrigerador. Anticoagulante W es Debe recordarse que el empleo de cantidades de anticoa-
útil, además, para la clasificación y tipificación de sangre, gulante mayores de lo conveniente pueden producir hema-
y en determinaciones de química sanguínea donde deba tocritos falsamente disminuidos.
emplearse plasma (excepto sodio, potasio y calcio).
PRESENTACION
REACTIVO PROVISTO - 6 frascos gotero x 50 ml (Cód. 1898552).
Anticoagulante W: solución equilibrada de sales sódicas y
potásicas de EDTA (0,342 mol/l) pH 7,2. Anticoagulante G
INSTRUCCIONES PARA SU USO APLICACIONES
Listo para usar. Para utilizar exclusivamente en la determinación de glucosa
sanguínea.
PRECAUCIONES La glucólisis es un proceso enzimático que se produce “in
Para uso diagnóstico "in vitro". vitro” desde el mismo momento de la extracción de la sangre
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales y que subsiste aún en estado de congelación.
de trabajo en el laboratorio de química clínica. A 37oC se destruyen de 0,10 a 0,20 g/l/hora de glucosa.
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de Cuando hay leucocitosis o contaminación bacteriana puede
acuerdo a la normativa local vigente. producirse falsa hipoglicemia en sangre estacionada a tem-
peratura ambiente. De todos los agentes ensayados para
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE evitar la destrucción de la glucosa de la muestra, los mejores
ALMACENAMIENTO resultados se han obtenido con los fluoruros alcalinos. Los
Anticoagulante W es estable a temperatura ambiente hasta inconvenientes adjudicados al fluoruro de sodio (escasa
la fecha de vencimiento indicada en la caja. estabilidad, impurezas de calcio, etc.) se han superado
utilizando fluoruro de potasio de gran pureza.
INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS Anticoagulante G combina dos principios fundamentales:
REACTIVOS un agente antiglucolítico óptimo, el fluoruro de potasio y el
Discoloración o aparición de precipitado indican deterioro. anticoagulante de elección, EDTA.
REACTIVO PROVISTO
PROCEDIMIENTO Anticoagulante G: solución equilibrada de sales sódicas
Una gota (70 ul) impide la coagulación de hasta 9 ml de y potásicas de EDTA (0,274 mol/l) y fluoruro (0,86 mol/l),
sangre. En estas condiciones el error por dilución es de pH 7,2.
0,8 %, considerado despreciable para cualquier trabajo
de rutina en hematología. INSTRUCCIONES PARA SU USO
Para recoger cantidades de sangre menores, pueden usar- Listo para usar.
870070022 / 01 p. 1/9
PRECAUCIONES Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
Para uso diagnóstico "in vitro". de trabajo en el laboratorio de química clínica.
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
de trabajo en el laboratorio de química clínica. acuerdo a la normativa local vigente.
acuerdo a la normativa local vigente. ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
ALMACENAMIENTO
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE Anticoagulante TP es estable a temperatura ambiente,
ALMACENAMIENTO hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
Anticoagulante G es estable a temperatura ambiente hasta
la fecha de vencimiento indicada en la caja. INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
REACTIVOS
INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS Discoloración o aparición de precipitado son indicio de su
REACTIVOS deterioro.
Discoloración o aparición de precipitado son indicio de su
deterioro.
PROCEDIMIENTO
En estudios de coagulación la relación sangre/anti-
PROCEDIMIENTO coagulante adecuada es 9+1. Por ejemplo, 4 gotas de
Una gota (70 ul) impide la coagulación de hasta 9 ml de Anticoagulante TP para 2,5 ml de sangre.
sangre. Usar 20 ul para volúmenes de hasta 2,5 ml y 50 ul Si se emplea para la determinación de eritrosedimen-
para recoger hasta 7 ml de sangre. tación, la proporción indicada (ICSH) es de 4+1. Por
ejemplo 2 ml de sangre + 7 gotas (0,5 ml) de Anticoa-
gulante TP.
Debe recordarse que por ser el fluoruro inhibidor enzimático,
no debe utilizarse Anticoagulante G en reacciones que LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
involucren enzimas (Ej.: urea con ureasa). Debe tenerse en cuenta que variaciones en la relación anti-
coagulante/muestra o en la concentración de citrato utilizado
PRESENTACION afectan los Tiempos de Quick, por lo que se recomienda
- 6 frascos gotero x 50 ml (Cód. 1890552). controlar las dosis de anticoagulante empleadas al tomar
las muestras.
Anticoagulante TP PRESENTACION
APLICACIONES - 6 frascos gotero x 50 ml (Cód. 1895002).
Para utilizar en la determinación de Tiempo de Protrombina,
eritrosedimentación, estudios de coagulación, etc. BIBLIOGRAFIA
El citrato trisódico es el anticoagulante de elección para - International Committee for Standardization in Hematology
los estudios de coagulación. Las muestras recogidas con (ICSH) - Am. J. Clin. Path. 68/4:505 (1977).
citrato en concentraciones entre 120 y 150 mmol/l muestran
máxima estabilidad para la determinación de Tiempo de
Protrombina hasta 8 horas después de la extracción. A la
concentración óptima señalada y a 4oC, sangres conserva-
das durante 7 días mantuvieron constante la actividad de
los factores V y VIII.
Anticoagulante TP puede también emplearse para test de
generación de tromboplastina, determinación de fibrinógeno
y otros factores de coagulación, eritrosedimentación, recuen-
to de plaquetas y reacciones que requieran sangre citratada.
REACTIVO PROVISTO
Anticoagulante TP: solución equilibrada de citrato trisódico
dihidratado (130 mmol/l) pH 7,2.

Listo para usar.
PRECAUCIONES
Para uso diagnóstico "in vitro".
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Símbolos
C
M Elaborado por:

Europea Nocivo

Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
Disp. Nº: 252/75-4854/98-
4383/00 2000 Rosario - Argentina
870070022 / 01 p. 3/9 UR120514
Antígenos Febriles
C Reactivos para la determinación de anticuerpos
específicos contra Salmonella y Brucella

Las Salmonellas se consideran patógenos entéricos obliga- Los reactivos se proveen listos para usar. Llevar a tempera-
dos. Los alimentos y el agua contaminados son los meca- tura ambiente y agitar vigorosamente antes de su empleo.
nismos de transmisión. La enfermedad puede presentarse
como gastroenteritis, septicemia con lesiones en diversos PRECAUCIONES
órganos o fiebre tifoidea. Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
La Brucelosis se presenta en la mayoría de los casos con Los controles han sido examinados para HIV, HCV y HBV
anorexia, fiebre, decaimiento y escalofríos, pudiendo apare- encontrándose no reactivos. No obstante, deben ser em-
cer luego complicaciones importantes como son las óseas pleados como si se tratara de material infectivo.
y neuropsíquicas. Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
A pesar de que el método definitivo para establecer la etio- de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
logía de estas enfermedades es a través del aislamiento Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
del agente patógeno, esto resulta difícil debido a que la acuerdo a la normativa local vigente.
investigación se realiza frecuentemente en períodos tardíos
de la enfermedad y luego de una terapia antibiótica. Por este ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
motivo es de gran importancia diagnóstica la detección de ALMACENAMIENTO
los anticuerpos específicos producidos en el curso de cada Reactivos Provistos: estables en refrigerador (2-10oC) has-
una de estas patologías. Una prueba aislada es de escaso ta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No congelar.
valor, siendo necesarias 2 o más pruebas seriadas a fin
de poner en evidencia cambios en el título de anticuerpos.
REACTIVOS
Cualquier contaminación bacteriana de los reactivos produ-
cida durante el uso puede ser causa de deterioro. Desechar.
El suero del paciente se pone en contacto con antígenos
específicos. En este caso se utilizan suspensiones de Sal-
MUESTRA
monellas o Brucellas muertos. Si la muestra contiene los
Suero
anticuerpos correspondientes se producirá una aglutinación
a) Recolección: debe obtenerse suero límpido en forma
visible macroscópicamente.
estéril. No inactivar ni calentar ya que los anticuerpos son
termolábiles.
REACTIVOS PROVISTOS b) Aditivos: no se requieren.
Antígenos Febriles Salmonella: suspensión en solución c) Sustancias interferentes conocidas: la hemólisis visible
salina con conservantes apropiados, conteniendo los si- y los quilomicrones pueden dar reacciones inespecíficas.
guientes antígenos bacterianos: d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: las
- Antígenos Paratyphoid A (Salmonella, antígeno flagelar a). muestras pueden conservarse 7 días en refrigerador (2-10oC).
- Antígenos Paratyphoid B (Salmonella, antígeno flagelar b).
- Antígenos Typhoid H (Salmonella, antígeno flagelar d). MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
- Antígenos Typhoid O (Salmonella, antígeno somático D). - Placa de vidrio
Antígenos Febriles Brucella: suspensión de antígenos - Micropipetas
bacterianos (Brucella abortus, cepa 1119-3) en solución - Tubos de hemólisis
fisiológica con conservantes apropiados. La concentración - Varilla
celular de los antígenos se encuentra entre el 4 y el 6%. Las - Reloj o timer
bacterias utilizadas se encuentran en fase lisa.
Antígenos Febriles Controles:
- Control Positivo: dilución de suero humano inactivado positivo. PROCEDIMIENTO
- Control Negativo: dilución de suero humano negativo.
I- TECNICA RAPIDA EN PLACA
Colocar en una placa una gota (50 ul) de suero y
agregar una gota (50 ul) de suspensión de Antígeno.
Solución fisiológica.
870090000 / 01 p. 1/6
Títulos significativos pueden obtenerse en individuos inmuni-
Mezclar y agitar la placa en forma circular durante 2
zados por vacunas tifoideas. Pueden observarse reacciones
minutos.
inespecíficas con antígenos de Salmonella O grupo D en
Observar la presencia o ausencia de aglutinación utili-
suero de pacientes con influenza.
zando una luz indirecta sobre fondo oscuro.
También se encontraron reacciones inespecíficas en pacien-
II- TITULACION RAPIDA EN PLACA tes con enfermedad hepática crónica activa y consumidores
1) Dividir una placa de vidrio en sectores de 4 cm2 de narcóticos.
aproximadamente. Los antígenos de Brucella pueden dar reacciones cruzadas
2) Empleando las micropipetas apropiadas colocar en individuos vacunados contra cólera.
en estos sectores 80 ul, 40 ul, 20 ul, 10 ul y 5 ul de
suero límpido. Repetir el procedimiento para un control PERFORMANCE
negativo y uno positivo. Antígenos Febriles Salmonella: en un estudio realizado
3) Colocar 1 gota de Antígeno previamente agitado sobre 191 muestras, comparando con otro método de simi-
sobre cada gota de suero. lar fundamento tomado como referencia, se obtuvieron los
4) Mezclar el suero y el Antígeno utilizando una varilla siguientes resultados:
abarcando un área de 2 cm de diámetro aproximada-
mente. Debe emplearse una varilla distinta para cada Salmonella Paratyphoid A:
dilución de suero o la misma varilla mezclando a partir Sensibilidad: 94,1%
de la muestra más diluida. Especificidad: 98,8%
5) Agitar la placa durante 2 minutos en forma circular. Salmonella Paratyphoid B:
6) Observar la aglutinación utilizando luz indirecta Sensibilidad: 89,3%
sobre fondo oscuro. Especificidad: 100%
Salmonella Typhoid H:
INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS Sensibilidad: 86,2%
4+: todos los microorganismos aglutinan. Especificidad: 99,3%
3+: aglutinan aproximadamente el 75%. Salmonella Typhoid O:
2+: aglutinan aproximadamente el 50%. Sensibilidad: 95%
1+: aglutinan aproximadamente el 25%. Especificidad: 99,1%
Negativo: no aparece aglutinación.
Antígenos Febriles Brucella: en un estudio realizado so-
Técnica I: se indica solamente positivo o negativo. bre 203 muestras comparando con otro método de similar
Técnica II: el título se considerará la última dilución que da fundamento tomado como referencia, se obtuvieron los
aglutinación del 50% (++). siguientes resultados:
Los resultados obtenidos en la titulación en placa se aproxi- Sensibilidad: 100%
man a los de la prueba en tubo descripta en Bennett, C.W Especificidad: 100%
(ver Bibliografía), considerando las diluciones como se
muestra a continuación: Debe tenerse en cuenta que debido a las limitaciones de
este tipo de reacciones serológicas, el método no sustituye
Volumen de Suero Dilución aproximada en el aislamiento e identificación del agente etiológico.
(ml) la prueba en tubo
0,08 1:20 PRESENTACION
0,04 1:40 Salmonella (Cód. 1863151)
0,02 1:80 Paratyphoid A: 1 x 5 ml
0,01 1:160 Paratyphoid B: 1 x 5 ml
0,005 1:320 Typhoid H: 1 x 5 ml
Typhoid O: 1 x 5 ml
METODO DE CONTROL DE CALIDAD Brucella (Cód. 1503151)
Antígenos Febriles Controles. Brucella abortus: 1 x 5 ml
VALORES DE REFERENCIA Controles (Cód. 1933151)
Generalmente títulos de 1:40 ó 1:80 son sospechosos de Control Positivo: 1 x 2 ml
enfermedad. Sólo títulos mayores de 1:80 pueden consi- Control Negativo: 1 x 2 ml
derarse probatorios de diagnóstico de enfermedad cuando
estén acompañados de la sintomatología clínica. Títulos BIBLIOGRAFIA
mayores de 1:320, son concluyentes. - Widal, F. - Bull. Soc. Med. Hop. de Paris 13 (1896).
- Bennett, C.W. Clinical Serology, pág. 145, Charles Thomas
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO Co. (1964).
Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA. - Huddleson, J.B. - J. Infect. Dis. 42:242 (1928).
870090000 / 01 p. 2/6
Símbolos
C
M Elaborado por:

Europea Nocivo

Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
Disp. Nº: 1889/89 - 4957/00-153/05
(Controles)
1889/89 - 4957/00-153/05-1733/13
(Brucella-Salmonella) 2000 Rosario - Argentina
870090000 / 01 p. 3/6 UR130715
LINEA TURBITEST AA
Apo A-I
de apolipoproteína A-I en suero
SIGNIFICACION CLINICA Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales

La apolipoproteína A-I (Apo A-I) es el principal componente de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
de las lipoproteínas de alta densidad (HDL). Se sintetiza en Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
el intestino delgado, en el hígado y en pequeña proporción acuerdo a la normativa local vigente.
en los riñones y gonadas.
La Apo A-I posee un rol fisiológico importante: actúa como ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
cofactor en la actividad de la lecitin colesterol acil transferasa ALMACENAMIENTO
(LCAT) y además extrae el colesterol libre de las células. Reactivos Provistos: estables en refrigerador (2-10oC)
El proceso de esterificación del colesterol catalizado por la hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No
LCAT es importante en el transporte reverso del colesterol congelar.
hacia el hígado para ser metabolizado y excretado.
Adicionalmente la Apo A-I posee un rol de estabilización MUESTRA
de las prostaciclinas y por lo tanto mejora la vasodilatación Suero
e inhibe la agregación plaquetaria. Estas funciones son a) Recolección: obtener la muestra de la manera usual.
importantes en la protección contra la aterosclerosis. b) Aditivos: no se requieren.
Los niveles de Apo A-I se encuentran aumentados en la hiper c) Sustancias interferentes conocidas: no emplear mues-
alfa-lipoproteinemia familiar, durante terapia estrogénica, tras hemolizadas, lipémicas o contaminadas.
embarazo y en enfermedad hepática. Un aumento en los Las muestras que poseen precipitados deben ser centrifu-
niveles de Apo A-I se asocia con una disminución del riesgo gadas previo a su ensayo.
de aterosclerosis. No se observan interferencias por hemoglobina hasta 1000 mg/dl, trigli-
Los niveles de Apo A-I se encuentran disminuidos en la hipo céridos hasta 2500 mg/dl, bilirrubina hasta 20 mg/dl, heparina
alfa-lipoproteinemia familiar, en la enfermedad de Tangier, hasta 50 mg/dl ni citrato de sodio 1000 mg/dl.
colestasis y sepsis. Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
La Apo A-I reacciona con el anticuerpo específico formando muestra debe ser preferentemente fresca. Si el ensayo no
inmunocomplejos insolubles. La turbidez causada por estos es realizado en el día, la muestra puede ser conservada 48
inmunocomplejos es proporcional a la concentración de horas a 2-10oC o por períodos más prolongados de tiempo
Apo A-I en la muestra y puede ser medida espectrofoto- a -20oC.
métricamente.
B. Reactivo B: anticuerpos policlonales anti-Apo A-I humana - Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados
(cabra) en buffer fosfato, pH 7,4. - Tubos de Kahn o hemólisis
- Cronómetro
- Apo Calibrator Turbitest AA de Wiener lab. - Longitud de onda: 340 nm
- Temperatura de reacción: temperatura ambiente (25oC).
INSTRUCCIONES PARA SU USO El control de la temperatura no es crítico, pudiendo oscilar
Reactivos Provistos: listos para usar. entre 22 y 30oC.
- Tiempo de reacción: 15 minutos
PRECAUCIONES - Volumen de muestra: 30 ul
Los reactivos son para uso diagnóstico “in vitro”. - Volumen final de reacción: 1830 ul
Todas las muestras de pacientes deben manipularse como Los volúmenes de muestra y reactivos pueden variarse
si fueran capaces de transmitir infección. proporcionalmente, sin que se alteren los factores de cálculo.
864105000 / 02 p. 1/6
PROCEDIMIENTO Ver Sustancias Interferentes conocidas en MUESTRA.
CURVA DE CALIBRACION Para preservar la integridad de los reactivos debe evitarse
Realizar en tubos de Kahn, las siguientes diluciones todo tipo de contaminaciones, empleando para la medición
en solución fisiológica del Apo Calibrator Turbitest únicamente micropipetas perfectamente limpias y secas.
AA: 1:10, 1:20, 1:40, 1:80 y 1:160, empleando solución
fisiológica como punto cero. PERFORMANCE
a) Reproducibilidad: realizando replicados de muestras
Calibrador diluido 30 ul
con distintos niveles de Apo A-I, se calculó la precisión
Reactivo A 1500 ul intraensayo.
Homogeneizar y leer la absorbancia de cada dilución Nivel D.S. C.V.
a 340 nm (DO1) llevando a cero con agua destilada. 131,5 mg/dl ± 1,7 mg/dl 1,3%
Luego agregar: 281,2 mg/dl ± 8,9 mg/dl 3,2%
Reactivo B 300 ul b) Límite de detección: 20 mg/dl.
Mezclar e incubar 15 minutos a temperatura ambiente. c) Rango de medición: 20 - 300 mg/dl.
Leer la absorbancia a 340 nm (DO2), llevando a cero con d) Efecto prozona: no se evidencia efecto prozona hasta
agua destilada. Calcular la diferencia de absorbancia 900 mg/dl de Apo A-I.
(∆A = DO2 - DO1) para cada dilución del calibrador,
incluyendo el punto cero. Representar en papel milime- PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS
trado las diferencias de absorbancia (∆A) en función de Referirse a las adaptaciones específicas de cada analizador.
la concentración en mg/dl del calibrador.
PRESENTACION
PROCEDIMIENTO PARA MUESTRAS 60 ml: - 1 x 50 ml Reactivo A
Realizar una dilución 1:10 de las muestras en solución - 1 x 10 ml Reactivo B
fisiológica. (Cód. 1009361)
Muestra diluida 30 ul 60 ml: - 1 x 50 ml Reactivo A
Reactivo A 1500 ul - 1 x 10 ml Reactivo B
(Cód. 1009639)
Homogeneizar y leer la absorbancia de cada dilución
BIBLIOGRAFIA
Luego agregar:
Reactivo B 300 ul 2005.
Mezclar e incubar 15 minutos a temperatura ambiente. - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
Leer la absorbancia a 340 nm (DO2), llevando a cero con AACC Press, 5th ed., 2000.
agua destilada.

Las muestras con absorbancias superiores a la del Apo
Calibrator Turbitest AA deben ser diluidas con solución

Se recomienda el uso de Lipid Control de Wiener lab.
Hombres: 111 - 157 mg/dl (1,11 - 1,57 g/l)
Mujeres: 126 - 182 mg/dl (1,26 - 1,82 g/l)
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Símbolos
C
M Elaborado por:

Europea Nocivo

Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
864105000 / 02 p. 3/6 UR121106
LINEA TURBITEST AA
Apo B
de apolipoproteína B en suero

La apolipoproteína B (Apo B) es una de las proteínas hu- ALMACENAMIENTO
manas de mayor tamaño. Representa aproximadamente el Reactivos Provistos: estables en refrigerador (2-10oC) has-
95% del total del contenido proteico de las lipoproteínas de ta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No congelar.
baja densidad (LDL). Es también el componente proteico
de las lipoproteínas de muy baja densidad (VLDL) y de los MUESTRA
quilomicrones. Suero
Apo B es esencial en la formación y liberación al plasma de a) Recolección: obtener la muestra de la manera usual.
las lipoproteínas e interactúa con los receptores de LDL pre- b) Aditivos: no se requieren.
sentes en las células periféricas lo que resulta en la remoción c) Sustancias interferentes conocidas: no emplear mues-
y degradación de las LDL. tras hemolizadas, lipémicas o contaminadas. Las muestras
Niveles elevados de Apo B se encuentran en pacientes con que poseen precipitados deben ser centrifugadas previo a
hipercolesterolemia familiar, hiperapobetalipoproteinemia su ensayo. No se observan interferencias por hemoglobina
familiar, síndrome nefrótico, obstrucción biliar, hiperlipidemia hasta 1000 mg/dl, triglicéridos hasta 2500 mg/dl, bilirrubina
tipo ll. Los niveles aumentados de Apo B se asocian con hasta 20 mg/dl, heparina hasta 50 mg/dl ni citrato de sodio
riesgo aumentado de aterosclerosis. 1000 mg/dl.
Niveles disminuidos de Apo B se encuentran en pacientes Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
con hipobeta lipoproteinemia familiar, abetalipoproteinemia, drogas en el presente método.
anemia crónica, enfermedad hepática y degeneración neuro- d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
muscular. muestra debe ser preferentemente fresca. Si el ensayo no es
realizado en el día, la muestra puede ser conservada 48 ho-
FUNDAMENTOS DEL METODO ras a 2-10oC o por períodos más prolongados de tiempo a -20oC.
La Apo B reacciona con el anticuerpo específico formando
inmunocomplejos insolubles. La turbidez causada por estos MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
inmunocomplejos es proporcional a la concentración de - Espectrofotómetro
Apo B en la muestra y puede ser medida espectrofotomé- - Cubetas espectrofotométricas de caras paralelas
tricamente. - Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados
- Tubos de Kahn o hemólisis
REACTIVOS PROVISTOS - Cronómetro
A. Reactivo A: buffer fosfato, pH 7,4.
B. Reactivo B: anticuerpos policlonales anti-Apo B humana CONDICIONES DE REACCION
(cabra) en buffer fosfato, pH 7,4. - Longitud de onda: 340 nm
- Temperatura de reacción: temperatura ambiente (25oC). El
REACTIVOS NO PROVISTOS control de la temperatura no es crítico, pudiendo oscilar
- Solución fisiológica. entre 22 y 30oC.
- Apo Calibrator Turbitest AA de Wiener lab. - Tiempo de reacción: 15 minutos
INSTRUCCIONES PARA SU USO - Volumen final de reacción: 1810 ul
Reactivos Provistos: listos para usar. Los volúmenes de muestra y reactivos pueden variarse
proporcionalmente, sin que se alteren los factores de cálculo.
PRECAUCIONES
Los reactivos son para uso diagnóstico “in vitro”.
Todas las muestras de pacientes deben manipularse como PROCEDIMIENTO
solución fisiológica del Apo Calibrator Turbitest AA:
1:1; 1:2; 1:4; 1:8; 1:16, empleando solución fisiológica
como punto cero.
864105400 / 02 p. 1/6
PERFORMANCE
Calibrador diluido 10 ul
a) Reproducibilidad: se realizaron 20 replicados consecu-
Reactivo A 1500 ul tivos de dos muestras con distintos niveles de Apo B. Con
Homogeneizar y leer la absorbancia de cada dilución a los datos obtenidos, se calculó la precisión intraensayo.
340 nm (DO1) llevando a cero con agua destilada. Luego Nivel D.S. C.V.
agregar: 133,7 mg/dl ± 3,7 mg/dl 2,8%
169,1 mg/dl ± 4,2 mg/dl 2,5%
Reactivo B 300 ul
b) Límite de detección: 30 mg/dl.
Leer la absorbancia a 340 nm (DO2), llevando a cero con c) Rango de medición: 30 - 400 mg/dl.
agua destilada. d) Efecto prozona: no se evidencia efecto prozona hasta
Calcular la diferencia de absorbancia (∆A = DO2 - DO1) 4000 mg/dl de Apo B.
para cada dilución del calibrador, incluyendo el punto cero.
Representar en papel milimetrado las diferencias de ab- PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS
sorbancia (∆A) en función de la concentración en mg/dl Referirse a las adaptaciones específicas de cada analizador.
del Apo Calibrator Turbitest AA.
PRESENTACION
Muestra 10 ul - 1 x 10 ml Reactivo B
(Cód. 1009362)
Reactivo A 1500 ul
Homogeneizar y leer la absorbancia de cada dilución a - 1 x 10 ml Reactivo B
340 nm (DO1) llevando a cero con agua destilada. Luego (Cód. 1009640)
agregar:
Reactivo B 300 ul BIBLIOGRAFIA
Mezclar e incubar 15 minutos a temperatura ambiente. 2005.
Leer la absorbancia a 340 nm (DO2), llevando a cero con - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
agua destilada. AACC Press, 5th ed., 2000.

Las muestras con absorbancias superiores a la del Apo
Calibrator Turbitest AA deben ser diluidas con solución

Se recomienda el uso de Lipid Control de Wiener lab.
El control deberá procesarse de la misma manera que las
muestras.
Hombres: 79 - 127 mg/dl (0,79 - 1,27 g/l)
Mujeres: 70 - 122 mg/dl (0,70 - 1,22 g/l)

únicamente micropipetas perfectamente limpias y secas.
864105400 / 02 p. 2/6
Símbolos
C
M Elaborado por:

Europea Nocivo

Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
864105400 / 02 p. 3/6 UR121106
LINEA TURBITEST AA
Apo
C Calibrator
Para la calibración de la determinación de apolipoproteínas
A-I y B por métodos inmunoturbidimétricos
Apo Calibrator Turbitest AA está diseñado para ser usado Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
en la calibración de la determinación de apolipoproteínas reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
A-I y B con los reactivos inmunoturbidimétricos Apo A-I Este producto cumple con los requerimientos previstos
Turbitest AA y Apo B Turbitest AA de Wiener lab.
Consultar los valores asignados en el rótulo, debido a que C por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios
el mismo es lote específico.
REACTIVOS PROVISTOS
Calibrador: suero humano liofilizado conteniendo apolipo- V Uso diagnóstico "in vitro"
proteínas A-I y B.
REACTIVO NO PROVISTO Fecha de caducidad

Agua bidestilada o desionizada.
H

Reconstituir el vial con el volumen de agua bidestilada o  No congelar

desionizada indicado en el rótulo. Tapar, dejar reposar 30
minutos y luego mezclar suavemente (sin agitar) hasta F Riesgo biológico
obtener disolución completa antes de su uso.
Se recomienda mantener el reactivo en el frasco original Volumen después de la reconstitución
luego de su reconstitución y durante su uso.
Cont. Contenido
PRECAUCIONES g Número de lote

Evitar ingestión y contacto con la piel. M Elaborado por:
Este calibrador ha sido preparado a partir de material no
reactivo para HBsAg, HCV y HIV. Sin embargo debe mane- Nocivo
jarse como si se tratara de una muestra infectiva.
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales Corrosivo / Cáustico
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de Irritante
ALMACENAMIENTO Calibr. Calibrador
Calibrador: estable en refrigerador (2-10oC) hasta la fecha
de vencimiento indicada en el envase. Una vez reconstituido b Control
es estable 1 mes a 2-10oC o 3 meses a -20oC alicuotado y
congelado inmediatamente después de su reconstitución. b Control Positivo
Sólo puede descongelarse una vez.
Mantener el frasco bien cerrado después de su uso. Evitar
c Control Negativo
contaminaciones.
PRESENTACION M Wiener Laboratorios S.A.I.C.

Riobamba 2944
- 1 x 1 ml (Cód. 1999722).
Wiener lab.
Bioquímica
867009600 / 01 p. 1/2 UR110901
APTTest
ellágico
C Reactivos para la determinación del Tiempo de
Tromboplastina Parcial Activada
SIGNIFICACION CLINICA estasis o trauma) y colocar en un tubo con anticoagulante en

El tiempo de tromboplastina parcial activada (APTT) es una proporción 9 + 1 exacta (ejemplo: 4,5 ml de sangre + 0,5 ml
prueba sensible a la deficiencia de factores procoagulantes de Anticoagulante TP de Wiener lab.). Mezclar suavemente.
del plasma así como a la presencia de ciertos inhibidores Centrifugar y separar el plasma antes de los 30 minutos. Es
de la coagulación. Sirve para detectar anormalidades en recomendable efectuar la extracción con jeringas plásticas.
la vía intrínseca de la coagulación, como son los factores b) Aditivos: para obtener el plasma debe emplearse Anti-
necesarios para la formación del activador intrínseco de coagulante TP de Wiener lab. o citrato de sodio 130 mmol/l
la protrombina, o sea los factores VIII, IX, XI y XII. Tam- (3,8%) o 109 mmol/l (3,2%).
bién detecta deficiencias severas de los factores II, V, X y c) Sustancias interferentes conocidas:
fibrinógeno, no siendo así con los trastornos plaquetarios, - Las contaminaciones, visibles o no, son causa de tiempos
las deficiencias de los factores VII y XIII ni los problemas falsamente prolongados.
vasculares. La rapidez, sencillez y reproducibilidad de la - No debe emplearse EDTA o heparina para obtener plasma.
prueba la hacen muy adecuada para el control de la tera- - Hemólisis visibles dificultan la medición foto-óptica de los
péutica anticoagulante por heparina. También permite la resultados.
identificación rápida de hemofílicos en potencia, a fin de Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
poder someterlos a tratamientos preventivos prequirúrgicos drogas en el presente método.
y evitar problemas hemorrágicos. d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: el
plasma debe mantenerse en refrigerador (2-10oC) hasta
FUNDAMENTOS DEL METODO el momento de efectuar la prueba. Este período no debe
El ensayo se basa en la medida del tiempo que tarda en coa- prolongarse más de 4 horas. En caso de no poder proce-
gular un plasma descalcificado, colocado en un baño a 37oC sarse en este lapso, el plasma debe congelarse a -20oC.
y en presencia de un exceso de cefalina, activador y calcio. Este procedimiento, al igual que el descongelado, debe
realizarse con rapidez (sumergiendo en baño a 37oC) previo
REACTIVOS PROVISTOS a la determinación.
A. Reactivo A: viales conteniendo cefalina bovina con ácido La muestra debe conservarse hasta el momento de su
ellágico como activador soluble. análisis en tubos plásticos para minimizar los efectos de
B. Reactivo B: solución de cloruro de calcio estable 0,025 mol/l. activación por contacto que pueden ocurrir con los tubos
de vidrio.
Reactivo A: listo para usar. Homogeneizar antes de usar. MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
Reactivo B: listo para usar. - Tubos de hemólisis.
- Pipetas y micropipetas para medir los volúmenes indicados.
PRECAUCIONES - Baño de agua a 37oC.
Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro". - Cronómetro.
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales - Fuente luminosa, para la observación del coágulo.
acuerdo a la normativa local vigente. PROCEDIMIENTO
Precalentar el Reactivo B antes de realizar la prueba en
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE baño de agua a 37oC.
En un tubo de hemólisis colocar:
ALMACENAMIENTO
Los Reactivos Provistos son estables en refrigerador (2- Muestra (plasma desconocido o control) 100 ul
10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
Reactivo A 100 ul
No congelar.
Mezclar e incubar 3 minutos a 37oC, luego agregar:
MUESTRA Reactivo B (a 37oC) 100 ul
Plasma
a) Recolección: obtener sangre cuidadosamente (evitando Disparar simultáneamente un cronómetro. Agitar breve-
870110022 / 01 p. 1/9
mente para homogeneizar el contenido, mantener en el trucciones de almacenamiento en MUESTRA.
baño unos 25 segundos. Luego sacar el tubo del baño, El mecanismo de la coagulación involucra una serie de
inclinar suavemente una vez por segundo y detener el reacciones enzimáticas que pueden ser influenciadas por
cronómetro en el momento de la formación del coágulo. toda condición que afecte a los sistemas enzimáticos en
Pueden emplearse para la lectura de los resultados general, razón por la cual se deben observar las mismas
aparatos automáticos o semiautomáticos que detecten precauciones metodológicas.
la formación de coágulos de fibrina, por métodos foto- Debe tenerse en cuenta que variaciones en la relación anti-
ópticos o mecánicos. coagulante/muestra o en la concentración de citrato utilizada
Tomar nota del tiempo de coagulación. afectan los tiempos de tromboplastina parcial activada, por
lo que se recomienda controlar la dosis de anticoagulante
empleada al tomar la muestra.
INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS
Los resultados pueden expresarse de distinta forma: PERFORMANCE
1) como tiempo de tromboplastina parcial activada en Reproducibilidad: los estudios de precisión se realizaron
segundos; siguiendo una modificación del protocolo EP5-A del NCCLS
2) como relación entre el tiempo obtenido con el desconocido (National Committee on Clinical Laboratory Standards). Se
y el de un plasma control. obtuvieron los siguientes resultados:
Precisión intraensayo
Plasma Control normal - patológico de Wiener lab. Muestra Nivel D.S. C.V.
Plasma Control normal 34,1 seg ± 0,49 seg 1,44%
El intervalo de valores de referencia observados en indivi- Plasma Control patológico 87,9 seg ± 0,49 seg 0,56%
duos normales, empleando la técnica manual mencionada, Pool de plasmas normales 29,3 seg ± 0,35 seg 1,18%
oscila entre 30-43 segundos.
Se consideran fuera de lo normal valores que difieran en más Precisión total
de 6 segundos de un pool de plasmas normales.
Muestra Nivel D.S. C.V.
Es recomendable que cada laboratorio procese un pool de
plasmas normales con cada lote de reactivos empleado y Plasma Control normal 34,1 seg ± 1,00 seg 2,93%
que correlacione los valores obtenidos para los pacientes Plasma Control patológico 87,9 seg ± 3,66 seg 4,16%
con el de dicho plasma, haciendo constar estos resultados
en el informe. Pool de plasmas normales 29,3 seg ± 0,51 seg 1,75%
referencia a partir de las técnicas e instrumental empleado, PRESENTACION
ya que los valores de APTT de individuos sanos varían en - 150 determinaciones (6 x 2,5 ml). (Cód 1705004).
función del laboratorio, dependiendo de la técnica empleada.
BIBLIOGRAFIA
CURVA DE CALIBRACION - Bell, W.N.; Alton, H.G. - Nature 174:880 (1954).
Este método es útil como control de la respuesta a la hepa- - Dacie, J.B.; Lewis, S.M. - Hematología Práctica - Ediciones
rina en pacientes tratados con este anticoagulante. Toray, 2a Edición (1970).
La técnica empleada es la siguiente: - Wintrobe, M.M. - Hematología Clínica, 3a. Edición Inter-
Preparar una Solución de Trabajo de heparina en solución médica (1969).
fisiológica cuya concentración sea 10 unidades/ml. Debe - Bragos, I.; Rodríguez Pécora, S.; Lorenzo, L.; Capriotti,
emplearse la misma heparina que se suministra al paciente. G. - 53° Triduo Bioquímico Científico Anual, Bahía Blanca.
Preparar diluciones de esta Solución de Trabajo utilizando (1988).
un pool de plasmas frescos normales o Plasma Control - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
normal como diluyente. Se deberán obtener diluciones de AACC Press, 4th ed., 2001.
0,8; 0,6; 0,4; 0,2 y 0,1 unidades/ml.
Determinar el tiempo de tromboplastina parcial para cada
una de estas soluciones así como para el pool de plasmas
y graficar en papel semilogarítmico APTT vs. concentración
de heparina.
El valor obtenido para el paciente debe correlacionarse con
los valores de la gráfica para obtener la concentración actual
de heparina circulante.

Ver Sustancias interferentes conocidas y Estabilidad e ins-
870110022 / 01 p. 2/9
Símbolos
C
M Elaborado por:

Europea Nocivo

Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870110022 / 01 p. 3/9 UR120514
APTTest
C Para la determinación del Tiempo de Tromboplastina
Parcial Activada

El tiempo de tromboplastina parcial activada (APTT), es una de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
prueba sensible a la deficiencia de factores procoagulantes Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
del plasma así como a la presencia de ciertos inhibidores acuerdo a la normativa local vigente.
de la coagulación.
Sirve para detectar anormalidades en la vía intrínseca de ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
la coagulación, como son los factores necesarios para la ALMACENAMIENTO
formación del activador intrínseco de la protrombina, o sea Reactivos Provistos: estables en refrigerador (2-10oC)
los factores VIII, IX, XI y XII. hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
También detecta deficiencias severas de los factores II, V, X Reactivo A: una vez reconstituido es estable durante 14
y fibrinógeno, no siendo así con los trastornos plaquetarios, días en refrigerador o 30 días congelado (-20oC).
las deficiencias de los factores VII y XIII ni los problemas El congelado y descongelado sólo puede realizarse una vez.
vasculares. Por esto se recomienda dividirlo en porciones, de acuerdo
La rapidez, sencillez y reproducibilidad de la prueba la hacen a las necesidades de trabajo.
muy adecuada para el control de la terapéutica anticoagu-
lante por heparina. También permite la identificación rápida MUESTRA
de hemofílicos en potencia, a fin de poder someterlos a Plasma
tratamientos preventivos prequirúrgicos y evitar problemas a) Recolección: obtener sangre cuidadosamente (evitando
hemorrágicos. estasis o trauma) y colocar en un tubo con anticoagulante en
proporción 9 + 1 exacta (ejemplo: 4,5 ml de sangre + 0,5 ml
FUNDAMENTOS DEL METODO de Anticoagulante TP de Wiener lab.). Mezclar suavemente.
El ensayo se basa en la medida del tiempo que tarda en coa- Centrifugar y separar el plasma antes de los 30 minutos. Es
gular un plasma descalcificado, colocado en un baño a 37oC recomendable efectuar la extracción con jeringas plásticas.
y en presencia de un exceso de cefalina, activador y calcio. b) Aditivos: para obtener el plasma debe emplearse Anti-
coagulante TP de Wiener lab. o citrato de sodio 130 mmol/l
REACTIVOS PROVISTOS (3,8%) o 109 mmol/l (3,2%).
A. Reactivo A: viales conteniendo cefalina con tierra de c) Sustancias interferentes conocidas:
diatomeas como activador particulado. - Las contaminaciones, visibles o no, son causa de tiempos
B. Reactivo B: solución de cloruro de calcio 0,025 mol/l. falsamente prolongados.
- No debe emplearse EDTA o heparina para obtener plasma.
REACTIVOS NO PROVISTOS Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
Agua bidestilada o desionizada. drogas en el presente método.
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: el
INSTRUCCIONES PARA SU USO plasma debe mantenerse en refrigerador (2-10oC) hasta el
Reactivo A, preparación: momento de efectuar la prueba.
- Abrir un vial quitando el precinto metálico y retirando lenta- Este período no debe prolongarse más de 4 horas. En
mente el tapón de goma para evitar pérdidas del material. caso de no poder procesarse en este lapso, el plasma
- Agregar el volumen de agua bidestilada o desionizada debe congelarse a -20oC. Este procedimiento al igual que
indicado en el envase. el descongelado debe realizarse con rapidez (sumergiendo
- Verificar que la temperatura del agua empleada no sea en baño a 37oC) previo a la determinación.
mayor a 37oC. La muestra debe conservarse hasta el momento de su aná-
- Tapar y agitar suavemente hasta obtener una suspensión lisis en tubos plásticos para minimizar los efectos de activa-
homogénea. Volver a homogeneizar cada vez que se ción por contacto que pueden ocurrir con los tubos de vidrio.
emplee.
Reactivo B: listo para usar. MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
- Tubos de hemólisis.
PRECAUCIONES - Pipetas y micropipetas para medir los volúmenes indicados.
Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro". - Baño de agua a 37oC.
870100022 / 01 p. 1/9
- Cronómetro. los valores de la gráfica, para obtener la concentración actual
- Fuente luminosa, para la observación del coágulo. de heparina circulante.

PROCEDIMIENTO Ver Sustancias interferentes conocidas y Estabilidad e ins-
Precalentar el Reactivo B antes de realizar la prueba en trucciones de almacenamiento en MUESTRA.
baño de agua a 37oC. El mecanismo de la coagulación involucra una serie de
En un tubo de hemólisis colocar: reacciones enzimáticas que pueden ser influenciadas por
Muestra (plasma desconocido o control) 100 ul toda condición que afecte a los sistemas enzimáticos en
general, razón por la cual se deben observar las mismas
Reactivo A (homogeneizado) 100 ul precauciones metodológicas.
Mezclar e incubar 3 minutos a 37oC, luego agregar: Debe tenerse en cuenta que variaciones en la relación anti-
coagulante/muestra o en la concentración de citrato utilizada
Reactivo B (a 37oC) 100 ul afectan los tiempos de tromboplastina parcial activada, por
lo que se recomienda controlar la dosis de anticoagulante
Disparar simultáneamente un cronómetro. Agitar breve-
empleada al tomar la muestra.
mente para homogeneizar el contenido, mantener en el
baño unos 25 segundos. Luego sacar el tubo del baño,
PERFORMANCE
inclinar suavemente una vez por segundo y detener el
Reproducibilidad: procesando replicados de las mismas
cronómetro en el momento de la formación del coágulo.
muestras en un mismo día se obtuvieron los siguientes
Tomar nota del tiempo de coagulación.
resultados:
Nivel D.S. C.V.
INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS 45 seg ± 1,1 seg 2,5 %
Los resultados pueden expresarse de distinta forma: 62 seg ± 1,8 seg 3,0 %
1) Como tiempo de tromboplastina parcial activada en
segundos. PRESENTACION
2) Como relación entre el tiempo obtenido con el desconocido - 150 determinaciones (6 x 2,5 ml) (Cód. 1705002).
y el de un plasma control.
BIBLIOGRAFIA
METODO DE CONTROL DE CALIDAD - Bell, W.N.; Alton, H.G. - Nature 174:880 (1954).
Plasma Control normal - patológico de Wiener lab. - Dacie, J.B.; Lewis, S.M. - Hematología Práctica - Ediciones
Toray, 2º Edición (1970).
VALORES DE REFERENCIA - Wintrobe, M.M. - Hematología Clínica 3ª Edición Intermé-
El intervalo de valores observados en individuos normales dica (1969).
oscila entre 33-48 segundos. - Bragos, I; Rodríguez Pécora, S; Lorenzo, L; Capriotti, G.
Se considera fuera de lo normal valores que difieran en más - “Evaluación de un nuevo Reactivo de Tiempo Parcial de
de 6 segundos de un plasma control. Tromboplastina Activada” - 53º Triduo Bioquímico Científico
Es recomendable que cada laboratorio procese un plasma Anual; Bahía Blanca (1988).
control con cada lote de reactivos empleado y que correlacio- - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
ne los valores obtenidos para los pacientes con el de dicho AACC Press, 4th ed., 2001.
plasma, haciendo constar estos resultados en el informe.
Este método es útil como control de la respuesta a la hepa-
rina en pacientes tratados con este anticoagulante.
La técnica empleada es la siguiente:
1) Preparar una Solución de Trabajo de heparina en solución
fisiológica cuya concentración sea 10 Unidades/ml. Debe
emplearse la misma heparina que se suministra al paciente.
2) Preparar diluciones de esta Solución de Trabajo utilizan-
do un pool de plasmas frescos normales o Plasma Control
normal como diluyente. Se deberán obtener diluciones de
0,8; 0,6; 0,4; 0,2; y 0,1 Unidades/ml.
3) Determinar el tiempo de tromboplastina parcial para cada
una de estas soluciones así como para el pool de plasmas
y graficar en papel semilogarítmico APTT vs. concentración
de heparina.
El valor obtenido para el paciente debe correlacionarse con
870100022 / 01 p. 2/9
Símbolos
C
M Elaborado por:

Europea Nocivo

Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
Disp. Nº: 1611/89-5184/98 2000 Rosario - Argentina
870100022 / 01 p. 3/9 UR101021
LINEA MAXI
Artritest
C directo
Prueba en placa para el diagnóstico de artritis reumatoidea
SIGNIFICACION CLINICA PRECAUCIONES

La artritis reumatoidea es un síndrome crónico de etiología Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
desconocida, caracterizado por una inflamación inespecífica Los Controles Positivo y Negativo han sido examinados para
y generalmente simétrica de las articulaciones, que a veces antígeno de superficie del virus de hepatitis B (HBsAg), virus
evoluciona hacia la destrucción de las estructuras articulares de la hepatitis C (HCV) y anticuerpos contra HIV 1/2, encon-
y periarticulares. trándose no reactivos. No obstante, deben ser empleados
En la articulación enferma se observa un engrosamiento de la como si se tratara de material infectivo.
membrana sinovial con formación de pliegues y proliferación Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
de linfocitos. Estas células, que forman folículos linfoides, de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
son las responsables de la síntesis de factores reumatoideos Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
(FR) y otras inmunoglobulinas. acuerdo a la normativa local vigente.
Los FR son generalmente de tipo IgM anti-IgG, es decir que
reaccionan con las fracciones Fc de las IgG. También se ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
han encontrado FR de tipo IgG, aunque en mucho menor ALMACENAMIENTO
proporción de casos. Reactivo A y Controles (Positivo y Negativo): estables en
Los FR de tipo IgM están presentes en el 85-90% de los refrigerador (2-10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada
adultos con artritis reumatoidea aunque no es específico de en la caja. No congelar.
la enfermedad puesto que también se han encontrado en
individuos sanos (en un 3 a 5% de los casos). INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
Por tal motivo, cuando se sospecha la existencia de una enfer- REACTIVOS
medad distinta de la artritis reumatoidea, frente a una reacción La autoaglutinación del Reactivo A es indicio de deterioro
de aglutinación positiva es aconsejable realizar la precipitación del mismo, en tal caso desechar.
de las globulinas con sulfato de amonio. De tal forma, se
asegura la precipitación completa de los FR y se mantiene en MUESTRA
solución cualquier aglutinina responsable de una falsa reacción Suero
positiva, como así también algún posible inhibidor. a) Recolección: obtener suero de la manera usual. No deben
usarse muestras inactivadas por calor.
FUNDAMENTOS DEL METODO b) Aditivos: no se requieren.
El factor reumatoideo de tipo IgM se detecta en presencia de c) Sustancias interferentes conocidas: hemólisis y ciertas
gamma-inmunoglobulina o fracción II de Cohn (que en este proteínas (distintas del factor reumatoideo) pueden ser causa
caso es el antígeno) adsorbida sobre un soporte inerte de de resultados erróneos.
látex-poliestireno. Este antígeno se une a los FR (anti-IgG) Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
produciendo una aglutinación de las partículas de látex- drogas en el presente método.
poliestireno, visible macroscópicamente. d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: el
suero debe ser preferentemente fresco. En caso de no
REACTIVOS PROVISTOS procesarse en el momento puede conservarse en el refri-
A. Reactivo A: suspensión de partículas de látex poliesti- gerador (2-10oC) durante no más de una semana contada
reno de 0,20 micrones de diámetro, que tienen adsorbidas desde su recolección.
moléculas termoagregadas de gamma-inmunoglobulina o
fracción II de Cohn. MATERIAL REQUERIDO
Control Positivo*: dilución de proteínas séricas conteniendo 1- Provisto
factor reumatoideo. Equivale a 2 (+). - placas de plástico o vidrio fondo negro*
Control Negativo*: dilución de proteínas séricas no reactivas. - 1 tapa gotero de 25 ul
2- No provisto
INSTRUCCIONES PARA SU USO - Palillo o varilla de vidrio
Reactivo A: agitar bien antes de usar, vaciando previamente - Cronómetro
la pipeta del gotero. - Pipetas y micropipetas para medir los volúmenes indicados
Controles Positivo y Negativo: listos para usar. - Fuente de luz
* No provisto con todas las presentaciones 870130022 / 02 p. 1/9

PERFORMANCE
PROCEDIMIENTO a) Sensibilidad analítica: calibrado frente al Standard del
Llevar los reactivos y las muestras a temperatura am- CDC, se encuentra una sensibilidad de 1 UI/ml.
biente antes de usar. En un estudio realizado sobre 176 muestras provenientes
de una población hospitalaria se compararon los resultados
I- TECNICA CUALITATIVA con un método turbidimétrico cuantitativo, obteniéndose
En uno de los sectores delimitados de la placa adjunta una sensibilidad del 100% y una especificidad del 99,3%.
al equipo, colocar: En otro estudio realizado sobre una población de 33 mues-
Muestra o Controles 25 ul tras de pacientes con historia clínica de artritis reumatoidea,
se obtuvieron 29 muestras reactivas. Se concluye que el 88%
Reactivo A 1 gota (25 ul) de los pacientes con artritis reumatoidea son FR positivos.
Mezclar con palillo o varilla de vidrio hasta obtener una b) Especificidad: en un estudio realizado sobre 75 mues-
suspensión uniforme en toda la superficie delimitada tras provenientes de 50 hombres y 26 mujeres con edades
de la placa. Inmediatamente, disparar un cronómetro, entre 18 y 47 años, sin síntomas aparentes de enfermedad
balancear suavemente la placa y observar macroscó- reumática, se encontraron 72 muestras no reactivas. Por
picamente el resultado dentro de los dos minutos bajo lo tanto, se concluye que el 4% de esta población sana es
un haz luminoso. FR positiva.
II- TITULACION PRESENTACION

Los sueros positivos pueden titularse efectuando Equipos para 150 determinaciones (Cód. 1103153).
diluciones seriadas, en 6 tubos de Kahn.
1) Colocar 0,4 ml de solución fisiológica al primer tubo BIBLIOGRAFIA
y 0,2 ml de solución fisiológica a los 5 restantes. - Singer, J.M. and Plotz, C.M. - Am. J. Clin. Path. 28/611
2) Agregar 0,1 ml (100 ul) de suero al tubo No 1 y (1957).
mezclar. Transferir 0,2 ml de esta dilución al tubo No 2 - Singer, J. M. et al. - Am. J. Clin. Path. 72/4:597 (1979).
y mezclar, continuando de esta forma las diluciones - Brooks, G. W. and Cobb, S. - Arthritis and Rheumatism
hasta el último tubo. 6/3:198 (1963).
Las diluciones así obtenidas equivalen a 1:5; 1:10; - Plotz, C M. and Singer, J.M. - Annual Meeting of the Ame-
1:20; 1:40; 1:80; 1:160. rican Rheumatism Association, Chicago (1956).
3) Ensayar cada dilución según la Técnica Cualitativa. - Oreskes, I.; Singer, J.M. and Plotz, C.M. - J. Immunology
90:107 (1963).
INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS AACC Press, 4th ed., 2001.
Negativo: suspensión homogénea.
Positivo: aglutinación que aparece dentro de los dos minu-
tos. Se califica de 1 a 4 (+).
Título: inversa de la máxima dilución a la que se produce
aglutinación visible macroscópicamente.
La concentración aproximada de factor reumatoideo en la
muestra puede ser calculada por la fórmula siguiente:
FR (UI/ml) = Título x Sensibilidad de la reacción (1 UI/ml)
Ejemplo: la muestra presenta un título de 1:40. Su concen-
tración en FR es de 40 x 1 = 40 UI/ml.

Procesar simultáneamente los controles provistos o sueros
probadamente reactivos, empleando 25 ul del Control corres-
pondiente y 25 ul de Reactivo A según la técnica cualitativa.
No están claramente establecidos. Se consideran patológi-
cos valores superiores a 20-30 UI/ml.

Cualquier alteración en la proporción Muestra/Reactivo,
puede conducir a resultados erróneos.
870130022 / 02 p. 2/9
Símbolos
C
M Elaborado por:

Europea Nocivo

Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
Cert. Nº 4700/02 2000 Rosario - Argentina
870130022 / 02 p. 3/9 UR130708
Artritest
C directo
Prueba en placa para el diagnóstico de artritis
reumatoidea

La artritis reumatoidea es un síndrome crónico de etiología Reactivo A: agitar bien antes de usar, vaciando previamente
desconocida, caracterizado por una inflamación inespecífica la pipeta del gotero.
y generalmente simétrica de las articulaciones, que a veces Controles (Positivo y Negativo): listos para usar.
evoluciona hacia la destrucción de las estructuras articulares
y periarticulares. PRECAUCIONES
En la articulación enferma se observa un engrosamiento de la Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
membrana sinovial con formación de pliegues y proliferación Los controles han sido ensayados para HIV, HCV y HBV
de linfocitos. Estas células, que forman folículos linfoides, encontrándose inactivos. No obstante, deben ser empleados
son las responsables de la síntesis de factores reumatoideos como si se tratara de material infectivo.
(FR) y otras inmunoglobulinas. Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
Los FR son generalmente de tipo IgM anti-IgG, es decir que de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
reaccionan con las fracciones Fc de las IgG. También se Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
han encontrado FR de tipo IgG, aunque en mucho menor acuerdo a la normativa local vigente.
proporción de casos.
Los FR de tipo IgM están presentes en el 85-90% de los ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
adultos con artritis reumatoidea aunque no es específico de ALMACENAMIENTO
la enfermedad puesto que también se han encontrado en Reactivos Provistos: estables en refrigerador (2-10oC) has-
individuos sanos (en un 3 a 5% de los casos). ta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No congelar.
Por tal motivo, cuando se sospecha la existencia de una
enfermedad distinta de la artritis reumatoidea, frente a una INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
reacción de aglutinación positiva es aconsejable realizar la REACTIVOS
precipitación de las globulinas con sulfato de amonio. De La autoaglutinación del Reactivo A es indicio de deterioro
tal forma, se asegura la precipitación completa de los FR y del mismo, en tal caso desechar.
se mantiene en solución cualquier aglutinina responsable
de una falsa reacción positiva, como así también algún MUESTRA
posible inhibidor. Suero
a) Recolección: obtener suero de la manera usual. No deben
FUNDAMENTOS DEL METODO usarse muestras inactivadas por calor.
El factor reumatoideo de tipo IgM se detecta en presencia de b) Aditivos: no se requieren.
gamma-inmunoglobulina o fracción II de Cohn (que en este c) Sustancias interferentes conocidas: hemólisis y ciertas
caso es el antígeno) adsorbida sobre un soporte inerte de proteínas (distintas del factor reumatoideo) pueden ser causa
látex-poliestireno. Este antígeno se une a los FR (anti-IgG) de resultados erróneos.
produciendo una aglutinación de las partículas de látex- Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
poliestireno, visible macroscópicamente. drogas en el presente método.
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: el suero
REACTIVOS PROVISTOS debe ser preferentemente fresco. En caso de no procesarse
A. Reactivo A: suspensión de partículas de látex poliesti- en el momento puede conservarse en el refrigerador (2-10oC)
reno de 0,20 micrones de diámetro, que tienen adsorbidas durante no más de una semana contada desde su recolección.
moléculas termoagregadas de gamma-inmunoglobulina o
fracción II de Cohn. MATERIAL REQUERIDO
Control Positivo: dilución de suero humano positivo. Equivale a 2 (+). 1- Provisto
Control Negativo: dilución de suero humano negativo. - placas de plástico o vidrio fondo negro.
2- No provisto
REACTIVO NO PROVISTO - Palillo o varilla de vidrio.
- Reactivo Precipitante (para el ensayo de la fracción - Cronómetro.
globulínica): sulfato de amonio 211,5 g/l en CINa 5,15 g/l. - Material volumétrico adecuado.
- Solución fisiológica. - Fuente de luz.
870120000 / 02 p. 1/6
Técnica semicuantitativa (titulación)
PROCEDIMIENTO Título: inversa de la máxima dilución a la que se produce
Llevar los reactivos y las muestras a temperatura am- aglutinación visible macroscópicamente.
biente antes de usar. La concentración aproximada de factor reumatoideo en la
muestra puede ser calculada por la fórmula siguiente:
I- TECNICA CUALITATIVA
En uno de los sectores delimitados de la placa adjunta FR (UI/ml) = Título x Sensibilidad de la reacción (1 UI/ml)
al equipo, colocar: Ejemplo: la muestra presenta un título de 1:40. Su concen-
Muestra 1 gota (50 ul) tración en FR es de 40 x 1 = 40 UI/ml.
Reactivo A 1 gota (50 ul) METODO DE CONTROL DE CALIDAD

Mezclar con palillo o varilla de vidrio hasta obtener una Procesar simultáneamente el Control Negativo y el Control
suspensión uniforme en toda la superficie delimitada Positivo provistos, empleando una gota del Control corres-
de la placa. Inmediatamente, disparar un cronómetro, pondiente en lugar de la Muestra.
balancear suavemente la placa y observar macroscó-
picamente el resultado dentro de los dos minutos bajo VALORES DE REFERENCIA
un haz luminoso. No están claramente establecidos. Se consideran patológi-
cos valores superiores a 20-30 UI/ml.
II- TECNICA SEMICUANTITATIVA
Los sueros positivos pueden titularse efectuando LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
diluciones seriadas, en 6 tubos de Kahn. Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
1) Colocar 0,4 ml de solución fisiológica al primer tubo
y 0,2 ml de solución fisiológica a los 5 restantes. PERFORMANCE
2) Agregar 0,1 ml (100 ul) de suero al tubo No 1 y a) Sensibilidad analítica: calibrado frente al Standard del
mezclar. Transferir 0,2 ml de esta dilución al tubo No 2 CDC, se encuentra una sensibilidad de 1 UI/ml.
y mezclar, continuando de esta forma las diluciones En un estudio realizado sobre 176 muestras provenientes
hasta el último tubo. de una población hospitalaria se compararon los resultados
Las diluciones así obtenidas equivalen a 1:5; 1:10; con un método turbidimétrico cuantitativo, obteniéndose una
1:20; 1:40; 1:80; 1:160. sensibilidad del 100%.
3) Ensayar cada dilución según la Técnica Cualitativa. En otro estudio realizado sobre una población de 33 mues-
III- ENSAYO DE LA FRACCION GLOBULINICA tras de pacientes con historia clínica de artritis reumatoidea,
En un tubo de centrífuga colocar: se obtuvieron 29 muestras reactivas. Se concluye que el 88%
de los pacientes con artritis reumatoidea son FR positivos.
Muestra (suero sin diluir) 1 ml b) Especificidad: en un estudio realizado sobre 75 mues-
Gota a gota y agitando suavemente, agregar: tras provenientes de 50 hombres y 26 mujeres con edades
entre 18 y 47 años, sin síntomas aparentes de enfermedad
Reactivo Precipitante 3,3 ml reumática, se encontraron 72 muestras no reactivas. Por lo
Mezclar por inversión, dejar al menos 30 minutos tanto, se concluye que el 4% de esta población sana es FR
(preferiblemente en heladera) y centrifugar. Volcar el positiva, siendo la especificidad del 96%.
sobrenadante, dejando el tubo invertido sobre papel
de filtro hasta escurrimiento completo y luego agregar: PRESENTACION
Equipo para 50 determinaciones (Cód. 1103152).
Solución fisiológica 1 ml
Disolver el precipitado. Esta solución de globulina tiene BIBLIOGRAFIA
el volumen original del suero y para su ensayo debe - Singer, J.M. and Plotz, C.M. - Am. J. Clin. Path. 28/611
procesarse al igual que la Muestra según la Técnica (1957).
Cualitativa. - Singer, J. M. et al. - Am. J. Clin. Path. 72/4:597 (1979).
- Brooks, G. W. and Cobb, S. - Arthritis and Rheumatism
6/3:198 (1963).
INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS - Plotz, C M. and Singer, J.M. - Annual Meeting of the Ame-
Técnica cualitativa rican Rheumatism Association, Chicago (1956).
Negativo: suspensión homogénea. - Oreskes, I.; Singer, J.M. and Plotz, C.M. - J. Immunology
Positivo: aglutinación que aparece dentro de los dos minu- 90:107 (1963).
tos. Se califica de 1 a 4 (+), siendo: - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
4+: aglutinación franca AACC Press, 4th ed., 2001.
3+: moderada aglutinación
2+: ligera aglutinación
1+: aglutinación débil
870120000 / 02 p. 2/6
Símbolos
C
M Elaborado por:

Europea Nocivo

Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo
Wiener lab.
Riobamba 2944
Bioquímica
870120000 / 02 p. 3/6 UR130708
LINEA TURBITEST AA
ASO
C Calibrador
Para la calibración de la determinación de antiestreptolisina
O (ASO) por métodos inmunoturbidimétricos
El ASO Calibrador está diseñado para ser usado con los Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
reactivos inmunoturbidimétricos de Wiener lab. Consultar el reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
valor asignado en el rótulo, debido a que el mismo es lote Este producto cumple con los requerimientos previstos
específico. Dicho valor se encuentra estandarizado con
respecto al standard de la World Health Organization (WHO). C por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios
REACTIVOS PROVISTOS P Representante autorizado en la Comunidad Europea

Calibrador: suero con alta concentración de antiestrep-
tolisina O diluido en solución fisiológica tamponada, con V Uso diagnóstico "in vitro"
conservadores apropiados.
INSTRUCCIONES PARA SU USO Fecha de caducidad

Calibrador: listo para usar.
H
PRECAUCIONES
El reactivo es para uso diagnóstico "in vitro".  No congelar

Evitar ingestión y contacto con la piel.
Este calibrador ha sido preparado a partir de material no F Riesgo biológico
reactivo para HBsAg y HIV. Sin embargo debe manejarse
como si se tratara de una muestra infectiva. Volumen después de la reconstitución
Cont. Contenido
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de g Número de lote
M Elaborado por:
ALMACENAMIENTO Nocivo
de vencimiento indicada en el envase. Corrosivo / Cáustico
Una vez abierto es estable 30 días refrigerado (2-10oC).
Irritante
PRESENTACION
- 1 x 1 ml (Cód. 1913263). i Consultar instrucciones de uso
BIBLIOGRAFIA Calibr. Calibrador

- Otsuji,S. Journal of Clinical Laboratory Analysis 4:241-245
(1990). b Control
- Henkel E., J.Clin.Chem.Clin.Biochem. Vol.22, 919-926
(1984). b Control Positivo
- Curtis,G. J.Clin.Pathol. 41:1331-1333 (1988).
c Control Negativo
Wiener lab.
Riobamba 2944
Bioquímica
870140000 / 01 p. 1/2 UR160314
LINEA MAXI
ASO-látex
C directo
Prueba en placa para la determinación de antiestreptolisina O

El anticuerpo antiestreptolisina O se encuentra presente REACTIVOS
en casi todas las personas en títulos bajos, debido a que La autoaglutinación del Reactivo A es indicio de deterioro
las infecciones estreptocócicas son comunes. Sin embargo del mismo. En tal caso desechar.
un título alto o creciente de antiestreptolisina O, indica una
infección reciente producida por un estreptococo beta he- MUESTRA
molítico de grupo A, como amigdalitis, escarlatina, sepsis Suero
puerperal, erisipela. a) Recolección: obtener suero de la manera usual.
b) Aditivos: no se requieren.
FUNDAMENTOS DEL METODO c) Sustancias interferentes conocidas: los sueros marca-
Los anticuerpos antiestreptolisina O se detectan en suero por damente lipémicos o contaminados pueden dar resultados
su reacción con la estreptolisina O adsorbida sobre soporte falsamente positivos.
inerte de látex. Los anticuerpos antiestreptolisina reaccionan d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
con la estreptolisina produciendo una aglutinación visible antiestreptolisina en suero es estable 24 horas refrigerada
macroscópicamente. (2-10oC) o congelada por períodos prolongados.
REACTIVOS PROVISTOS MATERIAL REQUERIDO

A. Reactivo A: suspensión de partículas de látex poliestireno 1- Provisto
recubiertas con estreptolisina O. - placas de plástico o vidrio fondo negro*
Control Positivo*: suero conteniendo antiestreptolisina O - 1 tapa gotero de 25 ul
en concentración superior a 250 UI/ml.
2- No provisto
Control Negativo*: dilución de proteínas séricas no reactivas.
- pipetas y micropipetas capaces de dispensar los volúme-
REACTIVOS NO PROVISTOS nes indicados
Solución fisiológica (para la técnica semicuantitativa). - palillos mezcladores descartables
- cronómetro
INSTRUCCIONES PARA SU USO - lámpara o fuente de luz
Reactivo A: homogeneizar por agitación intensa y luego cambiar - tubos de Kahn
la tapa ciega por la tapa gotero suministrada adicionalmente.
Controles Positivo y Negativo: listos para usar.
PROCEDIMIENTO
PRECAUCIONES Llevar los reactivos y la muestra a temperatura ambiente.
Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro". Agitar el Reactivo A antes de usar, vaciando previamente
Los Controles Positivo y Negativo han sido examinados para la pipeta del gotero.
antígeno de superficie del virus de hepatitis B, virus de la I- TECNICA CUALITATIVA
hepatitis C y anticuerpos contra HIV 1/2, encontrándose no En uno de los sectores delimitados de la placa adjunta
reactivos. No obstante, deben ser empleados como si se al equipo colocar:
tratara de material infectivo.
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales Reactivo A 1 gota (25 ul)
de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos. Muestra o Controles 25 ul
acuerdo a la normativa local vigente. Mezclar con palillo descartable (uno para cada
muestra) hasta obtener una suspensión uniforme en
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE la superficie delimitada de la placa. Inmediatamente
ALMACENAMIENTO disparar un cronómetro, balancear suavemente la
Los Reactivos Provistos son estables en refrigerador placa y observar macroscópicamente el resultado
(2-10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. dentro de los 2 minutos.
No congelar.

PRESENTACION
II- TECNICA SEMICUANTITATIVA (Titulación) Equipos para 150 determinaciones (Cód. 1073152).
Los sueros positivos pueden titularse efectuando
diluciones seriadas en tubos de Kahn. BIBLIOGRAFIA
a) Colocar 0,5 ml de solución fisiológica en cada uno - Sonnenwirth A.C.; Jarret L. - Gradwohl Métodos y Diagnós-
de los tubos. ticos del Laboratorio Clínico - Editorial Panamericana - 8o
b) Agregar 0,5 ml de suero al tubo No 1 y mezclar. Edición (1983).
Transferir 0,5 ml de esta dilución al tubo No 2 y mezclar,
continuando así las diluciones hasta el último tubo.
Las diluciones así obtenidas equivalen a 1:2, 1:4, 1:8,
1:16, etc.
c) Ensayar cada dilución según técnica I.

Positivo: aglutinación que aparece dentro de los 2 minutos.
Se califica de 1 a 4 +.
El nivel aproximado de antiestreptolisina O en la muestra,
puede ser calculada por la fórmula siguiente:
ASO (UI/ml) = Título x Sensibilidad de la reacción (200 UI/ml)
Ejemplo: la muestra presenta un título de 1:2. El nivel de
ASO es de 2 x 200 = 400 UI/ml

Es conveniente procesar simultáneamente los controles
provistos o sueros probadamente reactivos, empleando 25 ul
del Control correspondiente y 25 ul de Reactivo A según la
técnica cualitativa.
Hasta 200 UI/ml

- Tiempos de reacción mayores de 2 minutos pueden producir
reacciones falsamente positivas por efecto del secado de
los reactivos.
- Se pueden producir falsos negativos en niños mayores
de 6 meses y menores de 6 años o en infección reciente.
- Debe tenerse en cuenta que en este tipo de infecciones,
un resultado aislado sólo constituye un dato auxiliar, por
lo que se recomienda efectuar determinaciones seriadas
cada 15 - 20 días durante 4 ó 6 semanas.
- Cualquier alteración en la proporción Muestra/Reactivo,
PERFORMANCE
a) Sensibilidad: 200 UI/ml.
b) Especificidad: en una población adulta sana se obtienen
títulos de antiestreptolisina O menores o iguales a 200 Ul/ml
en el 95% de los casos. En una población infantil ( mayores
de 2 años) se pueden tener títulos de hasta 300 UI/ml.
870160000 / 02 p. 2/6
Símbolos
C
M Elaborado por:

Europea Nocivo

Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo
Wiener lab.
Riobamba 2944
Bioquímica
870160000 / 02 p. 3/6 UR130708
ASO
látex
C Prueba de látex para la determinación de antiestreptolisina O en suero

El anticuerpo antiestreptolisina O se encuentra presente REACTIVOS
en casi todas las personas en títulos bajos, debido a que La autoaglutinación del Reactivo A es indicio de deterioro
las infecciones estreptocócicas son comunes. Sin embargo del mismo. En tal caso desechar.
un título alto o creciente de antiestreptolisina O, indica una
infección reciente producida por un estreptococo beta he- MUESTRA
molítico de grupo A, como amigdalitis, escarlatina, sepsis Suero
puerperal, erisipela. a) Recolección: obtener suero de la manera usual.
Los anticuerpos antiestreptolisina O se detectan en suero por damente lipémicos o contaminados pueden dar resultados
su reacción con la estreptolisina O adsorbida sobre soporte falsamente positivos.
inerte de látex. Los anticuerpos antiestreptolisina reaccionan d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
con la estreptolisina produciendo una aglutinación visible antiestreptolisina en suero es estable 24 horas refrigerada
macroscópicamente. (2-10oC) o congelada por períodos prolongados.
REACTIVOS PROVISTOS MATERIAL REQUERIDO

A. Reactivo A: suspensión de partículas de látex poliestireno 1- Provisto
recubiertas con estreptolisina O. - placas de plástico o vidrio fondo negro
Control Positivo: suero humano conteniendo antiestrepto- - 1 tapa gotero
lisina O en concentración superior a 250 UI/ml.
Control Negativo: suero humano no reactivo con el Reactivo A. 2- No provisto
- goteros o pipetas para dispensar los volúmenes indicados.
REACTIVOS NO PROVISTOS - palillos mezcladores descartables
Solución fisiológica (para la técnica semicuantitativa). - cronómetro
- lámpara o fuente de luz
INSTRUCCIONES PARA SU USO - tubos de Kahn
Reactivo A: homogeneizar por agitación intensa y luego cambiar
la tapa ciega por la tapa gotero suministrada adicionalmente.
Controles (Positivo y Negativo): listos para usar. PROCEDIMIENTO
Llevar los reactivos y la muestra a temperatura ambiente.
PRECAUCIONES Agitar el Reactivo A antes de usar, vaciando previamente
Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro". la pipeta del gotero.
Los Controles Positivo y Negativo han sido examinados para
antígeno de superficie del virus de hepatitis B, virus de la I- TECNICA CUALITATIVA
hepatitis C y anticuerpos contra HIV 1/2, encontrándose no En uno de los sectores delimitados de la placa adjunta
reactivos. No obstante, deben ser empleados como si se al equipo colocar:
tratara de material infectivo.
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales Reactivo A 1 gota (50 ul)
de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos. Muestra 1 gota (50 ul)
acuerdo a la normativa local vigente. Mezclar con palillo descartable (uno para cada
muestra) hasta obtener una suspensión uniforme en
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE la superficie delimitada de la placa. Inmediatamente
ALMACENAMIENTO disparar un cronómetro, balancear suavemente la
Los Reactivos Provistos son estables en refrigerador placa y observar macroscópicamente el resultado
(2-10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. dentro de los 2 minutos.
No congelar.
870150000 / 02 p. 1/6
títulos de antiestreptolisina O menores o iguales a 200 Ul/ml
II- TECNICA SEMICUANTITATIVA
en el 95% de los casos. En una población infantil ( mayores
de 2 años) se pueden tener títulos de hasta 300 UI/ml.
diluciones seriadas en tubos de Kahn.
a) Colocar 0,5 ml de solución fisiológica en cada uno
PRESENTACION
de los tubos.
b) Agregar 0,5 ml de suero al tubo No 1 y mezclar.
Transferir 0,5 ml de esta dilución al tubo No 2 y mez- BIBLIOGRAFIA
clar, continuando así las diluciones hasta el último - Sonnenwirth A.C.; Jarret L. - Gradwohl Métodos y Diag-
tubo. Las diluciones así obtenidas equivalen a 1:2, nósticos del Laboratorio Clínico - Editorial Panamericana
1:4, 1:8, 1:16, etc. - 8o Ed (1983).
c) Ensayar cada dilución según técnica I.

Técnica cualitativa
Se califica de 1 a 4 +, siendo:
4+: aglutinación franca
Técnica semicuantitativa
El nivel aproximado de antiestreptolisina O en la muestra,
puede ser calculada por la fórmula siguiente:
ASO (UI/ml) = Título x Sensibilidad de la reacción (200 UI/ml)
Ejemplo: la muestra presenta un título de 1:2. El nivel de
ASO es de 2 x 200 = 400 UI/ml

Es conveniente procesar simultáneamente el Control Positi-
vo y el Control Negativo provistos, empleando una gota del
Control correspondiente en lugar de la muestra y una gota
del Reactivo A según la técnica cualitativa.
Hasta 200 UI/ml.

- Tiempos de reacción mayores de 2 minutos pueden produ-
cir reacciones falsamente positivas por efecto del secado
de los reactivos.
- Se pueden producir falsos negativos en niños mayores
de 6 meses y menores de 6 años o en infección reciente.
- Debe tenerse en cuenta que en este tipo de infecciones,
un resultado aislado sólo constituye un dato auxiliar, por
lo que se recomienda efectuar determinaciones seriadas
cada 15-20 días durante 4 ó 6 semanas.
PERFORMANCE
a) Sensibilidad: 200 UI/ml.
b) Especificidad: en una población adulta sana se obtienen
870150000 / 02 p. 2/6
Símbolos
C
M Elaborado por:

Europea Nocivo

Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo
Wiener lab.
Riobamba 2944
Bioquímica
870150000 / 02 p. 3/6 UR130708
LINEA TURBITEST AA
ASO
C látex
Para la determinación de antiestreptolisina O

El grupo A de estreptococos β-hemolíticos produce varias Suero
toxinas que pueden actuar como antígenos. Una de estas a) Recolección: obtener suero de la manera habitual.
toxinas es la estreptolisina O que produce en el organismo b) Aditivos: no se requieren.
afectado, anticuerpos específicos. El nivel de anticuerpos c) Sustancias interferentes conocidas: no emplear sueros
está directamente relacionado con la enfermedad y perma- hemolizados, lipémicos o contaminados.
nece elevado en los pacientes crónicos. Su determinación d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
cuantitativa permite seguir el curso de la enfermedad y muestra debe ser preferentemente fresca. En caso de no
diferenciar los casos crónicos de aquellos que están en procesarse en el momento, puede conservarse en refrige-
curso de remisión. rador (2-10oC) durante 2 ó 3 días o congelada (-20oC) hasta
3 meses. Evitar los congelamientos y descongelamientos
FUNDAMENTOS DEL METODO repetidos.
Los anticuerpos antiestreptolisina presentes en la muestra,
son capaces de aglutinar las partículas de látex recubiertas MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
con estreptolisina O. La turbidez causada por la aglutinación - Espectrofotómetro.
de las partículas de látex es proporcional a la concentración - Cubetas espectrofotométricas de caras paralelas.
de antiestreptolisina O (ASO) en la muestra y puede ser - Micropipetas y pipetas capaces de medir los volúmenes
medida espectrofotométricamente. indicados.
- Tubos de Kahn o hemólisis.
REACTIVOS PROVISTOS - Reloj o timer.
A. Reactivo A: solución de buffer glicina, pH 8,0.
B. Reactivo B: suspensión de partículas de látex de tamaño CONDICIONES DE REACCION
uniforme, recubiertas con estreptolisina O. - Longitud de onda: 600 nm
- Temperatura de reacción: temperatura ambiente (25oC),
REACTIVOS NO PROVISTOS pudiendo oscilar entre 22 y 30oC.
- ASO Calibrador Turbitest AA de Wiener lab. - Tiempo de reacción: 20 minutos
- Solución fisiológica.
- Agua destilada.
PROCEDIMIENTO
INSTRUCCIONES PARA SU USO Las muestras y el Calibrador se procesan sin dilución
Reactivos Provistos: listos para usar. previa. En tubos de Kahn marcados B (Blanco), C (ASO
El Reactivo B debe ser homogeneizado varias veces por Calibrador) y D (Desconocido), colocar:
inversión suave, antes de usar.
B C D
PRECAUCIONES
Muestra - - 10 ul
Todas las muestras de pacientes deben manipularse como ASO Calibrador - 10 ul -
Agua destilada 10 ul - -
de trabajo en el laboratorio de química clínica. Reactivo A 300 ul 300 ul 300 ul
Reactivo B 500 ul 500 ul 500 ul
Homogeneizar e incubar 20 minutos a temperatura
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ambiente. Leer la absorbancia del Blanco (AB), ASO
ALMACENAMIENTO Calibrador (AC) y la Muestra (AD) a 600 nm, llevando el
Reactivos Provistos: estables en refrigerador (2-10oC) has- aparato a cero con agua destilada.
870170000 / 03 p. 1/6
AD - AB - Otsuji, S. - J. Clin. Lab. Anal. 4:241, 1990.
ASO (UI/ml) = x concentración del Calibrador - Henkel, E. - J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 22:919, 1984.
AC - AB - Curtis, G. - J. Clin. Pathol. 41:1331, 1988.
Las muestras con concentraciones superiores a 1.000 UI/ml
deben ser diluidas 1:2 en solución fisiológica y procesadas
nuevamente. Multiplicar el resultado obtenido por 2.

Control Inmunológico nivel 1 o Control Inmunológico
nivel 2 Turbitest AA de Wiener lab. El control debe proce-
sarse de la misma manera que las muestras.
0 - 200 UI/ml
referencia.
Se aconseja efectuar dos o más determinaciones periódicas
para seguir el desarrollo de la enfermedad.

ASO (UI/ml) x 1 = ASO (UTodd/ml)

La turbiedad y partículas en las muestras, pueden interferir
PERFORMANCE
a) Reproducibilidad: procesando simultáneamente 10 re-
plicados de una misma muestra, se obtienen los siguientes
valores:
Nivel D.S. C.V.
119 UI/ml ± 1,21 UI/ml 1,02 %
279,4 UI/ml ± 1,87 UI/ml 0,67 %
b) Sensibilidad: 20 UI/ml.
c) Rango dinámico: 20 - 1.000 UI/ml

PRESENTACION
1 x 15 ml Reactivo B
(Cód. 1073261)
(Cód. 1009349)
(Cód. 1009221)
(Cód. 1009641)
870170000 / 03 p. 2/6
Símbolos
C
M Elaborado por:

Europea Nocivo

Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870170000 / 03 p. 3/6 UR120903
Basic Solution
C Solución lavadora básica para analizadores automáticos
Basic Solution es empleada en analizadores automáticos Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
para la limpieza de cubetas de lectura, agujas y circuitos reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
hidráulicos del instrumento. Este producto cumple con los requerimientos previstos
REACTIVOS PROVISTOS C por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios

Basic Solution: solución de hidróxido de sodio 1 N.
Basic Solution: listo para usar. También puede usarse V Uso diagnóstico "in vitro"
diluido siguiendo las indicaciones específicadas para cada
analizador.
PRECAUCIONES
La solución es irritante. R36/38: irrita los ojos y la piel. S26/28:
en caso de contacto con ojos y piel, lávense inmediatamente  No congelar

y abundantemente con agua y acúdase a un médico. S37/39:
usar guantes adecuados y protección para los ojos/la cara. F Riesgo biológico
de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos. Volumen después de la reconstitución
Cont. Contenido
g Número de lote
ALMACENAMIENTO M Elaborado por:

Basic Solution: estable a temperatura ambiente (< 25oC)
hasta la fecha de vencimiento indicada en el envase. Xn
Nocivo
NDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS Corrosivo / Cáustico

REACTIVOS
La presencia de turbidez o partículas en suspensión es in- Xi
Irritante
dicio de deterioro del producto, en tal caso desechar. Evitar
la contaminación con agentes externos. i Consultar instrucciones de uso
PRESENTACION Calibr. Calibrador

- 1 x 1000 ml (Cód. 1999721).
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo
Wiener lab.
Riobamba 2944
Bioquímica
861280000 / 00 p. 1/2 UR100521
LINEA LIQUIDA
Bilirrubina Directa
AA
C Método DPD para la determinación de bilirrubina
directa en suero o plasma
SIGNIFICACION CLINICA la luz natural o artificial envolviendo el tubo con papel negro.
La bilirrubina es un producto de la degradación del grupo b) Aditivos: en caso de que la muestra sea plasma, debe
hemo por el sistema mononuclear fagocítico y existe en dos usarse heparina para su obtención.
formas, conjugada y no conjugada. La bilirrubina no conju- c) Sustancias interferentes conocidas:
gada (indirecta) es transportada por la albúmina al hígado, - Muestras con hemólisis producen valores falsamente
donde se conjuga con ácido glucurónico en los hepatocitos disminuidos.
convirtiéndose en bilirrubina conjugada (directa), permitiendo - No se observan interferencias por lipemia hasta 5 g/l
de este modo su excreción a través de la bilis. (500 mg/dl) de triglicéridos. Sin embargo, muestras hiper-
Los niveles de bilirrubina directa se miden para investigar la lipémicas producen resultados erróneos.
causa de una ictericia pre-hepática, hepática o post-hepática. Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
Niveles aumentados de bilirrubina directa se observan en drogas en el presente método.
enfermedades hepatocelulares tales como hepatitis y en d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
casos de colestasis post-hepática. muestra debe ser preferentemente fresca. En caso de no
efectuarse el ensayo en el momento, la muestra puede
FUNDAMENTOS DEL METODO conservarse hasta 48 horas en refrigerador (2-10oC).
La bilirrubina directa reacciona con la sal de diclorofenildia- La acción de la luz es capaz de destruir hasta un 50% de la
zonio (DPD) formando un azocompuesto de color rojo en bilirrubina presente en la muestra, por lo que debe protegerse
solución ácida. cuidadosamente.
REACTIVOS PROVISTOS MATERIAL REQUERIDO (no provisto)

A. Reactivo A: solución acuosa conteniendo ácido clorhí- - Espectrofotómetro
drico 17 mmol/l. - Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados
B. Reactivo B: solución acuosa conteniendo sal de diclo- - Cronómetro
rofenildiazonio 0,4 mmol/l en ácido clorhídrico 17 mmol/l. - Analizador automático

Calibrador A plus de Wiener lab. - Longitud de onda: 546 nm (520 - 550 nm)
- Temperatura de reacción: 25oC (30oC o 37oC)
INSTRUCCIONES PARA SU USO - Tiempo de reacción: 6 minutos
Reactivo A: listo para usar. - Volumen de muestra: 80 ul
Reactivo B: listo para usar. Este reactivo puede presentar - Volumen final de reacción: 1,28 ml
una ligera tonalidad pardusca que no afecta su reactividad.
PRECAUCIONES PROCEDIMIENTO
Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro". En 3 tubos marcados BR (Blanco de Reactivos), BM
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales (Blanco de Muestra/Calibrador/Control) y M (Muestra/
de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos. Calibrador/Control), colocar:
acuerdo a la normativa local vigente. BR BM M
Reactivo A 1 ml 1,2 ml 1 ml
ALMACENAMIENTO Agua destilada 80 ul - -
Reactivos Provistos: estables en refrigerador (2-10oC)
Muestra - 80 ul 80 ul
hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
Mezclar e incubar exactamente 60 segundos. Luego
MUESTRA agregar:
Suero o plasma
Reactivo B 0,2 ml - 0,2 ml
a) Recolección: obtener de la manera habitual. Proteger de
861269522 / 02 p. 1/9
y de la longitud de onda. En espectrofotómetros con cube-
Mezclar e incubar 5 minutos. Inmediatamente después,
tas de caras paralelas de 1 cm de espesor, para un ∆A de
leer en espectrofotómetro a 546 nm (520 - 550 nm), lle-
0,001 el mínimo cambio de concentración detectable será
vando a cero el aparato con el Blanco de Reactivo (BR).
de 0,012 mg/dl.
Lectura 1 (DO1): BM (Blanco de Muestra) o BC (Blanco de
Calibrador). Lectura 2 (DO2): M (Muestra) o C (Calibrador).
del usuario del analizador en uso. Para la calibración, debe
usarse Calibrador A plus de Wiener lab.
Bilirrubina Directa (mg/l) = (DO2 M - DO1 BM) x f
donde: PRESENTACION
X* mg/l 240 ml: 4 x 50 ml Reactivo A
f= 2 x 20 ml Reactivo B
DO2 C - DO1 BC (Cód. 1120007)
(*)
concentración de bilirrubina directa en el Calibrador A 240 ml: 4 x 50 ml Reactivo A
plus de Wiener lab. 2 x 20 ml Reactivo B
(Cód. 1009335)
Procesar 2 niveles de un material de control de calidad 240 ml: 4 x 50 ml Reactivo A
(Standatrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas 2 x 20 ml Reactivo B
de bilirrubina directa, con cada determinación. (Cód. 1009246)
240 ml: 4 x 50 ml Reactivo A
Bilirrubina directa en suero o plasma:
(Cód. 1009604)
Adultos: hasta 2 mg/l
Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios BIBLIOGRAFIA
valores de referencia. - Burtis, CA; Ashwood, ER - Tietz Fundamentals of Clin.
Chem. 5th Ed.: 605, 2001.
CONVERSION DE UNIDADES AL SISTEMA SI - Burtis, CA; Ashwood, ER - Tietz Textbook of Clin.Chem.
Bilirrubina (umol/l) = Bilirrubina (mg/l) x 1,71 3rd Ed.:1170, 1996.
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO AACC Press, 5th ed., 2000.
Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA. - CLSI: Clinical and Laboratory Standards Institute (ex-
La acción de la luz, tanto sobre los sueros como sobre las NCCLS) - Protocols EP 15A, 2001 / EP 17A, 2004.
soluciones standard, es capaz de destruir en una hora hasta
el 50% de la bilirrubina presente.
PERFORMANCE
a) Reproducibilidad: se aplicó el protocolo EP15-A del CLSI.
Se analizaron dos niveles de concentración, cada uno por
cuadruplicado durante 5 días. Con los datos obtenidos, se
calcularon la precisión intraensayo y total.
Nivel D.S. C.V.
6,9 mg/l ± 0,075 mg/l 1,09%
24,3 mg/l ± 0,255 mg/l 1,05%
Nivel D.S. C.V.
6,9 mg/l ± 0,15 mg/l 2,23%
24,3 mg/l ± 0,249 mg/l 1,03%
b) Linealidad: la reacción es lineal hasta 100 mg/l (10 mg/dl)
de bilirrubina directa. Para valores superiores, repetir la
determinación empleando muestra diluida 1:2 ó 1:4 con
solución fisiológica, multiplicando el resultado obtenido por
2 ó 4 según el caso.
861269522 / 02 p. 2/9
Símbolos
C
M Elaborado por:

Europea Nocivo

Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
861269522 / 02 p. 3/9 UR120830
Bilirrubina Directa
AA
C Método DPD para la determinación de bilirrubina
directa en suero o plasma
SIGNIFICACION CLINICA de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.

La bilirrubina, compuesto de degradación de la hemoglobina, Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
es captada por el hígado para su conjugación y excreción acuerdo a la normativa local vigente.
en la bilis. Las alteraciones hepatocelulares u obstrucciones
biliares pueden provocar hiperbilirrubinemias. INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
La eritroblastosis fetal o anemia hemolítica del recién nacido REACTIVOS
es una patología provocada por incompatibilidad materno- Lecturas del blanco de Reactivos superiores a 0,100 D.O. a
fetal en la que se produce una destrucción excesiva de 546 nm, son indicio de deterioro de los reactivos. Desechar.
glóbulos rojos. Esto resulta en un severo aumento de la La turbidez indica deterioro de los reactivos. En tal caso,
bilirrubina sérica con el consecuente riesgo de difusión del desechar.
pigmento al sistema nervioso central, por lo que la determi-
nación de la bilirrubina en estos niños recién nacidos resulta ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
sumamente importante. ALMACENAMIENTO
FUNDAMENTOS DEL METODO hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
La bilirrubina directa reacciona con la sal de diclorofenil- Reactivo de Trabajo: estable 21 días en refrigerador (2-
diazonio (DPD) formando un azocompuesto de color rojo 10oC).
en solución ácida.
MUESTRA
REACTIVOS PROVISTOS Suero o plasma
A. Reactivo A: viales conteniendo sal de diclorofenildia- a) Recolección: obtener de la manera habitual. Proteger de
zonio. la luz natural o artificial envolviendo el tubo con papel negro.
B. Reactivo B: solución acuosa conteniendo ácido sulfá- b) Aditivos: en caso de que la muestra sea plasma, debe
mico 90 mmol/l. usarse heparina para su obtención.
C. Reactivo C (Reactivo para Blanco de Muestra): solución c) Sustancias interferentes conocidas: no se observan
acuosa conteniendo ácido sulfámico 90 mmol/l. interferencias por hemoglobina hasta 180 mg/dl, triglicéridos
Concentraciones finales hasta 550 mg/dl (5,50 g/l), ni heparina hasta 20 U/ml.
ácido sulfámico..................................................... 90 mmol/l Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
cloruro de sodio..........................................................6,6 g/l drogas en el presente método.
diclorofenildiazonio.............................................. 0,1 mmol/l d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
muestra debe ser preferentemente fresca. En caso de no
REACTIVOS NO PROVISTOS efectuarse el ensayo en el momento, la muestra puede
Calibrador A plus de Wiener lab. conservarse hasta 48 horas en refrigerador (2-10oC) y la
sangre entera no más de 24 horas en refrigerador (2-10oC)
INSTRUCCIONES PARA SU USO o 12 horas a temperatura ambiente (menor de 25oC).
Reactivos B y C: listos para usar. La acción de la luz es capaz de destruir hasta un 50% de la
Reactivo de Trabajo: reconstituir cada frasco de Reactivo bilirrubina presente en la muestra, por lo que debe protegerse
A con 10 ml de Reactivo B. Tapar y agitar hasta disolución cuidadosamente.
completa. Homogeneizar y fechar.
PRECAUCIONES - Espectrofotómetro
Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro". - Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados
Los Reactivos B y C son corrosivos. R36/38: irrita los ojos - Tubos o cubetas espectrofotométricas
y la piel. S24/25: evitar el contacto con los ojos y la piel. - Cronómetro
S26: en caso de contacto con la piel, lavar inmediatamente
y abundantemente con agua y acúdase a un médico. S37: CONDICIONES DE REACCION
usar guantes adecuados. - Longitud de onda: 546 nm en espectrofotómetro o 520-550 nm
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales en fotocolorímetro con filtro verde.
870190000 / 01 p. 1/6
- Temperatura de reacción: temperatura ambiente (< 25oC) (Stan-datrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas
- Tiempo de reacción: 10 minutos de bilirrubina directa, con cada determinación.
- Volumen final de reacción: 0,54 ml VALORES DE REFERENCIA
Bilirrubina directa en suero o plasma:
Adultos: hasta 2 mg/l
PROCEDIMIENTO Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios
En 4 tubos marcados BC (Blanco de Calibrador), C (Ca- valores de referencia.
librador), BD (Blanco de Desconocido) y D (Desconocido),
colocar: CONVERSION DE UNIDADES
B C C BD D Bilirrubina (mg/l) = Bilirrubina (mg/dl) x 10
Bilirrubina (mg/dl) x 17,1 = Bilirrubina (umol/l)
Reactivo C 0,5 ml - 0,5 ml -
Reactivo B - 0,4 ml - 0,4 ml LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
Calibrador 40 ul 40 ul - -
La acción de la luz, tanto sobre los sueros como sobre las
Muestra - - 40 ul 40 ul soluciones standard, es capaz de destruir en una hora hasta
Reactivo de Trabajo - 0,1 ml - 0,1 ml el 50% de la bilirrubina presente.
Mezclar e incubar 10 minutos a temperatura ambiente PERFORMANCE

(menor a 25oC). Leer en espectrofotómetro a 546 nm o Los ensayos fueron realizados en analizador automático
en fotocolorímetro con filtro verde (520-550 nm), llevando Express Plus(*). Si se usa el procedimiento manual, se
a cero el aparato con el Blanco de Reactivo (BR). debe validar que se obtenga una performance similar a
Se pueden aumentar proporcionalmente los volúmenes. la siguiente:
Nota: procesar un Blanco de Reactivos (BR) por cada serie a) Reproducibilidad: aplicando el protocolo EP5-A del CLSI
de determinaciones mezclando 0,4 ml de Reactivo B + (ex NCCLS), se obtuvieron los siguientes resultados:
40 ul de agua destilada + 0,1 ml de Reactivo de Trabajo. Precisión intraensayo
Nivel D.S. C.V.
1,4 mg/l ± 0,05 mg/l 4,03 %
ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL
18,0 mg/l ± 0,24 mg/l 1,33 %
La absorbancia debe ser leída a los 10 minutos exactos.
Precisión total
Nivel D.S. C.V.
Bilirrubina directa (mg/l) = (D - BD) x f 1,4 mg/l ± 0,06 mg/l 5,09 %
donde: 18,0 mg/l ± 0,36 mg/l 2,00 %
X* mg/l b) Linealidad: aplicando el protocolo EP6-P, se obtuvo
f= una linealidad de 140 mg/l. Para valores superiores, repetir
C - BC
la determinación empleando muestra diluida 1:2 ó 1:4 con
* concentración de bilirrubina directa en el Calibrador A solución fisiológica, multiplicando el resultado obtenido por
plus de Wiener lab. 2 ó 4 según el caso.
Ejemplo: c) Sensibilidad analítica: 1,1 mg/l.
BC = 0,008
C = 0,135 PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS
BD = 0,009 Para las instrucciones de programación consulte el manual
D = 0,029 del usuario del analizador en uso.
X = 23,9 mg/l Para la calibración debe emplearse Calibrador A plus de
Wiener lab.
23,9 mg/l
f = = 188,2 mg/l El equipo provee Reactivo para Blanco de Muestra (Reactivo
0,135 - 0,008 C) que sólo es requerido en algunos analizadores automá-
Bilirrubina directa (mg/l) = (0,029 - 0,009) x 188,2 = 3,8 mg/l ticos. En el resto de los analizadores este Reactivo no es
necesario.
También se puede emplear el factor colorimétrico (f) calcula- Para mayor información referirse al manual de adaptaciones
do usando Bilirrubina Standard de Wiener lab. en la técnica de Reactivos Wiener lab. de su analizador.
de Bilirrubina Total AA de Wiener lab. (método DPD).
PRESENTACION
METODO DE CONTROL DE CALIDAD - 4 viales Reactivo A
Procesar 2 niveles de un material de control de calidad - 4 x 10 ml Reactivo B
(*)
- 4 x 40 ml Reactivo C SIMBOLOS
Cód. 1009306 Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
- 4 viales Reactivo A
C
- 2 x 100 ml Reactivo C por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios
Cód. 1120006
BIBLIOGRAFIA
- Bartels, H. and Boehmer, M. - Z. Klin. Chem. Klin. Biochem. V Uso diagnóstico "in vitro"
(1971).
- Colombo, J.; Peheim, E.; Kyburz, S. and Hoffman - Clin. X Contenido suficiente para <n> ensayos
Chim. Acta 51/2:217 (1974).
- Botwell, J. H. - Clin. Chem. 10/3:197 (1964). H Fecha de caducidad
- Watson, D. - Clin. Chem. 7/6:603 (1961).
- Ichida, T. and Nobuoka, M. - Clin. Chim. Acta 19/2:249 l Límite de temperatura (conservar a)
(1968).
- Rand and Di Pascua - Clin. Chem. 8/6 (1962).  No congelar
- Zaroda, R. - Am. J. Clin. Path. 45/1:70 (1996).
F Riesgo biológico
AACC Press, 3rd ed. (1990). Volumen después de la reconstitución
- Tietz Textbook of Clinical Chemistry - Saunders Co., 3rd
ed. (1999). Cont. Contenido
- CLSI: Clinical and Laboratory Standards Institute (ex-NC-
CLS). Document “Evaluation of the Linearity of Quantitative g Número de lote
Analytical Methods“, EP6-P (1986).
- CLSI: Clinical and Laboratory Standards Institute (ex- M Elaborado por:
NCCLS). Document “Evaluation of Precision Performance Xn
of Clinical Laboratory Devices“, EP5-A (1999). Nocivo
Xi
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870190000 / 01 p. 3/6 UR160223
Bilirrubina
Para la determinación de bilirrubina directa y total

La bilirrubina, compuesto de degradación de la hemoglobina, Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
es captada por el hígado para su conjugación y excreción acuerdo a la normativa local vigente.
en la bilis. Las alteraciones hepatocelulares u obstrucciones Reactivo B: R36/38: irrita los ojos y la piel. S26: en caso
biliares pueden provocar hiperbilirrubinemias. de contacto con la piel, lávense inmediatamente y abun-
La eritroblastosis fetal o anemia hemolítica del recién nacido dantemente con agua y acúdase a un médico. S37/39: usar
es una patología provocada por incompatibilidad materno- guantes adecuados y protección para los ojos/la cara.
fetal en la que se produce una destrucción excesiva de
glóbulos rojos. Esto resulta en un severo aumento de la ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
bilirrubina sérica con el consecuente riesgo de difusión del ALMACENAMIENTO
pigmento al sistema nervioso central, por lo que la determi- Reactivos Provistos: son estables a temperatura ambiente
nación de la bilirrubina en estos niños recién nacidos resulta (< 25oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
sumamente importante. Diazorreactivo: en refrigerador (2-10oC) y en frasco de vidrio color
caramelo es estable 3 meses a partir de la fecha de su preparación.
La bilirrubina reacciona específicamente con el ácido sulfa- INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
nílico diazotado produciendo un pigmento color rojo-violáceo REACTIVOS
(azobilirrubina) que se mide fotocolorimétricamente a 530 nm. La presencia de sedimento y/o cambio de coloración de los
Si bien la bilirrubina conjugada (directa) reacciona direc- reactivos, pueden ser indicio de deterioro de los mismos.
tamente con el diazorreactivo, la bilirrubina no conjugada
(indirecta) requiere la presencia de un desarrollador acuoso MUESTRA
(Reactivo A) que posibilite su reacción. De forma tal que, para Suero, plasma o líquido amniótico
que reaccione la bilirrubina total (conjugada y no conjugada) a) Recolección: obtener suero o plasma de la manera
presente en la muestra, debe agregarse benzoato de cafeína usual. Proteger de la luz natural o artificial, envolviendo el
al medio de reacción. tubo con papel negro.
También es posible realizar la determinación en líquido amniótico.
REACTIVOS PROVISTOS b) Aditivos: en caso de que la muestra a emplear sea plas-
A. Reactivo A: solución acuosa de benzoato de cafeína 0,13 mol/l, ma, debe usarse heparina para su obtención.
tamponada y estabilizada. c) Sustancias interferentes conocidas: hemólisis modera-
B. Reactivo B: solución de ácido sulfanílico 29 mmol/l y da o intensa inhibe la reacción directa, obteniéndose valores
ácido clorhídrico 0,17 mol/l. de bilirrubina total falsamente aumentados.
C. Reactivo C: solución de nitrito de sodio 0,07 mol/l. Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
REACTIVOS NO PROVISTOS d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento:
- Agua destilada. la muestra debe ser preferentemente fresca. En caso de
- Bilirrubina Standard de Wiener lab. para efectuar la no efectuarse el ensayo en el momento, el suero debe
calibración periódica del equipo. conservarse hasta 48 horas en el refrigerador (2-10oC)
y la sangre entera no más de 24 horas en refrigerador o
INSTRUCCIONES PARA SU USO 12 horas a temperatura ambiente. El líquido amniótico es
Reactivo A: listo para usar. conveniente mantenerlo congelado hasta el momento de
Reactivo B: listo para usar. efectuar el ensayo.
Diazorreactivo: de acuerdo al volumen de trabajo, mezclar La acción de la luz es capaz de destruir en una hora hasta
1 parte de Reactivo C con 21 partes de Reactivo B. Rotular un 50% de la bilirrubina presente en la muestra. Es por tal
y fechar. motivo que debe protegerse cuidadosamente.
PRECAUCIONES MATERIAL REQUERIDO (no provisto)

Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro". - Espectrofotómetro o fotocolorímetro.
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales - Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados.
870180022 / 00 p. 1/9
- Frasco de vidrio color caramelo. CALCULO DE LOS RESULTADOS
- Tubos. Bilirrubina total (mg/l) = (T - B) x f
- Reloj o timer. Bilirrubina directa (mg/l) = (D - B) x f
Bilirrubina libre (indirecta) = BRB total - BRB directa
CONDICIONES DE REACCION El factor colorimétrico (f) debe calcularse con Bilirrubina
- Longitud de onda: 530 nm en espectrofotómetro o 520- Standard de Wiener lab.
550 nm en fotocolorímetro con filtro verde.
- Temperatura de reacción: temperatura ambiente METODO DE CONTROL DE CALIDAD
- Tiempo de reacción: 5 minutos Si la muestra a ensayar es suero o plasma, procesar 2 nive-
- Volumen de muestra: 200 ul les de un material de control de calidad (Standatrol S-E 2
- Volumen final de reacción: 2,9 ml niveles) con concentraciones conocidas de bilirrubina, con
cada determinación.
PROCEDIMIENTO VALORES DE REFERENCIA

Bilirrubina en suero o plasma
I- TECNICA PARA SUERO
- Adultos:
En tres tubos marcados B (Blanco), D (Directa) y T
Directa: hasta 2 mg/l
(Total) colocar:
Total: hasta 10 mg/l
B D T - Recién nacidos:
Muestra (suero) 200 ul 200 ul 200 ul Nacidos a término Prematuros
Sangre de cordón 25 mg/l
Agua destilada 2,5 ml 2,5 ml - hasta las 24 hs 60 mg/l 80 mg/l
Reactivo A - - 2,5 ml hasta las 48 hs 75 mg/l 120 mg/l
del 3º al 5º día 120 mg/l 240 mg/l
Reactivo B 200 ul - -
Los valores comienzan luego a disminuir para alcanzar el
Diazorreactivo - 200 ul 200 ul nivel promedio del adulto al mes del nacimiento. En los pre-
Mezclar de inmediato cada tubo por inversión. Luego maturos, los niveles de bilirrubina tardan más en alcanzar la
de 5 minutos, leer en espectrofotómetro a 530 nm o en normalidad, dependiendo del grado de inmadurez hepática.
fotocolorímetro con filtro verde (520-550 nm), llevando el Bilirrubina en líquido amniótico
aparato a cero con agua destilada. Las lecturas pueden Valores menores de 1 mg/l son considerados normales, mientras
efectuarse entre 4 y 15 minutos, excepto para la bilirru- que entre 1 y 2,7 mg/l sugieren la posibilidad de un feto afectado.
bina directa que debe leerse a los 5 minutos exactos. Si Los niveles por encima de 2,7 mg/l sólo se encuentran en
se lee antes, habrá subvaloración de los resultados por presencia de eritroblastosis fetal. Si la cantidad de bilirrubina
reacción incompleta. Si se lee después, habrá sobreva- es superior a 4,7 mg/l el feto ya se encuentra afectado y tiene
loración porque comienza a reaccionar la bilirrubina libre. probablemente algún tipo de falla circulatoria.
Sueros ictéricos: debe emplearse la técnica descripta Si la cantidad de bilirrubina sobrepasa los 9,5 mg/l la muerte
pero con menores cantidades de muestra, de acuerdo fetal es inminente.
a la severidad de la ictericia. De tal forma, en caso de Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios
ictericia moderada se usarán 50 ul de suero mientras valores de referencia.
que frente a una ictericia intensa se requieren sólo 20 ul.
Multiplicar los resultados obtenidos por 3,79 y 9,38 CONVERSION DE UNIDADES
respectivamente. Bilirrubina (mg/l) = Bilirrubina (mg/dl) x 10
II- TECNICA PARA LIQUIDO AMNIOTICO Birrubina (umol/l) = Bilirrubina (mg/dl) x 17,1
Se determina bilirrubina total. En dos tubos marcados
B (Blanco) y T (Total) colocar: LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
B T La acción de la luz, tanto sobre los sueros como sobre las
soluciones standard, es capaz de destruir en una hora hasta
Muestra (líquido amniótico) 1 ml 1 ml
el 50% de la bilirrubina presente.
Agua destilada 1,5 ml -
PERFORMANCE
Reactivo A - 1,5 ml a) Reproducibilidad: procesando replicados de las mismas
Reactivo B 0,2 ml - muestras en un mismo día, se obtuvo lo siguiente:
Diazorreactivo - 0,2 ml Bilirrubina directa
Nivel D.S. C.V.
Proceder de la misma manera que en la técnica I.
2,1 mg/l ± 0,18 mg/l 8,5 %
Dividir el resultado final por 5,37.
26,0 mg/l ± 0,62 mg/l 2,4 %
870180022 / 00 p. 2/9
Bilirrubina total SIMBOLOS
Nivel D.S. C.V. Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
9,8 mg/l ± 0,47 mg/l 4,7 % reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
127,7 mg/l ± 1,45 mg/l 1,1 % Este producto cumple con los requerimientos previstos
b) Linealidad: la reacción es lineal hasta 150 mg/l.

c) Recuperación: agregando cantidades conocidas de
bilirrubina a distintos sueros, se obtuvo una recuperación P Representante autorizado en la Comunidad Europea
entre 100 y 106%.
d) Límite de detección: depende del espectrofotómetro V Uso diagnóstico "in vitro"
empleado y de la longitud de onda. De acuerdo con la sen-
sibilidad requerida para un ∆A mínimo de 0,001, el menor X Contenido suficiente para <n> ensayos
cambio de concentración detectable será de 0,17 mg/l.
PRESENTACION
Equipo para 200 determinaciones (Cód. 1120001). l Límite de temperatura (conservar a)
 No congelar
BIBLIOGRAFIA
- Botwell, J. H. - Clin. Chem. 10/3:197 (1964). F Riesgo biológico
- Ichida, T.; Nobuoka, M. - Clin. Chim. Acta 19/2:249 (1968). Volumen después de la reconstitución
- O’Brien, D. et al - “Laboratory manual of pediatric micro- Cont. Contenido
biochemical techniques”, Harper & Row Pub - 4a Ed. (1968).
- Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests", g Número de lote
M Elaborado por:
Xn
Nocivo
Xi
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870180022 / 00 p. 3/9 UR120327
Bilirrubina
Standard
Para efectuar curvas de calibración fotocolorimétricas
FUNDAMENTOS DEL METODO Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
Ver Manual de Instrucciones de Bilirrubina Wiener lab. de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
REACTIVO PROVISTO acuerdo a la normativa local vigente.
S. Standard: viales conteniendo, cada uno, 500 ug de bili-
rrubina porcina purísima según normas de la A.A.C.C., para ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
una concentración final de 100 mg/l. ALMACENAMIENTO
Bilirrubina Standard es estable a temperatura ambiente
REACTIVOS NO PROVISTOS hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. Una vez
Agua destilada y Bilirrubina de Wiener lab. reconstituido, el Standard es estable 30 días en el congelador
o 5 días en el refrigerador (2-10oC). Resguardar de la luz
INSTRUCCIONES PARA SU USO conservándolo en su envase protector.
- Sacar el frasco de su estuche protector, quitar el precinto
metálico y abrir, retirando lentamente el tapón de goma
para evitar pérdidas del material.
REACTIVOS
- Agregar 5,00 ml de agua destilada exactamente medida.
Cualquier indicio de discoloración o humectación del reactivo
- Tapar, colocar en el estuche y mezclar por inversión (varias
es causa de deterioro del mismo.
veces, durante un plazo mínimo de 30 minutos) hasta
disolución completa de la bilirrubina.
- Durante este proceso y luego del mismo es conveniente MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
mantener el Standard refrigerado. Ver Manual de Instrucciones de Bilirrubina Wiener lab.
PRECAUCIONES CONDICIONES DE REACCION

El Reactivo Provisto es para uso diagnóstico "in vitro". Ver Manual de Instrucciones de Bilirrubina Wiener lab.
PROCEDIMIENTO
Emplear los reactivos de Bilirrubina Wiener lab.
En 6 tubos marcados (1, B1, 2, B2, 3, B3) colocar:
Reactivo B
Concentración
Tubo Standard Reactivo A Agua Diazorreactivo
(mg/l)
1 50 ul 2,6 ml - 0,2 ml - 25
B 1 50 ul - 2,6 ml - 0,2 ml -
2 100 ul 2,6 ml - 0,2 ml - 50
B 2 100 ul - 2,6 ml - 0,2 ml -
3 200 ul 2,5 ml - 0,2 ml - 100
B3 200 ul - 2,5 ml - 0,2 ml -
Al agregar el Diazorreactivo, mezclar inmediatamente cada tubo por inversión. A los 5 minutos, leer en espectrofotómetro
a 530 nm o en fotocolorímetro con filtro verde (520-550 nm), llevando a cero el aparato con agua destilada.
CALCULO DE LOS RESULTADOS La reacción sigue la ley de Beer, lo que permite calcular un
Restar a las lecturas de los tubos 1, 2 y 3 los blancos factor colorimétrico para cada tubo.
correspondientes (B 1, B 2 y B 3 respectivamente) obte-
niendo así las “lecturas corregidas”. Con estos valores, Bilirrubina (mg/l)
construir un gráfico de la manera usual, colocando en el Factor =
Lectura corregida
eje vertical los valores de las lecturas corregidas y en el
eje horizontal las concentraciones de bilirrubina en mg/l. Calcular luego el factor promedio.
870200022 / 01 p. 1/6
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO SÍMBOLOS
Fallas en la reconstitución pueden ser causa de resultados Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
erróneos. reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
Ver Limitaciones del Procedimiento en el manual
de instrucciones correspondiente al equipo en uso. Este producto cumple con los requerimientos previstos
PRESENTACION
- cajas conteniendo 2 viales x 5 ml (Cód. 1120002).
BIBLIOGRAFIA
- Watson, D. - Clin. Chem. 7/6: 603 (1961).
- Henry, R.J. et al - Clin. Chem. 6/6:529 (1960). Contenido suficiente para <n> ensayos
X
- Brodersen, R. & Vind, I. - Scand. J. Clin. Lab. Invest.
15/2:107 (1963). H Fecha de caducidad
- Bilissi, P.K. & Speer, R.J. - Clin. Chem. 9/5:552 (1963).
- “Recommendation on an uniform Bilirubin Standard”, Clin. l Límite de temperatura (conservar a)
Chem. 8/4:405 (1962).
 No congelar
F Riesgo biológico
Cont. Contenido
g Número de lote
Elaborado por:
M
Nocivo
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870200022 / 01 p. 2/6 UR120420
LINEA LIQUIDA
Bilirrubina Total
C Método DPD para la determinación de bilirrubina total
AA
en suero o plasma

La bilirrubina, compuesto de degradación de la hemoglobina, ALMACENAMIENTO
es captada por el hígado para su conjugación y excreción Reactivos Provistos: estables en refrigerador (2-10oC)
en la bilis. Las alteraciones hepatocelulares u obstrucciones hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
biliares pueden provocar hiperbilirrubinemias.
La eritroblastosis fetal o anemia hemolítica del recién nacido MUESTRA
es una patología provocada por incompatibilidad materno- Suero o plasma
fetal en la que se produce una destrucción excesiva de a) Recolección: obtener de la manera habitual. Proteger de
glóbulos rojos. Esto resulta en un severo aumento de la la luz natural o artificial envolviendo el tubo con papel negro.
bilirrubina sérica con el consecuente riesgo de difusión del b) Aditivos: en caso de que la muestra sea plasma, debe
pigmento al sistema nervioso central produciendo toxicidad, usarse heparina o EDTA para su obtención.
por lo que la determinación de la bilirrubina en estos niños c) Sustancias interferentes conocidas: no se observan
recién nacidos resulta sumamente importante. interferencias por hemólisis hasta una concentración de
hemoglobina de 500 mg/dl (0,5 g/dl) ni lipemia hasta una
FUNDAMENTOS DEL METODO concentración de 500 mg/dl (5 g/l) de triglicéridos. No obs-
La bilirrubina indirecta, unida a la albúmina, es liberada por tante, muestras hiperlipémicas o con hemólisis moderada
un tensioactivo. La bilirrubina total reacciona con la sal de pueden conducir a resultados erróneos.
diclorofenildiazonio (DPD) formando un azocompuesto de Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
color rojo en solución ácida. drogas en el presente método.
REACTIVOS PROVISTOS muestra debe ser preferentemente fresca. En caso de no
A. Reactivo A: solución acuosa conteniendo ácido clorhí- efectuarse el ensayo en el momento, la muestra puede
drico 150 mmol/l y tensioactivo. conservarse hasta 48 horas en refrigerador (2-10oC).
B. Reactivo B: solución acuosa conteniendo sal de diclo- La acción de la luz es capaz de destruir hasta un 50% de la
rofenildiazonio 1,5 mmol/l en ácido clorhídrico 150 mmol/l. bilirrubina presente en la muestra, por lo que debe protegerse
cuidadosamente.
Calibrador A plus de Wiener lab. MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
- Espectrofotómetro
INSTRUCCIONES PARA SU USO - Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados
Reactivos Provistos: listos para usar. Antes de utilizar, - Cronómetro
mezclar por inversión. - Analizador automático
El Reactivo B puede presentar una ligera turbidez que no
afecta su reactividad. CONDICIONES DE REACCION
- Longitud de onda: 546 nm (520 - 550 nm)
PRECAUCIONES - Temperatura de reacción: 25oC (30oC o 37oC)
Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro". - Tiempo de reacción: 5 minutos 30 segundos
Los reactivos son corrosivos. R34: provoca quemaduras. - Volumen de muestra: 80 ul
S24/25: evitar el contacto con los ojos y la piel. S26: en caso - Volumen final de reacción: 1,28 ml
de contacto con los ojos, lávense inmediata y abundante-
mente con agua y acúdase a un médico. S28: en caso de
contacto con la piel, lávese inmediata y abundantemente PROCEDIMIENTO
con agua. S37/39: usar guantes adecuados y protección En 3 tubos marcados BR (Blanco de Reactivos), BM
para los ojos/la cara. (Blanco de Muestra/Calibrador/Control) y M (Muestra/
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales Calibrador/Control), colocar:
de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos. BR BM M
Reactivo A 1 ml 1,2 ml 1 ml
861270022 / 01 p. 1/9
PERFORMANCE
Agua destilada 80 ul - -
a) Reproducibilidad: se aplicó el protocolo EP15-A del CLSI.
Muestra - 80 ul 80 ul Se analizaron tres niveles de concentración, cada uno por
Mezclar e incubar exactamente 30 segundos. Luego cuadruplicado durante 5 días. Con los datos obtenidos, se
agregar: calcularon la precisión intraensayo y total.
Reactivo B 0,2 ml - 0,2 ml Precisión intraensayo (n = 20)
Mezclar e incubar 5 minutos. Inmediatamente después, Nivel D.S. C.V.

leer en espectrofotómetro a 546 nm (520 - 550 nm), 8,5 mg/l ± 0,28 mg/l 3,29 %
llevando a cero el aparato con el Blanco de Reactivo 46,1 mg/l ± 0,31 mg/l 0,67 %
(BR). Lectura 1 (DO1): BM (Blanco de Muestra o BC 164,5 mg/l ± 1,21 mg/l 0,74 %
(Blanco de Calibrador). Lectura 2 (DO2): M (Muestra) o Precisión total (n = 20)
C (Calibrador).
Nivel D.S. C.V.
8,5 mg/l ± 0,30 mg/l 3,53 %
46,1 mg/l ± 0,77 mg/l 1,67 %
164,5 mg/l ± 3,15 mg/l 1,92 %
El color de la reacción es estable durante 30 segundos, por
lo que la absorbancia debe ser leída dentro de ese tiempo. b) Linealidad: la reacción es lineal hasta 250 mg/l de bili-
rrubina. Para valores superiores, repetir la determinación
CALCULO DE LOS RESULTADOS empleando muestra diluida 1:2 ó 1:4 con solución fisiológica,
Bilirrubina Total (mg/l) = (DO2 M - DO1 BM) x f multiplicando el resultado obtenido por 2 ó 4 según el caso.
donde:
y de la longitud de onda. En espectrofotómetros con cube-
X* mg/l
f=
DO2 C - DO1 BC 0,001 el mínimo cambio de concentración detectable será

de 0,031 mg/dl.
(*)
concentración de bilirrubina total en el Calibrador A plus
de Wiener lab. PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS
METODO DE CONTROL DE CALIDAD del usuario del analizador en uso. Para la calibración, debe
Procesar 2 niveles de un material de control de calidad usarse Calibrador A plus de Wiener lab.
(Standatrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas
de bilirrubina total, con cada determinación. PRESENTACION
VALORES DE REFERENCIA 2 x 20 ml Reactivo B
Bilirrubina total en suero o plasma: (Cód. 1120008)
- Adultos: hasta 10 mg/l
- Recién nacidos:
Nacidos a término Prematuros (Cód. 1009334)
Sangre de cordón < 20 mg/l < 20 mg/l
hasta las 24 hs 14 - 87 mg/l < 80 mg/l 240 ml: 4 x 50 ml Reactivo A
hasta las 48 hs 34 - 115 mg/l < 120 mg/l 2 x 20 ml Reactivo B
del 3º al 5º día 15 - 120 mg/l < 160 mg/l (Cód. 1009244)
Los valores comienzan luego a disminuir para alcanzar el 240 ml: 4 x 50 ml Reactivo A
nivel promedio del adulto al mes del nacimiento. 2 x 20 ml Reactivo B
En los prematuros, los niveles tardan más en alcanzar la (Cód. 1009605)
normalidad, dependiendo del grado de inmadurez hepática.
Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios BIBLIOGRAFIA
valores de referencia. - Burtis, C.A.; Ashwood, E.R. - Tietz Fundamentals of Clin.
Chem. 5th Ed.: 966, 2001.
CONVERSION DE UNIDADES AL SISTEMA SI - Weigl, E.; Bach, H.; Krieg, D. - Med. Klin. 70/15:664 (1975).
Bilirrubina (umol/l) = Bilirrubina (mg/l) x 1,71 - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO - CLSI: Clinical and Laboratory Standards Institute (ex-
Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA. NCCLS) - Protocols EP 15A, 2001 / EP 17A, 2004.
La acción de la luz, tanto sobre las muestras como sobre - Tietz Textbook of Clinical Chemistry - Saunders Co., 3rd
las soluciones standard, es capaz de destruir en una hora ed. (2001).
hasta el 50% de la bilirrubina presente.
861270022 / 01 p. 2/9
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
861270022 / 01 p. 3/9 UR120830
Bilirrubina Total
C Método DPD para la determinación de bilirrubina total
AA
en suero o plasma
SIGNIFICACION CLINICA y abundantemente con agua y acúdase a un médico. S37:

La bilirrubina, compuesto de degradación de la hemoglobina, usar guantes adecuados.
es captada por el hígado para su conjugación y excreción Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
en la bilis. Las alteraciones hepatocelulares u obstrucciones de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
biliares pueden provocar hiperbilirrubinemias. Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
La eritroblastosis fetal o anemia hemolítica del recién nacido acuerdo a la normativa local vigente.
es una patología provocada por incompatibilidad materno-
fetal en la que se produce una destrucción excesiva de INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
glóbulos rojos. Esto resulta en un severo aumento de la REACTIVOS
bilirrubina sérica con el consecuente riesgo de difusión del Lecturas del blanco de Reactivos superiores a 0,100 D.O. a
pigmento al sistema nervioso central, por lo que la determi- 546 nm, son indicio de deterioro de los reactivos. Desechar.
nación de la bilirrubina en estos niños recién nacidos resulta La turbidez indica deterioro de los reactivos. En tal caso,
sumamente importante. desechar.
FUNDAMENTOS DEL METODO ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE

La bilirrubina indirecta, unida a la albúmina, es liberada por ALMACENAMIENTO
un tensioactivo. La bilirrubina total (conjugada y libre) reac- Reactivos Provistos: estables en refrigerador (2-10oC)
ciona con la sal de diclorofenildiazonio (DPD) formando un hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
azocompuesto de color rojo en solución ácida. Reactivo de Trabajo: estable 21 días en refrigerador
(2-10oC).
REACTIVOS PROVISTOS
A. Reactivo A: viales conteniendo sal de diclorofenildia- MUESTRA
zonio. Suero o plasma
B. Reactivo B: solución acuosa conteniendo ácido clorhí- a) Recolección: obtener de la manera habitual. Proteger de
drico 90 mmol/l y tensioactivo. la luz natural o artificial envolviendo el tubo con papel negro.
C. Reactivo C (Reactivo para Blanco de Muestra): so- b) Aditivos: en caso de que la muestra sea plasma, debe
lución acuosa conteniendo ácido clorhídrico 90 mmol/l y usarse heparina para su obtención.
tensioactivo. c) Sustancias interferentes conocidas: no se observan
interferencias por hemoglobina hasta 350 mg/dl, triglicéridos
Concentraciones finales hasta 1000 mg/dl (10 g/l), ni heparina hasta 50 U/ml.
ácido clorhídrico................................................... 90 mmol/l Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
tensioactivo.................................................................... 4% drogas en el presente método.
diclorofenildiazonio................................................. 1 mmol/l d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
muestra debe ser preferentemente fresca. En caso de no
REACTIVOS NO PROVISTOS efectuarse el ensayo en el momento, el suero puede con-
Calibrador A plus o Bilirrubina Standard de Wiener lab. servarse hasta 48 horas en refrigerador (2-10oC) y la sangre
entera no más de 24 horas en refrigerador (2-10oC) o 12
INSTRUCCIONES PARA SU USO horas a temperatura ambiente (menor de 25oC).
Reactivos B y C: listos para usar. La acción de la luz es capaz de destruir hasta un 50% de la
Reactivo de Trabajo: reconstituir cada frasco de Reactivo bilirrubina presente en la muestra, por lo que debe protegerse
A con 10 ml de Reactivo B. Tapar y agitar hasta disolución cuidadosamente.
completa. Homogeneizar y fechar.
PRECAUCIONES - Espectrofotómetro o fotocolorímetro
Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro". - Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indi-
Los Reactivos B y C son corrosivos. R36/38: irrita los ojos y cados
la piel. S24/25: evitar el contacto con los ojos y la piel. S26: - Tubos o cubetas espectrofotométricas
en caso de contacto con la piel, lávense inmediatamente - Cronómetro
870210000 / 01 p. 1/6
CONDICIONES DE REACCION (Standatrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas
- Longitud de onda: 546 nm en espectrofotómetro o 520-550 nm de bilirrubina total, con cada determinación.
en fotocolorímetro con filtro verde.
- Temperatura de reacción: temperatura ambiente (< 25oC) VALORES DE REFERENCIA
- Tiempo de reacción: 10 minutos Bilirrubina total en suero o plasma:
- Volumen de muestra: 40 ul - Adultos: hasta 10 mg/l
- Volumen final de reacción: 0,54 ml
- Recién nacidos:
Nacidos a término Prematuros
PROCEDIMIENTO Sangre de cordón < 20 mg/l < 20 mg/l
En 4 tubos de fotocolorímetro marcados BC (Blanco de hasta las 24 hs 14 - 87 mg/l < 80 mg/l
Calibrador o Standard), C (Calibrador o Standard), BD hasta las 48 hs 34 - 115 mg/l < 120 mg/l
(Blanco de Desconocido) y D (Desconocido), colocar: del 3º al 5º día 15 - 120 mg/l < 160 mg/l
BC C BD D Los valores comienzan luego a disminuir para alcanzar el

nivel promedio del adulto al mes del nacimiento.
Reactivo C 0,5 ml - 0,5 ml - En los prematuros, los niveles tardan más en alcanzar la
Reactivo B - 0,4 ml - 0,4 ml normalidad, dependiendo del grado de inmadurez hepática.
Calibrador o Standard 40 ul 40 ul - -
Muestra - - 40 ul 40 ul
Reactivo de Trabajo - 0,1 ml - 0,1 ml CONVERSION DE UNIDADES
Bilirrubina (mg/l) = Bilirrubina (mg/dl) x 10
Mezclar e incubar 10 minutos a temperatura ambiente Bilirrubina (mg/dl) x 17,1 = Bilirrubina (umol/l)
(menor a 25oC). Leer en espectrofotómetro a 546 nm o
en fotocolorímetro con filtro verde (520-550 nm), llevando LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
a cero el aparato con el Blanco de Reactivo (BR). Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
Se pueden aumentar proporcionalmente los volúmenes. La acción de la luz, tanto sobre las muestras como sobre
Nota: procesar un Blanco de Reactivos (BR) por cada las soluciones standard, es capaz de destruir en una hora
serie de determinaciones mezclando 0,4 ml de Reactivo B hasta el 50% de la bilirrubina presente.
+ 40 ul de agua destilada + 0,1 ml de Reactivo de Trabajo.
PERFORMANCE
a) Reproducibilidad: procesando replicados de las mismas
ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL muestras en un mismo día, se obtuvieron los siguientes
El color de la reacción es estable durante 30 minutos por datos:
lo que la absorbancia debe ser leída dentro de ese lapso. Nivel D.S. C.V.
6,0 mg/l ± 0,09 mg/l 1,50 %
CALCULO DE LOS RESULTADOS 56,3 mg/l ± 0,55 mg/l 0,98 %
Bilirrubina Total (mg/l) = (D - BD) x f
Procesando la misma muestra en días diferentes, se obtuvo:
donde:
X* mg/l Nivel D.S. C.V.
f= 5,5 mg/l ± 0,15 mg/l 2,68 %
C - BC 56,1 mg/l ± 0,60 mg/l 1,08 %
* concentración de bilirrubina total en el Calibrador A plus b) Linealidad: la reacción es lineal hasta 200 mg/l de bi-
de Wiener lab. Si se emplea Bilirrubina Standard de Wiener lirrubina. Para valores superiores, repetir la determinación
lab., X = 100 mg/l. empleando muestra diluida 1:2 ó 1:4 con solución fisiológica,
Ejemplo: multiplicando el resultado obtenido por 2 ó 4 según el caso.
Bc = 0,002 c) Recuperación: agregando cantidades conocidas de
C = 0,258 bilirrubina a distintos sueros, se obtuvo una recuperación
BD = 0,002 entre 96 y 107%.
D = 0,092 d) Sensibilidad analítica: 0,8 mg/l.
X = 48 mg/l
48 mg/l PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS
f = = 188 mg/l Para las instrucciones de programación consulte el manual
0,258 - 0,002 del usuario del analizador en uso.
Bilirrubina total (mg/l) = (0,092 - 0,002) x 188 = 17 mg/l Para la calibración debe emplearse Calibrador A plus de
Wiener lab.
METODO DE CONTROL DE CALIDAD El equipo provee Reactivo para Blanco de Muestra (Reactivo
Procesar 2 niveles de un material de control de calidad C) que sólo es requerido en algunos analizadores automá-
870210000 / 01 p. 2/6
ticos. En el resto de los analizadores este Reactivo no es SIMBOLOS
necesario. Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
Para mayor información referirse al manual de adaptaciones reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
de Reactivos Wiener lab. de su analizador.
PRESENTACION
- 2 x 100 ml Reactivo C
Cód. 1120005
- 4 x 10 ml Reactivo B X Contenido suficiente para <n> ensayos
- 4 x 40 ml Reactivo C
Cód. 1009305
BIBLIOGRAFIA
- Bartels, H. & Boehmer, M. - Z. Klin. Chem. Klin. Biochem.  No congelar
(1971).
- Colombo, J.; Peheim, E.; Kyburz, S. and Hoffman - Clin. F Riesgo biológico
Chim. Acta 51/2:217 (1974).
- Botwell, J. H. - Clin. Chem. 10/3:197 (1964). Volumen después de la reconstitución
- Ichida, T. and Nobuoka, M. - Clin. Chim. Acta 19/2:249 Cont. Contenido
(1968).
- Rand and Di Pascua - Clin. Chem. 8/6 (1962). g Número de lote
M Elaborado por:
AACC Press, 5th ed. (1990). Xn
Nocivo
- Weigl, E.; Batch, H. & Krieg, D. - Med. Klin. 70/15:664
(1975). Corrosivo / Caústico
- Tietz Textbook of Clinical Chemistry - Saunders Co., 3rd
ed. (2001). Xi
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870210000 / 01 p. 3/6 UR160223
LINEA TURBITEST AA
C1-Esterase Inhibitor
de inhibidor de C1-esterasa en suero

El inhibidor de C1 esterasa (C1-INH) es una α2-globulina, de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
sintetizada en los hepatocitos. Es un miembro de la familia Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
de inhibidores de las serinproteasas. Su función fisiológica acuerdo a la normativa local vigente.
es la inhibición de las subunidades catalíticas del primer
componente de la vía clásica de activación del complemento ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
(C1r y C1s). La deficiencia de este inhibidor resulta en una ALMACENAMIENTO
activación inapropiada de la fracción C1 y la generación Reactivos Provistos: estables en refrigerador (2-10oC) has-
de productos que llevan a un aumento de la permeabilidad ta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No congelar.
vascular. Se estima que es el mediador del angioedema
observado en pacientes con deficiencias de C1-INH. Este MUESTRA
edema involucra los tejidos subcutáneo, gastrointestinal y Suero
del tracto respiratorio. a) Recolección: obtener la muestra de la manera usual.
Existen dos formas de deficiencia de C1- INH: la forma b) Aditivos: no se requieren.
hereditaria y la forma adquirida. c) Sustancias interferentes conocidas: no emplear mues-
La forma hereditaria se detecta normalmente en la primera tras hemolizadas, lipémicas o contaminadas.
o segunda década de vida. Se asocia con una disminución Las muestras que poseen precipitados deben ser centrifu-
cualitativa o cuantitativa de la síntesis del inhibidor. La forma gadas previo a su ensayo.
más común de esta anomalía es el edema angioneurótico. No se observan interferencias por hemoglobina hasta
La forma adquirida, se manifiesta a una edad mayor o avan- 1000 mg/dl, triglicéridos hasta 2500 mg/dl, bilirrubina
zada, y se caracteriza por la formación de inmunocomplejos hasta 20 mg/dl, heparina hasta 50 mg/dl, ni citrato de
que resultan en una disminución cuantitativa y funcional del sodio hasta 1000 mg/dl.
inhibidor. Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
El C1-INH reacciona con el anticuerpo específico formando muestra debe ser preferentemente fresca. Si el ensayo no
inmunocomplejos insolubles. La turbidez causada por estos es realizado en el día, la muestra puede ser conservada 48
inmunocomplejos es proporcional a la concentración de horas a 2-10oC o por períodos más prolongados de tiempo
C1-INH en la muestra y puede ser medida espectrofoto- a -20oC.
métricamente.
B. Reactivo B: anticuerpos policlonales anti-C1-INH humana - Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados
(cabra) en buffer fosfato, pH 7,4. - Tubos de Kahn o hemólisis
- Cronómetro
- Calibrador Proteínas nivel alto Turbitest AA de Wiener lab. - Longitud de onda: 340 nm
INSTRUCCIONES PARA SU USO control de la temperatura no es crítico, pudiendo oscilar
Reactivos Provistos: listos para usar. entre 22 y 30oC.
Los reactivos son para uso diagnóstico “in vitro”. - Volumen final de reacción: 1810 ul
864105700 / 02 p. 1/6
Realizar en tubos de Kahn, las siguientes diluciones en LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
solución fisiológica del Calibrador Proteínas nivel alto: Ver Sustancias Interferentes conocidas en MUESTRA.
1:1; 1:2; 1:4; 1:8; 1:16, empleando solución fisiológica Para preservar la integridad de los reactivos debe evitarse
como punto cero. todo tipo de contaminaciones, empleando para la medición
Reactivo A 1500 ul PERFORMANCE
Homogeneizar y leer la absorbancia de cada dilución a) Reproducibilidad: realizando replicados de una mis-
a 340 nm (DO1) llevando a cero con agua destilada. ma muestra conteniendo C1-INH, se calculó la precisión
Luego agregar: intraensayo:
Nivel D.S. C.V.
Reactivo B 300 ul
38,6 mg/dl ± 0,8 mg/dl 2,2%
Leer la absorbancia a 340 nm (DO2), llevando a cero con b) Límite de detección: 5 mg/dl.
agua destilada. c) Rango de medición: 5 - 106 mg/dl.
Calcular la diferencia de absorbancia (∆A = DO2 - DO1) d) Efecto prozona: no se evidencia efecto prozona hasta
para cada dilución del Calibrador Proteínas, incluyendo 530 mg/dl de C1-INH.
el punto cero.
Representar en papel milimetrado las diferencias de ab- PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS
sorbancia (∆A) en función de la concentración en mg/dl Referirse a las adaptaciones específicas de cada analizador.
del Calibrador Proteínas.
PRESENTACION
Muestra 10 ul - 1 x 10 ml Reactivo B
(Cód. 1009353)
Reactivo A 1500 ul
Luego agregar:
Reactivo B 300 ul BIBLIOGRAFIA
Mezclar e incubar 15 minutos a temperatura ambiente. 2005.
Leer la absorbancia a 340 nm (DO2), llevando a cero con - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
agua destilada. AACC Press, 5th ed., 2000.

Calcular la diferencia de absorbancia (∆A = DO2 - DO 1)
correspondiente a cada muestra analizada. Interpolar
esta ∆A en la curva de calibración para determinar la
concentración en mg/dl (g/l) correspondiente a la muestra
estudiada.
dor Proteínas nivel alto deben ser diluidas con solución

muestras.
15 - 35 mg/dl (0,15 - 0,35 g/l)
864105700 / 02 p. 2/6
Símbolos
C
M Elaborado por:

Europea Nocivo

Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
864105700 / 02 p. 3/6 UR150729
LINEA TURBITEST AA
C3
del componente C3 del complemento
SIGNIFICACION CLINICA plasma, se recomienda no emplear niveles en exceso de

El C3 es una β-2-proteína que constituye el componente heparina como anticoagulante.
central de la vía clásica y de la alternativa del complemento. c) Sustancias interferentes conocidas: no emplear sueros
Se comporta además como una proteína de fase aguda, hemolizados o contaminados.
por lo tanto, niveles séricos aumentados se relacionan No se observan interferencias por bilirrubina hasta 20 mg/dl,
con enfermedades inflamatorias agudas. Niveles séricos triglicéridos hasta 25 g/l, ni hemoglobina hasta 10 g/dl.
disminuidos se observan en enfermedades autoinmunes, Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
glomerulonefritis, deficiencias congénitas, etc. drogas en el presente método.
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: se
FUNDAMENTOS DEL METODO recomienda usar suero preferentemente fresco. Si el ensayo
La proteína C3 del complemento reacciona con el anticuerpo no puede ser realizado en el mismo día, la muestra puede
específico anti-C3 formando inmunocomplejos insolubles. ser conservada 48 horas en refrigerador (2-10oC). En caso
La turbidez provocada por estos inmunocomplejos es pro- que se deba procesar en un período más largo de tiempo,
porcional a la concentración de C3 en la muestra y puede debe conservarse inmediatamente a -20oC.
medirse espectrofotométricamente.
REACTIVOS PROVISTOS - Espectrofotómetro.
A. Reactivo A: solución fisiológica tamponada, pH 7,35 ± - Cubetas espectrofotométricas de caras paralelas.
0,10. - Micropipetas y pipetas capaces de medir los volúmenes
B. Reactivo B: anticuerpo monoespecífico anti-C3. indicados.
- Tubos de Kahn o hemólisis.
REACTIVOS NO PROVISTOS - Reloj o timer.
- Calibrador proteínas nivel alto Turbitest AA de Wiener lab. CONDICIONES DE REACCION
INSTRUCCIONES PARA SU USO - Temperatura de reacción: temperatura ambiente (25oC). El
Reactivos Provistos: listos para usar. control de la temperatura no es crítico, pudiendo oscilar
entre 22 y 30oC.
PRECAUCIONES - Tiempo de reacción: 30 minutos
si fueran capaces de transmitir infección. PROCEDIMIENTO
solución fisiológica, del Calibrador Proteínas nivel alto:
ALMACENAMIENTO Calibrador Proteínas diluido 70 ul
Reactivo A 900 ul
hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. Una vez
que los frascos han sido abiertos, deben ser conservados Homogeneizar y leer la absorbancia de cada dilución
herméticamente cerrados en refrigerador. No congelar. a 340 nm (DO1) llevando el aparato a cero con agua
destilada. Luego agregar:
MUESTRA
Suero o plasma heparinizado Reactivo B 120 ul
a) Recolección: obtener la muestra de la manera usual. Mezclar e incubar 30 minutos a temperatura ambiente.
b) Aditivos: en caso de que la muestra a emplear sea
870220000 / 05 p. 1/6
PERFORMANCE
Leer la absorbancia a 340 nm (DO2), llevando el aparato a) Reproducibilidad: procesando simultáneamente 20 re-
a cero con agua destilada. plicados de una misma muestra, se obtienen los siguientes
Calcular la diferencia (∆A = DO2 - DO1) para cada dilución valores:
del Calibrador Proteínas, incluyendo el punto cero.
Representar en papel milimetrado las diferencias de ab- Nivel D.S. C.V.
sorbancia (∆A = DO2 - DO1) en función de la concentración 115,9 mg/dl ± 1,12 mg/dl 1,0 %
en mg/dl (g/l) del Calibrador Proteínas. 142,1 mg/dl ± 2,86 mg/dl 2,0 %
PROCEDIMIENTO PARA MUESTRAS b) Rango dinámico: se pueden obtener valores entre la

Realizar diluciones 1:10 de las muestras en solución concentración de calibrador más baja y más alta de la curva
fisiológica. de calibración (alrededor de 400 mg/dl).
c) Límite de detección: la mínima concentración cuantifi-
Muestra diluida 70 ul cable de C3 es 20 mg/dl.
Reactivo A 900 ul
Homogeneizar y leer la absorbancia a 340 nm (DO1) Para las instrucciones de programación consulte el manual
llevando el aparato a cero con agua destilada. Luego del usuario del analizador en uso.
agregar: Para la calibración, se debe utilizar Calibrador Proteínas
Reactivo B 120 ul nivel alto Turbitest AA de Wiener lab.
PRESENTACION
1 x 5 ml Reactivo B
(Cód. 1513264)
CALCULO DE LOS RESULTADOS - 1 x 60 ml Reactivo A
Calcular la diferencia de absorbancia (∆A = DO2 - DO1) 1 x 5 ml Reactivo B
correspondiente a cada muestra analizada. Interpolar esta (Cód. 1009342)
diferencia (∆A) en la curva de calibración para determinar
la concentración en mg/dl correspondiente a la muestra - 1 x 60 ml Reactivo A
estudiada. 1 x 5 ml Reactivo B
Las muestras con absorbancias superiores a la del Calibra- (Cód. 1009215)
dor Proteínas nivel alto, deben ser diluidas 1:2 con solución
1 x 5 ml Reactivo B
obtenido por dos.
(Cód. 1009643)
BIBLIOGRAFIA
Control Inmunológico nivel 1 Turbitest AA.
- Dati, F. - J. of I.F.C.C. VIII/1:29 (1996).
- Ahmed, A. et al. - Clin. Diagn. Lab. Immunol. 2/5:509 (1995).
El Control se procesa de la misma manera que las muestras.
- Butts, W. et al. - Clin. Chem. 23/3:511 (1977).
- Buffone, G. et al. - Clin. Chem. 23/6:994 (1977).
- Borque, L. et al. - Clin. Biochem. 16/6:330 (1983).
90 - 180 mg/dl (0,9 - 1,8 g/l).
- Prince, C. et al. - Ann. Clin. Biochem. 20:1 (1983).
Cada laboratorio debe establecer sus propios valores de - Whicher, J. - Clin. Chem. 40/6:934 (1994).
referencia. - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
C3 (mg/dl) x 10 = C3 (mg/l)

La turbidez y la presencia de partículas en las muestras,
pueden interferir con la prueba. Por lo tanto, las partículas
que puedan resultar de una coagulación incompleta, o de
una desnaturalización de las proteínas, deben ser removidas
por centrifugación antes de proceder a su ensayo.
Las muestras que presentan absorbancias superiores al
calibrador más alto de la curva de calibración, deberán ser
diluidas y ensayadas nuevamente. La concentración de C3
para dichas muestras se obtiene multiplicando el resultado
obtenido por el factor de dilución correspondiente.
870220000 / 05 p. 2/6
Símbolos
C
M Elaborado por:

Europea Nocivo

Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870220000 / 05 p. 3/6 UR130730
LINEA TURBITEST AA
C4
del componente C4 del complemento
SIGNIFICACION CLINICA hemolizados o contaminados.

El C4 es una β-1-proteína componente del complemento. No se observan interferencias por bilirrubina hasta 20 mg/dl,
Niveles bajos en suero se asocian con lupus sistémico, en- triglicéridos hasta 500 mg/dl, ni hemoglobina hasta 10 g/dl.
fermedades hereditarias e infecciones a repetición. Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
FUNDAMENTOS DEL METODO d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: se
La proteína C4 del complemento reacciona con el anticuerpo recomienda usar suero preferentemente fresco. Si el ensayo
específico anti-C4 formando inmunocomplejos insolubles. no puede ser realizado en el mismo día, la muestra puede
La turbidez provocada por estos inmunocomplejos es pro- ser conservada 48 horas en refrigerador (2-10ºC). En caso
porcional a la concentración de C4 en la muestra y puede que se deba procesar en un período más largo de tiempo,
medirse espectrofotométricamente. debe conservarse inmediatamente a -20oC.

A. Reactivo A: solución fisiológica tamponada, pH 7,35 ± - Espectrofotómetro.
0,10. - Cubetas espectrofotométricas de caras paralelas.
B. Reactivo B: anticuerpo monoespecífico anti-C4. - Micropipetas y pipetas capaces de medir los volúmenes
indicados.
REACTIVOS NO PROVISTOS - Tubos de Kahn o hemólisis.
- Solución fisiológica. - Reloj o timer.
- Calibrador proteínas nivel alto Turbitest AA de Wiener
lab. CONDICIONES DE REACCION
INSTRUCCIONES PARA SU USO - Temperatura de reacción: temperatura ambiente (25oC). El
Reactivos Provistos: listos para usar. control de la temperatura no es crítico, pudiendo oscilar
entre 22 y 30oC.
de trabajo en el laboratorio de química clínica. CURVA DE CALIBRACION
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de Realizar en tubos de Kahn, las siguientes diluciones en
acuerdo a la normativa local vigente. solución fisiológica, del Calibrador Proteínas nivel alto:
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE lógica como punto cero.
ALMACENAMIENTO Calibrador Proteínas diluido 150 ul
Reactivo A 900 ul
que los frascos han sido abiertos, deben ser conservados Homogeneizar y leer la absorbancia de cada dilución
herméticamente cerrados en refrigerador. No congelar. a 340 nm (DO1) llevando el aparato a cero con agua
destilada. Luego agregar:
MUESTRA
Suero o plasma heparinizado Reactivo B 120 ul
a) Recolección: obtener la muestra de la manera usual. Mezclar e incubar 30 minutos a temperatura ambiente.
b) Aditivos: en caso de que la muestra a emplear sea Leer la absorbancia a 340 nm (DO2), llevando el aparato
plasma, se recomienda no emplear niveles en exceso de a cero con agua destilada.
heparina como anticoagulante. Calcular la diferencia (∆A = DO2 - DO1) para cada dilución
c) Sustancias interferentes conocidas: no emplear sueros
870230000 / 03 p. 1/6
PERFORMANCE
del Calibrador Proteínas, incluyendo el punto cero. a) Reproducibilidad: procesando simultáneamente 20 re-
Representar en papel milimetrado las diferencias de plicados de una misma muestra, se obtienen los siguientes
absorbancia (∆A = DO2 - DO1) en función de la concen- valores:
tración en mg/dl (g/l) del Calibrador Proteínas.
Nivel D.S. C.V.
PROCEDIMIENTO PARA MUESTRAS 32,3 mg/dl ± 0,49 mg/dl 1,5 %
Realizar diluciones 1:10 de las muestras en solución 36,9 mg/dl ± 1,21 mg/dl 3,3 %
fisiológica.
Muestra diluida 150 ul concentración de calibrador más baja y más alta de la curva
Reactivo A 900 ul de calibración (alrededor de 70 mg/dl).
c) Límite de detección: la mínima concentración cuantifi-
Homogeneizar y leer la absorbancia a 340 nm (DO1)
cable de C4 es 5 mg/dl.
llevando el aparato a cero con agua destilada. Luego
agregar:
Reactivo B 120 ul Para las instrucciones de programación consulte el manual
Mezclar e incubar 30 minutos a temperatura ambiente. del usuario del analizador en uso.
Leer la absorbancia a 340 nm (DO2), llevando el aparato Para la calibración, se debe utilizar Calibrador Proteínas
a cero con agua destilada. nivel alto Turbitest AA de Wiener lab.
PRESENTACION
CALCULO DE LOS RESULTADOS - 1 x 60 ml Reactivo A
Calcular la diferencia de absorbancia (∆A = DO2 - DO1) 1 x 5 ml Reactivo B
correspondiente a cada muestra analizada. Interpolar esta (Cód. 1513265)
diferencia (∆A) en la curva de calibración para determinar - 1 x 60 ml Reactivo A
la concentración en mg/dl correspondiente a la muestra 1 x 5 ml Reactivo B
estudiada. (Cód. 1009343)
dor Proteínas nivel alto, deben ser diluidas 1:2 con solución - 1 x 60 ml Reactivo A
fisiológica y procesadas nuevamente. Multiplicar el resultado 1 x 5 ml Reactivo B
obtenido por dos. (Cód. 1009216)
METODO DE CONTROL DE CALIDAD 1 x 5 ml Reactivo B
Se recomienda el uso de Control Inmunológico nivel 1 o (Cód. 1009644)
Control Inmunoógico nivel 2 Turbitest AA de Wiener lab.
El Control es procesado de la misma manera que las BIBLIOGRAFIA
muestras. - Dati, F. - J. of I.F.C.C. VIII/1:29 (1996).
- Ahmed, A. et al. - Clin. Diagn. Lab. Immunol. 2/5:509 (1995).
VALORES DE REFERENCIA - Butts, W. et al. - Clin. Chem. 23/3:511 (1977).
10 - 40 mg/dl (0,1 - 0,4 g/l). - Buffone, G. et al. - Clin. Chem. 23/6:994 (1977).
Cada laboratorio debe establecer sus propios valores de - Borque, L. et al. - Clin. Biochem. 16/6:330 (1983).
referencia. - Prince, C. et al. - Ann. Clin. Biochem. 20:1 (1983).
- Whicher, J. - Clin. Chem. 40/6:934 (1994).
CONVERSION DE UNIDADES AL SISTEMA SI - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
C4 (mg/dl) x 10 = C4 (mg/l) AACC Press, 4th ed., 2001.

La turbidez y la presencia de partículas en las muestras,
pueden interferir con la prueba. Por lo tanto, las partículas
que puedan resultar de una coagulación incompleta, o de
una desnaturalización de las proteínas, deben ser removidas
por centrifugación antes de proceder a su ensayo.
Las muestras que presentan absorbancias superiores al
calibrador más alto de la curva de calibración, deberán ser
diluidas y ensayadas nuevamente. La concentración de C4
para dicha muestra se obtiene multiplicando el resultado
obtenido por el factor de dilución correspondiente.
870230000 / 03 p. 2/6
Símbolos
C
M Elaborado por:

Europea Nocivo

Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870230000 / 03 p. 3/6 UR130730
Ca-Color
C Método colorimétrico para la determinación de calcio
AA
en suero, plasma heparinizado y orina

El calcio es esencial en la mayoría de las reacciones de la de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
coagulación sanguínea y en la regulación de la excitabilidad Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
de las fibras musculares. Su concentración en suero y orina acuerdo a la normativa local vigente.
está regulada por la acción de factores tales como niveles de
parathormona, vitamina D y fósforo, observándose fluctua- ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
ciones fisiológicas debidas a edad, sexo, embarazo, actividad ALMACENAMIENTO
física, cambios estacionales (por acción de la luz solar). Reactivos Provistos: estables a temperatura ambiente (me-
La hipercalcemia está relacionada con distintas patologías: nor a 25oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
hiperparatiroidismo, neoplasias óseas, intoxicaciones con Reactivo único (premezclado): en refrigerador (2-10oC)
vitamina D. La hipocalcemia se asocia con desórdenes es estable 4 días a partir del momento de su preparación.
tales como hipoparatiroidismo, deficiencia de vitamina D,
malabsorción. INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
REACTIVOS
FUNDAMENTOS DEL METODO Absorbancias altas de los Blancos son indicio de conta-
El calcio reacciona con la o-cresolftaleín complexona (o- minación con calcio. Desechar cuando las mismas sean
cpc) a pH alcalino, dando un complejo de color magenta superiores a 0,600 D.O.
que se mide fotocolorimétricamente a 570 nm.
MUESTRA
REACTIVOS PROVISTOS Suero, plasma heparinizado u orina
A. Reactivo A: solución de o-cresolftaleín complexona y a) Recolección:
8-hidroxiquinolina. - Suero o plasma: obtener de la manera usual.
B. Reactivo B: solución de aminometil propanol (AMP). - Orina: recolectar orina de 24 horas sobre 20 ml de ácido clor-
S. Standard: solución de calcio 10 mg/dl. hídrico al 50%. Llevar a 2 litros con agua y homogeneizar.
b) Aditivos: en caso de utilizar plasma, se debe usar hepa-
Concentraciones finales rina como anticoagulante. Si la muestra a emplear es orina,
o-Cresolftaleín complexona............................... 0,08 mmol/l se debe acidificar con ácido clorhídrico al 50% durante su
8-Hidroxiquinolina................................................... 4 mmol/l recolección.
AMP........................................................................ 3,5 mol/l c) Sustancias interferentes conocidas: los anticoagulan-
tes distintos de la heparina, complejan al calcio produciendo
REACTIVOS NO PROVISTOS resultados erróneos. No interfieren: bilirrubina hasta 20 mg/dl
- Calibrador A plus de Wiener lab. (200 mg/l), triglicéridos hasta 680 mg/dl (6,8 g/dl), hemoglo-
- Agua destilada o desionizada. bina hasta 94 mg/dl y magnesio hasta 9,9 mg/dl.
INSTRUCCIONES PARA SU USO drogas en el presente método.
Reactivos Provistos: listos para usar. d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
Standard: cada vez que se use, transferir una cantidad en muestra debe ser preferentemente fresca. Puede conservar-
exceso a un tubo limpio y pipetear de allí el volumen nece- se una semana en refrigerador (2-10oC) o más de 5 meses
sario, descartando el sobrenadante. en el congelador, sin agregado de conservadores.
Reactivo único (premezclado): según el número de
muestras a ensayar, mezclar partes iguales de Reactivo A MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
y Reactivo B. - Espectrofotómetro o fotocolorímetro.
PRECAUCIONES - Tubos o cubetas espectrofotométricas.
No ingerir. Evitar el contacto con la piel y los ojos. En caso CONDICIONES DE REACCION
de derrame o salpicaduras, lavar con abundante agua la - Longitud de onda: 570 nm en espectrofotómetro o 560-
zona afectada. 590 nm en fotocolorímetro con filtro rojo.
870250022 / 01 p. 1/9
- Temperatura de reacción: temperatura ambiente (15-25oC). CALCULO DE LOS RESULTADOS
- Tiempo de reacción: 5 minutos 10 mg/dl
- Volumen de muestra: 50 ul 1) Calcio sérico (mg/dl) = D x f f=
- Volumen final de reacción: 2,05 ml S
D
2) Calcio urinario (mg/24 hs) = x conc. S x 10 x V
S
PROCEDIMIENTO
donde:
I- TECNICA CON REACTIVOS SEPARADOS 10 = factor de conversión de mg/dl a mg/l
En tres tubos marcados B (Blanco), S (Standard) y D V = volumen de la diuresis en litros/24 hs
(Desconocido) colocar: Ejemplo:
Absorbancia del Standard = 1,050
B S D
Absorbancia de la muestra de orina = 0,933
Agua destilada 50 ul - - Concentración del Standard = 10 mg/dl
Standard - 50 ul - Volumen de orina de 24 hs = 1,27 litros
0,933
Muestra - - 50 ul Calcio urinario = x 10 x 10 x 1,27 = 113 mg/24 hs
Reactivo A 1,0 ml 1,0 ml 1,0 ml 1,050
Reactivo B 1,0 ml 1,0 ml 1,0 ml CONVERSION DE UNIDADES
Mezclar, incubar 5 minutos a temperatura ambiente Ca (mg/dl) = Ca (mmol/l) x 4
(15-25oC) y leer la absorbancia en espectrofotómetro a Ca (mmol/l) = Ca (mg/dl) x 0,25
570 nm o en fotocolorímetro con filtro rojo (560-590 nm). Ca (mg/dl) = Ca (mEq/l) x 2
Ca (mEq/l) = Ca (mg/dl) x 0,5
Microtécnica
Seguir el procedimiento indicado en la Técnica I) pero METODO DE CONTROL DE CALIDAD
usando 25 ul de Muestra, 0,5 ml de Reactivo A y 0,5 ml Si la muestra a ensayar es suero, procesar 2 niveles de un
de Reactivo B. material de control de calidad (Standatrol S-E 2 niveles) con
concentraciones conocidas de calcio, con cada determinación.
II- TECNICA CON REACTIVO UNICO (PREMEZCLADO)
(Desconocido) colocar:
Suero: 8,5 - 10,5 mg/dl
B S D Orina: hasta 300 mg/24 hs (para una dieta normal)
Agua destilada 50 ul - - En una población de 120 individuos sanos, provenientes de
la ciudad de Rosario (Argentina), de ambos sexos (entre 20 y
Standard - 50 ul - 45 años), con una ingesta restringida en calcio, se encontró
Muestra - - 50 ul que el 95% de los resultados cubrieron el siguiente rango:
Orina: 60 - 200 mg/24 hs
Reactivo único 2,0 ml 2,0 ml 2,0 ml
Mezclar, incubar 5 minutos a temperatura ambiente valores de referencia.
(15-25oC) y leer la absorbancia en espectrofotómetro a
570 nm o en fotocolorímetro con filtro rojo (560-590 nm). LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
Microtécnica Contaminaciones: el material a utilizar debe estar riguro-
Seguir el procedimiento indicado en la Técnica II) pero samente limpio, libre de calcio y de toda traza de anticoa-
usando 25 ul de Muestra y 1 ml de Reactivo único. gulante. Para ello se recomienda lavar con detergentes no
En caso de muestras lipémicas o hemolizadas es ne- iónicos (Noión de Wiener lab.) o ácidos minerales diluidos,
cesario procesar un Blanco de Muestra de la siguiente efectuando varios enjuagues con agua destilada.
manera: mezclar 50 ul de muestra con 2 ml de agua
destilada. Medir la absorbancia llevando el aparato a PERFORMANCE
cero con agua destilada. Restar esta absorbancia de Los ensayos fueron realizados en analizador Express Plus(*)
la obtenida inicialmente y utilizar esta diferencia para Si se usa el procedimiento manual, se debe validar que se
los cálculos. obtenga una performance similar a la siguiente:
a) Reproducibilidad:
Intraensayo
ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL Muestra Nivel D.S. C.V.
El color de reacción final es estable 20 minutos, por lo que Suero nivel normal 9,4 mg/dl ± 0,12 mg/dl 1,28 %
la absorbancia debe ser leída dentro de este lapso. Suero nivel alto 12,0 mg/dl ± 0,16 mg/dl 1,30 %
(*)
Muestra Nivel D.S. C.V. SÍMBOLOS
Orina nivel normal 118 mg/24 hs ± 1,26 mg/24 hs 1,06 % Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
Orina nivel alto 349 mg/24 hs ± 2,38 mg/24 hs 0,68 % reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
Interensayo
Muestra
Suero nivel alto

Nivel
Suero nivel normal 9,8 mg/dl
12,7 mg/dl
D.S. C.V.
± 0,17 mg/dl
± 0,22 mg/dl
1,74 %
1,70 %
Muestra Nivel D.S. C.V.

Orina nivel normal 121 mg/24 hs ± 3,01 mg/24 hs 2,50 %
Orina nivel alto 351 mg/24 hs ± 4,69 mg/24 hs 1,34 %
b) Linealidad: la reacción es lineal hasta 20 mg/dl. Para X Contenido suficiente para <n> ensayos
valores superiores, repetir la determinación empleando 25 ul
de Muestra o muestra diluida al 1:2 con solución fisiológica H Fecha de caducidad
y multiplicar por 2 el resultado obtenido.
c) Correlación: l Límite de temperatura (conservar a)
- Suero y plasma: se determinó el valor de calcio en 143
muestras, utilizando Ca-color AA de Wiener lab. y otro kit
 No congelar
comercial basado en el mismo principio, obteniéndose el Riesgo biológico

siguiente coeficiente de correlación: F
r = 0,9963, pendiente b = 1,0185, intersección a = 0,0362 Volumen después de la reconstitución
- Orina: se determinó el valor de calcio en 69 muestras,
utilizando Ca-color AA de Wiener lab. y otro kit comercial Cont. Contenido
basado en el mismo principio, obteniéndose el siguiente
coeficiente de correlación: g Número de lote
r = 0,9943, pendiente b = 1,0207, intersección a = 2,5116
Elaborado por:
d) Sensibilidad: basada en una lectura mínima del instru- M
mento de 0,001 D.O. el mínimo cambio de concentración
Nocivo
detectable en estas condiciones será aproximadamente
0,01 mg/dl.

Irritante
Consultar las instrucciones de programación en el Manual
del Usuario del analizador en uso.
Para la calibración, se puede utilizar un calibrador con base
de suero (Calibrador A plus de Wiener lab.). Calibr. Calibrador
PRESENTACION b Control
- 4 x 50 ml (Cód. 1152002).
b Control Positivo
BIBLIOGRAFIA
- Martinek, R.G. - J. Am. Med. Techn. 33:416 (1971). c Control Negativo
- Rojkín, M. y Mariani, M. de - Bioquím. Clín. VII/4:405 (1973).
- Lorenzo, L.E. ; Drappo, G.A. - 1o Congreso Argentino de h Número de catálogo
Osteología y Metabolismo Mineral - Rosario (1984).
- Drappo, G.; Lorenzo, L.; - Revista ABA 239:230 (1979).
- Connerty, H.V.; Briggs, A.R. - Am. J. Clin. Path. 45:290
(1966).
- Burtis C., Ashwood, E. - Tietz Texbook of Clinical Chemistry,
WB Saunders Co., 3º ed, 1999.
- Tietz N.W. - Fundamentals of Clinical Chemistry - W.B.
Saunders Co., Philadelphia; 1982. M Wiener Laboratorios S.A.I.C.
Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870250022 / 01 p. 3/9 UR120515
Ca-Color
C Arsenazo III AA
Método colorimétrico directo para la determinación de
calcio en suero, plasma y orina

El calcio es esencial en la mayoría de las reacciones de la REACTIVOS
coagulación sanguínea y en la regulación de la excitabilidad La turbidez o decoloración del Reactivo A indica deterioro
de las fibras musculares. del mismo, mientras que absorbancias del blanco mayor a
Su concentración en suero y orina está regulada por la acción 1,200 D.O. a 650 nm (ver LIMITACIONES DEL PROCE-
de factores tales como niveles de parathormona, vitamina D DIMIENTO), son indicio de contaminación con calcio. En
y fósforo, observándose fluctuaciones fisiológicas debidas a ambos casos, desechar.
edad, sexo, embarazo, actividad física, cambios estacionales
(por acción de la luz solar). MUESTRA
La hipercalcemia está relacionada con distintas patologías: Suero, plasma heparinizado u orina
hiperparatiroidismo, neoplasias óseas, intoxicaciones con a) Recolección:
vitamina D. - Suero o plasma: obtener de la manera usual.
La hipocalcemia se asocia con desórdenes tales como - Orina: recolectar orina de 24 horas sobre 20 ml de ácido
hipoparatiroidismo, deficiencia de vitamina D, malabsorción. clorhídrico al 50%. Llevar a 2 litros con agua y homoge-
neizar.
FUNDAMENTOS DEL METODO b) Aditivos: en caso de utilizar plasma, se debe usar hepa-
El calcio reacciona con arsenazo III dando un complejo de rina como anticoagulante. Si la muestra a emplear es orina,
color azul que se mide fotocolorimétricamente a 650 nm. se debe acidificar con ácido clorhídrico al 50% durante su
recolección.
REACTIVOS PROVISTOS c) Sustancias interferentes conocidas: los anticoagulan-
A. Reactivo A: solución de arsenazo III 100 mg/l y 8-hidroxi- tes distintos de la heparina, complejan al calcio produciendo
quinolina sulfonato 1,4 g/l en buffer Tris 100 mM, pH 8,5. resultados erróneos. No interfieren: bilirrubina hasta 200 mg/l,
S. Standard*: solución de calcio 10 mg/dl. hemoglobina hasta 350 mg/dl, magnesio hasta 10 mg/dl, ni
triglicéridos hasta 500 mg/dl.
- Agua destilada o desionizada. drogas en el presente método.
- Calibrador A plus de Wiener lab. cuando se emplea la téc- d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
nica automática. Puede también emplearse en calibración muestra debe ser preferentemente fresca. Puede conservar-
de técnicas manuales. se una semana en refrigerador (2-10oC) o más de 5 meses
en el congelador, sin agregado de conservadores.
Reactivos Provistos: listos para usar. MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
Standard: cada vez que se use, transferir una cantidad en - Espectrofotómetro o fotocolorímetro.
exceso a un tubo limpio y pipetear de allí el volumen nece- - Micropipetas y pipetas capaces de medir los volúmenes
sario, descartando el sobrenadante. indicados.
- Tubos o cubetas espectrofotométricas.
PRECAUCIONES - Cronómetro.
de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos. - Longitud de onda: 650 nm en espectrofotómetro o 620-
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de 650 nm en fotocolorímetro.
acuerdo a la normativa local vigente. - Temperatura de reacción: temperatura ambiente (15-25oC).
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE - Volumen de muestra: 10 ul
ALMACENAMIENTO - Volumen final de reacción: 1,01 ml
Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10oC) Los volúmenes de muestra y reactivo A se pueden variar
hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. Evitar la proporcionalmente (ej.: 20 ul de muestra + 2 ml de Reactivo
exposición prolongada del Reactivo A a la luz directa. A o 5 ul de muestra + 0,5 ml de Reactivo A).
* No provisto en todas las presentaciones 864120500 / 02 p. 1/6

la ciudad de Rosario (Argentina), de ambos sexos (entre 20 y
PROCEDIMIENTO 45 años), con una ingesta restringida en calcio, se encontró:
En tres tubos marcados B (Blanco), S (Standard o Cali- Orina: 60 - 200 mg/24 hs
brador) y D (Desconocido) colocar: Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios
B S D
Muestra - - 10 ul LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
Standard o Calibrador - 10 ul - Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
A longitudes de onda inferiores a 650 nm, pueden encon-
Agua destilada 10 ul - - trarse lecturas de Blanco superiores a 1,200 D.O. que no
Reactivo A 1 ml 1 ml 1 ml afectan los resultados.
Contaminaciones: el material a utilizar debe estar riguro-
Mezclar e incubar 2 minutos a temperatura ambiente
samente limpio, libre de calcio y de toda traza de anticoa-
(15-25oC). Leer la absorbancia en espectrofotómetro a
gulante. Para ello aconsejamos lavar con detergentes no
650 nm o en fotocolorímetro (620-650 nm), llevando el
iónicos (Noión de Wiener lab.) o ácidos minerales diluidos,
aparato a cero con el Blanco.
efectuando varios enjuagues con agua destilada.
Se aconseja separar pipetas y tubos para uso exclusivo de
esta determinación.
El color de reacción final es estable 1 hora, por lo que la
PERFORMANCE
absorbancia debe ser leída dentro de este lapso.
replicados de las mismas muestras en un mismo día, se
obtuvieron los siguientes datos:
10 mg/dl o C
1) Calcio sérico (mg/dl) = D x f f= Nivel D.S. C.V.
S Suero 9,2 mg/dl ± 0,18 mg/dl 1,93 %
donde: 11,0 mg/dl ± 0,10 mg/dl 0,88 %
C = concentración de calcio en el Calibrador A plus en caso Orina 104 mg/24 hs ± 2,68 mg/24 hs 2,57 %
de utilizar este reactivo 372 mg/24 hs ± 6,64 mg/24 hs 1,79 %
D
2) Calcio urinario (mg/24 hs) = x 200 mg/24 hs Procesando la misma muestra en diferentes días, se obtuvo:
S Suero 9,1 mg/dl ± 0,16 mg/dl 1,74 %
En el caso de orinas con volúmenes de diuresis superiores 12,1 mg/dl ± 0,16 mg/dl 1,29 %
a los 2 litros o que no han sido llevadas a 2 litros con agua
Orina 117 mg/24 hs ± 2,9 mg/24 hs 2,44 %
destilada, utilizar el siguiente cálculo:
266 mg/24 hs ± 7,0 mg/24 hs 2,62 %
D
Calcio urinario (mg/24 hs) = x 100 x V b) Linealidad: la reacción es lineal hasta 20 mg/dl. Para
S valores superiores, repetir la determinación empleando
donde: muestra diluida al 1:2 ó 1:4 con solución fisiológica y mul-
100 = concentración del Standard en mg/l tiplicar el resultado obtenido por 2 ó 4 respectivamente.
V = volumen de la diuresis en litros/24 hs c) Límite de cuantificación: la mínima concentración de
calcio detectable por este método es de 2,5 mg/dl.
CONVERSION DE UNIDADES
Ca (mg/dl) = Ca (mmol/l) x 4 PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS
Ca (mmol/l) = Ca (mg/dl) x 0,25 Para las instrucciones de programación consulte el manual
Ca (mg/dl) = Ca (mEq/l) x 2 del usuario del analizador en uso. Para la calibración debe
Ca (mEq/l) = Ca (mg/dl) x 0,5 emplearse Calibrador A plus de Wiener lab.

Si la muestra a ensayar es suero, procesar 2 niveles de un - 4 x 50 ml (Cód. 1152004)
material de control de calidad (Standatrol S-E 2 niveles) - 8 x 20 ml (Cód. 1009307)
con concentraciones conocidas de calcio, con cada determi- - 8 x 20 ml (Cód. 1009248)
nación. En el caso de muestras de orina, utilizar un control - 8 x 20 ml (Cód. 1009606)
con base de orina.
BIBLIOGRAFIA
VALORES DE REFERENCIA - Morgan, B.R.; Artiss, J.D.; Zak, B. - Clin. Chem. 39/8:1608
Suero: 8,5 - 10,5 mg/dl (1993).
Orina: hasta 300 mg/24 hs (para una dieta normal) - Leary, N.O.; Penbroke, A.; Duggan, P.F. - Clin. Chem.
En una población de 120 individuos sanos, provenientes de 38/6:904 (1992).
864120500 / 02 p. 2/6
- Burtis C., Ashwood, E. - Tietz Texbook of Clinical Chemistry, SÍMBOLOS
WB Saunders Co., 3º ed, 1999. Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
- Martinek, R.G. - J. Am. Med. Techn. 33:416 (1971). reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
- Rojkín, M. y Mariani, M. de - Bioquím. Clín. VII/4:405 (1973).
- Lorenzo, L.E. ; Drappo, G.A. - 1o Congreso Argentino de Este producto cumple con los requerimientos previstos
- Drappo, G.; Lorenzo, L.; - Revista ABA 239:230 (1979). C por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios
- Connerty, H.V.; Briggs, A.R. - Am. J. Clin. Path. 45:290
(1966).
- Tietz, N.W. - "Fundamentals of Clinical Chemistry", W.B. Contenido suficiente para <n> ensayos
Saunders, Philadelphia, 2001.
X
 No congelar
F Riesgo biológico
Cont. Contenido
g Número de lote
Elaborado por:
M
Nocivo
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo
Wiener lab.
Riobamba 2944
Bioquímica
864120500 / 02 p. 3/6 UR120830
Ca-Color
Para la determinación de calcio sérico y urinario
SIGNIFICACION CLINICA biente (< 25ºC) hasta la fecha de vencimiento indicada

El calcio es esencial en la mayoría de las reacciones de la en la caja.
coagulación sanguínea y en la regulación de la excitabilidad
de las fibras musculares. Su concentración en suero y orina INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
está regulada por la acción de factores tales como niveles de REACTIVOS
parathormona, vitamina D y fósforo, observándose fluctuacio- Ca-Color se caracteriza por presentar Blancos más bajos
nes fisiológicas debidas a edad, sexo, embarazo, actividad que todos los sistemas similares que usan Cfx u otros
física, cambios estacionales (por acción de la luz solar). indicadores de calcio. Absorbancias altas de los Blancos
La hipercalcemia está relacionada con distintas patologías: son indicio de contaminación con calcio. Desechar cuan-
hiperparatiroidismo, neoplasias óseas, intoxicaciones con vita- do las lecturas de los Blancos sean mayores o iguales a
mina D. La hipocalcemia se asocia con desórdenes tales como 0,300 D.O.
hipoparatiroidismo, deficiencia de vitamina D, malabsorción.
MUESTRA
FUNDAMENTOS DEL METODO Suero u orina
El calcio reacciona con la cresolftaleín complexona (cfx) a a) Recolección:
pH 11, dando un complejo de adición color magenta que se - Suero: obtener de la manera usual.
mide fotocolorimétricamente a 570 nm. - Orina: recolectar orina de 24 horas sobre 20 ml de ácido
clorhídrico al 50%. Llevar a 2 litros con agua y homoge-
REACTIVOS PROVISTOS neizar.
A. Reactivo A: solución de cresolftaleín complexona 3,7 mmol/l. b) Aditivos: si la muestra a emplear es orina, se debe aci-
B. Reactivo B: solución de aminometil propanol (AMP) dificar con ácido clorhídrico al 50% durante su recolección.
0,2 mol/l en metanol 35% V/V para pH final 11. c) Sustancias interferentes conocidas: los anticoagulantes
S. Standard: solución de calcio 10 mg/dl. complejan al calcio produciendo resultados erróneos.
No interfieren: proteínas hasta 15 g/dl, fosfatos hasta 5 g/l, bili-
REACTIVOS NO PROVISTOS rrubina hasta 200 mg/l, hemólisis intensa o lipemia hasta 15 g/l.
Agua destilada. Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
INSTRUCCIONES PARA SU USO d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
Reactivos Provistos: listos para usar. muestra debe ser preferentemente fresca. Puede conservar-
Standard: cada vez que se use, transferir una cantidad en se una semana en refrigerador (2-10oC) o más de 5 meses
exceso a un tubo limpio y pipetear de allí el volumen nece- en el congelador, sin agregado de conservadores.
sario, descartando el resto.
PRECAUCIONES - Espectrofotómetro o fotocolorímetro.
Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro". - Micropipetas y pipetas capaces de medir los volúmenes
Reactivo B: nocivo. R20/22: nocivo por inhalación y por indicados.
ingestión. S24/25: evítese el contacto con los ojos y la piel. - Tubos o cubetas espectrofotométricas.
S26/28: en caso de contacto con la piel y los ojos, lávese
inmediatamente con abundante agua y acúdase a un médico. CONDICIONES DE REACCION
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales - Longitud de onda: 570 nm en espectrofotómetro o 560-
de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos. 590 nm en fotocolorímetro con filtro rojo.
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de - Temperatura de reacción: temperatura ambiente (15-25oC).
acuerdo a la normativa local vigente. - Volumen de muestra: 20 ul
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE Los volúmenes de muestra y de reactivos pueden disminuirse
ALMACENAMIENTO o aumentarse proporcionalmente. (Ej.: 25 ul de Reactivo A +
Reactivos Provistos: son estables a temperatura am- 1,75 ml de Reactivo B + 10 ul de Muestra).
870240022 / 01 p. 1/9
En una población de 120 individuos sanos, provenientes de
PROCEDIMIENTO la ciudad de Rosario (Argentina), de ambos sexos (entre 20 y
Se aconseja trabajar directamente en tubos o cubetas 45 años), con una ingesta restringida en calcio, se encontró:
espectrofotométricas, de manera de poder determinar un Orina: 60 - 200 mg/24 hs
Blanco interno para cada ensayo, condición indispensable Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios
para controlar las trazas de calcio que pudieran haber valores de referencia.
escapado al proceso de lavado del material.
En dos tubos marcados S (Standard) y D (Desconocido) LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
colocar: Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
Contaminaciones: el material a utilizar debe estar riguro-
S D
samente limpio, libre de calcio y de toda traza de anticoa-
Reactivo A 50 ul 50 ul gulante. Para ello aconsejamos lavar con detergentes no
iónicos (Noión de Wiener lab.) o ácidos minerales diluidos,
Reactivo B 3,5 ml 3,5 ml efectuando un enjuague final con agua destilada.
Mezclar y leer la absorbancia de ambos tubos (Blancos Se aconseja separar pipetas y tubos de fotocolorímetro para
internos: BS y BD) en espectrofotómetro a 570 nm o en uso exclusivo de esta determinación.
fotocolorímetro con filtro rojo (560-590 nm) llevando el
aparato a cero con agua destilada. Agregar: PERFORMANCE
Standard 20 ul - muestras en un mismo día, se obtuvieron los siguiente
Muestra - 20 ul datos:
Nivel D.S. C.V.
Mezclar inmediatamente. Después de 10 minutos, volver
7 mg/dl ± 0,12 mg/dl 1,7 %
a leer (So y Do).
10 mg/dl ± 0,11 mg/dl 1,1 %
15 mg/dl ± 0,10 mg/dl 0,68 %
ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL b) Recuperación: agregando cantidades conocidas de
El color de reacción final es estable 3 horas, por lo que la calcio a distintos sueros, se obtuvo una recuperación entre
absorbancia debe ser leída dentro de este lapso. 97,5 y 101% para todo nivel de calcio estudiado.
c) Linealidad: la reacción es lineal hasta 20 mg/dl. Para
CALCULO DE LOS RESULTADOS valores superiores, repetir la determinación empleando 10 ul
Corregir las lecturas restando los Blancos internos corres- de Muestra o muestra diluida al 1:2 con solución fisiológica
pondientes: y multiplicar por 2 el resultado obtenido.
So - BS = S Según el aparato empleado, la reacción puede no cumplir la
Do - BD = D ley de Beer. Por esta razón, debe constatarse la respuesta
del sistema mediante una curva de calibración preparada con
10 mg/dl 20 y 40 ul de Standard, procesados de la manera indicada
1) Calcio sérico (mg/dl) = D x f f= en el PROCEDIMIENTO. La lectura corregida del segundo
S
tubo de la curva (20 mg/dl) no debe diferir en más del 5%
D del valor calculado en base al primer tubo (10 mg/dl), si la
2) Calcio urinario (mg/24 hs) = x 200 mg/24 hs respuesta es lineal.
S En casos de desvíos (positivos o negativos) superiores
al 5%, debe emplearse la curva de calibración para los
CONVERSION DE UNIDADES cálculos.
Ca (mg/dl) = Ca (mmol/l) x 4 d) Comparación con métodos de referencia: procesando
Ca (mmol/l) = Ca (mg/dl) x 0,25 distintas muestras, con Ca-Color y con otro método tomado
Ca (mg/dl) = Ca (mEq/l) x 2 como referencia, y comparando los resultados obtenidos por
Ca (mEq/l) = Ca (mg/dl) x 0,5 ambos métodos se observa que:
1- Tomando el método de absorción atómica como referencia
METODO DE CONTROL DE CALIDAD (propuesta por el National Bureau of Standards), los resul-
Si la muestra a ensayar es suero, procesar 2 niveles de un tados obtenidos muestran una correlación satisfactoria, con
material de control de calidad (Standatrol S-E 2 niveles) un coeficiente de correlación = 0,86.
con concentraciones conocidas de calcio, con cada deter- 2- Tomando el método de Clark y Collip como referencia, se
minación. demuestra que los resultados son estadísticamente iguales,
con una diferencia promedio menor de 0,2 mg/dl.
Suero: 8,5 - 10,5 mg/dl PRESENTACION
Orina: hasta 300 mg/24 hs (para una dieta normal) - 60 -145 determinaciones (Cód. 1152001).
870240022 / 01 p. 2/9
BIBLIOGRAFIA SÍMBOLOS
- Martinek, R.G. - J. Am. Med. Techn. 33:416 (1971). Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
- Rojkín, M. L. y Mariani, M.C.O. de - Bioquím. Clín. VII/4:405 reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
(1973).
- Lorenzo, L.E. ; Drappo, G.A. - 1o Congreso Argentino de Este producto cumple con los requerimientos previstos
- Drappo, G.; Lorenzo, L.; - Revista ABA No 239 pág. 230, C por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios
1979.
- Burtis C., Ashwood, E. - Tietz Texbook of Clinical Chemistry,
WB Saunders Co., 3º ed, 1999. Contenido suficiente para <n> ensayos

X
 No congelar
F Riesgo biológico
Cont. Contenido
g Número de lote
Elaborado por:
M
Xn
Nocivo
Xi
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
Disp. Nº: 252/75-7434-98 2000 Rosario - Argentina
870240022 / 01 p. 3/9 UR140819
Calibrador A
C
Lote kit: 1401132390 (Exp.: 2015/12)
plus
Calibrador de química clínica en analizadores automáticos
Lote Calibrador A plus: 132390 (Exp.: 2015/12)
Lote Reactivo A: 132390 (Exp.: 2016/07)
APLICACIONES Calibrador reconstituido: estable 8 horas a temperatura

El Calibrador está diseñado para ser usado con reactivos ambiente (menor a 25oC), 2 días refrigerado (2-10oC) o 30
Wiener lab. en analizadores automáticos de química clínica. días congelado (-20oC).
Consultar la tabla de valores asignados para los constituyen- En la oscuridad, la bilirrubina es estable 4 horas a tempera-
tes, debido a que los mismos son lote específico. tura ambiente (menor a 25oC), 8 horas refrigerada (2-10oC)
o 2 semanas congelada (-20oC).
FUNDAMENTOS DEL METODO Evitar los congelamientos y descongelamientos reiterados.
Calibrador A plus contiene los componentes habitualmente
determinados en los laboratorios de análisis clínicos. INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
Debe tenerse en cuenta que los valores asignados para los REACTIVOS
distintos componentes del Calibrador han sido obtenidos Cualquier variación en los caracteres organolépticos del
por métodos y reactivos de Wiener lab., razón por la cual Calibrador, puede ser indicio de deterioro del mismo.
los resultados obtenidos sólo serán comparables a los lis-
tados en la medida que se empleen los métodos y reactivos
correspondientes. PROCEDIMIENTO
El Calibrador reconstituido se debe usar de la misma
REACTIVOS PROVISTOS manera que una muestra desconocida, teniendo en
Calibrador: suero liofilizado conteniendo metabolitos en cuenta los parámetros para los analizadores automáticos
concentraciones apropiadas para asegurar una óptima que acompañan al equipo de reactivos que se empleen
calibración de los analizadores automáticos. en cada caso.
A. Reactivo A: solución de carbonato de sodio 25 mmol/l,
pH 10.
INSTRUCCIONES PARA SU USO Los valores del Calibrador fueron establecidos utilizando
- Abrir el vial, retirando lentamente el tapón de goma para Material de Referencia del National Bureau of Standards,
evitar pérdidas del material liofilizado. siempre que fue posible.
- Agregar 3,0 ml de Reactivo A exactamente medido (con
bureta o pipeta de doble aforo). LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
- Tapar y mezclar por inversión suave, evitando la formación Fallas en la reconstitución o en la conservación, pueden ser
de espuma. No agitar. causa de resultados erróneos.
- Dejar disolver unos 30 minutos a temperatura ambiente, Ver "Limitaciones del Procedimiento" en el manual de ins-
mezclando por inversión de tanto en tanto. trucciones correspondiente al equipo en uso.
- Inmediatamente antes de usar, mezclar por inversión.
PRESENTACION
PRECAUCIONES - 2 x 3 ml (Cód. 1918005).
El Calibrador ha sido preparado a partir de material no reac-
tivo para HIV, HCV y HBsAg. Sin embargo debe manipularse
como si se tratara de material infectivo.
ALMACENAMIENTO
Los Reactivos Provistos son estables en refrigerador (2-
870260022 / 11 p. 1/12
VALORES DE METABOLITOS ASIGNADOS PARA CALIBRADOR A PLUS (37oC)
Analito Método Valor Unidad
Uricostat enzimático AA 4,87 mg/dL
Acido úrico
Uricostat enzimático AA líquida 4,87 mg/dL
Albúmina Albúmina AA 3,51 g/dL
Bilirrubina 2,65 mg/dL
Bilirrubina directa Bilirrubina Directa AA 2,46 mg/dL
Bilirrubina Directa AA líquida 2,24 mg/dL
Bilirrubina Total Bilirrubina Total AA 3,97 mg/dL
Bilirrubina Total AA líquida 3,98 mg/dL
Ca-Color AA 10,4 mg/dL
Calcio
Ca-Color Arsenazo III AA 10,4 mg/dL
Colestat enzimático AA 174 mg/dL
Colesterol
Colestat enzimático AA líquida 174 mg/dL
Creatinina cinética AA líquida - Técnica convencional 3,73 mg/dL
Creatinina Creatinina cinética AA líquida - Técnica compensada 4,08 mg/dL
Creatinina enzimática AA líquida 3,84 mg/dL
Fósforo Fosfatemia UV AA 5,90 mg/dL
Glicemia enzimática AA 189 mg/dL
Glucosa
Glicemia enzimática AA líquida 189 mg/dL
HDL Colesterol Reactivo Precipitante 191 mg/dL
HDL Colesterol
HDL Colesterol FT 609 mg/dL
Fer-color AA 202 ug/dL
Hierro
Fer-color AA líquida 193 ug/dL
Lactato Lactate 30,3 mg/dL
LDL Colesterol LDL Colesterol Reactivo Precipitante 261 mg/dL
Mg-Color AA 2,76 mg/dL
Magnesio
Magnesium CPZ 2,70 mg/dL
Proteínas Totales AA 5,39 g/dL
Proteínas totales
Total Protein 4,97 g/dL
TG Color GPO/PAP AA 120 mg/dL
Triglicéridos
TG Color GPO/PAP AA líquida 120 mg/dL
UIBC UIBC/TIBC AA líquida 161 ug/dL
Urea UV cinética AA 103 mg/dL
Urea
Urea UV cinética AA líquida 103 mg/dL
870260022 / 11 p. 2/12
VALORES DE ENZIMAS ASIGNADOS PARA CALIBRADOR A PLUS (37oC)
Alanina aminotransferasa GPT (ALT) UV AA 96,8 U/L
(GPT/ALT)
GPT (ALT) UV AA líquida 96,8 U/L
Amilasa 405 cinética AA 250 U/L
Amilasa
Amilasa 405 cinética AA líquida 250 U/L
Aspartato aminotransferasa GOT (AST) UV AA 105 U/L
(GOT/AST)
GOT (AST) UV AA líquida 105 U/L
Colinesterasa AA 4966 U/L
Colinesterasa
Cholinesterase 4917 U/L
CK-NAC UV AA 325 U/L
Creatina kinasa
CK-NAC UV AA líquida 325 U/L
Creatina kinasa - MB CK-MB NAC UV AA líquida 305 U/L
Fosfatasa Acida Total y Prostática cinética - FANP 9,78 U/L
Fosfatasa ácida
Fosfatasa Acida Total y Prostática cinética - FAT 27,0 U/L
Fosfatasa alcalina ALP 405 AA líquida 425 U/L
g-G test cinética AA 112 U/L
g-Glutamil transferasa
g-G test cinética AA líquida 112 U/L
LDH-P UV AA 522 U/L
Lactato deshidrogenasa LDH-P UV AA líquida 522 U/L
LDH-L 263 U/L
Lipasa Lipasa AA líquida 109 U/L
870260022 / 11 p. 3/12
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Bioquímica Wiener lab.
870260022 / 11 p. 4/12 UR140127
Calibrador A
plus
C
Lote kit: 1402134250 (Exp.: 2015/12) Calibrador de química clínica en analizadores automáticos

pH 10.
PRESENTACION
ALMACENAMIENTO
870260022 / 12 p. 1/12
Acido úrico
Calcio
Colesterol
Glucosa
HDL Colesterol
Hierro
Magnesio
Proteínas totales
Triglicéridos
Urea
870260022 / 12 p. 2/12
(GPT/ALT)
Amilasa
(GOT/AST)
Colinesterasa
Creatina kinasa
Fosfatasa ácida
LDH-P UV AA 522 U/L
LDH-L 263 U/L
870260022 / 12 p. 3/12
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870260022 / 12 p. 4/12 UR140305
Calibrador A
plus
C

pH 10.
PRESENTACION
ALMACENAMIENTO
870260022 / 13 p. 1/12
Acido úrico
Calcio
Colesterol
Glucosa
HDL Colesterol
Hierro
Magnesio
Proteínas totales
Triglicéridos
Urea
870260022 / 13 p. 2/12
(GPT/ALT)
Amilasa
(GOT/AST)
Colinesterasa
Creatina kinasa
Fosfatasa ácida
LDH-P UV AA 522 U/L
LDH-L 263 U/L
870260022 / 13 p. 3/12
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870260022 / 13 p. 4/12 UR140505
Calibrador A
plus
C

pH 10.
PRESENTACION
ALMACENAMIENTO
870260022 / 14 p. 1/12
Acido úrico
Calcio
Colesterol
Glucosa
HDL Colesterol
Hierro
Magnesio
Proteínas totales
Triglicéridos
Urea
870260022 / 14 p. 2/12
(GPT/ALT)
Amilasa
(GOT/AST)
Colinesterasa
Creatina kinasa
Fosfatasa ácida
LDH-P UV AA 522 U/L
LDH-L 263 U/L
870260022 / 14 p. 3/12
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870260022 / 14 p. 4/12 UR140606
Calibrador A
plus
C

pH 10.
PRESENTACION
ALMACENAMIENTO
870260022 / 15 p. 1/12
Acido úrico
Calcio
Colesterol
Glucosa
HDL Colesterol
Hierro
Magnesio
Proteínas totales
Triglicéridos
Urea
870260022 / 15 p. 2/12
(GPT/ALT)
Amilasa
(GOT/AST)
Colinesterasa
Creatina kinasa
Fosfatasa ácida
LDH-P UV AA 522 U/L
LDH-L 263 U/L
870260022 / 15 p. 3/12
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870260022 / 15 p. 4/12 UR140627
Calibrador A
plus
C

pH 10.
PRESENTACION
ALMACENAMIENTO
870260022 / 16 p. 1/12
Acido úrico
Calcio
Colesterol
Glucosa
HDL Colesterol
Hierro
Magnesio
Proteínas totales
Triglicéridos
Urea
870260022 / 16 p. 2/12
(GPT/ALT)
Amilasa
(GOT/AST)
Colinesterasa
Creatina kinasa
Fosfatasa ácida
LDH-P UV AA 490 U/L
LDH-L 244 U/L
870260022 / 16 p. 3/12
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870260022 / 16 p. 4/12 UR140806
Calibrador A
plus
C

pH 10.
PRESENTACION
ALMACENAMIENTO
870260022 / 17 p. 1/12
Acido úrico
Calcio
Colesterol
Glucosa
HDL Colesterol
Hierro
Magnesio
Proteínas totales
Triglicéridos
Urea
870260022 / 17 p. 2/12
(GPT/ALT)
Amilasa
(GOT/AST)
Colinesterasa
Creatina kinasa
Fosfatasa ácida
LDH-P UV AA 490 U/L
LDH-L 244 U/L
870260022 / 17 p. 3/12
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870260022 / 17 p. 4/12 UR141002
Calibrador A
plus
C

pH 10.
PRESENTACION
ALMACENAMIENTO
870260022 / 18 p. 1/12
Acido úrico
Calcio
Colesterol
Glucosa
HDL Colesterol
Hierro
Magnesio
Proteínas totales
Triglicéridos
Urea
870260022 / 18 p. 2/12
Alanina aminotransferasa GPT (ALT) UV AA 108 U/L
(GPT/ALT)
GPT (ALT) UV AA líquida 106 U/L
Amilasa
(GOT/AST)
Colinesterasa
Creatina kinasa
Fosfatasa ácida
LDH-P UV AA 520 U/L
LDH-L 259 U/L
870260022 / 18 p. 3/12
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870260022 / 18 p. 4/12 UR150219
Calibrador A
plus
C

pH 10.
PRESENTACION
ALMACENAMIENTO
870260022 / 19 p. 1/12
Acido úrico
Calcio
Colesterol
Glucosa
HDL Colesterol
Hierro
Magnesio
Proteínas totales
Triglicéridos
Urea
870260022 / 19 p. 2/12
(GPT/ALT)
Amilasa
(GOT/AST)
Colinesterasa
Creatina kinasa
Fosfatasa ácida
LDH-P UV AA 520 U/L
LDH-L 259 U/L
870260022 / 19 p. 3/12
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870260022 / 19 p. 4/12 UR150313
Calibrador A
plus
Lote kit: 1504162600
C Calibrador de química clínica en analizadores automáticos
Lote Calibrador A plus: 162600
Lote Reactivo A: 162600

pH 10.
PRESENTACION
ALMACENAMIENTO
870260022 / 20 p. 1/12
Acido úrico
Calcio
Colesterol
Glucosa
HDL Colesterol
Hierro
Magnesio
Proteínas totales
Triglicéridos
Urea
870260022 / 20 p. 2/12
(GPT/ALT)
Amilasa
(GOT/AST)
Colinesterasa
Creatina kinasa
Fosfatasa ácida
LDH-P UV AA 520 U/L
LDH-L 259 U/L
870260022 / 20 p. 3/12
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870260022 / 20 p. 4/12 UR150414
Calibrador A
plus
Lote kit: 1504162610

pH 10.
PRESENTACION
ALMACENAMIENTO
870260022 / 22 p. 1/12
Acido úrico
Calcio
Colesterol
Glucosa
HDL Colesterol
Hierro
Magnesio
Proteínas totales
Triglicéridos
Urea
870260022 / 22 p. 2/12
(GPT/ALT)
Amilasa
(GOT/AST)
Colinesterasa
Creatina kinasa
Fosfatasa ácida
LDH-P UV AA 520 U/L
LDH-L 259 U/L
870260022 / 22 p. 3/12
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870260022 / 22 p. 4/12 UR150430
Calibrador A
plus
Lote kit: 1508169560

pH 10.
PRESENTACION
ALMACENAMIENTO
870260022 / 23 p. 1/12
Acido úrico
Calcio
Colesterol
Glucosa
HDL Colesterol
Hierro
Magnesio
Proteínas totales
Triglicéridos
Urea
870260022 / 23 p. 2/12
(GPT/ALT)
Amilasa
(GOT/AST)
Colinesterasa
Creatina kinasa
Fosfatasa ácida
LDH-P UV AA 523 U/L
LDH-L 257 U/L
870260022 / 23 p. 3/12
Símbolos
C
M Elaborado por:

Europea Nocivo

Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870260022 / 23 p. 4/12 UR150811
LINEA TURBITEST AA
Calibrador Proteínas
C nivel alto
Lote: 1407145380 Para la calibración de métodos inmunoturbidimétricos
Exp.: 2016/06/11
APLICACIONES reactivo para HBsAg y HIV. Sin embargo debe manejarse

El Calibrador Proteínas nivel alto está diseñado para ser como si se tratara de una muestra infectiva.
usado con los reactivos turbidimétricos de Wiener lab. Con- Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
sultar la tabla de valores asignados para los constituyentes, de trabajo en el laboratorio de química clínica.
debido a que los mismos son lote específicos. Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
REACTIVOS PROVISTOS
Calibrador Proteínas nivel alto: suero inactivado con ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
conservadores apropiados. ALMACENAMIENTO
Calibrador Proteínas nivel alto: estable en refrigerador (2-
INSTRUCCIONES PARA SU USO 10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en el envase.
Reactivo Provisto: listo para usar. No congelar.
PRECAUCIONES No congelar.
Evitar ingestión y contacto con la piel. PRESENTACION
Este calibrador ha sido preparado a partir de material no - 1 x 1 ml (Cód. 1913261).
VALORES ASIGNADOS
VALOR
PROTEINA METODO
(mg/dl) (g/l)
α1-Antitripsina α1-Antitrypsin Turbitest AA 324 3,24
α1-Glicoproteína AGP Turbitest AA 208 2,08
α2-Macroglobulina α2-Macroglobulin Turbitest AA 671 6,71
Cadena liviana kappa κ-Light Chain Turbitest AA 747 7,47
Cadena liviana lambda λ-Light Chain Turbitest AA 380 3,80

Componente C3 C3 Turbitest AA 406 4,06
Componente C4 C4 Turbitest AA 70,7 0,71
Haptoglobina Haptoglobin Turbitest AA 350 3,50
Inhibidor de C1-esterasa C1-Esterase Inhibitor Turbitest AA 64,6 0,65
Inmunoglobulina A IgA Turbitest AA 510 5,10
Inmunoglobulina G IgG Turbitest AA 2700 27,0
Inmunoglobulina M IgM Turbitest AA 220 2,20
Prealbúmina Prealbumin Turbitest AA 75,0 0,75
Transferrina TRF Turbitest AA 760 7,60
Los valores están basados en la preparación de referencia RPPHS/CRM470, de la International Federation of Clinical Che-
mistry (IFCC).
870270000 / 20 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870270000 / 20 p. 2/4 UR140815
LINEA TURBITEST AA
C nivel alto
Exp.: 2016/08/22

REACTIVOS PROVISTOS
VALORES ASIGNADOS
VALOR
PROTEINA METODO
(mg/dl) (g/l)

Inhibidor de C1-esterasa C1-Esterase Inhibitor Turbitest AA 62 0,62
Prealbúmina Prealbumin Turbitest AA 71 0,71
mistry (IFCC).
870270000 / 21 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870270000 / 21 p. 2/4 UR150204
LINEA TURBITEST AA
C nivel alto

REACTIVOS PROVISTOS
VALORES ASIGNADOS
VALOR
PROTEINA METODO
(mg/dl) (g/l)

mistry (IFCC).
870270000 / 22 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870270000 / 22 p. 2/4 UR150603
LINEA TURBITEST AA
C nivel alto

REACTIVOS PROVISTOS
VALORES ASIGNADOS
VALOR
PROTEINA METODO
(mg/dl) (g/l)

mistry (IFCC).
870270000 / 23 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870270000 / 23 p. 2/4 UR150702
LINEA TURBITEST AA
C nivel alto

REACTIVOS PROVISTOS
VALORES ASIGNADOS
VALOR
PROTEINA METODO
(mg/dl) (g/l)

mistry (IFCC).
870270000 / 24 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870270000 / 24 p. 2/4 UR151022
LINEA TURBITEST AA
C nivel alto

REACTIVOS PROVISTOS
VALORES ASIGNADOS
VALOR
PROTEINA METODO
(mg/dl) (g/l)

mistry (IFCC).
870270000 / 25 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870270000 / 25 p. 2/4 UR151211
LINEA TURBITEST AA
C nivel alto

REACTIVOS PROVISTOS
VALORES ASIGNADOS
VALOR
PROTEINA METODO
(mg/dl) (g/l)

mistry (IFCC).
870270000 / 27 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:

Europea Nocivo

Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870270000 / 27 p. 2/4 UR160118
LINEA TURBITEST AA
C nivel alto

REACTIVOS PROVISTOS
VALORES ASIGNADOS
VALOR
PROTEINA METODO
(mg/dl) (g/l)

mistry (IFCC).
870270000 / 28 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:

Europea Nocivo

Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870270000 / 28 p. 2/4 UR160322
LINEA TURBITEST AA
Ceruloplasmin
C Calibrator
Para la calibración de la determinación de ceruloplasmina
por métodos inmunoturbidimétricos
APLICACIONES SÍMBOLOS
Ceruloplasmin Calibrator Turbitest AA está diseñado Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
para ser usado en la calibración del reactivo Ceruloplasmin reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
Tubitest AA de Wiener lab. Consultar el valor asignado en
el rótulo, debido a que el mismo es lote específico. Este producto cumple con los requerimientos previstos

Calibrador: suero humano inactivado con conservadores
apropiados. P Representante autorizado en la Comunidad Europea
INSTRUCCIONES PARA SU USO V Uso diagnóstico "in vitro"
Antes de realizar el ensayo, invertir el vial varias veces
evitando la formación de espuma. Retirar la cantidad de cali-
brador a utilizar. No volver el material utilizado al vial original.
PRECAUCIONES l Límite de temperatura (conservar a)

Este calibrador ha sido preparado a partir de material no Riesgo biológico
reactivo para HBsAg, HCV y HIV. Sin embargo, el calibrador
F
y todas las muestras deben manejarse como si se tratara Volumen después de la reconstitución
de una muestra infectiva.
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales Cont. Contenido
Elaborado por:
M
Nocivo
ALMACENAMIENTO
de vencimiento indicada en el envase.
Una vez abierto es estable 4 semanas refrigerado (2-10oC).
Mantener el frasco bien cerrado después de su uso. El Irritante
calibrador es estable 3 meses a -20oC. Se recomienda que
el calibrador sea alicuotado y congelado inmediatamente i Consultar instrucciones de uso
después de comenzar a utilizarlo. Sólo puede descongelarse
Calibr. Calibrador
una vez. Evitar toda acción que conduzca a la contaminación
del calibrador.
b Control
PRESENTACION
- 1 x 1 ml (Cód. 1999748)
b Control Positivo
c Control Negativo
BIBLIOGRAFIA
- Dati, F et al. - Proteins-Laboratory testing and clinical h Número de catálogo
use, 2005. M Wiener Laboratorios S.A.I.C.
Wiener lab.
- Tietz Textbook of Clinical Chemistry - Burtis, C.; Ashwood, Riobamba 2944
E. (5º Edition) WB Saunders, 2001. http://www.wiener-lab.com.ar
- Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Bioquímica
Tests", AACC Press, 5th ed., 2000. PM-1102-81 2000 Rosario - Argentina
864106000 / 01 p. 1/2 UR120314
LINEA TURBITEST AA
Ceruloplasmin
de ceruloplasmina en suero

La ceruloplasmina es una α2-glicoproteína sintetizada en Suero
el hígado cuya principal función es transportar el cobre a) Recolección: obtener la muestra de la manera usual.
plasmático hacia las enzimas que lo requieren. Participa b) Aditivos: no se requieren.
además, en la regulación del potencial redox, transporte y c) Sustancias interferentes conocidas: no emplear mues-
utilización del hierro. tras hemolizadas, lipémicas o contaminadas.
Niveles disminuidos de ceruloplasmina se encuentran en la Las muestras que poseen precipitados deben ser centrifu-
enfermedad de Wilson y en enfermedades del tejido conectivo. gadas previo a su ensayo.
Las causas más importantes de insuficiencia adquirida de No se observan interferencias por hemoglobina hasta
ceruloplasmina son insuficiencia hepática y los síndromes 1000 mg/dl, triglicéridos hasta 2500 mg/dl, bilirrubina
de pérdida de proteínas tales como enteropatías, síndrome hasta 20 mg/dl, heparina hasta 50 mg/dl ni citrato de
nefrótico y síndrome de malabsorción. sodio hasta 1000 mg/dl.
Los niveles séricos aumentan durante procesos inflamatorios Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
crónicos y agudos, colestasis, leucemia, lupus eritematoso drogas en el presente método.
sistémico (LES) y artritis reumatoidea. d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
muestra debe ser preferentemente fresca. Si el ensayo no
FUNDAMENTOS DEL METODO es realizado en el día, la muestra puede ser conservada 48
La ceruloplasmina reacciona con el anticuerpo específico horas a 2-10oC o por períodos más prolongados de tiempo
formando inmunocomplejos insolubles. La turbidez causada a -20oC.
por estos inmunocomplejos es proporcional a la concentra-
ción de ceruloplasmina en la muestra y puede ser medida MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
espectrofotométricamente. - Espectrofotómetro
- Cubetas espectrofotométricas de caras paralelas
REACTIVOS PROVISTOS - Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados
A. Reactivo A: buffer fosfato, pH 7,4. - Tubos de Kahn o hemólisis
B. Reactivo B: anticuerpos policlonales anti-ceruloplasmina - Cronómetro
humana (cabra) en buffer fosfato, pH 7,4.
REACTIVOS NO PROVISTOS - Longitud de onda: 340 nm
- Ceruloplasmin Calibrator Turbitest AA de Wiener lab.
entre 22 y 30oC.
- Volumen final de reacción: 1810 ul
PRECAUCIONES
Los volúmenes de muestra y reactivos pueden variarse
de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos. PROCEDIMIENTO
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de CURVA DE CALIBRACION
acuerdo a la normativa local vigente. Realizar en tubos de Kahn, las siguientes diluciones en
solución fisiológica de Ceruloplasmin Calibrator Tur-
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE bitest AA: 1:1, 1:2, 1:4, 1:8 y 1:16, empleando solución
ALMACENAMIENTO fisiológica como punto cero.
Reactivos Provistos: estables en refrigerador (2-10oC) has- Calibrador diluido 10 ul
864105100 / 02 p. 1/6
PERFORMANCE
Reactivo A 1500 ul a) Reproducibilidad: realizando replicados de muestras con
Homogeneizar y leer la absorbancia de cada dilución distintos niveles de ceruloplasmina, se calculó la precisión
a 340 nm (DO1) llevando a cero con agua destilada. intraensayo:
Luego agregar:
Nivel D.S. C.V.
Reactivo B 300 ul 11,2 mg/dl ± 0,4 mg/dl 3,9%
35,6 mg/dl ± 0,6 mg/dl 1,6%
75,8 mg/dl ± 2,3 mg/dl 3,0%
agua destilada. b) Límite de detección: 5 mg/dl.
Calcular la diferencia de absorbancia (∆A = DO2 - DO1) c) Rango de medición: 5 - 110 mg/dl.
para cada dilución de Ceruloplasmin Calibrator Turbitest d) Efecto prozona: no se evidencia efecto prozona hasta
AA, incluyendo el punto cero. 150 mg/dl de ceruloplasmina.
Representar en papel milimetrado las diferencias de ab-
sorbancia (∆A) en función de la concentración en mg/dl PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS
de Ceruloplasmin Calibrator Turbitest AA. Referirse a las adaptaciones específicas de cada analizador.
PRESENTACION
Muestra 10 ul 60 ml: - 1 x 50 ml Reactivo A
Reactivo A 1500 ul - 1 x 10 ml Reactivo B
(Cód. 1009357)
a 340 nm (DO1) llevando a cero con agua destilada. 60 ml: - 1 x 50 ml Reactivo A
Luego agregar: - 1 x 10 ml Reactivo B
(Cód. 1009645)
Reactivo B 300 ul
Mezclar e incubar 15 minutos a temperatura ambiente. BIBLIOGRAFIA
Leer la absorbancia a 340 nm (DO2), llevando a cero con - Dati, F et al. - Proteins-Laboratory testing and clinical use,
agua destilada. 2005.
CALCULO DE LOS RESULTADOS - Tietz Textbook of Clinical Chemistry - Burtis, C.; Ashwood,
Calcular la diferencia de absorbancia (∆A = DO2 - DO 1) E. (5º Edition) WB Saunders, 2001.
correspondiente a cada muestra analizada. Interpolar
esta ∆A en la curva de calibración para determinar la
concentración en mg/dl (g/l) correspondiente a la muestra
estudiada.
Las muestras con absorbancias superiores a la de Cerulo-
plasmin Calibrator Turbitest AA deben ser diluidas con
solución fisiológica y procesadas nuevamente. Multiplicar
el resultado obtenido por el factor de dilución.

Se recomienda el uso del Control Inmunológico nivel 1 o
muestras.
20 - 60 mg/dl (0,20 - 0,60 g/l)

864105100 / 02 p. 2/6
Símbolos
C
M Elaborado por:

Europea Nocivo

Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
864105100 / 02 p. 3/6 UR120507
Chagatest
C ELISA
Ensayo inmunoenzimático (ELISA) para la detección de
anticuerpos contra el Trypanosoma cruzi
SIGNIFICACION CLINICA 37oC unos minutos, mezclando luego por inversión.

La enfermedad de Chagas es una infección parasitaria produ- Policubeta sensibilizada: lista para usar.
cida por el Trypanosoma cruzi. El diagnóstico de laboratorio Conjugado: listo para usar.
depende del estadio en el cual se encuentre la enfermedad. Revelador A: listo para usar.
Durante la fase aguda, el diagnóstico se efectúa directamen- Revelador B: listo para usar.
te mediante la comprobación de los parásitos en sangre o por Stopper: listo para usar.
métodos inmunológicos que detecten IgM. Durante la fase Diluyente de Muestras: listo para usar. El color del Diluyen-
crónica, se pueden usar métodos inmunológicos como la re- te de Muestras puede variar de lote a lote sin que se afecte la
acción de fijación de complemento de Machado y Guerreiro o capacidad reaccional del mismo.
aglutinación de látex, floculación, hemaglutinación, aglutina- Control Positivo y Control Negativo: listos para usar.
ción directa, inmunofluorescencia y últimamente ELISA.
PRECAUCIONES
FUNDAMENTOS DEL METODO - Todas las muestras de pacientes deben manipularse como
La muestra se diluye en el soporte en el que se encuentra si fueran capaces de transmitir infección. Los controles se
inmovilizado el antígeno. Si la misma contiene los anticuer- encuentran inactivados. Sin embargo, deben emplearse
pos específicos, éstos formarán un complejo con los antíge- como si se tratara de material infectivo.
nos y permanecerán unidos al soporte. La fracción no unida - Los sueros controles han sido examinados para antígeno de
se elimina por lavado tras lo que se agregan anticuerpos anti- superficie de hepatitis B (HBsAg) y virus de inmunodeficien-
inmunoglobulina humana conjugados con peroxidasa. Si se cia humana (HIV) encontrándose no reactivos.
produjo la reacción en la primera etapa del proceso, se unirá - Todos los materiales empleados en el ensayo deben ser
el conjugado. Luego de un nuevo lavado se agrega el sustrato destruidos a fin de asegurar la inactivación de agentes pató-
enzimático. En los casos en que se haya unido el conjugado genos. El método recomendado para este procedimiento
habrá aparición de color celeste. La reacción se detiene con es autoclavar durante 1 hora a 121oC. Los líquidos de dese-
ácido sulfúrico, con lo que el color celeste vira al amarillo. cho pueden ser desinfectados con hipoclorito de sodio (con-
centración final 5%) durante por lo menos 60 minutos.
REACTIVOS PROVISTOS - No intercambiar reactivos de distintos equipos y lotes.
Policubeta sensibilizada: policubeta de tiras removibles con - No emplear reactivos de otro origen.
pocillos que contienen antígenos citoplasmáticos y de mem- - Las policubetas deben incubarse en estufa. No usar baño
brana de Tripanosoma cruzi inmovilizados. de agua. Debe evitarse abrir la estufa durante este proceso.
Conjugado: anti-inmunoglobulinas humanas (cabra) conju- - Evitar que los vapores de hipoclorito provenientes de los
gadas con peroxidasa. recipientes para desechos biológicos entren en contacto
Revelador A: peróxido de hidrógeno 60 mmol/l en buffer ci- con la policubeta, ya que el hipoclorito afecta la reacción.
trato 50 mmol/l pH 3,2. - Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
Revelador B: tetrametilbencidina (TMB) 0,01 mol/l en ácido - Evitar el contacto del ácido sulfúrico con la piel y mucosas.
clorhídrico 0,1 N. - Evitar el derrame de líquidos y formación de aerosoles.
Stopper: ácido sulfúrico 2 N.
Buffer de Lavado concentrado: cloruro de sodio 1,4 mol/l ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
en buffer fosfatos 100 mmol/l y tensioactivo no iónico 0,1 g/l. ALMACENAMIENTO
Diluyente de Muestras: albúmina bovina en solución fisioló- Reactivos Provistos: estables en refrigerador (2-10oC) hasta
gica tamponada con buffer fosfatos pH 7,2. la fecha de vencimiento indicada en la caja. No congelar.
Control Positivo: dilución de suero inactivado conteniendo Buffer de Lavado: estable 3 meses a temperatura ambiente.
anticuerpos contra el Tripanosoma cruzi. Policubeta sensibilizada: las tiras de pocillos con antígeno
Control Negativo: dilución de suero no reactivo, inactivado. inmovilizado se proveen cerradas al vacío y con desecante.
No abrir el envoltorio hasta el momento de usar, ni antes que
INSTRUCCIONES PARA SU USO haya tomado temperatura ambiente, de lo contrario se favore-
Buffer de Lavado: para usar diluir 1+4 con agua destilada (1 cerá la humectación del contenido. Las tiras de pocillos no
parte de Buffer de Lavado concentrado + 4 partes de agua utilizadas deben conservarse dentro del sobre con el dese-
destilada). A baja temperatura los componentes del reactivo cante, cerrado y a 2-10oC. Las tiras conservadas en estas
pueden precipitar. En tal caso, colocar en baño de agua a condiciones pueden ser utilizadas dentro de los 5 meses
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posteriores mientras no se supere la fecha de vencimiento
Control Negativo - - 10 ul
del equipo.
Muestra 10 ul - -
MUESTRA Mezclar aplicando suaves golpes en los laterales de la
Suero o plasma policubeta durante 10 segundos una vez cargadas las
a) Recolección: obtener la muestra de la manera usual. No muestras en cada tira. Para evitar la evaporación, cubrir la
deben usarse muestras inactivadas por calor. Ver LIMITACIO- placa e incubar en estufa 30 minutos a 37oC. Luego aspirar
NES DEL PROCEDIMIENTO. cuidadosamente el líquido de cada pocillo recibiéndolo en
b) Aditivos: no se requieren para suero. Si se emplea plasma un recipiente para desechos biológicos que contenga 5%
puede utilizarse cualquier anticoagulante de uso corriente en de hipoclorito sódico. A continuación, lavar 5 veces con Bu-
la práctica transfusional. ffer de Lavado empleando aproximadamente 300 ul/vez/po-
c) Sustancias interferentes conocidas: la hemólisis, hiper- cillo. Después de cada lavado, el líquido se descartará tam-
lipemia y otras causas de turbiedad pueden provocar resul- bién en el recipiente con hipoclorito. Opcionalmente, em-
tados erróneos. Estas muestras deben ser clarificadas por plear lavador automático. Al finalizar el último lavado, eli-
centrifugación. minar por completo el líquido residual, invirtiendo la policu-
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: las beta y golpeándola varias veces sobre papel absorbente,
muestras no diluidas pueden conservarse durante 7 días a 2- ejerciendo una leve presión con la mano sobre los latera-
10oC. Para conservación por períodos más prolongados, de- les mayores del soporte, para evitar la caída de las tiras
ben ser congeladas a -20oC o menos. Evitar los congelamien- de pocillos. Luego agregar en cada pocillo:
tos y descongelamientos reiterados. Existen evidencias que
muestran que los congelamientos sucesivos pueden ser cau- Conjugado 1 gota 1 gota 1 gota
sas de resultados erróneos.
Si las muestras deben ser transportadas, embalar de acuer- En caso de utilizar micropipeta automática, dispensar 60 ul.
do a las especificaciones legales relativas al envío de mate- Mezclar aplicando suaves golpes en los laterales de la
riales infecciosos. policubeta durante 10 segundos. Para evitar la evapora-
ción, cubrir la placa e incubar durante 30 minutos en estu-
MATERIAL REQUERIDO (no provisto) fa a 37oC. Luego aspirar el líquido de los pocillos, recibién-
- Micropipetas capaces de medir los volúmenes indicados. dolo en el recipiente con hipoclorito y lavar según se indi-
- Reloj alarma o cronómetro. có más arriba. Al finalizar el último lavado, eliminar por
- Estufa a 37oC completo el líquido residual, invirtiendo la policubeta y gol-
- Espectrofotómetro para lectura de policubetas (opcional). peándola varias veces sobre papel absorbente, ejerciendo
una leve presión con la mano sobre los laterales mayores
CONDICIONES DE REACCION del soporte, para evitar la caída de las tiras de pocillos.
- Longitud de onda primaria: 450 nm Luego agregar en cada pocillo:
- Longitud de onda secundaria (bicromática): 620-650 nm Revelador A 1 gota 1 gota 1 gota
- Calibración del instrumental: llevar a cero el espectrofotóme-
tro con Blanco de Reactivos procesándolo de la misma forma Revelador B 1 gota 1 gota 1 gota
que una determinación pero omitiendo colocar Muestra. En caso de utilizar micropipeta automática, dispensar 50 ul.
- Tiempo de reacción: 90 minutos Mezclar aplicando suaves golpes en los laterales de la
- Temperatura de reacción: 37oC y temperatura ambiente policubeta durante 10 segundos. Incubar 30 minutos a tem-
- Volumen de muestra: 10 ul peratura ambiente y luego agregar:
Stopper 1 gota 1 gota 1 gota
PROCEDIMIENTO
En caso de utilizar micropipeta automática, dispensar 50 ul.
Llevar a temperatura ambiente los reactivos y las mues-
Mezclar aplicando suaves golpes en los laterales de la
tras antes de iniciar la prueba. Una vez iniciado el procedi-
policubeta durante 10 segundos.
miento debe completarse sin interrupción.
Procesar simultáneamente 2 Controles Positivos (CP) 3 Leer en espectrofotómetro a 450 nm o bicromática a 450/
Negativos (CN) y los Desconocidos (D). Al depositar la 620-650 nm o evaluar el resultado a simple vista por com-
muestra y/o Controles sobre el Diluyente de Muestras, paración con los Controles Positivos y Negativos.
debe asegurarse de colocar los mismos en el seno del
líquido y no sobre las paredes o el fondo del pocillo. Enjua-
gar la pipeta con el Diluyente dispensado en el pocillo para ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL
asegurar la correcta homogeneización. El color de la reacción es estable durante 30 minutos, por lo
En los pocillos a utilizar de la policubeta colocar: que los resultados deben observarse durante ese lapso.
D CP CN CRITERIOS DE VALIDACION DE LA CORRIDA

Diluyente de Muestras 200 ul 200 ul 200 ul La corrida se considera válida si se cumplen simultáneamen-
te las siguientes condiciones:
Control Positivo - 10 ul - a) Las lecturas de al menos 2 de los 3 Controles Negativos
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corregidas contra el Blanco de Reactivos deben ser meno- PERFORMANCE
res o iguales a 0,150 D.O. a) Sensibilidad: sobre un panel de 94 muestras con serolo-
b) La lectura media de los Controles Positivos corregida debe gía positiva coincidente por dos métodos de referencia (he-
ser mayor o igual a 0,600 D.O. maglutinación indirecta e inmunofluorescencia indirecta), la
Si una o ambas condiciones no se cumple, repetir la corrida. sensibilidad es del 100%.
Para ambos casos recordar que las lecturas obtenidas de- b) Especificidad: sobre un panel de 348 muestras con sero-
penderán de la sensibilidad del aparato empleado. logía negativa coincidente por dos métodos de referencia (he-
maglutinación indirecta e inmunofluorescencia indirecta), la
INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS especificidad es de 99,6%.
a) Con instrumental óptico: c) Estudio poblacional: en una población general que inclu-
La presencia o ausencia de anticuerpos anti-T. cruzi se deter- ye individuos sanos, donantes, chagásicos y con otras pato-
mina relacionando la absorbancia de la muestra respecto al logías, la correlación con respecto a métodos confirmatorios,
valor Cut-off. fue del 99,7%.
Cut-off = CN + 0,200 D.O. No obstante la sensibilidad del método, sus resultados, al
donde CN: promedio de las lecturas del Control Negativo igual que los de cualquier método serológico, sólo constitu-
Zona de indeterminación: Cut-off ± 10% yen un dato auxiliar para el diagnóstico. Es por esta razón
Muestras No Reactivas: se consideran aquellas con absor- que los informes deben ser considerados en términos de pro-
bancias menores que el límite inferior de la zona de indeter- babilidad. En este caso, mayor o menor probabilidad de para-
minación. sitosis por T. cruzi.
Muestras Reactivas: se consideran aquellas con absorbancias Cualquier resultado Reactivo debe ser verificado por otra téc-
mayores que el límite superior de la zona de indeterminación. nica. Recordar el criterio recomendado por el Instituto Fatala
Muestras Indeterminadas: se consideran aquellas con ab- Chaben, según el cual el inmunodiagnóstico de la infección
sorbancias que caen dentro de la zona de indeterminación. deberá hacerse con un mínimo de 2 de los siguientes méto-
Estas muestras deben ser ensayadas nuevamente. dos: inmunofluorescencia indirecta, hemaglutinación indirec-
ta, ELISA, aglutinación de partículas (látex), debidamente va-
b) Interpretación visual: lidados por el Centro Nacional de Referencia.
Si se opta por este tipo de interpretación debe considerarse
No Reactiva toda muestra que no presente una coloración PRESENTACION
mayor que la de los Controles Negativos. Por el contrario, Equipo para 96 determinaciones (Cód. 1293251).
una muestra netamente amarilla se considera Reactiva. Co- Equipo para 192 determinaciones (Cód. 1293252).
lores tenues mayores que el del Control Negativo, requieren
la interpretación instrumental. BIBLIOGRAFIA
- Engvall, E. and Perlmann, P. - Immunochem. 8:871-74 (1971).
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO - Berning, H. - Dtsch. Med. Wscho 108/3:106 (1984.)
Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA. - Rojkín, L.F.; Knecher, L.M.; Capriotti, G.A.; Lorenzo, L.E. -
- Constituyen causas de resultados erróneos: Proceedings of the 5th. National Forum on AIDS, Hepatitis
Lavado incorrecto de los pocillos de reacción. and Other blood-borne diseases, pág. 89 - Atlanta, Georgia.
Contaminación cruzada de muestras No Reactivas con an- 29 marzo-1 abril, 1992.
ticuerpos procedentes de una muestra Reactiva. - Lorenzo, L.; Capriotti, G.; Rojkín, F. - Rev. Arg. de Transfu-
Contaminación de la solución cromogénica con agentes oxi- sión XVII/1:51 (1991).
dantes (cloro, etc.). - Knecher, L.M.; Rojkín, L.F.; Capriotti, G.A.; Lorenzo, L.E.-
Contaminación del Stopper. Int. J. Parasitol. 24/2: 207-211 (1994).
Conservación inadecuada de tiras de pocillos no utilizadas. - Knecher, L.M.; Capriotti: G.A.; Rojkín, L.F.; Lorenzo, L.E. -
Utilizar baño de agua para la incubación. Rev. Asoc. Bioq. Arg. 58/3:125, 1994.
Contaminación del Buffer de Lavado diluido. Se recomienda - Schujman, L.; Suita, G.; Acebal, S.; Albrecht, A. - Acta Bioq.
verificar la limpieza de los recipientes donde se prepara y Clin. Latinoam. XXIX/4:517, 1995.
almacena. Si se observa aparición de turbidez o precipitado - Ministerio de Salud y Acción Social, Instituto Nacional de
al prepararlo, debe desecharse. Parasitología "Doctor Mario Fatala Chabén" - Normas para
- Un resultado negativo no excluye la posibilidad de exposi- el diagnóstico de la infección chagásica - Resolución minis-
ción o infección por T. cruzi. terial 523/97, 1998.
- Ocasionalmente, al efectuar lecturas bicromáticas, pueden
obtenerse absorbancias negativas que no invalidan la deter-
minación. Esto se debe a que algunas muestras dan lectu-
ras inferiores al Blanco de Reactivos.
- No utilizar muestras inactivadas por calor ya que pueden
ocasionar resultados falsos positivos.
- Verifique que el sistema lavador que está usando (WIENER
WASHER u otro) aspire totalmente el contenido y que el
volumen de la solución lavadora dispensada sea pareja.
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EXPLICACION DE LOS SIMBOLOS
Policubeta Sensib. Diluyente Muestra
Policubeta sensibilizada Diluyente de Muestra
Conjugado Buf. Lavado Conc.

Conjugado Buffer de Lavado Concentrado
Revelador A Revelador B
Control + Control -
Control Positivo Control Negativo
Stopper
Stopper
Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de reac-

tivos para diagnóstico de Wiener lab.
C
Este producto cumple con los requerimientos previs-
tos por la Directiva Europea 98/79 CE de productos
sanitarios para el diagnóstico "in vitro"

G No congelar
F Riesgo biológico
Cont. Contenido
g Número de lote
M Elaborado por:
Xn
Nocivo
Xi
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo
Riobamba 2944
Bioquímica
Producto Inscripto M.S.
Disp. Nº: R489/92 - 5972/96
Wiener lab.
870280000 / 00 Pág. 4 de 4 UR121212
Chagatest
C ELISA lisado
Ensayo inmunoenzimático (ELISA) para la detección
de anticuerpos anti-Trypanosoma cruzi
SIGNIFICACION CLINICA Control Negativo: suero humano no reactivo inactivado.

La enfermedad de Chagas es una infección parasitaria Color amarillo.
producida por el Trypanosoma cruzi. El diagnóstico de
laboratorio depende del estadio en el cual se encuentre la REACTIVOS NO PROVISTOS
enfermedad. Durante la fase aguda, se efectúa directamente Agua destilada o desionizada
mediante la comprobación de los parásitos en sangre o por
métodos inmunológicos que detecten IgM. Durante la fase MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
crónica, se pueden usar métodos inmunológicos como: - Micropipetas para medir los volúmenes indicados
hemaglutinación, inmunofluorescencia, ensayo inmunoen- - Tips descartables
zimático o Western blot. - Material volumétrico para preparar las diluciones indicadas
- Estufa a 37oC
FUNDAMENTOS DEL METODO - Papel absorbente
Chagatest ELISA lisado es un ensayo inmunoenzimático "in - Guantes descartables
vitro" para la detección cualitativa de anticuerpos anti-T. cruzi - Reloj alarma o cronómetro
en muestras de suero o plasma humano. - Hipoclorito de sodio
La muestra se diluye en la policubeta, cuyos pocillos se - Sistema de lavado de policubetas (manual o automático)
encuentran sensibilizados con antígenos de T. cruzi, corres- - Espectrofotómetro para lectura de policubetas
pondientes a zonas altamente conservadas entre distintas
cepas. Si la muestra contiene anticuerpos específicos, éstos PRECAUCIONES
formarán un complejo con los antígenos y permanecerán - Los reactivos son para uso diagnóstico “in vitro”.
unidos a la fase sólida. La fracción no unida se elimina por - Todas las muestras de pacientes deben manipularse como
lavado y luego se agrega el conjugado (anticuerpo mo- si fueran capaces de transmitir infección.
noclonal anti-IgG humana conjugado con peroxidasa), el - Los sueros controles han sido examinados para antígeno
cual reacciona específicamente con los anticuerpos anti-T. de superficie de hepatitis B (HBsAg) y anticuerpos contra
cruzi inmunocapturados. El conjugado no unido se elimina el virus de inmunodeficiencia humana (HIV) y hepatitis
por lavado. La presencia de peroxidasa unida al complejo C (HCV), encontrándose no reactivos. Sin embargo, se
se revela mediante el agregado del sustrato cromogénico, recomienda manipularlos con las precauciones requeridas
tetrametilbencidina. Las muestras reactivas desarrollan co- para muestras potencialmente infecciosas.
lor celeste. La reacción enzimática se detiene mediante el - Al descartar los materiales empleados en el ensayo se
agregado de ácido sulfúrico, produciendo un viraje del color deben tratar a fin de asegurar la inactivación de agentes pa-
celeste al amarillo. La densidad óptica se mide en forma tógenos. El método recomendado para este procedimiento
bicromática a 450/620-650 nm o a 450 nm. es autoclavar durante 1 hora a 121oC. Los líquidos de
desecho pueden ser desinfectados con hipoclorito de sodio
REACTIVOS PROVISTOS (concentración final 5%) durante por lo menos 60 minutos.
Policubeta sensibilizada: policubeta de tiras removibles, - No intercambiar reactivos de distintos lotes.
con 96 pocillos recubiertos con antígenos de T. cruzi. - No emplear reactivos de otro origen.
Diluyente de Muestra: buffer salino con tensioactivo. Color - Evitar tocar las paredes de los pocillos con los tips.
violeta. - No utilizar elementos metálicos que puedan entrar en
Conjugado Concentrado: anticuerpo monoclonal anti-IgG contacto con los reactivos.
humana conjugado con peroxidasa (10x). Color rojo. - Las policubetas deben incubarse en estufa. Debe evitarse
Diluyente de Conjugado: buffer salino con proteínas. abrir la estufa durante este proceso. No usar baño de agua.
Revelador: solución de tetrametilbencidina y peróxido de - Evitar que los vapores de hipoclorito provenientes de
hidrógeno. los recipientes para desechos biológicos u otras fuentes
Stopper: ácido sulfúrico 2 N. entren en contacto con los reactivos, ya que el hipoclorito
Buffer de Lavado Concentrado: buffer salino con tensio- afecta la reacción.
activo (25x). Color verde. - Evitar contacto del ácido sulfúrico (Stopper) con piel y
Control Positivo: suero humano inactivado conteniendo mucosas. Si esto ocurre enjuagar con abundante agua.
anticuerpos anti-T. cruzi. Color naranja. R36/38: irrita los ojos y la piel. R34: provoca quemaduras.
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S24/25: evítese el contacto con los ojos y la piel. S26: en condiciones pueden ser utilizadas dentro de los 4 meses
caso de contacto con los ojos, lávense inmediata y abun- posteriores mientras no supere la fecha de vencimiento
dantemente con agua y acúdase a un médico. S28: en caso indicada en la caja.
de contacto con la piel, lávese inmediata y abundantemente
con agua. S37/39: usar guantes adecuados y protección MUESTRA
para los ojos/la cara. Suero o plasma
- Evitar el derrame de líquidos y formación de aerosoles. a) Recolección de muestra: obtener de la manera
- No pipetear con la boca. Usar guantes descartables y pro- habitual.
tección en los ojos durante la manipulación de las muestras b) Aditivos: no se requieren para suero. Para las muestras
y reactivos del ensayo. de plasma se puede emplear heparina, citrato o EDTA como
- Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de anticoagulante.
acuerdo a la normativa vigente. c) Sustancias Interferentes conocidas: no se observa in-
terferencia por bilirrubina hasta 21 mg/dl de bilirrubina, ácido
PREPARACION DE LOS REACTIVOS ascórbico hasta 50 mg/dl, triglicéridos hasta 1500 mg/dl o
Es importante que todo el material utilizado para la prepa- hemoglobina hasta 300 mg/dl. Las muestras conteniendo
ración de los reactivos esté limpio y libre de detergente e partículas deberán clarificarse mediante centrifugación.
hipoclorito. d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
Buffer de Lavado: a baja temperatura los componentes muestra se debe conservar refrigerada (2-10oC). En caso
del reactivo concentrado pueden precipitar. En tal caso, de no realizar el análisis dentro de las 72 horas se debe
llevar la solución a 37oC hasta disolución completa. Para congelar a -20oC. No es recomendable realizar múltiples
la obtención del buffer de lavado listo para usar, diluir una ciclos de congelamiento y descongelamiento, ya que puede
parte de Buffer de Lavado Concentrado (25x) con 24 partes generar resultados erróneos. En caso de utilizar muestras
de agua destilada o desionizada. Ej.: 20 ml con 480 ml para congeladas, éstas deben ser homogeneizadas y centrifuga-
una policubeta. das antes de su uso.
Conjugado: diluir una parte de Conjugado Concentrado La inactivación por calor puede afectar el resultado.
(10x) con 9 partes de Diluyente de Conjugado (ej.: ver tabla No utilizar muestras con contaminación microbiana.
siguiente con volumen requerido de Conjugado Concentrado Si las muestras deben ser transportadas, embalarlas de
y Diluyente de Conjugado): acuerdo a las especificaciones legales relativas al envío de
material infeccioso.
Nº de pocillos Conjugado Diluyente
Concentrado de Conjugado
PROCEDIMIENTO DEL ENSAYO
8 100 ul 0,9 ml
1- Llevar a temperatura ambiente los reactivos y las
16 200 ul 1,8 ml
muestras antes de iniciar la prueba.
24 300 ul 2,7 ml
2- Preparar el volumen necesario de buffer de lavado
32 400 ul 3,6 ml
(1x).
96 1200 ul 10,8 ml
3- Colocar en el soporte de tiras, el número de pocillos
Policubeta sensibilizada, Diluyente de Muestra, Diluyen- requeridos para la cantidad de determinaciones a realizar,
te de Conjugado, Revelador, Stopper, Control Positivo y incluyendo 2 pocillos para el Control Positivo (CP) y 3
Control Negativo: listos para usar. para el Control Negativo (CN).
4- Dispensar el Diluyente de Muestra, luego la muestra
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE (M) y los controles según el siguiente esquema:
ALMACENAMIENTO M CP CN
10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. Diluyente de Muestra 100 ul 100 ul 100 ul
No congelar. Control Positivo - 20 ul -
Buffer de Lavado Concentrado y Stopper: se pueden
conservar a temperatura entre 2 y 25oC.
Buffer de lavado: una vez diluido es estable 3 meses a Muestra 20 ul - -
temperatura entre 2 y 25oC. Homogeneizar mezclando 2-3 veces por carga y descar-
Conjugado: una vez diluido es estable 6 horas a temperatura ga de la micropipeta. Al adicionar la muestra, el Diluyente
entre 2 y 25oC. de Muestra virará de color, de acuerdo a la tabla siguiente:
Policubeta sensibilizada: no abrir el sobre hasta el mo-
mento de usar, ni antes que haya tomado temperatura Tipo de Sin Suero o Control Control
ambiente, de lo contrario se favorecerá la condensación muestra muestra plasma Positivo Negativo
de humedad sobre la superficie de los pocillos. Las tiras no Color Violeta Celeste Naranja Verde
utilizadas deben conservarse entre 2-10oC dentro del sobre oscuro
con desecante bien cerrado. Las tiras conservadas en estas
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Se puede verificar la dispensación de controles o 12- Agregar el Stopper:
muestras a los pocillos visualmente o mediante lectura Stopper 100 ul 100 ul 100 ul
espectrofotomética (a 610/650 nm).
Advertencia: las muestras hemolizadas, ictéricas o tur- 13- Leer absorbancia en espectrofotómetro en forma
bias pueden alterar el color final sin afectar los resultados. bicromática a 450/620-650 nm o a 450 nm.
El viraje de color puede depender del volumen de muestra Nota: se recomienda efectuar siempre la lectura en forma
adicionado y de su composición. Un viraje de color de bicromática. En caso de que la lectura sea monocromáti-
menor intensidad puede deberse a que se dispensó un ca, realizar un blanco de reactivos que luego deberá ser
volumen inferior de muestra, a que la muestra no se restado de todos los valores de las muestras.
encuentra en las condiciones adecuadas, o a que tiene
un bajo nivel de proteínas.
5- Para evitar la evaporación, cubrir la placa con la cinta ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL
autoadhesiva provista, e incubar 30 ± 2 minutos a 37 ± El color de la reacción es estable durante 10 minutos, por lo
1oC. En forma paralela, preparar el conjugado diluido que los resultados deben leerse dentro de ese lapso.
(ver Tabla en PREPARACION DE LOS REACTIVOS).
6- Después de la incubación eliminar el líquido de cada PROCEDIMIENTO DE LAVADO
pocillo por completo. Lavar 5 veces según instrucción de Eliminar el líquido de los pocillos por aspirado o volcado.
lavado (ver PROCEDIMIENTO DE LAVADO). Los pocillos se lavan con 300 ul de buffer de lavado diluido.
7- Agregar el Conjugado: Asegurar que la altura alcanzada al llenar los pocillos no
cause desbordes.
Conjugado diluido 100 ul 100 ul 100 ul
La solución de lavado debe estar en contacto con los pocillos
Para evitar la evaporación cubrir la policubeta con cinta entre 30 y 60 segundos.
autoadhesiva. Garantizar que luego del último lavado no quede líquido re-
8- Incubar 30 ± 2 minutos a 37 ± 1oC. sidual. Realice un doble aspirado para eliminar el excedente
9- Lavar 5 veces según instrucción de lavado. de buffer. Si persiste luego de este procedimiento, invertir la
10- Dispensar el Revelador. Para ello, trasvasar a un placa sobre papel absorbente y golpearla varias veces, de lo
recipiente limpio solamente el volumen de Revelador contrario podrán obtenerse resultados erróneos.
que se requiera. No devolver el Revelador restante al Nota: el procedimiento de lavado es crítico para el resultado
frasco original. Evitar el contacto del reactivo con agentes del ensayo. Si queda buffer de lavado en los pocillos o si
oxidantes. los mismos no están completamente llenos se obtendrán
resultados erróneos. No dejar que los pocillos se sequen
Revelador 100 ul 100 ul 100 ul
durante el procedimiento. Los lavadores automáticos deben
11- Incubar 30 ± 2 minutos a temperatura ambiente (18- ser enjuagados con agua destilada o desionizada al final del
25oC), protegido de la luz. día para evitar obstrucciones debido a las sales presentes
en el buffer de lavado.
RESUMEN DEL PROCEDIMIENTO
ETAPA PROCEDIMIENTO PRECAUCION/OBSERVACIONES

Dilución Preparación de la solución de lavado (1x) Disolución de los cristales de sales
Diluyente de Agregar 100 ul de Diluyente de Muestra en cada
Muestra pocillo
Muestras Agregar 20 ul de M, CP y CN Se observa cambio de color al agregar la muestra
y los controles
Incubación Cubrir los pocillos e incubar durante 30 ± 2 minu- En estufa
tos a 37 ± 1oC
Lavado Lavar cada pocillo con 300 ul de buffer de lavado Tiempo de contacto de la solución de lavado en-
(5 veces) tre 30 y 60 segundos. Eliminar completamente el
líquido residual de los pocillos
Dilución Preparación del conjugado (1x) Durante la incubación con la muestra, diluir Conju-
gado Concentrado (10x)
Conjugado Agregar 100 ul de Conjugado diluido
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tos a 37 ± 1oC
Lavado Idem al lavado anterior
Revelado Agregar 100 ul de Revelador Trasvasar el volumen necesario de Revelador a
usar. No pipetear del frasco original. Descartar
remanente del reactivo. Evitar contacto con agentes
oxidantes. No exponer a la luz
Incubación Durante 30 ± 2 minutos entre 18-25oC Mantener los pocillos protegidos de la luz
Detención Agregar 100 ul de Stopper
Lectura Leer en espectrofotómetro Leer dentro de los 10 minutos
CRITERIOS DE VALIDACION DEL ENSAYO mayor que la de los Controles Negativos. Por el contrario,
El ensayo se considera válido si se cumplen simultánea- una muestra netamente amarilla se considera Reactiva.
mente las siguientes condiciones:
Toda muestra inicialmente reactiva debe ser repetida por
1- El promedio de las absorbanicas de los Controles Nega- duplicado. Si una o ambas repeticiones dan reactivas, la
tivos deben ser menor o igual a 0,100. misma debe considerarse reactiva.
Ejemplo: Una muestra inicialmente reactiva puede ser no reactiva en
Lectura 1 = 0,034; Lectura 2 = 0,028; Lectura 3 = 0,029 las dos repeticiones. Esto puede deberse a:
Promedio = (0,034 + 0,028 + 0,029) / 3 = 0,030 - Contaminación cruzada de un pocillo no reactivo por una
2- Eliminar cualquier Control Negativo con D.O. mayor a muestra reactiva.
0,100. - Contaminación de la muestra durante la dispensación,
imprecisión en el dispensado de muestra, Conjugado y/o
3- Si se ha eliminado algún Control Negativo, volver a calcu- Revelador en el pocillo.
lar el promedio de los Controles Negativos. Un ensayo es vá- - Reutilización de tips.
lido si se aceptan al menos dos de los Controles Negativos. - Contaminación del pocillo con hipoclorito u otros agentes
4- El promedio de las absorbancias de los Controles Posi- oxidantes.
tivos debe ser mayor o igual a 1,300. En ciertos casos una muestra no reactiva puede presentar
Ejemplo: una reacción falsamente reactiva, tanto en el análisis inicial
Lectura 1 = 1,697; Lectura 2 = 1,774 como en sus repeticiones. Algunas causas de este fenómeno
Promedio = (1,697 + 1,774) / 2 = 1,736 pueden ser:
5- La diferencia entre el promedio de las D.O. de los Con- - Contaminación de la muestra durante la extracción, proce-
troles Positivos y Controles Negativos debe ser mayor o samiento o conservación.
igual a 1,200. - Presencia de sustancias interferentes, tales como autoan-
Si una de estas condiciones no se cumple, repetir el ensayo. ticuerpos, fármacos, etc.
Recordar que las lecturas obtenidas dependerán de la - Dispensación y/o aspirado ineficiente de la solución de
sensibilidad del aparato empleado. lavado (sistema obstruido).
INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO

a) Con instrumental óptico Ver Sustancias Interferentes conocidas en Muestra.
La presencia o ausencia de anticuerpos anti-T.cruzi se de- No se debe utilizar pool de muestras.
termina relacionando la absorbancia de la muestra respecto No se deben utilizar otros fluidos corporales como la saliva,
al valor del Cut-off. líquido cefalorraquídeo u orina.
Cualquier resultado Reactivo debe ser verificado por otra
Cut-off = CN + 0,200 técnica. Recordar el criterio recomendado por el Instituto
CN: promedio de las D.O. del Control Negativo Fatala Chabén, según el cual el inmunodiagnóstico de la in-
Ejemplo: 0,030 + 0,200 = 0,230 fección deberá hacerse con un mínimo de 2 de los siguientes
métodos: inmunofluorescencia indirecta, hemaglutinación
Muestras No Reactivas: se consideran aquellas con ab-
indirecta y ELISA, debidamente validados por el Centro
sorbancias menores al Cut-off
Nacional de Referencia.
Muestras Reactivas: se consideran aquellas con absor-
bancias mayores o iguales al Cut-off.
CARACTERISTICAS ESPECIFICAS DE PERFORMANCE
b) Interpretación visual a) Sensibilidad
Si se opta por este tipo de interpretación, debe considerarse - Sensibilidad clínica en Paneles de Performance: en un
No Reactiva toda muestra que no presente una coloración estudio realizado sobre diferentes paneles comerciales
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internacionales, se obtuvieron los siguientes resultados: Proceedings of the 5th. National Forum on AIDS, Hepatitis
PMT 201 (Anti-T. cruzi Performance Panel, BBI, USA):se and Other blood-borne diseases, pág. 89 - Atlanta, Georgia.
detectaron 14 de las 14 muestras reactivas. 29 marzo-1 abril, 1992.
PMT 202 (Anti-T. cruzi Performance Panel, BBI, USA): se - Lorenzo, L.; Capriotti, G.; Rojkín, F. - Rev. Arg. de Trans-
detectaron 14 de las 14 muestras reactivas. fusión XVII/1:51 (1991).
PP 0409 (Panel de Performance para Chagas, Q Panel, - Knecher, L.M.; Rojkín, L.F.; Capriotti, G.A.; Lorenzo, L.E.-
Brasil): se detectaron 16 de las 16 muestras reactivas. Int. J. Parasitol. 24/2: 207-211 (1994).
PP 0508 (Panel de Performance anti-T. cruzi, Q Panel, Bra- - Knecher, L.M.; Capriotti: G.A.; Rojkín, L.F.; Lorenzo, L.E.
sil): se detectaron 16 de las 16 muestras reactivas. - Rev. Asoc. Bioq. Arg. 58/3:125, 1994.
- Sensibilidad clínica en Paneles de muestras reactivas - Schujman, L.; Suita, G.; Acebal, S.; Albrecht, A. - Acta Bioq.
anti-T. cruzi: en un estudio realizado sobre 85 muestras de Clin. Latinoam. XXIX/4:517, 1995.
niños, provenientes de región endémica, con infección por - Ministerio de Salud y Acción Social, Instituto Nacional de
T. cruzi confirmada por diferentes métodos, se encontraron Parasitología "Doctor Mario Fatala Chabén" - Normas
reactivas la totalidad de las muestras con el kit Chagatest para el diagnóstico de la infección chagásica - Resolución
ELISA lisado. ministerial 523/97, 1998.
En un estudio de 89 muestras reactivas provenientes de una - Clinical Evaluation of Immunoassays. Approved Guideline
institución hospitalaria, se detectaron todas las muestras. I/LA21-A (2002) National Committee for Clinical Laboratory
Standards.
b) Especificidad - Interference testing in Clinical Chemistry. Approved
En un estudio de 739 muestras de sueros y plasmas de dos Guideline EP7-A (2002) National Committee for Clinical
centros de salud diferentes, se encontró una especificidad Laboratory Standards.
de 99,29%. - User Demostration of Performance for Precision and Ac-
En otro estudio realizado sobre 251 muestras de sueros y curacy - Approved Guideline EP15-A (2001).
plasmas de banco de sangre, la especificidad obtenida fue
de 99,60%.
Se estudió la posible aparición de reactividades cruzadas
ensayando muestras provenientes de 341 individuos con
diferentes condiciones clínicas que pueden ser causantes
de reacciones inespecíficas para el ensayo Chagatest ELISA
lisado. Estas condiciones incluyen mujeres embarazadas,
pacientes hemodializados y pacientes con enfermedades
autoinmunes o enfermedades infecciosas diferentes a Cha-
gas (HIV, HTLV, hepatitis C, hepatitis B, sífilis, otras). Para
esta población la especificidad fue de 99,04%.
c) Precisión
Se evaluó la precisión del test siguiendo el protocolo EP15-A
recomendado por la NCCLS. Los ensayos fueron realizados
con muestras de diferentes niveles de reactividad y con los
controles. Se realizó 1 ensayo diario evaluando cada muestra
por cuadruplicado en el transcurso de 5 días.
Media Intra-ensayo Total
(D.O.) D.S. C.V. D.S. C.V.
Muestra 1 0,590 0,021 3,54% 0,041 6,92%
Muestra 2 0,993 0,043 4,34% 0,067 6,72%
Control (+) 2,255 0,062 2,76% 0,087 3,86%
Control (-) 0,025 0,001 4,88% 0,002 7,38%
n = 20
PRESENTACION
- 96 determinaciones (Cód. 1293096).
BIBLIOGRAFIA
- Engvall, E. and Perlmann, P. - Immunochem. 8:871-74
(1971).
- Berning, H. - Dtsch. Med. Wscho 108/3:106 (1984).
- Rojkín, L.F.; Knecher, L.M.; Capriotti, G.A.; Lorenzo, L.E. -
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Conjugado Conc. Conjugado Diluy.

Conjugado Concentrado Diluyente de Conjugado
Revelador Buf. Lavado Conc.

Revelador Buffer de Lavado Concentrado
Control + Control -
Stopper
Stopper
Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de


 No congelar
F Riesgo biológico
Cont. Contenido
g Número de lote
M Elaborado por:
Xn
Nocivo
Xi
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
M
c Control Negativo
Wiener Laboratorios S.A.I.C.
Riobamba 2944
Wiener lab.
h Número de catálogo Dir. Téc.: Viviana E. Cétola
Bioquímica
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Chagatest
C ELISA recombinante v.3.0
Método de 3ª generación para la detección de anticuerpos
contra el Trypanosoma cruzi
SIGNIFICACION CLINICA en buffer fosfatos 100 mmol/l y tensioactivo no iónico 0,1 g/l.
La enfermedad de Chagas es una infección parasitaria Diluyente de Muestras: albúmina bovina en solución fisio-
producida por el Trypanosoma cruzi. El diagnóstico de lógica tamponada con buffer fosfatos pH 7,2.
laboratorio depende del estadio en el cual se encuentre la Control Positivo: dilución de suero inactivado conteniendo
enfermedad. Durante la fase aguda, se efectúa directamente anticuerpos contra el Trypanosoma cruzi.
mediante la comprobación de los parásitos en sangre o Control Negativo: dilución de suero no reactivo, inactivado.
por métodos inmunológicos que detecten IgM. Durante
la fase crónica, se pueden usar métodos inmunológicos INSTRUCCIONES PARA SU USO
como: reacción de fijación de complemento, aglutinación Buffer de Lavado: para usar diluir 1+4 con agua destilada
de látex, floculación, hemaglutinación, aglutinación directa, (1 parte de Buffer de Lavado concentrado + 4 partes de
inmunofluorescencia o ELISA. agua destilada). A baja temperatura los componentes del
reactivo pueden precipitar. En tal caso, colocar en baño de
FUNDAMENTOS DEL METODO agua a 37oC unos minutos, mezclando luego por inversión.
En esta técnica cualitativa para la detección de anticuerpos Policubeta sensibilizada, Conjugado, Revelador A, Re-
anti-T. cruzi, la muestra se diluye en el soporte en el que velador B, Stopper: listos para usar.
se encuentran inmovilizados antígenos recombinantes Diluyente de Muestras: listo para usar. Su color puede
(1, 2, 13, 30, 36 y SAPA), obteniéndose un método de 3ª variar de lote a lote sin que se afecte la capacidad reaccional
generación. Estos antígenos se obtienen por técnica de del mismo.
ADN recombinante a partir de proteínas específicas de los Control Positivo y Control Negativo: listos para usar.
estadios epimastigote y tripomastigote del T. cruzi, corres-
pondientes a zonas altamente conservadas entre distintas PRECAUCIONES
cepas. La tecnología empleada permite asegurar una mezcla - Todas las muestras de pacientes deben manipularse como
antigénica de composición conocida y constante lote a lote, si fueran capaces de transmitir infección. Los controles se
brindando resultados reproducibles, específicos y con una encuentran inactivados. Sin embargo, deben emplearse
elevada sensibilidad. Si la muestra contiene los anticuerpos como si se tratara de material infectivo.
específicos, éstos formarán un complejo con los antígenos - Los sueros controles han sido examinados para antígeno de
y permanecerán unidos al soporte. La fracción no unida se superficie de hepatitis B (HBsAg), virus de inmunodeficien-
elimina por lavado tras lo que se agregan anticuerpos anti- cia humana (HIV) y hepatitis C encontrándose no reactivos.
inmunoglobulina humana conjugados con peroxidasa. Si - Todos los materiales empleados en el ensayo deben ser
se produjo la reacción en la primera etapa del proceso, se destruidos a fin de asegurar la inactivación de agentes pa-
unirá el conjugado. Luego de un nuevo lavado se agrega tógenos. El método recomendado para este procedimiento
el sustrato enzimático. En los casos en que se haya unido es autoclavar durante 1 hora a 121oC. Los líquidos de
el conjugado habrá aparición de color celeste. La reacción desecho pueden ser desinfectados con hipoclorito de sodio
se detiene con ácido sulfúrico, con lo que el color celeste (concentración final 5%) durante por lo menos 60 minutos.
vira al amarillo. - No intercambiar reactivos de distintos equipos y lotes.
- No emplear reactivos de otro origen.
REACTIVOS PROVISTOS - Las policubetas deben incubarse en estufa. No usar baño
Policubeta sensibilizada: policubeta de tiras removibles de agua. Debe evitarse abrir la estufa durante este proceso.
con pocillos que contienen antígenos recombinantes de T. - Evitar que los vapores de hipoclorito provenientes de
cruzi inmovilizados. los recipientes para desechos biológicos u otras fuentes
Conjugado: anti-inmunoglobulinas humanas (cabra) conju- entren en contacto con la policubeta, ya que el hipoclorito
gadas con peroxidasa. afecta la reacción.
Revelador A: peróxido de hidrógeno 60 mmol/l en buffer - Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
citrato 50 mmol/l pH 3,2. - Evitar el contacto del ácido sulfúrico con la piel y mucosas.
Revelador B: tetrametilbencidina (TMB) 0,01 mol/l en ácido R36/38: irrita los ojos y la piel. S24/25: evítese el contacto
clorhídrico 0,1 N. con los ojos y la piel. S26: en caso de contacto con los
Stopper: ácido sulfúrico 2 N. ojos, lávense inmediata y abundantemente con agua y
Buffer de Lavado concentrado: cloruro de sodio 1,4 mol/l acúdase a un médico. S28: en caso de contacto con la
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piel, lávese inmediata y abundantemente con agua. S37/39:
usar guantes adecuados y protección para los ojos/la cara. PROCEDIMIENTO
- Evitar el derrame de líquidos y formación de aerosoles. Llevar a temperatura ambiente los reactivos y las mues-
tras antes de iniciar la prueba. Una vez iniciado el proce-
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE dimiento debe completarse sin interrupción.
ALMACENAMIENTO Procesar simultáneamente 2 Controles Positivos (CP) 3
Los Reactivos Provistos son estables en refrigerador (2- Negativos (CN) y los Desconocidos (D). Al depositar la
10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. muestra y/o Controles sobre el Diluyente de Muestras,
No congelar. debe asegurarse de colocar los mismos en el seno del
Buffer de Lavado: estable 3 meses a temperatura ambiente. líquido y no sobre las paredes o el fondo del pocillo. En-
Policubeta sensibilizada: las tiras de pocillos con antígeno juagar la pipeta con el Diluyente dispensado en el pocillo
inmovilizado se proveen cerradas al vacío y con desecante. para asegurar la correcta homogeneización.
No abrir el envoltorio hasta el momento de usar, ni antes En los pocillos a utilizar de la policubeta colocar:
que haya tomado temperatura ambiente, de lo contrario
D CP CN
se favorecerá la humectación del contenido. Las tiras de
pocillos no utilizadas deben conservarse dentro del sobre Diluyente de Muestras 200 ul 200 ul 200 ul
con el desecante, cerrado y a 2-10oC. Las tiras conserva-
Control Positivo - 10 ul -
das en estas condiciones pueden ser utilizadas dentro de
los 5 meses posteriores mientras no se supere la fecha de Control Negativo - - 10 ul
vencimiento del equipo. Muestra 10 ul - -
MUESTRA Mezclar aplicando suaves golpes en los laterales de
Suero o plasma la policubeta durante 10 segundos una vez cargadas
a) Recolección: obtener de la manera usual. No usar las muestras en cada tira. Para evitar la evaporación,
muestras inactivadas por calor. VER LIMITACIONES DEL cubrir la placa e incubar en la estufa 30 minutos a 37oC.
PROCEDIMIENTO. Luego aspirar cuidadosamente el líquido de cada pocillo
b) Aditivos: no se requieren para suero. Si se emplea recibiéndolo en un recipiente para desechos biológicos
plasma puede utilizarse cualquier anticoagulante de uso que contenga 5% de hipoclorito sódico. A continuación,
corriente en la práctica transfusional. lavar 5 veces con Buffer de Lavado empleando aproxi-
c) Sustancias interferentes conocidas: la hemólisis, madamente 300 ul/vez/pocillo. Después de cada lavado,
hiperlipemia y otras causas de turbiedad pueden provocar el líquido se descartará también en el recipiente con
resultados erróneos. Estas muestras deben ser clarificadas hipoclorito. Opcionalmente, emplear lavador automáti-
por centrifugación. co. Al finalizar el último lavado, eliminar por completo el
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: las líquido residual, invirtiendo la policubeta y golpeándola
muestras no diluidas pueden conservarse durante 7 días a varias veces sobre papel absorbente, ejerciendo una
2-10oC. Para conservación por períodos más prolongados, leve presión con la mano sobre los laterales mayores
deben ser congeladas a -20oC o menos. Evitar los congela- del soporte, para evitar la caída de las tiras de pocillos.
mientos y descongelamientos reiterados. Existen evidencias Luego agregar en cada pocillo:
que muestran que los congelamientos sucesivos pueden ser Conjugado 1 gota 1 gota 1 gota
causas de resultados erróneos. Si las muestras deben ser
transportadas, embalar de acuerdo a las especificaciones En caso de utilizar micropipeta automática, dispensar
legales relativas al envío de materiales infecciosos. 50 ul.
MATERIAL REQUERIDO (no provisto) policubeta durante 10 segundos. Para evitar la evapo-
- Micropipetas capaces de medir los volúmenes indicados. ración, cubrir la placa e incubar durante 30 minutos en
- Reloj alarma o cronómetro. estufa a 37oC. Luego aspirar el líquido de los pocillos,
- Estufa a 37oC recibiéndolo en el recipiente con hipoclorito y lavar según
- Espectrofotómetro para lectura de policubetas (opcional). se indicó más arriba. Al finalizar el último lavado, eliminar
por completo el líquido residual, invirtiendo la policubeta
CONDICIONES DE REACCION y golpeándola varias veces sobre papel absorbente, ejer-
- Longitud de onda primaria: 450 nm ciendo una leve presión con la mano sobre los laterales
- Longitud de onda secundaria (bicromática): 620-650 nm mayores del soporte, para evitar la caída de las tiras de
- Calibración del instrumental: llevar a cero el espectrofotóme- pocillos. Luego agregar en cada pocillo:
tro con Blanco de Reactivos procesándolo de la misma forma Revelador A 1 gota 1 gota 1 gota
que una determinación pero omitiendo colocar Muestra.
- Tiempo de reacción: 90 minutos Revelador B 1 gota 1 gota 1 gota
- Temperatura de reacción: 37oC y temperatura ambiente En caso de utilizar micropipeta automática, dispensar 50 ul.
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Contaminación de la solución cromogénica con agentes
Mezclar aplicando suaves golpes en los laterales de la oxidantes (cloro, etc.).
policubeta durante 10 segundos. Incubar 30 minutos a Contaminación del Stopper.
temperatura ambiente y luego agregar: Conservación inadecuada de las tiras de pocillos no
Stopper 1 gota 1 gota 1 gota utilizadas.
En caso de utilizar micropipeta automática, dispensar Utilizar baño de agua para la incubación.
50 ul. Contaminación del Buffer de Lavado diluido. Se reco-
Mezclar aplicando suaves golpes en los laterales de la mienda verificar la limpieza de los recipientes donde se
policubeta durante 10 segundos. prepara y almacena. Si se observa aparición de turbidez
Leer en espectrofotómetro a 450 nm o bicromática a o precipitado al prepararlo, debe desecharse.
450/620-650 nm o evaluar el resultado a simple vista por - Un resultado negativo no excluye la posibilidad de exposi-
comparación con los Controles Positivos y Negativos. ción o infección por T. cruzi.
- Ocasionalmente, al efectuar lecturas bicromáticas, pueden
obtenerse absorbancias negativas que no invalidan la
ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL determinación. Esto se debe a que algunas muestras dan
El color de la reacción es estable durante 30 minutos, por lecturas inferiores al Blanco de Reactivos.
lo que los resultados deben observarse durante ese lapso. - Dependiendo de la sensibilidad del espectrofotómetro
utilizado, se encuentran muestras que pueden dar valores
CRITERIOS DE VALIDACION DE LA CORRIDA por encima del rango numérico de lectura. Estos resultados
La corrida se considera válida si se cumplen simultánea- deben interpretarse como reactivos. En estos casos parti-
mente las siguientes condiciones: culares, para obtener valores numéricos, puede efectuarse
a) Las lecturas de al menos 2 de los 3 Controles Negativos la lectura a 490 nm o 490/650 nm.
corregidas contra el Blanco de Reactivos deben ser menores - No utilizar muestras inactivadas por calor ya que pueden
o iguales a 0,150 D.O. ocasionar resultados falsos positivos.
b) La lectura media de los Controles Positivos corregida - Verifique que el sistema lavador que está usando (WIENER
debe ser mayor o igual a 0,600 D.O. WASHER u otro) aspire totalmente el contenido de los
Si una o ambas condiciones no se cumple, repetir la corrida. pocillos y que el volumen de la solución lavadora dispen-
Para ambos casos recordar que las lecturas obtenidas de- sada sea pareja.
penderán de la sensibilidad del aparato empleado.
PERFORMANCE
INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS a) Sensibilidad: sobre un panel de 70 muestras con xeno-
a) Con instrumental óptico: diagnóstico y serología positivos la sensibilidad es del 100%.
La presencia o ausencia de anticuerpos anti-T. cruzi se de- Sobre otro panel de 144 muestras con serología positiva con
termina relacionando la absorbancia de la muestra respecto métodos de hemaglutinación indirecta, inmunofluorescencia
al valor Cut-off. indirecta y otros ELISA, la sensibilidad es del 99,3%.
Cut-off = CN + 0,300 D.O. b) Especificidad: sobre un panel de 75 muestras con
xenodiagnóstico y serología negativos, la especificidad es
donde CN: promedio de las lecturas del Control Negativo
del 98,7%.
Zona de indeterminación: Cut-off ± 10%
Sobre otro panel de 200 muestras con serología negativa por
Muestras No Reactivas: se consideran aquellas con métodos de hemaglutinación indirecta, inmunofluorescencia
absorbancias menores al límite inferior de la zona de inde- indirecta y otros ELISA, la especificidad es del 100%.
terminación. c) Estudio poblacional: en una población general que
Muestras Reactivas: se consideran aquellas con absorban- incluye individuos sanos, donantes, chagásicos y con otras
cias mayores al límite superior de la zona de indeterminación. patologías, la correlación con respecto a métodos confirma-
Muestras Indeterminadas: se consideran aquellas con torios, fue del 99,6%.
absorbancias que caen dentro de la zona de indeterminación.
Estas muestras deben ser ensayadas nuevamente. No obstante la sensibilidad del método, sus resultados, al
b) Interpretación visual: igual que los de cualquier método serológico, sólo constitu-
Si se opta por este tipo de interpretación debe considerarse yen un dato auxiliar para el diagnóstico. Es por esta razón
No Reactiva toda muestra que no presente una coloración que los informes deben ser considerados en términos de
mayor que la de los Controles Negativos. Por el contrario, probabilidad. En este caso, mayor o menor probabilidad de
una muestra netamente amarilla se considera Reactiva. parasitosis por T. cruzi.
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO técnica. Recordar el criterio recomendado por el Instituto
Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA. Fatala Chaben, según el cual el inmunodiagnóstico de la in-
- Constituyen causas de resultados erróneos: fección deberá hacerse con un mínimo de 2 de los siguientes
Lavado incorrecto de los pocillos de reacción. métodos: inmunofluorescencia indirecta, hemaglutinación
Contaminación cruzada de muestras No Reactivas con indirecta, ELISA, aglutinación de partículas (látex), debi-
anticuerpos procedentes de una muestra Reactiva. damente validados por el Centro Nacional de Referencia.
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PRESENTACION EXPLICACION DE LOS SIMBOLOS
BIBLIOGRAFIA
- Frasch, A.; Reyes, M. - Parasitol. Today 6/4, 1990. Conjugado Buf. Lavado Conc.
- Affranchino, J. et al. - Mol. Biochem. Parasitol. 34:221, 1989.
Conjugado Buffer de Lavado Concentrado
- Pastini, A.C.; Iglesias, S.R.; Carricarte, V.C.; Guerin, M.E.;
Sánchez, D.O.; Frasch, A.C. - Clin. Chem. 40/10:1893, Revelador A Revelador B
1994. Revelador A Revelador B
- Iglesias, S.R. - Instituto de Investigaciones Bioqumícas
"Fundación Campomar", Buenos Aires, 1991. Control + Control -
- Knecher, L.M.; Rojkín, L.F.; Capriotti, G.A.; Lorenzo, L.E.- Control Positivo Control Negativo
Int. J. Parasitol. 24/2: 207-211 (1994).
- Knecher, L.M.; Capriotti: G.A.; Rojkín, L.F.; Lorenzo, L.E. Stopper
- Rev. Asoc. Bioq. Arg. 58/3:125, 1994. Stopper
- Ministerio de Salud y Acción Social, Instituto Nacional de Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
Parasitología "Doctor Mario Fatala Chabén" - Normas reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
para el diagnóstico de la infección chagásica - Resolución Este producto cumple con los requerimientos previstos
ministerial 523/97, 1998.
- Capriotti, G.A.; Felcaro, M.V.; Toplikar, E.M.; Gariglio, R.C. - C por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios
52º Annual Meeting AACC, San Francisco, CA - Clin. Chem.
46/S6:A51, Abs 190A, 2000.
 No congelar
F Riesgo biológico
Cont. Contenido
g Número de lote
M Elaborado por:
Xn
Nocivo
Xi
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
Producto Autorizado A.N.M.A.T
870290000 / 00 p. 4/4 UR120531
Chagatest
de anticuerpos anti-Trypanosoma cruzi
SIGNIFICACION CLINICA activo (25x). Color verde.

La enfermedad de Chagas es una infección parasitaria Control Positivo: suero humano inactivado conteniendo
producida por el Trypanosoma cruzi. El diagnóstico de anticuerpos anti-T. cruzi. Color naranja.
laboratorio depende del estadio en el cual se encuentre la Control Negativo: suero humano no reactivo inactivado.
enfermedad. Durante la fase aguda, se efectúa directamente Color amarillo.
mediante la comprobación de los parásitos en sangre o por
métodos inmunológicos que detecten IgM. Durante la fase REACTIVOS NO PROVISTOS
crónica, se pueden usar métodos inmunológicos como: Agua destilada o desionizada
hemaglutinación, inmunofluorescencia, ensayo inmunoen-
zimático o Western blot. MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
- Micropipetas para medir los volúmenes indicados
FUNDAMENTOS DEL METODO - Tips descartables
Chagatest ELISA recombinante v. 4.0 es un ensayo inmu- - Material volumétrico para preparar las diluciones indicadas
noenzimático "in vitro" para la detección cualitativa de anti- - Estufa a 37oC
cuerpos anti-T. cruzi en muestras de suero o plasma humano. - Papel absorbente
La muestra se diluye en la policubeta, cuyos pocillos se - Guantes descartables
encuentran sensibilizados con seis antígenos recombinan- - Reloj alarma o cronómetro
tes (SAPA, 1, 2, 13, 30 y 36) específicos de los estadios - Hipoclorito de sodio
epimastigote y tripomastigote del T. cruzi, correspondientes - Sistema de lavado de policubetas (manual o automático)
a zonas altamente conservadas entre distintas cepas. Si la - Espectrofotómetro para lectura de policubetas
muestra contiene anticuerpos específicos, éstos formarán
un complejo con los antígenos y permanecerán unidos a PRECAUCIONES
la fase sólida. La fracción no unida se elimina por lavado y - Los reactivos son para uso diagnóstico “in vitro”.
luego se agrega el conjugado (anticuerpo monoclonal anti- - Todas las muestras de pacientes deben manipularse como
IgG humana conjugado con peroxidasa), el cual reacciona si fueran capaces de transmitir infección.
específicamente con los anticuerpos anti-T. cruzi inmuno- - Los sueros controles han sido examinados para antígeno
capturados. El conjugado no unido se elimina por lavado. de superficie de hepatitis B (HBsAg) y anticuerpos contra
La presencia de peroxidasa unida al complejo se revela el virus de inmunodeficiencia humana (HIV) y hepatitis
mediante el agregado del sustrato cromogénico, tetrametil- C (HCV), encontrándose no reactivos. Sin embargo, se
bencidina. Las muestras reactivas desarrollan color celeste. recomienda manipularlos con las precauciones requeridas
La reacción enzimática se detiene mediante el agregado de para muestras potencialmente infecciosas.
ácido sulfúrico, produciendo un viraje del color celeste al - Al descartar los materiales empleados en el ensayo se
amarillo. La densidad óptica se mide en forma bicromática deben tratar a fin de asegurar la inactivación de agentes pa-
a 450/620-650 nm o a 450 nm. tógenos. El método recomendado para este procedimiento
es autoclavar durante 1 hora a 121oC. Los líquidos de
REACTIVOS PROVISTOS desecho pueden ser desinfectados con hipoclorito de sodio
Policubeta sensibilizada: policubeta de tiras recortables, (concentración final 5%) durante por lo menos 60 minutos.
con 96 pocillos recubiertos con antígenos recombinantes - No intercambiar reactivos de distintos lotes.
de T. cruzi. - No emplear reactivos de otro origen.
Diluyente de Muestra: buffer salino con tensioactivo. Color - Evitar tocar las paredes de los pocillos con los tips.
violeta. - No utilizar elementos metálicos que puedan entrar en
Conjugado Concentrado: anticuerpo monoclonal anti-IgG contacto con los reactivos.
humana conjugado con peroxidasa (10x). Color rojo. - Las policubetas deben incubarse en estufa. Debe evitarse
Diluyente de Conjugado: buffer salino con proteínas. abrir la estufa durante este proceso. No usar baño de agua.
Revelador: solución de tetrametilbencidina y peróxido de - Evitar que los vapores de hipoclorito provenientes de
hidrógeno. los recipientes para desechos biológicos u otras fuentes
Stopper: ácido sulfúrico 2 N. entren en contacto con los reactivos, ya que el hipoclorito
Buffer de Lavado Concentrado: buffer salino con tensio- afecta la reacción.
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- Evitar contacto del ácido sulfúrico (Stopper) con piel y con desecante bien cerrado. Las tiras conservadas en estas
mucosas. R36/38: irrita los ojos y la piel. R34: provoca condiciones pueden ser utilizadas dentro de los 4 meses
quemaduras. S24/25: evítese el contacto con los ojos y posteriores mientras no supere la fecha de vencimiento
la piel. S26: en caso de contacto con los ojos, lávense indicada en la caja.
inmediata y abundantemente con agua y acúdase a un
médico. S28: en caso de contacto con la piel, lávese inme- MUESTRA
diata y abundantemente con agua. S37/39: usar guantes Suero o plasma
adecuados y protección para los ojos/la cara. a) Recolección de muestra: obtener de la manera habitual.
- Evitar el derrame de líquidos y formación de aerosoles. b) Aditivos: no se requieren para suero. Para las muestras
- No pipetear con la boca. Usar guantes descartables y pro- de plasma se puede emplear heparina, citrato o EDTA como
tección en los ojos durante la manipulación de las muestras anticoagulante.
y reactivos del ensayo. c) Sustancias Interferentes conocidas: no se ha observado
- Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de interferencia con muestras que contienen hasta 42 mg/dl de
acuerdo a la normativa vigente. bilirrubina, 50 mg/dl de ácido ascórbico, 1600 mg/dl de trigli-
céridos o 290 mg/dl de hemoglobina. Muestras conteniendo
PREPARACION DE LOS REACTIVOS partículas deberán clarificarse mediante centrifugación.
Es importante que todo el material utilizado para la prepa- d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
ración de los reactivos esté limpio y libre de detergente e muestra se debe conservar refrigerada (2-10oC). En caso
hipoclorito. de no realizar el análisis dentro de las 72 horas se debe
Buffer de Lavado: a baja temperatura los componentes congelar a -20oC. No es recomendable realizar múltiples
del reactivo concentrado pueden precipitar. En tal caso, ciclos de congelamiento y descongelamiento. Esto puede
llevar la solución a 37oC hasta disolución completa. Para generar resultados erróneos. En caso de utilizar muestras
la obtención del buffer de lavado listo para usar, diluir una congeladas, éstas deben ser homogeneizadas y centrifuga-
parte de Buffer de Lavado Concentrado (25x) con 24 partes das antes de su uso.
de agua destilada o desionizada. Ej.: 20 ml con 480 ml para La inactivación por calor puede afectar el resultado.
una policubeta. No utilizar muestras con contaminación microbiana.
Conjugado: diluir una parte de Conjugado Concentrado Si las muestras deben ser transportadas, embalarlas de
(10x) con 9 partes de Diluyente de Conjugado (ej.: ver tabla acuerdo a las especificaciones legales relativas al envío de
siguiente con volumen requerido de Conjugado Concentrado material infeccioso.
y Diluyente de Conjugado):
8 100 ul 0,9 ml muestras antes de iniciar la prueba.
16 200 ul 1,8 ml 2- Preparar el volumen necesario de buffer de lavado
24 300 ul 2,7 ml diluido.
32 400 ul 3,6 ml 3- Colocar en el soporte de tiras, el número de pocillos
96 1200 ul 10,8 ml requeridos para la cantidad de determinaciones a realizar,
Policubeta sensibilizada, Diluyente de Muestra, Diluyen- incluyendo 2 pocillos para el Control Positivo (CP) y 3
te de Conjugado, Revelador, Stopper, Control Positivo y para el Control Negativo (CN).
Control Negativo: listos para usar. 4- Dispensar el Diluyente de Muestra, luego la muestra
(M) y los controles según el siguiente esquema:
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE M CP CN
ALMACENAMIENTO
Los Reactivos Provistos son estables en refrigerador (2- Diluyente de Muestra 100 ul 100 ul 100 ul
10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. Control Positivo - 20 ul -
No congelar.
conservar a temperatura entre 2 y 25oC. Muestra 20 ul - -
Buffer de lavado: una vez diluido es estable 3 meses a Homogeneizar por carga y descarga de la micropipeta.
temperatura entre 2 y 25oC. Al adicionar la muestra, el Diluyente de Muestra virará
Conjugado: una vez diluido es estable 6 horas a temperatura de color, de acuerdo a la tabla siguiente:
entre 2 y 25oC.
Policubeta sensibilizada: no abrir el envoltorio hasta el Tipo de Sin Suero o Control Control
momento de usar, ni antes que haya tomado temperatura muestra muestra plasma Positivo Negativo
ambiente, de lo contrario se favorecerá la condensación de Color Violeta Celeste Naranja Verde
humedad sobre la superficie de los pocillos. Las tiras no oscuro
utilizadas deben conservarse entre 2-10oC dentro del sobre
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Advertencia: las muestras hemolizadas o turbias pueden 13- Leer absorbancia en espectrofotómetro en forma
alterar el color final sin afectar los resultados. El viraje de bicromática a 450/620-650 nm o a 450 nm.
color puede depender del volumen de muestra adicio-
nado y de su composición. Un viraje de color de menor Nota: se recomienda efectuar siempre la lectura en forma
intensidad puede deberse a que se dispensó un volumen bicromática. En caso de que la lectura sea monocromáti-
inferior de muestra, a que la muestra no se encuentra en ca, realizar un blanco de reactivos que luego deberá ser
las condiciones adecuadas, o a que tiene un bajo nivel restado de todos los valores de las muestras.
de proteínas.
5- Para evitar la evaporación, cubrir la placa con la cinta
autoadhesiva provista, e incubar 60 ± 2 minutos a 37 ± ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL
1oC. En forma paralela, preparar el conjugado diluido El color de la reacción es estable durante 10 minutos, por lo
(ver Tabla en PREPARACION DE LOS REACTIVOS). que los resultados deben leerse dentro de ese lapso.
6- Después de la incubación eliminar el líquido de cada
pocillo por completo. Lavar 5 veces según instrucción de PROCEDIMIENTO DE LAVADO
lavado (ver PROCEDIMIENTO DE LAVADO). Eliminar el líquido de los pocillos por aspirado o volcado.
7- Agregar el Conjugado: Los pocillos se lavan con 300 ul de buffer de lavado diluido.
Asegurar que la altura alcanzada al llenar los pocillos no
Conjugado diluido 100 ul 100 ul 100 ul
cause desbordes.
Para evitar la evaporación cubrir la policubeta con cinta La solución de lavado debe estar en contacto con los pocillos
autoadhesiva. entre 30 y 60 segundos.
8- Incubar 30 ± 2 minutos a 37 ± 1oC. Garantizar que luego del último lavado no quede líquido re-
9- Lavar 5 veces según instrucción de lavado. sidual. Realice un doble aspirado para eliminar el excedente
10- Dispensar el Revelador. Para ello, trasvasar a un de buffer. Si persiste luego de este procedimiento, invertir la
recipiente limpio solamente el volumen de Revelador placa sobre papel absorbente y golpearla varias veces, de lo
que se requiera. No devolver el Revelador restante al contrario podrán obtenerse resultados erróneos.
frasco original. Evitar el contacto del reactivo con agentes
oxidantes. Nota: el procedimiento de lavado es crítico para el resultado
del ensayo. Si queda buffer de lavado en los pocillos o si
Revelador 100 ul 100 ul 100 ul los mismos no están completamente llenos se obtendrán
11- Incubar 30 ± 2 minutos a temperatura ambiente (18- resultados erróneos. No dejar que los pocillos se sequen
25oC), protegido de la luz. durante el procedimiento. Los lavadores automáticos deben
12- Agregar el Stopper: ser enjuagados con agua destilada o desionizada al final del
día para evitar obstrucciones debido a las sales presentes
Stopper 100 ul 100 ul 100 ul

Dilución Preparación de la solución de lavado Disolución de los cristales de sales
Muestra pocillo
y los controles
tos a 37 ± 1oC
Dilución Conjugado Durante la incubación con la muestra, diluir Conju-
Conjugado Agregar 100 ul de Conjugado diluido
tos a 37 ± 1oC
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remanente del reactivo. Evitar contacto con agentes
oxidantes.
CRITERIOS DE VALIDACION DEL ENSAYO Toda muestra inicialmente reactiva debe ser repetida por
El ensayo se considera válido si se cumplen simultánea- duplicado. Si una o ambas repeticiones dan reactivas, la
mente las siguientes condiciones: misma debe considerarse reactiva.
1- El promedio de las densidades ópticas (D.O.) de los Con- Una muestra inicialmente reactiva puede ser no reactiva en
troles Negativos deben ser menor o igual a 0,100. las dos repeticiones. Esto puede deberse a:
Ejemplo: - Contaminación cruzada de un pocillo no reactivo por una
Lectura 1 = 0,034; Lectura 2 = 0,028; Lectura 3 = 0,029 muestra reactiva.
Promedio = (0,034 + 0,028 + 0,029) / 3 = 0,030 - Contaminación de la muestra durante la dispensación,
imprecisión en el dispensado de muestra, Conjugado y/o
2- Eliminar cualquier Control Negativo con D.O. mayor a Revelador en el pocillo.
0,100. - Reutilización de tips.
3- Si se ha eliminado algún Control Negativo, volver a cal- - Contaminación del pocillo con hipoclorito u otros agentes
cular el promedio de los Controles Negativos. Un ensayo es oxidantes.
válido si se aceptan al menos dos de los Controles Negativos.
En ciertos casos una muestra no reactiva puede presentar
4- El promedio de las D.O. de los Controles Positivos debe una reacción falsamente reactiva, tanto en el análisis inicial
ser mayor o igual a 1,300. como en sus repeticiones. Algunas causas de este fenómeno
Ejemplo: pueden ser:
Lectura 1 = 1,697; Lectura 2 = 1,774 - Contaminación de la muestra durante la extracción, pro-
Promedio = (1,697 + 1,774) / 2 = 1,736 cesamiento o conservación.
5- La diferencia entre el promedio de las D.O. de los Con- - Presencia de sustancias interferentes, tales como autoan-
troles Positivos y Controles Negativos debe ser mayor o ticuerpos, fármacos, etc.
igual a 1,200. - Dispensación y/o aspirado ineficiente de la solución de
lavado (sistema obstruido).
Si una de estas condiciones no se cumple, repetir el ensayo.
Recordar que las lecturas obtenidas dependerán de la sen-
sibilidad del aparato empleado.
Ver Sustancias Interferentes conocidas en Muestra.
No se debe utilizar pool de muestras.
No se deben utilizar otros fluidos corporales como la saliva,
a) Con instrumental óptico
líquido cefalorraquídeo u orina.
La presencia o ausencia de anticuerpos anti-T.cruzi se de-
termina relacionando la absorbancia de la muestra respecto
al valor del Cut-off.
a) Sensibilidad
Cut-off = CN + 0,200 - Sensibilidad clínica en Paneles de Performance: en un
CN: promedio de las D.O. del Control Negativo estudio realizado sobre diferentes paneles comerciales
Ejemplo: 0,030 + 0,200 = 0,230 internacionales, se obtuvieron los siguientes resultados:
PMT 201 (Anti-T. cruzi Performance Panel, BBI, USA):se
Muestras No Reactivas: se consideran aquellas con ab- detectaron 14 de las 14 muestras reactivas.
sorbancias menores al Cut-off PP 0404 (Panel de Performance para Chagas, Q Panel,
Muestras Reactivas: se consideran aquellas con absorban- Brasil): se detectaron 16 de las 16 muestras reactivas.
cias mayores o iguales al Cut-off. PP 0405 (Panel de Performance anti-T. cruzi, Q Panel, Bra-
b) Interpretación visual sil): se detectaron 16 de las 16 muestras reactivas.
Si se opta por este tipo de interpretación, debe considerarse - Sensibilidad clínica en Paneles de muestras reactivas
No Reactiva toda muestra que no presente una coloración anti-T. cruzi: en un estudio realizado sobre 100 muestras de
mayor que la de los Controles Negativos. Por el contrario, niños, provenientes de región endémica, con infección por
una muestra netamente amarilla se considera Reactiva. T. cruzi confirmada por diferentes métodos, se encontraron
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reactivas la totalidad de las muestras con el kit Chagatest - Iglesias, S.R. - Instituto de Investigaciones Bioquímicas
ELISA recombinante v.4.0. "Fundación Campomar", Buenos Aires, 1991.
En un estudio de 116 muestras reactivas provenientes de - Knecher, L.M.; Rojkín, L.F.; Capriotti, G.A.; Lorenzo, L.E.-
una institución hospitalaria, se detectaron 115 muestras. Int. J. Parasitol. 24/2: 207-211 (1994).
- Umezawa, E.S; Nascimento, M.S.; Kesper, N. Jr; Coura,
b) Especificidad
J.R.; Borges-Pereira, J.; Junqueira, A.C.V.; Camargo,M. - J.
En un estudio realizado sobre 1192 muestras de sueros y
Clin. Microbiol. 34/9: 2143-2147 (1996).
plasmas de banco de sangre, la especificidad obtenida fue
- Umezawa, E.S.; da Silva, J.F. - Mem. Inst. Oswaldo Cruz,
de 99,66%.
Rio de Janeiro, 94/1:285-288 (1999).
En otro estudio de 477 muestras de sueros y plasmas de dos
- Berrizbeitia, M.; Ndao, M.; Bubis, J.; Gottschalk, M.; Aché,
centros de salud diferentes, se encontró una especificidad
A.; Lacouture, S.; Medina, M.; Ward, B. - J. Clin. Microbiol.
de 99,57%.
44/2:291-296 (2006).
Sobre un panel de 474 plasmas provenientes de una po-
- Ministerio de Salud y Acción Social, Instituto Nacional de
blación de alta prevalencia, la especificidad obtenida fue
Parasitología "Doctor Mario Fatala Chabén" - Normas
de 98,30%.
para el diagnóstico de la infección chagásica - Resolución
ministerial 523/97, 1998.
diferentes condiciones clínicas que pueden ser causantes - Capriotti, G.A.; Felcaro, M.V.; Toplikar, E.M.; Gariglio, R.C. -
de reacciones inespecíficas para el ensayo Chagatest ELISA 52º Annual Meeting AACC, San Francisco, CA - Clin. Chem.
recombinante v.4.0. Estas condiciones incluyen mujeres 46/S6:A51, Abs 190A, 2000.
embarazadas, pacientes hemodializados, pacientes con - Pirard, M.; Iihoshi, N.; Boelaert, M.; Lasanta, P.; López, F.;
enfermedades autoinmunes o enfermedades infecciosas di- Van der Stuyft, P. - Transfusion 45: 554-561 (2005).
ferentes a Chagas (HIV, HTLV, hepatitis C, hepatitis B, sífilis, - Evaluation of Precision Performance of Clinical Chemistry
otras). Para esta población la especificidad fue de 98,37%. Devices - Approved Guideline EP5-A 19/2 (1999).
c) Precisión
controles. Se realizaron 2 ensayos diarios evaluando cada
muestra por duplicado en el transcurso de 20 días.
(D.O.) D.S. C.V. D.S. C.V.
Muestra 1 0,360 0,029 8,07% 0,043 11,90%
Muestra 2 0,550 0,036 6,55% 0,055 10,01%
Muestra 3 0,870 0,063 7,23% 0,093 10,69%
Control (+) 1,750 0,085 4,83% 0,138 7,89%
Control (-) 0,028 0,003 10,35% 0,004 14,24%
n = 80
técnica. Recordar el criterio recomendado por el Instituto
Fatala Chabén, según el cual el inmunodiagnóstico de la in-
fección deberá hacerse con un mínimo de 2 de los siguientes
indirecta y ELISA, debidamente validados por el Centro
Nacional de Referencia.
PRESENTACION
BIBLIOGRAFIA
- Frasch, A.; Reyes, M. - Parasitol. Today 6/4, 1990.
- Affranchino, J. et al. - Mol. Biochem. Parasitol. 34:221, 1989.
- Pastini, A.C.; Iglesias, S.R.; Carricarte, V.C.; Guerin, M.E.;
Sánchez, D.O.; Frasch, A.C. - Clin. Chem. 40/10:1893,
1994.
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Control + Control -
Stopper
Stopper

C

 No congelar
F Riesgo biológico
Cont. Contenido
g Número de lote
M Elaborado por:
Xn
Nocivo
Xi
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
M
c
Control Negativo Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
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Chagatest HAI
C screening A-V
Prueba de hemaglutinación indirecta para la detección
de anticuerpos contra el Trypanosoma cruzi
SIGNIFICACION CLINICA encuentran inactivados. Sin embargo, deben emplearse

La enfermedad de Chagas es una infección parasitaria como si se tratara de material infectivo.
producida por el Trypanosoma cruzi. En la mayoría de los - Los sueros controles han sido examinados para antígeno
casos la enfermedad evoluciona hacia la fase crónica. El de superficie de hepatitis B (HBsAg), anticuerpos contra
diagnóstico de laboratorio depende del estadio en el cual el virus de la hepatitis C (anti-HCV) y virus de inmunodefi-
se encuentre la enfermedad. Durante la fase aguda, el ciencia humana (HIV) encontrándose no reactivos.
diagnóstico se efectúa mediante la comprobación de los - Todos los materiales empleados en el ensayo deben ser
parásitos en sangre. Durante la fase crónica, se usan mé- destruidos a fin de asegurar la inactivación de agentes pa-
todos serológicos como prueba de screening. tógenos. El método recomendado para este procedimiento
FUNDAMENTOS DEL METODO desecho pueden ser desinfectados con hipoclorito de sodio
La hemaglutinación indirecta (HAI) se basa en la propiedad (concentración final 5%) durante por lo menos 60 minutos.
que tienen los anticuerpos (que en este caso son anti-T. - No intercambiar reactivos de distintos equipos y lotes.
cruzi) de producir aglutinación específica en presencia de - Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
glóbulos rojos sensibilizados con antígenos citoplasmáticos
y de membrana del Trypanosoma cruzi. Chagatest HAI ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
screening A-V utiliza glóbulos rojos de ave, que al ser de ALMACENAMIENTO
mayor tamaño que los de carnero, aceleran la visualización Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-
de la reacción. 10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
Los anticuerpos interferentes, que pueden causar aglutina- No congelar.
ción inespecífica, se eliminan con el agregado de la solución Una ligera turbidez u opalescencia en la Solución Proteica
proteica, la cual tiene inhibidores de los mismos. no altera la capacidad reaccionante de la misma.
Diluyente de Sueros HAI A-V: en refrigerador (2-10oC) es
REACTIVOS PROVISTOS estable 24 horas a partir de su preparación.
Antígeno HAI A-V: suspensión de glóbulos rojos de ave
sensibilizados con antígenos citoplasmáticos y de membrana INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
de T. cruzi en buffer fosfatos con ClNa, 8,5 g/l y conservante REACTIVOS
< 0,1%. - Cuando el Control Negativo y todas las diluciones de sue-
Buffer HAI A-V: solución fisiológica (8,5 g/l ClNa) tamponada ros son reactivas, puede ser indicio de autoaglutinación
con fosfatos 20 mmol/l, pH 7,1 y conservante < 0,1%. del Antígeno HAI A-V. Verificar destinando un pocillo de
Solución Proteica A-V: solución de proteínas, 5 g/dl y la policubeta para mezclar Antígeno HAI A-V y Diluyente
conservante < 0,1%. de Sueros HAI A-V, sin la Muestra. Si aún en este caso
Control Positivo: suero inactivado conteniendo anticuerpos se observa aglutinación, el reactivo estará deteriorado.
contra el Trypanosoma cruzi y conservante < 0,1%. Desechar.
Control Negativo: dilución de proteínas séricas no reactivas - La ausencia de reactividad en todas las diluciones de
y conservante < 0,1%. sueros y el Control Positivo, puede ser indicio de deterioro
de los reactivos.
Antígeno HAI A-V: cada vez que se utilice debe homoge- MUESTRA
neizarse perfectamente por agitación, evitando la formación Suero
de espuma. a) Recolección: el paciente debe estar preferentemente en
Diluyente de Sueros HAI A-V: agregar 0,2 ml de Solución ayunas. Obtener suero de la manera usual. No usar plasma.
Proteica A-V a 5 ml de Buffer HAI A-V. Mezclar, rotular y tapar. Las muestras inactivadas por calor pueden provocar resul-
Controles Positivo y Negativo: listos para usar. tados falsos positivos.
b) Aditivos: no se requieren. No agregar conservadores.
PRECAUCIONES c) Sustancias interferentes conocidas: hemólisis o hi-
- Todas las muestras de pacientes deben manipularse como perlipemia (con quilomicronemia) son causas de resultados
si fueran capaces de transmitir infección. Los controles se erróneos.
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suero debe ser preferentemente fresco. En caso de no Diluciones correspondientes
procesarse en el momento, puede conservarse en el refri- Pocillos 1 2 3 4 5 6
gerador (2-10oC) durante no más de 72-96 horas contadas
Títulos 1/40 1/80 1/160 1/320 1/640 1/1280
a partir del momento de la extracción. Para períodos más
prolongados de conservación, congelar (a -20oC), evitando
reiterar tal procedimiento.
CRITERIOS DE VALIDACION
El ensayo se considera válido si se cumplen simultáneamente
MATERIAL REQUERIDO
las siguientes condiciones:
1- Provisto
- El Control Negativo debe dar un botón nítido en el fondo
- Policubetas de 96 pocillos fondo en V.
del pocillo.
2- No provisto - El Control Positivo debe dar una película o manto en el
- Micropipetas capaces de medir los volúmenes indicados. fondo del pocillo.
Ver PROCEDIMIENTO. Si una o ambas condiciones no se cumplen, repetir el ensayo.
- Tubos de hemólisis y material volumétrico adecuado.
No Reactivo: presencia de un sedimento en forma de botón,
PROCEDIMIENTO nítido y de bordes netos en el fondo del pocillo.
Seleccionar una policubeta de pocillos de fondo en V sin Reactivo Débil: manto pequeño sobre el fondo del pocillo
usar. Pasar un paño húmedo por la base de la misma con botón más o menos definido en el centro.
antes de usar y disponerla apaisada. Ver LIMITACIONES Fuertemente Reactivo: formación de una película o manto
DEL PROCEDIMIENTO. a veces de bordes irregulares en el fondo del pocillo.
I- PRUEBA CUALITATIVA VALORES DE REFERENCIA

1- En un tubo de hemólisis colocar 400 ul de Diluyente Dentro de las técnicas inmunológicas, la HAI es considerada
de Sueros HAI A-V y adicionar 10 ul de suero o controles un método confiable para la determinación de anticuerpos
(dilución 1/40). específicos. No obstante, sus resultados, al igual que los de
2- Colocar 50 ul de la dilución 1/40 de suero o controles cualquier método serológico, sólo constituyen un dato auxi-
en un pocillo de la policubeta y agregar 25 ul de Antígeno liar para el diagnóstico. Es por esta razón que los informes
HAI A-V. deben ser considerados en términos de probabilidad. En este
3- Mezclar aplicando suaves golpes en los laterales de la caso, mayor o menor probabilidad de parasitosis por T. cruzi.
policubeta durante por lo menos 30 segundos. Se consideran presumiblemente parasitados aquellos in-
4- Dejar en reposo, protegido de vibraciones durante 60 dividuos cuyos sueros son reactivos con títulos mayores o
minutos a temperatura ambiente. iguales a 1/40.
5- Leer a partir de los 60 minutos. Cualquier resultado Reactivo debe ser verificado por otra
Puede aumentarse la nitidez de la apreciación, leyendo técnica. Recordar el criterio recomendado por el Instituto
sobre un espejo, iluminando la placa desde arriba e inter- Fatala Chaben, según el cual el inmunodiagnóstico de la in-
poniendo un papel blanco traslúcido entre la policubeta fección deberá hacerse con un mínimo de 2 de los siguientes
y la fuente de luz. métodos: inmunofluorescencia indirecta, hemaglutinación
II- PRUEBA CUANTITATIVA indirecta, ELISA, aglutinación de partículas (látex), debi-
1- En una misma serie de 6 pocillos colocar 50 ul de damente validados por el Centro Nacional de Referencia.
Diluyente de Sueros HAI A-V en los pocillos 2, 3, 4, 5 y 6.
2- Pipetear 50 ul de la dilución 1/40 de suero o controles LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
en los pocillos 1 y 2. Ver “Sustancias interferentes conocidas” en MUESTRA.
3- Transferir 50 ul del pocillo 2 al 3 y así sucesivamente, Otras causas de resultados erróneos son:
desechando 50 ul del último pocillo, evitando la formación - Falta de acondicionamiento previo de la policubeta. Para
de burbujas. eliminar la carga electrostática es necesario pasar un trapo
4- Homogeneizar por inversión el Antígeno HAI A-V. húmedo por la base.
5- Agregar a cada dilución 25 ul de Antígeno HAI A-V. - Falta de homogeneización de los reactivos antes de su uso.
6- Agitar la policubeta aplicando suaves golpes en los - Deficiencias de mezclado.
laterales durante por lo menos 30 segundos. - Vibraciones accidentales durante el reposo necesario para
7- Dejar en reposo, protegido de vibraciones durante el desarrollo de la reacción.
60 minutos. - Sueros envejecidos o congelados y descongelados repe-
8- Leer a partir de los 60 minutos. tidamente.
El título del suero será el de la mayor dilución de suero - Sueros inactivados por calor.
reactivo. - Contaminaciones accidentales de los reactivos o del ma-
terial empleado en el ensayo.
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- Policubetas rayadas por uso reiterado. No se aconseja EXPLICACION DE LOS SIMBOLOS
reusar pocillos en aquellas policubetas que no fueron
Antígeno HAI A-V Buffer HAI A-V
empleadas en su totalidad.
- Diluyente de Sueros que no sea de preparación reciente. Antígeno HAI A-V Buffer HAI A-V
- Dilución de la muestra preparada por más de 24 horas. Sol. Proteica A-V Control -
Debe tenerse en cuenta que cada componente de Chagatest
Solución Proteica A-V Control Negativo
HAI screening A-V, forma un equipo completo que debe
considerarse como unidad. Por este motivo no deben inter- Control +
cambiarse los componentes de distintos equipos. Control Positivo
PERFORMANCE reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
a) Sensibilidad y especificidad
En poblaciones endémicas, empleando Chagatest HAI
screening A-V, el 100% de los títulos mayores y el 99% de
los títulos menores de 1/40 fueron confirmados por métodos
de referencia. P Representante autorizado en la Comunidad Europea

En poblaciones no endémicas, el 100% de los individuos
sanos presentó títulos menores a 1/40 empleando Chaga- V Uso diagnóstico "in vitro"
test HAI screening A-V.
b) Estudio poblacional
En un estudio realizado sobre 159 muestras provenientes H Fecha de caducidad
de una población hospitalaria se obtuvo una sensibilidad del
95,3% y una especificidad del 99,2%, datos confirmados por l Límite de temperatura (conservar a)
hemaglutinación indirecta y ELISA.
En otra población de 328 individuos, proveniente de un banco  No congelar
de sangre de una zona no endémica, se encontró una sensi-
bilidad del 100% y una especificidad del 98,7%, comparando F Riesgo biológico
con métodos ELISA y hemaglutinación indirecta.
PRESENTACION Cont. Contenido

Equipo para 480 determinaciones conteniendo:
2 viales x 6,3 ml Antígeno HAI A-V g Número de lote
10 ml Solución Proteica A-V
270 ml Buffer HAI A-V Elaborado por:
0,5 ml Control Positivo
M
0,5 ml Control Negativo Nocivo
5 policubetas
(Cód. 1293204) Corrosivo / Cáustico
BIBLIOGRAFIA Irritante
- Mazza, S. - Sexto Congreso Nacional de Medicina (Cór-
doba) pág. 155, 1938. i Consultar instrucciones de uso
- Cerisola, J.A. - La Prensa Médica Argentina 49/34: 1761,
1962. Calibr. Calibrador
- Fontenla S., Moretti E. y González G. - 50°Triduo de la
ABA, Huerta Grande (Córdoba), 1985. b Control
- Basso A. y col. - 50° Triduo de la ABA. Huerta Grande
(Córdoba), 1985.
b Control Positivo
- Lorenzo, L.; Capriotti, G.; Rojkín, F.; - Rev. Arg. de Trans- c Control Negativo
fusión XVII/1:51, 1991.
- Ministerio de Salud y Acción Social, Instituto Nacional de h Número de catálogo
Parasitología "Doctor Mario Fatala Chabén" - Normas
ministerial 523/97, 1998. M Wiener Laboratorios S.A.I.C.
Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870310022 / 01 p. 3/9 UR120327
Chagatest
C HAI
Prueba de hemaglutinación indirecta para la detección
de anticuerpos contra el Trypanosoma cruzi
SIGNIFICACION CLINICA Cada vez que se emplee, homogeneizar mediante agitación

La enfermedad de Chagas es una infección parasitaria evitando la formación de espuma.
producida por el Trypanosoma cruzi. El diagnóstico de GR no sensibilizados: homogeneizar mediante agitación
laboratorio depende del estadio en el cual se encuentre la antes de usar, evitando la formación de espuma.
enfermedad. Diluyente de Sueros HAI: agregar 0,2 ml de Solución
Durante la fase aguda, el diagnóstico se efectúa directa- Proteica cada 10 ml de Buffer HAI. Mezclar, rotular y fechar.
mente mediante la comprobación de los parásitos en sangre 2-Mercaptoetanol: una vez abierta la ampolla, trasvasar el
o por métodos inmunológicos que detecten anticuerpos contenido al frasco vacío provisto, el que se deberá tapar
específicos. inmediatamente después de usar.
Durante la fase crónica, se pueden usar métodos inmuno- 2-Mercaptoetanol al 1%: con el 2-ME provisto, preparar
lógicos como la reacción de aglutinación de látex, hema- una dilución 1/100 con solución fisiológica en cantidad
glutinación, aglutinación directa, inmunofluorescencia y suficiente de acuerdo al número de pocillos que se utilicen.
últimamente ELISA. Ejemplo: para 96 pocillos: 25 ul de 2-ME en 2,5 ml de so-
lución fisiológica.
FUNDAMENTOS DEL METODO Controles Positivo y Negativo: listos para usar.
La hemaglutinación indirecta (HAI), también llamada he-
maglutinación reversa pasiva, se basa en la propiedad que PRECAUCIONES
tienen los anticuerpos (que en este caso son anti-T. cruzi) - Los Reactivos Provistos son para uso diagnóstico "in vitro".
de producir aglutinación específica en presencia de glóbulos - Las muestras deben manipularse como si fueran capaces
rojos sensibilizados con los correspondientes antígenos. de transmitir la infección.
En el suero existen anticuerpos inespecíficos (heterófilos) - Los sueros controles han sido examinados para antígeno de
que son capaces de aglutinar glóbulos rojos de distintas superficie de hepatitis B (HBsAg) y virus de inmunodeficien-
especies. Su presencia se investiga enfrentando el suero cia humana (HIV) encontrándose no reactivos. Sin embargo
con GR no sensibilizados. Los anticuerpos interferentes se deben emplearse como si se tratara de material infectivo.
eliminan mediante tratamiento con 2-mercaptoetanol. - Todos los materiales empleados en el ensayo deben ser
destruidos a fin de asegurar la inactivación de agentes
REACTIVOS PROVISTOS patógenos. El método recomendado por este procedimien-
Reconstituyente HAI: solución fisiológica tamponada a to es autoclavar durante 1 hora a 121oC. Los líquidos de
pH 7. desecho pueden ser desinfectados con hipoclorito de sodio
Antígeno HAI: liofilizado de glóbulos rojos de carnero sen- (concentración final 5%) durante por lo menos 60 minutos.
sibilizados con antígenos citoplasmáticos de T. cruzi. - No intercambiar reactivos de distintos equipos y lotes.
GR no sensibilizados: suspensión al 1% de eritrocitos de
carnero no sensibilizados, para control de heterofilia. ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
Buffer HAI: solución fisiológica tamponada con fosfatos a ALMACENAMIENTO
pH 7,5, con colorante inerte. Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-
Solución Proteica: solución de albúmina bovina al 10%. 10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
2-Mercaptoetanol: ampolla con 2-mercaptoetanol (2-ME). No congelar.
Control Positivo: suero inactivado conteniendo anticuerpos Diluyente de Sueros HAI: es estable en refrigerador (2-
contra Tripanosoma cruzi. 10oC) 5 días a partir de la fecha de su preparación.
Control Negativo: suero no reactivo, inactivado. 2-Mercaptoetanol al 1%: usar inmediatamente después
de preparado.
REACTIVOS NO PROVISTOS Antígeno HAI: una vez reconstituido es estable durante 2
Solución fisiológica. meses conservado en refrigerador (2-10oC). No congelar.
INSTRUCCIONES PARA SU USO INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS

Antígeno HAI: preparar con 6,1 ml de Reconstituyente REACTIVOS
HAI. Esperar una hora antes de usar mezclando cada 20 - Cuando todas las diluciones de sueros son reactivas,
minutos para permitir una correcta rehidratación del reactivo. puede ser indicio de autoaglutinación del Antígeno HAI.
870300000 / 01 p. 1/4
Verificar destinando un pocillo de la policubeta para mezclar
microdilutores de 25 ul (uno para cada muestra).
Antígeno HAI y Diluyente de Sueros HAI, sin la Muestra.
Colocar cada microdilutor en el primer pocillo y rotarlo
Si aún en este caso se observa aglutinación, el reactivo
por lo menos 10 veces para asegurar una correcta
estará deteriorado. Desechar.
dilución de la muestra.
- La ausencia de reactividad en todas las diluciones de
3- Realizar diluciones seriadas a partir del primer
sueros, puede ser indicio de deterioro de los reactivos. pocillo (dilución 1/2), pasando los microdilutores al
Procesar Muestra con positividad conocida. pocillo siguiente (dilución 1/4) y así sucesivamente
hasta la dilución que se desea investigar (por ejemplo:
MUESTRA 1/8, 1/16, 1/32), rotando en cada paso el microdilutor
Suero por lo menos 10 veces para asegurar una correcta
a) Recolección: el paciente debe estar preferentemente en dilución de la muestra. Si se emplea una micropipeta
ayunas. Obtener suero de la manera usual. No usar plasma. automática de 25 ul para la toma y/o dilución de la
b) Aditivos: no se requieren. No agregar conservadores. muestra, homogeneizar por carga y descarga. Trans-
c) Sustancias interferentes conocidas: hemólisis o hiperli- ferir 25 ul de pocillo a pocillo hasta la dilución que se
pemia (con quilomicronemia) producen resultados erróneos. desee investigar. Descartar los últimos 25 ul.
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: el suero 4- Colocar en los pocillos conteniendo las diluciones
debe ser preferentemente fresco. En caso de no procesarse 1/2 y 1/4, una gota (25 ul) de GR no sensibilizados
en el momento, puede conservarse en el refrigerador (2-10oC) para control de heterofilia.
durante no más de 72 hs contadas a partir del momento de la 5- En el resto de los pocillos, agregar una gota (25 ul)
extracción. Para períodos más prolongados de conservación, de Antígeno HAI.
congelar (a -20oC), evitando reiterar tal procedimiento. 6- Mezclar aplicando suaves golpes en los laterales
Los sueros envejecidos tienden a gelificarse al contacto con de la policubeta.
el 2-ME, provocando resultados falsos positivos. 7- Dejar en reposo, a resguardo de vibraciones, du-
rante 90 minutos.
MATERIAL REQUERIDO 8- Leer a partir de los 90 minutos.
1- Provisto Se puede aumentar la nitidez de la apreciación, leyen-
- 1 frasco vacío (para trasvasar el 2-ME de la ampolla) do sobre un espejo, iluminando la placa desde arriba
- 5 policubetas con 96 pocillos de fondo en U e interponiendo un papel blanco y traslúcido entre la
- Accesorios policubeta y la fuente de luz.
2- No provisto II- TITULACION CON 2-ME
- microdilutores (25 ul) o micropipetas automáticas (25 ul) 1- Colocar una gota de suero en el primer pocillo
- microgoteros (25 ul) empleando goteros plásticos descartables, mante-
- tubos de ensayo y material volumétrico adecuado niéndolos en posición vertical (uno por cada suero).
- cinta adhesiva 2- Diluir al 1/2 agregando una gota de 2-Mercaptoetanol al 1%
- papel de filtro a los mismos pocillos (utilizar un único gotero descartable).
3- Sellar estos pocillos con cinta adhesiva y mezclar
RECOMENDACIONES PREVIAS aplicando suaves golpes en los laterales de la policubeta.
Microdilutores 4- Incubar 30-60 minutos a 37oC o 90 minutos a tem-
- Acondicionamiento previo: antes de usar los microdilutores, peratura ambiente.
sumergirlos en un recipiente con agua destilada y apoyarlos 5- Retirar la cinta adhesiva, pasar un trapo húmedo por
sobre papel de filtro para asegurar una correcta toma de la base de la policubeta y, con microgotero de 25 ul,
la muestra. colocar una gota de Diluyente de Sueros HAI en los
- Lavado: antes de tomar una nueva muestra con los micro- restantes pocillos a utilizar hasta la dilución deseada.
dilutores, descargar el volumen residual sobre papel de 6- Realizar los pasos 3 a 8 descriptos en la Titulación I.
filtro. Luego pasarlos sucesivamente por dos recipientes
con agua destilada y apoyarlos sobre papel de filtro. III- ABSORCION CON GLOBULOS ROJOS
NO SENSIBILIZADOS
Policubeta En sueros que presenten heterofilia los anticuerpos
Para eliminar la carga electrostática es necesario pasar un heterófilos pueden adsorberse sobre GR no sensibi-
trapo húmedo por la base de la misma. lizados de la siguiente forma: en un tubo de hemólisis
colocar 50 ul de GR no sensibilizados provistos + 50 ul
de suero en ensayo. Tapar para evitar la evaporación.
PROCEDIMIENTO Dejar la suspensión durante 30 minutos a 37oC agi-
Seleccionar una policubeta con pocillos sin usar de fondo en U. tando extemporáneamente. Luego centrifugar a 2000
I- TITULACION SIN 2-ME rpm durante 5 minutos. Del sobrenadante se toman
1- Con microgotero de 25 ul, colocar una gota de Diluyente 50 ul y se emplea como dilución 1/2, colocándola en
de Sueros HAI en todos los pocillos a usar de la policubeta. el primer pocillo. Si se emplea en titulación con 2-ME
2- Tomar una alícuota de cada suero a ensayar con este pocillo corresponde a dilución 1/4.
870300000 / 01 p. 2/4
No reactivo: presencia de un sedimento en forma de botón
o pequeño anillo de bordes regulares.
Reactivo: formación de una película o manto que cubre el
50% o más del fondo de los pocillos. Si no se usan micro- IMAGEN POSITIVA IMAGEN NEGATIVA
dilutores, la imagen del manto puede ser más pequeña.
IMAGEN NEGATIVA
IMAGEN DUDOSA
Dentro de las técnicas inmunológicas, la HAI es considerada
IMAGEN POSITIVA un método confiable para la determinación de anticuerpos
específicos. No obstante sus resultados, al igual que los de
cualquier método serológico, sólo constituyen un dato auxi-
liar para el diagnóstico. Es por esta razón que los informes
deben ser considerados en términos de probabilidad. En este
caso, mayor o menor probabilidad de parasitosis por T. cruzi.
Cualquier resultado Reactivo debe ser verificado por otra téc-
(1) (2)
nica. Recordar el criterio recomendado por el Instituto Fatala
Chaben, según el cual el inmunodiagnóstico de la infección
(1) Manto.
deberá hacerse con un mínimo de dos de los siguientes
(2) Punto final (50%).
indirecta, ELISA, aglutinación de partículas (látex), debi-
TECNICA SCREENING O DESCARTE POR 1 TITULO damente validados por el Centro Nacional de Referencia.
Procedimiento de titulación
PROCEDIMIENTO Sueros con títulos mayores o iguales a 1/16, se consideran
1- Con microgotero de 25 ul, colocar una gota de Dilu- reactivos para anticuerpos anti-T. cruzi.
yente de Sueros HAI en todos los pocillos a utilizar de la Cuando se observan resultados positivos (sueros reactivos)
policubeta (un pocillo por cada muestra). y además se presenta manto en los pocillos destinados a
2- Sumergir un ansa limpia (provista) en la muestra. control de heterofilia (diluciones 1/2 y 1/4), debe realizarse
3- Colocar el ansa cargada en el pocillo que contiene el otra titulación con los sueros correspondientes pero previa-
Diluyente de Sueros HAI, rotando la misma para obte- mente tratados con 2-ME o adsorbidos con GR no sensi-
ner un buen mezclado y distribuir la gota sobre todo el bilizados. El propósito de estos tratamientos es eliminar la
fondo del pocillo. Retirar el ansa y secarla con papel de reacción inespecífica. En el primer caso el agente reductor
filtro, lavar en dos recipientes con agua destilada. Secar (2-ME) elimina la capacidad aglutinante de los anticuerpos
nuevamente con papel de filtro. Proceder de la misma heterófilos, mientras que los GR no sensibilizados los elimina
manera para cada nueva muestra. por adsorción.
4- Agregar con microgotero de 25 ul, una gota de Antí- Técnica de screening o descarte por 1 título
geno HAI reconstituido y homogeneizado a cada pocillo. En las condiciones del ensayo, sueros con títulos mayores
5- Agitar la policubeta golpeando con los dedos en las o iguales a 1/12, se consideran reactivos para anticuerpos
paredes laterales, durante 30 segundos por lo menos, anti-T.cruzi. La imagen que presenta un suero reactivo es
para asegurar un buen mezclado. de película o manto en el fondo del pocillo.
6- Dejar reposar, al resguardo de vibraciones durante
2 horas. CONTROL DE CALIDAD
7- Efectuar la lectura. En caso de que la lectura de los Como punto de referencia de la reacción, pueden procesarse
resultados se efectúe en un plazo mayor de 2 horas, la simultáneamente un Control Positivo y un Control Negativo
policubeta deberá taparse con una cinta adhesiva trans- utilizándolos de la misma manera que la muestra.
parente para evitar evaporaciones.
INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS Otras causas de resultados erróneos son:
No reactivo: presencia de un sedimento en forma de botón. - Falta de acondicionamiento de la policubeta y los microdi-
Reactivo: formación de una película o manto en el fondo de lutores (Ver RECOMENDACIONES PREVIAS).
los pocillos. En caso de observar la presencia de un pequeño - Policubetas rayadas por uso reiterado. No se aconseja
anillo de bordes regulares, la muestra se considerará dudosa reutilizar pocillos.
y deberá ser ensayada por otro método. - Falta de homogeneización de los reactivos antes de su uso.
870300000 / 01 p. 3/4
- Deficiencias de mezclado. EXPLICACION DE LOS SIMBOLOS
- Vibraciones accidentales durante el reposo necesario para
Antígeno HAI Buffer HAI
el desarrollo de la reacción.
- Sueros envejecidos o congelados y descongelados repe- Antígeno HAI Buffer HAI
tidamente. Reconstituy. HAI GR no sensib.
- Contaminaciones accidentales de los reactivos o del ma-
Reconstituyente HAI GR no sensibilizados
terial empleado en el ensayo.
- Exceso o defecto de Diluyente de Sueros HAI en los pocillos Sol. Proteica 2-ME
de la policubeta. Solución Proteica 2-Mercaptoetanol
- Diluyente de Sueros HAI que tenga más de 5 días de
preparación. Control + Control -
- No respetar los tiempos y temperaturas de incubación en Control Positivo Control Negativo
el tratamiento con 2-ME al 1%.
- 2-Mercaptoetanol al 1% no preparado en el momento.
C
PERFORMANCE
Trabajos experimentales realizados sobre muestras pobla-
cionales endémicas y no endémicas, mostraron que:
1) En poblaciones endémicas, empleando el método de HAI, P Representante autorizado en la Comunidad Europea
el 98% de los títulos menores a 1/8 y el 95% de los títulos
mayores o iguales a 1/8 fueron confirmados por los métodos
tomados como referencia. X Contenido suficiente para <n> ensayos

2) En poblaciones no endémicas, el 100% de los individuos
sanos presentó títulos menores a 1/8 determinados por HAI.
3) En el 100% de los individuos con serología positiva con- l Límite de temperatura (conservar a)
firmada por los métodos tomados como referencia y con
parasitosis demostrada por xenodiagnóstico y/o hemocultivo,  No congelar
se observaron títulos mayores o iguales a 1/32 determinados F Riesgo biológico
con Chagatest HAI.
- 96 determinaciones de 5 títulos o 480 de un título
(Cód. 1293205) g Número de lote
M Elaborado por:
BIBLIOGRAFIA
Xn
- Mazza, S. - VI Congreso Nacional de Medicina (Córdoba), Nocivo
pág. 155 (1938).
- Cerisola, J.A. - La Prensa Médica Argentina 49/34:1761
(1962). Xi
Irritante
- Fontenla S., Moretti, E. y González, G. - 50° Triduo de la
ABA, Huerta Grande (Córdoba), 1985. i Consultar instrucciones de uso
- Basso, A. y col. - 50° Triduo de la ABA. Huerta Grande Calibr. Calibrador
(Córdoba), 1985.
- Lorenzo , L.; Capriotti, G.; Rojkín, F. - Rev. Arg. Transf. b Control
XVII/1: 51, 1991.
- Ministerio de Salud y Acción Social, Instituto Nacional de b Control Positivo
Parasitología "Doctor Mario Fatala Chabén" - Normas c Control Negativo
ministerial 523/97, 1998. h Número de catálogo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
Disp. Nº: 1280/88-3403/95-6862/01
-6643/09 2000 Rosario - Argentina
870300000 / 01 p. 4/4 UR140908
Cholinesterase
C Para la determinación de colinesterasa en suero o plasma

Se ha demostrado la existencia de dos colinesterasas: una de trabajo en el laboratorio de química clínica.
es la acetilcolinesterasa o colinesterasa verdadera (acetil Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
colina hidrolasa, EC. 3.1.1.7) que se encuentra en eritroci- acuerdo a la normativa local vigente.
tos y terminaciones de nervios colinérgicos, y la otra es la
butirilcolinesterasa o pseudocolinesterasa (EC. 3.1.1.8) que ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
se encuentra en plasma, hígado, músculo liso y adipocitos. ALMACENAMIENTO
La colinesterasa del suero o plasma (Che) o pseudocolines- Reactivos Provistos: estables en refrigerador (2-10oC)
terasa está asociada a las siguientes condiciones clínicas: hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. Una vez
1) Constituye un índice de función hepática, especialmente abiertos, no deben permanecer destapados ni fuera del refri-
en hepatopatías crónicas. Se observa una buena correlación gerador por períodos prolongados. Evitar contaminaciones.
entre el aumento de GOT (AST) y la disminución de Che, en Proteger de la luz.
hepatitis infecciosas.
2) Su disminución indica intoxicación por insecticidas orga- MUESTRA
nofosforados, inhibidores de la Che. Suero o plasma heparinizado o plasma con EDTA
3) En algunos individuos sensibles a la succinilcolina, rela- a) Recolección: obtener la muestra de la manera usual.
jante muscular administrado durante la anestesia, se observa b) Aditivos: en caso de emplear plasma como muestra, se
una apnea post-anestésica prolongada y en algunos casos, recomienda el uso de heparina o EDTA (Anticoagulante W
fatal. Esto coincide con la presencia de una variante genética de Wiener lab.) como anticoagulantes para su obtención.
de la Che ("atípica") incapaz de hidrolizar a la succinilcolina. c) Sustancias interferentes conocidas: no se observan
En sujetos normales, esta droga es hidrolizada "in vivo" por la interferencias por bilirrubina hasta 500 mg/l, triglicéridos
Che, en 1 a 4 minutos, por eso la apnea también se relaciona hasta 14 g/l, hemoglobina hasta 1000 mg/dl.
con bajos niveles de Che total. Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
Existen métodos de inhibición diferencial que permiten de- drogas en el presente método.
tectar a sujetos portadores de colinesterasa atípica. d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
muestra debe ser preferentemente fresca. Puede conser-
FUNDAMENTOS DEL METODO varse hasta una semana en refrigerador (2-10oC) o 1 año a
Che -20oC, sin agregado de conservadores.
butiriltiocolina + H2O tiocolina + butirato
tiocolina + ferricianuro de potasio (III)
- Material volumétrico para medir los volúmenes indicados.
ditio-bis-colina + ferrocianuro de potasio (II) - Analizador automático
REACTIVOS PROVISTOS
A. Reactivo A: buffer pirofosfato 73 mM, ferricianuro de PROCEDIMIENTO
potasio (III) 2,4 mM, pH 7,7. (Analizador automático)
B. Reactivo B: solución de buffer de Goods 10 mM, butiril- A continuación se detalla un procedimiento general para
tiocolina 92 mM, pH 4,0. Cholinesterase en un analizador automático. Cuando
se implemente la técnica en un analizador en particular,
REACTIVOS NO PROVISTOS siga las instrucciones de trabajo del mismo.
- Calibrador A plus de Wiener lab.
- Solución fisiológica (NaCl 9 g/) Muestra o Calibrador 4 ul
Reactivo A 150 ul
Incubación durante 300 segundos a 37oC
Reactivo B 30 ul
PRECAUCIONES Incubación durante 120 segundos a 37oC. Lectura de ab-
861232260 / 02 p. 1/6
(NaCl 9 g/l), repetir la determinación y multiplicar el resultado
sorbancia inicial a 405 nm (A1). A los 90 segundos exacta-
mente medidos con cronómetro, se registra una segunda
lectura (A2). Para obtener el resultado de colinesterasa
en U/l, se multiplica la diferencia de absorbancia (∆A =
Para las instrucciones de programación, consulte el manual
A2 - A1) por el factor.
del usuario del analizador en uso. Para la calibración debe
utilizarse Calibrador A plus de Wiener lab.
CALIBRACION
PRESENTACION
El Calibrador A plus es procesado de la misma manera
que las muestras. A partir de él se calcula el factor corres-
pondiente. Ingresar el valor de concentración del calibrador,
(Cód. 1999704)
cada vez que se cambie de lote.
METODO DE CONTROL DE CALIDAD - 1 x 10 ml Reactivo B
Procesar 2 niveles de un material de control de calidad (Cód. 1009278)
(Standatrol S-E 2 niveles) con actividades conocidas de
colinesterasa, con cada determinación. 60 ml: - 1 x 50 ml Reactivo A
VALORES DE REFERENCIA (Cód. 1009350)
Suero o plasma 120 ml: - 2 x 50 ml Reactivo A
Niños, hombres y mujeres > 40 años: 5320 - 12920 U/l - 1 x 20 ml Reactivo B
Mujeres entre 16 y 39 años, no embarazadas y que no toman (Cód. 1009607)
anticonceptivos orales: 4260 - 11250 U/l
Mujeres entre 18 y 41 años, embarazadas o tomando anti- BIBLIOGRAFIA
conceptivos orales: 3650 - 9120 U/l - Young D. Effects of Preanalytical Variables on Clinical
Es recomendable que cada laboratorio establezca sus pro- Laboratory Test, editado por AACC, second edition, 1997.
pios valores de referencia, teniendo en cuenta sexo, edad, - Young D. and Friedman R. Effects of Disease on Clinical
hábitos alimenticios, medición y otros factores propios de Laboratory Test, editado por AACC, third edition, 1997.
la población. - Young D. Effects of Drugs on Clinical Laboratory Test,
AACC, editado por AACC, fourth edition, 2001.
CONVERSION DE UNIDADES AL SISTEMA SI - Burtis - Ashwood. Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry,
Colinesterasa (kU/l) = Colinesterasa (U/l) x 0,001 editado por W.B. Saunders Co., fifth edition, United States
of America ,2001.
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO - Bergmeyer H. U. Methods of Enzymatic Analysis, Vol V
Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA. 3rd.Edition.
Para preservar la integridad de los reactivos deben evitarse - User Verification of Performance for Precision and True-
todo tipo de contaminaciones, empleando para la medición ness; Approved Guideline - Second Edition. CLSI EP15-A2
únicamente micropipetas perfectamente limpias y secas. Vol. 24 Nº 25, 2004.
Se recomienda utilizar Standatrol S-E 2 niveles de Wiener - Evaluation of the Linearity of Quantitative Measurement
lab, como material de control de calidad, ya que con controles Procedures: A Statistical Approach; Approved Guideline.
de otras marcas comerciales pueden obtenerse valores dife- CLSI EP6-A Vol. 23 Nº 16, 2003.
rentes al rango especificado, dado que los mismos dependen - Method Comparison and Bias estimation Using Patient
del método o sistema utilizado. Samples; Approved Guideline - Second Edition. CLSI
EP9-A2 Vol. 22 Nº 19, 2002.
PERFORMANCE - Protocols for Determination of Limits of Detection and
a) Precisión: basado en el protocolo EP15A del CLSI, se Limits of Quantitation; Approved Guideline. CLSI EP17-A
obtuvieron los siguientes coeficientes de variación como Vol. 24 Nº 34, 2004.
estimadores de la precisión intraensayo (CVi) y total (CVt): - den Blaauwen DH, Poppe WA, Tritschler W. - J Clin Chem
Nivel CV CVt Clin Biochem 21:381-386, 1983.
2553 U/l 1,4% 1,5%
4283 U/l 2,8% 2,5%
6791 U/l 1,5% 1,5%
b) Límite de detección: 70 U/l.
c) Límite de cuantificación: 262 U/l.
d) Linealidad: la reacción es lineal hasta 14000 U/l. Para
valores superiores, diluir la muestra con solución fisiológica
861232260 / 02 p. 2/6
Símbolos
C
M Elaborado por:

Europea Nocivo

Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
861232260 / 02 p. 3/6 UR130730
CK-MB
C Control - 3 niveles
Lote: 1401132080 (Exp.: 2016/01) Para control de la precisión en la determinación de la
Nivel 1: 132080 (Exp.: 2016/01)
Nivel 2: 132080 (Exp.: 2016/01)
isoenzima MB de Creatina Kinasa
Nivel 3: 132080 (Exp.: 2016/01)
APLICACIONES pos contra el virus de la inmunodeficiencia humana (HIV).

CK-MB Control 3 niveles es un control liofilizado basado No obstante, debido a que ningún método puede descartar
en albúmina sérica bovina que emplea isoenzima CK-MB el riesgo potencial de infección con absoluta certeza, tanto
humana y está diseñado para ser usado en el control de la los controles como todas las muestras deben manipularse
precisión de los kits CK-MB NAC UV AA líquida y CK-MB como si se tratara de material infectivo.
DS UV unitest. Utilizar guantes y protección ocular adecuada.
Evitar ingestión y/o contacto con la piel y mucosas. En
REACTIVOS PROVISTOS caso de exposición, proceda según las instrucciones de las
CK-MB Control nivel 1: control liofilizado basado en albú- autoridades sanitarias competentes.
mina sérica bovina con el agregado de isoenzima CK-MB Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
humana en niveles de actividad bajos y/o cercanos a los de trabajo en el laboratorio de química clínica.
normales. Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
CK-MB Control nivel 2: control liofilizado basado en albú- acuerdo a la normativa local vigente.
mina sérica bovina con el agregado de isoenzima CK-MB
humana en niveles de actividad cercanos a los normales. ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
CK-MB Control nivel 3: control liofilizado basado en albú- ALMACENAMIENTO
mina sérica bovina con el agregado de isoenzima CK-MB Los controles liofilizados son estables en refrigerador (2-
humana en niveles de actividad patológicos. 10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
Una vez reconstituidos son estables 3 días en refrigerador
REACTIVOS NO PROVISTOS (2-10oC) o 2 días a 25oC. Mantener los frascos bien cerra-
Agua destilada o desmineralizada. dos, refrigerados y protegidos de la luz luego de su empleo.
Cuando los controles reconstituidos se conservan a -20oC,
INSTRUCCIONES PARA SU USO son estables 3 meses en dichas condiciones. Se recomien-
Abrir el vial, retirando el tapón de goma lentamente para da alicuotarlos y congelarlos inmediatamente luego de su
evitar la pérdida del material liofilizado. Reconstituir agre- reconstitución. No volver a congelar una vez descongelados.
gando la cantidad de agua destilada o desmineralizada
indicada en el rótulo, tapar y homogeneizar suavemente por PRESENTACION
inversión hasta la disolución completa del material. Evitar la 3 x 3 ml: 1 x 3 ml Nivel 1
formación de espuma. 1 x 3 ml Nivel 2
Llenar el volumen necesario en un recipiente para muestras 1 x 3 ml Nivel 3
y analizar como si fuese una muestra de paciente. (Cód. 1271553)
Es recomendable procesar el control en forma diaria y para-
lela a las muestras de pacientes y establecer intervalos de BIBLIOGRAFIA
control que se adapten a las necesidades de cada laboratorio - Documentación de Wiener Laboratorios.
en particular. - Young, D.S. - «Effects of Drugs on Clinical Laboratory
Los resultados deben ubicarse dentro de los intervalos Tests», AACC Press, 4th ed., 2001.
definidos. Cada laboratorio debe establecer lineamientos - Tietz Textbook of Clinical Chemistry, Saunders Co., 3rd
para tomar medidas correctivas si los valores se ubicaran ed. (1999).
fuera del intervalo. - CLSI Document “User Demonstration of performance for
Cada laboratorio debe establecer procedimientos de control Precision and Accuracy“, EP15-A2 (2005).
de calidad para cumplir con las regulaciones vigentes o con
los requisitos de acreditación de los mismos.
PRECAUCIONES
Los controles han sido preparados a partir de material no
reactivo para antígeno de superficie de Hepatitis B (HBsAg),
anticuerpos contra el virus de la Hepatitis C (HCV) y anticuer-
860243500 / 20 p. 1/6
VALORES ASIGNADOS DE CK-MB (U/l)* - BT 3000 PLUS / WIENER LAB, CB SERIES
NIVEL 1 NIVEL 2 NIVEL 3
KIT VALOR RANGO VALOR RANGO VALOR RANGO
MEDIO ACEPTABLE MEDIO ACEPTABLE MEDIO ACEPTABLE
CK-MB DS UV unitest 27,1 20,3 33,9 41,6 33,3 49,9 81,5 65,2 97,8
CK-MB NAC UV AA líquida** 29,6 22,2 37,0 46,0 36,8 55,2 88,3 70,6 106,0
VALORES ASIGNADOS DE CK-MB (U/l)* - KONELAB SERIES / WIENER LAB. CT SERIES

VALORES ASIGNADOS DE CK-MB (U/l)* - METROLAB 2300 PLUS / WIENER LAB. CM SERIES
VALORES ASIGNADOS DE CK-MB (U/l)* - SELECTRA 1 / 2 / E

VALORES ASIGNADOS DE CK-MB (U/l)* - TARGA BT 3000

VALORES ASIGNADOS DE CK-MB (U/l)* - WIENER LAB. CMD 800 SERIES

* a 37oC
** Valores obtenidos empleando técnica con calibración
860243500 / 20 p. 2/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
860243500 / 20 p. 3/6 UR140210
CK-MB
Nivel 1: 136050 (Exp.: 2016/03)
Nivel 2: 136050 (Exp.: 2016/03)
Nivel 3: 136050 (Exp.: 2016/03)

PRECAUCIONES
860243500 / 21 p. 1/6
CK-MB NAC UV AA líquida** 35,1 26,3 43,9 45,9 36,8 55,1 105 84 126

CK-MB DS UV unitest 37,0 27,8 46,3 47,6 38,0 57,1 107 86 129



* a 37oC
860243500 / 21 p. 2/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
860243500 / 21 p. 3/6 UR140509
CK-MB
Nivel 1: 142030 (Exp.: 2016/06)
Nivel 2: 142030 (Exp.: 2016/06)
Nivel 3: 142030 (Exp.: 2016/06)

PRECAUCIONES
860243500 / 22 p. 1/6




* a 37oC
860243500 / 22 p. 2/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
860243500 / 22 p. 3/6 UR140711
CK-MB
Nivel 1: 150430 (Exp.: 2016/10)
Nivel 2: 150430 (Exp.: 2016/10)
Nivel 3: 150430 (Exp.: 2016/10)

PRECAUCIONES
860243500 / 23 p. 1/6



CK-MB DS UV unitest 29,9 20,9 38,9 44,0 33,0 55,0 84,0 63 105
CK-MB NAC UV AA líquida** 32,4 22,7 42,1 45,7 34,3 57,1 88,4 66 111

* a 37oC
860243500 / 23 p. 2/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
860243500 / 23 p. 3/6 UR141027
CK-MB
Nivel 1: 156770 (Exp.: 2017/01)
Nivel 2: 156770 (Exp.: 2017/01)
Nivel 3: 156770 (Exp.: 2017/01)

PRECAUCIONES
860243500 / 24 p. 1/6




* a 37oC
860243500 / 24 p. 2/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
860243500 / 24 p. 3/6 UR150219
CK-MB
Lote: 1505165490 Para control de la precisión en la determinación de la
Nivel 1: 165490
Nivel 2: 165490 isoenzima MB de Creatina Kinasa
Nivel 3: 165490

PRECAUCIONES
860243500 / 25 p. 1/6




* a 37oC
860243500 / 25 p. 2/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
860243500 / 25 p. 3/6 UR150529
CK-MB
Nivel 1: 169840
Nivel 3: 169840

PRECAUCIONES
860243500 / 26 p. 1/6
CK-MB DS UV unitest 29,7 22,3 37,1 44,3 35,4 53,2 93,4 74,7 112
CK-MB NAC UV AA líquida** 28,6 21,5 35,8 45,1 36,1 54,1 91,7 73,4 110

CK-MB DS UV unitest 31,5 23,6 39,4 48,5 38,8 58,2 102 81,6 122



* a 37oC
860243500 / 26 p. 2/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
860243500 / 26 p. 3/6 UR150807
CK-MB
Nivel 1: 174030
Nivel 3: 174030

PRECAUCIONES
860243500 / 27 p. 1/6

CK-MB NAC UV AA líquida** 33,2 24,9 41,5 50,0 40,0 60,0 102 81,6 122



* a 37oC
860243500 / 27 p. 2/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
860243500 / 27 p. 3/6 UR150930
CK-MB
Nivel 1: 181980
Nivel 3: 181980

PRECAUCIONES
860243500 / 28 p. 1/6




* a 37oC
860243500 / 28 p. 2/6
Símbolos
C
M Elaborado por:

Europea Nocivo

Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
860243500 / 28 p. 3/6 UR160122
CK-MB DS
C Método de doble sensibilidad para la determinación de

unitest
MONOCLONAL CK-MB en suero o plasma
SIGNIFICACION CLINICA teniendo cantidades suficientes para obtener las siguientes

La Creatina Kinasa (CK) es una enzima intramuscular concentraciones una vez reconstituidos:
constituida por una subunidad M (músculo) y otra subuni- creatina fosfato..................................................... 30 mmol/l
dad B (brain = cerebro) que se combinan dando lugar a las ADP........................................................................ 2 mmol/l
isoenzimas CK-MM (muscular), CK-BB (cerebral) y CK-MB glucosa................................................................. 20 mmol/l
(miocárdica). NADP...................................................................... 2 mmol/l
La elevación sérica de CK y de CK-MB constituye un indi- hexoquinasa (HK)................................................ ≥ 2500 U/l
cador de injuria de miocardio. Luego de un infarto agudo de glucosa-6-fosfato deshidrogenasa (G-6-PDH).... ≥ 2000 U/l
miocardio, en aproximadamente el 55% de los casos, el pico acetato de magnesio............................................ 10 mmol/l
máximo de elevación de CK y CK-MB se produce en forma AMP........................................................................ 5 mmol/l
simultánea, mientras que en el 45% de los casos la elevación di-(adenosina-5') pentafosfato............................... 10 umol/l
máxima de CK-MB precede a la de CK total. N-acetilcisteína (NAC).......................................... 20 mmol/l
6-fosfogluconolactonasa (6-PGL).......................... ≥ 200 U/l
FUNDAMENTOS DEL METODO 6-fosfogluconato deshidrogenasa (6-PGDH)........ ≥ 400 U/l
El esquema reaccional luego de la inhibición específica de Anticuerpos monoclonales capaces de inhibir 1000 U/l de
las subunidades CK-M con anticuerpos monoclonales (que CK-M (a 25oC) o 2000 U/l de CK-M (a 37oC).
inhiben tanto la isoenzima MM como las subunidades M de B. Reactivo B: solución de buffer imidazol 100 mmol/l; pH
la CK-MB), es el siguiente: 6,7.
CK Control: vial conteniendo CK-MB de origen humano, liofili
creatina fosfato + ADP creatina + ATP zada (ver tabla adjunta para valor teórico).
HK
ATP + D-glucosa ADP + D-glucosa-6-fosfato INSTRUCCIONES PARA SU USO
G-6-PDH Reactivo A: agregar 2,5 ml de Reactivo B a un vial de Reac-
D-glucosa-6-fosfato + NADP+ 6-fosfo-D-glucono- tivo A. Tapar y agitar hasta disolución completa.
lactona + NADPH + H+ Reactivo B: listo para usar.
6-PGL Control: abrir el vial teniendo la precaución de no perder
6-fosfo-D-gluconolactona + H2O 6-fosfo-D-gluconato material. Pipetear exactamente 1 ml de agua destilada. Tapar
6-PGDH y esperar 5 minutos. Disolver el contenido completamente
6-fosfo-D-gluconato + NADP+ D-ribulosa-5-fosfato
por inversión del vial. El Control de CK-MB reconstituido se
+ CO2 + NADPH
trata de la misma manera que una muestra desconocida.
El empleo de 6-fosfo-D-gluconolactonasa (6-PGL) y 6-fosfo-
gluconato deshidrogenasa (6-PGDH) aumenta la sensibilidad PRECAUCIONES
ya que provoca la liberación de otra molécula de NADPH al Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
medio de reacción, duplicando la señal. No ingerir. Evitar el contacto con piel y ojos. En caso de derrame
Dado que la isoenzima CK-BB se encuentra raramente en o salpicaduras, lavar con abundante agua la zona afectada.
suero y la actividad catalítica de las subunidades CK-M y El Reactivo B contiene azida.
CK-B prácticamente no difiere, la actividad catalítica de la El Control ha sido examinado para HIV, HCV y HBV encon-
CK-MB puede calcularse de la actividad de CK-B medida, trándose no reactivo. No obstante, debe ser empleado como
multiplicando el resultado por 2. si se tratara de material infectivo.
HK: hexoquinasa (levadura); G-6-PDH: glucosa-6-fosfato Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
deshidrogenasa (microbiana); 6-PGL: 6-fosfo-D-glucono- de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
lactonasa (microbiana); 6-PGDH: 6-fosfogluconato deshi- Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
drogenasa (levadura); ATP/ADP; adenosina 5’ tri/difosfato; acuerdo a la normativa local vigente.
NADH: nicotinamida-adenina dinucleótido reducida; NAD+:
nicotinamida-adenina dinucleótido. ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
ALMACENAMIENTO
REACTIVOS PROVISTOS Reactivos Provistos: estables en refrigerador (2-10oC)
A. Reactivo A: viales para determinaciones individuales con- hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
870320000 / 01 p. 1/8
Reactivo A reconstituido: en refrigerador (2-10oC) es
estable 7 días a partir del momento de su reconstitución. Mezclar inmediatamente por inversión. Esperar 5 mi-
Control reconstituido: estable 3 días refrigerado (2-10oC), nutos. Ajustar la absorbancia a un valor de referencia
o 3 meses congelado (-20oC). No congelar y descongelar y disparar simultáneamente el cronómetro. Registrar la
repetidamente. absorbancia cada minuto, durante 5 minutos. Determi-
nar la diferencia promedio de absorbancia/min (∆A/min)
INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS restando a cada lectura la anterior y promediando los
REACTIVOS valores. Utilizar este promedio para los cálculos.
La dificultad en obtener los valores de los controles dentro
del rango asignado es indicio de deterioro de los Reactivos.
En tal caso, desechar. CALCULO DE LOS RESULTADOS
Cuando el espectrofotómetro ha sido llevado a 0 con agua CK-MB (U/l) = ∆A/min x factor
destilada, lecturas de Absorbancia del Reactivo A reconstituido Medida a 340 nm: CK-MB (U/l) = ∆A/min x 4.127
> 0,800 D.O. (a 340 nm) son indicio de deterioro del mismo. Medida a Hg 334: CK-MB (U/l) = ∆A/min x 4.207
Medida a Hg 366: CK-MB (U/l) = ∆A/min x 7.429
MUESTRA Los factores arriba mencionados ya contemplan la corrección
Suero o plasma necesaria para convertir el valor de CK-B en CK-MB.
a) Recolección: obtener de la manera usual.
b) Aditivos: en el caso de que la muestra a emplear sea plas- METODO DE CONTROL DE CALIDAD
ma, debe usarse heparina o EDTA como anticoagulante. Se Procesar un material de control de calidad (Control CK-MB)
recomienda el empleo de Anticoagulante W de Wiener lab. con actividades conocidas de CK-MB, con cada determi-
c) Sustancias interferentes conocidas: los sueros con nación.
hemólisis visible o intensa, producen valores falsamente
aumentados, por lo que no deben ser usados. VALORES DE REFERENCIA
No se observan interferencias por hemoglobina hasta 50 mg/dl,
Temperatura 25oC(1) 30oC(2) 37oC(2)
bilirrubina hasta 2,5 mg/dl (25 mg/l) y heparina hasta 20 U/ml.
Valores 10 U/l 16 U/l 25 U/l
(1)
Stein, W. - Med. Welt. 36:572, 1985.
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la mues-
(2)
Valores calculados
tra debe ser fresca. En caso de no procesarse en el momento, Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios
puede ser conservada 12 horas a temperatura ambiente (< valores de referencia.
25oC), 3 días refrigerada (2-10oC) o 1 mes congelada (-20oC).
MATERIAL REQUERIDO (no provisto) CK-MB (U/l) x 0,01 = CK-MB (ukat/l)
- Espectrofotómetro.
- Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados. INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS
- Baño de agua a la temperatura indicada en PROCEDIMIENTO. Se tiene alta probabilidad de daño de miocardio si se cum-
- Cronómetro. plen simultáneamente las siguientes condiciones:
1- La actividad de CK total excede los siguientes rangos
CONDICIONES DE REACCION normales:
- Longitud de onda: 340 nm (Hg 334 ó 366).
- Temperatura de reacción: 25, 30 ó 37oC. Temperatura 25oC(1) 30oC(2) 37oC(3)
- Tiempo de reacción: 10 minutos Varones ≤ 80 U/l ≤ 130 U/l ≤ 195 U/l
- Volúmenes de muestra y reactivo: pueden variarse propor- Mujeres ≤ 70 U/l ≤ 110 U/l ≤ 170 U/l
cionalmente (ej. 40 ul muestra + 1 ml Reactivo A reconstituido (1)
Stein W. - Med. Welt. 1985; 36:572.
o 20 ul muestra + 500 ul Reactivo A reconstituido). (2)
Szaz G., Busch E.W. - Third European Congress of Clinical
Chemistry, Brighton, England, 3-8 June 1979.
(3)
Calculado
PROCEDIMIENTO
2- La actividad de CK-MB excede los valores normales. Ver
Llevar el aparato a cero con agua destilada. Ver INDI-
VALORES DE REFERENCIA.
CIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
3- El porcentaje de CK-MB se encuentra entre el 6-20% del
REACTIVOS. En una cubeta mantenida a la temperatura
valor de CK total. Si el porcentaje es menor al 6% es probable
seleccionada (25, 30 ó 37oC) colocar:
que haya daño del músculo esquelético. Si el porcentaje
Reactivo A reconstituido 2,5 ml supera el 20% del valor total de CK se puede sospechar de
la presencia de una forma macro de CK (CK atípica) que no
Preincubar unos minutos. Luego agregar: es inhibida por los anticuerpos anti CK-M.
Muestra 100 ul La presencia de CK atípica puede determinarse por:
a) Persistencia por más de 48 horas (la CK-MB decae
870320000 / 01 p. 2/8
aproximadamente a las 30-48 horas de iniciado el infarto). - Gerhardt, W.; Waldenstrom, J. - Clin. Chem. 28:277 (1982).
b) Estabilidad frente al tratamiento de la muestra a 40oC - Würzburg, U. et al. - J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 15:131
durante 20 minutos. (1977).
c) Análisis electroforético (se obtiene una banda entre las - Young, D.S. - «Effects of Drugs on Clinical Laboratory
isoenzimas MM y MB). Tests», AACC Press, 4th ed., 2001.
- Tietz Textbook of Clinical Chemistry, Saunders Co., 3rd
Si se sospecha daño de miocardio y los valores se encuen-
ed (1999).
tran por debajo del rango normal, existe la posibilidad de un
- National Committee for Clinical Chemistry Standards (NC-
infarto reciente. En este caso debe repetirse la determinación
CLS). Document “Evaluation of the Linearity of Quanti-tative
luego de 4 horas.
Analytical Methods“, EP6-P (1986).
- NCCLS Document “Evaluation of Precision Performance
of Clinical Laboratory Devices“, EP5-A (1999).
- Stein W. Med Welt; 36:572 (1985).
Muestras con actividad CK total que supera las 1000 U/l (a
- Szasz G, Busch EW. Third European Congress of Clinical
25oC) o las 2000 U/l (a 37oC) deben diluirse con solución
Chemistry, Brighton, England, 3-8. June 1979 (Abstract).
fisiológica (cloruro de sodio 0,9%). El resultado obtenido
debe multiplicarse por la dilución efectuada.
PERFORMANCE
Los ensayos fueron realizados en analizador automático Ex-
press Plus(*). Si se usa el procedimiento manual, se debe va-
lidar que se obtenga una performance similar a la siguiente:
Nivel D.S. C.V.
39,5 U/l ± 0,6 U/l 1,44 %
183,4 U/l ± 1,9 U/l 1,05 %
Precisión total
Nivel D.S. C.V.
39,5 U/l ± 0,8 U/l 1,90 %
183,4 U/l ± 2,6 U/l 1,39 %
b) Sensibilidad analítica: 7,1 U/l.
c) Linealidad: la reacción es lineal hasta una actividad de
CK-MB de 350 U/l. Para valores superiores, se debe diluir
la muestra con solución fisiológica y multiplicar el resultado
d) Correlación: se determinó el valor de CK-MB en 84
muestras con CK-MB DS UV unitest de Wiener lab. y un
kit comercial basado en el mismo principio, obteniéndose el
siguiente coeficiente de correlación:
r = 0.9985, pendiente b = 0.9779, intersección a = -1.5464

del Usuario del analizador en uso.
PRESENTACION
- 28 viales x 2,5 ml + 2 Control c.s.p. 1 ml (Cód. 1271354).
- 28 viales x 2,5 ml + 2 Control c.s.p. 1 ml (Cód. 1009323).
BIBLIOGRAFIA
- D.G.K.C. - Z. Klin. Chem. 10:281 (1972).
- S.S.C.C. - Scand. J. Clin. Lab. Invest. 33:291 (1974).
- I.F.C.C. - Clínica Chimica Acta 105:147F (1980).
- Wu, A.; Bowers, G. - Clin. Chem. 28/10:2017 (1982).
(*)
Símbolos
C
M Elaborado por:

Europea Nocivo

Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870320000 / 01 p. 4/8
LINEA LIQUIDA
CK-MB NAC
C Método UV para la determinación de la isoenzima
AA
MB de Creatina Kinasa en suero o plasma mediante
anticuerpos anti CK-M
SIGNIFICACION CLINICA separados o como Reactivo único, mezclando 5 partes de

La Creatina Kinasa (CK) es una enzima intramuscular consti Reactivo A con 1 parte de Reactivo B (ej.: 5 ml Reactivo A
tuida por una subunidad M (músculo) y otra subunidad B (brain + 1 ml Reactivo B).
= cerebro) que se combinan dando lugar a las isoenzimas Control: abrir el vial teniendo la precaución de no perder
CK-MM (muscular), CK-BB (cerebral) y CK-MB (miocárdica). material. Reconstituir con el volumen de agua destilada
La elevación sérica de CK y de CK-MB constituye un indi indicado en el rótulo. Tapar y esperar 5 minutos. Disolver el
cador de injuria de miocardio. Luego de un infarto agudo de contenido completamente por inversión del vial. El Control
miocardio, en aproximadamente el 55% de los casos, el pico de CK-MB reconstituido se trata de la misma manera que
máximo de elevación de CK y CK-MB se produce en forma una muestra desconocida.
simultánea, mientras que en el 45% de los casos la elevación
máxima de CK-MB precede a la de CK total. PRECAUCIONES
FUNDAMENTOS DEL METODO El Control ha sido examinado para antígeno de superficie
El método se basa en la inhibición específica de las subu del virus de hepatitis B, virus de hepatitis C y anticuerpos
nidades CK-M con anticuerpos anti CK-M. Los anticuerpos contra HIV 1/2, encontrándose no reactivo. No obstante, las
inhiben tanto la isoenzima MM como las subunidades M co muestras y el Control deben manipularse como si fueran
rrespondientes a CK-MB. Las subunidades B se determinan capaces de transmitir infección.
mediante el empleo de un sistema reactivo basado en una Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
técnica analítica optimizada por la IFCC, con N-acetilciste de trabajo en el laboratorio de química clínica.
ína como activador, adicionado de anticuerpos anti CK-M. Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
REACTIVOS PROVISTOS
A. Reactivo A: solución de buffer imidazol. ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
B. Reactivo B: solución conteniendo creatina fosfato, anti ALMACENAMIENTO
cuerpos anti-CK M y componentes reactivos en cantidades Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10oC)
suficientes para las siguientes concentraciones finales: hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
Una vez abiertos, no deben permanecer fuera del refrige
imidazol................................................. 100 mmol/l; pH 6,7 rador por períodos prolongados. Evitar contaminaciones.
creatina fosfato..................................................... 30 mmol/l Reactivo único (premezclado): estable 20 días en refrigera
ADP........................................................................ 2 mmol/l dor (2-10oC) a partir del momento de su mezclado.
glucosa................................................................. 20 mmol/l Control reconstituido: estable 3 días refrigerado (2-10oC),
NADP...................................................................... 2 mmol/l 2 días a 25oC o 3 meses congelado (-20oC). No congelar y
hexoquinasa........................................................ ≥ 2500 U/l descongelar repetidamente.
glucosa-6-fosfato deshidrogenasa...................... ≥ 2000 U/l
acetato de magnesio............................................ 10 mmol/l INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
AMP........................................................................ 5 mmol/l REACTIVOS
di-(adenosina-5') pentafosfato............................... 10 umol/l Cuando el espectrofotómetro ha sido llevado a cero con
N-acetil cisteín a (NAC)......................................... 20 mmol/l agua destilada, lecturas de absorbancia del Reactivo único
Anticuerpos capaces de inhibir 1000 U/l de CK-M. superiores a 0,500 D.O. (a 340 nm) son indicio de deterioro
Control: vial conteniendo CK-MB de origen humano, liofili del mismo.
zada (ver tabla adjunta para valor teórico).
MUESTRA
REACTIVOS NO PROVISTOS Suero o plasma
Solución fisiológica (cloruro de sodio 9 g/dl). a) Recolección: obtener de la manera usual.
Agua destilada. b) Aditivos: en el caso de que la muestra a emplear sea plas
ma, debe usarse heparina o EDTA como anticoagulante. Se
INSTRUCCIONES PARA SU USO recomienda el empleo de Anticoagulante W de Wiener lab.
Reactivos Provistos: listos para usar. Estos pueden usarse c) Sustancias interferentes conocidas: no se observan
864116500 / 03 p. 1/6
interferencias por bilirrubina hasta 390 mg/l (39 mg/dl), VALORES DE REFERENCIA
triglicéridos hasta 3,0 g/l (300 mg/dl) ni hemoglobina hasta
0,06 g/dl (60 mg/dl) (hemólisis leve). Los sueros con hemó
Valores ≤ 10 U/l ≤ 16 U/l ≤ 25 U/l
lisis visible producen valores falsamente aumentados, por lo
que no deben ser usados.
CK-MB (U/l) x 0,017 = CK-MB (ukat/l)
muestra debe ser fresca. Refrigerada (2-10oC) pierde hasta
Se tiene alta probabilidad de daño de miocardio si se cum
un 10% de actividad enzimática en un día.
plen simultáneamente las siguientes condiciones:
1- La actividad de CK total excede los siguientes rangos
normales:
- Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados. Temperatura 25oC 30oC 37oC
- Baño de agua a la temperatura indicada en PROCEDIMIENTO. Varones 10-80 U/l 15-130 U/l 24-195 U/l
- Cronómetro. Mujeres 10-70 U/l 15-110 U/l 24-170 U/l
Si se sospecha daño de miocardio y los valores se encuen
- Longitud de onda: 340 nm (Hg 334 ó 366).
- Temperatura de reacción: 25, 30 ó 37oC. Seleccionar la
luego de 4 horas.
temperatura de acuerdo al instrumental. Ver los VALORES
DE REFERENCIA correspondientes a cada temperatura.
- Volúmenes de muestra y reactivo: pueden variarse propor
valor de CK total.
cionalmente (ej. 100 ul muestra + 2,5 ml Reactivo único o
Si el porcentaje es menor al 6% es probable que haya daño
20 ul muestra + 500 ul Reactivo único).
del músculo esquelético. Si el porcentaje supera el 20% del
valor total de CK se puede sospechar de la presencia de
una forma macro de CK (CK atípica) que no es inhibida por
PROCEDIMIENTO
los anticuerpos anti CK-M.
La presencia de CK atípica puede determinarse por:
Llevar el aparato a cero con agua destilada.
a) Persistencia por más de 48 horas (la CK-MB decae apro
En una cubeta mantenida a la temperatura seleccionada
ximadamente a las 30-48 horas de iniciado el infarto).
(25, 30 ó 37oC) colocar:
b) Estabilidad frente al tratamiento de la muestra a 40oC
Reactivo único 1 ml durante 20 minutos.
Preincubar unos minutos. Luego agregar: c) Análisis electroforético (se obtiene una banda entre las
isoenzimas MM y MB).
Muestra 40 ul
Mezclar inmediatamente por inversión. Esperar 10 mi LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
nutos. Ajustar la absorbancia a un valor de referencia Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
y disparar simultáneamente el cronómetro. Registrar la Muestras con actividad CK total que supera las 1000 U/l
absorbancia cada minuto, durante 3 minutos. Determi deben diluirse con solución fisiológica. El resultado obtenido
nar la diferencia promedio de absorbancia/min (∆A/min) debe multiplicarse por la dilución efectuada.
restando a cada lectura la anterior y promediando los
valores. Utilizar este promedio para los cálculos. PERFORMANCE
a) Reproducibilidad: se aplicó el protocolo EP15-A del
CLSI. Se corrieron dos niveles de actividad, cada uno por
CALCULO DE LOS RESULTADOS cuadruplicado durante 5 días. Con los datos obtenidos, se
CK-MB (U/l) = ∆A/min x factor calcularon la precisión intraensayo y total.
Medida a 340 nm: CK-MB (U/l) = ∆A/min x 8.254 Precisión intraensayo (n = 20)
Medida a Hg 334: CK-MB (U/l) = ∆A/min x 8.414
Medida a Hg 366: CK-MB (U/l) = ∆A/min x 14.858 Nivel D.S. C.V.
Los factores arriba mencionados ya contemplan la correc 41 UI/l ± 0,69 UI/l 1,7%
ción necesaria para convertir el valor de CK-B en CK-MB. 232 UI/l ± 2,55 UI/l 1,1%
Procesar 2 niveles de un material de control de calidad Nivel D.S. C.V.
(Control CK-MB) con actividades conocidas de CK-MB, con 41 UI/l ± 0,98 UI/l 2,4%
cada determinación. 232 UI/l ± 3,94 UI/l 1,7%
864116500 / 03 p. 2/6
b) Linealidad: la reacción es lineal hasta 500 UI/l. SÍMBOLOS
c) Sensibilidad analítica: depende del fotómetro empleado Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
y de la longitud de onda. En espectrofotómetros a 340 nm reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
con cubetas de caras paralelas de 1 cm de espesor, para
un ∆A/min de 0,001, el mínimo cambio de actividad detec Este producto cumple con los requerimientos previstos
table será 8 U/l.
PRESENTACION Contenido suficiente para <n> ensayos

60 ml: 1 x 50 ml A
X
1 x 10 ml B H Fecha de caducidad
1 x C → 2 ml
(Cód. 1271361) l Límite de temperatura (conservar a)
60 ml: 3 x 17 ml A  No congelar
1 x 10 ml B
1 x C → 2 ml Riesgo biológico
F
(Cód. 1009333)
120 ml: 5 x 20 ml A
1 x 20 ml B Cont. Contenido
1 x C → 2 ml
120 ml: 2 x 50 ml A Elaborado por:

1 x 20 ml B M
1 x C → 2 ml Nocivo
(Cód. 1009608)
BIBLIOGRAFIA
- D.G.K.C. - Z. Klin. Chem. 10:281 (1972). Irritante
- I.F.C.C. - Clínica Chimica Acta 105:147F (1980). i Consultar instrucciones de uso
- Würzburg, U. et al - J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 15:131
(1977). Calibr. Calibrador
- Stein, W. - Med. Welt 36:572 (1985).
- Szasz, G.; Busch, E.W. - Third European Congress of Clini b Control
cal Chemistry, Brighton, England, 3-8. June 1979 (Abstract).
- Lorenzo, L.; Capriotti, G.; Rojkín, F. - Revista A.B.A. 55/3 b Control Positivo
(1991).
c Control Negativo
AACC Press, 5h ed., 2000.. h Número de catálogo

- CLSI: Clinical and Laboratory Standards Institute (ex-
NCCLS) - Protocols EP 15A (2001) / EP 17A (2004).
Wiener lab.
Riobamba 2944
Bioquímica
864116500 / 03 p. 3/6 UR120830
CK-MB NAC
unitest
C Para la determinación de CK-MB en suero o plasma
MONOCLONAL
SIGNIFICACION CLINICA Control: abrir el vial teniendo la precaución de no perder ma

La Creatina Kinasa (CK) es una enzima intramuscular terial. Pipetear exactamente 1,0 ml de agua destilada. Tapar
constituida por una subunidad M (músculo) y otra subuni y esperar 5 minutos. Disolver el contenido completamente
dad B (brain = cerebro) que se combinan dando lugar a las por inversión del vial. El Control de CK-MB reconstituido se
isoenzimas CK-MM (muscular), CK-BB (cerebral) y CK-MB trata de la misma manera que una muestra desconocida.
(miocárdica).
La elevación sérica de CK y de CK-MB constituye un indi PRECAUCIONES
cador de injuria de miocardio. Luego de un infarto agudo de Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
miocardio, en aproximadamente el 55% de los casos, el pico El Control ha sido examinado para HIV, HCV y HBV encon
máximo de elevación de CK y CK-MB se produce en forma trándose no reactivo. No obstante, debe ser empleado como
simultánea, mientras que en el 45% de los casos la elevación si se tratara de material infectivo.
máxima de CK-MB precede a la de CK total. Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
FUNDAMENTOS DEL METODO Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
El método se basa en la inhibición específica de las subuni acuerdo a la normativa local vigente.
dades CK-M con anticuerpos monoclonales anti CK-M. Los
anticuerpos inhiben tanto la isoenzima MM como las subu ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
nidades M correspondientes a CK-MB. Las subunidades B ALMACENAMIENTO
se determinan mediante el empleo de un sistema reactivo Reactivos Provistos: estables en refrigerador (2-10 oC)
basado en una técnica analítica optimizada por la IFCC, con hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
N-acetilcisteín
a como activador, adicionado de anticuerpos Reactivo A reconstituido: en refrigerador (2-10oC) es esta
monoclonales anti CK-M. ble 3 días a partir del momento de su reconstitución.
Control reconstituido: estable 3 días refrigerado (2-10oC)
REACTIVOS PROVISTOS o 3 meses congelado (-20oC). No congelar y descongelar
A. Reactivo A: viales para determinaciones individuales con repetidamente.
teniendo cantidades suficientes para obtener las siguientes
concentraciones una vez reconstituidos: INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
creatina fosfato..................................................... 30 mmol/l REACTIVOS
ADP........................................................................ 2 mmol/l Cuando el espectrofotómetro ha sido llevado a cero con
glucosa................................................................. 20 mmol/l agua destilada, lecturas de absorbancia del Reactivo A re
NADP...................................................................... 2 mmol/l constituido superiores a 0,800 D.O. (a 340 nm) son indicio
hexoquinasa........................................................ ≥ 2500 U/l de deterioro del mismo.
glucosa-6-fosfato deshidrogenasa...................... ≥ 2000 U/l
acetato de magnesio............................................ 10 mmol/l MUESTRA
AMP........................................................................ 5 mmol/l Suero o plasma
di-(adenosina-5') pentafosfato............................... 10 umol/l a) Recolección: obtener de la manera usual.
N-acetil cisteín a (NAC)......................................... 20 mmol/l b) Aditivos: en el caso de que la muestra a emplear sea
Anticuerpos monoclonales capaces de inhibir 1000 U/l de plasma, debe usarse heparina o EDTA como anticoagu
CK-M. lante. Se recomienda el empleo de Anticoagulante W de
B. Reactivo B: solución de buffer imidazol, 100 mmol/l; Wiener lab.
pH 6,7. c) Sustancias interferentes conocidas: los sueros con
Control: vial conteniendo CK-MB de origen humano, liofili hemólisis visible o intensa, producen valores falsamente
zada (ver tabla adjunta para valor teórico). aumentados, por lo que no deben ser usados.
INSTRUCCIONES PARA SU USO drogas en el presente método.
Reactivo B: listo para usar. d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
Reactivo A: agregar 2,5 ml de Reactivo B a un vial de Reac muestra debe ser fresca. Refrigerada (2-10oC) pierde hasta
tivo A. Tapar y agitar hasta disolución completa. un 10% de actividad enzimática en un día.
870330000 / 01 p. 1/6
MATERIAL REQUERIDO (no provisto) CONVERSION DE UNIDADES AL SISTEMA SI
- Espectrofotómetro. CK-MB (U/l) x 0,01 = CK-MB (ukat/l)
- Baño de agua a la temperatura indicada en PROCEDI INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS
MIENTO. Se tiene alta probabilidad de daño de miocardio si se cum
- Cronómetro. plen simultáneamente las siguientes condiciones:
1- La actividad de CK total excede los siguientes rangos normales:
CONDICIONES DE REACCION Temperatura 25oC 30oC 37oC
(Aumento de absorbancia) Varones 10-80 U/l 15-130 U/l 24-195 U/l
- Longitud de onda: 340 nm (Hg 334 ó 366). Mujeres 10-70 U/l 15-110 U/l 24-170 U/l
- Temperatura de reacción: 25, 30 ó 37oC. Seleccionar la
Si se sospecha daño de miocardio y los valores se encuen
temperatura de acuerdo al instrumental. Ver los VALORES
luego de 4 horas.
- Volúmenes de muestra y reactivo: pueden variarse propor
cionalmente (ej. 40 ul muestra + 1 ml Reactivo A recons
tituido o 20 ul muestra + 500 ul Reactivo A reconstituido).
valor de CK total.
Si el porcentaje es menor al 6% es probable que haya daño
PROCEDIMIENTO
del músculo esquelético. Si el porcentaje supera el 20% del
Llevar el aparato a cero con agua destilada. Ver INDI
valor total de CK se puede sospechar de la presencia de
CIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
una forma macro de CK (CK atípica) que no es inhibida por
REACTIVOS.
los anticuerpos anti CK-M.
En una cubeta mantenida a la temperatura seleccionada
La presencia de CK atípica puede determinarse por:
(25, 30 ó 37oC) colocar:
a) Persistencia por más de 48 horas (la CK-MB decae apro
Reactivo A reconstituido 2,5 ml ximadamente a las 30-48 horas de iniciado el infarto).
b) Estabilidad frente al tratamiento de la muestra a 40oC
Preincubar unos minutos. Luego agregar:
durante 20 minutos.
Muestra 100 ul c) Análisis electroforético (se obtiene una banda entre las
isoenzimas MM y MB).
Mezclar inmediatamente por inversión. Esperar 10 mi
nutos. Ajustar la absorbancia a un valor de referencia
y disparar simultáneamente el cronómetro. Registrar la
absorbancia cada minuto, durante 5 minutos. Determi
Muestras con actividad CK total que supera las 1000 U/l
nar la diferencia promedio de absorbancia/min (∆A/min)
deben diluirse con solución fisiológica (cloruro de sodio
restando a cada lectura la anterior y promediando los
0,9%). El resultado obtenido debe multiplicarse por la dilu
valores. Utilizar este promedio para los cálculos.
ción efectuada.
PERFORMANCE
a) Reproducibilidad: procesando simultáneamente repli
CK-MB (U/l) = ∆A/min x factor
cados de una misma muestra, se obtuvo:
Medida a 340 nm: CK-MB (U/l) = ∆A/min x 8.254
Medida a Hg 334: CK-MB (U/l) = ∆A/min x 8.414 Nivel D.S. C.V.
Medida a Hg 366: CK-MB (U/l) = ∆A/min x 14.858 30 U/l ± 1,7 U/l 5,7 %
Los fact or es arrib a menc ion ad os ya cont emp lan la 80 U/l ± 3,0 U/l 3,7 %
cor recc ión nec es ar ia par a conv ert ir el valor de CK-B b) Límite de detección: depende del fotómetro emplea
en CK-MB. do y de la longitud de onda. De acuerdo con la sensibilidad
requerida, en espectrofotómetro a 340 nm (con cubetas de
METODO DE CONTROL DE CALIDAD caras paralelas de 1 cm de espesor, reproducibilidad ± 2 nm,
Procesar 2 niveles de un material de control de calidad luz espuria ≤ 0,5%, semiancho de banda ≤ 8 nm), para un
(Control CK-MB) con actividades conocidas de CK-MB, ∆A/min de 0,001 el mínimo cambio de actividad detectable
con cada determinación. será 8 U/l.
c) Rango dinámico: el rango útil de lectura se extiende
VALORES DE REFERENCIA hasta 0,100 ∆A/min (340/334/366 nm).
Temperatura 25oC 30oC 37oC d) Linealidad: la reacción es lineal hasta 800 U/l (a 37oC).
Valores 10 U/l 16 U/l 25 U/l
Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios PRESENTACION
valores de referencia. - 19 x 2,5 ml con Control (Cód. 1271352).
870330000 / 01 p. 2/6
- D.G.K.C. - Z. Klin. Chem. 10:281 (1972). Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
- S.S.C.C. - Scand. J. Clin. Lab. Invest. 33:291 (1974). reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
- I.F.C.C. - Clínica Chimica Acta 105:147F (1980).
- Fried, E. et al. - Rev. Asoc. Bioq. Arg. 243:185 (1980). Este producto cumple con los requerimientos previstos
- Wu, A.; Bowers, G. - Clin. Chem. 28/10:2017 (1982).
- Urdal, P.; Landaas, S. - Clin. Chem. 25:461 (1979). C por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios
- Gerhardt, W.; Waldenstrom, J. - Clin. Chem. 28:277 (1982).
- Lorenzo, L.; Capriotti, G.; Rojkín, F.; - Revista A.B.A. 55/3
(1991).
AACC Press, 4th ed., 2001. Contenido suficiente para <n> ensayos
X
 No congelar
F Riesgo biológico
Cont. Contenido
g Número de lote
Elaborado por:
M
Nocivo
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870330000 / 01 p. 3/6 UR111013
LINEA LIQUIDA
CK-NAC
AA
C Método UV optimizado (IFCC) para la determinación de
Creatina Kinasa (CK) en suero o plasma

La creatina kinasa (CK) es una enzima intracelular localizada Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
en mayor proporción en músculos cardíaco y esquelético y Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
también en cerebro. Un aumento en la actividad sérica, es de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
por lo tanto indicio de lesión celular. Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
En el caso del infarto agudo de miocardio (IAM), la actividad acuerdo a la normativa local vigente.
sérica de CK comienza a aumentar entre 2 y 6 horas después
de producido el episodio y alcanza un máximo después de ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
18 a 24 horas. Los picos alcanzados pueden llegar a ser 20 ALMACENAMIENTO
veces el límite superior normal, razón por la cual es quizás Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10oC)
la prueba más sensible para el diagnóstico de IAM. hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
Una vez abiertos, no deben permanecer fuera del refrige-
FUNDAMENTOS DEL METODO rador por períodos prolongados. Evitar contaminaciones.
Basado en el siguiente esquema reaccionante: Reactivo único (premezclado): estable 20 días en refrigera-
creatina kinasa dor (2-10oC) a partir de la fecha de su preparación.
creatina fosfato + ADP creatina + ATP
hexoquinasa REACTIVOS
ATP + glucosa ADP + glucosa-6-P Cuando el espectrofotómetro ha sido llevado a cero con
G-6-PDH agua destilada, lecturas de absorbancia del Reactivo único
glucosa-6-P + NADP+ gluconato-6-P + NADPH + H+ > 0,800 D.O. (a 340 nm) son indicio de deterioro del mismo.
En la reacción interviene la N-acetilcisteína (NAC) como MUESTRA

activador de la creatina kinasa, recomendado por la I.F.C.C. Suero o plasma heparinizado
a) Recolección: se debe obtener de la manera usual.
REACTIVOS PROVISTOS b) Aditivos: en caso de emplear plasma, debe usarse he-
A. Reactivo A: solución de buffer imidazol. parina como anticoagulante.
B. Reactivo B: solución de componentes conteniendo creati- c) Sustancias interferentes conocidas: no interfieren bili-
na fosfato y componentes reactivos en cantidades suficientes rrubina hasta 390 mg/l (39 mg/dl), triglicéridos hasta 12,5 g/l
para las siguientes concentraciones finales: (1250 mg/dl) ni hemoglobina hasta 0,15 g/dl (150 mg/dl).
imidazol................................................. 100 mmol/l; pH 6,7 Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
creatina fosfato..................................................... 30 mmol/l drogas en el presente método.
ADP........................................................................ 2 mmol/l d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
glucosa................................................................. 20 mmol/l muestra debe ser preferentemente fresca. Puede conser-
NADP...................................................................... 2 mmol/l varse hasta 1 semana en refrigerador (2-10oC).
hexoquinasa ....................................................... ≥ 2500 U/l
glucosa-6-fosfato deshidrogenasa (G-6-PDH).... ≥ 2000 U/l MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
acetato de magnesio............................................ 10 mmol/l - Espectrofotómetro.
AMP........................................................................ 5 mmol/l - Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados.
di-(adenosina-5') pentafosfato............................... 10 umol/l - Baño de agua a la temperatura indicada en el procedimiento.
N-acetilcisteína..................................................... 20 mmol/l - Cronómetro.
INSTRUCCIONES PARA SU USO CONDICIONES DE REACCION

Reactivos Provistos: listos para usar. Estos pueden usarse (Aumento de absorbancia)
separados o como Reactivo único, mezclando 5 partes de - Longitud de onda: 340 nm (Hg 334 ó 366).
Reactivo A con 1 parte de Reactivo B (ej.: 5 ml Reactivo A - Temperatura de reacción: 25, 30 ó 37oC. Ver los VALORES
+ 1 ml Reactivo B). DE REFERENCIA correspondientes a cada temperatura.
861267022 / 02 p. 1/9
- Tiempo de reacción: varía de acuerdo al procedimiento PERFORMANCE
seleccionado. a) Reproducibilidad: se aplicó el protocolo EP15-A del
CLSI. Se analizaron dos niveles de actividad, cada uno por
PROCEDIMIENTO calcularon la precisión intraensayo y total.
TECNICA CON REACTIVO UNICO Precisión intraensayo (n = 20)
Llevar el aparato a cero con agua destilada. Nivel D.S. C.V.
A) 30 - 37oC 162 U/l ± 1,08 U/l 0,66 %
En una cubeta mantenida a 30-37oC, colocar: 362 U/l ± 1,61 U/l 0,44 %
Reactivo único 1 ml Precisión total (n = 20)
Preincubar 3-4 minutos. Luego agregar: Nivel D.S. C.V.
163 U/l ± 4,10 U/l 2,51 %
Muestra 40 ul 356 U/l ± 6,72 U/l 1,89 %
Mezclar inmediatamente y esperar 3 minutos. Ajustar b) Linealidad: normalmente, la reacción es lineal hasta un
la absorbancia a una lectura de referencia disparando ∆A/min de 0,130 D.O. (aproximadamente 550 U/l). Para
simultáneamente el cronómetro. Registrar la absor- valores superiores diluir la muestra 1/2 ó 1/5 con solución
bancia luego de 1, 2 y 3 minutos de la primera lectura. fisiológica y repetir la determinación respetando las mismas
Determinar la diferencia promedio de absorbancia/ condiciones de ensayo y multiplicando los resultados por
min (∆A/min), restando cada lectura de la anterior y la dilución efectuada. En analizadores automáticos puede
promediando los valores. Utilizar este promedio para observarse una linelidad de hasta 1800 U/l.
los cálculos. c) Sensibilidad analítica: depende del fotómetro empleado
B) 25oC y de la longitud de onda. En espectrofotómetros a 340 nm
Seguir el procedimiento indicado en A), pero emplean- con cubetas de caras paralelas de 1 cm de espesor, para
do 80 ul de Muestra y esperando 4 minutos luego del un ∆A/min de 0,001 el mínimo cambio de actividad detec
agregado de la misma. table será 8 U/l.

CALCULO DE LOS RESULTADOS Para las instrucciones de programación consulte el manual
CK (U/I) = ∆A/min x factor del usuario del analizador en uso.
En cada caso deberá emplearse el factor de cálculo corres-
pondiente, como se indica en la siguiente tabla: PRESENTACION
Temperatura 1 x 20 ml Reactivo B
30-37oC 25oC
Long. onda (Cód. 1271360)
340 nm 4.127 2.142 120 ml: 5 x 20 ml Reactivo A
334 nm 4.207 2.183 1 x 20 ml Reactivo B
366 nm 7.429 3.856 (Cód. 1009331)
METODO DE CONTROL DE CALIDAD 1 x 20 ml Reactivo B
(Standatrol S-E 2 niveles) con actividades conocidas de 240 ml: 4 x 50 ml Reactivo A
creatina kinasa, con cada determinación. 2 x 20 ml Reactivo B
(Cód. 1009609)
Temperatura 25oC 30oC 37oC(*) BIBLIOGRAFIA
Varones hasta 80 U/l hasta 130 U/l hasta 195 U/l - D.G.K.C. - Z. Klin. Chem. 10:281 (1972).
Mujeres hasta 70 U/l hasta 110 U/l hasta 170 U/l - S.S.C.C. - Scand. J. Clin. Lab. Invest. 33:291 (1974).
(*)
Calculados - I.F.C.C. - Clinica Chimica Acta 105:147 F (1980).
Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios - I.F.C.C. - Ann. Biol. Clin. 44/4:419 (1986).
valores de referencia. - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
CONVERSION DE UNIDADES AL SISTEMA SI - Stein, W. - Med. Welt. 36:572 (1985).
Creatina kinasa (U/l) x 0,017 = Creatina kinasa (ukat/l) - Szasz, G.; Busch, E.W. - 3rd European Congress of Clinical
Chemistry, Brighton, England, 3-8 June, 1979.
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO - NCCLS document "Evaluation of the Linearity of Quantita-
Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA. tive Analytical Methods", EP6-P, (1986).
861267022 / 02 p. 2/9
- CLSI: Clinical and Laboratory Standards Institute (ex- SÍMBOLOS
NCCLS) - Protocols EP 15A, 2001 / EP 17A, 2004. Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de


 No congelar
F Riesgo biológico
Cont. Contenido
g Número de lote
Elaborado por:
M
Nocivo
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
861267022 / 02 p. 3/9 UR120830
CK-NAC
unitest y AA
Creatina Kinasa (CK) en suero o plasma

La creatina kinasa (CK) es una enzima intracelular localizada Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
en mayor proporción en músculos cardíaco y esquelético y Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
también en cerebro. Un aumento en la actividad sérica, es de trabajo en el laboratorio de química clínica.
por lo tanto indicio de lesión celular. Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
En el caso del infarto agudo de miocardio (IAM), la actividad acuerdo a la normativa local vigente.
sérica de CK comienza a aumentar entre 2 y 6 horas después
de producido el episodio y alcanza un máximo después de ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
18 a 24 horas. Los picos alcanzados pueden llegar a ser 20 ALMACENAMIENTO
veces el límite superior normal, razón por la cual es quizás Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10oC)
la prueba más sensible para el diagnóstico de IAM. hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
Reactivo A reconstituido: estable 20 días en refrigerador (2-
FUNDAMENTOS DEL METODO 10oC) o 3 días a temperatura ambiente a partir del momento
Basado en el siguiente esquema reaccionante: de su reconstitución.
creatina kinasa
creatina fosfato + ADP creatina + ATP INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
hexoquinasa REACTIVOS
ATP + glucosa ADP + glucosa-6-P Cuando el espectrofotómetro ha sido llevado a cero con
G-6-PDH agua destilada, lecturas de absorbancia del Reactivo A re-
glucosa-6-P + NADP+ gluconato-6-P + NADPH + H+ constituido superiores a 0,800 D.O. (a 340 nm) son indicio
En el esquema de reacción interviene la N-acetilcisteína de deterioro del mismo.
(NAC) como activador de la creatina kinasa, recomendado
por la IFCC. MUESTRA
Suero o plasma
REACTIVOS PROVISTOS a) Recolección: se debe obtener de la manera usual.
B. Reactivo B: solución de buffer imidazol pH 6,7. b) Aditivos: en caso de emplear plasma, debe usarse hepa-
A. Reactivo A: frasco con sustrato desecado conteniendo rina (concentración < 15 UI/ml) o EDTA como anticoagulante.
cantidades suficientes para las siguientes concentraciones c) Sustancias interferentes conocidas: no se observan
finales: interferencias por bilirrubina hasta 90 mg/l, triglicéridos hasta
13 g/l ni heparina hasta 50 U/l. Hemólisis visible (concentra-
imidazol................................................. 100 mmol/l; pH 6,7
ción de hemoglobina > 0,08 g/dl) interfiere.
creatina fosfato..................................................... 30 mmol/l
ADP........................................................................ 2 mmol/l
glucosa................................................................. 20 mmol/l drogas en el presente método.
NADP...................................................................... 2 mmol/l d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
hexoquinasa ....................................................... ≥ 2500 U/l muestra debe ser preferentemente fresca. Puede conser-
glucosa-6-fosfato deshidrogenasa (G-6-PDH).... ≥ 2000 U/l varse hasta 1 semana en refrigerador (2-10oC) sin agregado
acetato de magnesio............................................ 10 mmol/l de conservadores.
AMP........................................................................ 5 mmol/l
di-(adenosina-5') pentafosfato............................... 10 umol/l MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
N-acetilcisteína..................................................... 20 mmol/l - Espectrofotómetro.
INSTRUCCIONES PARA SU USO - Baño de agua a la temperatura indicada en el procedimiento
Reactivo B: listo para usar. a seguir.
Reactivo A: reconstituir de acuerdo a lo siguiente: - Cronómetro.
- CK-NAC UV AA: disolver cada vial de Reactivo A con 20
ml de Reactivo B. Fechar. CONDICIONES DE REACCION
- CK-NAC UV unitest: disolver cada vial de Reactivo A con (Aumento de absorbancia)
2,5 ml de Reactivo B. Fechar. - Longitud de onda: 340 nm (Hg 334 ó 366).
870340022 / 01 p. 1/9
- Temperatura de reacción: 25, 30 ó 37oC. Ver los VALORES METODO DE CONTROL DE CALIDAD
DE REFERENCIA correspondientes a cada temperatura. Procesar 2 niveles de un material de control de calidad
- Tiempo de reacción: varía de acuerdo al procedimiento (Standatrol S-E 2 niveles) con actividades conocidas de
seleccionado. creatina kinasa, con cada determinación.
PROCEDIMIENTO
Temperatura 25oC 30oC 37oC*
Llevar el aparato a cero con agua destilada.
Varones hasta 80 U/l hasta 130 U/l hasta 195 U/l
A) 30 - 37oC Mujeres hasta 70 U/l hasta 110 U/l hasta 170 U/l
I- MACROTECNICA * Calculados
En una cubeta mantenida a 30-37oC, colocar:
Reactivo A reconstituido 2,5 ml valores de referencia.
Muestra 50 ul Creatina kinasa (U/l) x 0,017 = Creatina kinasa (ukat/l)
Mezclar inmediatamente y esperar 3 minutos. Ajustar
la absorbancia a una lectura de referencia disparando LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
simultáneamente el cronómetro. Registrar la absor- Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
bancia luego de 1, 2 y 3 minutos de la primera lectura.
Determinar la diferencia promedio de absorbancia/ PERFORMANCE
min (∆A/min), restando cada lectura de la anterior y a) Reproducibilidad: procesando simultáneamente repli-
promediando los valores. Utilizar este promedio para cados de una misma muestra en un mismo día se obtiene
los cálculos. lo siguiente:
Nivel D.S. C.V.
II- MICROTECNICA
144,5 U/l ± 3,36 U/l 2,33 %
450,4 U/l ± 5,98 U/l 1,33 %
Reactivo A reconstituido 1 ml
Procesando la misma muestra en días diferentes, se obtuvo:
Nivel D.S. C.V.
Muestra 20 ul 147,5 U/l ± 3,13 U/l 2,12 %
Mezclar inmediatamente y esperar 3 minutos. Continuar 451,2 U/l ± 6,89 U/l 1,53 %
de modo similar al descripto en el procedimiento (A-I).
b) Sensibilidad: depende del fotómetro empleado y de la
B) 25oC longitud de onda. En espectrofotómetros con cubetas de
I- MACROTECNICA caras paralelas de 1 cm de espesor, para un ∆A/min de
Como la actividad a esta temperatura es menor, 0,001 el mínimo cambio de actividad detectable será de 8 U/l
deben emplearse 100 ul de Muestra para obtener la (a 340 nm y 30 ó 37oC).
sensibilidad adecuada. Registrar las lecturas a partir c) Rango dinámico: el rango útil de lectura se extiende hasta
de los 4 minutos de agregada la Muestra. Seguir el 0,250 D.O. (340 nm) o 0,140 D.O. (366 nm). Para valores
procedimiento indicado en A-I. superiores se debe utilizar muestra diluida con solución
fisiológica corrigiendo consecuentemente los resultados.
II- MICROTECNICA
Seguir el procedimiento indicado en A-II, pero emplean- PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS
do 50 ul de Muestra. Para las instrucciones de programación consulte el manual
CALCULO DE LOS RESULTADOS PRESENTACION

CK U/I = ∆A/min x factor CK-NAC UV AA:
En cada caso deberá emplearse el factor de cálculo corres- - 3 x 20 ml (60 ml Reactivo B) (Cód. 1271303).
pondiente, como se indica en la siguiente tabla: - 3 x 20 ml (3 x 20 ml Reactivo B) (Cód. 1009309).
- 10 x 20 ml (200 ml Reactivo B) (Cód. 1271353).
Temperat. 30-37oC 25oC
CK-NAC UV unitest:
Long. onda I o II I II - 20 x 2,5 ml (Cód. 1271351).
340 nm 8.095 4.127 3.333
BIBLIOGRAFIA
334 nm 8.252 4.207 3.398
- D.G.K.C. - Z. Klin. Chem. 10:281 (1972).
366 nm 15.000 7.647 6.176 - S.S.C.C. - Scand. J. Clin. Lab. Invest. 33:291 (1974).
870340022 / 01 p. 2/9
- I.F.C.C. - Clinica Chimica Acta 105:147 F (1980). SÍMBOLOS
- I.F.C.C. - Ann. Biol. Clin. 44/4:419 (1986). Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
- Stein, W. - Med. Welt. 36:572 (1985). reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
- Szasz, G.; Busch, E.W. - 3rd European Congress of Clinical
Chemistry, Brighton, England, 3-8 June, 1979. Este producto cumple con los requerimientos previstos
AACC Press, 4th ed., 2001. C por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios
- NCCLS document "Evaluation of the Linearity of Quantita-
tive Analytical Methods", EP6-P (1986).
 No congelar
F Riesgo biológico
Cont. Contenido
g Número de lote
Elaborado por:
M
Nocivo
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
CK-NAC UV unitest:
Disp. Nº 7448/87 - 370/00
CK-NAC UV AA:
Disp. Nº 5999/83-5234/98-
955/02 2000 Rosario - Argentina
870340022 / 01 p. 3/9 UR120419
CMD 80 Detergent
C Para limpieza de sondas, mezcladores y cubetas
de analizadores automáticos
CMD 80 Detergent es un agente de limpieza para la eli- Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
minación de proteínas, lípidos, iones y demás residuos reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
procedentes de reacciones químicas que quedan en las Este producto cumple con los requerimientos previstos
superficies de las cubetas de analizadores automáticos.
REACTIVOS PROVISTOS
CMD 80 Detergent: solución de hidróxido de potasio al 5% P Representante autorizado en la Comunidad Europea
en buffer citrato 1% con surfactantes.
Listo para usar.
PRECAUCIONES
El Reactivo es para uso diagnóstico "in vitro". l Límite de temperatura (conservar a)
CMD 80 Detergent es irritante. R36/38: irrita los ojos y la
piel. S24/25: evitar el contacto con los ojos y la piel. S26: en  No congelar
caso de contacto con los ojos, lávense inmediata y abun-
dantemente con agua y acúdase a un médico. S28: en caso F Riesgo biológico
con agua. S37/39: usar guantes adecuados y protección Volumen después de la reconstitución
para los ojos/la cara.
Cont. Contenido
de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos. g Número de lote
El reactivo debe descartarse de acuerdo a la normativa
local vigente. M Elaborado por:
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE Xn
Nocivo
ALMACENAMIENTO
CMD 80 Detergent: es estable a temperatura ambiente (2- Corrosivo / Caústico
30ºC) hasta la fecha de vencimiento indicada en el envase.
Xi
Irritante
PRESENTACION
- 6 x 2 L (Cód. 1009666) i Consultar instrucciones de uso
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
877010100 / 00 p. 1/3 UR150521
CMD Cleaning
C Solution
Para la limpieza en analizadores automáticos con módulo ISE
CMD Cleaning Solution es empleada en analizadores Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
automáticos para la limpieza de las celdas de flujo de los reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
electrodos, así como de la tubuladora del módulo ISE. Este producto cumple con los requerimientos previstos

CMD Cleaning Solution: solución de hipoclorito de sodio
3%. P Representante autorizado en la Comunidad Europea
Lista para usar. Contenido suficiente para <n> ensayos

X
PRECAUCIONES H Fecha de caducidad
El Reactivo es para uso diagnóstico "in vitro".
Evitar ingestión y contacto con la piel. l Límite de temperatura (conservar a)
de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.  No congelar
El reactivo debe descartarse de acuerdo a la normativa
local vigente. F Riesgo biológico

ALMACENAMIENTO Cont. Contenido
CMD Cleaning Solution: es estable a temperatura am-
biente (2-30ºC) hasta la fecha de vencimiento indicada en g Número de lote
el envase.
M Elaborado por:
PRESENTACION
Xn
- 2 x 100 mL (Cód. 1009661) Nocivo
Xi
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
877010300 / 00 p. 1/2 UR150511
CMD Serum
C Standard
Para la calibración de la determinación de sodio,
potasio y cloruro en suero o plasma
CMD Serum Standard se emplea como calibrador en Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
analizadores automáticos de química clínica con módulo reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
ISE, para la determinación de sodio, potasio y cloruro en Este producto cumple con los requerimientos previstos
muestras de suero o plasma por el método de electrodos
ion selectivo. Consultar los valores asignados en los rótulos. C por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios

Calibrador 1: solución conteniendo concentraciones bajas
de cloruro de sodio y cloruro de potasio. V Uso diagnóstico "in vitro"
Calibrador 2: solución conteniendo concentraciones altas
de cloruro de sodio y cloruro de potasio.
PRECAUCIONES  No congelar
Los reactivos para uso diagnóstico "in vitro".
Evitar ingestión y contacto con la piel. F Riesgo biológico
acuerdo a la normativa local vigente. Cont. Contenido
g Número de lote
ALMACENAMIENTO Elaborado por:

Reactivos Provistos: estables a temperatura ambiente M
(2-30ºC) hasta la fecha de vencimiento indicada en el Nocivo
envase.
PRESENTACION
- 2 x 100 ml (Cód. 1009662) Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
877010500 / 01 p. 1/2 UR150511
CMD Urine
C Quality Control
Para control de precisión en la determinación de iones
Lote: 1602185230
APLICACIONES K+ Valor Medio Rango

CMD Urine Quality Control es un control de referencia para meq/l meq/l
electrolitos en orina utilizado para controlar el funcionamiento
del modo orina del electrodo ion selectivo de los Módulos Nivel 1 19,5 16,6 22,5
ISE en los analizadores automáticos de química. Nivel 2 44,6 37,9 51,2
Consultar la tabla de valores asignados para los constituyen-
tes, debido a que los mismos son lote específico.
Cl- Valor Medio Rango
REACTIVOS PROVISTOS meq/l meq/l
Control nivel 1: solución conteniendo niveles bajos de Nivel 1 89,6 76,2 103
cloruro de sodio y de cloruro de potasio.
Control nivel 2: solución conteniendo niveles altos de clo- Nivel 2 179 152 206
ruro de sodio y de cloruro de potasio.

Los controles se proveen listos para usar.
Cada laboratorio debe establecer lineamientos para tomar
medidas correctivas si los valores se ubicaran fuera del
intervalo.
Cada laboratorio debe establecer procedimientos de control
PRECAUCIONES
Los controles son para uso diagnóstico "in vitro".
ALMACENAMIENTO
Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10ºC)
PRESENTACION
- 2 x 100 ml (Cód. 1009665)
VALORES ASIGNADOS
Na+ Valor Medio Rango

meq/l meq/l
Nivel 1 71,1 60,4 81,7
Nivel 2 139 118 159
877010700 / 01 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:

Europea Nocivo

Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
877010700 / 01 p. 2/4 UR160308
CMD Urine
C Quality Control
Lote: 1506168430
CMD Urine Quality Control es un control de referencia Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
para electrolitos en orina utilizado para controlar el funcio- reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
namiento del modo orina del electrodo ion selectivo de los Este producto cumple con los requerimientos previstos
Módulos ISE en los analizadores automáticos de química.
Consultar la tabla de valores asignados para los constitu- C por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios
yentes, debido a que los mismos son lote específico.
REACTIVOS PROVISTOS
Control nivel 1: solución conteniendo niveles bajos de V Uso diagnóstico "in vitro"
Control nivel 2: solución conteniendo niveles altos de
cloruro de sodio y de cloruro de potasio. Fecha de caducidad
H
INSTRUCCIONES PARA SU USO l Límite de temperatura (conservar a)
Cada laboratorio debe establecer lineamientos para tomar  No congelar
intervalo. F Riesgo biológico
de calidad para cumplir con las regulaciones vigentes o con Volumen después de la reconstitución
Cont. Contenido

de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos. Xn
Nocivo
acuerdo a la normativa local vigente. Corrosivo / Caústico
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE Xi
Irritante
ALMACENAMIENTO
Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10ºC) i Consultar instrucciones de uso
Calibr. Calibrador
PRESENTACION
- 2 x 100 ml (Cód. 1009665) b Control
VALORES ASIGNADOS b Control Positivo
Unidad: mEq/L Na+ K+ Cl-

c Control Negativo
Nivel 1 61,8-83,7 16,8-22,7 77,1-104 h Número de catálogo
Nivel 2 117-158 37,6-50,9 150-203 M Wiener Laboratorios S.A.I.C.

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
877010700 / 00 p. 1/2 UR150630
CMD Urine
C Quality Control
Lote: 1601182400
CMD Urine Quality Control es un control de referencia Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
para electrolitos en orina utilizado para controlar el funcio- reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
namiento del modo orina del electrodo ion selectivo de los Este producto cumple con los requerimientos previstos
Módulos ISE en los analizadores automáticos de química.
Consultar la tabla de valores asignados para los constitu- C por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios
yentes, debido a que los mismos son lote específico.
REACTIVOS PROVISTOS
Control nivel 1: solución conteniendo niveles bajos de V Uso diagnóstico "in vitro"
Control nivel 2: solución conteniendo niveles altos de
cloruro de sodio y de cloruro de potasio. Fecha de caducidad
H
Cada laboratorio debe establecer lineamientos para tomar  No congelar
intervalo. F Riesgo biológico
de calidad para cumplir con las regulaciones vigentes o con Volumen después de la reconstitución
Cont. Contenido

de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos. Xn
Nocivo
acuerdo a la normativa local vigente. Corrosivo / Caústico
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE Xi
Irritante
ALMACENAMIENTO
Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10ºC) i Consultar instrucciones de uso
Calibr. Calibrador
PRESENTACION
- 2 x 100 ml (Cód. 1009665) b Control
VALORES ASIGNADOS b Control Positivo
Unidad: mEq/L Na+ K+ Cl-

c Control Negativo
Nivel 1 63,0-85,3 17,4-23,5 79,4-107 h Número de catálogo
Nivel 2 120-163 38,6-52,3 155-209 M Wiener Laboratorios S.A.I.C.

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
877010700 / 01 p. 1/2 UR160107
CMD Urine
C Quality Control
Lote: 1602185230
APLICACIONES K+ Valor Medio Rango

CMD Urine Quality Control es un control de referencia para meq/l meq/l
electrolitos en orina utilizado para controlar el funcionamiento
del modo orina del electrodo ion selectivo de los Módulos Nivel 1 19,5 16,6 22,5
ISE en los analizadores automáticos de química. Nivel 2 44,6 37,9 51,2
Consultar la tabla de valores asignados para los constituyen-
Cl- Valor Medio Rango
REACTIVOS PROVISTOS meq/l meq/l
Control nivel 1: solución conteniendo niveles bajos de Nivel 1 89,6 76,2 103
Control nivel 2: solución conteniendo niveles altos de clo- Nivel 2 179 152 206
ruro de sodio y de cloruro de potasio.

Cada laboratorio debe establecer lineamientos para tomar
intervalo.
PRECAUCIONES
ALMACENAMIENTO
Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10ºC)
PRESENTACION
- 2 x 100 ml (Cód. 1009665)
VALORES ASIGNADOS
Na+ Valor Medio Rango

meq/l meq/l
Nivel 1 71,1 60,4 81,7
Nivel 2 139 118 159
877010700 / 02 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:

Europea Nocivo

Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
877010700 / 02 p. 2/4 UR160308
CMD Urine
C Standard
Para la calibración de la determinación de sodio,
potasio y cloruro en orina
CMD Urine Standard se emplea como calibrador en analiza- Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
dores automáticos de química clínica con módulo ISE, para reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
la determinación de sodio, potasio y cloruro en muestras de Este producto cumple con los requerimientos previstos
orina por el método de electrodos ion selectivo. Consultar
los valores asignados en los rótulos. C por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanita-
rios para el diagnóstico "in vitro"

Calibrador 1: solución conteniendo concentraciones bajas
Calibrador 2: solución conteniendo concentraciones altas Contenido suficiente para <n> ensayos
X
Reactivos Provistos: listos para usar. l Límite de temperatura (conservar a)
PRECAUCIONES  No congelar
Los reactivos para uso diagnóstico "in vitro".
Evitar ingestión y contacto con la piel. F Riesgo biológico
Cont. Contenido
g Número de lote
Reactivos Provistos: estables a temperatura ambiente
(2-30ºC) hasta la fecha de vencimiento indicada en el Xn
Nocivo
envase.
PRESENTACION
- 2 x 100 ml (Cód. 1009663) Xi
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
877010600 / 00 p. 1/2 UR150511
LINEA LIQUIDA
Colestat
C enzimático AA
Método enzimático para la determinación de coleste-
rol en suero o plasma
SIGNIFICACION CLINICA Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de

La determinación de colesterol en forma aislada tiene utilidad acuerdo a la normativa local vigente.
diagnóstica limitada. Sin embargo, su concentración varía
de manera más o menos predecible en un gran número de ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
condiciones clínicas. Se ha visto que el colesterol es uno ALMACENAMIENTO
de los factores contribuyentes a la formación de ateromas Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10oC)
dado que las complicaciones arterioscleróticas prevalecen hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No man-
en individuos hipercolesterolémicos. tener a temperaturas elevadas durante lapsos prolongados.
Diversos estudios epidemiológicos han permitido observar
además, que el riesgo de contraer enfermedad cardíaca INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
coronaria (ECC) para los individuos varones de más de 40 REACTIVOS
años con colesterolemia menor o igual a 2,10 g/l es 3 veces Lecturas del Blanco superiores a 0,160 D.O. son indicio de
menor que entre individuos con más de 2,30 g/l y 6 veces deterioro de los reactivos. En tal caso desechar.
menor que entre individuos con más de 2,60 g/l.
MUESTRA
FUNDAMENTOS DEL METODO Suero o plasma
La secuencia reaccional es la siguiente: a) Recolección: se debe obtener de la manera usual.
CHE
ésteres del colesterol olesterol + ácidos grasos plasma, se recomienda únicamente el uso de heparina como
anticoagulante para su obtención.
CHOD
colesterol + O2 colesten-3-ona + H2O2 c) Sustancias interferentes conocidas:
- Excepto la heparina, los anticoagulantes comunes interfie-
POD
ren en la determinación.
H2O2 + 4-AF + aceptor quinonimina roja
- Los sueros con hemólisis visible o intensa producen valores
falsamente aumentados por lo que no deben ser usados.
REACTIVOS PROVISTOS
- No se observan interferencias por bilirrubina hasta 80 mg/l,
S. Standard*: solución de colesterol 2 g/l.
ácido ascórbico hasta 75 mg/l, ácido úrico hasta 200 mg/l,
A. Reactivo A: solución conteniendo colesterol esterasa
ni hemólisis ligera.
(CHE), colesterol oxidasa (CHOD), peroxidasa (POD), 4-ami-
nofenazona (4-AF) y buffer Good, conteniendo fenol y colato
de sodio, en las siguientes concentraciones:
CHE........................................................................ ≥100 U/l colesterol en suero es estable por lo menos 1 semana
CHOD.................................................................... ≥ 100 U/l en refrigerador y 2 meses en congelador, sin agregado de
POD..................................................................... ≥ 1000 U/l conservantes.
4-AF..................................................................... 0,2 mmol/l
Good..................................................................... 50 mmol/l MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
Fenol.................................................................... 15 mmol/l - Espectrofotómetro o fotocolorímetro.
Colato de sodio................................................... 0,2 mmol/l - Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados.
- Tubos o cubetas espectrofotométricas de caras paralelas.
REACTIVOS NO PROVISTOS - Baño de agua a 37oC.
Calibrador A plus de Wiener lab. - Reloj o timer.

Reactivos Provistos: listos para usar. - Longitud de onda: 505 nm en espectrofotómetro o en foto
colorímetro con filtro verde (490-530 nm).
PRECAUCIONES - Temperatura de reacción: 37oC
Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro". - Tiempo de reacción: 5 minutos
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales - Volumen de muestra: 10 ul
de trabajo en el laboratorio de química clínica. - Volumen de Reactivo A: 1 ml

- Volumen final de reacción: 1,01 ml vez que se obtengan valores fuera del rango aceptable de
Los volúmenes de Muestra y Reactivo A pueden variarse pro- los controles (Standatrol S-E 2 niveles).
porcionalmente (Ej.: 20 ul de Muestra + 2 ml de Reactivo A).
PERFORMANCE
PROCEDIMIENTO muestras en 10 días diferentes, se obtuvo:
En tres tubos o cubetas espectrofotométricas marcadas Nivel D.S. C.V.
B (Blanco), S (Standard) y D (Desconocido), colocar: 1,24 g/l ± 0,043 g/l 3,49 %
B S D 3,31 g/l ± 0,115 g/l 3,48 %
Standard - 10 ul - b) Recuperación: agregando cantidades conocidas de co-
lesterol a distintos sueros, se obtuvo una recuperación entre
Muestra - - 10 ul
98 y 101%, para todo nivel de colesterol entre 1,90 y 4,79 g/l.
Reactivo A 1 ml 1 ml 1 ml c) Límite de detección: depende del fotómetro empleado.
Para una lectura de 0,001 D.O., el cambio mínimo de con-
Incubar 5 minutos en baño de agua a 37 C o 20 minutos
o
centración detectable será aproximadamente de 0,0063 g/l.
a temperatura ambiente (25oC). Leer en espectrofotómetro
d) Linealidad: la reacción es lineal hasta 5 g/l. Para valores
a 505 nm o en fotocolorímetro con filtro verde (490-530 nm),
superiores, diluir 1:2 con el Blanco y repetir la lectura multi-
llevando el aparato a cero con el Blanco.
plicando el resultado final por 2.

Para las instrucciones de programación debe consultarse el
El color de reacción final es estable 30 minutos, por lo que
Manual del Usuario del Analizador en uso. Para la calibra-
la absorbancia debe ser leída dentro de este lapso.
ción debe emplearse Calibrador A plus de Wiener lab., de
acuerdo a los requerimientos del analizador.
2,00 g/l
PRESENTACION
colesterol (g/l) = D x f donde f = - 6 x 60 ml (Cód. 1009308).
S
- 6 x 60 ml (Cód. 1009610).
- 4 x 100 ml (Cód. 1220114).
- 2 x 500 ml (Cód. 1220222).
colesterol (g/l) = colesterol (mg/dl) x 0,01
- 12 x 50 ml (Cód. 1009253).
colesterol (mmol/l) = colesterol (g/l) x 2,59
colesterol (g/l) = colesterol (mmol/l) x 0,39 Empleando los reactivos Colestat enzimático AA líquida
junto con HDL-Colesterol Reactivo Precipitante, HDL
METODO DE CONTROL DE CALIDAD Colesterol FT y LDL-Colesterol Reactivo Precipitante
Procesar 2 niveles de un material de control de calidad (provistos separadamente por Wiener lab.) es posible
(Standatrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas determinar el colesterol ligado a las lipoproteínas de alta
de colesterol, con cada determinación. densidad (HDL-colesterol) y a las lipoproteínas de baja
densidad (LDL-colesterol).
El panel de expertos del National Cholesterol Education Pro- BIBLIOGRAFIA
gram (NCEP) provee los siguientes valores de colesterol: - Abell, L.L. et al. - J. Biol. Chem. 195:357 (1952).
- Allain, C.C. et al.. - Clin. Chem. 20:470 (1974).
Deseable: < 2,00 g/l - American Health Foundation - Position statement on diet
Moderadamente alto: 2,00 - 2,39 g/l and coronary heart disease - pág. 255 (1972).
Elevado: ≥ 2,40 g/l - I.F.C.C. - Clin. Chim. Acta 87/3:459 F (1978).
No obstante, se recomienda que cada laboratorio establezca - Trinder, P. - Ann. Clin. Biochem. 6/24 (1969).
sus propios intervalos o valores de referencia. - Coniglio R.I. - Acta Bioq. Clin. Latinoam. XXIII/2:201 (1989).
- Expert Panel of National Cholesterol Education Program -
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO JAMA 285/19:2486 (2001).
Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA. - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
Los reductores disminuyen la respuesta de color mientras AACC Press, 4th ed., 2001.
que los oxidantes colorean el Reactivo A aumentando los
Blancos.
Los detergentes, metales pesados y cianuros son inhibidores
enzimáticos.
No emplear el Standard en analizador automático debido a
la distinta tensión superficial con respecto al suero, dada por
el disolvente empleado en su preparación.
Se recomienda realizar una recalibración semanal o cada
864121022 / 02 p. 2/9
Símbolos
C
M Elaborado por:

Europea Nocivo

Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
864121022 / 02 p. 3/9 UR120830
Colestat
C enzimático AA
Método enzimático para la determinación de colesterol
en suero o plasma

La determinación de colesterol en forma aislada tiene utilidad Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
diagnóstica limitada. Sin embargo, su concentración varía Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
de manera más o menos predecible en un gran número de de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
condiciones clínicas. Se ha visto que el colesterol es uno Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
de los factores contribuyentes a la formación de ateromas acuerdo a la normativa local vigente.
dado que las complicaciones arterioscleróticas prevalecen
en individuos hipercolesterolémicos. ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
Diversos estudios epidemiológicos han permitido observar ALMACENAMIENTO
además, que el riesgo de contraer enfermedad cardíaca Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10oC)
coronaria (ECC) para los individuos varones de más de 40 hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
años con colesterolemia menor o igual a 2,10 g/l es 3 veces Reactivo de Trabajo: en refrigerador (2-10oC) es estable 60
menor que entre individuos con más de 2,30 g/l y 6 veces días a partir del momento de su preparación.
menor que entre individuos con más de 2,60 g/l.
FUNDAMENTOS DEL METODO REACTIVOS
La secuencia reaccional es la siguiente: Lecturas del Blanco superiores a 0,160 D.O. son indicio de
CHE deterioro de los reactivos. En tal caso desechar.
ésteres del colesterol colesterol + ácidos grasos
CHOD MUESTRA
colesterol + O2 colesten-3-ona + H2O2 Suero o plasma
POD a) Recolección: se debe obtener de la manera usual.
H2O2 + 4-AF + aceptor quinonimina roja b) Aditivos: en caso de que la muestra a emplear sea
plasma, se recomienda únicamente el uso de heparina como
REACTIVOS PROVISTOS anticoagulante para su obtención.
S. Standard: solución de colesterol 2 g/l. Ver LIMITACIONES c) Sustancias interferentes conocidas:
DEL PROCEDIMIENTO. - Excepto la heparina, los anticoagulantes comunes interfie-
A Reactivo A: viales con colesterol esterasa (CHE), colesterol ren en la determinación.
oxidasa (CHOD), peroxidasa (POD) y 4-aminofenazona (4-AF). - Los sueros con hemólisis visible o intensa producen valores
B. Reactivo B: solución de buffer Good pH 6,8, conteniendo falsamente aumentados por lo que no deben ser usados.
fenol y colato de sodio. - No se observan interferencias por bilirrubina hasta 80 mg/l,
Concentraciones finales ácido ascórbico hasta 75 mg/l, ácido úrico hasta 200 mg/l,
CHE........................................................................ ≥100 U/l ni hemólisis ligera.
CHOD.................................................................... ≥ 100 U/l Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
POD..................................................................... ≥ 1000 U/l drogas en el presente método.
4-AF..................................................................... 0,2 mmol/l d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: el coles-
Good........................................................ 50 mmol/l; pH 6,8 terol en suero es estable por lo menos 1 semana en refrigerador
Fenol.................................................................... 15 mmol/l y 2 meses en congelador, sin agregado de conservantes.
Colato de sodio................................................... 0,2 mmol/l
REACTIVOS NO PROVISTOS - Espectrofotómetro.
Calibrador A plus de Wiener lab. - Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados.
INSTRUCCIONES PARA SU USO - Baño de agua a 37oC.
Reactivo de Trabajo: reconstituir el contenido de un vial de - Reloj o timer.
Reactivo A con una parte de Reactivo B. Transferir al frasco
de Reactivo B, enjuagando varias veces el vial con el mismo. CONDICIONES DE REACCION
Mezclar hasta disolución completa. Homogeneizar y fechar. - Longitud de onda: 505 nm en espectrofotómetro o en foto
870360022 / 01 p. 1/9
colorímetro con filtro verde (490-530 nm). - Los reductores disminuyen la respuesta de color mientras
- Temperatura de reacción: 37oC que los oxidantes colorean el Reactivo aumentando los
- Tiempo de reacción: 5 minutos Blancos.
- Volumen de muestra: 10 ul - Los detergentes, metales pesados y cianuros son inhibi-
- Volumen de Reactivo de Trabajo: 1 ml dores enzimáticos.
- Volumen final de reacción: 1,01 ml - No emplear el Standard en analizador automático debido
Los volúmenes de Muestra y Reactivo pueden variarse a la distinta tensión superficial con respecto al suero, dada
proporcionalmente (Ej.: 20 ul de Muestra + 2 ml de Reactivo por el disolvente empleado en su preparación.
de Trabajo o 50 ul + 5 ml).
PERFORMANCE
PROCEDIMIENTO muestras en 10 días diferentes, se obtuvo:
En tres tubos o cubetas espectrofotométricas marcadas Nivel D.S. C.V.
B (Blanco), S (Standard) y D (Desconocido), colocar: 1,24 g/l ± 0,043 g/l 3,49 %
B S D 3,31 g/l ± 0,115 g/l 3,48 %
Standard - 10 ul - b) Recuperación: agregando cantidades conocidas de co-
Muestra - - 10 ul lesterol a distintos sueros, se obtuvo una recuperación entre
98 y 101%, para todo nivel de colesterol entre 1,90 y 4,79 g/l.
Reactivo de Trabajo 1 ml 1 ml 1 ml c) Límite de detección: depende del fotómetro empleado.
Incubar 5 minutos en baño de agua a 37oC o 20 minutos a Para una lectura de 0,001 D.O., el cambio mínimo de con-
temperatura ambiente (25oC). Leer en espectrofotómetro a centración detectable será aproximadamente de 0,0063 g/l.
505 nm o en fotocolorímetro con filtro verde (490-530 nm), d) Linealidad: la reacción es lineal hasta 5 g/l. Para valores
llevando el aparato a cero con el Blanco. superiores, diluir 1/2 con el Blanco y repetir la lectura multi-
ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS

El color de reacción final es estable 30 minutos, por lo que la Para las instrucciones de programación debe consultarse el
absorbancia debe ser leída dentro de este lapso. Manual del Usuario del Analizador en uso. Para la calibra-
CALCULO DE LOS RESULTADOS acuerdo a los requerimientos del analizador.
2,00 g/l PRESENTACION

colesterol (g/l) = D x f donde f = - 1 x 100 ml (Cód. 1220110).
S - 4 x 100 ml (Cód. 1220001).
Empleando los reactivos Colestat enzimático AA junto con
HDL Colesterol Reactivo Precipitante, HDL Colesterol FT
colesterol (g/l) = colesterol (mg/dl) x 0,01
y LDL Colesterol Reactivo Precipitante (provistos separa-
colesterol (mmol/l) = colesterol (g/l) x 2,59
damente por Wiener lab.) es posible determinar el colesterol
colesterol (g/l) = colesterol (mmol/l) x 0,39
ligado a las lipoproteínas de alta densidad (HDL colesterol) y
a las lipoproteínas de baja densidad (LDL colesterol).
Procesar 2 niveles de un material de control de calidad
BIBLIOGRAFIA
- Abell, L.L. et al. - J. Biol. Chem. 195:357 (1952).
de colesterol, con cada determinación.
- Allain, C.C. et al.. - Clin. Chem. 20:470 (1974).
- American Health Foundation - Position statement on diet
and coronary heart disease - pág. 255 (1972).
El panel de expertos del National Cholesterol Education
- I.F.C.C. - Clin. Chim. Acta 87/3:459 F (1978).
Pro-gram (NCEP) provee los siguientes valores de co-
- Trinder, P. - Ann. Clin. Biochem. 6/24 (1969).
lesterol:
- Coniglio R.I. - Acta Bioq. Clin. Latinoam. XXIII/2:201 (1989).
Deseable: < 2,00 g/l - Expert Panel of National Cholesterol Education Program -
Moderadamente alto: 2,00 - 2,39 g/l JAMA 285/19:2486 (2001).
Elevado: ≥ 2,40 g/l - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
No obstante, se recomienda que cada laboratorio establezca AACC Press, 4th ed., 2001.
sus propios intervalos o valores de referencia.

870360022 / 01 p. 2/9
Símbolos
C
M Elaborado por:

Europea Nocivo

Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870360022 / 01 p. 3/9 UR120327
Colestat
enzimático
Método enzimático para la determinación de colesterol
en suero o plasma
SIGNIFICACION CLINICA Mezclar por inversión, sin agitar. Rotular y fechar.

La determinación de colesterol en forma aislada tiene utilidad Pueden prepararse distintas cantidades respetando las pro-
diagnóstica limitada. Se ha visto que el colesterol es uno porciones establecidas. Es importante además, respetar el
de los factores contribuyentes a la formación de ateromas orden de agregado de los reactivos y asegurar una perfecta
dado que las complicaciones arterioscleróticas prevalecen homogeneización de los mismos, a fin de que el Reactivo B
en individuos hipercolesterolémicos. no deteriore el Reactivo de Trabajo.
Estudios epidemiológicos demuestran que el riesgo de con-
traer enfermedad cardíaca coronaria para individuos de más PRECAUCIONES
de 40 años con colesterolemia menor a 2,10 g/l es 3 veces Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
menor que entre individuos con más de 2,30 g/l y 6 veces El Reactivo B (fenol) es tóxico e irritante. R36/38: irrita los
menor que entre individuos con más de 2,60 g/l. ojos y la piel. R25: tóxico por ingestión. S24/25: evítese el
contacto con los ojos y la piel. S37/39: usar guantes ade-
FUNDAMENTOS DEL METODO cuados y protección para los ojos/la cara.
El esquema reaccional es el siguiente: Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
lipasa de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
ésteres de colesterol colesterol + ácidos grasos Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
CHOD acuerdo a la normativa local vigente.
colesterol + O2 colesten-3-ona + H2O2
POD ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
H2O2 + 4-AF + fenol quinona coloreada + H2O ALMACENAMIENTO
Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10oC)
REACTIVOS PROVISTOS hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No man-
A. Reactivo A: solución de 4-aminofenazona 25 mmol/l. tener a temperaturas elevadas durante lapsos prolongados.
B. Reactivo B: solución de fenol 55 mmol/l. Reactivo de Trabajo: en refrigerador y en frasco de vidrio
C. Reactivo C: suspensión conteniendo lipasa fungal 300 U/ml, co- color caramelo es estable 1 mes a partir del momento de
lesterol oxidasa (CHOD) 3 U/ml y peroxidasa (POD) 20 U/ml. su preparación.
S. Standard: solución de colesterol 2 g/l.
Concentraciones finales INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
Lipasa.................................................................. ≥ 6000 U/l REACTIVOS
CHOD...................................................................... ≥ 60 U/l Durante el uso, el Reactivo de Trabajo puede desarrollar un
POD...................................................................... ≥ 400 U/l ligero color rosado que no afecta los resultados siempre que
4-AF................................................................... 1,25 mmol/l se procese un Blanco con cada lote de determinaciones y
Fenol................................................................. 2,75 mmol/l un Standard periódicamente. Desechar cuando las lecturas
pH......................................................... 7,4 ± 0,1 (a to amb.) del Blanco sean superiores a 0,160 D.O. o las lecturas del
Standard sean anormalmente bajas.
Agua destilada. Ver LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO. MUESTRA
Suero o plasma
INSTRUCCIONES PARA SU USO a) Recolección: se debe obtener suero o plasma de la
Standard: mezclar por inversión antes de usar. manera usual.
Reactivo A: listo para usar. b) Aditivos: en caso de que la muestra a emplear sea
Reactivo B: listo para usar. Ver PRECAUCIONES. plasma, se recomienda únicamente el uso de heparina como
Reactivo C: homogeneizar por inversión antes de usar, anticoagulante para su obtención.
evitando la formación de espuma. c) Sustancias interferentes conocidas:
Reactivo de Trabajo: según el volumen de trabajo colocar en - Excepto la heparina, los anticoagulantes comunes interfie-
una probeta 50 partes de agua destilada, 5 partes de Reactivo A, ren en la determinación.
5 partes de Reactivo B y llevar a 100 partes con agua destilada. - Los sueros con hemólisis visible o intensa producen valores
Agregar 2 partes de Reactivo C previamente homogeneizadas. falsamente aumentados por lo que no deben ser usados.
870350022 / 00 p. 1/9
- En sueros fuertemente hiperlipémicos puede observarse CONVERSION DE UNIDADES
turbiedad: en tal caso, diluir el volumen final de reacción colesterol (g/l) = colesterol (mg/dl) x 0,01
a 1/2 ó 1/3 con Blanco de reactivos, repetir la lectura y colesterol (mmol/l) = colesterol (g/l) x 2,59
multiplicar el resultado por el factor de dilución. colesterol (g/l) = colesterol (mmol/l) x 0,39
- No interfieren: bilirrubina hasta 200 mg/l, ácido ascórbico
hasta 75 mg/l, ácido úrico hasta 200 mg/l, ni hemólisis ligera. METODO DE CONTROL DE CALIDAD
Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las Procesar 2 niveles de un material de control de calidad
drogas en el presente método. (Standatrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: el de colesterol, con cada determinación.
colesterol en suero es estable 1 semana en refrigerador
(2-10oC) y 2 meses congelado, sin agregado de conser- VALORES DE REFERENCIA
vadores. El panel de expertos del National Cholesterol Education Pro-
gram (NCEP) provee los siguientes valores de colesterol:
MATERIAL REQUERIDO (no provisto) Deseable: < 2,00 g/l
- Espectrofotómetro o fotocolorímetro. Moderadamente alto: 2,00 - 2,39 g/l
- Micropipetas, pipetas y material volumétrico adecuados. Elevado: ≥ 2,40 g/l
- Frasco de vidrio color caramelo.
No obstante, se recomienda que cada laboratorio establezca
- Baño de agua a 37°C (opcional).
- Reloj o timer.
Otras causas de resultados erróneos son:
- Longitud de onda: 505 nm en espectrofotómetro o en
- Los reductores disminuyen la respuesta de color mientras
fotocolorímetro con filtro verde (490-530 nm).
que los oxidantes colorean el Reactivo aumentando los
- Temperatura de reacción: 37°C
Blancos. Dichos agentes son frecuentemente encontrados
en el agua destilada empleada para preparar el Reactivo
de Trabajo, por lo que se recomienda controlar la calidad
- Volumen de Reactivo de Trabajo: 2 ml
de la misma.
- Los detergentes, metales pesados y cianuros son inhibi-
Los volúmenes de Muestra y Reactivo pueden aumentarse o
dores enzimáticos.
disminuirse proporcionalmente (Ej.: 10 ul de Muestra + 1 ml
- Incubación incorrecta. El nivel del agua en el baño no debe
de Reactivo de Trabajo o 50 ul + 5 ml).
ser inferior al de los reactivos en los tubos.
- Uso del Standard de un equipo con los reactivos de otro. Los
reactivos y el Standard de cada equipo forman un conjunto
PROCEDIMIENTO
perfectamente controlado y estandarizado.
En tres tubos de fotocolorímetro o cubetas espectro-
fotométricas marcadas B (Blanco), S (Standard) y D
PERFORMANCE
B S D muestras en 10 días diferentes, se obtuvo:
Standard - 20 ul - Nivel D.S. C.V.
1,57 g/l ± 0,033 g/l 2,32 %
Muestra - - 20 ul
2,90 g/l ± 0,065 g/l 2,23 %
Reactivo de Trabajo 2 ml 2 ml 2 ml 4,71 g/l ± 0,102 g/l 2,13 %
Incubar 15 minutos en baño de agua a 37oC o 30 minutos b) Recuperación: agregando cantidades conocidas de co-
a temperatura ambiente (25oC). Leer en fotocolorímetro lesterol a distintos sueros, se obtuvo una recuperación entre
con filtro verde (490-530 nm) o en espectrofotómetro a 98 y 101%, para todo nivel de colesterol entre 1,90 y 4,79 g/l.
505 nm, llevando el aparato a cero con el Blanco. c) Límite de detección: depende del fotómetro empleado
requerida, el cambio mínimo de concentración detectable
ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL para 0,001 D.O. será aproximadamente de 0,007 g/l.
El color de reacción final es estable dos horas, por lo que la d) Linealidad: la reacción es lineal hasta 5 g/l. Para valores
superiores, diluir 1/2 con el Blanco y repetir la lectura multi-
colesterol (g/l) = D x f donde f = - 250 ml (Cód. 1220101)
S - 1000 ml (Cód. 1220102)
870350022 / 00 p. 2/9
Empleando los reactivos de Colestat enzimático junto con SÍMBOLOS
HDL-Colesterol Reactivo Precipitante o HDL-Colesterol Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
FT y LDL-Colesterol Reactivo Precipitante (provistos reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
separadamente por Wiener lab.) es posible determinar
el colesterol ligado a las lipoproteínas de alta densidad Este producto cumple con los requerimientos previstos
(HDL-colesterol) y a las lipoproteínas de baja densidad
(LDL-colesterol). C por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios
BIBLIOGRAFIA
- Allain, C.C. et al. - Clin. Chem. 20:470 (1974).
- American Health Foundation - Position statement on diet
and coronary heart disease - pág. 255 (1972). Contenido suficiente para <n> ensayos
- Castelli, W.P. - Current Prescribing 6/77:39 (1977).
X
- Flegg, A.S. - Ann. Clin. Biochem. 10:79 (1973). H Fecha de caducidad
- Coniglio R.I. - Acta Bioq. Clin. Latinoam. XXIII/2:201, 1989.
- Expert Panel of National Cholesterol Education Program  No congelar

- JAMA 285/19:2486 (2001).
- Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests", F Riesgo biológico
Cont. Contenido
g Número de lote
Elaborado por:
M
Xn
Nocivo
Xi
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
870350022 / 00 p. 3/9 UR091119
Colinesterasa
C Para la determinación de colinesterasa en suero o plasma
AA

Se ha demostrado la existencia de dos colinesterasas: una Reactivo A; preparación: agregar la cantidad de Reactivo
es la acetilcolinesterasa o colinesterasa verdadera (acetil C indicada en el rótulo. Homogeneizar por inversión hasta
colina hidrolasa, EC. 3.1.1.7) que se encuentra en eritroci- disolución completa y fechar.
tos y terminaciones de nervios colinérgicos, y la otra es la Reactivo B; preparación: agregar la cantidad de Reactivo
butirilcolinesterasa o pseudocolinesterasa (EC. 3.1.1.8) que D indicada en el rótulo. Homogeneizar por inversión hasta
se encuentra en plasma, hígado, músculo liso y adipocitos. disolución completa y fechar.
La colinesterasa del suero o plasma (Che) o pseudocolines- Reactivos C y D: listos para usar.
terasa está asociada a las siguientes condiciones clínicas:
1) Constituye un índice de función hepática, especialmente PRECAUCIONES
en hepatopatías crónicas. Se observa una buena correlación Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
entre el aumento de GOT (AST) y la disminución de Che, en Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
hepatitis infecciosas. de trabajo en el laboratorio de química clínica.
2) Su disminución indica intoxicación por insecticidas orga- Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
nofosforados, inhibidores de la Che. acuerdo a la normativa local vigente.
3) En algunos individuos sensibles a la succinilcolina, rela-
jante muscular administrado durante la anestesia, se observa ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
una apnea post-anestésica prolongada y en algunos casos, ALMACENAMIENTO
fatal. Esto coincide con la presencia de una variante genética Reactivos Provistos: estables en refrigerador (2-10oC)
de la Che ("atípica") incapaz de hidrolizar a la succinilcolina. hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
En sujetos normales, esta droga es hidrolizada "in vivo" por la Reactivo A reconstituido: estable 6 semanas en refrigera-
Che, en 1 a 4 minutos, por eso la apnea también se relaciona dor (2-10oC). Conservar protegido de la luz.
con bajos niveles de Che total. Reactivo B reconstituido: estable 6 semanas en refrigera-
Existen métodos de inhibición diferencial que permiten de- dor (2-10oC). No debe permanecer destapado.
tectar a sujetos portadores de colinesterasa atípica. Reactivos C y D: una vez abiertos, no deben permanecer
destapados ni fuera del refrigerador por períodos prolonga-
FUNDAMENTOS DEL METODO dos. Evitar contaminaciones.
Che
butiriltiocolina + H2O tiocolina + butirato MUESTRA
Suero o plasma
tiocolina + DTNB 2-nitro-5-mercaptobenzoato
a) Recolección: obtener la muestra de la manera usual.
b) Aditivos: en caso de emplear plasma como muestra, se
REACTIVOS PROVISTOS
recomienda el uso de heparina o EDTA (Anticoagulante W
A. Reactivo A: viales conteniendo ácido 5,5'-ditiobis-2-nitro-
de Wiener lab.) como anticoagulantes para su obtención.
benzoico (DTNB) en buffer fosfatos para un pH final de la
mezcla de reacción de 7,7.
interferencias por bilirrubina hasta 200 mg/l, triglicéridos
B. Reactivo B: viales conteniendo ioduro de S-butiriltiocolina
hasta 25 g/l, hemoglobina hasta 1000 mg/dl ni heparina
(IBTC).
hasta 50 U/ml de sangre entera.
C. Reactivo C: solución acuosa reconstituyente del Reactivo
A, con conservantes apropiados.
D. Reactivo D: solución acuosa reconstituyente del Reactivo
B, con conservantes apropiados.
Concentraciones finales varse hasta una semana en el refrigerador (2-10oC), sin
IBTC....................................................................... 6 mmol/l agregado de conservadores.
DTNB................................................................. 0,25 mmol/l
Buffer fosfatos......................................... 50 mmol/l; pH 7,7 MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
REACTIVOS NO PROVISTOS - Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados.
Solución fisiológica. - Cubetas espectrofotométricas de caras paralelas.
870380000 / 01 p. 1/6
- Tubos de Kahn o hemólisis. Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios
- Baño de agua a la temperatura de reacción seleccionada. valores de referencia.
- Cronómetro.
CONDICIONES DE REACCION Colinesterasa (kU/l) = Colinesterasa (U/l) x 0,001
- Temperatura de reacción: 25, 30 ó 37oC. La temperatura METODO DE CONTROL DE CALIDAD
de la mezcla de reacción debe ser estrictamente mante- Procesar 2 niveles de un material de control de calidad
nida a la temperatura seleccionada. Ver los VALORES (Standatrol S-E 2 niveles) con actividades conocidas de
DE REFERENCIA correspondientes a cada temperatura. colinesterasa, con cada determinación.
- Volumen de muestra: 10 ul LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
- Volumen final de reacción: 1,51 ml Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
Los volúmenes de muestra y reactivos pueden variarse Para preservar la integridad de los reactivos deben evitarse
proporcionalmente, sin que se alteren los factores de cálculo. todo tipo de contaminaciones, empleando para la medición
PROCEDIMIENTO PERFORMANCE
Preincubar la cantidad necesaria de Reactivo B recons- a) Precisión: procesando de acuerdo al protocolo EP5A
tituido, a la temperatura seleccionada durante algunos del NCCLS (National Committee on Clinical Laboratory
minutos. En una cubeta mantenida a la temperatura Standards), se obtuvo lo siguiente:
elegida, colocar:
Reactivo A reconstituido 1,2 ml Nivel D.S. C.V.
Preincubar 2 minutos. Luego agregar: 8863 U/l ± 100,75 U/l 1,14 %
4811 U/l ± 46,69 U/l 0,97 %
Muestra 10 ul
Homogeneizar e inmediatamente agregar: Precisión total
Nivel D.S. C.V.
Reactivo B reconstituido 0,3 ml
8863 U/l ± 177,68 U/l 2,00 %
Mezclar, incubar 15 segundos y leer la absorbancia dispa- 4811 U/l ± 94,79 U/l 1,97 %
rando simultáneamente el cronómetro. Volver a leer luego
de 30 y 60 segundos exactos. Determinar la diferencia b) Límite de detección: depende del fotómetro empleado y
promedio de absorbancia cada 30 segundos (∆A/30 seg) de la longitud de onda. En espectrofotómetros con cubetas
restando cada lectura de la anterior y promediando los de caras paralelas de 1 cm de espesor, para un ∆A/30 seg de
valores. Utilizar este promedio para los cálculos. 0,001 el mínimo cambio de actividad detectable será de 22 U/l.
c) Rango dinámico: si ∆A/30 seg es superior a 0,400, se
debe repetir la determinación con Muestra diluida 1/2 con
CALCULO DE LOS RESULTADOS solución fisiológica, corrigiendo consecuentemente los
Colinesterasa (U/l) = ∆A/30 seg x 22210 resultados.
d) Linealidad: la reacción es lineal hasta 17000 U/l. Para
VALORES DE REFERENCIA valores superiores, diluir la muestra con solución fisiológica,
repetir la determinación y multiplicar el resultado por el factor
25oC 30oC* 37oC* de dilución.
Niños, hombres y mujeres de más de 40 años:
3500-8500 U/l 4300-10500 U/l 5500-13400 U/l Para las instrucciones de programación, consulte el manual
Mujeres entre 16-39 años, no embarazadas y que no toman del usuario del analizador en uso.
anticonceptivos orales:
PRESENTACION
2800-7400 U/l 3450-9100 U/l 4400-11700 U/l 78 ml: 3 x → 20 ml Reactivo A
Mujeres entre 18-41 años, embarazadas o tomando anti- 3 x → 6 ml Reactivo B
conceptivos orales: 1 x 60 ml Reactivo C
1 x 20 ml Reactivo D
2400-6000 U/l 3000-7400 U/l 3800-9500 U/l (Cód. 1241403)
* Valores calculados empleando los siguientes factores de
conversión de temperaturas: BIBLIOGRAFIA
- Szasz, G. - Clin. Chim. Acta 19:191 (1968).
25-30oC: 1,23 25-37oC: 1,58 - Knedel, M. y Böttger, R. - Klin. Wochr. 45/325 (1967).
870380000 / 01 p. 2/6
- Dietz, A.S. et al. - Clin. Chem. 19/11:1309 (1973). SÍMBOLOS
- den Blaauwen, D.H. et al. - J. Clin. Chem. Biochem. Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
21/6:381 (1983). reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
- Ellman, G. - Archives of Biochemistry and Biophysics
82:70 (1959). Este producto cumple con los requerimientos previstos
- Newman, M.A., Que Hee S.S. - Clin. Chem. 30/2:308
(1984). C por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios
E. (3º Edition) WB Saunders, 1999.
AACC Press, 3rd ed., 1990.
- NCCLS (National Committee for Clinical Chemistry Stan- Contenido suficiente para <n> ensayos
dards) - Document "Evaluation of the Linearity of Quantita-
X
tive Analytical Methods", EP6-P (1986). H Fecha de caducidad
- NCCLS (National Committee for Clinical Chemistry Stan-
dards) - Document "Evaluation of Precision Performance
of Clinical Laboratory Devices", EP5-A (1999).
 No congelar
F Riesgo biológico
Cont. Contenido
g Número de lote
Elaborado por:
M
Nocivo
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo
Wiener lab.
Riobamba 2944
Bioquímica
870380000 / 01 p. 3/6 UR100528
Colinesterasa
Método cinético a 405 nm para la determinación de
colinesterasa en suero o plasma

Se ha demostrado la existencia de dos colinesterasas: una Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
es la acetilcolinesterasa o colinesterasa verdadera (acetil Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
colina hidrolasa, EC. 3.1.1.7) que se encuentra en eritroci- de trabajo en el laboratorio de química clínica.
tos y terminaciones de nervios colinérgicos, y la otra es la Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
butirilcolinesterasa o pseudocolinesterasa (EC. 3.1.1.8) que acuerdo a la normativa local vigente.
se encuentra en plasma, hígado, músculo liso y adipocitos.
La colinesterasa del suero o plasma (Che) o pseudocolines- ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
terasa está asociada a las siguientes condiciones clínicas: ALMACENAMIENTO
1) Constituye un índice de función hepática, especialmente Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10oC)
en hepatopatías crónicas. Se observa una buena correlación hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
entre el aumento de GOT (AST) y la disminución de Che, Reactivo A reconstituido: es estable una hora a tempe-
en hepatitis infecciosas. ratura ambiente.
2) Su disminución indica intoxicación por insecticidas orga-
nofosforados, inhibidores de la Che. INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
3) En algunos individuos sensibles a la succinilcolina, rela- REACTIVOS
jante muscular administrado durante la anestesia, se observa El cambio de coloración de los reactivos puede indicar
una apnea post-anestésica prolongada y en algunos casos, deterioro de los mismos.
fatal. Esto coincide con la presencia de una variante genética
de la Che ("atípica") incapaz de hidrolizar a la succinilcolina. MUESTRA
En sujetos normales, esta droga es hidrolizada "in vivo" Suero o plasma
por la Che, en 1 a 4 minutos, por eso la apnea también se a) Recolección: se debe obtener suero de la manera usual.
relaciona con bajos niveles de Che total. b) Aditivos: en caso de emplear plasma como muestra, se
recomienda el uso de heparina o EDTA (Anticoagulante W
FUNDAMENTOS DEL METODO de Wiener lab.) como anticoagulantes para su obtención.
Che c) Sustancias interferentes conocidas: los anticoagulan-
butiriltiocolina + H2O tiocolina + butirato tes que contienen citrato, fluoruro u oxalato producen una
leve inhibición.
tiocolina + DTNB 2-nitro-5-mercaptobenzoato
REACTIVOS PROVISTOS
A. Reactivo A: viales conteniendo ioduro de S-butiriltiocolina
y ácido 5,5'-ditiobis-2-nitrobenzoico (DTNB) desecados.
varse hasta una semana en el refrigerador (2-10oC), sin
B. Reactivo B: solución de buffer fosfatos para pH final 7,7.
agregado de conservadores.
Concentraciones finales
Ioduro de S-butiriltiocolina...................................... 7 mmol/l MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
DTNB................................................................. 0,25 mmol/l - Espectrofotómetro.
Fosfatos................................................... 50 mmol/l; pH 7,7 - Micropipetas y pipetas.
REACTIVOS NO PROVISTOS - Baño de agua.
Solución fisiológica. - Cronómetro.

Reactivo B: listo para usar. Puede presentar cristales que - Longitud de onda: 405 nm
sedimentan en reposo y no afectan su reactividad. Pipetear - Temperatura de reacción: 25, 30 ó 37oC
sin remover el sedimento. - Tiempo de reacción: depende del PROCEDIMIENTO (I o II)
Reactivo A: agregar 3 ml de Reactivo B a un vial de Reactivo - Volumen de muestra: 20 ul
A. Tapar y agitar hasta disolución completa. Reconstituir en - Volumen de Reactivo A: 3 ml
el momento de usar. - Volumen final de reacción: 3,02 ml
870370000 / 01 p. 1/6
donde:
I- PROCEDIMIENTO CON ∆T FIJO ∆T = tiempo promedio en segundos
A) 25 - 30oC La Tabla II permite realizar este cálculo directamente.
En una cubeta mantenida a la temperatura elegida, Ver Equivalencia de unidades en I.
colocar:
Reactivo A reconstituido 3 ml VALORES DE REFERENCIA
Preincubar unos minutos. Luego agregar: 25oC 30oC* 37oC*

Muestra 20 ul 3.200-9.000 U/l 3.962-11.142 U/l 4.970-13.977 U/l
Mezclar inmediatamente y leer la absorbancia, dispa- * Calculados
rando simultáneamente el cronómetro. Volver a leer Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios
luego de 30, 60 y 90 segundos exactos. Determinar la valores de referencia.
diferencia promedio de absorbancia cada 30 segundos
(∆A/30 seg) restando cada lectura de la anterior y CONVERSION DE UNIDADES AL SISTEMA SI
promediando los valores. Utilizar este promedio para Colinesterasa (kU/l) = Colinesterasa (U/l) x 0,001
los cálculos.
B) 37oC METODO DE CONTROL DE CALIDAD
Usar Muestra diluida 1/2 con solución fisiológica y Procesar 2 niveles de un material de control de calidad
seguir el procedimiento descripto (I-A). Multiplicar el (Standatrol S-E 2 niveles) con actividades conocidas de
resultado obtenido por 2. colinesterasa, con cada determinación.

I- CALCULO DE LOS RESULTADOS Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
Colinesterasa (U/l) = ∆A/30 seg x 22.710 Para preservar la integridad de los reactivos deben evitarse
La Tabla I permite realizar este cálculo directamente. únicamente micropipetas perfectamente limpias y secas.
Equivalencia de unidades:
1 U/ml = 1 kU/l = 1000 U/l PERFORMANCE
a) Reproducibilidad: empleando el procedimiento I (con ∆T
fijo) y procesando replicados de las mismas muestras en un
II- PROCEDIMIENTO CON ∆A FIJO mismo día, se obtuvieron los siguientes datos:
A) 25 - 30oC Nivel D.S. C.V.
En una cubeta mantenida a la temperatura elegida, 6.145 U/l ± 90,8 U/l 1,47 %
colocar: 2.584 U/l ± 67,0 U/l 2,59 %
Reactivo A reconstituido 3 ml b) Límite de detección: el mínimo cambio de actividad
detectable es 23 U/l.
c) Rango dinámico: si ∆A/30 seg es superior a 0,250
Muestra 20 ul (procedimiento con ∆T fijo) o ∆T/0,100 D.O. es inferior a
5 segundos (procedimiento con ∆A fijo), se debe repetir la
Mezclar inmediatamente; registrar la absorbancia,
determinación con Muestra diluida 1/2 ó 1/5 con solución
disparando simultáneamente el cronómetro y medir el
fisiológica, corrigiendo consecuentemente los resultados.
tiempo en segundos en que se produce un aumento
d) Linealidad: la reacción es lineal hasta 5.650 U/l cuando
de absorbancia de 0,100 (∆A = 0,100 D.O.). Medir
se emplea el procedimiento con ∆T fijo y hasta 9.000 U/l
tres intervalos de tiempo consecutivos. Determinar el
cuando se emplea el procedimiento con ∆A fijo.
valor medio de los tiempos obtenidos (∆T/0,100 D.O.)
y utilizar este promedio para los cálculos.
PRESENTACION
B) 37oC - 20 x 3 ml (Cód. 1241401).
Usar Muestra diluida al 1/2 con solución fisiológica y
seguir el procedimiento descripto (II-A). Multiplicar el BIBLIOGRAFIA
resultado obtenido por 2. - Szasz, G. - Clin. Chim. Acta 19:191 (1968).
- Knedel, K. y Böttger, R. - Klin. Wochr. 45/325 (1967).
- Lippi, U. y Cagnin, V. - Lab. V/6:615 (1978).
II- CALCULO DE LOS RESULTADOS - De Díaz, M. et al. - Rev. Asoc. Bioq. Arg. - 54/1-2:15 (1990).
68.120
Colinesterasa (U/l) =
∆T/0,100 D.O.
870370000 / 01 p. 2/6
SÍMBOLOS
TABLA I (25-30-37oC)
∆A/30 seg U/l ∆A/30 seg U/l reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
0,010 227 0,130 2.952
0,015 341 0,135 3.066 Este producto cumple con los requerimientos previstos

0,020
0,025
454
568
0,454
0,145
3.179
3.283

0,030
0,035
681
795
0,150
0,155
3.407
3.520 P Representante autorizado en la Comunidad Europea
0,040 908 0,160 3.634
0,045 1.022 0,165 3.747 V Uso diagnóstico "in vitro"
0,050 1.136 0,170 3.861
0,055 1.249 0,175 3.974 X Contenido suficiente para <n> ensayos
0,060 1.363 0,180 4.088
0,065 1.476 0,185 4.201 H Fecha de caducidad
0,070 1.590 0,190 4.315
0,075 1.703 0,195 4.428 l Límite de temperatura (conservar a)
0,080 1.817 0,200 4.542
0,085 1.930 0,205 4.655  No congelar
0,090 2.044 0,210 4.769
0,095 2.157 0,215 4.883 F Riesgo biológico
0,100 2.271 0,220 4.996
0,105 2.385 0,225 5.110
0,110 2.498 0,230 5.223 Contenido
Cont.
0,115 2.612 0,235 5.337
0,120 2.725 0,240 5.450
0,125 2.839 0,245 5.564
g Número de lote
0,250 5.677 Elaborado por:

M
Nocivo
TABLA II (25-30-37oC)
t U/l t U/l Corrosivo / Cáustico
4 17.030 32 2.129
Irritante
5 13.624 34 2.004
6 11.353 36 1.892
7 9.731 38 1.793 i Consultar instrucciones de uso
8 8.515 40 1.703
Calibr. Calibrador
9 7.569 42 1.622
10 6.812 44 1.548
11 6.193 46 1.481 b Control
12 5.677 48 1.419
13 5.240 50 1.362 b Control Positivo
14 4.866 55 1.239
15 4.541 60 1.135
c Control Negativo
16 4.258 65 1.048
17 4.007 70 973
18 3.784 75 908
19 3.585 80 852
20 3.406 85 801
21 3.244 90 757
22 3.096 95 717
23 2.962 100 681
24 2.838 120 568
25 2.725 140 487
26 2.620 160 426
27 2.523 180 379
28 2.433 200 341 M Wiener Laboratorios S.A.I.C.
29 2.349 250 272
Wiener lab.
Riobamba 2944
30 2.271 300 227 http://www.wiener-lab.com.ar
350 195 Dir. Téc.: Viviana E. Cétola
Bioquímica
Disp. Nº: 5996/83-5635/98-3479/13 2000 Rosario - Argentina
870370000 / 01 p. 3/6 UR120531
LINEA TURBITEST AA
Control Inmunológico
C nivel 1
Para el control de la precisión de métodos inmunoturbidimétricos
Lote: 1312128960
Exp.: 2015/11
APLICACIONES El Control ha sido preparado a partir de material no reactivo

El Control Inmunológico está diseñado para ser usado para HBsAg, HCV y HIV. Sin embargo debe manejarse como
para el control de la precisión de reactivos turbidimétricos. si se tratara de muestras infectivas.
Consultar la tabla de valores asignados para los constituyen- Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
tes, debido a que los mismos son lote específicos. de trabajo en el laboratorio de química clínica.
REACTIVOS PROVISTOS acuerdo a la normativa local vigente.
Control Inmunológico nivel 1: suero humano inactivado
con conservadores apropiados. ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
ALMACENAMIENTO
INSTRUCCIONES PARA SU USO Reactivo Provisto: estable en refrigerador (2-10oC) hasta la
Los Reactivos Provistos son listos para usar. fecha de vencimiento indicada en el envase. Una vez abierto
la estabilidad es de 45 días refrigerado (2-10oC).
PRECAUCIONES
El reactivo es para uso diagnóstico "in vitro". PRESENTACION
Evitar ingestión y contacto con la piel. - 1 x 1 mL (Cód. 1933261).
VALORES ASIGNADOS
ANALITO UNIDAD KIT VALOR MEDIO RANGO
α1-Antitripsina mg/dL α1-Antytripsin Turbitest AA 76,4 57,3 95,5
α1-Glicoproteína mg/dL AGP Turbitest AA 42,5 34,0 51,0
α2-Macroglobulina mg/dL α2-Macroglobulin Turbitest AA 110 88 132
Antiestreptolisina O UI/mL ASO látex Turbitest AA 122 98 146
Cadena liviana kappa mg/dL κ-Light Chain Turbitest AA 179 134 224
Cadena liviana lambda mg/dL λ-Light Chain Turbitest AA 92,7 69,5 115,9
Ceruloplasmina mg/dL Ceruloplasmin Turbitest AA 13,3 10,0 16,6
Componente C3 mg/dL C3 Turbitest AA 75,6 60,5 90,7
Factor reumatoideo UI/mL FR látex Turbitest AA 35,6 28,5 42,7
Haptoglobina mg/dL Haptoglobin Turbitest AA 67,8 50,9 84,8
Inhibidor de C1-esterasa mg/dL C1-Esterase Inhibitor Turbitest AA 15,8 11,9 19,8
Inmunoglobulina A mg/dL IgA Turbitest AA 116 93 139
Inmunoglobulina G mg/dL IgG Turbitest AA 652 522 782
Inmunoglobulina M mg/dL IgM Turbitest AA 79,6 63,7 95,5
Prealbúmina mg/dL Prealbumin Turbitest AA 16,4 12,3 20,5
Proteína C reactiva mg/L PCR Turbitest AA 13,8 11,0 16,6
mg/L PCR ultrasensible Turbitest AA 12,8 10,2 15,4
Transferrina mg/dL TRF Turbitest AA 110 88 132
870390000 / 19 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
870390000 / 19 p. 2/4 UR131205
LINEA TURBITEST AA
C nivel 1
Lote: 1401132800
Exp.: 2016/01

ALMACENAMIENTO
PRECAUCIONES
VALORES ASIGNADOS
mg/L PCR Turbitest AA 13,8 11,0 16,6
Proteína C reactiva
870390000 / 20 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
870390000 / 20 p. 2/4 UR140127
LINEA TURBITEST AA
C nivel 1
Lote: 1404137120
Exp.: 2016/02

ALMACENAMIENTO
PRECAUCIONES
VALORES ASIGNADOS
870390000 / 21 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870390000 / 21 p. 2/4 UR140424
LINEA TURBITEST AA
C nivel 1
Lote: 1405139370
Exp.: 2016/02

ALMACENAMIENTO
PRECAUCIONES
VALORES ASIGNADOS
870390000 / 22 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870390000 / 22 p. 2/4 UR140526
LINEA TURBITEST AA
C nivel 1
Lote: 1407145330
Exp.: 2016/07

ALMACENAMIENTO
PRECAUCIONES
VALORES ASIGNADOS
Cadena liviana lambda mg/dL λ-Light Chain Turbitest AA 100 75 125
Inmunoglobulina M mg/dL IgM Turbitest AA 104 83 125
870390000 / 23 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870390000 / 23 p. 2/4 UR140815
LINEA TURBITEST AA
C nivel 1
Lote: 1407145370
Exp.: 2016/07

ALMACENAMIENTO
PRECAUCIONES
VALORES ASIGNADOS
870390000 / 24 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870390000 / 24 p. 2/4 UR140815
LINEA TURBITEST AA
C nivel 1
Lote: 1411151860
Exp.: 2016/10

ALMACENAMIENTO
PRECAUCIONES
VALORES ASIGNADOS
870390000 / 25 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870390000 / 25 p. 2/4 UR141103
LINEA TURBITEST AA
C nivel 1
Lote: 1502158170
Exp.: 2017/02

ALMACENAMIENTO
PRECAUCIONES
VALORES ASIGNADOS
Ceruloplasmina mg/dL Ceruloplasmin Turbitest AA 15 11,3 18,8
Componente C4 mg/dL C4 Turbitest AA 16 12,8 19,2
Inmunoglobulina M mg/dL IgM Turbitest AA 90 72,0 108,0
mg/L PCR Turbitest AA 16 12,8 19,2
870390000 / 26 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870390000 / 26 p. 2/4 UR150225
LINEA TURBITEST AA
C nivel 1
Lote: 1503161890
Exp.: 2017/03

ALMACENAMIENTO
PRECAUCIONES
VALORES ASIGNADOS
Ceruloplasmina mg/dL Ceruloplasmin Turbitest AA 15 11,3 18,8
Componente C4 mg/dL C4 Turbitest AA 16 12,8 19,2
Inmunoglobulina M mg/dL IgM Turbitest AA 90 72,0 108,0
mg/L PCR Turbitest AA 16 12,8 19,2
870390000 / 27 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870390000 / 27 p. 2/4 UR150316
LINEA TURBITEST AA
C nivel 1
Lote: 1505164590

ALMACENAMIENTO
PRECAUCIONES
VALORES ASIGNADOS
Transferrina mg/dL TRF Turbitest AA 119 95,2 142,8
870390000 / 28 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870390000 / 28 p. 2/4 UR150526
LINEA TURBITEST AA
C nivel 1
Lote: 1507170130

ALMACENAMIENTO
PRECAUCIONES
VALORES ASIGNADOS
α2-Macroglobulina mg/dL α2-Macroglobulin Turbitest AA 105 84,0 126
Cadena liviana lambda mg/dL λ-Light Chain Turbitest AA 94,1 70,6 118
Inmunoglobulina A mg/dL IgA Turbitest AA 116 92,8 139
Inmunoglobulina M mg/dL IgM Turbitest AA 94,6 75,7 114
870390000 / 30 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870390000 / 30 p. 2/4 UR150812
LINEA TURBITEST AA
C nivel 1
Lote: 1507170160

ALMACENAMIENTO
PRECAUCIONES
VALORES ASIGNADOS
870390000 / 29 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870390000 / 29 p. 2/4 UR150724
LINEA TURBITEST AA
C nivel 1
Lote: 1509174090

ALMACENAMIENTO
PRECAUCIONES
VALORES ASIGNADOS
870390000 / 31 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870390000 / 31 p. 2/4 UR151005
LINEA TURBITEST AA
C nivel 1
Lote: 1602183640

ALMACENAMIENTO
PRECAUCIONES
VALORES ASIGNADOS
Ferritina ng/mL Ferritin Turbitest AA 46,0 34,5 57,5
870390000 / 33 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:

Europea Nocivo

Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870390000 / 33 p. 2/4 UR160225
LINEA TURBITEST AA
C nivel 2
Lote: 1411152870
Exp.: 2016/01

ALMACENAMIENTO
PRECAUCIONES
VALORES ASIGNADOS
α1-Antitripsina mg/dL α1-Antytripsin Turbitest AA 128 96 160
Componente C3 mg/dL C3 Turbitest AA 146 117 175
Haptoglobina mg/dL Haptoglobin Turbitest AA 149 112 186
860237090 / 07 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo
Wiener lab.
Riobamba 2944
Bioquímica
860237090 / 07 p. 2/4 UR141113
LINEA TURBITEST AA
C nivel 2
Lote: 1412154690
Exp.: 2016/01

ALMACENAMIENTO
PRECAUCIONES
VALORES ASIGNADOS
860237090 / 08 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo
Wiener lab.
Riobamba 2944
Bioquímica
860237090 / 08 p. 2/4 UR141216
LINEA TURBITEST AA
C nivel 2
Lote: 1504162900

ALMACENAMIENTO
PRECAUCIONES
VALORES ASIGNADOS
860237090 / 09 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo
Wiener lab.
Riobamba 2944
Bioquímica
860237090 / 09 p. 2/4 UR150410
LINEA TURBITEST AA
C nivel 2
Lote: 1506168920

ALMACENAMIENTO
PRECAUCIONES
VALORES ASIGNADOS
α1-Glicoproteína mg/dL AGP Turbitest AA 91 72,8 109
Factor reumatoideo UI/mL FR látex Turbitest AA 84,8 67,8 102
860237090 / 10 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo
Wiener lab.
Riobamba 2944
Bioquímica
860237090 / 10 p. 2/4 UR150714
LINEA TURBITEST AA
C nivel 2
Lote: 1508171620

ALMACENAMIENTO
PRECAUCIONES
VALORES ASIGNADOS
860237090 / 11 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo
Wiener lab.
Riobamba 2944
Bioquímica
860237090 / 11 p. 2/4 UR150811
LINEA TURBITEST AA
C nivel 2
Lote: 1510177130

ALMACENAMIENTO
PRECAUCIONES
VALORES ASIGNADOS
α1-Glicoproteína mg/dL AGP Turbitest AA 87,8 70,2 105
Ferritin ng/mL Ferritin Turbitest AA 84,3 67,4 101
860237090 / 12 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo
Wiener lab.
Riobamba 2944
Bioquímica
860237090 / 12 p. 2/4 UR151112
LINEA TURBITEST AA
C nivel 2
Lote: 1512181540

ALMACENAMIENTO
PRECAUCIONES
VALORES ASIGNADOS
860237090 / 13 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo
Wiener lab.
Riobamba 2944
Bioquímica
860237090 / 13 p. 2/4 UR151223
LINEA TURBITEST AA
C nivel 2
Lote: 1601182740

ALMACENAMIENTO
PRECAUCIONES
VALORES ASIGNADOS
860237090 / 14 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo
Wiener lab.
Riobamba 2944
Bioquímica
860237090 / 14 p. 2/4 UR160118
LINEA TURBITEST AA
C nivel 2
Lote: 1602183180

ALMACENAMIENTO
PRECAUCIONES
VALORES ASIGNADOS
Ferritina ng/mL Ferritin Turbitest AA 129 97 161
860237090 / 17 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:

Europea Nocivo

Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo
Wiener lab.
Riobamba 2944
Bioquímica
860237090 / 17 p. 2/4 UR160225
LINEA TURBITEST AA
C nivel 2
Lote: 1603186940

ALMACENAMIENTO
PRECAUCIONES
VALORES ASIGNADOS
Ferritina ng/mL Ferritin Turbitest AA 84,3 67,4 101
860237090 / 17 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:

Europea Nocivo

Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo
Wiener lab.
Riobamba 2944
Bioquímica
860237090 / 17 p. 2/4 UR160323
COR Cleanser
C Para la limpieza en analizadores automáticos de coagulación
COR Cleanser es una solución de limpieza para analiza- Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
dores automáticos que realizan pruebas de coagulación. reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
REACTIVOS PROVISTOS
COR Cleanser: solución de hipoclorito de sodio 1%. C por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios
INSTRUCCIONES PARA SU USO P Representante autorizado en la Comunidad Europea

Lista para usar. Cuando el instrumento no está en uso, re-
tirar, tapar y conservar a temperatura ambiente y al abrigo V Uso diagnóstico "in vitro"
de la luz.
PRECAUCIONES
- El Reactivo es para uso diagnóstico "in vitro".
- Evitar ingestión y contacto con la piel.
- Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales l Límite de temperatura (conservar a)
 No congelar
- El reactivo debe descartarse de acuerdo a la normativa
local vigente. Riesgo biológico
F
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE Volumen después de la reconstitución
ALMACENAMIENTO
COR Cleanser: estable a temperatura ambiente (2-30ºC) Cont. Contenido
protegido de la luz hasta la fecha de vencimiento indicada
en el envase. No congelar. g Número de lote
PRESENTACION M Elaborado por:

- 6 x 30 mL (Cód. 1705008)
Nocivo
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870670022 / 00 p. 1/3 UR160222
LINEA LIQUIDA
Creatinina
C cinética AA
Método cinético para la determinación de creatinina
en suero, plasma u orina
SIGNIFICACION CLINICA piel, lávese inmediata y abundantemente con agua. S37/39:

La creatinina, compuesto sumamente difusible, se elimina usar guantes adecuados y protección para los ojos/la cara.
del organismo casi exclusivamente por filtración renal. Su Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
determinación en suero, así como la depuración de creati- de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
nina endógena constituyen parámetros importantes para el Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
diagnóstico de diversas afecciones renales. acuerdo a la normativa local vigente.

La creatinina reacciona con el picrato alcalino (reacción de ALMACENAMIENTO
Jaffe) produciendo un cromógeno rojo. La velocidad de esta Reactivos Provistos: son estables a temperatura ambiente
reacción, bajo condiciones controladas, es una medida de (menor a 25oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
la concentración de creatinina de la muestra puesto que Reactivo de Trabajo: premezclado y en envase plástico, es
se comporta como una reacción cinética de primer orden estable una semana a temperatura ambiente. En analiza-
para la creatinina. Por otra parte, se ha demostrado que los dores automáticos que emplean Reactivo de Trabajo único
cromógenos no-creatinina que interfieren en la mayor parte (premezclado), referirse a las adaptaciones específicas de
de las técnicas convencionales, reaccionan dentro de los cada analizador.
30 segundos de iniciada la reacción. De manera que entre Evitar la exposición prolongada al aire, manteniendo el frasco
los 30 segundos y los 5 minutos posteriores al inicio de la bien tapado cuando no sea utilizado.
reacción, el incremento de color se debe exclusivamente a
la creatinina. MUESTRA
Suero, plasma u orina
REACTIVOS PROVISTOS a) Recolección: el suero o plasma se deben obtener de la
A. Reactivo A: solución de ácido pícrico 12,7 mmol/l y lau- manera usual.
rilsulfato de sodio 8,4 mmol/l. Puede emplearse también orina de 2 horas o de 24 horas.
B. Reactivo B: solución de borato 53 mmol/l e hidróxido de Su recolección debe efectuarse en un recipiente perfecta-
sodio 970 mmol/l. mente limpio que se mantendrá en el refrigerador (2-10oC)
S. Standard*: solución de creatinina 20 mg/l. durante el tiempo de la recolección. Medir la diuresis, tomar
una alícuota y efectuar una dilución 1:50 de la misma en
REACTIVOS NO PROVISTOS agua destilada. En caso de que la diuresis sea de 2 horas,
Calibrador A plus de Wiener lab. multiplicar el volumen medido por 12 para calcular la cantidad
de creatinina eliminada durante 24 horas.
INSTRUCCIONES PARA SU USO b) Aditivos: en caso de utilizar plasma, recogerlo únicamen-
Reactivo A: listo para usar. A baja temperatura puede pre- te con heparina o EDTA.
sentar turbidez o sedimento. En tal caso, colocar en baño c) Sustancias interferentes conocidas: cuando la mues-
de agua a 37oC unos minutos antes de usar. tra es suero o plasma, no se observan interferencias por
Reactivo B: listo para usar. hemoglobina hasta 0,78 g/dl (7,8 g/l), triglicéridos hasta
Reactivo de Trabajo: de acuerdo al volumen de trabajo, 1.700 mg/l (1,7 g/l) ni bilirrubina hasta 24 mg/dl (240 mg/l);
mezclar cuatro partes de Reactivo A y una parte de Reacti- cuando la muestra es orina, no se observan interferencias
vo B. Rotular y fechar. A baja temperatura puede presentar por proteínas hasta 500 mg/dl (5 g/l), ácido ascórbico hasta
turbidez o sedimento. En tal caso, colocar en baño de agua 100 mg/dl (1 g/l) ni cetonas hasta 4 mmol/l.
a 37oC unos minutos antes de usar. Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
PRECAUCIONES d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: el
El kit es para uso diagnóstico "in vitro". suero o plasma debe ser separado de los glóbulos rojos
Reactivo B: irritante. R36/38: irrita los ojos y la piel. S24/25: antes de las dos horas de la extracción. Conservados en
evitar el contacto con los ojos y la piel. S26: en caso de con- refrigerador (2-10oC) su estabilidad es de 3 días.
tacto con los ojos, lávense inmediata y abundantemente con La orina puede mantenerse hasta 4 días en refrigerador
agua y acúdase a un médico. S28: en caso de contacto con la (2-10oC) sin agregado de conservantes.

MATERIAL REQUERIDO (no provisto) donde:
- Espectrofotómetro capaz de leer a 500 ± 10 nm. 0,020 g/l = concentración del Standard
- Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados. 50 = factor de dilución
- Cubetas espectrofotométricas.
Para expresar la creatinina en orina en “mg/Kg/24 hs”:
- Cronómetro. Creatinina en orina (g/24 hs) x 1000 mg/g
Peso del paciente (Kg)
- Longitud de onda: 500 nm 3) Depuración de Creatinina Endógena (D.C.E.):
- Temperatura de reacción: 25oC Creatinina en orina (g/24 hs)
El control de la temperatura no es crítico, pudiendo oscilar D.C.E. ml/min = x 694 ml/min
entre 22 y 28oC. Ver Limitaciones del Procedimiento. Creatinina en suero (mg/l)
- Volumen de muestra: 0,2 ml donde:
- Volumen de Reactivo de Trabajo: 1,2 ml g/24 hs 1.000 mg x 1.000 ml 1.000.000 ml
- Volumen final de reacción: 1,4 ml 694 ml/min = = =
mg/l 1 mg x 1.440 min 1.440 min
PROCEDIMIENTO Para expresar D.C.E. en “ml/min/1,73 m2”:

D.C.E. (ml/min) x 1,73
I- TECNICA PARA SUERO O PLASMA
Equilibrar el Reactivo de Trabajo a la temperatura de Superficie corporal del paciente (m2)
reacción (25oC). Antes de agregar la muestra, llevar
el aparato a cero con agua destilada. En dos cubetas METODO DE CONTROL DE CALIDAD
espectrofotométricas marcadas S (Standard) y D (Des- Procesar 2 niveles de un material de control de calidad
conocido), colocar: (Standatrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas
de creatinina, con cada determinación.
S D
Reactivo de Trabajo 1,2 ml 1,2 ml VALORES DE REFERENCIA
Standard 0,2 ml - Suero o plasma:
Hombre: 7 - 13 mg/l
Muestra - 0,2 ml Mujer: 6 - 11 mg/l
Mezclar inmediatamente, iniciando al mismo tiempo el Orina:
cronómetro y proseguir la incubación. A los 30 segundos Hombre: 14 - 26 mg/Kg/24 hs
exactos medir la absorbancia (S1 y D1) y continuar la Mujer: 11 - 20 mg/Kg/24 hs
incubación. Medir nuevamente la absorbancia (S2 y D2)
D.C.E.:
a los 5 minutos (4 minutos 30 segundos después de la
Hombre: 94 - 140 ml/min/1,73 m2
primera lectura).
Mujer: 72 - 110 ml/min/1,73 m2
II- TECNICA PARA ORINA Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios
Recolectar y preparar la muestra como se describió en valores de referencia.
“Recolección”, efectuando una dilución 1:50 de la misma
en agua desionizada. Aplicar luego la técnica I. CONVERSION DE UNIDADES AL SISTEMA SI
Creatinina (mg/l) x 8,84 = Creatinina (umol/l)
CALCULO DE LOS RESULTADOS LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO

1) Creatinina en suero (mg/l) = (D2 - D1) x f Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
20 mg/l Otras causas de resultados erróneos son:
f= - Temperatura: si bien la temperatura de reacción admite
S2 - S1 una variación entre 22 y 28oC, una diferencia entre la
D2 - D1 temperatura de incubación del Standard respecto de las
2) Creatinina en orina (g/24 hs) = x V muestras disminuye la precisión del método.
S2 - S1 - Tiempo de lectura: ligeras variaciones en la medición del
siendo: tiempo afectan notablemente la exactitud del método. Las
V = volumen de la diuresis expresado en litros/24 hs lecturas deberán realizarse exactamente a los 30 segundos
luego de haber mezclado la muestra con el reactivo y a los 5
La fórmula surge de: minutos (4 minutos 30 segundos luego de la primera lectura).
D2 - D1
Creatinina en orina (g/24 hs) = x 0,020 g/l x 50 x V PERFORMANCE
S2 - S1 a) Reproducibilidad: procesando de acuerdo al documento
864115022 / 01 p. 2/9
EP15-A del CLSI (ex-NCCLS), se obtuvo lo siguiente: SÍMBOLOS
Nivel D.S. C.V.
7,1 mg/l ± 0,27 mg/l 3,8 % Este producto cumple con los requerimientos previstos
Suero 14,7 mg/l
54,9 mg/l
± 0,32 mg/l
± 1,09 mg/l
2,2 %
2,0 % C por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios
440 mg/l ± 9,35 mg/l 2,1 % P Representante autorizado en la Comunidad Europea

Orina 2.620 mg/l ± 62,4 mg/l 2,4 %
5.060 mg/l ± 136 mg/l 2,7 % V Uso diagnóstico "in vitro"
Precisión total (n = 20) X Contenido suficiente para <n> ensayos

Nivel D.S. C.V.
7,1 mg/l ± 0,30 mg/l 4,3 %
Suero 14,7 mg/l ± 0,48 mg/l 3,3 %
54,9 mg/l ± 1,47 mg/l 2,7 % l Límite de temperatura (conservar a)
 No congelar
440 mg/l ± 20,5 mg/l 4,6 %
Orina 2.620 mg/l ± 119 mg/l 4,5 % F Riesgo biológico
5.060 mg/l ± 177 mg/l 3,5 %
b) Linealidad: la reacción es lineal hasta 90 mg/l de crea-
tinina. Para valores superiores, diluir la muestra 1:2 ó 1:4 Cont. Contenido
con solución salina y repetir la determinación. Corregir los
cálculos multiplicando por el factor de dilución empleado. g Número de lote
c) Límite de detección: el mínimo cambio de concentración
Elaborado por:
detectable es 4,5 mg/l. M
Xn
Nocivo
Manual del Usuario del Analizador en uso. Para la calibra-
ción, debe usarse Calibrador A plus de Wiener lab. Xi
Irritante
PRESENTACION
- 250 ml (2 x 100 ml Reactivo A + 2 x 25 ml Reactivo B) i Consultar instrucciones de uso
(Cód. 1260360)
Calibr. Calibrador
- 200 ml (4 x 40 ml Reactivo A + 2 x 20 ml Reactivo B)
(Cód. 1009329)
b Control
(Cód. 1009254) b Control Positivo

(Cód. 1009611) c Control Negativo
BIBLIOGRAFIA h Número de catálogo

- Owen, J.A.; et al. - Biochem. J. 58:426 (1954).
- Henry, R.J. et al. - Clinical Chemistry, Principles and Tech-
nics, 2nd ed., Harper and Row Publishers Inc., N.Y. (1974).
- Butler, A.R. - J. Chem. Soc. (Perkin Trans. II), 853 (1975).
- Labbé, D et al. - Ann. Biol. Clin. 54:285 (1996).
- Burtis, CA; Ashwood, ER - Tietz Fundamentals of Clin.
Chem., 5th ed., 2001.
- CLSI: Clinical and Laboratory Standards Institute (ex- M Wiener Laboratorios S.A.I.C.
NCCLS) - Protocol EP15-A, 2001 / EP 17A, 2004. Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
864115022 / 01 p. 3/9 UR120830
Creatinina
directa
Métodos para la determinación de creatinina en suero
y orina

La creatinina, compuesto sumamente difusible, se elimina del Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
organismo casi exclusivamente por filtración renal. Reactivo B: irritante. R36/38: irrita los ojos y la piel.
Su determinación en suero, así como el clearance de crea- S26/28: en caso de contacto con ojos y piel, lávense in-
tinina endógena constituyen parámetros importantes para el mediatamente y abundantemente con agua y acúdase a
diagnóstico de diversas afecciones renales. Sin embargo, un médico. S37/39: usar guantes adecuados y protección
debido a los problemas prácticos inherentes a la determi- para los ojos/la cara.
nación del clearance (recolección de orina en niños, etc.), Reactivo C: corrosivo. R36/38: irrita los ojos y la piel. S24/25:
la determinación de creatinina sérica es más utilizada como evítese el contacto con los ojos y la piel. S26/28: en caso
índice de funcionalismo renal. de contacto con la piel y los ojos, lávese inmediatamente
con abundante agua y acúdase a un médico. S37: usar
FUNDAMENTOS DEL METODO guantes adecuados.
La creatinina y otros compuestos de la muestra reaccionan Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
con el ácido pícrico en medio alcalino dando un complejo de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
color rojo que se cuantifica mediante lectura fotométrica. Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
La determinación de creatinina puede llevarse a cabo por acuerdo a la normativa local vigente.
medio de una técnica de punto final, o por una técnica
cinética eliminándose en ambas el color que se debe a los ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
cromógenos no creatinina. ALMACENAMIENTO
En el primer caso, la adición de ácido al medio, destruye el Reactivos Provistos: estables a temperatura ambiente
picrato de creatinina pero no el color formado por los de- hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
más compuestos. Por lo tanto la diferencia entre la lectura Reactivo de Trabajo: a temperatura ambiente y protegido
fotométrica antes y después del agregado de ácido, permite de la luz es estable 15 días a partir de la fecha de su pre-
cuantificar la creatinina en forma específica. paración.
En la técnica cinética, los cromógenos no creatinina, reac-
cionan dentro de los primeros 30 segundos de iniciada la MUESTRA
reacción, que se comporta como cinética de primer orden Suero u orina
para la creatinina. De manera que entre los 30 segundos y los a) Recolección: obtener suero de la manera usual.
5 minutos posteriores al inicio de la reacción, el incremento En el caso de orina, obtener orina de 2 horas o de 24 horas
de color se debe exclusivamente a la creatinina. empleando un recipiente perfectamente limpio y mantenien-
do en el refrigerador (2-10oC) durante la recolección. Medir
REACTIVOS PROVISTOS la diuresis, tomar una alícuota y efectuar una dilución 1:50
A. Reactivo A: solución de ácido pícrico 41,4 mmol/l. de la misma. En caso que la diuresis sea de 2 horas, mul-
B. Reactivo B: solución 0,4% de polioxietilén lauril éter (PLE) tiplicar el volumen medido por 12 para calcular la cantidad
en buffer alcalino, pH 12,4. de creatinina eliminada durante 24 horas.
C. Reactivo C: ácido acético al 20%. b) Aditivos: no se requieren.
S. Standard: solución de creatinina 20 mg/l. c) Sustancias interferentes conocidas: sueros con con-
centraciones de bilirrubina mayores a 50 mg/l producen
INSTRUCCIONES PARA SU USO valores erróneos.
Standard: listo para usar. No se observan interferencias por hemólisis ligera o modera-
Reactivo A: listo para usar. da, hiperlipemia, disproteinemia ni cromógenos no-creatinina
Reactivo B: listo para usar. Es posible que a bajas tempera- (tales como glucosa, ácido ascórbico, cetoácidos, glutatión
turas se produzca turbidez o algún sedimento. En tal caso, o ergotionina).
solubilizar totalmente el reactivo dejándolo unos minutos en Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
baño a 37oC antes de pipetearlo. drogas en el presente método.
Reactivo C: listo para usar. d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
Reactivo de Trabajo: mezclar en frasco plástico partes creatinina en suero es estable hasta 24 horas y en orina
iguales de Reactivo A y Reactivo B. Rotular y fechar. hasta 4 días, en refrigerador sin agregado de conservadores.
870410022 / 00 p. 1/12
• TECNICA DE PUNTO FINAL siendo:
MATERIAL REQUERIDO (no provisto) V = volumen de la diuresis expresado en litros/24 hs
- Espectrofotómetro o fotocolorímetro La fórmula surge de:
- Micropipetas y pipetas
D1 - D2
- Probeta
Creatinina en orina (g/24 hs) = x 0,020 g/l x 50 x V
- Tubos o cubetas espectrofotométricas S

- Reloj o timer donde:
0,020 g/l = concentración del Standard
CONDICIONES DE REACCION 50 = factor de dilución
fotocolorímetro con filtro verde (500-520 nm) 3) Depuración de Creatinina Endógena (D.C.E.):
- Temperatura de reacción: 37oC Creatinina en orina (g/24 hs)
- Volumen de muestra: 0,1 ml D.C.E. ml/min = x 694 ml/min
- Volumen de Reactivo: 1 ml Creatinina en suero (mg/l)
donde:
g/24 hs 1.000 mg x 1.000 ml 1.000.000 ml
694 ml/min = = =
PROCEDIMIENTO mg/l 1 mg x 1.440 min 1.440 min
(Desconocido) colocar: LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
B S D Es importante asegurarse de que el mezclado después de
agregar cada reactivo sea correcto para evitar errores en
Agua destilada 0,1 ml - -
los resultados.
Standard - 0,1 ml - Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
Muestra - - 0,1 ml El uso de plasma proporciona resultados falsamente dismi-
nuidos en un 8 a 15%.
Reactivo de Trabajo 1 ml 1 ml 1 ml
Mezclar. Incubar 10 minutos en baño a 37oC. Dentro de PERFORMANCE
los 15 minutos de retirado del baño, leer el Standard (S) a) Reproducibilidad: procesando simultáneamente replica-
y el Desconocido (D1) en espectrofotómetro a 510 nm o dos de una misma muestra se obtienen los siguientes datos:
en fotocolorímetro con filtro verde (500-520 nm) llevando Nivel D.S. C.V.
a 0,000 D.O. con el Blanco. Luego agregar: 7,3 mg/l ± 0,18 mg/l 2,4 %
15 mg/l ± 0,26 mg/l 1,7 %
Reactivo C 50 ul - 50 ul
b) Linealidad: la reacción es lineal hasta 100 mg/l.
Mezclar. Dejar los tubos 5 minutos a temperatura ambiente
y volver a leer el Desconocido (D2), llevando a 0,000 D.O.
con el Blanco. • TECNICA CINETICA
Los valores de referencia y el Método de Control de MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
Calidad son comunes para ambas técnicas. Ver el punto - Espectrofotómetro o fotocolorímetro
correspondiente en Técnica Cinética. - Micropipetas y pipetas
- Probeta
- Tubos o cubetas espectrofotométricas
ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL - Baño de agua a 25oC
El color de la reacción es estable durante 6 horas por lo que - Reloj o timer
la lectura debe efectuarse en ese lapso.
CALCULOS - Longitud de onda: 500 nm en espectrofotómetro o 490-510 nm
1) Creatinina en suero (mg/l) = (D1 - D2) x f en fotocolorímetro con filtro verde
- Temperatura de reacción: 25oC
20 mg/l El control de la temperatura no es crítico, pudiendo oscilar
f= entre 22 y 30oC. Ver Limitaciones del Procedimiento.
S - Volumen de muestra: 0,2 ml
D1 - D2 - Volumen de Reactivo de Trabajo: 1 ml
2) Creatinina en orina (g/24 hs) = x V - Volumen final de reacción: 1,2 ml
S - Tiempo de reacción: 5 minutos
870410022 / 00 p. 2/12
PROCEDIMIENTO Creatinina (mg/l) x 8,84 = Creatinina (umol/l)
Equilibrar el Reactivo de Trabajo a la temperatura de
reacción (25oC) antes de agregar la muestra, llevar el METODO DE CONTROL DE CALIDAD
aparato a cero con agua destilada. Procesar 2 niveles de un material de control de calidad
En dos tubos o cubetas espectrofotométricas marcadas (Standatrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas
S (Standard) y D (Desconocido) colocar: de creatinina, con cada determinación.
S D
Reactivo de Trabajo 1 ml 1 ml Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
Standard 0,2 ml - Otras causas de resultados erróneos son:
- Temperatura: si bien la temperatura de reacción admite
Muestra - 0,2 ml una variación entre 22 y 30oC, una diferencia entre la
Mezclar inmediatamente, disparando al mismo tiempo temperatura de incubación del Standard respecto de las
el cronómetro y volver a colocar los tubos en el baño. A muestras disminuye la precisión del método.
los 30 segundos exactos, medir la absorbancia (S1 y D1) - Tiempo de lectura: ligeras variaciones en la medición del
y continuar la incubación. Medir nuevamente la absor- tiempo afecta notablemente la exactitud del método.
bancia (S2 y D2) a los 5 minutos (4 minutos 30 segundos Las lecturas deberán realizarse exactamente a los 30
después de la primera lectura). segundos después de haber mezclado la muestra con el
reactivo y a los 5 minutos (4 minutos 30 segundos después
de la primera lectura).
CALCULOS - El uso de plasma proporciona resultados falsamente dis-
1) Creatinina en suero (mg/l) = (D2 - D1) x f minuidos en un 8 a 15%.
20 mg/l PERFORMANCE
f= a) Reproducibilidad: procesando simultáneamente replica-
S2 - S1
dos de una misma muestra se obtienen los siguientes datos:
D2 - D1
2) Creatinina en orina (g/24 hs) = x V Nivel D.S. C.V.
S2 - S1 8,6 mg/l ± 0,31 mg/l 3,6 %
20,2 mg/l ± 0,61 mg/l 3,0 %
siendo:
V = volumen de la diuresis expresado en litros/24 hs b) Recuperación: agregando cantidades conocidas de
creatinina a distintos sueros, se obtuvo una recuperación
La fórmula surge de: entre 96 y 101% para niveles de creatinina de hasta 60 mg/l.
D2 - D1 c) Linealidad: la reacción es lineal hasta 60 mg/l de creati-
Creatinina en orina (g/24 hs) = x 0,020 g/l x 50 x V nina. Para valores superiores, diluir la muestra 1:2 ó 1:4 con
S2 - S1 solución fisiológica y repetir la determinación.
donde: Corregir los cálculos multiplicando por el factor de dilución
0,020 g/l = concentración del Standard empleado.
50 = factor de dilución
PRESENTACION
3) Depuración de Creatinina Endógena (D.C.E.): - 240 ml (Cód. 1260551).
Creatinina en orina (g/24 hs)
D.C.E. ml/min = x 694 ml/min BIBLIOGRAFIA
Creatinina en suero (mg/l) - Butler, A.R. - J. Chem. Soc. (Perkin Trans. II), 853 (1975).
- Henry, R.J.; Cannon, D.C. & Winkelman, J.K. - Clinical
donde:
Chemistry - Principles and Technics - Harper & Row, New
g/24 hs 1.000 mg x 1.000 ml 1.000.000 ml York - 2ª Ed., pág. 541/53 (1974).
694 ml/min = = = - Martinek, R.G. - J. Amer. Med. Technol. 32/6:700 (1970).
mg/l 1 mg x 1.440 min 1.440 min - Owen, J.A.; Iggo, B.; Scandrett, F.J. & Stewart, C.P. - Bio-
chem. J. 58:426 (1954).
VALORES DE REFERENCIA - Popper, H.; Mandel, E. & Meyer, H. - Biochem. Z. 291:351
Suero: 8 - 14 mg/l (1937).
Orina: 0,9 - 1,5 g/24 hs - Lorenzo, L.; Demaría, I.; Setta, F.; Taborda, M. - Clin. Chem.
D.C.E.: 80 - 140 ml/min (promedio 125 ml/min) para adultos 36/6:935, 1992.
de hasta 60 años. - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
870410022 / 00 p. 3/12
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
870410022 / 00 p. 4/12 UR120423
LINEA LIQUIDA
Creatinina
C enzimática AA
Método enzimático para la determinación de creatinina en
suero, plasma u orina
SIGNIFICACION CLINICA hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No man-

La creatinina, compuesto sumamente difusible, se elimina tener a temperaturas elevadas durante lapsos prolongados.
del organismo casi exclusivamente por filtración renal. Su
determinación en suero, así como el clearance de creatini- MUESTRA
na endógena constituyen parámetros importantes para el Suero, plasma u orina
diagnóstico de diversas afecciones renales. a) Recolección: obtener suero o plasma de la manera usual.
Puede emplearse también orina de 2 horas o de 24 horas.
FUNDAMENTOS DEL METODO Su recolección debe efectuarse en un recipiente perfecta-
Basado en el siguiente esquema de reacción: mente limpio que se mantendrá en el refrigerador (2-10oC)
creatininasa durante el tiempo de la recolección. Medir la diuresis, tomar
creatinina + H2O creatina una alícuota y efectuar una dilución 1:50 de la misma. En
creatinasa caso de que la diuresis sea de 2 horas, multiplicar el volu-
creatina + H2O sarcosina + urea
men medido por 12 para calcular la cantidad de creatinina
sarcosina eliminada durante 24 horas.
oxidasa
sarcosina + H2O + O2 glicina + HCHO + H2O2 b) Aditivos: en caso de que la muestra a emplear sea
peroxidasa plasma, se recomienda únicamente el uso de heparina como
H2O2 + 4-AF + TOOS quinonimina coloreada anticoagulante para su obtención.
La intensidad del color de la quinonimina formada es di- c) Sustancias interferentes conocidas: no se observan in-
rectamente proporcional a la concentración de creatinina terferencias por ácido ascórbico hasta 100 mg/dl, hemoglobina
en la muestra. hasta 400 mg/dl (4 g/l), bilirrubina hasta 28 mg/dl (280 mg/l), ni
triglicéridos hasta 1250 mg/dl (12,5 g/l).
REACTIVOS PROVISTOS Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
A. Reactivo A: solución conteniendo creatinasa 36 kU/l, drogas en el presente método.
sarcosina oxidasa 11 kU/l, catalasa 300 kU/l, ascorbato d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: el
oxidasa 3 kU/l y buffer Goods 20 mmol/l pH 8,2 con N-etil- suero o plasma debe ser separado de los glóbulos rojos,
N-2-hidroxi-3-sulfopropil-3-metilanilina (TOOS) 1 mmol/l. antes de las dos horas de la extracción. Si se conserva en
B. Reactivo B: solución conteniendo 4-aminofenazona (4- la oscuridad a 2-10oC, la estabilidad es de 3 días.
AF) 4 mmol/l, creatininasa 370 kU/l, peroxidasa 15 kU/l, azida La orina puede mantenerse hasta 4 días en refrigerador
de sodio 0,8 g/l y buffer Goods 20 mmol/l pH 8,0. (2-10oC) sin agregado de conservantes.
S. Standard*: solución de creatinina 20 mg/l.
REACTIVOS NO PROVISTOS - Espectrofotómetro.
- Calibrador A plus de Wiener lab. - Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados.
- Agua desmineralizada. - Cubetas espectrofotométricas.
INSTRUCCIONES PARA SU USO - Cronómetro.
Reactivos provistos: listos para usar.
PRECAUCIONES - Longitud de onda: 546 nm
Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro". - Temperatura de reacción: 37oC
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de PROCEDIMIENTO
acuerdo a la normativa local vigente. Antes de agregar la muestra, llevar el aparato a cero con
agua destilada. En tres cubetas espectrofotométricas
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE marcadas B (Blanco), S (Standard) y D (Desconocido),
ALMACENAMIENTO colocar:
* No provisto en todas las presentaciones 860243000 / 04 p. 1 de 6

3) Depuración de Creatinina Endógena (D.C.E.):
B S D
Muestra - - 0,07 ml D.C.E. ml/min = x 694 ml/min
Standard - 0,07 ml - Creatinina en suero (mg/l)
donde:
Agua desmineralizada 0,07 ml - - g/24 hs 1.000 mg x 1.000 ml 1.000.000 ml
Reactivo A 2,5 ml 2,5 ml 2,5 ml 694 ml/min = = =
Mezclar e incubar 5 minutos a 37oC. Leer la absorbancia mg/l 1 mg x 1.440 min 1.440 min
a 546 nm (B1, S1 y D1).
Reactivo B 1,25 ml 1,25 ml 1,25 ml Procesar 2 niveles de un material de control de calidad
Mezclar e incubar 5 minutos a 37oC. Leer la absorbancia (Standatrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas
a 546 nm (B2, S2 y D2). de creatinina, con cada determinación.
CALCULO DE LOS RESULTADOS Los valores esperados de creatinina son los siguientes:
Suero o plasma
1) Creatinina en suero (mg/l) = [(D2-B2) - (D1-B1) x k] x f Hombre: 7 - 13 mg/l
20 mg/l Mujer: 6 - 11 mg/l
f= Orina
(S2-B2) - (S1-B1) x k
Hombre: 0,8 - 2,0 g/24 hs
donde: Mujer: 0,6 - 1,8 g/24 hs
volumen del Blanco (ml) 2,57 ml Depuración de Creatinina Endógena
k = = = 0,673 Hombre: 94 - 140 ml/min (promedio 125 ml/min)
volumen final (ml) 3,82 ml Mujer: 72 - 110 ml/min
Significa la compensación por dilución del blanco por agre- Es recomendable que cada laboratorio establezca sus pro-
gado del Reactivo B. pios valores de referencia.
Ejemplo:
B1: 0,123 S1: 0,145 D1: 0,164 Creatinina (mg/l) x 8,84 = Creatinina (umol/l)
B2: 0,137 S2: 0,365 D2: 0,412
Standard: 20 mg/l LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
k = 0,673 Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
20 (mg/l) 20 PERFORMANCE
f = = = a) Reproducibilidad: procesando sueros de acuerdo al
(0,365-0,137) - (0,145-0,123) x 0,673 0,228-0,022 x 0,673 documento EP5A del CLSI se obtuvo lo siguiente:
20 20 Precisión intraensayo (n = 20)
= = = 93,9 Nivel D.S. C.V.
0,228 - 0,015 0,213 0,98 mg/dl ± 0,014 mg/dl 1,45 %
3,80 mg/dl ± 0,038 mg/dl 0,99 %
Creatinina (mg/l) = [(0,412-0,137) - (0,164-0,123) x 0,673] x 93,9 =
= (0,275 - 0,041 x 0,673) x 93,9 = (0,275 - 0,028) x 93,9 =
Nivel D.S. C.V.
= 0,247 x 93,9 = 23,19 0,98 mg/dl ± 0,019 mg/dl 1,99 %
3,80 mg/dl ± 0,044 mg/dl 1,15 %
2) Creatinina en orina (g/24 hs) =
b) Linealidad: la reacción es lineal hasta 170 mg/l (17 mg/dl)
Creatinina (mg/l) x 50 x D Creatinina (mg/l) x D de creatinina. Para valores superiores, diluir la muestra 1:2
= = ó 1:4 con agua destilada y repetir la determinación. Corregir
1000 20 los cálculos multiplicando por el factor de dilución empleado.
c) Sensibilidad analítica: depende del fotómetro empleado
donde: y de la longitud de onda. En espectrofotómetros a 546 nm
D = volumen de la diuresis expresado en litros/24 hs con cubetas de caras paralelas de 1 cm de espesor, para
50 = factor de dilución un ∆A de 0,001 el mínimo cambio de concentración detec
1000 = conversión de mg a gramos table será 1,2 mg/l.
860243000 / 04 p. 2 de 6
PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS SÍMBOLOS
Para las instrucciones de programación debe consultarse el Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
Manual del Usuario del Analizador en uso. reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
Para la calibración, debe usarse Calibrador A plus de
Wiener lab. Este producto cumple con los requerimientos previstos
PRESENTACION C por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios

(Cód. 1260362)
3 x 10 ml Reactivo B X Contenido suficiente para <n> ensayos
(Cód. 1009612)
BIBLIOGRAFIA
- Fossatti, P.; Prencipe, L.; Berti, G. - Clin. Chem. 29:1494 l Límite de temperatura (conservar a)
(1983).  No congelar
- Curtis, C.A.; Ashwood, E.R. - Tietz Fundamentals of Clin.
Chem. 5th Ed.: 422, 2001. Riesgo biológico
F
- Burtis, C.A.; Ashwood, E.R. - Tietz Textbook of Clin. Chem.
3rd Ed.:1808, 1996. Volumen después de la reconstitución
AACC Press, 5th ed., 2000. Cont. Contenido
NCCLS) - Protocols EP 15A, 2001 / EP 17A, 2004. g Número de lote
Elaborado por:
M
Nocivo
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
860243000 / 04 p. 3 de 6 UR130509
Creatinina
Método colorimétrico con desproteinización para la
determinación de creatinina en suero u orina
SIGNIFICACION CLINICA mantenido en refrigerador (2-10oC) durante el tiempo de la

La creatinina, compuesto sumamente difusible, se elimina recolección. Medir la diuresis, tomar una alícuota y efectuar
del organismo casi exclusivamente por filtración renal. Su una dilución 1:50 de la misma. En caso de que la diuresis
determinación en suero, así como el clearance de creatini- sea de 2 horas, multiplicar el volumen medido por 12 para
na endógena constituyen parámetros importantes para el calcular la cantidad de creatinina eliminada durante 24 horas.
diagnóstico de diversas afecciones renales. Sin embargo, b) Aditivos: no se requieren. No se recomienda el uso de
debido a los problemas prácticos inherentes a la determi- plasma pues se obtienen resultados menores en un 8 a
nación del clea-rance (recolección de orina en niños, etc.), un 15%.
la determinación de creatinina sérica es más utilizada como c) Sustancias interferentes conocidas: hemólisis ligera a
índice de funcionalismo renal. moderada no interfiere, pero no debe emplearse sangre total
ya que aproximadamente el 60% del material Jaffe-reactivo
FUNDAMENTOS DEL METODO de los eritrocitos no es creatinina.
La creatinina reacciona con el picrato alcalino en medio Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
tamponado, previa desproteinización con ácido pícrico, drogas en el presente método.
obteniéndose un cromógeno que se mide a 510 nm. d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: es
conveniente utilizar el suero recién obtenido. Si esto no es
REACTIVOS PROVISTOS posible puede mantenerse hasta 24 horas en refrigerador
A. Reactivo A: ácido pícrico 41,4 mmol/l. (2-10oC) sin variaciones de los resultados.
B. Reactivo B: buffer glicina/NaOH 1 mol/l. Orinas destinadas a esta determinación pueden mantener-
S. Standard: solución de creatinina 20 mg/l. se hasta 4 días en refrigerador (2-10oC) sin agregado de
conservantes.
Agua destilada. MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
- Espectrofotómetro o fotocolorímetro.
INSTRUCCIONES PARA SU USO - Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indi-
Reactivos Provistos: listos para usar. cados.
- Tubos.
PRECAUCIONES - Reloj o timer.
de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos. - Longitud de onda: 510 nm en espectrofotómetro o en
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de fotocolorímetro con filtro verde (500-540 nm).
acuerdo a la normativa local vigente. - Temperatura de reacción: temperatura ambiente, que no
Reactivo B: R36/38: irrita los ojos y la piel. S26/28: en caso debe exceder los límites de 15 y 30oC.
de contacto con los ojos y la piel, lávense inmediatamente y - Tiempo de reacción: 35 minutos
abundantemente con agua y acúdase a un médico. S37/39: - Volumen de muestra: 0,7 ml
usar guantes adecuados y protección para los ojos/la cara. - Volumen final de reacción: 3,5 ml
ALMACENAMIENTO PROCEDIMIENTO
Los Reactivos Provistos son estables a temperatura am- En caso de que la muestra a utilizar sea suero, debe
biente hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. efectuarse una desproteinización de la siguiente manera:
a 0,7 ml de suero agregar 3,5 ml de Reactivo A. Mezclar
MUESTRA por inversión. Dejar reposar 10 minutos y centrifugar a
Suero u orina 3000 r.p.m. durante 5 minutos como mínimo.
a) Recolección: obtener suero de la manera usual. Puede En tubos marcados B (Blanco), S (Standard), Ds y Do
emplearse también orina de 2 o de 24 horas. Su recolec- (Desconocidos suero y orina), colocar:
ción debe efectuarse en un recipiente perfectamente limpio
870400000 / 00 p. 1/6
B S Ds Do Creatinina (mg/l) = Creatinina (mg/dl) x 10
Desproteinizado - - 3 ml - Creatinina (umol/l) = Creatinina (mg/dl) x 88,4
Standard - 0,5 ml - -
Orina diluida (1:50) - - - 0,5 ml Si la muestra a ensayar es suero, procesar 2 niveles de un
Agua destilada 1 ml 0,5 ml - 0,5 ml material de control de calidad (Standatrol S-E 2 niveles)
con concentraciones conocidas de creatinina, con cada
Reactivo A 2 ml 2 ml - 2 ml determinación. En el caso de muestras de orina, utilizar un
Reactivo B 0,5 ml 0,5 ml 0,5 ml 0,5 ml control con base de orina.
Mezclar por inversión. Incubar 20 minutos a temperatura VALORES DE REFERENCIA

ambiente. Luego leer en espectrofotómetro a 510 nm o Suero: 8 a 14 mg/l
en fotocolorímetro con filtro verde (500-540 nm), llevando Orina: 0,9 a 1,5 g/24 horas.
a cero el aparato con agua destilada. D.C.E.: 80 a 140 ml/min (promedio 125 ml/min)
MICROTECNICA Estos valores de D.C.E. corresponden a adultos hasta 60
Si es necesario usar menos cantidad de muestra y el años.
aparato de lectura lo permite, pueden desproteinizarse Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios
0,4 ml de suero con 2 ml de Reactivo A separando 1,5 ml de valores de referencia.
sobrenadante y adicionando a éste 0,25 ml de Reactivo
B. En ambos casos el Standard y Blanco se procesan LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
de la forma habitual. - Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
- En caso de haberse comprobado la presencia de acetoace-
tato en la muestra, una vez agregado el Reactivo A (y antes
ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL de centrifugar en el caso de suero), colocar en baño de
El color de la reacción es estable durante 10 minutos agua a ebullición durante 5 minutos, con lo que se elimina
por lo que la absorbancia debe ser leída dentro de ese casi totalmente esta interferencia. Enfriar y continuar como
lapso. El Blanco y el Standard pueden leerse hasta los se indica en PROCEDIMIENTO.
60 minutos. - Luego de la desproteinización del suero con Reactivo A
pueden observarse eventualmente escasas partículas
CALCULO DE LOS RESULTADOS en el sobrenadante, las que no interfieren en la reacción.
Corregir las lecturas S y D restándoles el Blanco (B). - El factor colorimétrico puede utilizarse cuando la reacción
se efectúa entre 20 y 25oC. De no ser así debe procesarse
1) Creatinina en suero (mg/l) = Ds x f simultáneamente un standard con cada lote de determi-
20 mg/l naciones. De todos modos la temperatura de reacción no
f= debe exceder los límites de 15 y 30oC.
S
Do PERFORMANCE
2) Creatinina en orina (g/24 hs) = x V a) Reproducibilidad: procesando replicados de las mismas
S muestras en un mismo día se obtuvieron los siguientes
siendo: resultados:
V = volumen de la diuresis expresado en litros/24 horas. Nivel D.S. C.V.
La fórmula surge de: 7,4 mg/l ± 0,19 mg/l 2,5 %
Do 14,1 mg/l ± 0,25 mg/l 1,7 %
Creatinina en orina (g/24 hs) = x 0,020 g/l x 50 x V
S b) Linealidad: la reacción es lineal hasta 40 mg/l, en caso
donde: de que los resultados superen este valor, deberá diluirse la
0,020 g/l = concentración del Standard solución coloreada final 1:2 ó 1:4 con el Blanco de Reactivos,
50 = factor de dilución repetir la lectura y multiplicar el resultado por la dilución
efectuada.
3) Depuración de Creatinina Endógena (D.C.E.): c) Recuperación: agregando cantidades conocidas de
creatinina a distintos sueros se obtuvo una recuperación
D.C.E. ml/min = x 694 ml/min
entre 96 y 101%.
Creatinina en suero (mg/l) d) Límite de detección: depende del fotocolorímetro em-
donde: pleado y de la longitud de onda utilizada. En espectrofotóme-
g/24 hs 1.000 mg x 1.000 ml 1.000.000 ml tro con cubetas de caras paralelas de 1 cm de espesor, para
694 ml/min = = = un cambio de absorbancia de 0,001 D.O., el mínimo cambio
mg/l 1 mg x 1.440 min 1.440 min de concentración detectable será de 0,09 mg/l.
870400000 / 00 p. 2/6
PRESENTACION SIMBOLOS
Kit para 220 determinaciones (Cód.1260001). Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
BIBLIOGRAFIA Este producto cumple con los requerimientos previstos
- Biggs, H.G. & Cooper, J.M. - Clin. Chem. 7/6:655 (1961).
- Martinek, R.G. - Amer. Med. Technol. 32/6:700 (1970).
- Searcy, R.L. - Diagnostic Biochemistry, Mc. Graw - Hill
Book Co. New York (1969). P Representante autorizado en la Comunidad Europea

- Teger-Nilsson, A.C. - Scand. J. Clin. Lab. Invest. 13:326
(1961). V Uso diagnóstico "in vitro"
 No congelar
F Riesgo biológico
Cont. Contenido
g Número de lote
M Elaborado por:
Xn
Nocivo
Xi
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870400000 / 00 p. 3/6 UR110408
LINEA TURBITEST AA
Cystatin C
C Calibrator
Para la calibración de la determinación de cistatina C
Cystatin C Calibrator Turbitest AA ha sido diseñado para Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
la calibración del kit Cystatin C Turbitest AA. reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
Consultar los valores asignados en cada vial, debido a que
los mismos son lote específico. Este producto cumple con los requerimientos previstos
REACTIVOS PROVISTOS
Calibradores 1, 2, 3, 4 y 5: suero humano con el agregado
de distintas concentraciones de cistatina C recombinante
humana. V Uso diagnóstico "in vitro"
INSTRUCCIONES PARA SU USO Contenido suficiente para <n> ensayos

X
PRECAUCIONES
Los reactivos para uso diagnóstico "in vitro". l Límite de temperatura (conservar a)
Los Calibradores han sido preparados a partir de material
no reactivo para antígeno de superficie de hepatitis B (HB-  No congelar
sAg), anticuerpos contra el virus de la hepatitis C (HCV) y
anticuerpos contra el virus de la inmunodeficiencia humana F Riesgo biológico
(HIV). Sin embargo, los Calibradores y todas las muestras
deben manipularse como si se tratara de material infectivo.
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales Cont. Contenido
Elaborado por:
M
Reactivos Provistos: son estables a 2-10oC hasta la fecha
Una vez abiertos los calibradores son estables 4 semanas
a 2-10oC. Irritante
PRESENTACION i Consultar instrucciones de uso

- 5 x 2 ml (Cód. 1999796)
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo
h
M
Número de catálogo
Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
864102600 / 01 p. 1/2
LINEA TURBITEST AA
Cystatin C
Lote: 1504163130
C Control
Para control de precisión en la determinación de cistatina C
Nivel 1: 163130
Nivel 2: 163130
APLICACIONES
VALORES ASIGNADOS
Cystatin C Control Turbitest AA ha sido diseñado para el
control de precisión del kit Cystatin C Turbitest AA. Cistatina Valor Medio Rango
Consultar la tabla de valores asignados para los constituyen- (mg/l) (mg/l) (mg/l)
Nivel 1 0,84 0,68 1,00
REACTIVOS PROVISTOS Nivel 2 4,04 3,24 4,84
Control nivel 1: suero humano con el agregado de cistatina C re-
combinante humana en niveles bajos o cercanos a los normales.
Control nivel 2: suero humano con el agregado de cistatina
C recombinante humana en niveles altos.

Es recomendable procesar el control diariamente y en
forma paralela a las muestras de pacientes, estableciendo
intervalos de control que se adapten a las necesidades de
cada laboratorio en particular. Los resultados deben ubicarse
dentro de los intervalos definidos.
Cada laboratorio debe establecer lineamientos para tomar me-
didas correctivas si los valores se ubicaran fuera del intervalo.
PRECAUCIONES
Los controles son para uso diagnóstico "in vitro". No ingerir.
Evitar contacto con la piel y ojos.
Los Controles han sido preparados a partir de material no
reactivo para antígeno de superficie de hepatitis B (HBsAg),
anticuerpos contra el virus de la hepatitis C (HCV) y anticuer-
pos contra el virus de la inmunodeficiencia humana (HIV).
Sin embargo, los Controles y todas las muestras deben
manipularse como si se tratara de material infectivo.
ALMACENAMIENTO
de vencimiento indicada en el envase. Una vez abiertos los
controles son estables 4 semanas a 2-10oC.
PRESENTACION
- 2 x 2 ml (Cód. 1999797)
864102500 / 04 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:

Europea Nocivo

Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
864102500 / 04 p. 2/4 UR150409
LINEA TURBITEST AA
Cystatin C
de cistatina C

Cistatina C es una proteína citoplasmática de bajo peso Suero o plasma
molecular (13 kDa) que funciona como inhibidor de diversas a) Recolección: obtener suero de la manera usual. Separar
cistatin proteasas. La cistatina C tiene una tasa de produc- del coágulo lo más rápidamente posible.
ción estable y es removida de circulación por filtración glo- b) Aditivos: en caso de usar plasma, puede utilizarse he-
mular. En individuos sanos la cistatina C es completamente parina o EDTA para su obtención.
reabsorbida y degradada en los túbulos, pero en individuos c) Sustancias interferentes conocidas: no emplear mues-
con problemas renales su nivel en sangre aumenta de 2 tras hemolizadas, lipémicas o contaminadas. No se observan
a 5 veces el valor normal. A diferencia de la creatinina, interferencias por hemoglobina hasta 500 mg/dl, bilirrubina
la cistatina C no es afectada por procesos inflamatorios, hasta 30 mg/dl, triglicéridos hasta 5 g/dl y ácido ascórbico
sexo, edad, dieta o estado nutricional. Numerosos estudios hasta 50 mg/dl.
han demostrado que la cistatina C en suero constituye un Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
mejor marcador de la tasa de filtración glomerular que la drogas en el presente método.
creatinina sérica. d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
El dosaje de cistatina C es útil para el diagnóstico y trata- muestra debe ser preferentemente fresca. Si el ensayo no
miento de enfermedades renales. puede ser realizado en el momento la muestra debe ser
colocada en un tubo bien tapado y conservarse durante 1
FUNDAMENTO DEL METODO semana a 2-10oC, 2 días a 20-25oC o 3 meses a -20ºC. Evitar
La cistatina C reacciona con el anticuerpo específico forman- congelamientos y descongelamientos repetidos.
do inmunocomplejos insolubles. La turbidez provocada por
estos inmunocomplejos es proporcional a la concentración MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
de cistatina C en la muestra y puede medirse espectrofo- - Material volumétrico para medir los volúmenes indicados.
tométricamente. - Analizador automático.
REACTIVOS PROVISTOS
A. Reactivo A: buffer Tris 100 mM, pH 8,5 ± 0,3. PROCEDIMIENTO
B. Reactivo B: partículas de látex recubiertas de anticuerpos (Analizador automático)
policlonales anti-cistatina C (conejo) en buffer glicina 100 mM, A continuación se detalla un procedimiento general para
pH 7,3 ± 0,3. Cystatin C Turbitest AA en un analizador automático.
Cuando se implemente la técnica para un analizador en
REACTIVOS NO PROVISTOS particular, seguir las instrucciones de trabajo del mismo.
- Cystatin C Calibrator Turbitest AA de Wiener lab.
Muestra o Calibrador 3 ul
- Solución fisiológica (NaCl 9 g/l).
Reactivo A 230 ul
INSTRUCCIONES PARA SU USO Incubar durante 300 segundos a 37oC
Reactivo B 50 ul
PRECAUCIONES Incubar 4 minutos, 30 segundos. Medir cambio de absor-
Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro". bancia a 546 nm. Calcular la concentración de cistatina
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales C utilizando la medida de cambio de absorbancia e
de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos. interpolando en la curva de calibración preparada con
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de calibradores de concentración conocida.
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE CALIBRACION

ALMACENAMIENTO Se recomienda el uso Cystatin C Calibrator Turbitest AA
Los Reactivos Provistos son estables a 2-10oC hasta la de Wiener lab. para la calibración. Usar solución fisiológica
fecha de vencimiento indicada en la caja. Una vez abiertos, (NaCl 0,9%) para el punto cero de la calibración (solución
los reactivos son estables 30 días a 2-10oC. No congelar. blanco).
864102400 / 02 p. 1/6
Se recomienda que cada laboratorio determine la frecuencia Brú C, Grubb A. - Clin. Biochem. 38: 1, 2005.
de la calibración y esto dependerá del analizador automático - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
en uso así como del tipo y número de ensayos a realizar. AACC Press, 5th ed., 2000.
Una nueva curva de calibración debe hacerse al menos una - Dharnidharka VR, Kwon C, Stevens G. - Am J Kidney Dis.
vez al mes o cuando un nuevo lote de reactivo es utilizado. 40, 221, 2002.

Procesar con cada determinación, 2 niveles de un material
de control de calidad (Cystatin C Control Turbitest AA) con
concentraciones conocidos de cistatina C.
Los intervalos y límites del control de calidad deben ser
adaptados a los requerimientos de cada laboratorio. Cada
laboratorio deberá establecer medidas correctivas si los
valores caen fuera de los límites.
Adultos: 0,56 - 1,02 mg/l

Las muestras que contengan niveles de cistatina C por en-
cima del rango de ensayo, deberán ser diluidas utilizando
NaCl 0,9% y ensayadas nuevamente. Corregir los resultados
de acuerdo al factor de dilución.
PERFORMANCE
a) Precisión: se evaluaron dos niveles (alto y bajo) y se
repitieron 20 veces para obtener la precisión intraensayo:
Nivel D.S. C.V.
0,84 mg/l ± 0,005 mg/l 0,58 %
4,02 mg/l ± 0,022 mg/l 0,55 %
b) Linealidad: 0,1-10 mg/l de cistatina C.
c) Sensibilidad analítica: ≤ 0,1 mg/l de cistatina C.
d) Efecto prozona: no se observa efecto prozona hasta una
concentración de cistatina C de 60 mg/l.

utilizarse Cystatin C Calibrator Turbitest AA de Wiener lab.
PRESENTACION
(Cód. 1009366)
(Cód. 1009646)
BIBLIOGRAFIA
- Filler G, Bökenkamp A, Hofmann W, Le Bricon T, Martinéz-
864102400 / 02 p. 2/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
864102400 / 02 p. 3/6 UR131213
DIA (Dot Immuno Assay)*
HIV 1+2
Inmunoensayo sobre soporte sólido para la detección
de anticuerpos contra los virus de inmunodeficiencia
humana HIV-1, HIV-1 grupo O y HIV-2
SIGNIFICACION CLINICA Buffer de Lavado: a baja temperatura los componentes del

Los virus de la inmunodeficiencia humana (HIV-1 y HIV-2) reactivo pueden precipitar. En tal caso, colocar en baño de
causantes del SIDA, son transmitidos principalmente por agua a 37oC unos minutos, mezclando luego por inversión.
contacto sexual o a través de sangre o productos contami- Diluir 1+7 con agua destilada (1 parte Buffer de Lavado
nados derivados de la sangre. concentrado + 7 partes de agua destilada). Tener en cuenta
En individuos infectados con estos virus aparecen anticuer- que al realizar la técnica el Buffer de Lavado se prepara
pos, como respuesta del sistema inmunitario a la invasión una sola vez y se utiliza en los dos lavados. Luego, debe
viral. Estos anticuerpos no son protectores y no confieren in- descartarse la solución agregándole previamente 5 ml de
munidad, pero por ser marcadores tempranos de la infección, hipoclorito de sodio al 5%.
su detección constituye la base del estudio de la patología. Revelador: listo para usar.
El presente equipo ha sido desarrollado para detectar Control Positivo: listo para usar.
conjuntamente la presencia de los anticuerpos anti-HIV-1, Control Negativo: listo para usar.
anti-HIV-1 grupo O y anti-HIV-2.
PRECAUCIONES
FUNDAMENTOS DEL METODO - Todas las muestras de pacientes deben manipularse como
La muestra diluida se pone en contacto con el soporte sólido si fueran capaces de transmitir infección. Los controles se
en forma de peine en el cual se encuentran inmovilizados encuentran inactivados. Sin embargo, deben emplearse
péptidos sintéticos de transmembrana de HIV-1 y HIV-2. Si como si se tratara de material infectivo.
la muestra contiene anticuerpos anti-HIV-1, anti-HIV-1 grupo - Los sueros controles han sido examinados para HBsAg,
O o anti-HIV-2 se formará un inmunocomplejo que quedará encontrándose negativos.
unido al soporte. Luego de un lavado, se incuba el soporte - Todos los materiales empleados en el ensayo deben ser
con un conjugado de proteína A-oro coloidal (Revelador). destruidos a fin de asegurar la inactivación de agentes pa-
La proteína A se une al fragmento Fc de los anticuerpos. tógenos. El método recomendado para este procedimiento
La aparición de una mancha rojiza en el lugar donde se es autoclavar durante 1 hora a 121oC. Los líquidos de
encuentran depositados los péptidos sintéticos es indicativo desecho pueden ser desinfectados con hipoclorito de sodio
de que se formó el inmunocomplejo y por lo tanto de la pre- (concentración final 5%) durante por lo menos 60 minutos.
sencia en la muestra de anticuerpos anti-HIV-1, anti-HIV-1 - Si los pocillos de la policubeta no se utilizan en su tota-
grupo O o anti-HIV-2. lidad, descartar el líquido de los pocillos utilizados en un
recipiente para desechos biológicos que contenga 5% de
REACTIVOS PROVISTOS hipoclorito sódico. Luego golpear la policubeta varias veces
Antígeno: soporte sólido en forma de peine, conteniendo in- sobre papel absorbente que se descartará como residuo
movilizados en cada “diente” péptidos sintéticos de antígenos biológico y lavarla con una solución alcohólica al 50%.
de transmembrana de HIV-1 y HIV-2 (parte opaca del peine). Secarla y cubrir los pocillos empleados en el ensayo con
Diluyente de Muestras: solución fisiológica con tensioactivo cinta autoadhesiva para evitar su reutilización.
no iónico, pH 7,3. - No intercambiar reactivos de distintos equipos y lotes.
Buffer de Lavado concentrado: cloruro de sodio 1,4 mol/l - No emplear reactivos de otro origen.
en buffer fosfatos 100 mmol/l y tensioactivo no iónico 0,1 g/l. - Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
Revelador: proteína A de Staphylococcus aureus conjugada - El Buffer de Lavado contiene azida sódica.
con oro coloidal.
Control Positivo: dilución de suero inactivado, reactivo para ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
anticuerpos anti-HIV. ALMACENAMIENTO
Control Negativo: dilución de suero inactivado, no reactivo. Los Reactivos Provistos son estables en refrigerador (2-
INSTRUCCIONES PARA SU USO Buffer de Lavado: preparar en el momento de usar.
Antígeno: listo para usar. Al cortar el sobre, tener la pre- Antígeno: los peines con antígeno inmovilizado se proveen
caución de no cortar con la tijera los peines o el sobre con cerrados y con desecante. No abrir el envoltorio hasta el
desecante. momento de usar ni antes que hayan tomado temperatura
Diluyente de Muestras: listo para usar. ambiente, para evitar la humectación del contenido. Los
* Elaborado bajo licencia de Concept Foundation 870420000 / 01 p. 1/8

peines no utilizados deben conservarse dentro del sobre con pocillo a fin de asegurar una correcta homogeneización.
el desecante, cerrado con cinta autoadhesiva y a 2-10oC. En la hilera de pocillos contigua a la utilizada para las
Los peines conservados en estas condiciones pueden ser muestras colocar 3 gotas de Revelador por pocillo a
utilizados dentro de los 2 meses posteriores mientras no se
utilizar. Preparar el Buffer de Lavado como se explicó en
supere la fecha de vencimiento del equipo.
INSTRUCCIONES PARA SU USO. Colocar el Buffer de
Lavado en el recipiente destinado a tal fin, teniendo la
MUESTRA
precaución de no formar espuma. Este recipiente debe
Suero o plasma
permitir que los dientes del peine queden completamente
a) Recolección: obtener la muestra de la manera usual.
sumergidos.
b) Aditivos: si se emplea plasma puede utilizarse cualquier
anticoagulante de uso corriente en la práctica transfusional. Realización de la prueba:
c) Sustancias interferentes conocidas: la hemólisis puede Abrir cuidadosamente el envoltorio y extraer el número
ser causa de resultados erróneos. de peines necesarios para el ensayo. Conservar los res-
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: las tantes como se indicó en ESTABILIDAD E INSTRUCCIO-
muestras no diluidas pueden conservarse durante no más de NES DE ALMACENAMIENTO. Colocar la identificación
4 horas a temperatura ambiente y hasta 7 días refrigeradas de cada muestra directamente en la parte superior del
(2-10oC). Para conservación por períodos más prolongados diente correspondiente.
deben ser congeladas a -20oC o menos. Los congelamien- Importante: no tocar en ningún momento las zonas reactivas
tos y descongelamientos reiterados pueden producir falsos del peine ya que esto puede ocasionar resultados erróneos.
positivos y falsos negativos. Colocar el peine en los pocillos de la policubeta que con-
Si las muestras deben ser transportadas, embalar de tienen las diluciones de muestras y controles e incubar
acuerdo a las especificaciones legales relativas al envío de durante exactamente 10 minutos a temperatura ambiente.
materiales infecciosos. Extraer el peine de los pocillos y escurrir las puntas de
los dientes tocando sobre papel absorbente. No tocar el
MATERIAL REQUERIDO papel con la zona reactiva de los dientes.
1- Provisto Manteniendo el peine en posición vertical con los dien-
- policubetas tes hacia abajo y la zona reactiva de frente al operador
- recipiente para lavado sumergir el peine en el Buffer de Lavado. El lavado debe
2- No provisto realizarse repitiendo 10 veces un movimiento del peine
- micropipeta de 100 ul constante, lento y suave de adelante hacia atrás, sin
- reloj alarma o cronómetro tocar con el mismo las paredes del recipiente. Escurrir
- material volumétrico adecuado nuevamente las puntas de los dientes como se explicó
anteriormente.
CONDICIONES DE REACCION Insertar el peine en los pocillos que contengan el Reve-
- Tiempo total de reacción: 20 minutos lador e incubar a temperatura ambiente durante exac-
- Temperatura de reacción: temperatura ambiente (> 22oC). tamente 10 minutos. Tener en cuenta que la reacción
Si la temperatura ambiente es menor a 22oC, realizar la positiva se intensifica si se agita durante el revelado, por
reacción en estufa a 37oC. ejemplo en un agitador de Kline.
- Volumen de muestra: 100 ul Al finalizar la incubación repetir el lavado como se indicó
más arriba, empleando el mismo Buffer de Lavado que
se usara anteriormente.
PROCEDIMIENTO Colocar el peine sobre una superficie limpia con la zona
Llevar a temperatura ambiente los reactivos y las mues- reactiva hacia arriba y dejar secar completamente antes
tras antes de iniciar la prueba. Una vez iniciado el análisis de observar los resultados.
completarlo sin interrupción. Procesar simultáneamente El color del “dot” se intensifica al secarse. Efectuar la
1 Control Positivo (en el “diente” del extremo derecho del lectura de los resultados bajo luz natural o fluorescente.
peine) y 1 Control Negativo (en el “diente” del extremo iz- No emplear lámpara incandescente.
quierdo del peine). Luego proceder de la siguiente forma:
Preparación del material:
Colocar 2 gotas de Diluyente de Muestras en cada
El color de la reacción es estable indefinidamente por lo
pocillo a utilizar de la policubeta. En cada uno de estos
que el soporte puede conservarse para referencias futuras
pocillos colocar 100 ul de Muestra o Controles. Tener
la precaución de colocar los mismos en el fondo de los de los resultados.
pocillos para asegurarse de no producir salpicaduras que
puedan contaminar pocillos vecinos. Mezclar aspirando CRITERIOS DE VALIDACION DE LA CORRIDA
con la micropipeta varias veces el contenido de cada La corrida se considera válida si se cumplen simultánea-
870420000 / 01 p. 2/8
a) No debe aparecer color detectable en el diente corres- Esquema de interpretación
pondiente al Control Negativo.
b) El Control Positivo debe ser nítidamente detectable. Muestra inicial
Si alguna de estas condiciones no se cumple, repetir la
corrida, empleando un nuevo equipo de reactivos.
zona reactiva incolora zona reactiva coloreada
Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA. Muestra No Reactiva Muestra Reactiva
- El kit está diseñado para usar con muestras puras. No
utilizar muestras diluidas debido a que las mismas pueden
ocasionar resultados falsos negativos.
Repetir por duplicado
- Debe recordarse que la presencia de anticuerpos anti-HIV
en el suero NO es diagnóstico de SIDA. Los resultados
repetidamente reactivos deben corroborarse por métodos
de referencia como Western blot. Ambos duplicados Uno o ambos duplicados
- Un resultado negativo no excluye la posibilidad de exposi- No Reactivos Reactivos
ción o infección por HIV.
- Pueden obtenerse resultados falsos positivos en las si-
guientes situaciones: enfermedades autoinmunes, tubercu-
losis, lupus eritematoso sistémico, embarazo, vacunación Muestra No Reactiva Confirmar por Western blot
contra hepatitis B y otras inmunizaciones, hemodiálisis, y discriminar HIV-1/HIV-2
enfermedad hepática y otras enfermedades.
PRESENTACION
PERFORMANCE Equipo para 48 determinaciones (Cód. 1723201).
- En un estudio conducido por el Global Program on Aids
(GPA) perteneciente a la World Health Organization (WHO) BIBLIOGRAFIA
se evaluó un panel de 600 sueros humanos y 8 paneles de - Gallo, R.C. y cols. Science 224:500 (1984).
seroconversión. Los datos obtenidos se compararon con - Montagnier, L. - Ann. Inst. Pasteur/Virol., 138, 3-11 (1987).
Western blot como método de referencia, encontrándose - Centers for Disease Control - Morbidity and Mortality Weekly
una sensibilidad del 100%, una especificidad del 99,7% y Report 36/31 (1987).
una reproducibilidad del 99,4%. - Lossa, G.R. - Acta Bioq. Clín. Latinoam. XXI/1:47-65 (1987).
- En un estudio realizado sobre 425 muestras provenientes - NotiWiener Nº76, pág. 1, abril 1990.
de pacientes del Instituto de Infectología Emílio Ribas de - Bansal, J.; Constantine, N.; Zhang, X.; Kataaha, P. - VIIth
San Pablo, se obtuvo una sensibilidad del 99,5%, una International Conference on AIDS in Africa, 1992.
especificidad del 96,4% y una eficiencia del 97,8%. - Sato, N.; Rojkín, F.; Lorenzo, L.; Piovesana, M.; Beristain,
- En un estudio realizado sobre dos muestras de HIV-1 grupo C.; Takeda, A. - XXVII Congreso Brasileiro de Patología
O, B7-2705-0001 y JP8-2707-0001, de Boston Biomedica Clínica San Pablo, Brasil - Setiembre 1993.
Inc., fueron detectadas las 2 muestras. - Lorenzo, L.E. ; Rojkín, L.F. ; Beristain, C.N. - 46th National
Meeting, AACC, 17-21 julio, 1994, New Orleans, LA, USA
INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS - Clin. Chem. 40/60:1036 Abs., 254, 1994.
Una vez finalizada la prueba y cuando el peine se haya - Rojkín, L.F.; Lorenzo, L.E.; Beristain, C.N.- Resúmenes 1°
secado completamente, observar los resultados sobre una Congreso Argentino de Biotecnología, II° Feria Congreso
superficie blanca, a ojo descubierto y con buena iluminación. Latinoamericano de Biotecnología, 6-8 junio, 1994, Buenos
Muestra Reactiva: aparición de una mancha coloreada (rosa Aires, Argentina, pag. 70.
tenue a rojo) en la zona reactiva del peine. Siempre que este - Report of the WHO evaluation of the DIA (Dot Immuno
círculo esté presente, aún cuando el color sea de menor Assay) HIV 1+ 2 (Wiener lab. - Argentina). Institute of Tro-
intensidad que el Control Positivo, indica muestra reactiva. pical Medicine, Department Infection and Immunity, WHO
Muestra No Reactiva: no se observa coloración en la zona Collaborating Centre on AIDS, Division of Microbiology -
reactiva del peine. Antwerpen, 24 February, 1995.
Toda prueba inicialmente reactiva debe ser ensayada nueva- - Celum C., Coombs R., Jones M. et al. - Arch. Intern. Med.
mente por duplicado. Si uno o ambos de los duplicados son 154:1129 (1994).
Reactivos, se presume que la muestra contiene anticuerpos - Barthel H., Wallance D. - Semin. Arthritis Rheum. 23:1
anti-HIV-1 o anti-HIV-2. (1993).
Si ambos duplicados resultan No Reactivos se considera el - Doran T. and Parra E. - Arch. Fam. Med. 9/9:924 (2000).
primer resultado como falsamente positivo, presumiéndose - Centers for Disease Control - MMWR 50/RR19:59 (2001).
que la muestra no contiene anti-HIV-1 ni anti-HIV-2.
Toda muestra Reactiva debe ensayarse nuevamente em-
pleando un método de referencia y realizar la discriminación
para HIV-1/HIV-2.
870420000 / 01 p. 3/8
Antígeno Diluyente Muestra
Antígeno Diluyente de Muestras

Revelador Buffer de Lavado concentrado
Control + Control -



 No congelar
F Riesgo biológico
Cont. Contenido
g Número de lote
Elaborado por:
M
Nocivo
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo
Wiener lab.
Riobamba 2944
Bioquímica
870420000 / 01 p. 4/8
Fecuntest
C directo
Prueba de aglutinación directa en placa para diagnóstico
de embarazo

La Gonadotrofina Coriónica Humana (hCG) es una glucopro- REACTIVOS
teína producida por las células trofoblásticas de la placenta. La turbidez y/o cambio de coloración de los reactivos pueden
Comienza a secretarse en la fase más temprana de la etapa ser indicio de contaminación de los mismos.
gestacional y aumenta constantemente hasta alcanzar un
pico, alrededor de 9 semanas después del comienzo del último MUESTRA
período menstrual normal, cuyos niveles son muy variables Orina
de una mujer a otra. Su producción es índice de crecimiento a) Recolección: recolectar orina en un recipiente perfecta-
placentario, hecho que permite establecer una relación directa mente limpio y libre de restos de detergente. Para la Técnica
entre la aparición de hCG y el diagnóstico de embarazo. Cualitativa emplear orina sin diluir, recolectada en cualquier
hora del día. No obstante, si se emplea la primera orina de
FUNDAMENTOS DEL METODO la mañana, puede lograrse mayor sensibilidad diagnóstica.
La muestra se pone en contacto con un reactivo de látex sensi- Para la titulación emplear orina de 24 horas. La misma debe
bilizado con anticuerpos monoclonales anti-hCG. Si la muestra ser mantenida en refrigerador (2-10oC) durante su recolección.
contiene hCG, ésta se unirá en forma sensible y específica b) Aditivos: no se requieren. No usar conservantes.
produciéndose una aglutinación visible macroscópicamente. c) Sustancias interferentes conocidas: hematuria, pro-
teinuria y/o contaminaciones bacterianas son causa de
REACTIVOS PROVISTOS resultados erróneos. Las orinas no límpidas deben filtrarse
A. Reactivo A: suspensión de partículas de látex-poliestireno o centrifugarse antes de ser ensayadas.
que tienen adsorbidas moléculas de anti-hCG. Referirse a las bibliografías de Young para los efectos de las
Control Positivo: solución buffer conteniendo hCG y con- drogas y las enfermedades en el presente método.
servantes. d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: em-
Control Negativo: solución buffer libre de hCG conteniendo plear orina fresca. En caso de no efectuarse el ensayo en el
conservantes. momento de la recepción de la muestra, la misma debe ser
mantenida en el refrigerador (2-10oC). Preferentemente, la
REACTIVOS NO PROVISTOS orina debe procesarse lo antes posible dentro de las doce
Solución fisiológica. horas contadas desde el momento de su obtención.
INSTRUCCIONES PARA SU USO MATERIAL REQUERIDO

Reactivo A: homogeneizar por agitación antes de usar. 1- Provisto
Controles Positivo y Negativo: listos para usar. - placas de plástico o vidrio fondo negro.
- espátulas-gotero plásticas descartables
PRECAUCIONES
2- No provisto
Los Reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
- 1 cronómetro.
Los Controles Positivo y Negativo han sido examinados para
- material volumétrico adecuado.
antígeno de superficie del virus de hepatitis B (HBsAg), virus
- fuente luminosa.
de la hepatitis C (HCV) y anticuerpos contra HIV 1/2, encon-
trándose no reactivos. No obstante, deben ser empleados
PROCEDIMIENTO
Llevar los reactivos y la muestra a temperatura ambiente
antes de usar.
Utilizar una espátula-gotero plástica provista, en posición
vertical, para colocar cada muestra o control.
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE I) TECNICA CUALITATIVA
ALMACENAMIENTO En cada uno de los sectores delimitados de la placa
Reactivos Provistos: estables en refrigerador (2-10oC) has- provista, colocar:
870430000 / 02 p. 1/6
res de hCG entre 25-50 Ul/ml, pudiendo llegar a un máximo
Muestra o Controles 1 gota de 250 Ul/ml en condiciones normales.
Reactivo A 1 gota Un número de condiciones, además del embarazo, inclu-
yendo enfermedad trofoblástica y ciertos neoplasmas no
Con el extremo cerrado de la espátula-gotero descartable
trofoblásticos provocan niveles elevados de hCG. Estos
utilizada para dispensar la muestra o control, mezclar
diagnósticos deberán considerarse si la evidencia clínica
durante 4-5 segundos hasta obtener una suspensión
es apropiada.
uniforme en toda la superficie del sector. Inmediatamente,
Un diagnóstico clínico definitivo no deberá estar basado en
disparar el cronómetro, balancear suavemente la placa y
el resultado de una sola prueba, sino que deberá hacerlo
observar macroscópicamente el resultado dentro de los
un médico después que todos los exámenes clínicos y de
2 minutos, utilizando una fuente de luz ubicada directa-
laboratorio han sido evaluados.
mente por encima de la placa.
II) TITULACION LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
Mezclar la orina recolectada durante 24 horas de la forma Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
antes indicada (Ver MUESTRA) y medir su volumen. Si la muestra de orina está demasiado diluida puede no
Tomar una alícuota y procesar como sigue: contener niveles representativos de hCG. Repetir con la
a) Preparar diluciones sucesivas (1/2, 1/4, 1/8, etc.) con primera orina de la mañana.
solución fisiológica. Muestras con concentraciones de hCG menores a la sensi-
b) Ensayar cada dilución según la TECNICA CUALITA- bilidad del método darán resultados negativos.
TIVA. Otras causas de resultados erróneos son:
- Intercambiar las tapas de los reactivos.
- No respetar los tiempos de mezclado indicados en el
INTERPRETACION Y CALCULO DE LOS RESULTADOS PROCEDIMIENTO.
Positivo: aglutinación que aparece dentro de los dos - No emplear los goteros en posición vertical.
minutos. - Usar una placa de vidrio que no esté perfectamente limpia.
Negativo: suspensión homogénea. Pasados los dos minu- - No llevar los reactivos y la muestra a temperatura ambiente
tos, pueden aparecer aglutinaciones inespecíficas. antes de comenzar a trabajar.
Título: inversa de la máxima dilución a la cual se produce
la aglutinación. PERFORMANCE
Sensibilidad: Fecuntest directo detecta hCG en orina a
Cálculos:
partir de 0,2 Ul/ml. Dicha sensibilidad fue verificada frente
1- Ul de hCG/ml = S x T
al 3rd International Standard de hCG (W.H.O.).
donde:
S= sensibilidad de la reacción= 0,2 UI/ml de hCG PRESENTACION
T= título Equipo para 50 determinaciones (Cód. 1323152).
2- Ul de hCG/24 horas = S x T x V
donde: BIBLIOGRAFIA
V= volumen total (en ml) de orina excretada durante las 24 hs - Derman, R. et al - "Current Status of Immunologic Pregnan-
cy Test" - Int. Gynaecol. Obstet. 17/90 (1979).
METODO DE CONTROL DE CALIDAD - Reiss, A.M. - "Immunologic Cross-Reaction between
Control Positivo: las reacciones positivas de Fecuntest Luteinizing Hormone and Antisera to Human Chorionic
directo presentan un aspecto grumoso que puede ser co- Gonadotropin" - Int. Arch. Allergy 30:561 (1966).
rroborado procesando una gota de orina que contenga una - Wide, L. - "An Immunological Method for the Assay of
cantidad de hCG igual o mayor a la sensibilidad del equipo Human Chorionic Gonadotropin" - Acta Endocrinol. 41:49.
o una gota de Control Positivo en lugar de la Muestra, si- Suppl. 70 (1962).
guiendo la técnica descripta (ver PROCEDIMIENTO). Orinas - Batzer, F. - Fertil. Steril. 34:1 (1980).
francamente positivas pueden conservarse en alícuotas a - Catt, K.; Dufan, M.; Vaitukaitis, J. - J. Clin. Endocrinol.
-20oC durante no más de 60 días debiendo ser descartadas Metab. 40:537 (1975).
después de su uso, puesto que su integridad no se mantiene - Braunstein, G.; Rasor, J.; Adler, D.; Danzer, H.; Wade, M.
al congelarlas y descongelarlas más de una vez. - Am. J. Obstet. Gynecol. 126:678 (1976).
Control Negativo: las reacciones negativas de Fecuntest - Lenton, E.; Neal, M.; Sulaiman, R. - Fertil. Steril. 37:773 (1982).
directo presentan un aspecto homogéneo que puede ser - Dawood, M.; Saxeba, B.; Landesman, R. - Ob. Gyn.
corroborado procesando una gota de solución fisiológica o 126:678 (1976).
una gota de Control Negativo en lugar de la muestra siguien- - Braunstein, G. et al. - Ann. Inter. Med. 78:39 (1973).
do la técnica descripta (Ver PROCEDIMIENTO). - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
VALORES DE REFERENCIA - Young, D.S. - "Effects of Deseases on Clinical Laboratory
Durante el primer trimestre del embarazo se observan valo- Tests", AACC Press, 4th ed., 2001.
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Símbolos
C
M Elaborado por:

Europea Nocivo

Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo
Wiener lab.
Riobamba 2944
Bioquímica
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Fecuntest
C strips
Prueba inmunocromatográfica para la detección de
embarazo en suero, plasma u orina
SIGNIFICACION CLINICA de trabajo en el laboratorio de química clínica.

La gonadotrofina coriónica humana (hCG) es una glicopro- - Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
teína producida por las células trofoblásticas de la placenta. acuerdo a la normativa local vigente.
Comienza a secretarse en la fase más temprana de la etapa
gestacional y aumenta constantemente hasta alcanzar un ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
pico, alrededor de 9 semanas después del comienzo del ALMACENAMIENTO
último período menstrual normal. Su producción es índice de Los reactivos provistos son estables a temperatura ambiente
crecimiento placentario, hecho que permite establecer una (2-30oC) hasta la fecha de vencimiento indicada, mientras
relación directa entre la aparición de hCG y el diagnóstico sean conservadas en su envase cerrado.
de embarazo. Una vez abierto el envase retirar las tiras de reacción ne-
cesarias y volver a cerrar inmediatamente el envase para
FUNDAMENTOS DEL METODO evitar que las tiras restantes se humedezcan.
La prueba Fecuntest strips es un inmunoensayo cromato-
gráfico rápido para la detección de hCG en orina o suero. MUESTRA
La membrana se encuentra recubierta con anticuerpos de Suero, plasma heparinizado u orina
captura anti-hCG en la zona de prueba (T) y de cabra anti- a) Recolección: obtener la muestra de la manera usual. La
ratón en la zona de control (C). Durante la prueba, la muestra orina puede ser cualquiera del día sin embargo se recomien-
reacciona con las partículas de oro coloidal cubiertas con da la primera de la mañana ya que contiene, en general, la
anticuerpos monoclonales de ratón anti-hCG. La mezcla mayor concentración de la hormona.
migra por la membrana por capilaridad. Si el resultado es b) Aditivos: no se requieren. En caso de utilizar plasma,
positivo, se formará una banda coloreada con la partícula recolectar con heparina.
compleja en la zona de prueba. La ausencia de una banda c) Sustancias interferentes conocidas: la hemólisis inten-
coloreada en la zona de prueba indica un resultado negativo. sa puede ser causa de resultados erróneos.
Como un control de procedimiento, siempre aparecerá una Las muestras de orina que presentaran sedimento o turbiedad
banda de color en la zona de control independientemente deben ser filtradas o centrifugadas previamente al ensayo.
de la presencia de hCG en la muestra. No producen interferencias tanto en orina como en suero y plasma:
acetaminofeno (20 mg/dl), ácido acetilsalicílico (20 mg/dl),
REACTIVOS PROVISTOS ácido ascórbico (20 mg/dl), etinil estradiol (1400 mg/dl),
Tiras de reacción: tiras de nitrocelulosa recubierta con progesterona (1500 mg/dl), cafeína (20 mg/dl), bilirrubina
anticuerpos de captura anti-hCG y partículas de oro coloidal (20 mg/dl), glucosa (2 mg/dl) y triglicéridos (1200 mg/dl).
recubiertas con anticuerpo monoclonal de ratón anti-hCG. Referirse a las bibliografías de Young para los efectos de las
drogas y las enfermedades en el presente método.
PRECAUCIONES d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: las
- Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro". No usar muestras pueden conservarse durante 48 horas a 2-10oC.
luego de la fecha de vencimiento. Si deben conservarse por períodos más prolongados,
- Las tiras deben permanecer en su envase hasta el mo- deben ser congeladas a -20oC o menos. Deben evitarse
mento de usar. ciclos de congelamiento y descongelamiento reiterados.
- Una vez utilizada, la tira debe descartarse en recipientes Llevar la muestra a temperatura ambiente antes de realizar
destinados a desechos biológicos. la prueba.
- Todas las muestras deben manipularse como si fueran
potencialmente infectivas. MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
- Los resultados obtenidos por este ensayo son estrictamente - Recipiente para recolección de muestras.
cualitativos y no arrojan ninguna correlación con el grado - Cronómetro.
de aumento o disminución de la concentración de hCG.
- Los resultados del test deben usarse en conjunto con in- CONDICIONES DE REACCION
formación disponible de la evaluación clínica del paciente - Tiempo de reacción: 3 minutos en caso de orina y 5 minutos
y otros procedimientos diagnósticos. en caso de suero o plasma.
- Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales - Temperatura de reacción: temperatura ambiente (< 30oC).
861238200 / 01 p. 1/6
(T) variará de acuerdo a la concentración de hCG presente
PROCEDIMIENTO en la muestra.
1- Tanto la tira de reacción como la muestra deben
mantenerse a temperatura ambiente (< 30oC) antes de METODO DE CONTROL DE CALIDAD
la prueba. La prueba incluye un control de procedimiento. Pueden
2- Retirar la tira de reacción de su envase y rotular con procesarse adicionalmente controles comerciales.
la identificación correspondiente al paciente.
3- Sumergir la tira de reacción en la muestra a ensayar, LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
manteniéndola en posición vertical por lo menos 15 Se observan resultados falsos positivos en ciertas patologías
segundos cuidando de no sobrepasar la línea máxima como enfermedad trofoblástica y neoplasmas no trofoblás-
permitida (MAX) especificada. ticos (tumores testiculares), cáncer de próstata, mama y
4- Colocar la tira de reacción sobre una superficie limpia, pulmón que cursan con niveles aumentados de hCG.
plana y seca, activar el cronómetro y esperar hasta la Se observan resultados falsos negativos en caso de em-
aparición de la/s líneas coloreadas. Para cada muestra, barazo muy reciente, donde la concentración de hCG se
utilizar una tira de reacción nueva. encuentra por debajo del valor de discriminación y también
5- Observar la aparición de bandas coloreadas. Leer el en orinas muy diluidas, por lo que en estos casos se reco-
resultado a los 3 minutos cuando se ensaya orina o a los 5 mienda repetir el examen luego de 48-72 horas.
minutos si se ensaya suero. No interpretar los resultados Como cualquier ensayo que utiliza anticuerpos murinos,
pasados los 10 minutos ni antes del tiempo recomendado existe la posibilidad de interferencia positiva o negativa
para cada tipo de muestra. debido a la presencia de anticuerpos humanos anti-murinos
(HAMA) presentes en la muestra del paciente (veterinarios,
individuos tratados con terapias de anticuerpos, etc.).
INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS Esta prueba se utiliza para obtener un resultado cualitativo
y visual.
hCG
hCG
hCG
hCG
hCG
VALORES ESPERADOS
Las mujeres sanas no gestantes y los varones sanos pre-
C C C C C sentan valores de hCG no detectables para la prueba de
hCG Fecuntest strips.
T T T T T Habitualmente en las mujeres gestantes sanas la concen-
tración de hCG se duplica cada 2 días durante los primeros
días del embarazo alcanzando a los 10 días valores entre
10-30 mUI/ml; al mes, valores cercanos a 100 mUI/ml y al
final del primer trimestre, un pico de actividad con valores
entre 100.000-200.000 mUI/ml. Luego, la concentración
de hCG disminuye paulatinamente hasta alcanzar un valor
normal luego del parto.
Por lo tanto Fecuntest strips tiene la sensibilidad nece-
{
{
saria (25 mUI/ml), para detectar la hormona gonadotrofina

positivo negativo inválido coriónica (hCG) en el suero, plasma u orina de mujeres
gestantes sanas.
Positivo: se observan dos líneas rojas en la tira, una debida
al control y otra debida a la presencia de hCG. PERFORMANCE
Negativo: se observa sólo una línea roja en la región de a) Sensibilidad: Fecuntest strips detecta concentraciones
control (C). urinarias de hCG iguales o superiores a 25 mUI/ml (cali-
Inválido: falla en la aparición de la línea roja en la zona de bradas de acuerdo al WHO Fourth International Standard
control (C), que puede deberse a: NIBSC Code: 75/589).
· insuficiente volumen de muestra; b) Especificidad: efectuando estudios de reacción cruzada
· procedimiento técnico incorrecto; con 300 mUI/ml de LH, 1000 mUI/ml de FSH y 1000 uUI/ml
· deterioro de los reactivos. de TSH se obtuvieron resultados negativos.
Si el resultado es inválido se debe repetir la determinación c) Efecto prozona: no se observa efecto prozona hasta una
con otra tira. concentración de 625.000 mUI/ml.
Si el resultado es dudoso deberá probarse nuevamente con d) Estudio poblacional: se realizó el ensayo de correlación
una muestra obtenida 48 a 72 horas más tarde. del producto a evaluar (Fecuntest strips) con un kit comer-
Las muestras dudosas con un resultado posterior negativo cialmente disponible (Fecuntest un paso v.2 de Wiener
pueden atribuirse a la disminución de los niveles de hCG lab.). Los resultados fueron obtenidos siguiendo el protocolo
posteriores a abortos espontáneos o inducidos. EP12-A del NCCLS.
La intensidad del color en la zona de la banda de prueba Se procesaron 100 muestras de orina, 102 muestras de
861238200 / 01 p. 2/6
suero y 87 muestras de plasma heparinizado. Los resultados SÍMBOLOS
muestran una sensibilidad y una especificidad del 100% Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
cuando se los compara con otro test inmunocromatográfico reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
para hCG de características similares.
PRESENTACION
Kit para 25 determinaciones (Cód. 1999705). C por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios
BIBLIOGRAFIA P Representante autorizado en la Comunidad Europea

- User Protocol for Evaluation of Quantitative Test Perfor-
mance. Approved guideline. NCCLS 2006.
- Bristow A, et al. "Establishment, value assignment, and Contenido suficiente para <n> ensayos
characterization of new WHO Reference Reagents for six
X
molecular forms of human chorionic gonadotropin" Clin. Fecha de caducidad
H
Chem. 51/1:177, 2005.
- Cole LA et al. "Selecting human chorionic gonadotropin
immunoassays: Consideration of cross-reacting molecules
in first-trimester pregnancy serum and urine" Am. J. Obstet.  No congelar

Gynecol. 168/5:1580, 1993.
- Fenili CA, et al. "Evaluación de seis inmunoensayos (IES) F Riesgo biológico
utilizados para la medición de hCG humana en primer
trimestre de embarazo" Rev. Soc. Argent. Endocrinol.
Ginecol. Reprod. 6:34, 2000. Contenido
Cont.
- Saavedra MS, et al. "Formas moleculares de Gonadotrofina
Coriónica Humana (hCG). Impacto en su medición" Rev.
Argent. Endocrinol. Metab. 41/1:27,2004.
g Número de lote
- Stenman UH. "Immunoassay standardization: is it pos- Elaborado por:

sible, Who is responsible; who is capable?" Clin. Chem.
M
47:815, 2001. Nocivo
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
861238200 / 01 p. 3/6 UR090707
LINEA LIQUIDA
Fer-color
AA
C Método colorimétrico directo para la determinación
de hierro en suero o plasma
SIGNIFICACION CLINICA S. Standard*: solución de iones hierro (III) equivalente a

El hierro se distribuye en el organismo de diferentes mane- 100 ug/dl.
ras, incluyendo hemoglobina, hierro tisular y mioglobina. El
transporte de hierro de un órgano a otro se realiza mediante REACTIVOS NO PROVISTOS
una proteína transportadora llamada apotransferrina. El com- - Calibrador A plus de Wiener lab.
plejo que forma con el hierro se conoce como transferrina. - Agua desionizada.
La ferritina, localizada en casi todas las células del cuerpo,
constituye una reserva de hierro disponible para la forma- INSTRUCCIONES PARA SU USO
ción de la hemoglobina y otras proteínas que contienen el Reactivos Provistos: listos para usar.
grupo hemo. La absorción de hierro ocurre principalmente
en el duodeno. Tanto la ferritina como la transferrina están PRECAUCIONES
presentes en las células de la mucosa intestinal y juntas Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro". Evitar la
regulan la absorción de hierro. ingestión y el contacto con los ojos.
Los mayores desórdenes del metabolismo de hierro se re- El Reactivo A contiene tiourea. Estudios experimentales
lacionan con su deficiencia o exceso, sin embargo, se han realizados con esta droga en animales han evidenciado un
observado alteraciones en muchas otras enfermedades, in- posible efecto carcinogénico.
cluyendo anemia, enfermedades cardiovasculares, hepatitis Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
crónica, enfermedades renales e infecciones. de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
La anemia por pérdida de hierro representa uno de los tras- Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
tornos orgánicos más frecuentes, especialmente en niños, acuerdo a la normativa local vigente.
mujeres jóvenes, embarazadas y ancianos. También las
úlceras gástricas o duodenales y carcinomas de estómago, ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
constituyen causas de anemia ferropénica. ALMACENAMIENTO
Por el contrario, el exceso de hierro se asocia con otros Reactivos A y B: son estables en refrigerador (2-10oC) hasta
desórdenes, como hemosiderosis, hemocromatosis y anemia la fecha de vencimiento indicada en la caja.
sideroblástica. Standard: es estable a temperatura ambiente (< 25oC) hasta
Las técnicas fotométricas para la determinación de hierro la fecha de vencimiento indicada en la caja.
en suero se basan en la formación de un complejo con un
cromógeno, entre los cuales ferrozina y batofenantrolina han INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
sido ampliamente usados. REACTIVOS
El presente método emplea ferene, un agente quelante Variaciones en las lecturas de Blancos de Reactivos y/o
adicional, con el objetivo de aumentar la sensibilidad del Standard indican contaminaciones ocasionales (agua, ma-
ensayo colorimétrico. Este compuesto presenta una elevada terial de vidrio, etc.).
absortividad molar, es más sensible que ferrozina y facilita Un aumento en el valor de los Blancos indicará una conta-
la detección de hierro. minación con hierro.
FUNDAMENTOS DEL METODO MUESTRA

El hierro se libera del complejo de transferrina en medio Suero o plasma heparinizado
ácido y se reduce a Fe (II) con ácido ascórbico. Seguida- a) Recolección: el paciente debe estar en ayunas y las
mente reacciona con el reactivo de color, ferene, dando un extracciones deben practicarse siempre a la misma hora
complejo color azul que se mide a 600 nm. La absorbancia (preferentemente de mañana) ya que las fluctuaciones
obtenida es directamente proporcional a la concentración fisiológicas son significativas durante el día.
de hierro. b) Aditivos: en caso de utilizar plasma como muestra debe
usarse heparina como anticoagulante.
REACTIVOS PROVISTOS c) Sustancias interferentes conocidas: no se observan
A. Reactivo A: solución de ácido cítrico 200 mM, ácido interferencias por hemoglobina hasta 300 mg/dl, bilirrubina
ascórbico 34 mM, tiourea 100 mM y tensioactivo. conjugada hasta 12 mg/dl, bilirrubina no conjugada hasta
B. Reactivo B: solución estabilizada de ferene > 3 mM. 35 mg/dl y heparina hasta 50 UI/ml. Los triglicéridos no

interfieren hasta 1000 mg/dl utilizando técnica automática y * Si se emplea Calibrador A plus consultar los valores
250 mg/dl con técnica manual. asignados debido a que son lote específico. En este caso,
Si bien hemólisis ligeras no interfieren con este método, el la lectura del calibrador deberá corregirse restando el blanco
International Committee for Standardization in Hematology correspondiente.
(ICSH) recomienda el uso de suero libre de hemólisis.
Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las METODO DE CONTROL DE CALIDAD
drogas en el presente método. Procesar 2 niveles de un material de control de calidad
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: el sue- (Standatrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas
ro o plasma heparinizado pueden conservarse una semana de hierro, con cada determinación.
en refrigerador (2-10oC) o hasta un año a -20oC.
VALORES TEORICOS
MATERIAL REQUERIDO (no provisto) Hombres: 65 a 175 ug/dl (11,6-31,3 umol/l)
- Espectrofotómetro o analizador automático. Mujeres: 50 a 170 ug/dl (9-30,4 umol/l)
- Tubos o cubetas espectrofotométricas. VALORES DE REFERENCIA
- Cronómetro. En un grupo de 20 mujeres y 20 varones sanos, con edades
oscilando entre los 18 y 51 años, se halló un rango de 55 a
CONDICIONES DE REACCION 175 ug/dl* con los siguientes promedios:
- Longitud de onda: 600 nm Hombres: 114,6 ug/dl (20,5 umol/l)
- Temperatura de reacción: temperatura ambiente (< 25oC) Mujeres: 103,3 ug/dl (18,5 umol/l)
*Valores de referencia extraidos de archivos de Wiener lab.
- Volumen total de reacción: 1,4 ml

PROCEDIMIENTO
Hierro (ug/dl) x 0,179 = Hierro (umol/l)
En tres tubos marcados B (Blanco de Reactivos), S
(Standard) y D (Desconocido) colocar:
B S D - Valores de Blanco aceptables son necesarios para prevenir
Agua bidestilada 200 ul - - posibles contaminaciones del agua y los reactivos con
hierro. El Blanco de Reactivos, procesado de acuerdo al
Standard - 200 ul - Manual de Instrucciones, no debe ser superior a 0,05 D.O.
Muestra - - 200 ul debiendo ser además despreciable la contribución del agua
en dicho Blanco. Para ello se recomienda el uso de agua
Reactivo A 1 ml 1 ml 1 ml de calidad comprobada.
Mezclar. Leer la absorbancia del tubo D (Blanco de Suero - El Reactivo A puede adquirir un leve color amarillo con el
BS) en espectrofotómetro a 600 nm llevando a cero el transcurso del tiempo que no afecta su reactividad.
aparato con agua. Luego agregar: - Limpieza del material: todo el material de laboratorio
empleado debe estar libre de hierro, para ello debe ser
sumergido durante al menos durante 6 horas en HCl 10%,
Mezclar inmediatamente. Volver a leer cada tubo a los 5 eliminando la acidez mediante numerosos lavados con
minutos, llevando el aparato a cero con agua. agua libre de hierro. Todo el material debe ser empleado
exclusivamente para la determinación de hierro.
ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL PERFORMANCE

Los tubos deben ser leídos entre 5 y 30 minutos luego de a) Reproducibilidad: procesando de acuerdo al documento
completados los pasos del procedimiento. EP15-A del CLSI (ex-NCCLS), se obtuvo lo siguiente:
CALCULO DE LOS RESULTADOS Nivel D.S. C.V.
Corregir las lecturas de S y D, restándoles los Blancos 61,84 ug/dl ± 0,87 ug/dl 1,40 %
correspondientes: 116,89 ug/dl ± 0,46 ug/dl 0,39 %
S - B = S corregida 236,31 ug/dl ± 0,72 ug/dl 0,31%
D - (B + BS) = D corregida Precisión total (n = 20)
Fe (ug/dl) = D corregida x f Nivel D.S. C.V.
100 ug/dl (Standard)* 61,82 ug/dl ± 0,88 ug/dl 1,42 %
donde: f= 116,89 ug/dl ± 1,30 ug/dl 1,11 %
S corregida 236,31 ug/dl ± 2,83 ug/dl 1,20 %
861272522 / 02 p. 2/9
b) Linealidad: la reacción es lineal hasta 1500 ug/dl en SÍMBOLOS
autoanalizadores y hasta 1000 ug/dl en técnica manual. Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
c) Límite de detección: la mínima concentración de hierro reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
detectable, utilizando el método de Fer-color AA líquida
es de 1 ug/dl. Este producto cumple con los requerimientos previstos
d) Límite de cuantificación: la mínima concentración de
hierro que se puede determinar cuantitativamente con pre-
cisión y exactitud aceptables con el método de Fer-color
AA líquida es de 4 ug/dl.
Para las instrucciones de programación debe consultarse el Contenido suficiente para <n> ensayos
X
Manual del Usuario del analizador en uso. Para la calibra-
ción debe emplearse Calibrador A plus de Wiener lab. de H Fecha de caducidad
acuerdo a los requerimientos del analizador.
PRESENTACION
120 ml: - 1 x 100 ml Reactivo A  No congelar
- 1 x 20 ml Standard F Riesgo biológico
(Cód. 1492360)
- 2 x 10 ml Reactivo B Cont. Contenido
(Cód. 1009285)
g Número de lote
- 2 x 10 ml Reactivo B Elaborado por:

(Cód. 1009336)
M
120 ml: - 2 x 50 ml Reactivo A Nocivo
(Cód. 1009613)
BIBLIOGRAFIA Irritante
- I.C.S.H. - Am. J. Clin. Path. 56/4:543-545 (1971).
- Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests", i Consultar instrucciones de uso
Calibr. Calibrador
- Burtis,C.A.; Ashwood, E.R. - “Tietz Fundamentals of Clinical
Chemistry”, 5ª edición, 2001.
- Imbert-Bismut et al, - Clin. Chem., 47/11: 2059-2061, 2001.
b Control
- Tietz, N.W.; Rinker, A.D.; Morrison, S.R. - Clin. Chem. b Control Positivo
40/4:546-551, 1994.
- Artiss, J.D. et al. - Clin. Biochem. 14/6:311-315, 1981. c Control Negativo
- Smith, F.E. - Clin. Biochem. 17:306-310, 1984.
- NTP, National Toxicology Program, Departmen of Health h Número de catálogo
and Human Service, Report of Carcinogens, 2005.
NCCLS) - Protocols EP15-A, 2001 / EP6-A, 2003 / EP17-A,
2004.

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
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Fer-color
AA
C Método colorimétrico directo para la determinación de
hierro en suero o plasma
SIGNIFICACION CLINICA REACTIVOS NO PROVISTOS

El hierro se distribuye en el organismo de diferentes ma- - Calibrador A plus de Wiener lab.
neras, incluyendo hemoglobina, hierro tisular y mioglobina. - Agua bidestilada.
El transporte de hierro de un órgano a otro se realiza
mediante una proteína transportadora llamada apotransfe- INSTRUCCIONES PARA SU USO
rrina. El complejo que forma con el hierro se conoce como Reactivo C: listo para usar.
transferrina. Standard: listo para usar.
La ferritina, localizada en casi todas las células del cuerpo, Reactivo de Trabajo: transferir al vial de Reactivo B la
constituye una reserva de hierro disponible para la forma- cantidad de Reactivo A indicada en el rótulo. Colocar fecha
ción de la hemoglobina y otras proteínas que contienen el de preparación.
grupo hemo. La absorción de hierro ocurre principalmente
en el duodeno. Tanto la ferritina como la transferrina están PRECAUCIONES
presentes en las células de la mucosa intestinal y juntas Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
regulan la absorción de hierro. Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
Los mayores desórdenes del metabolismo de hierro se re- de trabajo en el laboratorio de química clínica.
lacionan con su deficiencia o exceso, sin embargo, se han Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
observado alteraciones en muchas otras enfermedades, in- acuerdo a la normativa local vigente.
cluyendo anemia, enfermedades cardiovasculares, hepatitis
crónica, enfermedades renales e infecciones. ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
La anemia por pérdida de hierro representa uno de los tras- ALMACENAMIENTO
tornos orgánicos más frecuentes, especialmente en niños, Reactivos Provistos: son estables a temperatura ambiente
mujeres jóvenes, embarazadas y ancianos. También las (< 25oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
úlceras gástricas o duodenales y carcinomas de estómago, Reactivo de Trabajo: es estable durante 3 meses a partir
constituyen causas de anemia ferropénica. de la fecha de su preparación conservado en refrigerador
Por el contrario, el exceso de hierro se asocia con otros (2-10oC) o 10 días a temperatura ambiente (18-25oC).
desórdenes, como hemosiderosis, hemocromatosis y anemia
sideroblástica. INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
REACTIVOS
FUNDAMENTOS DEL METODO Variaciones en las lecturas de Blancos de Reactivos y/o
El hierro sérico se libera de la unión con su proteína trans- Standard, indican contaminaciones ocasionales (agua, ma-
portadora específica, la transferrina, en buffer acetato terial de vidrio, etc.). Un aumento en el valor de los Blancos
pH 4,5 y en presencia de un reductor, el ácido ascórbico. indicará una contaminación con hierro.
Posteriormente reacciona con el reactivo de color, piridil bis-
fenil triazina sulfonato (ferrozina) dando un complejo color MUESTRA
magenta, que se mide a 560 nm. Suero o plasma
a) Recolección: el paciente debe estar en ayunas y las
REACTIVOS PROVISTOS extracciones deben practicarse siempre a la misma hora
A. Reactivo A: solución de acetato 150 mmol/l para pH 4,5, (preferentemente de mañana) ya que las fluctuaciones
conteniendo guanidina. fisiológicas son significativas durante el día.
B. Reactivo B: ácido ascórbico. b) Aditivos: en caso de utilizar plasma como muestra debe
C. Reactivo C: solución estabilizada de ferrozina. usarse heparina como anticoagulante.
S. Standard: solución de iones Fe (III) equivalente a 100 ug/dl. c) Sustancias interferentes conocidas: no se observa
interferencia por hemoglobina hasta 90 mg/dl, bilirrubina
Concentraciones finales hasta 15 mg/dl y heparina hasta 50 UI/ml.
Acetato.................................................. 150 mmol/l, pH 4,5 Muestras lipémicas pueden conducir a resultados erróneos.
Ferrozina............................................................. 0,2 mmol/l Niveles de triglicéridos de 3,72 g/l producen interferen-
Acido ascórbico.................................................... 0,03 mol/l cias.
Guanidina............................................................... 4,0 mol/l Si bien hemólisis ligeras no interfieren con este método, el
870460000 / 02 p. 1/6
International Committee for Standardization in Hematology (Standatrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas
(ICSH) recomienda el uso de suero libre de hemólisis. de hierro, con cada determinación.
drogas en el presente método. VALORES TEORICOS
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: el Hombres: 65 a 175 ug/dl (11,6-31,3 umol/l)
suero o plasma heparinizado pueden conservarse hasta una Mujeres: 50 a 170 ug/dl (9-30,4 umol/l)
semana en refrigerador (2-10oC).
MATERIAL REQUERIDO (no provisto) En un grupo de 20 mujeres y 20 varones sanos, con edades
- Espectrofotómetro o fotocolorímetro. oscilando entre los 18 y 51 años, se halló un rango de 55 a
- Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados. 175 ug/dl* con los siguientes promedios:
Hombres: 114,6 ug/dl (20,5 umol/l)
Mujeres: 103,3 ug/dl (18,5 umol/l)
- Longitud de onda: 560 nm en espectrofotómetro o 540-560 nm *Valores de referencia extraidos de archivos de Wiener lab.
en fotocolorímetro con filtro verde. Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios
- Temperatura de reacción: temperatura ambiente valores de referencia.
- Volumen de muestra: 200 ul CONVERSION DE UNIDADES AL SISTEMA SI
- Volumen total de reacción: 1,4 ml Hierro (ug/dl) x 0,179 = Hierro (umol/l)

PROCEDIMIENTO - Valores de Blanco aceptables: la determinación de oligo-
En tres tubos marcados B (Blanco de Reactivos), S elementos requiere la prevención de posibles contamina-
(Standard) y D (Desconocido) colocar: ciones del agua y los reactivos. El Blanco de Reactivos,
ejecutado de acuerdo al Manual de Instrucciones, no debe
B S D
ser superior a 0,150 D.O. debiendo ser además, despre-
Agua bidestilada 200 ul - - ciable la contribución del agua en dicho Blanco. Para ello
Standard - 200 ul - se recomienda el uso de agua de calidad comprobada
(conductividad menor a 0,02 uOhms).
Muestra - - 200 ul - Limpieza del material: todo el material de laboratorio em-
Reactivo de Trabajo 1 ml 1 ml 1 ml pleado debe estar libre de hierro, para lo cual debe ser
sumergido durante 6 horas en HCl p.a. 10-15%, eliminando
Mezclar. Leer la absorbancia del tubo D (Blanco de Suero
la acidez con numerosos lavados con agua libre de hierro.
BS) en espectrofotómetro a 560/580 nm o en fotocolo-
Secar el material preferentemente a no más de 80oC en
rímetro con filtro verde (540/560 nm) llevando a cero el cestillas de acero inoxidable o revestidos con plástico.
aparato con agua. Luego agregar: Todo el material debe ser empleado exclusivamente para
Reactivo C 200 ul 200 ul 200 ul la determinación de hierro.
Mezclar inmediatamente. Volver a leer cada tubo a los 5
minutos, llevando el aparato a cero con agua. PERFORMANCE
muestras en un mismo día, se obtuvieron los siguientes
ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL datos:
Los tubos deben ser leídos entre 5 y 60 minutos luego de Nivel D.S. C.V.
completados los pasos del procedimiento. 146,5 ug/dl ± 1,93 ug/dl 1,32 %
324,6 ug/dl ± 1,76 ug/dl 0,54 %
Corregir las lecturas de S y D, restándoles los Blancos Procesando la misma muestra en días diferentes, se obtu-
correspondientes: vieron los siguientes resultados:
S - B = S corregida Nivel D.S. C.V.
D - (B + BS) = D corregida 142,8 ug/dl ± 2,50 ug/dl 1,75 %
Fe (ug/dl) = D corregida x f 314,0 ug/dl ± 3,93 ug/dl 1,25 %
100 ug/dl
donde: f = b) Recuperación: agregando cantidades conocidas de Fe
S corregida (II) a alícuotas de un mismo suero, se recuperó entre 90 y
103%.
METODO DE CONTROL DE CALIDAD c) Linealidad: la reacción es lineal hasta 1000 ug/dl.
Procesar 2 niveles de un material de control de calidad d) Límite de detección: 6,05 ug/dl.
870460000 / 02 p. 2/6
Manual del Usuario del Analizador en uso. Para la calibra- reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
acuerdo a los requerimientos del analizador. Este producto cumple con los requerimientos previstos
PRESENTACION
- 5 x 20 ml (Cód. 1492003).
BIBLIOGRAFIA
- Dixon, K. - Ann. Clin. Biochem. 10/5:127 (1973).
- I.C.S.H. - Am. J. Clin. Path. 56/4:543 (1971). Contenido suficiente para <n> ensayos
- Zak, B.; Baginski, E.S.; Epstein, E. y Wiener, L.M. - Clin.
X
Toxicol. 4/4:621 (1971). H Fecha de caducidad
- Rojkín, M.L.; Olguín de Mariani, M.C.; Drappo, G.A. y Alba-
rracín, A. - III Congreso Argentino de Bioquímica - Buenos l Límite de temperatura (conservar a)
Aires (1975).
- Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",  No congelar
F Riesgo biológico
Cont. Contenido
g Número de lote
Elaborado por:
M
Nocivo
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870460000 / 02 p. 3/6 UR130115
Fer-color
Para la determinación de hierro sérico
SIGNIFICACION CLINICA Reactivo A+B: transferir el contenido de la ampolla del

El hierro se distribuye en el organismo de diferentes mane- Reactivo B al Reactivo A, vertiéndolo directamente en el
ras, incluyendo hemoglobina, hierro tisular y mioglobina. El frasco de Reactivo A y mezclando por inversión. Anotar en
transporte de hierro de un órgano a otro se realiza mediante el rótulo la fecha de preparación.
una proteína transportadora llamada apotransferrina. El com-
plejo que forma con el hierro se conoce como transferrina. PRECAUCIONES
La ferritina, localizada en casi todas las células del cuerpo, Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
constituye una reserva de hierro disponible para la forma- El Reactico B es corrosivo. R36/38: irrita los ojos y la piel.
ción de la hemoglobina y otras proteínas que contienen el S24/25: evitar el contacto con los ojos y la piel. S26/28: en
grupo hemo. La absorción de hierro ocurre principalmente caso de contacto con la piel y los ojos, lávense inmediata
en el duodeno. Tanto la ferritina como la transferrina están y abundantemente con agua y acúdase a un médico. S37:
presentes en las células de la mucosa intestinal y juntas usar guantes adecuados.
regulan la absorción de hierro.
Los mayores desórdenes del metabolismo de hierro se re- ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
lacionan con su deficiencia o exceso, sin embargo, se han ALMACENAMIENTO
observado alteraciones en muchas otras enfermedades, in- Reactivos Provistos: son estables a temperatura ambiente
cluyendo anemia, enfermedades cardiovasculares, hepatitis hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
crónica, enfermedades renales e infecciones. Reactivo A+B: en refrigerador (2-10oC) es estable durante
La anemia por pérdida de hierro representa uno de los tras- un año a partir de la fecha de su preparación. Antes de usar
tornos orgánicos más frecuentes, especialmente en niños, llevar a 18-30oC.
mujeres jóvenes, embarazadas y ancianos. También las
úlceras gástricas o duodenales y carcinomas de estómago, INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
constituyen causas de anemia ferropénica. REACTIVOS
Por el contrario, el exceso de hierro se asocia con otros Variaciones en las lecturas de Blancos de Reactivos y/o
desórdenes, como hemosiderosis, hemocromatosis y ane- Standard, indican contaminaciones ocasionales (agua,
mia sideroblástica. material de vidrio, etc.).
Un aumento en el valor de los Blancos indicará una conta-
FUNDAMENTOS DEL METODO minación con hierro.
El hierro sérico se libera de su unión con su proteína trans-
portadora específica, la transferrina, en buffer succinato de MUESTRA
pH 3,7 y en presencia de un reductor, el ácido mercaptoacé- Suero
tico. Posteriormente reacciona con el reactivo de color, piridil a) Recolección: debe usarse únicamente suero ya que los
bis-fenil triazina sulfonato (PBTS) dando un complejo color anticoagulantes interfieren en la reacción. El paciente debe
magenta, que se mide a 560 nm. estar en ayunas y las extracciones deben practicarse siem-
pre a la misma hora (preferentemente de mañana) ya que
REACTIVOS PROVISTOS las fluctuaciones fisiológicas son significativas durante el día.
A. Reactivo A: buffer succinato 0,25 mol/l para pH 3,7. b) Aditivos: no se requieren.
B. Reactivo B: ampolla autorrompible conteniendo ácido c) Sustancias interferentes conocidas: no se observa
mercaptoacético al 70 % (reductor). interferencia por hemoglobina hasta 70 mg/dl, hiperlipemia,
C. Reactivo C: solución estabilizada de piridil bis-fenil tria- iones Cu hasta 200 ug/dl y bilirrubina hasta 400 mg/dl.
zina sulfonato (PBTS) 50 mmol/l. Si bien hemólisis ligeras no interfieren con este método, el
S. Standard: solución de iones Fe (III) equivalente a 100 ug/dl. International Committee for Standardization in Hematology
(ICSH) recomienda el uso de suero libre de hemólisis.
Agua destilada. drogas en el presente método.
INSTRUCCIONES PARA SU USO suero puede conservarse hasta una semana en refrigerador
Reactivo C y Standard: listos para usar. (2-10oC).
870450022 / 00 p. 1/9
MATERIAL REQUERIDO (no provisto) 175 ug/dl* con los siguientes promedios:
- Espectrofotómetro o fotocolorímetro. Hombres: 114,6 ug/dl (20,5 umol/l)
- Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados. Mujeres: 103,3 ug/dl (18,5 umol/l)
*Valores de referencia extraidos de archivos de Wiener lab.
- Longitud de onda: 560 nm en espectrofotómetro o 540-560 nm
en fotocolorímetro con filtro verde.
- Temperatura de reacción: temperatura ambiente
Hierro (ug/dl) x 0,179 = Hierro (umol/l)
- Volumen total de reacción: 2,5 ml
- Valores de Blanco aceptables: la determinación de oli-
goelementos implica prevenir celosamente las posibles
contaminaciones del agua y los reactivos. El Blanco de
PROCEDIMIENTO
Reactivos, ejecutado de acuerdo al Manual de Instrucciones, no
En tres tubos o cubetas marcados B (Blanco de Reacti- debe ser superior a 0,150 D.O. debiendo ser además, despre-
vos), S (Standard) y D (Desconocido) colocar: ciable la contribución del agua en dicho Blanco. Para controlar
B S D esto último, se recomienda leer un Blanco de Reactivos (2 ml
de Reactivo A+B + 0,5 ml de agua + 1 gota de Reactivo C)
Agua bidestilada 500 ul - -
contra un Blanco de Reactivo A (2,5 ml de Reactivo A+B + 1
Standard - 500 ul - gota de Reactivo C): la lectura del Blanco de Reactivos debe
Suero - - 500 ul ser menor o igual que la del Blanco de Reactivo A. Caso
contrario, reemplazar el agua destilada en uso por una de
Reactivo A+B 2 ml 2 ml 2 ml calidad comprobada (conductividad menor de 0,02 uOhms).
Mezclar. Leer la absorbancia del tubo D (Blanco de Suero Por otra parte, si la lectura del Blanco de Reactivo A es
BS) en espectrofotómetro a 560 nm o en fotocolorímetro superior a 0,150 D.O. es indicio de contaminación grosera
con filtro verde (540-560 nm) llevando a cero el aparato de los reactivos, los cuales deberán desecharse. Efectuar
con agua. Agregar, manteniendo el frasco gotero en po- este control periódicamente.
sición vertical, 1 gota de Reactivo C a cada tubo. Mezclar - Mezclado: los tubos pueden ser mezclados con la varilla o
inmediatamente cada tubo y leer todos los tubos a 560 nm por agitación suave. No invertir para evitar contaminaciones.
entre 6 y 20 minutos, llevando el aparato a cero con agua. - Limpieza del material: todo el material de laboratorio em-
pleado debe estar libre de hierro, para lo cual debe ser
sumergido durante 6 horas en HCl p.a. 10-15%, eliminando
ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL la acidez con numerosos lavados con agua libre de hierro.
Los tubos deben ser leídos entre 6 y 20 minutos luego de Secar el material preferentemente a no más de 80°C en
completados los pasos del procedimiento. cestillas de acero inoxidable o revestidos con plásticos.
Todo el material debe ser empleado exclusivamente para
CALCULO DE LOS RESULTADOS la determinación de hierro.
Corregir las lecturas de S y D, restándoles los Blancos
correspondientes: PERFORMANCE
a) Reproducibilidad: procesando la misma muestra en 10
S - B = S corregida
días diferentes, se obtuvo un coeficiente de variación del
D - (B + BS) = D corregida 4,2%, para un nivel de Fe sérico de 129 ug/dl.
Fe (ug/dl) = D corregida x f b) Recuperación: agregando cantidades conocidas de Fe (II)
100 ug/dl a alícuotas de un mismo suero, se recuperó entre 90 y 103%.
donde: f = c) Linealidad: la reacción es lineal hasta 500 ug/dl.
S corregida
Procesar 2 niveles de un material de control de calidad - 100 determinaciones (Cód. 1492001).
de hierro, con cada determinación. BIBLIOGRAFIA
VALORES TEORICOS - I.C.S.H. - Am. J. Clin. Path. 56/4:543 (1971).
Hombres: 65 a 175 ug/dl (11,6-31,3 umol/l) - Zak, B.; Baginski, E.S.; Epstein, E. y Wiener, L.M.- Clin.
Mujeres: 50 a 170 ug/dl (9-30,4 umol/l) Toxicol. 4/4:621 (1971).
- Rojkín, M. L.; Olguín de Mariani, M. C.; Drappo, G. A. y Albarracín,
VALORES DE REFERENCIA A. - III Congreso Argentino de Bioquímica - Buenos Aires (1975).
En un grupo de 20 mujeres y 20 varones sanos, con edades - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
oscilando entre los 18 y 51 años, se halló un rango de 55 a AACC Press, 4th ed., 2001.
870450022 / 00 p. 2/9
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870450022 / 00 p. 3/9 UR140722
Fer-color
Transferrina
Método colorimétrico para la determinación de la Capacidad
Total de Fijación de Hierro (TIBC) del suero

En el organismo humano, el hierro circula como Fe (III) unido ALMACENAMIENTO
a una proteína transportadora específica: la transferrina o side- Los Reactivos Provistos son estables a temperatura am-
rofilina. Su función es captar el hierro de los sitios de absorción biente hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
(mucosa intestinal) o depósito (sistema retículo endotelial) y Reactivo B: el frasco debe volver a taparse inmediatamente
llevarlo a los órganos hematopoyéticos donde es utilizado. después de retirar las porciones necesarias para el momento.
En el individuo normal sólo la tercera parte de la transferrina
se satura con hierro, estando el resto libre para unir y vehi- INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
culizar cualquier eventual aporte. REACTIVOS
La actividad fisiológica de la transferrina se puede determinar efi- Ver el manual de instrucciones de Fer-color o Fer-color
cazmente midiendo la capacidad total de fijación de hierro (TIBC). AA de Wiener lab.
La TIBC se encuentra aumentada en anemias post-hemorrá-
gicas, y ferropénicas en general, en insuficiencias hepáticas MUESTRA
y fisiológicamente en los últimos meses del embarazo. Ver el manual de instrucciones de Fer-color o Fer-color
Disminuye en cambio en la hemocromatosis, en ciertas AA de Wiener lab.
anemias con disproteinemia (infecciosas, neoplásicas, nefro-
páticas, etc.) en las hepatopatías crónicas, y en las grandes MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
pérdidas proteicas del síndrome nefrótico. - Ver el manual de instrucciones de Fer-color o Fer-color
AA de Wiener lab.
FUNDAMENTOS DEL METODO - Tubos de Kahn.
La transferrina o proteína transportadora específica del
hierro, se determina por su actividad fisiológica de captar CONDICIONES DE REACCION
Fe (III) a pH mayor que 7,2 donde la transferrina se satura Ver el manual de instrucciones de Fer-color o Fer-color
en presencia de Fe (III) en exceso. El remanente de Fe AA de Wiener lab.
(III) no ligado se elimina totalmente por coprecipitación con
carbonato de magnesio.
El hierro unido a la transferrina se libera y determina colo- PROCEDIMIENTO
rimétricamente según la técnica de Fer-color o Fer-color a) Saturación de la transferrina: en un tubo de Kahn
AA. La cantidad de Transferrina se expresa como los mi- colocar 500 ul de suero y 500 ul de Reactivo A. Mezclar y
crogramos de Fe (III) con que está saturada. dejar 5 minutos a 37oC. Con el dosificador provisto agregar
el contenido de una medida al ras de Reactivo B. Tapar
REACTIVOS PROVISTOS y agitar 5 minutos a temperatura ambiente. La agitación
A. Reactivo A: solución estabilizada de Fe (III). deberá ser vigorosa y en sentido longitudinal. Centrifugar
B. Reactivo B: carbonato de magnesio granulado. 10-15 minutos a 3.000-4.000 r.p.m. hasta obtener sobre-
nadante límpido o con la opalescencia propia del suero.
REACTIVOS NO PROVISTOS b) Colorimetría: seguir el procedimiento indicado en el
- Fer-color o Fer-color AA de Wiener lab. manual de instrucciones de Fer-color o Fer-color AA.
- Agua destilada.
INSTRUCCIONES PARA SU USO ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL

Reactivos Provistos: listos para usar. Ver el manual de instrucciones de Fer-color o Fer-color
AA de Wiener lab.
PRECAUCIONES
Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro". CALCULO DE LOS RESULTADOS
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales Corregir las lecturas y efectuar los cálculos de la misma ma-
de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos. nera que en la determinación de hierro sérico, multiplicando
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de por dos el resultado final, por la dilución del suero. Habitual-
acuerdo a la normativa local vigente. mente se realiza la determinación de hierro sérico juntamente
870470022 / 01 p. 1/6
con la de transferrina. En ese caso se informan tres valores: SÍMBOLOS
Hierro Sérico, Transferrina y Porcentaje de Saturación de la Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
Transferrina, que se calcula de la siguiente manera: reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
Hierro Sérico (ug/dl)
Saturación % = x 100 Este producto cumple con los requerimientos previstos
Transferrina (ug/dl)
Si se desea efectuar simultáneamente la determinación de
hierro sérico para el cálculo del Porcentaje de Saturación, co-

menzar con la Saturación de la Transferrina 30 minutos antes.
La literatura registra los siguientes rangos de valores para Trans- X Contenido suficiente para <n> ensayos
ferrina y Saturación de la Transferrina en personas normales:
Transferrina (TIBC): 250-400 ug/dl. H Fecha de caducidad
Saturación de la Transferrina: 20-55%.
Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios l Límite de temperatura (conservar a)
valores de referencia.  No congelar
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO F Riesgo biológico

Ver el manual de instrucciones de Fer-color o Fer-color
AA de Wiener lab. Volumen después de la reconstitución
La agitación insuficiente producirá valores falsamente au-
mentados de Transferrina. Cont. Contenido
La concentración de Fe (III) del Reactivo A es 10 veces
mayor que la del Standard. Por lo tanto, no debe medirse g Número de lote
este reactivo con la misma micropipeta que se utilice para el
Elaborado por:
Standard y los Desconocidos. Caso contrario se introducen M
fuertes contaminaciones que invalidan los resultados. Ade-
Nocivo
más, como la medida exacta de esta solución no es crítica,
puede usarse para tal fin una pipeta de 1 ml.
PERFORMANCE
Irritante
muestras en un mismo día se obtuvieron los siguientes datos:
Nivel D.S. C.V.
280 ug/dl ± 23,2 ug/dl 8,29 % Calibr. Calibrador
560 ug/dl ± 28,9 ug/dl 5,16 %
b) Linealidad: la reacción es lineal hasta 500 ug/dl.
b Control
c) Límite de detección: depende del espectrofotómetro b Control Positivo

empleado y de la longitud de onda. De acuerdo con la sen-
sibilidad requerida para un ∆A mínimo de 0,001, el menor c Control Negativo
cambio de concentración detectable será de 1 ug/dl.
PRESENTACION
Reactivos auxiliares para 25 determinaciones de la Capaci-
dad Total de Fijación de Hierro (Transferrina) (Cód. 1492002):
- Reactivo A: 1 x 20 ml
- Reactivo B: 1 x 25 (c.s.p 25 dosis)
BIBLIOGRAFIA
- I.C.S.H. - Am. J. Clin. Path. 56/4:543 (1971).
- Zak, B.; Baginski, E.S.; Epstein, E. y Wiener, L.M.- Clin.
Toxicol. 4/4:621 (1971).
Riobamba 2944
- Rojkín, M.; Olguín de Mariani, M.; Drappo, G. y Albarracín, A. 2000 - Rosario - Argentina
- III Congreso Argentino de Bioquímica - Buenos Aires (1975).
Bioquímica
Wiener lab.
AACC Press, 4th ed., 2001. Disp. Nº: 1287/77-220/00 2000 Rosario - Argentina
870470022 / 01 p. 2/6 UR110630
LINEA TURBITEST AA
Ferritin
Calibrator
C Para la calibración de la determinación de ferritina por
métodos inmunoturbidimétricos
Ferritin Calibrator Turbitest AA está diseñado para ser Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
usado en la calibración del kit Ferritin Turbitest AA de reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
Wiener lab. Consultar el valor asignado para cada calibrador Este producto cumple con los requerimientos previstos
en el rótulo correspondiente.
REACTIVOS PROVISTOS
Calibrador 1, 2, 3 y 4: suero humano conteniendo distintos P Representante autorizado en la Comunidad Europea
niveles de ferritina con azida de sodio 0,95 g/l.
PRECAUCIONES
Este calibrador ha sido preparado a partir de material no l Límite de temperatura (conservar a)
reactivo para HBsAg, HCV y HIV. Sin embargo, el calibrador  No congelar

y todas las muestras deben manejarse como si se tratara
de material infectivo. Riesgo biológico
F
de trabajo en el laboratorio de química clínica. Volumen después de la reconstitución
acuerdo a la normativa local vigente. Cont. Contenido
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE g Número de lote

ALMACENAMIENTO
Elaborado por:
Reactivos Provistos: estables a 2-10oC hasta la fecha de M
vencimiento indicada en el envase. No congelar. Nocivo
INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS Corrosivo / Cáustico

REACTIVOS
Los reactivos deben ser límpidos. Descartar en caso de
Irritante
presentar turbidez.

PRESENTACION
4 x 1 ml (Cód. 1999742) Calibr. Calibrador
BIBLIOGRAFIA
- Tietz Textbook of Clinical Chemistry; Burtis, C.; Ashwood,
b Control
E. (5º Edition) WB Saunders, 2001. b Control Positivo

- Young, D.S. "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
AACC Press, 5th ed., 2000. c Control Negativo
- Baynes R.D., Cook J.D. “Current issues in iron deficiency”;
Curr. Opin. Hematol.3:145-9; 1996. h Número de catálogo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
867019102 / 01 p. 1/3 UR140917
LINEA TURBITEST AA
Ferritin
Control
Lote: 1502160520 (Exp.: 2016/08)
C Para control de precisión en la determinación de ferritina
Nivel 1: 160520 (Exp.: 2016/08) por métodos inmunoturbidimétricos
Nivel 2: 160520 (Exp.: 2016/08)
APLICACIONES BIBLIOGRAFIA
Ferritin Control Turbitest AA está diseñado para el control - Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories.
de precisión del kit Ferritin Turbitest AA de Wiener lab. CDC/NIH manual, 5th edition, 2007.
Consultar la tabla de valores asignados para los componen-
tes, debido a que los mismos son lote específicos.
VALORES ASIGNADOS
REACTIVOS PROVISTOS Ferritin Valor medio Rango
Control nivel 1: suero humano liofilizado conteniendo valo- (ng/ml) (ng/ml) (ng/ml)
res de ferritina dentro del rango normal, en solución salina Nivel 1 135 70 200
tamponada con los correspondientes conservantes.
Control nivel 2: suero humano liofilizado conteniendo Nivel 2 450 300 600
valores de ferritina dentro del rango patológico, en solución
salina tamponada con los correspondientes conservantes.

Para reconstituir los controles, agregar al contenido la canti-
dad de agua desmineralizada indicada en la etiqueta del vial.
Tapar y mezclar suavemente. Dejar reposar durante 5 mi-
nutos. Agitar antes del uso.
PRECAUCIONES
reactivo para HBsAg, HCV y HIV. Los controles y todas las
muestras deben manipularse como si se tratara de material
infectivo. Utilizar los reactivos guardando las precauciones
habituales de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
ALMACENAMIENTO
Los controles son estables de 2-10oC hasta la fecha de
vencimiento indicada en el envase. Una vez reconstituidos
son estables durante 15 días de 2-10oC. Los controles pueden
alicuotarse y almacenarse congelados (-20oC) durante 5
meses. Congelar y descongelar sólo una vez.
PROCEDIMIENTO
Los Controles se deben usar de la misma manera que una
muestra desconocida, de acuerdo a las instrucciones que
acompañan el kit de Ferritin Turbitest AA de Wiener lab.
PRESENTACION
- 2 x 3 ml (Cód. 1999753)
867019104 / 00 p. 1/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
UR150225
867019104 / 00 p. 2/6
LINEA TURBITEST AA
Ferritin
Control
Lote: 1507170300
C Para control de precisión en la determinación de ferritina
Nivel 1: 170301 por métodos inmunoturbidimétricos
Nivel 2: 170300
Ferritin Control Turbitest AA está diseñado para el control - Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories.
de precisión del kit Ferritin Turbitest AA de Wiener lab. CDC/NIH manual, 5th edition, 2007.
Consultar la tabla de valores asignados para los componen- Rango: valor medio ± 48%
VALORES ASIGNADOS
REACTIVOS PROVISTOS Ferritin Valor medio Rango
Control nivel 1: suero humano liofilizado conteniendo valo- (ng/ml) (ng/ml) (ng/ml)
res de ferritina dentro del rango normal, en solución salina Nivel 1 112 70 200
tamponada con los correspondientes conservantes.
Control nivel 2: suero humano liofilizado conteniendo Nivel 2 419 300 600
valores de ferritina dentro del rango patológico, en solución
salina tamponada con los correspondientes conservantes.

Para reconstituir los controles, agregar al contenido la canti-
dad de agua desmineralizada indicada en la etiqueta del vial.
Tapar y mezclar suavemente. Dejar reposar durante 5 mi-
nutos. Agitar antes del uso.
PRECAUCIONES
reactivo para HBsAg, HCV y HIV. Los controles y todas las
muestras deben manipularse como si se tratara de material
infectivo. Utilizar los reactivos guardando las precauciones
habituales de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
ALMACENAMIENTO
Los controles son estables de 2-10oC hasta la fecha de
vencimiento indicada en el envase. Una vez reconstituidos
son estables durante 15 días de 2-10oC. Los controles pueden
alicuotarse y almacenarse congelados (-20oC) durante 5
meses. Congelar y descongelar sólo una vez.
PROCEDIMIENTO
Los Controles se deben usar de la misma manera que una
muestra desconocida, de acuerdo a las instrucciones que
acompañan el kit de Ferritin Turbitest AA de Wiener lab.
PRESENTACION
- 2 x 3 ml (Cód. 1999753)
867019104 / 01 p. 1/6
Símbolos
C
M Elaborado por:

Europea Nocivo

Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
UR150727
867019104 / 01 p. 2/6
LINEA TURBITEST AA
Ferritin
C Método inmunoturbidimétrico para la determinación de ferritina

La concentración plasmática de ferritina disminuye rápi- ALMACENAMIENTO
damente ante una deficiencia de hierro. Un aumento en la Los Reactivos Provistos son estables de 2-10ºC hasta la
concentración de ferritina sérica se produce por un gran fecha de vencimiento indicada en la caja. No congelar.
número de enfermedades crónicas. Estas enfermedades
incluyen infecciones crónicas, trastornos inflamatorios MUESTRA
crónicos como artritis reumatoide o enfermedad renal, Suero o plasma
enfermedad de Gaucher y numerosos tipos de tumores a) Recolección: obtener suero de la manera usual. Separar
malignos, especialmente linfomas, leucemias, cáncer de del coágulo lo más rápidamente posible. Centrifugar las
mama y neuroblastoma. También se produce un aumento de muestras que contienen precipitado antes de realizar el
la concentración plasmática de ferritina en la hepatitis viral ensayo.
o luego de lesiones hepáticas tóxicas como resultado de la b) Aditivos: si la muestra es plasma, utilizarse EDTA como
liberación de ferritina de las células dañadas del hígado. La anticoagulante.
concentración plasmática de ferritina también se incrementa c) Sustancias interferentes conocidas: no se observan
con el aumento de los depósitos de hierro, como se observa interferencias por bilirrubina hasta 20 mg/dl ni hemoglobina
en los pacientes con hemosiderosis o hemocromatosis. Ade- hasta 500 mg/dl. Se observa una interferencia máxima por
más del uso de ferritina como parámetro del metabolismo lipemia de hasta un 10 % con muestras de 1000 mg/dl de
del hierro, su determinación también ganó importancia como triglicéridos. Referirse a la bibliografía de Young para los
marcador tumoral para control y seguimiento de fármacos efectos de las drogas en el presente método.
terapéuticos. d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: utilizar
preferentemente suero fresco. Si la prueba no puede llevarse
FUNDAMENTOS DEL METODO a cabo en el día, el suero puede almacenarse durante 1
La ferritina presente en la muestra reacciona con las par- semana a 2-10ºC. Si se almacena durante un período más
tículas de látex sensibilizadas con anticuerpos anti-ferritina prolongado, la muestra debe ser congelada.
humana produciendo aglutinación. La turbidez causada por
la aglutinación es proporcional a la concentración de ferritina MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
en la muestra y puede ser medida espectrofotométricamente. - Material volumétrico para medir los volúmenes indicados.
- Analizador automático.
REACTIVOS PROVISTOS
A. Reactivo A: buffer HEPES 100 mmol/l, pH 7,0. CALIBRACION
B. Reactivo B: partículas de látex recubiertas de anticuerpos Utilizar Ferritin Calibrator Turbitest AA de Wiener lab,
de conejo anti-ferritina humana en buffer HEPES 100 mmol/l, para la calibración. Las concentraciones del calibrador son
pH 7,0. variables lote a lote y se encuentran indicadas en la etiqueta
del reactivo.
REACTIVOS NO PROVISTOS Usar solución fisiológica (NaCl 0,9%) para el punto cero de
Ferritin Calibrator Turbitest AA de Wiener lab. la calibración (solución blanco).
Solución fisiológica (NaCl 9 g/l) Se recomienda que cada laboratorio determine la frecuencia
de la calibración dependiendo del analizador automático en
INSTRUCCIONES PARA SU USO uso así como del tipo y número de ensayos a realizar.
Reactivos Provistos: listos para usar. Una nueva curva de calibración debe hacerse al menos una
vez al mes o cuando sea utilizado un nuevo lote de reactivo.
PRECAUCIONES
Los reactivos son para uso diagnóstico “in vitro”. CONDICIONES DE REACCION
Los reactivos contienen azida sódica como conservante (0,95 g/l). Parámetros generales para analizadores automáticos:
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales Tipo de reacción: punto final
de trabajo en el laboratorio de análisis clínico. Long. de onda primaria: 575 nm
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de Temperatura: 37ºC
acuerdo a la normativa local vigente. Volumen de muestra: 30 ul
867019100 / 04 p. 1/9
Volumen de Reactivo A: 180 ul b) Límite de detección: 5 ng/ml.
Volumen de Reactivo B: 60 ul c) Linealidad: hasta 500 ng/ml
Incubación de Reactivo A: 250 seg d) Efecto prozona: no se observa efecto prozona hasta una
Incubación de Reactivo B: 30 seg concentración de ferritina hasta 4000 ng/ml
Calibración: 5 puntos
METODO DE CONTROL DE CALIDAD Para las instrucciones de programación consulte el manual
Ferritin Control, Control Inmunológico nivel 1 o Control del usuario del analizador en uso.
Inmunológico nivel 2 Turbitest AA de Wiener lab. Para la calibración, debe utilizarse Ferritin Calibrator Tur-
Los controles son procesados de la misma manera que las bitest AA de Wiener lab.
muestras.
PRESENTACION
VALORES DE REFERENCIA - 1 x 30 ml Reactivo A
Hombres: 30 - 300 ng/ml 1 x 10 ml Reactivo B
Mujeres < 50 años: 15 - 160 ng/ml (Cód. 1999747)
Mujeres > 50 años: 20 - 300 ng/ml
Niños y adolescentes: 15 - 120 ng/ml - 1 x 30 ml Reactivo A
En la literatura (Tietz, N.W.) se menciona el siguiente rango (Cód. 1009675)
de referencia:
Recién nacidos: 25 - 200 ng/ml BIBLIOGRAFIA
1 mes: 200 - 600 ng/ml - Tietz Textbook of Clinical Chemistry - Burtis, C.; Ashwood,
2-5 meses: 50 - 200 ng/ml E. (5º Edition) WB Saunders, 2001.
6 meses a 15 años: 7 - 140 ng/ml - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
Adultos: AACC Press, 5th ed., 2000.
Hombres: 20 - 250 ng/ml - Lee M.H., Means R.T. Jr. - “Extremely elevated serum
Mujeres: 10 - 120 ng/ml ferritin levels in a university hospital: associated diseases
Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios and clinical significance” - Am. J. Med. 98:566-71; 1995.
valores de referencia para su población. Para el diagnóstico, - Baynes R.D., Cook J.D. – “Current issues in iron deficien-
los resultados de ferritina deben siempre ensayarse en con- cy”- Curr. Opin. Hematol.3:145-9; 1996.
junto con la historia clínica del paciente, exámenes clínicos
y otros hallazgos.
Ferritina (pmol/l) = 2,247 x ferritina (ng/ml)

Las muestras que contengan niveles de ferritina por enci-
ma del rango de ensayo, deberán ser diluidas utilizando
NaCl 9 g/l (por ejemplo 1+1) y ensayadas nuevamente.
Corregir los resultados de acuerdo al factor de dilución (por
ejemplo 2).
PERFORMANCE
a) Precisión
Se evaluó de acuerdo al protocolo EP5-A del CLSI. En este
estudio se emplearon dos muestras con niveles diferentes
ensayadas con 2 corridas diarias por duplicados durante
20 días.
Media CVwr CVtotal
126,73 ng/ml 2,28% 2,11%
376,46 ng/ml 1,73% 1,99%
867019100 / 04 p. 2/9
Símbolos
C
M Elaborado por:

Europea Nocivo

Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
867019100 / 04 p. 3/9 UR160113
LINEA TURBITEST AA
Fibrinogen
C Calibrator
Para la calibración de la determinación de fibrinógeno
APLICACIONES
Fibrinogen Calibrator Turbitest AA está diseñado para ser PROCEDIMIENTO
utilizado en la calibración de la determinación de fibrinógeno El calibrador reconstituido se utiliza de la misma forma
utilizando Fibrinogen Turbitest AA de Wiener lab. que una muestra desconocida, de acuerdo a las instruc-
Consultar el valor asignado en el rótulo, debido a que el ciones que acompañan al equipo Fibrinogen Turbitest
mismo es lote específico. AA.
Dicho valor se encuentra estandarizado frente al standard
de la World Health Organization (NIBSC 98/612).
REACTIVO PROVISTO Fallas en la reconstitución del Calibrador pueden ser causa
Calibrador: pool de plasmas humanos normales obtenidos de resultados erróneos.
con citrato como anticoagulante, liofilizado. Ver LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO en el manual
de instrucciones de Fibrinogen Turbitest AA.
REACTIVO NO PROVISTO
Agua bidestilada o desionizada. PRESENTACION
- 1 x 0,5 ml (Cód. 1999725).
Reconstituir el vial con el volumen de agua bidestilada o BIBLIOGRAFIA
desionizada indicado en el rótulo. Tapar, dejar reposar 30 - Dati, F et al. - Proteins-Laboratory testing and clinical use,
minutos y luego mezclar suavemente (sin agitar) hasta ob- 2005.
tener disolución completa antes de su uso. - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests"
Se recomienda mantener el reactivo en el frasco original AACC Press, 5th ed., 2000.
luego de su reconstitución y durante su uso. - Mackie et al, Thromb. Haemost.; 87: 997-1005,2002.
- Kakafika et al, Current Pharmaceutical Design; 13, 1647-
PRECAUCIONES 1659,2007.
Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro". - Mosesson, Journal of Thrombosis and Haemostasis, 3:
El Calibrador ha sido preparado a partir de material no 1894-1904, 2005.
reactivo para HBsAg, HCV y HIV. Sin embargo, al igual que
las muestras de sangre, debe manejarse como si se tratara
de material infectivo.
ALMACENAMIENTO
de vencimiento indicada en la caja. No congelar.
Una vez reconstituido, el calibrador es estable 48 horas
refrigerado (2-10oC).

REACTIVOS
Mantener el frasco bien cerrado y en refrigerador después de
su uso. Evitar toda acción que conduzca a la contaminación
del Calibrador.
867008995 / 01 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:

Europea Nocivo

Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
867008995 / 01 p. 2/4 UR160314
LINEA TURBITEST AA
Fibrinogen
C Método inmunoturbidimétrico para la determinación de
fibrinógeno en plasma

El fibrinógeno es una glicoproteína presente en el plasma y ALMACENAMIENTO
en los gránulos plaquetarios α. Es el factor de la coagula- Reactivos Provistos: estables en refrigerador (2-10oC) has-
ción de mayor concentración plasmática. ta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No congelar.
Cuando se produce un trauma o injuria vascular, la trombi-
na formada escinde al fibrinógeno en monómeros de fibri- MUESTRA
na que polimerizan espontáneamente y luego son estabili- Plasma
zados dando lugar a la malla insoluble de fibrina. a) Recolección: obtener sangre cuidadosamente, evitando
Niveles bajos de fibrinógeno pueden encontrarse en desór- estasis o espuma, y colocarla en un tubo con anticoagulan-
denes hereditarios tales como hipofibrinogenemia, afibri- te en proporción 9 + 1 (ejemplo: 4,5 ml de sangre + 0,5 ml
nogenemia, disfibrinogenemia, y también en otras circuns- de anticoagulante). Mezclar suavemente. Centrifugar y se-
tancias como enfermedad hepática, coagulación intravas- parar el plasma antes de los 30 minutos. La extracción se
cular diseminada, síndromes fibrinolíticos, etc. debe efectuar con jeringas plásticas.
Niveles elevados pueden encontrarse en diabetes, enfer- b) Aditivos: para obtener el plasma puede emplearse Anti-
medad inflamatoria, etc. coagulante TP de Wiener lab. o citrato de sodio 3,8% o
Actualmente se ha reconocido que niveles altos de fibrinó- 3,2%.
c) Sustancias interferentes conocidas: no emplear mues-
geno aumentan el riesgo a padecer enfermedad cardiovas-
tras hemolizadas, lipémicas o contaminadas.
cular.
Las muestras que poseen precipitados deben ser centrifu-
gadas previo a su ensayo.
No se observan interferencias por hemoglobina hasta
El fibrinógeno reacciona con el anticuerpo específico for-
1000 mg/dl, triglicéridos hasta 1700 mg/dl, bilirrubina hasta
mando inmunocomplejos insolubles. La turbidez causada
30 mg/dl y factor reumatoideo hasta 500 UI/ml.
por estos inmunocomplejos es proporcional a la concentra-
ción de fibrinógeno en la muestra y puede ser medida es-
pectrofotométricamente. d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: La
REACTIVOS PROVISTOS es realizado en el día, la muestra puede ser conservada 48
A. Reactivo A: buffer fosfato, pH 7,4. horas a 2-10oC o por períodos más prolongados de tiempo
B. Reactivo B: anticuerpos policlonales anti-fibrinógeno hu- a -20oC.
mano (cabra) en buffer fosfato, pH 7,4.
REACTIVOS NO PROVISTOS - Espectrofotómetro
- Solución fisiológica. - Cubetas espectrofotométricas de caras paralelas
- Fibrinogen Calibrator Turbitest AA de Wiener lab. - Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indica-
dos
INSTRUCCIONES PARA SU USO - Tubos de Kahn o hemólisis
Reactivos Provistos: listos para usar. - Cronómetro

Los reactivos son para uso diagnóstico “in vitro”. - Longitud de onda: 340 nm
Todas las muestras de pacientes deben manipularse como - Temperatura de reacción: temperatura ambiente (25oC).
si fueran capaces de transmitir infección. El control de la temperatura no es crítico, pudiendo oscilar
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habitua- entre 22 y 30oC.
les de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos. - Tiempo de reacción: 15 minutos
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de - Volumen de muestra: 6 ul
acuerdo a la normativa local vigente. - Volumen final de reacción: 1806 ul
864105500 / 02 p. 1/6
Los volúmenes de muestra y reactivos pueden variarse pro- VALORES DE REFERENCIA
porcionalmente, sin que se alteren los factores de cálculo. 200 - 400 mg/dl
Se recomienda que cada laboratorio establezca sus pro-
pios valores de referencia.
PROCEDIMIENTO
CURVA DE CALIBRACION LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
Realizar en tubos de Kahn, las siguientes diluciones en Ver Sustancias Interferentes conocidas en MUESTRA.
solución fisiológica de Fibrinogen Calibrator Turbitest Para preservar la integridad de los reactivos debe evitarse
AA: 1:1, 1:2, 1:4, 1:8 y 1:16, empleando solución fisioló- todo tipo de contaminaciones, empleando para la medi-
gica como punto cero. ción únicamente micropipetas perfectamente limpias y se-
Fibrinogen Calibrador diluido 6 ul cas.
Reactivo A 1500 ul PERFORMANCE

a) Reproducibilidad: realizando replicados de muestras con
Homogeneizar y leer la absorbancia de cada dilución a
distintos niveles de fibrinógeno, se calculó la precisión in-
traensayo.
agregar:
Nivel D.S. C.V.
Reactivo B 300 ul 63,9 mg/dl ± 1,4 mg/dl 2,3%
Mezclar e incubar 15 minutos a temperatura ambiente. 254,6 mg/dl ± 9,1 mg/dl 3,6%
Leer la absorbancia a 340 nm (DO2), llevando a cero con 365,4 mg/dl ± 17,3 mg/dl 4,7%
agua destilada. b) Límite de detección: 13 mg/dl.
Calcular la diferencia de absorbancia (∆A = DO2 - DO1) c) Rango de medición: 13 - 500 mg/dl.
para cada dilución del Fibrinogen Calibrator, incluyendo d) Efecto prozona: no se evidencia efecto prozona hasta
el punto cero. 5200 mg/dl de fibrinógeno.
sorbancia (∆A) en función de la concentración en mg/dl PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS
del Fibrinogen Calibrator. Referirse a las adaptaciones específicas de cada analiza-
PROCEDIMIENTO PARA MUESTRAS dor.
Muestra 6 ul PRESENTACION
Reactivo A 1500 ul
Homogeneizar y leer la absorbancia de cada dilución a (Cód. 1009363)
agregar:
Mezclar e incubar 15 minutos a temperatura ambiente. BIBLIOGRAFIA

Leer la absorbancia a 340 nm (DO2), llevando a cero con - Dati, F et al. - Proteins-Laboratory testing and clinical use,
agua destilada. 2005.
Las muestras con absorbancias superiores a la del
Fibrinogen Calibrator deben ser diluidas con solución fisio-
lógica y procesadas nuevamente. Multiplicar el resultado

Se recomienda el uso de Plasma Control (normal - patoló-
gico) de Wiener lab.
muestras.
864105500 / 02 p. 2/6
Símbolos
C M
Este producto cumple con los requerimientos pre-
Elaborado por:
vistos por la Directiva Europea 98/79 CE de produc-
tos sanitarios para el diagnóstico "in vitro"
P
Xn
Representante autorizado en la Comunidad Euro-

pea Nocivo


Xi
Irritante
G Calibr. Calibrador
No congelar
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
864105500 / 02 p. 3/6 UR120927
Fibrinógeno
C Reactivo para la determinación de fibrinógeno plasmático
SIGNIFICACION CLINICA Reactivo B: listo para usar. Evitar su contaminación. Man-

El fibrinógeno es una glicoproteína que se halla presente en tener en su frasco original bien cerrado.
el plasma y en los gránulos plaquetarios α. Es el factor de
la coagulación que se encuentra en mayor concentración PRECAUCIONES
plasmática (200-500 mg/dl). Los Reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
Cuando se produce un trauma o injuria vascular, la trombina Este producto ha sido preparado a partir de plasmas huma-
formada escinde al fibrinógeno convirtiéndolo en monómeros nos, los cuales han sido ensayados utilizando los métodos
de fibrina que polimerizan espontáneamente y luego son bajo licencia de la FDA. No se ha encontrado reactividad
estabilizados dando lugar a la malla insoluble de fibrina. para HBsAg, HCV y HIV. Pero dado que ningún método de
Niveles bajos de fibrinógeno pueden encontrarse en desór- ensayo puede asegurar la ausencia absoluta de agentes
denes hereditarios tales como hipofibrinogenemia, afibrino- infecciosos, los plasmas referencia, controles y muestras de
genemia, disfibrinogenemia, y también en otras circunstan- pacientes deben manejarse como si se tratara de material
cias como enfermedad hepática, coagulación intravascular potencialmente infeccioso.
diseminada, síndromes fibrinolíticos, etc. Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
Niveles elevados pueden encontrarse en diabetes, enfer- de trabajo en el laboratorio de química clínica.
medad inflamatoria, etc. Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
Actualmente se ha reconocido que niveles altos de fibrinóge- acuerdo a la normativa local vigente.
no aumentan el riesgo a padecer enfermedad cardiovascular.
FUNDAMENTOS DEL METODO ALMACENAMIENTO
El ensayo se basa en el método de Clauss, designado Reactivos provistos: son estables en refrigerador (2-10oC)
como procedimiento de referencia por el NCCLS (National hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
Committee for Clinical Laboratory Standards). Reactivo A reconstituido: estable 5 días refrigerada (2-
Cuando un exceso de trombina se adiciona a un plasma di- 10oC) o 30 días congelada (-20oC). Para descongelarlo,
luido, el tiempo de coagulación es inversamente proporcional hacerlo rápidamente a 37oC. No volver a congelar. Llevar a
a la concentración de fibrinógeno plasmático. El tiempo de temperatura ambiente el reactivo antes de volver a usarlo.
coagulación obtenido se compara posteriormente con una Evitar calentamientos prolongados.
preparación de fibrinógeno estandarizada. Calibrador reconstituido: estable durante 8 horas refrige-
rado (2-10oC).
REACTIVOS PROVISTOS
A. Reactivo A: viales conteniendo trombina liofilizada. Una MUESTRA
vez reconstituida equivale aproximadamente a 100 Unidades Plasma
NIH de trombina/ml. a) Recolección: obtener sangre cuidadosamente, evitando
B. Reactivo B: solución de imidazol 0,05 M, pH 7,3. estasis o espuma, y colocarla en un tubo con anticoagulante
Calibrador: vial conteniendo plasma liofilizado. Ver el valor en proporción 9 + 1 (ejemplo: 4,5 ml de sangre + 0,5 ml de
de fibrinógeno asignado en el rótulo. anticoagulante). Mezclar suavemente. Centrifugar y separar
el plasma antes de los 30 minutos. La extracción se debe
REACTIVO NO PROVISTO efectuar con jeringas plásticas.
Agua bidestilada o desionizada. b) Aditivos: para obtener el plasma puede emplearse An-
ticoagulante TP de Wiener lab. o citrato de sodio 3,8% o
INSTRUCCIONES PARA SU USO 3,2%. No debe emplearse EDTA o heparina.
Reactivo A y Calibrador: quitar el precinto metálico y c) Sustancias interferentes conocidas:
abrir el vial retirando lentamente el tapón de goma para - Las muestras ictéricas, lipémicas o hemolizadas pueden
evitar pérdidas del material. Agregar el volumen de agua dar resultados erróneos.
bidestilada o desionizada indicado en el rótulo. Tapar, dejar - Niveles elevados de productos de degradación de fibrinó-
reposar 30 minutos y luego mezclar suavemente (sin agitar) geno o fibrina pueden alargar los tiempos de coagulación
hasta obtener disolución completa antes de su uso. Fechar. especialmente cuando los niveles de fibrinógeno son
Se recomienda mantener el Reactivo A en el frasco original menores a 150 mg/dl.
luego de su reconstitución y durante su uso. - Niveles terapéuticos de heparina no interfieren con el en-
870480022 / 01 p. 1/9
sayo, pero niveles elevados pueden conducir a resultados
falsamente disminuidos. El valor de fibrinógeno de cada dilución de la curva se
Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las determina multiplicando la concentración de fibrinógeno
drogas en el presente método. en el Calibrador por el factor de dilución. Por ejemplo, si
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la en el Calibrador se indica un nivel de fibrinógeno de 260 mg/dl,
muestra debe conservarse hasta el momento de su análisis entonces las diluciones 1:5, 1:10, 1:15, 1:20 y 1:30 tienen
en tubos plásticos para minimizar el efecto de activación por 520, 260, 173, 130 y 87 mg/dl respectivamente.
contacto que puede ocurrir con los tubos de vidrio. El plasma II- MUESTRAS DE PACIENTES Y CONTROLES
debe mantenerse en refrigerador (2-10oC) hasta el momento 1- Preparar diluciones 1:10 de los plasmas de pacientes
de efectuarse la prueba. Este período no debe prolongarse o plasmas controles en Reactivo B.
más de 4 horas. En caso de no poder procesarse en este 2- Precalentar 0,2 ml de cada dilución a 37oC durante
lapso, el plasma debe congelarse a -20oC. Este último proceso 2 minutos.
debe realizarse con rapidez, al igual que el descongelamiento 3- Rápidamente adicionar 0,1 ml de Reactivo A y registrar
(sumergiendo en baño a 37oC) previo a la determinación. el tiempo de formación del coágulo.
4- Repetir la determinación y promediar el resultado para
MATERIAL REQUERIDO cada muestra.
1- Provisto
- Hoja de papel doble logarítmico.
2- No provisto CALCULO DE LOS RESULTADOS
- Tubos de hemólisis. Conocido el tiempo de coagulación del paciente o del control,
- Tubos plásticos para preparar las soluciones. ingresar este valor a la curva standard e interpolar el valor
- Pipetas y micropipetas para medir los volúmenes indicados. de fibrinógeno en cada caso.
- Cronómetro. INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS
- Fuente luminosa para la observación del coágulo. Si el tiempo de coagulación para la muestra es demasiado
corto (por ejemplo, menor a 7 segundos) diluir el plasma
1:20 con Reactivo B y volver a ensayar. Multiplicar el re-
PROCEDIMIENTO sultado por 2.
Si el tiempo de coagulación para la muestra es demasiado
I- CURVA DE CALIBRACION largo (por ejemplo, mayor a 35 segundos) diluir el plasma
1- Preparar diluciones del Calibrador 1:5, 1:10, 1:15, 1:20, 1:5 con Reactivo B y volver a ensayar. Multiplicar el resul-
1:30, empleando 0,1 ml del Calibrador reconstituido y tado por 0,5.
0,4; 0,9; 1,4; 1,9 y 2,9 ml de Reactivo B respectivamente.
El Calibrador diluido 1:10 representa el 100% del valor METODO DE CONTROL DE CALIDAD
asignado en el envase. Plasma Control normal/patológico.
2- Precalentar 0,2 ml de cada dilución a 37oC durante
2 minutos. VALORES DE REFERENCIA
3- Disparar el cronómetro con el agregado de 0,1 ml de El intervalo de valores observados en pacientes normales
Reactivo A reconstituido (no precalentar el Reactivo A) oscila entre 200 - 400 mg/dl.
a las diluciones preincubadas y registrar el tiempo de En general se recomienda que cada laboratorio establezca
formación del coágulo. sus propios intervalos de referencia, dentro de su población
4- Calcular el tiempo promedio de coagulación para cada de pacientes.
dilución, por duplicado.
5- Construir la curva de calibración de fibrinógeno re- CONVERSION DE UNIDADES AL SISTEMA SI
presentando los tiempos de coagulación en función de Fibrinógeno (mg/dl) x 0,01 = Fibrinógeno (g/l)
la concentración de fibrinógeno, sobre el papel log-log.
Unir a través de una recta la mayoría de los puntos re- LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
presentados. La recta final debe contener por lo menos - Se deberá realizar una curva de calibración nueva con
3 puntos consecutivos. cada cambio de lote de reactivo o cualquier cambio de
Dilución Reactivo Calibrador Concentrac. Factor instrumento.
B fibrinógeno(*) dilución - Fallas en la reconstitución de los reactivos pueden ser
1:5 0,8 0,2 ---- mg/dl x2=
causa de resultados erróneos.
1:10 0,9 0,1 ---- mg/dl x1= - Recolección de muestra: las muestras y sus diluciones
1:15 1,4 0,1 ---- mg/dl x 0,67 = deberán colocarse en tubos de plástico o de vidrio silicona-
1:20 1,9 0,1 ---- mg/dl x 0,5 = do. Es importante respetar la relación de anticoagulante y
1:30 2,9 0,1 ---- mg/dl x 0,33 = sangre como también la concentración de citrato utilizada.
(*)
concentración de fibrinógeno indicada en el rótulo del Calibrador - Debe controlarse que el ensayo se realice a 37oC y que los
tubos de trabajo estén absolutamente limpios.
870480022 / 01 p. 2/9
PERFORMANCE SÍMBOLOS
a) Reproducibilidad: procesando 20 replicados de las mis- Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
mas muestras en un mismo día se obtuvieron los siguientes reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
resultados:
Nivel D.S. C.V. Este producto cumple con los requerimientos previstos
288 mg/dl
180 mg/dl
± 6,13 mg/dl
± 4,01 mg/dl
2,1 %
2,2 %
b) Linealidad: la reacción es lineal entre 100 y 600 mg/dl. P Representante autorizado en la Comunidad Europea
El kit Fibrinógeno se puede usar en forma manual y con Contenido suficiente para <n> ensayos
métodos de detección mecánicos y foto-ópticos. Para ins- X
trumentos semiautomáticos y automáticos se recomienda Fecha de caducidad
seguir las instrucciones del analizador.
H
PRESENTACION
Kit para 100 determinaciones conteniendo:  No congelar

- Reactivo A: 10 x → 1 ml
- Reactivo B: 2 x 60 ml F Riesgo biológico
- Calibrador: 1 x → 1 ml
(Cód. 1705006) Volumen después de la reconstitución
Cont. Contenido
BIBLIOGRAFIA
- Clauss, A. - Acta Haematol. 17:237, 1957.
- Koepke, J.A. - Am. J. Clin. Pathol. 63:984, 1975.
g Número de lote
- Collet, J.P. - Blood 82/8:2462, 1993. Elaborado por:

- Ernest, E. - Ann. Intern. Med. 118/12:956, 1993. M
- Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests", Nocivo
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870480022 / 01 p. 3/9 UR120503
Fosfatasa Acida
Total y Prostática cinética
C Método cinético para la determinación de fosfatasas
ácida total y prostática
SIGNIFICACION CLINICA Fosfatasa Acida no Prostática (FANP/ACP-NP)

Las fosfatasas ácidas se encuentran presentes en casi to- Reactivo B; preparación: disolver con el volumen de Reac-
dos los tejidos del organismo, siendo particularmente altas tivo C indicado en el rótulo. Marcar en el rótulo ACP-NP.
las cantidades de estas enzimas en próstata, estómago,
hígado, músculo, bazo, eritrocitos y plaquetas. Las distintas PRECAUCIONES
isoenzimas se diferencian entre sí por su pH óptimo, peso Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
molecular, y requerimientos de activadores e inhibidores. Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
La fosfatasa ácida prostática (PAP) constituye un valioso de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
auxiliar en el diagnóstico precoz de cáncer prostático, Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
una de las formas neoplásicas de mayor morbilidad. La acuerdo a la normativa local vigente.
determinación de la actividad enzimática de PAP usando
α-naftil fosfato como sustrato ha mostrado sensibilidad y ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
especificidad adecuadas para su utilización en el diagnóstico ALMACENAMIENTO
de esta enfermedad. Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10oC)
Se encuentran actividades elevadas de Fosfatasa ácida total hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. La expo-
(ACP) en algunas enfermedades hematológicas (leucemia sición prolongada a temperatura ambiente puede deteriorar
mielocítica, trombocitopenia idiopática) y óseas (enfermedad de el Reactivo B.
Paget, carcinoma óseo), así como en algunos tipos de cáncer, Reactivo B reconstituido: estable 3 días refrigerado (2-
enfermedades hepáticas (hepatitis, ictericia obstructiva), etc. 10oC) o 24 horas a temperatura ambiente (< 25oC).
FUNDAMENTOS DEL METODO INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS

La fosfatasa ácida (ACP EC 3.1.3.2.) hidroliza el α-naftil REACTIVOS
fosfato a pH 5,2 con liberación de fosfato y α-naftol. El naf- Cuando las lecturas a 405 nm, del Reactivo B reconstituido,
tol reacciona a su vez con un diazorreactivo presente en el son mayores a 0,250 D.O., llevando el aparato a cero con
sistema (Fast Red TR) produciendo un pigmento amarillo, agua, son indicio de deterioro del Rectivo.
de modo que el aumento de la absorbancia, leído a 405 nm,
es proporcional a la actividad de fosfatasa ácida total (ACP) MUESTRA
de la muestra. Cuando se mide la actividad en presencia de Suero
tartrato, se inhibe la actividad de la isoenzima prostática. La a) Recolección: obtener suero de la manera usual. No
diferencia entre las actividades de fosfatasa ácida total (ACP) utilizar plasma. La fosfatasa ácida prostática es sumamente
y de la resistente al tartrato (Fosfatasa Acida no Prostática/ inestable “in vitro” y al pH del suero a temperatura ambiente
ACP-NP) corresponde a la fracción prostática (PAP). puede perderse hasta un 50% de actividad en pocas horas.
Por lo tanto debe separarse el suero del coágulo dentro de
REACTIVOS PROVISTOS una hora de la extracción, conservándolo refrigerado (2-
A. Reactivo A: buffer citrato 0,1 mol/l, pH 5,2. 10oC) hasta el momento de usar.
B. Reactivo B: viales conteniendo α-naftil fosfato 10 mmol/l b) Aditivos: para evitar la inactivación durante el almace-
y Fast Red TR 1,5 mmol/l. namiento puede acidificarse la muestra agregando 50 ul de
C. Reactivo C: solución de tartrato 135 mmol/l en buffer Reactivo D (acético 0,7 mol/l) por cada ml de suero.
citrato 100 mmol/l, pH 5,2. c) Sustancias interferentes conocidas:
D. Reactivo D: solución de ácido acético 0,7 mol/l. - Sueros con marcada ictericia muestran baja recuperación
de la actividad enzimática por lo que su uso debe evitarse.
REACTIVOS NO PROVISTOS - No se observa interferencia por lipemia hasta 600 mg/dl de
Solución fisiológica (cloruro de sodio 9 g/l). triglicéridos, ni hemoglobina hasta 100 mg/dl.
- Los anticoagulantes interfieren en la reacción por lo que no
INSTRUCCIONES PARA SU USO debe emplearse plasma en la determinación.
Fosfatasa Acida Total (FAT/ACP) Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
Reactivo B; preparación: disolver con el volumen de Reac- drogas en el presente método.
tivo A indicado en el rótulo. Marcar en el rótulo ACP. d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: si
860202200 / 01 p. 1/6
se emplea el conservador descripto en b) la muestra puede extracción de muestras y en la determinación.
conservarse refrigerada (2-10oC) durante varios días sin - Alteraciones iatrogénicas: existen algunos medicamentos
pérdida significativa de la actividad. De lo contrario, proceder que pueden afectar los valores plasmáticos de PAP, así
como se describe en a). como el masaje, cateterismo y otras manipulaciones pros-
táticas por lo que es conveniente interrogar al paciente o
MATERIAL REQUERIDO (no provisto) al médico tratante sobre toda medicación, tratamiento o
- Espectrofotómetro. procedimiento diagnóstico a que esté sujeto el paciente.
- Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados. - El diagnóstico clínico no debe realizarse teniendo en cuenta
- Cubetas espectrofotométricas de caras paralelas. el resultado de un único ensayo, sino que debe integrar los
- Cronómetro. datos clínicos y de laboratorio.
CONDICIONES DE REACCION METODO DE CONTROL DE CALIDAD

- Longitud de onda: 405 nm Procesar con cada determinación, dos niveles de un material
- Temperatura de reacción: 37oC de control de calidad (Standatrol S-E 2 niveles) con acti-
- Tiempo de reacción: 3 minutos vidades conocidas de fosfatasas ácida total y prostática.
PERFORMANCE
PROCEDIMIENTO
a) Reproducibilidad: se aplicó el protocolo EP15A del CLSI.
En una cubeta mantenida a 37oC colocar:
Se analizaron dos niveles de actividad, cada uno por cua-
ACP ACP-NP druplicado durante 5 días, en analizador automático. Con los
Reactivo B ACP 1 ml - datos obtenidos, se calculó la precisión intraensayo y total.
Reactivo B ACP-NP - 1 ml Fosfatasa Acida Total

Preincubar unos minutos. Luego agregar: Precisión Intraensayo
Muestra 100 ul 100 ul Nivel D.S. C.V.
23,7 U/l ± 0.400 U/l 1,7 %
ACP: mezclar y disparar simultáneamente el cronómetro. 45,2 U/l ± 0,575 U/l 1,3 %
A los 5 minutos registrar la D.O. Leer posteriormente la
absorbancia cada minuto durante 3 minutos. Determinar Precisión Total
la diferencia promedio de absorbancia/minuto (∆A/min) Nivel D.S. C.V.
restando cada lectura de la anterior y promediando los 23,7 U/l ± 0,480 U/l 2,0 %
valores. Utilizar este promedio para los cálculos (∆A1/min). 45,2 U/l ± 0,872 U/l 1,9 %
ACP-NP: proceder de la misma manera que para ACP.
Se obtiene el ∆A2/min. Fosfatasa Acida No Prostática
Precisión Intraensayo

Fosfatasa Acida Total (ACP) = ∆A1/min x 743 = (U/l1) 11,6 U/l ± 0,307 U/l 2,7 %
24,5 U/l ± 0,718 U/l 2,9 %
Fosfatasa Acida no Prostática (ACP-NP) = ∆A2/min x 743 = (U/l2)
Precisión Total
Fosfatasa Acida Prostática (PAP) (U/l) = U/l1 - U/l2
Nivel D.S. C.V.
VALORES DE REFERENCIA 11,6 U/l ± 0,351 U/l 3,0 %
Fosfatasa Acida Total (ACP): < 9 U/l (a 37oC) 24,5 U/l ± 0,776 U/l 3,2 %
Fosfatasa Acida Prostática (PAP): < 3,5 U/l (a 37oC) b) Linealidad: la reacción es lineal hasta 74 U/l (∆A/min =
La actividad de ACP es muy escasa en el hombre sano y 0,100 D.O.). Para valores superiores repetir la determinación
casi nula en la mujer, de modo que los valores esperados con muestra diluida (0,1 ml muestra + 0,2 ml solución fisioló-
se encuentran en el límite del error instrumental o muy gica), multiplicando el resultado obtenido por 3.
cercanos al límite de detección del sistema. No obstante c) Límite de detección: la mínima actividad detectable es
se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios 0,51 U/l para la fosfatasa ácida total y 0,48 U/l para la fosfa-
valores de referencia. tasa ácida no prostática.
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO PRESENTACION

- Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA. - 1 x 40 ml Reactivo A
- Las enzimas son sensibles a la acción de ciertos contami- - 20 x 2 ml Reactivo B
nantes y venenos enzimáticos (metales pesados, cianuros, - 1 x 40 ml Reactivo C
tensioactivos, etc.) por lo que se recomienda extremar las - 1 x 5 ml Reactivo D
precauciones en la limpieza del material empleado en la (Cód. 1351402)
860202200 / 01 p. 2/6
- 1 x 40 ml Reactivo A SÍMBOLOS
- 20 x 2 ml Reactivo B Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
- 1 x 40 ml Reactivo C reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
- 1 x 5 ml Reactivo D
(Cód. 1009669) Este producto cumple con los requerimientos previstos
BIBLIOGRAFIA C por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios

- Hillmann, G.Z. - Klin. Chem. Klin. Biochem. 9:273 (1971).
- Skelley, D.S. - Ligand Rev. 2/1:43 (1980). P Representante autorizado en la Comunidad Europea
- Shaw, L.M.; Brummund, W.; Dorio, R.J. - Am. J. Clin. Pathol.
68/1:57 (1977).
- Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests", Contenido suficiente para <n> ensayos
AACC Press, 4th ed., (2001)
X
- CLSI: Clinical and Laboratory Standards Institute (ex- Fecha de caducidad
H
NCCLS) - Protocols EP 15A, 2001 / EP 17A, (2004).
- Junge,W.; Thormeyer, I.; Schlottmann A. et al - 3rd Alpe-
Adria Congress on Clinical Chemistry and Laboratory
Medicine, September 7-9 (1994).  No congelar
F Riesgo biológico
Cont. Contenido
g Número de lote
Elaborado por:
M
Nocivo
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
860202200 / 01 p. 3/6 UR080915
Fosfatasas Acida
Prostática cinética
Método cinético a 405 nm para la determinación de fosfatasa
ácida prostática en suero. Sustrato: α-naftil fosfato

Las fosfatasas ácidas se encuentran presentes en casi todos ALMACENAMIENTO
los tejidos del organismo, siendo particularmente altas las Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10oC)
cantidades de estas enzimas en próstata, estómago, hígado, hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. La expo-
músculo, bazo, eritrocitos y plaquetas. sición prolongada a temperatura ambiente puede deteriorar
Las distintas isoenzimas se diferencian entre sí por su pH el Reactivo A.
óptimo, peso molecular, y requerimientos de activadores e Reactivo A reconstituido: estable 24 horas refrigerado
inhibidores. (2-10oC) o 12 horas a temperatura ambiente.
La fosfatasa ácida prostática (FAcP) constituye un valioso
auxiliar en el diagnóstico precoz de cáncer prostático, una INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
de las formas neoplásicas de mayor morbilidad. REACTIVOS
La determinación cinética de FAcP usando α-naftil fosfato Lecturas a 405 nm del Reactivo A reconstituido mayores de
como sustrato ha mostrado sensibilidad y especificidad 0,250 D.O. leídas contra agua, son indicio de deterioro de
comparables a las técnicas radioinmunológicas, con similar los reactivos. En tal caso desechar.
poder discriminatorio y evidentes ventajas de orden práctico.
MUESTRA
FUNDAMENTOS DEL METODO Suero
La FAcP (E.C.3.1.3.2.) hidroliza el α-naftil fosfato a pH 5,2 a) Recolección: obtener suero libre de hemólisis. No uti-
con liberación de fosfato y α-naftol. El naftol reacciona a su lizar plasma. La fosfatasa ácida prostática es sumamente
vez con un diazorreactivo presente en el sistema 4-cloro- inestable “in vitro” y al pH del suero a temperatura ambiente
tolueno-1,5-diazo α-naftaléndisulfonato (4-CTD) producien- puede perderse hasta un 50% de actividad en pocas horas.
do un pigmento amarillo, de modo que el aumento de la Por lo tanto debe separarse el suero del coágulo dentro de
absorbancia leído a 405 nm es proporcional a la actividad una hora de la extracción, conservándolo refrigerado hasta
fosfatásica de la muestra. el momento de usar.
b) Aditivos: para evitar la inactivación durante el almace-
REACTIVOS PROVISTOS namiento puede acidificarse la muestra agregando 20 ul
A. Reactivo A: comprimidos conteniendo cada uno 6 umol de buffer acetato, 5 M, pH 5 por cada ml de suero. Este
de α-naftil fosfato (NF) y 2 umol de 4-CTD. conservador se prepara agregando hidróxido de sodio con-
B. Reactivo B: buffer citrato 0,1 mol/l con 14 mmol/l de centrado a 29 ml de ácido acético glacial p.a. hasta obtener
activador (1,5-pentanodiol + butanol). pH 5 completando a 100 ml con agua destilada.
c) Sustancias interferentes conocidas:
Concentraciones finales - sueros con intensa ictericia muestran baja recuperación
NF........................................................................... 3 mmol/l de la actividad enzimática por lo que su uso debe evitarse.
4-CTD..................................................................... 1 mmol/l - no usar sueros con hemólisis visibles.
buffer citrato............................................... 0,1 mol/l, pH 5,2 - los anticoagulantes interfieren en la reacción por lo que no
debe emplearse plasma en la determinación.
INSTRUCCIONES PARA SU USO Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
Reactivo A; preparación: para cada determinación disolver drogas en el presente método.
un comprimido de Reactivo A en 2 ml de Reactivo B, agitando d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: si
suavemente hasta lograr disolución completa. se emplea el conservador descripto en b) la muestra puede
conservarse refrigerada (2-10oC) durante varios días sin
PRECAUCIONES pérdida significativa de la actividad. De no utilizarse este
Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro". conservador la muestra deberá procesarse inmediatamente.
de trabajo en el laboratorio de química clínica. MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de - Espectrofotómetro.
acuerdo a la normativa local vigente. - Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados.
870490000 / 01 p. 1/6
- Cubetas espectrofotométricas de caras paralelas. al médico tratante sobre toda medicación, tratamiento o
- Cronómetro. procedimiento diagnóstico a que esté sujeto el paciente.
CONDICIONES DE REACCION PERFORMANCE

- Longitud de onda: 405 nm a) Reproducibilidad: procesando simultáneamente replica-
- Temperatura de reacción: 25, 30 ó 37oC. dos de una misma muestra, se obtuvo lo siguiente:
- Tiempo de reacción: 4-5 minutos Nivel D.S. C.V.
- Volumen de muestra: 200 ul 10 U/l ± 0,51 U/l 5,1 %
- Volumen final de reacción: 2,2 ml 52 U/l ± 0,71 U/l 1,3 %
b) Linealidad: la reacción es lineal hasta 128 U/l (∆A/min =
PROCEDIMIENTO 0,150 D.O.). Para valores superiores repetir la determina-
En una cubeta mantenida a la temperatura seleccionada ción con muestra diluida 1:2 ó 1:5 con solución fisiológica,
colocar: corrigiendo consecuentemente los resultados.
c) Límite de detección: depende del fotómetro empleado y
de la longitud de onda. De acuerdo con la sensibilidad reque-
Preincubar unos minutos. Luego agregar: rida, en espectrofotómetros con cubetas de caras paralelas
Muestra 200 ul de 1 cm de espesor, reproducibilidad ± 2 nm, luz espuria ≤
0,5% y semiancho de banda ≤ 8 nm, para un ∆A/min de 0,001
Disparar simultáneamente un cronómetro. A los 4 minu- el mínimo cambio de actividad detectable será de 0,8 U/l.
tos registrar la D.O. Leer posteriormente la absorbancia
cada minuto durante 3 minutos. Determinar la diferencia PRESENTACION
promedio de absorbancia/minuto (∆A/min) restando cada Equipo para 20 determinaciones (Cód. 1351401).
lectura de la anterior y promediando los valores. Utilizar
este promedio para los cálculos. BIBLIOGRAFIA
- Hillmann, G.Z. - Klin. Chem. U. Klin. Biochem. 9:273 (1971).
- Babson, A.L.; Read, P.A. and Philips, G.E. - Am. J. Clin.
CALCULO DE LOS RESULTADOS Pathol. 32:83 (1959).
Fosfatasa ácida prostática (U/l) = ∆A/min x 853 - Fishman, W.H. y Davidsohn, H.M. - Methods of Biochemical
(405 nm; relación muestra/sustrato 1:10) Analysis. Ed. by D. Glick, N.Y. Acad. Press pág. 257-284
(1957).
VALORES DE REFERENCIA - Roy, A. - Clin. Chem. 17/11:1903 (1971).
La actividad de FAcP es muy escasa en el hombre sano y - Fishman, W.H. y Lerner, F. - J. Biol. Chem. 200:89 (1953).
casi nula en la mujer, de modo que los valores esperados - Skelley, D.S. - Ligand Rev. 2/1:43 (1980).
se encuentran en el límite del error instrumental o muy - Shaw, L.M.; Brummund, W. y Dorio, R.J. - Am. J. Clin.
cercanos al límite de detección del sistema. No obstante se Pathol. 68/1:57 (1977).
recomienda que cada laboratorio establezca sus propios - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
valores de referencia. AACC Press, 4th ed., 2001.
- Junge,W.; Thormeyer, I.; Schlottmann A. et al - 3rd Alpe-
Adria Congress on Clinical Chemistry and Laboratory
FAcP (U/l) 0 - 2,6 0 - 3,0 0 - 3,5 Medicine, September 7-9 (1994).
Debe sospecharse la presencia de cáncer prostático toda vez
que los valores superen en un 60% al valor superior normal.

- Es sabido que las enzimas son sensibles a la acción de
ciertos contaminantes y venenos enzimáticos (metales
pesados, cianuros, tensioactivos, etc.) por lo que se re-
comienda extremar las precauciones en la limpieza del
material empleado en la extracción de muestras y en la
determinación.
- Los comprimidos (Reactivo A) pueden presentar color
rosado, o pequeñas manchas en su superficie que no
alteran su reactividad.
- Alteraciones iatrogénicas: existen algunos medicamentos
que pueden afectar los valores plasmáticos de FAcP, igual
que el masaje, cateterismo y otras manipulaciones pros-
táticas por lo que es conveniente interrogar al paciente o
870490000 / 01 p. 2/6
Símbolos
C
M Elaborado por:

Europea Nocivo

Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo
Wiener lab.
Riobamba 2944
Bioquímica
870490000 / 01 p. 3/6 UR101222
Fosfatasas Alcalina
optimizada
Para la determinación de la actividad de fosfatasa alcalina en suero
SIGNIFICACION CLINICA A y mezclándolo hasta disolución completa (concentración

La fosfatasa alcalina es una enzima ampliamente distribuida final 14 mM). Anotar en el rótulo la fecha de preparación.
en el organismo. Hidroliza los monoésteres del ácido orto- Reactivo C; preparación: disolver el contenido del envase en
fosfórico en medio alcalino. 500 ml de agua destilada. Rotular y colocar fecha de preparación.
En el adulto proviene en parte del hígado (fracción termoesta- Standard: listo para usar.
ble) y en parte del hueso, sistema reticuloendotelial y vascu-
lar (fracción termolábil), dando lugar a distintas isoenzimas. PRECAUCIONES
La actividad sérica de fosfatasa alcalina ósea, en condi- Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
ciones normales, alcanza su mayor actividad en los niños Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
en edad de crecimiento (llegando a triplicar los niveles de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
del adulto) debido a que esta isoenzima se localiza en los Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
osteoblastos (relacionados con la calcificación y formación acuerdo a la normativa local vigente.
de estructuras óseas). También es fisiológico el aumento Reactivo C y Standard: R36/38: irrita los ojos y la piel. S26:
que se produce al final del primer trimestre del embarazo, a en caso de contacto con la piel, lávense inmediatamente y
expensas de la isoenzima placentaria que en este período abundantemente con agua y acúdase a un médico. S37/39:
alcanza niveles máximos (aproximadamente el doble de los usar guantes adecuados y protección para los ojos/la cara.
valores normales).
Entre las patologías que afectan la actividad sérica de fos- ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
fatasa alcalina, se pueden citar: carcinomas metastásicos ALMACENAMIENTO
en hígado y en hueso (productores de enzima), colestasis Los Reactivos Provistos son estables en refrigerador (2-
biliar, fenómenos osteoblásticos, trastornos de malabsorción 10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
acompañados de lesiones ulcerosas (donde la deficiencia Reactivo A reconstituido: estable durante 5 meses en
de vitamina D produce osteomalacia con el consecuente refrigerador (2-10oC).
aumento de fosfatasa alcalina ósea) e incluso lesiones en Reactivo C: una vez preparado es estable durante 5 meses
vías de reparación tales como infarto agudo de miocardio, a temperatura ambiente y al abrigo de la luz.
La fosfatasa alcalina desdobla al fenilfosfato de sodio en Valores de Blanco de reactivos mayores a 0,120 D.O. indican
medio alcalino tamponado con aminometil propanol (AMP). contaminaciones, debiéndose descartar los reactivos.
El fenol liberado se determina por reacción con 4-amino-
antipirina y ferricianuro como agente oxidante. El color MUESTRA
desarrollado es directamente proporcional a la actividad Suero
enzimática y se mide a 520 nm. a) Recolección: debe usarse únicamente suero fresco, no
hemolizado.
REACTIVOS PROVISTOS b) Aditivos: no se requieren.
A. Reactivo A: 4-aminoantipirina 29 mmol/l en solución de c) Sustancias interferentes conocidas: los anticoagu-
aminometil propanol 3 mol/l. lantes producen inhibición de la reacción en un 50 a 90%.
B. Reactivo B: fenilfosfato de sodio, 1,4 mmoles. Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
C. Reactivo C: ferricianuro de potasio, 10 mmol/l. drogas en el presente método.
S. Standard: solución de fenol equivalente a 200 UI/l. d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: si
la determinación no puede ser efectuada en un plazo de 6
REACTIVOS NO PROVISTOS horas, la muestra debe conservarse congelada (- 4oC) ya
Agua destilada. que a temperatura ambiente o en refrigerador (2-10oC) hay
aumento de actividad de 30 a 50% en 24 horas.
Reactivo A; preparación: transferir el contenido del frasco de MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
Reactivo B volcándolo directamente en el frasco de Reactivo - Espectrofotómetro o fotocolorímetro.
870500000 / 00 p. 1/6
- Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados. biéndose observado valores de hasta 700 UI/l en niños sin
- Tubos. patología que justificara un origen extraóseo de la enzima.
- Probeta. Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios
- Baño de agua a 37oC. valores de referencia.
- Reloj o timer.
CONDICIONES DE REACCION Fosfatasa alcalina (U/l) x 0,017 = Fosfatasa alcalina (ukat/l)
fotocolorímetro con filtro verde (500-550 nm). LIMITACIONES DE PROCEDIMIENTO
- Temperatura de reacción: 37oC - Ver Sustancias Interferentes conocidas en MUESTRA.
- Tiempo de reacción: 10 minutos - El tiempo y la temperatura de reacción son críticos. Un
- Volumen de muestra: 50 ul minuto o un grado en exceso o en defecto pueden producir
- Volumen final de reacción: 3,05 ml un error de ± 10%.
- Contaminación con fenol: puede provenir del material de
vidrio, de otros reactivos que lo contenga, o de las cañerías
PROCEDIMIENTO de PVC que suelen utilizarse para el trasvase del agua
En tres tubos marcados B (Blanco), S (Standard) y D destilada. No deben usarse frascos que hayan contenido
(Desconocido) colocar: fenol (Reactivo 1 de Uremia de Wiener lab., Kunkel fenol,
etc.) para preparar el Reactivo C.
B S D - Debe leerse un Blanco de Reactivos con cada lote de
Reactivo A reconstituido 0,5 ml 0,5 ml 0,5 ml determinaciones.
Preincubar en baño de agua a 37oC unos minutos. Luego
PERFORMANCE
agregar:
Suero - - 50 ul muestras en un mismo día, se obtuvo:
Standard - 50 ul - Nivel D.S. C.V.
Mezclar, incubar exactamente 10 minutos (cronómetro) 35 UI/l ± 1,75 UI/l 5,0 %
235 UI/l ± 5,40 UI/l 2,4 %
y agregar:
500 UI/l ± 6,00 UI/l 1,2 %
Reactivo C 2,5 ml 2,5 ml 2,5 ml
b) Linealidad: la reacción es lineal hasta 800 UI/l. A va-
Mezclar de inmediato cada tubo. Retirar los tubos del lores mayores, debe repetirse la determinación diluyendo
baño y leer en espectrofotómetro a 520 nm o en fotoco- la muestra 1:2 ó 1:5 con solución fisiológica de modo que
lorímetro con filtro verde, llevando el aparato a cero de los valores obtenidos se encuentren dentro del rango de
absorbancia con agua destilada. linealidad. El resultado obtenido debe multiplicarse por la
dilución efectuada.
c) Límite de detección: depende del fotómetro empleado. En
ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL espectrofotómetro (a 520 nm, con cubetas de caras paralelas
El color de la reacción es estable durante 30 minutos por de 1 cm de espesor, reproducibilidad ± 2 nm, luz espuria ≤
lo que la absorbancia debe ser leída dentro de ese lapso. 0,5%, semiancho de banda ≤ 8 nm), para 0,001 D.O. el mínimo
cambio de actividad detectable será de 1 UI/l.
Fosfatasa alcalina (UI/l) = factor x (D-B) PRESENTACION
200 UI/l Equipo para 200 determinaciones (Cód. 1361003).
donde: factor =
(S-B) BIBLIOGRAFIA
- Mc Comb, R.B.; Bowers, G.N. - Clin. Chem. 18/2:97 (1972).
METODO DE CONTROL DE CALIDAD - Bowers, G.N.; Mc Comb, R.B. - Clin. Chem. 21/13:1988
Si la muestra a ensayar es suero, procesar 2 niveles de un (1975).
material de control de calidad (Standatrol S-E 2 niveles) - Pric, C.P.; Woodmn, D.D. - Clin. Chim. Acta 35/2:265 (1971).
con actividades conocidas de fosfatasa alcalina, con cada - Conyers, R.A.; Birkett, D.J.; Neale, F.C.; Posen, S. and Bru-
determinación. denell-Woods, J - Biochim. Biophys. Acta 139:363 (1967).
- Skillen, A.W.; Harrison, J. - Clin. Chim. Acta 45:287 (1973).
VALORES DE REFERENCIA - Kind, P.R..; King, E.J. - J. Clin. Path. 7:322 (1954).
Adultos: 68 - 240 UI/l - Demaría, L.; Setta, F.; Lorenzo, L.E. - VIII Congreso Ar-
Niños: 100 - 400 UI/l gentino de Bioquímica, Rev. Asoc. Bioq. Arg. 54/3 (1990).
Nota: Debido al proceso osteoblástico, la isoenzima ósea - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
se encuentra aumentada en la niñez y adolescencia (hasta AACC Press, 4th ed., 2001.
los 18 años aproximadamente), proporcionando valores
de fosfatasa alcalina más elevados que en los adultos, ha-
870500000 / 00 p. 2/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
870500000 / 00 p. 3/6 UR110408
Fosfatemia
Método para la determinación de fósforo inorgánico y
fosfolípidos
• DETERMINACION DE FOSFORO INORGANICO Reactivo C: listo para usar. A baja temperatura los compo-
SIGNIFICACION CLINICA nentes del reactivo pueden precipitar. En tal caso, colocar
El fósforo se encuentra en el organismo formando parte de en baño de agua a 37oC unos minutos, mezclando luego
compuestos orgánicos (proteínas, lípidos, carbohidratos, áci- por inversión.
dos nucleicos, etc.) o como fosfatos inorgánicos, cumpliendo Standard: listo para usar.
diversas funciones (transporte de energía, estructura de los
tejidos, mantenimiento del pH de los líquidos corporales). PRECAUCIONES
Es constituyente esencial de los tejidos óseo y muscular y Los Reactivos Provistos son para uso diagnóstico "in vitro".
participa en la composición del tejido nervioso. Reactivo A: corrosivo. R36/38: irrita los ojos y la piel. S24/25:
Su concentración en circulación está regulada entre otros evítese el contacto con los ojos y la piel. S26/28: en caso
factores por los niveles de vitamina D y las glándulas endó- de contacto con la piel y los ojos, lávese inmediatamente
crinas, observándose variaciones fisiológicas de acuerdo a con abundante agua y acúdase a un médico. S37: usar
la edad, ingesta, actividad física, embarazo, etc. guantes adecuados.
Existen situaciones patológicas en las que se altera este Reactivo C: nocivo. R20/22: nocivo por inhalación y por
equilibrio, produciéndose anormalidades en la concentración ingestión. S24/25: evítese el contacto con los ojos y la piel.
de fósforo circulante. Niveles elevados de fósforo sérico S26/28: en caso de contacto con la piel y los ojos, lávese in-
son encontrados en el hipoparatiroidismo, mientras que el mediatamente con abundante agua y acúdase a un médico.
hiperparatiroidismo conduce a la situación contraria. También Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
puede encontrarse hiperfosfatemia por hipervitaminosis D y de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
diversos trastornos renales, mientras que la hipofosfatemia Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
se relaciona con deficiencias de vitamina D y defectos en la acuerdo a la normativa local vigente.
reabsorción de fósforo a nivel renal.
FUNDAMENTOS DEL METODO ALMACENAMIENTO
El fosfato inorgánico reacciona en medio ácido con el molib- Reactivos Provistos: son estables a temperatura ambiente
dato para dar fosfomolibdato, que es reducido por el ácido hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
ascórbico a azul de molibdeno, desarrollándose el color en Reactivo B: es estable un año en refrigerador (2-10oC) a
medio arsenito/citrato. El arsenito/citrato se combina con el partir del momento de su preparación.
exceso de molibdato impidiendo su reacción posterior con
el fosfato liberado de los ésteres lábiles. El color obtenido INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
se mide entre 620 y 650 nm. REACTIVOS
Valores de Blanco superiores a 0,050 D.O. indican conta-
REACTIVOS PROVISTOS minación de los reactivos. En tal caso deben desecharse.
A. Reactivo A: solución de molibdato de sodio 230 mmol/l La solución de ácido ascórbico del Reactivo B puede oxi-
en ácido clorhídrico 1 mol/l. darse y tornarse amarillenta por contaminantes químicos
B. Reactivo B: ácido ascórbico (≥ 5,6 mmol) desecado. presentes en el agua destilada, disminuyendo o incluso
C. Reactivo C: solución de arsenito de sodio 120 mmol/l en eliminando la respuesta cromogénica. En este caso puede
citrato de sodio 50 mmol/l con agentes tensioactivos. reemplazarse por una solución de ácido ascórbico p.a.
S. Standard: solución estabilizada de fosfatos que equivale 70 mmol/l, preparada extemporáneamente.
a 4 mg/dl de fósforo inorgánico.
MUESTRA
REACTIVOS NO PROVISTOS Suero, plasma u orina
Agua destilada. a) Recolección: se debe obtener suero o plasma de la
manera usual. También puede realizarse la determinación
INSTRUCCIONES PARA SU USO en orina. En este caso, recoger orina de 24 horas en un
Reactivo A: listo para usar. recipiente que contenga 2 ml de ClH concentrado, y diluir a
Reactivo B: disolver añadiendo 80 ml de agua destilada. 2 litros con agua. Tomar una alícuota y efectuar una dilución
Se obtiene una solución con concentración ≥ 70 mmol/l. 1:5 en agua destilada. Proceder en la misma forma que la
870510000 / 00 p. 1/8
descripta en PROCEDIMIENTO. ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL
b) Aditivos: en caso de que la muestra a utilizar sea plasma, El color de reacción final es estable 3 horas por lo que la
se recomienda el uso de Anticoagulante W de Wiener lab. absorbancia debe ser leída en ese lapso.
para su obtención.
c) Sustancias interferentes conocidas: el oxalato interfiere CALCULO DE LOS RESULTADOS
en la determinación. Suero o plasma
Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las D
drogas en el presente método. Pi (mg/dl) = x 4 mg/dl
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: el S
suero o plasma debe ser separado de los glóbulos rojos
dentro de las 2 horas de extraído y la determinación efec- El valor del Standard es reproducible pero se aconseja
tuada inmediatamente; de lo contrario se deberá refrigerar la repetirlo con cada lote de determinaciones.
muestra para evitar el aumento de fósforo inorgánico produ- Orina
cido por hidrólisis enzimática de los ésteres orgánicos lábiles.
D
La orina es estable 7 días refrigerada (2-10oC).
Pi (g/24 hs) = x 0,4 g/24 hs
S
- Espectrofotómetro o fotocolorímetro
- Micropipetas y pipetas
Si la muestra a ensayar es suero o plasma, procesar 2 ni-
- Probeta y tubos
veles de un material de control de calidad (Standatrol S-E
2 niveles) con concentraciones conocidas de fósforo, con
- Reloj o timer.
cada determinación. En el caso de muestras de orina, utilizar
un control con base de orina.
- Longitud de onda: 620-650 nm en espectrofotómetro o
620-700 nm en fotocolorímetro con filtro rojo.
Suero
Adultos: 2,50 a 4,50 mg/dl
Niños: 4,00 a 6,50 mg/dl
- Volumen final de reacción: 3,52 ml Orina
0,34 a 1,00 g/24 horas
En tres tubos marcados B (Blanco), S (Standard) y D (Des-
conocido) colocados en baño de agua a 37oC, agregar: CONVERSION DE UNIDADES AL SISTEMA SI
B S D Pi (mg/dl) x 0,323 = Pi (mmol/l)
Standard - 20 ul -
Muestra - - 20 ul - Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
Reactivo A 1 ml 1 ml 1 ml - Contaminación con fosfatos: todo el material de vidrio usado
(incluso en la recolección de la muestra) debe estar libre
Mezclar por agitación suave. Esperar por lo menos 30 de fosfatos. Para su limpieza se recomienda usar Noion
segundos y no más de 2 minutos. Luego agregar: de Wiener lab. Blancos elevados indican contaminación;
Reactivo B 1 ml 1 ml 1 ml si los valores son superiores a 0,050 D.O., los reactivos
deben desecharse.
Mezclar. Esperar por lo menos 30 segundos y no más de
2 minutos. Luego agregar: PERFORMANCE
Reactivo C 1,5 ml 1,5 ml 1,5 ml a) Reproducibilidad: procesando replicados de las mismas
muestras se obtuvieron los siguientes datos:
Mezclar por inversión. A los 10 minutos retirar del baño
y leer en espectrofotómetro entre 620 y 650 nm o en Nivel D.V. C.V.
fotocolorímetro con filtro rojo (620-700 nm), llevando el 2,00 mg/dl ± 0,033 mg/dl 1,6 %
aparato a cero con el Blanco. 8,00 mg/dl ± 0,043 mg/dl 0,5 %
Nota: al agregar Reactivo A se produce turbiedad por b) Recuperación: agregando cantidades conocidas de
precipitación proteica. Los agentes tensioactivos del fosfato inorgánico a distintas muestras se obtuvo una recu-
Reactivo C provocan su redisolución total, obteniéndose peración entre 97,2 y 102,4% en el caso de suero y 98,9 y
una solución perfectamente límpida. 102,5% para orina.
c) Linealidad: la reacción es lineal hasta 16 mg/dl.
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• DETERMINACION DE FOSFOLIPIDOS
SIGNIFICACION CLINICA PROCEDIMIENTO
Los fosfolípidos son biomoléculas lipídicas, que contienen En un tubo de Kahn colocar 100 ul de suero y agregar 4
fosfatos en su composición. Son componentes principales de ml de Mezcla Extractante. Tapar y agitar vigorosamente
las membranas celulares y de las lipoproteínas circulantes. de medio a un minuto. Centrifugar 3 minutos a 3.000 rpm.
La concentración de fosfolípidos séricos está sujeta a va- Tomar 1 ml del sobrenadante límpido y colocar en un tubo
riaciones fisiológicas debidas a cambios en la dieta, edad y de ensayo o de fotocolorímetro. Llevar a Baño María hir-
condiciones especiales como embarazo, ciclo menstrual, etc. viente eléctrico (vapores inflamables) evaporando hasta
Las variaciones patológicas muy frecuentemente están sequedad. Retirar del baño cuando no haya más restos
asociadas a cambios en las demás fracciones lipídicas. Este de solvente. Como los vapores suelen condensarse en la
hecho se manifiesta por ejemplo en afecciones como diabe- zona superior del tubo, completar la evaporación soplando
tes mellitus, ateroesclerosis, alcoholismo agudo, síndrome la boca del tubo o prolongando el calentamiento.
nefrótico, etc., que cursan habitualmente con hiperlipemia,
Mineralización: se logra por simple calcinación del ex-
y en las que se observa un aumento anormal de los niveles
tracto seco, observando las siguientes precauciones: a)
de fosfolípidos. Esta situación ha hecho que se le prestara
usar una llama suave del mechero de gas o alcohol y b)
especial atención a las relaciones entre colesterol y fosfolí-
tomar el tubo por la boca y rotándolo lentamente calentar
pidos en diversas condiciones.
todo el fondo y parte de la pared que contenga extracto.
También es posible encontrar niveles anormalmente bajos
Primero se observa ennegrecimiento del material con
de fosfolípidos, estando éstos relacionados generalmente
desprendimiento de vapores blancos. Se sigue calentando
con una nutrición deficiente o síndrome de malabsorción.
con mayor intensidad hasta que todo el residuo haya
blanqueado. Si queda algún punto negro se intensifica
Los fosfolípidos son extraídos específicamente del suero con el calentamiento en esa zona.
mezcla de Bloor. Una alícuota del extracto es evaporada a Preparar 3 tubos: B (Blanco), S (Standard) y D (Desco-
sequedad y mineralizada por calcinación. nocido, residuo mineralizado) y colocar en baño de agua
En el residuo se determina cuantitativamente el fósforo in- a 37oC. Utilizar 50 ul de Standard y agregar los reactivos
orgánico mediante la reacción colorimétrica de Fosfatemia. de Fosfatemia (2 ml de Reactivo A, 2 ml de Reactivo B
y 3 ml de Reactivo C como se indica en el Procedimiento
REACTIVOS PROVISTOS para fosfatemia).
Reactivos de Fosfatemia Wiener lab.
REACTIVOS NO PROVISTOS ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL

- Etanol puro 96o. Ver determinación de fosfatemia.
- Eter etílico calidad analítica o anestésica.
INSTRUCCIONES PARA SU USO 2,25
Reactivos Provistos: ver determinación de fosfatemia. Fosfolípidos (g/l) = factor x D factor =
Mezcla Extractante: preparar mezclando 3 partes de etanol S
puro 96o y una parte de éter etílico. 50
El factor 2,25 surge de: 0,04 x x 4,5 x 25 = 2,25
MUESTRA 100
Suero o plasma donde:
a) Recolección: obtener la muestra con 12-14 horas de ayuno. 0,04 = g/l de Pi en el Standard
b) Aditivos: en caso de que la muestra a utilizar sea plasma, 50 ul = volumen del Standard
se recomienda el uso de Anticoagulante W de Wiener lab. 100 ul = volumen de muestra
c) Sustancias interferentes conocidas: ver determinación 4,5 = dilución de la muestra
de fosfatemia. 25 = factor de conversión de P inorgánico en fosfolípidos.
drogas en el presente método. La reacción colorimétrica sigue la ley de Beer hasta 8 g/l de
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: ver fosfolípidos. Para valores superiores debe repetirse la determi-
determinación de fosfatemia. nación empleando menor cantidad del extracto de etanol-éter.
MATERIAL REQUERIDO (no provisto) VALORES DE REFERENCIA

Ver determinación de fosfatemia. 1,0 a 3,0 g/l.
- Probeta para preparar la Mezcla Extractante. Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios
- Tubos de Kahn. valores de referencia.
CONDICIONES DE REACCION LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO

Ver determinación de fosfatemia. Ver determinación de fosfatemia.
870510000 / 00 p. 3/8
PERFORMANCE SIMBOLOS
a) Reproducibilidad: procesando replicados de las mismas Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
muestras se obtuvieron los siguientes datos: reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
C
Nivel D.S. C.V. Este producto cumple con los requerimientos previstos
3 g/l ± 0,093 g/l 3,1 % por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios
7,5 g/l ± 0,180 g/l 2,4 %
b) Recuperación: agregando cantidades conocidas de P Representante autorizado en la Comunidad Europea
V
fosfolípidos a distintas muestras se obtuvo una recuperación
entre 96,8 y 103,2%. Uso diagnóstico "in vitro"
PRESENTACION X Contenido suficiente para <n> ensayos

BIBLIOGRAFIA
- Vanderlinde, R. & Kowalski, P. - Clin. Biochem. 4:76 (1971).
- Martinek, R.C. - J. Am. Med. Technol. 32:337 (1970).  No congelar
- Baginski E.S.; Foa, P.P. & Zak. B. - Clin. Chem. 13/4:326
(1967). F Riesgo biológico
- Baginski E.S.; et al. - Am. J. Med. Technol. 35:475 (1969).
- Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests", Volumen después de la reconstitución
Cont. Contenido
g Número de lote
M Elaborado por:
Xn
Nocivo
Xi
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
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Fosfatemia
C Método UV para la determinación de fósforo inorgánico
AA
(Pi) en suero, plasma u orina
SIGNIFICACION CLINICA con agua. S37/39: usar guantes adecuados y protección

El fósforo se encuentra en el organismo formando parte para los ojos/la cara.
de compuestos orgánicos (proteínas, lípidos, carbohidra- Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
tos, ácidos nucleicos, etc.) o como fosfatos inorgánicos, de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
cumpliendo diversas funciones (transporte de energía, Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
estructura de los tejidos, mantenimiento del pH de los acuerdo a la normativa local vigente.
líquidos corporales).
Los tejidos óseo y muscular lo contienen como constituyente ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
esencial y es notable su participación en la composición del ALMACENAMIENTO
tejido nervioso. Los Reactivos Provistos son estables a temperatura am-
Su concentración en circulación está regulada entre otros biente hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
factores por los niveles de vitamina D y las glándulas endó-
crinas, observándose variaciones fisiológicas de acuerdo a INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
la edad, ingesta, actividad física, embarazo, etc. REACTIVOS
Existen situaciones patológicas en las que se altera este Cuando el espectrofotómetro ha sido llevado a cero con
equilibrio, produciéndose anormalidades en la concentración agua destilada, la lectura de absorbancia del Reactivo
de fósforo circulante. A no debe ser superior a 0,500 D.O. En caso contrario,
Niveles elevados de fósforo sérico son encontrados en desechar.
el hipoparatiroidismo, mientras que el hiperparatiroidismo
conduce a la situación contraria. También puede encontrarse MUESTRA
hiperfosfatemia por hipervitaminosis D y diversos trastornos Suero, plasma u orina
renales, mientras que la hipofosfatemia se relaciona con a) Recolección: obtener suero de la manera usual o plasma
deficiencias de vitamina D y defectos en la reabsorción de con EDTA o citrato.
fósforo a nivel renal. También puede realizarse la determinación en orina. En este
caso, recoger orina de 24 horas en un recipiente que con-
FUNDAMENTOS DEL METODO tenga 2 ml de ácido clorhídrico concentrado. Homogeneizar
El fósforo inorgánico (Pi) reacciona en medio ácido con el y medir la diuresis. Tomar una alícuota, centrifugar o filtrar y
molibdato para dar un complejo fosfomolíbdico que se mide efectuar una dilución 1:10 en agua destilada (1 ml de orina
espectrofotométricamente a 340 nm. + 9 ml de agua destilada). Proceder en la misma forma que
la descripta en PROCEDIMIENTO.
REACTIVOS PROVISTOS b) Aditivos: en caso de que la muestra a utilizar sea plasma,
A. Reactivo A: solución de molibdato de amonio 2 mmol/l se recomienda el uso de Anticoagulante W o TP de Wiener
en ácido sulfúrico 1%. lab. para su obtención.
S. Standard*: solución estabilizada de fosfatos equivalente c) Sustancias interferentes conocidas:
a 4 mg/dl de fósforo inorgánico. - No se observan interferencias por bilirrubina hasta 58 mg/l.
- La hemólisis o lipemia son causa de resultados erróneos.
REACTIVOS NO PROVISTOS Se recomienda procesar un blanco de muestras para evitar
Calibrador A plus de Wiener lab. estas interferencias. Referirse a la bibliografía de Young para
los efectos de las drogas en el presente método.
INSTRUCCIONES PARA SU USO d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: el
Reactivos Provistos: listos para usar. suero o plasma debe ser separado de los glóbulos rojos
dentro de las 2 horas de extraída la muestra, debido a que los
PRECAUCIONES eritrocitos contienen fosfatos orgánicos lábiles que pueden
Los Reactivos son para uso diagnóstico "in vitro". conducir a resultados falsamente elevados.
El Reactivo A es corrosivo. R34: provoca quemaduras. El fósforo inorgánico es estable en el suero 8 horas a tem-
S24/25: evitar el contacto con los ojos y la piel. S26: en caso peratura ambiente. En caso de no procesarse dentro de ese
de contacto con los ojos, lávense inmediata y abundante- lapso, se puede refrigerar (2-10oC) hasta 7 días.
mente con agua y acúdase a un médico. S28: en caso de La orina de 24 horas es estable 7 días refrigerada (2-
contacto con la piel, lávese inmediata y abundantemente 10 oC).

MATERIAL REQUERIDO (no provisto) individuos habitantes de la ciudad de Rosario (Argentina),
- Espectrofotómetro de ambos sexos (entre 20 y 45 años), sin síntomas de
- Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados. enfermedad paratiroidea, renal o hepática o de deficiencia
- Cubetas espectrofotométricas de vitamina D.
- Reloj o timer Niños: 4,0 - 7,0 mg/dl
CONDICIONES DE REACCION Orina
- Longitud de onda: 340 nm (Hg 334 ó 366 nm) 0,3 - 1,0 g/24 horas
- Temperatura de reacción: temperatura ambiente Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios
- Tiempo de reacción: 10 minutos valores de referencia.
- Volumen de reacción final: 1,01 ml CONVERSION DE UNIDADES AL SISTEMA SI
Pi (mg/dl) x 0,323 = Pi (mmol/l)
PROCEDIMIENTO LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO

En tres cubetas marcadas B (Blanco), S (Standard) y D - Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
(Desconocido), agregar: - Todo el material de vidrio usado (incluso en la recolección
B S D de muestra) debe estar libre de fosfatos. Se recomienda,
para su limpieza, usar Noion de Wiener lab.
Standard - 10 ul - - Para lograr una mejor performance en los resultados, se re-
Muestra - - 10 ul comienda procesar un Blanco de Muestra con cada deter-
minación, reemplazando el Reactivo por solución fisioló-
Reactivo A 1 ml 1 ml 1 ml
gica. Este procedimiento es indispensable en el caso de
Incubar 10 minutos a temperatura ambiente. Luego leer muestras turbias, ictéricas, lipémicas o hemolizadas. La
en espectrofotómetro a 340 nm (Hg 334 ó 366 nm), absorbancia del Blanco de Muestra debe restarse de la
llevando el aparato a cero con el blanco. obtenida para el Desconocido para efectuar los cálculos.
PERFORMANCE
ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL Los ensayos fueron realizados en analizador automático
La reacción final es estable 20 minutos, por lo que la absor- Express Plus(*).
bancia debe ser leída en ese lapso. a) Reproducibilidad: procesando replicados de la misma
muestra, en un mismo día, se obtuvieron los siguientes datos:
Nivel D.S. C.V.
Suero o plasma:
3,6 mg/dl ± 0,09 mg/dl 2,64 %
Fósforo inorgánico (Pi) (mg/dl) = D x f 7,5 mg/dl ± 0,16 mg/dl 2,18 %
4 mg/dl Procesando la misma muestra en diferentes días, se obtuvo:
donde f =
S Nivel D.S. C.V.
Orina: 3,5 mg/dl ± 0,11 mg/dl 3,09 %
7,3 mg/dl ± 0,22 mg/dl 2,98 %
D D
Pi (g/24 horas) = x 0,040 x 10 x V = x 0,4 x V b) Recuperación: agregando cantidades conocidas de
S S fosfato inorgánico a distintas muestras, se obtuvo una recu-
donde: peración entre 98,4 y 103,5 %.
0,040 g/l = 4 mg/dl = concentración del Standard c) Linealidad: la reacción es lineal hasta 16 mg/dl. En caso
10 = factor de dilución de obtener valores de fósforo inorgánico superiores, debe
V = volumen de la diuresis expresado en litros/24 horas diluirse la muestra 1:2 con solución fisiológica y repetir la
determinación multiplicando por 2 el resultado obtenido.
METODO DE CONTROL DE CALIDAD d) Límite de detección: el menor cambio de concentración
Si la muestra a ensayar es suero, procesar 2 niveles de un detectable será de 0,11 mg/dl.
material de control de calidad (Standatrol S-E 2 niveles)
con concentraciones conocidas de fósforo, con cada deter- PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS
minación. En el caso de muestras de orina, utilizar un control Para las instrucciones de programación consulte el manual
con base de orina. del usuario del analizador en uso. Para la calibración debe
emplearse Calibrador A plus de Wiener lab.
Suero o plasma PRESENTACION
Adultos: 2,5 - 5,6 mg/dl - 1 x 100 ml (Cód. 1382321).
Este rango se obtuvo de muestras provenientes de 120 - 4 x 20 ml (Cód. 1009311).
(*)
- 6 x 20 ml (Cód. 1009256). SIMBOLOS
- 6 x 20 ml (Cód. 1009614). Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
BIBLIOGRAFIA
C
- Henry, R.J.; Cannon, D.C.; Winkelman, J.W. - "Clinical por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios
Chemistry, Principles and Techniques" - Harper and Row, para el diagnóstico "in vitro"
Publishers, 1974.
- Daly, J. A. and Ertingshausen - Clin. Chem. 18:263, 1972. P Representante autorizado en la Comunidad Europea
- Amador, E. and Urban, J. - Clin. Chem. 18:601, 1972.
- Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests", V Uso diagnóstico "in vitro"
 No congelar
F Riesgo biológico
Cont. Contenido
g Número de lote
M Elaborado por:
Xn
Nocivo
Xi
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
864121522 / 01 p. 3/9 UR120831
LINEA TURBITEST AA
FR
C Calibrador
Para la calibración de la determinación de factor reumatoideo
(FR) por métodos inmunoturbidimétricos
El FR Calibrador está diseñado para ser usado con los Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
reactivos inmunoturbidimétricos de Wiener lab. Consultar reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
el valor asignado en el rótulo, debido a que el mismo es Este producto cumple con los requerimientos previstos
lote específico. Dicho valor se encuentra estandarizado con
respecto al standard de la World Health Organization (WHO). C por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios

Calibrador: suero humano inactivado con alta concentra-
ción de factor reumatoideo, diluido en solución fisiológica
tamponada, con conservadores apropiados. Contenido suficiente para <n> ensayos

X
INSTRUCCIONES PARA SU USO Fecha de caducidad
H
PRECAUCIONES

Este calibrador ha sido preparado a partir de material no F Riesgo biológico
reactivo para HBsAg y HIV. Sin embargo debe manejarse
como si se tratara de una muestra infectiva.
Cont. Contenido
g Número de lote
Elaborado por:
M
Irritante
PRESENTACION
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
870520000 / 01 p. 1/3 UR120605
LINEA TURBITEST AA
FR
C látex
Para la determinación de factor reumatoideo

Los factores reumatoideos (FR) son un grupo heterogéneo de trabajo en el laboratorio de química clínica.
de autoanticuerpos dirigidos contra el fragmento Fc de la Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
IgG. Generalmente pertenecen al tipo IgM aunque también acuerdo a la normativa local vigente.
se han hallado FR de todos los tipos de inmunoglobulinas
(IgG, IgA, IgD e IgE). ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
Los FR se encuentran en un 70-80% de los pacientes adultos ALMACENAMIENTO
con artritis reumatoidea, en un 10% de jóvenes con artritis Reactivos Provistos: estables en refrigerador (2-10oC) has-
reumatoidea juvenil y en una variedad de otras enferme- ta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No congelar.
dades del tejido conectivo tales como: LES, síndrome de
Sjögrems, esclerosis sistémica, polimiositis, etc. MUESTRA
Los FR son los autoanticuerpos más comúnmente en- Suero o plasma
contrados en pacientes con artritis reumatoidea y por ello a) Recolección: obtener la muestra de la manera usual.
representan la determinación serológica más requerida para b) Aditivos: en caso de utilizar plasma, se recomienda el
el diagnóstico de dicha enfermedad. uso de heparina como anticoagulante.
Su hallazgo aislado no determina la presencia de la en- c) Sustancias interferentes conocidas: no emplear mues-
fermedad y es sólo uno de los tantos criterios necesarios tras hemolizadas, lipémicas o contaminadas.
(clínicos, radiológicos y de laboratorio) para el diagnóstico No se observan interferencias por bilirrubina hasta 20 mg/dl
de artritis reumatoidea. ni hemoglobina hasta 5 g/l.
FUNDAMENTOS DEL METODO drogas en el presente método.
Los factores reumatoideos presentes en la muestra son d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
capaces de aglutinar las partículas de látex recubiertas con muestra debe ser preferentemente fresca. En caso de no pro-
γ-globulina humana. La turbidez causada por la aglutinación cesarse en el momento, puede conservarse en refrigerador
de las partículas de látex es proporcional a la concentración (2-10oC) durante 2 días o congelada (-20oC) hasta 3 meses.
de FR en la muestra y puede ser medida espectrofotomé- Evitar los congelamientos y descongelamientos repetidos.
tricamente.
REACTIVOS PROVISTOS - Espectrofotómetro.
A. Reactivo A: solución buffer de glicina, pH 8,2. - Cubetas espectrofotométricas de caras paralelas.
B. Reactivo B: suspensión de partículas de látex de tamaño - Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados.
uniforme recubiertas con γ-globulina humana. - Tubos de Kahn o hemólisis.
- Reloj o timer.
- FR Calibrador Turbitest AA de Wiener lab. CONDICIONES DE REACCION
- Solución fisiológica - Longitud de onda: 600 nm
- Agua destilada - Temperatura de reacción: temperatura ambiente (< 25oC).
El control de la temperatura no es crítico, pudiendo oscilar
El Reactivo B debe ser homogeneizado varias veces por
inversión suave antes de usar.
PROCEDIMIENTO
PRECAUCIONES
Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro". CURVA DE CALIBRACION
El Reactivo B ha sido ensayado para HIV, HCV y HBV Realizar las siguientes diluciones del FR Calibrador Turbi-
encontrándose inactivo. No obstante, debe ser empleado test AA, empleando solución fisiológica como diluyente:
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1 2 3 4 5 6
FR (UI/ml) x 1 = FR (kUI/l)
FR Calibrador (ul) 100 80 60 40 20 0
Soluc. fisiológica (ul) - 20 40 60 80 100 LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
- La turbiedad y partículas en las muestras pueden interferir
Factor de dilución 1 0,8 0,6 0,4 0,2 0 con la prueba. Por lo tanto, las partículas que puedan
La concentración de FR de cada dilución se obtiene mul- resultar de una coagulación incompleta o de una desna-
tiplicando la concentración del FR Calibrador por el factor turalización de las proteínas, deben ser removidas por
de dilución correspondiente a cada dilución. centrifugación antes de proceder a su ensayo.
En tubos de Kahn rotulados de 1 a 6 colocar: - Es aconsejable que las muestras con una excesiva cantidad
de FR sean diluidas con solución fisiológica y ensayadas
FR Calibrador diluido (1 a 6) 20 ul nuevamente.
Reactivo A 600 ul
PERFORMANCE
Reactivo B 200 ul
a) Reproducibilidad: procesando simultáneamente 20 re-
Homogeneizar y disparar simultáneamente el cronómetro. plicados de una misma muestra, se obtienen los siguientes
Leer la absorbancia a 600 nm de cada tubo (1 a 6) a los valores:
30 segundos (DO1) y a los 5 minutos (DO2), llevando
Nivel D.S. C.V.
en cada lectura el aparato a cero con agua destilada.
23,3 UI/ml ± 0,24 UI/ml 1.01 %
Calcular la diferencia de absorbancia (∆A = DO2-DO1)
55,3 UI/ml ± 0,81 UI/ml 1,47 %
para cada dilución del FR Calibrador. Representar en
papel milimetrado las diferencias ∆A en función de la b) Rango dinámico: hasta 120 UI/ml para las condiciones
concentración en UI/ml del FR Calibrador. de ensayo descriptas en este manual.
PROCEDIMIENTO PARA MUESTRAS PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS
Las muestras deben procesarse sin dilución previa. Ver Referirse a las adaptaciones específicas de cada analizador.
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO.
Muestra 20 ul PRESENTACION
Reactivo A 600 ul
Homogeneizar y disparar simultáneamente el cronómetro. - 1 x 30 ml Reactivo A
Leer la absorbancia a 600 nm de cada muestra, a los 30 1 x 10 ml Reactivo B
segundos (DO1) y a los 5 minutos (DO2), llevando en cada (Cód. 1009302)
lectura el aparato a cero con agua destilada.
CALCULO DE LOS RESULTADOS (Cód. 1009222)
Calcular la diferencia de absorbancia (∆A = DO2-DO1) corres-
pondiente a cada muestra analizada. Interpolar esta ∆A en
la curva de calibración para determinar la concentración en
(Cód. 1009648)
UI/ml correspondiente a la muestra estudiada. La muestra
que posea una absorbancia superior a la absorbancia más
BIBLIOGRAFIA
alta del FR Calibrador, deberá ser diluida al 1:2 ó 1:4 con
- Moore, T. - Clin. Biochem. 26:75 (1993).
solución fisiológica y procesada nuevamente. Multiplicar el
- Henkel, E. - J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 22:919 (1984).
resultado obtenido por 2 o por 4 respectivamente.
Control Inmunológico nivel 1 Turbitest AA o Control
Inmunológico nivel 2 Turbitest AA de Wiener lab.
El control debe ser procesado de la misma manera que las
muestras.
0 - 20 UI/ml

referencia.
870530000 / 03 p. 2/6
Símbolos
C
M Elaborado por:

Europea Nocivo

Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870530000 / 03 p. 3/6 UR120903
LINEA LIQUIDA
Fructosamina
AA
C Método colorimétrico (NBT) para la determinación de
fructosamina en suero o plasma
SIGNIFICACION CLINICA aforo. Tapar y mezclar suavemente por inversión. No agitar.

La patología más común relacionada con el metabolismo de Dejar reposar unos 60 minutos a temperatura ambiente,
los hidratos de carbono es la diabetes mellitus. El diagnóstico mezclando por inversión ocasionalmente. Fechar. Inmedia-
precoz y el control de los pacientes diabéticos, tienen por tamente antes de usar, homogeneizar por inversión.
objeto evitar la cetoacidosis y las complicaciones resultan-
tes de la hiperglicemia, mediante el tratamiento adecuado. PRECAUCIONES
Dado que existen múltiples factores causales de hiper- o Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
hipoglicemia, debe considerarse en cada caso la condición Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
fisiológica y/o la patología presente en el paciente. de trabajo en el laboratorio de química clínica.
Las proteínas glicosiladas (fructosaminas) se forman por Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
enlace covalente de la glucosa con residuos lisina de las acuerdo a la normativa local vigente.
proteínas sanguíneas (principalmente albúmina) dando lugar
a bases de Schiff que en una segunda etapa son transfor- ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
madas irreversiblemente en cetoaminas (fructosaminas). ALMACENAMIENTO
Esta reacción es dependiente de la concentración de glucosa Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10oC)
sanguínea y del tiempo de interacción con las proteínas. hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. Conservar
Las fructosaminas permanecen en sangre actuando como el Reactivo A al abrigo de la luz.
"memoria glicémica" hasta ser metabolizadas de manera Standard reconstituido: estable 15 días en refrigerador
análoga a las demás proteínas del suero. Como consecuen- (2-10oC) o 45 días congelado (-20oC) y alicuotado.
cia, la concentración de fructosamina representa en forma
retrospectiva, un índice de la media de las fluctuaciones de MUESTRA
la concentración de glucosa sanguínea, dos a tres semanas Suero o plasma
previas a la realización del análisis. a) Recolección: se debe obtener suero de la manera
usual o plasma con heparina o EDTA. Ver VALORES DE
FUNDAMENTOS DEL METODO REFERENCIA.
El método se basa en la propiedad del grupo cetoamino b) Sustancias interferentes conocidas: las muestras con
de las proteínas glicosiladas de reducir la sal de tetrazolio hemólisis visible o intensa no pueden ser empleadas. No se
(NBT) en medio alcalino, a formazán, el cual se mide co- observan interferencias por triglicéridos hasta 10 g/dl, bilirrubina
lorimétricamente a 530 nm. La velocidad de formación del hasta 20 mg/l, ácido úrico hasta 150 mg/l y hemólisis ligera.
formazán es directamente proporcional a la concentración Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
de fructosamina presente en la muestra. drogas en el presente método.
c) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: las
REACTIVOS PROVISTOS muestras deben ser preferentemente frescas. En caso
A. Reactivo A: solución conteniendo nitroblue tetrazolio de no procesarlas en el momento, pueden conservarse
(NBT) 0,25 mmol/l en buffer carbonato 0,2 mol/l. hasta 7 días refrigeradas (2-10oC) o 2 meses congeladas
S. Standard*: liofilizado conteniendo proteínas glicosiladas (-20oC).
de origen animal, en una concentración entre 200 - 700 umol/l
de albúmina glicosilada (1,7 - 6,1 mmol/l de DMF, desoxi- MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
morfolinofructosa). La concentración, variable lote a lote, - Espectrofotómetro o fotocolorímetro.
figura en el rótulo. - Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados.
REACTIVOS NO PROVISTOS - Baño de agua a 37oC.
Agua bidestilada o desionizada. - Reloj o timer.

Reactivo A: listo para usar. - Longitud de onda: 530 nm en espectrofotómetro o en
Standard: reconstituir con 1 ml de agua destilada medida fotocolorímetro con filtro verde (490 - 530 nm).
exactamente con micropipeta de precisión o pipeta de doble - Temperatura de reacción: 37oC

- Tiempo de reacción: 15 minutos PERFORMANCE
- Volumen de muestra: 50 ul a) Reproducibilidad: procesando simultáneamente 20
- Volumen final de reacción: 1,05 ml replicados de las mismas muestras, se obtuvieron los si-
Los volúmenes de Muestra y Reactivo A pueden variarse guientes datos:
proporcionalmente (ej.: 100 ul Muestra + 2 ml Reactivo A). Nivel C.V.
265 umol/l (2,3 mmol/l) 1,3 %
731 umol/l (6,3 mmol/l) 0,7 %
PROCEDIMIENTO
En dos tubos marcados S (Standard) y D (Desconocido) b) Linealidad: la reacción es lineal hasta 800 umol/l (7 mmol/l
colocar: DMF). Para valores superiores, diluir al 1/2 la solución colo-
reada final con el Reactivo y repetir la lectura multiplicando
S D
el resultado final por 2.
Standard 50 ul - c) Recuperación: agregando cantidades conocidas de fruc-
Muestra - 50 ul tosamina a distintas muestras se obtuvo una recuperación
entre el 95 y el 99,6%.
Reactivo A 1 ml 1 ml d) Sensibilidad analítica: basada en una lectura mínima del
Mezclar bien y colocar en baño de agua a 37 C. Disparar
o instrumento de 0,001 D.O., el mínimo cambio de concentra-
inmediatamente el cronómetro. Leer la absorbancia de la ción detectable en estas condiciones será aproximadamente
Muestra y del Standard a los 10 minutos (S1 o D1) y a los 35 umol/l de albúmina glicosilada.
15 minutos (S2 o D2) en espectrofotómetro a 530 nm o en
fotocolorímetro con filtro verde (490-530 nm) llevando el PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS
aparato a cero con agua destilada. Para las instrucciones de programación debe consultarse el
Manual del Usuario del analizador en uso.

La diferencia de absorbancia entre las dos lecturas es pro- - 2 x 50 ml (Cód. 1400050).
porcional a la concentración de fructosamina, por lo tanto el - 4 x 20 ml (Cód. 1009281).
cálculo es el siguiente: - 4 x 20 ml (Cód. 1009381).
- 4 x 20 ml (Cód. 1009615).
fructosamina (umol/l o mmol/l) = (D2 - D1) x f
C* BIBLIOGRAFIA
f=
S2 - S1 - Ambruster, D.A. - Clin. Chem. 33/12:2153 (1987).

- Baker, J.R. - Clin. Chem. 31/9:1550 (1985).
* Concentración del Standard en umol/l (albúmina glicosilada) - Scheicher, E.D. and Vogt, B.W. - Clin. Chem. 36/1:136
o mmol/l (DMF) (1990).
METODO DE CONTROL DE CALIDAD AACC Press, 4th ed., 2001.
Fructosamina Control 2 niveles de Wiener lab.
205 - 285 umol/l (albúmina glicosilada)
1,9 - 2,9 mmol/l (DMF)
valores de referencia teniendo en cuenta edad, sexo, hábitos
alimenticios y otros factores.
Se pueden observar valores disminuidos en pacientes con
pérdidas elevadas de albúmina o en enfermedades del
catabolismo proteico.
Se ha encontrado que los niveles de fructosamina plasmática
son levemente inferiores a los de fructosamina sérica.

Los reductores disminuyen la respuesta de color, mientras que
los oxidantes colorean el Reactivo aumentado los Blancos.
Se recomienda realizar una recalibración semanal o cada
vez que se obtengan valores fuera del rango aceptable de
los controles (Fructosamina Control 2 niveles).
864122000 / 03 p. 2/6
Símbolos
C
M Elaborado por:

Europea Nocivo

Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
864122000 / 03 p. 3/6 UR150729
Fructosamina
Lote: 1408146710 (Exp.: 2016/02)
Para control de precisión
Nivel 1: 146710 (Exp.: 2016/02)
Nivel 2: 146710 (Exp.: 2016/02)
APLICACIONES LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO

Para estudio de precisión intralaboratorial en la determina- Ver LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO en el manual
ción de fructosamina en suero o plasma utilizando el kit de de instrucciones que acompaña al equipo de Fructosamina
Fructosamina AA líquida de Wiener lab. AA líquida de Wiener lab.
REACTIVOS PROVISTOS PRESENTACION

Control Nivel 1: solución conteniendo fructosamina en con- - 2 x 5 ml (1 x 5 ml nivel 1 + 1 x 5 ml nivel 2) (Cód. 1400053)
centraciones entre 200 y 400 umol/l (1,7 y 3,5 mmol/l de DMF,
desoximorfolinofructosa), con conservantes apropiados. Los
valores son variables lote a lote.
Control Nivel 2: solución conteniendo fructosamina en con-
centraciones entre 400 y 800 umol/l (3,5 y 7 mmol/l de DMF,
PRECAUCIONES

ALMACENAMIENTO

REACTIVOS
Cualquier variación de los caracteres organolépticos de los
controles, puede ser indicio de deterioro de los mismos.

Ver manual de instrucciones de Fructosamina AA líquida
de Wiener lab.
PROCEDIMIENTO
Se deben emplear de la misma manera que una muestra
desconocida, de acuerdo a las instrucciones que acom-
pañan al kit de Fructosamina AA líquida de Wiener lab.
Los valores asignados para cada nivel se encuentran
indicados en la tabla adjunta.
870540000 / 29 p. 1/6
VALORES ASIGNADOS DE FRUCTOSAMINA PARA TECNICA MANUAL Y ANALIZADORES
TECNICA / NIVEL 1 NIVEL 2
ANALIZADOR
VALOR MEDIO RANGO VALOR MEDIO RANGO
Konelab Series / 291 umol/L 233 349 512 umol/L 410 615
Wiener lab, CT Series 2,5 mmol/L (DMF) 2,0 3,0 4,5 mmol/L (DMF) 3,6 5,4
Selectra 1 / 2 / E 291 umol/L 233 349 512 umol/L 410 615

2,5 mmol/L (DMF) 2,0 3,0 4,5 mmol/L (DMF) 3,6 5,4
Targa BT 3000 277 umol/L 221 332 546 umol/L 437 655
Metrolab 2300 plus / 279 umol/L 223 335 541 umol/L 433 649
Wiener lab. CM Series 2,4 mmol/L (DMF) 1,9 2,9 4,7 mmol/L (DMF) 3,8 5,7
BT 3000 plus / 277 umol/L 221 332 546 umol/L 437 655
Wiener lab. CB Series 2,4 mmol/L (DMF) 1,9 2,9 4,8 mmol/L (DMF) 3,8 5,7
293 umol/L 234 351 521 umol/L 417 626
CMD 800 Series
Técnica Manual 251 umol/L 201 301 645 umol/L 516 774
870540000 / 29 p. 2/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870540000 / 29 p. 3/6 UR140903
Fructosamina
Lote: 1410150780 (Exp.: 2016/04)
Nivel 1: 150780 (Exp.: 2016/04)
Nivel 2: 150780 (Exp.: 2016/04)


PRECAUCIONES

ALMACENAMIENTO

REACTIVOS

de Wiener lab.
PROCEDIMIENTO
870540000 / 30 p. 1/6
ANALIZADOR

289 umol/L 231 347 483 umol/L 386 579
CMD 800 Series
870540000 / 30 p. 2/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870540000 / 30 p. 3/6 UR141111
Fructosamina
Lote: 1504164410
Nivel 1: 164410
Nivel 2: 164410


PRECAUCIONES

ALMACENAMIENTO

REACTIVOS

de Wiener lab.
PROCEDIMIENTO
870540000 / 31 p. 1/6
ANALIZADOR

272 umol/L 218 326 532 umol/L 426 638
CMD 800 Series
870540000 / 31 p. 2/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870540000 / 31 p. 3/6 UR150511
Fructosamina
Lote: 1506168280
Nivel 1: 168280
Nivel 2: 168280


PRECAUCIONES

ALMACENAMIENTO

REACTIVOS

de Wiener lab.
PROCEDIMIENTO
870540000 / 32 p. 1/6
ANALIZADOR

276 umol/L 221 331 459 umol/L 367 551
CMD 800 Series
870540000 / 32 p. 2/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870540000 / 32 p. 3/6 UR150703
Fructosamina
Lote: 1512180320
Nivel 1: 180320
Nivel 2: 180320


PRECAUCIONES

ALMACENAMIENTO

REACTIVOS

de Wiener lab.
PROCEDIMIENTO
870540000 / 33 p. 1/6
ANALIZADOR

280 umol/L 224 336 455 umol/L 364 546
CMD 800 Series
870540000 / 33 p. 2/6
Símbolos
C
M Elaborado por:

Europea Nocivo

Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870540000 / 33 p. 3/6 UR151215
LINEA LIQUIDA
γ-G-test
C cinética AA
Método (Szasz modificado) para la determinación de
γ-glutamil transferasa en suero o plasma.
Sustrato recomendado por la IFCC.

La γ-glutamil transferasa (γ-GT) es una enzima de membrana ALMACENAMIENTO
ampliamente distribuida en el organismo. Se localiza princi- Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10oC)
palmente en riñón, vesículas seminales, páncreas, hígado, hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
bazo y cerebro. Su actividad es influenciada por cualquier Reactivo único (premezclado): estable 4 semanas en refri-
factor que afecte a las membranas celulares de los órganos gerador (2-10oC). Proteger de la luz.
que la contienen.
En el caso de alteraciones hepáticas, la γ-GT generalmente INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
es índice de agresión tóxica. Sin embargo, la determinación REACTIVOS
sólo tiene valor clínico cuando sus valores son comparados Cuando el espectrofotómetro ha sido llevado a cero con
con los de otras enzimas de mayor órgano-especificidad. agua destilada, lecturas de absorbancia del Reactivo único
El análisis conjunto de γ-GT, fosfatasas alcalina, transami- superiores a 1,300 D.O. son indicio de deterioro del mismo.
nasas y bilirrubina, amplía significativamente el panorama
del diagnóstico diferencial de las enfermedades hepáticas MUESTRA
primarias y secundarias, formando parte del hepatograma. Suero o plasma
FUNDAMENTOS DEL METODO b) Aditivos: en caso de emplear plasma, se recomienda el
La γ-glutamil transferasa es una carboxipeptidasa que cata- uso de EDTA como anticoagulante para su obtención.
liza la siguiente reacción: c) Sustancias interferentes conocidas:
γ-GT No se observan interferencias por bilirrubina hasta 280 mg/l
L-γ-glutamil-3-carboxi-4-nitroanilida + glicilglicina (28 mg/dl), triglicéridos hasta 5,4 g/l (540 mg/dl) ni hemog-
L-γ-glutamilglicilglicina + 5-amino-2-nitrobenzoato lobina hasta 0,39 g/dl (390 mg/dl).
A. Reactivo A: solución de buffer Tris conteniendo glicil- d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
glicina. γ-GT en suero es estable hasta 2 semanas en refrigerador
B. Reactivo B: solución de L-γ-glutamil-3-carboxi-4-nitro-anilida. (2-10oC) y hasta 6 meses congelada (- 20oC).
Concentraciones finales MATERIAL REQUERIDO (no provisto)

buffer Tris............................................... 100 mmol/l; pH 8,5 - Espectrofotómetro.
L-γ-glutamil-3-carboxi-4-nitroanilida................. > 2,9 mmol/l - Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados.
glicilglicina.......................................................... 100 mmol/l - Cubetas espectrofotométricas de caras paralelas.
- Baño de agua a la temperatura de reacción seleccionada.
REACTIVOS NO PROVISTOS - Cronómetro.
Solución fisiológica (NaCl 9 g/l).
INSTRUCCIONES PARA SU USO - Longitud de onda: 405 nm
Reactivos Provistos: listos para usar. Estos pueden usarse - Temperatura de reacción: 25, 30 ó 37oC
separados o como Reactivo único, mezclando 4 partes de - Tiempo de reacción: 3 minutos
Reactivo A con 1 parte de Reactivo B (ej.: 4 ml Reactivo A - Volumen de muestra: 100 ul
+ 1 ml Reactivo B). - Volumen de Reactivo único: 1 ml
PRECAUCIONES
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales PROCEDIMIENTO
de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos. En una cubeta mantenida a la temperatura seleccionada
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de colocar:
861267500 / 03 p. 1/6
de caras paralelas de 1 cm de espesor, para un ∆A/min de
Reactivo único 1 ml
0,001 el mínimo cambio de actividad detectable será 1 U/l.
Muestra 100 ul PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS
Mezclar rápidamente y proseguir de inmediato la incu- del usuario del analizador en uso.
bación disparando simultáneamente el cronómetro. Re-
gistrar la absorbancia a los 1, 2 y 3 minutos. Determinar PRESENTACION
la diferencia promedio de absorbancia (∆A/min) restando 100 ml: - 4 x 20 ml Reactivo A
cada lectura de la anterior y promediando los valores. - 1 x 20 ml Reactivo B
Utilizar este promedio para los cálculos. (Cód. 1421404)
CALCULO DE LOS RESULTADOS - 1 x 20 ml Reactivo B
(Cód. 1009330)
γ-glutamil transferasa (U/l) = ∆A/min x 1.158
CONVERSION DE UNIDADES AL SISTEMA SI - 1 x 20 ml Reactivo B
γ-GT (U/l) x 0,017 = γ-GT (ukat/l) (Cód. 1009258)
METODO DE CONTROL DE CALIDAD - 2 x 12,5 ml Reactivo B
γ-glutamil transferasa, con cada determinación. BIBLIOGRAFIA
- Lum, G.; Gambino, S.R. - Clin. Chem. 18:358 (1972).
VALORES DE REFERENCIA - Burrows, S.; Feldman, W.; McBride, F. - Am. J. Clin. Path.
Temperatura 25oC 30oC(*) 37oC(*) 64/3:311 (1975).
Hombres 6-28 U/l 8-38 U/l 11-50 U/l - Szasz, G. - Clin. Chem. 15/2:124 (1969).
Mujeres 4-18 U/l 5-25 U/l 7-32 U/l - S.S.C.C. - Scand. J. Clin. Lab. Invest. 36:119 (1976).
(*)
Calculados - Szasz G.; Weinmann G.; Staler F.; Wahlefeld W.; Persijn
J. - Z. Klin. Chem. Biochem. 12:229 (1974).
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO - I.F.C.C. - J. Clin Chem. Clin. Biochem. 21: 633 (1983).
Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA. - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
PERFORMANCE - CLSI: Clinical and Laboratory Standards Institute (ex-
a) Reproducibilidad: se aplicó el protocolo EP-15A del NCCLS) - Protocols EP-15A, 2001 / EP-17A, 2004
CLSI. Se analizaron dos niveles de actividad, cada uno por
calcularon las precisiones intraensayo y total.
Nivel D.S. C.V.
37,0 U/l ± 0,45 U/l 1,21 %
160,8 U/l ± 0,90 U/l 0,56 %
Nivel D.S. C.V.
37,0 U/l ± 1,10 U/l 2,98 %
160,8 U/l ± 3,69 U/l 2,29 %
c) Linealidad: manualmente, la reacción es lineal hasta un
∆A/min de 0.200 D.O. (250 U/l). Para valores superiores,
diluir la muestra 1/5 ó 1/10 con solución fisiológica y repetir
la determinación, respetando las mismas condiciones de
ensayo y multiplicando los resultados por la dilución efec-
tuada. En analizadores automáticos puede observarse una
linealidad hasta 1200 U/l.
d) Sensibilidad analítica: depende del fotómetro empleado
y de la longitud de onda. En espectrofotómetros con cubetas
861267500 / 03 p. 2/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
861267500 / 03 p. 3/6 UR120831
γ-G-test
cinética AA
C Método (Szasz modificado) para la determinación de
γ-glutamil transferasa en suero o plasma.
Sustrato recomendado por la IFCC.
SIGNIFICACION CLINICA hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.

La γ-glutamil transferasa (γ-GT) es una enzima de membrana am- Reactivo A reconstituido: es estable 21 días en refrigerador
pliamente distribuida en el organismo. Se localiza principalmente (2-10oC) y 3 días a temperatura ambiente.
en riñón, vesículas seminales, páncreas, hígado, bazo y cerebro.
Su actividad es influenciada por cualquier factor que afecte INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
a las membranas celulares de los órganos que la contienen. REACTIVOS
En el caso de alteraciones hepáticas, la γ-GT generalmente La presencia de sedimento y/o cambio de coloración de los
es índice de agresión tóxica. Sin embargo, la determinación reactivos, pueden ser indicio de deterioro de los mismos.
sólo tiene valor clínico cuando sus valores son comparados
con los de otras enzimas de mayor órgano-especificidad. MUESTRA
El análisis conjunto de γ-GT, fosfatasa alcalina, transami- Suero o plasma
nasas y bilirrubina, amplía significativamente el panorama a) Recolección: se debe obtener de la manera usual.
del diagnóstico diferencial de las enfermedades hepáticas b) Aditivos: en caso de que la muestra a emplear sea
primarias y secundarias, formando parte del hepatograma. plasma, se recomienda el uso de EDTA como anticoagulante
para su obtención.
FUNDAMENTOS DEL METODO c) Sustancias interferentes conocidas:
La γ-glutamil transferasa es una carboxipeptidasa que cata- - Los anticoagulantes que contienen citrato, fluoruro u oxalato
liza la siguiente reacción: producen una leve inhibición de la actividad enzimática,
L-γ-glutamil-3-carboxi-4-nitroanilida + glicilglicina > mientras que la heparina produce interferencia.
L-γ-glutamilglicilglicina + 5-amino-2-nitrobenzoato - Los sueros con ictericia, hemólisis (moderada o intensa)
o hiperlipemia producen valores falsamente aumentados.
REACTIVOS PROVISTOS Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
A. Reactivo A: viales conteniendo L-γ-glutamil-3-carboxi-4- drogas en el presente método.
nitro-anilida y glicilglicina. d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
B. Reactivo B: solución de buffer Tris 100 mmol/l para pH γ-GT en suero es estable hasta 2 semanas en refrigerador
final de 8,25 a 25oC. (2-10oC) y hasta 6 meses en congelador (- 4oC), sin agregado
de conservadores.
Concentraciones finales
buffer Tris............................................................ 100 mmol/l MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
L-γ-glutamil-3-carboxi-4-nitroanilida.................... 2,9 mmol/l - Espectrofotómetro.
glicilglicina.......................................................... 100 mmol/l - Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados.
INSTRUCCIONES PARA SU USO - Baño de agua a la temperatura de reacción seleccionada.
Reactivo B: listo para usar. - Cronómetro.
Reactivo A; preparación: reconstituir el Reactivo A con la
cantidad de Reactivo B indicada en el rótulo. Tapar y agitar CONDICIONES DE REACCION
hasta dilución completa. - Longitud de onda: 405 nm
- Temperatura de reacción: 25, 30 ó 37oC
Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro". - Volumen de muestra: 100 ul
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales - Volumen de Reactivo A: 1 ml
de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos. - Volumen final de reacción: 1,1 ml
PROCEDIMIENTO
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE En una cubeta mantenida a la temperatura seleccionada
ALMACENAMIENTO colocar:
870550022 / 01 p. 1/9
Nivel D.S. C.V.
69,9 U/l ± 1,13 U/l 1,62%
Preincubar unos minutos. Luego agregar: 188,6 U/l ± 1,34 U/l 0,71%
Muestra 100 ul b) Límite de detección: depende del fotómetro empleado.
Mezclar rápidamente y proseguir de inmediato la incu- De acuerdo con la sensibilidad requerida, en espectrofotó-
bación. Ajustar la absorbancia a un valor de referencia metro a 405 nm (con cubetas de caras paralelas de 1 cm
(0,200 ó 0,300 D.O.) y disparar simultáneamente el cro- de espesor, reproducibilidad ± 2 nm, luz espuria ≤ 0,5 %,
nómetro. Registrar la absorbancia a los 1, 2 y 3 minutos. semiancho de banda ≤ 8 nm) para un ∆A/min de 0,001 el
Determinar la diferencia promedio de absorbancia (∆A/ mínimo cambio de actividad detectable será de 1,2 U/l.
min) restando cada lectura de la anterior y promediando c) Linealidad: la reacción es lineal hasta 250 U/l. Para
los valores. Utilizar este promedio para los cálculos. valores superiores, diluir la muestra 1/5 ó 1/10 con solución
fisiológica y repetir la determinación, respetando las mismas
condiciones de ensayo y multiplicando los resultados por la
dilución efectuada.
γ-glutamil transferasa (U/l) = ∆A/min x 1.158
γ-GT (U/l) x 0,017 = γ-GT (ukat/l)
PRESENTACION
Procesar 2 niveles de un material de control de calidad - 3 x 20 ml (60 ml Reactivo B) (Cód. 1421402).
(Standatrol S-E 2 niveles) con actividades conocidas de - 20 x 3 ml (60 ml Reactivo B) (Cód. 1421403).
γ-glutamil transferasa, con cada determinación.
BIBLIOGRAFIA
VALORES DE REFERENCIA - Lum, G.; Gambino, S.R. - Clin. Chem. 18:358 (1972).
- Rosalki, S.B.; Rav, O. - Clin. Chim. Acta 39:41(1972).
Temperatura 25oC 30oC* 37oC* - Rosalki, S.B.; Tarlow, D. - Lancet II, 376 (1971).
Hombres 6-28 U/l 8-38 U/l 11-50 U/l - Burrows, S.; Feldman, W.; McBride, F. - Am. J. Clin. Path.
Mujeres 4-18 U/l 5-25 U/l 7-32 U/l 64/3:311 (1975).
*Calculados - Szasz, G. - Clin. Chem. 15/2:124 (1969).
Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios - Fuke, H. et al. - Clin. Chim. Acta 69:43 -51 (1976).
valores de referencia. - Lugg, G.A. - Anal. Chem. 35/7:899 (1963).
Valores frecuentes en diversas afecciones - Szasz G.; Weinmann G.; Staler F.; Wahlefeld W.; Persijn
J. - Z. Klin. Chem. Biochem. 12:229 (1974).
Aumento (no de veces) - I.F.C.C. - J. Clin Chem. Clin. Biochem. 21: 633 (1983).
Patología sobre el límite - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
superior de referencia AACC Press, 4th ed., 2001.
Cirrosis hepática 1,5 a 15
Hepatitis aguda 2 a 20
Hepatitis crónica 3 a 20
Hígado graso hasta 10
Obstr. extrahepática c/ ictericia 1,5 a 20
Obstr. extrahepática s/ ictericia hasta 20
Metástasis de hígado hasta 40
Alcoholismo crónico 1,5 a 10

Tanto la temperatura como el tiempo de reacción son críticos.
Por cada grado de aumento o disminución de la temperatura,
la variación en los resultados es aproximadamente del 5%
en más o en menos.
PERFORMANCE
muestras en un mismo día, se obtuvieron los siguientes
datos:
870550022 / 01 p. 2/9
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
Disp. Nº: 1287/77-5234/98-
794/02-3114/12 2000 Rosario - Argentina
870550022 / 01 p. 3/9 UR140909
LINEA LIQUIDA
Glicemia
C enzimática AA
Para la determinación de glucosa en suero, plasma,
orina o líquido cefalorraquídeo

La patología más común relacionada con el metabolismo de REACTIVOS
los hidratos de carbono es la diabetes mellitus. El diagnóstico Durante el uso, el Reactivo A puede colorearse ligeramente
precoz y el control de los pacientes diabéticos, tienen por no afectando su funcionamiento siempre que se procese
objeto evitar la cetoacidosis y las complicaciones resultantes un Blanco con cada lote de determinaciones y un Standard
de la hiperglicemia, mediante el tratamiento adecuado. periódicamente. Desechar cuando las lecturas del Blanco
Dado que existen múltiples factores causales de hiper o sean superiores a 0,160 D.O.
hipoglicemia, debe considerarse en cada caso la condición
fisiológica y/o la patología presente en el paciente. MUESTRA
Suero, plasma, orina o líquido cefalorraquídeo (LCR)
FUNDAMENTOS DEL METODO a) Recolección:
El esquema de reacción es el siguiente: - Suero o plasma: se debe obtener suero de la manera usual
GOD o plasma recolectado con anticoagulantes comunes.
glucosa + O2 + H2O ácido glucónico + H2O2 - Orina: si se trata de una muestra aislada, utilizar prefe-
rentemente orina fresca. En caso de no poder realizar
POD
el ensayo de forma inmediata, conservar la muestra en
2 H2O2 + 4-AF + 4-hidroxibenzoato quinonimina roja
refrigerador (2-10oC). Puede realizarse el ensayo en orina
de 24 horas. En este caso, recolectar la muestra en un
REACTIVOS PROVISTOS
recipiente oscuro conteniendo 5 ml de ácido acético glacial
S. Standard*: solución de glucosa 100 mg/dl (1 g/l).
y conservarlo en hielo.
A. Reactivo A: solución conteniendo glucosa oxidasa
- LCR: en caso de utilizar LCR, el ensayo debe realizarse en
(GOD), peroxidasa (POD), 4-aminofenazona (4-AF), buffer
forma inmediata a la obtención de la muestra.
fosfatos pH 7,0 y 4-hidroxibenzoato en las siguientes con-
centraciones:
plasma, se recomienda el uso de Anticoagulante G (EDTA/
GOD (microbiana)................................................. ≥ 10 kU/l fluoruro) para su obtención.
POD (rábano).......................................................... ≥ 1 kU/l c) Sustancias interferentes conocidas: no se observan
4-AF..................................................................... 0,5 mmol/l interferencias por: bilirrubina hasta 10 mg/dl, triglicéridos
Fosfatos................................................. 100 mmol/l, pH 7,0 hasta 500 mg/dl y hemoglobina hasta 350 mg/dl. El ácido
Hidroxibenzoato................................................... 12 mmol/l ascórbico interfiere en la determinación en orina en cualquier
concentración.
Calibrador A plus de Wiener lab. drogas en el presente método.
INSTRUCCIONES PARA SU USO destrucción enzimática de la glucosa sanguínea (glucólisis)
Reactivos Provistos: listos para usar. por hematíes y leucocitos es proporcional a la temperatura a
la que se conserva la sangre, siendo máxima a 37oC. Este
PRECAUCIONES proceso no se inhibe aún en estado de congelación, por lo
Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro". que la sangre debe centrifugarse dentro de las 2 horas de la
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales extracción. El sobrenadante límpido se transfiere a otro tubo
de trabajo en el laboratorio de química clínica. para su conservación. De esta forma la glucosa es estable
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de 4 horas a temperatura ambiente o 24 horas refrigerada. En
acuerdo a la normativa local vigente. caso de no poder procesarse la muestra de la forma indi-
cada, deberá adicionarse un conservador en el momento
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE de la extracción.
ALMACENAMIENTO El LCR puede contaminarse con bacterias y otras células
Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10oC) por lo que la determinación debe realizarse de inmediato.
hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No man- En caso de no poder procesarse de esta manera, centrifugar
tener a temperaturas elevadas durante lapsos prolongados. el LCR y conservarlo 3 días a 2-10oC o 5 horas a 20-25oC.

MATERIAL REQUERIDO (no provisto) En la literatura (Tietz, N.W.) se menciona el siguiente rango
- Espectrofotómetro o fotocolorímetro. de referencia:
Suero o plasma
-Tubos o cubetas espectrofotométricas de caras paralelas.
Adultos: 74 - 106 mg/dl (4,11 - 5,89 mmol/l)
Niños: 60 - 100 mg/dl (3,33 - 5,55 mmol/l)
- Reloj o timer.
Neonatos: 1 día: 40 - 60 mg/dl (2,22 - 3,33 mmol/l)
mayor a 1 día: 50 - 80 mg/dl (2,78 - 4,44 mmol/l)
- Longitud de onda: 505 nm en espectrofotómetro o en Orina aislada fresca
fotocolorímetro con filtro verde (490-530 nm). 1 - 15 mg/dl (0,06 - 0,83 mmol/l)
- Temperatura de reacción: 37oC Orina de 24 horas
- Tiempo de reacción: 5 minutos < 0,5 g/24 hs (< 2,78 mmol/24 hs)
- Volumen de Reactivo A: 1 ml LCR
- Volumen final de reacción: 1,01 ml Niños: 60 - 80 mg/dl (3,33 - 4,44 mmol/l)
Los volúmenes de Muestra y de Reactivo A pueden Adultos: 40 - 70 mg/dl (2,22 - 3,89 mmol/l)
variarse proporcionalmente (Ej.: 20 ul Muestra + 2 ml Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios
Reactivo A). valores de referencia, teniendo en cuenta sexo, edad hábitos
PROCEDIMIENTO CONVERSION DE UNIDADES AL SISTEMA SI

En tres tubos marcados B (Blanco) S (Standard) y D Glucosa (mg/dl) x 0,0555 = Glucosa (mmol/l)
(Desconocido) colocar: Glucosa (g/24 horas) x 55,5 = Glucosa (mmol/24 hs)
B S D
Standard - 10 ul -
Muestra - - 10 ul
Reactivo A 1 ml 1 ml 1 ml PERFORMANCE
Los ensayos fueron realizados en analizador automático
o
Express Plus(*).
a 15-25oC. Luego leer en espectrofotómetro a 505 nm o a) Reproducibilidad: procesando 20 replicados de una
en fotocolorímetro con filtro verde (490-530 nm) llevando misma muestra en 5 días diferentes, se obtuvo:
el aparato a cero con el blanco.
Nivel D.S. C.V.
ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL 90,7 mg/dl ± 1,26 mg/dl 1,39 %
El color de reacción final es estable 30 minutos, por lo que 278 mg/dl ± 3,08 mg/dl 1,11 %
Precisión interensayo
100 mg/dl 90,1 mg/dl ± 1,73 mg/dl 1,92 %
glucosa (mg/dl) = D x f f= 299 mg/dl ± 4,86 mg/dl 1,62 %
S
METODO DE CONTROL DE CALIDAD glucosa a distintos sueros, se obtuvo una recuperación
Procesar 2 niveles de un material de control de calidad entre 99 y 101%.
(Standatrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas c) Linealidad: la reacción es lineal hasta 500 mg/dl. Para
de glucosa, con cada determinación. valores superiores, diluir la muestra con solución salina
y repetir el ensayo, multiplicando el resultado final por el
VALORES DE REFERENCIA factor de dilución.
Se analizaron con Glicemia enzimática AA líquida, 120 d) Correlación: se determinó el valor de glucosa en 154 mues-
muestras de individuos en ayunas, de ambos sexos, con tras de suero en un rango comprendido entre 23 y 503 mg/dl,
edades comprendidas entre 20 y 45 años, provenientes de con Glicemia enzimática AA líquida de Wiener lab. y un kit
la ciudad de Rosario (Argentina), sin síntomas de diabetes comercial basado en el mismo principio, obteniéndose el
o cualquier otra enfermedad aparente. Se encontró que el siguiente coeficiente de correlación:
95% de los resultados cubrieron el siguiente rango: r = 0,9997; pendiente b =1, 0257; intersección a = 1,9485
e) Sensibilidad: el mínimo límite de detección es 0,54 mg/dl
Suero o plasma: 70 a 110 mg/dl y la sensibilidad analítica es de 4,2 mg/dl.
(*)
Manual del Usuario del Analizador en uso. reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
Para la calibración puede emplearse Calibrador A plus de
Wiener lab., de acuerdo a los requerimientos del analizador. Este producto cumple con los requerimientos previstos
PRESENTACION
- 4 x 250 ml (Cód. 1400060).
- 6 x 60 ml (Cód. 1009313).
- 6 x 60 ml (Cód. 1009617).
- 12 x 50 ml (Cód. 1009260).

BIBLIOGRAFIA
- Henry, R.J. et.al. - Clinical Chemistry, Principles and H Fecha de caducidad
Techniques, 2nd. ed., Harper and Row Pub. Inc. N.Y. p.
1288 (1974). l Límite de temperatura (conservar a)
- Lott, J.A. and Turner, K. - Clin. Chem. 21:1754-1760 (1975).
- Trinder, P. - Ann. Clin. Biochem. 6/24 (1969).  No congelar
AACC Press, 4th ed., 2001. F Riesgo biológico
- Ziegenhorn, J.; Newman, U.; Hegen, A. - J. Clin. Chem.
Clin. Biochem. 15/1:13 (1977).
- Caraway - Stand. Meth. Clin. Chem. 4:240 (1963). Cont. Contenido
- Burtis - Ashwood. Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry,
W.B. Saunders Co., fifth edition, United States of America, g Número de lote
2001.
Elaborado por:
M
Xn
Nocivo
Xi
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
Disp.: 4574/97-4420/98-2877/02 2000 Rosario - Argentina
864122522 / 01 p. 3/9 UR120831
Glicemia
C enzimática AA
Para la determinación de glucosa en suero, plasma,

La patología más común relacionada con el metabolismo de ALMACENAMIENTO
los hidratos de carbono es la diabetes mellitus. Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10oC)
El diagnóstico precoz y el control de los pacientes diabéticos, hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No man-
tienen por objeto evitar la cetoacidosis y las complicaciones tener a temperaturas elevadas durante lapsos prolongados.
resultantes de la hiperglicemia, mediante el tratamiento Reactivo de Trabajo: en refrigerador (2-10oC) es estable
adecuado. 60 días a partir de la fecha de su preparación.
Dado que existen múltiples factores causales de hiper o
hipoglicemia, debe considerarse en cada caso la condición INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
fisiológica y/o la patología presente en el paciente. REACTIVOS
Durante el uso, el Reactivo de Trabajo puede desarrollar un
FUNDAMENTOS DEL METODO ligero color rosado que no afecta su funcionamiento siempre
El esquema de reacción es el siguiente: que se procese un Blanco con cada lote de determinaciones
GOD y un Standard por lo menos una vez por semana. Desechar
glucosa + O2 + H2O ácido glucónico + H2O2 cuando las lecturas del Blanco sean superiores a 0,160 D.O.
POD
2 H2O2 + 4-AF + 4-hidroxibenzoato quinonimina roja MUESTRA
Suero, plasma, orina o líquido cefalorraquídeo (LCR)
REACTIVOS PROVISTOS a) Recolección:
S. Standard: solución de glucosa 100 mg/dl (1 g/l). - Suero o plasma: se debe obtener suero de la manera usual
A. Reactivo A: viales conteniendo glucosa oxidasa (GOD), o plasma recolectado con anticoagulantes comunes.
peroxidasa (POD) y 4-aminofenazona (4-AF). - Orina: si se trata de una muestra aislada, utilizar prefe-
B. Reactivo B: buffer fosfatos pH 7,0 conteniendo 4-hidroxi- rentemente orina fresca. En caso de no poder realizar
benzoato. el ensayo de forma inmediata, conservar la muestra en
refrigerador (2-10oC). Puede realizarse el ensayo en orina
Concentraciones finales de 24 horas. En este caso, recolectar la muestra en un
GOD (microbiana)................................................. ≥ 10 kU/l recipiente oscuro conteniendo 5 ml de ácido acético glacial
POD (rábano).......................................................... ≥ 1 kU/l y conservarlo en hielo.
4-AF..................................................................... 0,5 mmol/l - LCR: en caso de utilizar LCR, el ensayo debe realizarse en
Fosfatos................................................. 100 mmol/l, pH 7,0 forma inmediata a la obtención de la muestra.
4-Hidroxibenzoato................................................ 12 mmol/l b) Aditivos: en caso de que la muestra a emplear sea plas-
ma, se recomienda el uso de heparina o Anticoagulante G
REACTIVOS NO PROVISTOS (EDTA/fluoruro) para su obtención.
Calibrador A plus de Wiener lab. c) Sustancias interferentes conocidas: no se observan
interferencias por: bilirrubina hasta 10 mg/dl, triglicéridos
INSTRUCCIONES PARA SU USO hasta 500 mg/dl, ni hemoglobina hasta 350 mg/dl. El ácido
Standard: listo para usar. ascórbico interfiere en la determinación en orina en cualquier
Reactivo de Trabajo: reconstituir el contenido de un vial de concentración.
Reactivo A con una parte de Reactivo B. Transferir al frasco Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
de Reactivo B, enjuagando varias veces el vial con el mismo. drogas en el presente método.
Mezclar hasta disolución completa. Homogeneizar y fechar. d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
destrucción enzimática de la glucosa sanguínea (glucólisis)
PRECAUCIONES por hematíes y leucocitos es proporcional a la temperatura a
Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro". la que se conserva la sangre, siendo máxima a 37oC. Este
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales proceso no se inhibe aún en estado de congelación, por lo
de trabajo en el laboratorio de química clínica. que la sangre debe centrifugarse dentro de las 2 horas de la
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de extracción. El sobrenadante límpido se transfiere a otro tubo
acuerdo a la normativa local vigente. para su conservación. De esta forma la glucosa es estable
870570000 / 01 p. 1/6
4 horas a temperatura ambiente o 24 horas refrigerada. En VALORES DE REFERENCIA
caso de no poder procesarse la muestra de la forma indi- Se analizaron con Glicemia enzimática AA, 120 muestras
cada, deberá adicionarse un conservador en el momento de individuos en ayunas, de ambos sexos, con edades com-
de la extracción. prendidas entre 20 y 45 años, provenientes de la ciudad de
El LCR puede contaminarse con bacterias y otras células Rosario (Argentina), sin síntomas de diabetes o cualquier
por lo que la determinación debe realizarse de inmediato. otra enfermedad aparente. Se encontró que el 95% de los
En caso de no poder procesarse de esta manera, centrifugar resultados cubrieron el siguiente rango:
el LCR y conservarlo 3 días a 2-10oC o 5 horas a 20-25oC. Suero o plasma: 70 a 110 mg/dl
En la literatura (Tietz, N.W.) se menciona el siguiente rango
MATERIAL REQUERIDO (no provisto) de referencia:
- Espectrofotómetro o fotocolorímetro. Suero o plasma
- Micropipetas y pipetas capaces de medir los volúmenes Adultos: 74 - 106 mg/dl (4,11 - 5,89 mmol/l)
indicados. Niños: 60 - 100 mg/dl (3,33 - 5,55 mmol/l)
- Tubos o cubetas espectrofotométricas de caras paralelas. Neonatos: 1 día: 40 - 60 mg/dl (2,22 - 3,33 mmol/l)
- Baño de agua a 37oC. mayor a 1 día: 50 - 80 mg/dl (2,78 - 4,44 mmol/l)
- Reloj o timer.
Orina aislada fresca
CONDICIONES DE REACCION 1 - 15 mg/dl (0,06 - 0,83 mmol/l)
- Longitud de onda: 505 nm en espectrofotómetro o en Orina de 24 horas
fotocolorímetro con filtro verde (490-530 nm). < 0,5 g/24 hs (< 2,78 mmol/24 hs)
- Temperatura de reacción: 37oC LCR
- Tiempo de reacción: 5 minutos Niños: 60 - 80 mg/dl (3,33 - 4,44 mmol/l)
- Volumen de muestra: 10 ul Adultos: 40 - 70 mg/dl (2,22 - 3,89 mmol/l)
valores de referencia, teniendo en cuenta sexo, edad hábitos
Los volúmenes de Muestra y de Reactivo pueden variar-
se proporcionalmente (Ej.: 20 ul Muestra + 2 ml Rvo. de
Trabajo).
Glucosa (mg/dl) x 0,0555 = Glucosa (mmol/l)
Glucosa (g/24 horas) x 55,5 = Glucosa (mmol/24 hs)
PROCEDIMIENTO
En tres tubos marcados B (Blanco) S (Standard) y D
B S D
PERFORMANCE
Standard - 10 ul -
Muestra - - 10 ul Express Plus(*).
muestras en 5 días diferentes se obtuvo:
o
a 15-25oC. Luego leer en espectrofotómetro a 505 nm o
en fotocolorímetro con filtro verde (490-530 nm) llevando Nivel D.S. C.V.
el aparato a cero con el blanco. 90,7 mg/dl ± 1,26 mg/dl 1,39 %
278 mg/dl ± 3,08 mg/dl 1,11 %
Precisión interensayo (n = 20)
Nivel D.S. C.V.
90,1 mg/dl ± 1,73 mg/dl 1,92 %
299 mg/dl ± 4,86 mg/dl 1,62 %
CALCULO DE LOS RESULTADOS b) Recuperación: agregando cantidades conocidas de
100 mg/dl glucosa a distintos sueros, se obtuvo una recuperación
glucosa (mg/dl) = D x f f= entre 99 y 101%.
S c) Linealidad: la reacción es lineal hasta 500 mg/dl. Para
valores superiores, diluir la muestra con solución salina
METODO DE CONTROL DE CALIDAD y repetir el ensayo, multiplicando el resultado final por el
Procesar 2 niveles de un material de control de calidad factor de dilución.
(Standatrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas d) Correlación: se determinó el valor de glucosa en 154 mues-
de glucosa, con cada determinación. tras de suero en un rango comprendido entre 23 y 503 mg/dl,
(*)
con Glicemia enzimática AA de Wiener lab. y un kit comercial SIMBOLOS
basado en el mismo principio, obteniéndose el siguiente coefi- Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
ciente de correlación: reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
r = 0,9997; pendiente b = 1,0257; intersección a = 1,9485
C
e) Sensibilidad: el mínimo límite de detección es 0,54 mg/dl por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios
y la sensibilidad analítica es de 4,2 mg/dl. para el diagnóstico "in vitro"
PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS P Representante autorizado en la Comunidad Europea

Manual del Usuario del Analizador en uso. V Uso diagnóstico "in vitro"
Para la calibración, se puede utilizar un calibrador con base
de suero (Calibrador A plus de Wiener lab.).
PRESENTACION
- 1 x 250 ml (Cód. 1400106). l Límite de temperatura (conservar a)
- 4 x 250 ml (Cód. 1400107).
 No congelar
BIBLIOGRAFIA
- Henry, R.J. et.al. - Clinical Chemistry, Principles and F Riesgo biológico
Techniques, 2nd. ed., Harper and Row Pub. Inc. N.Y. p.
1288 (1974). Volumen después de la reconstitución
- Lott, J.A. and Turner, K. - Clin. Chem. 21:1754-1760 (1975).
Cont. Contenido
- Ziegenhorn, J. - J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 15/1:13 g Número de lote
(1977).
- Caraway - Stand. Meth. Clin. Chem. 4:240 (1963). M Elaborado por:
AACC Press, 4th ed., 2001. Xn
Nocivo
- Burtis - Ashwood. Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry,
W.B. Saunders Co., fifth edition, United States of America, Corrosivo / Caústico
2001.
Xi
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
870570000 / 01 p. 3/6
Glicemia
enzimática
Método enzimático para la determinación de glucosa
en suero o plasma
SIGNIFICACION CLINICA proporciones antedichas. Es importante además, respetar el

La patología más común relacionada con el metabolismo de orden de agregado de los reactivos y asegurar una perfecta
los hidratos de carbono es la diabetes mellitus. El diagnós- homogeneización de los mismos, a fin de que el Reactivo B
tico precoz y el control de los pacientes diabéticos, tienen no deteriore el Reactivo de Trabajo.
por objeto evitar la cetoacidosis y las complicaciones de
los síntomas resultantes de la hiperglicemia, mediante el PRECAUCIONES
tratamiento adecuado. Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
Dado que existen múltiples factores causales de hiper o El Reactivo B (fenol) es tóxico e irritante. R36/38: irrita los
hipoglicemia, debe considerarse en cada caso la condición fi- ojos y la piel. R25: tóxico por ingestión. S24/25: evítese el
siológica y/o la patología presente en el paciente en cuestión. contacto con los ojos y la piel. S37/39: usar guantes ade-
cuados y protección para los ojos/la cara.
FUNDAMENTOS DEL METODO Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
El esquema de reacción es el siguiente: de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
GOD Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
glucosa + O2 + H2O ácido glucónico + H2O2 acuerdo a la normativa local vigente.
POD
2 H2O2 + 4-AF + fenol quinona coloreada + 4 H2O ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
ALMACENAMIENTO
REACTIVOS PROVISTOS Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10oC)
A. Reactivo A: solución de 4-aminofenazona 25 mmol/l en hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No man-
Buffer Tris 0,92 mol/l. tener a temperaturas elevadas durante lapsos prolongados.
B. Reactivo B: solución de fenol 55 mmol/l. Reactivo de Trabajo: en refrigerador (2-10oC) y en frasco
C. Reactivo C: solución de glucosa oxidasa (1000 U/ml) y color caramelo es estable un mes a partir de la fecha de su
peroxidasa (120 U/ml). preparación.
S. Standard: solución de glucosa 1 g/l.
GOD.................................................................... ≥ 3000 U/l REACTIVOS
POD...................................................................... ≥ 400 U/l Durante el uso, el Reactivo de Trabajo puede desarrollar un
4-AF........................................................................1,25 mM ligero color rosado que no afecta su funcionamiento siempre
Fenol......................................................................2,75 mM que se procese un Blanco con cada lote de determinaciones
pH...........................................................................7,4 ± 0,1 y un Standard periódicamente. Desechar cuando las lecturas
del Blanco sean superiores a 0,160 D.O. o las lecturas del
REACTIVOS NO PROVISTOS Standard sean anormalmente bajas.
Agua destilada. Ver LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO.
MUESTRA
INSTRUCCIONES PARA SU USO Suero o plasma
Standard: listo para usar. a) Recolección: se debe obtener suero o plasma de la
Reactivo A: listo para usar. manera usual. Cuando no es posible extraer sangre venosa
Reactivo B: listo para usar. Ver PRECAUCIONES. o en casos de extrema urgencia, la determinación se puede
Reactivo C: homogeneizar por inversión antes de usar, realizar en sangre capilar.
evitando la formación de espuma. b) Aditivos: en caso de que la muestra a emplear sea
Reactivo de Trabajo: de acuerdo al volumen de trabajo, plasma, se recomienda el uso de Anticoagulante G de
colocar en una probeta 500 partes de agua destilada, 50 Wiener lab. para su obtención (el mismo contiene fluoruro
partes de Reactivo A, 50 partes de Reactivo B y llevar a 1000 como conservador).
partes con agua destilada. Agregar 3 partes de Reactivo C c) Sustancias interferentes conocidas: los sueros o
previamente homogeneizadas. Mezclar por inversión, sin plasmas con hemólisis visible o intensa deben ser despro-
agitar. Rotular y fechar. teinizados.
Pueden prepararse distintas cantidades respetando las No se observan interferencias por: bilirrubina hasta 200 mg/l,
870560022 / 01 p. 1/9
ácido ascórbico hasta 75 mg/l, ácido úrico hasta 200 mg/l, METODO DE CONTROL DE CALIDAD
hemólisis ligera. Procesar 2 niveles de un material de control de calidad
Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las (Standatrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas
drogas en el presente método. de glicemia, con cada determinación.
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: los
hematíes y leucocitos son los responsables de la destrucción VALORES DE REFERENCIA
enzimática de la glucosa sanguínea, siendo máxima a 37oC, Se analizaron con Glicemia enzimática, 120 muestras de
razón por la cual debe centrifugarse la sangre dentro de individuos en ayunas, de ambos sexos, con edades com-
las dos horas posteriores a la extracción, hasta obtener un prendidas entre 20 y 45 años, provenientes de la ciudad de
sobrenadante límpido y transferir a otro tubo para su conser- Rosario (Argentina), sin síntomas de diabetes o cualquier
vación. En estas condiciones la glucosa es estable 4 horas otra enfermedad aparente. Se encontró que el 95% de los
a temperatura ambiente o 24 horas refrigerada (2-10oC). resultados cubrieron el siguiente rango:
En caso de no poder procesarse la muestra de la forma antes
Suero o plasma: 0,70 a 1,10 g/l
indicada, deberá adicionarse un conservador en el momento
de la extracción para inhibir la glucólisis. En la literatura (Tietz, N.W.) se menciona el siguiente rango
de referencia:
MATERIAL REQUERIDO (no provisto) Suero o plasma: 0,74 - 1,06 g/l
- Material volumétrico adecuado.
valores de referencia, teniendo en cuenta sexo, edad hábitos
- Reloj o timer.
Glucosa (g/l) = Glucosa (mg/dl) x 0,01
Glucosa (mg/dl) x 0,0555 = Glucosa (mmol/l)
Los reductores disminuyen la respuesta de color, mientras
que los oxidantes colorean el Reactivo aumentando los
Blancos. Dichos agentes son frecuentemente encontrados
en el agua destilada empleada para preparar el Reactivo
de Trabajo, por lo que se recomienda controlar la calidad
Los volúmenes de Muestra y de Reactivo pueden variarse propor-
de la misma.
cionalmente (Ej.: 50 ul de Muestra + 5 ml de Reactivo de Trabajo).
enzimáticos.
PROCEDIMIENTO
PERFORMANCE
En tres tubos marcados B (Blanco) S (Standard) y D
muestras en 10 días diferentes, se obtuvo lo siguiente:
B S D Nivel D.S. C.V.
Standard - 20 ul - 1,00 g/l ± 0,022 g/l 2,37 %
2,00 g/l ± 0,030 g/l 1,50 %
Muestra - - 20 ul
Reactivo de Trabajo 2 ml 2 ml 2 ml b) Recuperación: agregando cantidades conocidas de
glucosa a distintos sueros, se obtuvo una recuperación
Incubar 10 minutos en baño de agua a 37oC. Luego leer entre 99 y 101%.
en espectrofotómetro a 505 nm o en fotocolorímetro c) Linealidad: la reacción es lineal hasta 4,5 g/l. Para
con filtro verde (490-530 nm) llevando el aparato a cero valores superiores, diluir 1/2 la solución coloreada final con
con el blanco. el Reactivo de Trabajo y repetir la lectura multiplicando el
resultado final por dos.
d) Exactitud: empleando el método de la hexoquinasa como
ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL referencia, se observa que la correlación estadística entre
El color de reacción final es estable 1 hora, por lo que la ambos métodos es excelente (r= 0,99).
absorbancia debe ser leída dentro de este lapso. e) Sensibilidad: el mínimo límite de detección es 0,0054 g/l
y la sensibilidad analítica es de 0,042 g/l.
glucosa g/l = D x f donde f = - 1000 ml (Cód. 1400101)
S

870560022 / 01 p. 2/9
- Henry, R.J.; Cannon, D.C; Winkelman, J. - Clinical Che- Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
mistry, Principles and Techniques, 2nd. ed., Harper and reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
Row Publishers Inc. N.Y. (1974) p. 1288.
- Lott, J.A. and Turner, K. - Clin. Chem. 21, 1754-1760 (1975). Este producto cumple con los requerimientos previstos
- "Tietz textbook of Clinical Chemistry" - Burtis and Ashwood
Editors, 3rd Ed. - Saunders Co., 1999.
- Trinder, P. - Ann. Clin. Biochem., 6/24 (1969).
- Ziegenhorn, J.; Newman, U.; Hegen, A. - J. Clin. Chem.
Clin. Biochem. 15/1:13 (1977). Contenido suficiente para <n> ensayos

- Caraway - Stand. Meth. Clin. Chem. 4:240 (1963).
X
 No congelar
F Riesgo biológico
Cont. Contenido
g Número de lote
Elaborado por:
M
Xn
Nocivo
Xi
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

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Wiener lab.
Bioquímica
870560022 / 01 p. 3/9 UR140909
Glucose HK
C Para la determinación de glucosa en suero, plasma,

La determinación de glucosa en sangre es comúnmente ALMACENAMIENTO
utilizada en el diagnóstico de patologías relacionadas con Reactivos Provistos: estables en refrigerador (2-10oC)
el metabolismo de carbohidratos, entre ellas, la diabetes hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No man-
mellitus. El diagnóstico precoz y el control de los pacientes tener a temperaturas elevadas durante lapsos prolongados.
diabéticos, tienen por objeto evitar la cetoacidosis y las Una vez abiertos, no deben permanecer fuera del refrige-
complicaciones resultantes de la hiperglicemia, mediante el rador por períodos prolongados. Evitar contaminaciones.
tratamiento adecuado. Dado que existen múltiples factores
causales de hiperglicemia (por ejemplo, hipertiroidismo o INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
hiperfunción corticoadrenal) o hipoglicemia (por ejemplo, REACTIVOS
excesiva terapia insulínica, hipoglicemia neonatal, carci- Signos evidentes de derrame, turbiedad, coloración, creci-
noma de células de islotes pancreáticos o enfermedades miento microbiano o resultados de los controles de calidad
hepáticas), debe considerarse en cada caso la condición fuera de los rangos aceptables, son indicio de deterioro de
fisiológica y/o la patología presente en el paciente. los reactivos. Desechar.

El esquema de reacción es el siguiente: Suero, plasma, orina o líquido cefalorraquídeo (LCR)
HK a) Recolección:
glucosa + ATP glucosa-6-fosfato + ADP - Suero o plasma: obtener el suero de la manera habitual,
G-6-PDH verificando la completa formación del coágulo. En caso de
glucosa-6-P + NAD+ gluconato-6-P + NADH + H+ utilizar plasma, recolectar con anticoagulantes comunes,
centrifugando la muestra previamente al ensayo.
REACTIVOS PROVISTOS - Orina: si se trata de una muestra aislada, utilizar prefe-
A. Reactivo A: solución de buffer Tris 100 mM, sal de mag- rentemente orina fresca. En caso de no poder realizar
nesio 4 mM, ATP ≥ 1,7 mM, NADP ≥ 1,5 mM, azida sódica el ensayo de forma inmediata, conservar la muestra en
0,9 g/l, pH 7,8. refrigerador (2-10oC). Puede realizarse el ensayo en orina
B. Reactivo B: solución de buffer de Goods 30 mM, sal de de 24 horas. En este caso, recolectar la muestra en un
magnesio 4 mM, hexokinasa ≥ 5 U/ml, glucosa-6-fosfato recipiente oscuro conteniendo 5 ml de ácido acético glacial
deshidrogenasa ≥ 10 U/ml, azida sódica 0,9 g/l, pH 7,0. y conservarlo en hielo.
S. Standard*: solución de glucosa 100 mg/dl (1 g/l). - LCR: en caso de utilizar LCR, el ensayo debe realizarse en
forma inmediata a la obtención de la muestra.
REACTIVOS NO PROVISTOS b) Aditivos: en caso de que la muestra a emplear sea
- Agua destilada o desmineralizada. plasma, se recomienda el uso de Anticoagulante G (EDTA/
- Solución salina (ClNa 9 g/l). fluoruro) o, Anticoagulante W (EDTA), de Wiener lab., o
- Calibrador A plus de Wiener lab. heparina sódica < 20 UI/ml.
INSTRUCCIONES PARA SU USO interferencias significativas por bilirrubina no conjugada
Reactivos Provistos: listos para usar. hasta 45 mg/dl o bilirrubina conjugada hasta 40 mg/dl, por
lípidos hasta concentraciones de triglicéridos de 2500 mg/dl
PRECAUCIONES o por hemólisis hasta concentraciones de hemoglobina de
Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro". 1500 mg/dl.
No mezclar reactivos de diferentes lotes. En muestras de orina, no se observan interferencias sig-
Todas las muestras de pacientes deben manipularse como nificativas hasta concentraciones de ácido ascórbico de
si fueran capaces de transmitir infección. 1000 mg/dl.
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
de trabajo en el laboratorio de química clínica. drogas en el presente método.
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de Para fines diagnósticos, los resultados siempre deben ser
acuerdo a la normativa local vigente. evaluados en conjunto con la historia clínica del paciente,
* No provisto en todas las presentaciones 861103790 / 00 Pág. 1/8

el examen clínico y otros hallazgos. ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento de La absorbancia final debe ser leída dentro de los 20 minutos.
las muestras: la destrucción enzimática de la glucosa
sanguínea (glucólisis) por hematíes y leucocitos es pro- CALCULO DE LOS RESULTADOS
porcional a la temperatura a la que se conserva la sangre, Corregir las lecturas A2 obtenidas, restándoles los blancos
siendo máxima a 37oC. Este proceso no se inhibe aún en de muestra correspondientes (A1):
estado de congelación, por lo que la sangre debe centrifu- S = A2S - A1S
garse dentro de los 60 minutos posteriores a la extracción. D = A2D - A1D
El sobrenadante límpido se transfiere a otro tubo para su
conservación. De esta forma la glucosa es estable 4 horas Glucosa (mg/dl) = D x f
a temperatura ambiente o 24 horas refrigerada. En caso de 100 (mg/dl) o C
no poder procesarse la muestra de la forma indicada, deberá f=
adicionarse un conservador en el momento de la extracción. S
En muestras almacenadas, se debe inspeccionar la presen- donde:
cia de partículas. Si están presentes, mezclar y centrifugar C = concentración de glucosa en el Calibrador A plus
la muestra para removerlas previamente al ensayo. Para expresar el resultado de glucosa en orina de 24 horas
en g/24 hs:
MATERIAL REQUERIDO (no provisto) Vxc
- Espectrofotómetro. Glucosa (g/24 hs) =
- Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados. 100
donde:
V = volumen de la orina de 24 horas (en litros)
- Reloj o timer.
c = concentración de glucosa (mg/dl)
- Longitud de onda: 340 nm (primaria) en espectrofotómetro
(380 nm como secundaria en analizador automático).
- Temperatura de reacción: 37oC de glucosa, con cada determinación.
- Volumen de muestra: 20 ul VALORES DE REFERENCIA
- Volumen de Reactivo A: 1,5 ml En la literatura (Tietz, N.W.) se menciona el siguiente rango
- Volumen de Reactivo B: 0,3 ml de referencia:
Los volúmenes de Muestra y de Reactivo pueden variarse Suero o plasma
proporcionalmente (ej.: 600 ul Reactivo A, 8 ul Muestra y Adultos: 74-106 mg/dl (4,11-5,89 mmol/l)
120 ul Reactivo B). Niños: 60-100 mg/dl (3,33-5,55 mmol/l)
Neonatos: 1 día: 40-60 mg/dl (2,22-3,33 mmol/l)
> 1 día: 50-80 mg/dl (2,78-4,44 mmol/l)
PROCEDIMIENTO Orina aislada fresca
En dos tubos marcados S (Standard o Calibrador) y D 1-15 mg/dl (0,06-0,83 mmol/l)
(Desconocido) colocados en un baño a 37oC colocar: Orina de 24 horas
S D < 0,5 g/24 hs (< 2,78 mmol/24 hs)
Reactivo A 1,5 ml 1,5 ml LCR
Niños: 60-80 mg/dl (3,33-4,44 mmol/l)
Standard o Calibrador 20 ul -
Adultos: 40-70 mg/dl (2,22-3,89 mmol/l)
Muestra - 20 ul
Es recomendable que cada laboratorio establezca sus pro-
Leer en espectrofotómetro a 340 nm, llevando el aparato pios valores de referencia, teniendo en cuenta sexo, edad,
a 0 previamente con agua destilada o desmineralizada. hábitos alimenticios, medicación y otros factores propios
Denominar A1 a esta lectura (Blanco de muestra). de su población.
En el mismo baño de agua y sin sacar el tubo, agregar
el Reactivo B: CONVERSION DE UNIDADES AL SISTEMA SI
Reactivo B 0,3 ml 0,3 ml Glucosa (mg/dl) x 0,0555 = Glucosa (mmol/l o mM)
Glucosa (g/24 horas) x 55,5 = Glucosa (mmol/24 hs)
Mezclar e incubar a 37oC en baño de agua, durante
siete (7) minutos. Leer en espectrofotómetro a 340 nm y LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
denominar A2 a esta lectura. Ver Sustancias Interferentes conocidas y Estabilidad e Ins-
trucciones de Almacenamiento en MUESTRA.
861103790 / 00 Pág. 2/8

PERFORMANCE Samples; Approved Guideline - Second Edition. CLSI
Los ensayos fueron realizados en analizador automático EP9-A2 Vol. 22 Nº 19, 2002.
Wiener lab. CT600i. - Protocols for Determination of Limits of Detection and
a) Precisión: se analizaron 3 niveles de actividad, cada uno Limits of Quantitation; Approved Guideline. CLSI EP17-A
por duplicado en dos corridas diarias durante 20 días. Se Vol. 24 Nº 34, 2004.
calcularon la precisión intraensayo y total.
Nivel C.V.
86,8 mg/dl 0,56 %
195,1 mg/dl 0,65 %
290,7 mg/dl 0,64 %
Precisión total
Nivel C.V.
86,8 mg/dl 1,87 %
195,1 mg/dl 1,76 %
290,7 mg/dl 1,64 %
b) Linealidad: la reacción de la glucosa en suero o plasma

es lineal desde 5 a 1000 mg/dl (0,28 a 55,50 mmol/l). En
orina es lineal desde 4 a 2000 mg/dl (0,22 a 111,0 mmol/l).
Para valores superiores, diluir la muestra con solución salina
y repetir el ensayo, respetando las condiciones de reacción
y multiplicando el resultado final por el factor de dilución.
c) Sensibilidad: el límite de detección es 0,5 mg/dl y la
sensibilidad analítica es de 4,4 mg/dl.

del usuario del analizador en uso. Para la calibración debe
emplearse Calibrador A plus de Wiener lab., de acuerdo a
los requerimientos del analizador.
PRESENTACION
- 8 x 50 ml Reactivo A + 4 x 20 ml Reactivo B (Cód. 1009618)
- 8 x 55 ml Reactivo A + 8 x 11 ml Reactivo B (Cód. 1009314)
BIBLIOGRAFIA
- Young D. Effects of Preanalytical Variables on Clinical
Laboratory Test, editado por AACC, second edition, 1997.
- Young D. and Friedman R. Effects of Disease on Clinical
Laboratory Test, editado por AACC, third edition, 1997.
- Young D. Effects of Drugs on Clinical Laboratory Test,
AACC, editado por AACC, fourth edition, 2001.
- Burtis - Ashwood. Tietz Fundamentals of Clinical Che-
mistry, W.B. Saunders Co., fifth edition, United States of
America, 2001.
- Bergmeyer H. U. Methods of Enzymatic Analysis, Vol V
3rd.Edition.
- Zensuke Ogawa, Motohito Kanashima and Hiroshi Nishioka
- Clin. Chem. Lab. Med. 39/5:396, 2001.
- Evaluation of Precision Performance of Quantitative Mea-
surements Methods; Approved Guideline - Second Edition.
CLSI EP5-A2 Vol. 24 Nº25, 2004.
- Evaluation of the Linearity of Quantitative Measurement
Procedures: A Statistical Approach; Approved Guideline.
CLSI EP6-A Vol. 23 Nº16, 2003.
- Method Comparison and Bias estimation Using Patient
861103790 / 00 Pág. 3/8

Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

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Wiener lab.
Bioquímica
861103790 / 00 Pág. 4/8 UR091028
LINEA LIQUIDA
GOT(AST)
C Método UV optimizado (IFCC) para la determinación de aspartato
AA
aminotransferasa (GOT/AST) en suero o plasma

La aspartato aminotransferasa es una enzima bilocular ALMACENAMIENTO
(citoplasmática y mitocondrial) ampliamente difundida. Se Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10oC)
encuentra en mayor concentración en hígado y corazón. hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. Una vez
Cualquier alteración de estos tejidos produce un aumento abiertos, no deben permanecer fuera del refrigerador por
en los niveles de AST circulante. períodos prolongados. Evitar contaminaciones.
En el infarto agudo de miocardio, se observa un aumento Reactivo único (premezclado): estable 2 meses en refrige
moderado de la enzima a las 6 u 8 horas de ocurrido el epi rador (2-10oC) a partir de la fecha de su preparación.
sodio, alcanza niveles máximos alrededor de las 48 horas
y retorna a la normalidad entre el 4º y el 6º día. INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
En pacientes con afecciones hepáticas se observan las REACTIVOS
mayores elevaciones de AST, sobre todo en los casos de El Reactivo B puede presentar una coloración pardo rosada
hepatitis con necrosis. que no afecta su funcionamiento.
Cuando el espectrofotómetro ha sido llevado a cero con
FUNDAMENTOS DEL METODO agua destilada, lecturas de absorbancia del Reactivo único
Basado en el siguiente esquema reaccionante: inferiores a 0,900 D.O. o superiores a 1,800 D.O. (a 340 nm)
GOT son indicio de deterioro del mismo.
L-aspartato + 2-oxoglutarato oxalacetato + L-glutamato
MUESTRA
MDH Suero o plasma
oxalacetato + NADH + H+ L-malato + NAD +
REACTIVOS PROVISTOS b) Aditivos: en caso de que la muestra a utilizar sea plas
A. Reactivo A: solución de buffer TRIS pH 7,8 conteniendo ma, se puede usar heparina o EDTA como anticoagulantes.
L-aspartato. c) Sustancias interferentes conocidas:
B. Reactivo B: solución conteniendo 2-oxoglutarato, ni - Las muestras provenientes de pacientes hemodializados o
cotinamida adenina dinucleótido reducido (NADH), malato con hipovitaminosis o patologías asociadas con deficiencia
deshidrogenasa (MDH) y lactato deshidrogenasa (LDH). de piridoxal fosfato producen valores falsamente disminuidos.
- No se observan interferencias por bilirrubina hasta 30 mg/dl,
Concentraciones finales ni triglicéridos hasta 500 mg/dl. La hemoglobina interfiere
TRIS...................................................... 100 mmol/l; pH 7,8 significativamente aumentando los resultados debido a la
L-aspartato......................................................... 200 mmol/l presencia de GOT en los eritrocitos.
NADH................................................................ 0,18 mmol/l Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
MDH...................................................................... ≥ 400 U/l drogas en el presente método.
LDH....................................................................... ≥ 600 U/l d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
2-oxoglutarato...................................................... 12 mmol/l GOT en suero es estable hasta 3 días en refrigerador, sin
agregado de conservantes. No congelar.
Reactivos Provistos: listos para usar. Estos pueden usarse MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
separados o como Reactivo único, mezclando 4 partes de - Espectrofotómetro.
Reactivo A con 1 parte de Reactivo B (ej.: 4 ml Reactivo A - Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados.
+ 1 ml Reactivo B). - Baño de agua a la temperatura indicada en el procedimiento.
- Cronómetro.
PRECAUCIONES
Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro". CONDICIONES DE REACCION
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales - Longitud de onda: 340 nm
de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos. - Temperatura de reacción: 25, 30 ó 37oC. Ver los VALORES
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de DE REFERENCIA correspondientes a cada temperatura.
acuerdo a la normativa local vigente. - Tiempo de reacción: 4 minutos
864123022 / 02 p. 1/9
- Volumen de muestra: 100 ul CONVERSION DE UNIDADES AL SISTEMA SI
Los volúmenes de Muestra y de Reactivo pueden variarse GOT (U/l) x 0,017 = GOT (ukat/l)
proporcionalmente, sin que varíen los factores de cálculo.
PROCEDIMIENTO (Standatrol S-E 2 niveles) con actividades conocidas de
A) 30 ó 37oC GOT, con cada determinación.
I- TECNICA CON REACTIVO UNICO
En una cubeta mantenida a 30-37oC, colocar: LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
Reactivo único 1,0 ml Absorbancia inicial baja: cuando una vez agregado el suero
Preincubar unos minutos. Luego agregar: la primera lectura (tiempo 0) es inferior a 0,900 D.O., estando
el Reactivo B en condiciones, indica una muestra con muy
Muestra 100 ul alta actividad de GOT (que consume el NADH aún antes
Mezclar inmediatamente y disparar simultáneamente el de esta lectura) o con una concentración de cetoácidos en
cronómetro. Esperar 90 segundos y leer la absorbancia ini dógenos particularmente elevada. En este caso, repetir la
cial (ver LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO) y luego determinación con muestra diluida con solución fisiológica y
a los 1, 2 y 3 minutos de la primera lectura. Determinar la multiplicar el resultado por la dilución efectuada.
diferencia promedio de absorbancia/min (∆A/min), restan
do cada lectura de la anterior y promediando los valores. PERFORMANCE
Utilizar este promedio para los cálculos. a) Reproducibilidad: procesando simultáneamente repli
cados de una misma muestra, se obtiene:
II- TECNICA CON REACTIVOS SEPARADOS
En una cubeta mantenida a 30-37oC, colocar: Nivel D.S. C.V.
58,45 U/l ± 1,67 U/l 2,86 %
Reactivo A 0,80 ml 148,30 U/l ± 2,85 U/l 1,92 %
Muestra 100 ul
b) Sensibilidad: el mínimo cambio de actividad detectable
Preincubar unos minutos. Luego agregar: de GOT que puede distinguirse de cero es de 6 U/l.
Reactivo B 0,20 ml c) Rango dinámico: el rango útil de lectura se extiende hasta
0,345 ∆A/min (a 340 nm). Si la ∆A/min es superior a 0,345,
Mezclar inmediatamente y disparar simultáneamen se debe repetir la determinación con muestra diluida (1:5
te el cronómetro. Esperar 90 segundos y leer la ó 1:10) con solución fisiológica, corrigiendo los resultados
absorbancia inicial (ver LIMITACIONES DEL PRO según el factor de dilución empleado.
CEDIMIENTO) y luego a los 1, 2 y 3 minutos de la
primera lectura. Determinar la diferencia promedio PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS
de absorbancia/min (∆A/min), restando cada lectura Para las instrucciones de programación consulte el manual
de la anterior y promediando los valores. Utilizar este del usuario del analizador en uso.
promedio para los cálculos.
B) 25oC PRESENTACION
Emplear 250 ul de Muestra siguiendo el procedimiento 200 ml: - 4 x 40 ml Reactivo A
indicado en A). - 1 x 40 ml Reactivo B
(Cód. 1752360)
CALCULO DE LOS RESULTADOS 250 ml: - 4 x 50 ml Reactivo A

GOT (U/l) = ∆A/min x factor - 4 x 12,5 ml Reactivo B
(Cód. 1009321)
En cada caso deberá emplearse el factor de cálculo correspon
diente de acuerdo a la temperatura de reacción seleccionada: 250 ml: - 4 x 50 ml Reactivo A
factor(30-37oC) = 1.746 - 4 x 12,5 ml Reactivo B
factor(25oC) = 794 (Cód. 1009261)

Temperatura 25oC* 30oC* 37 C o
(Cód. 1009619)
Hombres hasta 18 U/l hasta 25 U/l hasta 38 U/l
Mujeres hasta 15 U/l hasta 21 U/l hasta 32 U/l
BIBLIOGRAFIA
* Calculados - IFCC - Clin. Chim. Acta 70/2:F19 (1976).
Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios - SSCC - Scand. J. Clin. Lab. Invest. 33:291 (1974).
valores de referencia. - DGKC - Z. Klin. Chem. 10:281 (1972).
864123022 / 02 p. 2/9
- Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests", SÍMBOLOS
AACC Press, 4th ed., 2001. Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
- Bergmeyer H.V., Horder, M., Rej R. - J. Clin. Chem. Clin. reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
Biochem. 24:497, 1986.
- Dufour, D.R.; Lott, J.A.; Nolte, F.S.; Gretch, D.R.; Koff, R.S. Este producto cumple con los requerimientos previstos
and Seeff, L.B. - Clin. Chem. 46/12:2027, 2000.
- "Tietz textbook of Clinical Chemistry" - Burtis and Ashwood C por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios
Editors, 3rd. Ed. - Saunders Co., 1999.
 No congelar
F Riesgo biológico
Cont. Contenido
g Número de lote
Elaborado por:
M
Xn
Nocivo
Xi
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
864123022 / 02 p. 3/9 UR140825
GOT(AST)
AA

La aspartato aminotransferasa es una enzima bilocular de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
(citoplasmática y mitocondrial) ampliamente difundida. Se Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
encuentra en mayor concentración en hígado y corazón. acuerdo a la normativa local vigente.
Cualquier alteración de estos tejidos produce un aumento
en los niveles de AST circulante. ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
En el infarto agudo de miocardio, se observa un aumento ALMACENAMIENTO
moderado de la enzima a las 6 u 8 horas de ocurrido el epi Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10oC)
sodio, alcanza niveles máximos alrededor de las 48 horas y hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
retorna a la normalidad entre el 4º y el 6º día. Reactivo A reconstituido: estable 30 días en refrigerador
En pacientes con afecciones hepáticas se observan las (2-10oC) o 3 días a temperatura ambiente a partir del mo
mayores elevaciones de AST, sobre todo en los casos de mento de su reconstitución.
hepatitis con necrosis.
La determinación de AST adquiere importancia diagnóstica INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
cuando sus valores se comparan con los de otras enzimas REACTIVOS
de similar origen tisular, es decir que permite completar el Cuando el espectrofotómetro ha sido llevado a cero con agua
perfil enzimático de órganos tales como corazón e hígado. destilada, lecturas de absorbancia del Reactivo A reconsti
tuido inferiores a 0,800 D.O. o superiores a 1,800 D.O. (a
FUNDAMENTOS DEL METODO 340 nm) son indicio de deterioro del mismo.
Basado en el siguiente esquema reaccionante:
GOT MUESTRA
L-aspartato + 2-oxoglutarato oxalacetato + L-glutamato Suero o plasma
MDH a) Recolección: se debe obtener de la manera usual.
oxalacetato + NADH + H+ L-malato + NAD+ b) Aditivos: en caso de que la muestra a utilizar sea plasma,
se debe usar heparina como anticoagulante.
REACTIVOS PROVISTOS c) Sustancias interferentes conocidas:
A. Reactivo A: viales conteniendo 2-oxoglutarato, nico - Las muestras provenientes de pacientes hemodializados
tinamida adenina dinucleótido reducido (NADH), malato o con hipovitaminosis o patologías asociadas con defi
deshidrogenasa (MDH) y lactato deshidrogenasa (LDH). ciencia de piridoxal fosfato producen valores falsamente
B. Reactivo B: solución de buffer TRIS pH 7,8 (a 30oC) disminuidos.
conL-aspartato. - No se observan interferencias por bilirrubina hasta 60 mg/l,
Concentraciones finales (según IFCC y SSCC) triglicéridos hasta 5,5 g/l y hemoglobina hasta 0,14 g/dl.
TRIS.......................................... 80 mmol/l; pH 7,8 (a 30oC) Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
L-aspartato......................................................... 240 mmol/l drogas en el presente método.
NADH................................................................ 0,18 mmol/l d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
MDH...................................................................... ≥ 420 U/l GOT en suero es estable hasta 3 días en refrigerador, sin
LDH....................................................................... ≥ 600 U/l agregado de conservantes. No congelar.
2-oxoglutarato...................................................... 12 mmol/l
INSTRUCCIONES PARA SU USO - Espectrofotómetro.
Reactivo B: listo para usar. - Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados.
Reactivo A; preparación: agregar 20 ml de Reactivo B a un - Baño de agua a la temperatura indicada en el procedi
frasco de Reactivo A. Tapar, agitar hasta disolución com miento.
pleta y fechar. - Cronómetro.

Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro". (Disminución de absorbancia)
El Reactivo B contiene azida. - Longitud de onda: 340 nm (Hg 334 ó 366).
870580000 / 00 p. 1/6
- Temperatura de reacción: 25, 30 ó 37oC. Ver los VALORES VALORES DE REFERENCIA
Temperatura 25oC 30oC* 37oC*
- Tiempo de reacción: 4 minutos.
Hombres hasta 18 U/l hasta 25 U/l hasta 38 U/l
Los volúmenes de Muestra y de Reactivo A reconstituido
Mujeres hasta 15 U/l hasta 21 U/l hasta 32 U/l
se pueden reducir proporcionalmente, sin que varíen los
factores de cálculo correspondientes. * Calculados
PROCEDIMIENTO
A) 30 ó 37oC CONVERSION DE UNIDADES AL SISTEMA SI
I- MACROTECNICA GOT (U/l) x 0,017 = GOT (ukat/l)
Reactivo A reconstituido 2 ml Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
Muestra 200 ul - Absorbancia inicial baja: cuando una vez agregado el suero
la primera lectura (tiempo 0) es inferior a 0,800 D.O., estando
el Reactivo A (sustrato) en condiciones, indica una muestra
cronómetro. Luego de 1 minuto registrar la absorbancia
con muy alta actividad de GOT (que consume el NADH aún
inicial (ver LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO) y
antes de esta lectura) o con una concentración de cetoácidos
luego a los 1, 2 y 3 minutos de la primera lectura. De
endógenos particularmente elevada. En este caso, repetir la
terminar la diferencia promedio de absorbancia/min (∆A/
determinación con muestra diluida con solución fisiológica y
min), restando cada lectura de la anterior y promediando
multiplicar el resultado por la dilución efectuada.
los valores. Utilizar este promedio para los cálculos.
- La humectación es causa de deterioro del Reactivo A.
II- MICROTECNICA
En una cubeta mantenida a 30-37oC, colocar: PERFORMANCE
Muestra 100 ul Standards), se obtuvo lo siguiente:
Mezclar inmediatamente. Continuar de modo similar al Precisión intraensayo (n = 20)
descripto en el procedimiento (A-I).
Nivel D.S. C.V.
B) 25oC 37 U/l ± 1,6 U/l 4,4 %
MACROTECNICA 180 U/l ± 2,4 U/l 1,3 %
Emplear 500 ul de Muestra. Luego de agregar la muestra
mezclar inmediatamente y disparar simultáneamente el Precisión total (n = 20)
cronómetro. Luego de 3 minutos registrar la absorbancia Nivel D.S. C.V.
inicial (ver LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO). 37 U/l ± 1,8 U/l 4,9 %
Continuar de modo similar al descripto en A-I. 180 U/l ± 2,8 U/l 1,6 %
b) Sensibilidad: depende del fotómetro empleado y de la

CALCULO DE LOS RESULTADOS longitud de onda. En espectrofotómetros con cubetas de
GOT (U/l) = ∆A/min x factor caras paralelas de 1 cm de espesor, para un ∆A/min de 0,001
En cada caso deberá emplearse el factor de cálculo corres el mínimo cambio de actividad detectable será de 1,8 U/l (a
pondiente de acuerdo a la temperatura de reacción seleccio 340 nm y 30 ó 37oC).
nada (30-37oC o 25oC), como se indica en la siguiente tabla: c) Rango dinámico: el rango útil de lectura se extiende
hasta 0,200 ∆A/min (a 340 nm). Si la ∆A/min es superior
Temperat. a 0,200 (a 340-334 nm) o 0,100 (a 366 nm) se debe re
30-37oC 25oC
Long. onda petir la determinación con muestra diluida (1:5 ó 1:10)
con solución fisiológica, corrigiendo consecuentemente
340 nm 1.740 791 los resultados.
334 nm 1.780 809
366 nm 3.207 1.453 PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS
METODO DE CONTROL DE CALIDAD del usuario del analizador en uso.
(Standatrol S-E 2 niveles) con actividades conocidas de PRESENTACION
GOT, con cada determinación. - 10 x 20 ml (200 ml Reactivo B) (Cód. 1751302).
870580000 / 00 p. 2/6
- IFCC - Clin. Chim. Acta 70/2:F19 (1976). Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
- SSCC - Scand. J. Clin. Lab. Invest. 33:291 (1974). reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
- DGKC - Z. Klin. Chem. 10:281 (1972).
- Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests", Este producto cumple con los requerimientos previstos
Editors, 3rd. Ed. - Saunders Co., 1999.
- Wallnöfer, H.; Schmidt, E.; Schmidt, FW - Synopsis der
leberkrankheiten. Stuttgart: Georg Thieme Verlag, 1974.
- Thefeld, W. et al. - Dtsch. Med. Wschr. 99:343 (1974).
- Dufour D.R; Lott J.A.; Nolte F.S.; Gretch D.R.; Koff R.S. Contenido suficiente para <n> ensayos
and Seeff L.B. - Clin. Chem. 46/12:2027 (2000).
X
- NCCLS document "Evaluation of Precision Performance of H Fecha de caducidad
Clinical Chemistry Devices", EP5-A (1999).
 No congelar
F Riesgo biológico
Cont. Contenido
g Número de lote
Elaborado por:
M
Xn
Nocivo
Xi
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
Disp. Nº: 6911/97 - 954/02 - 3480/13 2000 Rosario - Argentina
870580000 / 00 p. 3/6 UR110912
GOT(AST)
unitest

La aspartato aminotransferasa es una enzima bilocular de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
(citoplasmática y mitocondrial) ampliamente difundida. Se Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
encuentra en mayor concentración en hígado y corazón. acuerdo a la normativa local vigente.
Cualquier alteración de estos tejidos produce un aumento
en los niveles de AST circulante. ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
En el infarto agudo de miocardio, se observa un aumento ALMACENAMIENTO
moderado de la enzima a las 6 u 8 horas de ocurrido el epi Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10oC)
sodio, alcanza niveles máximos alrededor de las 48 horas y hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
retorna a la normalidad entre el 4º y el 6º día. Reactivo A reconstituido: estable 5 días en refrigerador (2-
En pacientes con afecciones hepáticas se observan las 10oC) o 1 día a temperatura ambiente a partir del momento
mayores elevaciones de AST, sobre todo en los casos de de su reconstitución.
hepatitis con necrosis.
La determinación de AST adquiere importancia diagnóstica INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
cuando sus valores se comparan con los de otras enzimas REACTIVOS
de similar origen tisular, es decir que permite completar el Cuando el espectrofotómetro ha sido llevado a cero con agua
perfil enzimático de órganos tales como corazón e hígado. destilada, lecturas de absorbancia del Reactivo A recons
tituido inferiores a 0,800 D.O. o superiores a 1,800 D.O. (a
FUNDAMENTOS DEL METODO 340 nm) son indicio de deterioro del mismo.
Basado en el siguiente esquema reaccionante:
GOT MUESTRA
L-aspartato + 2-oxoglutarato oxalacetato + L-glutamato Suero o plasma
MDH
b) Aditivos: en caso de que la muestra a utilizar sea plasma,
oxalacetato + NADH + H+ L-malato + NAD+
se debe usar heparina como anticoagulante.
REACTIVOS PROVISTOS
- Las muestras provenientes de pacientes hemodializados
A. Reactivo A: viales conteniendo 2-oxoglutarato, nico
o con hipovitaminosis o patologías asociadas con defi
tinamida adenina dinucleótido reducido (NADH), malato
ciencia de piridoxal fosfato producen valores falsamente
deshidrogenasa (MDH) y lactato deshidrogenasa (LDH).
disminuidos.
B. Reactivo B: solución de buffer TRIS pH 7,8 (a 30oC) con
L-aspartato.
triglicéridos hasta 5,5 g/l y hemoglobina hasta 0,14 g/dl.
Concentraciones finales (según IFCC y SSCC) Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
TRIS.......................................... 80 mmol/l; pH 7,8 (a 30oC) drogas en el presente método.
L-aspartato......................................................... 240 mmol/l d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
NADH................................................................ 0,18 mmol/l GOT en suero es estable hasta 3 días en refrigerador, sin
MDH...................................................................... ≥ 420 U/l agregado de conservantes. No congelar.
LDH....................................................................... ≥ 600 U/l
2-oxoglutarato...................................................... 12 mmol/l MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
INSTRUCCIONES PARA SU USO - Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados.
Reactivo B: listo para usar. - Baño de agua a la temperatura indicada en el procedi
Reactivo A; preparación: agregar 2 ml de Reactivo B a un vial miento a seguir.
de Reactivo A. Tapar, agitar hasta disolución completa y fechar. - Cronómetro.

El Reactivo B contiene azida. - Longitud de onda: 340 nm (Hg 334 ó 366).
870590000 / 00 p. 1/6
- Temperatura de reacción: 25, 30 ó 37oC. Ver los VALORES VALORES DE REFERENCIA
DE REFERENCIA correspondientes a cada temperatura. Temperatura 25oC 30oC* 37oC*
- Tiempo de reacción: 4 minutos. Hombres hasta 18 U/l hasta 25 U/l hasta 38 U/l
- Los volúmenes de Muestra y de Reactivo A reconstituido Mujeres hasta 15 U/l hasta 21 U/l hasta 32 U/l
se pueden reducir proporcionalmente, sin que varíen los * Calculados
factores de cálculo correspondientes.
PROCEDIMIENTO
A) 30 ó 37oC GOT (U/l) x 0,017 = GOT (ukat/l)
I- MACROTECNICA
En una cubeta mantenida a 30-37oC, colocar: LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
Reactivo A reconstituido 2 ml Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
- Absorbancia inicial baja: cuando una vez agregado el suero
Muestra 200 ul la primera lectura (tiempo 0) es inferior a 0,800 D.O., es
Mezclar inmediatamente y disparar simultáneamente el tando el Reactivo A (sustrato) en condiciones, indica una
cronómetro. Luego de 1 minuto registrar la absorbancia muestra con muy alta actividad de GOT (que consume el
inicial (ver LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO) y NADH aún antes de esta lectura) o con una concentración
luego a los 1, 2 y 3 minutos de la primera lectura. Determi de cetoácidos endógenos particularmente elevada. En
nar la diferencia promedio de absorbancia/min (∆A/min), este caso, repetir la determinación con muestra diluida
restando cada lectura de la anterior y promediando los con solución fisiológica y multiplicar el resultado por la
valores. Utilizar este promedio para los cálculos. dilución efectuada.
II- MICROTECNICA
Reactivo A reconstituido 1 ml a) Reproducibilidad: procesando de acuerdo al documento
Muestra 100 ul
cronómetro. Continuar de modo similar al descripto en
el procedimiento (A-I). Nivel D.S. C.V.
o
37 U/l ± 1,6 U/l 4,4 %
B) 25 C
180 U/l ± 2,4 U/l 1,3 %
MACROTECNICA
Emplear 500 ul de Muestra. Luego de agregar la muestra Precisión total (n = 20)
mezclar inmediatamente y disparar simultáneamente el Nivel D.S. C.V.
cronómetro. Luego de 3 minutos registrar la absorbancia 37 U/l ± 1,8 U/l 4,9 %
inicial (ver LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO). Con 180 U/l ± 2,8 U/l 1,6 %
tinuar de modo similar al descripto en el procedimiento A-I.
b) Límite de detección: depende del fotómetro empleado y
de la longitud de onda. En espectrofotómetros con cubetas de
CALCULO DE LOS RESULTADOS caras paralelas de 1 cm de espesor, para un ∆A/min de 0,001
el mínimo cambio de actividad detectable será de 1,8 U/l (a
GOT (U/l) = ∆A/min x factor
340 nm y 30 ó 37oC).
En cada caso deberá emplearse el factor de cálculo corres c) Rango dinámico: el rango útil de lectura se extiende
pondiente de acuerdo a la temperatura de reacción seleccio hasta 0,200 ∆A/min (a 340 nm). Si la ∆A/min es superior a
nada (30-37oC o 25oC), como se indica en la siguiente tabla: 0,200 (a 340-334 nm) o 0,100 (a 366 nm) se debe repetir la
Temperat. determinación con muestra diluida (1:5 ó 1:10) con solución
30-37oC 25oC fisiológica, corrigiendo consecuentemente los resultados.
Long. onda
340 nm 1.740 791 PRESENTACION
334 nm 1.780 809 - 20 x 2 ml (Cód. 1751351).
366 nm 3.207 1.453
BIBLIOGRAFIA
METODO DE CONTROL DE CALIDAD - IFCC - Clin. Chim. Acta 70/2:F19 (1976).
Procesar 2 niveles de un material de control de calidad - SSCC - Scand. J. Clin. Lab. Invest. 33:291 (1974).
(Standatrol S-E 2 niveles) con actividades conocidas de - DGKC - Z. Klin. Chem. 10:281 (1972).
GOT, con cada determinación. - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
870590000 / 00 p. 2/6
AACC Press, 4th ed., 2001. SIMBOLOS
- "Tietz textbook of Clinical Chemistry" - Burtis and Ashwood Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
Editors, 3rd. Ed. - Saunders Co., 1999. reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
- NCCLS document "Evaluation of Precision Performance of
C
Clinical Chemistry Devices", EP5-A (1999). por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios

 No congelar
F Riesgo biológico
Cont. Contenido
g Número de lote
M Elaborado por:
Xn
Nocivo
Xi
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
870590000 / 00 p. 3/6 UR100318
LINEA LIQUIDA
GPT(ALT)
AA
alanina aminotransferasa (GPT/ALT) en suero o plasma

La alanina aminotransferasa (ALT o GPT) es una enzima de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
unilocular (citoplasmática) cuya mayor actividad se localiza Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
en el tejido hepático. La destrucción o cambio de permeabi- acuerdo a la normativa local vigente.
lidad de las membranas celulares provoca la liberación de
ALT a la circulación sanguínea. ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
Los mayores aumentos de actividad ALT en suero, se pro- ALMACENAMIENTO
ducen como consecuencia de alteraciones hepáticas. En Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10oC)
el caso de hepatitis virales, el aumento de ALT precede a hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. Una vez
la aparición de ictericia, alcanzando un máximo luego de la abiertos, no deben permanecer fuera del refrigerador por
observación de dicho síntoma. Si los valores permanecen períodos prolongados. Evitar contaminaciones.
elevados luego de 6 semanas, debe pensarse en la posibi- Reactivo único (premezclado): estable 2 meses en refrige-
lidad de una hepatitis activa o en el comienzo de una hepa- rador (2-10oC) a partir de la fecha de su preparación.
titis crónica, por lo que es de utilidad las determinaciones
seriadas de la enzima. INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
La determinación de ALT adquiere importancia diagnóstica REACTIVOS
cuando sus valores se comparan con los de otras enzimas Cuando el espectrofotómetro ha sido llevado a cero con
de similar origen tisular, permitiendo así completar el perfil agua destilada, lecturas de absorbancia del Reactivo único
enzimático de órganos como el hígado. inferiores a 0,900 D.O. o superiores a 1,800 D.O. (a 340 nm)
son indicio de deterioro del mismo.
Basado en el siguiente esquema reaccionante: MUESTRA
GPT Suero o plasma
L-alanina + 2-oxoglutarato piruvato + L-glutamato a) Recolección: se debe obtener de la manera usual.
LDH b) Aditivos: en caso de que la muestra a utilizar sea plas-
piruvato + NADH + H +
L-lactato + NAD+ ma, se puede usar heparina o EDTA como anticoagulantes.
REACTIVOS PROVISTOS - Las muestras provenientes de pacientes hemodializados o
A. Reactivo A: solución de buffer TRIS pH 7,5 conteniendo con hipovitaminosis o patologías asociadas con deficiencia
L-alanina. de piridoxal fosfato producen valores falsamente disminuidos.
B. Reactivo B: solución conteniendo 2-oxoglutarato, nico- - No se observan interferencias por bilirrubina hasta 25 mg/dl,
tinamida adenina dinucleótido reducido (NADH) y lactato ni triglicéridos hasta 1000 mg/dl. La hemoglobina interfiere
deshidrogenasa (LDH). significativamente aumentando los resultados, a partir de
Concentraciones finales hemólisis moderada, debido a la presencia de GPT en los
TRIS...................................................... 100 mmol/l; pH 7,5 eritrocitos.
L-alanina............................................................. 500 mmol/l Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
NADH................................................................ 0,18 mmol/l drogas en el presente método.
LDH........................................................................ ≥ 1,5 U/l d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
2-oxoglutarato...................................................... 15 mmol/l GPT en suero es estable hasta 3 días en refrigerador, sin
agregado de conservantes. No congelar.
Reactivos Provistos: listos para usar. Estos pueden usarse MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
separados o como Reactivo único, mezclando 4 partes de - Espectrofotómetro.
Reactivo A con 1 parte de Reactivo B (ej.: 4 ml Reactivo A - Micropipetas y pipetas capaces de medir los volúmenes
+ 1 ml Reactivo B). indicados.
- Baño de agua a la temperatura indicada en el procedi
PRECAUCIONES miento a seguir.
Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro". - Cronómetro.
864123522 / 01 p. 1/9
CONDICIONES DE REACCION VALORES DE REFERENCIA
- Longitud de onda: 340 nm Temperatura 25oC* 30oC* 37oC
- Temperatura de reacción: 25, 30 ó 37oC. Ver los VALORES Hombres hasta 22 U/l hasta 29 U/l hasta 41 U/l
DE REFERENCIA correspondientes a cada temperatura. Mujeres hasta 17 U/l hasta 22 U/l hasta 31 U/l
- Volumen de muestra: 100 ul * Calculados
Los volúmenes de Muestra y de Reactivo pueden variarse Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios
proporcionalmente, sin que varíen los factores de cálculo. valores de referencia.

PROCEDIMIENTO GPT (U/l) x 0,017 = GPT (ukat/l)
A) 30 ó 37oC METODO DE CONTROL DE CALIDAD

I- TECNICA CON REACTIVO UNICO Procesar 2 niveles de un material de control de calidad
En una cubeta mantenida a 30-37oC, colocar: (Standatrol S-E 2 niveles) con actividades conocidas de
Reactivo único 1,0 ml GPT, con cada determinación.
Preincubar unos minutos. Luego agregar: LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO

Absorbancia inicial baja: cuando una vez agregado el suero la
Mezclar inmediatamente y disparar simultáneamen primera lectura (tiempo 0) es inferior a 0,900 D.O., estando el
te el cron óm et ro. Esperar 90 segundos y leer la Reactivo B en condiciones, indica una muestra con muy alta
absorbancia inicial (ver LIMITACIONES DEL PRO actividad de GPT (que consume el NADH aún antes de esta
CEDIMIENTO) y luego a los 1, 2 y 3 minutos de la lectura) o con una concentración de cetoácidos endógenos
primera lectura. Determinar la diferencia promedio particularmente elevada. En este caso, repetir la determina
de absorbancia/min (∆A/min), restando cada lectura ción con muestra diluida con solución fisiológica y multiplicar
de la anterior y promediando los valores. Utilizar este el resultado por la dilución efectuada.
promedio para los cálculos.
II- TECNICA CON REACTIVOS SEPARADOS PERFORMANCE
En una cubeta mantenida a 30-37oC, colocar: a) Reproducibilidad: procesando simultáneamente replica-
dos de una misma muestra, se obtiene:
Reactivo A 0,80 ml
Nivel D.S. C.V.
Muestra 100 ul 43,35 U/l ± 1,31 U/l 3,02 %
Preincubar unos minutos. Luego agregar: 119,70 U/l ± 2,18 U/l 1,82 %
Reactivo B 0,20 ml b) Sensibilidad: el mínimo cambio de actividad detectable

de GOT que puede distinguirse de cero es de 2 U/l.
Mezclar inmediatamente y disparar simultáneamen
c) Rango dinámico: el rango útil de lectura se extiende hasta
te el cron óm et ro. Esperar 90 segundos y leer la
0,345 ∆A/min (a 340 nm). Si la ∆A/min es superior a 0,345,
absorbancia inicial (ver LIMITACIONES DEL PRO
se debe repetir la determinación con muestra diluida (1:5
CEDIMIENTO) y luego a los 1, 2 y 3 minutos de la
ó 1:10) con solución fisiológica, corrigiendo los resultados
primera lectura. Determinar la diferencia promedio
según el factor de dilución empleado.
de absorbancia/min (∆A/min), restando cada lectura
de la anterior y promediando los valores. Utilizar este PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS
promedio para los cálculos. Para las instrucciones de programación consulte el manual
B) 25oC del usuario del analizador en uso.
Emplear 250 ul de Muestra siguiendo el procedimiento
indicado en A). PRESENTACION
CALCULO DE LOS RESULTADOS (Cód. 1762360)
GPT (U/l) = ∆A/min x factor 250 ml: - 4 x 50 ml Reactivo A
En cada caso deberá emplearse el factor de cálculo co- - 4 x 12,5 ml Reactivo B
rrespondiente de acuerdo a la temperatura de reacción (Cód. 1009322)
seleccionada:
factor(30-37oC) = 1.746 250 ml: - 4 x 50 ml Reactivo A
factor(25oC) = 794 (Cód. 1009263)
864123522 / 01 p. 2/9
250 ml: - 4 x 50 ml Reactivo A SÍMBOLOS
- 4 x 12,5 ml Reactivo B Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
(Cód. 1009620) reactivos para diagnóstico de Wiener lab.

- IFCC - Clin. Chim. Acta 70/2:F19 (1976).
- SSCC - Scand. J. Clin. Lab. Invest. 33:291 (1974).
- DGKC - Z. Klin. Chem. 10:281 (1972).
- Bergmeyer H.V., Horder, M., Rej R. - J. Clin. Chem. Clin.
Biochem. 24:497, 1986. X Contenido suficiente para <n> ensayos

- Dufour, D.R.; Lott, J.A.; Nolte, F.S.; Gretch, D.R.; Koff, R.S.
and Seeff, L.B. - Clin. Chem. 46/12:2027, 2000. H Fecha de caducidad
Editors, 3rd. Ed. - Saunders Co., 1999. l Límite de temperatura (conservar a)
 No congelar
F Riesgo biológico
Cont. Contenido
g Número de lote
Elaborado por:
M
Xn
Nocivo
Xi
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
864123522 / 01 p. 3/9 UR120831
GPT(ALT)
AA
alanina aminotransferasa (GPT/ALT) en suero o plasma
SIGNIFICACION CLINICA El Reactivo B contiene azida.

La alanina aminotransferasa (ALT o GPT) es una enzima Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
unilocular (citoplasmática) cuya mayor actividad se localiza de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
en el tejido hepático. La destrucción o cambio de permeabi- Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
lidad de las membranas celulares provoca la liberación de acuerdo a la normativa local vigente.
ALT a la circulación sanguínea.
Los mayores aumentos de actividad ALT en suero, se produ- ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
cen como consecuencia de alteraciones hepáticas. ALMACENAMIENTO
En el caso de hepatitis virales, el aumento de ALT precede Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10oC)
a la aparición de ictericia, alcanzando un máximo luego de hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
la observación de dicho síntoma. Si los valores permane- Reactivo A reconstituido: estable 30 días en refrigerador
cen elevados luego de 6 semanas, debe pensarse en la (2-10oC) o 3 días a temperatura ambiente a partir del mo-
posibilidad de una hepatitis activa o en el comienzo de una mento de su reconstitución.
hepatitis crónica, por lo que es de utilidad las determinacio-
nes seriadas de la enzima. INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
cuando sus valores se comparan con los de otras enzimas Cuando el espectrofotómetro ha sido llevado a cero con agua
de similar origen tisular, permitiendo así completar el perfil destilada, lecturas de absorbancia del Reactivo A reconsti
enzimático de órganos como el hígado. tuido inferiores a 0,800 D.O. o superiores a 1,800 D.O. (a
340 nm) son indicio de deterioro del mismo.
GPT Suero o plasma
LDH b) Aditivos: en caso de que la muestra a utilizar sea plasma,
piruvato + NADH + H+ L-lactato + NAD+ se debe usar heparina como anticoagulante.
REACTIVOS PROVISTOS - Las muestras con hemólisis visible o intensa producen
A. Reactivo A: viales conteniendo 2-oxoglutarato, nico- valores falsamente aumentados por lo que no deben ser
tinamida adenina dinucleótido reducido (NADH) y lactato usados.
deshidrogenasa (LDH). - Las muestras de pacientes hemodializados o con hipovi
B. Reactivo B: solución de buffer TRIS pH 7,5 (a 30oC) taminosis u otras patologías asociadas con deficiencia de
conteniendo L-alanina. piridoxal fosfato producen valores falsamente disminuidos.
Concentraciones finales (según IFCC y SSCC) Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
TRIS........................................ 100 mmol/l; pH 7,5 (a 30oC) drogas en el presente método.
L-alanina............................................................. 500 mmol/l d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
NADH................................................................ 0,18 mmol/l GPT en suero es estable hasta 3 días en refrigerador (2-
LDH.................................................................... ≥ 1.200 U/l 10oC), sin agregado de conservantes. No congelar.
2-oxoglutarato...................................................... 15 mmol/l
INSTRUCCIONES PARA SU USO - Espectrofotómetro.
Reactivo B: listo para usar. - Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados.
Reactivo A; preparación: agregar 20 ml de Reactivo B - Baño de agua a la temperatura indicada en el procedi
a un frasco de Reactivo A. Tapar, agitar hasta disolución miento a seguir.
completa y fechar. - Cronómetro.

870600000 / 00 p. 1/6
- Longitud de onda: 340 nm (Hg 334 ó 366). VALORES DE REFERENCIA
- Temperatura de reacción: 25, 30 ó 37oC. Ver los VALORES Temperatura 25oC 30oC* 37oC*
DE REFERENCIA correspondientes a cada temperatura. Hombres hasta 22 U/l hasta 29 U/l hasta 41 U/l
- Tiempo de reacción: 4 minutos. Mujeres hasta 17 U/l hasta 22 U/l hasta 31 U/l
Volúmenes de Muestra y de Reactivo A reconstituido: pueden * Calculados
reducirse proporcionalmente, sin que varíen los factores de
cálculo correspondientes.

PROCEDIMIENTO
GPT (U/l) x 0,017 = GPT (ukat/l)
A) 30 ó 37oC
I- MACROTECNICA LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
En una cubeta mantenida a 30-37oC, colocar: Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
Absorbancia inicial baja: cuando una vez agregado el suero
la primera lectura (tiempo 0) es inferior a 0,800 D.O., estando
Muestra 200 ul el Reactivo A (sustrato) en condiciones, indica una muestra
Mezclar inmediatamente y disparar simultáneamente el con muy alta actividad de GPT (que consume el NADH aún
cronómetro. Luego de 1 minuto registrar la absorbancia ini antes de esta lectura) o con una concentración de cetoácidos
cial (ver LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO) y luego, endógenos particularmente elevada. En este caso, repetir la
a los 1, 2 y 3 minutos de la primera lectura. Determinar la determinación con muestra diluida con solución fisiológica y
diferencia promedio de absorbancia/min (∆A/min), restan multiplicar el resultado por la dilución efectuada.
do cada lectura de la anterior y promediando los valores. La humectación es causa de deterioro del Reactivo A.
Utilizar este promedio para los cálculos.
PERFORMANCE
II- MICROTECNICA a) Reproducibilidad: procesando simultáneamente repli-
En una cubeta mantenida a 30-37oC, colocar: cados de una misma muestra, se obtiene:
Reactivo A reconstituido 1 ml Nivel D.S. C.V.
Muestra 100 ul 19,8 U/l ± 1,11 U/l 5,63 %
118 U/l ± 2,02 U/l 1,71 %
Mezclar inmediatamente. Continuar de modo similar al
descripto en el procedimiento anterior (A-I). b) Límite de detección: depende del fotómetro empleado y de
la longitud de onda. De acuerdo a la sensibilidad requerida, en
o
B) 25 C espectrofotómetros con cubetas de caras paralelas de 1 cm de
MACROTECNICA espesor, reproducibilidad ± 2 nm, luz espuria ≤ 0,5% y semiancho
Emplear 500 ul de Muestra. Luego de agregar la muestra de banda ≤ 8 nm, para un ∆A/min de 0,001 el mínimo cambio
mezclar inmediatamente y disparar simultáneamente el de actividad detectable será de 1,8 U/l (a 340 nm y 30 ó 37oC).
cronómetro. Luego de 3 minutos registrar la absorbancia c) Rango dinámico: el rango útil de lectura se extiende
inicial (ver LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO). Con- hasta 0,200 ∆A/min (a 340 nm). Si la ∆A/min es superior a
tinuar de modo similar al descripto en el procedimiento A-I. 0,200 (a 340-334 nm) o 0,100 (a 366 nm) se debe repetir la
determinación con muestra diluida (1:5 ó 1:10) con solución
GPT (U/l) = ∆A/min x factor PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS
pondiente de acuerdo a la temperatura de reacción seleccio-
nada (30-37oC o 25oC), como se indica en la siguiente tabla:
PRESENTACION
Temperat. - 10 x 20 ml (200 ml Reactivo B) (Cód. 1761302).
30-37oC 25oC
Long. onda
BIBLIOGRAFIA
340 nm 1.740 791 - I.F.C.C. - Clin. Chim. Acta 105:147 F (1980).
334 nm 1.780 809 - S.S.C.C. - Scand. J. Clin. Lab. Invest. 33:291 (1974).
366 nm 3.207 1.453 - D.G.K.C. - Z. Klin. Chem. 10:281 (1972).
METODO DE CONTROL DE CALIDAD AACC Press, 4th ed., 2001.
GPT, con cada determinación.
870600000 / 00 p. 2/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
870600000 / 00 p. 3/6 UR110914
GPT(ALT)
C Método UV optimizado (IFCC) para la determinación de alanina
unitest
aminotransferasa (GPT/ALT) en suero o plasma
SIGNIFICACION CLINICA El Reactivo B contiene azida.

La alanina aminotransferasa (ALT o GPT) es una enzima Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
unilocular (citoplasmática) cuya mayor actividad se localiza de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
en el tejido hepático. La destrucción o cambio de permeabi- Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
lidad de las membranas celulares provoca la liberación de acuerdo a la normativa local vigente.
ALT a la circulación sanguínea.
Los mayores aumentos de actividad ALT en suero, se produ- ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
cen como consecuencia de alteraciones hepáticas. ALMACENAMIENTO
En el caso de hepatitis virales, el aumento de ALT precede Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10oC)
a la aparición de ictericia, alcanzando un máximo luego de hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
la observación de dicho síntoma. Si los valores permane- Reactivo A reconstituido: estable 5 días en refrigerador (2-
cen elevados luego de 6 semanas, debe pensarse en la 10oC) o 1 día a temperatura ambiente a partir del momento
posibilidad de una hepatitis activa o en el comienzo de una de su reconstitución.
hepatitis crónica, por lo que es de utilidad las determinacio-
nes seriadas de la enzima. INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
cuando sus valores se comparan con los de otras enzimas Cuando el espectrofotómetro ha sido llevado a cero con agua
de similar origen tisular, permitiendo así completar el perfil destilada, lecturas de absorbancia del Reactivo A reconsti
enzimático de órganos como el hígado. tuido inferiores a 0,800 D.O. o superiores a 1,800 D.O. (a
Suero o plasma
GPT
b) Aditivos: en caso de que la muestra a utilizar sea plasma,
LDH se debe usar heparina como anticoagulante.
piruvato + NADH + H+ L-lactato + NAD+
- Las muestras con hemólisis visible o intensa producen
REACTIVOS PROVISTOS
valores falsamente aumentados por lo que no deben ser
A. Reactivo A: viales conteniendo 2-oxoglutarato, nicotina-
usados.
mida adenina dinucleótido (NADH) y lactato deshidrogenasa
- Las muestras de pacientes hemodializados o con hipovi
(LDH).
taminosis u otras patologías asociadas con defic iencia de
B. Reactivo B: solución de buffer TRIS pH 7,5 (a 30oC)
piridoxal fosfato producen valores falsamente disminuidos.
conteniendo L-alanina.
Concentraciones finales (según IFCC y SSCC) drogas en el presente método.
TRIS........................................ 100 mmol/l; pH 7,5 (a 30oC) d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
L-alanina............................................................. 500 mmol/l GPT en suero es estable hasta 3 días en refrigerador (2-
NADH................................................................ 0,18 mmol/l 10oC), sin agregado de conservantes. No congelar.
LDH.................................................................... ≥ 1.200 U/l
2-oxoglutarato...................................................... 15 mmol/l MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
Reactivo B: listo para usar. - Baño de agua a la temperatura indicada en el procedi
Reactivo A: agregar 2 ml de Reactivo B a un frasco de miento a seguir.
Reactivo A. Tapar, agitar hasta disolución completa y fechar. - Cronómetro.

870610000 / 00 p. 1/6
- Longitud de onda: 340 nm (Hg 334 ó 366). (Standatrol S-E 2 niveles) con actividades conocidas de
- Temperatura de reacción: 25, 30 ó 37oC. Ver los VALORES GPT, con cada determinación.
- Tiempo de reacción: 4 minutos. VALORES DE REFERENCIA
Volúmenes de Muestra y de Reactivo A reconstituido: pueden Temperatura 25oC 30oC* 37oC*
reducirse proporcionalmente, sin que varíen los factores de Hombres hasta 22 U/l hasta 29 U/l hasta 41 U/l
cálculo correspondientes. Mujeres hasta 17 U/l hasta 22 U/l hasta 31 U/l
* Calculados

A) 30 ó 37oC
I- MACROTECNICA CONVERSION DE UNIDADES AL SISTEMA SI
En una cubeta mantenida a 30-37oC, colocar: GPT (U/l) x 0,017 = GPT (ukat/l)
Mezclar inmediatamente y disparar simultáneamente el Absorbancia inicial baja: cuando una vez agregado el suero
cronómetro. Luego de 1 minuto registrar la absorbancia la primera lectura (tiempo 0) es inferior a 0,800 D.O., estando
inicial (ver LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO) el Reactivo A (sustrato) en condiciones, indica una muestra
y luego, a los 1, 2 y 3 minutos de la primera lectura. con muy alta actividad de GPT (que consume el NADH aún
Determinar la diferencia promedio de absorbancia/ antes de esta lectura) o con una concentración de cetoácidos
min (∆A/min), restando cada lectura de la anterior y endógenos particularmente elevada. En este caso, repetir la
promediando los valores. Utilizar este promedio para determinación con muestra diluida con solución fisiológica y
los cálculos. multiplicar el resultado por la dilución efectuada.
La humectación es causa de deterioro del Reactivo A.
II- MICROTECNICA
Reactivo A reconstituido 1 ml a) Reproducibilidad: procesando simultáneamente repli-
cados de una misma muestra, se obtiene:
Muestra 100 ul
Nivel D.S. C.V.
Mezclar inmediatamente y disparar simultáneamente
19,8 U/l ± 1,11 U/l 5,63 %
el cronómetro. Continuar de modo similar al descripto
118 U/l ± 2,02 U/l 1,71 %
en el procedimiento (A-I).
b) Límite de detección: depende del fotómetro empleado
B) 25oC
MACROTECNICA
requerida, en espectrofotómetros con cubetas de caras
Emplear 500 ul de Muestra. Luego de agregar la muestra
paralelas de 1 cm de espesor, reproducibilidad ± 2 nm, luz
mezclar inmediatamente y disparar simultáneamente el
espuria ≤ 0,5% y semiancho de banda ≤ 8 nm, para un ∆A/
cronómetro. Luego de 3 minutos registrar la absorbancia
min de 0,001 el mínimo cambio de actividad detectable será
inicial (ver LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO).
de 1,8 U/l (a 340 nm y 30 ó 37oC).
Continuar de modo similar al descripto en el procedi-
miento A-I.
hasta 0,200 ∆A/min (a 340 nm). Si la ∆A/min es superior a
0,200 (a 340-334 nm) o 0,100 (a 366 nm) se debe repetir la
determinación con muestra diluida (1:5 ó 1:10) con solución
GPT (U/l) = ∆A/min x factor
En cada caso deberá emplearse el factor de cálculo corres- PRESENTACION
pondiente de acuerdo a la temperatura de reacción seleccio- - 20 x 2 ml (Cód. 1761351).
nada (30-37oC o 25oC), como se indica en la siguiente tabla:
Temperat. BIBLIOGRAFIA
30-37oC 25oC - I.F.C.C. - Clin. Chim. Acta 105:147 F (1980).
Long. onda
340 nm 1.740 791 - D.G.K.C. - Z. Klin. Chem. 10:281 (1972).
334 nm 1.780 809 - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
366 nm 3.207 1.453 AACC Press, 4th ed., 2001.

870610000 / 00 p. 2/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
Disp. Nº: 7450/87 - 374/00 - 2402/00 2000 Rosario - Argentina
870610000 / 00 p. 3/6 UR100318
LINEA TURBITEST AA
Haptoglobin
de haptoglobina en suero

La haptoglobina es una proteína de transporte y de fase ALMACENAMIENTO
aguda sintetizada en el hígado. Se une a la hemoglobina Reactivos Provistos: estables en refrigerador (2-10oC) has-
resultante de una hemólisis marcada formando un complejo ta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No congelar.
haptoglobina-hemoglobina (Hp-Hb) altamente estable. La
formación de complejo y su rápida eliminación del torrente MUESTRA
sanguíneo impide la aparición de hemoglobinuria con pérdida Suero
excesiva de hierro. a) Recolección: obtener suero de la manera usual.
Niveles bajos o indetectables de haptoglobina se hallan b) Aditivos: no se requieren.
más frecuentemente en hemólisis intravasculares que en c) Sustancias interferentes conocidas: no emplear mues-
hemólisis extravasculares. tras hemolizadas, lipémicas o contaminadas.
La determinación de haptoglobina está indicada para evaluar Las muestras que poseen precipitados deben ser centrifu-
la gravedad y el estadio de la enfermedad hemolítica. gadas previo a su ensayo.
Los niveles de haptoglobina se encuentran disminuidos No se observan interferencias por bilirrubina hasta 20 mg/dl
en anemias hemolíticas, mononucleosis infecciosa y en (200 mg/l), triglicéridos hasta 1350 mg/dl, hemoglobina hasta
hemorragia tisular. También disminuye en enfermedades 30 mg/dl, ni factor reumatoideo hasta 300 UI/ml.
hepáticas. Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
Los niveles aumentan durante procesos inflamatorios agu- drogas en el presente método.
dos, colagenopatías y destrucción tisular. d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
FUNDAMENTOS DEL METODO es realizado en el día, la muestra puede ser conservada 48
La haptoglobina reacciona con el anticuerpo específico for- horas a 2-10oC o por períodos más prolongados de tiempo
mando inmunocomplejos insolubles. La turbidez causada por a -20oC.
estos inmunocomplejos es proporcional a la concentración
de haptoglobina en la muestra y puede ser medida espec- MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
trofotométricamente. - Espectrofotómetro
- Cubetas espectrofotométricas de caras paralelas
REACTIVOS PROVISTOS - Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados
A. Reactivo A: buffer fosfato, pH 7,4. - Tubos de Kahn o hemólisis
B. Reactivo B: anticuerpos policlonales anti-haptoglobina - Cronómetro
humana (cabra) en buffer fosfato, pH 7,4.
- Solución fisiológica. - Temperatura de reacción: temperatura ambiente (25oC). El
- Calibrador Proteínas nivel alto Turbitest AA de Wiener control de la temperatura no es crítico, pudiendo oscilar
lab. entre 22 y 30oC.
INSTRUCCIONES PARA SU USO - Volumen de muestra: 10 ul
Reactivos Provistos: listos para usar. - Volumen final de reacción: 1810 ul
PRECAUCIONES proporcionalmente, sin que se alteren los factores de cálculo.
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales CURVA DE CALIBRACION
de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos. Realizar en tubos de Kahn, las siguientes diluciones en
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de solución fisiológica del Calibrador Proteínas nivel alto:
864105200 / 01 p. 1/6
1:1, 1:2, 1:4, 1:8 y 1:16, empleando solución fisiológica
como punto cero.
Calibrador Proteínas diluido 10 ul todo tipo de contaminaciones, empleando para la medición
Reactivo A 1500 ul únicamente micropipetas perfectamente limpias y secas.
Homogeneizar y leer la absorbancia de cada dilución a PERFORMANCE

340 nm (DO1) llevando a cero con agua destilada. Luego a) Reproducibilidad: realizando replicados de muestras
agregar: con distintos niveles de haptoglobina, se calculó la precisión
Reactivo B 300 ul intraensayo:
Mezclar e incubar 15 minutos a temperatura ambiente. Nivel D.S. C.V.
Leer la absorbancia a 340 nm (DO2), llevando a cero con 28,2 mg/dl ± 1,0 mg/dl 3,5%
agua destilada. 110,2 mg/dl ± 2,6 mg/dl 2,4%
para cada dilución del Calibrador Proteínas, incluyendo b) Límite de detección: 2 mg/dl.
el punto cero. c) Rango de medición: 2 - 300 mg/dl.
Representar en papel milimetrado las diferencias de d) Efecto prozona: no se evidencia efecto prozona hasta
absorbancia (∆A) en función de la concentración en 1800 mg/dl de haptoglobina.
mg/dl del Calibrador Proteínas.
Muestra 10 ul
(Cód. 1009354)
agregar:
Reactivo B 300 ul 60 ml: - 1 x 50 ml Reactivo A
2005.
Las muestras con absorbancias superiores a la del Calibrador
Proteínas nivel alto deben ser diluidas con solución fisiológica
y procesadas nuevamente. Multiplicar el resultado obtenido

Control Inmunoógico nivel 2 Turbitest AA de Wiener lab.
muestras.
30 - 200 mg/dl (0,30 - 2,00 g/l)
En general se recomienda que cada laboratorio establezca
sus propios intervalos de referencia, dentro de su población
de pacientes.
Los resultados de haptoglobina deberán ser evaluados en
conjunto con la historia clínica del paciente, el examen mé-
dico y otros hallazgos de laboratorio.
864105200 / 01 p. 2/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
864105200 / 01 p. 3/6 UR120517
LINEA TURBITEST AA
HbA1c Control
Lote: 1408147460 (Exp.: 2016/02/28)
C Normal - Patológico
Para control de precisión en la determinación de HbA1c
Normal: 147460 (Exp.: 2016/02/28)
Patológico: 147460 (Exp.: 2016/02/28)
APLICACIONES Los controles no requieren tratamiento previo con el Reac-

HbA1c Control Turbitest AA está diseñado para ser usado tivo Hemolizante.
en el control de calidad del kit HbA1c Turbitest AA.
Consultar la tabla de valores asignados para los constituyen- PRECAUCIONES
tes, debido a que los mismos son lote específicos. Los Reactivos Provistos son para uso diagnóstico "in vitro".
El detergente TTAB es irritante. R36/38: irrita los ojos y la
REACTIVOS PROVISTOS piel. S24/25: evítese el contacto con los ojos y la piel. S37/39:
Control Normal: hemoglobina humana liofilizada conte- usar guantes adecuados y protección para los ojos/la cara.
niendo bromuro de tetradeciltrimetilamonio (TTAB) 9 g/l, Los Controles han sido preparados a partir de material no
con concentraciones de %HbA1c situadas dentro del rango reactivo para HBsAg, HCV y HIV. Sin embargo, los controles
de valores normales o valores clínicamente esperados para y todas las muestras deben manipularse como si se tratara
pacientes diabéticos controlados. de material infectivo.
Control Patológico: hemoglobina humana liofilizada con- Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
teniendo bromuro de tetradeciltrimetilamonio (TTAB) 9 g/l, de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
con concentraciones de %HbA1c dentro del intervalo de Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
valores patológicos. acuerdo a la normativa local vigente.
REACTIVOS NO PROVISTOS ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE

Agua desmineralizada. ALMACENAMIENTO
Los Controles liofilizados son estables en refrigerador (2-10oC)
INSTRUCCIONES PARA SU USO hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. Una vez
- Abrir el vial, retirando el tapón de goma lentamente para reconstituidos son estables 8 horas a temperatura ambiente
evitar pérdida del material liofilizado. (15-25oC), 7 días refrigerados (2-10oC) o 3 meses congelados
- Agregar la cantidad de agua desmineralizada indicada en (-20oC). Si se van a conservar a -20oC, se recomienda que
el rótulo. los controles sean alicuotados y congelados inmediatamente
- Tapar y mezclar por inversión suave varias veces en un después de su reconstitución. Mantener los frascos bien ce-
lapso de 30 minutos, evitando la formación de espuma. rrados y en refrigerador (2-10oC) después de su uso.
VALORES ASIGNADOS
Control Normal Control Patológico
Estandarización
Valor medio Rango Valor medio Rango
HbA1c (g(dl) 0,57 0,47 0,67 1,31 1,07 1,55
Hb (g/dl) 14,6 12,4 16,8 14,4 12,2 16,6
%HbA1c (1) IFCC 3,9 3,2 4,6 9,1 7,5 10,7
%HbA1c (2) DCCT/NGSP 5,7 4,7 6,8 10,5 8,6 12,4
Los valores de %HbA1c pueden ser expresados según la 2) Según DCCT/NGSP:

estandarización IFCC o DCCT/NGSP empleando los siguien- HbA1c (g/dl)
tes modos de cálculo: %HbA1c = 91,5 x + 2,15
Hb (g/dl)
1) Según IFCC:
HbA1c (g/dl)
%HbA1c = x 100
Hb (g/dl)
867022552 / 27 p. 1/4
- 2 x 1 ml: 1 x 1 ml Control Normal Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
1 x 1 ml Control Patológico reactivos para diagnóstico de Wiener lab.

- John, G. - Clin. Chem. Lab. Med. 41:1199 (2003).
- Jeppsson, J. et al. - Clin. Chem. Lab. Med. 40:78 (2002). P Representante autorizado en la Comunidad Europea
 No congelar
F Riesgo biológico
Cont. Contenido
g Número de lote
M Elaborado por:
Xn
Nocivo
Xi
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
867022552 / 27 p. 2/4 UR140827
LINEA TURBITEST AA
HbA1c Control
Lote: 1410151490 (Exp.: 2016/04)
Normal: 151490 (Exp.: 2016/04)
Patológico: 151490 (Exp.: 2016/04)


VALORES ASIGNADOS
Estandarización
HbA1c (g(dl) 0,57 0,47 0,67 1,31 1,07 1,55
Hb (g/dl) 14,6 12,4 16,8 14,4 12,2 16,6
%HbA1c (1) IFCC 3,9 3,2 4,6 9,1 7,5 10,7
%HbA1c (2) DCCT/NGSP 5,7 4,7 6,8 10,5 8,6 12,4

Hb (g/dl)
1) Según IFCC:
HbA1c (g/dl)
%HbA1c = x 100
Hb (g/dl)
867022552 / 28 p. 1/4

 No congelar
F Riesgo biológico
Cont. Contenido
g Número de lote
M Elaborado por:
Xn
Nocivo
Xi
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
867022552 / 28 p. 2/4 UR141021
LINEA TURBITEST AA
HbA1c Control
Lote: 1502160430 (Exp.: 2016/08)
Normal: 160430 (Exp.: 2016/08)
Patológico: 160430 (Exp.: 2016/08)


VALORES ASIGNADOS
Estandarización
HbA1c (g(dl) 0,53 0,43 0,63 1,24 1,02 1,46
Hb (g/dl) 14,2 12,1 16,3 13,9 11,8 16,0
%HbA1c (1) IFCC 3,7 3,1 4,4 8,9 7,3 10,5
%HbA1c (2) DCCT/NGSP 5,6 4,6 6,6 10,3 8,5 12,2

Hb (g/dl)
1) Según IFCC:
HbA1c (g/dl)
%HbA1c = x 100
Hb (g/dl)
867022552 / 29 p. 1/4

 No congelar
F Riesgo biológico
Cont. Contenido
g Número de lote
M Elaborado por:
Xn
Nocivo
Xi
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
867022552 / 29 p. 2/4 UR150226
LINEA TURBITEST AA
HbA1c Control
Lote: 1505166610
Normal: 166610
Patológico: 166610


VALORES ASIGNADOS
Estandarización
HbA1c (g(dl) 0,53 0,43 0,63 1,24 1,02 1,46
Hb (g/dl) 14,2 12,1 16,3 13,9 11,8 16,0
%HbA1c (1) IFCC 3,7 3,1 4,4 8,9 7,3 10,5
%HbA1c (2) DCCT/NGSP 5,6 4,6 6,6 10,3 8,5 12,2

Hb (g/dl)
1) Según IFCC:
HbA1c (g/dl)
%HbA1c = x 100
Hb (g/dl)
867022552 / 30 p. 1/4

 No congelar
F Riesgo biológico
Cont. Contenido
g Número de lote
M Elaborado por:
Xn
Nocivo
Xi
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
867022552 / 30 p. 2/4 UR150526
LINEA TURBITEST AA
HbA1c Control
Lote: 1509173140
Normal: 173140
Patológico: 173140


VALORES ASIGNADOS
Estandarización
HbA1c (g(dl) 0,53 0,43 0,63 1,24 1,02 1,46
Hb (g/dl) 14,2 12,1 16,3 13,9 11,8 16,0
%HbA1c (1) IFCC 3,7 3,1 4,4 8,9 7,3 10,5
%HbA1c (2) DCCT/NGSP 5,6 4,6 6,6 10,3 8,5 12,2

Hb (g/dl)
1) Según IFCC:
HbA1c (g/dl)
%HbA1c = x 100
Hb (g/dl)
867022552 / 31 p. 1/4

 No congelar
F Riesgo biológico
Cont. Contenido
g Número de lote
M Elaborado por:
Xn
Nocivo
Xi
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
867022552 / 31 p. 2/4 UR150908
LINEA TURBITEST AA
HbA1c Control
Lote: 1512180710
Normal: 180710
Patológico: 180710


VALORES ASIGNADOS
Estandarización
HbA1c (g(dl) 0,53 0,43 0,63 1,24 1,02 1,46
Hb (g/dl) 14,2 12,1 16,3 13,9 11,8 16,0
%HbA1c (1) IFCC 3,7 3,1 4,4 8,9 7,3 10,5
%HbA1c (2) DCCT/NGSP 5,6 4,6 6,6 10,3 8,5 12,2

Hb (g/dl)
1) Según IFCC:
HbA1c (g/dl)
%HbA1c = x 100
Hb (g/dl)
867022552 / 32 p. 1/4

 No congelar
F Riesgo biológico
Cont. Contenido
g Número de lote
M Elaborado por:
Xn
Nocivo
Xi
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
867022552 / 32 p. 2/4 UR151215
LINEA TURBITEST AA
HbA1c Control
Lote: 1601183410
Normal: 183410
Patológico: 183410


VALORES ASIGNADOS
Estandarización
HbA1c (g(dl) 0,55 0,45 0,65 1,18 0,97 1,39
Hb (g/dl) 12,3 10,5 14,1 12,3 10,5 14,1
%HbA1c (1) IFCC 4,5 3,7 5,3 9,6 7,9 11,3
%HbA1c (2) DCCT/NGSP 6,2 5,1 7,4 10,9 9,0 12,9

Hb (g/dl)
1) Según IFCC:
HbA1c (g/dl)
%HbA1c = x 100
Hb (g/dl)
867022552 / 33 p. 1/4

 No congelar
F Riesgo biológico
Cont. Contenido
g Número de lote
M Elaborado por:
Xn
Nocivo
Xi
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
867022552 / 33 p. 2/4 UR160122
HbA1c
enzymatic - Calibrator
Lote: 1409149550 (Exp.: 2015/08)
C Para la calibración de la determinación de HbA1c
Nivel 1: 149550 (Exp.: 2015/08)
Nivel 2: 149550 (Exp.: 2015/08)
APLICACIONES
El HbA1c enzymatic Calibrator está diseñado para la PROCEDIMIENTO
calibración de la determinación de HbA1c utilizando el kit Los calibradores se deben usar de la misma manera que
HbA1c enzymatic de Wiener lab. una muestra desconocida, de acuerdo a las instruccio-
nes que acompañan al kit HbA1c enzymatic. Sacar del
REACTIVOS PROVISTOS refrigerador, reconstituir y mezclar con cuidado debido a
Calibrador 1: liofilizado de hemoglobina humana contenien- que la agitación vigorosa puede crear burbujas. Transferir
do un nivel de HbA1c situado dentro del rango de valores alícuotas del volumen requerido a la cubeta del instru-
normales o valores clínicamente esperados para pacientes mento a ser usado. Tapar y conservar a 2-10oC.
diabéticos controlados (4-7%).
Calibrador 2: liofilizado de hemoglobina humana contenien-
do un nivel de HbA1c situado dentro del rango de valores VALORES ASIGNADOS
patológicos (8-14%).
%HbA1c Sistemas de Sistemas de
REACTIVOS NO PROVISTOS 3 reactivos 2 reactivos
Agua desmineralizada Nivel 1 5,5% 5,3%
INSTRUCCIONES PARA SU USO Nivel 2 9,5% 9,5%
Abrir los viales, retirando el tapón de goma lentamente para
evitar pérdida del material liofilizado. Los valores de %HbA1c pueden ser expresados según
Agregar la cantidad de agua desmineralizada indicada en la estandarización IFCC o DCCT/NGSP empleando los
la etiqueta del vial. siguientes modos de cálculo:
Tapar y mezclar por inversión suave varias veces en un lapso 1) Según IFCC:
de 30 minutos, evitando la formación de espuma. %HbA1c = [HbA1c (g/dL) / Hb (g/dL)] × 100
Los calibradores requieren tratamiento previo con HbA1c
enzymatic Lysis Buffer. 2) Según DCCT/NGSP:
%HbA1c = 91,5 × [HbA1c (g/dL) / Hb (g/dL)] + 2,15
PRECAUCIONES
Los reactivos son para uso diagnóstico “in vitro”. PRESENTACION
No ingerir. Evitar contacto con la piel y ojos. - 2 x 0,5 mL (Cód. 1999727)
Los calibradores han sido preparados a partir de material
no reactivo para HBsAg, HCV y HIV. Sin embargo, los cali- BIBLIOGRAFIA
bradores y todas las muestras deben manipularse como si - John, G. - Clin. Chem. Lab. Med. 41:1199 (2003).
se tratara de muestras infectivas. - Jeppsson, J. et al. - Clin. Chem. Lab. Med. 40:78 (2002).
ALMACENAMIENTO
Los calibradores liofilizados son estables en refrigerador
(2-10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
Una vez reconstituidos son estables 14 días refrigerados (2-
10oC). Mantener los frascos bien cerrados y en refrigerador
(2-10oC) después de su uso.
864501000 / 08 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
864501000 / 08 p. 2/4 UR140923
HbA1c
Lote: 1506168370
Nivel 1: 168370
Nivel 2: 168370
APLICACIONES
Calibrador 1: liofilizado de hemoglobina humana contenien- que la agitación vigorosa puede crear burbujas. Transferir
do un nivel de HbA1c situado dentro del rango de valores alícuotas del volumen requerido a la cubeta del instru-
normales o valores clínicamente esperados para pacientes mento a ser usado. Tapar y conservar a 2-10oC.
diabéticos controlados (4-7%).
PRECAUCIONES
ALMACENAMIENTO
864501000 / 10 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
864501000 / 10 p. 2/4 UR150619
HbA1c
Lote: 1509174420
Nivel 1: 174420
Nivel 2: 174420
APLICACIONES
que la agitación vigorosa puede crear burbujas. Transferir
Calibrador 1: liofilizado de hemoglobina humana con- alícuotas del volumen requerido a la cubeta del instru-
teniendo un nivel de HbA1c situado dentro del rango de mento a ser usado. Tapar y conservar a 2-10oC.
valores normales o valores clínicamente esperados para
pacientes diabéticos controlados (4-7%).
Calibrador 2: liofilizado de hemoglobina humana contenien- VALORES ASIGNADOS
do un nivel de HbA1c situado dentro del rango de valores
3 reactivos 2 reactivos
Nivel 2 11,0% 10,7%
Abrir los viales, retirando el tapón de goma lentamente para Los valores de %HbA1c pueden ser expresados según
evitar pérdida del material liofilizado. la estandarización IFCC o DCCT/NGSP empleando los
Agregar la cantidad de agua desmineralizada indicada en siguientes modos de cálculo:
la etiqueta del vial.
Los calibradores requieren tratamiento previo con HbA1c 2) Según DCCT/NGSP:
enzymatic Lysis Buffer. %HbA1c = 91,5 × [HbA1c (g/dL) / Hb (g/dL)] + 2,15
PRECAUCIONES PRESENTACION
Los reactivos son para uso diagnóstico “in vitro”. - 2 x 0,5 mL (Cód. 1999727)
No ingerir. Evitar contacto con la piel y ojos.
Los calibradores han sido preparados a partir de material BIBLIOGRAFIA
no reactivo para HBsAg, HCV y HIV. Sin embargo, los cali- - John, G. - Clin. Chem. Lab. Med. 41:1199 (2003).
bradores y todas las muestras deben manipularse como si - Jeppsson, J. et al. - Clin. Chem. Lab. Med. 40:78 (2002).
se tratara de muestras infectivas.
ALMACENAMIENTO
864501000 / 11 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
864501000 / 11 p. 2/4 UR150925
HbA1c
Lote: 1602184210
Nivel 1: 184210
Nivel 2: 184210
APLICACIONES
Calibrador 1: liofilizado de hemoglobina humana con- que la agitación vigorosa puede crear burbujas. Transferir
teniendo un nivel de HbA1c situado dentro del rango de alícuotas del volumen requerido a la cubeta del instru-
valores normales o valores clínicamente esperados para mento a ser usado. Tapar y conservar a 2-10oC.
pacientes diabéticos controlados (4-7%).
PRECAUCIONES
ALMACENAMIENTO
864501000 / 12 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
864501000 / 12 p. 2/4 UR160211
HbA1c
enzymatic - Control
Lote: 1405139250 (Exp.: 2015/11)
C Para control de precisión en la determinación de HbA1c
Nivel 1: 139250 (Exp.: 2015/11)
Nivel 2: 139250 (Exp.: 2015/11)
APLICACIONES INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS

HbA1c enzymatic Control está diseñado para ser usado REACTIVOS
en el control de calidad del kit HbA1c enzymatic. Los reactivos deben ser límpidos. Descartar si se observa
Consultar la tabla de valores asignados para los constituyen- turbidez.
REACTIVOS PROVISTOS PROCEDIMIENTO

Control nivel 1: liofilizado de hemoglobina humana conte- Los Controles se deben usar de la misma manera que
niendo un nivel de HbA1c situado dentro del rango de valores una muestra desconocida, de acuerdo a las instruccio-
normales o valores clínicamente esperados para pacientes nes que acompañan al kit HbA1c enzymatic. Sacar del
diabéticos controlados. refrigerador, reconstituir y mezclar con cuidado debido a
Control nivel 2: liofilizado de hemoglobina humana con- que la agitación vigorosa puede crear burbujas. Transferir
valores patológicos. mento a ser usado. Tapar y conservar a 2-10oC.
Agua desmineralizada. VALORES ASIGNADOS
Sistemas de 3 reactivos
Abrir el vial, retirando el tapón de goma lentamente para %HbA1c Valor Medio Rango
evitar pérdida del material liofilizado. (%) (%) (%)
Agregar la cantidad de agua desmineralizada indicada en Nivel 1 6,2 5,0 7,4
Nivel 2 8,7 7,0 10,4
Tapar y mezclar por inversión suave varias veces en un lapso
de 30 minutos, evitando la formación de espuma. Sistemas de 2 reactivos
Los controles requieren tratamiento previo con HbA1c en-
zymatic Lysis Buffer. %HbA1c Valor Medio Rango
(%) (%) (%)
PRECAUCIONES Nivel 1 6,0 4,8 7,2
No ingerir. Evitar contacto con la piel y ojos. Nivel 2 8,3 6,6 10,0
reactivo para HBsAg, HCV y HIV. Sin embargo, los con- Los valores de %HbA1c pueden ser expresados según
troles deben manipularse como si se tratara de muestras la estandarización IFCC o DCCT/NGSP empleando los
infectivas. siguientes modos de cálculo:
1) Según IFCC:
%HbA1c = [HbA1c (g/dL) / Hb (g/dL)] × 100
acuerdo a la normativa local vigente. 2) Según DCCT/NGSP:
ALMACENAMIENTO PRESENTACION
Los Controles liofilizados son estables en refrigerador - 2 x 0,5 mL (Cód. 1999728)
(2-10 oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la
caja. Una vez reconstituidos son estables 14 días refri- BIBLIOGRAFIA
gerados (2-10 oC). Mantener los frascos bien cerrados y - John, G. - Clin. Chem. Lab. Med. 41:1199 (2003).
en refrigerador (2-10 oC) después de su uso. - Jeppsson, J. et al. - Clin. Chem. Lab. Med. 40:78 (2002).
864501100 / 06 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
864501100 / 06 p. 2/4 UR140509
HbA1c
enzymatic - Control
Lote: 1408146930 (Exp.: 2015/12)
Nivel 1: 146930 (Exp.: 2015/12)
Nivel 2: 146930 (Exp.: 2015/12)


Nivel 2 8,7 7,0 10,4
(%) (%) (%)
Los valores de %HbA1c pueden ser expresados según
reactivo para HBsAg, HCV y HIV. Sin embargo, los con-
la estandarización IFCC o DCCT/NGSP empleando los
troles deben manipularse como si se tratara de muestras
siguientes modos de cálculo:
infectivas.
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales 1) Según IFCC:
de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos. %HbA1c = [HbA1c (g/dL) / Hb (g/dL)] × 100
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de 2) Según DCCT/NGSP:
acuerdo a la normativa local vigente. %HbA1c = 91,5 × [HbA1c (g/dL) / Hb (g/dL)] + 2,15
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE PRESENTACION

ALMACENAMIENTO - 2 x 0,5 mL (Cód. 1999728)
Los Controles liofilizados son estables en refrigerador
(2-10 oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la BIBLIOGRAFIA
caja. Una vez reconstituidos son estables 14 días refri- - John, G. - Clin. Chem. Lab. Med. 41:1199 (2003).
gerados (2-10 oC). Mantener los frascos bien cerrados y - Jeppsson, J. et al. - Clin. Chem. Lab. Med. 40:78 (2002).
en refrigerador (2-10 oC) después de su uso.
864501100 / 07 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
864501100 / 07 p. 2/4 UR140821
HbA1c
enzymatic - Control
Lote: 1502159240 (Exp.: 2016/05)
Nivel 1: 159240 (Exp.: 2016/05)
Nivel 2: 159240 (Exp.: 2016/05)


Nivel 2 8,6 6,9 10,3
(%) (%) (%)
infectivas.

864501100 / 08 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
864501100 / 08 p. 2/4 UR150218
HbA1c
enzymatic - Control
Lote: 1507170120
Nivel 1: 170120
Nivel 2: 170120


Nivel 2 8,6 6,9 10,3
(%) (%) (%)
infectivas.

864501100 / 09 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
864501100 / 09 p. 2/4 UR150728
HbA1c
enzymatic - Control
Lote: 1509174410
Nivel 1: 174410
Nivel 2: 174410


Nivel 2 8,6 6,9 10,3
(%) (%) (%)
infectivas.

864501100 / 10 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
864501100 / 10 p. 2/4 UR150925
HbA1c
enzymatic - Control
Lote: 1601182240
Nivel 1: 182240
Nivel 2: 182230


Nivel 2 9,1 7,3 10,9
(%) (%) (%)
infectivas.

864501100 / 11 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
864501100 / 11 p. 2/4 UR160118
HbA1c
enzymatic - Control
Lote: 1603185840
Nivel 1: 185840
Nivel 2: 185840


Nivel 2 8,2 6,6 9,8
(%) (%) (%)
infectivas.

864501100 / 12 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
864501100 / 12 p. 2/4 UR160314
HbA1c
C enzymatic
Método enzimático para la determinación de HbA1c en
sangre entera
SIGNIFICACION CLINICA La concentración de HbA1c se expresa directamente como

La diabetes mellitus es una enfermedad crónica, que com- %HbA1c.
prende un conjunto de desórdenes del metabolismo de los
hidratos de carbono que cursan con una manifestación REACTIVOS PROVISTOS
común: la hiperglicemia. A1. Reactivo A1: buffer de Goods 5 mM, pH 7,0, Tritón X-100
El control glicémico periódico permite prevenir los trastornos 0,5% y proteasas 4 kU/ml.
agudos y reducir el riesgo de las complicaciones tardías de A2. Reactivo A2: buffer de Goods 1 mM, pH 6,3.
la enfermedad (retinopatía, nefropatía, neuropatía y enfer- B. Reactivo B: buffer Tris 15 mM, pH 8,0, FVO > 10 U/mL,
medades cardiovasculares). POD 90 U/mL y cromógeno 0,8 mM.
La relación entre el desarrollo y progresión de las compli-
caciones microvasculares y el control glicémico ha sido REACTIVOS NO PROVISTOS
debatida por muchos años, en parte debido a los métodos - HbA1c enzymatic Lysis Buffer de Wiener lab.
inadecuados para realizar un control glicémico retrospectivo. - HbA1c enzymatic Control de Wiener lab.
Los métodos tradicionales de medición de glucosa en sangre - HbA1c enzymatic Calibrator de Wiener lab.
y orina tienen un valor limitado para este propósito, y sólo - Agua desmineralizada.
fue con el desarrollo de determinaciones para proteínas
glicosiladas o glicadas, que se ha logrado un conocimiento INSTRUCCIONES PARA SU USO
exacto y objetivo del estado glicémico a largo plazo. Reactivos A1, A2 y B: listos para usar para analizadores
Las glicohemoglobinas, también llamadas hemoglobinas capaces de trabajar con tres reactivos.
glicosiladas o glicadas, fueron descritas por primera vez Para analizadores que trabajen con dos reactivos, premez-
en 1968 por Rahbar como "hemoglobinas diabéticas". Su clar los reactivos A1 y A2 en una relación 7:3 respectivamente.
producción depende de la concentración de glucosa y ocu- Mezclar por inversión y dejar en reposo a 2-10oC por al
rre a través de un proceso no enzimático post-traduccional menos 12 horas previas al uso.
llamado glicación, donde el azúcar es unido a los grupos HbA1c enzymatic Lysis buffer: listo para usar.
amino de las moléculas de hemoglobina (Hb). La glicación
de los aminoácidos N terminales de las cadenas α y β como PRECAUCIONES
así también los grupos ε-amino de los residuos de lisina en Los Reactivos Provistos son para uso diagnóstico "in vitro".
la molécula de hemoglobina, resultan en una variedad de Los reactivos A2 y B son fotosensibles. Conservar en lugar
hemoglobinas glicadas, incluyendo HbA1c, que es la especie oscuro.
glicosilada en la valina N-terminal de la cadena β. Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
Los niveles de %HbA1c son proporcionales a la concentra- de trabajo en el laboratorio de química clínica.
ción de glucosa en sangre durante las últimas 6-8 semanas. Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
Así, la determinación de %HbA1c provee un parámetro acuerdo a la normativa local vigente.
integral para monitorear el curso del control de glucosa a
largo plazo. ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
ALMACENAMIENTO
FUNDAMENTOS DEL METODO Los Reactivos Provistos son estables en refrigerador (2-
HbA1c enzymatic es un método enzimático en el cual mues- 10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
tras de sangre entera lisadas son sometidas a una digestión No congelar.
proteica por medio de una proteasa. Este proceso libera Reactivos A1, A2 y B: una vez abiertos se recomienda con-
aminoácidos, incluyendo valinas glicadas de las cadenas servar los reactivos en refrigerador (2-10oC) bien cerrados.
beta de hemoglobina. Las valinas glicadas actúan como No congelar.
sustratos de la enzima fructosil valina oxidasa (FVO). Esta Reactivos A1 y A2 premezclados: estables 4 semanas a
enzima cliva específicamente valinas N terminales y genera 2-10oC
peróxido de hidrógeno. Este último a su vez, es cuantifica- HbA1c enzymatic Lysis Buffer: estable en refrigerador
do en una reacción catalizada por la peroxidasa (POD) en (2-10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la eti-
presencia de un cromógeno. No es necesaria una medida queta. Evitar contaminaciones (no introducir pipetas u otros
separada de la hemoglobina total (Hb). elementos en su interior. Cerrar el frasco luego de su uso.
864501500 / 03 p. 1/8
MUESTRA Nombre del test HbA1c enzymatic
Sangre entera anticoagulada
a) Recolección: obtener la muestra de la manera usual. Tipo de reacción Punto final
b) Aditivos: se recomienda el uso de EDTA (Anticoagulante Long. de onda primaria 700 nm
W de Wiener lab) como anticoagulante. Long. de onda secundaria 800 nm
c) Sustancias interferentes conocidas: no se observan Temperatura 37oC
interferencias por bilirrubina (conjugada y no conjugada) Volumen de Reactivo A1 112 uL
hasta 15 mg/dL, triglicéridos hasta 2000 mg/dL, ácido as- Volumen de muestra 25 uL
córbico hasta 25 mg/dL, glucosa hasta 4000 mg/dL, ácido Incubación 120 segundos
úrico hasta 20 mg/dL y urea hasta 100 mg/dL. Volumen de Reactivo A2 48 uL
Deberán interpretarse con cuidado los valores de %HbA1c Incubación 300 segundos
obtenidos en aquellas patologías o situaciones que alteran Volumen de Reactivo B 70 uL
la vida media de los eritrocitos, como anemias hemolíticas, Incubación 180 segundos
anemias ferropénicas, transfusiones, pérdidas de sangre, Calibración 2 puntos
etc. Calibradores 1y2
Referirse a las bibliografías de Young para los efectos de las
Parámetros generales para analizadores automáticos
drogas y las enfermedades en el presente método.
capaces de trabajar con 2 reactivos:
HbA1c enzymatic es un método de punto final y el primer
muestra es estable 3 días a temperatura ambiente (15-25oC)
punto de lectura es inmediatamente anterior al agregado del
o 14 días refrigerada (2-10oC).
reactivo B. Premezclar los reactivos A1 y A2 como se describe
en la sección preparación de reactivos.
PREPARACION DE LA MUESTRA Nombre del test HbA1c enzymatic
Permitir que HbA1c enzymatic Lysis Buffer tome
temperatura ambiente antes de usar. Homogeneizar Tipo de reacción Punto final
la muestra de sangre por inversión repetida, hasta ob- Long. de onda primaria 700 nm
tener una suspensión completa, evitando la formación Long. de onda secundaria 800 nm
de espuma. Temperatura 37oC
En un tubo de Kahn o hemólisis, agregar: Volumen de Reactivo A1-2 160 uL
Volumen de muestra 25 uL
HbA1c enzymatic Lysis Buffer 250 uL Incubación 300 segundos
Muestra 20 uL Volumen de Reactivo B 70 uL
Incubación 180 segundos
Mezclar, agitando por inversión repetida o bien emplear Calibración 2 puntos
vórtex. Evitar la formación de espuma. Incubar a tem- Calibradores 1y2
peratura ambiente (15-25oC) por al menos 10 minutos
para asegurar la lisis completa de los eritrocitos. La Los volúmenes de muestra y reactivos pueden variarse
muestra hemolizada podrá ser empleada una vez ob- proporcionalmente, sin que se alteren los factores de cálculo.
tenida una solución roja oscura y limpia, sin partículas Solicitar aplicaciones para los analizadores comercializados
en solución. por Wiener lab. Las aplicaciones no provistas por Wiener
Los calibradores y controles deben ser tratados exacta- lab. deben ser validadas.
mente igual que las muestras de pacientes.
INTERPRETACION DE RESULTADOS
Estabilidad de las muestras hemolizadas: estables 4 Los valores de %HbA1c son expresados directamente se-
horas a temperatura ambiente (< 25oC). gún el National Glycohemoglobin Standardization Program
(NGSP) y el Diabetes Control and Complications Trial (DCCT).
Los resultados según DCCT/NGSP (%) pueden ser conver-
MATERIAL REQUERIDO (no provisto) tidos a IFCC (%) a través de la siguiente fórmula:
- Analizador automático. IFCC (%) = [NGSP (%) - 2,15] / 0,915
- Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indi-
cados. METODO DE CONTROL DE CALIDAD
- Tubos de Kahn o hemólisis. HbA1c enzymatic Control de Wiener lab.
Los controles requieren tratamiento previo con el reactivo
CONDICIONES DE REACCION HbA1c enzymatic Lysis buffer al igual que los calibradores
Parámetros generales para analizadores automáticos y muestras de pacientes.
capaces de trabajar con 3 reactivos:
HbA1c enzymatic es un método de punto final y el primer VALORES DE REFERENCIA
punto de lectura es inmediatamente anterior al agregado Personas con metabolismo sano, de acuerdo a DCCT/
del reactivo B. NGSP: 4,8-5,9% de HbA1c.
864501500 / 03 p. 2/8
En base a los estudios de DCCT (Diabetes Control and 1 x 36 mL Reactivo A1
Complications Trial) se considera que niveles mayores a 1 x 16 mL Reactivo A2
7% de HbA1c se asocian a mayor riesgo de complicaciones 2 x 12 mL Reactivo B
crónicas. En general se recomienda que cada laboratorio (Cód. 1009621)
establezca sus propios intervalos de referencia, dentro de
Wiener lab. provee separadamente:
su población de pacientes.
HbA1c enzymatic Lysis Buffer: 1 x 50 mL (Cód.1999729)
BIBLIOGRAFIA
- Rahbar, S. - Clin. Chim. Acta 22:296 (1968).
Se recomienda realizar una calibración completa, cuando se
- Bunn, H. et al - Science 200:21 (1978).
cambia de lote de reactivo y/o de lote de HbA1c enzymatic
- Goldstein, D. et al - Diabetes Care 17:938 (1994).
Lysis Buffer o cuando el control de calidad así lo determina.
- The Diabetes Control and Complications Trial Research
Este método fue diseñado para informar %HbA1c, por lo
Group. N. Engl. J. Med. 329:977 (1993).
que no deben ser informados por separado los valores de
- UK Prospective Diabetes Study (UKPDS) Group - Lancet
HbA1c y Hb.
352:837 (1998).
El kit HbA1c enzymatic debe ser usado siempre que el
- Weykamp C.W. et al - Clin. Chem. 41:82 (1995).
valor de hemoglobina del paciente se encuentre dentro del
- Sacks, D. - Clin. Chem. 49:1245 (2003).
rango 9-21 g/dL. No utilizar este método para valores de Hb
- Martina, W. et al - Clin. Chem. 39:2259 (1993).
fuera de este rango.
- Karl, J. et al - Klin. Lab. 39:991 (1993).
Para preservar la integridad de los reactivos debe evi- - American Diabetes Association - Diabetes Care [Supl]
tarse todo tipo de contaminaciones, empleando para 24/1(2001).
la medición únicamente micropipetas perfectamente - John, G. - Clin. Chem. Lab. Med. 41:1199 (2003).
limpias y secas. - Jeppsson, J. et al - Clin. Chem. Lab. Med. 40:78 (2002).
- Jarausch, J. et al - Clin. Chem. 42:116 (Abstract 094) (1996).
PERFORMANCE - Junge, W. et al - Poster presentation 18th International
a) Reproducibilidad: fue evaluada a través del protocolo Diabetes Federation Congress, Paris 2003.
EP15-A de CLSI. Para ello se procesaron en Wiener lab - Tietz Textbook of Clinical Chemistry - Burtis, C.; Ashwood,
CT600i, 3 muestras con niveles diferentes de HbA1c, obte- E. (5ª Ed.) WB Saunders, 2001.
niéndose los siguientes resultados: - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
Precisión intraensayo AACC Press, 5th ed., 2000.
Nivel D.S. C.V. - Young D.S. - "Effects of Disease on Clinical Laboratory
5,39 % 0,04 % 0,72 % Tests", AACC Press, 4th ed., 2001.
10,89 % 0,06 % 0,56 % - CLSI: Clinical and Laboratory Standards Institute (ex-
12,11 % 0,09 % 0,71 % NCCLS) Protocols EP15-A, 1999 / EP17-A, 2004.
Precisión total
Nivel D.S. C.V.
5,39 % 0,07 % 1,32 %
10,89 % 0,09 % 0,82 %
12,11 % 0,19 % 1,54 %
b) Límite de detección: 4%. (%HbA1c).

c) Linealidad: HbA1c enzymatic posee un rango lineal entre
4% y 14%. Muestras con valores superiores a 14% no deben
ser diluidas y ensayadas nuevamente. Los resultados deben
ser reportados como mayores a 14% (> 14%).
PRESENTACION
1 x 18 mL Reactivo A1
1 x 12 mL Reactivo B
(Cód. 1999735)
(Cód. 1009368)
864501500 / 03 p. 3/8
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
864501500 / 03 p. 4/8 UR130730
LINEA TURBITEST AA
HbA1c
C Método de inhibición inmunoturbidimétrica para la
determinación cuantitativa de HbA1c
SIGNIFICACION CLINICA HbA1c

La diabetes mellitus es una enfermedad crónica, que com- Durante la primera fase de la reacción, la HbA1c de la
prende un conjunto de desórdenes del metabolismo de los muestra reacciona con el anticuerpo específico anti-HbA1c
hidratos de carbono que cursan con una manifestación (Reactivo A1), formando complejos solubles. Dado que la
común: la hiperglicemia. molécula de HbA1c posee un solo epitope por β-globina
El control glicémico periódico permite prevenir los trastornos para la fijación del anticuerpo específico, no pueden formarse
agudos y reducir el riesgo de las complicaciones tardías de redes de inmunocomplejos.
la enfermedad (retinopatía, nefropatía, neuropatía y enfer- Con la adición del polihapteno (Reactivo A2), que posee
medades cardiovasculares). numerosos epitopes por molécula, se produce la reacción de
La relación entre el desarrollo y progresión de las compli- dichas moléculas con el exceso de anticuerpo específico de
caciones microvasculares y el control glicémico ha sido la primera reacción, dando lugar a inmunocomplejos insolu-
debatida por muchos años, en parte debido a los métodos bles que pueden ser medidos turbidimétricamente a 340 nm.
inadecuados para realizar un control glicémico retrospectivo. De esta manera, cuanto mayor es el contenido de HbA1c
Los métodos tradicionales de medición de glucosa en sangre de la muestra, menor es la formación de inmunocomplejos
y orina tienen un valor limitado para este propósito, y sólo insolubles y menor la señal turbidimétrica obtenida.
fue con el desarrollo de determinaciones para proteínas
glicosiladas o glicadas, que se ha logrado un conocimiento Hb
exacto y objetivo del estado glicémico a largo plazo. La hemoglobina liberada al hemolizar la muestra, es conver-
Las glicohemoglobinas, también llamadas hemoglobinas tida en un derivado que puede ser medido espectrofotomé-
glicosiladas o glicadas, fueron descritas por primera vez tricamente (Reactivo B).
en 1968 por Rahbar como "hemoglobinas diabéticas". Su Este método es capaz de detectar todas las variantes de
producción depende de la concentración de glucosa y ocu- hemoglobina glicadas en la porción N-terminal de la cadena
rre a través de un proceso no enzimático post-traduccional β, cuya región reconocida por el anticuerpo es idéntica a la
llamado glicación, donde el azúcar es unido a los grupos HbA1c. De esta manera permite controlar el estado metabó-
amino de las moléculas de hemoglobina (Hb). La glicación lico del diabético con hemoglobinopatías y uremia.
de los aminoácidos N-terminales de las cadenas α y β como
así también los grupos ε-amino de los residuos de lisina en REACTIVOS PROVISTOS
la molécula de hemoglobina, resultan en una variedad de HbA1c:
hemoglobinas glicadas, incluyendo HbA1c, que es la especie A1. Reactivo A1: anticuerpos monoespecíficos anti-HbA1c
glicosilada en la valina N-terminal de la cadena β. en buffer pH 6,2.
Los niveles de %HbA1c son proporcionales a la concentra- A2. Reactivo A2: polihapteno-HbA1c en buffer pH 6,2.
ción de glucosa en sangre durante las últimas 6-8 semanas.
Así, la determinación de %HbA1c provee un parámetro Hb:
integral para monitorear el curso del control de glucosa a B. Reactivo B: buffer fosfato pH 7,4.
largo plazo. Calibradores 1, 2, 3 y 4: hemoglobina humana liofilizada
conteniendo TTAB 9 g/l con distintos niveles de glicación:
FUNDAMENTOS DEL METODO nivel 1 (Calibr. 1), nivel 2 (Calibr. 2), nivel 3 (Calibr. 3) y
HbA1c Turbitest AA es un método de inhibición inmunotur- nivel 4 (Calibr. 4). La concentración (variable lote a lote)
bidimétrica para determinar la concentración de hemoglobina figura en el rótulo.
A1c (HbA1c) como un porcentaje de la hemoglobina total en
sangre entera humana (%HbA1c). Para ello, es necesario REACTIVOS NO PROVISTOS
liberar la hemoglobina contenida en los glóbulos rojos, me- - Reactivo Hemolizante, de Wiener lab.
diante la hemólisis de la muestra. La sangre del paciente se - Agua desmineralizada.
pone en contacto con el Reactivo Hemolizante que contiene - Solución fisiológica.
un detergente (bromuro de tetradeciltrimetilamonio - TTAB)
que lisa los glóbulos rojos específicamente. A partir del he- INSTRUCCIONES PARA SU USO
molizado obtenido, se determina mediante dos reacciones Reactivos A1, A2 y B: listos para usar.
independientes, el nivel de HbA1c y Hb de la muestra. Reactivo Hemolizante: listo para usar.
867022551 / 04 p. 1/8
Calibradores 1, 2, 3 y 4: abrir los viales retirando el tapón de d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
goma lentamente para evitar pérdida del material liofilizado. muestra es estable 3 días a temperatura ambiente (15-25oC),
Agregar la cantidad de agua desmineralizada indicada en el 7 días refrigerada (2-10oC) o 6 meses congelada (-20oC).
rótulo, tapar y mezclar por inversión suave, evitando la for- Sólo puede ser descongelada una vez.
mación de espuma. Dejar reposar 30 minutos antes de usar.
Los Calibradores no requieren tratamiento previo con el
Reactivo Hemolizante. PREPARACION DE LA MUESTRA
Permitir que el Reactivo Hemolizante tome temperatura
PRECAUCIONES ambiente antes de usar. Homogeneizar la muestra de
Los Reactivos Provistos son para uso diagnóstico "in vitro". sangre por inversión repetida, evitando la formación de
El detergente TTAB es irritante. R36/38: irrita los ojos y la espuma. En un tubo de Kahn o hemólisis, agregar:
piel. S24/25: evítese el contacto con los ojos y la piel. S26:
en caso de contacto con los ojos, lávense inmediata y abun- Reactivo Hemolizante 1000 ul
dantemente con agua y acúdase a un médico. S28: en caso Muestra 10 ul
Mezclar, agitando por inversión repetida o bien emplear
con agua. S37/39: usar guantes adecuados y protección
vortex. Evitar la formación de espuma. Después del
para los ojos/la cara.
cambio de color rojo a marrón verdoso (1-2 minutos), la
Los Calibradores han sido preparados a partir de material
muestra hemolizada podrá ser empleada.
no reactivo para HBsAg, HCV y HIV. Sin embargo, los Cali-
bradores y todas las muestras deben manipularse como si Estabilidad de muestras hemolizadas: estables 4 horas
se tratara de material infectivo. a temperatura ambiente (15-25oC), 24 horas refrigeradas
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales (2-10oC) o 6 meses congeladas (-20oC). Sólo pueden ser
de trabajo en el laboratorio de química clínica. descongeladas una vez.
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE - Analizador automático.
ALMACENAMIENTO - Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados.
Los Reactivos Provistos son estables en refrigerador (2- - Tubos de Kahn o hemólisis.
No congelar. CONDICIONES DE REACCION
Reactivos A1, A2 y B: una vez abiertos se recomienda con- Parámetros generales para analizadores automáticos:
servar los reactivos en refrigerador (2-10oC) bien cerrados.
No congelar. Nombre del test HbA1c
Calibradores 1, 2, 3 y 4: una vez reconstituidos son estables Tipo de reacción punto final
8 horas a temperatura ambiente (15-25oC), 2 días refrigera- Long. de onda primaria 340 nm
dos (2-10oC) o 3 meses congelados (-20oC). Se recomienda Temperatura 37oC
que los calibradores sean alicuotados y congelados inme- Volumen de muestra 10 ul
diatamente después de su reconstitución. Volumen de Reactivo A1 250 ul
Reactivo Hemolizante: estable en refrigerador (2-10oC) Volumen de Reactivo A2 50 ul
hasta la fecha de vencimiento indicada en él rótulo. Evitar Incubación de Reactivo A1 300''
contaminaciones (no introducir pipetas u otros elementos en Incubación de Reactivo A2 300”
su interior) y cerrar el frasco luego de su uso. Calibración 5 puntos
Calibradores 0*, 1, 2, 3 y 4
MUESTRA
Sangre entera anticoagulada Nombre del test Hb
a) Recolección: obtener la muestra de la manera usual. Tipo de reacción punto final
b) Aditivos: se recomienda el uso de heparina o EDTA Long. de onda primaria 570 nm
(Anticoagulante W de Wiener lab) como anticoagulante. Long. de onda secundaria 660 nm
c) Sustancias interferentes conocidas: no se observan Temperatura 37oC
interferencias por bilirrubina (conjugada y no conjugada) Volumen de muestra 20 ul
hasta 40 mg/dl, triglicéridos hasta 13 g/l, ácido ascórbico Volumen de Reactivo B 230 ul
hasta 50 mg/dl y factor reumatoideo hasta 500 U/ml. Incubación de Reactivo B 300''
Deberán interpretarse con cuidado los valores de %HbA1c Calibración 2 puntos
obtenidos en aquellas patologías o situaciones que alteran la Calibradores 0* y 1
vida media de los eritrocitos, como anemias hemolíticas, ane-
mias ferropénicas, transfusiones, pérdidas de sangre, etc. *Como "0" (Calibrador cero) puede utilizarse solución fisio-
Referirse a las bibliografías de Young para los efectos de las lógica o Reactivo Hemolizante.
drogas y las enfermedades en el presente método. Los volúmenes de muestra y reactivos pueden variarse
867022551 / 04 p. 2/8
proporcionalmente, sin que se alteren los factores de cálculo. HbA1c
Solicitar adaptaciones para los analizadores comercializados 0,40 g/dl 0,011 g/dl 2,8 %
por Wiener lab. Las adaptaciones no provistas por Wiener 0,86 g/dl 0,016 g/dl 1,9 %
lab. deben ser validadas. 1,25 g/dl 0,016 g/dl 1,3 %
CALCULO DE LOS RESULTADOS %HbA1c

El %HbA1c puede ser calculado a través de dos procedi- 5,2 g/dl 0,09 g/dl 1,7 %
mientos distintos: 7,9 g/dl 0,11 g/dl 1,4 %
1) Según IFCC: 11,6 g/dl 0,13 g/dl 1,2 %
HbA1c (g/dl)
%HbA1c = x 100 Precisión total
Hb (g/dl) Hb
2) Según DCCT/NGSP: Nivel D.S. C.V.
12,1 g/dl 0,15 g/dl 1,2 %
HbA1c (g/dl)
%HbA1c = 91,5 x + 2,15 13,6 g/dl 0,13 g/dl 1,0 %
Hb (g/dl) 12,1 g/dl 0,16 g/dl 1,3 %
HbA1c
0,40 g/dl 0,022 g/dl 5,5 %
HbA1c Control normal-patológico Turbitest AA.
0,86 g/dl 0,023 g/dl 2,7 %
Los controles no requieren tratamiento previo con el Reactivo
1,25 g/dl 0,033 g/dl 2,7 %
Hemolizante.
%HbA1c
VALORES DE REFERENCIA 5,2 g/dl 0,17 g/dl 3,4 %
Personas con metabolismo sano: 7,9 g/dl 0,16 g/dl 2,1 %
1- Según IFCC: 2,9-4,2% de HbA1c 11,6 g/dl 0,27 g/dl 2,3 %
2- Según DCCT/NGSP: 4,8-5,9% de HbA1c
En base a los estudios de DCCT y UKPDS se considera que b) Límite de detección: es la mínima cantidad del analito
niveles mayores a 7% de HbA1c se asocian a mayor riesgo capaz de ser detectada como una muestra distinta de cero.
de complicaciones crónicas. HbA1c: 0,1 g/dl
En general se recomienda que cada laboratorio establezca Hb: 0,1 g/dl
sus propios intervalos de referencia, dentro de su población c) Rango de medición de HbA1c: se pueden obtener valo-
de pacientes. res de HbA1c entre 0,3 g/dl y la concentración del calibrador
más alta, que corresponde a un rango dinámico aproximado
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO de 2 a 16% de %HbA1c según IFCC y de 4 a 17% según
Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA. DCCT/NGSP, considerando un nivel de Hb normal (15 g/dl).
Los componentes del kit HbA1c Turbitest AA son lote-espe- Si la concentración de HbA1c es menor a 0,3 g/dl, se acon-
cíficos por lo que no pueden intercambiarse con otros lotes. seja hemolizar la muestra original 1 + 50 (ej. 10 ul + 500 ul)
Se recomienda realizar una recalibración completa, cuando con el Reactivo Hemolizante y repetir las determinaciones
se cambia de lote de reactivo o cuando el control de calidad de HbA1c y Hb, no requiriendo corrección de los resultados
así lo determina. obtenidos.
Este método fue diseñado para informar %HbA1c, por lo Si la concentración de HbA1c es mayor a la concentración
que no deben ser informados por separado los valores de del calibrador más alta, se aconseja diluir el hemolizado
HbA1c y Hb. 1+1 o hemolizar la muestra original 1 + 200 con el Reactivo
Para preservar la integridad de los reactivos debe evitarse Hemolizante y repetir las determinaciones de HbA1c y Hb,
todo tipo de contaminaciones, empleando para la medición no requiriendo corrección de los resultados obtenidos.
únicamente micropipetas perfectamente limpias y secas. d) Rango de medición de Hb: 6 a 30 g/dl.
PERFORMANCE PRESENTACION
a) Reproducibilidad: fue evaluada a través del protocolo 1 x 50 ml Reactivo A1
EP5-A de CLSI. Para ello se procesaron en Konelab 60i, 3 1 x 10 ml Reactivo A2
muestras con niveles diferentes de HbA1c, obteniéndose 1 x 50 ml Reactivo B
los siguientes resultados: 4 viales Calibradores (1-4) x 2 ml
Precisión intraensayo (Cód. 1999700)
Hb 4 x 18 ml Reactivo A1
Nivel D.S. C.V. 4 x 5 ml Reactivo A2
12,1 g/dl 0,10 g/dl 0,9 % 4 x 18 ml Reactivo B
13,6 g/dl 0,07 g/dl 0,5 % 4 viales Calibradores (1-4) x 2 ml
12,1 g/dl 0,06 g/dl 0,5 % (Cód. 1009303)
867022551 / 04 p. 3/8
4 x 18 ml Reactivo A1 SIMBOLOS
4 x 5 ml Reactivo A2 Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
4 x 18 ml Reactivo B reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
4 viales Calibradores (1-4) x 2 ml
C
(Cód. 1009224) por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios

2 x 50 ml Reactivo A1
2 x 10 ml Reactivo A2
4 viales Calibradores (1-4) x 2 ml V Uso diagnóstico "in vitro"
(Cód. 1009650)
Reactivo Hemolizante: 1 x 500 ml (Cód.1999701) H Fecha de caducidad

BIBLIOGRAFIA
- Rahbar, S. - Clin. Chim. Acta 22:296 (1968).  No congelar
- Bunn, H. et al - Science 200:21 (1978).
- Goldstein, D. et al - Diabetes Care 17:938 (1994). F Riesgo biológico
- The Diabetes Control and Complications Trial Research
Group - N. Engl. J. Med. 329:977 (1993). Volumen después de la reconstitución
- UK Prospective Diabetes Study (UKPDS) Group - Lancet
352:837 (1998). Cont. Contenido
- Sacks, D. et al - Clin. Chem. 48:436 (2002).
- Weykamp C.W. et al - Clin. Chem. 41:82 (1995). g Número de lote
- Sacks, D. - Clin. Chem. 49:1245 (2003).
M Elaborado por:
- Martina, W. et al - Clin. Chem. 39:2259 (1993).
- Karl, J. et al - Klin. Lab. 39:991 (1993). Xn
Nocivo
- American Diabetes Association - Diabetes Care [Supl]
24/1 (2001). Corrosivo / Caústico
- Jeppsson, J. et al - Clin. Chem. Lab. Med. 40:78 (2002). Xi
Irritante
- Jarausch, J. et al - Clin. Chem. 42:116 (Abstract 094)
(1996).
- Junge, W. et al - Poster presentation 18th International
Diabetes Federation Congress, Paris 2003. Calibr. Calibrador
E. (5ª Ed.) WB Saunders, 2001. b Control
AACC Press, 5th ed., 2000. b Control Positivo
- Young D.S. - "Effects of Disease on Clinical Laboratory
Tests", AACC Press, 4th ed., 2001. c Control Negativo
NCCLS) - Protocols EP5-A, 1999 / EP17-A, 2004.

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
867022551 / 04 p. 4/8 UR130509
HBsAg
ELISA
Ensayo inmunoenzimático (ELISA) para la detección del
antígeno de superficie del virus de la hepatitis B (HBsAg)
SIGNIFICACION CLINICA Diluyente de Conjugado: buffer tris conteniendo proteínas

La hepatitis B es una enfermedad viral del hígado causada y conservantes.
por el virus de la hepatitis B (HBV). Puede cursar en forma TMB: solución de tetrametilbencidina (TMB) 36 mM en
asintomática, o como un proceso agudo o crónico. En los dimetilsulfóxido (DMSO) (100x).
casos más graves puede derivar en cirrosis hepática y car- Diluyente de TMB: buffer citrato 40 mM y peróxido de
cinoma hepatocelular primario. Se transmite principalmente hidrógeno 1,27 mM, pH 4,3.
por contacto parenteral, percutáneo, o sexual. También se Stopper: ácido sulfúrico 2 N.
ha observado transmisión perinatal y horizontal. Buffer de Lavado Concentrado: buffer salino con tensio-
El HBV está constituido por una nucleocápside que contiene activo (25x). Color verde.
el ADN asociado a proteínas core y una envoltura cuyo prin- Control Positivo: suero que contiene HBsAg inactivado y
cipal componente es una proteína conocida como antígeno conservantes. Color naranja.
de superficie (HBsAg). El HBsAg generalmente aparece 6 Control Negativo: suero con conservantes. Color amarillo.
semanas después de la exposición al HBV y persiste du-
rante 4-14 semanas. Está presente durante el periodo de REACTIVOS NO PROVISTOS
incubación, antes de la aparición de la enfermedad clínica Agua destilada o desionizada
y puede ser detectado en sangre 2 a 8 semanas antes de
la aparición de ictericia o de evidencias bioquímicas de dis- MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
función hepática. Así, el HBsAg es un primer indicador de - Micropipetas para medir los volúmenes indicados
infección por el HBV. La hepatitis B crónica se define como - Tips descartables
la presencia del HBsAg en sangre durante más de 6 meses. - Material volumétrico para preparar las diluciones indicadas
La detección del HBsAg es importante para el diagnóstico de - Estufa a 37oC
las hepatitis agudas y crónicas, el control de portadores en - Papel absorbente
bancos de sangre y unidades de diálisis, de transplantados - Guantes descartables
y gestantes y para el control de preparados de sangre y - Reloj alarma o cronómetro
derivados destinados a transfusiones. - Hipoclorito de sodio
- Sistema de lavado de policubetas (manual o automático)
FUNDAMENTOS DEL METODO - Espectrofotómetro para lectura de policubetas
HBsAg ELISA es un método inmunoenzimático directo tipo
sandwich. Los pocillos de la policubeta están recubiertos PRECAUCIONES
con anticuerpo de cobayo anti-HBs (anti-HBsAg) que actúa - Los reactivos son para uso diagnóstico “in vitro”.
como anticuerpo de captura. La muestra se incuba en uno - Todas las muestras de pacientes deben manipularse como
de los pocillos. Si la misma contiene HBsAg, éste formará un si fueran capaces de transmitir infección.
complejo con el anticuerpo unido a la placa. El material no - Los sueros controles han sido examinados para anticuerpos
unido se elimina por lavado. En el siguiente paso se agrega contra el virus de inmunodeficiencia humana (HIV) y hepa-
el anticuerpo de cabra anti-HBs conjugado con peroxidasa, titis C (HCV), encontrándose no reactivos. Sin embargo, se
que se unirá con los complejos anticuerpo-antígeno forma- recomienda manipularlos con las precauciones requeridas
dos previamente. El conjugado no unido se remueve por para muestras potencialmente infecciosas.
lavado. Posteriormente se agrega una solución conteniendo - A fin de asegurar la inactivación de agentes patógenos, los
tetrametilbencidina y peróxido de hidrógeno. En los casos en materiales que han sido empleados en el ensayo deben
que el HBsAg esté presente en la muestra, se desarrolla color descontaminarse antes de ser descartados. El método
celeste que vira al amarillo cuando se detiene la reacción recomendado para este procedimiento es autoclavar
con ácido sulfúrico. durante 1 hora a 121oC. Los líquidos de desecho pueden
ser desinfectados con hipoclorito de sodio (concentración
REACTIVOS PROVISTOS final 5%) durante un mínimo de 60 minutos.
Policubeta sensibilizada: policubeta de tiras removibles con - Evitar que los vapores de hipoclorito provenientes de los recipien-
96 pocillos recubiertos con anticuerpo de cobayo anti-HBs. tes para desechos biológicos u otras fuentes entren en contacto
Conjugado Concentrado: anticuerpo de cabra anti-HBs con los reactivos, ya que el hipoclorito afecta la reacción.
conjugado con peroxidasa (51x). Color rojo. - Evitar el derrame de líquidos y formación de aerosoles.
861104205 / 01 p. 1/12
- No usar los reactivos luego de la fecha de vencimiento. Stopper, Control Positivo y Control Negativo: listos para
- No intercambiar reactivos de distintos lotes, o modificar los usar.
procedimientos del ensayo.
- No emplear reactivos de otro origen. ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
- Evitar tocar las paredes de los pocillos con los tips. ALMACENAMIENTO
- No utilizar elementos metálicos que puedan entrar en Los Reactivos Provistos son estables en refrigerador (2-
contacto con los reactivos. 10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
- Las policubetas deben incubarse en estufa. Debe evitarse No congelar.
abrir la estufa durante este proceso. No usar baño de agua. Buffer de Lavado Concentrado y Stopper: conservar a
- Evitar el contacto del ácido sulfúrico (Stopper) y DMSO temperatura entre 2 y 25oC.
(TMB) con piel, mucosas y ojos. Si esto ocurre, enjuagar Buffer de lavado (1x): conservar en recipiente cerrado. Es
con abundante agua. R36/38: irrita los ojos y la piel. R34: estable 3 meses a temperatura entre 2 y 25oC.
provoca quemaduras. S24/25: evítese el contacto con Conjugado (1x): es estable 7 días a 2-10oC, y 6 horas a
los ojos y la piel. S26: en caso de contacto con los ojos, temperatura 20-25oC.
lávense inmediata y abundantemente con agua y acúdase Policubeta sensibilizada: abrir el envoltorio cuando haya
a un médico. S28: en caso de contacto con la piel, lávese tomado temperatura ambiente y no antes del momento
inmediata y abundantemente con agua. S37/39: usar de usar, de lo contrario se favorecerá la condensación de
guantes adecuados y protección para los ojos/la cara. humedad sobre la superficie de los pocillos. Las tiras no
- No pipetear con la boca. Usar guantes descartables y pro- utilizadas se deben conservar a 2-10oC dentro del sobre
tección en los ojos durante la manipulación de las muestras con desecante y cerrado. Las tiras conservadas en estas
y reactivos del ensayo. condiciones pueden ser utilizadas dentro de los 4 meses
- La TMB es sensible a la luz. Mantenga el frasco cerrado posteriores, mientras no se supere la fecha de vencimiento
cuando no se utiliza. indicada en la caja.
- Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
acuerdo a la normativa vigente. MUESTRA
Suero o plasma
PREPARACION DE LOS REACTIVOS a) Recolección de muestra: obtener de la manera habitual.
Buffer de Lavado: a baja temperatura los componentes b) Aditivos: no se requieren para suero. Puede usarse el
del reactivo concentrado pueden precipitar. En tal caso, suero obtenido en tubos con acelerador de la coagulación
llevar la solución a 37ºC hasta disolución completa. Para y gel separador. Para las muestras de plasma se puede
la obtención del buffer de lavado listo para usar (1x), diluir emplear heparina, citrato o EDTA como anticoagulantes.
una parte de Buffer de Lavado Concentrado (25x) con 24 c) Sustancias Interferentes conocidas: no se ha observado
partes de agua destilada o desionizada. Ej.: 20 ml con 480 ml interferencia con muestras que contienen hasta 25 mg/dl de
para una policubeta. bilirrubina, 50 mg/dl de ácido ascórbico, 1200 mg/dl de trigli-
Conjugado: para la obtención del conjugado listo para usar céridos o 300 mg/dl de hemoglobina. Muestras conteniendo
(1x), diluir 1 parte de Conjugado Concentrado + 50 partes de partículas deberán clarificarse mediante centrifugación.
Diluyente de Conjugado según tabla siguiente: d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
Nº de pocillos Conjugado Diluyente muestra puede conservarse refrigerada (2-10oC) hasta 3
Concentrado de Conjugado días. Si se necesita conservarla por más tiempo, se debe
8 20 ul 1 ml congelar a -20oC (o inferior). No es recomendable realizar
16 40 ul 2 ml múltiples ciclos de congelamiento y descongelamiento, ya
24 60 ul 3 ml que puede generar resultados erróneos. En caso de utilizar
32 80 ul 4 ml muestras congeladas, éstas deben ser homogeneizadas y
96 240 ul 12 ml centrifugadas antes de su uso.
La inactivación por calor puede afectar el resultado.
Revelador: para la obtención del revelador listo para usar No utilizar muestras con contaminación microbiana.
(1x), diluir 1 parte de TMB (100x) + 100 partes de Diluyente Si las muestras deben ser transportadas, deben embalarse
de TMB (ver tabla siguiente). La TMB concentrada está de acuerdo a las especificaciones legales relativas al envío
disuelta en DMSO. Dado que la temperatura de fusión del de material infeccioso.
DMSO es 18oC, la TMB debe alcanzar temperatura ambiente
(20-25oC) y homogeneizarse bien antes de usar.
Nº de pocillos TMB Diluyente de TMB PROCEDIMIENTO DEL ENSAYO
8 10 ul 1 ml
16 20 ul 2 ml
2- Preparar el volumen necesario de Buffer de Lavado (1x).
24 30 ul 3 ml
3- Colocar en el soporte de tiras, el número de pocillos
32 40 ul 4 ml
requeridos para la cantidad de determinaciones a realizar,
96 120 ul 12 ml
861104205 / 01 p. 2/12
incluyendo 2 pocillos para el Control Positivo (CP) y 3 Stopper 100 ul 100 ul 100 ul
para el Control Negativo (CN). 13- A los 5 minutos leer absorbancia en espectrofotómetro
4- Dispensar la muestra (M) y los controles según el en forma bicromática a 450/620-650 nm, o monocromá-
siguiente esquema: tica a 450 nm.
M CP CN Nota: se recomienda realizar siempre la lectura en forma
Control Positivo - 100 ul - bicromática. En caso de que la lectura sea monocromáti-
ca, realizar un blanco de reactivos que luego deberá ser
Control Negativo - - 100 ul restado de todos los valores de las muestras.
Muestra 100 ul - -
Se puede verificar la dispensación de controles o
muestras a los pocillos visualmente, o mediante lectura ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL
espectrofotométrica (a 410/450 nm). El color de la reacción es estable entre 5 y 30 minutos, por
lo que los resultados deben leerse dentro de ese lapso.
5- Para evitar la evaporación, cubrir la placa con las
láminas adhesivas provistas, e incubar 60 ± 2 minutos
PROCEDIMIENTO DE LAVADO
a 37 ± 1oC. En forma paralela, preparar el Conjugado
Eliminar el líquido de los pocillos por aspirado o volcado.
Los pocillos se lavan con 350 ul de Buffer de Lavado. Ase-
6- Después de la incubación eliminar por completo el
gurar que la altura alcanzada al llenar los pocillos no cause
líquido de cada pocillo. Lavar 5 veces según instrucción
desbordes. La solución de lavado debe estar en contacto
de lavado (ver Procedimiento de Lavado).
con los pocillos entre 30 y 60 segundos. En caso de hacer
7- Agregar el Conjugado:
el lavado en forma automática, se aconseja realizar un doble
Conjugado 100 ul 100 ul 100 ul aspirado al final de cada lavado.
Para evitar la evaporación cubrir la policubeta con lámi- Garantizar que luego del último lavado no quede líquido
nas adhesivas. residual. Para ello, realice un doble aspirado para eliminar el
8- Incubar 30 ± 1 minutos a 37 ± 1oC. En forma paralela, excedente de buffer. Si persiste luego de este procedimiento,
preparar el Revelador (ver Tabla en PREPARACION DE invertir la placa sobre papel absorbente y golpearla varias
LOS REACTIVOS). veces, de lo contrario podrán obtenerse resultados erróneos.
Nota: el procedimiento de lavado es muy crítico para el
9- Lavar 5 veces según instrucción de lavado.
resultado del ensayo. Si queda buffer de lavado en el pocillo
10- Dispensar el Revelador.
o los pocillos no están completamente llenos, se obtendrán
Revelador 100 ul 100 ul 100 ul resultados erróneos. No dejar que los pocillos se sequen
11- Incubar 30 ± 2 minutos a temperatura ambiente (18- durante el procedimiento. Los lavadores automáticos deben
25oC), protegido de la luz. ser enjuagados con agua destilada o desionizada al final del
12- Agregar el Stopper: día, para evitar obstrucciones o corrosiones debido a las
sales presentes en el buffer de lavado.

ETAPA PROCEDIMIENTO PRECAUCIONES/OBSERVACIONES
Muestras Agregar 100 ul de M, CP y CN
Incubación Cubrir los pocillos e incubar durante 60 ± 2 mi- En estufa
nutos a 37 ± 1oC
Lavado Lavar cada pocillo con 350 ul de buffer de lava- Tiempo de contacto de la solución de lavado entre
do (5 veces) 30 y 60 segundos. Eliminar completamente el líquido
residual de los pocillos
Dilución Preparación del Conjugado (1x) Durante la incubación con la muestra, diluir el Con-
jugado Concentrado (51x)
Conjugado Agregar 100 ul de Conjugado (1x)
nuto a 37 ± 1oC
861104205 / 01 p. 3/12
Dilución Preparación del Revelador (1x) Durante la incubación con el Conjugado, diluir la
TMB (100x)
Revelado Agregar 100 ul de Revelador Evitar el contacto con agentes oxidantes. No ex-
poner a la luz.
Lectura Leer en espectrofotómetro Leer dentro de los 5 y 30 minutos
CRITERIOS DE VALIDACION DEL ENSAYO - Contaminación de la muestra durante la dispensación,

El ensayo se considera válido si se cumplen simultáneamen- imprecisión en el dispensado de muestra, conjugado y/o
te las siguientes condiciones: revelador en el pocillo.
- Reutilización de tips.
1- El promedio de las absorbancias de los Controles Nega-
- Contaminación del pocillo con hipoclorito u otros agentes
tivos debe ser menor o igual a 0,050.
oxidantes.
Ejemplo:
En ciertos casos una muestra no reactiva puede presentar
Lectura 1 = 0,025, Lectura 2 = 0,028, Lectura 3 = 0,022
una reacción falsamente reactiva, tanto en el análisis inicial
Promedio = (0,025 + 0,028 + 0,022) / 3= 0,025
como en sus repeticiones. Algunas causas de este fenómeno
2- Para el cálculo eliminar cualquier Control Negativo con pueden ser:
absorbancia mayor a 0,050. - Contaminación de la muestra durante la extracción, pro-
3- Si se ha eliminado algún Control Negativo, calcular nueva- cesamiento o conservación.
mente el promedio de los Controles Negativos. Un ensayo es - Presencia de sustancias interferentes, tales como autoan-
válido si se aceptan al menos dos de los Controles Negativos. ticuerpos, fármacos, etc.
- Dispensación y/o aspirado ineficiente de la solución de
4- El promedio de las absorbancias de los Controles Positivos lavado (sistema obstruido).
debe ser mayor a 1,000.
Ejemplo: LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
Lectura 1 = 1,504, Lectura 2 = 1,496 Ver Sustancias Interferentes conocidas en Muestra.
Promedio = (1,504 + 1,496) / 2= 1,500 No se debe utilizar pool de sueros o plasmas.
5- La diferencia entre el promedio de las absorbancias de los No se deben emplear otros fluidos corporales como la saliva,
Controles Positivos y Controles Negativos debe ser mayor líquido cefalorraquídeo u orina.
o igual a 0,950. Un resultado no reactivo no excluye la posibilidad de infec-
Si una de estas condiciones no se cumple, repetir el ensayo. ción por HBV ya que el antígeno puede encontrarse a una
Recordar que las lecturas obtenidas dependerán de la sen- concentración inferior a los límites de detección.
sibilidad del aparato empleado. Si una muestra es repetidamente reactiva deberán realizarse
pruebas de confirmación, y otros marcadores serológicos
INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS de la hepatitis B, para confirmar la infección por el HBV.
La presencia o ausencia de antígeno HBsAg se determina
relacionando la absorbancia de la muestra respecto al valor CARACTERISTICAS ESPECIFICAS DE PERFORMANCE
del Cut-off. Sensibilidad clínica
En un estudio realizado con 122 muestras con infección por
Cut-off = CN + 0,060 HBsAg, confirmada por diferentes métodos, se encontraron
CN: promedio de las absorbancias del Control Negativo repetidamente reactivas con el kit HBsAg ELISA la totalidad
Ejemplo: 0,025 + 0,060 = 0,085 de las muestras.
Muestras No Reactivas: se consideran aquellas con ab- Sensibilidad en Paneles de Performance

sorbancias menores al Cut-off. Se evaluaron diferentes paneles comerciales internacionales
Muestras Reactivas: se consideran aquellas con absorban- obteniéndose los siguientes resultados:
cias mayores o iguales al Cut-off.
Panel Muestras Muestras
Toda muestra inicialmente reactiva debe ser repetida por reactivas detectadas
duplicado. Si una o ambas repeticiones dan reactivas, la
PHA105 14 13
misma debe considerarse reactiva.
PHA106M 12 11
Una muestra inicialmente reactiva puede ser no reactiva en
PHA204 23 22
las dos repeticiones. Esto puede deberse a:
PHA205 23 23
- Contaminación cruzada de un pocillo no reactivo por una
PHA206 23 20
muestra reactiva.
861104205 / 01 p. 4/12
PHA105, y PHA106M (HBsAg Low Titer Performance Pa- - con anticuerpos contra Treponema pallidum, Mycoplasma
nels, BBI, USA). pneumoniae, Trypanosoma cruzi, y otros microorganismos.
PHA204, PHA205, y PHA206 (HBsAg Mixed Titer Perfor- - de pacientes hemodializados y mujeres embarazadas.
mance Panels, BBI, USA). La especificidad obtenida para esta población fue de 99,73%
(IC95%: 99,05-100).
Sensibilidad en Paneles de Seroconversión
Se evaluaron los siguientes paneles comerciales internacio- Precisión
nales de seroconversión de BBI (USA): Se evaluó la precisión de la prueba siguiendo el protocolo
EP5-A recomendado por la CLSI. Los ensayos fueron rea-
Panel Nº de HBsAg Subtipo lizados con muestras de diferentes niveles de reactividad
muestras ELISA*
en el HBsAg ELISA y con los controles. Se realizaron 2
PHM917 3 1 (43) indet. ensayos diarios evaluando cada muestra por duplicado y
PHM920 6 4 (26) ad por el transcurso de 20 días.
PHM927 6 4 (7) indet.
PHM928 7 3 (14) ad
PHM930 5 4 (3) ad de abs. D.S. C.V. D.S. C.V.
PHM933M 5 4 (7) ad Muestra 1 0,277 0,012 4,44% 0,032 11,44%
PHM934 6 5 (3) ad Muestra 2 0,930 0,031 3,32% 0,113 12,11%
*Se indica el número de muestras reactivas con el ELISA. Muestra 3 1,171 0,050 4,30% 0,117 10,02%
El número entre paréntesis indica el número de días entre Control (+) 1,880 0,068 3,62% 0,146 7,79%
el sangrado inicial y la primera muestra reactiva. Control (-) 0,026 0,002 8,53% 0,004 16,83%
DS: desviación estándar, CV: coeficiente de variación
Sensibilidad analítica (Límite de detección inferior)
n= 80
Ha sido calculada con las siguientes preparaciones inter-
nacionales:
PRESENTACION
- Second International Standard for HBsAg, subtype adw2,
genotype A. NIBSC código 00/588:
Diluido en suero humano negativo para HBsAg y anti-HBs,
se detectó hasta 0,10 UI/ml.
BIBLIOGRAFIA
- Estándares para HBsAg subtipos ad y ay provistos por el
- Barbara J. (1993) Vox sanguinis 65, 249-250.
Paul Erlich Institute (a partir de preparaciones de 100 U/ml
- Comanor L. (2006) Vox sanguinis 91, 1-12.
y 50000 U/ml, respectivamente):
- Engvall E. (1980) Methods in Enzymology 70, 419-439.
Diluidos en suero bovino se detectó hasta la dilución
- Gerlich WH (2007) Journal of Viral Hepatitis 14(I), 16-21.
0,063 U/ml del subtipo ad y hasta la dilución 0,12 U/ml
- Previsani N, Lavanchy D y Zuckerman A. Hepatitis B (2004)
del subtipo ay.
Viral. Hepatitis. In: Mushawar IK, editors. Perspectives in
- Hepatitis B Surface Antigen Sensitivity Panel PHA808,
Medical. Virology, vol. 10.
BBI, USA:
- Diagnostic problems caused by HBsAg mutants- A con-
Se detectaron las muestras 1-8 (hasta 0,06 UI/ml del sub-
sensus report of an expert meeting (2004) Intervirology
tipo ad), y 11-17 (hasta 0,09 UI/ml del subtipo ay).
47, 310-313.
Especificidad - WHO Working Group on International Reference Prepara-
En un estudio realizado sobre 685 muestras de sueros y tions for Testing Diagnostic Kits used in the Detection of
plasmas de pacientes de consultorios externos, la especifi- HBsAg and anti-HCV Antibodies. Switzerland 2003.
cidad obtenida fue de 100% (IC95%: 99,93-100). - Evaluation of Precision Performance of Clinical Chemistry
En un estudio realizado sobre 1134 muestras de sueros de Devices. Approved Guideline EP5-A 19/2 (1999) National
banco de sangre, la especificidad obtenida fue de 99,82% Committee for Clinical Laboratory Standards.
(IC95%: 99,54-100). - Specifications for Immunological Testing for Infectious
En otro estudio de 1256 muestras de plasmas de dos centros Diseases. Approved Guideline I/LA18-A2 (1994) National
de salud, se encontró una especificidad de 99,68% (IC95%: Committee for Clinical Laboratory Standards.
99,33-100). - Clinical Evaluation of Immunoassays. Approved Guideline
I/LA21-A (2002) National Committee for Clinical Laboratory
Se estudió la posible aparición de reactividad cruzada Standards.
ensayando 364 muestras provenientes de individuos con - Interference testing in Clinical Chemistry. Approved
diferentes condiciones clínicas que podrían ser causantes Guideline EP7-A (2002) National Committee for Clinical
de reacciones inespecíficas para el ensayo HBsAg ELISA. Laboratory Standards.
Este grupo incluía muestras:
- con anticuerpos contra HCV, EBV, CMV, HIV, HTLV y
otros virus.
- con diferentes autoanticuerpos (AGA, AMA, ATA, ACA,
TPO, y otros).
861104205 / 01 p. 5/12
Policubeta Sensib. TMB Diluy.
Policubeta sensibilizada Diluyente de TMB

TMB Buf. Lavado Conc.

TMB Buffer de Lavado Concentrado
Control + Control -
Stopper
Stopper



 No congelar
F Riesgo biológico
Cont. Contenido
g Número de lote
M Elaborado por:
Xn
Nocivo
Xi
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Riobamba 2944
Wiener lab.
Control Negativo 2000 - Rosario - Argentina
Bioquímica
861104205 / 01 p. 6/12 UR130321
HCV
ELISA 3ª generación
de anticuerpos contra el virus de la hepatitis C
SIGNIFICACION CLINICA humana conjugado con peroxidasa (10x). Color rojo.

La hepatitis C es la forma más común de hepatitis post- Diluyente de Conjugado: buffer salino con proteínas.
transfusional. Su agente etiológico es el virus C (HCV) y Revelador: solución de tetrametilbencidina (TMB) y peróxido
su transmisión se produce fundamentalmente por vía pa- de hidrógeno.
renteral. Otras vías de transmisión, como la materno-fetal Stopper: ácido sulfúrico 2 N.
y la sexual, son poco eficientes. El 80% de las personas Buffer de Lavado Concentrado: buffer salino con tensio-
infectadas con HCV desarrollan infección crónica, y en un activo (25x). Color verde.
30% la enfermedad progresa hasta la cirrosis o cáncer de Control Positivo: suero humano inactivado conteniendo
hígado. La mayoría de las personas con hepatitis C no pre- anticuerpos contra HCV. Color naranja.
senta síntomas, y por lo tanto, esta enfermedad raramente Control Negativo: suero humano no reactivo inactivado.
es diagnosticada antes de la aparición de sus complicaciones Color amarillo.
crónicas.
El genoma del HCV está constituido por una cadena simple REACTIVOS NO PROVISTOS
positiva de ARN que codifica para una poliproteína, que Agua destilada o desionizada.
puede dar origen a por lo menos 9 proteínas funcionales.
Los primeros ensayos para hepatitis C fueron de primera MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
generación y empleaban sólo la proteína NS4. Sin embargo, - Micropipetas para medir los volúmenes indicados
carecían de sensibilidad y especificidad. Actualmente existen - Tips descartables
ensayos de tercera generación que incorporan proteínas del - Material volumétrico para preparar las diluciones indicadas
core (estructural) y de las regiones no estructurales (NS3, - Estufa a 37oC
NS4 y NS5). - Papel absorbente
Los ensayos serológicos para el diagnóstico de la infección - Guantes descartables
por HCV detectan anticuerpos anti-HCV. Se emplean en el - Reloj alarma o cronómetro
diagnóstico de la infección y en el control de unidades de - Hipoclorito de sodio
donantes en bancos de sangre. - Sistema de lavado de policubetas (manual o automático)
- Espectrofotómetro para lectura de policubetas
Los pocillos de la policubeta están recubiertos con antígenos PRECAUCIONES
recombinantes derivados de la región estructural (core) y de - Los reactivos son para uso diagnóstico “in vitro”.
la no estructural (NS3, NS4 y NS5) del virus de la hepatitis - Todas las muestras de pacientes deben manipularse como
C. La muestra diluida se incuba en los pocillos. Si los anti- si fueran capaces de transmitir infección.
cuerpos contra el virus están presentes en la muestra, éstos - Los sueros controles han sido examinados para antígeno de
se unen a los antígenos del pocillo. El material no unido superficie de Hepatitis B (HBsAg), y anticuerpos contra el
es removido por lavado. En el paso siguiente se agrega el Virus de Inmunodeficiencia Humana (HIV), encontrándose
conjugado, que consiste en un anticuerpo monoclonal anti- no reactivos. Sin embargo, se recomienda manipularlos con
IgG humana conjugado con peroxidasa. Este se une a los las precauciones requeridas para muestras potencialmente
complejos antígeno-anticuerpo, formados previamente. El infecciosas.
conjugado no unido se remueve por lavado. Posteriormente, - A fin de asegurar la inactivación de agentes patógenos, los
se agrega una solución conteniendo tetrametilbencidina y materiales empleados en el ensayo deben descontaminar-
peróxido de hidrógeno. Las muestras reactivas desarrollan se antes de ser descartados. El método recomendado para
color celeste que vira al amarillo cuando se detiene la reac- este procedimiento es autoclavar durante 1 hora a 121oC.
ción con ácido sulfúrico. Los líquidos de desecho pueden ser desinfectados con
hipoclorito de sodio (concentración final 5%) durante un
REACTIVOS PROVISTOS mínimo de 60 minutos.
Policubeta sensibilizada: policubeta de tiras recortables - Evitar que los vapores de hipoclorito provenientes de
con 96 pocillos recubiertos con antígenos recombinantes los recipientes para desechos biológicos u otras fuentes
del HCV. entren en contacto con los reactivos, ya que el hipoclorito
Diluyente de Muestra: buffer salino con tensioactivo. Color violeta. afecta la reacción.
Conjugado Concentrado: anticuerpo monoclonal anti-IgG - Evitar el derrame de líquidos y formación de aerosoles.
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- No usar los reactivos luego de la fecha de vencimiento. Buffer de Lavado Concentrado y Stopper: conservar a
- No intercambiar reactivos de distintos lotes, o modificar los temperatura entre 2 y 25oC.
procedimientos del ensayo. Buffer de Lavado (1x): conservar en recipiente cerrado. Es
- No emplear reactivos de otro origen. estable 3 meses a temperatura entre 2 y 25oC.
- Evitar tocar las paredes de los pocillos con los tips. Conjugado (1x): estable 6 horas a temperatura entre 2 y
- No utilizar elementos metálicos que puedan entrar en 25oC.
contacto con los reactivos. Policubeta sensibilizada: abrir el envoltorio cuando haya to-
- Las policubetas deben incubarse en estufa. Debe evitarse mado temperatura ambiente y no antes del momento de usar,
abrir la estufa durante este proceso. No usar baño de agua. de lo contrario se favorecerá la condensación de humedad
- Evitar contacto del ácido sulfúrico (Stopper) con piel y sobre la superficie de los pocillos. Las tiras no utilizadas se
mucosas. R36/38: irrita los ojos y la piel. R34: provoca deben conservar a 2-10oC dentro del sobre con desecante.
quemaduras. S24/25: evítese el contacto con los ojos y Las tiras conservadas en estas condiciones pueden ser
la piel. S26: en caso de contacto con los ojos, lávense utilizadas dentro de los 4 meses posteriores, mientras no se
inmediata y abundantemente con agua y acúdase a un supere la fecha de vencimiento indicada en la caja.
médico. S28: en caso de contacto con la piel, lávese inme-
diata y abundantemente con agua. S37/39: usar guantes MUESTRA
adecuados y protección para los ojos/la cara. Suero o plasma
- No pipetear con la boca. Usar guantes descartables y pro- a) Recolección: obtener suero o plasma de la manera habitual.
- La TMB es sensible a la luz. Mantenga el frasco cerrado anticoagulantes.
cuando no se utiliza. c) Sustancias Interferentes conocidas: no se ha observado
- Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de interferencia con muestras que contienen hasta 25 mg/dl de
acuerdo a la normativa vigente. bilirrubina, 50 mg/dl de ácido ascórbico, 1500 mg/dl de trigli-
céridos o 300 mg/dl de hemoglobina. Muestras conteniendo
PREPARACION DE LOS REACTIVOS partículas deberán clarificarse mediante centrifugación.
Es importante que todo el material utilizado para la preparación d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
de los reactivos esté limpio y libre de detergente e hipoclorito. muestra puede conservarse refrigerada (2-10oC) hasta 3
Buffer de Lavado: a baja temperatura los componentes días. Si se necesita conservar por más tiempo, se debe
del reactivo concentrado pueden precipitar. En tal caso, congelar a -20oC (o inferior). No es recomendable realizar
llevar la solución a 37oC hasta disolución completa. Para la múltiples ciclos de congelamiento y descongelamiento, ya
obtención del buffer de lavado listo para usar (1x), diluir una que puede generar resultados erróneos. En caso de utilizar
parte de Buffer de Lavado Concentrado (25x) con 24 partes muestras congeladas, éstas deben ser homogeneizadas y
de agua destilada o desionizada. Ej.: 20 ml con 480 ml para centrifugadas antes de su uso.
una policubeta. La inactivación por calor puede afectar el resultado.
Conjugado: para la obtención del conjugado listo para usar No utilizar muestras con contaminación microbiana.
(1x), diluir una parte de Conjugado Concentrado (10x) con 9 Si las muestras deben ser transportadas, deben embalarse
partes de Diluyente de Conjugado (ej.: ver tabla siguiente con de acuerdo a las especificaciones legales relativas al envío
volumen requerido de Conjugado Concentrado y Diluyente de material infeccioso.
de Conjugado):
Nº de pocillos Conjugado Diluyente PROCEDIMIENTO DEL ENSAYO

Concentrado de Conjugado 1- Llevar a temperatura ambiente los reactivos y las
16 200 ul 1,8 ml 2- Preparar el volumen necesario de Buffer de Lavado (1x).
96 1200 ul 10,8 ml incluyendo 2 pocillos para el Control Positivo (CP) y 3
para el Control Negativo (CN).
Diluyente de Muestra, Diluyente de Conjugado, Revela- 4- Dispensar el Diluyente de Muestra, luego la muestra
dor, Stopper, Control Positivo y Control Negativo: listos (M) y los controles según el siguiente esquema:
para usar. M CP CN
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE Diluyente de Muestra 100 ul 100 ul 100 ul
ALMACENAMIENTO Control Positivo - 20 ul -
Los Reactivos Provistos son estables en refrigerador (2- Control Negativo - - 20 ul
No congelar. Muestra 20 ul - -
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Homogeneizar mezclando 2-3 veces por carga y descarga Revelador 100 ul 100 ul 100 ul
de la micropipeta, o agitando la placa durante 10 segundos.
11- Incubar 30 ± 2 minutos a temperatura ambiente (18-
Al adicionar la muestra, el Diluyente de Muestra virará de
25oC), protegido de la luz.
color (ver tabla). Se puede verificar la dispensación de
12- Agregar el Stopper:
controles o muestras a los pocillos visualmente, o mediante
lectura espectrofotométrica (a 610/650 nm). Stopper 100 ul 100 ul 100 ul
Tipo de Sin Suero o Control Control 13- Leer absorbancia en espectrofotómetro en forma mo-
muestra muestra plasma Positivo Negativo nocromática a 450 nm o bicromática a 450/620-650 nm.
Color Violeta Celeste Naranja Verde Nota: se recomienda efectuar siempre la lectura en forma
oscuro bicromática. En caso de que la lectura sea monocromáti-
ca, realizar un blanco de reactivos que luego deberá ser
Advertencia: las muestras hemolizadas, ictéricas o turbias restado de todos los valores de las muestras.
pueden alterar el color final sin afectar los resultados. El
viraje de color puede depender del volumen de muestra
adicionado y de su composición. Un viraje de color de ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL
menor intensidad puede deberse a que se dispensó un El color de la reacción es estable durante 10 minutos, por lo
volumen inferior de muestra, a que la muestra no se que los resultados deben leerse dentro de ese lapso.
encuentra en las condiciones adecuadas, o a que tiene
una baja concentración de proteínas. PROCEDIMIENTO DE LAVADO
5- Para evitar la evaporación, cubrir la placa con la cinta Eliminar el líquido de los pocillos por aspirado o volcado.
autoadhesiva provista, e incubar 60 ± 2 minutos a 37 ± Los pocillos se lavan con 350 ul de Buffer de Lavado. Ase-
1oC. En forma paralela, preparar el conjugado (ver Tabla gurar que la altura alcanzada al llenar los pocillos no cause
en PREPARACION DE LOS REACTIVOS). desbordes. La solución de lavado debe estar en contacto
6- Después de la incubación eliminar por completo el con los pocillos entre 30 y 60 segundos.
líquido de cada pocillo. Lavar 5 veces según instrucción Garantizar que luego del último lavado no quede líquido
de lavado (ver PROCEDIMIENTO DE LAVADO). residual. Para ello, realice un doble aspirado para eliminar el
7- Agregar el Conjugado: excedente de buffer. Si persiste luego de este procedimiento,
Conjugado 100 ul 100 ul 100 ul invertir la placa sobre papel absorbente y golpearla varias
veces, de lo contrario podrán obtenerse resultados erróneos.
Para evitar la evaporación cubrir la policubeta con cinta
Nota: el procedimiento de lavado es crítico para el resul-
autoadhesiva.
tado del ensayo. Si queda Buffer de Lavado en el pocillo o
8- Incubar 30 ± 1 minutos a 37 ± 1oC.
los pocillos no están completamente llenos, se obtendrán
9- Lavar 5 veces según instrucción de lavado.
10- Dispensar el Revelador. Para ello, trasvasar a un reci-
durante el procedimiento. Los lavadores automáticos deben
piente limpio solamente el volumen de Revelador que se
ser enjuagados con agua destilada o desionizada al final del
requiera. No devolver el Revelador restante al frasco origi-
día, para evitar obstrucciones o corrosiones debido a las
nal. Evitar el contacto del reactivo con agentes oxidantes.

Muestra pocillo
y los controles
tos a 37 ± 1oC
Lavado Lavar cada pocillo con 350 ul de buffer de lavado Tiempo de contacto de la solución de lavado entre
(5 veces) 30 y 60 segundos. Eliminar completamente el líqui-
do residual de los pocillos
Dilución Preparación del Conjugado (1x) Durante la incubación con la muestra, diluir Conju-
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to a 37 ± 1oC
Revelado Agregar 100 ul de Revelador Trasvasar el volumen necesario de Revelador a usar.
No pipetear del frasco original. Descartar remanen-
te del reactivo. Evitar contacto con agentes oxidan-
tes. No exponer a la luz.
CRITERIOS DE VALIDACION DEL ENSAYO Una muestra inicialmente reactiva puede ser no reactiva en
El ensayo se considera válido si se cumplen simultánea- las dos repeticiones. Esto puede deberse a:
mente las siguientes condiciones: - Contaminación cruzada de un pocillo no reactivo por una
muestra reactiva.
- Contaminación de la muestra durante la dispensación,
imprecisión en el dispensado de muestra, conjugado y/o
Ejemplo:
Revelador en el pocillo.
Lectura 1 = 0,042; Lectura 2 = 0,058; Lectura 3 = 0,050
Promedio = (0,042 + 0,058 + 0,050) / 3 = 0,050
- Contaminación del pocillo con hipoclorito u otros agentes
2- Eliminar cualquier Control Negativo con absorbancia oxidantes.
mayor a 0,100. En ciertos casos una muestra no reactiva puede presentar
3- Si se ha eliminado algún Control Negativo, calcular nueva- una reacción falsamente reactiva, tanto en el análisis inicial
mente el promedio de los Controles Negativos. Un ensayo es como en sus repeticiones. Algunas causas de este fenómeno
válido si se aceptan al menos dos de los Controles Negativos. pueden ser:
- Contaminación de la muestra durante la extracción, pro-
4- El promedio de las absorbancias de los Controles Positivos cesamiento o conservación.
debe ser mayor a 1,000. - Presencia de sustancias interferentes, tales como autoan-
Ejemplo: ticuerpos, fármacos, etc.
Lectura 1 = 1,407; Lectura 2 = 1,331 - Dispensación y/o aspirado ineficiente de la solución de
Promedio = (1,407 + 1,331) / 2= 1,369 lavado (sistema obstruido).
5- La diferencia entre el promedio de las absorbancias de los
Controles Positivos y Controles Negativos debe ser mayor LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
o igual a 0,900. Ver Sustancias Interferentes conocidas en Muestra.
No se debe utilizar pool de sueros o plasmas.
Si una de estas condiciones no se cumple, repetir el ensayo. No se deben emplear otros fluidos corporales como la saliva,
Recordar que las lecturas obtenidas dependerán de la sen- líquido cefalorraquídeo u orina.
sibilidad del aparato empleado. La presencia de anticuerpos contra el virus C indica infección
reciente o pasada por este virus, pero no permite diferenciar
INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS entre una infección aguda, crónica o resuelta. Debido al
La presencia o ausencia de anticuerpos anti-HCV se deter- tiempo prolongado que transcurre entre la infección y la sero-
mina relacionando la absorbancia de la muestra respecto conversión, los niveles de anti-HCV pueden ser indetectables
al valor del Cut-off. en las fases tempranas de la infección. Así, un resultado
Cut-off = CN + 0,150 negativo no excluye la posibilidad de infección por HCV.
Las muestras repetidamente reactivas deberán analizarse
CN: promedio de las absorbancias del Control Negativo por técnicas suplementarias o confirmatorias, como Inmu-
Ejemplo: 0,045 + 0,150 = 0,195 noblot o PCR, respectivamente.
Muestras No Reactivas: se consideran aquellas con ab-
sorbancias menores al Cut-off.
a) Sensibilidad
Muestras Reactivas: se consideran aquellas con absorban-
Sensibilidad en Paneles de Performance: en un estudio
realizado sobre diferentes paneles comerciales internacio-
Toda muestra inicialmente reactiva debe ser repetida por nales, se obtuvieron los siguientes resultados:
duplicado. Si una o ambas repeticiones dan reactivas, la PHV 103 (Anti-HCV Low Titer Performance Panel, BBI, USA):
misma debe considerarse reactiva. se detectaron 14 de las 14 muestras reactivas.
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PHV 105M (Anti-HCV Low Titer Performance Panel, BBI, - con anticuerpos contra HAV, HBV, EBV, CMV, HSV, VZV,
USA): se detectaron 12 de las 12 muestras reactivas. HIV, HTLV y otros virus;
PHV 205 (Anti-HCV Mixed Titer Performance Panel, BBI, - con diferentes autoanticuerpos (AGA, AMA, ATA, FAN,
USA): se detectaron 23 de las 23 muestras reactivas. factor reumatoideo y otros);
PHV 206 (Anti-HCV Mixed Titer Performance Panel, BBI, - con anticuerpos contra Treponema pallidum, Mycoplasma
USA): se detectaron 23 de las 23 muestras reactivas. pneumoniae, Toxoplasma gondii, Toxocara canis, Trypa-
PHV 207 (Anti-HCV Mixed Titer Performance Panel, BBI, nosoma cruzi y otros microorganismos;
USA): se detectaron 21 de las 23 muestras reactivas. - de pacientes hemodializados y mujeres embarazadas.
PP 0404 (Panel de Performance para HCV, Q Panel, Brasil): La especificidad obtenida para esta población fue de 98,38%.
se detectaron 16 de las 16 muestras reactivas.
PP 0405 (Panel de Performance para HCV, Q Panel, Brasil): c) Precisión
se detectaron 16 de las 16 muestras reactivas. Se evaluó la precisión de la prueba siguiendo el protocolo
PP 0406 (Panel de Performance para HCV, Q Panel, Brasil): EP5-A recomendado por el CLSI (ex NCCLS). Los ensayos
se detectaron 16 de las 16 muestras reactivas. fueron realizados con muestras de diferentes niveles de reac-
tividad en el HCV ELISA 3ª generación y con los controles.
Sensibilidad en Paneles de Seroconversión: se evalua- Se realizaron 2 ensayos diarios evaluando cada muestra
ron los siguientes paneles comerciales internacionales de por duplicado y por el transcurso de 20 días.
seroconversión de BBI (USA):
HCV ELISA Patrón de de absor-
Número de D.S. C.V. D.S. C.V.
Panel 3ª genera- RIBA serocon- bancia
muestras
ción versión
Muestra 1 0,330 0,026 7,92% 0,038 11,42%
PHV 901 11 9 (97) 9 (97) NS3-NS4 Muestra 2 0,405 0,031 7,73% 0,050 12,37%
PHV 906 7 5 (7) 7 (0) NS3-NS4 Muestra 3 0,579 0,044 7,53% 0,075 13,02%
PHV 910 5 3 (8) 3 (8) core Muestra 4 0,976 0,076 7,76% 0,102 10,42%
PHV 912 3 1 (7) 1 (7) core Control (+) 1,297 0,082 6,30% 0,164 12,64%
PHV 920 10 7 (13) 7 (13) core-NS3 Control (-) 0,047 0,004 8,38% 0,007 14,86%
En la tabla se indica el número de muestras reactivas con n = 80
cada método. El número entre paréntesis indica el núme-
ro de días entre el sangrado inicial y la primera muestra PRESENTACION
reactiva. Kit para 96 determinaciones (Cód. 1483258).
Sensibilidad a diferentes genotipos: se evaluó el panel Kit para 192 determinaciones (Cód. 1483259).
Worldwide HCV Performance Panel WWHV 302 BBI, USA,
detectándose 14 de las 14 muestras reactivas. BIBLIOGRAFIA
Además se detectaron 14 muestras del genotipo 1, 5 del - Butler, JE (2000) Methods 22, 4-23.
genotipo 2 y 4 del genotipo 4. - Colin, C. et al (2001) Journal of Viral Hepatitis 8, 87-95.
- Choo, Q. et al. (1989) Science 244, 359-362.
Sensibilidad clínica en Paneles de muestras reactivas - Engvall, E. (1980) Methods in Enzymology 70, 419-439.
anti-HCV: en un estudio realizado sobre 190 muestras con - Erensoy, S. (2001) Journal of Clinical Virology 21, 271-281.
infección por HCV, confirmada por diferentes métodos, se - Forns, X. (2006) Journal of Hepatology 44, S35-S39.
encontraron reactivas con el kit HCV ELISA 3ª generación - Gómez-Cordero, I., Alvarez-García, M. (2003) Revista
la totalidad de las muestras. Biomédica 14, 253-268.
En un estudio con 356 muestras reactivas provenientes de - Khudyakov, Y. et al .(1995) Virology 206, 666-672.
diferentes instituciones hospitalarias, se detectaron 355 - Lok, A., Gunaratnam, N. (1997) Hepatology 26 (3), 48S-55S.
muestras. - Penin, F. et al. (2004) Hepatology 39 (1), 5-19.
b) Especificidad - Evaluation of Precision Performance of Clinical Chemistry
En un estudio realizado sobre 1364 muestras de sueros y Devices. Approved Guideline EP5-A 19/2 (1999) National
plasmas de banco de sangre, la especificidad obtenida fue Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS).
de 99,41%. - Specifications for Immunological Testing for Infectious
En otro estudio de 1660 muestras de plasmas de dos centros Diseases. Approved Guideline I/LA18-A2 (1994) National
de salud (con alta prevalencia de HCV), se encontró una Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS).
especificidad de 99,58%. - Clinical Evaluation of Immunoassays. Approved Guideline
Se estudió la posible aparición de reactividad cruzada Standards (NCCLS).
ensayando 556 muestras provenientes de individuos con - Interference testing in Clinical Chemistry. Approved Guideli-
diferentes condiciones clínicas que podrían ser causantes ne EP7-A (2002) National Committee for Clinical Laboratory
de reacciones inespecíficas para el ensayo HCV ELISA 3ª Standards (NCCLS).
generación. Este grupo incluía muestras: - Heinrich Scheiblawer, et al. - Transfusion, vol 46:708; 2006.
864118500 / 02 p. 5/12


Control + Control -
Stopper
Stopper



 No congelar
F Riesgo biológico
Cont. Contenido
g Número de lote
M Elaborado por:
Xn
Nocivo
Xi
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
864118500 / 02 p. 6/12 UR110708
HDL Cholesterol
C Calibrator
Para la calibración de la determinación de HDL-colesterol
APLICACIONES - Gordon, T. et al. - Am. J. Med. 62:707 (1977).

HDL Cholesterol Calibrator está diseñado para ser utiliza- - Warnick, G. - Clin. Chem. 41:10, 1427 (1995).
do en la calibración del kit HDL Cholesterol fast de Wiener - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
lab. Consultar el valor asignado en el rótulo debido a que el AACC Press, 3rd ed., 1990.
mismo es lote específico.
REACTIVOS PROVISTOS
Calibrador: suero humano liofilizado conteniendo lipoproteí-
nas de distintos tipos, incluyendo HDL-colesterol.
Agua destilada o bidestilada.

Reconstituir el vial con el volumen de agua destilada o
bidestilada indicado en el rótulo. Tapar, dejar reposar 5 mi-
nutos y luego mezclar suavemente (sin agitar) hasta obtener
disolución completa antes de su uso.
PRECAUCIONES
El calibrador ha sido preparado a partir de material no reactivo
para HBsAg, HCV y HIV. Sin embargo, el calibrador y todas las
muestras deben manejarse como si se tratara de una muestra
infectiva. Utilizar los reactivos guardando las precauciones
habituales de trabajo en el laboratorio de análisis clínico.
ALMACENAMIENTO
El Calibrador es estable en refrigerador (2-10ºC) hasta la
fecha de vencimiento indicada en la caja. Una vez recons-
tituido, el Calibrador es estable 1 semana en refrigerador
(2-10ºC) o 1 mes congelado (-20ºC), evitando descongelar
y volver a congelar.

REACTIVOS
El reactivo debe ser límpido. Descartar en caso de presentar
turbidez.
PRESENTACION
1 x → 1 ml (Cód. 1220232)
BIBLIOGRAFIA
- Castelli, W. et al. - Circulation, 55:767 (1977).
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Símbolos
C
M Elaborado por:

Europea Nocivo

Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870660022 / 00 p. 2/5 UR151015
HDL Cholesterol
C fast
Método colorimétrico homogéneo para la
determinación de HDL-colesterol en suero o plasma
SIGNIFICACION CLINICA CHO

Las lipoproteínas plasmáticas son partículas esféricas que HDL-colesterol colest-4-en-3-ona + H2O2
contienen cantidades variables de colesterol, triglicéridos, CHE
fosfolípidos y proteínas. Los fosfolípidos, el colesterol POD
libre y las proteínas constituyen la superficie externa de H2O2 + TOOS + 4-AAP desarrollo de color
la partícula lipoproteica, mientras que su core contiene
en mayor proporción colesterol esterificado y triglicéridos. REACTIVOS PROVISTOS
Estas partículas solubilizan y transportan el colesterol en el A. Reactivo A: solución de colesterol oxidasa (< 3000 U/l),
torrente sanguíneo. peroxidasa (< 5000 U/l), catalasa (< 3000 U/l) y N-etil-N-(2-
La proporción relativa de proteína y lípido determina la hidroxi-3-sulfopropil)-3-toluidina disódica (TOOS) (< 1 mM), en
densidad de estas lipoproteínas y provee las bases sobre buffer de Good, con estabilizante y conservante apropiados.
las cuales establecer una clasificación. Estas clases son: B. Reactivo B: solución de detergente (< 2%), colesterol
quilomicrones, lipoproteínas de muy baja densidad (VLDL esterasa (< 3000 U/l) y 4-aminoantipirina (4-AAP) (< 1 mM),
- Very Low Density Lipoproteins), lipoproteínas de baja den- en buffer de Good, con azida sódica (0.9 g/l) y estabilizante
sidad (LDL - Low Density Lipoproteins) y lipoproteínas de apropiado.
alta densidad (HDL - High Density Lipoproteins). Numerosos Calibrador*: suero humano liofilizado conteniendo lipopro-
estudios clínicos han demostrado que las diferentes clases teínas de diversos tipos incluyendo HDL. La concentración
de lipoproteínas tienen distintos y variados efectos en el es variable lote a lote (ver título en el rótulo).
riesgo de enfermedad coronaria.
La función principal de las HDL en el metabolismo lipídico REACTIVOS NO PROVISTOS
es la captación y transporte de colesterol desde los tejidos - Agua destilada.
periféricos al hígado en un proceso conocido como trans- - HDL Cholesterol Calibrator (para las presentaciones que
porte reverso de colesterol (mecanismo cardioprotectivo). no proveen Calibrador).
El HDL-colesterol bajo, está asociado con un alto riesgo de
enfermedad cardíaca. Por este motivo la determinación de
HDL-colesterol es una herramienta útil en la identificación Reactivos A y B: listos para usar.
de individuos de alto riesgo. Calibrador: reconstituir con el volumen de agua destilada
indicado en el rótulo. Tapar el vial y dejar en reposo durante
FUNDAMENTOS DEL METODO 5 minutos. Ayudar a la disolución rotando el vial suavemente,
El presente es un método birreactivo homogéneo para la evitando la formación de espuma. No agitar.
determinación de HDL-colesterol. En la primera etapa de la
reacción se solubiliza y consume el colesterol libre asociado PRECAUCIONES
a proteínas distintas de HDL, en una reacción que involucra - Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
a colesterol oxidasa (CHO) y catalasa (CAT), dando lugar a - No pipetear con la boca.
un producto no coloreado. En una segunda etapa, un agente - El Calibrador ha sido examinado para HBsAg, HCV y an-
específico (azida) bloquea la acción de CAT y un detergente ticuerpos contra HIV 1/2, encontrándose no reactivo. No
solubiliza específicamente las HDL. El HDL-colesterol es obstante, debe procesarse como si se tratara de material
así liberado para reaccionar con colesterol esterasa (CHE), infectivo.
CHO, 4-AAP (4-amino antipirina) y N-etil-N-(2-hidroxi-3- - Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
sulfopropil)-3-toluidina disódica (TOOS), dando un producto
coloreado que se lee a 540-600 nm. - Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
CHO acuerdo a la normativa local vigente.
LDL, VLDL, quilomicrones productos incoloros de LDL,
CAT VLDL y quilomicrones ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
ALMACENAMIENTO
detergente Los Reactivos Provistos son estables en refrigerador (2-
HDL-colesterol HDL-colesterol solubilizada 10ºC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No
* No provisto en algunas presentaciones 870650022 / 01 p. 1/9

congelar. Una vez abiertos los reactivos son estables durante VALORES DE REFERENCIA
3 semanas en refrigerador (2-10ºC). Los valores esperados de HDL-colesterol son los siguientes:
Una vez reconstituido, el Calibrador es estable 1 semana en Varones: 30 - 70 mg/dl
refrigerador (2-10ºC) o 1 mes congelado (-20ºC), evitando Mujeres: 30 - 85 mg/dl
descongelar y volver a congelar. El panel de expertos del National Cholesterol Education
Program (NCEP) provee los siguientes valores de HDL-
MUESTRA colesterol: 40 - 60 mg/dl
Suero o plasma Es recomendable que cada laboratorio establezca sus pro-
a) Recolección: obtener la muestra de la manera usual. pios valores de referencia. No obstante, valores mayores
b) Aditivos: heparina o EDTA cuando se utilice plasma de 40 mg/dl se consideran recomendables y los que se en-
como muestra. cuentren por encima de 60 mg/dl se han considerado como
c) Sustancias interferentes conocidas: no se observan protectivos. Por el contrario, valores de HDL-colesterol por
interferencias por ácido ascórbico hasta 24 mg/dl, hemo- debajo de 40 mg/dl se consideran como índice significativo
globina hasta 1000 mg/dl, bilirrubina hasta 80 mg/dl, ni de riesgo de enfermedad cardíaca coronaria.
triglicéridos hasta 3000 mg/dl (ver LIMITACIONES DEL
PROCEDIMIENTO). LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las No deben emplearse anticoagulantes que contengan citrato.
drogas en el presente método. No exponer los reactivos a la luz.
c) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: cen- Conservar los reactivos de acuerdo a las instrucciones.
trifugar y separar el suero del coágulo dentro de las 3 horas En caso de muestras con concentraciones de triglicéridos
posteriores a la extracción. De no procesar las muestras mayores a 3000 mg/dl, diluir las mismas con solución
inmediatamente, las mismas pueden ser conservadas du- fisiológica.
rante 1 semana en refrigerador (2-10ºC).
PERFORMANCE
MATERIAL REQUERIDO (no provisto) a) Precisión: procesando simultáneamente replicados de
- Material volumétrico para medir los volúmenes indicados una misma muestra en un mismo día se obtiene lo siguiente:
- Analizador automático
Nivel D.S. C.V.
24,1 mg/dl ± 0,20 mg/dl 0,8%
PROCEDIMIENTO
(analizadores automáticos) 50,9 mg/dl ± 0,34 mg/dl 0,7%
A continuación se detalla un procedimiento general para 75,9 mg/dl ± 0,93 mg/dl 1,2%
HDL Cholesterol fast en un analizador automático.
Cuando se implemente la técnica para un analizador en Procesando la misma muestra en días diferentes, se obtuvo:
particular seguir las instrucciones de trabajo del mismo.
Nivel D.S. C.V.
24,1 mg/dl ± 0,49 mg/dl 2,0%
Reactivo A 300 ul
50,9 mg/dl ± 0,45 mg/dl 0,9%
Incubación durante 5 minutos a 37ºC. Lectura de absor-
bancia a 540-600 nm (Blanco de Muestra). 75,9 mg/dl ± 1,84 mg/dl 2,3%
Reactivo B 100 ul b) Linealidad: la reacción es lineal hasta 150 mg/dl. Para

valores superiores, diluir la muestra con solución fisiológica
Incubación 5 minutos a 37ºC. Lectura del resultado a y multiplicar el resultado por el factor de dilución empleado.
540-600 nm (concentración de HDL-colesterol). c) Límite de cuantificación: la mínima concentración cuan-
tificable de HDL-colesterol es de 4 mg/dl.
d) Recuperación: agregando cantidades conocidas de HDL-
CALIBRACION colesterol a distintos sueros, se obtuvo una recuperación
El Calibrador debe procesarse de la misma manera que las entre 98,4 y 99,0%.
muestras. Las concentraciones del Calibrador se encuentran
alrededor de los niveles de decisión médica y son variables PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS
lote a lote (ver título en el rótulo). Ingresar el valor de con- Para las instrucciones de programación consulte el manual
centración del calibrador cada vez que se cambie de lote. del usuario del analizador en uso.

Procesar 2 niveles de un material de control de calidad 40 ml: - 1 x 30 ml Reactivo A
(Standatrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas - 1 x 10 ml Reactivo B
de HDL-colesterol, con cada determinación. (Cód. 1220229)
870650022 / 01 p. 2/9

- Gordon, T. et al. - Am. J. Med. 62:707 (1977). C por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios
- Warnick, G. - Clin. Chem. 41:10, 1427 (1995).
- Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests", P Representante autorizado en la Comunidad Europea
AACC Press, 3rd ed., 1990.
- Expert Panel of National Cholesterol Education Program - V Uso diagnóstico "in vitro"
JAMA 285/19:2486 (2001).
- Tietz N.W., Clinical Guide to Laboratory Tests, W.B. Saunder
Co., Philadelphia, pag. 256, 1986.
- Westgard, J. et al. - Clin. Chem. 20:825 (1974).
- CLSI. User verification of Performance for Precision and
Trueness; Approved Guideline-second Edition. CLSI docu- l Límite de temperatura (conservar a)
ment EP15-A2 [ISBN 1-56238-574-7]. CLSI, Wayne, PA:  No congelar

Clinical and Laboratory Standards Institute; 2005.
- CLSI. Evaluation of the Linearity of Quantitative Measure- Riesgo biológico
ment Procedures: A Statistical Approach;Approved Guide-
F
line. CLSI document EP6-A [ISBN 1-56238-498-8]. CLSI, Volumen después de la reconstitución
Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute;2003.
- CLSI. Method Comparison and Bias Estimation Using Cont. Contenido
Patient Samples; Approved Guideline—Second Edition
(Interim Revision). CLSI document EP09-A2-IR. Wayne, g Número de lote
PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; 2010.
Elaborado por:
- Glick, M.R., K.W. Ryder, and S.A. Jackson, Graphical M
comparisons of interferences in clinical chemistry instru-
Nocivo
mentation. Clin Chem, 1986. 32(3): p. 470-475.
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
870650022 / 01 p. 3/9 UR151014
HDL Colesterol
C Reactivo precipitante (ácido fosfotúngstico) para la
FT
separación de las Lipoproteínas de Alta Densidad (HDL)
en suero o plasma

Las lipoproteínas plasmáticas son partículas esféricas que El reactivo es para uso diagnóstico "in vitro".
contienen cantidades variables de colesterol, triglicéridos, Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
fosfolípidos y proteínas. de trabajo en el laboratorio de química clínica.
Los fosfolípidos, el colesterol libre y las proteínas constituyen Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
la superficie externa de la partícula lipoproteica, mientras que acuerdo a la normativa local vigente.
su core contiene en mayor proporción colesterol esterificado
y triglicéridos. ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
Estas partículas solubilizan y transportan el colesterol en el ALMACENAMIENTO
torrente sanguíneo. El Reactivo Provisto es estable a temperatura ambiente (< 25oC)
La proporción relativa de proteína y lípido determina la den- hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
sidad de estas lipoproteínas y proveen las bases sobre las
cuales establecer una clasificación. Estas clases son: quilo- INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
micrones, proteínas de muy baja densidad (VLDL), proteínas REACTIVOS
de baja densidad (LDL) y proteínas de alta densidad (HDL). Cualquier indicio de contaminación bacteriana puede ser
Numerosos estudios clínicos han demostrado que las di- signo de deterioro del reactivo.
ferentes clases de lipoproteínas tienen distintos y variados
efectos en el riesgo de enfermedad coronaria. MUESTRA
La función principal de las HDL en el metabolismo lipídico Suero o plasma
es la captación y transporte de colesterol desde los tejidos a) Recolección: obtener la muestra de la manera habitual.
periféricos al hígado en un proceso conocido como trans- b) Aditivos: en caso de utilizar plasma, recogerlo única-
porte reverso de colesterol (mecanismo cardioprotectivo). mente con heparina.
El HDL colesterol bajo, está asociado con un alto riesgo de c) Sustancias interferentes conocidas: anticoagulantes
distintos de la heparina y bilirrubinemia mayor de 50 mg/l
enfermedad cardíaca. Por este motivo la determinación de
son causas de interferencia.
HDL colesterol es una herramienta útil en la identificación
de individuos de alto riesgo.
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: se-
parar el suero dentro de la hora de la extracción. Las Lipid
Las lipoproteínas de alta densidad (HDL) se separan pre-
Research Clinics recomiendan refrigerar la muestra hasta
cipitando selectivamente las lipoproteínas de baja y muy
la realización del ensayo. La conservación de las muestras
baja densidad (LDL y VLDL) mediante el agregado de ácido a temperatura ambiente altera la composición lipoproteica
fosfotúngstico en presencia de iones magnesio. de las muestras aún antes de las 24 horas. Algunos autores
Las HDL quedan en el sobrenadante separado por centrifuga- mencionan estabilidad de 3 días a 4oC que se prolongan
ción, donde se realiza la determinación del colesterol ligado a al congelar, pero existe mucha variabilidad entre muestras
las mismas, empleando el sistema enzimático Colesterol oxi- diferentes, por lo que se recomienda mantener la muestra
dasa/Peroxidasa con colorimetría según Trinder (Fenol/4-AF). refrigerada y procesar dentro de las 24 horas.

A. Reactivo A (Reactivo Precipitante): solución de ácido - Espectrofotómetro o fotocolorímetro.
fosfotúngstico 0,44 mmol/l y cloruro de magnesio 20 mmol/l. - Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados.
- Tubos de Kahn.
REACTIVOS NO PROVISTOS - Cubetas espectrofotométricas de caras paralelas.
Colestat enzimático, Colestat enzimático AA o Colestat - Baño de agua a 37oC.
enzimático AA líquida, de Wiener lab. - Reloj o timer.

Reactivo A: listo para usar. - Longitud de onda: 505 nm en espectrofotómetro o en
870620000 / 00 p. 1/6
fotocolorímetro con filtro verde (490-530 nm). colesterol:
- Temperatura de reacción: 37oC 0,40 - 0,60 g/l
- Tiempo de reacción: 35 minutos Es recomendable que cada laboratorio establezca sus
- Volumen de muestra: 200 ul propios valores de referencia. No obstante, valores mayo-
- Volumen de Reactivo A: 500 ul res de 0,40 g/l se consideran recomendables y los que se
- Volumen de Sobrenadante: 200 ul encuentren por encima de 0,60 g/l se han considerado como
- Volumen de Reactivo de Trabajo de Colestat enzimático o protectivos. Por el contrario, valores de HDL colesterol por
Colestat enzimático AA/líquida: 2 ml debajo de 0,40 g/l se consideran como índice significativo
- Volumen final de reacción: 2,2 ml de riesgo de enfermedad cardíaca coronaria.

PROCEDIMIENTO - Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
En un tubo de Kahn medir 200 ul de muestra, y agregar - La exactitud y precisión dependen fundamentalmente de la
500 ul de Reactivo A. Homogeneizar agitando (sin invertir) observación de las condiciones de precipitación.
durante 20 segundos y dejar 10 minutos en reposo a tem- - Muestras con trigliceridemia superior a 10 g/l pueden
peratura ambiente. Centrifugar 15 minutos a 3.000 r.p.m. dificultar la precipitación fraccionada dando lugar a sobre-
o 2 minutos a 12.000 r.p.m. Usar el sobrenadante límpido nadantes turbios o a una capa de lipoproteínas que flotan
como muestra. En tres tubos marcados B, S y D, colocar: sobre la superficie. En tal caso, diluir la muestra al 1/2 con
B S D solución fisiológica y repetir la precipitación. El resultado
obtenido deberá multiplicarse por 2.
Sobrenadante - - 200 ul
Standard - 20 ul - PERFORMANCE
a) Reproducibilidad: procesando replicados de una misma
Reactivo de Trabajo 2 ml 2 ml 2 ml muestra en el día se obtienen los siguientes valores:
Mezclar e incubar 5 minutos a 37 C si se usa el Reactivo
o
Nivel D.S. C.V.
de Trabajo de Colestat enzimático AA/líquida o 15 mi- 0,32 g/l ± 0,011 g/l 3,4 %
nutos a 37oC cuando se usa el de Colestat enzimático. 0,68 g/l ± 0,024 g/l 3,5 %
Retirar del baño y enfriar. Leer a 505 nm en espectrofo-
tómetro o en colorímetro con filtro verde (490-530 nm), b) Linealidad: la reacción es lineal hasta 5 g/l.
llevando a cero con el Blanco. c) Límite de detección: en espectrofotómetro, para una
variación de absorbancia de 0,001 D.O., el cambio mínimo
de concentración detectable será de 0,0063 g/l de colesterol.
El color de reacción es estable 2 horas por lo que la absor- PRESENTACION
bancia debe ser leída dentro de ese lapso. - 100 ml (Cód. 1220108).

- Castelli, W.; Levitas I. - Current Prescribing 6/77:39 (1977).
0,762
HDL Colesterol (g/l) = D x f f = - Gordon, T. - Am. J. Med. 62:707 (1977).
S - Lopes-Virela, M.F. et al. - Clin. Chem. 23/5:882 (1977).
- Coniglio, R. I.- Acta Bioq. Clin. Latinoam. XXIII/2:201, 1989.
VFE VRE VS - Cooper, C. - National Heart and Lung Institute, NIH (USA),
0,762 = 2 g/l x x x
1974.
VM VRS VE
- Expert Panel of National Cholesterol Education Program -
donde: JAMA 285/19:2486 (2001).
VFE = volumen final de extracto = 0,7 ml - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
VM = volumen de muestra procesada = 0,2 ml AACC Press, 4th ed., 2001.
VRE = volumen de reacción con extracto = 2,2 ml
VRS = volumen de reacción con Standard = 2,02 ml
VS = volumen de Standard en la reacción = 0,020 ml
VE = volumen de extracto en la reacción = 0,2 ml
Si se emplean volúmenes de Reactivo diferentes de 2 ml
el factor 0,762 varía y debe ser calculado nuevamente,
reemplazando en la fórmula VRE y VRS.
Program (NCEP) provee los siguientes valores de HDL
870620000 / 00 p. 2/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
870620000 / 00 p. 3/6 UR101005
HDL Colesterol
C monofase AA plus
Método colorimétrico sin precipitación para la determinación
de HDL-colesterol en suero o plasma
SIGNIFICACION CLINICA REACTIVOS PROVISTOS

Las lipoproteínas plasmáticas son partículas esféricas que A. Reactivo A: solución de colesterol oxidasa (< 1000 U/l),
contienen cantidades variables de colesterol, triglicéridos, peroxidasa (< 1300 U/l) y N-etil-N-(2-hidroxi-3-sulfopropil)-
fosfolípidos y proteínas. Los fosfolípidos, el colesterol libre 3-toluidina disódica (TOOS) (< 1 mM), en buffer de Good,
y las proteínas constituyen la superficie externa de la partí- con estabilizante y conservante apropiados.
cula lipoproteica, mientras que su core contiene en mayor B. Reactivo B: solución de detergente (< 2%), colesterol es-
proporción colesterol esterificado y triglicéridos. Estas par- terasa (< 1500 U/l) y 4-aminoantipirina (4-AAP) (< 1 mM), en
tículas solubilizan y transportan el colesterol en el torrente buffer de Good, con estabilizante y conservante apropiados.
sanguíneo. Calibrador*: suero humano liofilizado conteniendo lipopro-
La proporción relativa de proteína y lípido determina la den- teínas de diversos tipos incluyendo HDL. La concentración
sidad de estas lipoproteínas y provee las bases sobre las es variable lote a lote (ver título en el rótulo).
cuales establecer una clasificación. Estas clases son: quilo-
micrones, lipoproteínas de muy baja densidad (VLDL - Very REACTIVOS NO PROVISTOS
Low Density Lipoproteins), lipoproteínas de baja densidad Agua destilada.
(LDL - Low Density Lipoproteins) y lipoproteínas de alta
densidad (HDL - High Density Lipoproteins). Numerosos INSTRUCCIONES PARA SU USO
estudios clínicos han demostrado que las diferentes clases Reactivos A y B: listos para usar.
de lipoproteínas tienen distintos y variados efectos en el Calibrador: reconstituir con el volumen de agua destilada
riesgo de enfermedad coronaria. indicado en el rótulo. Tapar el vial y dejar en reposo durante
La función principal de las HDL en el metabolismo lipídico 5 minutos. Ayudar a la disolución rotando el vial suavemente,
es la captación y transporte de colesterol desde los tejidos evitando la formación de espuma. No agitar.
periféricos al hígado en un proceso conocido como transporte
reverso de colesterol (mecanismo cardioprotectivo). PRECAUCIONES
El HDL-colesterol bajo, está asociado con un alto riesgo de - Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
enfermedad cardíaca. Por este motivo la determinación de - No pipetear con la boca.
HDL-colesterol es una herramienta útil en la identificación - El Calibrador ha sido examinado para HBsAg, HCV y an-
de individuos de alto riesgo. ticuerpos contra HIV 1/2, encontrándose no reactivo. No
obstante, debe procesarse como si se tratara de material
FUNDAMENTOS DEL METODO infectivo.
El presente, es un método homogéneo que emplea dos - Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
reactivos. En la primera etapa de la reacción, se solubiliza de trabajo en el laboratorio de química clínica.
y consume el colesterol libre o unido a proteínas distintas de - Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
la HDL en una reacción que involucra a colesterol oxidasa acuerdo a la normativa local vigente.
(CHO), peroxidasa (POD) y N-etil-N-(2-hidroxi-3-sul-fopropil)-
3-toluidina disódica (TOOS) dando lugar a un producto no ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
coloreado. En una segunda etapa, un detergente solubiliza ALMACENAMIENTO
específicamente las HDL. El HDL-colesterol es liberado para Los Reactivos Provistos son estables en refrigerador (2-
reaccionar con colesterol esterasa (CHE), colesterol oxidasa 10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No
y TOOS, dando un producto coloreado: congelar. Una vez abiertos los reactivos son estables durante
TOOS 3 semanas en refrigerador (2-10oC).
LDL, VLDL, productos incoloros de LDL, Una vez reconstituido, el Calibrador es estable 1 semana en
quilomicrones CHO VLDL y quilomicrones refrigerador (2-10oC) o 1 mes congelado (-20oC), evitando
detergente descongelar y volver a congelar.
HDL-colesterol HDL solubilizada
CHO MUESTRA
HDL-colesterol colest-4-en-3-ona + H2O2 Suero o plasma
CHE a) Recolección: obtener la muestra de la manera usual.
POD b) Aditivos: heparina o EDTA cuando se utilice plasma
H2O2 + TOOS + 4-AAP desarrollo de color como muestra.
* No provisto en algunas presentaciones 861265522 / 01 p. 1/9

c) Sustancias interferentes conocidas: no se observan protectivos. Por el contrario, valores de HDL colesterol por
interferencias por ácido ascórbico hasta 100 mg/dl, he- debajo de 40 mg/dl se consideran como índice significativo
moglobina hasta 1000 mg/dl, bilirrubina hasta 60 mg/dl, de riesgo de enfermedad cardíaca coronaria.
ni triglicéridos hasta 1200 mg/dl (ver LIMITACIONES DEL
PROCEDIMIENTO). LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las No deben emplearse anticoagulantes que contengan citrato.
drogas en el presente método. No exponer los reactivos a la luz.
c) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: Conservar los reactivos de acuerdo a las instrucciones.
centrifugar y separar el suero del coágulo dentro de las 3 En caso de muestras con concentraciones de triglicéridos
horas posteriores a la extracción. De no procesar las mues- mayores a 1200 mg/dl, diluir las mismas con solución
tras inmediatamente, las mismas pueden ser conservadas fisiológica.
durante 1 semana en refrigerador (2-10oC).
PERFORMANCE
MATERIAL REQUERIDO (no provisto) a) Precisión: procesando simultáneamente replicados de
- Material volumétrico para medir los volúmenes indicados una misma muestra en un mismo día se obtiene lo siguiente:
- Analizador automático Nivel D.S. C.V.
32,9 mg/dl ± 0,6 mg/dl 1,9 %
50,7 mg/dl ± 0,9 mg/dl 1,7 %
PROCEDIMIENTO 101,3 mg/dl ± 1,5 mg/dl 1,5 %
(analizadores automáticos)
A continuación se detalla un procedimiento general para Procesando la misma muestra en días diferentes, se obtuvo:
HDL Colesterol monofase AA plus en un analizador Nivel D.S. C.V.
automático. Cuando se implemente la técnica para 32,8 mg/dl ± 0,8 mg/dl 2,4 %
un analizador en particular seguir las instrucciones de 50,0 mg/dl ± 1,2 mg/dl 2,5 %
trabajo del mismo. 100,1 mg/dl ± 2,3 mg/dl 2,3 %
b) Linealidad: la reacción es lineal hasta 200 mg/dl. Para
Reactivo A 300 ul valores superiores, diluir la muestra con solución fisiológica
Incubación durante 5 minutos a 37oC. Lectura de absor- y multiplicar el resultado por el factor de dilución empleado.
bancia a 600/700 nm (Blanco de Muestra). c) Límite de cuantificación: la mínima concentración cuan-
tificable de HDL colesterol es de 4 mg/dl.
Reactivo B 100 ul d) Recuperación: agregando cantidades conocidas de HDL
Incubación 5 minutos a 37 C. Lectura del resultado a
o colesterol a distintos sueros, se obtuvo una recuperación
600/700 nm (concentración de HDL-colesterol). entre 98,4 y 99,0%.

CALIBRACION Para las instrucciones de programación consulte el manual
El Calibrador debe procesarse de la misma manera que las del usuario del analizador en uso.
muestras. Las concentraciones del Calibrador se encuentran
alrededor de los niveles de decisión médica y son variables PRESENTACION
lote a lote (ver título en el rótulo). Ingresar el valor de con- - 80 ml (1 x 60 ml + 1 x 20 ml), con Calibrador (Cód. 1220223)
centración del calibrador cada vez que se cambie de lote. - 80 ml (1 x 60 ml + 1 x 20 ml), sin Calibrador (Cód. 1220224)
- 80 ml (2 x 30 ml + 2 x 10 ml), con Calibrador (Cód. 1009328)
METODO DE CONTROL DE CALIDAD - 80 ml (2 x 30 ml + 2 x 10 ml), con Calibrador (Cód. 1009280)
Procesar 2 niveles de un material de control de calidad - 160 ml (2 x 60 ml + 2 x 20 ml), con Calibrador (Cód. 1009622)
de HDL colesterol, con cada determinación. BIBLIOGRAFIA
VALORES DE REFERENCIA - Gordon, T. et al. - Am. J. Med. 62:707 (1977).
Los valores esperados de HDL colesterol son los siguientes: - Warnick, G. - Clin. Chem. 41:10, 1427 (1995).
Varones: 30 - 70 mg/dl - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
Mujeres: 30 - 85 mg/dl AACC Press, 4th ed., 2001.
El panel de expertos del National Cholesterol Education Pro- - Expert Panel of National Cholesterol Education Program -
gram (NCEP) provee los siguientes valores de HDL colesterol: JAMA 285/19:2486 (2001).
40 - 60 mg/dl - Tietz N.W., Clinical Guide to Laboratory Tests, W.B. Saunder
Es recomendable que cada laboratorio establezca sus pro- Co., Philadelphia, pag. 256, 1986.
pios valores de referencia. No obstante, valores mayores - Westgard, J. et al. - Clin. Chem. 20:825 (1974).
de 40 mg/dl se consideran recomendables y los que se en-
cuentren por encima de 60 mg/dl se han considerado como
861265522 / 01 p. 2/9
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
Cert. Nº: 4980/04
Lic Nº: PCT/JP00/03860 -
PCT/JP97/04442 2000 Rosario - Argentina
861265522 / 01 p. 3/9 UR120831
HDL Colesterol
C Reactivo Precipitante
Para la separación de las lipoproteínas de alta densi-
dad (HDL) en suero o plasma
SIGNIFICACION CLINICA de trabajo en el laboratorio de química clínica.

Las lipoproteínas plasmáticas son partículas esféricas que Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
contienen cantidades variables de colesterol, triglicéridos, acuerdo a la normativa local vigente.
fosfolípidos y proteínas. Estas partículas solubilizan y trans-
portan el colesterol en el torrente sanguíneo. ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
La proporción relativa de proteína y lípido determina la ALMACENAMIENTO
densidad de estas lipoproteínas. Reactivos Provistos: son estables a temperatura ambiente
La función principal de las lipoproteínas de alta densidad hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
o HDL (high density lipoprotein) en el metabolismo lipídico Reactivo Precipitante: es estable 6 meses a temperatura
es la captación y transporte de colesterol desde los tejidos ambiente o 1 año en refrigerador (2-10oC) a partir de la fecha
periféricos al hígado en un proceso conocido como transporte de preparación.
reverso de colesterol (mecanismo cardioprotectivo).
El HDL colesterol bajo, está asociado con un alto riesgo de INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
enfermedad cardíaca. Por este motivo la determinación de REACTIVOS
HDL colesterol es una herramienta útil en la identificación Cualquier indicio de contaminación bacteriana puede ser
de individuos de alto riesgo. signo de deterioro de los reactivos.

Las lipoproteínas de alta densidad (HDL) se separan preci- Suero o plasma
pitando selectivamente las lipoproteínas de baja y muy baja a) Recolección: obtener la muestra de la manera habitual.
densidad (LDL y VLDL) mediante el agregado de sulfato de b) Aditivos: en caso de utilizar plasma, recogerlo única-
dextrán de PM 50.000 en presencia de iones Mg++. mente con heparina.
En el sobrenadante separado por centrifugación, quedan c) Sustancias interferentes conocidas: anticoagulantes
las HDL y se realiza la determinación del colesterol ligado distintos de la heparina y bilirrubinemia mayor de 50 mg/l
a las mismas, empleando el sistema enzimático Colesterol son causas de interferencia.
oxidasa/Peroxidasa con colorimetría según Trinder (Fenol/4- Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
Ami-nofenazona). drogas en el presente método.
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: se-
REACTIVOS PROVISTOS parar el suero dentro de la hora de la extracción. Las Lipid
A. Reactivo A: solución de sulfato de dextrán (PM 50.000) Research Clinics recomiendan refrigerar la muestra hasta la
0,032 mmol/l. realización del ensayo. El almacenamiento o conservación
B. Reactivo B: solución de cloruro de magnesio 1,5 M. de las muestras a temperatura ambiente altera la composi-
ción lipoproteica de las muestras aún antes de las 24 horas.
REACTIVOS NO PROVISTOS Algunos autores mencionan estabilidad de 3 días a 4oC que
Colestat enzimático, Colestat enzimático AA o Colestat se prolongan al congelar, pero existe mucha variabilidad en-
enzimático AA líquida de Wiener lab. tre muestras diferentes, por lo que se recomienda mantener
la muestra refrigerada y procesar dentro de las 24 horas.
Reactivo Precipitante (A+B); preparación: en el frasco MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
provisto, medir 2,5 ml de Reactivo A y 2,5 ml de Reactivo - Espectrofotómetro o fotocolorímetro.
B. Mezclar por inversión y colocar fecha de preparación. - Micropipetas y pipetas.
Pueden prepararse cantidades menores de acuerdo a las - Tubos de Kahn.
necesidades, respetando la proporción 1 + 1 para ambos - Tubos o cubetas espectrofotométricas.
reactivos. - Baño de agua a 37oC.
- Reloj o timer.
PRECAUCIONES
Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro". CONDICIONES DE REACCION
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales - Longitud de onda: 505 nm en espectrofotómetro o en
870630022 / 00 p. 1/9
fotocolorímetro con filtro verde (490-530 nm). 0,40 - 0,60 g/l
- Temperatura de reacción: 37oC Es recomendable que cada laboratorio establezca sus
- Tiempo de reacción: 45 minutos propios valores de referencia. No obstante, valores mayo-
- Volumen de muestra: 500 ul res de 0,40 g/l se consideran recomendables y los que se
- Volumen de Reactivo Precipitante: 50 ul encuentren por encima de 0,60 g/l se han considerado como
- Volumen de Sobrenadante: 100 ul protectivos. Por el contrario, valores de HDL colesterol por
- Volumen de Reactivo de Trabajo de Colestat enzimático debajo de 0,40 g/l se consideran como índice significativo
o Colestat enzimático AA/líquida: 2 ml de riesgo de enfermedad cardíaca coronaria.
Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA
PROCEDIMIENTO La exactitud y precisión de la determinación dependen
En un tubo de Kahn medir 0,5 ml (500 ul) de muestra, y fundamentalmente de la observación de las condiciones
agregar 50 ul de Reactivo Precipitante. Homogeneizar de precipitación, por lo que los tiempos y temperaturas es-
agitando (sin invertir) durante 20 segundos y dejar 30- tablecidos, si bien no requieren un control riguroso, deben
40 minutos en refrigerador (2-10oC) o 15 minutos en ser respetados.
baño de agua a la misma temperatura. No colocar en Cuando el HDL colesterol no puede separarse por com-
congelador. Centrifugar 15 minutos a 3000 r.p.m. Usar pleto en una centrífuga común debido a niveles elevados
el sobrenadante límpido como muestra. de triglicéridos puede efectuarse la determinación de la
En 3 tubos marcados B, S y D colocar: siguiente manera: seguir las instrucciones indicadas en
B S D PROCEDIMIENTO hasta la incubación a 4-10oC y luego de
la misma, colocar la mezcla de reacción en tubos capilares
Sobrenadante - - 100 ul y centrifugar en centrífugas de microhematocrito a 10.000
Standard - 20 ul - r.p.m. durante 5 minutos. Cortar el capilar desechando el
precipitado y utilizar el sobrenadante límpido para la prueba.
Mezclar e incubar 5 minutos a 37oC si se usa el Reactivo PERFORMANCE
de Trabajo de Colestat enzimático AA/líquida o 15 mi- a) Reproducibilidad: procesando replicados de una misma
nutos a 37oC cuando se usa el de Colestat enzimático. muestra en el día se obtienen los siguientes valores:
Retirar del baño y enfriar. Leer a 505 nm en espectrofo- Nivel D.S. C.V.
tómetro o en colorímetro con filtro verde (490-530 nm), 0,29 g/l ± 0,011 g/l 3,8 %
llevando a cero con el Blanco. 0,63 g/l ± 0,023 g/l 3,7 %
b) Linealidad: la reacción es lineal hasta 5 g/l.
ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL c) Límite de detección: en espectrofotómetro, para una
El color de reacción es estable 2 horas por lo que la absor- variación de absorbancia de 0,001 D.O., el cambio mínimo
bancia debe ser leída dentro de ese lapso. de concentración detectable será de 0,0063 g/l de colesterol.

0,457 Equipo para procesar 100 muestras (Cód. 1220103).
HDL Colesterol (g/l) = D x f f=
S BIBLIOGRAFIA
VFE VRE VS - Castelli, W. P.; Levitas I. M. - Current Prescribing 6/77:39
0,457 = 2 (g/l) x x x donde: (1977).
VM VRS VE - Cooper, C. et al. - National Heart and Lung Institute, (USA)
VFE = volumen final de extracto = 0,55 ml (1974).
VM = volumen de muestra procesada = 0,5 ml - Gordon, T. - Am. J. Med. 62:707 (1977).
VRE = volumen de reacción con extracto = 2,1 ml - Kostner, G.M.et al. - Clin. Chem. 25/6:939 (1979).
VRS = volumen de reacción con Standard = 2,02 ml - Stanbury, J. B.; Wyngaarden, J. B.; Fredrickson, D. S. - “The
VS = volumen de Standard en la reacción = 0,020 ml Metabolic Basis of Inherited Disease”, Mc Graw - Hill Book
VE = volumen de extracto en la reacción = 0,1 ml Co., 2ª ed., 1966.
Si se emplean volúmenes de Reactivo diferentes de 2 ml - Coniglio, R. I.- Acta Bioq. Clin. Latinoam. XXIII/2:201, 1989.
el factor 0,457 varía y debe ser calculado nuevamente, - Expert Panel of National Cholesterol Education Program -
reemplazando en la fórmula VRE y VRS. JAMA 285/19:2486 (2001).
Program (NCEP) provee los siguientes valores de HDL
colesterol:
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Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870630022 / 00 p. 3/9 UR120607
hemogloWiener
Standard
Para la estandarización y control de la hemoglobinometría
APLICACION la fecha de vencimiento indicada en la caja.

Permite calibrar los aparatos fotométricos así como eliminar
los errores operacionales y de técnica que los patrones INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
coloreados no controlan: reactivos vencidos o deteriorados, REACTIVOS
pipetas y micropipetas mal calibradas, técnica o manualidad Discoloración o aparición de precipitado son indicios de
defectuosa, diferencias entre cubetas o tubos de lectura, deterioro del reactivo.
errores de lectura, etc.
FUNDAMENTOS DEL METODO - Espectrofotómetro.
hemogloWiener Standard es una solución que constituye - Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados.
un verdadero standard de hemoglobina desarrollado por - Cubetas espectrofotométricas.
Wiener lab., que se procesa en las mismas condiciones que - Reloj o timer.
la muestra. Se emplea para estandarizar los métodos colo-
rimétricos que determinan la hemoglobina como cianuro de CONDICIONES DE REACCION
hemiglobina o cianmetahemoglobina (Drabkin; van Kampen Ver Manual de Instrucciones correspondiente al reactivo
& Zijlstra, etc.) utilizado.
REACTIVO PROVISTO
S. Standard: vial conteniendo solución estabilizada de PROCEDIMIENTO
hemoglobina nativa. hemogloWiener Standard debe usarse en las mismas
Contenido hemoglobínico determinado por espectrofotometría condiciones que la muestra.
a 540 nm como cianuro de hemiglobina con reactivo según Ver Procedimiento en el manual de instrucciones del
van Kampen y Zijlstra (pH 7,2) considerando una absortividad reactivo utilizado.
milimolar de 440,0 mmol-1 cm-1 a partir de la ecuación:
D540 x 64.458
HiCN (mg/dl) = ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL
44 x d x 10 Ver Manual de Instrucciones correspondiente al reactivo
donde D540 es la lectura obtenida; 64.458 el peso molecular de utilizado.
la hemoglobina; d = 1,00 cm = espesor de la capa de lectura
y 10 el factor de conversión de litros a decilitros. CALCULO DE LOS RESULTADOS
Standard (g/dl)
REACTIVO NO PROVISTO f=
Reactivo utilizado en un método basado en la determinación S
de hemoglobina como cianmetahemoglobina. donde Standard (g/dl) es la concentración de hemoglobina
correspondiente al lote de hemogloWiener Standard.
El Reactivo Provisto es listo para usar. METODO DE CONTROL DE CALIDAD
Las soluciones de cianuro de hemiglobina obtenidas con
PRECAUCIONES este Standard cumplen las especificaciones del Internatio-
Para uso diagnóstico "in vitro". nal Committee for Standardization in Hematology (ICSH):
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales relación DO540/505 = 1,61; turbiedad (lectura a 750 nm): menor
de trabajo en el laboratorio de química clínica. que 0,002 D.O. y concuerdan con la Preparación de Refe-
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de rencia de Cianuro de Hemiglobina (ICSH) obtenida del Rijks
acuerdo a la normativa local vigente. Instituut voor deer Volksgezondheid (Utrecht Netherlands).
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO

ALMACENAMIENTO Ver Limitaciones del Procedimiento en el Manual de Instruc-
El Reactivo Provisto es estable en refrigerador (2-10oC) hasta ciones del reactivo utilizado.
870640022 / 00 p. 1/6
hemgloWiener Standard no debe usarse en métodos SÍMBOLOS
basados en la capacidad de fijación de oxígeno (oxihemo- Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
globina, etc.). reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
Control de fuentes de error: por tratarse de una verdadera
solución de hemoglobina, hemogloWiener Standard se Este producto cumple con los requerimientos previstos
procesa en idénticas condiciones que la muestra, debiendo
usarse las mismas pipetas y micropipetas, el mismo reactivo, C por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios
el mismo fotómetro, etc. De esta manera, no sólo se calibra
el aparato de lectura, sino que se controlan todas las varia-
bles metodológicas. Las variaciones en las lecturas diarias
del Standard detectan errores operacionales, materiales
defectuosos o reactivos deteriorados. Contenido suficiente para <n> ensayos

X
PRESENTACION H Fecha de caducidad
Vial conteniendo 1,5 ml (Cód. 1450002).
BIBLIOGRAFIA
- Rice E.W. - J. Lab. Clin. Med. 71/2:319 (1968).  No congelar

- Van Kampen, E.J.; Zijlstra, W.G. - Adv. Clin. Chem. 8/141
(1965). F Riesgo biológico
- Rojkín, M.L.; Olguín de Mariani, M.C. y Drappo, G.A. - III
Congreso Argentino de Bioquímica - Buenos Aires (1975).
Cont. Contenido
g Número de lote
Elaborado por:
M
Xn
Nocivo
Xi
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870640022 / 00 p. 2/6 UR120607
Hepatitis B (anti-HBc)
ELISA
Ensayo inmunoenzimático (ELISA) para la detección de anticuerpos
contra el antígeno core del virus de la hepatitis B (anti-HBc)
SIGNIFICACION CLINICA en baño de agua a 37oC unos minutos, mezclando luego por
La hepatitis B es una enfermedad viral caracterizada por un inversión. Para usar diluir 1+4 con agua destilada (1 parte de
período prolongado de incubación (45-160 días). El virus Buffer de Lavado concentrado + 4 partes de agua destilada).
causante de esta patología (HBV) es una partícula com- Policubeta sensibilizada: lista para usar.
puesta por una región interior o "core" donde se encuentra Conjugado: listo para usar.
el DNA y una envoltura exterior antigénica conocida como Revelador A: listo para usar.
antígeno de superficie (HBsAg). Su presencia en suero indica Revelador B: listo para usar.
enfermedad activa. Stopper: listo para usar.
El antígeno “core” (HBcAg) normalmente no se detecta en Control Positivo y Control Negativo: listos para usar.
suero, pero su anticuerpo (anti-HBc) se presenta entre los 10
y 25 días posteriores a la aparición del HBsAg, persistiendo PRECAUCIONES
aún después de la desaparición de este último antígeno - Todas las muestras de pacientes deben manipularse como
y antes de la aparición de su anticuerpo (anti-HBs). Por si fueran capaces de transmitir infección. Los controles se
lo tanto en ausencia de HBsAg y anti-HBs, anti-HBc es el encuentran inactivados. Sin embargo, deben emplearse
único marcador serológico de infección reciente por el virus como si se tratara de material infectivo.
de la hepatitis B. Por otra parte, dado que este anticuerpo - Los sueros controles han sido examinados para HIV en-
permanece detectable en suero por largo tiempo luego de la contrándose negativos.
infección, puede detectar una infección pasada. - Todos los materiales empleados en el ensayo deben ser
destruidos a fin de asegurar la inactivación de agentes pa-
FUNDAMENTOS DEL METODO tógenos. El método recomendado para este procedimiento
La muestra se pone en contacto con el antígeno HBcAg ines autoclavar durante 1 hora a 121oC. Los líquidos de
movilizado sobre el soporte sólido en presencia de anticuerpo desecho pueden ser desinfectados con hipoclorito de sodio
anti-HBc conjugado con peroxidasa. Si la muestra contiene (concentración final 5%) durante por lo menos 60 minutos.
anticuerpos específicos, éstos competirán con el conjugado - No intercambiar reactivos de distintos equipos y lotes.
por el antígeno presente en el soporte. - No emplear reactivos de otro origen.
Luego de incubar y lavar para eliminar la fracción no unida, - Las policubetas deben incubarse en estufa. No usar
se agrega el sustrato enzimático. baño de agua. Debe evitarse abrir la estufa durante este
A mayor cantidad de anti-HBc presente en la muestra, menor proceso.
será el desarrollo de color. - Evitar que los vapores de hipoclorito provenientes de los
recipientes para desechos biológicos entren en contacto
REACTIVOS PROVISTOS con la policubeta, ya que el hipoclorito afecta la reacción.
Policubeta sensibilizada: policubeta de tiras removibles con - Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
pocillos que contienen HBcAg recombinante inmovilizado. - Evitar contacto del ácido sulfúrico (Stopper) con piel y
Conjugado: anticuerpo anti-HBc conjugado con peroxidasa. mucosas. R36/38: irrita los ojos y la piel. R34: provoca
Revelador A: peróxido de hidrógeno 60 mmol/l en buffer quemaduras. S24/25: evítese el contacto con los ojos y
citrato 50 mmol/l pH 3,2. la piel. S26: en caso de contacto con los ojos, lávense
Revelador B: tetrametilbencidina (TMB) 0,01 mol/l en ácido inmediata y abundantemente con agua y acúdase a un
clorhídrico 0,1 N. médico. S28: en caso de contacto con la piel, lávese inme-
Stopper: ácido sulfúrico 2 N. diata y abundantemente con agua. S37/39: usar guantes
Buffer de Lavado concentrado: cloruro de sodio 1,4 mol/l adecuados y protección para los ojos/la cara.
en buffer fosfatos 100 mmol/l y tensioactivo no iónico 0,1 g/l. - Evitar el derrame de líquidos y formación de aerosoles.
Control Positivo: dilución de suero reactivo para anticuerpos
anti-HBc, inactivado. ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
Control Negativo: dilución de suero no reactivo, inactivado. ALMACENAMIENTO
INSTRUCCIONES PARA SU USO 10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
Buffer de Lavado: a baja temperatura los componentes del No congelar.
reactivo pueden precipitar. En tal caso, antes de diluir, colocar Buffer de Lavado : estable 3 meses a temperatura ambiente.
870650000 / 00 p. 1/8
Policubeta sensibilizada: las tiras de pocillos con antígeno
inmovilizado se proveen cerradas al vacío y con desecante. utilizar de la policubeta colocar:
No abrir el envoltorio hasta el momento de usar, ni antes D CP CN
que haya tomado temperatura ambiente, de lo contrario
se favorecerá la humectación del contenido. Las tiras de Muestra 100 ul - -
pocillos no utilizadas deben conservarse dentro del sobre Control Positivo - 100 ul -
con el desecante, cerrado y a 2-10oC. Las tiras conserva-
das en estas condiciones pueden ser utilizadas dentro de
los 5 meses posteriores mientras no se supere la fecha de Conjugado 1 gota 1 gota 1 gota
vencimiento del equipo. En caso de utilizar micropipeta automática, dispensar
60 ul.
MUESTRA Debido a la alta densidad del Conjugado es importante
Suero o plasma mezclar homogeneizando perfectamente mediante
a) Recolección: obtener la muestra de la manera usual. suaves golpes en los laterales de la policubeta durante
b) Aditivos: si se emplea plasma puede utilizarse cualquier 10 segundos.
anticoagulante de uso corriente en la práctica transfusional. Para evitar la evaporación, cubrir la placa con una cinta
c) Sustancias interferentes conocidas: la hemólisis, autoadhesiva e incubar 2 horas en estufa a 37oC. Luego
hiperlipemia y otras causas de turbiedad pueden provocar aspirar cuidadosamente el líquido de cada pocillo reci-
resultados erróneos. Estas muestras deben ser clarificadas biéndolo en un recipiente para desechos biológicos que
por centrifugación. contenga 5% de hipoclorito sódico. A continuación, lavar 5
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: las veces con Buffer de Lavado empleando aproximadamen-
muestras pueden conservarse durante 7 días a 2-10oC. te 300 ul/vez/pocillo. Después de cada lavado, el líquido
Para conservación por períodos más prolongados deben se descartará también en el recipiente con hipoclorito.
ser congeladas a -20oC o menos. Evitar los congelamientos Opcionalmente, emplear lavador automático. Al finalizar
y descongelamientos reiterados. Existen evidencias que el último lavado, eliminar por completo el líquido residual
muestran que los congelamientos sucesivos pueden ser invirtiendo la policubeta y golpeándola varias veces so-
causa de resultados erróneos. bre papel absorbente, ejerciendo una leve presión con
Si las muestras deben ser transportadas, embalar de acuerdo la mano sobre los laterales mayores del soporte, para
a las especificaciones legales relativas al envío de materiales evitar la caída de las tiras de pocillos. Luego agregar
infecciosos. en cada pocillo:
MATERIAL REQUERIDO (no provisto) Revelador A 1 gota 1 gota 1 gota
- Micropipetas capaces de medir los volúmenes indicados Revelador B 1 gota 1 gota 1 gota
- Reloj alarma o cronómetro.
- Estufa a 37oC. En caso de utilizar micropipeta automática, dispensar
- Material volumétrico adecuado. 50 ul.
- Espectrofotómetro para lectura de policubetas. Mezclar aplicando suaves golpes en los laterales de la
CONDICIONES DE REACCION Incubar 30 minutos a temperatura ambiente y luego
- Longitud de onda: 450 nm agregar:
- Longitud de onda secundaria (bicromática): 620-650 nm Stopper 1 gota 1 gota 1 gota
- Calibración del instrumental: llevar a cero el espectofotó-
metro con Blanco de Reactivos procesándolo de la misma En caso de utilizar micropipeta automática, dispensar
forma que una determinación pero omitiendo colocar 50 ul.
Muestra y Conjugado, es decir, sólo Revelador A, Reve- Mezclar aplicando suaves golpes en los laterales de la
lador B y Stopper. policubeta durante 10 segundos.
- Volumen de muestra: 100 ul Leer en espectrofotómetro a 450 nm o bicromática a
- Tiempo de reacción: 2 horas 30 minutos 450/620-650 nm o evaluar el resultado a simple vista por
- Temperatura de reacción: 37oC y temperatura ambiente. comparación con los Controles Positivos y Negativos.
PROCEDIMIENTO ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL

Llevar a temperatura ambiente los reactivos y las mues- El color de la reacción es estable durante 30 minutos por lo
tras antes de iniciar la prueba. Una vez iniciado el proce- que los resultados deben observarse dentro de ese lapso.
dimiento debe completarse sin interrupción.
Procesar simultáneamente 2 Controles Positivos (CP), 3 CRITERIOS DE VALIDACION DE LA CORRIDA
Negativos (CN) y los Desconocidos (D). En los pocillos a La corrida se considera válida si se cumplen simultánea-
870650000 / 00 p. 2/8
a) La lectura media de los Controles Negativos, corregida c) Estudio poblacional: en una población general que
contra el Blanco de Reactivos, debe ser mayor o igual a incluye individuos sanos, donantes, con hepatitis B y otras
0,600 D.O. patologías, la correlación con respecto a métodos de refe-
b) La lectura media de los Controles Positivos, corregida rencia, fue del 98,7%.
contra el Blanco de Reactivos, debe ser menor o igual a
0,200 D.O. PRESENTACION
Si alguna de estas condiciones no se cumple, repetir la co- Kit para 96 determinaciones (Cód. 1483255) conteniendo:
rrida. Recordar que las lecturas obtenidas dependerán de la - 1 Policubeta sensibilizada
sensibilidad del aparato empleado. - 1 x 9 ml Conjugado
- 1 x 9 ml Revelador A
INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS - 1 x 9 ml Revelador B
La reactividad de la muestra se determina relacionando la - 1 x 9 ml Stopper
absorbancia de la muestra respecto al valor cut-off. - 1 x 240 ml Buffer de Lavado concentrado
- 1 x 2 ml Control Positivo
Cut-off = 0,4 CN + 0,6 CP
- 1 x 2,5 ml Control Negativo
donde:
CN: promedio de las lecturas de los Controles Negativos. BIBLIOGRAFIA
CP: promedio de las lecturas de los Controles Positivos. - Wisdon, G.B. - Clin. Chem. 22/8:1243, 1976.
Muestras Reactivas: se consideran aquellas con absorban- - Engvall, E. - Methods Enzymol. 70:419, 1980.
cias menores o iguales al valor cut-off. Estas muestras deben - Gerety, R.J. - “Hepatitis B” - Academic Press, Inc., USA,
ser ensayadas nuevamente. 1985.
Muestras no Reactivas: se consideran aquellas con absor- - Chang, Y. - Diagnostic Medicine 6/5:28, 1983.
bancias mayores al valor cut-off. - Argeri, N. et al. - Qualitas 1/2:118, 1982.
- Katchaki; J. et al. - Vox Sang. 37:9, 1979.
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO - García Solís - Análisis Clínicos 24/6:199, 1988.
Constituyen causas de resultados erróneos:
- Lavado incorrecto de los pocillos de reacción.
- Contaminación cruzada de Muestras no Reactivas con
anticuerpos procedentes de una Muestra Reactiva.
- Contaminación de la solución cromogénica con agentes
oxidantes (cloro, etc.)
- Contaminación del Stopper.
- Falta de homogeneización de las muestras con el Conjugado.
- Conservación inadecuada de las tiras de pocillos no utilizadas.
- Contaminación del Buffer de Lavado diluido. Se recomienda
verificar la limpieza de los recipientes donde se prepara y
almacena. Si se observa aparición de turbidez o precipitado
al prepararlo, debe desecharse.
No utilizar baño de agua para la incubación.
Un resultado negativo no excluye la posibilidad de exposición
o infección por HBV.
Ocasionalmente, al efectuar lecturas bicromáticas, pueden
minación. Esto se debe a que algunas muestras dan lecturas
inferiores al Blanco de Reactivos.
Verifique que el sistema lavador que Ud. está usando (WIE-
NER WASHER u otro), aspire totalmente el contenido de los
pocillos y que el volumen de la solución lavadora sea pareja.
PERFORMANCE
a) Sensibilidad: la sensibilidad basada en la prevalencia
asumida del 100% de anticuerpos anti-HBc en individuos
con hepatitis B, se estima en 98,7%.
b) Especificidad: la especificidad basada en la prevalencia
asumida del 0% de anticuerpos anti-HBc en individuos sanos,
se estima en 99,4%.
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Policubeta Sensib. Buf. Lavado Conc.
Policubeta sensibilizada Buffer de Lavado Concentrado
Conjugado Stopper
Conjugado Stopper
Control + Control -

C

 No congelar
F Riesgo biológico
Cont. Contenido
g Número de lote
M Elaborado por:
Xn
Nocivo
Xi
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo
h Número de catálogo M Wiener Laboratorios S.A.I.C.

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
870650000 / 00 p. 4/8 UR111122
Hepatitis B (HBsAg)
ELISA
a
Ensayo inmunoenzimático (ELISA) de 3 generación para la detección
del antígeno de superficie del virus de la hepatitis B (HBsAg)
SIGNIFICACION CLINICA Revelador B: tetrametilbencidina (TMB) 0,01 mol/l en ácido

La hepatitis B es una enfermedad viral caracterizada por un clorhídrico 0,1 N.
período prolongado de incubación (45-160 días). El virus Stopper: ácido sulfúrico 2 N.
causante de esta patología (HBV) es una partícula com- Buffer de Lavado concentrado: cloruro de sodio 1,4 mol/l
puesta por una región interior o "core" donde se encuentra en buffer fosfatos 100 mmol/l y tensioactivo no iónico 0,1 g/l.
el DNA y una envoltura exterior antigénica conocida como Control Positivo: dilución de suero inactivado, reactivo
antígeno de superficie (HBsAg). Su presencia en el suero para HBsAg.
indica enfermedad activa. El antígeno de superficie de la Control Negativo: dilución de suero inactivado, no reactivo.
hepatitis B (HBsAg) y su correspondiente anticuerpo son
específicos para infecciones por virus B. El antígeno puede INSTRUCCIONES PARA SU USO
ser detectado en el suero y secreciones de pacientes en Buffer de Lavado: a baja temperatura los componentes
período agudo o en infecciones crónicas por HBV. del reactivo pueden cristalizar. En tal caso, antes de diluir,
El HBsAg es generalmente la primera evidencia de infec- colocar en baño de agua a 37oC unos minutos, mezclando
ción por HBV, que puede preceder en semanas o meses a luego por inversión. Para usar diluir 1+4 con agua destilada
cualquier otra manifestación de laboratorio o a los síntomas (1 parte de Buffer de Lavado concentrado + 4 partes de
y signos clínicos de la enfermedad. Puede ser en algunos agua destilada).
casos el único indicador de portadores asintomáticos en Policubeta sensibilizada: lista para usar.
individuos con hepatitis B crónica. Conjugado: antes de diluir, para optimizar el aprovecha-
La detección del HBsAg es importante por lo tanto, no sólo miento del reactivo, es conveniente centrifugar suavemente
para el diagnóstico de la enfermedad aguda, sino para el el Conjugado concentrado para arrastrar lo que pudiera
control de portadores en bancos de sangre, unidades de quedar retenido en las paredes del tubo. Preparar diluyendo
diálisis y áreas hospitalarias donde exista la posibilidad de 1 parte de Conjugado concentrado + 50 partes de Diluyente
transmisión de la infección. de Conjugado (ej.: para una tira colocar 20 ul Conjugado
concentrado + 1 ml Diluyente de Conjugado o cantidades
FUNDAMENTOS DEL METODO equivalentes).
La muestra se pone en contacto con un anticuerpo monoclo- Revelador A y B: listos para usar.
nal anti-HBs inmovilizado sobre el soporte sólido. Si la misma Stopper: listo para usar.
contiene antígeno HBsAg, éste formará un complejo con los Control Positivo y Negativo: listos para usar.
anticuerpos y permanecerá unido al soporte. La fracción
no unida se elimina por lavado tras lo que se agrega otro PRECAUCIONES
anticuerpo monoclonal anti-HBs conjugado con peroxidasa. - Todas las muestras de pacientes deben manipularse como
Si se produjo la reacción en la primera etapa del proceso, si fueran capaces de transmitir infección. Los controles se
se unirá el conjugado. Luego de un nuevo lavado se agrega encuentran inactivados. Sin embargo, deben emplearse
el sustrato enzimático. En los casos en que el HBsAg esté como si se tratara de material infectivo.
presente en la muestra, habrá desarrollo de color celeste. - Los sueros controles han sido examinados para HIV en-
La reacción se detiene con el agregado de ácido sulfúrico, contrándose negativos.
con lo que el color celeste vira al amarillo. - Todos los materiales empleados en el ensayo deben ser
destruidos a fin de asegurar la inactivación de agentes pa-
REACTIVOS PROVISTOS tógenos. El método recomendado para este procedimiento
Policubeta sensibilizada: policubeta de tiras removibles es autoclavar durante 1 hora a 121oC. Los líquidos de
con pocillos que contienen anticuerpo monoclonal anti-HBs desecho pueden ser desinfectados con hipoclorito de sodio
inmovilizado. (concentración final 5%) durante por lo menos 60 minutos.
Conjugado concentrado: anticuerpo monoclonal anti-HBs - No intercambiar reactivos de distintos equipos y lotes.
conjugado con peroxidasa. - No emplear reactivos de otro origen.
Diluyente de Conjugado: buffer Tris conteniendo aditivos - Las policubetas deben incubarse en estufa. No usar baño
y conservantes. de agua. Debe evitarse abrir la estufa durante este proceso.
Revelador A: peróxido de hidrógeno 60 mmol/l en buffer - Evitar que los vapores de hipoclorito provenientes de
citrato 50 mmol/l. los recipientes para desechos biológicos u otras fuentes
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entren en contacto con la policubeta, ya que éste afecta CONDICIONES DE REACCION
la reacción. - Longitud de onda primaria: 450 nm
- Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro". - Longitud de onda secundaria (bicromática): 620-650 nm
- Evitar contacto del ácido sulfúrico (Stopper) con piel y - Calibración del instrumental: llevar a cero el espectro-
mucosas. R36/38: irrita los ojos y la piel. R34: provoca fotómetro con Blanco de Reactivos procesándolo de
quemaduras. S24/25: evítese el contacto con los ojos y la misma forma que una determinación pero omitiendo
la piel. S26: en caso de contacto con los ojos, lávense colocar Muestra y Conjugado, es decir sólo Revelador A,
inmediata y abundantemente con agua y acúdase a un Revelador B y Stopper.
médico. S28: en caso de contacto con la piel, lávese inme- - Tiempo total de reacción: 2 horas 30 minutos.
diata y abundantemente con agua. S37/39: usar guantes - Temperatura de reacción: 37oC y temperatura ambiente.
adecuados y protección para los ojos/la cara. - Volumen de muestra: 100 ul
- Evitar el derrame de líquidos y formación de aerosoles.
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE PROCEDIMIENTO

ALMACENAMIENTO Nota: una vez iniciado el procedimiento debe completarse
Los Reactivos Provistos son estables en refrigerador (2- sin interrupción.
10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. Llevar a temperatura ambiente los reactivos y las mues-
No congelar. tras antes de iniciar la prueba. Procesar simultáneamente
Buffer de Lavado: estable 3 meses a temperatura ambiente. 2 Controles Positivos (CP), 3 Controles Negativos (CN)
Policubeta sensibilizada: las tiras de pocillos con anti- y los Desconocidos (D). En los pocillos a utilizar de la
cuerpo inmovilizado se proveen cerradas al vacío y con policubeta colocar:
desecante. No abrir el envoltorio hasta el momento de
usar, ni antes que haya tomado temperatura ambiente, de D CP CN
lo contrario se favorecerá la humectación del contenido. Muestra 100 ul - -
Las tiras de pocillos no utilizadas deben conservarse dentro
del sobre con el desecante, cerrado y a 2-10oC. Las tiras Control Positivo - 100 ul -
conservadas en estas condiciones pueden ser utilizadas Control Negativo - - 100 ul
dentro de los 5 meses posteriores mientras no se supere la
Para evitar la evaporación, cubrir la placa con una cinta
fecha de vencimiento del equipo.
autoadhesiva e incubar en estufa 60 minutos a 37oC.
Conjugado: estable 24 horas en refrigerador (2-10oC).
Luego aspirar cuidadosamente el líquido de cada pocillo
recibiéndolo en un recipiente para desechos biológicos
MUESTRA
que contenga 5% de hipoclorito sódico. A continuación,
Suero o plasma
lavar 5 veces con Buffer de Lavado empleando aproxi-
a) Recolección: obtener la muestra de la manera usual. No
madamente 350 ul/vez/pocillo. Después de cada lavado,
pueden usarse muestras inactivadas por calor.
el líquido se descartará también en el recipiente con
b) Aditivos: si se emplea plasma puede utilizarse cualquier
anticoagulante de uso corriente en la práctica transfusional. hipoclorito, opcionalmente emplear lavador automático.
c) Sustancias interferentes conocidas: la hemólisis, Al finalizar el último lavado, eliminar por completo el
hiperlipemia y otras causas de turbiedad pueden provocar líquido residual, invirtiendo la policubeta y golpeándola
resultados erróneos. Estas muestras deben ser clarificadas varias veces sobre papel absorbente, ejerciendo una
por centrifugación. leve presión con la mano sobre los laterales mayores
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: las del soporte, para evitar la caída de las tiras de pocillos.
muestras pueden conservarse durante 7 días a 2-10oC. Luego agregar en cada pocillo:
Para conservación por períodos más prolongados deben Conjugado 100 ul 100 ul 100 ul
ser congeladas a -20oC o menos. Evitar los congelamientos
y descongelamientos reiterados. Existen evidencias que
policubeta durante 10 segundos. Para evitar la evapora-
muestran que los congelamientos sucesivos pueden ser
ción, cubrir la placa con una cinta autoadhesiva e incubar
durante 60 minutos en estufa a 37oC. Luego eliminar el
Si las muestras deben ser transportadas, embalar de
líquido de los pocillos, recibiéndolo en el recipiente con
acuerdo a las especificaciones legales relativas al envío de
hipoclorito y lavar según se indicó más arriba. Al finalizar
materiales infecciosos.
el último lavado, eliminar por completo el líquido residual,
MATERIAL REQUERIDO (no provisto) invirtiendo la policubeta y golpeándola varias veces sobre
- Micropipetas capaces de medir los volúmenes indicados papel absorbente, ejerciendo una leve presión con la
en el PROCEDIMIENTO. mano sobre los laterales mayores del soporte, para evitar
- Reloj alarma o cronómetro. la caída de las tiras de pocillos. Luego agregar:
- Estufa a 37oC. Revelador A 1 gota 1 gota 1 gota
- Material volumétrico adecuado.
Revelador B 1 gota 1 gota 1 gota
- Espectrofotómetro para lectura de policubetas (opcional).
870660000 / 01 p. 2/8
antígeno procedente de una Muestra Reactiva.
En caso de utilizar micropipeta automática, dispensar 50 ul. - Contaminación de la solución cromogénica con agentes
Mezclar aplicando suaves golpes en los laterales de la oxidantes (cloro, etc.).
policubeta durante 10 segundos. Incubar 30 minutos a - Contaminación del Stopper.
temperatura ambiente y luego agregar: - Conservación inadecuada de las tiras de pocillos no uti-
Stopper 1 gota 1 gota 1 gota lizadas.
- Uso de baño de agua en lugar de estufa para la incubación.
En caso de utilizar micropipeta automática, dispensar 50 ul.
- Contaminación del Buffer de Lavado diluido. Se recomienda
verificar la limpieza de los recipientes donde se prepara y
almacena. Si se observa aparición de turbidez o precipitado
Leer en espectrofotómetro a 450 nm o bicromática a
al prepararlo, debe desecharse.
450/620-650 nm o evaluar el resultado a simple vista por
Un resultado negativo no excluye la posibilidad de exposición
comparación con los Controles Positivos y Negativos.
o infección por HBV.
El color de la reacción es estable durante 30 minutos por lo
que los resultados deben observarse dentro de ese lapso.
Verifique que el sistema lavador que está usando (WIENER
WASHER u otro), aspire totalmente el contenido de los po-
CRITERIOS DE VALIDACION DE LA CORRIDA
cillos y que el volumen de la solución lavadora sea pareja.
La corrida se considera válida si se cumplen simultáneamen-
PERFORMANCE
a) Las lecturas de al menos 2 de los 3 Controles Negativos
a) Sensibilidad: utilizando el International Standard for He-
corregidas contra el Blanco de Reactivos deben ser menores
patitis B Surface Antigen (subtype ad) NIBSC (cód. 80/549)
o iguales a 0,150 D.O.
b) La lectura media de los Controles Positivos corregida debe diluido en PBS-BSA 5%, azida sódica 0,1% se detectan
ser mayor o igual a 0,600 D.O. cantidades de antígeno de 0,5 UI/ml. De acuerdo al informe
Si alguna de estas condiciones no se cumple, repetir la co- del WHO Working Group on International Reference Pre-
rrida. Para ambos casos recordar que las lecturas obtenidas parations, 1 UI equivale a 0,58 unidades PEI (Paul Ehrlich
dependerán de la sensibilidad del aparato empleado. Institut) o 1,93 French "ng" o 5,59 Abbott "ng".
b) Especificidad: se realizaron diferentes estudios sobre
INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS una población de individuos hospitalizados y ambulatorios,
a) Con instrumental óptico provenientes de centros de salud de la ciudad de Rosario,
La reactividad de la muestra se determina relacionando la Argentina. En los mismos se comparó la especificidad del
absorbancia de la muestra respecto al valor cut-off. método con otros de similar principio de reacción, obtenién-
dose los siguientes resultados:
Cut-off = CN + 0,060 D.O. - Estudio Nº 1: se analizaron 85 individuos obteniéndose una
donde CN = promedio de las lecturas del Control Negativo. especificidad de 100%.
Muestras Reactivas: se consideran aquellas con absorban- - Estudio Nº 2: se analizaron 76 individuos, obteniéndose
cias mayores o iguales al valor cut-off. una especificidad de 98,7%.
Las muestras inicialmente reactivas deben analizarse nue- - Estudio Nº 3: se analizaron 127 individuos, obteniéndose
vamente por duplicado con el mismo método antes de su una especificidad de 100%.
interpretación definitiva. Si uno o ambos duplicados resul- c) Estudio poblacional: en una población general que inclu-
taran reactivos la muestra debe considerarse repetidamente ye individuos sanos y donantes, la correlación con respecto
reactiva. a otros ensayos disponibles en el mercado, fue del 99,8%.
Muestras no Reactivas: se consideran aquellas con absor-
bancias menores que el valor cut-off. PRESENTACION
b) Interpretación visual - Equipo para 96 determinaciones (Cód. 1483253).
Si se opta por este tipo de interpretación, debe considerarse - Equipo para 192 determinaciones (Cód. 1483256).
no reactiva toda muestra que no presente una coloración
mayor que la de los Controles Negativos. Por el contrario, una BIBLIOGRAFIA
muestra netamente amarilla se considera reactiva. Colores - Wisdom, G.B. - Clin. Chem. 22/8:1243, 1976.
tenues mayores que el del Control Negativo, requieren la - Engvall, E. - Methods Enzymol. 70:419, 1980.
interpretación instrumental. - Gerety, R.J. - "Hepatitis B" - Academic Press, Inc., USA,
1985.
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO - García Solís - Análisis Clínicos 24/6:199, 1981.
Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA. - Toplikar, E.; Carlomagno, A.; Capriotti, G.; Rojkín, F.;
Constituyen causas de resultados erróneos: Lorenzo, L. - Rev. Arg. de Transfusión XVII/4:239, 1991.
- Lavado incorrecto de los pocillos de reacción. - Rojkín, F.; Gariglio, R.; Toplikar, E.; Carlomagno, A.; Loren-
- Contaminación cruzada de Muestras no Reactivas con zo, L. - Proceedings, 5th National Forum on AIDS, Hepatitis
870660000 / 01 p. 3/8
and other Blood-Borne Diseases, Atlanta, Georgia, USA, EXPLICACION DE LOS SIMBOLOS
pág. 89, 1992.
Policubeta Sensib. Diluyente Conj.
- Toplikar, E.; Carlomagno, A.; Rojkín, F.; Gariglio, R.; Loren-
zo, L. - J. Clin. Lab. Anal. 7/6:324, 1993. Policubeta sensibilizada Diluyente de Conjugado
- Barbara, J. - Vox Sang. 65:249-250, 1993. Conjugado Conc. Buf. Lavado Conc.
- WHO Working Group on International Reference Prepa-
rations for Testing Diagnostic Kits used in the Detection Conjugado Concentrado Buffer de Lavado Concentrado
of HBsAg and anti-HCV Antibodies. Geneva, SW 6-7
October 2003.
Control + Control -
Stopper
Stopper
C


 No congelar
F Riesgo biológico
Cont. Contenido
g Número de lote
M Elaborado por:
Xn
Nocivo
Xi
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
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HIV 1+2
ELISA 3ª Generación
anticuerpos anti- HIV-1 y anti HIV-2 en suero o plasma

Los virus de la inmunodeficiencia humana (HIV-1 y HIV-2) son Agua destilada o desionizada.
los agentes causales del Síndrome de la Inmunodeficiencia
Adquirida (SIDA). Estos retrovirus son transmitidos por la ex- MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
posición a ciertos fluidos corporales infectados, principalmente - Micropipetas para medir los volúmenes indicados
secreciones genitales y sangre o productos contaminados - Tips descartables
derivados de la sangre y por pasaje a través de la placenta. - Material volumétrico para preparar las diluciones indicadas
La evidencia serológica de la infección por HIV-1 y HIV-2 - Estufa a 37oC
puede ser obtenida determinando la presencia de antígenos - Papel absorbente
y anticuerpos en el suero de individuos en los que se sos- - Guantes descartables
pecha la infección. Los antígenos pueden generalmente ser - Reloj alarma o cronómetro
detectados en la fase aguda y durante la fase sintomática de - Hipoclorito de sodio
la enfermedad. Los anticuerpos pueden ser detectados a lo - Sistema de lavado de policubetas (manual o automático)
largo de toda la infección, comenzando en la fase aguda o - Espectrofotómetro para lectura de policubetas
inmediatamente después de ella.
El ensayo HIV 1+2 ELISA 3ª Generación está diseñado para PRECAUCIONES
detectar anticuerpos contra HIV-1, HIV-1 grupo O y HIV-2. - Los reactivos son para uso diagnóstico “in vitro”.
-Todas las muestras de pacientes deben manipularse como
FUNDAMENTOS DEL METODO si fueran capaces de transmitir infección.
Los pocillos de la policubeta están recubiertos con antígenos - Los sueros controles han sido examinados para antígeno
recombinantes de los virus HIV-1 y HIV-2. La muestra se de superficie de hepatitis B (HBsAg) y anticuerpos contra el
incuba en los pocillos. Si la muestra contiene anticuerpos virus de hepatitis C (HCV), encontrándose no reactivos. Sin
contra HIV-1 o HIV-2, los mismos se unirán a los antígenos embargo, se recomienda manipularlos con las precaucio-
sensibilizados en la placa. El material no unido es removido nes requeridas para muestras potencialmente infecciosas.
- Al descartar los materiales empleados en el ensayo se
por lavado. En el paso siguiente se agrega el conjugado que
deben tratar a fin de asegurar la inactivación de agentes pa-
contiene los mismos antígenos de la placa conjugados a
tógenos. El método recomendado para este procedimiento
peroxidasa. Estos se unirán a los anticuerpos si estaban pre-
sentes en la muestra. El conjugado no unido se remueve por
desecho pueden ser desinfectados con hipoclorito de sodio
lavado. A continuación se agrega una solución conteniendo
(concentración final 5%) durante por lo menos 60 minutos.
tetrametilbencidina y peróxido de hidrógeno. Las muestras
- No intercambiar reactivos de distintos lotes.
reactivas desarrollan color celeste que vira al amarillo cuando - No emplear reactivos de otro origen.
se detiene la reacción con ácido sulfúrico. - Evitar tocar las paredes de los pocillos con los tips.
- No utilizar elementos metálicos que puedan entrar en
REACTIVOS PROVISTOS contacto con los reactivos.
Policubeta sensibilizada: policubeta de tiras removibles - Las policubetas deben incubarse en estufa. Debe evitarse
con 96 pocillos recubiertos con antígenos recombinantes abrir la estufa durante este proceso. No usar baño de agua.
de HIV-1 y HIV-2. - Evitar que los vapores de hipoclorito provenientes de
Conjugado: antígenos recombinantes unidos a peroxidasa. los recipientes para desechos biológicos u otras fuentes
Color rojo. entren en contacto con los reactivos, ya que el hipoclorito
Revelador: solución de tetrametilbencidina (TMB) y peróxido afecta la reacción.
de hidrógeno. - Evitar contacto del ácido sulfúrico (Stopper) con piel y
Stopper: ácido sulfúrico 2 N. mucosas. R36/38: irrita los ojos y la piel. R34: provoca
Buffer de Lavado Concentrado: buffer salino con tensio- quemaduras. S24/25: evítese el contacto con los ojos y
activo (25x). Color verde. la piel. S26: en caso de contacto con los ojos, lávense
Control Positivo: suero humano inactivado conteniendo inmediata y abundantemente con agua y acúdase a un
anticuerpos anti-HIV-1 y HIV-2. Color naranja. médico. S28: en caso de contacto con la piel, lávese inme-
Control Negativo: suero humano no reactivo inactivado. diata y abundantemente con agua. S37/39: usar guantes
Color amarillo. adecuados y protección para los ojos/la cara.
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- Evitar el derrame de líquidos y formación de aerosoles. La inactivación por calor puede afectar el resultado.
- No pipetear con la boca. Usar guantes descartables y pro- No utilizar muestras con contaminación microbiana.
tección en los ojos durante la manipulación de las muestras Si las muestras deben ser transportadas, embalarlas de
y reactivos del ensayo. acuerdo a las especificaciones legales relativas al envío de
- Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de material infeccioso.
acuerdo a la normativa vigente.
PREPARACION DE LOS REACTIVOS PROCEDIMIENTO

Es importante que todo el material utilizado para la prepa- 1- Llevar a temperatura ambiente los reactivos y las
ración de los reactivos esté limpio y libre de detergente e muestras antes de iniciar la prueba.
hipoclorito. 2- Preparar el volumen necesario de buffer de lavado
Buffer de Lavado: a baja temperatura los componentes diluido.
del reactivo concentrado pueden precipitar. En tal caso, 3- Colocar en el soporte de tiras, el número de pocillos
llevar la solución a 37oC hasta disolución completa. Para requeridos para la cantidad de determinaciones a realizar,
la obtención del buffer de lavado listo para usar, diluir una incluyendo 2 pocillos para el Control Positivo (CP) y 3
parte de Buffer de Lavado Concentrado (25x) con 24 partes para el Control Negativo (CN).
de agua destilada o desionizada. Ej.: 20 ml con 480 ml para 4- Dispensar la Muestra (M) y los controles según el
una policubeta. siguiente esquema:
Policubeta sensibilizada, Conjugado, Revelador, Sto-
M CP CN
pper, Control Positivo y Control Negativo: listos para usar.
Control Positivo - 50 ul -
ALMACENAMIENTO
Reactivos Provistos: estables en refrigerador (2-10oC) has- Muestra 50 ul - -
5- Para evitar la evaporación, cubrir la placa con la cinta
autoadhesiva provista, e incubar 30 ± 2 minutos a 37oC
conservar a una temperatura entre 2 y 25oC.
± 1oC.
Buffer de lavado (1x): una vez diluido es estable 3 meses
a temperatura entre 2 y 25oC.
pocillo por completo. Lavar 5 veces según instrucción de
Policubeta sensibilizada: no abrir el sobre hasta el mo-
lavado (ver Procedimiento de Lavado).
mento de usar, ni antes que haya tomado temperatura
ambiente, de lo contrario se favorecerá la condensación
de humedad sobre la superficie de los pocillos. Las tiras no Conjugado 100 ul 100 ul 100 ul
utilizadas deben conservarse entre 2-10oC dentro del sobre 8- Para evitar la evaporación cubrir la policubeta con
con desecante bien cerrado. Las tiras conservadas en estas cinta autoadhesiva. Incubar 30 ± 2 minutos a 37oC ± 1oC.
condiciones pueden ser utilizadas dentro de los 4 meses 9- Lavar 5 veces según instrucción de lavado.
posteriores mientras no supere la fecha de vencimiento 10- Dispensar el Revelador trasvasando a un recipiente
indicada en la caja. limpio solamente el volumen necesario. No devolver el
Revelador restante al frasco original. Evitar el contacto
MUESTRA del reactivo con agentes oxidantes.
Suero o plasma
a) Recolección: obtener la muestra de la manera habitual. Revelador 100 ul 100 ul 100 ul
b) Aditivos: no se requieren para suero. Para las muestras 11- Incubar 30 ± 2 minutos a temperatura ambiente (18-
de plasma se puede emplear heparina, citrato o EDTA como 25oC), protegido de la luz.
anticoagulante. 12- Agregar el Stopper:
c) Sustancias Interferentes conocidas: no se observan
interferencias por bilirrubina hasta 30 mg/dl, ácido ascórbico Stopper 100 ul 100 ul 100 ul
hasta 50 mg/dl, triglicéridos hasta 1500 mg/dl o hemoglobina 13- Leer absorbancia en espectrofotómetro en forma
hasta 270 mg/dl. Muestras conteniendo partículas deberán bicromática a 450/620-650 nm o a 450 nm.
clarificarse mediante centrifugación. Nota: se recomienda realizar siempre la lectura en forma
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la bicromática. En caso de que la lectura sea monocromáti-
muestra se debe conservar refrigerada (2-10oC). En caso ca, realizar un blanco de reactivos que luego deberá ser
de no realizar el análisis dentro de las 72 horas se debe restado de todos los valores de las muestras.
congelar a -20oC. No se recomienda realizar múltiples ciclos
de congelamiento y descongelamiento. Esto puede generar
resultados erróneos. En caso de utilizar muestras conge- ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL
ladas, éstas deben ser homogeneizadas y centrifugadas El color de la reacción es estable durante 10 minutos, por lo
antes de su uso. que los resultados deben leerse dentro de ese lapso.
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PROCEDIMIENTO DE LAVADO rias veces, de lo contrario podrán obtenerse resultados
Eliminar el líquido de los pocillos por aspirado o volcado. erróneos.
Los pocillos se lavan con 350 ul de buffer de lavado diluido.
Asegurar que la altura alcanzada al llenar los pocillos no Nota: el procedimiento de lavado es crítico para el resulta-
cause desbordes. do del ensayo. Si queda buffer de lavado en el pocillo o si
La solución de lavado debe estar en contacto con los pocillos los pocillos no están completamente llenos se obtendrán
entre 30 y 60 segundos. resultados erróneos. No dejar que los pocillos se sequen
Garantizar que luego del último lavado no quede líquido durante el procedimiento. Los lavadores automáticos deben
residual. Realice un doble aspirado para eliminar el exce- ser enjuagados con agua destilada o desionizada al final del
dente de buffer. Si persiste luego de este procedimiento, día para evitar obstrucciones debido a las sales presentes
invertir la placa sobre papel absorbente y golpearla va- en el buffer de lavado.

Muestras Agregar 50 ul de M, CP e CN
nutos a 37 ± 1oC
Lavado Lavar cada pocillo con 350 ul de buffer de lava- Tiempo de contacto de la solución de lavado de 30
do (5 veces) e 60 segundos. Eliminar completamente el líquido
residual de los pocillos
Conjugado Agregar 100 ul de Conjugado
nutos a 37 ± 1oC
Revelado Agregar 100 ul de Revelador Trasvasar el volumen necesario de Revelador a u-
sar. No pipetear del frasco original. Descartar el
reactivo remanente. Evitar el contacto com agen-
tes oxidantes.
Incubación Durante 30 ± 2 minutos entre 18-25oC Mantener la policubeta protegida de la luz
CRITERIOS DE VALIDACION DEL ENSAYO Si una de estas condiciones no se cumple, repetir el ensayo.
El ensayo se considera válido si se cumplen simultáneamen- Recordar que las lecturas obtenidas dependerán de la sen-
te las siguientes condiciones: sibilidad del aparato empleado.
1. El promedio de las densidades ópticas (D.O.) de los
Controles Negativos deben ser ≤ 0,050. INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS
Ejemplo: a) Con instrumental óptico:
Lectura 1 = 0,015, Lectura 2 = 0,018, Lectura 3 = 0,021 La presencia o ausencia de anticuerpos anti-HIV-1 o HIV-2
Promedio = (0,015+0,018+0,021) / 3= 0,018 se determina relacionando la absorbancia de la muestra
respecto al valor del Cut-off.
2. Eliminar cualquier Control Negativo con D.O. > 0,050.
Cut-off = CN + 0,250
3. Si se ha eliminado algún Control Negativo, volver a calcular
CN: promedio de las D.O. del Control Negativo
el promedio de los Controles Negativos. Un ensayo es válido
si se aceptan al menos dos de los Controles Negativos. Ejemplo: 0,018 + 0,250 = 0,268
4. El promedio de las D.O. de los Controles Positivos debe Muestras No Reactivas: se consideran aquellas con ab-
ser ≥ 1,200. sorbancias menores al Cut-off
Ejemplo: Muestras Reactivas: se consideran aquellas con absorban-
Lectura 1 = 1,658, Lectura 2 = 1,721 cias mayores o iguales al Cut-off.
Promedio = (1,658+1,721) / 2 = 1,689
b) Interpretación visual:
5. La diferencia entre el promedio de las D.O. de los Con- Si se opta por este tipo de interpretación, debe considerarse
troles Positivos y Controles Negativos debe ser ≥ 1,100. No Reactiva toda muestra que no presente una coloración
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mayor que la de los Controles Negativos. Por el contrario, PRB 934 AI 0, 7, 11 7 7 ND
una muestra netamente amarilla se considera Reactiva. PRB 944-AT 0, 2, 7, 9, 14, 16 14 14 14 (Indet)
PRB 945 AU 0, 3, 13, 15, 20 15 13 20
Toda muestra inicialmente reactiva debe ser repetida por
duplicado. Si una o ambas repeticiones dan positivas, la PRB 947-AW 0, 9, 11, 20 9 9 20
misma debe considerarse reactiva. PRB 949-AY 0, 6, 9, 18, 20 20 20 20 (Indet)
Una muestra inicialmente reactiva puede ser no reactiva en No
PRB 951-BE 0, 2, 8, 11, 15, 19 19 19
las dos repeticiones. Esto puede deberse a: reactivo
- Contaminación cruzada de un pocillo no reactivo por una PRB 952-BB 0, 7, 10, 14, 17, 21 17 14 17
muestra reactiva. No
- Contaminación de la muestra durante la dispensación, PRB 953-BC 0, 3, 7, 10 10 7
reactivo
imprecisión en el dispensado de muestra, conjugado y/o
0, 2, 20, 22, 30, 35, No
Revelador en el pocillo PRB 966 48 48
37, 44, 48, 51 reactivo
- Contaminación del pocillo con hipoclorito u otros agentes Indet: indeterminadas
oxidantes.
b) Sensibilidad clínica en Paneles de Performance
En ciertos casos una muestra no reactiva puede presentar En un estudio realizado sobre diferentes paneles comerciales
una reacción falsamente reactiva, tanto en el análisis inicial internacionales, se obtuvieron los siguientes resultados:
como en sus repeticiones. Algunas causas de este fenómeno -PRZ 207 (Anti-HIV-1/2 Combo Performance Panel): se
pueden ser: detectaron 14 de las 14 muestras reactivas.
- Contaminación de la muestra durante la extracción, pro- -PRZ 206 (Anti-HIV-1/2 Combo Performance Panel) se
cesamiento o conservación. detectan 11 de las 12 muestras reactivas.
- Presencia de sustancias interferentes, tales como autoan-
ticuerpos, fármacos, etc. c) Sensibilidad en paneles de muestras reactivas anti-HIV
- Dispensación y/o aspirado ineficiente de la solución de En un estudio realizado sobre 123 muestras de pacientes
lavado (sistema obstruido). con infección por HIV-1 confirmados por diferentes métodos,
se encontraron reactivas la totalidad de las muestras con el
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO kit HIV 1+2 ELISA 3ª Generación.
- Ver Sustancias Interferentes conocidas en Muestra. b) Especificidad
- No se debe utilizar pool de muestras. En un estudio realizado sobre 3004 muestras de sueros y
- No se deben utilizar otros fluidos corporales como la saliva, plasmas de cinco centros de salud diferentes, se encontraron
líquido cefalorraquídeo u orina. 33 muestras reactivas de las cuales 28 fueron confirmadas
- Un resultado negativo no excluye la posibilidad de ex- por otros métodos, obteniéndose una especificidad del
posición o infección por HIV-1 o HIV-2. Los resultados 99,83%
repetidamente reactivos deben corroborarse por un método Se estudio la posible aparición de reactividad cruzada en
confirmatorio, de acuerdo a la normativa legal vigente. 272 muestras provenientes de individuos con diferentes
- No utilizar muestras inactivadas por calor ya que pueden condiciones clínicas que podrían ser causantes de re-
ocasionar resultados falsos positivos. acciones inespecíficas en el ensayo HIV 1+2 ELISA 3ª
Generación.
CARACTERISTICAS ESPECIFICAS DE PERFORMANCE Este grupo incluye muestras:
Sensibilidad clínica - con anticuerpos contra HAV, HBV, EBV, CMV, HSV, VZV,
a) Sensibilidad clínica con paneles de seroconversión (BBI, HCV, HTLV y otros virus
Boston Biomedica Inc) - con anticuerpos contra Treponema pallidum, Mycoplasma
pneumoniae, Toxoplasma gondii, Toxocara canis, Trypa-
Tiempo (días) en que la
Nombre Días desde la muestra se torna reactiva nosoma cruzi y otros microorganismos.
del panel recolección HIV 1+2 ELISA HIV W. Blot - con diferentes autoanticuerpos (AGA, AMA, ATA, FAN,
de la muestra ELISA 3ª 3ª Gen. (BBI) factor reumatoideo y otros)
Gen. (BBI) La especificidad en esta población fue de 97,42%.
PRB 904-D 0, 21, 49, 92, 99 92 92 92 En otro estudio sobre 91 plasmas de mujeres embarazadas
PRB 912-L 0, 9, 14, 16, 28, 30 0 0 9 se observó una especificidad del 98,9%.
PRB 916-P 0, 4, 9, 18, 30, 35 30 30 30 c) Precisión
PRB 919-S 0, 9, 11 9 9 9 Se evaluó la precisión del test siguiendo el protocolo
0, 2, 8, 10, 26, 33, EP5A recomendado por la NCCLS. Los ensayos fueron
PRB 924-X 33 33 35 (Indet)
35, 40 realizados con muestras de diferentes niveles de reacti-
PRB 925-Y 0, 10, 18, 22, 44, 49 44 44 44 (Indet)
vidad y con los controles. Se realizaron 2 ensayos diarios
evaluando cada muestra por duplicado por el transcurso
PRB 930-AE 0, 3, 7, 10 7 7 10 (Indet)
de 20 días.
864102822 / 00 p. 4/15
Media Intra-ensayo Inter-ensayo
Muestra
(D.O.) D.S. C.V. D.S. C.V. Policubeta Sensib. Buf. Lavado Conc.
Policubeta sensibilizada Buffer de Lavado Concentrado
M1 0,354 0,026 7,34% 0,037 10,45%
M2 0,790 0,073 9,24% 0,107 13,54% Conjugado Control +
C (+) 1,273 0,056 4,40% 0,096 7,54% Conjugado Control Positivo
C (-) 0,014 0,002 15,22% 0,003 23,19%
Revelador Control -
n= 80 Revelador Control Negativo
PRESENTACION Stopper
- 96 determinaciones (Cód. 1723096) Stopper
- 192 determinaciones (Cód. 1723192) Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
BIBLIOGRAFIA
- Gallo, RC - Retrovirology 3:72, 2006.
- Fauci, AS - Nature Medicine 9/7:839-843, 2003.
- Fiebig, EW et al. - AIDS 17 /13:1871-1879, 2003.
- WHO - HIV Testing, Treatment and Prevention. Generic P Representante autorizado en la Comunidad Europea
tools for operational research, 2009.
- WHO - AIDS Epidemic update, 2009. V Uso diagnóstico "in vitro"
- Evaluation of Precision Performance of Clinical Chemistry
Devices. Approved Guideline EP5-A 19/2 (1999) National X Contenido suficiente para <n> ensayos
Committee for Clinical Laboratory Standards.
- Specifications for Immunological Testing for Infectious
Diseases. Approved Guideline I/LA18-A2 (1994) National
Committee for Clinical Laboratory Standards. l Límite de temperatura (conservar a)
- Clinical Evaluation of Immunoassays. Approved Guideline

 No congelar
Standards. Riesgo biológico

- Interference testing in Clinical Chemistry. Approved
F
Guideline EP7-A (2002) National Committee for Clinical Volumen después de la reconstitución
Laboratory Standards.
Cont. Contenido
g Número de lote
Elaborado por:
M
Xn
Nocivo
Xi
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
864102822 / 00 p. 5/15 UR110914
HIV Ag/Ac
ELISA 4ª Generación
Ensayo inmunoenzimático (ELISA) para la detección simultánea del
antígeno p24 de HIV-1 y de anticuerpos anti HIV-1 y anti HIV-2
SIGNIFICACION CLINICA Conjugado 1: solución conteniendo antígenos recombi-

Los virus de la inmunodeficiencia humana (HIV-1 y HIV-2) nantes y péptidos sintéticos de HIV-1 y HIV-2 y anticuerpos
son los agentes causales del Síndrome de la Inmunodefi- monoclonales humanos anti-p24 biotinilados en buffer fosfato
ciencia Adquirida (SIDA). Estos retrovirus son transmitidos 10 mM con proteínas bovinas, cloruro de sodio y agente
por la exposición a ciertos fluidos corporales infectados, tensioactivo, pH 7,2.
principalmente secreciones genitales y sangre o productos Conjugado 2 concentrado: estreptavidina conjugada con
contaminados derivados de la sangre y por pasaje a través peroxidasa, color naranja.
de la placenta. Diluyente de Conjugado 2: buffer fosfato 10 mM con proteí-
La evidencia serológica de la infección por HIV-1 y HIV-2 nas bovinas, cloruro de sodio y agente tensioactivo, pH 7,2.
puede ser obtenida determinando la presencia de antíge- TMB: solución de tetrametilbencidina 36 mM en dimetilsul-
nos y anticuerpos en el suero de individuos en los que se fóxido (DMSO) 100%, (100x).
sospecha que tienen la infección. Los antígenos pueden Diluyente de TMB: buffer citrato 40 mM y peróxido de
generalmente ser detectados en la fase aguda y durante la hidrógeno 1,27 mM, pH 4,3.
fase sintomática de la enfermedad. Los anticuerpos pueden Stopper: ácido sulfúrico 1 M.
ser detectados a lo largo de toda la infección, comenzando Buffer de Lavado concentrado: buffer fosfato 250 mM,
en la fase aguda o inmediatamente después de ella. Por ello cloruro de sodio 3,45 M y agente tensioactivo, (25x), pH 6,4.
es de fundamental importancia la utilización de una deter- Control Positivo: suero humano inactivado, conteniendo
minación de alta sensibilidad que pueda detectar antígenos anticuerpos anti-HIV, color rojo.
y anticuerpos. Control Positivo p24: solución de antígeno p24 de HIV-1
El ensayo de HIV Ag/Ac ELISA 4ª Generación está diseñado en buffer fosfato 10 mM, con proteínas bovinas, cloruro de
para detectar antígeno p24 así como anticuerpos contra sodio y agente tensioactivo, pH 7,2.
HIV-1, HIV-1 grupo O y HIV-2. Control Negativo: suero humano normal no reactivo, inac-
tivado, color amarillo.
Los pocillos de la policubeta están recubiertos con proteínas REACTIVOS NO PROVISTOS
recombinantes y péptidos sintéticos de HIV-1 (gp41) y HIV-2 Agua destilada o desionizada.
(gp36) y anticuerpos monoclonales anti-p24(*). La muestra se
incuba en los pocillos, si la misma contiene antígeno p24 y/o MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
anticuerpos contra HIV-1 o HIV-2 se unirán a los antígenos - Micropipetas automáticas o semiautomáticas, regulables
y/o anticuerpos del pocillo. El material no unido es removido o fijas
por lavado. En el paso siguiente se agrega el Conjugado 1 - Tips descartables
que contiene anticuerpos y antígenos marcados con biotina - Material volumétrico para preparar diluciones
que se unirán a los antígenos/anticuerpos si están presentes - Cronómetro
en la muestra. Luego se agrega el Conjugado 2 (peroxidasa - Estufa a 37oC
conjugada a estreptavidina) que se unirá al Conjugado 1. El - Guantes descartables
conjugado no unido se remueve por lavado. - Papel absorbente
A continuación se agrega una solución conteniendo tetrame- - Hipoclorito de sodio
tilbencidina (TMB) y peróxido de hidrógeno. Las muestras - Sistema de lavado de policubetas (manual o automático)
reactivas desarrollan color azul que vira al amarillo cuando - Espectrofotómetro para lectura de policubetas
la reacción se detiene con ácido sulfúrico (Stopper).
PRECAUCIONES
REACTIVOS PROVISTOS - Los reactivos son para uso diagnóstico “in vitro”.
Policubeta sensibilizada: policubeta de 96 pocillos recu- - Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
biertos con proteínas recombinantes y péptidos sintéticos de de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
HIV-1 y HIV-2 y anticuerpos monoclonales humanos anti-p24. - Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
Diluyente de Muestra: buffer Tris 0,02 M conteniendo acuerdo a la normativa local vigente.
proteínas bovinas, cloruro de sodio y agente tensioactivo, - Todas las muestras de pacientes deben manipularse como
pH 7,2, color azul. si fueran capaces de transmitir infección. Los controles se
(*)
Contiene biomaterial provisto por AIP N.V., Bélgica 864116000 / 03 p. 1/12
encuentran inactivados. Sin embargo deben emplearse ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
como si se tratara de material infectivo. ALMACENAMIENTO
- Los sueros controles han sido examinados para antígeno Los Reactivos Provistos son estables en refrigerador (2-10oC)
de superficie de Hepatitis B (HBsAg) y anticuerpos contra el hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No congelar.
virus de Hepatitis C (HCV), encontrándose no reactivos. Sin Es importante que todo el material utilizado para la prepa-
embargo, se recomienda manipularlos con las precaucio- ración esté limpio.
nes requeridas para muestras potencialmente infecciosas. Buffer de Lavado concentrado y Stopper: se pueden
- Todos los materiales empleados en el ensayo deben conservar a 2-25oC.
ser tratados a fin de asegurar la inactivación de agen- Buffer de lavado: una vez diluido es estable 3 meses a
tes patógenos. El método recomendado para este temperatura ambiente (2-25oC).
procedimiento es autoclavar durante 1 hora a 121oC. Conjugado 2 diluido: una vez preparado es estable 24
Los líquidos de desecho pueden ser desinfectados con horas a temperatura ambiente (2-25oC).
hipoclorito de sodio (concentración final 5%) durante por Policubeta sensibilizada: se provee cerrada y con de-
lo menos 60 minutos. secante. No abrir el envoltorio hasta el momento de usar,
- No intercambiar reactivos de distintos equipos y lotes. ni antes que haya alcanzado temperatura ambiente, de lo
- No emplear reactivos de otro origen. contrario se favorecerá la condensación de humedad sobre
- Las policubetas deben incubarse en estufa. Se debe la superficie de los pocillos. Los pocillos no utilizados deben
evitar abrir la estufa durante la incubación. No usar baño conservarse dentro de la bolsa provista con desecante y
de agua. entre 2-10oC, bien cerrada.
- Evitar que los vapores de hipoclorito provenientes de Revelador: una vez preparado se debe usar dentro de las 3
los recipientes para desechos biológicos u otras fuentes horas conservándolo a temperatura ambiente (2-25oC) y pro-
entren en contacto con la policubeta, ya que el hipoclorito tegido de la luz. En caso de coloración, debe ser descartado.
afecta la reacción.
- Evitar el contacto del ácido sulfúrico (Stopper) y del DMSO MUESTRA
(TMB) con la piel y mucosas. R36/38: irrita los ojos y Suero o plasma no diluido
la piel. R34: provoca queimaduras. S24/25: evítese el a) Recolección: obtener la muestra de la manera usual.
contacto con los ojos y la piel. S26: en caso de contacto b) Aditivos: no se requieren para suero. Las muestras de
con los ojos, lávense inmediata y abundantemente con plasma se pueden recoger con cualquier anticoagulante de
agua y acúdase a un médico. S28: en caso de contacto uso habitual en la práctica transfusional.
con la piel, lávese inmediata y abundantemente con agua. c) Sustancias interferentes conocidas: no utilizar sueros
S37/39: usar guantes adecuados y protección para los o plasmas contaminados, hiperlipémicos o hemolizados.
ojos/la cara. No se observan interferencias por bilirrubina hasta 30 mg/dl,
- Si cualquier reactivo entra en contacto con la piel o los ojos, ácido ascórbico hasta 50 mg/dl, muestras lipémicas hasta
lavar con abundante agua. 1453 mg/dl de triglicéridos o muestras hemolizadas hasta
- Evitar el derrame de líquidos y formación de aerosoles. 15 mg/dl de hemoglobina. Muestras conteniendo partículas
- No pipetear con la boca. Usar guantes descartables y pro- deberán clarificarse mediante centrifugación.
tección en los ojos durante la manipulación de las muestras d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento y
y reactivos del ensayo. transporte: la muestra se debe conservar refrigerada (2-
10oC). En caso de no realizar el análisis dentro de las 72 ho-
PREPARACION DE REACTIVOS ras se debe conservar a -20oC. No es recomendable realizar
Buffer de Lavado: a baja temperatura los componentes del múltiples ciclos de congelamiento y descongelamiento. Esto
reactivo pueden precipitar. En tal caso, calentar la solución a puede generar resultados erróneos. Los plasmas deberán
descongelarse rápidamente por calentamiento durante unos
37oC hasta su disolución completa. Para la obtención del buffer
minutos a 40oC (para limitar la precipitación de la fibrina).
de lavado listo para usar, diluir el Buffer de Lavado concentrado
Si las muestras deben ser transportadas, embalar de acuerdo a las
(25x) con agua destilada o desionizada. Ej.: 40 ml en 960 ml
especificaciones legales relativas al envío de material infeccioso.
para una policubeta.
Conjugado 2: en un tubo rotulado, diluir el Conjugado 2 con-
centrado (100x) en el Diluyente de Conjugado 2. Ej.: 200 ul en
20 ml para una policubeta.
Revelador: en un tubo rotulado, diluir la TMB concentrada
muestras 30 minutos antes de iniciar la prueba.
(100x) en el Diluyente de TMB. Ej.: 200 ul en 20 ml para una
2- Preparar el volumen necesario de Buffer de Lavado.
policubeta. La TMB concentrada está disuelta en DMSO.
3- Sacar el número de pocillos requeridos para el ensayo
Dado que la temperatura de fusión del DMSO es 18ºC,
y volver a colocar el resto de la policubeta en su bolsa ce-
la TMB debe alcanzar temperatura ambiente (20-25ºC) y
rrada y con desecante, colocarla inmediatamente a 2-10oC.
homogeneizarse bien antes de usar.
4- En los pocillos a utilizar de la policubeta dispensar el
Policubeta sensibilizada, Diluyente de Muestra, Conju-
Diluyente de Muestra, luego la muestra (M), el Control
gado 1, Stopper, Control Positivo, Control Positivo p24 Negativo (CN) por triplicado, el Control Positivo (CP)
y Control Negativo: listos para usar.
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por duplicado y el Control Positivo p24 (p24) según el 14- Agregar el Revelador:
siguiente esquema:
Revelador 200 ul 200 ul 200 ul 200 ul
M CP p24 CN
15- Incubar 30 minutos a temperatura ambiente (18-
Diluyente de Muestra 100 ul 100 ul 100 ul 100 ul 25oC). Mantener la policubeta protegida de la luz y luego
Control Positivo - 100 ul - - agregar:
Control Positivo p24 - - 100 ul - Stopper 50 ul 50 ul 50 ul 50 ul
Control Negativo - - - 100 ul 16- Leer la absorbancia de la solución de los pocillos en es-
pectrofotómetro a 450 nm o bicromática a 450/600-650 nm.
Muestra 100 ul - - -
Nota: se recomienda efectuar siempre la lectura en
Para evitar la evaporación cubrir la policubeta con cinta forma bicromática. En caso de que la lectura sea mono-
autoadhesiva. cromática, realizar un blanco de reactivos (omitiendo el
5- Incubar durante 60 minutos a 37oC. Conjugado 2 diluido) que luego deberá ser restado de
6- Después de la incubación eliminar el líquido de cada todos los valores de las muestras.
7- Agregar Conjugado 1 listo para usar: ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL
Conjugado 1 200 ul 200 ul 200 ul 200 ul El color de la reacción es estable entre 5 y 30 minutos, por
lo que los resultados deben observarse dentro de ese lapso.
Para evitar la evaporación cubrir la policubeta con cinta
autoadhesiva. PROCEDIMIENTO DE LAVADO
8- Incubar el Conjugado 1 durante 30 minutos a 37oC. En Los pocillos se lavan con 350 ul de Buffer de Lavado diluido.
forma paralela, preparar el Conjugado 2 diluido. Asegurar que la altura alcanzada al llenar los pocillos no
9- Después de la incubación eliminar el Conjugado 1 cause desbordes.
de cada pocillo por aspirado o invirtiendo la policubeta El tiempo mínimo que debe estar la solución de lavado en
y golpeándola sobre papel absorbente. NO LAVAR LA contacto con el pocillo es entre 30 y 60 segundos.
POLICUBETA ENTRE LA INCUBACION CON CONJU- Garantizar que luego del último lavado no quede líquido re-
GADO 1 Y CONJUGADO 2. sidual. Realice un doble aspirado para eliminar el excedente
10- Agregar el Conjugado 2 diluido: de buffer, si persiste luego de este procedimiento, invertir la
Conjugado 2 diluido 200 ul 200 ul 200 ul 200 ul policubeta sobre papel absorbente y golpearla varias veces.
Para evitar la evaporación cubrir la policubeta con cinta Nota: el procedimiento de lavado es crítico para el resulta-
autoadhesiva. do del ensayo. Si queda buffer de lavado en el pocillo o si
11- Incubar durante 30 minutos a 37oC. los pocillos no están completamente llenos se obtendrán
12- Preparar el Revelador. resultados erróneos. No dejar que los pocillos se sequen
13- Después de la incubación eliminar el Conjugado 2 durante el procedimiento. Los lavadores automáticos deben
lavando 5 veces según instrucción de lavado (ver Pro- ser enjuagados con agua destilada o desionizada al final del
cedimiento de Lavado). día para evitar obstrucciones debido a las sales presentes

Buffer de lavado Preparación de la solución de lavado Disolución de los cristales de sales
Muestra pocillo
Muestras Agregar 100 ul de M, CN, CP y p24 Se observa cambio de color al agregar la muestra
y los controles
Incubación Cubrir los pocillos e incubar a 37oC durante 60 mi- En estufa
nutos
Lavado Lavar cada pocillo con 350 ul de buffer de lavado Tiempo de contacto de la solución de lavado entre
(5 veces) 30 y 60 segundos. Eliminar completamente el líqui-
do residual de los pocillos
Conjugado 1 Agregar 200 ul de Conjugado 1
864116000 / 03 p. 3/12
Incubación Cubrir los pocillos e incubar a 37oC durante 30 En estufa
minutos
Preparación Conjugado 2 Durante la incubación con el Conjugado 1, prepa-
rar Conjugado 2
Conjugado 2 Eliminar el Conjugado 1 y dispensar 200 ul de No lavar entre el Conjugado 1 y el Conjugado 2
Conjugado 2 diluido
Incubación Cubrir los pocillos e incubar a 37oC durante 30
minutos
Preparación Revelador Durante la incubación con el Conjugado 2, preparar
el Revelador
Revelado Agregar 200 ul de Revelador
Incubación Entre 18-25oC durante 30 minutos Mantener la policubeta protegida de la luz
Lectura Leer en espectrofotómetro Leer entre los 5 y 30 minutos
CRITERIOS DE VALIDACION DE LA CORRIDA Si los dos duplicados son negativos, la muestra se considera
La prueba se considera válida si se cumplen simultáneamen- no reactiva para HIV.
te las siguientes condiciones: Si por lo menos uno de los duplicados es positivo, la muestra
1- Las lecturas de al menos 2 de los 3 Controles Negativos se considera repetidamente reactiva y contiene antígeno p24
deben ser menores o iguales a 0,100 D.O. Si un Control y/o anticuerpos contra HIV-1 o HIV-2.
Negativo no cumple con el criterio se debe excluir. Los resultados repetidamente reactivos deben corroborarse por
Ejemplo: cálculo del promedio de los Controles Negativos un método confirmatorio, de acuerdo a la normativa legal vigente.
Control Absorbancia Una muestra inicialmente reactiva puede ser no reactiva en
1 0,019 las dos repeticiones. Esto puede deberse a:
2 0,016 - Contaminación cruzada de un pocillo no reactivo por una
3 0,016 muestra con título elevado de anticuerpos anti-HIV y/o
Total 0,051 antígeno.
- Contaminación de la muestra durante la dispensación,
CN = Total Abs / 3 = 0,051 / 3 = 0,017 imprecisión en el dispensado de la muestra y/o de los
2- Las lecturas de los Controles Positivos debe ser mayor conjugados o TMB en el pocillo, reutilización de tips.
o igual a 0,800 D.O. - Contaminación del pocillo con hipoclorito u otros agentes
Ejemplo: lectura de los Controles Positivos oxidantes.
- Muestras no coaguladas completamente, con restos de
Control Absorbancia
fibrina o fibronectina.
1 1,968
2 2,012 En ciertos casos una muestra no reactiva puede presentar una
3- La lectura del Control Positivo para p24 debe ser mayor reacción falsamente reactiva, tanto en el análisis inicial como en
o igual a 0,400 D.O. sus repeticiones. Algunas causas de este fenómeno pueden ser:
- Contaminación de una muestra no reactiva por otra fuer-
Nota: si uno o más criterios de los enunciados arriba no
temente reactiva.
cumplen, repetir la corrida.
- Contaminación de la muestra durante la extracción, proce-
Cut-off samiento o conservación.
Calcular el valor del Cut-off sumando 0,180 al promedio de - Presencia de sustancias interferentes, tales como au-
los Controles Negativos. toanticuerpos, anticuerpos dirigidos contra alguno de los
Ejemplo: promedio Controles Negativos = 0,017 componentes del reactivo, fármacos, etc.
Valor Cut-off = 0,180 + 0,017= 0,197 - Contaminación del Revelador por el Conjugado 2.
- Utilización de muestras hemolizadas, suero coagulado en
INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS forma incompleta, plasma conteniendo fibrina, o muestras
Muestras no reactivas: se consideran aquellas cuyo valor con contaminación microbiana. Este tipo de muestras
de absorbancia es menor al valor Cut-off. pueden dar resultados falsamente reactivos.
Muestras inicialmente reactivas: se consideran aquellas - Dispensación y/o aspirado ineficiente de la solución de
cuyo valor de absorbancia es mayor o igual al valor Cut-off. lavado (sistema obstruido).
Estas muestras deben ser reanalizadas por duplicado usando - Aspirado insuficiente con un remanente de solución de
la muestra original. lavado en los pocillos en el último lavado.
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- Presencia de burbujas en los pocillos durante el proceso b) Sensibilidad clínica en Paneles de Performance de BBI:
de lectura. En un estudio realizado sobre diferentes paneles comerciales
internacionales, se obtuvieron los siguientes resultados:
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO PRZ204 (HIV 1/2 Combo Performance Panel): se detectaron
Ver Sustancias Interferentes conocidas en MUESTRA. 14 de las 14 muestras reactivas.
No se debe utilizar pool de muestras. PRZ205 (HIV 1/2 Combo Performance Panel): se detectaron
No se deben utilizar otros fluidos corporales como la saliva, 14 de las 14 muestras reactivas.
líquido cefalorraquídeo u orina. PRB204 (Anti-HIV 1 Mixed Titer Performance Panel): se
El método colorimétrico de verificación del cargado de la detectaron 23 de las 23 muestras reactivas.
muestra no permite verificar la exactitud de los volúmenes PRB108 (Anti-HIV 1 Low Titer Performance Panel): se de-
distribuidos sino solamente validar la presencia de la muestra. tectaron 14 de las 14 muestras reactivas.
c) Sensibilidad clínica en paneles de muestras reactivas anti-HIV:
En un estudio realizado sobre 540 muestras de pacientes
con infección por HIV-1 y HIV-2 confirmadas por diferentes
métodos, se encontraron reactivas la totalidad de las mues-
tras con el kit HIV Ag/Ac ELISA 4ª Generación.
Sensibilidad Clínica Nº de muestras Sensibilidad
a) Sensibilidad clínica con paneles de seroconversión co-
361 [hospitales] 100%
merciales (BBI, Boston Biomedica, Inc):
203 [población de riesgo]
Resultados Resultados 153 muestras reactivas 100%
Paneles BBI HIV Ag/Ac Western Blot y 50 no reactivas
ELISA (según BBI) 26 muestras HIV-2 100%
4ª Generación
Días de Tiempo (días) en que la Sensibilidad antígeno p24
Nombre del panel recolección muestra se vuelve El panel BBI PRA801 (HIV Antigen Sensitivity Panel) consiste
de muestras reactiva en diluciones seriadas de cultivo de células infectadas por
Panel BBI 916 P 0 4 9 15 30 35 15 30 HIV-1. La concentración de antígeno p24 se determina con
los estándares: WHO: HIV-1 p24 Antigen 90/636, DuPont
0 2 8 10 26 33
Panel BBI 924 X
35 40
26 35 (indet) HIV p24 y Sanofi HIV Antigen, detectándose hasta la dilución
número 9 (concentración de p24 < 2 pg/ml, según BBI) con
0 10 18 22 44
Panel BBI 925 Y 44 44 (indet) el kit HIV Ag/Ac ELISA 4ª Generación.
49
Panel BBI 926 Z 0 2 7 9 27 32 7 27 Especificidad Clínica
Panel BBI 927 AB 0 28 33 35 40 28 35 En un estudio realizado sobre 3250 muestras de sueros y
0 4 14 18 21
plasmas provenientes de dos centros diferentes, ensayadas
Panel BBI 929 AD 18 25-28 por el kit HIV Ag/Ac ELISA 4ª Generación, se encontraron
25 28
99,94% (3229/3231) de muestras no reactivas. De las 21
0 2 7 9 15 28
Panel BBI 931 AF
33 35 42
28 33 muestras inicialmente reactivas, 19 fueron reactivas, con-
firmadas por otros métodos.
0 10 16 21 24
Panel BBI 935 AJ 28 43
28 43 Especificidad
Panel BBI 944 AT 0 2 7 9 14 16 7 14 (indet) En un estudio realizado sobre 561 muestras provenientes de
Panel BBI 945 AU 0 3 7 13 15 20 13 20 una población de edad avanzada ensayadas por el kit HIV Ag/Ac
Panel BBI 946 AV 0 4 7 11 7 ND
ELISA 4ª Generación, se encontró una especificidad de 99,82%.
Se estudió la posible aparición de reacciones cruzadas
Panel BBI 948 AX 0 18 20 23 23 No reactivo
0 2 7 10 14 17 diferentes condiciones clínicas que pueden ser causantes
Panel BBI 954 BD 21 No reactivo
21 de reacciones inespecíficas para el ensayo HIV Ag/Ac ELISA
todas 4ª Generación. Estas condiciones incluyen: mujeres emba-
Panel BBI 955 BE 0 3 7 12 14 7
indet razadas y pacientes hemodializados, con enfermedades
Panel BBI 956 BF 0 40 42 47 50 47 No reactivo autoinmunes o enfermedades infecciosas diferentes a HIV
0 7 9 14 16 23 todas (Sífilis, HTLV, Hepatitis B, Hepatitis C, CMV, Adenovirus,
Panel BBI 957 BG 23
28 indet otras). Solamente, una muestra perteneciente al grupo de
Panel BBI 958 BH 0 2 7 9 15 17 9 No reactivo enfermedades autoinmunes presentó una reactividad no es-
pecífica. Para esta población la especificidad es de 99,62%.
0 7 9 14 19 21
Panel BBI 959 BI 7 14
26 Precisión
ND: no determinada; indet: indeterminadas Se evaluó la reproducibilidad intra e inter-ensayo, como así
864116000 / 03 p. 5/12
también la inter-lote. Los ensayos fueron realizados con EXPLICACION DE LOS SIMBOLOS
muestras de diferentes niveles de reactividad.
Promedio Intraensayo Interensayo Inter-lote
DO/CO C.V. C.V. C.V.
Muestra 1 2,44 9,19 % 10,88 % 13,44 % Conjugado 1 Conjugado 2 Conc.
Muestra 2 1,5 10,24 % 13,2 % 12,67 % Conjugado 1 Conjugado 2 concentrado
Control (+) 15,09 2,12 % 2,13 % 2,52 %
Control (-) 0,074 14,68 % 13,58 % 23,42 % Conjugado 2 Diluy. TMB
n = 144 Diluyente de Conjugado 2 TMB
LIMITACIONES DEL METODO TMB Diluy. Stopper

- La variabilidad de los virus HIV-1 y HIV-2 no permite excluir Diluyente de TMB Stopper
la posibilidad de una infección por HIV-1 o HIV-2. Ningún
método conocido puede ofrecer completa seguridad. Buf. Lavado Conc. Control +
- Toda técnica ELISA puede presentar resultados falsamente Buffer de Lavado Concentrado Control Positivo
reactivos.
- Un resultado no reactivo no excluye la posibilidad de Control p24 Control -
infección por HIV. Control Positivo p24 Control Negativo
- Un resultado reactivo debe ser confirmado por otro test.
Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de reactivos para
diagnóstico de Wiener lab.
PRESENTACION
Equipo para 192 determinaciones (Cód. 1723551). C por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios

- Center for Disease Control and prevention (2001). Human
Immunodeficiency Virus Type 1 (HIV-1) Antibody testing.
- Weber, B, Fall EH, Berger AM, and Doerr W. - Reduction X Contenido suficiente para <n> ensayos
of Diagnostic Window by New Fourth Generation Human H Fecha de caducidad
Immunodeficiency Virus Screening Assays - J. Clin. Micro-
biol. 36/8:2235 (1998). l Límite de temperatura (conservar a)
- Saville RD, Constantine NT, Cleghorn FR, Jack N, Bartho-  No congelar
lomew C, Edwards J, Gomez P and Blattner WA. - Fourth-
Generation Enzyme-Linked Immunosorbent Assay for the F Riesgo biológico
Simultaneous detection of Human Immunodeficiency Virus Volumen después de la reconstitución
Antigen and Antibody. - J. Clin. Microbiol. 39/7:2518 (2001).
Cont. Contenido
- Roques P, Robertson DL, Souquiere S, Damond F, Ayouba
A, Farfara I, Depienne C, Nerrienet E, Dormont D, Brun- g Número de lote
Vezinet F, Simon F and Mauclere P. - Phylogenetic analy-
M Elaborado por:
sis of 49 newly derived HIV-1 group O strains: High viral
diversity but no group M-like subtype structure - Virology Xn
Nocivo
302/2:259 (2002).
- Yilmaz G. - Diagnosis of HIV infection and laboratory
Xi
Monitoring of its Therapy - J. Clin. Virol. 21/3:187 (2001). Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo
Wiener lab.
Riobamba 2944
Bioquímica
864116000 / 03 p. 6/12 UR130321
Homocysteine
C Calibrator
Para la calibración de la determinación de homocisteína total
Homocysteine Calibrator ha sido diseñado para la calibra- Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
ción de la determinación cuantitativa de homocisteína. reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
Consultar los valores asignados en cada vial, debido a que
C
los mismos son lote específico. por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios
Los resultados del calibrador ayudan a la detección de para el diagnóstico "in vitro"
errores analíticos causados por una técnica defectuosa, por
deterioro de los reactivos o por problemas en el analizador. P Representante autorizado en la Comunidad Europea
REACTIVOS PROVISTOS V Uso diagnóstico "in vitro"
Calibrador 1: solución libre de L-homocisteína.
Calibrador 2: solución conteniendo L-homocisteína en con-
centraciones entre 25 y 30 umol/l. H Fecha de caducidad

 No congelar
PRECAUCIONES
Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro". No ingerir. F Riesgo biológico
Cont. Contenido

ALMACENAMIENTO
Reactivos Provistos: son estables a 2-10oC hasta la fecha Xn
Nocivo
de vencimiento indicada en el envase. Una vez abiertos los
calibradores son estables 30 días a 2-10oC. Corrosivo / Caústico
INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS Xi

Irritante
REACTIVOS
Los calibradores deben ser límpidos. Descartar si se ob- i Consultar instrucciones de uso
serva turbidez.
Calibr. Calibrador
PROCEDIMIENTO b Control
Los Calibradores se deben usar de la misma manera que
una muestra desconocida, de acuerdo a las instrucciones b Control Positivo
que acompañan al kit de Homocysteine.
Transferir alícuotas del volumen requerido a la cubeta
c Control Negativo
del instrumento a ser usado. Tapar y conservar a 2-10oC. h Número de catálogo

Riobamba 2944
PRESENTACION 2000 - Rosario - Argentina
- 2 x 1 ml (Cód. 1999732) http://www.wiener-lab.com.ar
Bioquímica
Wiener lab.
864102300 / 00 p. 1/2 UR101007
Homocysteine
C Control
Para control de precisión en la determinación de homocisteína total
Lote: 1502159100 (Exp.: 2015/12/11)
Nivel 1: 159100 (Exp.: 2015/12/11)
Nivel 3: 159100 (Exp.: 2015/12/11)
APLICACIONES
Homocysteine Control ha sido diseñado para el control Sacar del refrigerador y mezclar con cuidado debido a que
de precisión de métodos para la determinación cuantitativa la agitación vigorosa puede crear burbujas. Transferir alí-
de homocisteína. cuotas del volumen requerido a la cubeta del instrumento
Consultar la tabla de valores asignados para los constituyen- a ser usado. Tapar y conservar a 2-10oC.
Los resultados del control ayudan a la detección de errores
analíticos causados por una técnica defectuosa, por deterioro PRESENTACION
de los reactivos o por problemas en el analizador. - 2 x 1 ml (Cód. 1999733)
REACTIVOS PROVISTOS VALORES ASIGNADOS

Control nivel 1: suero humano conteniendo concentraciones Homocisteína Valor Medio Rango
normales de homocisteína. (umol/l) (umol/l) (umol/l)
Control nivel 3: suero humano conteniendo concentraciones
patológicas de homocisteína. Nivel 1 7,0 5,6 8,4
Nivel 3 25,0 20,0 30,0
PRECAUCIONES
reactivo para HBsAg, HCV y HIV. Sin embargo debe mani-
pularse como si se tratara de muestras infectivas.
ALMACENAMIENTO
Una vez abiertos los controles son estables 30 días
conservados a 2-10oC cuando no estén en uso.

REACTIVOS
Los reactivos deben ser límpidos. Descartar si se observa
turbidez.
PROCEDIMIENTO
Los Controles se deben usar de la misma manera que
una muestra desconocida, de acuerdo a las instrucciones
864102200 / 05 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
864102200 / 05 p. 2/4 UR150218
Homocysteine
C Control
Lote: 1506168970
Nivel 1: 168970
Nivel 3: 168970
APLICACIONES

Nivel 3 25,0 20,0 30,0
PRECAUCIONES
ALMACENAMIENTO

REACTIVOS
turbidez.
PROCEDIMIENTO
864102200 / 06 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
864102200 / 06 p. 2/4 UR150630
Homocysteine
C Control
Lote: 1510174980
Nivel 1: 174980
Nivel 3: 174980
APLICACIONES

Nivel 3 25,0 20,0 30,0
PRECAUCIONES
ALMACENAMIENTO

REACTIVOS
turbidez.
PROCEDIMIENTO
864102200 / 07 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
864102200 / 07 p. 2/4 UR151006
Homocysteine
C Control
Lote: 1603185870
Nivel 1: 185870
Nivel 3: 185870
APLICACIONES

Nivel 3 25,0 20,0 30,0
PRECAUCIONES
ALMACENAMIENTO

REACTIVOS
turbidez.
PROCEDIMIENTO
864102200 / 08 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
864102200 / 08 p. 2/4 UR160314
Homocysteine
C Para la determinación de homocisteína total en suero y plasma

La homocisteína es un producto derivado del metabolismo - Solución salina (0,9%)
proteico, específicamente de la desmetilación intracelular - Homocysteine Calibrator de Wiener lab.
del aminoácido esencial metionina.
La homocisteína es liberada al plasma donde circula princi- INSTRUCCIONES PARA SU USO
palmente en su forma oxidada, unida a proteínas plasmáti- Reactivos Provistos: listos para usar.
cas. La homocisteína total está representada por todas las
especies de homocisteína encontradas en suero o plasma PRECAUCIONES
(homocisteína libre más homocisteína unida a proteínas). Los reactivos son para uso diagnóstico “in vitro”.
En cantidades pequeñas la homocisteína no es dañina para Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
el organismo o para los vasos sanguíneos pero cuando se de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
acumulan grandes cantidades en circulación, puede dañar Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
arterias y la inflamación resultante causa eventualmente el acuerdo a la normativa local vigente.
bloqueo de la circulación sanguínea hacia el corazón.
Estudios recientes evidencian que niveles elevados de ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
homocisteína en sangre tiene un valor predictivo de ALMACENAMIENTO
riesgo de enfermedad arteriocoronaria similar al efecto Los Reactivos Provistos son estables a 2-10oC hasta la fecha
que ocasiona un nivel elevado de colesterol. Evidencias de vencimiento indicada en la caja.
recientes también relacionan altos niveles de homocisteína
en sangre con el riesgo de abortos espontáneos y defectos INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
en el nacimiento. REACTIVOS
Los reactivos deben ser límpidos. Descartar en caso de
FUNDAMENTOS DEL METODO observar turbidez.
Las formas oxidadas de homocisteína son reducidas a
homocisteína libre que luego reacciona con serina en una MUESTRA
reacción catalizada por la enzima cistationina β-sintetasa Suero o plasma
(CBS) formando L-cistationina. El ciclo hace que la cistatio- a) Recolección: obtener suero de la manera usual.
nina vuelva a homocisteína por la enzima cistationina β-liasa b) Aditivos: en caso de usar plasma como muestra, debe
(CBL) formando piruvato y amonio. Esta secuencia cíclica utilizarse EDTA o heparina para su obtención.
aumenta la sensibilidad del método aproximadamente 10 ve- c) Sustancias interferentes conocidas: no se observan
ces. El piruvato es detectado usando lactato deshidrogenasa interferencias por bilirrubina hasta 20 mg/dl, triglicéridos
(LDH) con NADH. El grado de conversión de NADH a NAD+ hasta 500 mg/dl y hemoglobina hasta 500 mg/dl.
es directamente proporcional a la cantidad de homocisteína Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
en la muestra. drogas en el presente método.
CBS d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
Serina + homocisteína L-cistationina homocisteína total en suero o plasma es estable 4 días a 20-
25oC, 4 semanas refrigerada entre 2-10oC y 4 años a -20oC.
CBL
L-cistationina homocisteína + piruvato + NH3
LDH - Material volumétrico para medir los volúmenes indicados
Piruvato + NADH Lactato + NAD+
- Analizador automático
- Cronómetro
REACTIVOS PROVISTOS
A. Reactivo A: solución conteniendo lactato deshidrogenasa
(músculo de conejo) > 35 kU/l, serina 0,76 mmol/l, NADH
PROCEDIMIENTO
0,47 mmol/l, en buffer Tris pH 8,5.
(Analizador Automático)
B. Reactivo B: solución conteniendo cistationina β-sintetasa
A continuación se detalla un procedimiento general para
(microbiana) > 20 kU/l, cistationina β-liasa (microbiana) > 10 kU/l, Homocysteine en un analizador automático. Cuando se
pH 7,5.
864102100 / 02 p. 1/6
implemente la técnica para un analizador en particular,
seguir las instrucciones de trabajo del mismo. Nivel D.S. C.V.
7,06 umol/l ± 0,40 umol/l 5,6%
Muestra o Calibrador 10 ul 12,38 umol/l ± 0,38 umol/l 3,1%
Reactivo A 150 ul 29,16 umol/l ± 0,84 umol/l 2,9%
Incubar durante 300 segundos a 37oC Precisión total (n = 20)
Reactivo B 15 ul Nivel D.S. C.V.
7,06 umol/l ± 0,38 umol/l 5,4%
Incubar durante 60 segundos a 37 C. Lectura de ab-
o
12,38 umol/l ± 0,41 umol/l 3,3%
sorbancia inicial a 340 nm (A1). A los 300 segundos 29,16 umol/l ± 1,39 umol/l 4,8%
exactamente medidos con cronómetro, se registra una
segunda lectura (A2). b) Linealidad: reacción es lineal hasta una concentración
Para obtener el resultado de homocisteína en umol/l, de 60 umol/l de homocisteína.
se multiplica la diferencia de absorbancia (∆A = A2-A1) c) Límite de detección: 0,274 umol/l.
por el factor.
CALIBRACION del usuario del analizador en uso.
Se recomienda el uso Homocysteine Calibrator de Wie-
ner lab. Los calibradores deben procesarse de la misma PRESENTACION
manera que las muestras y a partir de él se calcula el factor 55 ml: - 1 x 50 ml Reactivo A
correspondiente. - 1 x 5 ml Reactivo B
Ingresar el valor de concentración del calibrador, cada vez (Cód. 1009365)
que se cambia el lote.
Procesar con cada determinación, 2 niveles de un material (Cód. 1009623)
de control de calidad (Homocysteine Control) con concen-
traciones conocidas de homocisteína. BIBLIOGRAFIA
El rango aceptable de control deberá ser establecido por - McCully KS. - Am. J. Pathol. 56:111-128; 1969.
cada laboratorio. - McCully KS. - Ann. Clin. Lab. Sci. 23:447-493; 1993.
- Cramer DA. - Laboratory Medicine - 29:7; 1998.
VALORES DE REFERENCIA - Rosenquist TH, Ratashak SA, Selhub J. - Proc. Natl. Acad.
Embarazadas: < 10 umol/l Sci. USA 93:15227-15232; 1996.
Niños < 15 años: < 10 umol/l - Young, DS. Effects of drugs on clinical laboratory tests, 5th
Adultos 15-65 años: < 15 umol/l ed., AACC Press, Washington, DC, p 3-441; 2000.
Adultos > 65 años: < 20 umol/l - Ueland PM, Refsum H, Stabler SP, et al, - Clin. Chem.
39:1764-79; 1993.
Estos rangos deben ser considerados sólo como guía para - Probst R, Brandl R, Blümke M, Neumeier D. - Clin. Chem.
los valores esperados. 44:1567-9; 1998.
Los niveles de homocisteína pueden variar con la edad, - CLSI EP9 A2: Method Comparison and Bias Estimation
sexo, área geográfica y factores genéticos. Using Patient Samples; Approved Guideline - Second
Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios Ed., CLSI, 2002.
valores de referencia. - CLSI EP15 A2: User verification of Performance for Pre-
cision and Trueness; Approved Guideline - Second Ed.,
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO CLSI, 2005.
Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA. - CLSI EP6 A: Evaluation of the Linearity of Quantitative
No pipetear con la boca. Measurement Procedures: A Statistical Approach; Appro-
Se recomienda el uso de Homocysteine Control de Wiener ved Guideline, CLSI, 2003.
lab. como material de control de calidad, ya que con controles - Silvia Persichilli, Bruno Zappacosta, et al. - Clin. Chem.
de otras marcas comerciales pueden obtenerse valores dife- Lab. Med. 46/12: 1786-1788; 2008.
rentes al rango especificado dado que los mismos dependen - John M Scott et al. - Clin. Chem. 50/1:3-32; 2004.
del método o sistema utilizado.
PERFORMANCE
a) Precisión: basado en el protocolo EP15-A del CLSI, se
obtuvieron los siguientes coeficientes de variación como
estimadores de la precisión intraensayo (CVi) y total (CVt):
864102100 / 02 p. 2/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
864102100 / 02 p. 3/6 UR140815
HTLV I+II
ELISA recombinante
de anticuerpos contra los virus HTLV I y II
SIGNIFICACION CLINICA violeta.

Los virus linfotrópicos de células T humanas tipo HTLV per- Conjugado Concentrado: anticuerpo monoclonal anti-IgG
tenecen a la familia de los retrovirus, se dividen en dos tipos: humana conjugado con peroxidasa (10x). Color rojo.
HTLV-I y HTLV-II. Están asociados a enfermedades malignas Diluyente de Conjugado: buffer salino con proteínas.
de las células T y a procesos neurológicos degenerativos. Revelador: solución de tetrametilbencidina (TMB) y peróxido
El HTLV-I es el causante etiológico de dos tipos de pato- de hidrógeno.
logías: la leucemia de células T de adulto (ATL) y diversos Stopper: ácido sulfúrico 2 N.
trastornos neurológicos de desmielinización que incluyen Buffer de Lavado Concentrado: buffer salino con tensio-
la mielopatía asociada a HTLV-I (HAM) y la paraparesia activo (25x). Color verde.
espástica tropical (TSP). También se detectan anticuerpos Control Positivo: suero humano inactivado conteniendo
específicos contra HTLV-I en ciertos casos de dermatitis, anticuerpos contra HTLV I y/o HTLV II. Color naranja.
uveitis, poliomiositis y artritis. Control Negativo: suero humano no reactivo inactivado.
El HTLV-II ha sido asociado a síndromes neurológicos Color amarillo.
similares a la HAM.
Ambos virus se trasmiten por contacto sexual, exposición REACTIVOS NO PROVISTOS
a sangre contaminada, transfusión, o transmisión de una Agua destilada o desionizada.
madre infectada al feto durante el periodo prenatal o a través
de la leche materna. MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
El ensayo HTLV I+II ELISA recombinante esta diseñado - Micropipetas para medir los volúmenes indicados
para detectar anticuerpos tanto contra HTLV-I como contra - Tips descartables
HTLV-II. Se puede emplear en el diagnóstico de la infección - Material volumétrico para preparar las diluciones indicadas
y en el control de unidades de donantes en bancos de san- - Estufa a 37oC
gre. Para verificar la presencia de anticuerpos específicos - Papel absorbente
contra HTLV-I y/o HTLV-II es necesario usar un ensayo - Guantes descartables
complementario. - Reloj alarma o cronómetro
- Hipoclorito de sodio
FUNDAMENTOS DEL METODO - Sistema de lavado de policubetas (manual o automático)
Los pocillos de la policubeta están recubiertos con antígenos - Espectrofotómetro para lectura de policubetas
recombinantes y péptidos de los virus HTLV I (recombinan-
tes gp46, gp21 y p24) y HTLV II (péptido correspondiente a PRECAUCIONES
gp46). La muestra diluida se incuba en los pocillos. Si los - Los reactivos son para uso diagnóstico “in vitro”.
anticuerpos contra uno de los virus están presentes en la - Todas las muestras de pacientes deben manipularse como
muestra, éstos se unen a los antígenos del pocillo. El mate- si fueran capaces de transmitir infección. Los controles se
rial no unido es removido por lavado. En el paso siguiente encuentran inactivados. Sin embargo deben emplearse
se agrega el conjugado, que consiste en un anticuerpo como si se tratara de material infectivo.
monoclonal anti-IgG humana conjugado con peroxidasa. - Los sueros controles han sido examinados para antígeno de
Este se une a los complejos antígeno-anticuerpo, formados superficie de Hepatitis B (HBsAg), y anticuerpos contra el virus
previamente. El conjugado no unido se remueve por lava- de Hepatitis C (HCV), encontrándose no reactivos. Debido al
do. Posteriormente, se agrega una solución conteniendo alto nivel de infección simultánea por HIV, ciertos controles
tetrametilbencidina y peróxido de hidrógeno. Las muestras reactivos para HTLV I+II pueden resultar también reactivos
reactivas desarrollan color celeste que vira al amarillo cuando para HIV. Se recomienda manipularlos con las precauciones
se detiene la reacción con ácido sulfúrico (Stopper). requeridas para muestras potencialmente infecciosas.
- A fin de asegurar la inactivación de agentes patógenos, los
REACTIVOS PROVISTOS materiales empleados en el ensayo deben decontaminarse
Policubeta sensibilizada: policubeta de tiras removibles antes de ser descartados. El método recomendado para
con 96 pocillos recubiertos con antígenos recombinantes y este procedimiento es autoclavar durante 1 hora a 121oC.
péptidos de los virus HTLV I y II. Los líquidos de desecho pueden ser desinfectados con
Diluyente de Muestra: buffer salino con tensioactivo. Color hipoclorito de sodio (concentración final 5%) durante un
864102900 / 03 p. 1/12
mínimo de 60 minutos. ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
- Evitar que los vapores de hipoclorito provenientes de ALMACENAMIENTO
los recipientes para desechos biológicos u otras fuentes Los Reactivos Provistos son estables en refrigerador (2-
entren en contacto con los reactivos, ya que el hipoclorito 10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
afecta la reacción. No congelar.
- Evitar el derrame de líquidos y formación de aerosoles. Buffer de Lavado Concentrado y Stopper: conservar a
- No usar los reactivos luego de la fecha de vencimiento. temperatura entre 2 y 25oC.
- No intercambiar reactivos de distintos kits o lotes, o modi- Buffer de lavado (1x): conservar en recipiente cerrado. Es
ficar los procedimientos del ensayo. estable 3 meses a temperatura entre 2 y 25oC.
- No emplear reactivos de otro origen. Conjugado (1x): es estable 6 horas a temperatura entre
- Evitar tocar las paredes de los pocillos con los tips. 2 y 25oC.
- No utilizar elementos metálicos que puedan entrar en Policubeta sensibilizada: abrir el sobre cuando haya
contacto con los reactivos. tomado temperatura ambiente y no antes del momento
- Las policubetas deben incubarse en estufa. Debe evitarse de usar, de lo contrario se favorecerá la condensación de
abrir la estufa durante este proceso. No usar baño de agua humedad sobre la superficie de los pocillos. Las tiras no
para la incubación. utilizadas se deben conservar a 2-10oC dentro del sobre
- El ácido sulfúrico (Stopper) es corrosivo. R36/38: irrita los con desecante y cerrado. Las tiras conservadas en estas
ojos y la piel. R34: provoca quemaduras. S24/25: evítese el condiciones pueden ser utilizadas dentro de los 4 meses
contacto con los ojos y la piel. S26: en caso de contacto con posteriores, mientras no se supere la fecha de vencimiento
los ojos, lávense inmediata y abundantemente con agua indicada en la caja.
y acúdase a un médico. S28: en caso de contacto con la
piel, lávese inmediata y abundantemente con agua. S37/39: MUESTRA
usar guantes adecuados y protección para los ojos/la cara. Suero o plasma
- No pipetear con la boca. Usar guantes descartables y pro- a) Recolección de muestra: obtener de la manera habitual.
- La TMB es sensible a la luz. Mantenga el frasco cerrado anticoagulantes.
cuando no se utiliza. c) Sustancias Interferentes conocidas: no se observa
- Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de interferencia por bilirrubina hasta 30 mg/dl, ácido ascórbico
acuerdo a la normativa vigente. hasta 50 mg/dl, triglicéridos hasta 1500 mg/dl o hemoglobina
hasta 300 mg/dl. Muestras conteniendo partículas deberán
PREPARACION DE LOS REACTIVOS clarificarse mediante centrifugación.
Es importante que todo el material utilizado para la preparación d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
de los reactivos esté limpio y libre de detergente e hipoclorito. muestra puede conservarse refrigerada (2-10oC) hasta 3
Buffer de Lavado: a baja temperatura los componentes días. Si se necesita conservarla por más tiempo, se debe
del reactivo concentrado pueden precipitar. En tal caso, congelar a -20oC (o inferior). No es recomendable realizar
llevar la solución a 37oC hasta disolución completa. Para la múltiples ciclos de congelamiento y descongelamiento, ya
obtención del buffer de lavado listo para usar (1x), diluir una que puede generar resultados erróneos. En caso de utilizar
parte de Buffer de Lavado Concentrado (25x) con 24 partes muestras congeladas, éstas deben ser homogeneizadas y
de agua destilada o desionizada. Ej.: 20 ml con 480 ml para centrifugadas antes de su uso.
una policubeta. La inactivación por calor puede afectar el resultado.
Conjugado: para la obtención del conjugado listo para usar No utilizar muestras con contaminación microbiana.
Si las muestras deben ser transportadas, deben embalarse
(1x), diluir una parte de Conjugado Concentrado (10x) con 9
de acuerdo a las especificaciones legales relativas al envío
partes de Diluyente de Conjugado. (Ver tabla sigueinte con
de material infeccioso.
el volumen requerido de Conjugado Concentrado y Diluyente
de Conjugado):
Nº de pocillos Conjugado Diluyente PROCEDIMIENTO DEL ENSAYO

Concentrado de Conjugado 1- Llevar a temperatura ambiente los reactivos y las
8 100 ul 0,9 ml 2- Preparar el volumen necesario de buffer de lavado
16 200 ul 1,8 ml (1x).
96 1200 ul 10,8 ml incluyendo 2 pocillos para el Control Positivo (CP) y 3
para el Control Negativo (CN).
Policubeta sensibilizada, Diluyente de Muestra, Diluyen- 4- Dispensar el Diluyente de Muestra, luego la muestra
te de Conjugado, Revelador, Stopper, Control Positivo y (M) y los controles según el siguiente esquema:
Control Negativo: listos para usar.
864102900 / 03 p. 2/12
M CP CN recipiente limpio solamente el volumen de Revelador
Diluyente de Muestra 100 ul 100 ul 100 ul que se requiera. No devolver el Revelador restante al
Control Positivo - 20 ul - oxidantes.
Control Negativo - - 20 ul Revelador 100 ul 100 ul 100 ul
Muestra 20 ul - - 11- Incubar 30 ± 2 minutos a temperatura ambiente (18-
Homogeneizar mezclando 2-3 veces por carga y des- 25oC), protegido de la luz.
carga de la micropipeta, o agitando la placa durante 12- Agregar el Stopper:
10 segundos. Al adicionar la muestra, el Diluyente de Stopper 100 ul 100 ul 100 ul
Muestra virará de color de acuerdo a la tabla siguiente.
13- Leer absorbancia en espectrofotómetro en forma bi-
Tipo de Sin Suero o Control Control cromática a 450/620-650 nm, o monocromática a 450 nm.
muestra muestra plasma Positivo Negativo Nota: se recomienda realizar siempre la lectura en forma
Color Violeta Celeste Naranja Verde bicromática. En caso de que la lectura sea monocromáti-
oscuro ca, realizar un blanco de reactivos que luego deberá ser
restado de todos los valores de las muestras.
Se puede verificar la dispensación de controles o
muestras a los pocillos visualmente, o mediante lectura
espectrofotométrica (a 610/650 nm).
Advertencia: las muestras hemolizadas, ictéricas o turbias El color de la reacción es estable durante 10 minutos, por lo
pueden alterar el color final sin afectar los resultados. El que los resultados deben leerse dentro de ese lapso.
viraje de color puede depender del volumen de muestra
adicionado y de su composición. Un viraje de color de PROCEDIMIENTO DE LAVADO
menor intensidad puede deberse a que se dispensó un Eliminar el líquido de los pocillos por aspirado o volcado.
volumen inferior de muestra, a que la muestra no se Los pocillos se lavan con 350 ul de buffer de lavado diluido.
encuentra en las condiciones adecuadas, o a que tiene Asegurar que la altura alcanzada al llenar los pocillos no
una baja concentración de proteínas. cause desbordes. La solución de lavado debe estar en
5- Para evitar la evaporación, cubrir la placa con la cinta contacto con los pocillos entre 30 y 60 segundos.
autoadhesiva provista, e incubar 60 ± 2 minutos a 37 ± Garantizar que luego del último lavado no quede líquido
1oC. En forma paralela, preparar el conjugado (ver Tabla residual. Para ello, realice un doble aspirado para eliminar
en PREPARACION DE REACTIVOS). el excedente de buffer. Si persiste luego de este procedi-
6- Después de la incubación eliminar por completo el miento, invertir la placa sobre papel absorbente y golpearla
líquido de cada pocillo. Lavar 5 veces según instrucción varias veces, de lo contrario podrán obtenerse resultados
de lavado (ver Procedimiento de Lavado). erróneos.
Nota: el procedimiento de lavado es crítico para el resul-
Conjugado 100 ul 100 ul 100 ul tado del ensayo. Si queda buffer de lavado en el pocillo o
Para evitar la evaporación cubrir la policubeta con cinta los pocillos no están completamente llenos, se obtendrán
autoadhesiva. resultados erróneos. No dejar que los pocillos se sequen
8- Incubar 30 ± 1 minutos a 37 ± 1oC. durante el procedimiento. Los lavadores automáticos deben
9- Lavar 5 veces según instrucción de lavado. ser enjuagados con agua destilada o desionizada al final del
10- Dispensar el Revelador. Para ello, trasvasar a un día, para evitar obstrucciones o corrosiones debido a las

Diluyente de Muestra Agregar 100 ul de Diluyente de Muestra en
cada pocillo
Muestras Agregar 20 ul de M, CP y CN Se observa cambio de color al agregar la mues-
tra y los controles
nutos a 37 ± 1oC
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Lavado Lavar cada pocillo con 350 ul de buffer de lava- Tiempo de contacto de la solución de lavado, en-
do (5 veces) tre 30 y 60 segundos. Eliminar completamente el
Dilución Preparación del Conjugado (1x) Durante la incubación con la muestra, diluir el Conju-
nutos a 37 ± 1oC
Revelador Agregar 100 ul de Revelador Trasvasar el volumen necesario de Revelador a
el remanente de reactivo. Evitar el contacto con
agentes oxidantes.
CRITERIOS DE VALIDACION DEL ENSAYO Muestras No Reactivas: se consideran aquellas con ab-
El ensayo se considera válido si se cumplen simultáneamen- sorbancias menores al Cut-off.
Muestras Reactivas: se consideran aquellas con absorban-
1- El promedio de las absorbancias de los Controles Nega- cias mayores o iguales al Cut-off.
Ejemplo: Toda muestra inicialmente reactiva debe ser repetida por
Lectura 1 = 0,031, Lectura 2 = 0,025, Lectura 3 = 0,038 duplicado. Si una o ambas repeticiones dan reactivas, la
Promedio = (0,031 + 0,025 + 0,037) / 3= 0,031 misma debe considerarse reactiva.
2- Eliminar cualquier Control Negativo con absorbancia Una muestra inicialmente reactiva puede ser no reactiva en
mayor a 0,050. las dos repeticiones. Esto puede deberse a:
- Contaminación cruzada de un pocillo no reactivo por una
3- Si se ha eliminado algún Control Negativo, calcular nueva- muestra reactiva.
mente el promedio de los Controles Negativos. Un ensayo es - Contaminación de la muestra durante la dispensación,
válido si se aceptan al menos dos de los Controles Negativos. imprecisión en el dispensado de muestra, conjugado y/o
4- El promedio de las absorbancias de los Controles Positivos Revelador en el pocillo.
debe ser mayor a 0,800. - Reutilización de tips.
Ejemplo: - Contaminación del pocillo con hipoclorito u otros agentes
Lectura 1 = 1,358, Lectura 2 = 1,214 oxidantes.
Promedio = (1,358 + 1,214) / 2= 1,286
5- La diferencia entre el promedio de las absorbancias de los En ciertos casos una muestra no reactiva puede presentar
Controles Positivos y Controles Negativos debe ser mayor una reacción falsamente reactiva, tanto en el análisis inicial
o igual a 0,850. como en sus repeticiones. Algunas causas de este fenómeno
pueden ser:
Si una de estas condiciones no se cumple, repetir el ensayo. - Contaminación de la muestra durante la extracción, pro-
Recordar que las lecturas obtenidas dependerán de la sen- cesamiento o conservación.
sibilidad del aparato empleado. - Presencia de sustancias interferentes, tales como autoan-
ticuerpos, fármacos, etc.
INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS - Dispensación y/o aspirado ineficiente de la solución de
La presencia o ausencia de anticuerpos anti-HTLV I y/o II lavado (sistema obstruido).
se determina relacionando la absorbancia de la muestra
respecto al valor del Cut-off. LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
Cut-off = CN + 0,170 Ver Sustancias Interferentes conocidas en Muestra.
No se debe utilizar pool de muestras.
CN: promedio de las absorbancias del Control Negativo
El kit está diseñado para usar con muestras puras. No utilizar
Ejemplo: 0,031 + 0,170 = 0,201 muestras diluidas debido a que las mismas pueden ocasionar
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resultados falsos negativos. Media Intra-ensayo Total
No se deben emplear otros fluidos corporales como la saliva, Muestra
(D.O.) D.S. C.V. D.S. C.V.
líquido cefalorraquídeo u orina.
Las muestras repetidamente reactivas deberán analizarse C (+) 1,410 0,061 4,30% 0,121 8,61%
por técnicas suplementarias o confirmatorias, según norma C (-) 0,010 0,001 12,21% 0,002 16,81%
vigente en el país. M1 1,068 0,045 4,23% 0,107 10,05%
M2 0,739 0,034 4,55% 0,078 10,56%
CARACTERISTICAS ESPECIFICAS DE PERFORMANCE M3 0,477 0,022 4,52% 0,051 10,69%
a) Sensibilidad D.S.: desvío standard, C.V.: coeficiente de variación
Sensibilidad en Paneles de Performance n = 80
En un estudio realizado sobre diferentes paneles comerciales
internacionales, se obtuvieron los siguientes resultados: PRESENTACION
PRP205(M) (Anti-HTLV I/II Mixed Titer Performance Panel Kit para 96 determinaciones (Cód. 1681096).
Modified, BBI, USA) se detectaron 17 de las 18 muestras Kit para 192 determinaciones (Cód. 1681192).
reactivas.
PRP206 (Anti-HTLV I/II Mixed Titer Performance Panel, BIBLIOGRAFIA
Panel, BBI, USA) se detectaron 14 de las 14 muestras - Feuer G, Green PL. Comparative biology of human T-cell
reactivas. lymphotropic virus type 1 (HTLV-1) and HTLV-2. Oncogene
PRP207 (Anti-HTLV I/II Mixed Titer Performance Panel, BBI, 24(39):5996-6004 (2005).
USA) se detectaron 14 de las 14 muestras reactivas. - Roucoux DF, Murphy EL. The epidemiology and disease
outcomes of human T-lymphotropic virus type II. AIDS Rev
Sensibilidad clínica en Paneles de muestras reactivas anti-
3:144-54. (2004).
HTLV I+II
- Poiesz BJ, Poiesz MJ, Choi D. The human T-cell lymphoma/
En un estudio realizado sobre 124 muestras con infección
leukemia viruses. Cancer Invest 2 :253-77. (2003)
por HTLV, confirmada por diferentes métodos, se encontraron
- Gotuzzo E, Arango C, de Queiroz-Campos A, Istúriz RE.
reactivas con el kit HTLV I+II ELISA recombinante la totalidad
Human T-cell lymphotropic virus-I in Latin America. Infect
de las muestras.
Dis Clin North Am. 14(1):21 1-39, x-xi (2000).
b) Especificidad - Evaluation of Precision Performance of Clinical Chemistry
En un estudio realizado sobre 1052 muestras de sueros y Devices. Approved Guideline EP5-A 19/2 (1999) National
plasmas de diferentes centros de salud se encontró una Committee for Clinical Laboratory Standards.
especificidad del 99,80%. - Clinical Evaluation of Immunoassays. Approved Guideline
En un estudio de 301 muestras de plasmas de banco de I/LA21-A (2002) National Committee for Clinical Laboratory
sangre se encontró una especificidad de 99,33 %. Standards.
En un estudio de 985 muestras se encontró una especificidad - Interference testing in Clinical Chemistry. Approved
del 99,79%. Guideline EP7-A (2002) National Committee for Clinical
Se estudió la posible aparición de reactividad cruzada Laboratory Standards.
ensayando 209 muestras provenientes de individuos con
diferentes condiciones clínicas que podrían ser causantes
de reacciones inespecíficas para el ensayo HTLV I+II ELISA
recombinante. Este grupo incluía muestras:
- con anticuerpos contra HAV, HBV, EBV, CMV, HSV, VZV,
HIV, HCV y otros virus.
- con diferentes autoanticuerpos (AGA, AMA, ATA, FAN,
factor reumatoideo y otros).
- con anticuerpos contra Treponema pallidum, Mycoplasma
pneumoniae, Toxoplasma gondii, Toxocara canis, Trypa-
nosoma cruzi, y otros microorganismos.
- de pacientes hemodializados y mujeres embarazadas.
La especificidad obtenida para esta población fue de 99 %.
c) Precisión
Se evaluó la precisión de la prueba siguiendo el protocolo
EP5-A recomendado por la NCCLS. Los ensayos fueron
realizados con muestras de diferentes niveles de reactividad
en el HTLV I y II y con los controles. Se realizaron 2 ensa-
yos diarios evaluando cada muestra por duplicado y por el
transcurso de 20 días.
864102900 / 03 p. 5/12


Control + Control -
Stopper
Stopper

C

 No congelar
F Riesgo biológico
Cont. Contenido
g Número de lote
M Elaborado por:
Xn
Nocivo
Xi
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo
Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
864102900 / 03 p. 6/12 UR130321
HTLV I+II
ELISA recombinante v.4.0
de anticuerpos contra los virus HTLV I y II
SIGNIFICACION CLINICA TMB: solución de tetrametilbencidina 36 mM en dimetilsul-

Los virus linfotrópicos de células T humanas tipo HTLV per- fóxido (DMSO) 100%, (100x).
tenecen a la familia de los retrovirus, se dividen en dos tipos: Diluyente de TMB: buffer citrato 40 mM y peróxido de
HTLV-I y HTLV-II. Están asociados a enfermedades malignas hidrógeno 1,27 mM, pH 4,3.
de las células T y a procesos neurológicos degenerativos. Stopper: ácido sulfúrico 2 N.
El HTLV-I es el causante etiológico de dos tipos de pato- Buffer de Lavado Concentrado: buffer salino con tensio-
logías: la leucemia de células T de adulto (ATL) y diversos activo (25x). Color verde.
trastornos neurológicos de desmielinización que incluyen Control Positivo: suero humano inactivado conteniendo
la mielopatía asociada a HTLV-I (HAM) y la paraparesia anticuerpos contra HTLV I y/o HTLV II. Color naranja.
espástica tropical (TSP). También se detectan anticuerpos Control Negativo: suero humano no reactivo inactivado.
específicos contra HTLV-I en ciertos casos de dermatitis, Color amarillo.
uveitis, poliomiositis y artritis.
El HTLV-II ha sido asociado a síndromes neurológicos REACTIVOS NO PROVISTOS
similares a la HAM. Agua destilada o desionizada.
Ambos virus se trasmiten por contacto sexual, exposición
a sangre contaminada, transfusión, o transmisión de una MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
madre infectada al feto durante el periodo prenatal o a través - Micropipetas para medir los volúmenes indicados
de la leche materna. - Tips descartables
El ensayo HTLV I+II ELISA recombinante v.4.0. está - Material volumétrico para preparar las diluciones indicadas
diseñado para detectar anticuerpos tanto contra HTLV-I - Estufa a 37ºC
como contra HTLV-II. Se puede emplear en el diagnóstico - Papel absorbente
de la infección y en el control de unidades de donantes en - Guantes descartables
bancos de sangre. - Reloj alarma o cronómetro
- Hipoclorito de sodio
FUNDAMENTOS DEL METODO - Sistema de lavado de policubetas (manual o automático)
Los pocillos de la policubeta están recubiertos con antí- - Espectrofotómetro para lectura de policubetas
genos recombinantes de los virus HTLV I y II. La muestra
diluida se incuba en los pocillos. Si los anticuerpos contra PRECAUCIONES
uno de los virus están presentes en la muestra, éstos se - Los reactivos son para uso diagnóstico “in vitro”.
unen a los antígenos del pocillo. El material no unido es - Todas las muestras de pacientes deben manipularse como
removido por lavado. En el paso siguiente se agrega el si fueran capaces de transmitir infección. Los controles se
conjugado, que consiste en antigenos de HTLV I y HTLV II encuentran inactivados. Sin embargo deben emplearse
conjugados con peroxidasa. Este se une a los complejos como si se tratara de material infectivo.
antígeno-anticuerpo, formados previamente. El conjugado - Los sueros controles han sido examinados para antígeno
no unido se remueve por lavado. Posteriormente, se agrega de superficie de Hepatitis B (HBsAg), y anticuerpos contra
una solución conteniendo tetrametilbencidina y peróxido de el virus de Hepatitis C (HCV), encontrándose no reactivos.
hidrógeno. Las muestras reactivas desarrollan color celeste Debido al alto nivel de infección simultánea por HIV, ciertos
que vira al amarillo cuando se detiene la reacción con ácido controles reactivos para HTLV I + II pueden resultar también
sulfúrico (Stopper). reactivos para HIV. Se recomienda manipularlos con las
precauciones requeridas para muestras potencialmente
REACTIVOS PROVISTOS infecciosas.
Policubeta sensibilizada: policubeta de tiras removibles - A fin de asegurar la inactivación de agentes patógenos, los
con 96 pocillos recubiertos con antígenos recombinantes materiales empleados en el ensayo deben decontaminarse
de los virus HTLV I y II. antes de ser descartados. El método recomendado para
Diluyente de Muestra: buffer salino con tensioactivo. Color este procedimiento es autoclavar durante 1 hora a 121ºC.
violeta. Los líquidos de desecho pueden ser desinfectados con
Conjugado: antígenos de HTLV I y HTLV II conjugados con hipoclorito de sodio (concentración final 5%) durante un
peroxidasa. Color rojo. mínimo de 60 minutos.
864103900 / 03 p. 1/12
- Evitar que los vapores de hipoclorito provenientes de Buffer de lavado (1x): conservar en recipiente cerrado. Es
los recipientes para desechos biológicos u otras fuentes estable 3 meses a temperatura entre 2 y 25ºC.
entren en contacto con los reactivos, ya que el hipoclorito Policubeta sensibilizada: abrir el sobre cuando haya toma-
afecta la reacción. do temperatura ambiente y no antes del momento de usar,
- Evitar el derrame de líquidos y formación de aerosoles. de lo contrario se favorecerá la condensación de humedad
- No usar los reactivos luego de la fecha de vencimiento. sobre la superficie de los pocillos. Las tiras no utilizadas se
- No intercambiar reactivos de distintos kits o lotes, o modi- deben conservar a 2-10ºC dentro del sobre con desecante y
ficar los procedimientos del ensayo. cerrado. Las tiras conservadas en estas condiciones pueden
- No emplear reactivos de otro origen. ser utilizadas dentro de los 4 meses posteriores, mientras
- Evitar tocar las paredes de los pocillos con los tips. no se supere la fecha de vencimiento indicada en la caja.
- No utilizar elementos metálicos que puedan entrar en Revelador: una vez preparado se debe usar dentro de las 3
contacto con los reactivos. horas conservándolo a temperatura ambiente (2-25ºC) y pro-
- Las policubetas deben incubarse en estufa. Debe evitarse tegido de la luz. En caso de coloración, debe ser descartado.
abrir la estufa durante este proceso. No usar baño de agua
para la incubación. MUESTRA
- El ácido sulfúrico (Stopper) es corrosivo. R36/38: irrita los Suero o plasma
ojos y la piel. R34: provoca quemaduras. S24/25: evítese a) Recolección de muestra: obtener de la manera habitual.
el contacto con los ojos y la piel. S26: en caso de contacto b) Aditivos: no se requieren para suero. Para las muestras
con los ojos, lávese inmediata y abundantemente con agua de plasma se puede emplear heparina, citrato, fluoruro o
y acúdase a un médico. S28: en caso de contacto con la EDTA como anticoagulantes.
piel, lávese inmediata y abundantemente con agua. S37/39: c) Sustancias Interferentes conocidas: no se observa
usar guantes adecuados y protección para los ojos/la cara. interferencia por bilirrubina hasta 30 mg/dl, ácido ascórbico
- No pipetear con la boca. Usar guantes descartables y pro- hasta 50 mg/dl, triglicéridos hasta 750 mg/dl o hemoglobina
tección en los ojos durante la manipulación de las muestras hasta 300 mg/dl. Muestras conteniendo partículas deberán
y reactivos del ensayo. clarificarse mediante centrifugación.
- La TMB es sensible a la luz. Mantenga el frasco cerrado d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
cuando no se utiliza. muestra puede conservarse refrigerada (2-10ºC) hasta 3
- Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de días. Si se necesita conservarla por más tiempo, se debe
acuerdo a la normativa vigente. congelar a -20ºC (o inferior). No es recomendable realizar
múltiples ciclos de congelamiento y descongelamiento, ya
PREPARACION DE LOS REACTIVOS que puede generar resultados erróneos. En caso de utilizar
Es importante que todo el material utilizado para la prepa- muestras congeladas, éstas deben ser homogeneizadas y
ración de los reactivos esté limpio y libre de detergente e centrifugadas antes de su uso.
hipoclorito. La inactivación por calor puede afectar el resultado.
Buffer de Lavado: a baja temperatura los componentes No utilizar muestras con contaminación microbiana.
del reactivo concentrado pueden precipitar. En tal caso, Si las muestras deben ser transportadas, deben embalarse
llevar la solución a 37ºC hasta disolución completa. Para de acuerdo a las especificaciones legales relativas al envío
la obtención del buffer de lavado listo para usar (1x), diluir de material infeccioso.
una parte de Buffer de Lavado Concentrado (25x) con 24
partes de agua destilada o desionizada. Ej.: 20 ml con 480 ml
para una policubeta. PROCEDIMIENTO DEL ENSAYO
Revelador: en un tubo rotulado, diluir la TMB concentrada 1- Llevar a temperatura ambiente los reactivos y las
(100x) en el Diluyente de TMB. Ej.: 200 ul en 20 ml para una muestras antes de iniciar la prueba.
policubeta. La TMB concentrada está disuelta en DMSO. 2- Preparar el volumen necesario de buffer de lavado (1x).
Dado que la temperatura de fusión del DMSO es 18ºC, 3- Colocar en el soporte de tiras, el número de pocillos
la TMB debe alcanzar temperatura ambiente (20-25ºC) y requeridos para la cantidad de determinaciones a realizar,
homogeneizarse bien antes de usar. incluyendo 2 pocillos para el Control Positivo (CP) y 3
Policubeta sensibilizada, Diluyente de Muestra, Con- para el Control Negativo (CN).
jugado , Stopper, Control Positivo y Control Negativo: 4- Dispensar el Diluyente de Muestra, luego la muestra
listos para usar. (M) y los controles según el siguiente esquema:
ALMACENAMIENTO Diluyente de Muestra 50 ul 50 ul 50 ul
10ºC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. Control Positivo - 50 ul -
No congelar. Control Negativo - - 50 ul
Buffer de Lavado Concentrado y Stopper: conservar a
Muestra 50 ul - -
temperatura entre 2 y 25ºC.
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Homogeneizar mezclando 2-3 veces por carga y des- Revelador 100 ul 100 ul 100 ul
carga de la micropipeta, o agitando la placa durante
11- Incubar 30 ± 2 minutos a temperatura ambiente (18-
10 segundos. Al adicionar la muestra, el Diluyente de
25ºC), protegido de la luz.
Muestra virará de color de acuerdo a la tabla siguiente.
12- Agregar el Stopper:
Tipo de Sin Suero o Control Control Stopper 100 ul 100 ul 100 ul
muestra muestra plasma Positivo Negativo
13- Leer absorbancia en espectrofotómetro en forma bi-
Color Violeta Celeste Naranja Verde cromática a 450/620-650 nm, o monocromática a 450 nm.
oscuro Nota: se recomienda realizar siempre la lectura en forma
Se puede verificar la dispensación de controles o bicromática. En caso de que la lectura sea monocromáti-
muestras a los pocillos visualmente, o mediante lectura ca, realizar un blanco de reactivos que luego deberá ser
espectrofotométrica (a 610/650 nm). restado de todos los valores de las muestras.
Advertencia: las muestras hemolizadas, ictéricas o turbias
pueden alterar el color final sin afectar los resultados. El ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL
viraje de color puede depender del volumen de muestra El color de la reacción es estable durante 10 minutos, por lo
adicionado y de su composición. Un viraje de color de que los resultados deben leerse dentro de ese lapso.
menor intensidad puede deberse a que se dispensó un
volumen inferior de muestra, a que la muestra no se PROCEDIMIENTO DE LAVADO
encuentra en las condiciones adecuadas, o a que tiene Eliminar el líquido de los pocillos por aspirado o volcado.
una baja concentración de proteínas. Los pocillos se lavan con 350 ul de buffer de lavado diluido.
5- Para evitar la evaporación, cubrir la placa con la cinta Asegurar que la altura alcanzada al llenar los pocillos no
autoadhesiva provista, e incubar 30 ± 2 minutos a 37 ± 1ºC. cause desbordes. La solución de lavado debe estar en
6- Después de la incubación eliminar por completo el contacto con los pocillos entre 30 y 60 segundos.
líquido de cada pocillo. Lavar 5 veces según instrucción Garantizar que luego del último lavado no quede líquido
de lavado (ver Procedimiento de Lavado). residual. Para ello, realice un doble aspirado para eliminar
7- Agregar el Conjugado: el excedente de buffer. Si persiste luego de este procedi-
Conjugado 100 ul 100 ul 100 ul miento, invertir la placa sobre papel absorbente y golpearla
varias veces, de lo contrario podrán obtenerse resultados
Para evitar la evaporación cubrir la policubeta con cinta erróneos.
autoadhesiva.
8- Incubar 30 ± 2 minutos a 37 ± 1ºC. Nota: el procedimiento de lavado es crítico para el resul-
9- Lavar 5 veces según instrucción de lavado. tado del ensayo. Si queda buffer de lavado en el pocillo o
10- Preparar el Revelador (ver PREPARACION DE los pocillos no están completamente llenos, se obtendrán
REACTIVOS). Dispensar el Revelador trasvasando a resultados erróneos. No dejar que los pocillos se sequen
un recipiente limpio solamente el volumen requerido. No durante el procedimiento. Los lavadores automáticos deben
devolver el Revelador restante al frasco original. Evitar el ser enjuagados con agua destilada o desionizada al final del
contacto del reactivo con agentes oxidantes. día, para evitar obstrucciones o corrosiones debido a las

Diluyente de Agregar 50 ul de Diluyente de Muestra en
Muestra cada pocillo
Se observa cambio de color al agregar la mues-
Muestras Agregar 50 ul de M, CP y CN
tra y los controles.
Cubrir los pocillos e incubar durante 30 ± 2
Incubación En estufa
minutos a 37 ± 1ºC
Tiempo de contacto con la solución de lavado
Lavar cada pocillo con 350 ul de buffer de
Lavado entre 30 y 60 segundos. Eliminar completamente
lavado (5 veces)
el líquido residual de los pocillos.
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Conjugado Agregar 100 ul de Conjugado
Cubrir los pocillos e incubar durante 30 ± 2
Incubación En estufa
minutos a 37 ± 1ºC
Durante la incubación con el conjugado, diluir
Dilución Preparación del Revelador 1x
la TMB100x con el diluyente de TMB
Descartar remanente del reactivo. Evitar
Revelador Agregar 100 ul de Revelador contacto con agentes oxidantes. No exponer
a la luz.
Incubación Durante 30 ± 2 minutos entre 18-25ºC Mantener los pocillos protegidos de la luz
CRITERIOS DE VALIDACION DEL ENSAYO Muestras No Reactivas: se consideran aquellas con absor-
El ensayo se considera válido si se cumplen simultáneamen- bancias menores al Cut-off.
te las siguientes condiciones: Muestras Reactivas: se consideran aquellas con absorban-
tivos debe ser menor o igual a 0,150 Toda muestra inicialmente reactiva debe ser repetida por
Ejemplo: duplicado. Si una o ambas repeticiones dan reactivas, la
Lectura 1 = 0,060 Lectura 2 = 0,055, Lectura 3 = 0,070 misma debe considerarse reactiva.
Promedio = (0,060 + 0,055 + 0,070)/3= 0,055 Una muestra inicialmente reactiva puede ser no reactiva en
las dos repeticiones. Esto puede deberse a:
2- Eliminar cualquier Control Negativo con absorbancia - Contaminación cruzada de un pocillo no reactivo por una
mayor a 0,150 muestra reactiva.
3- Si se ha eliminado algún Control Negativo, calcular nueva- - Contaminación de la muestra durante la dispensación,
mente el promedio de los Controles Negativos. Un ensayo es imprecisión en el dispensado de muestra, conjugado y/o
válido si se aceptan al menos dos de los Controles Negativos. Revelador en el pocillo.
4- El promedio de las absorbancias de los Controles Positivos - Contaminación del pocillo con hipoclorito u otros agentes
debe ser mayor a 0,900. oxidantes.
Ejemplo:
Lectura 1 = 1,358, Lectura 2 = 1,214 En ciertos casos una muestra no reactiva puede presentar
Promedio = (1,358 + 1,214)/2= 1,286 una reacción falsamente reactiva, tanto en el análisis inicial
como en sus repeticiones. Algunas causas de este fenómeno
5- La diferencia entre el promedio de las absorbancias de los pueden ser:
Controles Positivos y Controles Negativos debe ser mayor - Contaminación de la muestra durante la extracción, pro-
o igual a 0,750.
cesamiento o conservación.
Si una de estas condiciones no se cumple, repetir el ensayo. - Presencia de sustancias interferentes, tales como autoan-
Recordar que las lecturas obtenidas dependerán de la sen- ticuerpos, fármacos, etc.
sibilidad del aparato empleado. - Dispensación y/o aspirado ineficiente de la solución de
lavado (sistema obstruido).
La presencia o ausencia de anticuerpos anti-HTLV I y/o II LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
se determina relacionando la absorbancia de la muestra Ver Sustancias Interferentes conocidas en Muestra.
respecto al valor del Cut-off. No se debe utilizar pool de muestras.
No se deben emplear otros fluidos corporales como la saliva,
Cut-off = CN + 0,200 líquido cefalorraquídeo u orina.
Las muestras repetidamente reactivas deberán analizarse
CN: promedio de las absorbancias del Control Negativo
por técnicas suplementarias o confirmatorias, según norma
Ejemplo: 0,035 + 0,200 = 0,235 vigente en el pais.
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CARACTERISTICAS ESPECIFICAS DE PERFORMANCE Media Intra-ensayo Total
a) Sensibilidad
IP (DO/CO) S CV S CV
Sensibilidad en Paneles de Performance
Muestra 1 1,25 0,071 5,72% 0,094 7,57%
internacionales, se obtuvieron los siguientes resultados: Muestra 2 1,54 0,083 5,42% 0,090 5,86%
Muestra 3 3,38 0,149 4,41% 0,177 5,25%
PRP205(M) (Anti-HTLV I/II Mixed Titer Performance Panel
Muestra 4 5,21 0,177 3,39% 0,239 4,58%
Modified, BBI, USA) se detectaron 18 de las 18 muestras
Muestra 5 2,80 0,076 2,72% 0,127 4,53%
reactivas.
PRP206 (Anti-HTLV I/II Mixed Titer Performance Panel, Pa- Muestra 6 1,39 0,056 4,03% 0,092 6,62%
nel, BBI, USA) se detectaron 14 de las 14 muestras reactivas. Control
9,32 0,352 3,77% 0,460 4,94%
PRP207 (Anti-HTLV I/II Mixed Titer Performance Panel, BBI, Positivo
USA) se detectaron 14 de las 14 muestras reactivas. Control
0,10 0,010 9,64% 0,017 17,05%
QRP 712 (Anti-HTLV I/II Qualification Panel, SERACARE, Negativo
USA) se detectaron 5 de las 5 muestras reactivas. n= 20
QRP 751 (Anti-HTLV I/II Qualification Panel, SERACARE,
USA) se detectaron 4 de las 4 muestras reactivas. PRESENTACION
QRP 761 (Anti-HTLV I/II Qualification Panel, SERACARE, Kit para 96 determinaciones (Cód. 1671096)
USA) se detectaron 5 de las 5 muestras reactivas.
BIBLIOGRAFIA
Sensibilidad clínica en Paneles de muestras reactivas anti- - Feuer G, Green PL. Comparative biology of human T-cell
HTLV I y/o II lymphotropic virus type 1 (HTLV-1) and HTLV-2. Oncogene
En un estudio realizado sobre 47 muestras con infección 24(39):5996-6004 (2005).
por HTLV I y/o II, confirmada por diferentes métodos, se en- - Roucoux DF, Murphy EL. The epidemiology and disease
contraron reactivas con el kit HTLV I+II ELISA recombinante outcomes of human T-lymphotropic virus type II. AIDS Rev
v.4.0 la totalidad de las muestras. 3:144-54. (2004).
- Poiesz BJ, Poiesz MJ, Choi D. The human T-cell lymphoma/
b) Especificidad leukemia viruses. Cancer Invest 2 :253-77. (2003)
En un estudio realizado sobre 921 muestras de sueros de - Gotuzzo E, Arango C, de Queiroz-Campos A, Istúriz RE.
diferentes centros de salud de la ciudad de Rosario, se Human T-cell lymphotropic virus-I in Latin America. Infect
encontró una especificidad del 99.67%. Dis Clin North Am. 14(1):21 1-39, x-xi (2000).
En otro estudio de 1048 muestras de plasmas de diferentes - User Demostration of Performance for Precision and Ac-
centros de salud de la ciudad de Rosario, se encontró una curacy – Approved Guideline EP15-A (2001).
especificidad de 100 %. - Clinical Evaluation of Immunoassays. Approved Guideline
I/LA21-A (2002) National Committee for Clinical Labora-
Se estudió la posible aparición de reactividad cruzada tory Standards.
ensayando 184 muestras provenientes de individuos con - Interference testing in Clinical Chemistry. Approved
diferentes condiciones clínicas que podrían ser causantes Guideline EP7-A (2002) National Committee for Clinical
de reacciones inespecíficas para el ensayo HTLV I+II ELISA Laboratory Standards.
recombinante v.4.0. Este grupo incluía muestras: - Richard Malan, Carolina A. Berini2. Seroprevalencia de
- con anticuerpos contra HAV, HBV, EBV, CMV, HSV, VZV, HTLV-1/2 en donantes de sangre de la provincia de Mis-
HIV, Chagas y otros virus. iones. Medicina (Buenos Aires) 2009; 69: 71-74
- con diferentes autoanticuerpos (AGA, AMA, ATA, FAN, - Nadia C. Santos Quispe, Edwin Bengoa Feria, Elizabeth
factor reumatoideo y otros). de los Santos-Fortuna and Adele Caterino-de-Araujo. Con-
- con anticuerpos contra Treponema pallidum, Mycoplasma firming the presence of htLV-1 infection and the absence
pneumoniae, Toxoplasma gondii, Toxocara canis, Trypa- of HTLV-2 in blood donors from Arequipa, Perú. Rev. Inst.
nosoma cruzi, y otros microorganismos. Med. trop. S. Paulo 51(1):25-29, 2009.
- de pacientes hemodializados y mujeres embarazadas. - Anna Abrams, Yoshimi Akahata and Steven Jacobson. The
La especificidad obtenida para esta población fue de Prevalence and Significance of HTLV-I/II Seroindeterminate
100%. Western Blot Patterns. Viruses 2011, 3, 1320-1331.
c) Precisión
Se evaluó la precisión de la prueba siguiendo el protocolo
EP15-A recomendado por la NCCLS. Los ensayos fueron
realizados con muestras de diferentes niveles de reactividad
en el HTLV I y II y con los controles. Se realizaron 2 ensayos
diarios evaluando cada muestra por cuadruplicado y por el
transcurso de 5 días.
864103900 / 03 p. 5/12
Conjugado TMB Diluy.

Conjugado Diluyente de TMB
TMB Buf. Lavado Conc.

TMB Buffer de Lavado Concentrado
Control + Control -
Stopper
Stopper



 No congelar
F Riesgo biológico
Cont. Contenido
g Número de lote
M Elaborado por:
Xn
Nocivo
Xi
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
864103900 / 03 p. 6/12 UR150821
LINEA TURBITEST AA
IgA
de inmunoglobulina A
SIGNIFICACION CLINICA Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las

La determinación cuantitativa de IgA es necesaria en la drogas en el presente método.
tipificación de inmunodeficiencias y de mielomas. También d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: se
es importante para el seguimiento de infecciones agudas y recomienda usar suero preferentemente fresco. Si el ensayo
crónicas de diversos orígenes. no puede ser realizado en el mismo día la muestra puede
ser conservada 1 semana en refrigerador (2-10oC). En caso
FUNDAMENTOS DEL METODO que se deba procesar en un período más largo de tiempo,
La inmunoglobulina A reacciona con el anticuerpo espe- conservarla a -20oC.
cífico formando inmunocomplejos insolubles. La turbidez
provocada por estos inmunocomplejos es proporcional a MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
la concentración de IgA en la muestra y puede medirse - Espectrofotómetro.
espectrofotométricamente. - Cubetas espectrofotométricas de caras paralelas.
REACTIVOS PROVISTOS - Tubos de Kahn o hemólisis.
A. Reactivo A: solución fisiológica tamponada, pH 7,5. - Reloj o timer.
B. Reactivo B: anticuerpo monoespecífico anti-IgA.
PROCEDIMIENTO
PRECAUCIONES
Todas las muestras de pacientes deben manipularse como Realizar en tubos de Kahn, las siguientes diluciones en
si fueran capaces de transmitir infección. solución fisiológica del Calibrador Proteínas nivel alto:
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales 1:10, 1:20, 1:40, 1:80 y 1:160, empleando solución fisio-
de trabajo en el laboratorio de química clínica. lógica como punto cero.
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de Calibrador Proteínas diluido 50 ul
Reactivo A 900 ul
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE Homogeneizar y leer la absorbancia de cada dilución
ALMACENAMIENTO a 340 nm (DO1) llevando el aparato a cero con agua
Reactivos Provistos: estables en refrigerador (2-10oC) has- destilada. Luego agregar:
Reactivo B 80 ul
MUESTRA Mezclar e incubar 30 minutos a temperatura ambiente.
Suero o plasma heparinizado Leer la absorbancia a 340 nm (DO2), llevando el aparato a
a) Recolección: obtener la muestra de la manera usual. cero con agua destilada. Calcular la diferencia de absor-
b) Aditivos: en caso de que la muestra a emplear sea plas- bancia (∆A = DO2 - DO1) para cada dilución del Calibrador
ma, se recomienda el uso de heparina como anticoagulante. Proteínas, incluyendo el punto cero.
c) Sustancias interferentes conocidas: no emplear sueros Representar en papel milimetrado las diferencias de
hemolizados o contaminados. absorbancia ∆A en función de la concentración en mg/dl
No se observan interferencias por bilirrubina hasta 20 mg/dl, (g/l) del Calibrador Proteínas.
triglicéridos hasta 25 g/l ni hemoglobina hasta 1 g/dl.
870690000 / 02 Pág. 1/6

PROCEDIMIENTO PARA MUESTRAS concentración de calibrador más baja y más alta de la curva
Realizar diluciones 1:10 de las Muestras en solución de calibración (alrededor de 600 mg/dl).
fisiológica. c) Límite de detección: la mínima concentración cuantifi-
Muestra diluida 50 ul cable de IgA es 18 mg/dl.
Reactivo A 900 ul
Mezclar e incubar 30 minutos a temperatura ambiente. PRESENTACION
Leer la absorbancia a 340 nm (DO2), llevando el aparato 1 x 60 ml Reactivo A
a cero con agua destilada. 1 x 5 ml Reactivo B
(Cód. 1513261)
CALCULO DE LOS RESULTADOS 1 x 60 ml Reactivo A
Calcular la diferencia de absorbancia (∆A = DO2 - DO1) co- 1 x 5 ml Reactivo B
rrespondiente a cada muestra analizada. Interpolar esta ∆A (Cód. 1009344)
en mg/dl (g/l) correspondiente a la muestra estudiada. 1 x 60 ml Reactivo A
Las muestras con absorbancias superiores a la del Calibra- 1 x 5 ml Reactivo B
dor Proteínas nivel alto deben ser diluidas 1:2 con solución (Cód. 1009217)
fisiológica y procesadas nuevamente. Multiplicar el resultado 1 x 60 ml Reactivo A
obtenido por dos. 1 x 5 ml Reactivo B
(Cód. 1009667)
70 - 400 mg/dl (0,7 - 4,0 g/l). BIBLIOGRAFIA
Cada laboratorio debe establecer sus propios valores de - Ichihara, K. et al - J. Clin. Lab. Anal. 10:110 (1996).
referencia. - Itoh, Y. et al - J. Clin. Lab. Anal. 11:39 (1997).
- Maynard, Y. et al - Clin. Chem. 32/5:752 (1986).
CONVERSION DE UNIDADES AL SISTEMA SI - Dati, F - Journal of IFCC VIII/1:29 (1996).
IgA (mg/dl) x 10 = IgA (mg/l) - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
El Control es procesado de la misma manera que las
muestras.

En el caso de muestras con características clínicas no
definidas, deberá realizarse una electroforesis de proteínas
para detectar un eventual exceso de antígeno, como ocurre
en las gammapatías.
PERFORMANCE
Nivel D.S. C.V.
37 mg/dl ± 1,12 mg/dl 3,04 %
192 mg/dl ± 4,92 mg/dl 2,56 %
560 mg/dl ± 19,7 mg/dl 3,52 %
870690000 / 02 Pág. 2/6

Symbols
The following symbols are used in packaging for Wiener lab. diagnostic reagent kits.
C
This product fulfills the requirements of the Euro-
pean Directive 98/79 EC for "in vitro" diagnostic M Manufactured by:
medical devices
P
Xn
Authorized representative in the European Com-

munity Harmful
V "In vitro" diagnostic medical device

Corrosive / Caustic
X Conteins sufficient for <n> tests

Xi
Irritant
H Use by
i Consult instructions for use
l Temperature limitation (store at)
 Do not freeze
Calibr. Calibrator
b Control
F Biological risks
Volume after reconstitution

b Positive Control
Cont. Contents c Negative Control
g Batch code h Catalog number

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
870690000 / 02 Pág. 3/6 UR130618
LINEA TURBITEST AA
IgG
de inmunoglobulina G

La determinación cuantitativa de IgG es necesaria en la drogas en el presente método.
tipificación de inmunodeficiencias y de mielomas. También d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: se
es importante para el seguimiento de infecciones crónicas de recomienda usar suero preferentemente fresco. Si el ensayo
diversos orígenes, donde se encuentran altos niveles de IgG. no puede ser realizado en el mismo día la muestra puede
ser conservada 1 semana en refrigerador (2-10oC). En caso
La inmunoglobulina G reacciona con el anticuerpo espe- conservarla a -20oC.
la concentración de IgG en la muestra y puede medirse - Espectrofotómetro.
B. Reactivo B: anticuerpo monoespecífico anti-IgG.
PROCEDIMIENTO
PRECAUCIONES
solución fisiológica del Calibrador Proteínas nivel alto:
Reactivo A 900 ul
Reactivo B 160 ul
870700000 / 02 p. 1/6
Muestra diluida 40 ul cable de IgG es 90 mg/dl.
Reactivo A 900 ul

(Cód. 1513262)
en mg/dl (g/l) correspondiente a la muestra estudiada. 1 x 60 ml Reactivo A
Las muestras con absorbancias superiores a la del Calibra- 1 x 5 ml Reactivo B
dor Proteínas nivel alto deben ser diluidas 1:2 con solución (Cód. 1009219)
(Cód. 1009652)
Control Inmunológico nivel 1 Turbitest AA. BIBLIOGRAFIA
Control Inmunológico nivel 2 Turbitest AA. - Ichihara, K. et al - J. Clin. Lab. Anal. 10:110 (1996).
El Control es procesado de la misma manera que las - Itoh, Y. et al - J. Clin. Lab. Anal. 11:39 (1997).
muestras. - Maynard, Y. et al - Clin. Chem. 32/5:752 (1986).
- Dati, F - Journal of IFCC VIII/1:29 (1996).
VALORES DE REFERENCIA - Pressac, M. - Ann. Biol. Clin. 41:315 (1983).
700 - 1600 mg/dl (7,0 - 16,0 g/l). - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
Cada laboratorio debe establecer sus propios valores de AACC Press, 4th ed., 2001.
referencia.

IgG (mg/dl) x 0,01 = IgG (g/l)

En el caso de muestras con características clínicas no de-
finidas, deberá realizarse una electroforesis de proteínas
PERFORMANCE
Nivel D.S. C.V.
454 mg/dl ± 11,36 mg/dl 2,50 %
966 mg/dl ± 31,39 mg/dl 3,25 %
1776 mg/dl ± 74,22 mg/dl 4,18 %
870700000 / 02 p. 2/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
870700000 / 02 p. 3/6 UR120920
LINEA TURBITEST AA
IgM
de inmunoglobulina M

La determinación cuantitativa de IgM es necesaria en la drogas en el presente método.
tipificación de inmunodeficiencias y de mielomas. d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
También es importante para el seguimiento de infecciones muestra debe ser preferentemente fresca. Si el ensayo no
agudas. puede ser realizado en el mismo día la muestra puede ser
conservada 1 semana en refrigerador (2-10oC). En caso
La inmunoglobulina M reacciona con el anticuerpo espe- conservarla a -20oC.
la concentración de IgM en la muestra y puede medirse - Espectrofotómetro.
B. Reactivo B: anticuerpo monoespecífico anti-IgM.
PROCEDIMIENTO
PRECAUCIONES
Todas las muestras de pacientes deben manipularse como Realizar en tubos de Kahn, las siguientes diluciones en
si fueran capaces de transmitir infección. solución fisiológica del Calibrador Proteínas nivel alto:
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales 1:10, 1:20, 1:40, 1:80 y 1:160, empleando solución fisio-
de trabajo en el laboratorio de química clínica. lógica como punto cero.
Reactivo A 900 ul
Reactivo B 100 ul
870710000 / 02 p. 1/6
Muestra diluida 60 ul cable de IgM es 20 mg/dl.
Reactivo A 900 ul

(Cód. 1513263)

1 x 5 ml Reactivo B
(Cód. 1009218)
dor Proteínas nivel alto deben ser diluidas 1:2 con solución
(Cód. 1009653)
Control Inmunológico nivel 1 o Control Inmunológico BIBLIOGRAFIA
nivel 2 Turbitest AA de Wiener lab. El Control es procesado - Ichihara, K. et al - J. Clin. Lab. Anal. 10:110 (1996).
de la misma manera que las muestras. - Itoh, Y. et al - J. Clin. Lab. Anal. 11:39 (1997).
- Maynard, Y. et al - Clin. Chem. 32/5:752 (1986).
VALORES DE REFERENCIA - Dati, F - Journal of IFCC VIII/1:29 (1996).
40 - 260 mg/dl (0,40 - 2,60 g/l). - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
Cada laboratorio debe establecer sus propios valores de AACC Press, 4th ed., 2001.
referencia.

IgM (mg/dl) x 10 = IgM (mg/l)

En el caso de muestras con características clínicas no de-
finidas, deberá realizarse una electroforesis de proteínas
PERFORMANCE
Nivel D.S. C.V.
35,4 mg/dl ± 1,54 mg/dl 4,35 %
129 mg/dl ± 3,82 mg/dl 2,96 %
250 mg/dl ± 6,26 mg/dl 2,50 %
870710000 / 02 p. 2/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
870710000 / 02 p. 3/6 UR130618
ISE TAR
C iones
Para la determinación de iones utilizando módulo
I.S.E. de analizador automático
REACTIVOS PROVISTOS VALORES DE REFERENCIA

Buffer: buffer borato 0,1 mol/l, pH 8,7.
Solución de Limpieza: hidróxido de sodio 0,1 mol/l, Suero Rango de referencia Linealidad ISE
pH 9,1. Na +
134-149 mEq/l 20-400 mEq/l
Calibrador Bajo: solución de Na+, K+ y Cl- en concentracio- K+ 3,6-5,5 mEq/l 2,0-200 mEq/l
nes bajas. Ver concentración en el rótulo. Cl- 94-112 mEq/l 40-400 mEq/l
Calibrador Alto: solución de Na+, K+ y Cl- en concentracio-
nes altas. Ver concentración en el rótulo. CONTROL DE CALIDAD
Solución de Referencia: buffer borato 0,1 mol/l con Na+, Las buenas prácticas de laboratorio requieren diariamente el
K+, Cl- y CO3H- en concentraciones bajas, pH 8,6. ensayo de por lo menos dos niveles de material de control.
Si los valores de control caen dentro de los límites superior
INSTRUCCIONES PARA SU USO e inferior establecidos, la corrida se considera bajo control
Reactivos Provistos: listos para usar. y los resultados pueden ser informados. Cuando el control
no se encuentra dentro de los rangos aceptables, debe
PRECAUCIONES repetirse la corrida. Si aún así no se encuentran dentro del
- Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro". rango aceptable, repetir la corrida utilizando un nuevo control
- Los standards químicos líquidos pueden deteriorarse al y reactivos frescos. Si aún así los resultados se encuentran
ser expuestos al aire, por lo que se recomienda verter los fuera de los límites, recalibrar.
mismos dentro de la cubeta donde se colocan las muestras
y realizar la calibración inmediatamente. En ningún caso CALIBRACION DEL INSTRUMENTAL
deben dejarse los calibradores expuestos al aire por más La calibración debe realizarse cada 4 horas o cuando los
de 15 minutos. valores del control de calidad se encuentran fuera de los
- Debe tenerse en cuenta que las muestras a dosar también límites aceptables.
se deterioran en contacto con el aire. Las variaciones de calibración deben estar dentro de los
- El Buffer debe taparse inmediatamente después de usar límites de pendiente de calibración que se presentan en la
ya que en contacto con el aire se degrada completamente siguiente tabla:
en 3 días.
Analito
- Solución de Limpieza: R36/38: irrita los ojos y la piel. S26: Límite de pendiente
en caso de contacto con la piel, lávense inmediatamente de calibración (mv)
y abundantemente con agua y acúdase a un médico.
S37/39: usar guantes adecuados y protección para los Sodio 50 a 80
ojos/la cara. Potasio 40 a 70
- Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
Cloruro -70 a -35
- Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de Para la calibración se utilizan Calibrador Alto y Calibrador
acuerdo a la normativa local vigente. Bajo.

ALMACENAMIENTO - 4 x 150 determinaciones (Cód. 1572553):
Los Reactivos Provistos son estables a temperatura ambien- 4 x 90 ml Buffer
te (menor a 25oC) hasta la fecha de vencimiento indicada 4 x 250 ml Solución de Referencia
en la caja. 4 x 6 ml Solución de Limpieza
Una vez abiertos y colocados en el analizador (on board) 1 x 50 ml Calibrador Alto
los mismos son estables durante 2 semanas. 1 x 50 ml Calibrador Bajo

Analizador automático con módulo ISE.
870720000 / 00 p. 1/4
Sol Referencia Calibr Alto

Solución de Referencia Calibrador Alto
Sol Limpieza Calibr Bajo

Solución de Limpieza Calibrador Bajo
Buffer
Buffer

C

 No congelar
F Riesgo biológico
Cont. Contenido
g Número de lote
M Elaborado por:
Xn
Nocivo
Xi
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo
h Número de catálogo M Wiener Laboratorios S.A.I.C.

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870720000 / 00 p. 2/4 UR101005
ISE TAR plus
C iones
Para la determinación de iones utilizando módulo
I.S.E. de analizador automático
FUNDAMENTOS DEL METODO - Solución de Limpieza: R36/38: irrita los ojos y la piel.
La determinación automatizada de la concentración de S24/25: evitar el contacto con los ojos y la piel. S26: en
electrolitos tales como Na+, K+ y Cl- en suero o plasma, se caso de contacto con la piel, lávense inmediatamente y
fundamenta en un método potenciométrico que emplea abundantemente con agua y acúdase a un médico. S28:
electrodos "ion-selectivo". Estos electrodos consisten en en caso de contacto con la piel, lávese inmediata y abun-
membranas permeables a una determinada especie iónica. dantemente con agua. S37/39: usar guantes adecuados
La diferencia de potencial que se establece en la interfase y protección para los ojos/la cara.
de la membrana y la muestra en solución, es directamente - La Solución (de la Solución Desproteinizante) es corrosiva.
proporcional al logaritmo de la actividad o concentración R34: provoca quemaduras. S24/25: evitar el contacto con
iónica según lo establecido por la ecuación de Nernst: los ojos y la piel. S26: en caso de contacto con la piel,
E = Eo + RT/nF x log A lávense inmediatamente y abundantemente con agua y
E: diferencia de potencial; A: actividad del ión en la acúdase a un médico. S28: en caso de contacto con la piel,
solución. lávese inmediata y abundantemente con agua. S37/39:
usar guantes adecuados y protección para los ojos/la cara.
REACTIVOS PROVISTOS - Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
Buffer: buffer borato 0,1 mol/l, pH 8,3. de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
Solución de Limpieza: hidróxido de sodio 0,1 mol/l. - Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
Solución de Referencia: buffer borato 0,1 mol/l con Na+, acuerdo a la normativa local vigente.
K+, Cl- y CO3H- en concentraciones bajas, pH 8,3.
Calibrador Alto: solución de Na+, K+ y Cl- en concentracio- ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
nes altas. Ver concentración en el rótulo. ALMACENAMIENTO
Calibrador Bajo: solución de Na+, K+ y Cl- en concentracio- Reactivos Provistos: estables a temperatura ambiente (me-
nes bajas. Ver concentración en el rótulo. nor a 25oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
Solución Desproteinizante: Solución Desproteinizante: una vez preparada es estable
Catalizador: sobre conteniendo pepsina para una concen- durante un mes refrigerada (2-10oC).
tración final de 8 g/l.
Solución: ácido clorhídrico 0,075 N. MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
Analizador automático con módulo ISE.
Buffer, Solución de Referencia, Solución de Limpieza y
Calibradores Alto y Bajo: listos para usar. PROCEDIMIENTO
Solución Desproteinizante: preparar agregando el conte- Para el uso del producto, debe consultarse el manual del
nido de un sobre de Catalizador (A) a un frasco de Solución analizador en el que se desee emplear.
(B). Agitar bien y mezclar.
PRECAUCIONES CALIBRACION DEL INSTRUMENTAL

- Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro". Para la calibración deben utilizarse los Calibradores Alto y
- Los Calibradores pueden deteriorarse al ser expuestos al Bajos provistos con el kit. La calibración debe realizarse pre-
aire, por lo que se recomienda verter los mismos dentro ferentemente cada 4 horas o por lo menos 2 veces por día.
de la cubeta donde se colocan las muestras y realizar También debe realizarse cuando se presentan las siguientes
la calibración inmediatamente. En ningún caso deben situaciones:
dejarse los calibradores expuestos al aire por más de - cuando el control de calidad se encuentra fuera de los
15 minutos. límites aceptables;
- Debe tenerse en cuenta que las muestras a dosar también - cada vez que el Buffer o la Solución de Referencia sean
se deterioran en contacto con el aire. recambiadas.
- El Buffer debe taparse inmediatamente luego de usar. Las variaciones de calibración deben estar dentro de los
En contacto con el aire se degrada completamente en límites de pendiente de calibración que se presentan a
3 días. continuación:
861265100 / 01 p. 1/4
SIMBOLOS
Analito Límite de pendiente
de calibración (mv)
Sodio 50 a 70
C
Potasio 40 a 70
Cloruro -60 a -35 para el diagnóstico "in vitro"
Suero Rango de referencia Linealidad ISE V Uso diagnóstico "in vitro"
+
Na 134-149 mEq/l 20-400 mEq/l X Contenido suficiente para <n> ensayos
K+ 3,6-5,5 mEq/l 2,0-200 mEq/l
Cl- 94-112 mEq/l 40-400 mEq/l H Fecha de caducidad
CONTROL DE CALIDAD l Límite de temperatura (conservar a)

Las buenas prácticas de laboratorio requieren diariamente el
ensayo de por lo menos dos niveles de material de control.
 No congelar
Si los valores de control caen dentro de los límites superior

F Riesgo biológico
e inferior establecidos, la corrida se considera bajo control
y los resultados pueden ser informados. Cuando el control Volumen después de la reconstitución
no se encuentra dentro de los rangos aceptables, debe
repetirse la corrida. Si aún así no se encuentra dentro del Cont. Contenido
rango aceptable, repetir la corrida utilizando un nuevo control
y reactivos frescos. Si aún así los resultados se encuentran g Número de lote
fuera de los límites, recalibrar.
M Elaborado por:
PRESENTACION Xn
Nocivo
- Cód. 1009279:
5 x 10 ml Buffer
8 x 10 ml Solución de Referencia
5 x 10 ml Solución de Limpieza Xi
1 x 125 ml Solución Irritante
1 sobre Catalizador
1 x 50 ml Calibrador Alto i Consultar instrucciones de uso
1 x 50 ml Calibrador Bajo Calibr. Calibrador
EXPLICACION DE LOS SIMBOLOS b Control
Sol Referencia Calibr Alto b Control Positivo

Solución de Referencia Calibrador Alto
c Control Negativo
Sol Limpieza Calibr Bajo
Solución de Limpieza Calibrador Bajo
Solución Buffer
Solución Buffer
Catalizador
Catalizador

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
861265100 / 01 p. 2/4 UR130625
LINEA TURBITEST AA
κ-Light Chain
de cadena liviana kappa en suero

Las inmunoglobulinas policlonales exhiben cadenas livianas Suero
kappa y lambda en una proporción constante 2:1, mientras a) Recolección: obtener la muestra de la manera usual.
que las inmunoglobulinas monoclonales presentan un solo b) Aditivos: no se requieren.
tipo de cadena liviana. El aumento de la producción de inmu- c) Sustancias interferentes conocidas: no emplear mues-
noglobulinas monoclonales o cadenas livianas monoclonales tras hemolizadas, lipémicas o contaminadas. Las muestras
libres produce un cociente kappa/lambda fuera del rango que poseen precipitados deben ser centrifugadas previo a
de referencia que indica la existencia de una gammapatía su ensayo. No se observan interferencias por hemoglobina
monoclonal. hasta 1100 mg/dl, triglicéridos hasta 2300 mg/dl, bilirrubina
La determinación de cadenas livianas es útil para el diag- hasta 20 mg/dl y factor reumatoideo hasta 300 U/l.
nóstico y seguimiento de afecciones tales como mieloma Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
múltiple, neoplasmas linfocitarios, macroglobulinemia de drogas en el presente método.
Waldenström y enfermedades del tejido conectivo tales como d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
artritis reumatoidea o lupus eritematoso sistémico (LES). muestra debe ser preferentemente fresca. Si el ensayo no
es realizado en el día, la muestra puede ser conservada 48
FUNDAMENTOS DEL METODO horas a 2-10oC o por períodos más prolongados de tiempo
La cadena liviana kappa reacciona con el anticuerpo espe- a -20oC.
causada por estos inmunocomplejos es proporcional a la MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
concentración de cadena liviana kappa en la muestra y - Espectrofotómetro
puede ser medida espectrofotométricamente. - Cubetas espectrofotométricas de caras paralelas
- Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados
REACTIVOS PROVISTOS - Tubos de Kahn o hemólisis
A. Reactivo A: buffer fosfato, pH 7,4. - Cronómetro
B. Reactivo B: anticuerpos policlonales anti-cadena liviana
kappa humana (cabra) en buffer fosfato, pH 7,4. CONDICIONES DE REACCION
REACTIVOS NO PROVISTOS - Temperatura de reacción: temperatura ambiente (25oC).
- Solución fisiológica. El control de la temperatura no es crítico, pudiendo oscilar
- Calibrador Proteínas nivel alto Turbitest AA de Wiener entre 22 y 30oC.
lab. - Tiempo de reacción: 15 minutos
PRECAUCIONES
si fueran capaces de transmitir infección. CURVA DE CALIBRACION
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales Realizar en tubos de Kahn, las siguientes diluciones
de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos. en solución fisiológica del Calibrador Proteínas nivel
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de alto: 1:10, 1:20, 1:40, 1:80 y 1:160, empleando solución
acuerdo a la normativa local vigente. fisiológica como punto cero.
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE Calibrador Proteínas diluido 12 ul

ALMACENAMIENTO Reactivo A 1000 ul
864103300 / 01 p. 1/6
definidas, deberá realizarse una electroforesis de proteí-
340 nm (DO1) llevando el aparato a cero con agua des- nas para detectar un eventual exceso de antígeno, como
tilada. Luego agregar: ocurre en las gammapatías. Un exceso de antígenos puede
Reactivo B 100 ul detectarse prediluyendo adecuadamente las muestras con
solución fisiológica
Los resultados deberán ser evaluados en conjunto con
la historia clínica del paciente, el examen médico y otros
hallazgos de laboratorio.
Calcular la diferencia de absorbancia (∆A = DO2 - DO1)
para cada dilución del Calibrador Proteínas, incluyendo
PERFORMANCE
el punto cero.
a) Reproducibilidad: se realizaron replicados de muestras
con distintos niveles de cadena liviana kappa, se calculó la
sorbancia (∆A) en función de la concentración en mg/dl
precisión intraensayo.
Nivel D.S. C.V.
PROCEDIMIENTO PARA MUESTRAS 90,7 mg/dl ± 3,7 mg/dl 4,1%
Realizar una dilución 1:10 de las muestras en solución 236,7 mg/dl ± 3,9 mg/dl 1,7%
fisiológica. 582,7 mg/dl ± 8,9 mg/dl 1,5%
Muestra diluida 12 ul b) Límite de detección: 25 mg/dl.
Reactivo A 1000 ul c) Rango de medición: 25 - 750 mg/dl.
d) Efecto prozona: no se evidencia efecto prozona hasta
7500 mg/dl de cadena liviana kappa.
340 nm (DO1) llevando el aparato a cero con agua des-
tilada. Luego agregar:
Reactivo B 100 ul Referirse a las adaptaciones específicas de cada analizador.
Leer la absorbancia a 340 nm (DO2), llevando el aparato PRESENTACION
a cero con agua destilada. 65 ml: - 1 x 60 ml Reactivo A
(Cód. 1009359)
Calcular la diferencia de absorbancia (∆A = DO2 - DO1) co- - 1 x 5 ml Reactivo B
rrespondientes a cada muestra analizada. Interpolar esta ∆A (Cód. 1009654)
en mg/dl (g/l) correspondiente a la muestra estudiada. BIBLIOGRAFIA
Las muestras con absorbancias superiores a la del calibrador - Dati, F et al. - Proteins-Laboratory testing and clinical use,
proteínas nivel alto deben ser diluidas con solución fisiológica 2005.
y procesadas nuevamente. Multiplicar el resultado obtenido - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
por el factor de dilución utilizado. AACC Press, 5th ed., 2000.
- Lievens M. Medical and technical usefulness of measure-
METODO DE CONTROL DE CALIDAD ment of kappa and lambda immunoglobulin light chains
Se recomienda el uso del Control Inmunológico nivel 1 y in serum with an M-component. - J. Clin. Chem. Clin.
Control Inmunológico nivel 2 Turbitest AA de Wiener lab. Biochem. 27:519-523, 1989.
El control deberá procesarse de la misma manera que las - Hafner G et al. - Effects of standardization with the new
muestras. international reference preparation for proteins in human
serum on method comparability and reference values. -
VALORES DE REFERENCIA Clin. Lab. 41:743-748, 1995.
138-375 mg/dl (1,38-3,75 g/l) - Jones RG et al. - Use of Immunoglobulin Heavy-chain and
Cociente κ/λ: 1,17-2,93 Light-chain measurement in a multicenter trial to investi-
Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios gate Monoclonal components: I. Detection. - Clin. Chem.
valores de referencia. 37:1917-1921, 1991.
- Jones RG et al. - Use of Immunoglobulin Heavy-chain and
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO Light-chain measurement in a multicenter trial to investigate
Monoclonal components: II. Classification by use of Com-
puter-based algorithms. - Clin Chem 37:1922-1926, 1991.
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Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
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LINEA TURBITEST AA
λ-Light Chain
de cadena liviana lambda en suero

Las inmunoglobulinas policlonales exhiben cadenas livianas Suero
kappa y lambda en una proporción constante 2:1, mientras a) Recolección: obtener la muestra de la manera usual.
que las inmunoglobulinas monoclonales presentan un solo b) Aditivos: no se requieren.
tipo de cadena liviana. El aumento de la producción de inmu- c) Sustancias interferentes conocidas: no emplear mues-
noglobulinas monoclonales o cadenas livianas monoclonales tras hemolizadas, lipémicas o contaminadas. Las muestras
libres produce un cociente kappa/lambda fuera del rango que poseen precipitados deben ser centrifugadas previo a
de referencia que indica la existencia de una gammapatía su ensayo. No se observan interferencias por hemoglobina
monoclonal. hasta 1100 mg/dl, triglicéridos hasta 1200 mg/dl, bilirrubina
La determinación de cadenas livianas es útil para el diag- hasta 20 mg/dl y factor reumotoideo hasta 300 U/l.
nóstico y seguimiento de afecciones tales como mieloma Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
múltiple, neoplasmas linfocitarios, macroglobulinemia de drogas en el presente método.
Waldenström y enfermedades del tejido conectivo tales como d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
artritis reumatoidea o lupus eritematoso sistémico (LES). muestra debe ser preferentemente fresca. Si el ensayo no
La cadena liviana lambda reacciona con el anticuerpo es- a -20oC.
pecífico formando inmunocomplejos insolubles. La turbidez
causada por estos inmunocomplejos es proporcional a la MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
concentración de cadena liviana Lambda en la muestra y - Espectrofotómetro
puede ser medida espectrofotométricamente. - Cubetas espectrofotométricas de caras paralelas
B. Reactivo B: anticuerpos policlonales anti-cadena liviana
lambda humana (cabra) en buffer fosfato, pH 7,4. CONDICIONES DE REACCION
REACTIVOS NO PROVISTOS - Temperatura de reacción: temperatura ambiente (25oC). El
- Solución fisiológica. control de la temperatura no es crítico, pudiendo oscilar
- Calibrador Proteínas nivel alto Turbitest AA de Wiener entre 22 y 30oC.
lab. - Tiempo de reacción: 15 minutos
PRECAUCIONES
si fueran capaces de transmitir infección. CURVA DE CALIBRACION
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales Realizar en tubos de Kahn, las siguientes diluciones
de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos. en solución fisiológica del Calibrador Proteínas nivel
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de alto: 1:10, 1:20, 1:40, 1:80 y 1:160, empleando solución
acuerdo a la normativa local vigente. fisiológica como punto cero.
ALMACENAMIENTO Reactivo A 1000 ul
864103200 / 01 p. 1/6
definidas, deberá realizarse una electroforesis de proteí-
nas para detectar un eventual exceso de antígeno, como
Luego agregar:
ocurre en las gammapatías. Un exceso de antígenos puede
Reactivo B 100 ul detectarse prediluyendo adecuadamente las muestras con
Mezclar e incubar 15 minutos a temperatura ambiente. solución fisiológica
Leer la absorbancia a 340 nm (DO2), llevando a cero con Los resultados deberán ser evaluados en conjunto con
agua destilada. la historia clínica del paciente, el examen médico y otros
Calcular la diferencia de absorbancia (∆A = DO2 - DO1) hallazgos de laboratorio.
para cada dilución del Calibrador Proteínas, incluyendo
el punto cero. PERFORMANCE
Representar en papel milimetrado las diferencias de ab- a) Reproducibilidad: realizando replicados de muestras
sorbancia (∆A) en función de la concentración en mg/dl con distintos niveles de cadena liviana lambda, se calculó
del Calibrador Proteínas. la precisión intraensayo.
Nivel D.S. C.V.
55,5 mg/dl ± 1,2 mg/dl 2,1%
140,0 mg/dl ± 2,0 mg/dl 1,4%
fisiológica.
333,2 mg/dl ± 5,3 mg/dl 1,6%
b) Límite de detección: 25 mg/dl.
Reactivo A 1000 ul c) Rango de medición: 25 - 400 mg/dl.
Homogeneizar y leer la absorbancia de cada dilución d) Efecto prozona: no se evidencia efecto prozona hasta
a 340 nm (DO1) llevando a cero con agua destilada. 8600 mg/dl de cadena liviana lambda.
Luego agregar:
Reactivo B 100 ul Referirse a las adaptaciones específicas de cada analizador.
Leer la absorbancia a 340 nm (DO2), llevando a cero con PRESENTACION
agua destilada. 65 ml: - 1 x 60 ml Reactivo A
(Cód. 1009358)
Calcular la diferencia de absorbancia (∆A = DO2 - DO1) co- - 1 x 5 ml Reactivo B
rrespondientes a cada muestra analizada. Interpolar esta ∆A (Cód. 1009655)
en mg/dl (g/l) correspondiente a la muestra estudiada. BIBLIOGRAFIA
Las muestras con absorbancias superiores a la del calibrador - Dati, F et al. - Proteins-Laboratory testing and clinical use,
proteínas nivel alto deben ser diluidas con solución fisiológica 2005.
y procesadas nuevamente. Multiplicar el resultado obtenido - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
por el factor de dilución. AACC Press, 5th ed., 2000.
- Lievens M. - Medical and technical usefulness of measure-
METODO DE CONTROL DE CALIDAD ment of kappa and lambda immunoglobulin light chains in
Se recomienda el uso del Control Inmunológico nivel 1 y serum with an M-component. - J. Clin. Chem. Clin. Biochem
Control Inmunológico nivel 2 Turbitest AA de Wiener lab. 27:519-523, 1989.
El control deberá procesarse de la misma manera que las - Hafner G et al. - Effects of standardization with the new
muestras. international reference preparation for proteins in human
serum on method comparability and reference values. -
VALORES DE REFERENCIA Clin. Lab. 41:743-748, 1995.
93-242 mg/dl (0,93-2,42 g/l) - Jones RG et al. - Use of Immunoglobulin Heavy-chain and
Cociente κ/λ: 1,17-2,93 Light-chain measurement in a multicenter trial to investi-
gate Monoclonal components: I. Detection. - Clin. Chem.
37:1917-1921, 1991.
- Jones RG et al. - Use of Immunoglobulin Heavy-chain and
Light-chain measurement in a multicenter trial to investigate
Monoclonal components: II. Classification by use of Com-
Ver Sustancias Interferentes conocidas en MUESTRA. puter-based algorithms. - Clin. Chem. 37:1922-1926, 1991.
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Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

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Bioquímica
Wiener lab.
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Lactate
C Para la determinación de lactato en plasma y líquido
cefalorraquídeo
SIGNIFICACION CLINICA muestra y se determina midiendo el aumento de absorbancia

El ácido láctico, un intermediario del metabolismo anaeróbico a 540-550 nm.
de los hidratos de carbono, proviene principalmente del mús-
culo esquelético, cerebro, piel, médula renal y eritrocitos. La REACTIVOS PROVISTOS
concentración de lactato en la sangre dependerá del balance A. Reactivo A: TOOS 3,5 mM; ascorbato oxidasa (pepino)
entre su producción en estos tejidos y su metabolismo en ≥ 30 U/ mL; buffer fosfato 100 mM pH 7,8, azida sódica
hígado y riñones. Aproximadamente el 65% del lactato gene- < 0.1%.
rado es utilizado por el hígado principalmente en el proceso B. Reactivo B: 4-aminoantipirina 5 mM; lactato oxidasa (micro-
de gluconeogénesis. Cuando la concentración de lactato organismos) ≥ 10 U/mL; peroxidasa (rábano picante) ≥ 24 U/mL;
es mayor a 18 mg/dL (2 mmol/L) el clearence hepático de buffer fosfato 100 mM pH 7,8, azida sódica < 0,1%.
lactato se satura aumentando su nivel en sangre. Un ejemplo
concreto sucede durante el ejercicio prolongado en el que REACTIVOS NO PROVISTOS
los niveles de lactato pueden aumentar significativamente. - Calibrador A plus de Wiener lab.
El aumento de lactato en sangre asociado a una disminución - Solución fisiológica (NaCl 9 g/L).
del pH arterial recibe el nombre de acidosis láctica. La dis-
minución de la oxigenación tisular (hipoxia) es la causa más INSTRUCCIONES PARA SU USO
común de acidosis láctica por ejemplo hipoxia secundaria Reactivos Provistos: listos para usar.
a diferentes condiciones clínicas como shock, neumonía,
hemorragia aguda, edema pulmonar e insuficiencia cardíaca PRECAUCIONES
congestiva. También se han registrado casos de acidosis Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
láctica en necrosis hepática, neoplasmas, linfomas, varias Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
formas de leucemia, la deficiencia de tiamina y en la cetoaci- de trabajo en el laboratorio de química clínica.
dosis diabética. Otras causas de acidosis láctica incluye la Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
infusión intravenosa de ciertas sustancias como fructosa, acuerdo a la normativa local vigente.
sorbitol, epinefrina y la ingesta incrementada de alcohol y/o
acetominofeno. ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
Los niveles de lactato en el líquido cefalorraquídeo (LCR) ALMACENAMIENTO
son similares a sus niveles en sangre, pero en presencia Reactivos Provistos: los reactivos sin abrir son estables
de patologías del SNC la concentración de lactato en LCR en refrigerador (2-10oC) hasta la fecha de vencimiento
varía en forma independiente observándose un aumento de indicada en la caja.
los niveles de lactato en líquido cefalorraquídeo (LCR) en
meningitis bacteriana, hipocapnia, hidrocefalia, abscesos MUESTRA
cerebrales, isquemia cerebral y/o cualquier condición clínica Plasma y LCR
asociada a una oxigenación reducida del cerebro, inflama- a) Recolección: la muestra a recolectar puede ser plasma
ción y/o presión intracraneal aumentada. o líquido cefalorraquídeo. No utilizar suero.
Las muestras de sangre deben extraerse de una vena libre
FUNDAMENTOS DEL METODO de éstasis, si bien una hemostasis mínima (inferior a 30
El lactato de la muestra es oxidado por la enzima específica segundos) no afecta el nivel de lactato. Evitar en lo posible
lactato oxidasa (LOD). El peróxido de hidrógeno formado en el uso de torniquete.
esta reacción es luego utilizado por la peroxidasa (POD) para En caso de recolectar plasma, centrifugar dentro de los 15
generar un cromógeno. minutos después de obtenida la muestra.
LOD Los sistemas de recolección de muestras para plasma de
L-lactato + O2 piruvato + H2O2 diversos fabricantes pueden contener diferentes materiales
POD que en ciertos casos pueden llegar a afectar los resultados.
H2O2 + TOOS + 4-AAP cromógeno + 2 H2O Si las muestras se procesan en tubos primarios (sistema de
recolección de muestras para plasma) seguir las instruccio-
La intensidad cromática del complejo formado es directa- nes del fabricante de los tubos.
mente proporcional a la concentración de L-lactato en la El LCR puede usarse directamente sin tratar.
867012810 / 01 p. 1/6
b) Aditivos: en caso de obtener plasma, utilizar fluoruro/ VALORES ESPERADOS
EDTA (Anticoagulante G de Wiener lab.), fluoruro/heparina Plasma
y fluoruro/oxalato. Si se obtiene plasma sin inhibidores de Sangre venosa: 4,5 - 19,8 mg/dL
la glucólisis (fluoruro) guardar la sangre entera en hielo y Sangre arterial: < 11,3 mg/dL
separar el plasma de las células dentro de un plazo de 15 LCR
minutos tras recogerla. Neonatos: 10 - 60 mg/dL
c) Sustancias interferentes conocidas: no se observan 3-10 días: 10 - 40 mg/dL
interferencias por triglicéridos hasta 1400 mg/dL, bilirrubina > 10 días y adultos: 10 - 25 mg/dL
hasta 32 mg/dL, hemoglobina hasta 1000 mg/dL, heparina
hasta 55 UI/L y ácido ascórbico hasta 50 mg/dL. CONVERSION DE UNIDADES
Referirse a la bibliografía de Young para ver los efectos de 1 mg/dL x 0,111 = 1 mmol/L
otros interferentes en el presente método.
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: las LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
muestras de plasma deben procesarse rápidamente, de lo Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
contrario deben ser mantenidas a 2-10oC o congeladas a El nivel de lactato aumenta rápidamente luego de la actividad
-20oC debido a que el lactato aumenta un 20% en 3 minutos física. El tiempo requerido para retomar los valores basales
y un 70% en 30 minutos a 25oC. Las muestras son estables depende de cada individuo pero generalmente con 30 minu-
8 días a 2-10oC y 4 semanas a -20oC. tos de reposo es suficiente.
Una vez activado el proceso de glucólisis, el nivel de lactato
MATERIAL REQUERIDO (no provisto) comienza a aumentar rápidamente. Debido a que las células
- Micropipetas para medir los volúmenes indicados. presentes en el plasma favorecen este proceso, resulta fun-
- Analizador automático. damental separar el plasma del paquete globular rápidamente
a fin de obtener concentraciones de lactato exactas. El lactato
aumenta 20% en 3 minutos y 70% en 30 minutos a 25oC
PROCEDIMIENTO Para preservar la integridad de los reactivos deben evitarse
(Analizador automático) todo tipo de contaminaciones, empleando para la medición
A continuación se detalla un procedimiento general para únicamente micropipetas perfectamente limpias y secas.
determinación de lactato en un analizador automático. Se recomienda utilizar Standatrol S-E 2 niveles de Wiener lab,
Cuando se implemente la técnica en un analizador en como material de control de calidad, ya que con controles de
particular, siga las instrucciones de trabajo del mismo. En otras marcas comerciales pueden obtenerse valores diferen-
una cubeta mantenida a la temperatura elegida, colocar: tes al rango especificado, dado que los mismos dependen
Muestra o Calibrador 2 uL del método o sistema utilizado.
Reactivo A 175 uL PERFORMANCE
Incubar durante 120 segundos a 37oC. Leer absorbancia a) Reproducibilidad: procesando simultáneamente replica-
a 540-550 nm (blanco de muestra). dos de una misma muestra, se obtienen los siguientes valores:
Reactivo B 35 uL Nivel D.S. CVwr CVt
o
11,6 mg/dL ± 0,15 mg/dL 1,3% 2,7%
Incubar durante 300 segundos a 37 C. Leer absorbancia 21,9 mg/dL ± 0,26 mg/dL 1,2% 2,6%
a 540-550 nm (concentración de lactato). 38,5 mg/dL ± 0,50 mg/dL 1,3% 2,4%
Los analizadores Wiener lab. calculan automáticamente
la concentración de lactato de cada muestra. b) Linealidad: la reacción es lineal hasta 130 mg/dL. Para
valores superiores, diluir la muestra 1+2 partes con solución
fisiológica (NaCl 9 g/L), repetir la determinación y multiplicar
CALIBRACION el resultado por el factor de dilución.
El Calibrador A plus es procesado de la misma manera que c) Límite de detección: 0,7 mg/dL
las muestras y a partir de él se calcula el factor correspon- d) Límite de cuantificación: 1,8 mg/dL
diente. Los valores de concentración de lactato son variables
lote a lote. Consultar los valores en el manual de instruccio- PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS
nes de Calibrador A plus de Wiener lab. Referirse a las adaptaciones específicas de cada analizador.
Se recomienda usar calibración a dos puntos después de
cambiar lote de reactivo y cuando el control de calidad lo PRESENTACION
requiera. 72 mL: 1 x 60 mL Reactivo A
METODO DE CONTROL DE CALIDAD (Cód. 1999795)
Procesar 2 niveles de un material de control de calidad 24 mL: 1 x 20 mL Reactivo A
(Standatrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas 1 x 4 mL Reactivo B
de lactato. (Cód. 1009370)
867012810 / 01 p. 2/6
24 mL: 1 x 20 mL Reactivo A SIMBOLOS
1 x 4 mL Reactivo B Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
BIBLIOGRAFIA
C
- The Use of Lactate as a Biomarker. - Nicholas C. Watson por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios
and Stephen O. Heard. J Intensive Care Med 2010 25: 301. para el diagnóstico "in vitro"
- Determination of D-lactate by enzymatic methods in
biological fluids: study of interferences. - Ramon Martí, P Representante autorizado en la Comunidad Europea
Encarna Varela, Rosa M. Segura, José Alegre, José M.
Suriñach, and Carles Pascual. - Clinical Chemistry 43:6
1010–1015 (1997). Contenido suficiente para <n> ensayos

X
- Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 5 th edition 2001. Burtis
CA, Ashwoos ER, editors. H Fecha de caducidad
- Evaluation of Precision Performance of Clinical Chemis-
try Devices; Approved Guideline. CLSI EP-5A Vol. 19 l Límite de temperatura (conservar a)
No.2.1999.
- Evaluation of the Linearity of Quantitative Measurement  No congelar
CLSI EP6-A Vol. 23 Nº.16.2003. F Riesgo biológico
Samples; Approved Guideline - Second Edition. CLSI
EP9-A2 Vol. 22 Nº.19.2002.
Cont. Contenido
- Protocols for Determination of Limits of Detection and
Limits of Quantitation; Approved Guideline. CLSI EP17-A g Número de lote
Vol. 24 Nº.34.2004.
M Elaborado por:
Xn
Nocivo
Xi
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
867012810 / 01 p. 3/6 UR131213
LDH-L
C Para la determinación de lactato deshidrogenasa en
suero, plasma y líquido cefalorraquídeo

La determinación de la actividad lactato deshidrogenasa Reactivos Provistos: listos para usar.
(LDH) tiene una gran variedad de aplicaciones clínicas. Por
ser una enzima intracelular, su elevación es índice de daño PRECAUCIONES
tisular con la consecuente liberación de ésta a la circula- Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
ción. El daño puede variar desde una simple anoxia con Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
ligero daño celular y pérdida de citoplasma hasta necrosis de trabajo en el laboratorio de química clínica.
celular severa generando diversos grados de elevación de Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
la actividad enzimática. acuerdo a la normativa local vigente.
En el infarto agudo de miocardio, la actividad de LDH total
(junto con las CK y AST), constituye un elemento importante ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
de diagnóstico. La misma comienza a elevarse 12-24 horas ALMACENAMIENTO
después de producido el infarto; alcanza un pico entre las 48- Reactivos Provistos: estables en refrigerador (2-10oC)
72 horas y permanece elevada hasta el séptimo o décimo día. hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. Una vez
También se registra un aumento de actividad de LDH total abiertos, no deben permanecer destapados ni fuera del refri-
en pacientes con necrosis hepática (producida por agentes gerador por períodos prolongados. Evitar contaminaciones.
tóxicos o por infección aguda como la hepatitis viral) e incluso Proteger de la luz directa.
acompañando a necrosis tubular renal, pielonefritis, etc. En
los tumores sanguíneos como leucemias y linfomas también MUESTRA
se observan valores aumentados de la LDH. Suero, plasma o LCR
En el líquido cefalorraquídeo (LCR) el valor normal es de a) Recolección: obtener el suero de la manera habitual, libre
aproximadamente el 10% de su valor en suero, aumentando de hemólisis. También pueden usarse plasma o LCR. El plas-
marcadamente su valor en meningitis bacterianas. En las ma debe estar libre de hemólisis y de células ya que las pla-
meningitis virales la LDH aumenta su valor solo en el 10% quetas poseen elevadas concentraciones de LDH. El plasma
de los casos. recogido en tubos primarios de acuerdo a las instrucciones del
fabricante puede contener células en suspensión, generando
FUNDAMENTOS DEL METODO resultados falsamente aumentados. Se recomienda transferir
El método se basa en el siguiente esquema de reac- el plasma a un tubo secundario y centrifugar.
b) Aditivos: en caso de que la muestra a emplear sea plas-
ción:
ma, se recomienda el uso de heparina como anticoagulante.
LDH
También puede utilizarse EDTA o citrato. En caso de utilizar
L-lactato + NAD+ piruvato + NADH + H+
EDTA, se ha demostrado que puede disminuir la actividad
La velocidad de formación de NADH es directamente pro- de la LDH hasta un 10%.
porcional a la actividad catalítica de la LDH y se determina c) Sustancias interferentes conocidas: no se observan
midiendo el aumento de la absorbancia a 340 nm. interferencias por triglicéridos hasta 1400 mg/dl, bilirrubina
Las concentraciones del ensayo están optimizadas de hasta 30 mg/dl. La hemoglobina interfiere significativamente
acuerdo a los procedimientos de referencia para la me- en todo su rango de concentraciones por lo que se recomien-
dición de la actividad catalítica de las enzimas a 37oC da usar muestras libres de hemólisis.
descriptos por la Federación Internacional de Química Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
Clínica (IFCC) drogas en el presente método.
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento:
REACTIVOS PROVISTOS separar el suero o el plasma del coágulo o de las células y
A. Reactivo A: solución de metilglucamina (MEG) 400 mM efectuar el test inmediatamente. En caso de no procesarse
y lactato 61 mM; pH 9,4 a 37oC. en el momento, puede conservarse 7 días a 20-25oC, 4 días
B. Reactivo B: solución conteniendo NAD 61 mM. a 2-10oC o 6 semanas a -20oC.
REACTIVOS NO PROVISTOS MATERIAL REQUERIDO (no provisto)

- Calibrador A plus de Wiener lab. - Micropipetas para medir los volúmenes indicados
- Solución fisiológica (NaCl 9 g/l). - Analizador automático
864107100 / 02 p. 1/6
PERFORMANCE
PROCEDIMIENTO a) Reproducibilidad: procesando simultáneamente repli-
(Analizador automático) cados de una misma muestra, se obtienen los siguientes
A continuación se detalla un procedimiento general para valores:
LDH-L en un analizador automático. Cuando se imple-
Nivel D.S. C.V.
mente la técnica en un analizador en particular, siga
150 U/l ± 2,69 U/l 1,8 %
las instrucciones de trabajo del mismo. En una cubeta
250 U/l ± 3,75 U/l 1,5 %
mantenida a la temperatura elegida, colocar:
b) Linealidad: la reacción es lineal hasta 1000 U/l. Para
valores superiores, diluir la muestra 1+4 partes con solución
Reactivo A 100 ul fisiológica (NaCl 9 g/l), repetir la determinación y multiplicar
Incubación durante 300 segundos a 37oC el resultado por el factor de dilución.
c) Límite de detección: 4 U/l.
Reactivo B 20 ul d) Límite de cuantificación: 20 U/l.
o
Incubación durante 120 segundos a 37 C.
[LDH] = (∆A/min) x factor; εNAD/NADH = 6230 M-1 cm-1 PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS
Los analizadores Wiener lab. calculan automáticamente Para las instrucciones de programación consultar las adap-
la actividad de LDH de cada muestra. taciones correspondientes a los analizadores de la línea
Wiener lab para el método LDH-L. Para la calibración debe
utilizarse Calibrador A plus de Wiener lab.
CALIBRACION
El método LDH-L fue estandarizado frente a la fórmula PRESENTACION
original del IFCC usada como referencia. 120 ml: - 1 x 100 ml Reactivo A
El Calibrador A plus es procesado de la misma manera - 1 x 20 ml Reactivo B
que las muestras y a partir de él se calcula el factor corres- (Cód. 1999726)
pondiente. 120 ml: - 2 x 50 ml Reactivo A
Se recomienda usar calibración a dos puntos después de - 2 x 10 ml Reactivo B
cambiar lote de reactivo y cuando el control de calidad lo (Cód. 1009213)
requiera.
lactato deshidrogenasa, con cada determinación. 150 ml: - 2 x 60 ml Reactivo A
VALORES DE REFERENCIA (Cód. 1009625)
Adultos 135 -240 U/l
Niños (2 - 15 años) 120 -300 U/l BIBLIOGRAFIA
Recién nacidos (4 a 20 días) 240 - 600 U/l - Conmutable Calibrador with Value Assigned by the IFCC
Reference Procedure. Clinical Chemistry 54/8:1349-1355,
2008.
valores de referencia, teniendo en cuenta sexo, edad, hábitos
- IFCC Primary Reference Procedures for the Measurement
alimenticios, medicación y otros factores de su población.
of Catalytic Activity Concentrations of Enzymes at 37oC.
Clin. Chem. Lab. Med. 40/6:643-648, 2002.
LDH (U/l) x 0,0167 = LDH (ukat/l)
- Evaluation of the Linearity of Quantitative Measurement
CLSI EP6-A Vol. 23 Nº 16, 2003.
Las muestras de plasma deben ser centrifugadas previa-
mente a realizar el ensayo.
Samples; Approved Guideline - Second Edition. CLSI
Para preservar la integridad de los reactivos deben evitarse
EP9-A2 Vol. 22 Nº 19, 2002.
- Protocols for Determination of Limits of Detection and
Limits of Quantitation; Approved Guideline. CLSI EP17-A
Se recomienda utilizar Standatrol S-E 2 niveles de Wiener
Vol. 24 Nº 34, 2004.
lab, como material de control de calidad, ya que con controles
- J. Vázquez, M. Adducci, D. Monzón, K. Iserson - Journal
de otras marcas comerciales pueden obtenerse valores dife-
of Emergency Medicine, 37/1:93-97, 2009.
rentes al rango especificado, dado que los mismos dependen
del método o sistema utilizado.
864107100 / 02 p. 2/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
864107100 / 02 p. 3/6 UR130916
LINEA LIQUIDA
LDH-P
C Método UV optimizado (SFBC) para la determinación
AA
de lactato deshidrogenasa (LDH) en suero o plasma

La determinación de la actividad lactato deshidrogenasa Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
(LDH) tiene una gran variedad de aplicaciones clínicas. Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
Por ser una enzima intracelular, su elevación es índice de de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
daño tisular con la consecuente liberación de ésta a la cir- Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
culación. El daño puede variar desde una simple anoxia con acuerdo a la normativa local vigente.
ligero daño celular y pérdida de citoplasma hasta necrosis
celular severa generando diversos grados de elevación de ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
la actividad enzimática. ALMACENAMIENTO
En el infarto agudo de miocardio, la actividad de LDH total Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10oC)
(junto con las CK y AST), constituye un elemento importante hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. Una vez
de diagnóstico. La misma comienza a elevarse 12-24 horas abiertos, no deben permanecer destapados y fuera del refri-
después de producido el infarto; alcanza un pico entre las gerador durante lapsos prolongados. Evitar contaminaciones.
48-72 horas y permanece elevada hasta el séptimo o décimo Reactivo único (premezclado): en refrigerador (2-10oC) es
día. También se registra un aumento de actividad de LDH estable 1 mes a partir de la fecha de su preparación.
total en pacientes con necrosis hepática (producida por
agentes tóxicos o por infección aguda como la hepatitis viral) INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
e incluso acompañando a necrosis tubular renal, pielonefritis, REACTIVOS
etc. En los tumores sanguíneos como leucemias y linfomas Cuando el espectrofotómetro ha sido llevado a cero con
también se observan valores aumentados de la LDH. agua destilada, lecturas de absorbancia del Reactivo único
En el líquido cefalorraquídeo (LCR) el valor normal es de premezclado inferiores a 0,800 D.O. o superiores a 1,800 D.O.
aproximadamente el 10% de su valor en suero, aumentando (a 340 nm) son indicio de deterioro del mismo.
marcadamente su valor en meningitis bacterianas. En las
meningitis virales la LDH aumenta su valor solo en el 10% MUESTRA
de los casos. Suero o plasma
a) Recolección: se debe obtener suero de la manera usual y
FUNDAMENTOS DEL METODO separar del coágulo dentro de las dos horas de su obtención.
Basado en el siguiente esquema de reacción: También puede usarse plasma.
LDH b) Aditivos: en caso de que la muestra a emplear sea plas-
Piruvato + NADH + H+ L-lactato + NAD+
ma, debe usarse heparina como anticoagulante.
Las concentraciones del ensayo están optimizadas de c) Sustancias interferentes conocidas: no se observan in-
acuerdo a la Sociedad Francesa de Biología Clínica (SFBC). terferencias por triglicéridos hasta 570 mg/dl, bilirrubina hasta
18 mg/dl, hemoglobina hasta 180 mg/dl (en muestras con
REACTIVOS PROVISTOS niveles normales de LDH) o hasta 350 mg/dl (en muestras
A. Reactivo A: solución de buffer Tris, pH 7,2 conteniendo con niveles elevados de LDH), ni heparina hasta 50 UI/ml.
piruvato y cloruro de sodio. Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
B. Reactivo B: solución conteniendo NADH. drogas en el presente método.
Concentraciones finales (según SFBC) d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
Tris................................................................ 80 mM, pH 7,2 muestra debe ser preferentemente fresca. La LDH es estable
Piruvato............................................................... 1,6 mmol/l hasta 24 horas en refrigerador. No congelar.
NADH.................................................................. 0,2 mmol/l
ClNa................................................................... 200 mmol/l MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
Reactivos Provistos: listos para usar. Pueden usarse - Material volumétrico adecuado.
separados o como Reactivo único, mezclando 4 partes de - Baño de agua a la temperatura indicada en el procedi-
Reactivo A con 1 parte de Reactivo B (ej.: 4 ml Reactivo A miento.
+ 1 ml Reactivo B). - Cronómetro.
864124022 / 01 p. 1/9
CONDICIONES DE REACCION CALCULO DE LOS RESULTADOS
(Disminución de absorbancia) LDH (U/l) = ∆A/min x factor
- Longitud de onda: 340 nm (Hg 334 ó 366)
En cada caso deberá emplearse el factor de cálculo co-
- Temperatura de reacción: 25, 30 ó 37oC. Ver los VALORES
rrespondiente de acuerdo a la temperatura de reacción
seleccionada (30-37oC o 25oC) y a la técnica empleada (con
- Tiempo de reacción: 3 minutos y 30 segundos.
Reactivo único o separados) como se indica en las siguientes
Los volúmenes de muestra y reactivo se pueden variar
tablas de factores:
proporcionalmente sin que se alteren los factores de cálculo.
PROCEDIMIENTO Temperat.
25oC 30-37oC
I- TECNICA CON REACTIVO UNICO Long. onda
A) 30-37oC 340 nm 4.921 8.095
En una cubeta mantenida a la temperatura de trabajo, 334 nm 5.016 8.253
colocar: 366 nm 9.118 15.000
Reactivo único 1 ml
TECNICA CON REACTIVOS SEPARADOS
Preincubar unos minutos, luego agregar:
Temperat.
Muestra 20 ul 25oC 30-37oC
Long. onda
340 nm 6.111 10.080
cronómetro. Esperar 30 segundos. Leer la absorbancia
334 nm 6.230 10.275
inicial (ver LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO)
366 nm 11.324 18.675
y luego a los 1, 2 y 3 minutos de la primera lectura.
Determinar la diferencia promedio de absorbancia/
min (∆A/min), restando cada lectura de la anterior y
los cálculos.
lactato deshidrogenasa, con cada determinación.
B) 25oC
Emplear 100 ul de Muestra y 3 ml Reactivo único, VALORES DE REFERENCIA
siguiendo el procedimiento indicado en I-A).
II- TECNICA CON REACTIVOS SEPARADOS
Valores (U/l) 120-240 160-320 230-460
A) 30-37oC
En una cubeta mantenida a la temperatura de trabajo, Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios
colocar: valores de referencia.
Reactivo A 1 ml CONVERSION DE UNIDADES AL SISTEMA SI

Muestra 20 ul LDH (U/l) x 0,017 = LDH (ukat/l)
Preincubar unos minutos, luego agregar: LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO

Reactivo B 0,25 ml Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
Absorbancia inicial baja: cuando una vez agregado el suero,
Mezclar inmediatamente y disparar simultáneamente el la primera lectura (tiempo 0) es inferior a 0,800 D.O. estando
cronómetro. Esperar 30 segundos. Leer la absorbancia el Reactivo B en condiciones, indica una muestra con muy
inicial (ver LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO) alta actividad de LDH (que consume NADH aún antes de
y luego a los 1, 2 y 3 minutos de la primera lectura. esta lectura). En este caso, repetir la determinación con
Determinar la diferencia promedio de absorbancia/ muestra diluida 1/10 con solución fisiológica y multiplicar el
min (∆A/min), restando cada lectura de la anterior y resultado por la dilución efectuada.
los cálculos. PERFORMANCE
B) 25oC a) Reproducibilidad: procesando simultáneamente replica-
dos de una misma muestra, se obtienen los siguientes valores:
Emplear 3 ml de Reactivo A con 100 ul de Muestra
y 0,75 ml de Reactivo B, siguiendo el procedimiento Nivel D.S. C.V.
indicado en II-A). 439 U/l ± 3,64 U/l 0,8 %
919 U/l ± 11,41 U/l 1,2 %
864124022 / 01 p. 2/9
b) Linealidad: el límite de linealidad es hasta 1000 U/l. Si la SÍMBOLOS
∆A/min es superior a 0,120 D.O. (340-334 nm y 37oC), repetir Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
la determinación con muestra diluida 1/5 ó 1/10 con solución reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
c) Límite de cuantificación: la mínima actividad cuantifica- Este producto cumple con los requerimientos previstos
ble de lactado deshidrogenasa es 24 U/l.

X
- 1 x 20 ml Reactivo B H Fecha de caducidad
(Cód. 1009267)
100 ml: - 4 x 20 ml Reactivo A l Límite de temperatura (conservar a)
(Cód. 1521304)  No congelar
125 ml: - 5 x 20 ml Reactivo A F Riesgo biológico

(Cód. 1009315) Volumen después de la reconstitución
150 ml: - 2 x 60 ml Reactivo A Cont. Contenido

Elaborado por:
BIBLIOGRAFIA M
- Societé Française de Biologie Clinique (SFBC) - Ann. Biol. Xn
Clin. 40:160, 1982. Nocivo
- Sociedad Española de Química Clínica - Comité Científico,
Comisión de Enzimas - Quim. Clin. 57-61, 1989. Corrosivo / Cáustico
- Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests", Xi
AACC Press, 4th ed., 2001. Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
864124022 / 01 p. 3/9 UR120903
LDH-P
C Método UV optimizado (SFBC) para la determinación
AA
de lactato deshidrogenasa (LDH) en suero o plasma

(LDH) tiene una gran variedad de aplicaciones clínicas. Por Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
ser una enzima intracelular, su elevación es índice de daño de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
tisular con la consecuente liberación de ésta a la circula- Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
ción. El daño puede variar desde una simple anoxia con acuerdo a la normativa local vigente.
(junto con las CK y AST), constituye un elemento importante hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
de diagnóstico. La misma comienza a elevarse 12-24 horas Reactivo A reconstituido: estable 21 días en refrigerador (2-
después de producido el infarto; alcanza un pico entre las 10oC) o 3 días a temperatura ambiente a partir del momento
48-72 horas y permanece elevada hasta el séptimo o décimo de su reconstitución.
día. También se registra un aumento de actividad de LDH
total en pacientes con necrosis hepática (producida por INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
agentes tóxicos o por infección aguda como la hepatitis viral) REACTIVOS
e incluso acompañando a necrosis tubular renal, pielonefritis, Cuando el espectrofotómetro ha sido llevado a cero con agua
etc. En los tumores sanguíneos como leucemias y linfomas destilada, lecturas de absorbancia del Reactivo A reconsti-
también se observan valores aumentados de la LDH. tuido inferiores a 0,800 D.O. o superiores a 1,800 D.O. (a
En el líquido cefalorraquídeo (LCR) el valor normal es de 340 nm) son indicio de deterioro del mismo.
aproximadamente el 10% de su valor en suero, aumentando
marcadamente su valor en meningitis bacterianas. En las MUESTRA
meningitis virales la LDH aumenta su valor solo en el 10% Suero o plasma
de los casos. a) Recolección: se debe obtener suero de la manera usual y
separar del coágulo dentro de las dos horas de su obtención.
FUNDAMENTOS DEL METODO También puede usarse plasma.
Basado en el siguiente esquema de reacción: b) Aditivos: en caso de que la muestra a emplear sea plas-
LDH ma, debe usarse heparina como anticoagulante.
Piruvato + NADH + H+ L-lactato + NAD+ c) Sustancias interferentes conocidas: las muestras con
Las concentraciones del ensayo están optimizadas de hemólisis visible o intensa pueden producir valores falsamen-
acuerdo a la Sociedad Francesa de Biología Clínica (SFBC). te aumentados por lo que no deben ser usadas.
A. Reactivo A: viales conteniendo NADH. d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
B. Reactivo B: solución de buffer Tris, pH 7,2 conteniendo muestra debe ser preferentemente fresca. La LDH es estable
piruvato y cloruro de sodio. hasta 24 horas en refrigerador. No congelar.
Concentraciones finales (según SFBC)
Tris................................................................ 80 mM, pH 7,2 MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
Piruvato............................................................... 1,6 mmol/l - Espectrofotómetro.
NADH.................................................................. 0,2 mmol/l - Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados.
ClNa................................................................... 200 mmol/l - Material volumétrico adecuado.
- Baño de agua a la temperatura indicada en el procedi-
INSTRUCCIONES PARA SU USO miento.
Reactivo A: agregar el volumen de Reactivo B indicado en - Cronómetro.
el rótulo a un vial de Reactivo A. Tapar y agitar suavemente
por inversión hasta disolución completa. Fechar. CONDICIONES DE REACCION
Reactivo B: listo para usar. (Disminución de absorbancia)
870730000 / 00 p. 1/6
- Longitud de onda: 340 nm (Hg 334 ó 366) CONVERSION DE UNIDADES AL SISTEMA SI
- Temperatura de reacción: 25, 30 ó 37oC. Ver los VALORES LDH (U/l) x 0,017 = LDH (ukat/l)
- Tiempo de reacción: 3 minutos y 30 segundos. METODO DE CONTROL DE CALIDAD
- Los volúmenes de muestra y reactivo se pueden reducir Procesar 2 niveles de un material de control de calidad
proporcionalmente sin que varíen los factores de cálculo. (Standatrol S-E 2 niveles) con actividades conocidas de
PROCEDIMIENTO LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO

o Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
A) 25 C
- Absorbancia inicial baja: cuando una vez agregado el sue-
En una cubeta mantenida a la temperatura de trabajo,
ro, la primera lectura (tiempo 0) es inferior a 0,800 D.O.
colocar:
estando el sustrato (Reactivo A) en condiciones, indica
Reactivo A reconstituido 3 ml una muestra con muy alta actividad de LDH (que consume
Preincubar unos minutos, luego agregar: NADH aún antes de esta lectura). En este caso, repetir la
determinación con muestra diluida 1/10 con solución fisio-
Muestra 100 ul lógica y multiplicar el resultado por la dilución efectuada.
Mezclar inmediatamente y disparar simultáneamente el - La humectación es causa de deterioro del Reactivo A.
inicial (ver LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO) y PERFORMANCE
luego a los 1, 2 y 3 minutos de la primera lectura. Determi- a) Reproducibilidad: procesando simultáneamente repli-
nar la diferencia promedio de absorbancia/min (∆A/min), cados de una misma muestra, se obtienen los siguientes
restando cada lectura de la anterior y promediando los valores:
valores. Utilizar este promedio para los cálculos. Nivel D.S. C.V.
o
B) 30-37 C 438 U/l ± 5,14 U/l 1,17 %
I- MACROTECNICA 683 U/l ± 7,99 U/l 1,17 %
Emplear 50 ul de Muestra, siguiendo el procedimiento b) Límite de detección: depende del espectrofotómetro
indicado en A). empleado y de la longitud de onda. De acuerdo con la sen-
sibilidad requerida, en espectrofotómetro a 340 nm (Hg 334
II- MICROTECNICA
ó 366), con cubetas de caras paralelas de 1 cm de espesor,
Emplear 20 ul de muestra y 1,0 ml de Reactivo A re-
reproducibilidad ± 2 nm, luz espuria ≤ 0,5% y semiancho de
constituido siguiendo el procedimiento indicado en A).
banda ≤ 8 nm, para un ∆A/min de 0,001, el mínimo cambio
de actividad detectable será de 5 U/l (a 340 nm y a 25oC).
hasta 0,200 D.O. ∆A/min (a 340 nm y 25oC). Si la ∆A/min
LDH (U/l) = ∆A/min x factor es superior a 0,200 D.O. (340-334 nm y 25oC) o 0,100 D.O.
En cada caso deberá emplearse el factor de cálculo co- (366 nm y 25oC), repetir la determinación con muestra diluida
rrespondiente de acuerdo a la temperatura de reacción 1/5 ó 1/10 con solución fisiológica, corrigiendo consecuen-
seleccionada (30-37oC o 25oC) y a la técnica empleada temente los resultados.
(micro o macrotécnica) como se indica en la siguiente tabla
de factores: PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS
o o
Temp. 25 C 30-37 C del usuario del analizador en uso.
L. onda I II
PRESENTACION
340 nm 4.921 9.683 8.095 - 3 x 20 ml (Cód. 1521303).
334 nm 5.016 9.871 8.253
366 nm 9.118 17.941 15.000 BIBLIOGRAFIA
- Societé Française de Biologie Clinique (SFBC) - Ann. Biol.
VALORES DE REFERENCIA Clin. 40:160, 1982.
Temperatura 25oC 30oC (*) 37oC (*) - Sociedad Española de Química Clínica - Comité Científico,
Comisión de Enzimas - Quim. Clin. 57-61, 1989.
Valores (U/l) 120-240 160-320 230-460 - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
(*) Calculados AACC Press, 4th ed., 2001.
870730000 / 00 p. 2/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
870730000 / 00 p. 3/6 UR101029
LDH-P
C unitest
Método UV optimizado (DGKC) para la determinación
de lactato deshidrogenasa (LDH) en suero

(LDH) tiene una gran variedad de aplicaciones clínicas. Por Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
ser una enzima intracelular, su elevación es índice de daño de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
tisular con la consecuente liberación de ésta a la circula- Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
ción. El daño puede variar desde una simple anoxia con acuerdo a la normativa local vigente.
(junto con las CK y AST), constituye un elemento importante hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
de diagnóstico. La misma comienza a elevarse 12-24 horas Reactivo A reconstituido: en refrigerador (2-10oC) es
después de producido el infarto; alcanza un pico entre las estable 24 horas a partir del momento de su reconstitución.
48-72 horas y permanece elevada hasta el séptimo o décimo
día. También se registra un aumento de actividad de LDH INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
total en pacientes con necrosis hepática (producida por REACTIVOS
agentes tóxicos o por infección aguda como la hepatitis viral) Cuando el espectrofotómetro ha sido llevado a cero con agua
e incluso acompañando a necrosis tubular renal, pielonefritis, destilada, lecturas de absorbancia del Reactivo A reconsti-
etc. En los tumores sanguíneos como leucemias y linfomas tuido inferiores a 0,700 D.O. o superiores a 1,800 D.O. (a
también se observan valores aumentados de la LDH. 340 nm) son indicio de deterioro del mismo.
En el líquido cefalorraquídeo (LCR) el valor normal es de
aproximadamente el 10% de su valor en suero, aumentando MUESTRA
marcadamente su valor en meningitis bacterianas. En las Suero
meningitis virales la LDH aumenta su valor solo en el 10% a) Recolección: obtener suero de la manera usual y separar
de los casos. del coágulo dentro de las dos horas de su obtención.
FUNDAMENTOS DEL METODO c) Sustancias interferentes conocidas: los sueros con he-
Basado en el siguiente esquema reaccional: mólisis visible o intensa pueden producir valores falsamente
LDH aumentados por lo que no deben ser usados.
piruvato + NADH + H+ L-lactato + NAD+ Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
Las concentraciones del ensayo están optimizadas de
acuerdo a la Sociedad Alemana de Química Clínica (DGKC).
suero debe ser preferentemente fresco. La LDH es estable
hasta 24 horas en refrigerador. No congelar.
REACTIVOS PROVISTOS
A. Reactivo A: viales para determinaciones individuales,
conteniendo NADH.
B. Reactivo B: solución de buffer fosfatos pH 7,5 conte-
niendo piruvato.
- Baño de agua a la temperatura indicada en el Procedi-
Concentraciones finales (según DGKC) miento a seguir.
fosfatos.................................................... 50 mmol/l; pH 7,5 - Cronómetro.
piruvato................................................................ 0,6 mmol/l
NADH................................................................ 0,18 mmol/l CONDICIONES DE REACCION
(disminución de absorbancia)
INSTRUCCIONES PARA SU USO - Longitud de onda: 340 nm (Hg 334 ó 366).
Reactivo B: listo para usar. - Temperatura de reacción: 25, 30 ó 37oC. Ver los VALORES
Reactivo A: agregar 3 ml de Reactivo B a un vial de Reactivo DE REFERENCIA correspondientes.
A. Tapar y agitar hasta disolución completa. - Tiempo de reacción: 3 minutos y 30 segundos.
870740000 / 00 p. 1/6
- Los volúmenes de muestra y reactivo se pueden reducir ro, la primera lectura (tiempo 0) es inferior a 0,700 D.O.
proporcionalmente sin que varíen los factores de cálculo. estando el Reactivo A (sustrato) en condiciones, indica
una muestra con muy alta actividad de LDH (que consume
NADH aún antes de esta lectura). En este caso, repetir la
PROCEDIMIENTO determinación con muestra diluida 1/10 con solución fisio-
lógica y multiplicar el resultado por la dilución efectuada.
A) 25oC
En una cubeta mantenida a la temperatura de trabajo,
colocar:
PERFORMANCE
Reactivo A reconstituido 3 ml a) Reproducibilidad: procesando simultáneamente repli-
Preincubar unos minutos, luego agregar: cados de una misma muestra, se obtiene:
Muestra 100 ul Nivel D.S. C.V.

135 U/l ± 8,25 U/l 6,11 %
Mezclar inmediatamente y disparar simultáneamente el 320 U/l ± 7,26 U/l 2,27 %
inicial (ver LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO) y b) Límite de detección: depende del espectrofotómetro em-
luego a los 1, 2 y 3 minutos de la primer lectura. Determi- pleado y de la longitud de onda. De acuerdo con la sensibilidad
nar la diferencia promedio de absorbancia/min (∆A/min), requerida, en espectrofotómetro a 340 nm (Hg 334 ó 366), con
restando cada lectura de la anterior y promediando los cubetas de caras paralelas de 1 cm de espesor, reproducibilidad
valores. Utilizar este promedio para los cálculos. ± 2 nm, luz espuria ≤ 0,5% y semiancho de banda ≤ 8 nm, para
un ∆A/min de 0,001, el mínimo cambio de actividad detectable
B) 30-37oC será de 5 U/l (a 340 nm y a 25oC).
Emplear 50 ul de Muestra, siguiendo el procedimiento c) Rango dinámico: el rango útil de lectura se extiende
antes indicado. hasta 0,200 ∆A/min (a 340 nm). Si la ∆A/min es superior
a 0,200 D.O. (340-334 nm) o 0,100 (366 nm) repetir la
determinación con muestra diluida 1/5 ó 1/10 con solución
CALCULO DE LOS RESULTADOS fisiológica, corrigiendo consecuentemente los resultados.
LDH (U/l) = ∆A/min x factor
PRESENTACION
- 20 x 3 ml (Cód. 1521351).
pondiente de acuerdo a la temperatura de reacción seleccio-
nada (30-37oC o 25oC) como se indica en la tabla de factores:
BIBLIOGRAFIA
Temperatura 30-37oC 25oC - D.G.K.C. - Z. Clin. Chem. 10:281 (1972).
340 nm 9.683 4.921 - I.F.C.C. - Clinica Chimica Acta 105:147 F (1980).
334 nm 9.871 5.016 - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
366 nm 17.941 9.118 AACC Press, 4th ed., 2001.
Temperatura 25oC 30oC (*) 37oC (*)
Valores (U/l) 100-240 120-320 180-450
(*) Calculados


LDH (U/l) x 0,017 = LDH (ukat/l)

- Absorbancia inicial baja: cuando una vez agregado el sue-
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Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
870740000 / 00 p. 3/6 UR111014
LDL Colesterol
C monofase AA
Para la determinación de LDL colesterol en suero o plasma
SIGNIFICACION CLINICA en el rótulo. Cerrar el vial y dejar 5 minutos. Luego disolver el conte-
Las lipoproteínas plasmáticas son partículas esféricas que nido del vial por agitación suave evitando la formación de espuma.
contienen cantidades variables de colesterol, triglicéridos,
fosfolípidos y proteínas. Estas partículas solubilizan y trans- PRECAUCIONES
portan el colesterol en el torrente sanguíneo. - Los Reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
La proporción relativa de proteína y lípido determina la - No pipetear con la boca.
densidad de estas lipoproteínas y provee las bases sobre - El Calibrador ha sido examinado para HBsAg, HCV y anticuer-
las cuales establecer una clasificación. Estas clases son: po contra HIV 1/2, encontrándose no Reactivo. No obstante
quilomicrones, lipoproteínas de muy baja densidad (VLDL debe procesarse como si se tratara de material infectivo.
- Very Low Density Lipoproteins), lipoproteínas de baja den- - Utilizar los Reactivos guardando las precauciones habitua-
sidad (LDL - Low Density Lipoproteins) y lipoproteínas de les de trabajo en el laboratorio de química clínica.
alta densidad (HDL - High Density Lipoproteins). Numerosos - Todos los Reactivos y las muestras deben descartarse de
estudios clínicos han demostrado que las diferentes clases acuerdo a la normativa local vigente.
de lipoproteínas tienen distintos y variados efectos en el
riesgo de enfermedad coronaria. Estos estudios señalan al ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
LDL colesterol como el factor clave en la patogénesis de la ALMACENAMIENTO
ateroesclerosis y la enfermedad cardíaca coronaria (ECC), Los Reactivos Provistos son estables en refrigerador (2-10oC)
mientras que el HDL colesterol es considerado como factor hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No congelar.
protectivo. Puede ocurrir un aumento en el LDL colesterol, Una vez abierto los Reactivos son estables durante 4 sema-
aún con concentraciones normales de colesterol, asociado nas en refrigerador (2-10oC).
a un incremento en el riesgo de ECC. Calibrador: estable en refrigerador (2-10oC) hasta la fecha
de vencimiento indicada en la caja. Una vez reconstituido
FUNDAMENTOS DEL METODO es estable 2 semanas en refrigerador (2-10 oC). Puede
El presente método es un ensayo homogéneo sin precipita- fraccionarse en alícuotas debiendo ser conservado a -80oC.
ción, en dos pasos. En el primero, se agrega un tensioactivo
(Reactivo A) que solubiliza las partículas lipoproteicas no- MUESTRA
LDL. El colesterol liberado es consumido por la colesterol es- Suero o plasma
terasa y la colesterol oxidasa en una reacción sin desarrollo a) Recolección: obtener la muestra de la manera usual.
de color. Un segundo tensioactivo (Reactivo B) solubiliza las b) Aditivos: en caso de que la muestra a emplear sea plasma
partículas de LDL formándose, por la presencia de enzimas y usar EDTA o heparina como anticoagulantes.
un Reactivo cromogénico, un color proporcional a la cantidad c) Sustancias interferentes conocidas: no se encuentran
de LDL colesterol presente en la muestra. interferencias por ácido ascórbico hasta 50 mg/dl, hemoglo-
bina hasta 500 mg/dl, bilirrubina hasta 20 mg/dl y γ-globulina
REACTIVOS PROVISTOS hasta 50 g/l. En caso de muestras con concentraciones
A. Reactivo A: solución conteniendo colesterol esterasa superiores de interferentes, deberán diluirse con solución
1000 U/l, colesterol oxidasa 1200 U/l, peroxidasa 1250 U/l, fisiológica antes de proceder a su ensayo, multiplicando el
ascorbato oxidasa 3000 U/l, 4-aminoantipirina 1 g/l y tensio- resultado obtenido por la dilución efectuada.
activo 7 g/l en buffer MES 50 mM. Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
B. Reactivo B: solución conteniendo N,N-bis-(4-sulfobutil)- drogas en el presente método.
m-toluidina disódica (DSBmT) 0,4 g/l y tensioactivo 10 g/l d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento:
en buffer MES 50 mM. centrifugar y separar el suero del coágulo dentro de las 3
Calibrador: suero humano liofilizado conteniendo lipopro- horas posteriores a la extracción. De no procesar las mues-
teínas de diversos tipos incluyendo LDL. La concentración tras inmediatamente, las mismas pueden ser conservadas
es variable lote a lote (ver título en el rótulo). durante 5 días en refrigerador (2-10oC).

Reactivos A y B: listos para usar. - Material volumétrico para medir los volúmenes indicados.
Calibrador: reconstituir con el volumen de agua destilada indicado - Analizador automático.
864124500 / 03 p. 1/6
Método LDL Colesterol Referencia
PROCEDIMIENTO
monofase AA
(analizadores automáticos)
A continuación se detalla un procedimiento general Nº de muestras 54 54
para LDL Colesterol monofase AA en un analizador promedio (mg/dl) 122,5 125,1
automático. Cuando se implemente la técnica para desvío standard (mg/dl) 30,7 30,9
un analizador en particular seguir las instrucciones de coeficiente de correlación: 0,96
trabajo del mismo.
Muestra o Calibrador 3 ul Método LDL Colesterol Método
monofase AA directo
Reactivo A 300 ul
Nº de muestras 92 92
Incubación durante 5 minutos a 37oC. Lectura de absor- promedio (mg/dl) 120,0 122,8
bancia a 660/546 nm (Blanco de Muestra). desvío standard (mg/dl) 30,5 31,6
Reactivo B 100 ul coeficiente de correlación: 0,97
Incubación durante 5 minutos a 37oC. Lectura del resul-
b) Precisión: procesando simultáneamente 20 muestras en
tado a 660/546 nm (concentración de LDL-colesterol).
el mismo día se obtuvo la siguiente variación intraensayo:
Nivel D.S. C.V.
CALIBRACION 98,1 mg/dl ± 0,72 mg/dl 0,73 %
El Calibrador debe procesarse junto con las muestras y en la 146,5 mg/dl ± 0,96 mg/dl 0,66 %
misma forma que éstas. Las concentraciones del Calibrador 209,8 mg/dl ± 1,31 mg/dl 0,62 %
se encuentran alrededor de los niveles de decisión médica
y son variables lote a lote (ver título en el rótulo). Ingresar c) Límite de detección: 0,278 mg/dl.
el valor de concentración del calibrador cada vez que se
cambie de lote.
LDL colesterol (mmol/l) = LDL colesterol (mg/dl) x 0,02586
PRESENTACION
de LDL colesterol, con cada determinación.
BIBLIOGRAFIA
- Crouse, J.R. et al. - J- Lipid Res. 26: 566, 1985.
- Barr, D.P.; Russ, E.M.; Eder, H.A. - Am. J. Med. 11:480,
Program (NCEP) provee los siguientes valores de LDL 1951.
colesterol en relación al riesgo de contraer enfermedad - William, P. Robinson, D.; Baily, A. - Lancet 1:72, 1979.
cardíaca coronaria (ECC): - Kannel, W.B.; et al. - Am. Intern. Med. 90/1:85, 1979.
- Riesgo bajo o nulo (sujetos normales): valores de LDL - Bachorik, P.S.; et al. - Clin. Chem. 41/10, 1995.
colesterol menores de 129 mg/dl. - Grundy, S.M. et al. - JAMA 269/23:3015, 1993.
- Riesgo moderado a elevado (individuos con probabilidad - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
de contraer ECC): valores entre 130 y 189 mg/dl. AACC Press, 4th ed., 2001.
- Riesgo muy elevado (individuos sospechosos de padecer - Tietz, N.W. - W.B. Saunders Co., Philadelphia, p.256, 1986.
ECC): valores de LDL colesterol ≥ 190 mg/dl. - Expert Panel of National Cholesterol Education Program -
No obstante, es recomendable que cada laboratorio esta- JAMA 285/19:2486 (2001).
blezca sus propios valores de referencia.

No deben emplearse anticoagulantes que contengan citrato.
PERFORMANCE
a) Exactitud: la exactitud del método descripto se verificó
por comparación con los valores obtenidos por el método
de referencia de ultracentrifugación y análisis del colesterol
y con el método directo de inmunoseparación de LDL.
Los resultados de la comparación fueron los siguientes:
864124500 / 03 p. 2/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
864124500 / 03 p. 3/6 UR140128
LDL Colesterol
C Reactivo Precipitante
Para la separación de las lipoproteínas de baja densidad
(LDL) en suero
SIGNIFICACION CLINICA sulfato de polivinilo disuelto en polietilenglicol (PM: 600) al

El contenido aproximado de colesterol en cada familia de 25%, pH 6,7.
lipoproteínas es (en % por unidad de peso): 1% en los
quilomicrones, 18% en las VLDL, 50% en las LDL y 23% REACTIVOS NO PROVISTOS
en las HDL. Dado que cada familia posee distinta actividad Colestat enzimático, Colestat enzimático AA o Colestat
biológica, el significado clínico de un aumento de colesterol enzimático AA líquida, de Wiener lab.
depende de la o las lipoproteínas que se encuentran en
exceso. INSTRUCCIONES PARA SU USO
Por otra parte, los mecanismos reguladores de los niveles Reactivo A: listo para usar.
plasmáticos de lipoproteínas son muy complejos y pueden
ser afectados por múltiples factores (genéticos, ambientales, PRECAUCIONES
fisiológicos o patológicos), siendo posible encontrar valores El reactivo es para uso diagnóstico "in vitro".
de colesterol total cercanos al rango normal acompañados Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
de alteraciones en las fracciones lipoproteicas. de trabajo en el laboratorio de química clínica.
Las HDL y las LDL han sido las más estudiadas por su im Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
portante actividad biológica: acuerdo a la normativa local vigente.
- las LDL, producto del metabolismo de las VLDL en plasma,
son las encargadas del transporte del colesterol exógeno ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
(y en mucho menos proporción, endógeno) hacia el interior ALMACENAMIENTO
de las células; Reactivo A: estable en refrigerador (2-10oC) hasta la fecha
- las HDL, sintetizadas en el hígado, remueven el colesterol no de vencimiento indicada en la caja.
utilizado por las células (dentro de ciertos límites de concen
tración), transportándolo hacia el hígado para su degradación. INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
Diversos estudios epidemiológicos han confirmado que el REACTIVOS
exceso de colesterol de LDL con respecto a un valor crítico Todo cambio en la coloración u otro aspecto físico del reac
(1,9 g/l) debe ser considerado como factor de riesgo para el tivo, puede ser indicio de deterioro del mismo.
desarrollo de enfermedad cardíaca coronaria, considerando
que el efecto protector de las HDL sólo parece tener relevan MUESTRA
cia dentro de cierto rango de concentraciones de colesterol Suero
circulante. Tales hallazgos permiten deducir que los valores a) Recolección: el paciente debe estar en ayunas (de 12 a
aislados de colesterol de HDL o de LDL no pueden tomarse 16 horas). Obtener suero de la manera usual y separar del
como índices predictivos de riesgo, sino que es necesario coágulo dentro de la hora de la extracción.
conformar un perfil lipídico con los valores de colesterol total, b) Aditivos: no se requieren.
colesterol de HDL y colesterol de LDL. c) Sustancias interferentes conocidas: los sueros hiper
trigliceridémicos (con quilomicronemia) producen sobrena
FUNDAMENTOS DEL METODO dantes turbios; la bilirrubina interfiere en niveles mayores
Las lipoproteínas de baja densidad (LDL o β-lipoproteínas) se de 50 mg/l.
separan del suero precipitándolas selectivamente mediante Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
el agregado de polímeros de alto peso molecular. Luego de drogas en el presente método.
centrifugar, en el sobrenadante quedan las demás lipoproteí d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: el
nas (HDL y VLDL); el colesterol ligado a las mismas se de suero debe ser preferentemente fresco. En caso de no proce
termina empleando el sistema enzimático Colesterol oxidasa/ sarse en el momento, puede conservarse en el refrigerador
Peroxidasa con colorimetría según Trinder (Fenol/4-AF). (2-10oC) durante no más de 24 horas contadas a partir del
Por diferencia entre el colesterol total y el determinado en momento de la extracción. No congelar.
el sobrenadante, se obtiene el colesterol unido a las LDL.
REACTIVOS PROVISTOS - Centrífuga.
A. Reactivo A (Reactivo Precipitante): solución 1 g/l de - Espectrofotómetro o fotocolorímetro.
870750000 / 01 p. 1/9
- Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados. VALORES DE REFERENCIA
- Tubos de Kahn. El panel de expertos del National Cholesterol Education
- Cubetas espectrofotométricas de caras paralelas. Program (NCEP) provee los siguientes valores de LDL
- Baño de agua a 37oC. colesterol en relación al riesgo de contraer enfermedad
- Reloj o timer. cardíaca coronaria (ECC):
- Riesgo bajo o nulo (sujetos normales): valores de LDL
colesterol menores de 1,29 g/l.
PROCEDIMIENTO - Riesgo moderado a elevado (individuos con probabilidad
En un tubo de Kahn, colocar: de contraer ECC): valores entre 1,30 y 1,89 g/l.
- Riesgo muy elevado (individuos sospechosos de padecer
Muestra 200 ul
ECC): valores de LDL colesterol ≥ 1,90 g/l.
Reactivo A 100 ul No obstante, es recomendable que cada laboratorio esta
Homogeneizar agitando (sin invertir) durante 20 segun blezca sus propios valores de referencia.
dos y dejar 15 minutos en un baño de agua a 20-25oC.
Centrifugar 15 minutos a 3000 r.p.m. Separar inme LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
diatamente el sobrenadante. Ver LIMITACIONES DEL Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
Cuando se procesen muestras ictéricas, deberán diluirse
PROCEDIMIENTO.
los sueros 1/2 ó 1/3 con solución fisiológica y emplearse
Usar el sobrenadante como Muestra para el ensayo
el procedimiento habitual, teniendo en cuenta el factor de
colorimétrico.
dilución para los cálculos.
Cuando el LDL colesterol no puede separarse por com
pleto en una centrífuga común debido a niveles elevados
B S D de triglicéridos, puede efectuarse la determinación de la
Sobrenadante - - 100 ul siguiente manera:
Seguir las instrucciones indicadas en PROCEDIMIENTO
Standard - 20 ul - hasta la incubación en baño de agua a 20-25oC, 15 minutos,
Reactivo de Trabajo 2 ml 2 ml 2 ml luego colocar la mezcla de reacción en capilares y centrifugar
en centrífugas de microhematocrito, a 10.000 r.p.m. durante 5
Mezclar e incubar 5 minutos a 37 C si se usa el Reactivo
o
minutos. Cortar el capilar desechando el precipitado y utilizar
de Trabajo de Colestat enzimático AA/líquida o 15
el sobrenadante límpido para la prueba.
minutos a 37oC si se usa el de Colestat enzimático.
En todos los casos en que los valores de colesterol unido
Retirar del baño y enfriar. Leer en espectrofotómetro a a HDL y VLDL (D x f, según los cálculos) sean superiores
505 nm o en fotocolorímetro con filtro verde (490-530 a 1 g/l, se debe repetir la determinación con los mismos
nm), llevando el aparato a cero de absorbancia con el sueros empleando 100 ul de muestra y 200 ul de Reactivo
Blanco. A. Continuar con la técnica descripta, tomando 100 ul de
sobrenadante y utilizando el factor 1,248 para los cálculos
en lugar del anterior.
CALCULO DE LOS RESULTADOS No dejar el precipitado en contacto con el sobrenadante,
LDL colesterol (g/l) = Colesterol total (*) - (D x f) debido a que puede haber redisolución provocando valores
de lecturas elevados con la consiguiente disminución de los
0,624 valores de LDL colesterol.
f=
S
PERFORMANCE
(*) Valor obtenido con Colestat enzimático o Colestat a) Reproducibilidad: procesando replicados de una misma
enzimático AA/líquida. muestra en el día, se obtienen los siguientes valores:
El valor 0,624 surge de: Nivel D.S. C.V.
1,14 g/l ± 0,03 g/l 2,6 %
VFE VRE VS
0,624 = 2 (g/l) x x x 2,03 g/l ± 0,04 g/l 2,0 %
VM VRS VE
b) Linealidad: la reacción es lineal hasta 5 g/l.
donde: c) Límite de detección: en espectrofotómetro, para una
VFE = volumen final del extracto = 0,3 ml variación de absorbancia de 0,001 D.O., el cambio mínimo
VM = volumen de muestra procesada = 0,2 ml (200 ul) de concentración detectable será de 0,0063 g/l de colesterol.
VRE = volumen de reacción con el extracto = 2,1 ml
VRS = volumen de reacción con el Standard = 2,02 ml PRESENTACION
VS = volumen de Standard en la reacción = 0,02 ml (20 ul) Para procesar 100 muestras (Cód. 1220104).
VE = volumen de extracto en la reacción = 0,1 ml (100 ul)
Si se emplean volúmenes diferentes el factor 0,624 varía y BIBLIOGRAFIA
debe ser calculado nuevamente. - Seidel, D. - Ann. Clin. Biochem. 19:278 (1982).
870750000 / 01 p. 2/9
- Levy, R.I. - Clin. Chem. 27/5:653 (1981). SIMBOLOS
- Coniglio, R.I.- Acta Bioq. Clin. Latinoam. XXIII/2:201 (1989). Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
- Expert Panel of National Cholesterol Education Program - reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
JAMA 285/19:2486 (2001).
- Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests", Este producto cumple con los requerimientos previstos

 No congelar
F Riesgo biológico
Cont. Contenido
g Número de lote
M Elaborado por:
Xn
Nocivo
Xi
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo
Wiener lab.
Riobamba 2944
Bioquímica
870750000 / 01 p. 3/9 UR140909
LINEA LIQUIDA
Lipasa
C Método cinético para la determinación de lipasa en suero y plasma
AA

La lipasa producida principalmente en el páncreas exócrino REACTIVOS
y en pequeñas cantidades por las glándulas salivales y El Reactivo A es un líquido límpido. Si presenta alguna
mucosas gástricas, intestinales y pulmonares, escinde las turbiedad, no debe ser utilizado.
uniones de los ésteres de glicerol de los ácidos grasos. El Reactivo B es una microemulsión levemente opalescente
La determinación de la lipasa es útil para el diagnóstico y de color naranja. Si presenta una coloración netamente
tratamiento de las patologías del páncreas como pancreatitis rojiza, debe descartarse.
aguda y obstrucción del conducto pancreático.
El diagnóstico clínico debe realizarse teniendo en cuenta la MUESTRA
anamnesis del paciente, su historia clínica y otros hallazgos Suero o plasma heparinizado
de laboratorio. a) Recolección: obtener suero de la manera usual. Separar
del coágulo lo más rápidamente posible.
FUNDAMENTOS DEL METODO b) Aditivos: en caso de usar plasma, debe utilizarse hepa-
La lipasa hidroliza el sustrato definido 1,2-O-dilauril-rac- rina para su obtención.
glicerol-3-glutárico-(6’-metilresorufina)-éster para liberar c) Sustancias interferentes conocidas: no se observan
ácido glutárico-metilresorufina éster, compuesto inestable interferencias por bilirrubina hasta 40 mg/dl, hemoglobina
que se descompone espontáneamente liberando un com- hasta 500 mg/dl, triglicéridos hasta 1200 mg/dl.
puesto coloreado (metilresorufina) que se mide a 570 nm. La Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
velocidad de aparición de color es directamente proporcional drogas en el presente método.
a la actividad enzimática. d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
lipasa en suero o plasma es estable una semana refrigerada
REACTIVOS PROVISTOS (2-10oC) y un año en freezer (-20oC)
A. Reactivo A: buffer de Goods 50 mmol/l, pH 8,0, con
colipasa y sales biliares. MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
B. Reactivo B: solución de 1,2-O-dilauril-rac-glicerol-3-glu- - Material volumétrico para medir los volúmenes indicados.
tárico-(6’-metilresorufina)-éster (sustrato de la lipasa) en - Analizador automático
buffer tartrato 10 mmol/l.
REACTIVOS NO PROVISTOS PROCEDIMIENTO

- Calibrador A plus de Wiener lab. (analizador automático)
- Solución fisiológica (NaCl 9 g/l). A continuación se detalla un procedimiento general
para Lipasa AA líquida en un analizador automático.
INSTRUCCIONES PARA SU USO Cuando se implemente la técnica para un analizador
Reactivos Provistos: listos para usar. en particular, seguir las instrucciones de trabajo del
mismo.
PRECAUCIONES Muestra o Calibrador 2 ul
Reactivo A 100 ul
de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos. Incubación durante 300 segundos a 37oC.
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de Reactivo B 25 ul
Incubación durante 90 segundos a 37 C. Lectura de
o
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE absorbancia inicial a 575 nm (A1). A los 60 segundos

ALMACENAMIENTO exactamente medidos con cronómetro, se registra una
Los Reactivos Provistos son estables en refrigerador (2- segunda lectura (A2).
10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. Para obtener el resultado de lipasa en U/l, se multiplica
Proteger de la luz. la diferencia de absorbancia (∆A = A2 - A1) por el factor.
864118000 / 04 p. 1/6
CALIBRACION - 1 x 20 ml Reactivo A
El Calibrador A plus es procesado de la misma manera - 1 x 12 ml Reactivo B
que las muestras y a partir de él se calcula el factor corres- (Cód. 1009339)
pondiente. Ingresar el valor de concentración del calibrador,
cada vez que se cambie de lote. - 2 x 20 ml Reactivo A
METODO DE CONTROL DE CALIDAD (Cód. 1009628)
(Standatrol S-E 2 niveles) con actividades conocidas de BIBLIOGRAFIA
lipasa, con cada determinación. - Fossati, P.; Ponti, M.; Paris, P.; Berti, G. and Tarenghi, G.
- Clin. Chem. 38:211, 1992.
VALORES DE REFERENCIA - Tietz N:W: et al. - Clin. Chem. 39:746, 1993.
Adultos: 13 - 60 U/l (37oC) - Kazmierczak, S.; Catrou, P.; Van Lente, F. - Clin. Chem.
Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios 39:1960, 1993.
valores de referencia. - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
CONVERSION DE UNIDADES AL SISTEMA SI - Junge W., Abicht K., Goldman J. et al. - Clin. Chem. Lab.
Lipasa (U/l) x 0,017 = Lipasa (ukat/l) Med. 1999; 37. Special Suppl.:469.
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO NCCLS) - Protocol EP15-A, 2005 / EP 17A, 2004.
Ver sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
Se recomienda utilizar Standatrol S-E 2 niveles de Wiener
lab. como material de control de calidad, ya que con controles
rentes al rango especificado dado que los mismos dependen
del método o sistema utlizado.
Es importante evitar la contaminación por arrastre en cubetas
y agujas cuando se han utilizado para determinaciones de
triglicéridos, colesterol y HDL y LDL colesterol. Para ello, se
recomienda emplear los programas de limpieza adicionales
que se indican en cada analizador.
Es conveniente realizar la determinación de lipasa en forma
independiente de los otros ensayos.
PERFORMANCE
a) Reproducibilidad: basado en el protocolo EP15-A del CLSI,
se obtuvieron los siguientes coeficientes de variación como
estimadores de la precisión intraensayo (C.Vi) y total (C.Vt):
Nivel C.Vi C.Vt
34,6 U/l ± 0,99 % 4,00 %
59,7 U/l ± 2,80 % 3,85 %
97,0 U/l ± 1,51 % 4,03 %
b) Límite de detección: 2 U/l
c) Linealidad: la reacción es linal hasta 300 U/l. Para valores
superiores diluir la muestra 1:10 con solución fisiológica
(ClNa 9 g/l) y repetir la determinación multiplicando el re-
sultado hallado por 10.

usarse Calibrador A plus de Wiener lab.
PRESENTACION
(Cód. 1009284)
864118000 / 04 p. 2/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
864118000 / 04 p. 3/6 UR130305
Lipid
Lote: 1508172340
C Control
Para control de precisión en la determinación de lípidos
Nivel 1: 172340
Nivel 2: 172340
APLICACIONES VALORES ESPERADOS

Lipid Control es un control líquido, diseñado para el estudio Los valores obtenidos deben estar dentro del rango acep-
de precisión en la determinación de lípidos en suero o plasma. table establecido. No obstante se recomienda que cada
Consultar la tabla de valores asignados para los dos niveles laboratorio establezca su propia media y utilice la provista
provistos, debido a que los mismos son lote específico. sólo como orientación.
REACTIVOS PROVISTOS LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO

Control (1 y 2): controles líquidos, preparados a partir de Las limitaciones de cada método en particular están incluidas
suero humano conteniendo dos niveles diferentes de lípidos. en los manuales de instrucciones de cada analito.
El empleo de métodos distintos a kits Wiener lab., para
establecer los valores esperados pueden originar valores
Homogenizar el contenido de cada vial por inversión, antes diferentes a los indicados.
de realizar el ensayo. No agitar.
Retirar la cantidad de Control a utilizar. No volver el material PRESENTACION
utilizado al vial original. Una vez utilizado, tapar inmediata- - 2 x 3 ml (Cód. 1999740).
mente y conservar en refrigerador (2-10oC). Evitar la conta-
minación de los controles.
PRECAUCIONES
reactivo para HBsAg, HCV y HIV. Sin embargo los controles
y todas las muestras de sangre deben manejarse como si
se trataran de material infectivo.
de trabajo en el laboratorio de bioquímica clínica.
ESTABILIDAD EN INSTRUCCIONES DE
ALMACENAMIENTO
Reactivos Provistos: estables a 2-10oC hasta la fecha de
vencimiento indicada en la caja.

REACTIVOS
Cualquier variación de los caracteres organolépticos o con-
taminación de los reactivos, puede ser indicio de deterioro
de los mismos. La presencia de turbidez o crecimiento mi-
crobiano es indicio de contaminación y deterioro del control,
por lo que debe desecharse.
PROCEDIMIENTO
Los controles deben ser usados de la misma manera que
que acompañan al equipo de reactivos utilizado en cada caso.
864118200 / 05 p. 1/6
VALORES ASIGNADOS PARA BT 3000 PLUS / CB 350i
NIVEL 1 NIVEL 2
ANALITO METODO VALOR RANGO VALOR RANGO
MEDIO ACEPTABLE MEDIO ACEPTABLE
Apolipoproteína A-I
Apo A-I Turbitest AA 86,5 73,5 99,5 158 134 182
(mg/dl)
Apolipoproteína B
Apo B Turbitest AA 105 89 121 183 156 210
(ug/dl)
Colesterol
Colestat enzimático AA líquida 152 129 175 283 241 325
(mg/dl)
HDL Colesterol
HDL Colesterol monofase AA plus 33,2 24,9 41,5 58,5 43,9 73,1
(mg/dl)
LDL Colesterol
LDL Colesterol monofase AA 73,2 54,9 91,5 163 122 204
(mg/dl)
Triglicéridos
TG Color GPO/PAP AA líquida 115 98 132 432 367 497
(mg/dl)
VALORES ASIGNADOS PARA KONELAB 20, 30, 60 / CT 200, 300, 600
NIVEL 1 NIVEL 2
(mg/dl)
Apolipoproteína B
Apo B Turbitest AA 85,7 72,8 98,6 165 140 190
(ug/dl)
Colesterol
(mg/dl)
HDL Colesterol
(mg/dl)
LDL Colesterol
LDL Colesterol monofase AA 86,9 65,2 109 168 126 210
(mg/dl)
Triglicéridos
(mg/dl)
864118200 / 05 p. 2/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
864118200 / 05 p. 3/6 UR150826
Lipid
Lote: 1511178270
C Control
Para control de precisión en la determinación de lípidos
Nivel 1: 178270
Nivel 2: 178270
APLICACIONES VALORES ESPERADOS

Lipid Control es un control líquido, diseñado para el estudio Los valores obtenidos deben estar dentro del rango acep-
de precisión en la determinación de lípidos en suero o plasma. table establecido. No obstante se recomienda que cada
Consultar la tabla de valores asignados para los dos niveles laboratorio establezca su propia media y utilice la provista
provistos, debido a que los mismos son lote específico. sólo como orientación.
REACTIVOS PROVISTOS LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO

Control (1 y 2): controles líquidos, preparados a partir de Las limitaciones de cada método en particular están incluidas
suero humano conteniendo dos niveles diferentes de lípidos. en los manuales de instrucciones de cada analito.
El empleo de métodos distintos a kits Wiener lab., para
establecer los valores esperados pueden originar valores
Homogenizar el contenido de cada vial por inversión, antes diferentes a los indicados.
de realizar el ensayo. No agitar.
Retirar la cantidad de Control a utilizar. No volver el material PRESENTACION
utilizado al vial original. Una vez utilizado, tapar inmediata- - 2 x 3 ml (Cód. 1999740).
mente y conservar en refrigerador (2-10oC). Evitar la conta-
minación de los controles.
PRECAUCIONES
reactivo para HBsAg, HCV y HIV. Sin embargo los controles
y todas las muestras de sangre deben manejarse como si
se trataran de material infectivo.
de trabajo en el laboratorio de bioquímica clínica.
ESTABILIDAD EN INSTRUCCIONES DE
ALMACENAMIENTO
Reactivos Provistos: estables a 2-10oC hasta la fecha de
vencimiento indicada en la caja.

REACTIVOS
Cualquier variación de los caracteres organolépticos o con-
taminación de los reactivos, puede ser indicio de deterioro
de los mismos. La presencia de turbidez o crecimiento mi-
crobiano es indicio de contaminación y deterioro del control,
por lo que debe desecharse.
PROCEDIMIENTO
Los controles deben ser usados de la misma manera que
que acompañan al equipo de reactivos utilizado en cada caso.
864118200 / 06 p. 1/6
VALORES ASIGNADOS PARA BT 3000 PLUS / CB 350i
NIVEL 1 NIVEL 2
(mg/dl)
Apolipoproteína B
Apo B Turbitest AA 105 89 121 183 156 210
(ug/dl)
Colesterol
(mg/dl)
HDL Colesterol
(mg/dl)
LDL Colesterol
LDL Colesterol monofase AA 73,2 54,9 91,5 163 122 204
(mg/dl)
Triglicéridos
(mg/dl)
VALORES ASIGNADOS PARA KONELAB 20, 30, 60 / CT 200, 300, 600
NIVEL 1 NIVEL 2
(mg/dl)
Apolipoproteína B
Apo B Turbitest AA 85,7 72,8 98,6 165 140 190
(ug/dl)
Colesterol
(mg/dl)
HDL Colesterol
(mg/dl)
LDL Colesterol
LDL Colesterol monofase AA 86,9 65,2 109 168 126 210
(mg/dl)
Triglicéridos
(mg/dl)
864118200 / 06 p. 2/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
864118200 / 06 p. 3/6 UR151110
Magnesium
C Para la determinación de magnesio en suero, plasma y orina
CPZ

El magnesio (Mg) es uno de los iones más abundantes del Reactivos Provistos: listos para usar.
organismo. El 60% del Mg del organismo se encuentra en
los huesos y el resto está repartido entre músculos y otros PRECAUCIONES
tejidos blandos. Los reactivos son para uso diagnóstico “in vitro”.
El Mg cumple un rol muy importante en la fisiología humana. Las muestras de pacientes deben manipularse como si fueran
Participa en el metabolismo energético a través de la activa- capaces de transmitir infección.
ción del ATP, en la transferencia de fosfatos de alta energía Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
y es el ion activador de muchas enzimas involucradas en de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
el metabolismo de lípidos, carbohidratos y proteínas. El Mg Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
es un mediador en mecanismos de conducción y transporte acuerdo a la normativa vigente.
a través de membranas. Es esencial en la preservación de
estructuras macromoleculares de DNA, RNA y ribosomas y ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
en la formación del hueso y el mantenimiento de la presión ALMACENAMIENTO
osmótica. Reactivos Provistos: estables en refrigerador (2-10oC)
La hipomagnesemia está muy asociada a la deficiencia de hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
otros iones como el P, K y Ca. Las causas de hipomagnese-
mia son múltiples: diarreas crónicas y agudas, síndromes de MUESTRA
mala absorción, succión nasogástrica prolongada y vómitos, Suero, plasma heparinizado y orina
fístulas intestinales y biliares, deterioro de la conservación a) Recolección:
renal, diabetes mellitus, hipertiroidismo, hiperaldosteronismo Suero o plasma: obtener la muestra de la manera habitual.
primario, alcoholismo crónico. Orina: acidificar la orina con unas gotas de HCl concentrado
El exceso de Mg puede darse por incorporación o adminis- hasta alcanzar un pH menor a 2.
tración excesiva de sales de Mg y en general se asocia a b) Aditivos: en caso de que la muestra a emplear sea plasma
falla renal. Otras patologías asociadas a hipermagnesemia utilizar heparina como anticoagulante. Los anticoagulantes
son: hipercalcemia hipocalciúrica, hipotiroidismo, deficiencia tales como EDTA, citrato y oxalato forman complejos con el
de mineralocorticoides, etc. Mg, provocando resultados erróneos.
c) Sustancias interferentes conocidas: no emplear mues-
FUNDAMENTOS DEL METODO tras hemolizadas, lipémicas o contaminadas. Las muestras
El magnesio presente en la muestra se une al clorofosfonazo III que poseen precipitados deben ser centrifugadas previo a
(CPZ III) produciendo un incremento de absorbancia a 660 nm. su ensayo. La contaminación con eritrocitos puede elevar los
El agregado de EDTA sustrae el Mg del complejo Mg-CPZ resultados ya que el nivel de Mg en los mismos es mayor que en
III, libera el CPZ III y permite la lectura del blanco. La dife- suero. No interfieren: triglicéridos hasta 1300 mg/dl, hemoglobina
rencia de absorbancia entre Mg-CPZ III y CPZ III equivale hasta 800 mg/dl, bilirrubina directa hasta 21 mg/dl, bilirrubina
a la absorbancia debida sólo al Mg. La presencia de EGTA total hasta 40 mg/dl, calcio hasta 45 mg/dl y heparina hasta
evita que el calcio interfiera en la reacción. 50 UI/ml.
pH 7,5 Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
Mg2+ + CPZ III Mg-CPZ III drogas en el presente método.
pH 7,5 d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: las
Mg-CPZ III + EDTA Mg-EDTA + CPZ III muestras de suero o plasma pueden conservarse hasta 7
días a 2-10oC o a 15-25oC y un año congeladas (a -20oC).
REACTIVOS PROVISTOS Las muestras de orina hasta 3 días a 2-10oC o a 15-25oC
A. Reactivo A: buffer TES 145 mM, CPZ III 0,2 mM, EGTA y un año congeladas (a -20oC). Evitar congelamientos y
10 mM, pH 7,5. descongelamientos repetidos.
B. Reactivo B: buffer TES 100 mM, EDTA 17 mM, pH 7,5.
REACTIVOS NO PROVISTOS - Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados.
Calibrador A plus de Wiener lab. - Analizador automático.
864112520 / 01 p. 1/6
PROCEDIMIENTO Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
(analizadores automáticos) Se recomienda recalibrar, cuando se cambia de lote de
A continuación se detalla un procedimiento general para reactivo o cuando el control de calidad así lo determina.
Magnesium CPZ en un analizador automático. Cuando Para preservar la integridad de los reactivos debe evitarse
se implemente la técnica para un analizador en particular todo tipo de contaminaciones, empleando para la medición
seguir las instrucciones de trabajo del mismo. únicamente micropipetas perfectamente limpias y secas.
Reactivo A 160 ul
PERFORMANCE
Muestra o Calibrador 4 ul a) Reproducibilidad: se evaluó a través del protocolo
Incubación durante 300 segundos a 37oC. Lectura de EP5-A2 del CLSI. Para ello se procesaron muestras con
absorbancia inicial a 660 nm (DO1). distintos niveles de Mg. Con los datos obtenidos se calculó
la precisión intraensayo y total.
Reactivo B 28 ul
Incubación durante 180 segundos a 37 C. Lectura de
o
absorbancia a 660 nm (DO2). Nivel D.S. C.V.

Para obtener los resultados, el analizador calcula la di- 1,8 mg/dl ± 0,016 mg/dl 0,84%
ferencia de absorbancia (∆A = DO2 - DO1) y la multiplica 4,0 mg/dl ± 0,028 mg/dl 0,69%
por el factor obtenido en la calibración. Precisión Total
Nivel D.S. C.V.
1,8 mg/dl ± 0,046 mg/dl 2,5%
CALIBRACION 4,0 mg/dl ± 0,065 mg/dl 1,6%
El Calibrador A plus de Wiener lab. es procesado de la
misma manera que las muestras y a partir de él se calcula b) Límite de detección: 0,17 mg/dl.
el factor correspondiente. c) Límite de cuantificación: 0,35 mg/dl.
d) Linealidad: la reacción es lineal hasta 6 mg/dl.
METODO DE CONTROL DE CALIDAD Estos datos de performance fueron obtenidos empleando
Si la muestra a ensayar es suero o plasma, procesar 2 ni- analizador automático Konelab 60i, por lo tanto dichos
veles de un material de control de calidad (Standatrol S-E valores pueden variar cuando se emplea otro analizador.
2 niveles) con concentraciones conocidas de magnesio.
En el caso de muestras de orina, utilizar un control con PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS
base de orina. Para las instrucciones de programación consulte el manual
Los controles son procesados de la misma manera que las del usuario del analizador en uso. Para la calibración debe
muestras. emplearse Calibrador A plus de Wiener lab.
VALORES DE REFERENCIA PRESENTACION

Suero o plasma: 1,7 a 2,5 mg/dl (0,70 a 1,05 mmol/l) 105 ml: - 1 x 90 ml Reactivo A
Orina: 60 a 210 mg/24hs
(Cód. 1999803)
2,5 a 8,5 mmol/24 hs
4,10 a 13,80 mg/dl*
*Considerando un volumen de orina de 1,5 L/24 hs - 2 x 9 ml Reactivo B
(Cód. 1009289)
de referencia: 140 ml: - 2 x 60 ml Reactivo A
Suero o plasma: 1,6 a 2,6 mg/dl (0,66 a 1,07 mmol/l) - 2 x 10 ml Reactivo B
Orina: 3,0 a 5,0 mmol/24 hs (Cód. 1009367)
Cada laboratorio debe establecer sus propios valores de 140 ml: - 2 x 60 ml Reactivo A
referencia. - 2 x 10 ml Reactivo B
Los resultados obtenidos deberán ser evaluados en conjunto (Cód. 1009629)
con la historia clínica del paciente, el examen médico y otros
hallazgos de laboratorio. BIBLIOGRAFIA
- Tietz Fundamentals of clinical chemistry - Burtis, C., Ash-
CONVERSION DE UNIDADES wood, E. (5º Edition) WB Saunders, 2001.
Mg (mg/dl) = Mg (mmol/l) x 2,43 - Clinical Chemistry Principles and Technics, 2nd Edition,
Mg (mg/dl) = Mg (mEq/l) x 1,215 Henry, R.J.; Connon, D.C.; Winkelman, J.W., p 670-673,
Mg (mmol/día) = Mg (mEq/día) x 0,5 2001.
864112520 / 01 p. 2/6
- Young, DS. Effects of preanalytical variables on clinical SIMBOLOS
laboratory test. AACC Press. Third Edition, 2007. Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
- Schmidt-Gayk, H. - Measurement of calcium, phosphate reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
and magnesium - In: Dynamics of bone and cartilage me-
C
tabolism. Academic Press, p.487-502, 2006. Este producto cumple con los requerimientos previstos
- EP5-A2 Vol. 24 Nº 25 del CLSI. Evaluation of precision por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios
performance of quantitative measurement methods (ap- para el diagnóstico "in vitro"
proved guideline - second edition).
- EP17-A2 Vol. 24 Nº 34 del CLSI. Protocols for determination
of limits of detection and limits of quantitation; approved
guideline.
 No congelar
F Riesgo biológico
Cont. Contenido
g Número de lote
M Elaborado por:
Xn
Nocivo
Xi
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
864112520 / 01 p. 3/6 UR120903
Mg-color
C Método colorimétrico directo para la determinación
AA
cuantitativa de magnesio en líquidos biológicos
SIGNIFICACION CLINICA Standard: cada vez que se use, transferir una cantidad en
El magnesio (Mg) es uno de los iones más abundantes del exceso a un tubo limpio y pipetear de allí el volumen nece-
organismo. El 60% del Mg del organismo se encuentra en sario, descartando el remanente.
los huesos y el resto está repartido entre músculos y otros
tejidos blandos. El Mg cumple un rol muy importante en la PRECAUCIONES
fisiología humana. Participa en el metabolismo energético a Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro". No ingerir.
través de la activación del ATP, en la transferencia de fosfatos Evitar el contacto con piel y ojos. En caso de derrame o
de alta energía y es el ion activador de muchas enzimas salpicaduras, lavar con abundante agua la zona afectada.
involucradas en el metabolismo de lípidos, carbohidratos y Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
proteínas. El Mg es un mediador en mecanismos de conduc- de trabajo en el laboratorio de química clínica.
ción y transporte a través de membranas. Es esencial en la Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
preservación de estructuras macromoleculares de DNA, RNA acuerdo a la normativa local vigente.
y ribosomas y en la formación del hueso y el mantenimiento
de la presión osmótica. ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
La hipomagnesemia está muy asociada a la deficiencia de ALMACENAMIENTO
otros iones como el P, K y Ca. Las causas de hipomagnese- Reactivos Provistos: son estables a temperatura ambiente
mia son múltiples: diarreas crónicas y agudas, síndromes de (< 25oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
mala absorción, succión nasogástrica prolongada y vómitos, Es importante cerrar perfectamente el frasco de Reactivo A
fístulas intestinales y biliares, deterioro de la conservación una vez utilizado.
renal, diabetes mellitus, hipertiroidismo, hiperaldosteronismo Standard: en ocasiones puede presentar una ligera colo-
primario, alcoholismo crónico. ración amarillenta que no afecta la correcta funcionalidad
El exceso de Mg puede darse por incorporación o adminis- del mismo.
tración excesiva de sales de Mg y en general se asocia a
falla renal. Otras patologías asociadas a hipermagnesemia INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
son: hipercalcemia hipocalciúrica, hipotiroidismo, deficiencia REACTIVOS
de mineralocorticoides, etc. La discoloración o disminución de pH del Reactivo A indican
deterioro del mismo. En tal caso desechar.
FUNDAMENTOS DEL METODO La formación de precipitado o turbidez en el Standard, es
El magnesio, en medio alcalino, reacciona con el xylidyl blue indicio de deterioro. En tal caso desechar.
formando un complejo de color púrpura cuya intensidad
es proporcional a la concentración de Mg presente en la MUESTRA
muestra. La incorporación del complejante EGTA al reactivo Suero, plasma heparinizado u orina
elimina la interferencia de los iones calcio. a) Recolección:
- Suero o plasma: obtener de la manera habitual.
REACTIVOS PROVISTOS - Orina: puede contener precipitado de magnesio que debe
A. Reactivo A: solución de xylidyl blue 0,1 mM y EGTA 0,04 mM disolverse por acidificación antes del ensayo. Acidificar la
en buffer Tris 0,2 M, pH 11,3. orina con unas gotas de HCl concentrado hasta alcanzar
S. Standard*: solución de magnesio 3 mg/dl. Ver LIMITA- un pH entre 3 y 4 que debe verificarse con tiras reactivas.
CIONES DEL PROCEDIMIENTO. Diluir una parte de la orina acidificada con 4 partes de agua
destiliada (dilución 1:5).
REACTIVOS NO PROVISTOS b) Aditivos: en caso de utilizar plasma se debe usar única-
- Calibrador A plus de Wiener lab. cuando se emplea la mente heparina como anticoagulante.
técnica automática. Puede también emplearse en calibra- c) Sustancias interferentes conocidas: los anticoagulantes
ción de técnicas manuales. tales como EDTA, citrato u oxalato forman complejos con el
- Agua destilada. magnesio, provocando resultados erróneos.
No deben usarse muestras hemolizadas debido a la gran
INSTRUCCIONES PARA SU USO concentración de magnesio presente en los glóbulos rojos.
Reactivos Provistos: listos para usar. No interfieren: bilirrubina hasta 200 mg/l (20 mg/dl), calcio hasta

16 mg/dl, hemoglobina hasta 3,5 g/l (350 mg/dl), ni triglicéridos 3) Magnesio urinario (mg/24 hs) = resultado del magnesio
hasta 6 g/l (600 mg/dl) equivalente a lipemia ligera o moderada. x factor de dilución x 10 x diuresis (litros)
Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las siendo:
drogas en el presente método. 10 = factor de conversión de dl a litro
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la Ejemplo:
muestra debe ser preferentemente fresca. Puede conser- Resultado del magnesio = 2,0 mg/dl
varse 2 semanas en refrigerador (2-10oC) o más de 1 mes Dilución = 1:5
congelada (-20oC) sin agregado de conservadores. Diuresis = 1,5 litros
MATERIAL REQUERIDO (no provisto) Magnesio urinario = 2,0 x 5 x 10 x 1,5 = 150 mg/24 hs
- Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados. CONVERSION DE UNIDADES
- Tubos o cubetas espectrofotométricas. Mg (mg/dl) = Mg (mmol/l) x 2,43
- Reloj o timer. Mg (mg/dl) = Mg (mEq/l) x 1,215
Mg (mmol/día) = Mg (mEq/día) x 0,5
- Longitud de onda: 510 nm en espectrofotómetro o (490-530 nm) METODO DE CONTROL DE CALIDAD
en fotocolorímetro con filtro verde. Si la muestra a ensayar es suero, procesar 2 niveles de un
- Temperatura de reacción: temperatura ambiente (15-25oC) material de control de calidad (Standatrol S-E 2 niveles)
- Tiempo de reacción: 5 minutos con concentraciones conocidas de magnesio, con cada
- Volumen de Muestra: 10 ul determinación. En el caso de muestras de orina, utilizar un
- Volumen final de reacción: 1,01 ml control con base de orina.
Los volúmenes de muestra y reactivo pueden variarse propor-
cionalmente (ej.: 20 ul muestra + 2 ml Reactivo A o 50 ul + 5 ml). VALORES DE REFERENCIA
Suero o plasma: 1,7 a 2,5 mg/dl (0,70 a 1,05 mmol/l)
Orina: 60 a 210 mg/24hs
PROCEDIMIENTO 2,5 a 8,5 mmol/24 hs
En tres tubos marcados B (Blanco), C (Calibrador o 4,10 a 13,80 mg/dl*
Standard) y D (Desconocido), colocar: *Considerando un volumen de orina de 1,5 L/24 hs
B C D En la literatura (Tietz, N.W.) se menciona el siguiente rango
Muestra - - 10 ul de referencia:
Suero o plasma: 1,6 a 2,6 mg/dl (0,66 a 1,07 mmol/l)
Calibrador o Standard - 10 ul -
Orina: 3,0 a 5,0 mmol/24 hs
Agua destilada 10 ul - - Cada laboratorio debe establecer sus propios valores de
Reactivo A 1 ml 1 ml 1 ml referencia.
Los resultados obtenidos deberán ser evaluados en conjunto
Mezclar e incubar 5 minutos a temperatura ambiente
con la historia clínica del paciente, el examen médico y otros
(15-25oC). Leer en espectrofotómetro a 510 nm o en
hallazgos de laboratorio.
fotocolorímetro con filtro verde (490-530 nm) llevando el
- Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
- El Standard no debe ser empleado en analizadores au-
tomáticos, sólo debe usarse en calibración de técnicas
El color de la reacción final es estable por lo menos 1 hora, manuales.
por lo que la absorbancia debe ser leída dentro de ese lapso. - Para evitar contaminaciones con magnesio se deben
emplear tubos y cubetas plásticas descartables o material
CALCULO DE LOS RESULTADOS de vidrio rigurosamente limpio, libre de magnesio y de
1) Magnesio (mg/dl) = D x f cualquier traza de anticoagulantes. Para esto se recomien-
Valor del Standard (mg/dl)* da lavar el material de vidrio con detergentes no iónicos
f= (Noión de Wiener lab.) y enjuagar con ácidos minerales
Absorbancia del Standard diluidos, efectuando por último varios enjuagues con agua
* Conc. de magnesio en el Calibrador A plus o en el Standard destilada. Se recomienda utilizar pipetas y tubos de uso
exclusivo para esta determinación.
Para muestras de orina, el resultado debe ser multiplicado
por el factor de dilución y en el caso de orinas de 24 horas,
PERFORMANCE
además por el volumen (litros), como sigue:
Los ensayos fueron realizados en analizador automático Ex-
2) Magnesio urinario (mg/dl) = resultado del magnesio x press Plus(*). Si se usa el procedimiento manual, se debe va-
factor de dilución lidar que se obtenga una performance similar a la siguiente:
864125022 / 00 p. 2/9
a) Reproducibilidad: procesando de acuerdo al documento SÍMBOLOS
EP5-A del NCCLS (National Committee on Clinical Labora- Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
tory Standards), se obtuvo lo siguiente: reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
Suero
Nivel
2,49 mg/dl
5,49 mg/dl
D.S.
± 0,050 mg/dl
± 0,106 mg/dl
C.V.
2,01 %
1,93 %
Orina 8,83 mg/dl ± 0,132 mg/dl 1,49 %

22,03 mg/dl ± 0,332 mg/dl 1,51 % V Uso diagnóstico "in vitro"
Precisión interensayo Contenido suficiente para <n> ensayos

Nivel D.S. C.V.
X
Suero 2,53 mg/dl ± 0,066 mg/dl 2,61 % H Fecha de caducidad
5,23 mg/dl ± 0,170 mg/dl 3,25 %
Orina 8,83 mg/dl ± 0,271 mg/dl 3,07 % l Límite de temperatura (conservar a)
21,63 mg/dl ± 0,415 mg/dl 1,92 %  No congelar

b) Linealidad: los estudios de linealidad se realizaron siguiendo
F Riesgo biológico
el protocolo del documento EP6-P de la NCCLS (Testing for
Equality of Variances and Testing for Lack of Fit of the Linear Mo- Volumen después de la reconstitución
del). Los resultados demostraron que la reacción es lineal hasta
6,0 mg/dl. Para valores superiores, repetir la determinación Cont. Contenido
empleando muestra diluida 1:2 ó 1:4 con solución fisiológica,
multiplicando el resultado obtenido por 2 ó 4 respectivamente. g Número de lote
c) Correlación:
Elaborado por:
- Suero: se determinó el valor de magnesio en 140 muestras, M
utilizando Mg-color AA de Wiener lab. y otro kit comercial Xn
Nocivo
coeficiente de correlación:
r = 0.9936, pendiente b = 0.9437, intersección a = 0.0844
- Orina: se determinó el valor de magnesio en 55 muestras, Xi
utilizando Mg-color AA de Wiener lab. y otro kit comercial Irritante

coeficiente de correlación: i Consultar instrucciones de uso
r = 0.9890, pendiente b =1.013, intersección a = 0.4897
Calibr. Calibrador
d) Sensibilidad: la sensibilidad analítica es 0,25 mg/dl y el
límite de detección es 0,079 mg/dl.
b Control
PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS b Control Positivo

del usuario del analizador en uso. Para la calibración debe c Control Negativo
emplearse Calibrador A plus de Wiener lab.
PRESENTACION
- 2 x 50 ml (con Standard) (Cód. 1580001).
- 6 x 20 ml (sin Standard) (Cód. 1009271).
- 6 x 20 ml (sin Standard) (Cód. 1009337).
BIBLIOGRAFIA
- Mann, C.K.; Yoe, J.H. - Anal. Chem. 28:202 (1956).
- Duncanson, G. - Clin. Chem. 36/5:756 (1990).
- NCCLS document «Evaluation of Precision Performance
Riobamba 2944
of Clinical Chemistry Devices», EP5-A (1999). 2000 - Rosario - Argentina
- Bohuon, C. - Clin. Chim. Acta 7:811 (1962).
- Weiss, G. - J. F. Lehmanns Ed. - Verlag - Müncehn (1976).
Bioquímica
Wiener lab.
(*)
Marca registrada de Ciba Corning Diagnostics 864125022 / 00 p. 3/9 UR120423
LINEA TURBITEST AA
Microalbúmina
C Calibrador
Para la calibración de la determinación de microalbuminuria
Microalbúmina Calibrador está diseñado para ser usado en Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
la calibración de Microalbúmina Turbitest AA de Wiener lab. reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
Consultar el valor asignado en el rótulo, debido a que el mismo
es lote específico. Dicho valor se encuentra estandarizado Este producto cumple con los requerimientos previstos
frente al European Reference Material, ERM-DA470 (BCR-470)
- IRMM (Institute for Reference Materials and Measurements). C por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios

Calibrador: solución de albúmina humana con conservantes
apropiados. V Uso diagnóstico "in vitro"

Calibrador: listo para usar. Fecha de caducidad
Antes de realizar el ensayo, invertir el vial varias veces evitan- H
do la formación de espuma. Retirar sólo la cantidad de Cali-
brador a utilizar. No volver el material utilizado al vial original. l Límite de temperatura (conservar a)
 No congelar
PRECAUCIONES
El reactivo es para uso diagnóstico “in vitro”. F Riesgo biológico
Este Calibrador ha sido preparado a partir de material no Volumen después de la reconstitución
reactivo para antígeno de superficie de hepatitis B (HBsAg)
y anticuerpos contra el virus de la hepatitis C (HCV) y de la Cont. Contenido
inmunodeficiencia humana (HIV). Sin embargo, el Calibrador
y todas las muestras deben manipularse como si se tratara g Número de lote
Elaborado por:
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales M
Xn
de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos. Nocivo
acuerdo a la normativa local vigente. Corrosivo / Cáustico
Xi
Irritante
ALMACENAMIENTO
El Calibrador cerrado es estable en refrigerador (2-10oC) hasta
la fecha de vencimiento indicada en la caja. Una vez abierto
es estable 4 semanas en refrigerador (2-10oC). Mantener el Calibr. Calibrador
frasco bien cerrado y en refrigerador después de su uso. Evitar
toda acción que conduzca a la contaminación del Calibrador. b Control
PRESENTACION b Control Positivo

- 1 x 2 ml (Cód. 1913266).
c Control Negativo
BIBLIOGRAFIA
- Collins, AC. et al - Diabetologia 36/10:993 (1993). h Número de catálogo
- Sacks et al - Clin. Chem. 48:436 (2002). M Wiener Laboratorios S.A.I.C.
Riobamba 2944
- Mogensen, CE - J. Intern. Med. 254:45 (2003). 2000 - Rosario - Argentina
Wiener lab.
- American Diabetes Association: Diabetic Nephropathy. http://www.wiener-lab.com.ar
Diabetes Care (Suppl 1) 26:S94 (2003). Bioquímica
861268522 / 00 p. 1/3 UR120607
LINEA TURBITEST AA
Microalbúmina
Microalbúmina Control está diseñado para ser usado en - Collins, AC. et al - Diabetologia 36/10:993 (1993).
el control de la precisión de Microalbúmina Turbitest AA - Sacks et al - Clin. Chem. 48:436 (2002).
de Wiener lab. Consultar el valor asignado a cada nivel en - Mogensen, CE - J. Intern. Med. 254:45 (2003).
la tabla provista, debido a que el mismo es lote específico. - American Diabetes Association: Diabetic Nephropathy.
Dicho valor se encuentra estandarizado frente al European Diabetes Care (Suppl 1) 26:S94 (2003).
Reference Material, ERM-DA470 (BCR-470) - IRMM (Insti-
tute for Reference Materials and Measurements).
REACTIVOS PROVISTOS
Control Nivel 1: solución de albúmina humana conteniendo
niveles de albúmina de 20 a 60 mg/l.
Control Nivel 2: solución de albúmina humana conteniendo
niveles de albúmina de 80 a 160 mg/l.

Antes de realizar el ensayo, invertir cada vial varias veces
evitando la formación de espuma. Retirar la cantidad de
Control a utilizar. No volver el material utilizado al vial original.
PRECAUCIONES
Los Controles han sido preparados a partir de material no
reactivo para antígeno de superficie de hepatitis B (HBsAg)
y anticuerpos contra el virus de la hepatitis C (HCV) y de la
inmunodeficiencia humana (HIV). Sin embargo, los Controles
y todas las muestras deben manipularse como si se tratara
ALMACENAMIENTO
Los Controles cerrados son estables en refrigerador (2-10oC)
abiertos son estable 4 semanas en refrigerador (2-10oC).
Mantener los frascos bien cerrados y en refrigerador después
de su uso. Evitar toda acción que conduzca a la contamina-
ción de los Controles.
PRESENTACION
2 x 2 ml: - 1 x 2 ml Nivel 1
- 1 x 2 ml Nivel 2
(Cód. 1933266)
861268022 / 00 p. 1/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
861268022 / 00 p. 2/6 UR120607
LINEA TURBITEST AA
Microalbúmina
cuantitativa de microalbuminuria

Se denomina microalbuminuria al aumento de excreción urinaria Orina
de albúmina por encima de niveles normales pero en ausencia a) Recolección: obtener la muestra de la manera usual.
de nefropatía clínica manifiesta. Se define como la excreción Pueden utilizarse tanto la primera orina de la mañana, como
de 30 a 300 mg de albúmina en 24 horas (20-200 ug/min) en orinas de 3, 8, 12 ó 24 horas de recolección. Las muestras no
2 de 3 recolecciones urinarias realizadas en un período de deberán ser recolectadas después de realizar ejercicio, en pre-
pocas semanas. sencia de infecciones del tracto urinario, durante enfermedad
La determinación de microalbúmina (MAlb) es importante aguda, después de una cirugía o sobrecarga líquida aguda.
en el seguimiento de pacientes diabéticos, ya que permite b) Aditivos: no se requieren.
detectar precozmente a aquellos individuos en riesgo de c) Sustancias interferentes conocidas: no se observan
desarrollar enfermedad renal progresiva permitiendo la interferencias por creatinina hasta 440 mg/dl, urea hasta
aplicación de medidas terapéuticas adecuadas. 4500 mg/dl, bilirrubina hasta 25 mg/dl (250 mg/l), ácido
Actualmente, se ha reconocido a la microalbuminuria como ascórbico hasta 500 mg/dl e IgG hasta 2300 mg/dl.
un factor de riesgo independiente de enfermedad cardio- No deben emplearse muestras de orina que contengan
vascular en pacientes con y sin diabetes. hemoglobina y/o sangre.
Muestras que evidencian turbidez deberán ser centrifugadas
FUNDAMENTOS DEL METODO y usar sólo el sobrenadante para realizar el ensayo.
La albúmina reacciona con el anticuerpo específico forman- Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
do inmunocomplejos insolubles. La turbidez causada por drogas en el presente método.
estos inmunocomplejos es proporcional a la concentración d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: las
de albúmina en la muestra y puede ser medida espectro- muestras pueden conservarse durante 7 días refrigeradas
fotométricamente. (2-10oC) o 2 meses congelada (a -20oC).

A. Reactivo A: solución fisiológica tamponada, pH 7,6. - Espectrofotómetro
B. Reactivo B: anticuerpos monoespecíficos (cabra) anti- - Cubetas espectrofotométricas de caras paralelas
albúmina humana. - Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados
- Tubos de Kahn o hemólisis
REACTIVOS NO PROVISTOS - Baño de agua a 37oC
- Solución fisiológica. - Cronómetro
- Microalbúmina Calibrador Turbitest AA de Wiener lab.
INSTRUCCIONES PARA SU USO - Longitud de onda: 340 nm
Reactivos Provistos: listos para usar. - Temperatura de reacción: 37oC
Los reactivos son para uso diagnóstico “in vitro”. - Volumen final de reacción: 1,27 ml
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de PROCEDIMIENTO
En tubos de Kahn, realizar las siguientes diluciones en
solución fisiológica de Microalbúmina Calibrador Tur-
ALMACENAMIENTO
bitest AA: 1/1; 1/2; 1/4; 1/8 y 1/16, empleando solución
fisiológica como punto cero.
864117022 / 01 p. 1/9
Microalbúmina Calibrador diluido 70 ul
Reactivo A 1000 ul Excreción urinaria de Albúmina
ug/min
Homogeneizar e incubar 5 minutos a 37 C. Leer la ab-
o mg/g de
mg/24 hs
sorbancia de cada dilución a 340 nm (DO1) llevando el Creatinina
aparato a cero con agua destilada. Luego agregar: Normal < 30 < 20 < 30
Reactivo B 200 ul Microalbuminuria 30-300 20-200 30-300
Albuminuria clínica > 300 > 200 > 300
Homogeneizar. Incubar 5 minutos exactos a 37oC e inme-
diatamente leer la absorbancia a 340 nm (DO2), llevando En general se recomienda que cada laboratorio establezca
el aparato a cero con agua destilada. sus propios intervalos de referencia, dentro de su población
Calcular la diferencia de absorbancia (∆A = DO2 - DO1) de pacientes. Los resultados de microalbuminuria deberán
para cada dilución del Calibrador, incluyendo el punto ser evaluados en conjunto con la historia clínica del paciente,
cero. el examen médico y otros hallazgos de laboratorio.
Representar en papel milimetrado las diferencias de
absorbancia (∆A) en función de la concentración en mg/l LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
de Microalbúmina Calibrador. Ver Sustancias Interferentes conocidas en MUESTRA.
Se recomienda realizar una recalibración completa, cuando
En tubos de Kahn debidamente marcados, colocar:
así lo determina.
Muestra 70 ul Para evitar problemas de prozona en muestras con exceso
Reactivo A 1000 ul de antígeno es recomendable que todas las muestras sean
ensayadas con tiras reactivas previo al ensayo. Las mues-
Homogeneizar e incubar 5 minutos a 37oC. Leer la ab- tras con un nivel de proteínas superior a 250 mg/l deberán
sorbancia a 340 nm (DO1) llevando el aparato a cero con ser diluidas en solución fisiológica para que el nivel medido
agua destilada. Luego agregar: quede comprendido por el rango de medición.
Reactivo B 200 ul Para preservar la integridad de los reactivos debe evitarse
Homogeneizar. Incubar 5 minutos exactos a 37oC e inme-
diatamente leer la absorbancia a 340 nm (DO2), llevando
el aparato a cero con agua destilada.
PERFORMANCE
a) Reproducibilidad: se evaluó a través de una modificación
del protocolo EP5-A del CLSI. Para ello se procesaron, una
muestra control y muestras con distinto nivel de microalbu-
1) Calcular la diferencia de absorbancia (∆A = DO2 - DO1)
minuria. Con los datos obtenidos, se calculó la precisión
correspondiente a cada muestra analizada. Interpolar esta
intraensayo y total.
∆A en la curva de calibración para determinar la concentra-
ción de MAlb (mg/l) correspondiente a la muestra estudiada. Precisión intraensayo
Las muestras con absorbancias superiores al último punto Nivel D.S. C.V.
de calibración deben ser diluidas (1:2 ó 1:4) con solución Normal 6,0 mg/l ± 0,17 mg/l 2,8 %
fisiológica y procesadas nuevamente. Multiplicar el resultado Patológico 1 30,8 mg/l ± 0,54 mg/l 1,8 %
obtenido por la dilución efectuada. Patológico 2 165,0 mg/l ± 0,70 mg/l 0,4 %
MAlb Control 50,2 mg/l ± 0,42 mg/l 0,8 %
2) MAlb en orina (mg/24 hs) = MAlb (mg/l) x V
siendo: Precisión total
V = volumen de la diuresis expresado en litros/24 hs Nivel D.S. C.V.
Normal 6,0 mg/l ± 0,44 mg/l 7,4 %
3) Para evitar la necesidad de cronometrar la recolección de Patológico 1 30,8 mg/l ± 1,00 mg/l 3,2 %
orina se emplea la Relación MAlb/Creatinina: Patológico 2 165,0 mg/l ± 2,61 mg/l 1,6 %
Microalbúmina (mg/l) MAlb Control 50,2 mg/l ± 0,82 mg/l 1,6 %
MAlb/Creatinina (mg/g) = 1000 x
Creatinina (mg/l) b) Límite de detección: es la mínima cantidad del analito
capaz de ser detectada como una muestra distinta de cero
Siendo 1000 el factor de conversión de mg a g de Creatinina. y corresponde a la concentración 0,7 mg/l de MAlb.
c) Rango de medición: corresponde al intervalo de valores
METODO DE CONTROL DE CALIDAD exactamente cuantificables y se extiende de 4 mg/l al último
Microalbúmina Control 2 niveles Turbitest AA. punto de calibración (aproximadamente 250 mg/l).
Los Controles son procesados de la misma manera que d) Efecto prozona: no se evidencia efecto prozona hasta
las muestras. 2700 mg/l de MAlb.
864117022 / 01 p. 2/9
Estos datos de performance fueron obtenidos empleando SÍMBOLOS
analizador automático Konelab 60i, por lo tanto dichos Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
valores pueden variar cuando se emplea otro analizador o reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
técnica manual.
Referirse a las adaptaciones específicas de cada analizador. C por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios
PRESENTACION
(Cód. 1513266) Contenido suficiente para <n> ensayos

X
(Cód. 1009338)
1 x 10 ml Reactivo B  No congelar
(Cód. 1009276)
F Riesgo biológico
1 x 10 ml Reactivo B Volumen después de la reconstitución
(Cód. 1009656)
Cont. Contenido
BIBLIOGRAFIA
- Collins, AC. et al. - Diabetología 36/10: 993 (1993).
g Número de lote
- Sacks et al. - Clin. Chem. 48: 436 (2002). Elaborado por:

- Mogensen, CE - J. Intern. Med. 254: 45 (2003). M
Xn
- American Diabetes Association: Diabetic Nephropathy. Nocivo
Diabetes Care (Suppl 1) 26: S94 (2003).
- Tietz Textbook of Clinical Chemistry - Burtis, C.; Ashwood, Corrosivo / Cáustico
E. (5º Edition) WB Saunders, 2001. Xi
- Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests", Irritante
- CLSI: Clinical and Laboratory Standards Institute (ex- i Consultar instrucciones de uso
NCCLS) - Protocol EP5-A, 1999.
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
864117022 / 01 p. 3/9 UR130305
Monoslide
C Prueba en placa para el diagnóstico de mononucleosis infecciosa
SIGNIFICACION CLINICA REACTIVO NO PROVISTO

La mononucleosis infecciosa es una enfermedad benigna Solución fisiológica.
producida por el virus de Epstein-Barr (EBV) que se ca-
racteriza en su aspecto clínico por la aparición de fiebre INSTRUCCIONES PARA SU USO
irregular durante una o dos semanas, dolor e hinchazón de Reactivo A: vaciar la pipeta del gotero y agitar vigorosa-
los ganglios cervicales e irritación faríngea; con un cuadro mente antes de usar, verificando que no queden eritrocitos
hematológico bastante característico debido a la gran pro- adheridos al fondo del frasco.
liferación de células linfoides atípicas. Controles Positivo y Negativo: listos para usar.
Paul y Bunnell observaron que el suero de estos pacientes ge-
neralmente contiene un alto título de anticuerpos heterófilos, PRECAUCIONES
capaces de aglutinar glóbulos rojos de carnero o de caballo. Los reactivos son para uso "in vitro". Los controles han
Estos anticuerpos no son privativos de la mononucleosis, sido examinados para HIV, HCV y HBV encontrándose no
ya que en el suero de individuos sanos pueden existir reactivos. No obstante, deben ser empleados como si se
aglutininas anti-carnero con títulos de 1/28 y hasta 1/56, tratara de material infectivo.
observándose títulos de 1/112 o más en diversas infecciones Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
y luego de estimulaciones antigénicas como transfusiones de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
sanguíneas. Tales hechos indican que la evidencia de altos Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
títulos de anticuerpos heterófilos sólo tiene valor presuntivo acuerdo a la normativa local vigente.
en el diagnóstico de esta enfermedad.
Davidsohn introdujo la adsorción diferencial con extracto ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
de riñón de cobayo (capaz de adsorber los anticuerpos ALMACENAMIENTO
heterófilos no-mononucleosis infecciosa o anticuerpos de Reactivos Provistos: estables en refrigerador (2-10°C) has-
Forssman), aumentando así la sensibilidad y especificidad ta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No congelar.
de la prueba y permitiendo confirmar los resultados de la
Paul-Bunnell, que por su rapidez y practicidad siguió em- MUESTRA
pleándose como prueba de screening o selección. Suero
No obstante, existe cierto porcentaje de pacientes (aproxi- a) Recolección: obtener suero de la manera usual.
madamente el 10%) con mononucleosis infecciosa que b) Aditivos: no se requieren.
poseen bajos títulos de anticuerpos heterófilos, razón por c) Sustancias interferentes conocidas: se ha descripto un
la cual los resultados de estas pruebas únicamente son inhibidor termolábil de la reacción que produce resultados fal-
considerados significativos, desde el punto de vista diag- sos negativos. Para eliminar esta interferencia es necesario
nóstico, cuando se relacionan con los datos hematológicos inactivar el suero. Además, la hemólisis también interfiere.
y las manifestaciones clínicas del paciente. Inactivación: colocar el suero a 56°C durante 15 minutos,
inmediatamente antes de usar.
FUNDAMENTOS DEL METODO d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: el
Los anticuerpos heterófilos asociados a la mononucleosis suero debe ser preferentemente fresco. En caso de no pro-
infecciosa se detectan por su capacidad de aglutinar los cesarse en el momento puede conservarse en refrigerador
eritrocitos de caballo, neutralizándose simultáneamente (2-10°C) hasta 48 horas o en congelador durante 3 meses,
los anticuerpos no asociados a mononucleosis (anticuerpos a partir del momento de su recolección.
Forss-man) con extracto de riñón de cobayo. La aglutinación
se visualiza macroscópicamente. MATERIAL REQUERIDO
1- Provisto
REACTIVOS PROVISTOS
- Placa de vidrio
A. Reactivo A: suspensión de eritrocitos de caballo y ex-
tracto de riñón de cobayo. 2- No provisto
Control Positivo: dilución de suero humano positivo, inac- - Palillo o varilla de vidrio
tivado. Equivalente a 2-3 (+). - Cronómetro
Control Negativo: dilución de suero humano negativo, - Material volumétrico adecuado
inactivado. - Lámpara o fuente de luz horizontal
870760000 / 00 p. 1/6
inespecíficas, por lo que la hemaglutinación sólo se consi-
PROCEDIMIENTO dera como reacción positiva para mononucleosis infecciosa
Llevar los reactivos y las muestras a temperatura am- en diluciones mayores de 1/14.
biente antes de usar. La sensibilidad de los eritrocitos estabilizados que provee
Monoslide ha sido regulada para proporcionar igual reacti-
I) PRUEBA CUALITATIVA
vidad con suero inactivado sin diluir.
Colocar una gota (50 ul) de Muestra inactivada en uno
de los círculos de la placa limpia y seca. Agregar una
PRESENTACION
gota (50 ul) de Reactivo A homogeneizado. Mezclar con
palillo de madera hasta obtener una suspensión unifor-
me en toda la superficie del círculo. Inmediatamente,
BIBLIOGRAFIA
disparar un cronómetro y observar macroscópicamente
- Wintrobe, M. M. - "Hematología Clínica" - Pág. 924 (Ed.
el resultado dentro de los dos minutos.
1969) - Intermédica.
Para una correcta visualización de los resultados,
- Lee, C. L.; Davidsohn, I.; Slaby, R. - Am. J. Clin. Path.
debe mantenerse la placa sobre un fondo negro y
49/1:3 (1968).
ligeramente por encima de un haz luminoso horizontal
- Lee, C. L.; Davidsohn, I.; Panczyszyn, O. - Am. J. Clin.
(ej.: lámpara de microscopía).
Path. 49/1:12 (1968).
II) PRUEBA SEMICUANTITATIVA - Sinay, H. S.; Schoen, I.; Miyahira, T. - Am. J. Clin. Path.
Los sueros positivos, según la prueba anterior, pueden 50/1:75 (1968).
titularse efectuando diluciones seriadas: - Hoagland. R. J. - "Infectious mononucleosis" - Ed. 1967
1) Colocar en una serie de tubos 200 ul de solución - Grune-Stratton.
fisiológica. - Marletta, J.; Cravero, J.; Fay, O.; Rey. J. - Paraná (1977).
2) Agregar al primer tubo 200 ul de la Muestra inac-
tivada y mezclar. Transferir 200 ul de esta dilución al
segundo tubo y mezclar, continuando de esta forma
las diluciones hasta el último tubo.
Las diluciones así obtenidas equivalen a 1:2; 1:4; 1:8;
1:16, etc.
3) Tomar una gota de cada dilución y ensayar según I).

Técnica cualitativa
Positivo: aglutinación que aparece dentro de los dos minu-
tos. Se califica de 1 a 4 (+), siendo:
4+: aglutinación franca
Un resultado positivo indica la presencia de anticuerpos
heterófilos asociados a la mononucleosis infecciosa.
Técnica semicuantitativa
Título: se expresa como la inversa de la máxima dilución a
la que se produce aglutinación visible macroscópicamente.

Como punto de referencia de las reacciones positivas y
negativas de Monoslide, es conveniente procesar simultá-
neamente el Control Positivo y Control Negativo provistos,
que se utilizan de la misma manera que la muestra.

PERFORMANCE
Sensibilidad: en la técnica original de Davidsohn se em-
plean eritrocitos frescos (nativos) que dan lugar a reacciones
870760000 / 00 p. 2/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
870760000 / 00 p. 3/6 UR100325
Noión
Detergente para uso de laboratorio no iónico, biodegradable
CARACTERISTICAS - Sumergir totalmente en Solución Lavadora Noión, entre

- Bajo poder espumígeno: se ha demostrado que la produc- media hora y dos horas.
ción de espuma no tiene ninguna relación con el poder - Retirar, cepillar si es necesario y enjuagar con agua co-
limpiador. El bajo poder espumígeno es una de las normas rriente por lo menos diez veces.
recomendadas por la Soap and Detergent Association of - Sumergir en agua corriente y dejar dos horas o hasta el
U.S.A. día siguiente según convenga.
- Biodegradable: se aconseja la preparación diaria de la - Enjuagar cinco o seis veces con agua corriente. Efectuar
solución. La descomposición que se produce al segundo un enjuague final con agua destilada o desionizada.
o tercer día de la Solución Lavadora es normal y se debe - Secado: el material de vidrio calibrado no debe secarse a
a la biodegradabilidad del tensioactivo. más de 80oC. Se aconseja estufa a 37oC o bien directamen-
- Permite obtener un material de laboratorio brillante (limpie- te a temperatura ambiente en escurridores. Para materiales
za óptica) sin la perjudicial película opaca que se observa no calibrados pueden emplearse temperaturas superiores.
en el caso de usarse fórmulas no aptas. En todos los casos el material debe colocarse boca abajo
- La principal cualidad de Noión la constituye su capacidad en posición vertical o inclinada.
de eliminar totalmente cualquier sustancia contaminante
(limpieza química). Portaobjetos: para agilizar el lavado conviene, a medida
- No se han adicionado cargas a su composición de modo que se van usando, quitarles el aceite de inmersión con una
que constituye una elevada expresión de pureza. gasa seca y sumergirlos en un recipiente de plástico que
contenga Solución Lavadora Noión. Al finalizar la jornada
REACTIVOS PROVISTOS de trabajo se enjuagan individualmente, ayudándose con un
Noión: detergente concentrado para uso de laboratorios. cepillo si es necesario y se dejan en agua corriente hasta
No iónico-biodegradable. el día siguiente. Sacar del agua, repetir el enjuague y secar
con una tela suave.
REACTIVOS NO PROVISTOS Pipetas: como en el caso anterior y a medida que se utilizan,
Agua corriente y agua destilada o desmineralizada. se van sumergiendo con la punta hacia arriba en una probeta
de dos litros con Solución Lavadora Noión. Al terminar el
INSTRUCCIONES PARA SU USO trabajo diario, las pipetas pueden colocarse en lavadores
Preparación: la Solución Lavadora Noión al 1% se prepa- automáticos lavando con agua corriente durante dos horas
ra colocando, 10 ml de Noión por cada litro de agua. Esta (o toda la noche) o pueden lavarse en forma manual enjua-
proporción puede variarse (2% o 3%) de acuerdo con las gando y dejándolas sumergidas en agua corriente hasta el
necesidades del lavado. otro día. Continuar luego con la técnica general de lavado.
PRECAUCIONES Material de cirugía: el material quirúrgico puede ser lavado

El reactivo es para uso diagnóstico "in vitro". por inmersión en Solución Lavadora Noión, cepillado, enjua-
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales gado y esterilizado según las normas corrientes.
PRESENTACION
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE - 6 x 500 ml (Cód. 1999601)
ALMACENAMIENTO - 5 litros (Cód. 1999551).
El reactivo es estable a temperatura ambiente (< 25oC) hasta
la fecha indicada en el envase.
La Solución Lavadora Noión es estable 48 horas a tem-
peratura ambiente (< 25oC), a partir del momento de su
preparación.
Riobamba 2944
TECNICA GENERAL DE LAVADO 2000 - Rosario - Argentina
- Enjuagar previamente el material con agua para quitar los
restos de suciedad.
Bioquímica
Wiener lab.
860000000 p. 1/2 UR060922
Nucleotidasa
Para la determinación de 5’-nucleotidasa en suero
SIGNIFICACION CLINICA Reactivo B: listo para usar.

La 5'-nucleotidasa (5'-ribonucleótido fosfohidrolasa, E.C. Reactivo C: listo para usar.
3.1.3.5) es una enzima ampliamente distribuida en tejidos
y órganos, entre ellos, el hígado. PRECAUCIONES
Un aumento de la 5'-nucleotidasa en suero responderá Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
al incremento de síntesis provocado en forma específica Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
por la colestasis, ya que esta enzima no responde a otros de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
mecanismos de inducción enzimática (alcohol, drogas). Se Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
encuentran valores aumentados en pacientes con enfermedad acuerdo a la normativa local vigente.
hepatobiliar con obstrucción biliar intrahepática o extrahepá-
tica, carcinoma hepático, cirrosis biliar y mieloma múltiple. ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
Sus niveles son paralelos a los de fosfatasa alcalina pero ALMACENAMIENTO
no está comprometida en el metabolismo óseo ni en el de Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10oC)
la mucosa intestinal. hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
Su determinación es de utilidad en la diferenciación entre Reactivo A reconstituido: estable 30 días en refrigerador
ictericia obstructiva y hepatocelular y entre enfermedad (2-10oC) y al abrigo de la luz.
hepatobiliar y ósea.
La 5'-nucleotidasa cataliza la desfosforilación de adenosina- Una coloración amarillenta del Reactivo A desecado es
5'-monofosfato (AMP), con máxima actividad a pH 7,5. A este indicio de deterioro del mismo. Conservar perfectamente
pH, el AMP también es hidrolizado inespecíficamente por las tapado y a resguardo de la humedad.
fosfatasas alcalinas (ALP) presentes en la muestra, según:
MUESTRA
5'-nucleotidasa Suero
AMP + H2O adenosina + Pi
a) Recolección: obtener suero libre de hemólisis.
(y ALP)
La 5'-nucleotidasa es inhibida selectivamente por iones Ni2+. c) Sustancias interferentes conocidas: referirse a la biblio-
La diferencia de medidas entre el fosfato (Pi) liberado en grafía de Young para los efectos de las drogas en este método.
presencia y en ausencia de Ni2+ (determinado por la reacción d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: en
colorimétrica de Fosfatemia de Wiener lab.), es proporcional caso de no efectuarse el ensayo de inmediato puede con-
a la actividad de 5'-nucleotidasa. servarse el suero durante 2 días refrigerado (2-10oC) o una
semana en congelador (-20oC).
REACTIVOS PROVISTOS
A. Reactivo A: viales conteniendo adenosina-5'-monofosfato. MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
Una vez reconstituido, cada vial contiene 1 mmol/l de AMP. - Espectrofotómetro o fotocolorímetro.
B. Reactivo B: buffer Veronal 40 mmol/l, pH 7,5, conteniendo - Tubos o cubetas espectrofotométricas.
Mg2+, 10 mmol/l. - Micropipetas y pipetas.
C. Reactivo C: cloruro de níquel 130 mmol/l. - Baño de agua a 37oC.
- Reloj o timer.
- Fosfatemia de Wiener lab. CONDICIONES DE REACCION
- Agua destilada. - Longitud de onda: 620-650 nm en espectrofotómetro o en
fotocolorímetro con filtro rojo (620-700 nm).
INSTRUCCIONES PARA SU USO - Temperatura de reacción: 37oC
Reactivo A; preparación: agregar 2,5 ml de Reactivo B a un - Tiempo de reacción: 45 minutos
vial de Reactivo A. Mezclar por inversión hasta disolución - Volumen de muestra: 20 ul
completa. - Volumen final de reacción: 3,7 ml
870770000 / 00 p. 1/6
PROCEDIMIENTO - Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
En dos tubos marcados DT (Desconocido Total: fosfatasa - Al agregar el Reactivo C puede producirse una turbiedad
alcalina + 5'-nucleotidasa) y DI (Desconocido Inhibido: que desaparece durante la reacción de color con los reac-
fosfatasa alcalina) colocar: tivos de Fosfatemia.
- Contaminaciones con fosfatos: todo el material de vidrio
DT DI
usado (incluso en la recolección de la muestra) debe es-
Reactivo A reconstituido 0,2 ml 0,2 ml tar libre de fosfatos, iones metálicos y cianuros (venenos
Reactivo C - 20 ul enzimáticos). Debe tenerse especial precaución en la
limpieza del material que haya sido utilizado con reactivos
Colocar en baño de agua a 37oC unos minutos. Luego conteniendo buffer fosfatos en su composición. Para ello
agregar: se recomienda el uso de Noión de Wiener lab.
Muestra 20 ul 20 ul - Leer atentamente las instrucciones de Fosfatemia de
Wiener lab. antes de proceder a su empleo.
Mezclar e incubar exactamente 30 minutos. Luego
agregar los reactivos de Fosfatemia de la siguiente
PERFORMANCE
manera:
Reactivo A (Fosfatemia) 1 ml 1 ml muestras en un mismo día se obtuvo:
Mezclar por agitación suave. Esperar por lo menos 30 Nivel D.S. C.V.
segundos y no más de 2 minutos. Luego agregar: 92,3 U/l ± 2,94 U/l 3,19 %
Reactivo B (Fosfatemia) 1 ml 1 ml 15,3 U/l ± 0,89 U/l 5,82 %
Mezclar. Esperar por lo menos 30 segundos y no más de b) Rango dinámico: la reacción es lineal hasta lecturas
2 minutos. Luego agregar: de 1,200 D.O. A valores superiores debe repetirse la deter-
minación empleando 15 minutos de incubación a 37oC (en
Reactivo C (Fosfatemia) 1,5 ml 1,5 ml lugar de los 30 minutos indicados en PROCEDIMIENTO).
Mezclar por inversión. A los 10 minutos, retirar del baño El resultado deberá multiplicarse por 2.
y leer en espectrofotómetro entre 620 y 650 nm o en c) Límite de detección: en espectrofotómetro, para 0,001 D.O.
fotocolorímetro con filtro rojo (620 a 700 nm) llevando el el mínimo cambio de actividad detectable será de 0,3 U/l.
aparato a cero con agua destilada.
PRESENTACION
Factor colorimétrico: mientras se desarrolla la reacción Equipo para 50 determinaciones (Cód. 1631001).
enzimática, colocar 0,2 ml de agua destilada en dos tubos
marcados S (Standard) y B (Blanco de Reactivos). Agre- BIBLIOGRAFIA
gar 20 ul de Standard al tubo S. Mezclar por agitación - Bergmeyer, H.U. - “Methods of Enzymatic Analysis”, Aca-
suave. Colocar ambos tubos en baño de agua a 37oC demic Press Vol. 2 pág. 871, 1965.
y agregar los reactivos de Fosfatemia, como se indica - Domecq, R.V. - La Prensa Médica Argentina - 64/13:475
en PROCEDIMIENTO. Leer llevando el aparato a cero (1977).
con el Blanco. - Baginski, E.S. et al - LAB V/2:193 (1978).
El color de la reacción es estable durante 3 horas, por lo que
la absorbancia debe ser leída dentro de ese lapso.

El Standard de Fosfatemia equivale a 43 U/l de 5'-nucleo-
tidasa.
5'-nucleotidasa (U/l) = factor x (DT - DI)
43 U/l
factor =
S
Hasta 15 U/l.
870770000 / 00 p. 2/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
870770000 / 00 p. 3/6 UR091125
O-Estreptolisina
liofilizada
Método hemolítico para la determinación del título de
antiestreptolisina O
SIGNIFICACION CLINICA debe aparecer hemólisis; caso contrario desechar. Con los
El anticuerpo antiestreptolisina O se encuentra presente en eritrocitos lavados, una vez descartado el sobrenadante,
casi todas las personas en títulos bajos, debido a que las preparar una suspensión del 3 al 5% con Buffer pH 6,5.
infecciones estreptocócicas son comunes. Sin embargo un
título alto o creciente de antiestreptolisina O, indica una infec- PRECAUCIONES
ción reciente producida por estreptococo β-hemolítico grupo Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
A, como amigdalitis, escarlatina, sepsis puerperal, erisipela. Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
Tiene además especial interés en los procesos que aparecen de trabajo en el laboratorio de química clínica.
como segunda enfermedad: fiebre reumática y glomerulo- Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
nefritis aguda. Por lo tanto, a pesar de no ser una prueba acuerdo a la normativa local vigente.
específica para fiebre reumática, apoya su diagnóstico
cuando lo sugieren la historia y los signos clínicos. ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
ALMACENAMIENTO
FUNDAMENTOS DEL METODO Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10oC)
La estreptolisina O, producida por el estreptococo β-hemolítico hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
de grupo A, tiene la propiedad de producir hemólisis cuando Estreptolisina-O: una vez preparada es estable 2 horas a
se pone en contacto con glóbulos rojos. Al colocar distintas temperatura ambiente, 5 días en refrigerador (2-10oC) o 2
diluciones de un suero que contenga antiestreptolisina O en meses congelada (-20oC) y fraccionada. Ver LIMITACIONES
presencia de dosis constantes de estreptolisina O, se produce DEL PROCEDIMIENTO.
una reacción antígeno-anticuerpo que neutraliza la capacidad Buffer: estable 1 año en refrigerador (2-10oC).
hemolítica de la misma. Este fenómeno se evidencia por una Suspensión de eritrocitos: los eritrocitos pueden usarse
inhibición de la hemólisis al agregar suspensión de glóbulos hasta 48 horas después de preparada la suspensión, si
rojos del 3 al 5%. El título de antiestreptolisina será la recí- previamente se lavan una vez con Buffer y no se observa
proca de la máxima dilución del suero del paciente capaz de hemólisis.
neutralizar totalmente la estreptolisina.
MUESTRA
REACTIVOS PROVISTOS Suero
Estreptolisina-O: estreptolisina liofilizada titulada. a) Recolección: debe obtenerse suero libre de hemólisis.
Buffer concentrado: solución de buffer fosfatos conteniendo b) Aditivos: no se requieren.
fosfatos 0,36 mol/l y cloruro de sodio 1,2 mol/l, para pH final 6,5. c) Sustancias interferentes conocidas: muestras con he-
mólisis visible pueden conducir a una interpretación errónea
REACTIVOS NO PROVISTOS de los resultados, por lo que deben descartarse.
- Agua destilada. d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
- Eritrocitos frescos humanos de grupo O, del mismo paciente antiestreptolisina en suero es estable congelada por lo que
o de conejo. puede mantenerse en estas condiciones hasta efectuar el
- Solución fisiológica. ensayo.

A baja temperatura el Buffer concentrado puede cristalizar. - Tubos de hemólisis.
En tal caso, colocar en baño de agua a 37oC unos minutos - Material volumétrico apropiado.
mezclando por inversión hasta disolución completa. - Centrífuga.
Buffer; preparación: diluir el contenido con 150 ml de agua - Baño de agua a 37oC.
destilada.
Estreptolisina-O: disolver el vial con el volumen de Buffer CONDICIONES DE REACCION
indicado en el rótulo, mezclando por inversión hasta diso- - Temperatura de reacción: 37oC
lución completa. - Tiempo de incubación: 60 minutos
Suspensión de eritrocitos: lavar los mismos 3 veces con - Volumen final de reacción: 2 ml
solución fisiológica. Luego del último lavado centrifugar a Si se desea realizar microtécnica en policubetas, solicitar las
2.000 r.p.m. durante 15 minutos. En el sobrenadante no instrucciones al Servicio Bibliográfico de Wiener lab.
870780000 / 01 p. 1/6
PROCEDIMIENTO
Preparar diluciones de la siguiente forma: 1:10 (0,2 ml de suero + 1,8 ml de Buffer), 1:100 (0,5 ml de dilución 1:10 + 4,5 ml
de Buffer), 1:500 (1 ml de dilución 1:100 + 4 ml Buffer). Luego proceder de la siguiente forma:
Dilución del suero 1:10 1:100 1:500 CONTROLES
Tubo Nº 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13
Suero diluido (ml) 0,2 1 0,8 0,6 0,4 0,3 1 0,8 0,6 0,4 0,2 - -
Buffer (ml) 0,8 - 0,2 0,4 0,6 0,7 - 0,2 0,4 0,6 0,8 1,5 1
Estreptolisina-O (ml) 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 - 0,5
Mezclar y mantener a baño María a 37°C 15 minutos.
Eritrocitos 3-5% (ml) 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5
Mezclar agitando ligeramente y mantener en baño María a 37oC durante 15 minutos, agitar nuevamente y continuar en
baño María durante 30 minutos más. Centrifugar 3 minutos a 1.500 r.p.m. y leer.
Unidades Todd/ml 50 100 125 166 250 333 500 625 833 1250 2500 (-) (+)
INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO

El título de la muestra se expresa mediante la inversa de En caso de conservar la Estreptolisina-O reconstituida
la mayor dilución en la cual se observa ausencia total de congelada, se recomienda fraccionarla de modo de evitar
hemólisis. los congelamientos y descongelamientos sucesivos que
El tubo 12 (control eritrocitario) no deberá presentar hemólisis ocasionan su deterioro.
mientras que el tubo 13 (control Estreptolisina-O) deberá
mostrar hemólisis completa. PRESENTACION
- 6 x 3 ml (Cód. 1073202).
Para controlar el procedimiento y los reactivos es conve- BIBLIOGRAFIA
niente procesar simultáneamente un suero con cantidad - Bennett, C.V. - "Clinical Serology" - Charles Thomas Pub.,
conocida de antiestreptolisina O. USA (1964).
- Sonnenwirth, A.C.; Jarret, L. - Gradwohl Métodos y Diag-
VALORES DE REFERENCIA nósticos del Laboratorio Clínico - Edit. Panamericana - 8ª
Normalmente pueden existir en suero hasta 200 unidades de Ed. (1983).
antiestreptolisina O. Títulos superiores son indicativos de un - Rantz, L.A. y Randall, M.F. - Proc. Soc. Exp. Bio. 59:22 (1945).
proceso infeccioso por estreptococo β-hemolítico de grupo A.
870780000 / 01 p. 2/6
Estreptolisina O Buffer conc

Estreptolisina O Buffer concentrado



 No congelar
F Riesgo biológico
Cont. Contenido
g Número de lote
M Elaborado por:
Xn
Nocivo
Xi
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo
Wiener lab.
Riobamba 2944
Bioquímica
Disp.. Nº: 737/89-176/99 2000 Rosario - Argentina
870780000 / 01 p. 3/6 UR141117
LINEA TURBITEST AA
PCR
C Calibrador en serie
Para la calibración de la determinación de proteína C
reactiva (PCR) por métodos inmunoturbidimétricos

PCR Calibrador en serie Turbitest AA está diseñado para Evitar toda acción que conduzca a la contaminación del
ser usado en la calibración de la determinación de proteína calibrador. No trasvasar por volcado, no introducir ningún
C reactiva (PCR) con reactivos inmunoturbidimétricos de elemento en el interior del vial, no mezclar las tapas de los
la línea Turbitest AA de Wiener lab. Consultar el valor diferentes calibradores, etc.
asignado en el rótulo de cada vial, debido a que los mismos
son lote específico. Los valores están estandarizados frente PRESENTACION
al European Reference Material ERM-DA470 (BCR-470) - 1 x 2 ml PCR Calibrador 1
IRMM (Institute for Reference Materials and Measurements). 1 x 2 ml PCR Calibrador 2
1 x 2 ml PCR Calibrador 3
REACTIVOS PROVISTOS 1 x 2 ml PCR Calibrador 4
PCR Calibrador en serie: consta de ocho calibradores 1 x 2 ml PCR Calibrador 5
líquidos con distinto nivel de PCR humana: Calibrador 1, 1 x 2 ml PCR Calibrador 6
2, 3, 4, 5, 6, 7 y 8. 1 x 2 ml PCR Calibrador 7
1 x 2 ml PCR Calibrador 8
INSTRUCCIONES PARA SU USO (Cód. 1913267)
Antes de realizar el ensayo, invertir el vial varias veces BIBLIOGRAFIA
evitando la formación de espuma. Retirar la cantidad de cali- - Ledue, T. et al - Clin. Chem. 49/8:1258 (2003).
brador a utilizar. No volver el material utilizado al vial original. - Roberts, W. - Circulation 110:572 (2004).
Los calibradores deben ser usados como se especifica en los - Benzaquen, L. et al - Critical Reviews in Clinical Laboratory
manuales de instrucciones correspondientes a los productos Sciences 39:459 (2002).
PCR de la línea Turbitest AA. - Blirup-Jensen, S et al - Clin. Chem. Lab. Med .39/11:1110
(2001).
PRECAUCIONES - Whicher, J. et al - Pure & Appl. Chem. 68/10:1851 (1996).
El reactivo es para uso diagnóstico “in vitro”. - Kimberly, M. et al - Clin. Chem. 49:611 (2003).
Estos calibradores han sido preparados a partir de material
no reactivo para HBsAg, HCV y HIV. Sin embargo deben
manipularse como si se trataran de material infectivo.
ALMACENAMIENTO
Los calibradores cerrados son estables en refrigerador (2-
10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en el envase.
Una vez abiertos son estables 30 días en refrigerador (2-10oC).
Mantener los frascos bien cerrados, refrigerados y protegidos
de la luz después de su uso.

REACTIVOS
La presencia de turbidez o crecimiento microbiano es indicio
de contaminación y deterioro del reactivo, por lo que debe
desecharse.
861271500 / 01 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
861271500 / 01 p. 2/4 UR081002
LINEA TURBITEST AA
PCR
C Control N
Para el control de calidad de la determinación de proteína
C reactiva (PCR) por métodos inmunoturbidimétricos

PCR Control N Turbitest AA está diseñado para ser usado Evitar toda acción que conduzca a la contaminación del
en el control de calidad de PCR ultrasensible Turbitest control como: trasvasar por volcado, introducir cualquier
AA. Consultar el valor asignado en el rótulo, debido a que elemento en el interior del vial, etc.
el mismo es lote específico.
PRESENTACION
REACTIVOS PROVISTOS - 1 x 2 ml (Cód. 1937262).
PCR Control N: solución de proteína C reactiva (PCR) huma-
na conteniendo niveles de PCR dentro del rango de valores BIBLIOGRAFIA
normales o valores en el límite del rango normal y patológico. - Ledue, T. et al - Clin. Chem. 49/8:1258 (2003).
- Roberts, W - Circulation 110:572 (2004).
INSTRUCCIONES PARA SU USO - Benzaquen, L. et al - Critical Reviews in Clinical Laboratory
Reactivo Provisto: listo para usar. Sciences 39: 459 (2002).
Antes de realizar el ensayo, invertir el vial varias veces - Blirup-Jensen, S et al . Clin. Chem. Lab. Med. 39/11:1110
evitando la formación de espuma. Retirar la cantidad de (2001).
control a utilizar. No volver el material utilizado al vial original. - Whicher, J. et al - Pure & Appl. Chem. 68/10:1851 (1996).
Este control ha sido específicamente diseñado como control - Kimberly, M. et al - Clin. Chem. 49: 611 (2003).
del kit PCR ultrasensible Turbitest AA.
PRECAUCIONES
El reactivo es para uso diagnóstico “in vitro”.
El control ha sido preparado a partir de material no reactivo
para HBsAg, HCV y HIV. Sin embargo, dicho control y to-
das las muestras deben manipularse como si se tratara de
material infectivo.
ALMACENAMIENTO
El control cerrado es estable en refrigerador (2-10oC) hasta
la fecha de vencimiento indicada en el envase.
Una vez abierto es estable 2 semanas en refrigerador (2-10oC).
Mantener el frasco bien cerrado, refrigerado y protegido de
la luz después de su uso.
Cuando el control se conserva a -20oC, es estable 3 meses.
Se recomienda alicuotarlo y congelarlo, inmediatamente
después de ser abierto. No volver a congelar.

REACTIVOS
La presencia de turbidez o crecimiento microbiano es indicio
de contaminación y deterioro del reactivo, por lo que debe
desecharse.
861272000 / 01 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
861272000 / 01 p. 2/4 UR100623
LINEA MAXI
PCR-látex
C directo
Prueba directa de aglutinación en placa para la
determinación de Proteína C Reactiva
SIGNIFICACION CLINICA anticuerpos contra HIV 1/2, encontrándose no reactivos.

La Proteína C Reactiva (PCR) es una proteína termolábil que No obstante, deben ser empleados como si se tratara de
no atraviesa la barrera placentaria y cuya movilidad electro- material infectivo.
forética se encuentra entre las zonas de las α y β globulinas. Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
Su nombre se debe a la capacidad para precipitar los poli- de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
sacáridos C de los pneumococos. Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
Es una de las llamadas proteínas de fase aguda y se incre- acuerdo a la normativa local vigente.
menta en suero, en una gran variedad de enfermedades
inflamatorias o como respuesta a necrosis tisular. ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
Su determinación es importante debido a que aumenta ALMACENAMIENTO
rápidamente al comienzo de la enfermedad, 14 a 26 horas Los Reactivos Provistos son estables en refrigerador (2-
luego de la inflamación o injuria tisular y desaparece en la 10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
etapa de recuperación, apareciendo sólo durante la fase No congelar.
activa del proceso inflamatorio.
La PCR se encuentra comúnmente aumentada en: artritis INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
reumatoidea activa, infecciones virales, tuberculosis, fiebre REACTIVOS
reumática activa, infarto agudo de miocardio, etc. También La autoaglutinación del Reactivo A es indicio de deterioro
se la puede hallar luego de una operación quirúrgica y en del mismo. En tal caso desechar.
gran porcentaje luego de transfusiones sanguíneas. La
determinación de PCR no sólo indica la intensidad de la MUESTRA
enfermedad sino también la respuesta del paciente a un Suero
tratamiento dado. a) Recolección: obtener suero de la manera usual.
La PCR se detecta en suero por reacción con un anticuerpo damente lipémicos o contaminados pueden dar resultados
específico adsorbido sobre un soporte inerte de látex. La falsamente positivos.
PCR se une a los anticuerpos adsorbidos produciendo la d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: el
aglutinación de las partículas de látex. suero debe ser preferentemente fresco. En caso de no pro-
cesarse en el momento puede conservarse hasta 24 horas en
REACTIVOS PROVISTOS refrigerador (2-10oC) y hasta 4 semanas congelado a -20oC.
A. Reactivo A: suspensión de partículas de látex-poliestireno
sensibilizadas con anticuerpos anti-PCR. MATERIAL REQUERIDO
Control Positivo*: dilución de proteínas séricas conteniendo 1- Provisto
proteína C reactiva. - placas de plástico o vidrio fondo negro*
Control Negativo*: dilución de proteínas séricas no reactiva. - 1 tapa gotero de 25 ul
2- No Provisto
REACTIVOS NO PROVISTOS - pipetas y micropipetas capaces de dispensar los volúme-
Solución fisiológica. nes indicados
- palillos mezcladores descartables
INSTRUCCIONES PARA SU USO - cronómetro
Reactivo A: agitar bien y luego cambiar la tapa ciega por la - lámpara o fuente de luz
tapa gotero suministrada adicionalmente.
PROCEDIMIENTO
PRECAUCIONES Llevar los reactivos y las muestras a temperatura am-
Los Reactivos Provistos son para uso diagnóstico "in vitro". biente antes de usar. Agitar el Reactivo A antes de usar,
Los Controles han sido examinados para antígeno de vaciando previamente la pipeta del gotero.
superficie del virus de hepatitis B, virus de la hepatitis C y

PRESENTACION
I- TECNICA CUALITATIVA
Muestra o Control 25 ul
BIBLIOGRAFIA
Reactivo A 1 gota (25 ul) - Singer, J.M.; Plotz, C.M.; Parker, E. and Elster, S.K. - Am.
Mezclar con un palillo descartable hasta obtener una J. Clin. Path. 28:611 (1957).
suspensión uniforme en toda la superficie del círculo. - Nilson, L.A. - Acta Pathol. Microbiol. Scand. 73:129 (1968).
Inmediatamente disparar un cronómetro, balancear - Scherffarth, F.; Pérez-Miranda, M. and Goetz, H. - Blut.
suavemente la placa y observar macroscópicamente el 20: 296 (1970).
resultado bajo un haz luminoso dentro de los 2 minutos.
II- TITULACION
Los sueros positivos pueden titularse efectuando dilu-
ciones seriadas en 8 tubos de Kahn.
de los tubos.
b) Agregar 0,5 ml de suero al tubo Nº 1 y mezclar.
Transferir 0,5 ml de esta dilución al tubo Nº 2 y mezclar,
continuando así las diluciones hasta el último tubo.
Las diluciones así obtenidas equivalen a 1:2, 1:4, 1:8,
1:16, etc.
c) Ensayar cada dilución según la TECNICA I.

Se califica de 1 a 4 +.
La concentración aproximada de PCR en la muestra puede
ser calculada por la fórmula siguiente:
PCR (mg/l) = Título x Sensibilidad de la reacción (6 mg/l)
Ejemplo: la muestra presenta un título de 1:2. Su concentra-
ción de PCR es de 2 x 6 = 12 mg/l.

Procesar simultáneamente los controles provistos o sueros
probadamente reactivos, empleando 25 ul del Control corres-
pondiente y 25 ul de Reactivo A según la técnica cualitativa.
Hasta 6 mg/l.

- Tiempos de reacción mayores de dos minutos pueden
producir reacciones falsamente positivas por efectos de
secado de los reactivos.
- Cualquier alteración en la proporción Muestra/Reactivo,
PERFORMANCE
Sensibilidad: PCR-látex directo maxi detecta 6 mg/l de
proteína C reactiva.
870800022 / 01 p. 2/8
SÍMBOLOS


 No congelar
F Riesgo biológico
Cont. Contenido
g Número de lote
Elaborado por:
M
Xn
Nocivo
Xi
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870800022 / 01 p. 3/8 UR130708
PCR-látex
C directo
Prueba de aglutinación en placa para la determinación
de Proteína C Reactiva
SIGNIFICACION CLINICA deben ser empleados como si se tratara de material infectivo.

La Proteína C Reactiva (PCR) es una proteína termolábil que Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
no atraviesa la barrera placentaria y cuya movilidad electro- de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
forética se encuentra entre las zonas de las α y β globulinas. Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
Su nombre se debe a la capacidad para precipitar los poli- acuerdo a la normativa local vigente.
sacáridos C de los pneumococos.
Es una de las llamadas proteínas de fase aguda y se incre- ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
menta en suero, en una gran variedad de enfermedades ALMACENAMIENTO
inflamatorias o como respuesta a necrosis tisular. Los Reactivos Provistos son estables en refrigerador (2-10oC)
Su determinación es importante debido a que aumenta hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No congelar.
rápidamente al comienzo de la enfermedad, 14 a 26 horas
luego de la inflamación o injuria tisular y desaparece en la INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
etapa de recuperación, apareciendo sólo durante la fase REACTIVOS
activa del proceso inflamatorio. La autoaglutinación del Reactivo A es indicio de deterioro
La PCR se encuentra comúnmente aumentada en: artritis del mismo. En tal caso desechar.
reumatoidea activa, infecciones virales, tuberculosis, fiebre
reumática activa, infarto agudo de miocardio, etc. También MUESTRA
se la puede hallar luego de una operación quirúrgica y en Suero
gran porcentaje luego de transfusiones sanguíneas. La a) Recolección: obtener suero de la manera usual.
determinación de PCR no sólo indica la intensidad de la b) Aditivos: no se requieren.
enfermedad sino también la respuesta del paciente a un c) Sustancias interferentes conocidas: los sueros marca-
tratamiento dado. damente lipémicos o contaminados pueden dar resultados
falsamente positivos.
FUNDAMENTOS DEL METODO d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: el
La PCR se detecta en suero por reacción con un anticuerpo suero debe ser preferentemente fresco. En caso de no pro-
específico adsorbido sobre un soporte inerte de látex. La cesarse en el momento puede conservarse hasta 24 horas en
PCR se une a los anticuerpos adsorbidos produciendo la refrigerador (2-10oC) y hasta 4 semanas congelado a -20oC.
aglutinación de las partículas de látex.
MATERIAL REQUERIDO
REACTIVOS PROVISTOS 1- Provisto
A. Reactivo A: suspensión de partículas de látex-poliestireno - placas de plástico o vidrio fondo negro
sensibilizadas con anticuerpos anti-PCR. 2- No Provisto
Control Negativo: dilución de suero negativo. - material volumétrico adecuado para efectuar mediciones
Control Positivo: dilución de suero positivo. y diluciones de las muestras
- palillos mezcladores descartables
REACTIVOS NO PROVISTOS - cronómetro
Solución fisiológica. - lámpara o fuente de luz
Reactivo A: agitar bien y luego cambiar la tapa ciega por la PROCEDIMIENTO
tapa gotero suministrada adicionalmente. Llevar los reactivos y las muestras a temperatura am-
Controles Positivo y Negativo: listos para usar. biente antes de usar. Agitar el Reactivo A antes de usar,
vaciando previamente la pipeta del gotero.
PRECAUCIONES
Los Reactivos Provistos son para uso diagnóstico "in vitro". I- TECNICA CUALITATIVA
Los Controles han sido examinados para antígeno de superfi- Muestra 1 gota
cie del virus de hepatitis B, virus de la hepatitis C y anticuerpos
contra HIV 1/2, encontrándose no reactivos. No obstante, Reactivo A 1 gota
870790000 / 02 p. 1/6
SIMBOLOS
Mezclar con un palillo descartable hasta obtener una
suspensión uniforme en toda la superficie del círculo. Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
Inmediatamente disparar un cronómetro, balancear reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
suavemente la placa y observar macroscópicamente el
C
resultado bajo un haz luminoso dentro de los 2 minutos. Este producto cumple con los requerimientos previstos
II- TITULACION para el diagnóstico "in vitro"
diluciones seriadas en 8 tubos de Kahn. P Representante autorizado en la Comunidad Europea
de los tubos.
b) Agregar 0,5 ml de suero al tubo Nº 1 y mezclar. Contenido suficiente para <n> ensayos
Transferir 0,5 ml de esta dilución al tubo Nº 2 y mezclar,
X
continuando así las diluciones hasta el último tubo. Las di- H Fecha de caducidad
luciones así obtenidas equivalen a 1:2, 1:4, 1:8, 1:16, etc.
c) Ensayar cada dilución según la TECNICA I. l Límite de temperatura (conservar a)
 No congelar
Negativo: suspensión homogénea. F Riesgo biológico
Se califica de 1 a 4 +. Volumen después de la reconstitución
aglutinación visible macroscópicamente. Cont. Contenido
La concentración aproximada de PCR en la muestra puede
ser calculada por la fórmula siguiente:
g Número de lote
PCR (mg/l) = Título x Sensibilidad de la reacción (6 mg/l) M Elaborado por:

Ejemplo: la muestra presenta un título de 1:2. Su concen-
tración de PCR es de 2 x 6 = 12 mg/l.
Xn
Nocivo
METODO DE CONTROL DE CALIDAD Corrosivo / Caústico

Procesar simultáneamente el Control Negativo y el Control
Xi
Positivo provistos, empleando una gota del Control corres- Irritante
pondiente en lugar de la muestra y una gota del Reactivo A
según la técnica cualitativa. i Consultar instrucciones de uso
VALORES DE REFERENCIA Calibr. Calibrador

Hasta 6 mg/l.
Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios b Control
valores de referencia. b Control Positivo
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO c Control Negativo

Tiempos de reacción mayores de dos minutos pueden pro- h Número de catálogo
ducir reacciones falsamente positivas por efectos de secado
de los reactivos.
PERFORMANCE
Sensibilidad: PCR-Látex directo detecta 6 mg/l de proteína
C reactiva.
PRESENTACION
BIBLIOGRAFIA M Wiener Laboratorios S.A.I.C.

- Singer, J.M.; Plotz, C.M.; Parker, E. and Elster, S.K. - Am. Riobamba 2944
J. Clin. Path. 28:611 (1957). http://www.wiener-lab.com.ar
- Nilson, L.A. - Acta Pathol. Microbiol. Scand. 73:129 (1968). Dir. Téc.: Viviana E. Cétola
Bioquímica
Wiener lab.
- Scherffarth, F.; Pérez-Miranda, M.; Goetz, H. - Blut. 20: 296 (1970). Producto Autorizado A.N.M.A.T.
870790000 / 02 p. 2/6 UR130708
LINEA TURBITEST AA
PCR
cuantitativa de proteína C reactiva (PCR)
SIGNIFICACION CLINICA c) Sustancias interferentes conocidas: no emplear muestras

La proteína C reactiva (PCR) es uno de los reactantes de hemolizadas, lipémicas o contaminadas. Las muestras que
fase aguda más sensibles que se sintetizan en el hígado. poseen precipitado deben ser centrifugadas previo al ensayo.
Sus niveles se incrementan en respuesta a estímulos agu- No se observan interferencias por bilirrubina hasta 22 mg/dl
dos o crónicos de tipo infeccioso, inflamatorio o en caso de (220 mg/l), ni factor reumatoideo hasta 500 UI/ml.
daño tisular. Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
La determinación de PCR es muy útil tanto en el diagnóstico drogas en el presente método
como en el tratamiento de estados inflamatorios, dado que d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
el grado de incremento de PCR y su duración, se correla- muestra debe ser preferentemente fresca. En caso de no
cionan estrechamente con la gravedad y actividad de la procesarse en el momento, puede ser conservada 2 meses
enfermedad inflamatoria. en refrigerador (2-10oC) o 3 años congelada (-20oC). Evitar
los congelamientos y descongelamientos repetidos.
La proteína C reactiva reacciona con el anticuerpo espe- MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
cífico formando inmunocomplejos insolubles. La turbidez - Espectrofotómetro.
provocada por estos inmunocomplejos es proporcional a - Cubetas espectrofotométricas de caras paralelas.
la concentración de PCR en la muestra y puede medirse - Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados.
espectrofotométricamente. - Tubos de Kahn o hemólisis.
REACTIVOS PROVISTOS - Cronómetro.
A. Reactivo A: solución fisiológica tamponada, pH 7,6.
B. Reactivo B: anticuerpos monoespecíficos anti-PCR. CONDICIONES DE REACCION
REACTIVOS NO PROVISTOS - Temperatura de reacción: 37oC
- Solución fisiológica. - Tiempo de reacción: 10 minutos
- PCR Calibrador en serie Turbitest AA de Wiener lab. - Volumen de muestra: 80 ul
INSTRUCCIONES PARA SU USO Los volúmenes de muestra y reactivos pueden variarse
Reactivos Provistos: listos para usar. proporcionalmente, sin que se alteren los factores de cálculo.
PRECAUCIONES
Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro". PROCEDIMIENTO
En tubos de Kahn debidamente marcados colocar:
de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos. PCR Calibrador en serie (1; 3; 5; 6; 7; 8) 80 ul
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de Reactivo A 1000 ul
Homogeneizar e incubar 5 minutos a 37oC. Leer la ab-
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE sorbancia de cada Calibrador a 340 nm (DO1) llevando
ALMACENAMIENTO el aparato a cero con agua destilada. Luego agregar:
Reactivos Provistos: estables en refrigerador (2-10oC) has- Reactivo B 200 ul
Homogeneizar. Incubar 5 minutos exactos a 37oC e
inmediatamente leer la absorbancia a 340 nm (DO2),
MUESTRA
llevando el aparato a cero con agua destilada. Calcular
Suero
la diferencia de absorbancia (∆A = DO2 - DO1) para cada
a) Recolección: obtener suero de la manera usual.
calibrador.
861270500 / 02 p. 1/6
del protocolo EP5-A del CLSI. Para ello se procesaron, dos
Representar en papel milimetrado las diferencias de
muestras con distinto nivel de PCR. Con los datos obtenidos,
absorbancia ∆A en función de la concentración en mg/l
se calculó la precisión intraensayo y total.
de PCR.
En tubos de Kahn debidamente marcados, colocar: Nivel D.S. C.V.
11,9 mg/l ± 0,28 mg/l 2,4 %
Muestra 80 ul 40,6 mg/l ± 0,49 mg/l 1,2 %
Reactivo A 1000 ul Precisión total
Homogeneizar e incubar 5 minutos a 37oC. Leer la ab- Nivel D.S. C.V.
sorbancia a 340 nm (DO1) llevando el aparato a cero con 11,9 mg/l ± 0,72 mg/l 6,0 %
agua destilada. Luego agregar: 40,6 mg/l ± 1,30 mg/l 3,2 %
Reactivo B 200 ul b) Límite de detección: es la mínima cantidad del analito
Homogeneizar. Incubar 5 minutos exactos a 37oC e inme- capaz de ser detectada como una muestra distinta de cero
diatamente leer la absorbancia a 340 nm (DO2), llevando y corresponde a la concentración 0,5 mg/l de PCR.
el aparato a cero con agua destilada. c) Rango de medición: corresponde al intervalo de valores
exactamente cuantificables y se extiende de 2 mg/l al último
punto de calibración (aproximadamente 200 mg/l de PCR).
CALCULO DE LOS RESULTADOS d) Efecto prozona: no se evidencia efecto prozona hasta
Calcular la diferencia de absorbancia (∆A = DO2 - DO1) co- 1000 mg/l PCR.
rrespondiente a cada muestra analizada. Interpolar esta ∆A Los datos de performance fueron obtenidos empleando
en la curva de calibración para determinar la concentración analizador automático Konelab 60i, por lo tanto dichos
de PCR (mg/l) correspondiente a la muestra estudiada. valores pueden variar cuando se emplea otro analizador o
Las muestras con absorbancias superiores al último punto técnica manual.
de calibración, deben ser diluidas (1:2 ó 1:4) con solución
fisiológica y procesadas nuevamente. Multiplicar el resultado PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS
obtenido por la dilución efectuada. Referirse a las adaptaciones específicas de cada analizador.

Control Inmunológico nivel 1 Turbitest AA. 60 ml: 1 x 50 ml Reactivo A
Control Inmunológico nivel 2 Turbitest AA. 1 x 10 ml Reactivo B
Los Controles son procesados de la misma manera que (Cód. 1683267)
las muestras.
BIBLIOGRAFIA
VALORES DE REFERENCIA - Ledue, T. et al - Clin Chem 49/8:1258 (2003).
0 - 5 mg/l - Otsuji, S. - Clin. Chem. 28/10:2121 (1982).
En general se recomienda que cada laboratorio debe esta- - Dati, F. - J. of IFCC VIII/1:29 (1996).
blecer sus propios valores de referencia. - Dati, F. - Clin. Chem. Lab. Med. 39/11:1134 (2001).
Se aconseja efectuar dos o más determinaciones periódicas - WHO Publication WHO/DIL/LAB/99.1 Rev. 2 (2002).
para seguir la evolución de la enfermedad. - Tietz Textbook of Clinical Chemistry - Burtis, C.; Ashwood,
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
- Ver Sustancias interferentes conocidas, en MUESTRA. AACC Press, 5th ed., 2000.
- Se recomienda realizar una recalibración completa, cuando - EP5-A (Vol.19 - Nº2) Evaluation of precision Performance of
se cambia de lote de reactivo o cuando el control de calidad Clinical Chemistry Devices; Approved Guideline - NCCLS.
así lo determina. - EP17-A (Vol.24 - Nº34) Protocols for Determination of
- En el curso de procesos inflamatorios la PCR puede alcan- Limits of Detection and Limits of Quantitation; Approved
zar niveles 1000 veces más elevados que el nivel normal. Guideline - NCCLS.
Se recomienda diluir las muestras 1:5 ó 1:10 en caso de
obtener resultados elevados o de sospechar procesos
inflamatorios severos.
- Para preservar la integridad de los reactivos debe evitarse
todo tipo de contaminaciones, empleando para la medición,
PERFORMANCE
a) Reproducibilidad: se evaluó a través de una modificación
861270500 / 02 p. 2/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
861270500 / 02 p. 3/6 UR120106
LINEA TURBITEST AA
PCR
C ultrasensible
Método inmunoturbidimétrico con látex para la determinación
cuantitativa de proteína C reactiva (PCR)
SIGNIFICACION CLINICA B. Reactivo B: suspensión de partículas de látex, recubier-

La Proteína C Reactiva (PCR) es una proteína inespecífica tas con anticuerpos anti-PCR.
relacionada a procesos inflamatorios y/o infecciosos. Debi-
do a la velocidad y a la magnitud de su respuesta, la PCR REACTIVOS NO PROVISTOS
es reconocida como uno de los marcadores más sensibles - PCR Calibrador en serie Turbitest AA de Wiener lab.
de fase aguda. Después de infarto de miocardio, stress, - Solución fisiológica.
trauma, infección, inflamación, cirugías o proliferación
neoplásica, el nivel de PCR puede aumentar dentro de las INSTRUCCIONES PARA SU USO
24 a 48 horas del episodio hasta 2000 veces con respecto Reactivos Provistos: listos para usar. Los reactivos deben
a valores de referencia. Sin embargo, el incremento de ser homogeneizados varias veces por inversión suave,
PCR es inespecífico y no puede ser interpretado sin co- antes de usar.
nocimiento de la historia clínica completa y de los valores
previos del paciente. PRECAUCIONES
La determinación de PCR es clínicamente útil en el screening Los reactivos son para uso diagnóstico “in vitro”.
de enfermedades infecciosas e inflamatorias; para monito- Todas las muestras de pacientes deben manipularse como
rear la actividad inflamatoria de enfermedades como la artritis si fueran capaces de transmitir infección.
reumatoidea; para la detección de infecciones intercurrentes Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
en lupus eritematoso sistémico, leucemia o después de ci- de trabajo en el laboratorio de química clínica.
rugía; para la detección de rechazo de transplantes y para Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
el manejo de septicemias y meningitis neonatal. acuerdo a la normativa local vigente.
Evidencia reciente ha demostrado claramente que incremen-
tos en la PCR dentro del intervalo de referencia está asociado ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
con eventos cardiovasculares futuros en sujetos con y sin ALMACENAMIENTO
enfermedad cardiovascular establecida. Individuos con un Reactivos Provistos: estables en refrigerador (2-10oC) has-
nivel de PCR basal en el cuartil más alto tienen 2 a 4 veces ta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No congelar.
más riesgo de presentar en el futuro infartos de miocardio,
stroke isquémico, enfermedad vascular periférica o muerte MUESTRA
cardíaca súbita, que aquellos individuos con un nivel de PCR Suero o plasma
en el cuartil más bajo. a) Recolección: obtener la muestra de la manera usual.
Comparando con marcadores nuevos y tradicionales de b) Aditivos: en caso de que la muestra a emplear sea
enfermedad coronaria, la PCR mostró ser el predictor más plasma, se recomienda el uso de heparina como anti-
fuerte de eventos coronarios futuros y cuando se combina coagulante.
con colesterol total, HDL-colesterol, LDL-colesterol mejora c) Sustancias interferentes conocidas: no emplear mues-
notablemente su valor predictivo. tras hemolizadas, lipémicas o contaminadas. Las muestras
Con el fin de evaluar el riesgo de enfermedades cardiovas- que poseen precipitados deben ser centrifugadas previo a
culares en individuos aparentemente sanos se requieren su ensayo.
métodos de mayor sensibilidad que los métodos tradicionales No se observan interferencias por bilirrubina hasta 20 mg/dl
para la determinación de PCR. (200 mg/l), triglicéridos hasta 660 mg/dl, hemoglobina hasta
460 mg/dl y factor reumatoideo hasta 500 UI/ml.
FUNDAMENTOS DEL METODO Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
La PCR presente en la muestra, es capaz de aglutinar las drogas en el presente método.
partículas de látex recubiertas con anticuerpos anti-PCR. La d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: las
turbidez causada por la aglutinación de las partículas de látex muestras pueden conservarse durante 2 meses en heladera
es proporcional a la concentración de PCR en la muestra y (2-10oC) o 3 años congelada (a -20oC). Evitar los congela-
puede ser medida espectrofotométricamente. mientos y descongelamientos repetidos.

A. Reactivo A: solución de buffer glicina. Analizador automático capaz de medir absorbancias a 570 nm.
861271000 / 03 p. 1/6
CONDICIONES DE REACCION Para un correcto seguimiento del control de calidad, se
Parámetros generales para analizadores automáticos: recomienda incluir 2 controles con distinto nivel de PCR
Según la sensibilidad y rango de medición requeridos podrá (por ejemplo: PCR Control N y Control Inmunológico Tur-
emplearse una de las siguientes adaptaciones: alta sensi- bitest AA).
bilidad o standard. En el curso de procesos inflamatorios la PCR puede alcanzar
niveles 1000 a 2000 veces más elevados que el nivel normal.
Parámetros PCR alta Se recomienda diluir las muestras 1:5 ó 1:10 en solución
PCR standard
sensibilidad fisiológica en caso de obtener resultados elevados o de
Tipo de reacción dos puntos dos puntos sospechar procesos inflamatorios severos.
Longitud de onda primaria 570 nm 570 nm Para preservar la integridad de los reactivos debe evitarse
Temperatura 37oC 37oC todo tipo de contaminaciones, empleando para la medición
Volumen de muestra 6 ul 3 ul
Niveles elevados de PCR son inespecíficos y no deben ser
Volumen de Reactivo A 150 ul 150 ul interpretados sin una historia clínica completa del paciente.
Volumen de Reactivo B 150 ul 150 ul En la evaluación de PCR como factor de riesgo de enferme-
Tiempo de incubación de dad cardiovascular los valores obtenidos deben ser siempre
300” 300”
Reactivo A + Muestra comparados con valores previos.
Tiempo de lectura - ∆T 150-200” 150-200”
Calibración 6 puntos 6 puntos PERFORMANCE
PCR Calibrador en serie 1, 2, 4, 5, 6, 7 1, 3, 5, 6, 7, 8 PCR alta sensibilidad
Rango de medición 0,2-100 mg/l* 0,5-200 mg/l*
a) Reproducibilidad: fue evaluada a través de una modi-
* El límite inferior del rango de medición (límite de cuantifica- ficación del protocolo de NCCLS EP5-A para la adaptación
ción) dependerá del analizador empleado y el límite superior alta sensibilidad. Para ello se procesaron 3 muestras de
dependerá de la concentración de PCR en el calibrador 7 y 8. distinta concentración de PCR.
Los volúmenes de muestra y reactivos pueden variarse pro-
porcionalmente, sin que se alteren los factores de cálculo. Precisión intraensayo
Solicitar las adaptaciones para los analizadores comercia- Media D.S. C.V.
lizados por Wiener lab. Las adaptaciones no provistas por Muestra 1 1,36 mg/l ± 0,048 mg/l 3,51 %
Wiener lab. deben ser validadas. Muestra 2 2,91 mg/l ± 0,086 mg/l 2,95 %
Muestra 3 8,90 mg/l ± 0,311 mg/l 3,49 %
CALIBRACION
El método ha sido estandarizado frente al European Refe- Precisión total
rence Material, ERM-DA470 (BCR-470) - IRMM (Institute for
Reference Materials and Measurements). Media D.S. C.V.
Para calibrar la adaptación PCR alta sensibilidad deben Muestra 1 1,36 mg/l ± 0,07 mg/l 5,13 %
usarse los calibradores 1, 2, 4, 5, 6 y 7 y para calibrar la Muestra 2 2,91 mg/l ± 0,111 mg/l 3,81 %
adaptación PCR standard deben usarse los calibradores Muestra 3 8,90 mg/l ± 0,366 mg/l 4,11 %
1, 3, 5, 6, 7 y 8 del PCR Calibrador en serie Turbitest AA. b) Límite de detección: es la mínima cantidad del analito
capaz de ser detectada como una muestra distinta de cero
METODO DE CONTROL DE CALIDAD y corresponde a la concentración 0,1 mg/l de PCR.
Control Inmunológico nivel 1 o Control Inmunológico nivel 2 c) Rango de medición: corresponde al intervalo de valores
o PCR Control N Turbitest AA. exactamente cuantificables y se extiende de 0,2 mg/l al último
Los Controles son procesados de la misma manera que punto de calibración (aproximadamente 100 mg/l PCR).
las muestras. d) Efecto prozona: no se evidencia efecto prozona hasta
1000 mg/l PCR.
0 - 5 mg/l PCR standard
En general se recomienda que cada laboratorio establezca
a) Reproducibilidad: fue evaluada a través de una modi-
sus propios intervalos de referencia, dentro de su población
ficación del protocolo de NCCLS EP5-A para la adaptación
de pacientes.
standard. Para ello se procesaron 3 muestras de distinta
Se aconseja efectuar dos o más determinaciones periódicas
concentración de PCR.
para seguir el desarrollo de la enfermedad.
Ver Sustancias Interferentes conocidas en MUESTRA. Media D.S. C.V.
Se recomienda realizar una recalibración completa, cuando Muestra 1 2,95 mg/l 0,156 mg/l 5,30 %
se cambia de lote de reactivo o cuando el control de calidad Muestra 2 9,21 mg/l 0,216 mg/l 2,34 %
así lo determina. Muestra 3 42,1 mg/l 1,110 mg/l 2,64 %
861271000 / 03 p. 2/6
Precisión total SIMBOLOS
Media D.S. C.V.
Muestra 1 2,95 mg/l 0,176 mg/l 5,95 % reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
C
Muestra 2 9,21 mg/l 0,324 mg/l 3,52 %
Muestra 3 42,1 mg/l 1,038 mg/l 2,47 % por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios
b) Límite de detección: es la mínima cantidad del analito
capaz de ser detectada como una muestra distinta de cero P Representante autorizado en la Comunidad Europea
y corresponde a la concentración 0,2 mg/l de PCR.
c) Rango de medición: corresponde al intervalo de valores V Uso diagnóstico "in vitro"
exactamente cuantificables y se extiende de 0,5 mg/l al último
punto de calibración (aproximadamente 200 mg/l PCR).
d) Efecto prozona: no se evidencia efecto prozona hasta
2000 mg/l PCR.
Los datos de performance fueron obtenidos empleando l Límite de temperatura (conservar a)
analizador Konelab 60i, por lo tanto dichos valores pueden
variar cuando se emplea otro analizador.  No congelar
PRESENTACION F Riesgo biológico

(Cód. 1683262) Cont. Contenido
g Número de lote
(Cód. 1009304) Elaborado por:

M
Nocivo
Xn
(Cód. 1009223)
- 1 x 60 ml Reactivo B Xi
Irritante
(Cód. 1009657)
BIBLIOGRAFIA
- Ledue, T. et al. - Clin. Chem. 49/8:1258 (2003). Calibr. Calibrador
- Roberts, W - Clin. Chem. 47/3:418 (2001).
- Biasucci, L. - Circulation 110:560 (2004). b Control
- Ridker, P et al. - JAMA 285:2481 (2001).
- Benzaquen, L. et al. - Critical Reviews in Clinical Laboratory
b Control Positivo
Sciences 39:459 (2002). c Control Negativo

- Dati, F. - J. of IFCC VIII/1:29 (1996).
- Dati, F. - Clin. Chem. Lab. Med. 39/11:1134 (2001). h Número de catálogo
- WHO Publication WHO/DIL/LAB/99.1 Rev. 2 (2002).
- EP5-A (Vol.19 - Nº 2) Evaluation of Precision Performance of
Clinical Chemistry Devices; Approved Guideline - NCCLS.
- EP17-A (Vol.24 - Nº 34) Protocols for Determination of
Limits of Detection and Limits of Quantitation; pproved
Guideline - NCCLS.

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
861271000 / 03 p. 3/6 UR120903
Plasma Control
C Para control de precisión en coagulación
Normal
Lote: 1306116340
Exp.: 2015/12

El Plasma Control está diseñado para su uso como control en Fallas en la reconstitución del Plasma Control pueden ser
la determinación del tiempo de protrombina, tiempo de trombi- causa de resultados erróneos.
na, tiempo de tromboplastina parcial activada y fibrinógeno. Ver LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO en el manual de
instrucciones correspondiente al equipo en uso.
REACTIVO PROVISTO
Control Normal: pool de plasmas humanos normales obteni- VALORES DE REFERENCIA
dos con citrato como anticoagulante, liofilizado. Los valores de tiempo de protrombina, tiempo de trombina,
tiempo de tromboplastina parcial activada y fibrinógeno utili-
REACTIVO NO PROVISTO zando el Plasma Control, dependen de los reactivos y anali-
Agua bidestilada o desionizada. zadores para coagulación en uso.
INSTRUCCIONES PARA SU USO Técnica Técnica

Reconstituir cada vial con 1,0 ml de agua bidestilada o desioni- Reactivo
Manual Automática*
zada. Dejar disolver unos 20 minutos a temperatura ambiente
mezclando de tanto en tanto sin invertir. Asegurarse de que Soluplastin 10,5 - 14,3 seg 10,5 - 14,1 seg
todo el material particulado se ha disuelto completamente. APTTest 25,7 - 42,9 seg 25,7 - 42,9 seg
APTTest ellágico 24,0 - 36,0 seg 23,2 - 34,8 seg
PRECAUCIONES Fibrinógeno 308 - 443 mg/dl 308 - 443 mg/dl
Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro". Tiempo de Trombina
El Plasma Control ha sido preparado a partir de material no 4.0 UNIH/ml 12,3 - 17,7 seg 12,4 - 17,8 seg
reactivo para HBsAg, HCV y HIV. Sin embargo, al igual que 2.7 UNIH/ml 15,1 - 21,7 seg 15,7 - 22,5 seg
* Wiener lab. CoL 2
de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos. Método turbidimétrico en analizadores automáticos:
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de Valor Medio Rango
acuerdo a la normativa local vigente. Reactivo
(mg/dl) (mg/dl)
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE Fibrinogen Turbitest AA 303 248 - 358
ALMACENAMIENTO
Reactivos Provistos: estables en refrigerador (2-10oC) hasta PRESENTACION
la fecha de vencimiento indicada en la caja. - 6 x 1 ml (Cód. 1937001).
Una vez reconstituidos poseen una estabilidad de 8 horas
tanto a temperatura ambiente como refrigerado (2-10oC).

REACTIVOS
Cualquier variación en los caracteres organolépticos del Plas-
ma Control puede ser indicio de deterioro del mismo.
PROCEDIMIENTO
El Control reconstituido se utiliza de la misma forma que
que acompañan al equipo de reactivos para tiempo de
protrombina, tiempo de trombina, tiempo de tromboplastina
parcial activada y fibrinógeno que se emplee en cada caso.
870810022 / 07 p. 1/6
Símbolos
C M
Elaborado por:
vistos por la Directiva Europea 98/79 CE de pro-
ductos sanitarios para el diagnóstico "in vitro"
P
Xn
Representante autorizado en la Comunidad Eu-

ropea Nocivo


Xi
Irritante
No congelar
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
870810022 / 07 p. 2/6 UR130610
Plasma Control
C Normal
Para control de precisión en coagulación
Lote: 1308121970
Exp.: 2016/02

la determinación del tiempo de protrombina, tiempo de trom- causa de resultados erróneos.
bina, tiempo de tromboplastina parcial activada y fibrinógeno. Ver LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO en el manual
de instrucciones correspondiente al equipo en uso.
REACTIVO PROVISTO
Control Normal: pool de plasmas humanos normales obte- VALORES DE REFERENCIA
nidos con citrato como anticoagulante, liofilizado. Los valores de tiempo de protrombina, tiempo de trombina,
tiempo de tromboplastina parcial activada y fibrinógeno
REACTIVO NO PROVISTO utilizando el Plasma Control, dependen de los reactivos y
Agua bidestilada o desionizada. analizadores para coagulación en uso.
INSTRUCCIONES PARA SU USO Reactivo Técnica Técnica

Reconstituir cada vial con 1,0 ml de agua bidestilada o desioni- Manual Automática
Soluplastin (seg) 10,5 14,3 10,5 14,1
mezclando de tanto en tanto sin invertir. Asegurarse de que
todo el material particulado se ha disuelto completamente. APTTest (seg) 25,7 42,9 25,7 42,9
APTTest ellágico (seg) 24,0 36,0 23,2 34,8
PRECAUCIONES
Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro". Fibrinógeno (mg/dl) 308 443 308 443
El Plasma Control ha sido preparado a partir de material no
Tiempo de Trombina (seg)
las muestras de sangre, debe manejarse como si se tratara 4.0 UNIH/ml 12,3 17,7 12,4 17,8
de material infectivo. 2.7 UNIH/ml 15,1 21,7 15,7 22,5
de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos. * Wiener lab. CoL 2
acuerdo a la normativa local vigente. Método turbidimétrico en analizadores automáticos:
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE Reactivo Valor Medio Rango

ALMACENAMIENTO (mg/dl) (mg/dl)
Reactivos Provistos: estables en refrigerador (2-10oC) Fibrinogen Turbitest AA 303 248 358
PRESENTACION
- 6 x 1 ml (Cód. 1937001).
REACTIVOS
Cualquier variación en los caracteres organolépticos del
Plasma Control puede ser indicio de deterioro del mismo.
PROCEDIMIENTO
870810022 / 08 p. 1/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
870810022 / 08 p. 2/6 UR130830
Plasma Control
C Normal
Lote: 1401132590
Exp.: 2016/02

REACTIVO PROVISTO

Reconstituir cada vial con 1,0 ml de agua bidestilada o desioni- Manual Automática*
Soluplastin (seg) 10,5 14,3 10,5 14,1
PRECAUCIONES

PRESENTACION
- 6 x 1 ml (Cód. 1937001).
REACTIVOS
PROCEDIMIENTO
870810022 / 09 p. 1/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
870810022 / 09 p. 2/6 UR140127
Plasma Control
Normal
Lote: 1406141270
Exp.: 2016/12

REACTIVO PROVISTO

Soluplastin (seg) 11,0 14,8 11,1 15,0
PRECAUCIONES

PRESENTACION
- 6 x 1 ml (Cód. 1937001).
REACTIVOS
PROCEDIMIENTO
870810022 / 10 p. 1/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870810022 / 10 p. 2/6 UR140604
Plasma Control
Normal
Lote: 1409148920
Exp.: 2016/12

REACTIVO PROVISTO

Soluplastin (seg) 11,0 14,8 11,1 15,0
PRECAUCIONES

PRESENTACION
- 6 x 1 ml (Cód. 1937001).
REACTIVOS
PROCEDIMIENTO
870810022 / 11 p. 1/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870810022 / 11 p. 2/6 UR140915
Plasma Control
Normal
Lote: 1410151540
Exp.: 2016/12

REACTIVO PROVISTO

Soluplastin (seg) 11,0 14,8 11,1 15,0
PRECAUCIONES

PRESENTACION
- 6 x 1 ml (Cód. 1937001).
REACTIVOS
PROCEDIMIENTO
870810022 / 12 p. 1/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870810022 / 12 p. 2/6 UR141027
Plasma Control
Normal
Lote: 1504163250

REACTIVO PROVISTO

Soluplastin (seg) 11,2 15,2 11,1 15,0
PRECAUCIONES

PRESENTACION
- 6 x 1 ml (Cód. 1937001).
REACTIVOS
PROCEDIMIENTO
870810022 / 13 p. 1/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870810022 / 13 p. 2/6 UR150414
Plasma Control
Normal
Lote: 1506168360

REACTIVO PROVISTO

Soluplastin (seg) 11,0 14,8 11,1 15,0
PRECAUCIONES

PRESENTACION
- 6 x 1 ml (Cód. 1937001).
REACTIVOS
PROCEDIMIENTO
870810022 / 14 p. 1/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870810022 / 14 p. 2/6 UR150619
Plasma Control
Normal
Lote: 1506168380

REACTIVO PROVISTO

Soluplastin (seg) 11,2 15,2 11,1 15,0
PRECAUCIONES

PRESENTACION
- 6 x 1 ml (Cód. 1937001).
REACTIVOS
PROCEDIMIENTO
870810022 / 16 p. 1/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870810022 / 16 p. 2/6 UR150625
Plasma Control
Normal
Lote: 1507170260

REACTIVO PROVISTO

Soluplastin (seg) 11,2 15,2 11,1 15,0
PRECAUCIONES

PRESENTACION
- 6 x 1 ml (Cód. 1937001).
REACTIVOS
PROCEDIMIENTO
870810022 / 17 p. 1/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870810022 / 17 p. 2/6 UR150728
Plasma Control
Normal
Lote: 1508172420

REACTIVO PROVISTO

Soluplastin (seg) 11,2 15,2 11,1 15,0
PRECAUCIONES

PRESENTACION
- 6 x 1 ml (Cód. 1937001).
REACTIVOS
PROCEDIMIENTO
870810022 / 18 p. 1/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870810022 / 18 p. 2/6 UR150827
Plasma Control
Normal
Lote: 1509174510

REACTIVO PROVISTO

Soluplastin (seg) 11,2 15,2 11,1 15,0
PRECAUCIONES

PRESENTACION
- 6 x 1 ml (Cód. 1937001).
REACTIVOS
PROCEDIMIENTO
870810022 / 19 p. 1/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870810022 / 19 p. 2/6 UR150925
Plasma Control
Normal
Lote: 1511180280

REACTIVO PROVISTO

Soluplastin (seg) 11,6 15,8 11,4 15,4
PRECAUCIONES

PRESENTACION
- 6 x 1 ml (Cód. 1937001).
REACTIVOS
PROCEDIMIENTO
870810022 / 20 p. 1/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870810022 / 20 p. 2/6 UR151201
Plasma Control
Normal
Lote: 1601182220

REACTIVO PROVISTO

Soluplastin (seg) 11,6 15,8 11,4 15,4
PRECAUCIONES

PRESENTACION
- 6 x 1 ml (Cód. 1937001).
REACTIVOS
PROCEDIMIENTO
870810022 / 21 p. 1/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870810022 / 21 p. 2/6 UR160106
Plasma Control
Patológico
Lote: 1306117840
Exp.: 2015/12
APLICACIONES
El Plasma Control está diseñado para su uso como control en
protrombina, tiempo de trombina, tiempo de tromboplasti-
la determinación del tiempo de protrombina, tiempo de trombi-
na parcial activada y fibrinógeno que se emplee en cada
na, tiempo de tromboplastina parcial activada y fibrinógeno.
caso.
REACTIVO PROVISTO
Control Patológico: pool de plasmas humanos normales ob-
tenidos con citrato como anticoagulante y procesados de ma-
Fallas en la reconstitución del Plasma Control pueden ser
nera de obtener tiempos de protrombina, trombina y trombo-
plastina parcial anormalmente prolongados y fibrinógeno bajo,
Ver LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO en el manual de
liofilizado.
instrucciones correspondiente al equipo en uso.
Los valores de tiempo de protrombina, tiempo de trombina,
INSTRUCCIONES PARA SU USO tiempo de tromboplastina parcial activada y fibrinógeno utili-
Reconstituir cada vial con 1,0 ml de agua bidestilada o desioni- zando el Plasma Control, dependen de los reactivos y anali-
zada. Dejar disolver unos 20 minutos a temperatura ambiente zadores para coagulación en uso.
todo el material particulado se ha disuelto completamente. Técnica Técnica
Reactivo
Manual Automática*
PRECAUCIONES Soluplastin 36,1 - 53,1 seg 37,4 - 55,0 seg
Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro". APTTest 63,7 - 106,1 seg 63,7 - 106,1 seg
El Plasma Control ha sido preparado a partir de material no APTTest ellágico 54,0 - 80,9 seg 52,9 - 79,3 seg
reactivo para HBsAg, HCV y HIV. Sin embargo, al igual que Fibrinógeno 115 - 165 mg/dl 115 - 165 mg/dl
las muestras de sangre, debe manejarse como si se tratara Tiempo de Trombina
de material infectivo. 4.0 UNIH/ml 14,6 - 21,0 seg 14,7 - 21,1 seg
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales 2.7 UNIH/ml 17,5 - 25,1 seg 17,5 - 25,3 seg
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de * Wiener lab. CoL 2
Método turbidimétrico en analizadores automáticos:
Valor Medio Rango
ALMACENAMIENTO Reactivo
(mg/dl) (mg/dl)
Reactivos Provistos: estables en refrigerador (2-10oC) hasta
la fecha de vencimiento indicada en la caja. Fibrinogen Turbitest AA 150 123 - 177
tanto a temperatura ambiente como refrigerado (2-10oC). PRESENTACION
- 6 x 1 ml (Cód. 1937002).
REACTIVOS
Cualquier variación en los caracteres organolépticos del Plas-
ma Control puede ser indicio de deterioro del mismo.
PROCEDIMIENTO
870820022 / 11 p. 1/6
Símbolos
C M
Elaborado por:
vistos por la Directiva Europea 98/79 CE de pro-
ductos sanitarios para el diagnóstico "in vitro"
P
Xn
Representante autorizado en la Comunidad Eu-

ropea Nocivo


Xi
Irritante
No congelar
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Biochemist
Wiener lab.
A.N.M.A.T. Registered product
870820022 / 11 p. 2/6 UR130701
Plasma Control
C Patológico
Lote: 1311128580
Exp.: 2016/02/29
APLICACIONES
la determinación del tiempo de protrombina, tiempo de trom-
protrombina, tiempo de trombina, tiempo de trombo-
bina, tiempo de tromboplastina parcial activada y fibrinógeno.
plastina parcial activada y fibrinógeno que se emplee
en cada caso.
REACTIVO PROVISTO
Control Patológico: pool de plasmas humanos normales
obtenidos con citrato como anticoagulante y procesados
de manera de obtener tiempos de protrombina, trombina y
tromboplastina parcial anormalmente prolongados y fibrinó-
geno bajo, liofilizado.
Ver LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO en el manual
INSTRUCCIONES PARA SU USO Los valores de tiempo de protrombina, tiempo de trombina,
Reconstituir cada vial con 1,0 ml de agua bidestilada o tiempo de tromboplastina parcial activada y fibrinógeno
desionizada. Dejar disolver unos 20 minutos a temperatura utilizando el Plasma Control, dependen de los reactivos y
ambiente mezclando de tanto en tanto sin invertir. Asegu- analizadores para coagulación en uso.
rarse de que todo el material particulado se ha disuelto
completamente. Reactivo Técnica Técnica
Manual Automática*
PRECAUCIONES Soluplastin (seg) 36,1 53,1 37,4 55,0
APTTest (seg) 63,7 106,1 63,7 106,1
reactivo para HBsAg, HCV y HIV. Sin embargo, al igual que APTTest ellágico (seg) 54,0 80,9 52,9 79,3
Fibrinógeno (mg/dl) 115 165 115 165
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales Tiempo de Trombina (seg)
4.0 UNIH/ml 14,6 21,0 14,7 21,1
acuerdo a la normativa local vigente. 2.7 UNIH/ml 17,5 25,1 17,5 25,3
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE * Wiener lab. CoL 2

ALMACENAMIENTO
hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. Valor Medio Rango
Una vez reconstituidos poseen una estabilidad de 8 horas Reactivo
(mg/dl) (mg/dl)
Fibrinogen Turbitest AA 150 123 177
REACTIVOS PRESENTACION
Cualquier variación en los caracteres organolépticos del - 6 x 1 ml (Cód. 1937002).
PROCEDIMIENTO
870820022 / 12 p. 1/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Biochemist
Wiener lab.
870820022 / 12 p. 2/6 UR131129
Plasma Control
Patológico
Lote: 1404137180
Exp.: 2016/02/29
APLICACIONES
en cada caso.
REACTIVO PROVISTO
Manual Automática*
APTTest (seg) 63,7 106,1 63,7 106,1
4.0 UNIH/ml 14,6 21,0 14,7 21,1

ALMACENAMIENTO
(mg/dl) (mg/dl)
PROCEDIMIENTO
870820022 / 13 p. 1/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Biochemist
870820022 / 13 p. 2/6 UR140407
Plasma Control
Patológico
Lote: 1406141950
Exp.: 2016/12/30
APLICACIONES
en cada caso.
REACTIVO PROVISTO
Manual Automática*
APTTest (seg) 61,4 102,4 61,4 102,4
4.0 UNIH/ml 14,8 21,4 14,1 20,3

ALMACENAMIENTO
(mg/dl) (mg/dl)
PROCEDIMIENTO
870820022 / 14 p. 1/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Biochemist
870820022 / 14 p. 2/6 UR140618
Plasma Control
Patológico
Lote: 1407145340
Exp.: 2016/12/31
APLICACIONES
en cada caso.
REACTIVO PROVISTO
Manual Automática*
APTTest (seg) 61,4 102,4 61,4 102,4
4.0 UNIH/ml 14,8 21,4 14,1 20,3

ALMACENAMIENTO
(mg/dl) (mg/dl)
PROCEDIMIENTO
870820022 / 15 p. 1/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Biochemist
870820022 / 15 p. 2/6 UR140731
Plasma Control
Patológico
Lote: 1411152600
Exp.: 2016/12
APLICACIONES
en cada caso.
REACTIVO PROVISTO
Manual Automática*
APTTest (seg) 61,4 102,4 61,4 102,4
4.0 UNIH/ml 14,8 21,4 14,1 20,3

ALMACENAMIENTO
(mg/dl) (mg/dl)
PROCEDIMIENTO
870820022 / 16 p. 1/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Biochemist
870820022 / 16 p. 2/6 UR141112
Plasma Control
Patológico
Lote: 1411152620
Exp.: 2016/12
APLICACIONES
en cada caso.
REACTIVO PROVISTO
Manual Automática*
APTTest (seg) 61,4 102,4 61,4 102,4
4.0 UNIH/ml 14,8 21,4 14,1 20,3

ALMACENAMIENTO
(mg/dl) (mg/dl)
PROCEDIMIENTO
870820022 / 17 p. 1/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Biochemist
870820022 / 17 p. 2/6 UR141112
Plasma Control
Patológico
Lote: 1504162880
APLICACIONES
en cada caso.
REACTIVO PROVISTO
Manual Automática*
APTTest (seg) 54,8 91,3 54,8 91,3
4.0 UNIH/ml 14,5 20,9 14,5 20,9

ALMACENAMIENTO
(mg/dl) (mg/dl)
PROCEDIMIENTO
870820022 / 18 p. 1/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Biochemist
870820022 / 18 p. 2/6 UR150410
Plasma Control
Patológico
Lote: 1508171420
APLICACIONES
en cada caso.
REACTIVO PROVISTO
Manual Automática*
APTTest (seg) 54,8 91,3 54,8 91,3
4.0 UNIH/ml 14,5 20,9 14,5 20,9

ALMACENAMIENTO
(mg/dl) (mg/dl)
PROCEDIMIENTO
870820022 / 19 p. 1/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Biochemist
870820022 / 19 p. 2/6 UR150807
Plasma Control
Patológico
Lote: 1512180430
APLICACIONES
en cada caso.
REACTIVO PROVISTO
Manual Automática*
APTTest (seg) 49,1 81,8 49,1 81,8
4.0 UNIH/ml 15,2 21,8 14,4 20,8

ALMACENAMIENTO
(mg/dl) (mg/dl)
PROCEDIMIENTO
870820022 / 20 p. 1/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Biochemist
870820022 / 20 p. 2/6 UR151210
Plasma Control
Patológico
Lote: 1601183060
APLICACIONES
en cada caso.
REACTIVO PROVISTO
Manual Automática*
APTTest (seg) 49,1 81,8 49,1 81,8
4.0 UNIH/ml 15,2 21,8 14,4 20,8

ALMACENAMIENTO
(mg/dl) (mg/dl)
PROCEDIMIENTO
870820022 / 21 p. 1/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Biochemist
870820022 / 21 p. 2/6 UR160127
Plasma Control
Patológico
Lote: 1602184200
APLICACIONES
en cada caso.
REACTIVO PROVISTO
Manual Automática*
APTTest (seg) 49,1 81,8 49,1 81,8
4.0 UNIH/ml 15,2 21,8 14,4 20,8

ALMACENAMIENTO
(mg/dl) (mg/dl)
PROCEDIMIENTO
870820022 / 22 p. 1/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Biochemist
870820022 / 22 p. 2/6 UR160211
LINEA TURBITEST AA
Prealbumin
de prealbúmina en suero

La prealbúmina o transtiretina, es una proteína rica en trip- ALMACENAMIENTO
tofano, sintetizada en los hepatocitos. Reactivos Provistos: estables en refrigerador (2-10oC) has-
Se une a la proteína transportadora de retinol para trans- ta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No congelar.
portar la vitamina A desde el hígado a los tejidos periféricos.
También actúa como transportadora de tiroxina. MUESTRA
Tiene una vida media de aproximadamente dos días y se Suero
cataboliza en los riñones. a) Recolección: obtener la muestra de la manera usual.
Debido a su corta vida media su concentración baja rápi- b) Aditivos: no se requieren.
damente cuando la síntesis hepática disminuye debido a c) Sustancias interferentes conocidas: no emplear mues-
daño hepático o ingesta inadecuada. Por esto resulta útil tras hemolizadas, lipémicas o contaminadas.
como indicador sensible de malnutrición y como respuesta Las muestras que poseen precipitados deben ser centrifu-
temprana a tratamientos de nutrición enteral o parenteral. gadas previo a su ensayo.
La prealbúmina refleja cambios dietarios recientes más que No se observan interferencias por hemoglobina hasta 1000 mg/dl,
estado nutricional en general. Dado que su síntesis se realiza bilirrubina hasta 20 mg/dl, triglicéridos hasta 2500 mg/dl, hepa-
en el hígado, resulta un indicador apropiado de la función rina hasta 50 mg/dl ni por citrato de sodio hasta 1000 mg/dl.
hepática en las enfermedades hepatobiliares. Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
Esta proteína se encuentra aumentada en uremia y deshidra- drogas en el presente método.
tación y disminuye en la respuesta inflamatoria, ayuno, hiperti- d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
roidismo, daño hepático severo, sobrehidratación y embarazo. muestra debe ser preferentemente fresca. Si el ensayo no
La prealbúmina reacciona con el anticuerpo específico for- a -20oC.
mando inmunocomplejos insolubles. La turbidez causada por
estos inmunocomplejos es proporcional a la concentración MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
de prealbúmina en la muestra y puede ser medida espec- - Espectrofotómetro
trofotométricamente. - Cubetas espectrofotométricas de caras paralelas
B. Reactivo B: anticuerpos policlonales anti-prealbúmina
humana (cabra) en buffer fosfato, pH 7,4. CONDICIONES DE REACCION
REACTIVOS NO PROVISTOS - Temperatura de reacción: temperatura ambiente (25oC). El
- Solución fisiológica. control de la temperatura no es crítico, pudiendo oscilar
- Calibrador Proteínas nivel alto Turbitest AA de Wiener lab. entre 22 y 30oC
INSTRUCCIONES PARA SU USO - Volumen de muestra: 10 ul
Reactivos Provistos: listos para usar. - Volumen final de reacción: 1810 ul
PRECAUCIONES proporcionalmente, sin que se alteren los factores de cálculo.
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales CURVA DE CALIBRACION
de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos. Realizar en tubos de Kahn, las siguientes diluciones en
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de solución fisiológica del Calibrador Proteínas nivel alto:
864105800 / 01 p. 1/6
1:1, 1:2, 1:4, 1:8 y 1:16, empleando solución fisiológica
como punto cero.
Se recomienda realizar una recalibración completa cuando
Calibrador Proteínas diluido 10 ul se cambia de lote reactivo o cuando el control de calidad
Reactivo A 1500 ul así lo determina.
Homogeneizar y leer la absorbancia de cada dilución PERFORMANCE

a 340 nm (DO1) llevando a cero con agua destilada. a) Reproducibilidad: realizando replicados de muestras
Luego agregar: con distintos niveles de prealbúmina, se calculó la precisión
Reactivo B 300 ul intraensayo.
Nivel D.S. C.V.
Leer la absorbancia a 340 nm (DO2), llevando a cero con 7, 7 mg/dl ± 0,3 mg/dl 4,2%
agua destilada. 31,9 mg/dl ± 0,7mg/dl 2,1%
para cada dilución del Calibrador Proteínas, incluyendo b) Límite de detección: 4 mg/dl.
el punto cero. c) Rango de medición: 4 - 80 mg/dl.
Representar en papel milimetrado las diferencias de ab- d) Efecto prozona: no se evidencia efecto prozona hasta
sorbancia (∆A) en función de la concentración en mg/dl 150 mg/dl de prealbúmina.
Muestra 10 ul
Luego agregar:
Reactivo B 300 ul
2005.
rrespondientes a cada muestra analizada. Interpolar esta ∆A
en mg/dl correspondiente a la muestra estudiada.
Las muestras con absorbancias superiores a la del Cali-
brador Proteínas nivel alto deben ser diluidas con solución

Se recomienda el uso del Control Inmunológico nivel 1 o
20 - 40 mg/dl (0,2 - 0,4 g/l)
intervalos de referencia, dentro de su población de pacientes.

864105800 / 01 p. 2/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
864105800 / 01 p. 3/6 UR140815
Proteínas Totales
C Método colorimétrico para la determinación de proteínas
AA
totales en suero

Las proteínas son compuestos orgánicos macromoleculares, ALMACENAMIENTO
ampliamente distribuidos en el organismo, esenciales para la Reactivo Provisto: es estable a temperatura ambiente hasta
vida. Actúan como elementos estructurales y de transporte y la fecha de vencimiento indicada en la caja.
aparecen bajo la forma de enzimas, hormonas, anticuerpos,
factores de coagulación, etc. MUESTRA
En el plasma, las proteínas contribuyen a mantener el vo- Suero
lumen del fluido circulante, transportan sustancias relativa- a) Recolección: debe obtenerse suero libre de hemólisis.
mente insolubles y actúan en la inactivación de compuestos b) Aditivos: no se requieren.
tóxicos y en la defensa contra agentes invasores. c) Sustancias interferentes conocidas: no se observa
La determinación de proteínas totales es útil para el mo- interferencia por bilirrubina hasta 100 mg/l, ni hemólisis ligera
nitoreo de cambios ocasionados por diversos estados de y en ningún caso se presenta turbiedad por quilomicrones.
enfermedad. En condiciones patológicas como pérdidas Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
renales, desnutrición, infecciones prolongadas, etc., suelen drogas en el presente método.
presentarse hipoproteinemias, mientras que en otras como d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: si no
mieloma múltiple, endocarditis bacteriana y hemoconcentra- se procesa inmediatamente el suero puede conservarse hasta
ción de diversos orígenes, (ej.: deshidratación) se observan 3 días en refrigerador (2-10oC) o una semana en congelador.
hiperproteinemias.
FUNDAMENTOS DEL METODO - Espectrofotómetro o fotocolorímetro.
Los enlaces peptídicos de las proteínas reaccionan con el - Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados.
ión cúprico en medio alcalino, para dar un complejo color - Tubos o cubetas espectrofotométricas.
violeta con máximo de absorción a 540 nm, cuya intensidad - Baño de agua a 37oC.
es proporcional a la concentración de proteínas totales en - Reloj o timer.
la muestra.
REACTIVO PROVISTO - Longitud de onda: 540 nm en espectrofotómetro o en
A. Reactivo A: complejo EDTA/Cu 13 mmol/l en hidróxido fotocolorímetro con filtro verde (520-560 nm).
de sodio 875 mmol/l y alquil aril poliéter (AAP). - Temperatura de reacción: 37oC
REACTIVO NO PROVISTO - Volumen de muestra: 20 ul
Calibrador A plus / Proti 2 Suero Patrón de Wiener lab. - Volumen de Reactivo A: 2,0 ml (Ver PERFORMANCE)
Reactivo A: listo para usar.
PROCEDIMIENTO
PRECAUCIONES En tres tubos marcados B (Blanco), S (Standard) y D
El Reactivo Provisto es para uso diagnóstico "in vitro". (Desconocido), colocar:
El Reactivo A es irritante. R36/38: irrita los ojos y la piel. B S D
S24/25: evitar el contacto con los ojos y la piel. S26: en caso
de contacto con los ojos, lávense inmediata y abundante- Calibrador / Suero Patrón - 20 ul -
mente con agua y acúdase a un médico. S28: en caso de Muestra - - 20 ul
contacto con la piel, lávese inmediata y abundantemente
con agua. S37/39: usar guantes adecuados y protección Reactivo A 2,0 ml 2,0 ml 2,0 ml
para los ojos/la cara. Mezclar con varilla. Incubar durante 15 minutos a 37oC.
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales Leer en espectrofotómetro a 540 nm o en fotocoloríme-
de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos. tro con filtro verde (520-560 nm) llevando a cero con el
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de Blanco de Reactivo.
864125522 / 01 p. 1/9
ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL b) Recuperación: agregando cantidades conocidas de
El color de la reacción es estable durante 12 horas por lo que proteínas a distintas muestras se obtuvo una recuperación
la absorbancia debe ser leída dentro de ese lapso. de 96 a 103 %.
CALCULO DE LOS RESULTADOS y de la longitud de onda. De acuerdo con la sensibilidad
Empleando el Suero Patrón tal como se indica en PROCE- requerida para un ∆A mínimo de 0,001, el menor cambio
DIMIENTO, los cálculos se realizan como sigue: de concentración detectable será de 0,01 g/dl.
d) Linealidad: la reacción es lineal hasta 17 g/dl.
P.T. (g/dl)*
Proteínas totales (g/dl) = D x f f= Si el instrumento usado en la lectura tuviese baja sensibilidad
S fotocolorimétrica, puede emplearse 20 ul de muestra con 1,5 ml
*Concentración de proteínas totales en el Calibrador A plus de Reactivo A. En este caso la linealidad alcanza a 12 g/dl de
o en el Suero Patrón proteínas totales.
Albúmina (g/dl)
Relación A/G = PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS
P.T. (g/dl) - Alb. (g/dl) Para las instrucciones de programación consulte el manual
Curva de calibración Para la calibración, se puede utilizar Calibrador A plus de
Para constatar que el fotocolorímetro tenga una respuesta Wiener lab.
lineal en la longitud de onda fijada para la reacción, puede
prepararse una curva de calibración con cantidades cre- PRESENTACION
cientes de Suero Patrón (ej.: 20 y 40 ul) con un volumen de - 10 x 20 ml (Cód. 1009327).
Reactivo A de 2,0 ml en todos los casos. Si el valor obtenido - 10 x 20 ml (Cód. 1009630).
para el segundo tubo se aparta en más de un 5% del cal- - 10 x 20 ml (Cód. 1009273).
culado de acuerdo a la lectura del primero debe emplearse - 6 x 120 ml (Cód. 1690009).
para los cálculos la curva de calibración.
BIBLIOGRAFIA
CONVERSION DE UNIDADES AL SISTEMA SI - Gasbarro, L.; Bandinelli R. & Tomassini, G. - Clin. Chim.
Proteínas totales (g/dl) x 10 = Proteínas totales (g/l) Acta 36/1:275 (1972).
- Strickland, R.D.; Freeman, M.L. & Gurule E.T. - Anal. Chem.
METODO DE CONTROL DE CALIDAD 33:545 (1961).
Procesar 2 niveles de un material de control de calidad - Pastewka, J. W. & Ness, A.T. - Clin. Chim. Acta 12:523
(Standatrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas (1965).
de proteínas totales, con cada determinación. - Peters, T. Jr. - Clin. Chem. 14:1147 (1968).
- Henry, R., Sobel, C. & Berkman, S. - Anal. Chem.
VALORES DE REFERENCIA 29/10:1491 (1957).
Se determinó el contenido de proteínas totales en suero de - Kachmar, J.F. - Fundamentals of Clinical Chemistry - Tietz,
personas sanas, de ambos sexos, con alimentación mixta Saunders, pág. 177 (1970).
normal y edades entre 17 y 40 años. - Rojkín, M.L.; Olguín de Mariani, M.C.; Drappo, G.A. y Sosa,
Se obtuvieron los siguientes rangos: C.F. - Bioq. del Atlántico VI/63: 1931 (1974).
Proteínas totales: 6,1 a 7,9 g/dl - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
Relación A/G: 1,2 a 2,2 AACC Press, 4th ed., 2001.

Ver Sustancias interferentes en MUESTRA.
Puede usarse plasma como muestra, pero el resultado de
la proteinemia estará incrementado en 0,2 g/dl debido a la
presencia de fibrinógeno, que no está considerado dentro
de la definición de Proteínas Totales.
PERFORMANCE
muestras en distintos días se obtuvieron los siguientes
resultados:
Nivel D.S. C.V.
4,6 g/dl ± 0,022 g/dl 0,49 %
5,8 g/dl ± 0,023 g/dl 0,56 %
7,0 g/dl ± 0,028 g/dl 0,39 %
864125522 / 01 p. 2/9
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
864125522 / 01 p. 3/9 UR120903
Proti
Control - 2 niveles
Lote: 1401131100 (Exp.: 2015/11)
C Para control de precisión
Nivel 1: 131100 (Exp.: 2015/11)
Nivel 2: 131100 (Exp.: 2015/11)
APLICACIONES ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE

Para estudio de precisión intralaboratorial en la determina- ALMACENAMIENTO
ción de proteínas en orina y líquido cefalorraquídeo utilizan- Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10oC)
do el equipo de Proti U/LCR de Wiener lab. hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
REACTIVOS PROVISTOS INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS

Control Nivel 1: solución conteniendo niveles de albúmina REACTIVOS
entre 25-75 mg/dL. Los valores son variables lote a lote. Cualquier variación de los caracteres organolépticos de los
Control Nivel 2: solución conteniendo niveles de albúmina controles, puede ser indicio de deterioro del mismo.
entre 70-190 mg/dL. Los valores son variables lote a lote.
PRECAUCIONES Ver manual de instrucciones de Proti U/LCR de Wiener lab.
Los controles han sido examinados para antígeno de super-
ficie del virus de hepatitis B (HBsAg), virus de la hepatitis PROCEDIMIENTO
C (HCV) y anticuerpos contra HIV 1/2, encontrándose no Se deben emplear de la misma manera que una muestra
reactivos. No obstante, deben ser empleados como si se desconocida, de acuerdo a las instrucciones que acom-
tratara de material infectivo. pañan al equipo de Proti U/LCR de Wiener lab
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
acuerdo a la normativa local vigente. Ver manual de instrucciones de Proti U/LCR de Wiener lab.
INSTRUCCIONES PARA SU USO PRESENTACION

Reactivos Provistos: listos para usar. - 2 x 3 mL (Cód. 1937003).
VALORES ASIGNADOS PARA TECNICA MANUAL Y ANALIZADORES

NIVEL 1 NIVEL 2
TECNICA /
ANALIZADOR VALOR MEDIO RANGO VALOR MEDIO RANGO
(mg/dL) (mg/dL) (mg/dL) (mg/dL)
Konelab Series /
28,8 23,0 34,6 109 87 131
Wiener lab, CT Series
Metrolab 2300 plus /
31,8 25,4 38,2 109 87 131
Wiener lab. CM Series
Selectra 1 / 2 / E 35,2 28,1 42,2 112 90 135
Targa BT 3000 33,9 23,7 44,1 108 76 140
BT 3000 plus /
33,9 25,4 42,4 108 81 135
Wiener lab. CB Series
Wiener lab. CMD Series 32,4 25,9 38,9 112 90 134
Técnica Manual 33,6 25,2 42,0 115 86 143
870850000 / 26 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
870850000 / 26 p. 2/4 UR140205
Proti
Control - 2 niveles
Lote: 1401132300 (Exp.: 2016/01)
Nivel 1: 132300 (Exp.: 2016/01)
Nivel 2: 132300 (Exp.: 2016/01)




NIVEL 1 NIVEL 2
TECNICA /
Konelab Series /
27,0 21,6 32,4 108 86 130
29,6 23,7 35,5 107 86 128
Selectra 1 / 2 / E 34,2 27,4 41,0 113 90 136
Targa BT 3000 32,3 22,6 42,0 110 77 143
BT 3000 plus /
32,3 24,2 40,4 110 83 138
Técnica Manual 33,4 25,1 41,8 115 86 143
870850000 / 27 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
870850000 / 27 p. 2/4 UR140205
Proti
Control - 2 niveles
Lote: 1404138430 (Exp.: 2016/04)
Nivel 1: 138430 (Exp.: 2016/04)
Nivel 2: 138430 (Exp.: 2016/04)




NIVEL 1 NIVEL 2
TECNICA /
Konelab Series /
27,4 21,9 32,9 107 86 128
31,6 25,3 37,9 108 86 130
Selectra 1 / 2 / E 31,8 25,4 38,2 106 85 127
Targa BT 3000 33,0 23,1 42,9 107 75 139
BT 3000 plus /
33,0 24,8 41,3 107 80 134
Técnica Manual 34,3 25,8 42,9 111 83 139
870850000 / 28 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
870850000 / 28 p. 2/4 UR140515
Proti
Control - 2 niveles
Lote: 1409148350 (Exp.: 2016/09)
Nivel 1: 148350 (Exp.: 2016/09)
Nivel 2: 148350 (Exp.: 2016/09)




NIVEL 1 NIVEL 2
TECNICA /
Konelab Series /
28,0 22,4 33,6 108 86 130
31,5 25,2 37,8 107 86 129
Selectra 1 / 2 / E 33,0 24,8 41,3 107 85 128
Targa BT 3000 33,0 24,8 41,3 107 80 133
BT 3000 plus /
33,0 24,8 41,3 107 80 133
Técnica Manual 36,2 27,2 45,3 122 91 152
870850000 / 29 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
870850000 / 29 p. 2/4 UR140922
Proti
Control - 2 niveles
Lote: 1501153450 (Exp.: 2016/11)
Nivel 1: 153450 (Exp.: 2016/11)
Nivel 2: 153450 (Exp.: 2016/11)




NIVEL 1 NIVEL 2
TECNICA /
Konelab Series /
27,1 21,7 32,5 112 90 134
31,2 25,0 37,4 111 89 133
Selectra 1 / 2 / E 32,0 24,0 40,0 111 89 133
Targa BT 3000 31,7 23,8 39,6 109 82 136
BT 3000 plus /
31,7 23,8 39,6 109 82 136
Técnica Manual 36,4 27,3 45,5 111 83 138
870850000 / 30 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
870850000 / 30 p. 2/4 UR150114
Proti
Control - 2 niveles
Lote: 1504163400
Nivel 1: 163400
Nivel 2: 163400




NIVEL 1 NIVEL 2
TECNICA /
Konelab Series /
26,1 20,9 31,3 110 88 132
29,8 23,8 35,7 104 83 125
Selectra 1 / 2 / E 32,4 24,3 40,5 109 87 131
Targa BT 3000 31,8 23,9 39,8 106 80 133
BT 3000 plus /
31,8 23,9 39,8 106 80 133
Técnica Manual 35,5 26,7 44,4 116 87 145
870850000 / 31 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
870850000 / 31 p. 2/4 UR150428
Proti
Control - 2 niveles
Lote: 1508172200
Nivel 1: 172200
Nivel 2: 172200




NIVEL 1 NIVEL 2
TECNICA /
Konelab Series /
41,0 32,8 49,2 110 88 132
44,5 35,6 53,4 105 84 126
Selectra 1 / 2 / E 45,8 34,4 57,3 105 84 126
Targa BT 3000 46,1 34,6 57,7 106 80 133
BT 3000 plus /
46,1 34,6 57,7 106 80 133
Técnica Manual 48,4 36,3 60,5 113 85 141
870850000 / 32 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
870850000 / 32 p. 2/4 UR150902
Proti
Control - 2 niveles
Lote: 1512181580
Nivel 1: 181580
Nivel 2: 181580




NIVEL 1 NIVEL 2
TECNICA /
Konelab Series /
42,2 33,8 50,7 111 88,6 133
48,6 38,9 58,3 109 87,3 131
Selectra 1 / 2 / E 47,0 35,3 58,8 106 85,0 128
Targa BT 3000 47,0 35,3 58,8 106 79,7 133
BT 3000 plus /
47,0 35,3 58,8 106 79,7 133
Wiener lab. CMD Series 46,9 37,5 56,3 109 87,0 131
Técnica Manual 51,5 38,6 64,3 112 83,9 140
870850000 / 33 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
870850000 / 33 p. 2/4 UR160114
Proti
Control - 2 niveles
Lote: 1603185340
Nivel 1: 185340
Nivel 2: 185340




NIVEL 1 NIVEL 2
TECNICA /
Konelab Series /
29,2 23,4 35,1 105 84 126
34,7 27,8 41,7 105 84 126
Selectra 1 / 2 / E 34,4 25,8 43,0 100 80 120
Targa BT 3000 34,4 25,8 43,0 100 75 125
BT 3000 plus /
34,4 25,8 43,0 100 75 125
Técnica Manual 36,1 27,1 45,1 108 81 135
870850000 / 34 p. 1/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
870850000 / 34 p. 2/4 UR160318
Proti
C Método colorimétrico cuantitativo para la determinación
de proteínas en orina y líquido cefalorraquídeo

Proteínas en orina - Agua destilada.
Una cantidad de proteínas plasmáticas de pequeño peso - Solución fisiológica.
molecular son filtradas normalmente en forma libre a través
del glomérulo renal y luego son, en parte, reabsorbidas por INSTRUCCIONES PARA SU USO
los túbulos renales. Reactivos Provistos: listos para usar.
Hay condiciones fisiológicas o benignas donde se puede
observar un aumento en la excreción urinaria de proteínas PRECAUCIONES
como en el ejercicio violento, fiebre, hipotermia, embarazo. Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
La medición de las proteínas urinarias es importante en la Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
detección de patología renal. La proteinuria en la enfermedad de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
renal puede resultar de una disfunción glomerular o tubular. Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
En el primer caso se da por un aumento en el pasaje a través acuerdo a la normativa local vigente.
de los capilares del glomérulo y caracterizada por la pérdida
de proteínas plasmáticas de igual o mayor tamaño. En el ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
segundo caso se da por una disminución en la capacidad ALMACENAMIENTO
de reabsorción de proteínas por los túbulos. Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10oC)
Entre las patologías en las que se produce un aumento en hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
la excreción de proteínas urinarias se encuentran: síndrome El Reactivo A debe protegerse de la luz.
nefrítico, síndrome nefrótico, hipergammaglobulinemia mo-
noclonal, nefropatía diabética, infecciones del tracto urinario. INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
Proteínas en líquido cefalorraquídeo (LCR) REACTIVOS
La determinación de proteínas en LCR es útil para evaluar Cuando el espectrofotómetro ha sido llevado a cero con agua
la permeabilidad de la barrera hematoencefálica en muchas destilada, lecturas de absorbancia a 600 nm del Reactivo A
enfermedades inflamatorias o infecciosas del SNC, como superiores a 0,250 D.O. o inferiores a 0,030 D.O. son indicio
ocurre en las meningitis bacterianas, virales o de otros oríge- de deterioro del mismo.
nes, encefalitis, poliomielitis, neurosífilis, esclerosis múltiple,
hemorragia cerebral, tumores cerebrales o espinales. Otros MUESTRA
desórdenes ocasionan una producción anormal de proteínas Orina o líquido cefalorraquídeo
dentro del SNC como las enfermedades desmielinizantes. a) Recolección: obtener orina ocasional o de 24 horas.
La sensibilidad del presente método lo hace apropiado para Medir la diuresis.
ser usado en líquidos biológicos tales como orina y líquido En caso de que las muestras sean turbias, es conveniente
cefalorraquídeo donde la concentración de proteínas con centrifugarlas.
respecto a la del plasma es demasiado baja como para deter- b) Aditivos: no se requieren.
minarla por métodos empleados habitualmente para suero. c) Sustancias interferentes conocidas:
- la hemólisis puede ser causa de resultados falsamente
FUNDAMENTOS DEL METODO aumentados tanto en orina como en LCR;
Las proteínas presentes en la muestra reaccionan en medio - los conservantes para orina tales como ácido clorhídrico,
ácido con el complejo Rojo de Pirogalol-Molibdato originando ácido benzoico o timol pueden ser causas de resultados
un nuevo complejo coloreado que se cuantifica espectrofo- falsamente disminuidos;
tométricamente a 600 nm. - algunas drogas o medicamentos pueden interferir en la
reacción. Referirse a la bibliografía de Young para los
REACTIVOS PROVISTOS efectos de las drogas en el presente método.
A. Reactivo A: solución estabilizada de Rojo de Pirogalol d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
0,1 mmol/l, molibdato de sodio 0,1 mmol/l en buffer succi- orina puede conservarse refrigerada (2-10oC) hasta 8 días o
nato 50 mmol/l. congelada (-20oC) hasta 3 meses. El LCR puede conservarse
S. Standard: solución de albúmina 100 mg/dl (1,0 g/l). 3 días refrigerado (2-10oC) o 3 meses congelado (-20oC).
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MATERIAL REQUERIDO (no provisto) CONVERSION DE UNIDADES AL SISTEMA SI
- Espectrofotómetro o fotocolorímetro para lecturas a 600 nm Proteínas (mg/dl) x 10 = Proteínas (mg/l)
(580-620 nm).
- Baño de agua a 37oC. LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
- Pipetas y micropipetas para medir los volúmenes indicados. Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
Proteger el Reactivo A de la luz.
El material empleado debe estar libre de tensioactivos, caso
PROCEDIMIENTO contrario se obtendrán valores discordantes.
Llevar a temperatura ambiente los reactivos y las mues-
tras antes de iniciar el ensayo. En tres tubos o cubetas PERFORMANCE
espectrofotométricas marcados B (Blanco), S (Standard) a) Reproducibilidad: procesando replicados de las mismas
y D (Desconocido), colocar: muestras en un mismo día se obtuvo:
B S D Nivel D.S. C.V.
Standard - 20 ul - 14 mg/dl ± 0,66 mg/dl 4,7 %
100 mg/dl ± 2,30 mg/dl 2,3 %
Muestra - - 20 ul
b) Sensibilidad: en espectrofotómetro a 600 nm, un Stan-
Reactivo A 1 ml 1 ml 1 ml dard de 100 mg/dl proporciona una lectura de aproximada-
Mezclar e incubar los tubos durante 10 minutos a 37oC. mente 0,200 D.O., lo que significa que para 0,001 D.O. el
Leer en fotocolorímetro entre 580-620 nm o en espectrofo- mínimo cambio de actividad detectable será de 0,5 mg/dl.
tómetro a 600 nm, llevando a cero el aparato con el Blanco. c) Linealidad: la reacción es lineal hasta 150 mg/dl de pro-
teínas. Para valores superiores, diluir la muestra 1:2 ó 1:4
con solución fisiológica y repetir la determinación. Corregir
ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL los cálculos multiplicando por el factor de dilución empleado.
El color de la reacción es estable durante 30 minutos por Si se desea aumentar la sensibilidad analítica en muestras
lo que la absorbancia debe ser leída dentro de ese lapso. normales o levemente aumentadas, pueden emplearse 50 ul
de muestra. En este caso, es preferible diluir el Standard 1:2
CALCULO DE LOS RESULTADOS (1+1) con agua destilada, y usar este standard de 50 mg/dl en
1) Proteínas en orina de 24 horas la prueba, de tal manera de ajustar la calibración a los valores
D normales bajos.
mg de proteínas /24 horas = x V x 1000
S PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS
siendo: Para las instrucciones de programación consulte el manual
V = volumen de la diuresis expresado en litros /24 horas del usuario del analizador en uso.
1000 = mg/l del Standard
2) Proteínas en orina ocasional PRESENTACION
D - 1 x 100 ml (Cód. 1690007).
mg/dl proteínas = x 100 - 4 x 20 ml (Cód. 1009317).
S - 4 x 20 ml (Cód. 1009282).
3) Proteínas en líquido cefalorraquídeo - 2 x 60 ml (Cód. 1009631).
D
mg/dl proteínas = x 100 BIBLIOGRAFIA
S - Watanabe, N.; et al. - Clin. Chem. 32:1551, 1986.
- Fujita, Y.; Mori, I.; Kitano, S. - Benseki Kagaku 32:379, 1983.
METODO DE CONTROL DE CALIDAD - Watson, M.; Scott, M. - Clin Chem. 41/3:343, 1995.
Procesar 2 niveles de un material de control de calidad (Proti - Killingsworth, L. - Clin. Chem. 28/5:1093, 1982.
U/LCR Control 2 niveles) con concentraciones conocidas - Orsonneau, J.; Douet, P.; Massoubre, C; Lustenberger, P.;
de proteínas, con cada determinación. Bernard, S. - Clin. Chem. 35/11:2233, 1989.
Orina de 24 horas: 30-140 mg/24 horas (hasta 160 mg/24
horas en embarazadas)
Orina ocasional: 25 mg/dl
LCR: 15-45 mg/dl en personas sanas. En personas de más
de 60 años, este rango se extiende hasta 60 mg/dl.
Estos valores son orientativos. Es conveniente que cada
laboratorio establezca sus propios rangos, dado que pue-
den variar de acuerdo a la población de pacientes y a las
condiciones del laboratorio.
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Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
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Proti 2
Método colorimétrico para la determinación de Proteínas
Totales y Albúmina en suero

Las proteínas son compuestos orgánicos macromoleculares, Reactivos Provistos: listos para usar.
ampliamente distribuidos en el organismo y esenciales para
la vida. Actúan como elementos estructurales y de transporte PRECAUCIONES
y aparecen bajo la forma de enzimas, hormonas, anticuerpos, Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
factores de coagulación, etc. Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
La proteína más abundante en plasma es la albúmina. Una de de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
sus funciones más importantes es la de permitir el transporte Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
de ácidos grasos, hormonas esteroides, bilirrubina, cateco- acuerdo a la normativa local vigente.
laminas, que en forma libre son insolubles en medio acuoso. Reactivo A: irritante. R36/38: irrita los ojos y la piel. S26: en
La concentración de albúmina en plasma influye notable- caso de contacto con los ojos, lávense inmediata y abundan-
mente en el mantenimiento de la presión coloidosmótica, temente con agua y acúdase a un médico. S37/39: usense
lo que estaría relacionado con su relativamente bajo peso guantes adecuados y protección para los ojos/la cara.
molecular y su gran carga neta.
En condiciones patológicas como pérdidas renales, desnu- ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
trición, infecciones prolongadas, etc., suelen presentarse ALMACENAMIENTO
hipoproteinemias, mientras que en otras como mieloma Reactivos Provistos: son estables a temperatura ambiente
múltiple, endocarditis bacteriana y hemoconcentraciones de (< 25ºC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
diversos orígenes, se observan hiperproteinemias. Standard: es estable a temperatura ambiente (no mayor de
En general, ambas situaciones se ven acompañadas tam- 25oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. Una
bién por hipoalbuminemias. Los aumentos anormales de vez abierto, debe conservarse en refrigerador.
albúmina son ocasionales y se relacionan casi siempre con
deshidratación que produce el consecuente aumento en el INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
contenido proteico del plasma. REACTIVOS
Variaciones en el pH de los reactivos pueden ocasionar su
FUNDAMENTOS DEL METODO deterioro. Por este motivo se recomienda no intercambiar
Determinación de Proteínas Totales: las tapas de los frascos.
Los enlaces peptídicos de las proteínas reaccionan con el ión Cualquier variación en los caracteres organolépticos del
cúprico, en medio alcalino, para dar un complejo color violeta Standard puede ser indicio de deterioro del mismo.
con máximo de absorción a 540 nm, cuya intensidad es pro-
porcional a la concentración de proteínas totales en la muestra. MUESTRA
Determinación de Albúmina: Suero
La albúmina reacciona específicamente -sin separación pre- a) Recolección: debe obtenerse suero libre de hemólisis.
via- con la forma aniónica de la 3,3',5,5'-tetrabromo cresolsul- b) Aditivos: no se requieren.
fon ftaleína (BCF), en presencia de un exceso de colorante, c) Sustancias interferentes conocidas:
en medio tamponado a pH 3,8. El aumento de absorbancia - En la determinación de Proteínas Totales no se observa in-
a 625 nm respecto del Blanco de reactivo, es proporcional terferencia por bilirrubina hasta 100 mg/l, ni hemólisis ligera
a la cantidad de albúmina presente en la muestra. y en ningún caso se presenta turbiedad por quilomicrones.
- En la determinación de Albúmina, no se observan interferen-
REACTIVOS PROVISTOS cias por hemólisis moderada, bilirrubina hasta 200 mg/l ni lipe-
A. Reactivo A: complejo EDTA/Cu 13 mmol/l en hidróxido mia hasta 20 g/l. Debido a que no interfieren las globulinas, en
de sodio 875 mmol/l y alquil aril poliéter (AAP). esta determinación no se requiere desproteinización previa.
B. Reactivo B: solución de 3,3',5,5'-tetrabromo cresolsulfon Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
ftaleína (en polioxietilén lauril éter). drogas en el presente método.
S. Standard (Suero Patrón): solución de albúmina y glo- d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: si
bulinas de origen bovino, con título conocido de proteínas no se procesa inmediatamente el suero puede conservarse
y albúmina. Consultar los valores asignados en el rótulo, hasta 3 días en refrigerador (2-10oC) o una semana en
debido a que los mismos son lote específicos. congelador.
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- Espectrofotómetro o fotocolorímetro. Reactivo B 3,5 ml 3,5 ml 3,5 ml
- Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados. Mezclar con varilla. Mantener los tubos entre 15 y 28oC
- Tubos o cubetas espectrofotométricas. durante 10 minutos. Leer en espectrofotómetro a 625 nm
- Baño de agua a 37oC (para Proteínas Totales). o en fotocolorímetro con filtro rojo (620-650 nm) llevando
- Reloj o timer. a cero con el Blanco de Reactivo.
• DETERMINACION DE PROTEINAS TOTALES

El color es estable 20 minutos por lo que la absorbancia
debe ser leída dentro de ese lapso.
Empleando el Standard tal como se indica en PROCEDI-
MIENTO, los cálculos se realizan como sigue:
- Volumen de Reactivo A: 3,5 ml
- Volumen final de reacción: 3,55 ml P.T. (g/dl)
Proteínas Totales (g/dl) = D x f f=
S
PROCEDIMIENTO Alb. (g/dl)
En tres tubos marcados B (Blanco), S (Standard) y D Albúmina (g/dl) = D x f f=
(Desconocido), colocar: S
Albúmina (g/dl)
B S D
Relación A/G =
Agua destilada 50 ul - - P.T. (g/dl) - Alb. (g/dl)
Standard - 50 ul - Curva de calibración
Muestra - - 50 ul Para constatar que el colorímetro tenga una respuesta lineal
en las longitudes de onda fijadas para las reacciones, puede
Reactivo A 3,5 ml 3,5 ml 3,5 ml
prepararse una curva de calibración con cantidades cre-
Mezclar con varilla. Incubar 15 minutos a 37oC. Leer en cientes de Standard (ej.: 50 y 100 ul para Proteínas Totales;
espectrofotómetro a 540 nm o en fotocolorímetro con 10 y 20 ul para Albúmina) con un volumen de reactivo de
filtro verde (520-560 nm) llevando a cero con el Blanco 3,5 ml en todos los casos. Si los valores obtenidos para el
de Reactivo. segundo tubo se apartan más de un 5 % de los calculados
de acuerdo a la lectura del primero debe emplearse para
los cálculos la curva de calibración.
El color de la reacción es estable durante 12 horas por lo que METODO DE CONTROL DE CALIDAD
la absorbancia debe ser leída dentro de ese lapso. Procesar 2 niveles de un material de control de calidad
• DETERMINACION DE ALBUMINA de proteínas totales y albúmina, con cada determinación.
- Longitud de onda: 625 nm en espectrofotómetro o en Se determinó el contenido de proteínas totales y albúmina en
fotocolorímetro con filtro rojo (620-650 nm). suero de personas sanas, de ambos sexos, con alimentación
- Temperatura de reacción: 15-28oC mixta normal y edades entre 17 y 40 años; obteniéndose
- Tiempo de reacción: 10 minutos los siguientes rangos:
- Volumen de muestra: 10 ul Proteínas totales: 6,1 a 7,9 g/dl
- Volumen de Reactivo B: 3,5 ml Albúmina: 3,5 a 4,8 g/dl
- Volumen final de reacción: 3,51 ml Relación A/G: 1,2 a 2,2
(Desconocido), colocar: CONVERSION DE UNIDADES AL SISTEMA SI
Proteínas totales (g/dl) x 10 = Proteínas totales (g/l)
B S D Albúmina (g/dl) x 10 = Albúmina (g/l)
Standard - 10 ul -
Muestra - - 10 ul
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- Determinación de Proteínas Totales: - Peters, T. Jr. - Clin. Chem. 14:1147 (1968).
Puede usarse plasma como muestra, pero el resultado de - Rojkín, M.L.; Olguín de Mariani, M.C.; Drappo, G.A. y Sosa,
la proteinemia estará incrementado en 0,2 g/dl debido a la C.F. - Bioq. del Atlántico VI/63: 1931 (1974).
presencia de fibrinógeno, que no está considerado dentro - Rojkín, M.L.; Olguín de Mariani, M.C.; Drappo, G.A. y Sosa,
de la definición de Proteínas Totales. C.F. - Bioq. Clin. VIII/4:241 (1974).
- Determinación de Albúmina: - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
Mientras se realice la reacción entre 15 y 28oC puede AACC Press, 4th ed., 2001.
utilizarse factor para los cálculos. Fuera de este rango,
cambia la cinética de la reacción y no se completa el
desarrollo del color.
El sistema debe estandarizarse con el Standard provisto, ya
que los standards liofilizados y pools de sueros responden
de distinta forma.
En caso de utilizar un analizador automático se recomien-
da, para una mejor performance, el empleo de Albúmina
AA de Wiener lab.
PERFORMANCE
muestras en distintos días se obtuvieron los siguientes
resultados:
Proteínas Totales
Nivel D.S. C.V.
4,6 g/dl ± 0,023 g/dl 0,49 %
5,8 g/dl ± 0,023 g/dl 0,40 %
7,0 g/dl ± 0,029 g/dl 0,41 %
Albúmina
Nivel D.S. C.V.
2,6 g/dl ± 0,079 g/dl 3,0 %
3,7 g/dl ± 0,071 g/dl 1,9 %
5,5 g/dl ± 0,070 g/dl 1,3 %
albúmina y globulinas a distintas muestras se obtuvo una
recuperación de 96 a 103% para Proteínas Totales y entre
98 y 100% para Albúmina.
requerida para un ∆A mínimo de 0,001, el menor cambio de
concentración detectable será de 0,02 g/dl para Proteínas
Totales y 0,01 g/dl para Albúmina.
d) Linealidad: la reacción es lineal hasta 12 g/dl para Pro-
teínas Totales y hasta 6 g/dl para Albúmina.
PRESENTACION
Equipo para 140 determinaciones de Proteínas Totales y
Albúmina con Standard (Cód. 1690001).
Proti 2 Suero Patrón: frasco de 1,8 ml (Cód. 1690004).
BIBLIOGRAFIA
- Doumas, B.T.; Watson, W.A. & Biggs, H.G. - Clin. Chim.
Acta 31/1:87 (1971).
- Gasbarro, L.; Bandinelli R. & Tomassini, G. - Clin. Chim.
Acta 36:275 (1972).
- Pastewka, J. W. & Ness, A. T. - Clin. Chim. Acta 12:523
(1965).
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SÍMBOLOS


 No congelar
F Riesgo biológico
Cont. Contenido
g Número de lote
Elaborado por:
M
Xn
Nocivo
Xi
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
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Proti 2
Suero Patrón
Para calibración y control de la determinación de proteínas totales y albúmina
APLICACIONES
Proti 2 Suero Patrón responde a los requerimientos esta- PROCEDIMIENTO
blecidos para un Standard Secundario, tanto para proteínas Proti 2 Suero Patrón se debe usar de la misma ma-
totales como para albúmina. nera que una muestra desconocida, de acuerdo a las
Puede ser empleado para la calibración y/o control de: instrucciones que acompañan a los equipos de Proti 2,
- La determinación de proteínas totales por reacción del Proteínas Totales AA o Albúmina AA de Wiener lab,
Biuret (Proti 2 o Proteínas Totales AA, Wiener lab.). según sea el equipo en uso.
- La determinación de albúmina por unión a colorante BCF
(Proti 2 o Albúmina AA, Wiener lab.).
FUNDAMENTOS DEL METODO Las reacciones colorimétricas usadas en Proti 2, Proteínas
Proti 2 Suero Patrón es una solución proteica mixta que Totales AA y Albúmina AA de Wiener lab., cumplen la ley
se puede procesar de la misma manera que una muestra de Beer en un amplio rango, pero debe constatarse que el
de suero. aparato de medida empleado tenga respuesta lineal en las
Los títulos asignados para proteínas totales (método de longitudes de onda indicadas, preparando curvas de cali-
Biuret) y albúmina (método de unión a la 3,3',5,5'-tetrabromo- bración con cantidades crecientes de Suero Patrón (ej. 50
m-cresol sulfon ftaleína o BCF) han sido determinados por y 100 ul para proteínas totales o 10 y 20 ul para albúmina)
comparación frente al Standard de referencia del National manteniendo en todos los casos el volumen de Reactivo
Institute of Standards and Technology, SRM 927b. (3,5 ml).
Para considerar la respuesta lineal, la lectura del segundo
REACTIVOS PROVISTOS tubo no debe diferir en más de un 5 % respecto del valor
S. Suero Patrón: solución de albúmina y globulinas en calculado en base a la lectura del primero. Caso contrario,
estado nativo. Su concentración se especifica según debe usarse la curva de calibración en lugar del factor
el lote. colorimétrico.
INSTRUCCIONES PARA SU USO LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO

Reactivo Provisto: listo para usar. Ver el manual de instrucciones de Proti 2, Proteínas Totales
AA o Albúmina AA, según sea el equipo en uso.
PRECAUCIONES
El Reactivo Provisto es para uso diagnóstico "in vitro". PRESENTACION
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales - 1,8 ml (Cód. 1690004).
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de BIBLIOGRAFIA
acuerdo a la normativa local vigente. - Doumas, B.T.; Watson, W.A. & Biggs, H.G. - Clin. Chim.
Acta 31/1:87 (1971).
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE - Peters, T. Jr. - Clin. Chem. 14:147 (1966).
ALMACENAMIENTO - Rojkín, M.L.; Olguín de Mariani, M.C.; Drappo, G.A. y Sosa,
Proti 2 Suero Patrón es estable a temperatura ambiente C.F. - Bioq. Clin. VIII: 241 (1974).
(menor a 25oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la
caja. Una vez abierto, debe conservarse en el refrigerador
(2-10oC).

REACTIVOS
Cualquier variación de los caracteres organolépticos del
Suero Patrón puede ser indicio de deterioro del mismo.
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Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
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RPR slide test
C Prueba no-treponémica para la detección serológica de sífilis

La sífilis es una enfermedad venérea causada por el Tre- Reactivo A: listo para usar. Agitar antes de usar. Para
ponema pallidum, que invade las mucosas intactas o la piel dispensar este reactivo utilizar el gotero metálico provisto o
en áreas de abrasiones. El contacto sexual es la forma más bien colocar 17 ul medidos con micropipeta.
común de transmisión. Controles Positivo y Negativo: listos para usar.
La detección y tratamiento de la enfermedad en sus estadios
tempranos es fundamental a fin de evitar complicaciones gra- PRECAUCIONES
ves como sífilis cardiovascular, neurosífilis y sífilis congénita. Los Reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
El diagnóstico de esta enfermedad sufre la carencia de Los Controles Positivo y Negativo han sido examinados para
un método para cultivar el microorganismo en medios de antígeno de superficie del virus de hepatitis B y anticuerpos
laboratorio y la dificultad para detectarlo en estadios de la contra HCV y HIV 1/2, encontrándose no reactivos.
enfermedad en los que no se observan lesiones epidérmicas. Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
Sin embargo, desde el comienzo de la infección aparecen de trabajo en el laboratorio de química clínica.
en el suero del individuo infectado ciertas sustancias de- Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
nominadas "reaginas", que reaccionan con antígenos de acuerdo a la normativa local vigente.
cardiolipina, lecitina y colesterol. Estas reaginas junto a
los signos clínicos son por lo tanto los procedimientos más MATERIAL REQUERIDO
rápidos y útiles disponibles para diagnóstico de sífilis. 1- Provisto
- Tarjetas de reacción
FUNDAMENTOS DEL METODO - Gotero metálico para dispensar el Reactivo
En la prueba rápida para reaginas plasmáticas (RPR), las - Goteros plásticos descartables para dispensar y distribuir
"reaginas" presentes en el suero de individuos infectados con las muestras
Treponema pallidum, se detectan por acción de las mismas
2- No Provisto
con antígeno de cardiolipina, lecitina y colesterol adsorbido
- Agitador rotativo de 100 rpm
sobre partículas de carbón.
La reacción produce una aglutinación visible macroscópica-
MUESTRA
mente, favorecida por las partículas de carbón.
Suero o plasma
Las reacciones inespecíficas se evitan con el empleo de
a) Recolección: obtener la muestra de la manera usual. No
antígeno altamente purificado y el agregado de cloruro de
es necesario inactivar.
colina, por lo que no es necesario inactivar la muestra.
b) Aditivos: en caso de obtener plasma, utilizar heparina,
EDTA, fluoruro u oxalato de sodio como anticoagulantes.
REACTIVOS PROVISTOS
c) Sustancias interferentes conocidas: hemólisis o hiperli-
A. Reactivo A: suspensión de antígeno de cardiolipina
pemia pueden provocar resultados erróneos, así como el ex-
0,003%, lecitina 0,02% y colesterol 0,09%, adsorbido sobre
ceso de anticoagulante empleado en la obtención de plasma.
partículas de carbón 0,02% especialmente tratado en buffer
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: si no
fosfatos 0,01 mol/l con cloruro de colina 0,72 mol/l, EDTA
se procesa en el momento, el suero puede conservarse hasta
12,5 mmol/l y conservantes apropiados.
7 días en refrigerador (2-10oC). El plasma debe emplearse
Control Positivo: dilución de suero reactivo.
antes de las 24 horas de efectuada la extracción.
Control Negativo: dilución de suero no reactivo.
PROCEDIMIENTO
Si se desea realizar la técnica semicuantitativa se requiere
adicionalmente solución fisiológica (ClNa 9 g/l). I- PRUEBA CUALITATIVA
Llevar a temperatura ambiente los reactivos y la mues-
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE tra antes de realizar el ensayo.
ALMACENAMIENTO En cada uno de los círculos de la tarjeta de reacción
Los Reactivos Provistos son estables en refrigerador (2-10oC) colocar con un gotero plástico provisto:
hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No congelar.
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do se presenta el fenómeno de prozona. Por este motivo
Muestra o Controles 1 gota (50 ul) se recomienda repetir la prueba con muestra diluida al
Con el extremo cerrado del gotero distribuir la muestra 1:5 con solución fisiológica para verificar el resultado. Si
uniformemente en todo el círculo. en estas condiciones se observa aglutinación, la muestra
Con el gotero metálico provisto, en posición vertical, es reactiva.
agregar en el centro del círculo: - No obstante las ventajas del método, sus resultados, al igual
que los de cualquier método serológico, sólo constituyen
Reactivo A 1 gota (17 ul)
un dato auxiliar para el diagnóstico que debe corroborarse
SIN MEZCLAR, hacer rotar horizontalmente la tarjeta con la historia clínica del paciente.
de reacción en forma manual o con agitador rotativo
a 100 rpm durante 8 minutos. Observar la presencia PERFORMANCE
o ausencia de aglutinación al cabo de este tiempo. Los estudios estadísticos realizados indican que la sensibi-
Tiempos de lectura mayores pueden dar lugar a falsos lidad y especificidad del método son similares a los corres-
resultados. pondientes a la prueba USR (Unheated Serum Reagin).
II- PRUEBA SEMICUANTITATIVA
Efectuar diluciones seriadas 1:2, 1:4, 1:8, hasta PRESENTACION
1:64 empleando solución fisiológica y proceder de la Equipo para 250 determinaciones (Cód. 1853154).
misma manera que en la técnica cualitativa. El título
estará dado por la inversa de la última dilución que se BIBLIOGRAFIA
observe reactiva. - Zinsser Microbiología, Joklik W., Willett H. y Amos D., 17o
edición Editorial Médica Panamericana, 1983.
- Manual of Tests for Syphilis, cap. 8 - American Public Health
INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS Association, Washington, D.C 20005, 1990.
Reactivo: presencia de aglutinación visible en forma de - McGrew, B.E. et al. - Am. J. Clin. Path. 50:52, 1968.
grumos negros sobre el fondo claro que indica presencia - Stevens, R.W. and Stroebel, E. - Am. J. Clin. Path. 53:32,
de "reaginas" en la muestra. 1970.
No reactivo: aspecto gris homogéneo que indica ausencia
de "reaginas" en la muestra.

Para controlar la calidad del sistema procesar un Control
Positivo y un Control Negativo utilizándolos de la misma
forma que la muestra.

- Evitar el contacto de los dedos con los círculos de la tarjeta
de reacción, dado que el depósito de grasa en los mismos
puede ocasionar una mala distribución de la muestra, pro-
duciendo resultados erróneos. Si la muestra no puede ser
distribuida uniformemente en toda la superficie de prueba,
se recomienda utilizar otro círculo de la tarjeta.
- Una vez utilizado el gotero metálico para dispensar el
Reactivo A, descartar el remanente y enjuagarlo con agua
destilada.
- El Reactivo A debe dispensarse manteniendo el gotero
en posición vertical respecto de la tarjeta de reacción a
fin de asegurar que el volumen de la gota sea el correcto.
- A temperaturas elevadas o humedad ambiente baja se
recomienda el uso de una cámara húmeda durante la
rotación, para evitar que las muestras se sequen.
- En individuos con cuadros patológicos diversos como
hepatitis, influenza, brucelosis, lepra, malaria, asma, tu-
berculosis, cáncer, diabetes y enfermedades autoinmunes,
pueden obtenerse resultados falsos positivos. Estos casos
se presentan con títulos bajos y una historia clínica que no
coincide con las características de sífilis.
- Pueden observarse resultados falsamente negativos cuan-
870860022 / 00 p. 2/9
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
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Sífilis
anticuerpos anti-Treponema pallidum
SIGNIFICACION CLINICA Revelador: solución de tetrametilbencidina y peróxido de

La sífilis es una enfermedad venérea causada por una bac- hidrógeno.
teria denominada Treponema pallidum, que invade las mu- Stopper: ácido sulfúrico 2 N.
cosas intactas o la piel en áreas de abrasiones. El contacto Buffer de Lavado Concentrado: buffer salino con tensio-
sexual es la forma más común de transmisión. Sin embargo, activo (25x). Color verde.
puede transmitirse a través de la barrera placentaria de la Control Positivo: suero humano inactivado conteniendo
madre al feto, o mediante transfusión sanguínea. anticuerpos anti-Treponema pallidum. Color naranja.
La detección o tratamiento de la enfermedad en sus estadios Control Negativo: suero humano no reactivo inactivado.
tempranos es fundamental a fin de evitar complicaciones gra- Color amarillo.
ves como sífilis cardiovascular, neurosífilis o sífilis congénita.
El diagnóstico de esta enfermedad se ve obstaculizado por REACTIVOS NO PROVISTOS
la carencia de un método para cultivar el microorganismo Agua destilada o desionizada
en medios de laboratorio y la dificultad para detectarlo en
estadios de la enfermedad en los que no se observan lesio- MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
nes directas. El mismo puede realizarse: - Micropipetas para medir los volúmenes indicados
- a través de métodos de detección de anticuerpos no- - Tips descartables
específicos (que utilizan antígenos no-treponémicos) cuya - Material volumétrico para preparar las diluciones indicadas
interpretación es visual; - Estufa a 37oC
- por métodos inmunoenzimáticos (ELISA) que detectan la - Papel absorbente
presencia de anticuerpos específicos contra el Treponema - Guantes descartables
pallidum en muestras de pacientes que se encuentran en - Reloj alarma o cronómetro
diferentes estadios de la enfermedad. - Hipoclorito de sodio
- Sistema de lavado de policubetas (manual o automático)
FUNDAMENTOS DEL METODO - Espectrofotómetro para lectura de policubetas
Los pocillos de la policubeta están recubiertos con antígenos
recombinantes de la bacteria Treponema pallidum (p15, p17 PRECAUCIONES
y p47). La muestra diluida se incuba en los pocillos. Si los - Los reactivos son para uso diagnóstico “in vitro”.
anticuerpos contra la bacteria están presentes en la muestra, -Todas las muestras de pacientes deben manipularse como
éstos se unen a los antígenos del pocillo. El material no unido si fueran capaces de transmitir infección.
es removido por lavado. En el paso siguiente se agrega el - Los sueros controles han sido examinados para antígeno
conjugado, que consiste en un anticuerpo monoclonal anti- de superficie de Hepatitis B (HBsAg) y anticuerpos contra
IgG humana conjugado con peroxidasa. Este se une a los el virus de inmunodeficiencia humana (HIV) y Hepatitis
complejos antígeno-anticuerpo, formados previamente. El C (HCV), encontrándose no reactivos. Sin embargo, se
conjugado no unido se remueve por lavado. Posteriormente, recomienda manipularlos con las precauciones requeridas
se agrega una solución conteniendo tetrametilbencidina y para muestras potencialmente infecciosas.
peróxido de hidrógeno. Las muestras reactivas desarrollan - Al descartar los materiales empleados en el ensayo se
color celeste que vira al amarillo cuando se detiene la reac- deben tratar de manera de asegurar la inactivación de
ción con ácido sulfúrico. agentes patógenos. El método recomendado para este
procedimiento es autoclavar durante 1 hora a 121oC.
REACTIVOS PROVISTOS Los líquidos de descarte pueden ser desinfectados con
Policubeta sensibilizada: policubeta de tiras recortables, hipoclorito de sodio (concentración final 5%) durante por
con 96 pocillos recubiertos con antígenos recombinantes de lo menos 60 minutos.
Treponema pallidum. - No intercambiar reactivos de distintos lotes.
Diluyente de Muestra: buffer salino con tensioactivo. Color - No emplear reactivos de otro origen.
violeta. - Evitar tocar las paredes de los pocillos con los tips.
Conjugado Concentrado: anticuerpo monoclonal anti-IgG - No utilizar elementos metálicos que puedan entrar en
humana conjugado con peroxidasa (10x). Color rojo. contacto con los reactivos.
Diluyente de Conjugado: buffer salino con proteínas. - Las policubetas deben incubarse en estufa. Debe evitarse
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abrir la estufa durante este proceso. No usar baño de agua. Policubeta sensibilizada: no abrir el envoltorio hasta el
- Evitar que los vapores de hipoclorito provenientes de momento de usar, ni antes que haya tomado temperatura
los recipientes para desechos biológicos u otras fuentes ambiente, de lo contrario se favorecerá la condensación de
entren en contacto con los reactivos, ya que el hipoclorito humedad sobre la superficie de los pocillos.
afecta la reacción. Las tiras no utilizadas deben conservarse entre 2-10oC
- Evitar contacto del ácido sulfúrico (Stopper) con piel y dentro del sobre con desecante bien cerrado con cinta
mucosas. R36/38: irrita los ojos y la piel. R34: provoca autoadhesiva. Las tiras conservadas en estas condiciones
queimaduras. S24/25: evítese el contacto con los ojos pueden ser utilizadas dentro de los 4 meses posteriores
y la piel. S26: en caso de contacto con los ojos, lávense mientras no supere la fecha de vencimiento indicada en
inmediata y abundantemente con agua y acúdase a un la caja.
médico. S28: en caso de contacto con la piel, lávese inme-
diata y abundantemente con agua. S37/39: usar guantes MUESTRA
adecuados y protección para los ojos/la cara. Suero o plasma
- Evitar el derrame de líquidos y formación de aerosoles. a) Recolección de muestra: obtener de la manera habitual.
- No pipetear con la boca. Usar guantes descartables y pro- b) Aditivos: no se requieren para suero. Para las muestras
tección en los ojos durante la manipulación de las muestras de plasma se puede emplear heparina, citrato o EDTA como
y reactivos del ensayo. anticoagulante.
- Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de c) Sustancias Interferentes conocidas: no se ha observado
acuerdo a la normativa vigente. interferencia con muestras que contienen hasta 30 mg/dl de
bilirrubina, 50 mg/dl de ácido ascórbico, 1500 mg/dl de trigli-
PREPARACION DE LOS REACTIVOS céridos o 300 mg/dl de hemoglobina. Muestras conteniendo
Es importante que todo el material utilizado para la prepa- partículas deberán clarificarse mediante centrifugación.
ración de los reactivos esté limpio y libre de detergente e d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
hipoclorito. muestra se debe conservar refrigerada (2-10oC). En caso de
Buffer de Lavado: a baja temperatura los componentes no realizar el análisis dentro de las 72 hs se debe congelar
del reactivo concentrado pueden precipitar. En tal caso, a -20oC. No es recomendable realizar múltiples ciclos de
llevar la solución a 37oC hasta disolución completa. Para congelamiento y descongelamiento. Esto puede generar
la obtención del buffer de lavado listo para usar, diluir una resultados erróneos. En caso de utilizar muestras conge-
parte de Buffer de Lavado Concentrado (25x) con 24 partes ladas, éstas deben ser homogeneizadas y centrifugadas
de agua destilada o desionizada. Ej.: 20 ml con 480 ml para antes de su uso.
una policubeta completa. La inactivación por calor puede afectar el resultado.
Conjugado: diluir una parte de Conjugado Concentrado No utilizar muestras con contaminación microbiana.
(10x) con 9 partes de Diluyente de Conjugado (ej.: ver tabla Si las muestras deben ser transportadas, embalarlas de
siguiente con volumen requerido de Conjugado Concentrado acuerdo a las especificaciones legales relativas al envío de
y Diluyente de Conjugado): material infeccioso.
8 100 ul 0,9 ml 1- Llevar a temperatura ambiente los reactivos y las
24 300 ul 2,7 ml 2- Preparar el volumen necesario de buffer de lavado diluido.
incluyendo 2 pocillos para el Control Positivo (CP) y 3
Diluyente de Muestra, Diluyente de Conjugado, Reve- para el Control Negativo (CN).
lador, Stopper, Control Positivo y Control Negativo: 4- Dispensar el Diluyente de Muestra, luego la muestra
listos para usar. (M) y los controles según el siguiente esquema:
ALMACENAMIENTO Diluyente de Muestra 100 ul 100 ul 100 ul
10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. Control Positivo - 20 ul -
No congelar. Control Negativo - - 20 ul
conservar a una temperatura entre 2 y 25oC. Muestra 20 ul - -
Buffer de lavado (1x): una vez diluido es estable 3 meses Homogeneizar por carga y descarga de la micropipeta.
a temperatura ≤ 25oC. Al adicionar la muestra, el Diluyente de Muestra virará
Conjugado: una vez diluido es estable 6 horas a tempe- de color, de acuerdo a la tabla siguiente:
ratura ≤ 25oC.
864108100 / 02 p. 2/12
Tipo de Sin Suero o Control Control 12- Agregar el Stopper:
muestra muestra plasma Positivo Negativo Stopper 100 ul 100 ul 100 ul
Color Violeta Celeste Naranja Verde 13- Leer absorbancia en espectrofotómetro en forma
oscuro bicromática a 450/620-650 nm o a 450 nm.
Advertencia: las muestras hemolizadas o turbias pueden Nota: se recomienda realizar siempre la lectura en forma
alterar el color final sin afectar los resultados. El viraje de bicromática. En caso de que la lectura sea monocromáti-
color puede depender del volumen de muestra adicionado ca, realizar un blanco de reactivos que luego deberá ser
y de su composición. Un viraje de color de menor intensidad restado de todos los valores de las muestras.
puede deberse a que se dispensó un volumen inferior de
muestra, a que la muestra no se encuentra en las condicio-
nes adecuadas, o a que tiene un bajo nivel de proteínas. ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL
5- Para evitar la evaporación, cubrir la placa con la cinta El color de la reacción es estable durante 10 minutos, por lo
autoadhesiva provista, e incubar 60 ± 2 minutos a 37oC que los resultados deben leerse dentro de ese lapso.
± 1ºC. En forma paralela, preparar el conjugado diluido
PROCEDIMIENTO DE LAVADO
Eliminar el líquido de los pocillos por aspirado o volcado.
Los pocillos se lavan con 300 ul de buffer de lavado diluido.
Asegurar que la altura alcanzada al llenar los pocillos no
cause desbordes. La solución de lavado debe estar en
Conjugado diluido 100 ul 100 ul 100 ul contacto con los pocillos entre 30 y 60 segundos.
Para evitar la evaporación cubrir la policubeta con cinta Garantizar que luego del último lavado no quede líquido re-
autoadhesiva. sidual. Realice un doble aspirado para eliminar el excedente
8- Incubar 30 ± 2 minutos a 37oC ± 1oC. de buffer. Si persiste luego de este procedimiento, invertir la
9- Lavar 5 veces según instrucción de lavado. placa sobre papel absorbente y golpearla varias veces, de lo
10- Dispensar el Revelador. Para ello, trasvasar a un contrario podrán obtenerse resultados erróneos.
recipiente limpio solamente el volumen de Revelador
Nota: el procedimiento de lavado es crítico para el resulta-
que se requiera. No devolver el Revelador restante al
do del ensayo. Si queda buffer de lavado en el pocillo o si
los pocillos no están completamente llenos se obtendrán
oxidantes.
Revelador 100 ul 100 ul 100 ul durante el procedimiento. Los lavadores automáticos deben
11- Incubar 30 ± 2 minutos a temperatura ambiente (18- ser enjuagados con agua destilada o desionizada al final del
25oC), protegido de la luz. día para evitar obstrucciones debido a las sales presentes

Muestra pocillo
y los controles
tos a 37 ± 1oC
Dilución Preparación del Conjugado (1x) Durante la incubación con la muestra, diluir Conju-
Conjugado Agregar 100 ul de Conjugado diluido (1x)
tos a 37 ± 1oC
864108100 / 02 p. 3/12
remanente del reactivo. Evitar contacto con agen-
tes oxidantes.
CRITERIOS DE VALIDACION DEL ENSAYO misma debe considerarse reactiva.

El ensayo se considera válido si se cumplen simultánea- Una muestra inicialmente reactiva puede ser no reactiva en
mente las siguientes condiciones: las dos repeticiones. Esto puede deberse a:
1- El promedio de las densidades ópticas (D.O.) de los Con- - Contaminación cruzada de un pocillo no reactivo por una
troles Negativos deben ser menor o igual a 0,100. muestra reactiva.
Ejemplo: - Contaminación de la muestra durante la dispensación,
Lectura 1 = 0,014; Lectura 2 = 0,018; Lectura 3 = 0,019 imprecisión en el dispensado de muestra, Conjugado y/o
Promedio = (0,014 + 0,018 + 0,019) / 3 = 0,017 Revelador en el pocillo.
2- Eliminar cualquier Control Negativo con D.O. mayor a 0,100. - Contaminación del pocillo con hipoclorito u otros agentes
3- Si se ha eliminado algún Control Negativo, volver a cal- oxidantes.
cular el promedio de los Controles Negativos. Un ensayo es En ciertos casos una muestra no reactiva puede presentar
válido si se aceptan al menos dos de los Controles Negativos. una reacción falsamente reactiva, tanto en el análisis inicial
4- El promedio de las D.O. de los Controles Positivos debe como en sus repeticiones. Algunas causas de este fenómeno
ser mayor o igual a 1,000. pueden ser:
Ejemplo: - Contaminación de la muestra durante la extracción, pro-
Lectura 1 = 1,697; Lectura 2 = 1,774 cesamiento o conservación.
Promedio = (1,697 + 1,774) / 2 = 1,736 - Presencia de sustancias interferentes, tales como autoan-
ticuerpos, fármacos, etc.
5- La diferencia entre el promedio de las D.O. de los Con- - Dispensación y/o aspirado ineficiente de la solución de
troles Positivos y Controles Negativos debe ser mayor o lavado (sistema obstruido).
igual a 0,900.
Si una de estas condiciones no se cumple, repetir el ensayo. LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
Recordar que las lecturas obtenidas dependerán de la sen- - Ver Sustancias Interferentes conocidas en Muestra.
sibilidad del aparato empleado. - No se debe utilizar pool de muestras.
- No se deben utilizar otros fluidos corporales como la saliva,
INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS líquido cefalorraquídeo u orina.
a) Con instrumental óptico: - Un resultado negativo no excluye la posibilidad de exposi-
La presencia o ausencia de anticuerpos anti-Treponema ción o infección por Treponema pallidum.
pallidum se determina relacionando la absorbancia de la - Los resultados repetidamente reactivos deben corroborarse
muestra respecto al valor del Cut-off. por un método confirmatorio, de acuerdo a la normativa
legal vigente.
Cut-off = CN + 0,160 - No utilizar muestras inactivadas por calor ya que pueden
CN: promedio de las D.O. del Control Negativo ocasionar resultados falsos positivos.
Ejemplo: 0,017 + 0,160 = 0,177
Muestras No Reactivas: se consideran aquellas con ab- a) Sensibilidad
sorbancias menores al Cut-off Sensibilidad clínica en Paneles de Performance
Muestras Reactivas: se consideran aquellas con absorban- En un estudio realizado sobre diferentes paneles comerciales
cias mayores o iguales al Cut-off. internacionales, se obtuvieron los siguientes resultados:
- Syphilis mixed Titer Performance Panel (PSS 201), Boston
b) Interpretación visual:
Biomedica, Inc.: se detectaron 22 de 22 muestras positivas.
Si se opta por este tipo de interpretación, debe considerarse
- Syphilis mixed Titer Performance Panel (PSS 202), Boston
No Reactiva toda muestra que no presente una coloración
Biomedica, Inc.: se detectaron 18 de 18 muestras positivas.
mayor que la de los Controles Negativos. Por el contrario,
- Syphilis Qualification Panel (QSS 701), Boston Biomedica,
una muestra netamente amarilla se considera Reactiva.
Inc.: se detectaron 5 de 5 muestras positivas.
Toda muestra inicialmente reactiva debe ser repetida por - Panel WO2 del Center for Disease Control (CDC), se
duplicado. Si una o ambas repeticiones dan positivas, la detectaron 20 de 20 muestras positivas.
864108100 / 02 p. 4/12
- Panel de Performance para Sífilis, Q Panel, Brasil - Clinical Evaluation of Immunoassays. Approved Guideline
(PP0406): se detectaron 16 de 16 muestras positivas. I/LA21-A (2002) National Committee for Clinical Laboratory
- Panel de Performance para Sífilis, Q Panel, Brasil Standards.
(PP0407): se detectaron 16 de 16 muestras positivas. - Interference testing in Clinical Chemistry. Approved
Guideline EP7-A (2002) National Committee for Clinical
b) Especificidad
Laboratory Standards.
En otro estudio de 3519 muestras de sueros y plasmas de
tres centros de salud diferentes, se encontró una especifi-
cidad de 99,85%.
Sobre un panel de 461 plasmas provenientes de una po-
blación de alta prevalencia, la especificidad obtenida fue
de 100%.
diferentes condiciones clínicas que pueden ser causantes
de reacciones inespecíficas para el ensayo Sífilis ELISA re-
combinante v.4.0. Estas condiciones incluyen pacientes con
enfermedades autoinmunes o enfermedades infecciosas di-
ferentes a Sífilis (HIV, HTLV, Hepatitis C, Hepatitis B, Chagas,
otras). Para esta población la especificidad fue de 99,4%.
c) Precisión
controles. Se realizaron 2 ensayos diarios evaluando cada
muestra por duplicado por el transcurso de 20 días.

(D.O.) D.S. C.V. D.S. C.V.
Muestra 1 0,716 0,082 11,440% 0,137 19,129%
Muestra 2 0,829 0,057 6,876% 0,083 10,013%
Muestra 3 0,389 0,031 8,020% 0,044 11,311%
Muestra 4 1,403 0,104 7,430% 0,154 10,976%
Control (+) 1,585 0,084 5,290% 0,127 8,013%
Control (-) 0,014 0,003 19,710% 0,002 12,143%
n = 80
PRESENTACION
BIBLIOGRAFIA
- Brown, D.L. et al. - American Family Physician 68/2:283-
290, 2003.
- Morse, S.A. - Current Opinions in Infectious Diseases
14:45-51, 2001.
- Quattordio, L.E. et al. - Acta Bioquímica Clínica Latinoa-
mericana 38/3:301-306, 2004.
- Singh, A.E. et al. - Clinical Microbiology Reviews 12/2:187-
209, 1999.
- Young, H. - Sex Transm. Inf. 76:403-405, 2000.
- Evaluation of Precision Performance of Clinical Chemistry
Devices. Approved Guideline EP5-A 19/2 (1999) National
- Specifications for Immunological Testing for Infectious
Diseases. Approved Guideline I/LA18-A2 (1994) National
864108100 / 02 p. 5/12


Control + Control -
Stopper
Stopper



 No congelar
F Riesgo biológico
Cont. Contenido
g Número de lote
M Elaborado por:
Nocivo
Xn
Xi
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo
Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
Cert.: 6436/09 2000 Rosario - Argentina
864108100 / 02 p. 6/12 UR130321
Solución
Desproteinizante
Para uso en analizadores automáticos
APLICACIONES EXPLICACION DE LOS SIMBOLOS

La Solución Desproteinizante es empleada en analizadores
automáticos para la limpieza de cubetas de lectura, agujas Solución Catalizador
y circuitos hidráulicos del instrumento. Solución Catalizador
REACTIVOS PROVISTOS reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
Catalizador: sobre conteniendo pepsina.
C
Solución: ácido clorhídrico 0,075 N. por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios
Concentraciones finales para el diagnóstico "in vitro"
Acido clorhídrico...................................................... 0,075 N P Representante autorizado en la Comunidad Europea
Pepsina.........................................................................8 g/l
Surfactante....................................................................1 g/l V Uso diagnóstico "in vitro"
INSTRUCCIONES PARA SU USO X Contenido suficiente para <n> ensayos

Solución Desproteinizante: preparar agregando el conte-
nido de un sobre de Catalizador a un frasco de Solución. H Fecha de caducidad
Agitar bien y mezclar.
ALMACENAMIENTO
 No congelar
Reactivos Provistos: son estables a temperatura ambiente

F Riesgo biológico
Solución Desproteinizante: una vez preparada es estable Volumen después de la reconstitución
durante un mes refrigerada (2-10oC).
Cont. Contenido
PRECAUCIONES
Los Reactivos Provistos son para uso diagnóstico "in vitro". g Número de lote
Solución: S24/25: evítese el contacto con los ojos y la piel.
S26/28: en caso de contacto con los ojos y la piel, lávense M Elaborado por:
inmediatamente y abundantemente con agua y acúdase a Xn
Nocivo
un médico. S37: usar guantes adecuados.
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales Corrosivo / Caústico
de trabajo en el laboratorio de química clínica. Xi
Irritante
acuerdo a la normativa local vigente. i Consultar instrucciones de uso
Calibr. Calibrador
REACTIVOS b Control
La presencia de turbiedad es indicio de deterioro del reactivo,
en tal caso desechar. b Control Positivo
c Control Negativo
PROCEDIMIENTO h Número de catálogo

Para el uso del producto, debe consultarse el manual del
analizador en el que se desee emplear.
Riobamba 2944
PRESENTACION
Bioquímica
Wiener lab.
- 3 x 125 ml (Cód. 1958001). Producto Autorizado A.N.M.A.T.
870880000 / 00 p. 1/2 UR110601
Solución de Dicromato
de Potasio Abs. 8
Para calibración de sistemas ópticos
Para calibración de sistemas ópticos. Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
C
El Dicromato de Potasio se emplea para medir la exactitud por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios
de la longitud de onda (340 nm) así como la capacidad de para el diagnóstico "in vitro"
respuesta de los espectrofotómetros (linealidad).
REACTIVOS PROVISTOS
Solución de Dicromato de Potasio abs. 8: dicromato de
potasio en medio ácido. Contenido suficiente para <n> ensayos

X
REACTIVOS NO PROVISTOS H Fecha de caducidad
Agua destilada o desionizada.
Listo para usar. Mezclar bien antes de su empleo.  No congelar
PRECAUCIONES F Riesgo biológico

El reactivo es para uso diagnóstico “in vitro”.
La Solución de Dicromato de Potasio es corrosiva. R36/38: Volumen después de la reconstitución
irrita los ojos y la piel. R34: provoca quemaduras. S24/25:
Cont. Contenido
evítese el contacto con los ojos y la piel. S26: en caso de
contacto con los ojos, lávense inmediata y abundantemente g Número de lote
con agua y acúdase a un médico. S28: en caso de contacto
con la piel, lávese inmediata y abundantemente con agua. M Elaborado por:
S37/39: usar guantes adecuados y protección para los ojos/
Xn
la cara. Nocivo
de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos. Corrosivo / Caústico
acuerdo a la normativa local vigente. Xi
Irritante
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE i Consultar instrucciones de uso

ALMACENAMIENTO
El reactivo es estable a temperatura ambiente (< 25oC) hasta Calibr. Calibrador
la fecha de vencimiento indicada en el envase.
b Control
CALCULOS Y RESULTADOS
Seguir las instrucciones del espectrofotómetro o analizador
b Control Positivo
automático empleado, para efectuar las diluciones y cálculos
apropiados.
c Control Negativo
PRESENTACION
- 1 x 50 ml (Cód. 1958004) M Wiener Laboratorios S.A.I.C.
Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
870899000 / 00 p. 1/2 UR110929
Solución de
C Limpieza SE
Para el lavado de circuitos hidráulicos de analizadores automáticos
La Solución de Limpieza SE es empleada en analizadores Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
automáticos para asegurar la limpieza de agujas y de los reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
circuitos hidráulicos del aparato.
C
Solución de Limpieza SE: solución de hipoclorito de sodio
en medio alcalino. P Representante autorizado en la Comunidad Europea
REACTIVOS NO PROVISTOS V Uso diagnóstico "in vitro"
Agua destilada o desmineralizada.
INSTRUCCIONES PARA SU USO H Fecha de caducidad

Solución de Limpieza SE; preparación: se emplea en
dilución o sin diluir, colocando una porción en una copa de l Límite de temperatura (conservar a)
muestra, siguiendo el protocolo de lavado de cada analizador
en particular.  No congelar
PRECAUCIONES F Riesgo biológico

- El Reactivo es para uso diagnóstico "in vitro".
- No debe agregarse al agua del analizador. Es decir, no se Volumen después de la reconstitución
emplea en reemplazo de TW AA de Wiener lab. ni cualquier
Cont. Contenido
otro detergente o líquido de sistema que se coloca en el
agua del analizador.
- Solución cáustica e irritante. R36/38: irrita los ojos y la piel.
g Número de lote
S24/25: evítese el contacto con los ojos y la piel. S26: en M Elaborado por:
caso de contacto con la piel, lávense inmediatamente y
abundantemente con agua y acúdase a un médico. S37/39: Xn
Nocivo
usar guantes adecuados y protección para los ojos/la cara.
- Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales Corrosivo / Caústico
Xi
Irritante
ALMACENAMIENTO i Consultar instrucciones de uso
Solución de Limpieza SE: es estable a temperatura am-
biente (< 25oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en Calibr. Calibrador
el envase.
b Control
PRESENTACION
- 500 ml (Cód. 1958003). b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
p. 1/2
Soluplastin
C Tromboplastina cálcica para la determinación del
Tiempo de Protrombina en una etapa

El fenómeno de la coagulación puede desencadenarse por ALMACENAMIENTO
una “vía extrínseca” (lesión tisular) o por una “vía intrínseca” Reactivo A: estable en refrigerador (2-10oC) hasta la fecha
(contacto de la sangre con epitelios distintos del vascular de vencimiento indicada en la caja.
normal). Reactivo A reconstituido: en refrigerador (2-10oC), es
La determinación del Tiempo de Protrombina o Tiempo de estable 5 días a partir del momento de su reconstitución.
Quick es una prueba global para evaluar la coagulación
extrínseca, siendo sensible a: factor II o protrombina, factor MUESTRA
V o proacelerina, factor VII o proconvertina y factor X o Plasma
Stuart-Prower. a) Recolección: obtener sangre cuidadosamente (evitando
Por lo tanto la determinación se aplica a: estasis o trauma) y colocar en un tubo con anticoagulante en
- estudios de rutina en los análisis prequirúrgicos; proporción 9 + 1 exacta (ejemplo: 4,5 ml de sangre + 0,5 ml de
- detección de alteraciones en los niveles de uno o más anticoagulante). Si se emplea Anticoagulante TP de Wiener
factores involucrados en la vía extrínseca; lab., se requerirán 7 gotas para 4,5 ml de sangre). Mezclar suave-
- control de la terapéutica con anticoagulantes orales. mente. Centrifugar y separar el plasma antes de los 30 minutos.
b) Aditivos: para obtener el plasma se debe emplear Anti-
FUNDAMENTOS DEL METODO coagulante TP de Wiener lab. o citrato de sodio 130 mmol/l
Este ensayo se basa en la medida del tiempo que tarda en (3,8%) o 109 mmol/l (3,2%).
coagular un plasma descalcificado, colocado a 37oC y en c) Sustancias interferentes conocidas:
presencia de un exceso de tromboplastina tisular y calcio. - las contaminaciones, visibles o no, son causa de tiempos
El método no detecta deficiencias de factores de la vía falsamente prolongados;
intrínseca (VIII, IX, XI y XII). - la presencia de heparina o EDTA invalida los resultados;
- hemólisis visibles dificultan la medición foto-óptica de los
REACTIVO PROVISTO resultados.
A. Reactivo A: viales conteniendo tromboplastina de cerebro Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
de conejo, cloruro de calcio para una concentración final drogas en el presente método.
de 0,0125 mol/l y cloruro de sodio para una concentración d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: el
final de 0,1 mol/l. plasma debe mantenerse en el refrigerador (2-10oC) hasta
el momento de efectuar el ensayo. En caso de no proce-
REACTIVO NO PROVISTO sarse dentro de las 4 horas contadas desde la obtención,
Agua bidestilada o desionizada. la muestra se debe congelar (a -20oC); de tal forma, puede
conservarse durante un mes. Este último procedimiento debe
INSTRUCCIONES PARA SU USO ser realizado con rapidez, al igual que el descongelamiento
- Abrir un vial quitando el precinto metálico y retirando lenta- (sumergiendo en baño a 37oC) previo a la determinación.
mente el tapón de goma para evitar pérdidas del material.
- Agregar el volumen de agua bidestilada o desionizada MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
indicado en el envase. Verificar que la temperatura del - Tubos de hemólisis.
agua empleada no sea mayor de 37oC. - Pipetas y micropipetas para medir los volúmenes indicados.
- Tapar y agitar suavemente hasta obtener una suspensión - Baño de agua a 37oC.
homogénea. Volver a homogeneizar cada vez que se - Cronómetro.
emplee. - Fuente luminosa para la observación del coágulo.
PRECAUCIONES
El reactivo es para uso diagnóstico "in vitro". PROCEDIMIENTO
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales 1- Colocar el plasma (desconocido o control) en baño de
de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos. agua a 37oC durante 2-3 minutos (no más de 10 minutos).
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de 2- En un tubo de hemólisis, colocar 0,2 ml de Reactivo
870890022 / 00 p. 1/11
- Porcentaje de Actividad Protrombínica: 70 - 100%
A reconstituido y preincubar a 37oC durante 2-3 minutos Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios
(no más de 10 minutos). intervalos o valores de referencia. Para pacientes bajo
3- Pipetear 100 ul del plasma preincubado y agregar tratamiento con antivitaminas K se ha establecido un rango
rápidamente al tubo conteniendo 0,2 ml de Reactivo A, terapéutico que se puede expresar como:
disparando simultáneamente el cronómetro. - Porcentaje de Actividad Protrombínica: 25 - 35%
4- Mantener el tubo dentro del baño y cerca de una fuente - R.I.N.: 2,4 - 2,5
de luz. Previo al tiempo estimado de coagulación, sacar
el tubo del baño, inclinar suavemente una o dos veces LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
por segundo y detener el cronómetro en el momento de Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
la aparición del coágulo. Otras causas de resultados erróneos son:
5- Calcular el tiempo promedio de coagulación de la deter- - Extracción defectuosa de sangre venosa.
minación por duplicado para cada plasma (desconocido - Las variaciones en la relación anticoagulante/muestra o en
o control). Si la diferencia entre los replicados de una la concentración de citrato utilizada afectan los Tiempos
misma muestra es mayor del 5%, se aconseja repetir el de Quick por lo que se recomienda controlar la dosis de
procedimiento desechando los valores anteriores. anticoagulante empleada al tomar la muestra.
En caso de emplear un instrumento de medición, deben - La preincubación en el 2o paso del PROCEDIMIENTO
seguirse las instrucciones del fabricante del mismo. no debe exceder los 10 minutos indicados como límite
máximo. Por otra parte, es conveniente que el reactivo re-
constituido se retire del refrigerador inmediatamente antes
INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS de iniciar la prueba y vuelva a guardarse al finalizarla, ya
Los resultados pueden expresarse de distintas formas: que la exposición por varias horas a temperatura ambiente
1- Tiempo de Protrombina o Tiempo de Quick en se- en forma reiterada, deteriora el reactivo produciendo el
gundos. alargamiento de los tiempos de protrombina.
2- Porcentaje de Actividad Protrombínica respecto de un
plasma normal (100% de actividad): para ello se debe trazar PERFORMANCE
la curva de actividad protrombínica de un pool de plasmas a) Reproducibilidad: los estudios de precisión se realizaron
frescos normales. siguiendo el protocolo EP5-A del NCCLS (National Com-
Curva de calibración mittee on Clinical Laboratory Standards), obteniéndose los
En tubos de hemólisis, preparar 5 diluciones (cada una siguientes resultados:
por duplicado) de un pool de por lo menos 3 plasmas Precisión intraensayo
normales o Plasma Control normal, según: Muestra Nivel D.S. C.V.
Diluciones 1:1 1:2 1:3 1:4 1:8 Plasma Control normal 12,5 seg ± 0,13 seg 1,03%
Plasma Control patológico 31,7 seg ± 0,44 seg 1,39%
Porcentaje de Actividad (%) 100 50 33,3 25 12,5
Pool de plasmas normales 11,2 seg ± 0,14 seg 1,28%
Pool plasmas normales (ml) 0,5 0,3 0,3 0,2 0,2 Pool de plasmas patológicos 15,4 seg ± 0,19 seg 1,25%
Solución fisiológica (ml) - 0,3 0,6 0,6 1,4 Precisión total
Determinar el Tiempo de Protrombina para cada dilución, Muestra Nivel D.S. C.V.
empleando el PROCEDIMIENTO descripto. En un papel Plasma Control normal 12,5 seg ± 0,37 seg 2,94%
milimetrado, graficar los resultados en un sistema de Plasma Control patológico 31,7 seg ± 1,01 seg 3,19%
coordenadas. Colocar los Tiempos de Protrombina en Pool de plasmas normales 11,2 seg ± 0,33 seg 2,99%
segundos sobre el eje de las ordenadas y los Porcentajes Pool de plasmas patológicos 15,4 seg ± 0,36 seg 2,35%
de Actividad Protrombínica en el eje de las abscisas.
Cada laboratorio debe trazar su propia curva de calibra- b) Correlación: se determinó el valor de R.I.N. en 103
ción, correspondiente al lote de reactivos en uso. Repetir muestras con Soluplastin de Wiener lab. y un kit comercial
con cada nuevo lote de reactivos. basado en el mismo principio, obteniéndose el siguiente
coeficiente de correlación:
3- Razón Internacional Normatizada (R.I.N.) r = 0,9886; pendiente b = 0,9367; intersección a = 0,1236
Para su cálculo, deberá emplearse la tabla de valores ad-
junta al equipo. PRESENTACION
- Kit para 100 determinaciones (10 x 2 ml) (Cód. 1705001).
METODO DE CONTROL DE CALIDAD - Kit para 200 determinaciones (10 x 4 ml) (Cód. 1705005).
Plasma Control normal - patológico de Wiener lab. - Kit para 320 determinaciones (8 x 8 ml) (Cód. 1705003).
VALORES DE REFERENCIA BIBLIOGRAFIA

El rango de valores obtenidos en pacientes normales oscila - Quick, A.J. - “Fisiología y Patología de la Hemostasis” - Ed.
entre: El Ateneo, Buenos Aires (1952).
- Tiempo de Protrombina o Tiempo de Quick: 10 - 14 seg - Araldi, H.T., et al. - “Primer Reactivo Nacional Argentino de
870890022 / 00 p. 2/11
Referencia de Tromboplastina de Cerebro Humano” - Acta SÍMBOLOS
Bioquím. Clín. Latinoam. XVI/1:131 (1982). Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
- Comité de Expertos de la O.M.S. en Patrones Biológicos - reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
Inf. Nº 28: Normalización de la Vigilancia del Tratamiento
Anticoagulante (oral) - Serv. Inf. Tec. Nº 610:49-56 (1977). Este producto cumple con los requerimientos previstos
- Comité de Expertos de la O.M.S. en Patrones Biológicos -
Inf. Nº 31: Requerimientos para Tromboplastinas y Plasmas C por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios
usados en la terapia anticoagulante oral - Serv. Inf. Téc.
Nº 658:202-223 (1981). P Representante autorizado en la Comunidad Europea
- Suñer Casadevall, F. - “Nuevas Normas Internacionales
para la Expresión del Tiempo de Quick” - Análisis Clínicos
X/40:240-245 (1985). Contenido suficiente para <n> ensayos

- Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests", X
AACC Press, 4th ed., 2001. Fecha de caducidad
H
 No congelar
F Riesgo biológico
Cont. Contenido
g Número de lote
Elaborado por:
M
Xn
Nocivo
Xi
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo
Wiener lab.
Riobamba 2944
Bioquímica
870890022 / 00 p. 3/11 UR120327
51.8 54.0 56.3 58.5 60.8 4.50 6.09 8 54.0 56.3 58.5 60.8 4.50 6.55
870890022 p. 1 0 / 11
ISI
51.8 54.0 56.3 58.5 60.8 4.50 7.62
870890022 p. 1 1 / 11
Standatrol S-E
nivel 3
Suero liofilizado para control de precisión en química
Lote: 1301106470 clínica
Èxp.: 2015/11
APLICACIONES Standatrol S-E nivel 3 reconstituido: sus componentes son

Standatrol S-E nivel 3 es adaptable a distintos usos: estables en su mayoría, 10 días refrigerados (2-10oC) ex-
- estudios de precisión intralaboratorial en los que se re- cepto la fosfatasa alcalina cuya actividad puede aumentar
quiera un espécimen de control estable y reproducible en con el tiempo, y la bilirrubina que es estable 12 horas a 4oC
el tiempo, pudiendo emplearse en el control diario de re- y en la oscuridad. Para cada componente en particular, la
producibilidad y en la preparación de “cartas de control” estabilidad es similar a la del mismo en el suero nativo y
de acuerdo a los métodos corrientes; puede ser consultada en el manual de instrucciones co-
- como muestra desconocida en encuestas interlaboratoriales. rrespondiente.
Para un mayor rendimiento se recomienda, una vez recons-
FUNDAMENTOS DEL METODO tituido, conservarlo congelado (-20oC) y fraccionado en reci-
Standatrol S-E nivel 3 contiene los componentes habitual- pientes con cierre hermético (por ejemplo: tubos de micro-
mente determinados en los laboratorios de análisis clínicos. centrífuga de 1,5 ml). Las fracciones deben ser desconge-
Debe tenerse en cuenta que los valores asignados a los ladas una única vez a temperatura ambiente, homogenei-
distintos componentes del suero control han sido obteni- zándolas antes de ser utilizadas.
dos por sistemas analíticos Wiener lab., razón por la cual
los resultados obtenidos sólo serán comparables a los INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
listados, en la medida que hayan sido determinados con REACTIVOS
esos mismos sistemas. Cualquier variación de los caracteres organolépticos del
suero control (cambio en la coloración, humectación del
REACTIVOS PROVISTOS liofilizado, incompleta disolución con abundante floculación
Standatrol S-E nivel 3: suero humano liofilizado y estabili- o formación de gurmos), puede ser indicio de deterioro del
zado en viales para 5 ml con concentraciones establecidas mismo.
de metabolitos y enzimas. Valores reiterados fuera del rango esperado, también pue-
den ser indicios de deterioro.
PROCEDIMIENTO
INSTRUCCIONES PARA SU USO Standatrol S-E nivel 3 reconstituido: se debe usar de la
- Abrir el vial, retirando lentamente el tapón de goma para misma manera que una muestra desconocida, de acuer-
evitar pérdidas del material liofilizado. do a las instrucciones que acompañan al kit de reactivos
- Agregar 5,00 ml de agua bidestilada o desionizada exacta- que se emplee en cada caso.
mente medida (con bureta o pipeta de doble aforo). Nota: los valores asignados a las enzimas en los distin-
- Tapar y mezclar por inversión suave, evitando la formación tos analizadores automáticos, fueron obtenidos em-
de espuma. No agitar. pleando técnicas a 37oC.
- Dejar disolver unos 30 minutos a temperatura ambiente,
mezclando por inversión de tanto en tanto.
- Inmediatamente antes de usar, mezclar por inversión. LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
Fallas en la reconstitución o en la conservación pueden ser
PRECAUCIONES causa de resultados erróneos.
Los Reactivos son para uso diagnóstico "in vitro". Ver LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO en el manual de
Este suero control ha sido preparado a partir de material no instrucciones correspondiente al equipo en uso.
reactivo para HBsAg, HCV y HIV. Sin embargo, se recomien-
da manipularlo como si se tratara de material infectivo. PRESENTACION
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habitua- - 3 viales x 5 ml (Cód. 1937555)
les de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
acuerdo a la normativa local vigente. - International Federation of Clinical Chemistry. - Clin. Chem.
23/9:1784 (1977).
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE - Tonks, D. B. - Can. J. Med. Tech. 30:38 (1969)
ALMACENAMIENTO
Standatrol S-E nivel 3: es estable en refrigerador (2-10oC)
861266500 / 21 Pág. 1 de 5
KONELAB 20, 30, 60 / CT 200, 300, 600 - METABOLITOS
NIVEL 3
METABOLITO REACTIVO
VALOR MEDIO 1 D.S. RANGO ACEPTABLE
Acido úrico Uricostat enzimático AA 5,55 0,50 4,55 - 6,55
(mg/dl)
Uricostat enzimático AA líquida 5,58 0,50 4,58 - 6,58
Albúmina
Albúmina AA 3,80 0,29 3,23 - 4,37
(g/dl)
Bilirrubina directa Bilirrubina 0,97 0,12 0,73 - 1,21
(mg/dl)
Bilirrubina Directa AA 1,08 0,22 0,65 - 1,51
Bilirrubina Directa AA líquida 1,00 0,20 0,60 - 1,40

Bilirrubina total Bilirrubina 1,59 0,20 1,19 - 1,99
(mg/dl)
Bilirrubina Total AA 1,34 0,27 0,80 - 1,88
Bilirrubina Total AA líquida 1,33 0,27 0,80 - 1,86

Calcio Ca-Color AA 9,04 0,64 7,77 - 10,31
(mg/dl)
Ca-Color Arsenazo III AA 9,22 0,65 7,93 - 10,51
Cloruro
Electrodo ion selectivo 95,8 4,8 86,2 - 105,4
(mEq/l)
Colesterol Colestat enzimático AA 146 11 124 - 168
(mg/dl)
Colestat enzimático AA líquida 145 11 123 - 167
Creatinina Creatinina cinética AA líquida
(mg/dl) Técnica convencional 1,40 0,21 0,98 - 1,82
Técnica compensada 1,42 0,22 0,99 - 1,85
Creatinina enzimática AA líquida 1,36 0,17 1,02 - 1,70
Fósforo inorgánico
Fosfatemia UV AA 5,21 0,47 4,27 - 6,15
(mg/dl)
Glucosa Glicemia enzimática AA 107 8 91 - 123
(mg/dl)
Glicemia enzimática AA líquida 109 8 93 - 125
HDL Colesterol
HDL Colesterol monofase AA plus 48,9 6,1 36,7 - 61,1
(mg/dl)
Hierro Fer-color AA 114 14 87 - 141
(ug/dl)
Fer-color AA líquida 112 14 85 - 139
LDL Colesterol
LDL Colesterol monofase AA 72,2 9,1 54,1 - 90,3
(mg/dl)
Magnesio Mg-color AA 2,32 0,35 1,62 - 3,02
(mg/dl)
Magnesium CPZ 2,30 0,35 1,61 - 2,99
Potasio
(mEq/l)
Proteínas totales
Proteínas Totales AA 5,79 0,35 5,10 - 6,48
(g/dl)
Sodio
Electrodo ion selectivo 139 7 125 - 153
(mEq/l)
861266500 / 21 Pág. 2 de 5
NIVEL 3
METABOLITO REACTIVO
Triglicéridos TG Color GPO/PAP AA 96,0 7,2 81,6 - 110,4

(mg/dl)
TG Color GPO/PAP AA líquida 95,1 7,2 80,8 - 109,4
UIBC
UIBC/TIBC AA líquida 112 11 90 - 134
(ug/dl)
Urea Urea UV cinética AA 43,4 6,5 30,4 - 56,4
(mg/dl)
Urea UV cinética AA líquida 42,4 6,4 29,7 - 55,1
Lote: 1301106470 Exp.: 2015/11
861266500 / 21 Pág. 3 de 5
KONELAB 20, 30, 60 / CT 200, 300, 600 - ENZIMAS
NIVEL 3
ENZIMA REACTIVO
Alanina aminotransferasa GPT (ALT) UV AA 33,7 3,4 27,0 - 40,4
GPT/ALT)
(U/l) GPT (ALT) UV AA líquida 38,2 4,8 28,6 - 47,8
Amilasa Amilasa 405 cinética AA 111 14 83 - 139

(U/l) (CNPG3)
Amilasa 405 AA líquida 107 14 80 - 134
(CNPG3)
Aspartato aminotransfe- GOT (AST) UV AA 34,0 3,4 27,2 - 40,8
rasa (GOT/AST)
(U/l) GOT (AST) UV AA líquida 35,2 4,4 26,4 - 44,0
Colinesterasa Colinesterasa AA 6015 602 4812 - 7218

(U/l)
Cholinesterase 5828 583 4662 - 6994
Creatina kinasa CK-NAC UV AA 203 21 162 - 244
(U/l)
CK-NAC UV AA líquida 194 25 145 - 243
Fosfatasa ácida no Fosfatasa Acida Total y
3,94 0,59 2,76 - 5,12
prostática (U/l) Prostática cinética
Fosfatasa ácida Fosfatasa Acida Total y

14,4 2,2 10,1 - 18,7
total (U/l) Prostática cinética
Fosfatasa alcalina ALP 405 cinética optimizada 284 36 213 - 355

(U/l)
ALP 405 AA líquida 278 28 222 - 334
γ-glutamil transferasa γ-G-test cinética AA 45,7 5,7 34,3 - 57,1
(U/l)
γ-G-test cinética AA líquida 45,8 5,8 34,3 - 57,3
Lactato deshidrogenasa LDH-P UV AA 412 41 330 - 494
(U/l) (SFBC)
LDH-P UV AA líquida 380 48 285 - 475
(SFBC)
LDH-L 206 21 165 - 247
Lipasa
Lipasa AA líquida 32,7 3,3 26,2 - 39,2
(U/l)
Lote: 1301106470 Exp.: 2015/11
861266500 / 21 Pág. 4 de 5
Símbolos
C M
Elaborado por:
P
Xn

pea Nocivo


Xi
Irritante
G
Calibr. Calibrador
No congelar
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
861266500 / 21 Pág. 5 de 5
UR130116
Standatrol S-E
nivel 3
Suero liofilizado para control de precisión en química
Lote: 1305116110 clínica
Èxp.: 2016/05
APLICACIONES Standatrol S-E nivel 3 reconstituido: sus componentes son

Standatrol S-E nivel 3 es adaptable a distintos usos: estables en su mayoría, 10 días refrigerados (2-10oC) ex-
- estudios de precisión intralaboratorial en los que se re- cepto la fosfatasa alcalina cuya actividad puede aumentar
quiera un espécimen de control estable y reproducible en con el tiempo, y la bilirrubina que es estable 12 horas a 4oC
el tiempo, pudiendo emplearse en el control diario de re- y en la oscuridad. Para cada componente en particular, la
producibilidad y en la preparación de “cartas de control” estabilidad es similar a la del mismo en el suero nativo y
de acuerdo a los métodos corrientes; puede ser consultada en el manual de instrucciones co-
- como muestra desconocida en encuestas interlaboratoriales. rrespondiente.
Para un mayor rendimiento se recomienda, una vez recons-
FUNDAMENTOS DEL METODO tituido, conservarlo congelado (-20oC) y fraccionado en reci-
Standatrol S-E nivel 3 contiene los componentes habitual- pientes con cierre hermético (por ejemplo: tubos de micro-
mente determinados en los laboratorios de análisis clínicos. centrífuga de 1,5 ml). Las fracciones deben ser desconge-
Debe tenerse en cuenta que los valores asignados a los ladas una única vez a temperatura ambiente, homogenei-
distintos componentes del suero control han sido obteni- zándolas antes de ser utilizadas.
dos por sistemas analíticos Wiener lab., razón por la cual
los resultados obtenidos sólo serán comparables a los INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
listados, en la medida que hayan sido determinados con REACTIVOS
esos mismos sistemas. Cualquier variación de los caracteres organolépticos del
suero control (cambio en la coloración, humectación del
REACTIVOS PROVISTOS liofilizado, incompleta disolución con abundante floculación
Standatrol S-E nivel 3: suero humano liofilizado y estabili- o formación de gurmos), puede ser indicio de deterioro del
zado en viales para 5 ml con concentraciones establecidas mismo.
de metabolitos y enzimas. Valores reiterados fuera del rango esperado, también pue-
den ser indicios de deterioro.
PROCEDIMIENTO
INSTRUCCIONES PARA SU USO Standatrol S-E nivel 3 reconstituido: se debe usar de la
- Abrir el vial, retirando lentamente el tapón de goma para misma manera que una muestra desconocida, de acuer-
evitar pérdidas del material liofilizado. do a las instrucciones que acompañan al kit de reactivos
- Agregar 5,00 ml de agua bidestilada o desionizada exacta- que se emplee en cada caso.
mente medida (con bureta o pipeta de doble aforo). Nota: los valores asignados a las enzimas en los distin-
- Tapar y mezclar por inversión suave, evitando la formación tos analizadores automáticos, fueron obtenidos em-
de espuma. No agitar. pleando técnicas a 37oC.
- Dejar disolver unos 30 minutos a temperatura ambiente,
mezclando por inversión de tanto en tanto.
- Inmediatamente antes de usar, mezclar por inversión. LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
Fallas en la reconstitución o en la conservación pueden ser
PRECAUCIONES causa de resultados erróneos.
Los Reactivos son para uso diagnóstico "in vitro". Ver LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO en el manual de
Este suero control ha sido preparado a partir de material no instrucciones correspondiente al equipo en uso.
reactivo para HBsAg, HCV y HIV. Sin embargo, se recomien-
da manipularlo como si se tratara de material infectivo. PRESENTACION
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habitua- - 3 viales x 5 ml (Cód. 1937555)
les de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
acuerdo a la normativa local vigente. - International Federation of Clinical Chemistry. - Clin. Chem.
23/9:1784 (1977).
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE - Tonks, D. B. - Can. J. Med. Tech. 30:38 (1969)
ALMACENAMIENTO
861266500 / 22 Pág. 1 de 5
NIVEL 3
METABOLITO REACTIVO
Acido úrico Uricostat enzimático AA (1) (1) (1)
(mg/dl)
Uricostat enzimático AA líquida 5,80 0,52 4,76 - 6,84
Albúmina
Albúmina AA 3,99 0,30 3,39 - 4,59
(g/dl)
Bilirrubina directa Bilirrubina (1) (1) (1)
(mg/dl)
Bilirrubina Directa AA 1,10 0,22 0,66 - 1,54
Bilirrubina Directa AA líquida (1) (1) (1)
Bilirrubina total Bilirrubina (1) (1) (1)

(mg/dl)
Bilirrubina Total AA 1,32 0,27 0,79 - 1,85
Bilirrubina Total AA líquida (1) (1) (1)
Calcio Ca-Color AA (1) (1) (1)

(mg/dl)
Ca-Color Arsenazo III AA 9,52 0,67 8,19 - 10,85
Cloruro
Electrodo ion selectivo 100 5,0 90 - 110
(mEq/l)
Colesterol Colestat enzimático AA (1) (1) (1)
(mg/dl)
Colestat enzimático AA líquida 188 14 160 - 216
(mg/dl) Técnica convencional (1) (1) (1)
Técnica compensada 1,37 0,21 0,96 - 1,78
Creatinina enzimática AA líquida (1) (1) (1)
Fosfatemia UV AA 4,92 0,45 4,03 - 5,81
(mg/dl)
Glucosa Glicemia enzimática AA (1) (1) (1)
(mg/dl)
Glicemia enzimática AA líquida 124 10 105 - 143
HDL Colesterol
HDL Colesterol monofase AA plus 67,6 8,5 50,7 - 84,5
(mg/dl)
Hierro Fer-color AA (1) (1) (1)
(ug/dl)
Fer-color AA líquida (1) (1) (1)
LDL Colesterol
LDL Colesterol monofase AA (1) (1) (1)
(mg/dl)
Magnesio Mg-color AA (1) (1) (1)
(mg/dl)
Magnesium CPZ (1) (1) (1)
Potasio
(mEq/l)
Proteínas totales
Proteínas Totales AA 6,12 0,37 5,39 - 6,85
(g/dl)
Sodio
Electrodo ion selectivo 138 7 124 - 152
(mEq/l)
861266500 / 22 Pág. 2 de 5
NIVEL 3
METABOLITO REACTIVO
Triglicéridos TG Color GPO/PAP AA (1) (1) (1)

(mg/dl)
TG Color GPO/PAP AA líquida 91,3 6,9 77,6 - 105,0
UIBC
UIBC/TIBC AA líquida (1) (1) (1)
(ug/dl)
Urea Urea UV cinética AA (1) (1) (1)
(mg/dl)
Urea UV cinética AA líquida 46,3 7,0 32,4 - 60,2
(1)
No asignado
Lote: 1305116110 Exp.: 2016/05
861266500 / 22 Pág. 3 de 5
NIVEL 3
ENZIMA REACTIVO
Alanina aminotransferasa GPT (ALT) UV AA (1) (1) (1)
GPT/ALT)
(U/l) GPT (ALT) UV AA líquida 37,1 4,7 27,8 - 46,4
Amilasa Amilasa 405 cinética AA (1) (1) (1)

(U/l) (CNPG3)
Amilasa 405 AA líquida 107 14 80 - 134
(CNPG3)
Aspartato aminotransfe- GOT (AST) UV AA (1) (1) (1)
rasa (GOT/AST)
(U/l) GOT (AST) UV AA líquida 38,2 4,8 28,6 - 47,8
Colinesterasa Colinesterasa AA (1) (1) (1)

(U/l)
Cholinesterase (1) (1) (1)
Creatina kinasa CK-NAC UV AA 226 23 181 - 271

(U/l)
CK-NAC UV AA líquida (1) (1) (1)

(1) (1) (1)

(1) (1) (1)
Fosfatasa alcalina ALP 405 cinética optimizada (1) (1) (1)

(U/l)
ALP 405 AA líquida 295 30 236 - 354
γ-glutamil transferasa γ-G-test cinética AA 48,6 6,1 36,4 - 60,8
(U/l)
γ-G-test cinética AA líquida (1) (1) (1)
Lactato deshidrogenasa LDH-P UV AA (1) (1) (1)

(U/l) (SFBC)
LDH-P UV AA líquida 382 48 286 - 478
(SFBC)
LDH-L (1) (1) (1)
Lipasa
Lipasa AA líquida (1) (1) (1)
(U/l)
(1)
No asignado
Lote: 1305116110 Exp.: 2016/05
861266500 / 22 Pág. 4 de 5
Símbolos
C M
Elaborado por:
P
Xn

pea Nocivo


Xi
Irritante
G
Calibr. Calibrador
No congelar
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
861266500 / 22 Pág. 5 de 5
UR130617
Standatrol S-E
nivel 3
Suero liofilizado para control de precisión en química clínica
Lote: 1308122250
Èxp.: 2016/08
APLICACIONES estables en su mayoría, 10 días refrigerados (2-10oC) excepto

Standatrol S-E nivel 3 es adaptable a distintos usos: la fosfatasa alcalina cuya actividad puede aumentar con el
- estudios de precisión intralaboratorial en los que se requiera tiempo, y la bilirrubina que es estable 12 horas a 4oC y en la
un espécimen de control estable y reproducible en el tiempo, oscuridad. Para cada componente en particular, la estabili-
pudiendo emplearse en el control diario de reproducibilidad dad es similar a la del mismo en el suero nativo y puede ser
y en la preparación de “cartas de control” de acuerdo a los consultada en el manual de instrucciones correspondiente.
métodos corrientes; Para un mayor rendimiento se recomienda, una vez reconstitui-
- como muestra desconocida en encuestas interlaboratoriales. do, conservarlo congelado (-20oC) y fraccionado en recipientes
con cierre hermético (por ejemplo: tubos de microcentrífuga de
FUNDAMENTOS DEL METODO 1,5 ml). Las fracciones deben ser descongeladas una única
Standatrol S-E nivel 3 contiene los componentes habitual- vez a temperatura ambiente, homogeneizándolas antes de
mente determinados en los laboratorios de análisis clínicos. ser utilizadas.
Debe tenerse en cuenta que los valores asignados a los dis-
tintos componentes del suero control han sido obtenidos por INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
sistemas analíticos Wiener lab., razón por la cual los resultados REACTIVOS
obtenidos sólo serán comparables a los listados, en la medida Cualquier variación de los caracteres organolépticos del suero
que hayan sido determinados con esos mismos sistemas. control (cambio en la coloración, humectación del liofilizado,
incompleta disolución con abundante floculación o formación
REACTIVOS PROVISTOS de gurmos), puede ser indicio de deterioro del mismo.
Standatrol S-E nivel 3: suero humano liofilizado y estabiliza- Valores reiterados fuera del rango esperado, también pueden
do en viales para 5 ml con concentraciones establecidas de ser indicios de deterioro.
metabolitos y enzimas.
REACTIVO NO PROVISTO PROCEDIMIENTO

Agua bidestilada o desionizada. Standatrol S-E nivel 3 reconstituido: se debe usar de la
misma manera que una muestra desconocida, de acuerdo
INSTRUCCIONES PARA SU USO a las instrucciones que acompañan al kit de reactivos que
- Abrir el vial, retirando lentamente el tapón de goma para se emplee en cada caso.
evitar pérdidas del material liofilizado. Nota: los valores asignados a las enzimas en los distintos
- Agregar 5,00 ml de agua bidestilada o desionizada exacta- analizadores automáticos, fueron obtenidos empleando
mente medida (con bureta o pipeta de doble aforo). técnicas a 37oC.
- Tapar y mezclar por inversión suave, evitando la formación
de espuma. No agitar.
- Dejar disolver unos 30 minutos a temperatura ambiente, LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
mezclando por inversión de tanto en tanto. Fallas en la reconstitución o en la conservación pueden ser
- Inmediatamente antes de usar, mezclar por inversión. causa de resultados erróneos.
PRECAUCIONES instrucciones correspondiente al equipo en uso.
Este suero control ha sido preparado a partir de material no PRESENTACION
reactivo para HBsAg, HCV y HIV. Sin embargo, se recomienda - 3 viales x 5 ml (Cód. 1937555)
manipularlo como si se tratara de material infectivo.
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales BIBLIOGRAFIA
de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos. - International Federation of Clinical Chemistry. - Clin. Chem.
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de 23/9:1784 (1977).
acuerdo a la normativa local vigente. - Tonks, D. B. - Can. J. Med. Tech. 30:38 (1969)
ALMACENAMIENTO
Standatrol S-E nivel 3 reconstituido: sus componentes son
861266500 / 23 p. 1/4
NIVEL 3
METABOLITO REACTIVO VALOR RANGO
1 D,S,
MEDIO ACEPTABLE
Acido úrico
(mg/dl) Uricostat enzimático AA líquida 5,92 0,54 4,85 6,99
Albúmina
Albúmina AA 4,04 0,31 3,43 4,65
(g/dl)
Bilirrubina directa
(mg/dl) Bilirrubina Directa AA 1,21 0,24 0,73 1,69
Bilirrubina total
Bilirrubina Total AA 1,37 0,28 0,82 1,92
(mg/dl)
Calcio
(mg/dl) Ca-Color Arsenazo III AA 9,32 0,65 8,02 10,62
Cloruro
Electrodo ion selectivo 102 5 92 112
(mEq/l)
Colesterol
Colestat enzimática AA líquida 145 11 123 167
(mg/dl)
(mg/dl) 1,51 0,23 1,06 1,96
Técnica compensada
Fosfatemia UV AA 4,71 0,43 3,86 5,56
(mg/dl)
Glucosa
Glicemia enzimática AA líquida 106 8 90 122
(mg/dl)
HDL Colesterol HDL Colesterol
45,4 5,7 34,0 56,8
(mg/dl) monofase AA plus
Potasio
Electrodo ion selectivo 3,93 0,20 3,54 4,32
(mEq/l)
Proteínas Totales
Proteínas Totales AA 6,13 0,37 5,39 6,87
(g/dl)
Sodio
(mEq/l)
Triglicéridos
TG Color GPO/PAP AA líquida 94,4 7,1 80,2 108,6
(mg/dl)
Urea
Urea UV cinética AA líquida 46,1 6,9 32,3 59,9
(mg/dl)
Lote: 1308122250 Exp.: 2016/08
861266500 / 23 p. 2/4
NIVEL 3
ENZIMA REACTIVO VALOR RANGO
1 D.S.
MEDIO ACEPTABLE
Alanina aminotransferasa
(GPT/ALT) GPT (ALT) UV AA líquida 40,7 5,1 30,5 50,9
(U/l)
Amilasa Amilasa 405 AA líquida
(U/l) 101 13 76 126
(CNPG3)
Aspartato aminotransferasa
(GOT/AST) GOT (AST) UV AA líquida 39,6 5,0 29,7 49,5
(U/l)
Creatina kinasa
(U/l) CK-NAC UV AA 208 26 156 260
Fosfatasa alcalina
ALP 405 AA líquida 292 37 219 365
(U/l)
g-glutamil transferasa g-G-test cinética AA 49,8 6,3 37,3 62,3

(U/l) g-G-test cinética AA líquida 50,1 6,3 37,6 62,6
Lactato
LDH-P UV AA líquida
deshidrogenasa 431 54 323 539
(SFBC)
(U/l)
Lote: 1308122250 Exp.: 2016/08
861266500 / 23 p. 3/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo
Wiener lab.
Riobamba 2944
Bioquímica
861266500 / 23 p. 4/4 UR130906
Standatrol S-E
nivel 3
Lote: 1311127840
Èxp.: 2016/11


ALMACENAMIENTO
861266500 / 24 p. 1/4
NIVEL 3
1 D,S,
MEDIO ACEPTABLE
Acido úrico
Albúmina
Albúmina AA 4,04 0,31 3,43 4,65
(g/dl)
Bilirrubina directa
Bilirrubina total
(mg/dl)
Calcio
Cloruro
(mEq/l)
Colesterol
(mg/dl)
(mg/dl) 1,51 0,23 1,06 1,96
Técnica compensada
Fosfatemia UV AA 4,71 0,43 3,86 5,56
(mg/dl)
Glucosa
(mg/dl)
45,4 5,7 34,0 56,8
Potasio
(mEq/l)
Proteínas Totales
(g/dl)
Sodio
(mEq/l)
Triglicéridos
(mg/dl)
Urea
(mg/dl)
Lote: 1311127840 Exp.: 2016/11
861266500 / 24 p. 2/4
NIVEL 3
1 D.S.
MEDIO ACEPTABLE
(U/l)
(U/l) 101 13 76 126
(CNPG3)
(U/l)
Creatina kinasa
(U/l) CK-NAC UV AA 208 26 156 260
Fosfatasa alcalina
ALP 405 AA líquida 292 44 204 380
(U/l)

Lactato
(SFBC)
(U/l)
Lote: 1311127840 Exp.: 2016/11
861266500 / 24 p. 3/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo
Wiener lab.
Riobamba 2944
Bioquímica
861266500 / 24 p. 4/4 UR131115
Standatrol S-E
nivel 3
Lote: 1405139650
Èxp.: 2017/01


ALMACENAMIENTO
861266500 / 25 p. 1/4
NIVEL 3
1 D.S.
MEDIO ACEPTABLE
Acido úrico
Albúmina
Albúmina AA 4,04 0,31 3,43 4,65
(g/dl)
Bilirrubina directa
Bilirrubina total
(mg/dl)
Calcio
Cloruro
(mEq/l)
Colesterol
(mg/dl)
(mg/dl) 1,51 0,23 1,06 1,96
Técnica compensada
Fosfatemia UV AA 4,71 0,43 3,86 5,56
(mg/dl)
Glucosa
(mg/dl)
45,4 5,7 34,0 56,8
Potasio
(mEq/l)
Proteínas Totales
(g/dl)
Sodio
(mEq/l)
Triglicéridos
(mg/dl)
Urea
(mg/dl)
Lote: 1405139650 Exp.: 2017/01
861266500 / 25 p. 2/4
NIVEL 3
1 D.S.
MEDIO ACEPTABLE
(U/l)
(U/l) 101 13 76 126
(CNPG3)
(U/l)
Creatina kinasa
(U/l) CK-NAC UV AA 208 26 156 260
Fosfatasa alcalina
ALP 405 AA líquida 292 37 219 365
(U/l)

Lactato
(SFBC)
(U/l)
Lote: 1405139650 Exp.: 2017/01
861266500 / 25 p. 3/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo
Wiener lab.
Riobamba 2944
Bioquímica
861266500 / 25 p. 4/4 UR140516
Standatrol S-E
nivel 3
Lote: 1407145150
Exp.: 2017/01


ALMACENAMIENTO
861266500 / 26 p. 1/4
NIVEL 3
1 D.S.
MEDIO ACEPTABLE
Acido úrico
Albúmina
Albúmina AA 4,04 0,31 3,43 4,65
(g/dl)
Bilirrubina directa
Bilirrubina total
(mg/dl)
Calcio
Cloruro
(mEq/l)
Colesterol
(mg/dl)
(mg/dl) 1,51 0,23 1,06 1,96
Técnica compensada
Fosfatemia UV AA 4,71 0,43 3,86 5,56
(mg/dl)
Glucosa
(mg/dl)
45,4 5,7 34,0 56,8
Potasio
(mEq/l)
Proteínas Totales
(g/dl)
Sodio
(mEq/l)
Triglicéridos
(mg/dl)
Urea
(mg/dl)
Lote: 1407145150 Exp.: 2017/01
861266500 / 26 p. 2/4
NIVEL 3
1 D.S.
MEDIO ACEPTABLE
(U/l)
(U/l) 101 13 76 126
(CNPG3)
(U/l)
Creatina kinasa
(U/l) CK-NAC UV AA 208 26 156 260
Fosfatasa alcalina
ALP 405 AA líquida 292 37 219 365
(U/l)

Lactato
(SFBC)
(U/l)
Lote: 1407145150 Exp.: 2017/01
861266500 / 26 p. 3/4
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo
Wiener lab.
Riobamba 2944
Bioquímica
861266500 / 26 p. 4/4 UR140804
Standatrol S-E
Lote: 1404137860 (Exp.: 2016/04)
C 2 niveles
Nivel 1: 137860 (Exp.: 2016/04)
Nivel 2: 137860 (Exp.: 2016/04)
APLICACIONES Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales

Standatrol S-E 2 niveles es adaptable a distintos usos: de trabajo en el laboratorio de química clínica.
- estudios de precisión intralaboratorial en los que se re Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
quiera un espécimen de control estable y reproducible acuerdo a la normativa local vigente.
en el tiempo, pudiendo emplearse en el control diario de
reproducibilidad y en la preparación de “cartas de control” ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
de acuerdo a los métodos corrientes; ALMACENAMIENTO
- como muestra desconocida en encuestas interlaboratoriales Standatrol S-E 2 niveles es estable en refrigerador (2-10oC)
de precisión en base a su constancia de dosis y su estabilidad. hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
Una vez reconstituidos los Controles, sus componentes son
FUNDAMENTOS DEL METODO estables 10 días refrigerados (2-10oC) excepto la fosfatasa
Standatrol S-E 2 niveles contiene los componentes habitual alcalina cuya actividad puede aumentar con el tiempo, y la
mente determinados en los laboratorios de análisis clínicos. bilirrubina que es estable 12 horas a 4oC y en la oscuridad.
Debe tenerse en cuenta que los valores asignados a los Para un mayor rendimiento se recomienda, una vez recons-
distintos componentes del suero control han sido obtenidos tituidos, conservarlos congelados (-20oC) y fraccionados
por métodos y reactivos Wiener lab., razón por la cual los en recipientes con cierre hermético (por ejemplo: tubos
resultados obtenidos sólo serán comparables a los lista de microcentrífuga de 1,5 ml). Las fracciones deben ser
dos, en la medida que se empleen los métodos y reactivos descongeladas una única vez a temperatura ambiente,
correspondientes. homogeneizándolas antes de ser utilizadas.

Control Nivel 1: suero homogeneizado y liofilizado en viales REACTIVOS
para 5 ml con concentraciones normales o en los niveles de Cualquier variación de los caracteres organolépticos del sue
decisión médica, de metabolitos y enzimas. ro control (como discoloración, humectación del liofilizado,
Control Nivel 2: suero homogeneizado y liofilizado en viales disolución incompleta con abundante floculación o formación
para 5 ml con concentraciones patológicas o en los niveles de gurmos), puede ser indicio de deterioro del mismo.
de decisión médica, de metabolitos y enzimas.

Agua bidestilada o desionizada. Los Controles reconstituidos se deben usar de la misma
manera que una muestra desconocida, de acuerdo a las
INSTRUCCIONES PARA SU USO instrucciones que acompañan al equipo de reactivos que
- Abrir el vial, retirando lentamente el tapón de goma para se empleen en cada caso.
evitar pérdidas del material liofilizado.
- Agregar 5,00 ml de agua bidestilada o desionizada exacta
mente medida (con bureta o pipeta de doble aforo). LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
- Tapar y mezclar por inversión suave, evitando la formación Fallas en la reconstitución o en la conservación pueden ser
- Dejar disolver unos 20 minutos a temperatura ambiente, Ver LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO en el manual
mezclando por inversión de tanto en tanto. de instrucciones correspondiente al equipo en uso.
PRESENTACION
PRECAUCIONES - 6 viales x 5 ml (Cód. 1937553).
Estos sueros controles han sido preparados a partir de mate BIBLIOGRAFIA
rial no reactivo para HBsAg y HIV. Sin embargo los controles - International Federation of Clinical Chemistry. - Clin. Chem.
y todas las muestras de sangre deberían manejarse como 23/9:1784 (1977).
si se trataran de material infectivo. - Tonks, D. B. - Can. J. Med. Tech. 30:38 (1969).
870900000 / 16 p. 1/24
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo
870900000 / 16 p. 2/24
Standatrol S-E
2 niveles
Lote: 1404137860 (Venc.: 2016/04)
C Soro liofilizado para controle de precisão em química clínica
Nível 1: 137860 (Venc.: 2016/04)
Nível 2: 137860 (Venc.: 2016/04)
APLICAÇÕES Utilizar os reagentes observando as precauções habituais

Standatrol S-E 2 niveles é adaptável a diversos usos: de trabalho no laboratório de análise clínica.
- estudos de precisão intralaboratorial onde seja necessário Todos os reagentes e as amostras devem-se descartar
um espécime de controle estável e reprodutível no tempo, conforme à regulação local vigente.
podendo ser empregado no controle diário de reprodutibili-
dade e na preparação de “gráficos de controle” de acordo ESTABILIDADE E INSTRUÇÕES DE
com os métodos correntes; ARMAZENAMENTO
- como amostra desconhecida em análises interlaboratoriais Standatrol S-E 2 niveles é estável sob refrigeração (2-10oC)
de precisão devido a sua constância de dose e à sua até a data de vencimento indicada na embalagem.
estabilidade. Uma vez reconstituídos os controles, seus componentes são
estáveis 10 dias sob refrigeração (2-10oC) exceto a fosfatase
FUNDAMENTOS DO MÉTODO alcalina, sendo que a atividade pode aumentar com o tempo
Standatrol S-E 2 niveles contém os componentes habitu- e a bilirrubina que é estável 12 horas a 4oC e ao abrigo da luz.
almente determinados nos laboratórios de análises clínicas. Recomenda-se que para obter melhor rendimento uma vez
Deve-se ter em consideração que os valores estabelecidos que sejam reconstituídos os controles devem ser congelados
para os componentes distintos do soro controle foram ob- (-20oC) e fracionados em recipientes com fecho hermético
tidos por métodos e reagentes de Wiener lab., razão pela (exemplo: tubos microcentrífuga de 1,5 ml). As parcelas do
qual os resultados obtidos apenas serão comparáveis aos material deve ser descongelado só uma vez e a temperatura
relacionados se forem empregados os métodos e reagentes ambiente, homogeneizar antes de ser utilizada.
correspondentes.
INDÍCIOS DE INSTABILIDADE OU DETERIORAÇÃO
REAGENTES FORNECIDOS DOS REAGENTES
Controle Nível 1: soro homogeneizado e liofilizado em Qualquer alteração das características orgão-lépticas dos
frascos para 5 ml com concentrações normais ou nos níveis soros controle (tais como discolor, umectação, dissolução
de decisão médica, de metabólitos e enzimas. incompleta com abundante floculação ou formação de gru-
Controle Nível 2: soro homogeneizado e liofilizado em fras- mos) pode ser indício de deterioração dos mesmos.
cos de 5 ml com concentrações patológicas ou nos níveis
de decisão médica de metabólitos e enzimas.
PROCEDIMENTO
REAGENTE NÃO FORNECIDO Os Controles reconstituídos devem ser utilizados do mes-
Água bidestilada o deionizada. mo modo que uma amostra desconhecida, de acordo com
as instruções que acompanham aos kits de reagentes
INSTRUÇÕES PARA USO que se utilizam em cada caso.
- Abrir o frasco, retirando lentamente a tampa de borracha,
para evitar perdas do material liofilizado.
- Adicionar 5,00 ml de água bidestilada o deionizada exata- LIMITAÇÕES DO PROCEDIMENTO
mente medida (bureta ou pipeta de duplo aforo). Falhas na reconstituição podem ser causa de resultados
- Tampar e misturar por inversão suave, evitando a formação incorretos.
de espuma. Não agitar. Vide LIMITAÇÕES DO PROCEDIMENTO no manual de
- Deixar dissolver uns 20 minutos a temperatura ambiente, instruções correspondentes ao kit em uso.
misturando por inversão de tempos em tempos.
- Imediatamente antes de usar, misturar por inversão. APRESENTAÇÃO
- 6 frascos x 5 ml (Cód. 1937553).
PRECAUÇÕES
Os Reagentes são para uso diagnóstico "in vitro". REFERÊNCIAS
Estes soros controle foram preparados a partir de material - International Federation of Clinical Chemistry. - Clin. Chem.
não-reativo para HBsAg e HIV. No entanto, os controles e 23/9:1784 (1977).
todas as amostras de sangue devem ser manipuladas como - Tonks, D. B. - Can. J. Med. Tech. 30:38 (1969).
material potencialmente contaminado.
870900000 / 16 p. 3/24
Símbolos
Os seguintes símbolos são utilizados nos kits de reagentes para diagnóstico da Wiener lab.
C
Este produto preenche os requisitos da Diretiva
Européia 98/79 CE para dispositivos médicos de M Elaborado por:
diagnóstico "in vitro"
P
Xn
Representante autorizado na Comunidade

Nocivo
Européia
V Uso médico-diagnóstico "in vitro"

X Conteúdo suficiente para <n> testes

Xi
Irritante
H Data de validade
i Consultar as instruções de uso
l Limite de temperatura (conservar a)
 Não congelar
Calibr. Calibrador
b Controle
F Risco biológico
Volume após da reconstituição

b Controle Positivo
Cont. Conteúdo c Controle Negativo
870900000 / 16 p. 4/24
INDICE
Página
Técnica manual
Metabolitos................................................................................................................... 6-7
Enzimas....................................................................................................................... 8
Targa BT 3000
Metabolitos................................................................................................................... 9-10
Enzimas....................................................................................................................... 11
Selectra 1 / 2 / E
Metabolitos................................................................................................................... 12
Enzimas....................................................................................................................... 13
Konelab Series / Wiener lab. CT Series

Metabolitos................................................................................................................... 14-15
Enzimas....................................................................................................................... 16
BT 3000 plus / Wiener lab. CB Series

Metabolitos................................................................................................................... 17-18
Enzimas....................................................................................................................... 19
Metrolab 2300 plus / Wiener lab. CM Series

Metabolitos................................................................................................................... 20
Emzimas...................................................................................................................... 21
Wiener lab. CMD 800 Series

Metabolitos................................................................................................................... 22
Emzimas...................................................................................................................... 23
Wiener lab. IC Series

Iones............................................................................................................................ 24
870900000 / 16 p. 5/24
TECNICA MANUAL - METABOLITOS
NIVEL 1 NIVEL 2
METABOLITO REACTIVO VALOR RANGO VALOR RANGO
Acido úrico Uricostat enzimático 4,5 3,7 5,3 6,3 5,2 7,4
(mg/dl) Uricostat enzimático AA 5,2 4,3 6,1 9,2 7,5 10,9
Uricostat enzimático AA líquida 5,0 4,1 5,9 8,7 7,1 10,3
Albúmina Proti-2 (Rvo. BCF) 4,6 3,9 5,3 3,0 2,5 3,5
(g/dl) Albúmina AA 4,4 3,7 5,1 2,9 2,4 3,4
Bilirrubina directa Bilirrubina 0,3 0,2 0,4 11 8 14
(mg/l) Bilirrubina Directa AA 2,7 1,9 3,5 10 7 13
Bilirrubina Directa AA líquida 3,5 2,1 4,9 13 8 18
Bilirrubina total Bilirrubina 8,3 6,2 10,4 53 42 64
(mg/l) Bilirrubina Total AA 9,3 7,4 11,2 45 36 54
Bilirrubina Total AA líquida 9,6 5,8 13,4 46 28 64
Calcio Ca-Color 8,6 7,4 9,8 12 10 14
(mg/dl) Ca-Color AA 9,0 7,7 10,3 12 10 14
Ca-Color Arsenazo III AA 9,7 8,3 11,1 11 9 13
Colesterol Colestat enzimático 2,3 2,0 2,6 0,9 0,8 1,0
(g/l) Colestat enzimático AA 2,4 2,0 2,8 1,0 0,9 1,2
Colestat enzimático líquida 2,5 2,1 2,9 1,0 0,9 1,2
Creatinina Creatinina cinética AA líquida 13 10 16 56 45 67
(mg/l) Creatinina directa - - - - - -
Técnica cinética 12 9 15 50 40 60
Técnica de punto final 18 14 23 63 50 76
Creatinina 23 17 29 67 54 80
Fósforo inorgánico Fosfatemia 4,8 3,9 5,7 8,3 7,1 9,5
(mg/dl) Fosfatemia UV AA 5,2 4,3 6,1 8,7 7,4 10,0
Glucosa Glicemia enzimática 86 73 99 286 243 329
(mg/dl) Glicemia enzimática AA 87 74 100 282 240 324
Glicemia enzimática AA líquida 88 75 101 286 243 329
Hierro Fer-color 197 150 244 51 36 66
(ug/dl) Fer-color AA 195 148 242 49 34 64
Fer-color AA líquida 221 168 274 60 42 78
Magnesio
Mg-color AA 2,3 1,6 3,0 4,4 3,3 5,5
(mg/dl)
Proteínas Totales Proti-2 (Rvo. EDTA/Cu) 6,5 5,7 7,3 4,3 3,8 4,8
(g/dl) Proteínas Totales AA 6,7 5,9 7,5 4,3 3,8 4,8
Triglicéridos TG Color GPO/PAP AA 1,8 1,5 2,1 0,8 0,7 0,9
(g/l) TG Color GPO/PAP AA líquida 1,7 1,4 2,0 0,9 0,8 1,0
UIBC
UIBC/TIBC AA líquida - - - 160 120 200
(ug/dl)
(-) No asignado
870900000 / 16 p. 6/24
NIVEL 1 NIVEL 2
Urea Urea color 2R 0,4 0,3 0,5 1,0 0,8 1,2
(g/l) Uremia 0,3 0,2 0,4 0,9 0,7 1,1
Urea UV cinética AA 0,3 0,2 0,4 1,0 0,8 1,2
Urea UV cinética AA líquida 0,3 0,2 0,4 1,0 0,8 1,2
Lote: 1404137860 (Exp.: 2016/04) Nivel 1: 137860 (Exp.: 2016/04) Nivel 2: 137860 (Exp.: 2016/04)
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TECNICA MANUAL - ENZIMAS
NIVEL 1 NIVEL 2
ENZIMA REACTIVO VALOR RANGO VALOR RANGO
Alanina aminotransferasa GPT (ALT) UV unitest 32 24 40 99 74 124
(GPT/ALT) GPT (ALT) UV AA 33 25 41 97 73 121
(U/l)
GPT (ALT) UV AA líquida 33 25 41 97 73 121
Amilasa Amilasa 405 cinética 82 62 103 466 350 583
(U/l) Amilasa 405 AA líquida 82 62 103 466 350 583
Aspartato aminotransferasa GOT (AST) UV unitest 45 34 56 212 159 265
(GOT/AST) GOT (AST) UV AA 41 31 51 210 158 263
(U/l)
GOT (AST) UV AA líquida 41 31 51 210 158 263
Colinesterasa Colinesterasa (30ºC) 6341 4756 7926 4510 3383 5638
(U/l) Colinesterasa AA (30ºC) 6341 4756 7926 4510 3383 5638
Creatina Kinasa CK NAV UV unitest 130 98 163 421 316 526
(U/l) CK NAC UV AA 130 98 163 421 316 526
CK NAC UV AA líquida 147 110 184 427 320 534
Fosfatasa alcalina ALP 405 cinética optimizada 179 134 224 512 384 640
(U/l) ALP 405 AA líquida 212 148 276 680 510 850
Fosfatasas Alcalina optim. 193 145 241 633 475 791
g-Glutamil transferasa g-G-test cinética AA 35 26 44 129 97 161
(U/l) g-G-test cinética AA líquida 35 26 44 129 97 161
Lactato deshidrogenasa LDH-P UV unitest 354 266 443 736 552 920
(U/l)) LDH-P UV AA 393 295 491 894 671 1,118
LDH-P UV AA líquida 408 306 510 948 711 1,185
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TARGA BT 3000 - METABOLITOS
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Acido úrico Uricostat enzimático AA 5,14 0,59 3,96 6,32 9,21 0,83 7,55 10,87
(mg/dl) Uricostat enz. AA líquida 5,08 0,59 3,91 6,25 9,05 0,82 7,42 10,68
Albúmina
Albúmina AA 3,76 0,43 2,90 4,62 2,88 0,26 2,36 3,40
(g/dl)
Bilirrubina directa Bilirrubina 0,39 0,08 0,23 0,55 1,21 0,24 0,73 1,69
(mg/dl) Bilirrubina Directa AA 0,34 0,08 0,19 0,49 1,14 0,26 0,63 1,65
Bilirrubina Directa AA líquida 0,47 0,11 0,26 0,68 1,22 0,28 0,67 1,77
Bilirrubina total Bilirrubina 0,95 0,12 0,71 1,19 4,89 0,61 3,67 6,11
(mg/dl) Bilirrubina Total AA 0,85 0,17 0,51 1,19 4,26 0,96 2,34 6,18
Bilirrubina Total AA líquida 0,86 0,17 0,52 1,20 4,65 1,0 2,56 6,74
Calcio Ca-Color AA 9,35 0,89 7,57 11,13 12,5 0,9 10,7 14,3
(mg/dl) Ca-Color Arsenazo III AA 10,1 1,0 8,2 12,0 12,3 0,9 10,6 14,0
Cloruro Electrodo
101 8 86 116 82,7 4,2 74,4 91,0
(mEq/l) ion selectivo
Colesterol Colestat enzimático AA 243 25 194 292 100 8 85 115
(mg/dl) Colestat enz. AA líquida 241 24 193 289 98,8 7,4 84,0 113,6
Creatinina Creatinina cinética AA líquida 1,44 0,25 0,94 1,94 5,51 0,69 4,13 6,89
(mg/dl) Creatinina enzim. AA líquida 0,55 0,09 0,38 0,72 5,04 0,63 3,78 6,30
Fosfatemia UV AA 4,21 0,53 3,16 5,26 7,44 0,56 6,32 8,56
(mg/dl)
Glucosa Glicemia enzimática AA 85,7 6,5 72,8 98,6 282 21 240 324
(mg/dl) Glicemia enz. AA líquida 86,8 6,5 73,8 99,8 287 22 244 330
89,7 13,5 62,8 116,6 27,6 4,2 19,3 35,9
Hierro Fer-color AA 248 30 188 308 59,8 9,0 41,9 77,7
(ug/dl) Fer-color AA líquida 236 29 179 293 57,6 8,7 40,3 74,9
Lactato
Lactate 37,1 4,7 27,8 46,4 11,3 1,4 8,5 14,1
(mg/dl)
LDL Colesterol LDL Colesterol
129 20 90 168 62,1 9,3 43,5 80,7
(mg/dl) monofase AA
Magnesio
Mg-color AA 2,00 0,30 1,40 2,60 4,37 0,53 3,32 5,42
(mg/dl)
Potasio Electrodo
3,90 0,30 3,31 4,49 5,87 0,44 4,99 6,75
Proteínas Totales
Proteínas Totales AA 6,40 0,48 5,44 7,36 4,20 0,32 3,57 4,83
(g/dl)
Sodio Electrodo
143 11 122 164 125 10 106 144
Triglicéridos TG Color GPO/PAP AA 174 13 148 200 86,9 6,5 73,9 99,9
(mg/dl) TG Color GPO/PAPAA líquida 176 13 150 202 85,7 6,5 72,8 98,6
UIBC
UIBC/TIBC AA líquida - - - - 122 19 85 159
(ug/dl)
870900000 / 16 p. 9/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Urea Urea UV cinética AA 33,1 5,0 23,2 43,0 96,7 11,6 73,5 119,9
(mg/dl)
Urea UV cinética AA líquida 32,0 4,8 22,4 41,6 98,2 11,8 74,6 121,8
(-) No asignado
870900000 / 16 p. 10/24
TARGA BT 3000 - ENZIMAS
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Alanina aminotransfe- GPT (ALT) UV AA 33,6 4,2 25,2 42,0 100 13 75 125
rasa (GPT/ALT) (U/l)
GPT (ALT) UV AA líquida 32,6 4,9 22,8 42,4 101 15 71 131
Amilasa Amilasa 405 cinética 79,9 12,0 55,9 103,9 456 69 319 593
(U/l) Amilasa 405 AA líquida 80,1 12,0 56,1 104,1 458 69 321 595
Aspartato aminotran- GOT (AST) UV AA 44,1 5,5 33,1 55,1 209 26 157 261
ferasa (GOT/AST) (U/l)
GOT (AST) UV AA líquida 41,4 6,2 29,0 53,8 199 30 139 259
Colinesterasa Colinesterasa AA 7150 894 5362 8938 4952 743 3466 6438
(U/l) Cholinesterase 7346 919 5509 9183 5159 645 3869 6449
Creatina kinasa CK-NAC UV AA 137 21 96 178 441 66 309 573
(U/l) CK-NAC UV AA líquida 140 21 98 182 420 63 294 546
Fosfatasa alcalina
ALP 405 AA líquida 198 25 148 248 649 81 487 811
(U/l)
g-glutamil transferasa g-G-test cinética AA 34,3 4,3 25,7 42,9 137 17 103 171
(U/l)
g-G-test cinética AA líquida 34,4 4,3 25,8 43,0 137 17 103 171
Lactato LDH-P UV AA 335 42 251 419 708 89 531 885
deshidrogenasa
(U/l) LDH-P UV AA líquida 315 48 220 410 709 107 496 922
LDH-L 171 22 128 214 349 44 262 436
Lipasa
Lipasa AA líquida 42,5 5,3 31,9 53,1 62,0 7,8 46,5 77,5
(U/l)
870900000 / 16 p. 11/24
SELECTRA 1 / 2 / E - METABOLITOS
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D,S, 1 D,S,
Albúmina
Albúmina AA 4,09 0,31 3,48 4,70 2,91 0,26 2,39 3,43
(g/dl)
(mg/dl) Colestat enz. AA líquida 242 18 206 278 100 8 85 115
Fosfatemia UV AA 4,43 0,40 3,63 5,23 8,21 0,62 6,98 9,44
(mg/dl)
76,9 9,6 57,7 96,1 26,3 3,3 19,7 32,9
Lactato
Lactate 35,8 3,2 29,4 42,2 10,6 1,0 8,7 12,5
(mg/dl)
121 15 91 151 58,3 7,3 43,7 72,9
(mg/dl) monofase AA
Magnesio
Mg-color AA 2,13 0,32 1,49 2,77 4,17 0,50 3,17 5,17
(mg/dl)
Proteínas Totales
(g/dl)
UIBC
(ug/dl) UIBC/TIBC AA líquida - - - - 124 16 93 155
Urea Urea UV cinética AA 31,9 4,8 22,3 41,5 100 12 76 124

(mg/dl) Urea UV cinética AA líquida 32,9 5,0 23,0 42,8 100 12 76 124
(-) No asignado
870900000 / 16 p. 12/24
SELECTRA 1 / 2 / E - ENZIMAS
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D,S, 1 D,S,
Alanina aminotransfe- GPT (ALT) UV AA 31,7 3,2 25,4 38,0 94,4 9,5 75,5 113,3
GPT (ALT) UV AA líquida 29,8 3,8 22,3 37,3 94,2 11,8 70,6 117,8
Aspartato aminotrans- GOT (AST) UV AA 41,7 4,2 33,4 50,0 197 20 158 236
4,21 0,63 2,95 5,47 4,49 0,68 3,14 5,84
total (U/l) Prostática cinética 8,50 1,28 5,95 11,05 36,7 4,6 27,5 45,9
Fosfatasa alcalina
(U/l) ALP 405 AA líquida 181 18 145 217 587 59 470 704
(U/l)
deshidrogenasa LDH-P UV AA líquida 321 40 241 401 723 91 542 904
(U/l)
LDH-L 169 17 135 203 354 36 283 425
Lipasa
(U/l)
870900000 / 16 p. 13/24
KONELAB SERIES / WIENER LAB. CT SERIES - METABOLITOS
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Albúmina
Albúmina AA 3,90 0,30 3,31 4,49 2,74 0,25 2,25 3,23
(g/dl)
Calcio iónico (Cai) Electrodo
0,87 0,10 0,68 1,06 1,17 0,13 0,91 1,43
(mmol/l) ion selectivo
Cloruro Electrodo
(mEq/l) 101 5 91 111 84,2 4,2 75,8 92,6
ion selectivo
Colesterol Colestat enzimático AA 241 18 205 277 97,7 7,4 83,0 112,4
(mg/dl) Creatinina cinética AA
1,37 0,21 0,96 1,78 5,69 0,71 4,27 7,11
líquida (compensada)
Creatinina enzim. AA líquida 0,50 0,07 0,37 0,63 4,96 0,62 3,72 6,20
Fosfatemia UV AA 4,23 0,38 3,47 4,99 7,74 0,58 6,58 8,90
(mg/dl)
80,9 10,1 60,7 101,1 25,8 3,3 19,3 32,3
Lactato
Lactate 35,6 3,2 29,2 42,0 10,8 1,0 8,9 12,7
(mg/dl)
132 17 99 165 63,1 7,9 47,3 78,9
(mg/dl) monofase AA
Litio Electrodo
0,62 0,09 0,45 0,79 1,74 0,16 1,43 2,05
Magnesio Mg-color AA 2,13 0,32 1,49 2,77 4,60 0,55 3,50 5,70
(mg/dl)
Magnesium CPZ 2,00 0,30 1,40 2,60 4,44 0,54 3,37 5,51
Potasio Electrodo
3,94 0,20 3,55 4,33 6,03 0,30 5,43 6,63
Proteínas Totales Proteínas Totales AA 6,41 0,39 5,64 7,18 4,20 0,25 3,70 4,70
(g/dl) Total Protein 6,31 0,38 5,55 7,07 4,00 0,24 3,52 4,48
870900000 / 16 p. 14/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Sodio Electrodo
147 8 132 162 127 7 114 140
(mg/dl)
TG Color GPO/PAP AA líquida 177 14 150 204 83,5 6,3 71,0 96,0
UIBC
(ug/dl)
(mg/dl) Urea UV cin.AA líquida 32,5 4,9 22,7 42,3 98,0 11,8 74,5 121,5
(-) No asignado
870900000 / 16 p. 15/24
KONELAB SERIES / WIENER LAB. CT SERIES - ENZIMAS
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Amilasa Amilasa 405 cinética AA 82,9 10,4 62,2 103,6 486 61 364 608
4,14 0,62 2,90 5,38 4,44 0,67 3,11 5,77
8,51 1,28 5,96 11,06 35,6 4,5 26,7 44,5
Fosfatasa alcalina
ALP 405 AA líquida 171 17 137 205 565 57 452 678
(U/l)
(U/l)
(U/l)
LDH-L 170 17 136 204 348 35 278 418
Lipasa
(U/l)
870900000 / 16 p. 16/24
BT 3000 PLUS / WIENER LAB. CB SERIES - METABOLITOS
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Albúmina
Albúmina AA 3,76 0,28 3,20 4,32 2,88 0,26 2,36 3,40
(g/dl)
Cloruro Electrodo
101 5 91 111 82,7 4,2 74,4 91,0
líquida (compensada) 1,39 0,21 0,97 1,81 5,62 0,71 4,21 7,03
Fosfatemia UV AA 4,01 0,36 3,29 4,73 7,44 0,56 6,32 8,56
(mg/dl)
89,7 11,2 67,3 112,1 25,1 3,2 18,8 31,4
Lactato
Lactate 37,1 3,4 30,4 43,8 10,8 1,0 8,9 12,7
(mg/dl)
119 15 89 149 59,7 7,5 44,8 74,6
(mg/dl) monofase AA
(mg/dl)
Magnesium CPZ 2,15 0,33 1,50 2,80 4,65 0,56 3,53 5,77
Potasio Electrodo
3,90 0,20 3,51 4,29 5,87 0,30 5,28 6,46
(g/dl)
Total Protein 6,35 0,38 5,59 7,11 4,02 0,24 3,54 4,50
Sodio Electrodo
143 7 129 157 125 7 112 138
870900000 / 16 p. 17/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
(mg/dl)
UIBC
(ug/dl)
(mg/dl)
(-) No asignado
870900000 / 16 p. 18/24
BT 3000 PLUS / WIENER LAB. CB SERIES - ENZIMAS
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
rasa (GPT/ALT) (U/l) GPT (ALT) UV AA líquida
32,6 4,1 24,4 40,8 101 13 76 126
3,82 0,58 2,67 4,97 4,27 0,64 2,99 5,55
8,65 1,30 6,05 11,25 37,2 4,7 27,9 46,5
Fosfatasa alcalina
ALP 405 AA líquida 177 18 142 212 601 60 481 721
(U/l)
(U/l)
deshidrogenasa
LDH-P UV AA líquida 335 42 251 419 709 89 532 886
(U/l)
LDH-L 171 17 137 205 349 35 279 419
Lipasa
(U/l)
870900000 / 16 p. 19/24
METROLAB 2300 PLUS / WIENER LAB. CM SERIES - METABOLITOS
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Albúmina
Albúmina AA 3,97 0,30 3,37 4,57 2,83 0,26 2,32 3,34
(g/dl)
1,24 0,19 0,87 1,61 5,43 0,68 4,07 6,79
Fosfatemia UV AA 4,37 0,40 3,58 5,16 7,80 0,59 6,63 8,97
(mg/dl)
82,3 10,3 61,7 102,9 25,8 3,3 19,3 32,3
Lactato
Lactate 36,8 3,3 30,2 43,4 11,8 1,1 9,7 13,9
(mg/dl)
119 15 89 149 62,1 7,8 46,6 77,6
(mg/dl) monofase AA
(mg/dl) Magnesium CPZ 2,10 0,32 1,47 2,73 4,70 0,57 3,57 5,83
(mg/dl)
UIBC
(ug/dl)
(mg/dl)
Urea UV cinética AA líquida 34,4 5,2 24,1 44,7 103 13 78 128
(-) No asignado
870900000 / 16 p. 20/24
METROLAB 2300 PLUS / WIENER LAB. CM SERIES - ENZIMAS
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
4,53 0,68 3,17 5,89 4,64 0,70 3,25 6,03
9,34 1,40 6,54 12,14 36,1 4,5 27,1 45,1
Fosfatasa alcalina
ALP 405 AA líquida 180 18 144 216 628 63 502 754
(U/l)
(U/l)
deshidrogenasa
(U/l)
LDH-L 177 18 142 212 365 37 292 438
Lipasa
(U/l)
870900000 / 16 p. 21/24
WIENER LAB. CMD 800 SERIES - METABOLITOS
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Acido úrico
Uricostat enz. AA líquida 5,01 0,45 4,11 5,91 8,87 0,80 7,27 10,47
(mg/dl)
Albúmina
Albúmina AA 4,01 0,30 3,41 4,61 2,86 0,26 2,35 3,37
(g/dl)
Bilirrubina directa
(mg/dl)
Bilirrubina total
(mg/dl) Bilirrubina Total AA líquida 0,78 0,16 0,47 1,09 4,42 0,89 2,65 6,19
Calcio
Ca-Color Arsenazo III AA 9,86 0,69 8,48 11,24 12,3 0,9 10,6 14,0
(mg/dl)
Cloruro Electrodo
102 5 92 112 82,4 4,1 74,2 90,6
Colesterol
Colestat enz. AA líquida 251 19 213 289 101 8 86 116
(mg/dl)
Creatinina Creatinina cinética AA
1,37 0,21 0,96 1,78 5,73 0,72 4,30 7,16
(mg/dl) líquida (compensada)
Fosfatemia UV AA 4,29 0,39 3,52 5,06 7,65 0,58 6,50 8,80
(mg/dl)
Glucosa Glicemia enz. AA líquida 88,0 6,6 74,8 101,2 291 22 247 335
(mg/dl)
Glucose HK 82,5 6,2 70,1 94,9 283 21 241 325
80,6 10,1 60,4 100,8 23,6 3,0 17,7 29,5
Hierro
Fer-color AA líquida 244 30 185 303 57,0 8,6 39,9 74,1
(ug/dl)
Lactato
Lactate 37,4 3,4 30,7 44,1 11,2 1,0 9,2 13,2
(mg/dl)
122 16 91 153 57,0 7,2 42,7 71,3
(mg/dl) monofase AA
Magnesio
Magnesium CPZ 2,13 0,32 1,49 2,77 4,70 0,57 3,57 5,83
(mg/dl)
Potasio Electrodo
3,96 0,20 3,56 4,36 6,09 0,31 5,48 6,70
Proteínas Totales
(g/dl)
Sodio Electrodo
145 8 130 160 127 7 114 140
Triglicéridos TG Color GPO/PAP AA
183 14 156 210 86,0 6,5 73,1 98,9
(mg/dl) líquida
UIBC
(ug/dl)
Urea Urea UV cinética AA
33,9 5,1 23,7 44,1 99,4 12,0 75,5 123,3
(mg/dl) líquida
(-) No asignado
870900000 / 16 p. 22/24
WIENER LAB. CMD 800 SERIES - ENZIMAS
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Alanina aminotrans-
ferasa (GPT/ALT) (U/l) GPT (ALT) UV AA líquida 34,3 4,3 25,7 42,9 105 13 79 131
Amilasa
Amilasa 405 AA líquida 86,0 10,8 64,5 107,5 497 62 373 621
(U/l)
Aspartato aminotrans-
ferasa (GOT/AST) (U/l) GOT (AST) UV AA líquida 42,2 5,3 31,6 52,8 203 26 152 254
Colinesterasa
Cholinesterase 7580 758 6064 9096 5193 520 4154 6232
(U/l)
Creatina kinasa
CK-NAC UV AA líquida 144 18 108 180 424 53 318 530
(U/l)
3,67 0,55 2,57 4,77 4,17 0,63 2,92 5,42
8,43 1,27 5,90 10,96 38,7 4,9 29,0 48,4
Fosfatasa alcalina
(U/l) ALP 405 AA líquida 169 17 135 203 555 56 444 666
g-glutamil transferasa
(U/l) g-G-test cinética AA líquida 34,3 4,3 25,7 42,9 135 14 108 162
Lactato LDH-P UV AA líquida 335 42 251 419 733 92 550 916

deshidrogenasa
(U/l) LDH-L 176 18 141 211 359 36 287 431
Lipasa
(U/l)
870900000 / 16 p. 23/24
WIENER LAB. IC SERIES - IONES
NIVEL 1 NIVEL 2
ION VALOR RANGO VALOR RANGO
1 D.S. 1 D.S.
Potasio
3,90 0,20 3,51 4,29 5,99 0,30 5,39 6,59
(mEq/l)
Sodio
144 7 130 158 125 7 112 138
(mEq/l)
Cloruro
92,8 4,7 83,5 102,1 78,1 3,9 70,3 85,9
(mEq/l)
Calcio iónico - Can
1,04 0,10 0,85 1,23 1,21 0,14 0,94 1,48
(mmol/l)
Calcio iónico - Cai
0,90 0,09 0,72 1,08 1,12 0,13 0,87 1,37
(mmol/l)
Litio
0,56 0,08 0,41 0,71 1,79 0,16 1,47 2,11
(mmol/l)

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870900000 / 16 p. 24/24 UR140425
Standatrol S-E
Lote: 1407142240 (Exp.: 2016/07)
C 2 niveles
Nivel 1: 142240 (Exp.: 2016/07)
Nivel 2: 142240 (Exp.: 2016/07)



PRESENTACION
870900000 / 17 p. 1/24
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo
870900000 / 17 p. 2/24
Standatrol S-E
2 niveles
Lote: 1407142240 (Venc.: 2016/07)
Nível 1: 142240 (Venc.: 2016/07)
Nível 2: 142240 (Venc.: 2016/07)

correspondentes.
PROCEDIMENTO
- 6 frascos x 5 ml (Cód. 1937553).
PRECAUÇÕES
870900000 / 17 p. 3/24
Símbolos
C
Europeia 98/79 CE para dispositivos médicos de M Elaborado por:
P
Xn

Nocivo
Europeia


Xi
Irritante
H Data de validade
 Não congelar
Calibr. Calibrador
b Controle
F Risco biológico
Volume após a reconstituição

b Controle Positivo
870900000 / 17 p. 4/24
INDICE
Página
Técnica manual
Metabolitos................................................................................................................... 6-7
Enzimas....................................................................................................................... 8
Targa BT 3000
Metabolitos................................................................................................................... 9-10
Enzimas....................................................................................................................... 11
Selectra 1 / 2 / E
Metabolitos................................................................................................................... 12
Enzimas....................................................................................................................... 13

Metabolitos................................................................................................................... 14-15
Enzimas....................................................................................................................... 16

Metabolitos................................................................................................................... 17-18
Enzimas....................................................................................................................... 19

Metabolitos................................................................................................................... 20
Emzimas...................................................................................................................... 21

Metabolitos................................................................................................................... 22
Emzimas...................................................................................................................... 23

Iones............................................................................................................................ 24
870900000 / 17 p. 5/24
NIVEL 1 NIVEL 2
(g/dl) Albúmina AA 4,4 3,7 5,1 2,9 2,4 3,4
Calcio Ca-Color 8,6 7,4 9,8 12 10 14
(mg/dl) Ca-Color AA 9,0 7,7 10,3 12 10 14
Colestat enzimático AA líquida 2,50 2,13 2,88 1,05 0,89 1,21
(mg/l) Creatinina directa
Creatinina 23 17 29 67 54 80
Hierro Fer-color 197 150 244 51 36 66
(ug/dl) Fer-color AA 195 148 242 49 34 64
Magnesio
Mg-color AA 2,3 1,6 3,0 4,4 3,3 5,5
(mg/dl)
UIBC
(ug/dl)
(-) No asignado
870900000 / 17 p. 6/24
NIVEL 1 NIVEL 2
Urea Urea color 2R 0,43 0,30 0,56 1,03 0,78 1,28
(g/l) Uremia 0,27 0,19 0,35 0,91 0,69 1,13
870900000 / 17 p. 7/24
NIVEL 1 NIVEL 2
(U/l)
(U/l)
(U/l) CK NAC UV AA 130 98 163 421 316 526
(U/l) ALP 405 AA líquida 212 148 276 680 510 850
(U/l)) LDH-P UV AA 393 295 491 894 671 1118
LDH-P UV AA líquida 408 306 510 948 711 1185
870900000 / 17 p. 8/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Albúmina
Albúmina AA 3,76 0,43 2,90 4,62 2,88 0,26 2,36 3,40
(g/dl)
Cloruro Electrodo
101 8 86 116 82,7 4,2 74,4 91,0
Fosfatemia UV AA 4,21 0,53 3,16 5,26 7,44 0,56 6,32 8,56
(mg/dl)
89,7 13,5 62,8 116,6 27,6 4,2 19,3 35,9
Lactato
Lactate 37,1 4,7 27,8 46,4 11,3 1,4 8,5 14,1
(mg/dl)
129 20 90 168 62,1 9,3 43,5 80,7
(mg/dl) monofase AA
Magnesio
Mg-color AA 2,00 0,30 1,40 2,60 4,37 0,53 3,32 5,42
(mg/dl)
Potasio Electrodo
3,90 0,30 3,31 4,49 5,87 0,44 4,99 6,75
Proteínas Totales
(g/dl)
Sodio Electrodo
143 11 122 164 125 10 106 144
UIBC
(ug/dl)
870900000 / 17 p. 9/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
(mg/dl)
(-) No asignado
870900000 / 17 p. 10/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Fosfatasa alcalina
ALP 405 AA líquida 198 25 148 248 649 81 487 811
(U/l)
(U/l)
deshidrogenasa
LDH-L 171 22 128 214 349 44 262 436
Lipasa
(U/l)
870900000 / 17 p. 11/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Albúmina
Albúmina AA 4,09 0,31 3,48 4,70 2,91 0,26 2,39 3,43
(g/dl)
Fosfatemia UV AA 4,43 0,40 3,63 5,23 8,21 0,62 6,98 9,44
(mg/dl)
76,9 9,6 57,7 96,1 26,3 3,3 19,7 32,9
Lactato
Lactate 35,8 3,2 29,4 42,2 10,6 1,0 8,7 12,5
(mg/dl)
121 15 91 151 58,3 7,3 43,7 72,9
(mg/dl) monofase AA
Magnesio
Mg-color AA 2,13 0,32 1,49 2,77 4,17 0,50 3,17 5,17
(mg/dl)
Proteínas Totales
(g/dl)
UIBC

(-) No asignado
870900000 / 17 p. 12/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
4,21 0,63 2,95 5,47 4,49 0,68 3,14 5,84
Fosfatasa alcalina
(U/l) ALP 405 AA líquida 181 18 145 217 587 59 470 704
(U/l)
(U/l)
LDH-L 169 17 135 203 354 36 283 425
Lipasa
(U/l)
870900000 / 17 p. 13/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Albúmina
Albúmina AA 3,90 0,30 3,31 4,49 2,74 0,25 2,25 3,23
(g/dl)
0,87 0,10 0,68 1,06 1,17 0,13 0,91 1,43
Cloruro Electrodo
(mEq/l) 101 5 91 111 84,2 4,2 75,8 92,6
ion selectivo
1,37 0,21 0,96 1,78 5,69 0,71 4,27 7,11
Fosfatemia UV AA 4,23 0,38 3,47 4,99 7,74 0,58 6,58 8,90
(mg/dl)
80,9 10,1 60,7 101,1 25,8 3,3 19,3 32,3
Lactato
Lactate 35,6 3,2 29,2 42,0 10,8 1,0 8,9 12,7
(mg/dl)
132 17 99 165 63,1 7,9 47,3 78,9
(mg/dl) monofase AA
Litio Electrodo
0,62 0,09 0,45 0,79 1,74 0,16 1,43 2,05
(mg/dl)
Magnesium CPZ 2,00 0,30 1,40 2,60 4,44 0,54 3,37 5,51
Potasio Electrodo
3,94 0,20 3,55 4,33 6,03 0,30 5,43 6,63
870900000 / 17 p. 14/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Sodio Electrodo
147 8 132 162 127 7 114 140
(mg/dl)
UIBC
(ug/dl)
(-) No asignado
870900000 / 17 p. 15/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
4,14 0,62 2,90 5,38 4,44 0,67 3,11 5,77
8,51 1,28 5,96 11,06 35,6 4,5 26,7 44,5
Fosfatasa alcalina
ALP 405 AA líquida 171 17 137 205 565 57 452 678
(U/l)
(U/l)
(U/l)
LDH-L 170 17 136 204 348 35 278 418
Lipasa
(U/l)
870900000 / 17 p. 16/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Albúmina
Albúmina AA 3,76 0,28 3,20 4,32 2,88 0,26 2,36 3,40
(g/dl)
Cloruro Electrodo
101 5 91 111 82,7 4,2 74,4 91,0
Fosfatemia UV AA 4,01 0,36 3,29 4,73 7,44 0,56 6,32 8,56
(mg/dl)
89,7 11,2 67,3 112,1 25,1 3,2 18,8 31,4
Lactato
Lactate 37,1 3,4 30,4 43,8 10,8 1,0 8,9 12,7
(mg/dl)
119 15 89 149 59,7 7,5 44,8 74,6
(mg/dl) monofase AA
(mg/dl)
Magnesium CPZ 2,15 0,33 1,50 2,80 4,65 0,56 3,53 5,77
Potasio Electrodo
3,90 0,20 3,51 4,29 5,87 0,30 5,28 6,46
(g/dl)
Total Protein 6,35 0,38 5,59 7,11 4,02 0,24 3,54 4,50
Sodio Electrodo
143 7 129 157 125 7 112 138
870900000 / 17 p. 17/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
(mg/dl)
UIBC
(ug/dl)
(mg/dl)
(-) No asignado
870900000 / 17 p. 18/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
32,6 4,1 24,4 40,8 101 13 76 126
3,82 0,58 2,67 4,97 4,27 0,64 2,99 5,55
8,65 1,30 6,05 11,25 37,2 4,7 27,9 46,5
Fosfatasa alcalina
ALP 405 AA líquida 177 18 142 212 601 60 481 721
(U/l)
(U/l)
deshidrogenasa
(U/l)
LDH-L 171 17 137 205 349 35 279 419
Lipasa
(U/l)
870900000 / 17 p. 19/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Albúmina
Albúmina AA 3,97 0,30 3,37 4,57 2,83 0,26 2,32 3,34
(g/dl)
1,24 0,19 0,87 1,61 5,43 0,68 4,07 6,79
Fosfatemia UV AA 4,37 0,40 3,58 5,16 7,80 0,59 6,63 8,97
(mg/dl)
82,3 10,3 61,7 102,9 25,8 3,3 19,3 32,3
Lactato
Lactate 36,8 3,3 30,2 43,4 11,8 1,1 9,7 13,9
(mg/dl)
119 15 89 149 62,1 7,8 46,6 77,6
(mg/dl) monofase AA
(mg/dl)
UIBC
(ug/dl)
(mg/dl)
(-) No asignado
870900000 / 17 p. 20/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
4,53 0,68 3,17 5,89 4,64 0,70 3,25 6,03
9,34 1,40 6,54 12,14 36,1 4,5 27,1 45,1
Fosfatasa alcalina
ALP 405 AA líquida 180 18 144 216 628 63 502 754
(U/l)
(U/l)
deshidrogenasa
(U/l)
LDH-L 177 18 142 212 365 37 292 438
Lipasa
(U/l)
870900000 / 17 p. 21/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Acido úrico
(mg/dl)
Albúmina
Albúmina AA 4,01 0,30 3,41 4,61 2,86 0,26 2,35 3,37
(g/dl)
Bilirrubina directa
(mg/dl)
Bilirrubina total
Calcio
(mg/dl)
Cloruro Electrodo
102 5 92 112 82,4 4,1 74,2 90,6
Colesterol
(mg/dl)
1,37 0,21 0,96 1,78 5,73 0,72 4,30 7,16
Fosfatemia UV AA 4,29 0,39 3,52 5,06 7,65 0,58 6,50 8,80
(mg/dl)
(mg/dl)
Glucose HK 82,5 6,2 70,1 94,9 283 21 241 325
80,6 10,1 60,4 100,8 23,6 3,0 17,7 29,5
Hierro
(ug/dl)
Lactato
Lactate 37,4 3,4 30,7 44,1 11,2 1,0 9,2 13,2
(mg/dl)
122 16 91 153 57,0 7,2 42,7 71,3
(mg/dl) monofase AA
Magnesio
Magnesium CPZ 2,13 0,32 1,49 2,77 4,70 0,57 3,57 5,83
(mg/dl)
Potasio Electrodo
3,96 0,20 3,56 4,36 6,09 0,31 5,48 6,70
Proteínas Totales
(g/dl)
Sodio Electrodo
145 8 130 160 127 7 114 140
183 14 156 210 86,0 6,5 73,1 98,9
(mg/dl) líquida
UIBC
(ug/dl)
33,9 5,1 23,7 44,1 99,4 12,0 75,5 123,3
(mg/dl) líquida
(-) No asignado
870900000 / 17 p. 22/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Alanina aminotrans-
Amilasa
(U/l)
Colinesterasa
Cholinesterase 7580 758 6064 9096 5193 520 4154 6232
(U/l)
Creatina kinasa
(U/l)
3,67 0,55 2,57 4,77 4,17 0,63 2,92 5,42
8,43 1,27 5,90 10,96 38,7 4,9 29,0 48,4
Fosfatasa alcalina
(U/l) ALP 405 AA líquida 169 17 135 203 555 56 444 666

deshidrogenasa
(U/l) LDH-L 176 18 141 211 359 36 287 431
Lipasa
(U/l)
870900000 / 17 p. 23/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Potasio
3,90 0,20 3,51 4,29 5,99 0,30 5,39 6,59
(mEq/l)
Sodio
144 7 130 158 125 7 112 138
(mEq/l)
Cloruro
92,8 4,7 83,5 102,1 78,1 3,9 70,3 85,9
(mEq/l)
1,04 0,10 0,85 1,23 1,21 0,14 0,94 1,48
(mmol/l)
0,90 0,09 0,72 1,08 1,12 0,13 0,87 1,37
(mmol/l)
Litio
0,56 0,08 0,41 0,71 1,79 0,16 1,47 2,11
(mmol/l)

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870900000 / 17 p. 24/24 UR140711
Standatrol S-E
Lote: 1410150720 (Exp.: 2016/10)
C 2 niveles
Nivel 1: 150720 (Exp.: 2016/10)
Nivel 2: 150720 (Exp.: 2016/10)



PRESENTACION
870900000 / 18 p. 1/24
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo
870900000 / 18 p. 2/24
Standatrol S-E
2 niveles
Lote: 1410150720 (Venc.: 2016/10)
Nível 1: 150720 (Venc.: 2016/10)
Nível 2: 150720 (Venc.: 2016/10)

correspondentes.
PROCEDIMENTO
- 6 frascos x 5 ml (Cód. 1937553).
PRECAUÇÕES
870900000 / 18 p. 3/24
Símbolos
C
P
Xn

Nocivo
Europeia


Xi
Irritante
H Data de validade
 Não congelar
Calibr. Calibrador
b Controle
F Risco biológico

b Controle Positivo
870900000 / 18 p. 4/24
INDICE
Página
Técnica manual
Metabolitos................................................................................................................... 6-7
Enzimas....................................................................................................................... 8
Targa BT 3000
Metabolitos................................................................................................................... 9-10
Enzimas....................................................................................................................... 11
Selectra 1 / 2 / E
Metabolitos................................................................................................................... 12
Enzimas....................................................................................................................... 13

Metabolitos................................................................................................................... 14-15
Enzimas....................................................................................................................... 16

Metabolitos................................................................................................................... 17-18
Enzimas....................................................................................................................... 19

Metabolitos................................................................................................................... 20
Emzimas...................................................................................................................... 21

Metabolitos................................................................................................................... 22
Emzimas...................................................................................................................... 23

Iones............................................................................................................................ 24
870900000 / 18 p. 5/24
NIVEL 1 NIVEL 2
(g/dl) Albúmina AA 4,4 3,7 5,1 2,9 2,4 3,4
Calcio Ca-Color 8,6 7,4 9,8 12 10 14
(mg/dl) Ca-Color AA 9,0 7,7 10,3 12 10 14
Creatinina 23 17 29 67 54 80
Hierro Fer-color 197 150 244 51 36 66
(ug/dl) Fer-color AA 195 148 242 49 34 64
Magnesio
Mg-color AA 2,3 1,6 3,0 4,4 3,3 5,5
(mg/dl)
UIBC
(ug/dl)
(-) No asignado
870900000 / 18 p. 6/24
NIVEL 1 NIVEL 2
Urea Urea color 2R 0,43 0,30 0,56 1,03 0,78 1,28
(g/l) Uremia 0,27 0,19 0,35 0,91 0,69 1,13
870900000 / 18 p. 7/24
NIVEL 1 NIVEL 2
(U/l)
(U/l)
(U/l) CK NAC UV AA 130 98 163 421 316 526
(U/l) ALP 405 AA líquida 212 148 276 680 510 850
(U/l)) LDH-P UV AA 393 295 491 894 671 1118
870900000 / 18 p. 8/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Albúmina
Albúmina AA 3,76 0,43 2,90 4,62 2,88 0,26 2,36 3,40
(g/dl)
Cloruro Electrodo
101 8 86 116 82,7 4,2 74,4 91,0
Fosfatemia UV AA 4,21 0,53 3,16 5,26 7,44 0,56 6,32 8,56
(mg/dl)
89,7 13,5 62,8 116,6 27,6 4,2 19,3 35,9
Lactato
Lactate 37,1 4,7 27,8 46,4 11,3 1,4 8,5 14,1
(mg/dl)
129 20 90 168 62,1 9,3 43,5 80,7
(mg/dl) monofase AA
Magnesio
Mg-color AA 2,00 0,30 1,40 2,60 4,37 0,53 3,32 5,42
(mg/dl)
Potasio Electrodo
3,90 0,30 3,31 4,49 5,87 0,44 4,99 6,75
Proteínas Totales
(g/dl)
Sodio Electrodo
143 11 122 164 125 10 106 144
UIBC
(ug/dl)
870900000 / 18 p. 9/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
(mg/dl)
(-) No asignado
870900000 / 18 p. 10/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Fosfatasa alcalina
ALP 405 AA líquida 198 25 148 248 649 81 487 811
(U/l)
(U/l)
deshidrogenasa
LDH-L 171 22 128 214 349 44 262 436
Lipasa
(U/l)
870900000 / 18 p. 11/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Albúmina
Albúmina AA 4,09 0,31 3,48 4,70 2,91 0,26 2,39 3,43
(g/dl)
Fosfatemia UV AA 4,43 0,40 3,63 5,23 8,21 0,62 6,98 9,44
(mg/dl)
76,9 9,6 57,7 96,1 26,3 3,3 19,7 32,9
Lactato
Lactate 35,8 3,2 29,4 42,2 10,6 1,0 8,7 12,5
(mg/dl)
121 15 91 151 58,3 7,3 43,7 72,9
(mg/dl) monofase AA
Magnesio
Mg-color AA 2,13 0,32 1,49 2,77 4,17 0,50 3,17 5,17
(mg/dl)
Proteínas Totales
(g/dl)
UIBC

(-) No asignado
870900000 / 18 p. 12/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
4,21 0,63 2,95 5,47 4,49 0,68 3,14 5,84
Fosfatasa alcalina
(U/l) ALP 405 AA líquida 181 18 145 217 587 59 470 704
(U/l)
(U/l)
LDH-L 169 17 135 203 354 36 283 425
Lipasa
(U/l)
870900000 / 18 p. 13/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Albúmina
Albúmina AA 3,90 0,30 3,31 4,49 2,74 0,25 2,25 3,23
(g/dl)
0,87 0,10 0,68 1,06 1,17 0,13 0,91 1,43
Cloruro Electrodo
(mEq/l) 101 5 91 111 84,2 4,2 75,8 92,6
ion selectivo
1,37 0,21 0,96 1,78 5,69 0,71 4,27 7,11
Fosfatemia UV AA 4,23 0,38 3,47 4,99 7,74 0,58 6,58 8,90
(mg/dl)
80,9 10,1 60,7 101,1 25,8 3,3 19,3 32,3
Lactato
Lactate 35,6 3,2 29,2 42,0 10,8 1,0 8,9 12,7
(mg/dl)
132 17 99 165 63,1 7,9 47,3 78,9
(mg/dl) monofase AA
Litio Electrodo
0,62 0,09 0,45 0,79 1,74 0,16 1,43 2,05
(mg/dl)
Magnesium CPZ 2,00 0,30 1,40 2,60 4,44 0,54 3,37 5,51
Potasio Electrodo
3,94 0,20 3,55 4,33 6,03 0,30 5,43 6,63
870900000 / 18 p. 14/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Sodio Electrodo
147 8 132 162 127 7 114 140
(mg/dl)
UIBC
(ug/dl)
(-) No asignado
870900000 / 18 p. 15/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
4,14 0,62 2,90 5,38 4,44 0,67 3,11 5,77
8,51 1,28 5,96 11,06 35,6 4,5 26,7 44,5
Fosfatasa alcalina
ALP 405 AA líquida 171 17 137 205 565 57 452 678
(U/l)
(U/l)
(U/l)
LDH-L 170 17 136 204 348 35 278 418
Lipasa
(U/l)
870900000 / 18 p. 16/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Albúmina
Albúmina AA 3,76 0,28 3,20 4,32 2,88 0,26 2,36 3,40
(g/dl)
Cloruro Electrodo
101 5 91 111 82,7 4,2 74,4 91,0
Fosfatemia UV AA 4,01 0,36 3,29 4,73 7,44 0,56 6,32 8,56
(mg/dl)
89,7 11,2 67,3 112,1 25,1 3,2 18,8 31,4
Lactato
Lactate 37,1 3,4 30,4 43,8 10,8 1,0 8,9 12,7
(mg/dl)
119 15 89 149 59,7 7,5 44,8 74,6
(mg/dl) monofase AA
(mg/dl)
Magnesium CPZ 2,15 0,33 1,50 2,80 4,65 0,56 3,53 5,77
Potasio Electrodo
3,90 0,20 3,51 4,29 5,87 0,30 5,28 6,46
(g/dl)
Total Protein 6,35 0,38 5,59 7,11 4,02 0,24 3,54 4,50
Sodio Electrodo
143 7 129 157 125 7 112 138
870900000 / 18 p. 17/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
(mg/dl)
UIBC
(ug/dl)
(mg/dl)
(-) No asignado
870900000 / 18 p. 18/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
32,6 4,1 24,4 40,8 101 13 76 126
3,82 0,58 2,67 4,97 4,27 0,64 2,99 5,55
8,65 1,30 6,05 11,25 37,2 4,7 27,9 46,5
Fosfatasa alcalina
ALP 405 AA líquida 177 18 142 212 601 60 481 721
(U/l)
(U/l)
deshidrogenasa
(U/l)
LDH-L 171 17 137 205 349 35 279 419
Lipasa
(U/l)
870900000 / 18 p. 19/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Albúmina
Albúmina AA 3,97 0,30 3,37 4,57 2,83 0,26 2,32 3,34
(g/dl)
1,24 0,19 0,87 1,61 5,43 0,68 4,07 6,79
Fosfatemia UV AA 4,37 0,40 3,58 5,16 7,80 0,59 6,63 8,97
(mg/dl)
82,3 10,3 61,7 102,9 25,8 3,3 19,3 32,3
Lactato
Lactate 36,8 3,3 30,2 43,4 11,8 1,1 9,7 13,9
(mg/dl)
119 15 89 149 62,1 7,8 46,6 77,6
(mg/dl) monofase AA
(mg/dl)
UIBC
(ug/dl)
(mg/dl)
(-) No asignado
870900000 / 18 p. 20/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
4,53 0,68 3,17 5,89 4,64 0,70 3,25 6,03
9,34 1,40 6,54 12,14 36,1 4,5 27,1 45,1
Fosfatasa alcalina
ALP 405 AA líquida 180 18 144 216 628 63 502 754
(U/l)
(U/l)
deshidrogenasa
(U/l)
LDH-L 177 18 142 212 365 37 292 438
Lipasa
(U/l)
870900000 / 18 p. 21/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Acido úrico
(mg/dl)
Albúmina
Albúmina AA 4,01 0,30 3,41 4,61 2,86 0,26 2,35 3,37
(g/dl)
Bilirrubina directa
(mg/dl)
Bilirrubina total
Calcio
(mg/dl)
Cloruro Electrodo
102 5 92 112 82,4 4,1 74,2 90,6
Colesterol
(mg/dl)
1,37 0,21 0,96 1,78 5,73 0,72 4,30 7,16
Fosfatemia UV AA 4,29 0,39 3,52 5,06 7,65 0,58 6,50 8,80
(mg/dl)
(mg/dl)
Glucose HK 82,5 6,2 70,1 94,9 283 21 241 325
80,6 10,1 60,4 100,8 23,6 3,0 17,7 29,5
Hierro
(ug/dl)
Lactato
Lactate 37,4 3,4 30,7 44,1 11,2 1,0 9,2 13,2
(mg/dl)
122 16 91 153 57,0 7,2 42,7 71,3
(mg/dl) monofase AA
Magnesio
Magnesium CPZ 2,13 0,32 1,49 2,77 4,70 0,57 3,57 5,83
(mg/dl)
Potasio Electrodo
3,96 0,20 3,56 4,36 6,09 0,31 5,48 6,70
Proteínas Totales
(g/dl)
Sodio Electrodo
145 8 130 160 127 7 114 140
183 14 156 210 86,0 6,5 73,1 98,9
(mg/dl) líquida
UIBC
(ug/dl)
33,9 5,1 23,7 44,1 99,4 12,0 75,5 123,3
(mg/dl) líquida
(-) No asignado
870900000 / 18 p. 22/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Alanina aminotrans-
Amilasa
(U/l)
Colinesterasa
Cholinesterase 7580 758 6064 9096 5193 520 4154 6232
(U/l)
Creatina kinasa
(U/l)
3,67 0,55 2,57 4,77 4,17 0,63 2,92 5,42
8,43 1,27 5,90 10,96 38,7 4,9 29,0 48,4
Fosfatasa alcalina
(U/l) ALP 405 AA líquida 169 17 135 203 555 56 444 666

deshidrogenasa
(U/l) LDH-L 176 18 141 211 359 36 287 431
Lipasa
(U/l)
870900000 / 18 p. 23/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Potasio
3,90 0,20 3,51 4,29 5,99 0,30 5,39 6,59
(mEq/l)
Sodio
144 7 130 158 125 7 112 138
(mEq/l)
Cloruro
92,8 4,7 83,5 102,1 78,1 3,9 70,3 85,9
(mEq/l)
1,04 0,10 0,85 1,23 1,21 0,14 0,94 1,48
(mmol/l)
0,90 0,09 0,72 1,08 1,12 0,13 0,87 1,37
(mmol/l)
Litio
0,56 0,08 0,41 0,71 1,79 0,16 1,47 2,11
(mmol/l)

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870900000 / 18 p. 24/24 UR141010
Standatrol S-E
Lote: 1412154880 (Exp.: 2016/10)
C 2 niveles
Nivel 1: 154880 (Exp.: 2016/10)
Nivel 2: 154880 (Exp.: 2016/10)



PRESENTACION
870900000 / 19 p. 1/24
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo
870900000 / 19 p. 2/24
Standatrol S-E
2 niveles
Lote: 1412154880 (Venc.: 2016/10)
Nível 1: 154880 (Venc.: 2016/10)
Nível 2: 154880 (Venc.: 2016/10)

correspondentes.
PROCEDIMENTO
- 6 frascos x 5 ml (Cód. 1937553).
PRECAUÇÕES
870900000 / 19 p. 3/24
Símbolos
C
P
Xn

Nocivo
Europeia


Xi
Irritante
H Data de validade
 Não congelar
Calibr. Calibrador
b Controle
F Risco biológico

b Controle Positivo
870900000 / 19 p. 4/24
INDICE
Página
Técnica manual
Metabolitos................................................................................................................... 6-7
Enzimas....................................................................................................................... 8
Targa BT 3000
Metabolitos................................................................................................................... 9-10
Enzimas....................................................................................................................... 11
Selectra 1 / 2 / E
Metabolitos................................................................................................................... 12
Enzimas....................................................................................................................... 13

Metabolitos................................................................................................................... 14-15
Enzimas....................................................................................................................... 16

Metabolitos................................................................................................................... 17-18
Enzimas....................................................................................................................... 19

Metabolitos................................................................................................................... 20
Emzimas...................................................................................................................... 21

Metabolitos................................................................................................................... 22
Emzimas...................................................................................................................... 23

Iones............................................................................................................................ 24
870900000 / 19 p. 5/24
NIVEL 1 NIVEL 2
(g/dl) Albúmina AA 4,4 3,7 5,1 2,9 2,4 3,4
Calcio Ca-Color 8,6 7,4 9,8 12 10 14
(mg/dl) Ca-Color AA 9,0 7,7 10,3 12 10 14
Creatinina 23 17 29 67 54 80
Hierro Fer-color 197 150 244 51 36 66
(ug/dl) Fer-color AA 195 148 242 49 34 64
Magnesio
Mg-color AA 2,3 1,6 3,0 4,4 3,3 5,5
(mg/dl)
UIBC
(ug/dl)
(-) No asignado
870900000 / 19 p. 6/24
NIVEL 1 NIVEL 2
Urea Urea color 2R 0,43 0,30 0,56 1,03 0,78 1,28
(g/l) Uremia 0,27 0,19 0,35 0,91 0,69 1,13
870900000 / 19 p. 7/24
NIVEL 1 NIVEL 2
(U/l)
(U/l)
(U/l) CK NAC UV AA 130 98 163 421 316 526
(U/l) ALP 405 AA líquida 212 148 276 680 510 850
(U/l)) LDH-P UV AA 393 295 491 894 671 1118
870900000 / 19 p. 8/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Albúmina
Albúmina AA 3,76 0,43 2,90 4,62 2,88 0,26 2,36 3,40
(g/dl)
Cloruro Electrodo
101 8 86 116 82,7 4,2 74,4 91,0
Fosfatemia UV AA 4,21 0,53 3,16 5,26 7,44 0,56 6,32 8,56
(mg/dl)
89,7 13,5 62,8 116,6 27,6 4,2 19,3 35,9
Lactato
Lactate 37,1 4,7 27,8 46,4 11,3 1,4 8,5 14,1
(mg/dl)
129 20 90 168 62,1 9,3 43,5 80,7
(mg/dl) monofase AA
Magnesio
Mg-color AA 2,00 0,30 1,40 2,60 4,37 0,53 3,32 5,42
(mg/dl)
Potasio Electrodo
3,90 0,30 3,31 4,49 5,87 0,44 4,99 6,75
Proteínas Totales
(g/dl)
Sodio Electrodo
143 11 122 164 125 10 106 144
UIBC
(ug/dl)
870900000 / 19 p. 9/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
(mg/dl)
(-) No asignado
870900000 / 19 p. 10/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Fosfatasa alcalina
ALP 405 AA líquida 198 25 148 248 649 81 487 811
(U/l)
(U/l)
deshidrogenasa
LDH-L 171 22 128 214 349 44 262 436
Lipasa
(U/l)
870900000 / 19 p. 11/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Albúmina
Albúmina AA 4,09 0,31 3,48 4,70 2,91 0,26 2,39 3,43
(g/dl)
Fosfatemia UV AA 4,43 0,40 3,63 5,23 8,21 0,62 6,98 9,44
(mg/dl)
76,9 9,6 57,7 96,1 26,3 3,3 19,7 32,9
Lactato
Lactate 35,8 3,2 29,4 42,2 10,6 1,0 8,7 12,5
(mg/dl)
121 15 91 151 58,3 7,3 43,7 72,9
(mg/dl) monofase AA
Magnesio
Mg-color AA 2,13 0,32 1,49 2,77 4,17 0,50 3,17 5,17
(mg/dl)
Proteínas Totales
(g/dl)
UIBC

(-) No asignado
870900000 / 19 p. 12/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
4,21 0,63 2,95 5,47 4,49 0,68 3,14 5,84
Fosfatasa alcalina
(U/l) ALP 405 AA líquida 181 18 145 217 587 59 470 704
(U/l)
(U/l)
LDH-L 169 17 135 203 354 36 283 425
Lipasa
(U/l)
870900000 / 19 p. 13/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Albúmina
Albúmina AA 3,90 0,30 3,31 4,49 2,74 0,25 2,25 3,23
(g/dl)
0,87 0,10 0,68 1,06 1,17 0,13 0,91 1,43
Cloruro Electrodo
(mEq/l) 101 5 91 111 84,2 4,2 75,8 92,6
ion selectivo
1,37 0,21 0,96 1,78 5,69 0,71 4,27 7,11
Fosfatemia UV AA 4,23 0,38 3,47 4,99 7,74 0,58 6,58 8,90
(mg/dl)
80,9 10,1 60,7 101,1 25,8 3,3 19,3 32,3
Lactato
Lactate 35,6 3,2 29,2 42,0 10,8 1,0 8,9 12,7
(mg/dl)
132 17 99 165 63,1 7,9 47,3 78,9
(mg/dl) monofase AA
Litio Electrodo
0,62 0,09 0,45 0,79 1,74 0,16 1,43 2,05
(mg/dl)
Magnesium CPZ 2,00 0,30 1,40 2,60 4,44 0,54 3,37 5,51
Potasio Electrodo
3,94 0,20 3,55 4,33 6,03 0,30 5,43 6,63
870900000 / 19 p. 14/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Sodio Electrodo
147 8 132 162 127 7 114 140
(mg/dl)
UIBC
(ug/dl)
(-) No asignado
870900000 / 19 p. 15/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
4,14 0,62 2,90 5,38 4,44 0,67 3,11 5,77
8,51 1,28 5,96 11,06 35,6 4,5 26,7 44,5
Fosfatasa alcalina
ALP 405 AA líquida 171 17 137 205 565 57 452 678
(U/l)
(U/l)
(U/l)
LDH-L 170 17 136 204 348 35 278 418
Lipasa
(U/l)
870900000 / 19 p. 16/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Albúmina
Albúmina AA 3,76 0,28 3,20 4,32 2,88 0,26 2,36 3,40
(g/dl)
Cloruro Electrodo
101 5 91 111 82,7 4,2 74,4 91,0
Fosfatemia UV AA 4,01 0,36 3,29 4,73 7,44 0,56 6,32 8,56
(mg/dl)
89,7 11,2 67,3 112,1 25,1 3,2 18,8 31,4
Lactato
Lactate 37,1 3,4 30,4 43,8 10,8 1,0 8,9 12,7
(mg/dl)
119 15 89 149 59,7 7,5 44,8 74,6
(mg/dl) monofase AA
(mg/dl)
Magnesium CPZ 2,15 0,33 1,50 2,80 4,65 0,56 3,53 5,77
Potasio Electrodo
3,90 0,20 3,51 4,29 5,87 0,30 5,28 6,46
(g/dl)
Total Protein 6,35 0,38 5,59 7,11 4,02 0,24 3,54 4,50
Sodio Electrodo
143 7 129 157 125 7 112 138
870900000 / 19 p. 17/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
(mg/dl)
UIBC
(ug/dl)
(mg/dl)
(-) No asignado
870900000 / 19 p. 18/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
32,6 4,1 24,4 40,8 101 13 76 126
3,82 0,58 2,67 4,97 4,27 0,64 2,99 5,55
8,65 1,30 6,05 11,25 37,2 4,7 27,9 46,5
Fosfatasa alcalina
ALP 405 AA líquida 177 18 142 212 601 60 481 721
(U/l)
(U/l)
deshidrogenasa
(U/l)
LDH-L 171 17 137 205 349 35 279 419
Lipasa
(U/l)
870900000 / 19 p. 19/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Albúmina
Albúmina AA 3,97 0,30 3,37 4,57 2,83 0,26 2,32 3,34
(g/dl)
1,24 0,19 0,87 1,61 5,43 0,68 4,07 6,79
Fosfatemia UV AA 4,37 0,40 3,58 5,16 7,80 0,59 6,63 8,97
(mg/dl)
82,3 10,3 61,7 102,9 25,8 3,3 19,3 32,3
Lactato
Lactate 36,8 3,3 30,2 43,4 11,8 1,1 9,7 13,9
(mg/dl)
119 15 89 149 62,1 7,8 46,6 77,6
(mg/dl) monofase AA
(mg/dl)
UIBC
(ug/dl)
(mg/dl)
(-) No asignado
870900000 / 19 p. 20/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
4,53 0,68 3,17 5,89 4,64 0,70 3,25 6,03
9,34 1,40 6,54 12,14 36,1 4,5 27,1 45,1
Fosfatasa alcalina
ALP 405 AA líquida 180 18 144 216 628 63 502 754
(U/l)
(U/l)
deshidrogenasa
(U/l)
LDH-L 177 18 142 212 365 37 292 438
Lipasa
(U/l)
870900000 / 19 p. 21/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Acido úrico
(mg/dl)
Albúmina
Albúmina AA 4,01 0,30 3,41 4,61 2,86 0,26 2,35 3,37
(g/dl)
Bilirrubina directa
(mg/dl)
Bilirrubina total
Calcio
(mg/dl)
Cloruro Electrodo
102 5 92 112 82,4 4,1 74,2 90,6
Colesterol
(mg/dl)
1,37 0,21 0,96 1,78 5,73 0,72 4,30 7,16
Fosfatemia UV AA 4,29 0,39 3,52 5,06 7,65 0,58 6,50 8,80
(mg/dl)
(mg/dl)
Glucose HK 82,5 6,2 70,1 94,9 283 21 241 325
80,6 10,1 60,4 100,8 23,6 3,0 17,7 29,5
Hierro
(ug/dl)
Lactato
Lactate 37,4 3,4 30,7 44,1 11,2 1,0 9,2 13,2
(mg/dl)
122 16 91 153 57,0 7,2 42,7 71,3
(mg/dl) monofase AA
Magnesio
Magnesium CPZ 2,13 0,32 1,49 2,77 4,70 0,57 3,57 5,83
(mg/dl)
Potasio Electrodo
3,96 0,20 3,56 4,36 6,09 0,31 5,48 6,70
Proteínas Totales
(g/dl)
Sodio Electrodo
145 8 130 160 127 7 114 140
183 14 156 210 86,0 6,5 73,1 98,9
(mg/dl) líquida
UIBC
(ug/dl)
33,9 5,1 23,7 44,1 99,4 12,0 75,5 123,3
(mg/dl) líquida
(-) No asignado
870900000 / 19 p. 22/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Alanina aminotrans-
Amilasa
(U/l)
Colinesterasa
Cholinesterase 7580 758 6064 9096 5193 520 4154 6232
(U/l)
Creatina kinasa
(U/l)
3,67 0,55 2,57 4,77 4,17 0,63 2,92 5,42
8,43 1,27 5,90 10,96 38,7 4,9 29,0 48,4
Fosfatasa alcalina
(U/l) ALP 405 AA líquida 169 17 135 203 555 56 444 666

deshidrogenasa
(U/l) LDH-L 176 18 141 211 359 36 287 431
Lipasa
(U/l)
870900000 / 19 p. 23/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Potasio
3,90 0,20 3,51 4,29 5,99 0,30 5,39 6,59
(mEq/l)
Sodio
144 7 130 158 125 7 112 138
(mEq/l)
Cloruro
92,8 4,7 83,5 102,1 78,1 3,9 70,3 85,9
(mEq/l)
1,04 0,10 0,85 1,23 1,21 0,14 0,94 1,48
(mmol/l)
0,90 0,09 0,72 1,08 1,12 0,13 0,87 1,37
(mmol/l)
Litio
0,56 0,08 0,41 0,71 1,79 0,16 1,47 2,11
(mmol/l)

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870900000 / 19 p. 24/24 UR150105
Standatrol S-E
Lote: 1503162390
C 2 niveles
Nivel 1: 162390
Nivel 2: 162390



PRESENTACION
870900000 / 20 p. 1/24
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo
870900000 / 20 p. 2/24
Standatrol S-E
2 niveles
Lote: 1503162390
Nível 1: 162390
Nível 2: 162390

correspondentes.
PROCEDIMENTO
- 6 frascos x 5 ml (Cód. 1937553).
PRECAUÇÕES
870900000 / 20 p. 3/24
Símbolos
C
P
Xn

Nocivo
Europeia


Xi
Irritante
H Data de validade
 Não congelar
Calibr. Calibrador
b Controle
F Risco biológico

b Controle Positivo
870900000 / 20 p. 4/24
INDICE
Página
Técnica manual
Metabolitos................................................................................................................... 6-7
Enzimas....................................................................................................................... 8
Targa BT 3000
Metabolitos................................................................................................................... 9-10
Enzimas....................................................................................................................... 11
Selectra 1 / 2 / E
Metabolitos................................................................................................................... 12
Enzimas....................................................................................................................... 13

Metabolitos................................................................................................................... 14-15
Enzimas....................................................................................................................... 16

Metabolitos................................................................................................................... 17-18
Enzimas....................................................................................................................... 19

Metabolitos................................................................................................................... 20
Emzimas...................................................................................................................... 21

Metabolitos................................................................................................................... 22
Emzimas...................................................................................................................... 23

Iones............................................................................................................................ 24
870900000 / 20 p. 5/24
NIVEL 1 NIVEL 2
(g/dl) Albúmina AA 4,4 3,7 5,1 2,9 2,4 3,4
Calcio Ca-Color 8,6 7,4 9,8 12 10 14
(mg/dl) Ca-Color AA 9,0 7,7 10,3 12 10 14
Creatinina 23 17 29 67 54 80
Hierro Fer-color 197 150 244 51 36 66
(ug/dl) Fer-color AA 195 148 242 49 34 64
Magnesio
Mg-color AA 2,3 1,6 3,0 4,4 3,3 5,5
(mg/dl)
UIBC
(ug/dl)
(-) No asignado
870900000 / 20 p. 6/24
NIVEL 1 NIVEL 2
Urea Urea color 2R 0,43 0,30 0,56 1,03 0,78 1,28
(g/l) Uremia 0,27 0,19 0,35 0,91 0,69 1,13
Lote: 1503162390 Nivel 1: 162390 Nivel 2: 162390
870900000 / 20 p. 7/24
NIVEL 1 NIVEL 2
(U/l)
(U/l)
(U/l) CK NAC UV AA 130 98 163 421 316 526
(U/l) ALP 405 AA líquida 212 148 276 680 510 850
(U/l)) LDH-P UV AA 393 295 491 894 671 1118
Lote: 1503162390 Nivel 1: 162390 Nivel 2: 162390
870900000 / 20 p. 8/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Albúmina
Albúmina AA 3,76 0,43 2,90 4,62 2,88 0,26 2,36 3,40
(g/dl)
Cloruro Electrodo
101 8 86 116 82,7 4,2 74,4 91,0
Fosfatemia UV AA 4,21 0,53 3,16 5,26 7,44 0,56 6,32 8,56
(mg/dl)
89,7 13,5 62,8 116,6 27,6 4,2 19,3 35,9
Lactato
Lactate 37,1 4,7 27,8 46,4 11,3 1,4 8,5 14,1
(mg/dl)
129 20 90 168 62,1 9,3 43,5 80,7
(mg/dl) monofase AA
Magnesio
Mg-color AA 2,00 0,30 1,40 2,60 4,37 0,53 3,32 5,42
(mg/dl)
Potasio Electrodo
3,90 0,30 3,31 4,49 5,87 0,44 4,99 6,75
Proteínas Totales
(g/dl)
Sodio Electrodo
143 11 122 164 125 10 106 144
UIBC
(ug/dl)
870900000 / 20 p. 9/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
(mg/dl)
(-) No asignado
Lote: 1503162390 Nivel 1: 162390 Nivel 2: 162390
870900000 / 20 p. 10/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Fosfatasa alcalina
ALP 405 AA líquida 198 25 148 248 649 81 487 811
(U/l)
(U/l)
deshidrogenasa
LDH-L 171 22 128 214 349 44 262 436
Lipasa
(U/l)
Lote: 1503162390 Nivel 1: 162390 Nivel 2: 162390
870900000 / 20 p. 11/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Albúmina
Albúmina AA 4,09 0,31 3,48 4,70 2,91 0,26 2,39 3,43
(g/dl)
Fosfatemia UV AA 4,43 0,40 3,63 5,23 8,21 0,62 6,98 9,44
(mg/dl)
76,9 9,6 57,7 96,1 26,3 3,3 19,7 32,9
Lactato
Lactate 35,8 3,2 29,4 42,2 10,6 1,0 8,7 12,5
(mg/dl)
121 15 91 151 58,3 7,3 43,7 72,9
(mg/dl) monofase AA
Magnesio
Mg-color AA 2,13 0,32 1,49 2,77 4,17 0,50 3,17 5,17
(mg/dl)
Proteínas Totales
(g/dl)
UIBC

(-) No asignado
Lote: 1503162390 Nivel 1: 162390 Nivel 2: 162390
870900000 / 20 p. 12/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
4,21 0,63 2,95 5,47 4,49 0,68 3,14 5,84
Fosfatasa alcalina
(U/l) ALP 405 AA líquida 181 18 145 217 587 59 470 704
(U/l)
(U/l)
LDH-L 169 17 135 203 354 36 283 425
Lipasa
(U/l)
Lote: 1503162390 Nivel 1: 162390 Nivel 2: 162390
870900000 / 20 p. 13/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Albúmina
Albúmina AA 3,90 0,30 3,31 4,49 2,74 0,25 2,25 3,23
(g/dl)
0,87 0,10 0,68 1,06 1,17 0,13 0,91 1,43
Cloruro Electrodo
(mEq/l) 101 5 91 111 84,2 4,2 75,8 92,6
ion selectivo
1,37 0,21 0,96 1,78 5,69 0,71 4,27 7,11
Fosfatemia UV AA 4,23 0,38 3,47 4,99 7,74 0,58 6,58 8,90
(mg/dl)
80,9 10,1 60,7 101,1 25,8 3,3 19,3 32,3
Lactato
Lactate 35,6 3,2 29,2 42,0 10,8 1,0 8,9 12,7
(mg/dl)
132 17 99 165 63,1 7,9 47,3 78,9
(mg/dl) monofase AA
Litio Electrodo
0,62 0,09 0,45 0,79 1,74 0,16 1,43 2,05
(mg/dl)
Magnesium CPZ 2,00 0,30 1,40 2,60 4,44 0,54 3,37 5,51
Potasio Electrodo
3,94 0,20 3,55 4,33 6,03 0,30 5,43 6,63
870900000 / 20 p. 14/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Sodio Electrodo
147 8 132 162 127 7 114 140
(mg/dl)
UIBC
(ug/dl)
(-) No asignado
Lote: 1503162390 Nivel 1: 162390 Nivel 2: 162390
870900000 / 20 p. 15/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
4,14 0,62 2,90 5,38 4,44 0,67 3,11 5,77
8,51 1,28 5,96 11,06 35,6 4,5 26,7 44,5
Fosfatasa alcalina
ALP 405 AA líquida 171 17 137 205 565 57 452 678
(U/l)
(U/l)
(U/l)
LDH-L 170 17 136 204 348 35 278 418
Lipasa
(U/l)
Lote: 1503162390 Nivel 1: 162390 Nivel 2: 162390
870900000 / 20 p. 16/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Albúmina
Albúmina AA 3,76 0,28 3,20 4,32 2,88 0,26 2,36 3,40
(g/dl)
Cloruro Electrodo
101 5 91 111 82,7 4,2 74,4 91,0
Fosfatemia UV AA 4,01 0,36 3,29 4,73 7,44 0,56 6,32 8,56
(mg/dl)
89,7 11,2 67,3 112,1 25,1 3,2 18,8 31,4
Lactato
Lactate 37,1 3,4 30,4 43,8 10,8 1,0 8,9 12,7
(mg/dl)
119 15 89 149 59,7 7,5 44,8 74,6
(mg/dl) monofase AA
(mg/dl)
Magnesium CPZ 2,15 0,33 1,50 2,80 4,65 0,56 3,53 5,77
Potasio Electrodo
3,90 0,20 3,51 4,29 5,87 0,30 5,28 6,46
(g/dl)
Total Protein 6,35 0,38 5,59 7,11 4,02 0,24 3,54 4,50
Sodio Electrodo
143 7 129 157 125 7 112 138
870900000 / 20 p. 17/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
(mg/dl)
UIBC
(ug/dl)
(mg/dl)
(-) No asignado
Lote: 1503162390 Nivel 1: 162390 Nivel 2: 162390
870900000 / 20 p. 18/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
32,6 4,1 24,4 40,8 101 13 76 126
3,82 0,58 2,67 4,97 4,27 0,64 2,99 5,55
8,65 1,30 6,05 11,25 37,2 4,7 27,9 46,5
Fosfatasa alcalina
ALP 405 AA líquida 177 18 142 212 601 60 481 721
(U/l)
(U/l)
deshidrogenasa
(U/l)
LDH-L 171 17 137 205 349 35 279 419
Lipasa
(U/l)
Lote: 1503162390 Nivel 1: 162390 Nivel 2: 162390
870900000 / 20 p. 19/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Albúmina
Albúmina AA 3,97 0,30 3,37 4,57 2,83 0,26 2,32 3,34
(g/dl)
1,24 0,19 0,87 1,61 5,43 0,68 4,07 6,79
Fosfatemia UV AA 4,37 0,40 3,58 5,16 7,80 0,59 6,63 8,97
(mg/dl)
82,3 10,3 61,7 102,9 25,8 3,3 19,3 32,3
Lactato
Lactate 36,8 3,3 30,2 43,4 11,8 1,1 9,7 13,9
(mg/dl)
119 15 89 149 62,1 7,8 46,6 77,6
(mg/dl) monofase AA
(mg/dl)
UIBC
(ug/dl)
(mg/dl)
(-) No asignado
Lote: 1503162390 Nivel 1: 162390 Nivel 2: 162390
870900000 / 20 p. 20/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
4,53 0,68 3,17 5,89 4,64 0,70 3,25 6,03
9,34 1,40 6,54 12,14 36,1 4,5 27,1 45,1
Fosfatasa alcalina
ALP 405 AA líquida 180 18 144 216 628 63 502 754
(U/l)
(U/l)
deshidrogenasa
(U/l)
LDH-L 177 18 142 212 365 37 292 438
Lipasa
(U/l)
Lote: 1503162390 Nivel 1: 162390 Nivel 2: 162390
870900000 / 20 p. 21/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Acido úrico
(mg/dl)
Albúmina
Albúmina AA 4,01 0,30 3,41 4,61 2,86 0,26 2,35 3,37
(g/dl)
Bilirrubina directa
(mg/dl)
Bilirrubina total
Calcio
(mg/dl)
Cloruro Electrodo
102 5 92 112 82,4 4,1 74,2 90,6
Colesterol
(mg/dl)
1,37 0,21 0,96 1,78 5,73 0,72 4,30 7,16
Fosfatemia UV AA 4,29 0,39 3,52 5,06 7,65 0,58 6,50 8,80
(mg/dl)
(mg/dl)
Glucose HK 82,5 6,2 70,1 94,9 283 21 241 325
80,6 10,1 60,4 100,8 23,6 3,0 17,7 29,5
Hierro
(ug/dl)
Lactato
Lactate 37,4 3,4 30,7 44,1 11,2 1,0 9,2 13,2
(mg/dl)
122 16 91 153 57,0 7,2 42,7 71,3
(mg/dl) monofase AA
Magnesio
Magnesium CPZ 2,13 0,32 1,49 2,77 4,70 0,57 3,57 5,83
(mg/dl)
Potasio Electrodo
3,96 0,20 3,56 4,36 6,09 0,31 5,48 6,70
Proteínas Totales
(g/dl)
Sodio Electrodo
145 8 130 160 127 7 114 140
183 14 156 210 86,0 6,5 73,1 98,9
(mg/dl) líquida
UIBC
(ug/dl)
33,9 5,1 23,7 44,1 99,4 12,0 75,5 123,3
(mg/dl) líquida
(-) No asignado
Lote: 1503162390 Nivel 1: 162390 Nivel 2: 162390
870900000 / 20 p. 22/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Alanina aminotrans-
Amilasa
(U/l)
Colinesterasa
Cholinesterase 7580 758 6064 9096 5193 520 4154 6232
(U/l)
Creatina kinasa
(U/l)
3,67 0,55 2,57 4,77 4,17 0,63 2,92 5,42
8,43 1,27 5,90 10,96 38,7 4,9 29,0 48,4
Fosfatasa alcalina
(U/l) ALP 405 AA líquida 169 17 135 203 555 56 444 666

deshidrogenasa
(U/l) LDH-L 176 18 141 211 359 36 287 431
Lipasa
(U/l)
Lote: 1503162390 Nivel 1: 162390 Nivel 2: 162390
870900000 / 20 p. 23/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Potasio
3,90 0,20 3,51 4,29 5,99 0,30 5,39 6,59
(mEq/l)
Sodio
144 7 130 158 125 7 112 138
(mEq/l)
Cloruro
92,8 4,7 83,5 102,1 78,1 3,9 70,3 85,9
(mEq/l)
1,04 0,10 0,85 1,23 1,21 0,14 0,94 1,48
(mmol/l)
0,90 0,09 0,72 1,08 1,12 0,13 0,87 1,37
(mmol/l)
Litio
0,56 0,08 0,41 0,71 1,79 0,16 1,47 2,11
(mmol/l)
Lote: 1503162390 Nivel 1: 162390 Nivel 2: 162390

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870900000 / 20 p. 24/24 UR150423
Standatrol S-E
Lote: 1504164150
C 2 niveles
Nivel 1: 164150
Nivel 2: 164150



PRESENTACION
870900000 / 21 p. 1/24
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo
870900000 / 21 p. 2/24
Standatrol S-E
2 niveles
Lote: 1504164150
Nível 1: 164150
Nível 2: 164150

correspondentes.
PROCEDIMENTO
- 6 frascos x 5 ml (Cód. 1937553).
PRECAUÇÕES
870900000 / 21 p. 3/24
Símbolos
C
P
Xn

Nocivo
Europeia


Xi
Irritante
H Data de validade
 Não congelar
Calibr. Calibrador
b Controle
F Risco biológico

b Controle Positivo
870900000 / 21 p. 4/24
INDICE
Página
Técnica manual
Metabolitos................................................................................................................... 6-7
Enzimas....................................................................................................................... 8
Targa BT 3000
Metabolitos................................................................................................................... 9-10
Enzimas....................................................................................................................... 11
Selectra 1 / 2 / E
Metabolitos................................................................................................................... 12
Enzimas....................................................................................................................... 13

Metabolitos................................................................................................................... 14-15
Enzimas....................................................................................................................... 16

Metabolitos................................................................................................................... 17-18
Enzimas....................................................................................................................... 19

Metabolitos................................................................................................................... 20
Emzimas...................................................................................................................... 21

Metabolitos................................................................................................................... 22
Emzimas...................................................................................................................... 23

Iones............................................................................................................................ 24
870900000 / 21 p. 5/24
NIVEL 1 NIVEL 2
(g/dl) Albúmina AA 4,8 4,1 5,5 3,4 2,8 4,0
Calcio Ca-Color 9,0 7,7 10,3 11 9 13
(mg/dl) Ca-Color AA 9,2 7,9 10,5 12 10 14
Creatinina 23 17 29 71 57 85
Hierro Fer-color 203 154 252 56 39 73
(ug/dl) Fer-color AA 198 150 246 49 34 64
Magnesio
Mg-color AA 1,9 1,3 2,5 3,4 2,6 4,2
(mg/dl)
UIBC
(ug/dl)
(-) No asignado
870900000 / 21 p. 6/24
NIVEL 1 NIVEL 2
Urea Urea color 2R 0,43 0,30 0,56 1,06 0,81 1,31
(g/l) Uremia 0,35 0,25 0,46 1,05 0,80 1,30
Lote: 1504164150 Nivel 1: 164150 Nivel 2: 164150
870900000 / 21 p. 7/24
NIVEL 1 NIVEL 2
(U/l)
(U/l)
(U/l) CK NAC UV AA 129 103 155 409 327 491
(U/l) ALP 405 AA líquida 193 135 251 687 515 859
(U/l)) LDH-P UV AA 370 296 444 926 741 1,111
Lote: 1504164150 Nivel 1: 164150 Nivel 2: 164150
870900000 / 21 p. 8/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Albúmina
Albúmina AA 3,74 0,28 3,18 4,30 2,96 0,27 2,43 3,49
(g/dl)
Cloruro Electrodo
105 6 94 116 89,4 4,5 80,5 98,3
Fosfatemia UV AA 3,86 0,35 3,17 4,55 7,28 0,55 6,19 8,37
(mg/dl)
73,1 9,2 54,8 91,4 35,4 4,5 26,5 44,3
(ug/dl) Fer-color AA líquida 235 28 179 291 69,1 10 48,4 89,8
Lactato
Lactate 40,6 3,7 33,3 47,9 11,3 1,0 9,3 13,3
(mg/dl)
128 16 96 160 46,6 5,9 34,9 58,3
(mg/dl) monofase AA
Magnesio
Mg-color AA 1,79 0,27 1,25 2,33 5,00 0,60 3,80 6,20
(mg/dl)
Potasio Electrodo
3,79 0,19 3,41 4,17 5,90 0,30 5,31 6,49
Proteínas Totales
(g/dl)
Sodio Electrodo
141 7 127 155 124 6 112 136
UIBC
(ug/dl)
870900000 / 21 p. 9/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
(mg/dl)
(-) No asignado
Lote: 1504164150 Nivel 1: 164150 Nivel 2: 164150
870900000 / 21 p. 10/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Fosfatasa alcalina
ALP 405 AA líquida 203 21 162 244 681 68 545 817
(U/l)
(U/l)
deshidrogenasa
LDH-L 168 17 134 202 386 39 309 463
Lipasa
(U/l)
Lote: 1504164150 Nivel 1: 164150 Nivel 2: 164150
870900000 / 21 p. 11/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Albúmina
Albúmina AA 4,23 0,32 3,60 4,86 3,06 0,28 2,51 3,61
(g/dl)
Colesterol Colestat enzimático AA 244 19 207 281 98 7,5 83 113
(mg/dl) Colestat enz. AA líquida 241 18 205 277 95 7,0 81 109
Fosfatemia UV AA 4,15 0,38 3,40 4,90 8,11 0,61 6,89 9,33
(mg/dl)
65,4 8,2 49,0 81,8 31,0 3,9 23,2 38,8
Lactato
Lactate 41,5 3,8 34,0 49,0 10,4 0,95 8,5 12,3
(mg/dl)
127 16 95 159 48,1 6,0 36,1 60,1
(mg/dl) monofase AA
Magnesio
Mg-color AA 1,93 0,29 1,35 2,51 4,45 0,54 3,38 5,52
(mg/dl)
Proteínas Totales
(g/dl)
UIBC

(-) No asignado
Lote: 1504164150 Nivel 1: 164150 Nivel 2: 164150
870900000 / 21 p. 12/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Amilasa Amilasa 405 cinética 85,6 11 64,2 107,0 502 63 376 628
(U/l) Amilasa 405 AA líquida 86,4 11 64,8 108,0 504 63 378 630
3,87 0,58 2,71 5,03 4,86 0,73 3,40 6,32
Fosfatasa alcalina
(U/l) ALP 405 AA líquida 189 19 151 227 584 59 467 701
(U/l)
(U/l)
LDH-L 171 17 137 205 395 40 316 474
Lipasa
(U/l)
Lote: 1504164150 Nivel 1: 164150 Nivel 2: 164150
870900000 / 21 p. 13/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Albúmina
Albúmina AA 3,99 0,30 3,39 4,59 2,93 0,27 2,40 3,46
(g/dl)
0,90 0,10 0,70 1,10 1,24 0,14 0,97 1,51
Cloruro Electrodo
(mEq/l) 98 5 88 108 85,1 4,3 76,6 93,6
ion selectivo
1,46 0,22 1,02 1,90 5,91 0,74 4,43 7,39
Fosfatemia UV AA 3,96 0,36 3,25 4,67 7,55 0,57 6,42 8,68
(mg/dl)
67,4 8,5 50,5 84,3 32,5 4,1 24,4 40,6
Hierro Fer-color AA 253 31 192 314 69,2 10 48,4 90,0
Lactato
Lactate 41,2 3,7 33,8 48,6 10,3 0,95 8,4 12,2
(mg/dl)
137 17 103 171 49,1 6,2 36,8 61,4
(mg/dl) monofase AA
Litio Electrodo
0,59 0,08 0,43 0,75 1,79 0,16 1,47 2,11
(mg/dl)
Magnesium CPZ 2,00 0,30 1,40 2,60 4,43 0,53 3,37 5,49
Potasio Electrodo
3,97 0,20 3,57 4,37 6,16 0,31 5,54 6,78
870900000 / 21 p. 14/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Sodio Electrodo
144 7 130 158 124 6 112 136
(mg/dl)
UIBC
(ug/dl)
Urea Urea UV cinética AA 33,9 5,1 23,7 44,1 105,0 13 79,8 130,2
(mg/dl) Urea UV cin.AA líquida 33,6 5,1 23,5 43,7 104,5 13 79,4 129,6
(-) No asignado
Lote: 1504164150 Nivel 1: 164150 Nivel 2: 164150
870900000 / 21 p. 15/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
4,21 0,63 2,95 5,47 4,74 0,71 3,32 6,16
7,54 1,13 5,28 9,80 40,2 5,1 30,1 50,3
Fosfatasa alcalina
ALP 405 AA líquida 178 18 142 214 593 60 474 712
(U/l)
(U/l)
(U/l)
LDH-L 168 17 134 202 389 39 311 467
Lipasa
(U/l)
Lote: 1504164150 Nivel 1: 164150 Nivel 2: 164150
870900000 / 21 p. 16/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Albúmina
Albúmina AA 3,74 0,28 3,18 4,30 2,96 0,27 2,43 3,49
(g/dl)
Cloruro Electrodo
105 6 94 116 89,4 4,5 80,5 98,3
Fosfatemia UV AA 3,72 0,34 3,05 4,39 7,28 0,55 6,19 8,37
(mg/dl)
73,1 9,2 54,8 91,4 32,5 4,1 24,4 40,6
Lactato
Lactate 40,6 3,7 33,3 47,9 10,8 1,0 8,9 12,7
(mg/dl)
119 15 89 149 44,9 5,6 33,7 56,1
(mg/dl) monofase AA
(mg/dl)
Magnesium CPZ 2,05 0,31 1,43 2,67 4,52 0,54 3,44 5,60
Potasio Electrodo
3,79 0,19 3,41 4,17 5,90 0,30 5,31 6,49
(g/dl)
Total Protein 6,61 0,40 5,82 7,40 4,27 0,26 3,76 4,78
Sodio Electrodo
141 7 127 155 124 6 112 136
870900000 / 21 p. 17/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
(mg/dl)
UIBC
(ug/dl)
(mg/dl)
(-) No asignado
Lote: 1504164150 Nivel 1: 164150 Nivel 2: 164150
870900000 / 21 p. 18/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
29,0 3,7 21,7 36,3 102 13 76 128
3,54 0,53 2,48 4,60 4,16 0,63 2,91 5,41
7,34 1,10 5,14 9,54 42,7 5,4 32,0 53,4
Fosfatasa alcalina
ALP 405 AA líquida 181 18 145 217 631 63 505 757
(U/l)
(U/l)
deshidrogenasa
(U/l)
LDH-L 168 17 134 202 386 39 309 463
Lipasa
(U/l)
Lote: 1504164150 Nivel 1: 164150 Nivel 2: 164150
870900000 / 21 p. 19/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Albúmina
Albúmina AA 4,09 0,31 3,48 4,70 3,02 0,27 2,48 3,56
(g/dl)
1,35 0,21 0,94 1,76 5,65 0,71 4,24 7,06
Fosfatemia UV AA 4,08 0,37 3,35 4,81 7,78 0,59 6,61 8,95
(mg/dl)
67,4 8,5 50,5 84,3 32,5 4,1 24,4 40,6
Lactato
Lactate 39,5 3,6 32,4 46,6 11,4 1,1 9,3 13,5
(mg/dl)
127 16 95 159 50,6 6,4 37,9 63,3
(mg/dl) monofase AA
(mg/dl)
UIBC
(ug/dl)
(mg/dl)
(-) No asignado
Lote: 1504164150 Nivel 1: 164150 Nivel 2: 164150
870900000 / 21 p. 20/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
4,06 0,61 2,84 5,28 4,50 0,68 3,15 5,85
8,09 1,22 5,66 10,52 43,1 5,4 32,3 53,9
Fosfatasa alcalina
ALP 405 AA líquida 187 19 150 224 663 67 530 796
(U/l)
(U/l)
deshidrogenasa
LDH-P UV AA líquida 337 42 253 421 822 103 616 1,028
(U/l)
LDH-L 173 18 138 208 389 39 311 467
Lipasa
(U/l)
Lote: 1504164150 Nivel 1: 164150 Nivel 2: 164150
870900000 / 21 p. 21/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Acido úrico
(mg/dl)
Albúmina
Albúmina AA 4,02 0,30 3,42 4,62 2,97 0,27 2,44 3,50
(g/dl)
Bilirrubina directa
(mg/dl)
Bilirrubina total
Calcio
(mg/dl)
Cloruro Electrodo
98 5 88 108 82,8 4,2 74,5 91,1
Colesterol
Colestat enz. AA líquida 244 19 207 281 95,0 7,2 80,7 109,3
(mg/dl)
1,61 0,24 1,13 2,09 6,04 0,76 4,53 7,55
Fosfatemia UV AA 4,27 0,39 3,50 5,04 7,70 0,58 6,54 8,86
(mg/dl)
(mg/dl)
Glucose HK 82,0 6,2 69,7 94,3 271 21 230 312
68,4 8,6 51,3 85,5 31,9 4,0 23,9 39,9
Hierro
(ug/dl)
Lactato
Lactate 41,2 3,7 33,8 48,6 10,2 0,9 8,4 12,0
(mg/dl)
126 16 94 158 46,5 5,8 34,9 58,1
(mg/dl) monofase AA
Magnesio
Magnesium CPZ 2,09 0,32 1,46 2,72 4,41 0,53 3,35 5,47
(mg/dl)
Potasio Electrodo
3,92 0,20 3,53 4,31 6,15 0,31 5,53 6,77
Sodio Electrodo
142 7 128 156 125 7 112 138
187 14 159 215 71,0 5,4 60,3 81,7
(mg/dl) líquida
UIBC
(ug/dl)
31,4 4,7 22,0 40,8 90,3 10,9 68,6 112,0
(mg/dl) líquida
(-) No asignado
Lote: 1504164150 Nivel 1: 164150 Nivel 2: 164150
870900000 / 21 p. 22/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Alanina aminotrans-
Amilasa
(U/l)
Colinesterasa
Cholinesterase 7788 779 6230 9346 5433 544 4346 6520
(U/l)
Creatina kinasa
(U/l)
2,94 0,44 2,06 3,82 3,83 0,58 2,68 4,98
7,43 1,12 5,20 9,66 42,9 5,4 32,2 53,6
Fosfatasa alcalina
(U/l) ALP 405 AA líquida 183 19 146 220 618 62 494 742
deshidrogenasa
(U/l) LDH-L 172 17 138 206 392 39 314 470
Lipasa
(U/l)
Lote: 1504164150 Nivel 1: 164150 Nivel 2: 164150
870900000 / 21 p. 23/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Potasio
3,82 0,19 3,44 4,20 6,09 0,31 5,48 6,70
(mEq/l)
Sodio
141 7 127 155 122 6 110 134
(mEq/l)
Cloruro
93,7 4,7 84,3 103,1 79,1 4,0 71,2 87,0
(mEq/l)
1,13 0,10 0,93 1,33 1,38 0,15 1,08 1,68
(mmol/l)
0,90 0,09 0,72 1,08 1,27 0,14 0,99 1,55
(mmol/l)
Litio
0,59 0,08 0,43 0,75 1,79 0,16 1,47 2,11
(mmol/l)
Lote: 1504164150 Nivel 1: 164150 Nivel 2: 164150

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870900000 / 21 p. 24/24 UR150505
Standatrol S-E
Lote: 1510175640
C 2 niveles
Nivel 1: 175640
Nivel 2: 175640



PRESENTACION
870900000 / 22 p. 1/24
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo
870900000 / 22 p. 2/24
Standatrol S-E
2 niveles
Lote: 1510175640
Nível 1: 175640
Nível 2: 175640

correspondentes.
PROCEDIMENTO
- 6 frascos x 5 ml (Cód. 1937553).
PRECAUÇÕES
870900000 / 22 p. 3/24
Símbolos
C
P
Xn

Nocivo
Europeia


Xi
Irritante
H Data de validade
 Não congelar
Calibr. Calibrador
b Controle
F Risco biológico

b Controle Positivo
870900000 / 22 p. 4/24
INDICE
Página
Técnica manual
Metabolitos................................................................................................................... 6-7
Enzimas....................................................................................................................... 8
Targa BT 3000
Metabolitos................................................................................................................... 9-10
Enzimas....................................................................................................................... 11
Selectra 1 / 2 / E
Metabolitos................................................................................................................... 12
Enzimas....................................................................................................................... 13

Metabolitos................................................................................................................... 14-15
Enzimas....................................................................................................................... 16

Metabolitos................................................................................................................... 17-18
Enzimas....................................................................................................................... 19

Metabolitos................................................................................................................... 20
Emzimas...................................................................................................................... 21

Metabolitos................................................................................................................... 22
Emzimas...................................................................................................................... 23

Iones............................................................................................................................ 24
870900000 / 22 p. 5/24
NIVEL 1 NIVEL 2
(g/dl) Albúmina AA 4,8 4,1 5,5 3,4 2,8 4,0
Calcio Ca-Color 9,0 7,7 10,3 11 9 13
(mg/dl) Ca-Color AA 9,2 7,9 10,5 12 10 14
Creatinina 23 17 29 71 57 85
Hierro Fer-color 203 154 252 56 39 73
(ug/dl) Fer-color AA 198 150 246 49 34 64
Magnesio
Mg-color AA 1,9 1,3 2,5 3,4 2,6 4,2
(mg/dl)
UIBC
(ug/dl)
(-) No asignado
870900000 / 22 p. 6/24
NIVEL 1 NIVEL 2
Urea Urea color 2R 0,43 0,30 0,56 1,06 0,81 1,31
(g/l) Uremia 0,35 0,25 0,46 1,05 0,80 1,30
Lote: 1510175640 Nivel 1: 175640 Nivel 2: 175640
870900000 / 22 p. 7/24
NIVEL 1 NIVEL 2
(U/l)
(U/l)
(U/l) CK NAC UV AA 129 103 155 409 327 491
(U/l) ALP 405 AA líquida 193 135 251 687 515 859
(U/l)) LDH-P UV AA 370 296 444 926 741 1,111
Lote: 1510175640 Nivel 1: 175640 Nivel 2: 175640
870900000 / 22 p. 8/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Albúmina
Albúmina AA 3,74 0,28 3,18 4,30 2,96 0,27 2,43 3,49
(g/dl)
Cloruro Electrodo
105 6 94 116 89,4 4,5 80,5 98,3
Fosfatemia UV AA 3,86 0,35 3,17 4,55 7,28 0,55 6,19 8,37
(mg/dl)
73,1 9,2 54,8 91,4 35,4 4,5 26,5 44,3
Lactato
Lactate 40,6 3,7 33,3 47,9 11,3 1,0 9,3 13,3
(mg/dl)
128 16 96 160 46,6 5,9 34,9 58,3
(mg/dl) monofase AA
Magnesio
Mg-color AA 1,79 0,27 1,25 2,33 5,00 0,60 3,80 6,20
(mg/dl)
Potasio Electrodo
3,79 0,19 3,41 4,17 5,90 0,30 5,31 6,49
Proteínas Totales
(g/dl)
Sodio Electrodo
141 7 127 155 124 6 112 136
UIBC
(ug/dl)
870900000 / 22 p. 9/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
(mg/dl)
(-) No asignado
Lote: 1510175640 Nivel 1: 175640 Nivel 2: 175640
870900000 / 22 p. 10/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Fosfatasa alcalina
ALP 405 AA líquida 203 21 162 244 681 68 545 817
(U/l)
(U/l)
deshidrogenasa
LDH-L 168 17 134 202 386 39 309 463
Lipasa
(U/l)
Lote: 1510175640 Nivel 1: 175640 Nivel 2: 175640
870900000 / 22 p. 11/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Albúmina
Albúmina AA 4,23 0,32 3,60 4,86 3,06 0,28 2,51 3,61
(g/dl)
Fosfatemia UV AA 4,15 0,38 3,40 4,90 8,11 0,61 6,89 9,33
(mg/dl)
65,4 8,2 49,0 81,8 31,0 3,9 23,2 38,8
Lactato
Lactate 41,5 3,8 34,0 49,0 10,4 0,95 8,5 12,3
(mg/dl)
127 16 95 159 48,1 6,0 36,1 60,1
(mg/dl) monofase AA
Magnesio
Mg-color AA 1,93 0,29 1,35 2,51 4,45 0,54 3,38 5,52
(mg/dl)
Proteínas Totales
(g/dl)
UIBC

(-) No asignado
Lote: 1510175640 Nivel 1: 175640 Nivel 2: 175640
870900000 / 22 p. 12/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
3,87 0,58 2,71 5,03 4,86 0,73 3,40 6,32
Fosfatasa alcalina
(U/l) ALP 405 AA líquida 189 19 151 227 584 59 467 701
(U/l)
(U/l)
LDH-L 171 17 137 205 395 40 316 474
Lipasa
(U/l)
Lote: 1510175640 Nivel 1: 175640 Nivel 2: 175640
870900000 / 22 p. 13/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Albúmina
Albúmina AA 3,99 0,30 3,39 4,59 2,93 0,27 2,40 3,46
(g/dl)
0,90 0,10 0,70 1,10 1,24 0,14 0,97 1,51
Cloruro Electrodo
(mEq/l) 98 5 88 108 85,1 4,3 76,6 93,6
ion selectivo
1,46 0,22 1,02 1,90 5,91 0,74 4,43 7,39
Fosfatemia UV AA 3,96 0,36 3,25 4,67 7,55 0,57 6,42 8,68
(mg/dl)
67,4 8,5 50,5 84,3 32,5 4,1 24,4 40,6
Lactato
Lactate 41,2 3,7 33,8 48,6 10,3 0,95 8,4 12,2
(mg/dl)
137 17 103 171 49,1 6,2 36,8 61,4
(mg/dl) monofase AA
Litio Electrodo
0,59 0,08 0,43 0,75 1,79 0,16 1,47 2,11
(mg/dl)
Magnesium CPZ 2,00 0,30 1,40 2,60 4,43 0,53 3,37 5,49
Potasio Electrodo
3,97 0,20 3,57 4,37 6,16 0,31 5,54 6,78
870900000 / 22 p. 14/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Sodio Electrodo
144 7 130 158 124 6 112 136
(mg/dl)
UIBC
(ug/dl)
(-) No asignado
Lote: 1510175640 Nivel 1: 175640 Nivel 2: 175640
870900000 / 22 p. 15/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
4,21 0,63 2,95 5,47 4,74 0,71 3,32 6,16
7,54 1,13 5,28 9,80 40,2 5,1 30,1 50,3
Fosfatasa alcalina
ALP 405 AA líquida 178 18 142 214 593 60 474 712
(U/l)
(U/l)
(U/l)
LDH-L 168 17 134 202 389 39 311 467
Lipasa
(U/l)
Lote: 1510175640 Nivel 1: 175640 Nivel 2: 175640
870900000 / 22 p. 16/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Albúmina
Albúmina AA 3,74 0,28 3,18 4,30 2,96 0,27 2,43 3,49
(g/dl)
Cloruro Electrodo
105 6 94 116 89,4 4,5 80,5 98,3
Fosfatemia UV AA 3,72 0,34 3,05 4,39 7,28 0,55 6,19 8,37
(mg/dl)
73,1 9,2 54,8 91,4 32,5 4,1 24,4 40,6
Lactato
Lactate 40,6 3,7 33,3 47,9 10,8 1,0 8,9 12,7
(mg/dl)
119 15 89 149 44,9 5,6 33,7 56,1
(mg/dl) monofase AA
(mg/dl)
Magnesium CPZ 2,05 0,31 1,43 2,67 4,52 0,54 3,44 5,60
Potasio Electrodo
3,79 0,19 3,41 4,17 5,90 0,30 5,31 6,49
(g/dl)
Total Protein 6,61 0,40 5,82 7,40 4,27 0,26 3,76 4,78
Sodio Electrodo
141 7 127 155 124 6 112 136
870900000 / 22 p. 17/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
(mg/dl)
UIBC
(ug/dl)
(mg/dl)
(-) No asignado
Lote: 1510175640 Nivel 1: 175640 Nivel 2: 175640
870900000 / 22 p. 18/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
29,0 3,7 21,7 36,3 102 13 76 128
3,54 0,53 2,48 4,60 4,16 0,63 2,91 5,41
7,34 1,10 5,14 9,54 42,7 5,4 32,0 53,4
Fosfatasa alcalina
ALP 405 AA líquida 181 18 145 217 631 63 505 757
(U/l)
(U/l)
deshidrogenasa
(U/l)
LDH-L 168 17 134 202 386 39 309 463
Lipasa
(U/l)
Lote: 1510175640 Nivel 1: 175640 Nivel 2: 175640
870900000 / 22 p. 19/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Albúmina
Albúmina AA 4,09 0,31 3,48 4,70 3,02 0,27 2,48 3,56
(g/dl)
1,35 0,21 0,94 1,76 5,65 0,71 4,24 7,06
Fosfatemia UV AA 4,08 0,37 3,35 4,81 7,78 0,59 6,61 8,95
(mg/dl)
67,4 8,5 50,5 84,3 32,5 4,1 24,4 40,6
Lactato
Lactate 39,5 3,6 32,4 46,6 11,4 1,1 9,3 13,5
(mg/dl)
127 16 95 159 50,6 6,4 37,9 63,3
(mg/dl) monofase AA
(mg/dl)
UIBC
(ug/dl)
(mg/dl)
(-) No asignado
Lote: 1510175640 Nivel 1: 175640 Nivel 2: 175640
870900000 / 22 p. 20/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
4,06 0,61 2,84 5,28 4,50 0,68 3,15 5,85
8,09 1,22 5,66 10,52 43,1 5,4 32,3 53,9
Fosfatasa alcalina
ALP 405 AA líquida 187 19 150 224 663 67 530 796
(U/l)
(U/l)
deshidrogenasa
(U/l)
LDH-L 173 18 138 208 389 39 311 467
Lipasa
(U/l)
Lote: 1510175640 Nivel 1: 175640 Nivel 2: 175640
870900000 / 22 p. 21/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Acido úrico
(mg/dl)
Albúmina
Albúmina AA 4,02 0,30 3,42 4,62 2,97 0,27 2,44 3,50
(g/dl)
Bilirrubina directa
(mg/dl)
Bilirrubina total
Calcio
(mg/dl)
Cloruro Electrodo
98 5 88 108 82,8 4,2 74,5 91,1
Colesterol
(mg/dl)
1,61 0,24 1,13 2,09 6,04 0,76 4,53 7,55
Fosfatemia UV AA 4,27 0,39 3,50 5,04 7,70 0,58 6,54 8,86
(mg/dl)
(mg/dl)
Glucose HK 82,0 6,2 69,7 94,3 271 21 230 312
68,4 8,6 51,3 85,5 31,9 4,0 23,9 39,9
Hierro
(ug/dl)
Lactato
Lactate 41,2 3,7 33,8 48,6 10,2 0,9 8,4 12,0
(mg/dl)
126 16 94 158 46,5 5,8 34,9 58,1
(mg/dl) monofase AA
Magnesio
Magnesium CPZ 2,09 0,32 1,46 2,72 4,41 0,53 3,35 5,47
(mg/dl)
Potasio Electrodo
3,92 0,20 3,53 4,31 6,15 0,31 5,53 6,77
Sodio Electrodo
142 7 128 156 125 7 112 138
187 14 159 215 71,0 5,4 60,3 81,7
(mg/dl) líquida
UIBC
(ug/dl)
31,4 4,7 22,0 40,8 90,3 10,9 68,6 112,0
(mg/dl) líquida
(-) No asignado
Lote: 1510175640 Nivel 1: 175640 Nivel 2: 175640
870900000 / 22 p. 22/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Alanina aminotrans-
Amilasa
(U/l)
Colinesterasa
Cholinesterase 7788 779 6230 9346 5433 544 4346 6520
(U/l)
Creatina kinasa
(U/l)
2,94 0,44 2,06 3,82 3,83 0,58 2,68 4,98
7,43 1,12 5,20 9,66 42,9 5,4 32,2 53,6
Fosfatasa alcalina
(U/l) ALP 405 AA líquida 183 19 146 220 618 62 494 742
deshidrogenasa
(U/l) LDH-L 172 17 138 206 392 39 314 470
Lipasa
(U/l)
Lote: 1510175640 Nivel 1: 175640 Nivel 2: 175640
870900000 / 22 p. 23/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Potasio
3,82 0,19 3,44 4,20 6,09 0,31 5,48 6,70
(mEq/l)
Sodio
141 7 127 155 122 6 110 134
(mEq/l)
Cloruro
93,7 4,7 84,3 103,1 79,1 4,0 71,2 87,0
(mEq/l)
1,13 0,10 0,93 1,33 1,38 0,15 1,08 1,68
(mmol/l)
0,90 0,09 0,72 1,08 1,27 0,14 0,99 1,55
(mmol/l)
Litio
0,59 0,08 0,43 0,75 1,79 0,16 1,47 2,11
(mmol/l)
Lote: 1510175640 Nivel 1: 175640 Nivel 2: 175640

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870900000 / 22 p. 24/24 UR151014
Standatrol S-E
Lote: 1511177750
C 2 niveles
Nivel 1: 175640
Nivel 2: 175640



PRESENTACION
870900000 / 24 p. 1/24
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo
870900000 / 24 p. 2/24
Standatrol S-E
2 niveles
Lote: 1511177750
Nível 1: 175640
Nível 2: 175640

correspondentes.
PROCEDIMENTO
- 6 frascos x 5 ml (Cód. 1937553).
PRECAUÇÕES
870900000 / 24 p. 3/24
Símbolos
C
P
Xn

Nocivo
Europeia


Xi
Irritante
H Data de validade
 Não congelar
Calibr. Calibrador
b Controle
F Risco biológico

b Controle Positivo
870900000 / 24 p. 4/24
INDICE
Página
Técnica manual
Metabolitos................................................................................................................... 6-7
Enzimas....................................................................................................................... 8
Targa BT 3000
Metabolitos................................................................................................................... 9-10
Enzimas....................................................................................................................... 11
Selectra 1 / 2 / E
Metabolitos................................................................................................................... 12
Enzimas....................................................................................................................... 13

Metabolitos................................................................................................................... 14-15
Enzimas....................................................................................................................... 16

Metabolitos................................................................................................................... 17-18
Enzimas....................................................................................................................... 19

Metabolitos................................................................................................................... 20
Emzimas...................................................................................................................... 21

Metabolitos................................................................................................................... 22
Emzimas...................................................................................................................... 23

Iones............................................................................................................................ 24
870900000 / 24 p. 5/24
NIVEL 1 NIVEL 2
(g/dl) Albúmina AA 4,8 4,1 5,5 3,4 2,8 4,0
Calcio Ca-Color 9,0 7,7 10,3 11 9 13
(mg/dl) Ca-Color AA 9,2 7,9 10,5 12 10 14
Creatinina 23 17 29 71 57 85
Hierro Fer-color 203 154 252 56 39 73
(ug/dl) Fer-color AA 198 150 246 49 34 64
Magnesio
Mg-color AA 1,9 1,3 2,5 3,4 2,6 4,2
(mg/dl)
UIBC
(ug/dl)
(-) No asignado
870900000 / 24 p. 6/24
NIVEL 1 NIVEL 2
Urea Urea color 2R 0,43 0,30 0,56 1,06 0,81 1,31
(g/l) Uremia 0,35 0,25 0,46 1,05 0,80 1,30
Lote: 1511177750 Nivel 1: 175640 Nivel 2: 175640
870900000 / 24 p. 7/24
NIVEL 1 NIVEL 2
(U/l)
(U/l)
(U/l) CK NAC UV AA 129 103 155 409 327 491
(U/l) ALP 405 AA líquida 193 135 251 687 515 859
(U/l)) LDH-P UV AA 370 296 444 926 741 1,111
Lote: 1511177750 Nivel 1: 175640 Nivel 2: 175640
870900000 / 24 p. 8/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Albúmina
Albúmina AA 3,74 0,28 3,18 4,30 2,96 0,27 2,43 3,49
(g/dl)
Cloruro Electrodo
105 6 94 116 89,4 4,5 80,5 98,3
Fosfatemia UV AA 3,86 0,35 3,17 4,55 7,28 0,55 6,19 8,37
(mg/dl)
73,1 9,2 54,8 91,4 35,4 4,5 26,5 44,3
Lactato
Lactate 40,6 3,7 33,3 47,9 11,3 1,0 9,3 13,3
(mg/dl)
128 16 96 160 46,6 5,9 34,9 58,3
(mg/dl) monofase AA
Magnesio
Mg-color AA 1,79 0,27 1,25 2,33 5,00 0,60 3,80 6,20
(mg/dl)
Potasio Electrodo
3,79 0,19 3,41 4,17 5,90 0,30 5,31 6,49
Proteínas Totales
(g/dl)
Sodio Electrodo
141 7 127 155 124 6 112 136
UIBC
(ug/dl)
870900000 / 24 p. 9/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
(mg/dl)
(-) No asignado
Lote: 1511177750 Nivel 1: 175640 Nivel 2: 175640
870900000 / 24 p. 10/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Fosfatasa alcalina
ALP 405 AA líquida 203 21 162 244 681 68 545 817
(U/l)
(U/l)
deshidrogenasa
LDH-L 168 17 134 202 386 39 309 463
Lipasa
(U/l)
Lote: 1511177750 Nivel 1: 175640 Nivel 2: 175640
870900000 / 24 p. 11/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Albúmina
Albúmina AA 4,23 0,32 3,60 4,86 3,06 0,28 2,51 3,61
(g/dl)
Fosfatemia UV AA 4,15 0,38 3,40 4,90 8,11 0,61 6,89 9,33
(mg/dl)
65,4 8,2 49,0 81,8 31,0 3,9 23,2 38,8
Lactato
Lactate 41,5 3,8 34,0 49,0 10,4 0,95 8,5 12,3
(mg/dl)
127 16 95 159 48,1 6,0 36,1 60,1
(mg/dl) monofase AA
Magnesio
Mg-color AA 1,93 0,29 1,35 2,51 4,45 0,54 3,38 5,52
(mg/dl)
Proteínas Totales
(g/dl)
UIBC

(-) No asignado
Lote: 1511177750 Nivel 1: 175640 Nivel 2: 175640
870900000 / 24 p. 12/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
3,87 0,58 2,71 5,03 4,86 0,73 3,40 6,32
Fosfatasa alcalina
(U/l) ALP 405 AA líquida 189 19 151 227 584 59 467 701
(U/l)
(U/l)
LDH-L 171 17 137 205 395 40 316 474
Lipasa
(U/l)
Lote: 1511177750 Nivel 1: 175640 Nivel 2: 175640
870900000 / 24 p. 13/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Albúmina
Albúmina AA 3,99 0,30 3,39 4,59 2,93 0,27 2,40 3,46
(g/dl)
0,90 0,10 0,70 1,10 1,24 0,14 0,97 1,51
Cloruro Electrodo
(mEq/l) 98 5 88 108 85,1 4,3 76,6 93,6
ion selectivo
1,46 0,22 1,02 1,90 5,91 0,74 4,43 7,39
Fosfatemia UV AA 3,96 0,36 3,25 4,67 7,55 0,57 6,42 8,68
(mg/dl)
67,4 8,5 50,5 84,3 32,5 4,1 24,4 40,6
Lactato
Lactate 41,2 3,7 33,8 48,6 10,3 0,95 8,4 12,2
(mg/dl)
137 17 103 171 49,1 6,2 36,8 61,4
(mg/dl) monofase AA
Litio Electrodo
0,59 0,08 0,43 0,75 1,79 0,16 1,47 2,11
(mg/dl)
Magnesium CPZ 2,00 0,30 1,40 2,60 4,43 0,53 3,37 5,49
Potasio Electrodo
3,97 0,20 3,57 4,37 6,16 0,31 5,54 6,78
870900000 / 24 p. 14/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Sodio Electrodo
144 7 130 158 124 6 112 136
(mg/dl)
UIBC
(ug/dl)
(-) No asignado
Lote: 1511177750 Nivel 1: 175640 Nivel 2: 175640
870900000 / 24 p. 15/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
4,21 0,63 2,95 5,47 4,74 0,71 3,32 6,16
7,54 1,13 5,28 9,80 40,2 5,1 30,1 50,3
Fosfatasa alcalina
ALP 405 AA líquida 178 18 142 214 593 60 474 712
(U/l)
(U/l)
(U/l)
LDH-L 168 17 134 202 389 39 311 467
Lipasa
(U/l)
Lote: 1511177750 Nivel 1: 175640 Nivel 2: 175640
870900000 / 24 p. 16/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Albúmina
Albúmina AA 3,74 0,28 3,18 4,30 2,96 0,27 2,43 3,49
(g/dl)
Cloruro Electrodo
105 6 94 116 89,4 4,5 80,5 98,3
Fosfatemia UV AA 3,72 0,34 3,05 4,39 7,28 0,55 6,19 8,37
(mg/dl)
73,1 9,2 54,8 91,4 32,5 4,1 24,4 40,6
Lactato
Lactate 40,6 3,7 33,3 47,9 10,8 1,0 8,9 12,7
(mg/dl)
119 15 89 149 44,9 5,6 33,7 56,1
(mg/dl) monofase AA
(mg/dl)
Magnesium CPZ 2,05 0,31 1,43 2,67 4,52 0,54 3,44 5,60
Potasio Electrodo
3,79 0,19 3,41 4,17 5,90 0,30 5,31 6,49
(g/dl)
Total Protein 6,61 0,40 5,82 7,40 4,27 0,26 3,76 4,78
Sodio Electrodo
141 7 127 155 124 6 112 136
870900000 / 24 p. 17/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
(mg/dl)
UIBC
(ug/dl)
(mg/dl)
(-) No asignado
Lote: 1511177750 Nivel 1: 175640 Nivel 2: 175640
870900000 / 24 p. 18/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
29,0 3,7 21,7 36,3 102 13 76 128
3,54 0,53 2,48 4,60 4,16 0,63 2,91 5,41
7,34 1,10 5,14 9,54 42,7 5,4 32,0 53,4
Fosfatasa alcalina
ALP 405 AA líquida 181 18 145 217 631 63 505 757
(U/l)
(U/l)
deshidrogenasa
(U/l)
LDH-L 168 17 134 202 386 39 309 463
Lipasa
(U/l)
Lote: 1511177750 Nivel 1: 175640 Nivel 2: 175640
870900000 / 24 p. 19/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Albúmina
Albúmina AA 4,09 0,31 3,48 4,70 3,02 0,27 2,48 3,56
(g/dl)
1,35 0,21 0,94 1,76 5,65 0,71 4,24 7,06
Fosfatemia UV AA 4,08 0,37 3,35 4,81 7,78 0,59 6,61 8,95
(mg/dl)
67,4 8,5 50,5 84,3 32,5 4,1 24,4 40,6
Lactato
Lactate 39,5 3,6 32,4 46,6 11,4 1,1 9,3 13,5
(mg/dl)
127 16 95 159 50,6 6,4 37,9 63,3
(mg/dl) monofase AA
(mg/dl)
UIBC
(ug/dl)
(mg/dl)
(-) No asignado
Lote: 1511177750 Nivel 1: 175640 Nivel 2: 175640
870900000 / 24 p. 20/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
4,06 0,61 2,84 5,28 4,50 0,68 3,15 5,85
8,09 1,22 5,66 10,52 43,1 5,4 32,3 53,9
Fosfatasa alcalina
ALP 405 AA líquida 187 19 150 224 663 67 530 796
(U/l)
(U/l)
deshidrogenasa
(U/l)
LDH-L 173 18 138 208 389 39 311 467
Lipasa
(U/l)
Lote: 1511177750 Nivel 1: 175640 Nivel 2: 175640
870900000 / 24 p. 21/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Acido úrico
(mg/dl)
Albúmina
Albúmina AA 4,02 0,30 3,42 4,62 2,97 0,27 2,44 3,50
(g/dl)
Bilirrubina directa
(mg/dl)
Bilirrubina total
Calcio
(mg/dl)
Cloruro Electrodo
98 5 88 108 82,8 4,2 74,5 91,1
Colesterol
(mg/dl)
1,61 0,24 1,13 2,09 6,04 0,76 4,53 7,55
Fosfatemia UV AA 4,27 0,39 3,50 5,04 7,70 0,58 6,54 8,86
(mg/dl)
(mg/dl)
Glucose HK 82,0 6,2 69,7 94,3 271 21 230 312
68,4 8,6 51,3 85,5 31,9 4,0 23,9 39,9
Hierro
(ug/dl)
Lactato
Lactate 41,2 3,7 33,8 48,6 10,2 0,9 8,4 12,0
(mg/dl)
126 16 94 158 46,5 5,8 34,9 58,1
(mg/dl) monofase AA
Magnesio
Magnesium CPZ 2,09 0,32 1,46 2,72 4,41 0,53 3,35 5,47
(mg/dl)
Potasio Electrodo
3,92 0,20 3,53 4,31 6,15 0,31 5,53 6,77
Sodio Electrodo
142 7 128 156 125 7 112 138
187 14 159 215 71,0 5,4 60,3 81,7
(mg/dl) líquida
UIBC
(ug/dl)
31,4 4,7 22,0 40,8 90,3 10,9 68,6 112,0
(mg/dl) líquida
(-) No asignado
Lote: 1511177750 Nivel 1: 175640 Nivel 2: 175640
870900000 / 24 p. 22/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Alanina aminotrans-
Amilasa
(U/l)
Colinesterasa
Cholinesterase 7788 779 6230 9346 5433 544 4346 6520
(U/l)
Creatina kinasa
(U/l)
2,94 0,44 2,06 3,82 3,83 0,58 2,68 4,98
7,43 1,12 5,20 9,66 42,9 5,4 32,2 53,6
Fosfatasa alcalina
(U/l) ALP 405 AA líquida 183 19 146 220 618 62 494 742
deshidrogenasa
(U/l) LDH-L 172 17 138 206 392 39 314 470
Lipasa
(U/l)
Lote: 1511177750 Nivel 1: 175640 Nivel 2: 175640
870900000 / 24 p. 23/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Potasio
3,82 0,19 3,44 4,20 6,09 0,31 5,48 6,70
(mEq/l)
Sodio
141 7 127 155 122 6 110 134
(mEq/l)
Cloruro
93,7 4,7 84,3 103,1 79,1 4,0 71,2 87,0
(mEq/l)
1,13 0,10 0,93 1,33 1,38 0,15 1,08 1,68
(mmol/l)
0,90 0,09 0,72 1,08 1,27 0,14 0,99 1,55
(mmol/l)
Litio
0,59 0,08 0,43 0,75 1,79 0,16 1,47 2,11
(mmol/l)
Lote: 1511177750 Nivel 1: 175640 Nivel 2: 175640

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870900000 / 24 p. 24/24 UR151113
Standatrol S-E
Lote: 1511180330
C 2 niveles
Nivel 1: 180330
Nivel 2: 180330



PRESENTACION
870900000 / 25 p. 1/24
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo
870900000 / 25 p. 2/24
Standatrol S-E
2 niveles
Lote: 1511180330
Nível 1: 180330
Nível 2: 180330

correspondentes.
PROCEDIMENTO
- 6 frascos x 5 ml (Cód. 1937553).
PRECAUÇÕES
870900000 / 25 p. 3/24
Símbolos
C
P
Xn

Nocivo
Europeia


Xi
Irritante
H Data de validade
 Não congelar
Calibr. Calibrador
b Controle
F Risco biológico

b Controle Positivo
870900000 / 25 p. 4/24
INDICE
Página
Técnica manual
Metabolitos................................................................................................................... 6-7
Enzimas....................................................................................................................... 8
Targa BT 3000
Metabolitos................................................................................................................... 9-10
Enzimas....................................................................................................................... 11
Selectra 1 / 2 / E
Metabolitos................................................................................................................... 12
Enzimas....................................................................................................................... 13

Metabolitos................................................................................................................... 14-15
Enzimas....................................................................................................................... 16

Metabolitos................................................................................................................... 17-18
Enzimas....................................................................................................................... 19

Metabolitos................................................................................................................... 20
Emzimas...................................................................................................................... 21

Metabolitos................................................................................................................... 22
Emzimas...................................................................................................................... 23

Iones............................................................................................................................ 24
870900000 / 25 p. 5/24
NIVEL 1 NIVEL 2
(g/dl) Albúmina AA 4,8 4,1 5,5 3,4 2,8 4,0
Calcio Ca-Color 9,0 7,7 10,3 11 9 13
(mg/dl) Ca-Color AA 9,2 7,9 10,5 12 10 14
Creatinina 23 17 29 71 57 85
Hierro Fer-color 203 154 252 56 39 73
(ug/dl) Fer-color AA 198 150 246 49 34 64
Magnesio
Mg-color AA 1,9 1,3 2,5 3,4 2,6 4,2
(mg/dl)
UIBC
(ug/dl)
(-) No asignado
870900000 / 25 p. 6/24
NIVEL 1 NIVEL 2
Urea Urea color 2R 0,43 0,30 0,56 1,06 0,81 1,31
(g/l) Uremia 0,35 0,25 0,46 1,05 0,80 1,30
Lote: 1511180330 Nivel 1: 180330 Nivel 2: 180330
870900000 / 25 p. 7/24
NIVEL 1 NIVEL 2
(U/l)
(U/l)
(U/l) CK NAC UV AA 129 103 155 409 327 491
(U/l) ALP 405 AA líquida 193 135 251 687 515 859
(U/l)) LDH-P UV AA 370 296 444 926 741 1,111
Lote: 1511180330 Nivel 1: 180330 Nivel 2: 180330
870900000 / 25 p. 8/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Albúmina
Albúmina AA 3,74 0,28 3,18 4,30 2,96 0,27 2,43 3,49
(g/dl)
Cloruro Electrodo
105 6 94 116 89,4 4,5 80,5 98,3
Fosfatemia UV AA 3,86 0,35 3,17 4,55 7,28 0,55 6,19 8,37
(mg/dl)
73,1 9,2 54,8 91,4 35,4 4,5 26,5 44,3
Lactato
Lactate 40,6 3,7 33,3 47,9 11,3 1,0 9,3 13,3
(mg/dl)
128 16 96 160 46,6 5,9 34,9 58,3
(mg/dl) monofase AA
Magnesio
Mg-color AA 1,79 0,27 1,25 2,33 5,00 0,60 3,80 6,20
(mg/dl)
Potasio Electrodo
3,79 0,19 3,41 4,17 5,90 0,30 5,31 6,49
Proteínas Totales
(g/dl)
Sodio Electrodo
141 7 127 155 124 6 112 136
UIBC
(ug/dl)
870900000 / 25 p. 9/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
(mg/dl)
(-) No asignado
Lote: 1511180330 Nivel 1: 180330 Nivel 2: 180330
870900000 / 25 p. 10/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Fosfatasa alcalina
ALP 405 AA líquida 203 21 162 244 681 68 545 817
(U/l)
(U/l)
deshidrogenasa
LDH-L 168 17 134 202 386 39 309 463
Lipasa
(U/l)
Lote: 1511180330 Nivel 1: 180330 Nivel 2: 180330
870900000 / 25 p. 11/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Albúmina
Albúmina AA 4,23 0,32 3,60 4,86 3,06 0,28 2,51 3,61
(g/dl)
Fosfatemia UV AA 4,15 0,38 3,40 4,90 8,11 0,61 6,89 9,33
(mg/dl)
65,4 8,2 49,0 81,8 31,0 3,9 23,2 38,8
Lactato
Lactate 41,5 3,8 34,0 49,0 10,4 0,95 8,5 12,3
(mg/dl)
127 16 95 159 48,1 6,0 36,1 60,1
(mg/dl) monofase AA
Magnesio
Mg-color AA 1,93 0,29 1,35 2,51 4,45 0,54 3,38 5,52
(mg/dl)
Proteínas Totales
(g/dl)
UIBC

(-) No asignado
Lote: 1511180330 Nivel 1: 180330 Nivel 2: 180330
870900000 / 25 p. 12/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
3,87 0,58 2,71 5,03 4,86 0,73 3,40 6,32
Fosfatasa alcalina
(U/l) ALP 405 AA líquida 189 19 151 227 584 59 467 701
(U/l)
(U/l)
LDH-L 171 17 137 205 395 40 316 474
Lipasa
(U/l)
Lote: 1511180330 Nivel 1: 180330 Nivel 2: 180330
870900000 / 25 p. 13/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Albúmina
Albúmina AA 3,99 0,30 3,39 4,59 2,93 0,27 2,40 3,46
(g/dl)
0,90 0,10 0,70 1,10 1,24 0,14 0,97 1,51
Cloruro Electrodo
(mEq/l) 98 5 88 108 85,1 4,3 76,6 93,6
ion selectivo
1,46 0,22 1,02 1,90 5,91 0,74 4,43 7,39
Fosfatemia UV AA 3,96 0,36 3,25 4,67 7,55 0,57 6,42 8,68
(mg/dl)
67,4 8,5 50,5 84,3 32,5 4,1 24,4 40,6
Lactato
Lactate 41,2 3,7 33,8 48,6 10,3 0,95 8,4 12,2
(mg/dl)
137 17 103 171 49,1 6,2 36,8 61,4
(mg/dl) monofase AA
Litio Electrodo
0,59 0,08 0,43 0,75 1,79 0,16 1,47 2,11
(mg/dl)
Magnesium CPZ 2,00 0,30 1,40 2,60 4,43 0,53 3,37 5,49
Potasio Electrodo
3,97 0,20 3,57 4,37 6,16 0,31 5,54 6,78
870900000 / 25 p. 14/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Sodio Electrodo
144 7 130 158 124 6 112 136
(mg/dl)
UIBC
(ug/dl)
(-) No asignado
Lote: 1511180330 Nivel 1: 180330 Nivel 2: 180330
870900000 / 25 p. 15/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
4,21 0,63 2,95 5,47 4,74 0,71 3,32 6,16
7,54 1,13 5,28 9,80 40,2 5,1 30,1 50,3
Fosfatasa alcalina
ALP 405 AA líquida 178 18 142 214 593 60 474 712
(U/l)
(U/l)
(U/l)
LDH-L 168 17 134 202 389 39 311 467
Lipasa
(U/l)
Lote: 1511180330 Nivel 1: 180330 Nivel 2: 180330
870900000 / 25 p. 16/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Albúmina
Albúmina AA 3,74 0,28 3,18 4,30 2,96 0,27 2,43 3,49
(g/dl)
Cloruro Electrodo
105 6 94 116 89,4 4,5 80,5 98,3
Fosfatemia UV AA 3,72 0,34 3,05 4,39 7,28 0,55 6,19 8,37
(mg/dl)
73,1 9,2 54,8 91,4 32,5 4,1 24,4 40,6
Lactato
Lactate 40,6 3,7 33,3 47,9 10,8 1,0 8,9 12,7
(mg/dl)
119 15 89 149 44,9 5,6 33,7 56,1
(mg/dl) monofase AA
(mg/dl)
Magnesium CPZ 2,05 0,31 1,43 2,67 4,52 0,54 3,44 5,60
Potasio Electrodo
3,79 0,19 3,41 4,17 5,90 0,30 5,31 6,49
(g/dl)
Total Protein 6,61 0,40 5,82 7,40 4,27 0,26 3,76 4,78
Sodio Electrodo
141 7 127 155 124 6 112 136
870900000 / 25 p. 17/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
(mg/dl)
UIBC
(ug/dl)
(mg/dl)
(-) No asignado
Lote: 1511180330 Nivel 1: 180330 Nivel 2: 180330
870900000 / 25 p. 18/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
29,0 3,7 21,7 36,3 102 13 76 128
3,54 0,53 2,48 4,60 4,16 0,63 2,91 5,41
7,34 1,10 5,14 9,54 42,7 5,4 32,0 53,4
Fosfatasa alcalina
ALP 405 AA líquida 181 18 145 217 631 63 505 757
(U/l)
(U/l)
deshidrogenasa
(U/l)
LDH-L 168 17 134 202 386 39 309 463
Lipasa
(U/l)
Lote: 1511180330 Nivel 1: 180330 Nivel 2: 180330
870900000 / 25 p. 19/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Albúmina
Albúmina AA 4,09 0,31 3,48 4,70 3,02 0,27 2,48 3,56
(g/dl)
1,35 0,21 0,94 1,76 5,65 0,71 4,24 7,06
Fosfatemia UV AA 4,08 0,37 3,35 4,81 7,78 0,59 6,61 8,95
(mg/dl)
67,4 8,5 50,5 84,3 32,5 4,1 24,4 40,6
Lactato
Lactate 39,5 3,6 32,4 46,6 11,4 1,1 9,3 13,5
(mg/dl)
127 16 95 159 50,6 6,4 37,9 63,3
(mg/dl) monofase AA
(mg/dl)
UIBC
(ug/dl)
(mg/dl)
(-) No asignado
Lote: 1511180330 Nivel 1: 180330 Nivel 2: 180330
870900000 / 25 p. 20/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
4,06 0,61 2,84 5,28 4,50 0,68 3,15 5,85
8,09 1,22 5,66 10,52 43,1 5,4 32,3 53,9
Fosfatasa alcalina
ALP 405 AA líquida 187 19 150 224 663 67 530 796
(U/l)
(U/l)
deshidrogenasa
(U/l)
LDH-L 173 18 138 208 389 39 311 467
Lipasa
(U/l)
Lote: 1511180330 Nivel 1: 180330 Nivel 2: 180330
870900000 / 25 p. 21/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Acido úrico
(mg/dl)
Albúmina
Albúmina AA 4,02 0,30 3,42 4,62 2,97 0,27 2,44 3,50
(g/dl)
Bilirrubina directa
(mg/dl)
Bilirrubina total
Calcio
(mg/dl)
Cloruro Electrodo
98 5 88 108 82,8 4,2 74,5 91,1
Colesterol
(mg/dl)
1,61 0,24 1,13 2,09 6,04 0,76 4,53 7,55
Fosfatemia UV AA 4,27 0,39 3,50 5,04 7,70 0,58 6,54 8,86
(mg/dl)
(mg/dl)
Glucose HK 82,0 6,2 69,7 94,3 271 21 230 312
68,4 8,6 51,3 85,5 31,9 4,0 23,9 39,9
Hierro
(ug/dl)
Lactato
Lactate 41,2 3,7 33,8 48,6 10,2 0,9 8,4 12,0
(mg/dl)
126 16 94 158 46,5 5,8 34,9 58,1
(mg/dl) monofase AA
Magnesio
Magnesium CPZ 2,09 0,32 1,46 2,72 4,41 0,53 3,35 5,47
(mg/dl)
Potasio Electrodo
3,92 0,20 3,53 4,31 6,15 0,31 5,53 6,77
Sodio Electrodo
142 7 128 156 125 7 112 138
187 14 159 215 71,0 5,4 60,3 81,7
(mg/dl) líquida
UIBC
(ug/dl)
31,4 4,7 22,0 40,8 90,3 10,9 68,6 112,0
(mg/dl) líquida
(-) No asignado
Lote: 1511180330 Nivel 1: 180330 Nivel 2: 180330
870900000 / 25 p. 22/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Alanina aminotrans-
Amilasa
(U/l)
Colinesterasa
Cholinesterase 7788 779 6230 9346 5433 544 4346 6520
(U/l)
Creatina kinasa
(U/l)
2,94 0,44 2,06 3,82 3,83 0,58 2,68 4,98
7,43 1,12 5,20 9,66 42,9 5,4 32,2 53,6
Fosfatasa alcalina
(U/l) ALP 405 AA líquida 183 19 146 220 618 62 494 742
deshidrogenasa
(U/l) LDH-L 172 17 138 206 392 39 314 470
Lipasa
(U/l)
Lote: 1511180330 Nivel 1: 180330 Nivel 2: 180330
870900000 / 25 p. 23/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Potasio
3,82 0,19 3,44 4,20 6,09 0,31 5,48 6,70
(mEq/l)
Sodio
141 7 127 155 122 6 110 134
(mEq/l)
Cloruro
93,7 4,7 84,3 103,1 79,1 4,0 71,2 87,0
(mEq/l)
1,13 0,10 0,93 1,33 1,38 0,15 1,08 1,68
(mmol/l)
0,90 0,09 0,72 1,08 1,27 0,14 0,99 1,55
(mmol/l)
Litio
0,59 0,08 0,43 0,75 1,79 0,16 1,47 2,11
(mmol/l)
Lote: 1511180330 Nivel 1: 180330 Nivel 2: 180330

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870900000 / 25 p. 24/24 UR151201
Standatrol S-E
Lote: 1601182850
C 2 niveles
Nivel 1: 182850
Nivel 2: 182850



PRESENTACION
870900000 / 26 p. 1/24
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo
870900000 / 26 p. 2/24
Standatrol S-E
2 niveles
Lote: 1601182850
Nível 1: 182850
Nível 2: 182850

correspondentes.
PROCEDIMENTO
- 6 frascos x 5 ml (Cód. 1937553).
PRECAUÇÕES
870900000 / 26 p. 3/24
Símbolos
C
P
Xn

Nocivo
Europeia


Xi
Irritante
H Data de validade
 Não congelar
Calibr. Calibrador
b Controle
F Risco biológico

b Controle Positivo
870900000 / 26 p. 4/24
INDICE
Página
Técnica manual
Metabolitos................................................................................................................... 6-7
Enzimas....................................................................................................................... 8
Targa BT 3000
Metabolitos................................................................................................................... 9-10
Enzimas....................................................................................................................... 11
Selectra 1 / 2 / E
Metabolitos................................................................................................................... 12
Enzimas....................................................................................................................... 13

Metabolitos................................................................................................................... 14-15
Enzimas....................................................................................................................... 16

Metabolitos................................................................................................................... 17-18
Enzimas....................................................................................................................... 19

Metabolitos................................................................................................................... 20
Emzimas...................................................................................................................... 21

Metabolitos................................................................................................................... 22
Emzimas...................................................................................................................... 23

Iones............................................................................................................................ 24
870900000 / 26 p. 5/24
NIVEL 1 NIVEL 2
(g/dl) Albúmina AA 4,4 3,7 5,1 3,0 2,5 3,5
Bilirrubina directa Bilirrubina 2,3 1,6 3,0 8,7 6,1 11,3
(mg/l) Bilirrubina Directa AA 2,9 2,0 3,8 9,8 6,9 12,7
Calcio Ca-Color 8,6 7,4 9,8 11 9 13
(mg/dl) Ca-Color AA 8,4 7,2 9,6 11 9 13
(mg/l) Creatinina directa 10 8 13 40 32 48
Técnica cinética
Creatinina 26 20 33 71 57 85
Hierro Fer-color 212 161 263 58 41 75
(ug/dl) Fer-color AA 219 166 272 51 36 66
Magnesio
Mg-color AA 2,0 1,4 2,6 4,1 3,1 5,1
(mg/dl)
UIBC
(ug/dl)
(-) No asignado
870900000 / 26 p. 6/24
NIVEL 1 NIVEL 2
Urea Urea color 2R 0,42 0,29 0,55 1,04 0,79 1,29
(g/l) Uremia 0,30 0,21 0,39 1,00 0,76 1,24
Lote: 1601182850 Nivel 1: 182850 Nivel 2: 182850
870900000 / 26 p. 7/24
NIVEL 1 NIVEL 2
(U/l)
(U/l)
(U/l) CK NAC UV AA 112 90 134 386 309 463
(U/l) ALP 405 AA líquida 182 127 237 610 458 763
(U/l)) LDH-P UV AA 447 358 536 939 751 1127
Lote: 1601182850 Nivel 1: 182850 Nivel 2: 182850
870900000 / 26 p. 8/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Albúmina
Albúmina AA 3,78 0,29 3,21 4,35 2,96 0,27 2,43 3,49
(g/dl)
Cloruro Electrodo
103 5 93 113 85,9 4,3 77,3 94,5
Fosfatemia UV AA 4,14 0,38 3,39 4,89 7,41 0,56 6,30 8,52
(mg/dl)
78,2 9,8 58,6 97,8 32,1 4,0 24,1 40,1
Lactato
Lactate 37,2 3,4 30,5 43,9 9,41 0,85 7,72 11,10
(mg/dl)
135 17 101 169 54,4 6,8 40,8 68,0
(mg/dl) monofase AA
Magnesio
Mg-color AA 2,00 0,30 1,40 2,60 4,34 0,52 3,30 5,38
(mg/dl)
Potasio Electrodo
3,98 0,20 3,58 4,38 6,00 0,30 5,40 6,60
Proteínas Totales
(g/dl)
Sodio Electrodo
142 7 128 156 125 7 112 138
UIBC
(ug/dl)
870900000 / 26 p. 9/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
(mg/dl)
(-) No asignado
Lote: 1601182850 Nivel 1: 182850 Nivel 2: 182850
870900000 / 26 p. 10/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Fosfatasa alcalina
ALP 405 AA líquida 212 21 170 254 723 73 578 868
(U/l)
(U/l)
deshidrogenasa
LDH-L 166 17 133 199 358 36 286 430
Lipasa
(U/l)
Lote: 1601182850 Nivel 1: 182850 Nivel 2: 182850
870900000 / 26 p. 11/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Albúmina
Albúmina AA 4,07 0,31 3,46 4,68 3,03 0,28 2,48 3,58
(g/dl)
Fosfatemia UV AA 4,23 0,38 3,47 4,99 8,23 0,62 7,00 9,46
(mg/dl)
74,3 9,3 55,7 92,9 35,7 4,5 26,8 44,6
Lactato
Lactate 37,3 3,4 30,6 44,0 8,97 0,81 7,36 10,58
(mg/dl)
116 15 87 145 43,7 5,5 32,8 54,6
(mg/dl) monofase AA
Magnesio
Mg-color AA 2,30 0,35 1,61 2,99 4,19 0,51 3,18 5,20
(mg/dl)
Proteínas Totales
(g/dl)
UIBC

(-) No asignado
Lote: 1601182850 Nivel 1: 182850 Nivel 2: 182850
870900000 / 26 p. 12/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Alanina aminotransfe- GPT (ALT) UV AA 32,3 4,1 24,2 40,4 94,6 12 70,9 118,3
4,21 0,63 2,95 5,47 4,54 0,68 3,18 5,90
Fosfatasa alcalina
(U/l) ALP 405 AA líquida 178 23 133 223 572 72 429 715
(U/l)
(U/l)
LDH-L 166 21 124 208 388 49 291 485
Lipasa
(U/l)
Lote: 1601182850 Nivel 1: 182850 Nivel 2: 182850
870900000 / 26 p. 13/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Albúmina
Albúmina AA 3,93 0,30 3,34 4,52 2,89 0,26 2,37 3,41
(g/dl)
0,85 0,10 0,66 1,04 1,08 0,12 0,84 1,32
Cloruro Electrodo
(mEq/l) 99,3 5 89,4 109,2 83,6 4,2 75,2 92,0
ion selectivo
1,30 0,20 0,91 1,69 5,75 0,72 4,31 7,19
Fosfatemia UV AA 4,13 0,37 3,39 4,87 7,68 0,58 6,53 8,83
(mg/dl)
68,1 8,5 51,1 85,1 28,9 3,6 21,7 36,1
HDL Cholesterol fast 65,3 8,2 49,0 81,6 28,9 3,6 21,7 36,1
Lactato
Lactate 35,3 3,2 28,9 41,7 8,86 0,80 7,27 10,45
(mg/dl)
150 19 112 188 60,8 7,6 45,6 76,0
(mg/dl) monofase AA
Litio Electrodo
0,65 0,09 0,47 0,83 1,70 0,16 1,39 2,01
(mg/dl)
Magnesium CPZ 2,06 0,31 1,44 2,68 4,66 0,56 3,54 5,78
Potasio Electrodo
4,04 0,20 3,64 4,44 6,02 0,30 5,42 6,62
870900000 / 26 p. 14/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Sodio Electrodo
146 8 131 161 127 7 114 140
(mg/dl)
UIBC
(ug/dl)
(mg/dl) Urea UV cin.AA líquida 31,8 4,8 22,3 41,3 102 12 78 126
(-) No asignado
Lote: 1601182850 Nivel 1: 182850 Nivel 2: 182850
870900000 / 26 p. 15/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
4,65 0,70 3,25 6,05 4,74 0,71 3,32 6,16
9,22 1,39 6,45 11,99 37,5 4,7 28,1 46,9
Fosfatasa alcalina
ALP 405 AA líquida 158 16 126 190 564 57 451 677
(U/l)
(U/l)
(U/l)
LDH-L 166 17 133 199 358 36 286 430
Lipasa
(U/l)
Lote: 1601182850 Nivel 1: 182850 Nivel 2: 182850
870900000 / 26 p. 16/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Albúmina
Albúmina AA 3,78 0,29 3,21 4,35 2,96 0,27 2,43 3,49
(g/dl)
Cloruro Electrodo
103 5 93 113 85,9 4,3 77,3 94,5
Fosfatemia UV AA 3,98 0,36 3,26 4,70 7,41 0,56 6,30 8,52
(mg/dl)
78,2 9,8 58,6 97,8 29,5 3,7 22,1 36,9
Lactato
Lactate 37,2 3,4 30,5 43,9 8,97 0,81 7,36 10,58
(mg/dl)
125 16 94 156 52,4 6,6 39,3 65,5
(mg/dl) monofase AA
(mg/dl)
Magnesium CPZ 1,99 0,30 1,39 2,59 4,54 0,55 3,45 5,63
Potasio Electrodo
3,98 0,20 3,58 4,38 6,00 0,30 5,40 6,60
(g/dl)
Total Protein 6,49 0,39 5,71 7,27 4,20 0,25 3,70 4,70
Sodio Electrodo
142 7 128 156 125 7 112 138
870900000 / 26 p. 17/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
(mg/dl)
UIBC
(ug/dl)
(mg/dl)
(-) No asignado
Lote: 1601182850 Nivel 1: 182850 Nivel 2: 182850
870900000 / 26 p. 18/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
32,0 4,0 24,0 40,0 100 13 75 125
3,92 0,59 2,74 5,10 4,38 0,66 3,07 5,69
8,40 1,26 5,88 10,92 41,1 5,2 30,8 51,4
Fosfatasa alcalina
ALP 405 AA líquida 189 19 151 227 669 67 535 803
(U/l)
(U/l)
deshidrogenasa
(U/l)
LDH-L 166 17 133 199 358 36 286 430
Lipasa
(U/l)
Lote: 1601182850 Nivel 1: 182850 Nivel 2: 182850
870900000 / 26 p. 19/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Albúmina
Albúmina AA 4,00 0,30 3,40 4,60 2,90 0,26 2,38 3,42
(g/dl)
1,21 0,18 0,85 1,57 5,59 0,70 4,19 6,99
Fosfatemia UV AA 4,42 0,40 3,62 5,22 8,07 0,61 6,86 9,28
(mg/dl)
66,4 8,3 49,8 83,0 26,8 3,4 20,1 33,5
Lactato
Lactate 36,7 3,3 30,1 43,3 11,3 1,0 9,3 13,3
(mg/dl)
125 16 94 156 53,6 6,7 40,2 67,0
(mg/dl) monofase AA
(mg/dl)
UIBC
(ug/dl)
(mg/dl)
(-) No asignado
Lote: 1601182850 Nivel 1: 182850 Nivel 2: 182850
870900000 / 26 p. 20/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
4,18 0,63 2,93 5,43 4,70 0,71 3,29 6,11
8,69 1,31 6,08 11,30 41,1 5,2 30,8 51,4
Fosfatasa alcalina
ALP 405 AA líquida 187 19 150 224 672 67 538 806
(U/l)
(U/l)
deshidrogenasa
(U/l)
LDH-L 173 18 138 208 371 37 297 445
Lipasa
(U/l)
Lote: 1601182850 Nivel 1: 182850 Nivel 2: 182850
870900000 / 26 p. 21/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Acido úrico
(mg/dl)
Albúmina
Albúmina AA 3,97 0,30 3,37 4,57 2,85 0,26 2,34 3,36
(g/dl)
Bilirrubina directa
(mg/dl)
Bilirrubina total
(mg/dl)
Calcio
(mg/dl)
Cloruro Electrodo
97,4 4,9 87,7 107,1 80,5 4,1 72,4 88,6
Colesterol
(mg/dl)
1,35 0,21 0,94 1,76 5,78 0,73 4,33 7,23
Fosfatemia UV AA 4,52 0,41 3,71 5,33 7,76 0,58 6,60 8,92
(mg/dl)
(mg/dl)
Glucose HK 81,0 6,1 68,8 93,2 276 21 235 317
73,0 9,2 54,7 91,3 28,7 3,6 21,5 35,9
Hierro
(ug/dl)
Lactato
Lactate 37,2 3,4 30,5 43,9 8,80 0,79 7,22 10,38
(mg/dl)
128 16 96 160 52,3 6,6 39,2 65,4
(mg/dl) monofase AA
Magnesio
Magnesium CPZ 2,10 0,32 1,47 2,73 4,68 0,56 3,56 5,80
(mg/dl)
Potasio Electrodo
3,97 0,20 3,57 4,37 6,11 0,31 5,50 6,72
Sodio Electrodo
142 7 128 156 123 6 111 135
177 14 150 204 78,0 5,9 66,3 89,7
(mg/dl) líquida
UIBC
(ug/dl)
31,9 4,8 22,3 41,5 89,3 10,7 67,9 110,7
(mg/dl) líquida
(-) No asignado
Lote: 1601182850 Nivel 1: 182850 Nivel 2: 182850
870900000 / 26 p. 22/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Alanina aminotrans-
ferasa (GPT/ALT) (U/l) GPT (ALT) UV AA líquida 32,2 4,1 24,1 40,3 99,3 12,4 74,5 124,1
Amilasa
(U/l)
Colinesterasa
Cholinesterase 2411 241 1929 2893 4390 439 3512 5268
(U/l)
Creatina kinasa
(U/l)
3,33 0,50 2,33 4,33 4,19 0,63 2,93 5,45
7,67 1,15 5,37 9,97 42,1 5,3 31,6 52,6
Fosfatasa alcalina
(U/l) ALP 405 AA líquida 158 16 126 190 515 52 412 618

deshidrogenasa
(U/l) LDH-L 171 17 137 205 356 36 285 427
Lipasa
(U/l)
Lote: 1601182850 Nivel 1: 182850 Nivel 2: 182850
870900000 / 26 p. 23/24
NIVEL 1 NIVEL 2
1 D.S. 1 D.S.
Potasio
3,88 0,20 3,49 4,27 6,00 0,30 5,40 6,60
(mEq/l)
Sodio
139 7 125 153 120 6 108 132
(mEq/l)
Cloruro
92,3 4,6 83,1 101,5 78,9 4,0 71,0 86,8
(mEq/l)
0,88 0,08 0,72 1,04 1,20 0,13 0,94 1,46
(mmol/l)
0,75 0,08 0,60 0,90 1,04 0,12 0,81 1,27
(mmol/l)
Litio
0,58 0,08 0,42 0,74 1,74 0,16 1,43 2,05
(mmol/l)
Lote: 1601182850 Nivel 1: 182850 Nivel 2: 182850

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
UR160121
870900000 / 26 p. 24/24
Suero Anti-humano
(poliespecífico)
(Anti-IgG policlonal + anti-C3d monoclonal)
Para realizar Pruebas Antiglobulina (Coombs) Directa o Indirecta

Las experiencias descriptas por Coombs, Mourant y Race en El reactivo está listo para usar. No debe diluirse.
1945 establecieron que las Pruebas Antiglobulina Humana
resultaban los mejores métodos para detectar anticuerpos PRECAUCIONES
sensibilizantes pero no directamente aglutinantes. Origi- El Reactivo Provisto es para uso diagnóstico "in vitro" y
nalmente, se hacía referencia a antígenos del sistema Rh está destinado a uso profesional por personal calificado con
pero experiencias posteriores probaron el valor de estas comprobada competencia en inmunohematología.
pruebas en la detección de anticuerpos en casi todos los No utilizar el reactivo fuera de la fecha de vencimiento.
grupos sanguíneos de importancia clínica, siendo empleadas La azida puede reaccionar con las cañerías de plomo o cobre
actualmente en los siguientes casos: generando compuestos explosivos. Al eliminar el reactivo,
se debe dejar correr grandes cantidades de agua.
Prueba Antiglobulina Indirecta
- Screening de suero de donantes y pacientes para anti-
cuerpos irregulares.
El reactivo y las muestras deben descartarse de acuerdo a
- Pruebas de compatibilidad previas a la transfusión.
la normativa local vigente.
- Fenotipo de glóbulos rojos.
- Identificación y titulación de anticuerpos encontrados en
suero o eluatos.
ALMACENAMIENTO
Prueba Antiglobulina Directa El Reactivo Provisto es estable en refrigerador (2-10oC) hasta
- Diagnóstico de laboratorio de anemia hemolítica y enfer- la fecha de vencimiento indicada en la caja. No congelar ni
medad hemolítica del recién nacido. exponer a temperaturas elevadas.
- Investigación de reacciones dudosas en una transfusión.
- Investigación de enfermedades autoinmunes que invo- INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
lucran la unión de inmunoglobulinas y/o fracciones del REACTIVOS
complemento a los glóbulos rojos. Desechar el reactivo si se observa contaminación del mis-
mo. No debe utilizarse si presenta turbidez, presencia de
FUNDAMENTOS DEL METODO partículas o precipitado.
El agregado de Suero Anti-humano (poliespecífico) a gló-
bulos rojos cubiertos de inmunoglobulinas y/o fragmentos MUESTRA
de complemento produce una aglutinación de los glóbulos Glóbulos rojos
rojos visible macroscópicamente. a) Recolección: la sangre debe ser obtenida asépticamente,
con o sin anticoagulante.
REACTIVO PROVISTO b) Aditivos: pueden emplearse como anticoagulantes:
Suero Anti-humano (poliespecífico): mezcla de anti-IgG EDTA, heparina, ACD (ácido cítrico, citrato, dextrosa),
policlonal (producido por inmunización de conejos con IgG CPD (citrato, fosfato, dextrosa) o CPDA-1 (citrato, fosfato,
humana purificada) con anti-C3d monoclonal obtenido por dextrosa, adenina). Puede utilizarse Anticoagulante W de
cultivo de línea celular BRIC-8 de hibridoma murino secre- Wiener lab.
toras de IgM. El reactivo contiene colorante verde (que no c) Sustancias interferentes conocidas: las muestras
afecta las propiedades del reactivo) y < 1 g/l de azida sódica contaminadas o con hemólisis marcada no deben utilizarse.
como conservante. d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento:
las muestras deben ser analizadas lo antes posible. Si el
REACTIVOS NO PROVISTOS análisis no se realiza en el momento, las muestras deberán
- Reactivos para la determinación de grupos sanguíneos. conservarse entre 2-10oC. Si se utilizó heparina o EDTA,
De acuerdo a la técnica a emplear puede requerirse adi- la tipificación debe llevarse a cabo dentro de las 48 horas
cionalmente: de obtenida la muestra. Las muestras obtenidas con ACD,
- Solución fisiológica. CPD o CPDA-1 pueden ser ensayadas hasta los 35 días
- Buffer fosfato (PBS) pH 7,0 ± 0,2. de extraídas. Si se emplean coágulos, deberá efectuarse la
- Solución fisiológica de baja fuerza iónica (LISS). tipificación dentro de los 7 días de obtenida la muestra. Los
870910000 / 00 p. 1/6
coágulos no deben ser refrigerados antes de las pruebas
directas. Cuando se efectúan pruebas antiglobulina directas, 1) Colocar en un tubo de hemólisis 1 gota de suero a probar.
la sangre debe ser preferentemente fresca (menos de 24 2) Agregar 1 gota de glóbulos rojos a probar al 3% en LISS.
horas de la extracción). 3) Mezclar e incubar a 37oC durante 15 minutos en baño
Las muestras de sangre de donantes pueden ser analizadas de agua.
hasta su fecha de vencimiento. 4) Lavar los glóbulos 3 veces con PBS. Asegurarse de
Los sueros deben conservarse no más de 24 horas a 2-10oC remover la mayor cantidad posible de solución salina al
o 1 mes a -20oC. Sueros almacenados a -20oC o menos por final de cada lavado, de manera de obtener un botón
períodos prolongados pierden la actividad del complemento. celular “seco”. Descartar completamente el sobrenadante
Las pruebas antiglobulínicas directas deben realizarse en luego del último lavado.
eritrocitos frescos obtenidos con EDTA para evitar la sensi- 5) Agregar 2 gotas de Suero Anti-humano (poliespecífico)
bilización “in vitro” con factores del complemento. al botón de células. Mezclar perfectamente y centrifugar
durante 15 segundos a 1.000 g.
MATERIAL REQUERIDO (no provisto) 6) Agitar suavemente el tubo a fin de deshacer el botón
- Centrífuga celular y observar macroscópicamente. La observación
- Baño de agua a 37oC puede facilitarse si se emplea una fuente de luz difusa.
- Tubos de hemólisis Tener en cuenta que agitaciones demasiado vigorosas
pueden dar lugar a lecturas negativas de un aglutinado
débil (falso negativo).
PROCEDIMIENTO 7) Los resultados negativos deben confirmarse por
Este reactivo ha sido estandarizado según los procedi- adición de glóbulos rojos sensibilizados con IgG débiles
mientos detallados a continuación; su desempeño en el (Control de Coombs).
uso mediante otras técnicas no puede ser garantizado. III- PRUEBA ANTIGLOBULINA DIRECTA
I- PRUEBA ANTIGLOBULINA INDIRECTA (en solución Se emplea para demostrar la absorción “in vivo” de IgG y/o frac-
ciones del complemento en la superficie de los glóbulos rojos.
salina de fuerza iónica normal)
1) Preparar una suspensión de glóbulos rojos a probar
1) En un tubo de hemólisis colocar 2 gotas del suero a probar.
en PBS al 3%.
2) Agregar 1 gota de suspensión de glóbulos rojos a
2) En un tubo de hemólisis colocar 1 gota de esta suspensión.
probar al 3%, lavados 3 veces y resuspendidos en PBS.
3) Lavar los glóbulos 3 veces con PBS. Asegurarse de
El gotero provisto dispensa un volumen de 50 ± 5 ul. Es
remover la mayor cantidad posible de solución salina al
importante que se mantenga la relación reactivo:células
final de cada lavado, de manera de obtener un botón
en todos los sistemas de ensayo.
celular “seco”. Descartar completamente el sobrenadante
3) Mezclar e incubar a 37oC durante 30-60 minutos.
luego del último lavado.
4) Lavar los glóbulos 3 veces con PBS. Asegurarse de
4) Agregar 2 gotas de Suero Anti-humano (poliespecífico)
remover la mayor cantidad posible de solución salina al
al botón de células. Mezclar perfectamente y centrifugar
final de cada lavado, de manera de obtener un botón
celular “seco”. Descartar completamente el sobrenadante
5) Agitar suavemente el tubo a fin de deshacer el botón
luego del último lavado.
celular y observar macroscópicamente. La observación
5) Agregar 2 gotas de Suero Anti-humano (poliespecífico)
puede facilitarse si se emplea una fuente de luz difusa.
al botón de células. Mezclar perfectamente y centrifugar
Tener en cuenta que agitaciones demasiado vigorosas
6) Agitar suavemente el tubo a fin de deshacer el botón
celular y observar macroscópicamente. La observación 6) Los resultados negativos deben confirmarse por
puede facilitarse si se emplea una fuente de luz difusa. adición de glóbulos rojos sensibilizados con IgG débiles
Tener en cuenta que agitaciones demasiado vigorosas (Control de Coombs).
7) Los resultados negativos deben confirmarse por INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS
adición de glóbulos rojos sensibilizados con IgG débiles La observación de aglutinación (con cualquiera de las téc-
(Control de Coombs). nicas empleadas) en presencia del Suero Anti-humano
II- PRUEBA ANTIGLOBULINA INDIRECTA (en solución (poliespecífico) indica la presencia de IgG o componentes
fisiológica de baja fuerza iónica). del complemento en la membrana del glóbulo rojo; la reac-
El empleo de esta solución permite reducir el tiempo de ción es positiva.
incubación a 15 minutos. Si no se observa aglutinación, la reacción es negativa.
Los glóbulos rojos deben lavarse 2 veces con PBS y una
vez con LISS. Finalmente preparar con esta solución una METODO DE CONTROL DE CALIDAD
suspensión de glóbulos rojos al 3%. Debe realizarse un control de los reactivos al comienzo de
cada jornada de trabajo con glóbulos rojos sensibilizados
870910000 / 00 p. 2/6
con IgG, como por ejemplo, Glóbulos R1r sensibilizado con SIMBOLOS
Anti-Rh (D) débil. Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO Este producto cumple con los requerimientos previstos
Reacciones falsas positivas y falsas negativas pueden ocurrir
por las siguientes causas: C por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios
- Contaminación química o bacteriana de la muestra u otros
materiales empleados para la prueba. P Representante autorizado en la Comunidad Europea
- Lavado inadecuado de las células. Los pasos de lavado de-
ben completarse lo antes posible y sin interrupción. Retrasos V Uso diagnóstico "in vitro"
en completar los pasos de lavado o en la lectura pueden
ocasionar la disociación del complejo antígeno-anticuerpo
obteniendo resultados falsos negativos o positivos débiles. H Fecha de caducidad
- Todo resto de solución lavadora puede diluir el reactivo más
allá de la concentración óptima de funcionamiento. Por lo l Límite de temperatura (conservar a)
tanto es importante remover la mayor cantidad del líquido
de lavado al finalizar dicho proceso.  No congelar
- Tiempo o temperatura de incubación inadecuados.
- Tiempo o velocidad de centrifugación inadecuados. F Riesgo biológico
- Concentración inadecuada de glóbulos rojos.
- Agitación excesiva para despegar los glóbulos rojos aglutinados. Volumen después de la reconstitución
- Luego de agregar el reactivo Anti-globulina humana, los
Cont. Contenido
ensayos deben ser centrifugados y leídos inmediatamente.
Los eritrocitos positivos en una prueba antiglobulínica directa g Número de lote
no deben utilizarse para una prueba antiglobulínica indirecta.
Los reactivos han sido estandarizados para detectar inmuno- M Elaborado por:
globulinas humanas y fragmentos C3 unidos a los glóbulos
rojos. No son aptos para detectar anticuerpos de otro origen. Xn
Nocivo
PRESENTACION Corrosivo / Caústico

- 1 x 10 ml (Cód. 1443156)
Xi
Irritante
BIBLIOGRAFIA
- Coombs, R.R.A.; Mourant., A.E. and Race, R.R. - Lancet, i Consultar instrucciones de uso
ii:15, 1945.
- Garratty G, Petz LD. “The significance of red cell bound Calibr. Calibrador
complement components in the development of standards
and quality assurance for the anti-complement components b Control
of antiglobulin sera”. Transfusion 19, 1976.
- Wright MS, Issitt PD. Anticomplement and the indirect b Control Positivo
antiglobulin test. Transfusion 19:688-694, 1979.
- Moore BPL. - Serological and immunological methods of
c Control Negativo
the Canadian Red Cross Blood Transfusion Service. 8th ed. h Número de catálogo
Toronto: Hunter Rose, 1980.
- Lachman PJ, Pangburn MK, Oldroyd RG. Breakdown of C3
after complement activation. J Exp Med 156:205-216, 1982.
- Howell P, Giles CM. - A detailed serological study of five
anti-JK sera reacting by the antiglobulin technique. - Vox
Sang 45:129-138, 1983.
- Issit PD Applied blood group serology. 3rd ed. Miami: Mont-
gomery Scientific, 1985.
- Voak D, Downie DM, Moore BPL et al. Quality control of
anti-human globulin test: use of replicate test to improve
performance. Bio Bull 1:41-52, 1986.
- ISBT/ICSH Working Party. International reference polyspeci- M Wiener Laboratorios S.A.I.C.
Wiener lab.
fic antihuman globulin reagents. Vox Sang 53:241-247, 1987. Riobamba 2944
- Walker RH, ed. Technical manual. 11th ed. Bethesda: http://www.wiener-lab.com.ar
American Association of Blood Banks, 1993. Bioquímica
870910000 / 00 p. 3/6 UR110726
Tensioactive
C Detergente para analizadores automáticos
Tensioactive se emplea en los analizadores automáticos Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
para lograr un mejor escurrimiento de los fluidos en los reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
circuitos hidráulicos, evitando así la formación de burbujas
C
que puedan afectar la precisión de los resultados. por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios
REACTIVOS PROVISTOS
Tensioactive: solución de Tween 20® 1%. Detergente no P Representante autorizado en la Comunidad Europea
iónico, biodegradable.
Agua destilada o desmineralizada.
Agregar Tensioactive al agua destilada o desmineralizada l Límite de temperatura (conservar a)
empleada en la proporción indicada en cada analizador.
 No congelar
PRECAUCIONES
El reactivo es para uso diagnóstico "in vitro". F Riesgo biológico
Utilizar el reactivo guardando las precauciones habituales
Cont. Contenido
g Número de lote

Tensioactive: estable en refrigerador (2-10oC) hasta la fecha
de vencimiento indicada en el envase. Xn
Nocivo
NDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS Corrosivo / Caústico

REACTIVOS
La presencia de turbidez o partículas en suspensión es in- Xi
Irritante
dicio de deterioro del producto, en tal caso desechar. Evitar
la contaminación con agentes externos. i Consultar instrucciones de uso

- 1 x 200 ml (Cód. 1999719).
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
861289000 / 00 p. 1/2 UR100521
LINEA LIQUIDA
TG Color
C GPO/PAP AA
Método enzimático para la determinación de triglicéridos
en suero o plasma

Los triglicéridos son lípidos absorbidos en la dieta y también acuerdo a la normativa local vigente.
producidos en forma endógena a partir de los carbohidratos.
Su medición es importante en el diagnóstico y manejo de las ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
hiperlipidemias. Estas enfermedades pueden tener origen ALMACENAMIENTO
genético o ser secundarias a otras tales como nefrosis, Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10oC)
diabetes mellitus y disfunciones endócrinas. El aumento de y al abrigo de la luz hasta la fecha de vencimiento indicada
triglicéridos se ha identificado como un factor de riesgo en en la caja. No mantener a temperaturas elevadas durante
enfermedades ateroscleróticas. lapsos prolongados.

El esquema de reacción es el siguiente: REACTIVOS
lipoprotein lipasa El Reactivo A puede presentar una coloración rosada que
triglicéridos glicerol + ácidos grasos no afecta su funcionamiento.
glicerol kinasa Lecturas del Blanco superiores a 0,250 D.O. o lecturas del
glicerol + ATP glicerol-1-P + ADP Standard anormalmente bajas, son indicios de deterioro del
GPO Reactivo A. En tal caso, desechar.
glicerol-1-fosfato + O2 H2O2 + dihidroxiacetonafosfato
POD MUESTRA
2 H2O2 + 4-AF + clorofenol quinonimina roja
Suero o plasma
a) Recolección: previo ayuno de 12 a 14 horas, obtener
REACTIVOS PROVISTOS
suero o plasma. Separar de los glóbulos rojos dentro de las
A. Reactivo A: solución conteniendo buffer Good (pH 6,8),
2 horas de extracción.
clorofenol, lipoprotein lipasa (LPL), glicerol kinasa (GK), gli-
b) Aditivos: en caso de emplear plasma, se recomienda
cerol fosfato oxidasa (GPO), peroxidasa (POD), adenosina
el uso de Anticoagulante W o heparina para su obtención.
trifosfato (ATP) y 4-aminofenazona (4-AF).
S. Standard*: solución de glicerol 2,26 mmol/l (equivale a
interferencias por bilirrubina hasta 15 mg/dl; hemólisis mar-
2 g/l de trioleína).
cadas no interfieren en la determinación.
Concentraciones finales Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
Buffer Good............................................. 50 mmol/l; pH 6,8 drogas en el presente método.
clorofenol................................................................ 2 mmol/l d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: los
lipoprotein lipasa................................................... ≥ 800 U/l triglicéridos en suero son estables 3 días en refrigerador
GK......................................................................... ≥ 500 U/l (2-10oC). No congelar.
GPO.................................................................... ≥ 1500 U/l
POD....................................................................... ≥ 900 U/l MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
ATP......................................................................... 2 mmol/l - Espectrofotómetro
4-AF..................................................................... 0,4 mmol/l - Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados
- Cubetas espectrofotométricas
REACTIVOS NO PROVISTOS - Baño de agua a 37oC
Calibrador A plus de Wiener lab. para la técnica automática. - Reloj o timer

Reactivos Provistos: listos para usar. - Longitud de onda: 505 nm
Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro". - Volumen de muestra: 10 ul
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales - Volumen de Reactivo A: 1 ml
de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos. - Volumen final de reacción: 1,01 ml

PERFORMANCE
PROCEDIMIENTO a) Reproducibilidad: procesando simultáneamente 20
Homogeneizar la muestra antes de usar, especialmente replicados de las mismas muestras, se obtuvieron los
frente a sueros lechosos. siguientes datos:
En tres cubetas espectrofotométricas marcadas B (Blan- Nivel D.S. C.V.
co), S (Standard) y D (Desconocido) colocar: 0,76 g/l ± 0,039 g/l 0,50 %
B S D 3,73 g/l ± 0,060 g/l 0,16 %
Muestra - - 10 ul b) Recuperación: agregando cantidades conocidas de
Standard - 10 ul - trioleína a distintos sueros, se obtuvo una recuperación
entre 96 y 101% para todo el rango de linealidad del método.
Reactivo A 1 ml 1 ml 1 ml
c) Linealidad: la reacción es lineal hasta 10 g/l de triglicé-
Mezclar, incubar 5 minutos a 37 C o 20 minutos a tem-
o
ridos. Para valores superiores, repetir la determinación con
peratura ambiente (18-25oC). Enfriar y leer en espec- muestra diluida 1:2 con solución fisiológica. Multiplicar el
trofotómetro a 505 nm llevando el aparato a cero con resultado obtenido por la dilución efectuada.
agua destilada. d) Límite de detección: depende del fotómetro empleado.
En espectrofotómetros, el cambio mínimo de concentración
Microtécnica
detectable en las condiciones de reacción descriptas, para
Seguir el procedimiento indicado anteriormente pero
una variación de absorbancia de 0,001 D.O. será aproxima-
utilizando 5 ul de Muestra y 500 ul de Reactivo A.
damente de 0,009 g/l.

Para las instrucciones de programación debe consultarse
el Manual del Usuario del Analizador en uso.
Para la calibración debe emplearse Calibrador A plus de
Wiener lab., de acuerdo a los requerimientos del analizador.
Corregir las lecturas con el Blanco de reactivos y usar las
PRESENTACION
lecturas corregidas para los cálculos.
- 1 x 100 ml (Cód. 1780111).
2 g/l
- 4 x 100 ml (Cód. 1780112).
TG (g/l) = D x factor factor =
S - 4 x 60 ml (Cód. 1009318).

- 4 x 60 ml (Cód. 1009632).
CONVERSION DE UNIDADES - 8 x 50 ml (Cód. 1009274).
Triglicéridos (g/l) = 0,01 x Triglicéridos (mg/dl)
Triglicéridos (mg/dl) x 0,0113 = Triglicéridos (mmol/l) BIBLIOGRAFIA
- Fossati, P - Clin. Chem. 28/10:2077 (1982).
METODO DE CONTROL DE CALIDAD - McGowan, M.W.; et al - Clin. Chem. 29/3: 538 (1983).
Procesar 2 niveles de un material de control de calidad - Tietz, N.W. - Fundamentals of Clin. Chem. - W.B., Saunders
(Standatrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas Co. - Philadelphia, Pa. (1970), pág. 329.
- Expert Panel of National Cholesterol Education Program
de triglicéridos, con cada determinación.
- JAMA 285/19:2486 (2001).
El panel de expertos del National Cholesterol Education Pro-
gram (NCEP) provee los siguientes valores de Triglicéridos:
Deseable: < 1,50 g/l
Moderadamente elevado a elevado: 1,50 - 1,99 g/l
Elevado: 2,00 - 4,99 g/l
Muy elevado: ≥ 5,00 g/l
No obstante, se recomienda que cada laboratorio establezca

Los reductores disminuyen la respuesta de color, mientras
que los oxidantes colorean el Reactivo A aumentando los
Blancos.
Las contaminaciones con glicerol producen resultados fal-
samente aumentados.
864126522 / 01 p. 2/9
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
864126522 / 01 p. 3/9 UR120903
TG Color
C GPO/PAP AA
Método enzimático para la determinación de triglicéridos
en suero o plasma
SIGNIFICACION CLINICA neizar y fechar.

Los triglicéridos son lípidos absorbidos en la dieta y también - 4 x 50 ml: reconstituir el contenido de un vial de Reactivo A
producidos en forma endógena a partir de los carbohidratos. con una porción de Reactivo B y luego transferir al frasco de
Su medición es importante en el diagnóstico y manejo de las Reactivo B enjuagando varias veces. Homogeneizar y fechar.
hiperlipidemias. Estas enfermedades pueden tener origen
genético o ser secundarias a otras tales como nefrosis, PRECAUCIONES
diabetes mellitus y disfunciones endócrinas. El aumento de Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
triglicéridos se ha identificado como un factor de riesgo en Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
enfermedades ateroscleróticas. de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
FUNDAMENTOS DEL METODO acuerdo a la normativa local vigente.
El esquema de reacción es el siguiente:
lipoprotein lipasa ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
triglicéridos glicerol + ácidos grasos ALMACENAMIENTO
glicerol kinasa Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10oC)
glicerol + ATP glicerol-1-P + ADP hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No man-
GPO tener a temperaturas elevadas durante lapsos prolongados.
glicerol-1-fosfato + O2 H2O2 + dihidroxiacetonafosfato Reactivo de Trabajo: es estable 30 días en refrigerador
POD (2-10oC).
2 H2O2 + 4-AF + clorofenol quinonimina roja
REACTIVOS PROVISTOS REACTIVOS
A. Reactivo A: viales conteniendo lipoprotein lipasa, glicerol El Reactivo de Trabajo puede presentar una coloración
kinasa (GK), glicerol fosfato oxidasa (GPO), peroxidasa rosada que no afecta su funcionamiento.
(POD), adenosina trifosfato (ATP) y 4-aminofenazona (4-AF). Lecturas del Blanco superiores a 0,160 D.O. o lecturas del
B. Reactivo B: solución de buffer Good conteniendo clo- Standard anormalmente bajas, son indicios de deterioro del
rofenol, pH 7,5. Reactivo. En tal caso, desechar.
S. Standard: solución de glicerol 2,26 mmol/l (equivale a
2 g/l de trioleína). MUESTRA
Concentraciones finales Suero o plasma
Good........................................................ 50 mmol/l; pH 7,5 a) Recolección: previo ayuno de 12 a 14 horas, obtener
clorofenol................................................................ 2 mmol/l suero o plasma. Separar de los glóbulos rojos dentro de las
lipoprotein lipasa................................................... ≥ 800 U/l 2 horas de extracción.
GK......................................................................... ≥ 500 U/l b) Aditivos: en caso de emplear plasma, se recomienda
GPO.................................................................... ≥ 1500 U/l el uso de Anticoagulante W o heparina para su obtención.
POD....................................................................... ≥ 900 U/l c) Sustancias interferentes conocidas: los sueros con
ATP......................................................................... 2 mmol/l hemólisis intensa o marcadamente ictéricos producen resul-
4-AF..................................................................... 0,4 mmol/l tados erróneos, por lo que no deben ser usados.
REACTIVOS NO PROVISTOS drogas en el presente método.
Calibrador A plus de Wiener lab. cuando se emplea la d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: los
técnica automática. triglicéridos en suero son estables 3 días en refrigerador
(2-10oC). No congelar.
Standard: listo para usar. MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
Reactivo de Trabajo: - Espectrofotómetro o fotocolorímetro.
- 5/10 x 20 ml: agregar 20 ml de Reactivo B a un vial de - Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados.
Reactivo A. Mezclar hasta disolución completa. Homoge- - Tubos o cubetas espectrofotométricas.
870920022 / 00 p. 1/9
- Baño de agua a 37oC. No obstante, se recomienda que cada laboratorio establezca
- Reloj o timer. sus propios intervalos o valores de referencia.

- Longitud de onda: 505 nm en espectrofotómetro o 490- Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
530 nm en fotocolorímetro con filtro verde. Los reductores disminuyen la respuesta de color, mientras
- Temperatura de reacción: 37oC que los oxidantes colorean el Reactivo aumentando los
- Tiempo de reacción: 5 minutos Blancos.
- Volumen de muestra: 10 ul Las contaminaciones con glicerol producen resultados
- Volumen de reactivo: 1 ml falsamente aumentados.
PERFORMANCE
a) Reproducibilidad: procesando simultáneamente repli-
PROCEDIMIENTO cados de las mismas muestras en 10 días diferentes, se
Homogeneizar la muestra antes de usar, especialmente obtuvieron los siguientes datos:
frente a sueros lechosos. Nivel D.S. C.V.
En tres tubos o cubetas espectrofotométricas marcadas 1,14 g/l ± 0,021 g/l 1,82 %
B (Blanco), S (Standard) y D (Desconocido) colocar: 7,41 g/l ± 0,074 g/l 2,11 %
B S D
Muestra - - 10 ul trioleína a distintos sueros, se obtuvo una recuperación entre
99,2 y 100,7% para todo el rango de linealidad del método.
Standard - 10 ul -
c) Linealidad: la reacción es lineal hasta 10 g/l de triglicé-
Reactivo de Trabajo 1 ml 1 ml 1 ml ridos. Para valores superiores, repetir la determinación con
muestra diluida 1:2 con solución fisiológica. Multiplicar el
Mezclar, incubar 5 minutos a 37oC o 20 minutos a tempe-
resultado obtenido por la dilución efectuada.
ratura ambiente (18-25oC). Enfriar y leer en espectrofotó-
d) Límite de detección: depende del fotómetro empleado.
metro a 505 nm o en fotocolorímetro con filtro verde (490-
En espectrofotómetros, el cambio mínimo de concentración
530 nm) llevando el aparato a cero con agua destilada.
detectable en las condiciones de reacción descriptas, para
una variación de absorbancia de 0,001 D.O. será aproxima-
damente de 0,008 g/l.
El color de reacción final es estable 60 minutos, por lo que la
Para las instrucciones de programación debe consultarse
el Manual del Usuario del Analizador en uso.
Para la calibración debe emplearse Calibrador A plus de
Corregir las lecturas con el Blanco de reactivos y usar las
Wiener lab., de acuerdo a los requerimientos del analizador.
lecturas corregidas para los cálculos.
2 g/l PRESENTACION
TG g/l = D x factor factor = - 5 x 20 ml (Cód. 1780107).
S - 10 x 20 ml (Cód. 1780101).
- 4 x 50 ml (Cód. 1780105).
Triglicéridos (g/l) = 0,01 x Triglicéridos (mg/dl) BIBLIOGRAFIA
Triglicéridos (mg/dl) x 0,0113 = Triglicéridos (mmol/l) - Fossati, P - Clin. Chem. 28/10:2077 (1982).
- McGowan, M.W.; et al - Clin. Chem. 29/3: 538 (1983).
METODO DE CONTROL DE CALIDAD - Tietz, N.W. - Fundamentals of Clin. Chem. - W.B., Saunders
Procesar 2 niveles de un material de control de calidad Co. - Philadelphia, Pa. (1970), pág. 329.
(Stan-datrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas - Expert Panel of National Cholesterol Education Program
de triglicéridos, con cada determinación. - JAMA 285/19:2486 (2001).
El panel de expertos del National Cholesterol Education Pro-
gram (NCEP) provee los siguientes valores de Triglicéridos:
Deseable: < 1,50 g/l
Moderadamente elevado a elevado: 1,50 - 1,99 g/l
Elevado: 2,00 - 4,99 g/l
Muy elevado: ≥ 5,00 g/l
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Símbolos
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Bioquímica
Wiener lab.
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Tiempo de Trombina
C Para la determinación del tiempo de trombina
SIGNIFICACION CLINICA Agregar el volumen de agua bidestilada o desionizada in-

El tiempo de trombina es parte de las pruebas de screening dicado más arriba. Tapar, dejar reposar 30 minutos y luego
coagulométricas que se emplean en la localización de la mezclar suavemente (sin agitar) hasta obtener disolución
causa de un desorden hemostático. completa antes de su uso. Fechar.
Al producirse un trauma o injuria vascular, la trombina forma- Se recomienda mantener el Reactivo A en el frasco original
da escinde al fibrinógeno soluble en monómeros de fibrina luego de su reconstitución y durante su uso.
que polimerizan espontáneamente y luego son estabilizados
dando lugar a la malla insoluble de fibrina. PRECAUCIONES
El tiempo de trombina evalúa esta última etapa de la coagu- El Reactivo A es para uso diagnóstico "in vitro".
lación, es decir, la conversión del fibrinógeno a fibrina. Por Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
lo tanto, la anomalía en el nivel funcional del fibrinógeno, la de trabajo en el laboratorio de química clínica.
presencia de sustancias que interfieran en la acción de la Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
trombina sobre el fibrinógeno (heparina, hirudina) o las que acuerdo a la normativa local vigente.
bloquean la polimerización de los monómeros de fibrina
(PDF/pdf, paraproteínas) conducen a un prolongamiento ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
del test Tiempo de Trombina. Esta determinación no detecta ALMACENAMIENTO
deficiencias del factor XIII. Reactivo Provisto: estable en refrigerador (2-10oC) hasta
Entonces, la alteración del test de Tiempo de Trombina la fecha de vencimiento indicada en la caja.
puede deberse a: desórdenes cualitativos o cuantitativos Reactivo A reconstituido: estable 7 días en refrigerador
del fibrinógeno, actividad fibrinolítica aumentada, terapias (2-10oC). Para una conservación más prolongada puede ser
con anticoagulante, terapias fibrinolíticas, etc. conservada a -20oC durante 30 días en su frasco original o
en alícuotas fraccionadas en Eppendorf o tubos de plástico.
FUNDAMENTO DEL METODO Para descongelarla, hacerlo rápidamente a 37oC. No volver
Este ensayo se basa en la medida del tiempo que tarda a congelar. Evite calentamientos prolongados.
en coagular un plasma descalcificado, colocado a 37oC y Para optimizar la estabilidad del reactivo se recomienda,
en presencia de una solución de trombina de actividad fija. una vez finalizado su uso, tapar el reactivo y conservarlo
refrigerado (2-10oC) en su vial original.
REACTIVOS PROVISTOS
MUESTRA
A. Reactivo A: viales conteniendo trombina bovina liofili-
Plasma
zada (aproximadamente 8.0 Unidades NIH/vial) con buffer
a) Recolección: obtener sangre cuidadosamente, evitando
y estabilizantes.
estasis o espuma y colocarla en un tubo con anticoagulante en
proporción 9+1 exacta (ejemplo: 4,5 ml de sangre + 0,5 ml de
anticoagulante). Mezclar suavemente. Centrifugar y separar
el plasma antes de los 30 minutos. La extracción se debe
efectuar con jeringas plásticas.
INSTRUCCIONES PARA SU USO b) Aditivos: para obtener el plasma debe emplearse An-
Cada vial de Reactivo A puede ser reconstituido de dos ticoagulante TP de Wiener lab. o citrato de sodio 3,8% o
formas diferentes, según sea la utilidad analítica requerida: 3,2%. No debe emplearse EDTA o heparina.
c) Sustancias interferentes conocidas: el reactivo utilizado
Volumen de Unidades de
en forma manual, no presenta interferencias por: bilirrubina
reconstitución Trombina hasta 20 mg/dl, triglicéridos hasta 2000 mg/dl ni hemoglobina
2 ml 4.0 UNIH/ml hasta 250 mg/dl.
3 ml 2.7 UNIH/ml Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
Reconstitución: quitar el precinto metálico y abrir el vial,
retirando lentamente el tapón de goma para evitar pérdidas MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
del material. - Tubos de hemólisis.
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- Micropipetas capaces de medir los volúmenes indicados. PERFORMANCE
- Baño de agua a 37oC. Reproducibilidad: procesando replicados de las mismas
- Cronómetro. muestras en un mismo día, se obtuvieron los siguientes
- Fuente luminosa para la observación del coágulo. resultados:
Tiempo de 4.0 UNIH/ml 2.7 UNIH/ml
PROCEDIMIENTO Trombina Nivel 1 Nivel 2 Nivel 1 Nivel 2
Llevar el Reactivo a temperatura ambiente antes de usar.
n 20 20 20 20
1- En tubos de hemólisis precalentados, agregar 0,2 ml
de cada plasma e incubar a 37oC durante 2 minutos. X (seg) 15,5 17,4 17,5 19,3
2- Rápidamente adicionar 0,2 ml de Reactivo A y registrar D.S. (seg) 0,28 0,29 0,24 0,34
el tiempo de formación del coágulo.
3- Repetir la determinación y promediar el resultado para C.V. (%) 1,79 1,67 1,37 1,76
cada muestra.
El Reactivo se puede usar en forma manual y con métodos
INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS de detección del coágulo mecánicos y foto-ópticos. Para
Los resultados se expresan en segundos. instrumentos semiautomáticos y automáticos se recomienda
Si la diferencia entre los replicados de una misma muestra seguir las instrucciones de los mismos.
es mayor del 5%, se aconseja repetir el procedimiento des-
echando los valores anteriores. PRESENTACION
- Kit para 60 o 90 determinaciones:
METODO DE CONTROL DE CALIDAD Reactivo A: 6 viales (2 ó 3 ml)
Plasma Control normal - patológico de Wiener lab. (Cód. 1705009)
VALORES DE REFERENCIA BIBLIOGRAFIA

Los valores observados en pacientes normales usando el - Harrison, R. - Am. J. Clin. Pathol. 89/1:87 (1988).
método manual, oscilan entre: - Penner, J. - Am. J. Clin. Pathol. 61:645 (1974).
- Glynn, M.F.X. - Am. J. Clin. Pathol. 71:397 (1979).
13 - 17 seg para 4.0 UNIH/ml - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
17 - 21 seg para 2.7 UNIH/ml AACC Press, 4th ed., 2001.
Estos valores son sólo orientativos, dado que el tiempo de
coagulación es influido por distintas variables, como la toma
y conservación de la muestra, la metodología e instrumental
empleado, etc. Por lo tanto, cada laboratorio debe establecer
sus propios intervalos de referencia dentro de su población
de pacientes, ajustando las variables que influyen sobre
dicho ensayo.

- Fallas en la reconstitución del reactivo puede ser causa de
resultados erróneos.
- Recolección de la muestra:
Las muestras deberán colocarse en tubos de plástico o
de vidrio siliconado.
Las muestras ictéricas, lipémicas o hemolizadas pueden
dar resultados erróneos cuando se emplea detección foto-
óptica del coágulo.
Es importante respetar la relación de anticoagulante y
sangre como también la concentración de citrato utilizada.
- Técnica de laboratorio:
Debe controlarse que el ensayo se realice a 37oC y que los
tubos estén absolutamente limpios y secos.
Después de realizar el ensayo en un aparato automático,
se deben tomar las medidas de limpieza adecuadas, para
prevenir posteriores contaminaciones con la trombina del
reactivo.
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Símbolos
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M Elaborado por:
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Total Protein
C Método colorimétrico para la determinación de proteínas
totales en suero y plasma

Las proteínas son compuestos orgánicos macromoleculares, Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
ampliamente distribuidos en el organismo, esenciales para la Los Reactivos Provistos son irritantes. R36/38: irrita los ojos
vida. Actúan como elementos estructurales y de transporte y y la piel. S24/25: evitar el contacto con los ojos y la piel.
aparecen bajo la forma de enzimas, hormonas, anticuerpos, S26: En caso de contacto con los ojos, lávense inmediata
factores de coagulación, etc. y abundantemente con agua y acúdase a un médico. S28:
En el plasma, las proteínas contribuyen a mantener el vo- En caso de contacto con la piel, lávese inmediata y abun-
lumen del fluido circulante, transportan sustancias relativa- dantemente con agua. S37/39: usar guantes adecuados y
mente insolubles y actúan en la inactivación de compuestos protección para los ojos/la cara.
tóxicos y en la defensa contra agentes invasores. Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
La determinación de proteínas totales es útil para el mo- de trabajo en el laboratorio de química clínica.
nitoreo de cambios ocasionados por diversos estados de Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
enfermedad. En condiciones patológicas como pérdidas acuerdo a la normativa local vigente.
renales, desnutrición, infecciones prolongadas, etc., suelen
presentarse hipoproteinemias, mientras que en otras como ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
mieloma múltiple, endocarditis bacteriana y hemoconcentra- ALMACENAMIENTO
ción de diversos orígenes, (ej.: deshidratación) se observan Reactivos Provistos: estables en refrigerador (2-10oC)
hiper-proteinemias. hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
Una vez abiertos, no deben permanecer destapados ni fuera
FUNDAMENTOS DEL METODO del refrigerador por períodos prolongados.
En medio alcalino, los enlaces peptídicos de las proteí- Puede observarse una ligera alteración del color del Reactivo
nas reaccionan con el ión cúprico formando el complejo B sin cambios en el desempeño del mismo.
violeta-púrpura del biuret. La intensidad de absorción de Evitar contaminaciones.
este complejo a 540 nm es directamente proporcional a la Proteger de la luz.
concentración de las proteínas totales en la muestra.
El tartrato de sodio y potasio presente en el reactivo, inhibe MUESTRA
la formación de hidróxido de cobre, evitando así su preci- Suero o plasma
pitación. El ioduro de potasio previene la reducción del ión a) Recolección: obtener la muestra de la manera usual.
cúprico a óxido cuproso. b) Aditivos: en caso de emplear plasma como muestra, se
Medio alcalino recomienda el uso de heparina o EDTA (Anticoagulante W
Proteínas (enlace peptídico) + Cu de Wiener lab.) como anticoagulantes.
+2
complejo Cu-Proteína c) Sustancias interferentes conocidas: no se observan

interferencias por dextrán hasta 30 g/L, hemoglobina hasta
REACTIVOS PROVISTOS 750 mg/dL, triglicéridos hasta 4000 mg/dL, ni bilirrubina hasta
A. Reactivo A: hidróxido de sodio, 600 mmol/L; tartrato 20 mg/dL (200 mg/L).
sódico-potásico 127,6 mmol/L. Las muestras que poseen precipitados deben ser centrifu-
B. Reactivo B: hidróxido de sodio, 600 mmol/L; tartrato gadas previo a su ensayo.
sódico-potásico 127,6 mmol/L; ioduro potásico 120 mmol/L; Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
sulfato de cobre 48,9 mmol/L. drogas en el presente método.
REACTIVOS NO PROVISTOS muestra debe ser preferentemente fresca. Puede conser-
- Calibrador A plus de Wiener lab. varse hasta una semana en refrigerador (2-10oC) o 6 meses
- Solución fisiológica (NaCl 9 g/L). a -20oC.

Reactivo A: listo para usar. - Micropipetas para medir los volúmenes indicados.
Reactivo B: listo para usar. - Analizador automático
867029100 / 02 p. 1/9
PROCEDIMIENTO rentes al rango especificado, dado que los mismos dependen
(Analizador automático) del método o sistema utilizado.
A continuación se detalla un procedimiento general para
Total Protein en un analizador automático. Cuando se PERFORMANCE
implemente la técnica en un analizador en particular, siga a) Precisión: basado en el protocolo EP5-A2 del CLSI, se
las instrucciones de trabajo del mismo. En una cubeta obtuvieron los siguientes coeficientes de variación como
mantenida a la temperatura elegida, colocar: estimadores de la precisión intraensayo (CVi) y total (CVt):
Muestra o Calibrador 3 uL Nivel CVwr CVt
Reactivo A 120 uL 4,4 g/dL 0,36% 0,96%
6,7 g/dL 0,65% 1,16%
Incubar durante 120 segundos a 37oC. Leer a 540 nm 7,3 g/dL 0,57% 0,88%
de longitud de onda primaria y 700 nm de longitud de
onda secundaria. b) Linealidad: la linealidad se evaluó utilizando un protocolo
basado en el EP6-A de la CLSI. La reacción es lineal hasta
Reactivo B 40 uL
12 g/dL. Para valores superiores, diluir la muestra 1+4 partes
Incubar durante 300 segundos a 37oC. Leer a 540 nm con solución fisiológica (NaCl 9 g/L), repetir la determinación
de longitud de onda primaria y 700 nm de longitud de y multiplicar el resultado por el factor de dilución.
onda secundaria. c) Límite de cuantificación: se evaluó utilizando un protoco-
Los analizadores Wiener lab. calculan automáticamente lo basado en el EP17-A de la CLSI. El límite de cuantificación
la concentración del analito de cada muestra. es de 2,5 g/dL.

CALIBRACION Para las instrucciones de programación consultar las adap-
El Calibrador A plus es procesado de la misma manera que taciones correspondientes a los analizadores de la línea
las muestras y a partir de él se calcula el factor correspon- Wiener lab. para el método Total Protein. Para la calibración
diente. Los valores de concentración de proteínas totales son debe utilizarse Calibrador A plus de Wiener lab.
variables lote a lote. Consultar los valores en el manual de
instrucciones de Calibrador A plus de Wiener lab. PRESENTACION
3 x 125 mL Reactivo A
METODO DE CONTROL DE CALIDAD 1 x 125 mL Reactivo B
1 x 60 mL Reactivo A
de proteínas totales, con cada determinación.
(Cód. 1009382)
Adultos: 6,4 - 8,3 g/dL (64 - 83 g/L)
BIBLIOGRAFIA
Sangre de cordón: 4,8 - 8,0 g/dL (48 - 80 g/L)
- Doumas, B; Bayse, D; Carter, R; Peters, T schaffer, R.- A
Prematuros: 3,6 - 6,0 g/dL (36 - 60 g/L)
candidate reference method for determination of total pro-
Neonatos: 4,6 - 7,0 g/dL (46 - 70 g/L)
tein in serum. I. development and validation. - Clin. Chem.
1 semana: 4,4 - 7,6 g/dL (44 - 76 g/L)
27/10:1642, 1981.
7 meses -1 año: 5,1 - 7,3 g/dL (51 - 73 g/L)
- Glick, M; Ryder, K; Jackson, S. - Graphical comparisons of
1-2 años: 5,6 - 7,5 g/dL (56 - 75 g/L)
interferences in clinical chemistry instrumentation. - Clin.
> 3 años 6,0 - 8,0 g/dL (60 - 80 g/L)
Chem. 32:470, 1986.
Estos valores son sólo orientativos. Se recomienda que cada - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
laboratorio establezca sus propios intervalos de referencia, AACC Press, 4th ed., 2001.
dentro de su población de pacientes. - Tholen, D; Kallner, A; Kennedy, J; Krouwer,J; Meier, K. - Eva-
luation of precision of quantitative measurement methods;
CONVERSION DE UNIDADES AL SISTEMA SI Approved Guideline - Second Edition. Vol. 24 Nº 25, 2004.
Proteínas totales (g/dL) x 10 = Proteínas totales (g/L) - Tholen, D; Kroll, M; Astles, J; Happe, T; Krouwer, J; Las-
ky, F. EP6-A. - Evaluation of the Linearity of quantitative
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO Measu-rement Procedures: A Statical approach; Aproved
Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA. Guideline. - Vol. 23 Nº 16, 2003.
Para preservar la integridad de los reactivos deben evitarse - Tholen, D; Linnet, K; Kondratovich, M; Armbruster, D; Garret,
todo tipo de contaminaciones, empleando para la medición P; Jones, R; Kroll, M; Lequin, R; Pankratz, T; Scassellati, G;
únicamente micropipetas perfectamente limpias y secas. Schimmel, H; Tsai, J. EP17-A. - Protocols for Deter-mination
Se recomienda utilizar Standatrol S-E 2 niveles de Wiener of Limits of Detection and Limits of Quantitation; Approved
lab, como material de control de calidad, ya que con controles Guideline. - Vol. 24 Nº 34, 2004.
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Toxotest
HAI
Prueba de hemaglutinación indirecta (HAI) para la
detección de anticuerpos contra el Toxoplasma gondii
SIGNIFICACION CLINICA contra el Toxoplasma gondii.

La toxoplasmosis es una enfermedad infecciosa general- Control Negativo: suero no reactivo, inactivado.
mente benigna y asintomática del hombre y de los animales,
cuyo agente etiológico es el Toxoplasma gondii, parásito REACTIVOS NO PROVISTOS
intracelular obligado de distribución mundial. Solución fisiológica.
Cuando la infección por T. gondii se adquiere durante la
gestación, existe un alto riesgo de infección en el feto, INSTRUCCIONES PARA SU USO
pudiendo provocar abortos o lesiones graves que son más Antígeno HAI: preparar con 5,2 ml de Reconstituyente HAI.
severas cuanto más precoz sea la contaminación materna. Esperar una hora antes de usar agitando enérgicamente
Las determinaciones serológicas son las más convenientes cada 20 minutos para permitir una correcta rehidratación del
y certeras para el diagnóstico de la toxoplasmosis y debe reactivo. Cada vez que se emplea homogeneizar mediante
establecerse: a) la seroconversión de negativo a positivo, agitación.
b) un aumento en el título de anticuerpos y c) la presencia GR no sensibilizados: homogeneizar mediante agitación
de IgM específica que indicaría infección activa. antes de usar, evitando la formación de espuma.
Diluyente de Sueros HAI: agregar 0,2 ml de Solución
FUNDAMENTOS DEL METODO Proteica cada 10 ml de Buffer HAI. Mezclar, rotular y fechar.
Toxotest HAI se basa en la propiedad que tienen los anti- 2-Mercaptoetanol: una vez abierta la ampolla, trasvasar el
cuerpos anti-T. gondii de producir aglutinación en presencia contenido al frasco vacío provisto, el que se deberá tapar
de glóbulos rojos sensibilizados con antígenos citoplas- inmediatamente después de usar.
máticos y de membrana del parásito. El empleo de ambos 2-Mercaptoetanol al 1%: con el 2-ME provisto, preparar
tipos de antígenos incrementa la sensibilidad del método una dilución 1/100 con solución fisiológica en cantidad
permitiendo la detección precoz de la infección. Tanto la suficiente de acuerdo al número de pocillos que se utilicen.
Ejemplo: para 96 pocillos: 25 ul de 2-ME en 2,5 ml de so-
presencia de anticuerpos heterófilos como la aparición de
lución fisiológica.
IgM, características del período agudo de la parasitosis, se
investigan empleando tratamiento con 2-mercaptoetanol (2-
ME) y eritrocitos no sensibilizados para control y absorción
PRECAUCIONES
de heterofilia.
- Todas las muestras de pacientes deben manipularse como
Los anticuerpos heterófilos se absorben con eritrocitos no
si fueran capaces de transmitir infección. Los controles se
sensibilizados. En los sueros de pacientes con infección
encuentran inactivados. Sin embargo, deben emplearse
aguda tratados con 2-ME, se observa una caída del título
en por lo menos dos diluciones comparados con los mismos - Los sueros controles han sido examinados para antígeno
sueros sin tratar con 2-ME. de superficie de hepatitis B (HBsAg) y virus de inmunode-
ficiencia humana (HIV) encontrándose no reactivos.
REACTIVOS PROVISTOS - Todos los materiales empleados en el ensayo deben ser
Reconstituyente HAI: solución fisiológica tamponada a destruidos a fin de asegurar la inactivación de agentes pa-
pH 7. tógenos. El método recomendado para este procedimiento
Antígeno HAI: liofilizado de glóbulos rojos de carnero sen- es autoclavar durante 1 hora a 121oC. Los líquidos de
sibilizados con antígenos citoplasmáticos y de superficie desecho pueden ser desinfectados con hipoclorito de sodio
de T. gondii. (concentración final 5%) durante por lo menos 60 minutos.
GR no sensibilizados: suspensión al 1% de eritrocitos - No intercambiar reactivos de distintos equipos y lotes.
de carnero no sensibilizados, para control y absorción de - No emplear reactivos de otro origen.
heterofilia. - Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
Buffer HAI: solución fisiológica tamponada con fosfatos a
pH 7,5, con colorante inerte. ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
Solución Proteica: solución de albúmina bovina. ALMACENAMIENTO
2-Mercaptoetanol: ampolla conteniendo 2-mercaptoetanol Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-
(2-ME). 10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
Control Positivo: suero inactivado conteniendo anticuerpos No congelar.
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Diluyente de Sueros HAI: es estable en refrigerador (2-
10oC) 5 días a partir de la fecha de su preparación. I- TITULACION SIN 2-ME
GR no sensibilizados: mantener en posición vertical. 1) Con microgotero de 25 ul, colocar una gota de
2-Mercaptoetanol al 1%: usar inmediatamente después Diluyente de Sueros HAI en todos los pocillos a usar
de preparado. de la policubeta.
Antígeno HAI: una vez reconstituido es estable durante 4 2) Tomar una alícuota de cada suero o controles a
meses conservado en refrigerador (2-10oC). No congelar. ensayar con microdilutores de 25 ul (uno para cada
Mantener en posición vertical. muestra) y colocar en los pocillos de la columna 1. Se
utilizarán tantas hileras horizontales como sueros o
INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS controles deban procesarse.
REACTIVOS 3) Realizar diluciones a partir de la columna 1 (dilu-
Cuando el Control Negativo y todas las diluciones de sueros ción 1/2), pasando los microdilutores a la columna 2
son reactivas, puede ser indicio de autoaglutinación del An- (dilución 1/4) y así sucesivamente hasta la columna 6
tígeno HAI. Verificar destinando un pocillo de la policubeta (dilución 1/64).
para mezclar Antígeno HAI y Diluyente de Sueros HAI, sin Si se procesaran más de 8 sueros, se utilizarán las
la muestra. Si aún en este caso se observa aglutinación, el columnas 7 a 12, realizando las diluciones de la manera
reactivo estará deteriorado. Desechar. antes descripta.
La ausencia de reactividad en todas las diluciones de sue- 4) Colocar en las columnas 1 y 2 (diluciones 1/2 y 1/4)
ros y Control Positivo, puede ser indicio de deterioro de los una gota (25 ul) de GR no sensibilizados, para control
reactivos. Procesar una muestra con positividad conocida. de heterofilia. Hacer lo mismo en las columnas 7 y 8
en caso de ser empleadas.
5) En el resto de los pocillos, agregar una gota (25 ul)
MUESTRA
de Antígeno HAI.
Suero
6) Agitar la policubeta golpeando con los dedos en las
a) Recolección: el paciente debe estar preferentemente en
paredes laterales, durante 30 segundos por lo menos.
ayunas. Obtener suero de la manera usual. No usar plasma.
7) Dejar en reposo, al resguardo de vibraciones, du-
b) Aditivos: no se requieren. No agregar conservadores.
rante 90 minutos.
c) Sustancias interferentes conocidas: hemólisis o hi-
8) A partir de los 90 minutos, leer.
perlipemia (con quilomicronemia) son causa de resultados
Se puede aumentar la nitidez de la imagen, leyendo
erróneos. sobre un espejo, iluminando la placa desde arriba e
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: el interponiendo un papel blanco y traslúcido entre la
suero debe ser preferentemente fresco. En caso de no pro- policubeta y la fuente de luz.
cesarse en el momento, puede conservarse en refrigerador
(2-10oC) durante no más de 72-96 horas contadas a partir II- TITULACION CON 2-ME
del momento de la extracción. Para períodos más prolon- 1) Colocar una gota de suero o controles en cada uno
gados de conservación, congelar (a -20oC) evitando reiterar de los pocillos de la columna 1 (y 7 si es necesario),
descongelamientos y congelamientos. empleando espátulas-gotero descartables (una por
Los sueros envejecidos tienden a gelificarse al contacto con cada suero) en posición vertical.
el 2-ME, provocando resultados falsos positivos. 2) Agregar una gota de 2-Mercaptoetanol al 1% a
los mismos pocillos, utilizando una espátula-gotero
MATERIAL REQUERIDO descartable.
1- Provisto 3) Sellar los pocillos con cinta adhesiva y agitar la policu-
- 1 frasco vacío (para trasvasar el 2-ME de la ampolla) beta golpeando con los dedos en las paredes laterales.
- 5 policubetas con 96 pocillos de fondo en U (8 hileras y 4) Incubar 30-60 minutos a 37oC o 90 minutos a tem-
12 columnas) peratura ambiente.
- espátulas-gotero plásticas descartables 5) Retirar la cinta adhesiva, pasar un trapo húmedo por la
base de la policubeta y, con microgotero de 25 ul, colocar
2- No provisto una gota de Diluyente de Suero HAI en los pocillos
- microdilutores (25 ul) restantes de las hileras utilizadas.
- microgoteros (25 ul) 6) Realizar los pasos 3 al 8 descriptos en la Titulación I.
- tubos de ensayo y material volumétrico adecuado
- cinta adhesiva III- TECNICAS ALTERNATIVAS
Cuando se estudian sueros altamente reactivos o en
caso de poblaciones con una elevada prevalencia de
PROCEDIMIENTO toxoplasmosis donde habitualmente se encuentran
Seleccionar una policubeta con pocillos sin usar de fondo títulos superiores a 1/32 pueden emplearse algunas
en U. Pasar un trapo húmedo por la base de la policubeta de las siguientes técnicas alternativas:
antes de usar, colocarla en forma apaisada sobre el trapo Técnica alternativa 1:
y realizar el ensayo manteniéndola en esta posición. Ver Continuar con las diluciones hasta la columna 12 inclu-
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO. sive con lo que se obtiene una dilución final de 1/4.096.
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No Reactivo: presencia de un sedimento en forma de botón
Técnica alternativa 2: o pequeño anillo de bordes regulares.
Colocar en un tubo “ad-hoc” 50 ul de suero y 350 ul Reactivo: formación de una película o manto que cubre el
de Diluyente de Sueros HAI (dilución 1/8). Tomar 50% o más del fondo de los pocillos.
25 ul de esta dilución y colocarla en la columna 1 de
la policubeta. Proseguir según se describe en I, hasta VALORES DE REFERENCIA
la columna 6. De esta forma se obtiene una dilución Dentro de las técnicas inmunológicas, la HAI es considerada
final de 1/512. un método confiable para la determinación de anticuerpos
específicos. No obstante, sus resultados, al igual que los
IV- ABSORCION SOBRE GLOBULOS ROJOS NO de cualquier método serológico, sólo constituyen un dato
SENSIBILIZADOS auxiliar para el diagnóstico.
En sueros que presenten heterofilia los anticuerpos Es por esta razón que los informes deben ser considerados
heterófilos pueden absorberse sobre GR no sensibiliza- en términos de probabilidad. En este caso, mayor o menor
dos de la siguiente forma: en un tubo de hemólisis con probabilidad de parasitosis por T. gondii.
tapón colocar 50 ul de GR no sensibilizados provistos + Se consideran presumiblemente parasitados aquellos indi-
50 ul de suero en ensayo. Dejar la suspensión durante viduos cuyos sueros son reactivos en diluciones mayores o
30 minutos a 37oC agitando de tanto en tanto. Luego iguales a 1/16.
centrifugar a 2.000 r.p.m. durante 5 minutos. Del so-
Se debe tener en cuenta que la concentración de anticuerpos
brenadante se toman 50 ul y se emplea como dilución
en suero varía en distintas poblaciones, razón por la cual es
1/2, colocándola en la primera columna. Si se emplea
posible encontrar sueros reactivos correspondientes a indivi-
en titulación con 2-ME esta columna corresponde a
duos no parasitados. Por esta razón es necesario determinar
dilución 1/4.
los valores de referencia de la población en estudio.
LIMITACIONES DE PROCEDIMIENTO
Titulación sin 2-ME
Títulos ≥ 16 significan mayor probabilidad de infección toxo- Otras causas de resultados erróneos son:
plásmica. A fin de determinar una primoinfección reciente - Falta de acondicionamiento previo de la policubeta. Para
deben procesarse 2 muestras tomadas con un intervalo de eliminar la carga electrostática es necesario pasar un trapo
2-3 semanas. Un aumento de título mayor de 2 diluciones húmedo por la base (ver PROCEDIMIENTO).
entre la 1ra y 2da muestra indican infección recientemente - Falta de homogeneización de los reactivos antes de su uso.
adquirida. - Deficiencias de mezclado.
- Vibraciones accidentales durante el reposo necesario para
Titulación con 2-ME el desarrollo de la reacción.
La aparición de títulos bajos en la titulación sin 2-ME y reacti- - Sueros envejecidos o congelados y descongelados repe-
vidad con glóbulos rojos no sensibilizados que desaparece al tidamente.
efectuar la titulación con 2-ME y/o absorción con GR no sen- - Contaminaciones accidentales de los reactivos o del ma-
sibilizados, serían indicativos de la existencia de heterofilia. terial empleado en el ensayo.
Por el contrario, títulos elevados sin el empleo de 2-ME que - Policubetas rayadas por uso reiterado. No se aconseja
disminuyen considerablemente al utilizar 2-ME indicarían reutilizar pocillos.
la presencia de IgM, característica de infección aguda. Los - Diluyente de Sueros HAI conservado más de 5 días.
controles de heterofilia en este caso deben dar reacción - Exceso o defecto de Diluyente de Sueros HAI en los pocillos
negativa en el suero sin tratar o tras absorción con GR no de la policubetas.
sensibilizados. - No respetar los tiempos y temperaturas de incubación en
IMAGEN NEGATIVA el tratamiento con 2-ME al 1%.
- 2-Mercaptoetanol al 1% no preparado en el momento.
Debe tenerse en cuenta que en este tipo de infecciones
las titulaciones aisladas proveen escasa información por
lo que se prefiere efectuar determinaciones seriadas cada
15-20 días que permitan observar las variaciones en los
IMAGEN POSITIVA títulos. Para este procedimiento es conveniente conservar
congeladas alícuotas de las muestras de distintos días y
procesarlas simultáneamente con los mismos reactivos y
el mismo operador.
Recordar que cada componente de Toxotest HAI forma un
equipo completo que debe considerarse como unidad. Por
este motivo no deben intercambiarse los componentes de
(1) (2) distintos equipos.
(1) Manto. PRESENTACION

(2) Punto final (50%). - 80 determinaciones (Cód. 1743201).
870940000 / 00 p. 3/8
BIBLIOGRAFIA EXPLICACION DE LOS SIMBOLOS
- Gomez Lus, R. y Benito Ruesca, R. - Medicine 33-2a serie
Antígeno HAI Buffer HAI
- pág. 1.459 (1984).
- Jacobs, L.; Linde, M.N. - J. Parasitol. 43:308, (1957). Antígeno HAI Buffer HAI
Reconstituy. HAI GR no sensib.

Reconstituyente HAI GR no sensibilizados
Sol. Proteica 2-ME

Solución Proteica 2-Mercaptoetanol
Control + Control -
C

 No congelar
F Riesgo biológico
Cont. Contenido
g Número de lote
M Elaborado por:
Xn
Nocivo
Xi
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo
Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
870940000 / 00 p. 4/8 UR111122
Toxotest
látex
Prueba de aglutinación de látex para la detección de
anticuerpos contra el Toxoplasma gondii
SIGNIFICACION CLINICA Control Negativo: listo para usar. Llevar a temperatura

La toxoplasmosis es una enfermedad infecciosa del hombre ambiente antes de usar.
y de los animales, de distribución universal, cuyo agente
etiológico es un parásito intracelular obligado, el Toxoplas- PRECAUCIONES
ma gondii. Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
Es una enfermedad generalmente benigna y asintomática en Todas las muestras de pacientes deben manipularse como
individuos inmunocompetentes, convirtiéndose en una seria si fueran capaces de transmitir infección.
complicación en pacientes inmunocomprometidos como los Los sueros controles han sido examinados para antígeno de
que tienen el síndrome de inmunodeficiencia adquirido o los superficie de hepatitis B (HBsAg) y virus de inmunodeficien-
que se hallan bajo terapia inmunosupresora. cia humana (HIV), encontrándose no reactivos. Sin embargo
Cuando la infección se adquiere durante la gestación, exis- deben ser empleados como si se tratara de material infectivo
te un alto riesgo de infección del feto, pudiendo provocar ya que ningún método puede ofrecer la total seguridad de la
abortos o lesiones graves en el mismo como coriorretinitis, ausencia de éstos u otros agentes infecciosos.
hidrocefalia, microcefalia, calcificaciones cerebrales y retar- Si bien tanto el reactivo como los controles poseen con-
dos psicomotrices. Las lesiones provocadas en el feto son servantes, son susceptibles a la contaminación, por lo que
más severas cuanto más temprana en el embarazo sea la deben manipularse con cuidado.
contaminación materna. Si la infección es previa al embara- Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
zo, la madre se considera inmunizada y el embrión protegido. de trabajo en el laboratorio de química clínica.
Las determinaciones serológicas son las más convenientes Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
y certeras para el diagnóstico de la toxoplasmosis ya que la acuerdo a la normativa local vigente.
detección del parásito no siempre es confiable y es inade-
cuada para el diagnóstico masivo. ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
ALMACENAMIENTO
FUNDAMENTOS DEL METODO Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-
La muestra se pone en contacto con un reactivo de látex 10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
sensibilizado con antígenos purificados de Toxoplasma gon- No congelar.
dii. Si la muestra contiene anticuerpos anti-T. gondii, éstos No utilizar los reactivos una vez superada la fecha de ven-
reaccionarán en forma sensible y específica produciéndose cimiento del equipo.
una aglutinación visible macroscópicamente. El Reactivo A presenta, una vez agitado, un aspecto unifor-
me. Luego de un período prolongado de almacenamiento
REACTIVOS PROVISTOS puede presentar sedimentación que no altera el correcto
A. Reactivo A: suspensión al 1% de partículas de látex funcionamiento del mismo.
sensibilizadas con antígenos de T. gondii.
Control Positivo: dilución de suero humano inactivado, INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
conteniendo anticuerpos contra el T. gondii. REACTIVOS
Control Negativo: dilución de suero no reactivo, inactivado. La presencia de grumos en el Reactivo A que no desapa-
rece por agitación, son indicio de deterioro del mismo. En
REACTIVOS NO PROVISTOS tal caso, desechar.
Solución fisiológica (ClNa, 8,5 g/l) cuando se usa la técnica Una conservación inadecuada de los reactivos, sobre todo a
semicuantitativa. temperaturas elevada, ocasiona el deterioro de los mismos.
Esto puede verificarse procesando los controles provistos
INSTRUCCIONES PARA SU USO en el equipo.
Reactivo A: homogeneizar por agitación suave y luego
cambiar la tapa ciega por la tapa gotero suministrada MUESTRA
adicionalmente. Llevar a temperatura ambiente y agitar Suero
suavemente antes de usar. a) Recolección: obtener suero de la manera usual. El
Control Positivo: listo para usar. Llevar a temperatura paciente debe estar preferentemente en ayunas. No es
ambiente antes de usar. necesario inactivar. No usar plasma. Descartar los sueros
870950022 / 01 p. 1/9
contaminados o hemolizados.
mezclar 3 o 4 veces por aspiración en la sección 2, obte-
niéndose así una dilución 1:2. Tomar 50 ul de esta dilución
c) Sustancias interferentes conocidas: la hemólisis o
y colocarlos en la sección 3. Mezclar como se describió
hiperlipemia son causa de resultados erróneos.
anteriormente y continuar con este procedimiento hasta
la sección 6. Tomar 50 ul de esta sección y desecharlos.
suero debe ser límpido, libre de partículas y preferentemente
fresco. En caso de no procesarse en el momento, puede Esquema de diluciones
conservarse en refrigerador (2-10oC) durante no más de 48-
sección 1 2 3 4 5 6
72 horas a partir del momento de la extracción. Si se debe
conservar por períodos más prolongados, congelar a -20oC. s. fisiol. (ul) - 50 50 50 50 50
Evitar los congelamientos y descongelamientos sucesivos. muestra (ul) 50 50 - - - -
Mezclar y transferir ↑ ↑ ↑ ↑ →
MATERIAL REQUERIDO
1- Provisto dilución 1:1 1:2 1:4 1:8 1:16 1:32
- placas de plástico o vidrio fondo negro UI/ml 10 20 40 80 160 320
- 1 gotero para dispensar 40 ul
Agitar suavemente el Reactivo A y agregar una gota (40 ul)
2- No provisto a cada una de las secciones de la placa conteniendo las
- goteros o micropipetas capaces de dispensar 50 ul diluciones de la muestra. Mezclar con un palillo descar-
- palillos mezcladores descartables table cubriendo toda la superficie de la sección. Agitar la
- cronómetro placa rotándola con movimiento suave, ya sea manualmen-
- lámpara o fuente de luz te o con agitador mecánico rotatorio (100 r.p.m.) durante 5
- agitador automático de rotación horizontal (opcional) minutos. Observar presencia o ausencia de aglutinación.
PROCEDIMIENTO INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS

Llevar a temperatura ambiente (18-25oC) los reactivos y a) Técnica cualitativa
las muestras antes de usar. No Reactivo: suspensión que se mantiene homogénea
Control del Reactivo A hasta el tiempo sugerido indica que la muestra no presenta
Antes de realizar una serie de determinaciones, se anticuerpos anti-T. gondii detectables. En caso de obtener
recomienda controlar el funcionamiento del Reactivo A un resultado no reactivo en una muestra de embarazada,
con los Controles Positivo y Negativo provistos según lo se recomienda repetir la determinación periódicamente para
indicado en la técnica cualitativa. detectar una posible seroconversión.
Reactivo: cualquier aglutinación visible, ya sea débil o in-
I- TECNICA CUALITATIVA tensa, distinta de un control No Reactivo, indica la presencia
Agitar suavemente el Reactivo A antes de usar. En uno de anticuerpos anti-T. gondii. Se califica de 1 a 4 cruces. Ver
de los sectores de la placa colocar: LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO.
Muestra 1 gota (50 ul) Cuando el resultado es Reactivo se recomienda diferenciar
entre una infección antigua y una toxoplasmosis en evolu-
Reactivo A 1 gota (40 ul) ción, especialmente si la muestra proviene de una embaraza-
Mezclar durante 4-5 segundos con palillo descartable da. En este caso se procederá a la determinación del nivel de
hasta obtener una suspensión uniforme en toda la su- anticuerpos anti-T. gondii mediante las técnicas cuantitativas
perficie del sector. habituales así como al análisis de IgM específicas.
Colocar la placa en un agitador de rotación horizontal b) Técnica semicuantitativa
(100 r.p.m.), inmediatamente disparar el cronómetro, El título de la muestra corresponde al de la dilución más
agitar la placa durante 5 minutos y luego observar ma- alta que presenta aglutinación (1+ según la escala anterior).
croscópicamente la presencia o ausencia de aglutinación,
manteniendo la placa bien iluminada. VALORES DE REFERENCIA
En caso de no disponerse de un agitador mecánico, la Los valores de prevalencia dependen mucho de los há-
agitación se puede realizar en forma manual. bitos alimenticios y el contacto con gatos de la población
II- TECNICA SEMICUANTITATIVA estudiada.
Las diluciones de la muestra se realizarán sobre 2 placas Además, es importante tener en cuenta la edad del paciente,
con secciones marcadas para la lectura de las aglutina- pues en algunas áreas, la prevalencia en poblaciones adultas
ciones (ver esquema de diluciones). puede llegar a más del 70%.
Colocar 50 ul de solución fisiológica en las secciones 2 a
6 de las placas. Agregar 50 ul de muestra en las seccio- LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
nes 1 y 2 de la primera placa. Con la misma micropipeta - Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
- Aunque en la evaluación realizada (ver PERFORMANCE)
870950022 / 01 p. 2/9
no se encontró ninguna muestra que presentara efecto de SÍMBOLOS
prozona inhibitorio de la aglutinación, si se sospecha que Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
esto pudiera suceder, se recomienda repetir el análisis con reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
una dilución 1:10 de la muestra en solución fisiológica.
- Recordar que el gotero provisto debe utilizarse en posición Este producto cumple con los requerimientos previstos
vertical.
- Antes de tapar el frasco de Reactivo A debe tenerse la C por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios
precaución de descargar el gotero.
- Si la punta del gotero se rompiera, deberá utilizarse mi-
cropipeta de 40 ul.
- Debe recordarse que los reactivos de látex deben tomar
temperatura ambiente (18-25oC) para poder ser empleados Contenido suficiente para <n> ensayos
correctamente, de lo contrario podrían obtenerse resulta-
X
dos erróneos. H Fecha de caducidad
PERFORMANCE
Sensibilidad analítica: 10 UI/ml
a) Sobre una población de 312 muestras ensayadas se  No congelar

obtuvieron los siguientes resultados: una sensibilidad clínica
de 91,0%, una especificidad de 96,4%, valor predictivo del F Riesgo biológico
positivo de 95,6% y un valor predictivo del negativo de 92,6%.
Cuando se realizó la comparación de títulos con inmunofluo-
rescencia indirecta para las 312 muestras, se encontró un Cont. Contenido
coeficiente de correlación r = 0,86.
b) En otra población de 136 muestras se comparó Toxotest g Número de lote
látex con HAI sin 2-ME tomada como referencia, obteniéndo-
se una especificidad del 96,2% y una sensibilidad del 86,4%. Elaborado por:
M
Xn
PRESENTACION Nocivo
Equipos para 100 determinaciones (Cód. 1743151).
BIBLIOGRAFIA Xi
- Singer, J.M; Plotz, C.M. “The Latex Fixation Test” - Am. Irritante
J.Clin. Path. 21:888 (1956).
- Gomez Lus, R - Medicine 33 2ª Serie, pág. 1459 (1984). i Consultar instrucciones de uso
- Johnson, J. y Cols. - Direct agglutination test and other
assays for measuring antibodies to Toxoplasma gondii - J. Calibr. Calibrador
Clin. Pathol. 42:536 (1984).
- Chabalgoity, A; Miraballes, I.; Villavedra, M.; Battistoni, J. b Control
- Cátedra de Inmunología, Laboratorio de desarrollo Bio-
tecnológico de Reactivos de Inmunodiagnóstico, Facultad
b Control Positivo
de Química, Montevideo, Uruguay - “Evaluación de un látex

para el diagnóstico de la toxoplasmosis” - Comunicación
c Control Negativo
personal. h Número de catálogo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870950022 / 01 p. 3/9 UR130708
Transaminasas 200
Para la determinación de Transaminasa Glutámico Oxalacética
(GOT(AST) y Transaminasa Glutámico Pirúvica (GPT/ALT)

Las transaminasas GOT y GPT son enzimas ampliamente Reactivo A (GOT o GPT): listo para usar.
difundidas en el organismo con elevada concentración en Reactivo B: listo para usar.
corazón, hígado, músculo esquelético, riñón y eritrocitos. Reactivo C diluido (0,40 mol/l); preparación:
La actividad sérica en condiciones normales es baja o - Trasvasar el contenido del frasco a un matraz de l litro.
nula. - Lavar el frasco con un pequeño volumen de agua destilada y
Un daño o enfermedad en cualquiera de estos tejidos pasar el líquido de lavado al matraz. Repetir esta operación
conduce a un aumento en los niveles séricos. Así, luego de 3-4 veces.
un infarto de miocardio se produce en suero un marcado - Diluir con agua destilada hasta el aforo. Tapar y mezclar
aumento de la actividad de GOT (abundante en músculo bien por inversión.
cardíaco). - Envasar en un frasco de plástico de buen cierre (no utilizar
En hepatitis virales y otras formas de enfermedad hepática frasco de vidrio).
que involucren necrosis tisular, predominará la actividad Standard: listo para usar en la curva de GPT. Diluir 1:2 con
sérica de GPT (abundante en tejido hepático). Reactivo A para la curva de GOT.
Una elevada actividad de transaminasas puede detectarse
también en traumas accidentales o quirúrgicos y en distrofias PRECAUCIONES
musculares o miositis. Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
Reactivo B: corrosivo. R36/38: irrita los ojos y la piel. S24/25:
FUNDAMENTOS DEL METODO evítese el contacto con los ojos y la piel. S26/28: en caso
La GOT cataliza la siguiente reacción: de contacto con los ojos y la piel, lávense inmediatamente
GOT y abundantemente con agua y acúdase a un médico. S37:
l-aspartato + α-cetoglutarato glutamato + oxalacetato usar guantes adecuados.
Reactivo C: irritante. R36/38: irrita los ojos y la piel. S26/28:
La GPT cataliza la siguiente reacción: en caso de contacto con ojos y piel, lávense inmediatamente
GPT
l-alanina + α-cetoglutarato glutamato + piruvato usar guantes adecuados y protección para los ojos/la cara.
El piruvato formado (el oxalacetato es inestable y se trans- de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
forma en piruvato), reacciona con la 2,4-dinitrofenilhidracina Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
produciéndose, en medio alcalino, un compuesto coloreado acuerdo a la normativa local vigente.
que se mide a 505 nm.
REACTIVOS PROVISTOS ALMACENAMIENTO
- Transaminasas 200 GOT provee: Reactivos Provistos: estables a temperatura ambiente (<
A. Reactivo A: solución con 100 mM de l-aspartato y 2 mM 25oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
de α-cetoglutarato en buffer fosfatos 100 mM, pH 7,4.
- Transaminasas 200 GPT provee: INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
A. Reactivo A: solución con 200 mM de dl-alanina y 2 mM REACTIVOS
de α-cetoglutarato en buffer fosfatos 100 mM, pH 7,4. Cuando el espectrofotómetro ha sido llevado a cero con
Además, ambos equipos proveen: agua destilada, lecturas del Blanco inferiores a 0,270 D.O.
B. Reactivo B: solución conteniendo 1 mmol de 2,4-di- a 505 nm son indicio de deterioro del mismo. También indica
nitrofenilhidracina (2,4-DNFH) en ácido clorhídrico 1 mol/l. deterioro la aparición de turbidez.
C. Reactivo C: solución de hidróxido de sodio 4 mol/l.
S. Standard: solución de piruvato de sodio 2 mmol/l. Para MUESTRA
efectuar la curva de calibración. Suero
a) Recolección: se debe obtener suero de la manera usual.
REACTIVOS NO PROVISTOS No es necesario que el paciente esté en ayunas para la
Agua destilada. extracción de sangre.
870960022 / 00 p. 1/12
b) Aditivos: no se requieren. los valores de actividad enzimática pueden deducirse de
c) Sustancias interferentes conocidas: los sueros hemo las tablas de conversión obtenidas por comparación con
lizados producen resultados falsamente elevados ya que el método UV convencional, siempre que las lecturas se
los glóbulos rojos contienen 3 a 5 veces más enzimas que efectúen en las siguientes condiciones de medida: cubetas
el suero. de caras paralelas de 1 cm de espesor, semiancho de banda
Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las ≤ 8 nm y longitud de onda 505 nm o Hg 546.
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: en GOT (30 min):
caso de no efectuarse la determinación en el día, puede con-
servarse el suero refrigerado a 4oC durante no más de 5 días. Método UV
Hg 546 convencional 505 nm
MATERIAL REQUERIDO (no provisto) (U/l)
- Espectrofotómetro o fotocolorímetro. 0,020 5 0,034
- Material volumétrico adecuado. 0,030 7 0,047
- Baño de agua a 37oC. 0,040 10 0,061
- Reloj o timer. 0,050 14 0,080
0,060 19 0,100
CONDICIONES DE REACCION 0,070 23 0,115
- Longitud de onda: 505 nm en espectrofotómetro, Hg 546 o 0,080 26 0,129
en fotocolorímetro con filtro verde (500-550 nm). 0,090 31 0,146
- Temperatura de reacción: 37oC 0,100 36 0,164
- Tiempo de reacción: 40 minutos 0,110 41 0,180
- Volumen de muestra: 100 ul 0,120 46 0,196
- Volumen final de reacción: 6,1 ml 0,130 50 0,210
Alternativamente pueden disminuirse los volúmenes de 0,140 55 0,224
Muestra y Reactivos a la mitad. 0,150 61 0,239
0,160 67 0,254
0,170 74 0,269
PROCEDIMIENTO
En dos tubos marcados B (Blanco) y D (Desconocido), GPT:
colocar:
B D Método UV
Hg 546 convencional 505 nm
Reactivo A (GOT o GPT) 0,5 ml 0,5 ml
(U/l)
Colocar en baño de agua a 37oC ± 0,5oC unos minutos.
0,020 5 0,034
Suero - 100 ul 0,040 9 0,061
Agua destilada 100 ul - 0,060 14 0,100
0,080 18 0,129
Mezclar por agitación suave e incubar exactamente 30 0,100 23 0,164
minutos y agregar: 0,120 27 0,196
Reactivo B 0,5 ml 0,5 ml 0,140 32 0,224
o
0,160 37 0,254
Mezclar. Dejar 10 minutos a 37 C. Luego agregar:
0,180 42 0,284
Reactivo C diluido 5 ml 5 ml 0,200 47 0,314
Mezclar por inversión y retirar del baño. Después de 2 0,220 52 0,340
minutos leer la absorbancia en fotocolorímetro con filtro 0,240 57 0,364
verde (500-550 nm); en espectrofotómetro a 505 nm o Hg 0,260 62 0,389
546, llevando el aparato a cero D.O. con agua destilada. 0,280 68 0,415
0,300 74 0,442
0,320 80 0,468
0,340 87 0,494
El color de la reacción es estable durante 30 minutos por 0,360 96 0,524
lo que la absorbancia debe ser leída dentro de ese lapso. 0,380 104 0,552
CALCULO DE LOS RESULTADOS b) Empleando curva de calibración:

a) Empleando tablas de conversión: Emplear el Standard como se indicó en INSTRUCCIONES
Este cálculo se basa en la absortividad del cromógeno y PARA SU USO. En 9 tubos colocar:
870960022 / 00 p. 2/12
ros (sin incubar o agregando el suero después del Reactivo
Tubo Standard Reactivo A Agua dest. GPT GOT
B) cuando se trabaja con muestras hemolizadas, muy
(ml) (ml) (ml) (U/l) (U/l)
ictéricas o cuando se sospecha la presencia de cetosis.
1 0,00 1,00 0,2 - -
2 0,05 0,95 0,2 9 7 PERFORMANCE
3 0,10 0,90 0,2 18 12 a) Reproducibilidad: procesando replicados de las mismas
4 0,15 0,85 0,2 25 20 muestras en un mismo día, se obtuvieron los siguientes
5 0,20 0,80 0,2 37 28 datos:
6 0,25 0,75 0,2 46 37 GOT:
7 0,30 0,70 0,2 56 48
Nivel D.S. C.V.
8 0,40 0,60 0,2 79 81
19,3 U/l ± 1,50 U/l 7,77 %
9 0,50 0,50 0,2 113 -
49,0 U/l ± 2,19 U/l 4,47 %
Mezclar y agregar a cada tubo, con intervalos de 1/2 minuto 66,5 U/l ± 3,44 U/l 5,17 %
entre uno y otro, 1 ml de Reactivo B. Mezclar. Incubar 10 GPT:
minutos a 37oC (contados desde el agregado del Reactivo Nivel D.S. C.V.
B al primer tubo). Luego agregar 10 ml de Reactivo C pre-
16,5 U/l ± 0,79 U/l 4,79 %
parado a cada tubo, manteniendo el intervalo de 1/2 minuto.
23,3 U/l ± 1,16 U/l 4,98 %
Mezclar cada tubo inmediatamente por inversión y retirar
44,8 U/l ± 2,35 U/l 5,25 %
del Baño. Diez minutos después, leer absorbancia con
filtro verde (500-550 nm) o en espectrofotómetro a 505 nm, b) Límite de detección: depende del fotómetro empleado.
llevando el aparato a cero D.O. con agua destilada. El color En espectrofotómetro a 505 nm (con cubetas de caras
es estable 30 minutos. paralelas de 1 cm de espesor, reproducibilidad ± 2 nm,
Restar a cada lectura la obtenida con el tubo Nº 1, obtenién- luz espuria ≤ 0,5 %, semiancho de banda ≤ 8 nm) para un
dose las Lecturas Corregidas. cambio mínimo de 0,001 D.O. el mínimo cambio de actividad
En un papel milimetrado, trazar un sistema de coordenadas detectable será de 0,5 U/l para un nivel de GOT de 88 U/l y
colocando en el eje vertical las Lecturas Corregidas y en el 0,2 U/l para un nivel de GPT de 64 U/l.
horizontal las actividades para GPT y GOT. Determinar en el c) Rango dinámico: si la actividad de la muestra es mayor
gráfico los puntos correspondientes a cada tubo. Uniéndolos de 80 U/l de GOT o GPT, debe repetirse la determinación
se obtienen las curvas respectivas para GOT y GPT. Tener diluyendo previamente la muestra con solución fisiológica
en cuenta que para cada técnica debe utilizarse el gráfico o empleando menor cantidad de suero.
correspondiente.
PRESENTACION
CONVERSION DE UNIDADES GOT: equipo para 200-400 determinaciones (Cód. 1751002).
Los resultados pueden ser expresados en U/l o en las an- GPT: equipo para 200-400 determinaciones (Cód. 1761002).
tiguas unidades del método (Karmen o Wroblesky), para lo
que deben utilizarse las siguientes equivalencias: BIBLIOGRAFIA
- Reitman, S. & Frankel, F. - Am. J. Clin. Path. 28:56 (1957).
U/l = UKarmen/ml (o Wroblesky/ml) x 0,482
- Frankel, S. - Gradwohl's Clinical laboratory methods and
UKarmen/ml (o Wroblesky/ml) = U/l x 2,07
diagnostic Vol. 1 pág. 123 - Ed. por Frankel, Reitman y
No obstante debe tenerse en cuenta que en sueros patoló- Sonnenwirth - (7ª Ed., 1970).
gicos la conversión no siempre es exacta. - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
Se consideran valores normales de transaminasas (GOT y
GPT) hasta 12 U/l. Si bien se han hallado individuos norma-
les con valores hasta 18 U/l, los niveles de transaminasas
que se encuentren entre 12 y 18 U/l deben considerarse
sospechosos.

- La temperatura ambiente y el tiempo de incubación son
críticos. Por cada grado de temperatura, la variación es
aproximadamente del 7%.
- El autor del método recomienda procesar un blanco de sue-
870960022 / 00 p. 3/12
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
870960022 / 00 p. 4/12 UR120503
LINEA TURBITEST AA
TRF
C Para la determinación de transferrina en suero o plasma

La transferrina (TRF) es la principal proteína plasmática acuerdo a la normativa vigente.
transportadora de hierro. Cada molécula de TRF posee dos
sitios de unión para el hierro, el cual se une sólo en su forma ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
oxidada (Fe3+). Se sintetiza en el hígado y su nivel plasmático ALMACENAMIENTO
es regulado principalmente por la disponibilidad de hierro. Reactivos Provistos: estables en refrigerador (2-10oC) has-
La evaluación de los niveles plasmáticos de TRF es útil en ta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No congelar.
el diagnóstico diferencial de anemias y el monitoreo de su
tratamiento. En casos de anemia hipocrómica por deficiencia MUESTRA
de hierro los niveles de TRF aumentan debido a un aumento Suero o plasma
de su síntesis pero su saturación con hierro es baja como a) Recolección: obtener la muestra de la manera habitual.
consecuencia de los bajos niveles de hierro. Por otro lado si b) Aditivos: en caso de que la muestra a emplear sea
la anemia se debe a una falla en la incorporación de hierro plasma se recomienda utilizar heparina como anticoa-
a la hemoglobina, los niveles de TRF son bajos pero la pro- gulante.
teína está altamente saturada con hierro. Es una proteína c) Sustancias interferentes conocidas: no emplear mues-
de fase aguda, con bajos niveles en procesos inflamatorios tras hemolizadas, lipémicas o contaminadas. Las muestras
y tumores malignos. Se encuentra disminuida también que poseen precipitados deben ser centrifugadas previo a
en enfermedades hematológicas, cirrosis, enfermedades su ensayo.
renales y malnutrición. Aumenta durante el embarazo y No se observan interferencias por triglicéridos hasta
administración de estrógenos. 1600 mg/dl, hemoglobina hasta 1000 mg/dl, bilirrubina di-
recta hasta 24 mg/dl, bilirrubina total hasta 40 mg/dl y factor
FUNDAMENTO DEL METODO reumatoideo hasta 520 UI/ml.
La TRF reacciona con el anticuerpo específico formando Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
inmunocomplejos insolubles. La turbidez causada por estos drogas en el presente método.
inmunocomplejos es proporcional a la concentración de TRF d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: las
presente en la muestra y puede ser medida espectrofoto- muestras pueden conservarse hasta 7 días en heladera
métricamente. (2-10oC) o 6 meses congeladas (a -20oC). Evitar congela-
mientos y descongelamientos repetidos.
REACTIVOS PROVISTOS
A. Reactivo A: buffer Tris 50 mM, pH 7,5. MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
B. Reactivo B: anticuerpos monoespecíficos (cabra) anti- - Espectrofotómetro
transferrina humana. - Cubetas espectrofotométricas de caras paralelas
- Micropipetas y pipetas capaces de medir los volúmenes
REACTIVOS NO PROVISTOS indicados
- Solución fisiológica - Tubos de Kahn o hemólisis
- Control Inmunológico nivel 1 Turbitest AA y Calibrador - Baño de agua a 37oC
Proteínas nivel alto Turbitest AA de Wiener lab. - Cronómetro

Reactivos Provistos: listos para usar. - Longitud de onda: 340 nm
Los reactivos son para uso diagnóstico “in vitro”. - Volumen de muestra: 30 ul
Todas las muestras de pacientes deben manipularse como - Volumen final de reacción: 1230 ul
si fueran capaces de transmitir infección. Los volúmenes de muestra y reactivos pueden variarse
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales proporcionalmente, sin que se alteren los factores de
de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos. cálculo.
861254900 / 02 p. 1/6
PROCEDIMIENTO referencia.
CURVA DE CALIBRACION CONVERSION DE UNIDADES AL SISTEMA SI
En tubos de Khan, realizar las siguientes diluciones TRF (mg/dl) x 0,01 = TRF (g/l)
en solución fisiológica del Calibrador Proteínas nivel
alto Turbitest AA: 1/10, 1/20, 1/40, 1/80, 1/160, utilizar LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
solución fisiológica como punto cero. Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
Reactivo A 1000 ul Se recomienda realizar una recalibración completa, cuando
Calibrador Proteínas diluido 30 ul así lo determina.
Homogeneizar y leer la absorbancia de cada dilución Para preservar la integridad de los reactivos debe evitarse
a 340 nm (DO1) llevando el aparato a cero con agua todo tipo de contaminaciones, empleando para la medición
destilada. Luego agregar: únicamente micropipetas perfectamente limpias y secas.
Reactivo B 200 ul PERFORMANCE
Homogeneizar e incubar 10 minutos a 37oC, leer la a) Reproducibilidad: se evaluó a través de una modifica-
absorbancia a 340 nm (DO2) dentro de los diez minutos, ción del protocolo EP5-A del CLSI. Para ellos se procesaron
llevando el aparato a cero con agua destilada. muestras con distintos niveles de TRF. Con los datos obte-
Calcular la diferencia de absorbancia (∆A = DO2 - DO1) nidos se calculó la precisión intraensayo y total.
para cada dilución del calibrador, incluyendo el punto Precisión intraensayo
cero. Representar en papel milimetrado las diferencias
Nivel D.S. C.V.
de absorbancia (∆A) en función de la concentración en
208 mg/dl ± 1,5 mg/dl 0,7%
mg/dl de transferrina en el calibrador.
238 mg/dl ± 2,0 mg/dl 0,9%
PROCEDIMIENTO PARA MUESTRAS 377 mg/dl ± 2,8 mg/dl 0,7%
Realizar diluciones 1:10 de las muestras en solución
fisiológica. En tubos de Kahn debidamente marcados, Precisión total
colocar: Nivel D.S. C.V.
208 mg/dl ± 3,8 mg/dl 1,8%
Reactivo A 1000 ul 238 mg/dl ± 4,6 mg/dl 2,0%
Muestra diluida 30 ul 377 mg/dl ± 6,3 mg/dl 1,7%
Homogeneizar y leer la absorbancia de cada dilución b) Límite de detección: es la mínima cantidad del analito
a 340 nm (DO1) llevando el aparato a cero con agua capaz de ser detectada como una muestra distinta de cero y
destilada. Luego agregar: corresponde a la concentración de 3,8 mg/dl de TRF.
c) Rango de medición: corresponde al intervalo de valores
Reactivo B 200 ul
exactamente cuantificables y se extiende de 30 a 600 mg/dl
Homogeneizar e incubar 10 minutos a 37oC, leer la de transferrina.
absorbancia a 340 nm (DO2) dentro de los diez minutos, d) Efecto prozona: no se evidencia efecto prozona hasta
llevando el aparato a cero con agua destilada. 3000 mg/dl de transferrina.
Estos datos de performance fueron obtenidos empleando
analizador automático Konelab 60i, por lo tanto dichos
CALCULO DE RESULTADOS valores pueden variar cuando se emplea otro analizador o
Calcular la diferencia de absorbancia (∆A = DO2 - DO1) co- técnica manual.
en la curva de calibración para determinar la concentración PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS
de TRF en mg/dl. Referirse a las adaptaciones específicas de cada analizador.
dor Proteínas nivel alto deben ser diluidas 1:2 con solución PRESENTACION
fisiológica y procesadas nuevamente. Multiplicar el resultado 60 ml: - 1 x 50 ml Reactivo A
obtenido por dos. - 1 x 10 ml Reactivo B
(Cód. 1999703)
Control Inmunológico nivel 1 o Control Inmunológico 60 ml: - 1 x 50 ml Reactivo A
nivel 2 Turbitest AA de Wiener lab. El control es procesado - 1 x 10 ml Reactivo B
de la misma manera que las muestras. (Cód. 1009347)
VALORES DE REFERENCIA - 1 x 10 ml Reactivo B
200 a 360 mg/dl (2,0 a 3,6 g/l) (Cód. 1009220)
861254900 / 02 p. 2/6
60 ml: - 1 x 50 ml Reactivo A SIMBOLOS
BIBLIOGRAFIA
C
- Tietz Fundamentals of clinical chemistry - Burtis, C., As- por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios
hwood, E. (5º Edition) WB Saunders, 2001. para el diagnóstico "in vitro"
- Young, DS. - Effects of preanalytical variables on clinical
laboratory test. AACC Press - Third Edition, 2007.
- Kasvosve, I; Delanghe, J. 2002 - Clin. Chem. Lab. Med.
40/10:1014, 2002.
- Bandi, ZL; Schoen, I; Bee DE. - Clin Chem. 31/10:1601, Contenido suficiente para <n> ensayos
X
1985.
- EP5-A Vol. 24 Nº 25 del CLSI - Evaluation of precision per- H Fecha de caducidad
formance of quantitative measurement methods (approved
guideline - second edition). l Límite de temperatura (conservar a)
- EP17-A2 Vol. 24 Nº 34 del CLSI - Protocols for deter-
mination of limits of detection and limits of quantitation;  No congelar
approved guideline.
F Riesgo biológico
Cont. Contenido
g Número de lote
M Elaborado por:
Xn
Nocivo
Xi
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
861254900 / 02 p. 3/6 UR120903
TW
C Detergente no iónico para uso en laboratorio
AA
Una solución diluida de TW AA se emplea en analizadores Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
automáticos para lograr un mejor escurrimiento de los lí- reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
quidos en el circuito hidráulico. Esto impide la adhesión de
C
pequeñas gotas de líquido a las paredes de los tubos de este por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios
circuito y de la cubeta de lectura, evitando la formación de para el diagnóstico "in vitro"
microburbujas con la consecuente falta de reproducibilidad
en los resultados. P Representante autorizado en la Comunidad Europea
REACTIVOS PROVISTOS V Uso diagnóstico "in vitro"
TW AA: detergente concentrado (Tween 20®) para uso de
laboratorios. No iónico, biodegradable.
Agua destilada o desmineralizada. l Límite de temperatura (conservar a)
INSTRUCCIONES PARA SU USO  No congelar

Agregar TW AA al agua destilada o desmineralizada em-
pleada en el analizador. La proporción depende de cada F Riesgo biológico
aparato. Referirse al Manual de Instrucciones específico de
cada analizador. Volumen después de la reconstitución
Cont. Contenido
PRECAUCIONES
Utilizar el reactivo guardando las precauciones habituales
g Número de lote
de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos. M Elaborado por:
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE Xn
Nocivo
ALMACENAMIENTO
TW AA: estable a temperatura ambiente (< 25oC) hasta la Corrosivo / Caústico
fecha de vencimiento indicada en el envase.
Xi
Irritante
PRESENTACION
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
801145510 / 00 p. 1/2 UR100506
LINEA LIQUIDA
UIBC/TIBC
C AA
Método colorimétrico directo para la determinación de la capacidad
latente de fijación de hierro (UIBC) en suero o plasma

El hierro se transporta desde un órgano hacia otro formando Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
un complejo con una proteína denominada transferrina. acuerdo a la normativa local vigente.
Dado que normalmente sólo un tercio de los sitios de unión
están ocupados, la transferrina posee una considerable ca- ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
pacidad de unión al hierro. Esta se conoce como capacidad ALMACENAMIENTO
latente de fijación de hierro (UIBC). Reactivos Provistos: son estables a 2-10oC hasta la fecha
La suma de hierro sérico y UIBC representa la capacidad de vencimiento indicada en la caja.
total de fijación de hierro (TIBC).
Si bien las mediciones de hierro sérico son importantes desde INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
el punto de vista clínico, cuando se combinan con valores de REACTIVOS
UIBC/TIBC permiten obtener un diagnóstico más completo Variaciones en las lecturas de Blancos de Reactivos y/o
de enfermedades como anemia y afecciones hepáticas. Standard indican contaminaciones ocasionales (agua, ma-
terial de vidrio, etc.).
Una cantidad conocida de iones de hierro se adiciona a la MUESTRA
muestra a pH alcalino para saturar la transferrina y el exceso Suero o plasma heparinizado
no unido se mide colorimétricamente. UIBC es igual a la dife- a) Recolección: el paciente debe estar en ayunas y las
rencia entre la concentración de hierro adicionado y el exceso extracciones deben practicarse siempre a la misma hora
no unido. TIBC se puede calcular como la suma de hierro (preferentemente de mañana) ya que las fluctuaciones
sérico y la capacidad latente de fijación de hierro (UIBC). fisiológicas son significativas durante el día.
b) Aditivos: en caso de utilizar plasma como muestra debe
REACTIVOS PROVISTOS usarse heparina como anticoagulante.
A. Reactivo A: buffer Tris 500 mM, pH 8,7 conteniendo 50 ug/dl c) Sustancias interferentes conocidas: no se observa
de hierro (II), tiourea 80 mM. interferencia por bilirrubina conjugada hasta 20 mg/dl, bilirru-
B. Reactivo B: solución de ferrozina 5 mM. bina no conjugada hasta 35 mg/dl y heparina hasta 50 UI/ml.
S. Standard: solución de iones hierro (II) equivalente a Se recomienda el uso de muestras libres de hemólisis. Los
500 ug/dl. triglicéridos no interfieren hasta 1200 mg/dl en la técnica
automática y 300 mg/dl en la técnica manual.
- Agua desionizada. drogas en el presente método.
- Fer-color AA o Fer-color AA líquida, para el cálculo de TIBC. d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: las
muestras pueden conservarse una semana en refrigerador
INSTRUCCIONES PARA SU USO (2-10oC). En caso de no procesarse en el momento, congelar
Reactivos Provistos: listos para usar. El Standard es utili- para su conservación.
zado en algunas adaptaciones a analizadores automáticos.
PRECAUCIONES - Espectrofotómetro o analizador automático.
Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro". - Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados.
Evitar la ingestión y el contacto con los ojos. - Tubos o cubetas espectrofotométricas.
El Reactivo A contiene tiourea; estudios experimentales - Baño a 37oC.
realizados con esta droga en animales han evidenciado un - Agua libre de hierro.
posible efecto carcinogénico. - Cronómetro.
Todo el material a utilizar debe estar libre de hierro por lo
que debe sumergirse al menos 6 horas en solución de HCl CONDICIONES DE REACCION
10% y luego enjuagar con abundante cantidad de agua - Longitud de onda: 560 nm
libre de hierro. - Temperatura de reacción: 37oC
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales - Tiempo de reacción: 6 minutos
861273022 / 01 p. 1/9
- Volumen de muestra: 100 ul % Saturación de Transferrina:
- Volumen total de reacción: 1,3 ml Hombres: 20-50%
Mujeres: 15-50%

En dos tubos o cubetas espectrofotométricas marcados valores de referencia.
B (Blanco) y D (Desconocido) colocar:
CONVERSIONES DE UNIDADES AL SISTEMA SI
B D UIBC (ug/dl) x 0,179 = UIBC (umol/l)
Agua bidestilada 100 ul - TIBC (ug/dl) x 0,179 = TIBC (umol/l)
Muestra - 100 ul
Reactivo A 1 ml 1 ml - Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
Mezclar, incubar 3 minutos a 37oC. Leer la absorbancia - Limpieza del material: todo el material de laboratorio em-
de B (BA) y de D (BD) en espectrofotómetro a 560 nm pleado debe estar libre de hierro, para ello debe ser su-
llevando a cero el aparato con agua. Luego agregar: mergido durante al menos 6 horas en HCl 10%, eliminando
la acidez mediante numerosos lavados con agua libre de
Reactivo B 200 ul 200 ul hierro. Todo el material debe ser empleado exclusivamente
Mezclar inmediatamente, incubar 3 minutos a 37oC. Volver para la determinación de UIBC.
a leer cada uno en las condiciones especificadas arriba.
PERFORMANCE
ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL EP15-A del CLSI (ex-NCCLS), se obtuvo lo siguiente:
Los tubos deben ser leídos entre 3 y 30 minutos luego de Precisión intraensayo (n = 20)
completados los pasos del procedimiento.
Nivel D.S. C.V.
CALCULO DE LOS RESULTADOS 132,46 ug/dl ± 1,07 ug/dl 0,81 %
Corregir las lecturas de B y D, restándoles los Blancos 184,83 ug/dl ± 1,32 ug/dl 0,72 %
correspondientes: 416,35 ug/dl ± 5,04 ug/dl 1,21 %
B - BA = B corregida Precisión total (n = 20)
D - BD = D corregida Nivel D.S. C.V.
D corregida 132,46 ug/dl ± 3,73 ug/dl 2,82 %
UIBC (ug/dl) = 500 - (500 x ) 184,83 ug/dl ± 6,70 ug/dl 3,62 %
B corregida 416,35 ug/dl ± 7,63 ug/dl 1,83 %
Ejemplo: b) Límite de detección: la mínima concentración de UIBC
BA = 0,000 D.O.; B = 0,170 D.O.; B corregida = 0,170 D.O. detectable empleando UIBC/TIBC AA líquida es 0,2 ug/dl.
BD = 0,020 D.O.; D = 0,110 D.O.; D corregida = 0,090 D.O. c) Límite de cuantificación: la mínima concentración de
0,09 UIBC detectable empleando UIBC/TIBC AA líquida con
UIBC (ug/dl) = 500 - (500 x ) = 235 ug/dl precisión y exactitud aceptables es 13 ug/dl.
0,17 d) Linealidad: la reacción es lineal hasta 500 ug/dl en au-
Cálculos adicionales: toanalizadores y hasta 450 ug/dl en técnica manual.
TIBC (ug/dl) = UIBC (ug/dl) + Hierro sérico (ug/dl) Para muestras con concentración de UIBC superior a 500 ug/dl
en autoanalizadores o 450 ug/dl en técnica manual, diluir
100 x Hierro sérico al medio manualmente con solución fisiológica y ensayar
% Saturación de Transferrina =
TIBC nuevamente. Multiplicar el resultado por el factor de dilución.
METODO DE CONTROL DE CALIDAD PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS

Procesar 2 niveles de un material de control de calidad (Stan- Para las instrucciones de programación debe consultarse el
datrol S-E 2 niveles) con valores conocidos de UIBC/TIBC Manual del Usuario del analizador en uso.
con cada determinación.
PRESENTACION
VALORES TEORICOS 60 ml: - 1 x 50 ml Reactivo A
Intervalos en adultos: - 1 x 10 ml Reactivo B
UIBC: (Cód. 1492361)
Hombres: 140-330 ug/dl
Mujeres: 140-346 ug/dl 72 ml: - 3 x 20 ml Reactivo A
TIBC: 250-425 ug/dl (Cód. 1009286)
861273022 / 01 p. 2/9
72 ml: - 3 x 20 ml Reactivo A Este producto cumple con los requerimientos previstos

(Cód. 1009633) C por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios

- Goodwin, J. et al. - Clin. Chem. 12/2:47-57, 1966.
- Levy, A.L. et al. - Clin. Chem. 7/3:241-248, 1961.
- Burtis,C.A.; Ashwood, E.R.; “Tietz Fundamentals of Clinical Contenido suficiente para <n> ensayos
Chemistry”, 5ª edición, 2001.
X
- Gambino, R. et al. - Clin. Chem. 43/12:2408-2412, 1997. Fecha de caducidad
H
- Henry, R.J.; Cannon, D.C.; Winkelman, J.W.; “Clinical
Chemistry, Principles and Techniques”, Harper & Row, 2ª
edición, 1974.
- Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",  No congelar

- Tietz, N.W.; Rinker, A.D.; Morrison, S.R. - Clin. Chem F Riesgo biológico
40/4:546-551, 1994.
- Preden-Kerekovic, V. et al. - Clin. Chem. Lab. Med. Volumen después de la reconstitución
36/5:327-337, 1998.
Cont. Contenido
- CLSI: Clinical and Laboratory Standards Institute (ex-NC-
CLS), Protocol EP15-A, 2001; EP6-A, 2003; EP17-A, 2004.
- NTP, National Toxicology Program, Department of Health
g Número de lote
and Human Services, Report of Carcinogens, 2005. Elaborado por:

M
Xn
Nocivo
Xi
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
861273022 / 01 p. 3/9 UR130730
Urea color
C Para la determinación de urea en líquidos biológicos
SIGNIFICACION CLINICA Reactivo B: irritante. R36/38: Irrita los ojos y la piel. S26: En
La urea constituye la fracción de nitrógeno no proteico más caso de contacto con los ojos, lávense inmediata y abundan-
importante en la mayoría de los líquidos biológicos. En el temente con agua y acúdase a un médico. S37/39: Úsense
hombre es el principal producto final del metabolismo pro- guantes adecuados y protección para los ojos/la cara.
teico. Se produce en el hígado y es excretada por la orina a
través de los riñones. ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
Una elevación de la concentración sérica de urea, se inter- ALMACENAMIENTO
preta generalmente como una posible disfunción renal. Sin Reactivos Provistos: estables en refrigerador (2-10oC)
embargo, no debe dejarse de lado el hecho de que los valo- hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
res séricos de urea se encuentran íntimamente relacionados Reactivos A y B: estables durante 1 año a partir del momen-
con la dieta y el metabolismo proteico, por lo que cualquier to de su preparación conservados en refrigerador (2-10oC).
alteración en estas variables se traducirá en un cambio de La mezcla de Reactivo A+C es estable durante 20 días en
la concentración de urea en suero. refrigerador (2-10oC) a partir del momento de su preparación.

La ureasa descompone específicamente la urea produciendo REACTIVOS
dióxido de carbono y amoníaco. Este reacciona en medio Valores de Blanco superiores a 0,150 D.O. son indicio de
alcalino con salicilato e hipoclorito para dar indofenol color deterioro de los reactivos. En tal caso desechar.
verde.
MUESTRA
REACTIVOS PROVISTOS Suero, plasma u orina
A. Reactivo A: solución concentrada conteniendo buffer a) Recolección: obtener de la manera usual.
fosfatos 200 mmol/l, ácido salicílico 750 mmol/l, nitroprusiato b) Aditivos: en caso de que la muestra a usar sea plasma
de sodio 20 mmol/l y EDTA 10 mmol/l. se recomienda el uso de Anticoagulante W de Wiener lab.
B. Reactivo B: solución concentrada de hipoclorito de sodio c) Sustancias interferentes conocidas:
10 mmol/l en hidróxido de sodio 0,1 mol/l. - Los anticoagulantes que contienen fluoruros inhiben la
C. Reactivo C: ureasa ≥ 75 U/ml en solución glicerinada. acción de la ureasa.
S. Standard: solución de urea 0,60 g/l (28,04 mg/dl de BUN). - No se observan interferencias por hemólisis ligeras o mo-
deradas y bilirrubina hasta 400 mg/l.
Agua destilada. drogas en el presente método.
INSTRUCCIONES PARA SU USO urea en suero es estable varios días en refrigerador (2-10oC)
Reactivo A; preparación: diluir 1 parte del Reactivo A con- o 6 meses en congelador, sin agregado de conservadores.
centrado + 4 partes de agua destilada.
Reactivo B; preparción: diluir 1 parte del Reactivo B con- MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
centrado + 4 partes de agua destilada. - Espectrofotómetro o fotocolorímetro.
Reactivo A+C: se prepara agregando 4 ml de Reactivo C - Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados.
cada 100 ml de Reactivo A. Pueden prepararse otras canti- - Baño de agua a 37oC (opcional).
dades mientras se respete la proporción indicada. - Reloj o timer.

Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro". - Temperatura de reacción: 37oC o temperatura ambiente.
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales - Tiempo de reacción: 10 minutos a 37oC o 20 minutos a
de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos. temperatura ambiente.
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de - Volumen de reacción: 2 ml
acuerdo a la normativa local vigente. - Volumen de muestra: 10 ul
870970022 / 00 p. 1/9
PROCEDIMIENTO Urea (g/l) x 16,67 = Urea (mmol/l)
BUN (mg/dl) x 0,357 = Urea (mmol/l)
I) TECNICA PARA SUERO O PLASMA
En tres tubos marcados B (Blanco), D (Desconocido) y VALORES DE REFERENCIA
S (Standard) colocar: Suero o plasma: 0,10 - 0,50 g/l
B S D Este rango se obtuvo de 120 muestras de individuos en
ayunas, pertenecientes a ambos sexos, con edades com-
Standard - 10 ul -
prendidas entre 20 y 45 años, provenientes de la ciudad de
Suero o plasma - - 10 ul Rosario (Argentina), sin síntomas de disfunción renal u otra
Reactivo A+C 1 ml 1 ml 1 ml enfermedad aparente.
Orina: normalmente, la eliminación de urea está sujeta a
Mezclar. Incubar 5 minutos a 37oC o 10 minutos a tem- grandes variaciones dependientes de la dieta. Por término
peratura ambiente. Luego agregar: medio, y con una dieta mixta corriente, se excreta unos 30 g
Reactivo B 1 ml 1 ml 1 ml en 24 horas, con oscilaciones comprendidas entre 20 g y 40 g.
Mezclar. Incubar 5 minutos a 37oC o 10 minutos a tem- Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios
peratura ambiente. valores de referencia.
Leer en espectrofotómetro a 570 nm o en fotocolorímetro
con filtro naranja (560-580 nm). LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
II) TECNICA PARA ORINA
Se sigue la misma técnica que para suero o plasma PERFORMANCE
utilizando orina diluida con agua o solución fisiológica. a) Reproducibilidad: procesando simultáneamente repli-
Como el contenido de urea está generalmente relacio- cados de una misma muestra en un mismo día se obtienen
nado con la densidad, es conveniente diluir según el los siguientes resultados:
siguiente esquema:
Nivel D.S. C.V.
Densidad hasta 1,015..................................... diluir 1/10 0,60 g/l ± 0,008 g/l 1,32 %
Densidad de 1,016 a 1,025............................. diluir 1/20 2,28 g/l ± 0,045 g/l 1,97 %
Densidad mayor de 1,025............................... diluir 1/40
b) Linealidad: la reacción es lineal hasta 2,50 g/l. Si las
Como la orina contiene cantidades variables de amoníaco lecturas resultan muy altas para el aparato empleado pueden
debe efectuarse un Blanco de orina (BD). Dicho Blanco utilizarse 1,5 ml de cada Reactivo y 10 ul de muestra para
se ejecuta igual que el Blanco de reactivos (B), con la obtener la linealidad mencionada.
diferencia que, después de agregado el Reactivo B, se Cuando la concentración de urea supera los 2,50 g/l o está por
agregan 10 ul de la dilución de orina. Llevar el aparato encima de la linealidad del aparato, puede diluirse la reacción
a cero con el Blanco de Reactivos (B) y leer el Standard final con el blanco. En estas condiciones es lineal hasta 5 g/l.
(S), el Blanco de orina (BD) y desconocido (D). c) Recuperación: agregando cantidades conocidas de urea
a diferentes alícuotas de la misma muestra se obtuvo una
recuperación entre 94,2 y 100,6%.
ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL d) Sensibilidad analítica: depende del fotómetro empleado
El color de la reacción es estable durante 2 horas por lo que y de la longitud de onda. En espectrofotómetros con cube-
la absorbancia debe ser leída dentro de ese lapso. tas de caras paralelas de 1 cm de espesor, para un ∆A de
0,001 el mínimo cambio de concentración detectable será
CALCULO DE LOS RESULTADOS de 0,0125 g/l.
Suero o plasma:
Urea g/l = D x factor factor = Equipo para 500 determinaciones (Cód. 1810050).
S
Orina: BIBLIOGRAFIA
(D - BD) x 0,60 g/l - Kim, H.S.; et al. - J. Korean Agr. Chem. Soc. 2:23 (1961).
Urea g/l = x dilución - Stergermann, H. et al. - Z. Physiol. Chem. 329:241 (1962).
S - Fawcett, J.K. et al. - Brit. J. Clin. Path. 13:156 (1960).
- Searcy, R.L. et al. - Am. J. Med. Techn. 27:255 (1961).
METODO DE CONTROL DE CALIDAD - Patton, C.J. et al. - Analytical Chem. 49/3:464 (1977).
Si la muestra a ensayar es suero, procesar 2 niveles de un - Lorenzo, L.; Setta, F.; Demaría, I. - “Evaluación de un mé-
material de control de calidad (Standatrol S-E 2 niveles) todo de Berthelot modificado para dosar urea” - Revista
con concentraciones conocidas de urea, con cada determi- ABA 55/2:76 (1991).
nación. En el caso de muestras de orina, utilizar un control - Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
con base de orina. AACC Press, 4th ed., 2001.
870970022 / 00 p. 2/9
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870970022 / 00 p. 3/9 UR120607
LINEA LIQUIDA
Urea
C cinética AA
Para la determinación de urea en suero, plasma u orina

La urea constituye la fracción de nitrógeno no proteico más de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
importante en la mayoría de los líquidos biológicos. En el Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
hombre es el principal producto final del metabolismo pro- acuerdo a la normativa local vigente.
teico. Se produce en el hígado y es excretada por la orina
a través de los riñones. ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
Una elevación de la concentración sérica de urea, se inter- ALMACENAMIENTO
preta generalmente como una posible disfunción renal. Sin Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10oC)
embargo, no debe dejarse de lado el hecho de que los valo- hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. Una vez
res séricos de urea se encuentran íntimamente relacionados abiertos, no deben permanecer destapados y fuera del
con la dieta y el metabolismo proteico, por lo que cualquier refrigerador durante lapsos de tiempo prolongados. Evitar
alteración en estas variables se traducirá en un cambio de contaminaciones.
la concentración de urea en suero. Reactivo único (premezclado): en refrigerador (2-10oC)
es estable 30 días a partir del momento de su preparación.
Basado en el siguiente esquema reaccionante: INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
ureasa REACTIVOS
urea + H2O > 2 NH3 + CO2 La turbidez es indicio de deterioro de los Reactivos.
Cuando el espectrofotómetro ha sido llevado a cero con agua,
GLDH
lecturas de Absorbancia del Blanco inferiores a 1,000 D.O. (a
NH3 + NADH + H+ + 2-oxoglutarato > l-glutamato +
NAD+ + H2O
MUESTRA
REACTIVOS PROVISTOS
S. Standard*: solución de urea 0,60 g/l (equivalente a 28,04 mg/dl Suero, plasma u orina
de BUN). a) Recolección: obtener suero de la manera usual o plasma
A. Reactivo A: solución conteniendo buffer Good pH 7,6, recolectado con anticoagulantes comunes. Separar de los
2-oxoglutarato, ureasa y glutamato deshidrogenasa (GLDH). glóbulos rojos dentro de las 24 horas de obtenida.
B. Reactivo B: solución conteniendo NADH. Si la muestra es orina, utilizar preferentemente fresca.
Concentraciones finales plasma, se recomienda el uso de heparina o EDTA (Anti-
Buffer Good........................................................ 250 mmol/l coagulante W de Wiener lab.) para su obtención. Noutilizar
2-Oxoglutarato..................................................... 7,5 mmol/l heparinato de amonio.
NADH............................................................... 0,28 mmol/l c) Sustancias interferentes conocidas: no se observan
Ureasa (Jack bean)............................................. ≥ 5000 U/l interferencias por bilirrubina hasta 150 mg/l, hemoglobina
GLDH (microbiana)............................................... ≥ 800 U/l hasta 350 mg/dl y triglicéridos hasta 7 g/l.
REACTIVOS NO PROVISTOS drogas en el presente método.
Calibrador A plus de Wiener lab. d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
urea en suero es estable 7 días a 20-25oC o a 2-10oC o 1 año
INSTRUCCIONES PARA SU USO a -20oC, sin agregado de conservantes. En orina es estable
Standard : listo para usar. 2 días a 20-25oC, 7 días a 2-10oC o 4 semanas a -20oC sin
Reactivos A y B: listos para usar. Estos pueden usarse agregado de conservantes.
separados o como Reactivo único mezclando 4 partes de
Reactivo A + 1 parte de Reactivo B (ej.: 4 ml Reactivo A + MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
1 ml Reactivo B). - Espectrofotómetro
PRECAUCIONES - Cubetas espectrofotométricas
Los Reactivos son para uso diagnóstico "in vitro". - Cronómetro

(disminución de la absorbancia) Suero o plasma
- Longitud de onda: 340 nm (Hg 334 ó 366) 0,10 - 0,50 g/l como urea (4,7 - 23,4 mg/dl como BUN)
- Temperatura de reacción: 37oC Este rango se obtuvo de muestras provenientes de 120 in-
- Tiempo de reacción: 2 minutos dividuos habitantes de la ciudad de Rosario (Argentina), de
- Volumen de muestra: 10 ul ambos sexos (entre 20 y 45 años), sin síntomas de disfunción
- Volumen final de la reacción: 1,01 ml renal u otra enfermedad aparente.
Los volúmenes de Muestra y de Reactivo pueden variarse
Orina
proporcionalmente a fin de acomodarlos a los requerimientos
Normalmente, la eliminación de urea está sujeta a grandes
de los distintos espectrofotómetros.
variaciones dependientes de la dieta. Por término medio, y
con una dieta mixta corriente, se excretan unos 30 g en 24
horas, con oscilaciones comprendidas entre 20 g y 40 g.
PROCEDIMIENTO
I- TECNICA CON REACTIVOS SEPARADOS de referencia:
Llevar a cero el espectrofotómetro con agua destilada. Suero o plasma: 13 - 43 mg/dl (2,1 - 7,1 mmol/l)
En una cubeta mantenida a la temperatura de trabajo, Orina: 26 - 43 g/24 hs (0,43 - 0,72 mol/24 horas)
colocar: Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios
Reactivo A 1 ml valores de referencia.
Muestra o Standard 10 ul CONVERSION DE UNIDADES
Mezclar sin invertir. Incubar aproximadamente 1 minuto Urea (g/l) x 46,7 = BUN (mg/dl)
a 37oC. Luego agregar: Urea (mg/dl) x 0,1665 = Urea (mmol/l)
Urea (mg/dl) x 0,467 = BUN (mg/dl)
Reactivo B 250 ul
BUN (mg/dl) x 2,14 = Urea (mg/dl)
Mezclar inmediatamente (sin invertir) y disparar simul- Urea (g/24 hs) x 0,0167 = Urea (mol/24 hs)
táneamente un cronómetro. A los 60 segundos exactos Para convertir valores de urea (en g/l) a valores de BUN (en
medir la absorbancia (D1 o S1) y continuar la incubación. mg/dl), se debe utilizar el siguiente factor de conversión:
Medir nuevamente la absorbancia (D2 o S2) a los 120
segundos (60 segundos después de la 1° lectura). 1 1000
factor = x = 46,7
II- TECNICA CON REACTIVO UNICO 2,14 10
Llevar a cero el espectrofotómetro con agua destilada. donde:
En una cubeta mantenida a la temperatura de trabajo, 1/2,14 = factor de conversión entre la urea y el nitrógeno
colocar: ureico en sangre (BUN)
Reactivo único 1 ml 1000 = factor de conversión entre gramo y miligramo
1/10 = factor de conversión entre litro y decilitro
Muestra o Standard 10 ul Ejemplo:
Mezclar inmediatamente (sin invertir) y disparar simul- 0,50 g/l de urea x 46,7 = 23,4 mg/dl de BUN
táneamente un cronómetro. A los 60 segundos exactos
medir la absorbancia (D1 o S1) y continuar la incubación. LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
Medir nuevamente la absorbancia (D2 o S2) a los 120 Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
segundos (60 segundos después de la 1° lectura). Para preservar la integridad de los reactivos debe emplearse
material volumétrico perfectamente limpio y seco.
III- TECNICA EN ORINA
Utilizar la misma técnica (I o II) diluyendo la orina con- PERFORMANCE
venientemente con agua o solución fisiológica. Para Los ensayos fueron realizados en analizador Express Plus(*)
el cálculo de los resultados, multiplicar por el factor de a) Reproducibilidad: procesando simultáneamente 20
dilución utilizado. replicados de una misma muestra, en un mismo día, se
obtienen los siguientes resultados:
CALCULO DE LOS RESULTADOS Precisión intraensayo
0,60 g/l Nivel D.S. C.V.
Urea (g/l) = f x (D1 - D2 ) f= 0,283 g/l ± 0,0057 g/l 2,01 %
(S1 - S2) 1,13 g/l ± 0,0136 g/l 1,20 %
METODO DE CONTROL DE CALIDAD Precisión interensayo

Procesar 2 niveles de un material de control de calidad Nivel D.S. C.V.
(Standatrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas 0,28 g/l ± 0,0066 g/l 2,36 %
de urea, con cada determinación. 1,13 g/l ± 0,0148 g/l 1,31 %
(*)
b) Sensibilidad: la sensibilidad analítica de Urea UV cinética SÍMBOLOS
AA líquida es 0,071 g/l (7,1 mg/dl) de urea o 3,32 mg/dl de Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
BUN y el límite de detección es 0,0383 g/l (3,83 mg/dl) de reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
urea o 1,79 mg/dl de BUN.
c) Linealidad: la reacción es lineal hasta 3 g/l (300 mg/dl) de Este producto cumple con los requerimientos previstos
urea y hasta 140 mg/dl como BUN. Para valores superiores,
diluir la muestra original 1:2 con agua destilada y repetir la C por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios
determinación. Corregir los cálculos multiplicando el resul-
tado por el factor de dilución empleado.
d) Correlación: se determinó el valor de urea en 158 mues-
tras usando Urea UV cinética AA líquida y otro kit comercial
basado en el mismo principio. El coeficiente de correlación Contenido suficiente para <n> ensayos
obtenido fue el siguiente:
X
r = 0,9995; pendiente b = 1,0093; intersección a = 0,0985 H Fecha de caducidad
PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS l Límite de temperatura (conservar a)

del Usuario del analizador en uso.  No congelar
Para la calibración, se debe utilizar Calibrador A plus de
Wiener lab., de acuerdo a los requerimientos del analizador. F Riesgo biológico

PRESENTACION
- 225 ml (3 x 60 ml Reactivo A + 3 x 15 ml Reactivo B), Cont. Contenido
sin Standard (Cód. 1009319).
- 300 ml (4 x 60 ml Reactivo A + 1 x 60 ml Reactivo B), g Número de lote
- 400 ml (8 x 40 ml Reactivo A + 4 x 20 ml Reactivo B), Elaborado por:
M
Xn
- 500 ml (4 x 100 ml Reactivo A + 4 x 25 ml Reactivo B), Nocivo
Standard incluido (Cód. 1810324).
- 1000 ml (4 x 200 ml Reactivo A + 1 x 200 ml Reactivo B), Corrosivo / Cáustico
Standard incluido (Cód. 1810328). Xi
Irritante
BIBLIOGRAFIA
- Searcy, R.L. - "Diagnostic Biochemistry" McGraw-Hill, New i Consultar instrucciones de uso
York, NY 1969.
- Talke, H.; Schubert, G.E. - Klin Wochschr 43:174, 1965. Calibr. Calibrador
- Tiffany, T.O.; Jansen, J.M.; Burtis, C.A.; Overton, J.B.; Scott,
C.D. - Clin. Chem. 18:829, 1972. b Control
b Control Positivo

wood, E. (5º Edition) WB Saunders, 2001.
c Control Negativo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
864127022 / 01 p. 3/9 UR120903
Urea
C cinética AA
Para la determinación de urea en suero, plasma u orina

La urea constituye la fracción de nitrógeno no proteico más Los Reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
importante en la mayoría de los líquidos biológicos. En el Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
hombre es el principal producto final del metabolismo pro- de trabajo en el laboratorio de química clínica.
teico. Se produce en el hígado y es excretada por la orina Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
a través de los riñones. acuerdo a la normativa local vigente.
Una elevación de la concentración sérica de urea, se inter-
preta generalmente como una posible disfunción renal. Sin ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
embargo, no debe dejarse de lado el hecho de que los valo- ALMACENAMIENTO
res séricos de urea se encuentran íntimamente relacionados Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10oC)
con la dieta y el metabolismo proteico, por lo que cualquier hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
alteración en estas variables se traducirá en un cambio de Reactivo de Trabajo: en refrigerador (2-10oC) es estable
la concentración de urea en suero. 30 días a partir del momento de su preparación.

Basado en el siguiente esquema reaccionante: REACTIVOS
ureasa Cuando el espectrofotómetro ha sido llevado a cero con
urea + H2O 2 NH3 + CO2 agua, lecturas de Absorbancia del Reactivo de Trabajo
GlDH inferiores a 1,000 D.O. (a 340 nm) son indicio de deterioro
NH3 + NADH + H+ + 2-oxoglutarato l-glutamato + del mismo, por lo que debe descartarse.
NAD+ + H2O
MUESTRA
REACTIVOS PROVISTOS Suero, plasma u orina
S. Standard: solución de urea 0,60 g/l (28,04 mg/dl de BUN). a) Recolección: obtener suero de la manera usual o plasma
A. Reactivo A: viales conteniendo 2-oxoglutarato, NADH, recolectado con anticoagulantes comunes. Separar de los
ureasa y glutamato deshidrogenasa (GlDH). glóbulos rojos dentro de las 24 horas de obtenida.
B. Reactivo B: solución de buffer Goods pH 7,8 ± 0,1. Si la muestra es orina, utilizar preferentemente fresca.
Concentraciones finales b) Aditivos: en caso de que la muestra a emplear sea
2-Oxoglutarato..................................................... 7,5 mmol/l plasma, se recomienda el uso de heparina o EDTA (Anti-
NADH............................................................... 0,28 mmol/l coagulante W de Wiener lab.) para su obtención. No utilizar
Ureasa (Jack bean)............................................. ≥ 4000 U/l heparinato de amonio.
GlDH (microbiana)................................................. ≥ 400 U/l c) Sustancias interferentes conocidas: no se observan
Goods................................................................. 100 mmol/l interferencias por bilirrubina hasta 150 mg/l, hemoglobina
hasta 350 mg/dl, ni triglicéridos hasta 7 g/l.
INSTRUCCIONES PARA SU USO urea en suero es estable 7 días a 20-25oC o a 2-10oC o 1
Standard : listo para usar. año a -20oC, sin agregado de conservantes. En orina es
Reactivo de Trabajo: estable 2 días a 20-25oC, 7 días a 2-10oC o 4 semanas a
- 4 x 50 ml: disolver el contenido de un vial de Reactivo A en -20oC sin agregado de conservantes.
un frasco de Reactivo B. Enjuagar varias veces el vial con
Reactivo B. Mezclar suavemente por inversión hasta diso- MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
lución completa, evitando la formación de espuma. Fechar. - Espectrofotómetro.
- 10 x 20 ml: disolver el contenido de un vial de Reactivo A - Micropipetas y pipetas capaces de medir los volúmenes
con 20 ml de Reactivo B. Mezclar suavemente por inver- indicados.
sión hasta disolución completa, evitando la formación de - Cubetas espectrofotométricas.
espuma. Fechar. - Cronómetro.
870980022 / 00 p. 1/9
CONDICIONES DE REACCION y con una dieta mixta corriente, se excretan unos 30 g en
(disminución de la absorbancia) 24 horas, con oscilaciones comprendidas entre 20 g y 40 g.
- Longitud de onda: 340 nm (Hg 334 ó 366) En la literatura (Tietz, N.W.) se menciona el siguiente rango
- Temperatura de reacción: 37oC de referencia:
- Tiempo de reacción: 2 minutos Suero o plasma: 13 - 43 mg/dl (2,1 - 7,1 mmol/l)
- Volumen de muestra: 10 ul Orina: 26 - 43 g/24 hs (0,43 - 0,72 mol/24 horas)
- Volumen final de la reacción: 1,01 ml Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios
Se pueden alterar proporcionalmente los volúmenes de valores de referencia.
muestra y de reactivo a fin de acomodarlo a los requerimien-
tos de los distintos espectrofotómetros. CONVERSION DE UNIDADES
Urea (g/l) x 46,7 = BUN (mg/dl)
Urea (mg/dl) x 0,1665 = Urea (mmol/l)
PROCEDIMIENTO Urea (mg/dl) x 0,467 = BUN (mg/dl)
Equilibrar los reactivos a la temperatura de trabajo antes BUN (mg/dl) x 2,14 = Urea (mg/dl)
de agregar la muestra. Urea (g/24 hs) x 0,0167 = Urea (mol/24 hs)
Llevar a cero el espectrofotómetro con agua destilada. Para convertir valores de urea (en g/l) a valores de BUN (en
En una cubeta mantenida a la temperatura de trabajo, mg/dl), se debe utilizar el siguiente factor de conversión:
colocar: 1 1000
Reactivo de Trabajo 1 ml factor = x = 46,7
2,14 10
Muestra o Standard 10 ul
donde:
Mezclar inmediatamente (sin invertir) y disparar simul- 1/2,14 = factor de conversión entre la urea y el nitrógeno
táneamente un cronómetro. A los 60 segundos exactos ureico en sangre (BUN)
medir la absorbancia (D1 o S1 ) y continuar la incubación. 1000 = factor de conversión entre gramo y miligramo
Medir nuevamente la absorbancia (D2 o S2 ) a los 120 1/10 = factor de conversión entre litro y decilitro
segundos (60 segundos después de la 1° lectura). De-
terminar la diferencia de absorbancia (∆A). Utilizar esta Ejemplo:
diferencia para los cálculos. 0,50 g/l de urea x 46,7 = 23,4 mg/dl de BUN
TECNICA EN ORINA LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO

Utilizar la misma técnica diluyendo la orina convenien- Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
temente con agua o solución fisiológica. Para el cálculo Para preservar la integridad de los reactivos debe emplearse
de los resultados, multiplicar por el factor de dilución material volumétrico perfectamente limpio y seco.
utilizado.
PERFORMANCE
CALCULO DE LOS RESULTADOS Ex-press Plus(*).
0,60 g/l a) Reproducibilidad: procesando simultáneamente 20
Urea (g/l) = f x (D1 - D2 ) f= replicados de una misma muestra, se obtiene:
(S1 - S2)
METODO DE CONTROL DE CALIDAD Nivel D.S. C.V.
Procesar 2 niveles de un material de control de calidad 0,283 g/l ± 0,0057 g/l 2,01 %
(Standatrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas 1,13 g/l ± 0,0136 g/l 1,20 %
de urea, con cada determinación. Precisión intraensayo
Nivel D.S. C.V.
0,28 g/l ± 0,0066 g/l 2,36 %
Suero o plasma
1,13 g/l ± 0,0148 g/l 1,31 %
0,10 - 0,50 g/l como urea (4,7 - 23,4 mg/dl como BUN)
b) Sensibilidad: la sensibilidad analítica de Urea UV cinética
Este rango se obtuvo de 120 muestras de individuos en
ayunas, pertenecientes a ambos sexos, con edades com- AA es de 0,071 g/l (7,1 mg/dl) de urea o 3,32 mg/dl de BUN
prendidas entre 20 y 45 años, provenientes de la ciudad de y el límite de detección es 0,0383 g/l (3,83 mg/dl) de urea o
Rosario (Argentina), sin síntomas de disfunción renal u otra 1,79 mg/dl de BUN.
enfermedad aparente. c) Linealidad: la reacción es lineal hasta 3 g/l (300 mg/dl)
de urea y hasta 140 mg/dl de BUN. Para valores superiores,
Orina diluir la muestra original 1:2 con agua destilada y repetir la
Normalmente, la eliminación de urea está sujeta a grandes determinación. Corregir los cálculos multiplicando el resultado
variaciones dependientes de la dieta. Por término medio, por el factor de dilución empleado.
(*)
d) Correlación: se determinó el valor de urea en 158 SÍMBOLOS
muestras usando Urea UV cinética AA y otro kit comercial Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
basado en el mismo principio. El coeficiente de correlación reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
obtenido fue el siguiente:
r = 0.9995; pendiente b = 1,0093; intersección a = - 0,0985 Este producto cumple con los requerimientos previstos
PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS C por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios
del usuario del analizador en uso. Para la calibración, se P Representante autorizado en la Comunidad Europea
puede utilizar Calibrador A plus de Wiener lab.

- 10 x 20 ml (Cód. 1810322). X
- 4 x 50 ml (Cód. 1810323). Fecha de caducidad
H
BIBLIOGRAFIA
- Searcy, R.L. - "Diagnostic Biochemistry" McGraw-Hill, New
York, NY 1969.  No congelar

- Talke, H.; Schubert, G.E. - Klin Wochschr 43:174, 1965..
- Tiffany, T.O.; Jansen, J.M.; Burtis, C.A.; Overton, J.B.; Scott, F Riesgo biológico
C.D. - Clin. Chem. 18:829, 1972.
- Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests", Volumen después de la reconstitución
Cont. Contenido
- Faulkner, W.R.; King, J.W. - "Fundamentals of Clinical Che-
mistry". Tietz NW (Ed) W.B. Saunders Co. Philadelphia
Chap 12:718, 1970.
g Número de lote
- Tietz Fundamentals of clinical chemistry - Burtis, C., Ash- Elaborado por:

wood, E. (5º Edition) WB Saunders, 2001. M
Xn
Nocivo
Xi
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
870980022 / 00 p. 3/9 UR120607
Uremia
Para la determinación de urea en suero, plasma y orina
SIGNIFICACION CLINICA Fechar.

La urea constituye la fracción de nitrógeno no proteico más Standard: listo para usar.
importante en la mayoría de los líquidos biológicos. En el
hombre es el principal producto final del metabolismo pro- PRECAUCIONES
teico. Se produce en el hígado y es excretada por la orina Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
a través de los riñones. Reactivo A: nocivo. R20/22: nocivo por inhalación y por
Una elevación de la concentración sérica de urea, se inter- ingestión. S24/25: evítese el contacto con los ojos y la piel.
preta generalmente como una posible disfunción renal. Sin S26/28: en caso de contacto con la piel y los ojos, lávese
embargo, no debe dejarse de lado el hecho de que los valo- inmediatamente con abundante agua y acúdase a un médico.
res séricos de urea se encuentran íntimamente relacionados Reactivo B: irritante. R36/38: irrita los ojos y la piel. S26/28:
con la dieta y el metabolismo proteico, por lo que cualquier en caso de contacto con ojos y piel, lávense inmediatamente
alteración en estas variables se traducirá en un cambio de y abundantemente con agua y acúdase a un médico. S37/39:
la concentración de urea en suero. usar guantes adecuados y protección para los ojos/la cara.
FUNDAMENTOS DEL METODO de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
La ureasa descompone específicamente a la urea produ- Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
ciendo dióxido de carbono y amoníaco; éste reacciona con acuerdo a la normativa local vigente.
fenol e hipoclorito en medio alcalino produciendo azul de
indofenol que se determina colorimétricamente. ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES
DE ALMACENAMIENTO
REACTIVOS PROVISTOS Reactivos Provistos: estables a temperatura ambiente
A. Reactivo A: reactivo desecado conteniendo fenol y hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
nitroferricianuro de sodio. Reactivos A y B: una vez reconstituidos son estables 1 año
B. Reactivo B: reactivo concentrado de hipoclorito de sodio en refrigerador (2-10oC) y al abrigo de la luz, a partir de la
e hidróxido de sodio. fecha de su preparación.
S. Standard: solución de urea 0,60 g/l.
fenol.................................................................... 532 mmol/l REACTIVOS
nitroferricianuro de sodio................................... 0,85 mmol/l Las contaminaciones con vapores amoniacales producen
hipoclorito de sodio........................................... 36,6 mmol/l deterioro de los reactivos. Lecturas del Blanco > 0.150 D.O.
hidróxido de sodio.............................................. 0,625 mol/l indican contaminación con amoníaco, en tal caso desechar.
Deben emplearse distintas pipetas para los Reactivos A y
REACTIVOS NO PROVISTOS B y no deben intercambiarse las tapas de los frascos, ya
- Agua destilada. que la contaminación de un reactivo con el otro produce su
- Ureasa de Wiener lab.: solución estabilizada y tamponada. deterioro definitivo.
INSTRUCCIONES PARA SU USO MUESTRA

Reactivo A; preparación: Suero, plasma u orina
- 100 determinaciones: disolver con 95 ml de agua destilada. a) Recolección: obtener de la manera usual.
Mezclar por inversión hasta disolución completa. Fechar. b) Aditivos: en caso de que la muestra a usar sea plasma
- 500 determinaciones: disolver con 475 ml de agua des- se recomienda el uso de Anticoagulante W de Wiener lab.
tilada. Mezclar por inversión hasta disolución completa. c) Sustancias interferentes conocidas:
Fechar. - Los anticoagulantes que contienen fluoruros inhiben la
Reactivo B; preparación: acción de la ureasa.
- 100 determinaciones: disolver con 80 ml de agua destilada. - La hemólisis intensa puede producir resultados falsamente
Mezclar por inversión hasta disolución completa. Fechar. elevados que no sobrepasan el 5%. Esta interferencia
- 500 determinaciones: disolver con 400 ml de agua des- puede corregirse con un Blanco de suero.
tilada. Mezclar por inversión hasta disolución completa. - No se observan interferencias por hemólisis ligeras o
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moderadas y bilirrubina hasta 400 mg/l.
con la diferencia que, luego de agregar el Reactivo A y
antes del B, se agregan 20 ul de la dilución de orina.
Llevar el aparato a cero con el Blanco de Reactivos
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la urea
(B) y leer el Standard (S), el Blanco de orina (BD) y el
en suero o plasma es estable varios días en refrigerador o
Desconocido (D).
6 meses en congelador, sin agregado de conservantes. En
orinas de pH < 4 es estable 4-5 días en refrigerador (2-10oC).
MATERIAL REQUERIDO (no provisto) ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL

- Espectrofotómetro El color de la reacción final es estable 12 horas, por lo que
- Micropipetas y pipetas la absorbancia debe ser leída en ese lapso.
- Reloj o timer CALCULO DE LOS RESULTADOS
Suero o plasma
CONDICIONES DE REACCION 0,60 g/l
- Longitud de onda: 540 nm Urea (g/l) = D x factor factor =
S
- Tiempo de reacción: 20 minutos 0,28 g/l
- Volumen de reacción: 12 ml BUN (g/l) = D x factor factor =
- Volumen de muestra: 20 ul S
Orina
PROCEDIMIENTO (D-BD) x 0,60
Urea (g/l) = x dilución
I- TECNICA EN SUERO O PLASMA
S
(Desconocido) colocar 1 ó 2 gotas de agua y agregar:
B S D Si la muestra a ensayar es suero, procesar 2 niveles de un
Standard - 20 ul - material de control de calidad (Standatrol S-E 2 niveles)
con concentraciones conocidas de urea, con cada determi-
Suero o plasma - - 20 ul
nación. En el caso de muestras de orina, utilizar un control
Ureasa 1 gota 1 gota 1 gota con base de orina.
Mezclar por agitación suave e incubar 5 minutos a
37oC. Luego agregar: CONVERSION DE UNIDADES AL SISTEMA SI
Urea (g/l) x 16,67 = Urea (mmol/l)
Reactivo A 1 ml 1 ml 1 ml BUN (mg/dl) x 0,357 = Urea (mmol/l)
Reactivo B 1 ml 1 ml 1 ml
Mezclar por agitación suave e incubar 5 minutos a VALORES DE REFERENCIA
37oC. Luego agregar: Suero o plasma
Sobre un total de 1700 individuos de ambos sexos, con eda-
Agua destilada 10 ml 10 ml 10 ml des comprendidas entre los 20 y 45 años, concurrentes al
Mezclar por inversión y retirar del baño. Después de 10 consultorio externo de un servicio hospitalario en la zona de
minutos leer en fotocolorímetro con filtro verde (510- Rosario (Argentina) sin patología renal manifiesta (con control
550 nm) o en espectrofotómetro a 540 nm, llevando a de diuresis y densidad urinaria), el 95% de los valores de
cero con el Blanco. uremia en suero estuvo comprendido entre 0,20 g/l y 0,45 g/l.
II- TECNICA EN ORINA Orina
Se sigue la misma técnica que para sangre utilizando Normalmente, la eliminación de urea está sujeta a grandes
orina diluida con agua o solución fisiológica. Como el variaciones dependientes de la dieta. Por término medio, y
contenido de urea está relacionado con la densidad, es con una dieta mixta corriente, se excretan unos 30 g en 24
conveniente diluir según el siguiente esquema: horas, con oscilaciones comprendidas entre 20 g y 40 g.
Densidad hasta 1,015................................. diluir 1/10 Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios
Densidad de 1,016 a 1,025......................... diluir 1/20 valores de referencia.
Densidad mayor de 1,025........................... diluir 1/40
Como la orina contiene cantidades variables de amo- LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
níaco debe efectuarse un Blanco de orina (BD). Este Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
Blanco se ejecuta igual que el Blanco de Reactivo (B), Evitar contaminaciones con amoníaco provenientes del
ambiente (humo de cigarrillo, vapores amoniacales).
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PERFORMANCE SÍMBOLOS
a) Reproducibilidad: procesando simultáneamente repli- Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
cados de una misma muestra, se obtuvo: reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
Nivel D.S. C.V.
0,36 g/l
1,02 g/l
± 0,016 g/l
± 0,035 g/l
4,4 %
3,4 % C por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios
urea a distintos sueros, se obtuvo una recuperación entre
94,7% y 101,3%.
c) Rango dinámico: cuando el resultado obtenido so-
brepasa los 1,5 g/l de urea, debe diluirse la solución final X Contenido suficiente para <n> ensayos
1/3 empleando como diluyente Blanco de Reactivos y
efectuando la lectura luego de 10 minutos de efectuada H Fecha de caducidad
la dilución. El resultado obtenido debe multiplicarse por la
dilución efectuada. l Límite de temperatura (conservar a)
d) Sensibilidad analítica: depende del fotómetro empleado
y de la longitud de onda. En espectrofotómetros con cube-  No congelar
0,001 el mínimo cambio de concentración detectable será F Riesgo biológico
de 0,003 g/l.

- 100 determinaciones (Cód. 1810057)
- 500 determinaciones (Cód. 1810058) g Número de lote
Wiener lab. provee separadamente: Elaborado por:

- Ureasa x 100 determinaciones (Cód. 1810054) M
Xn
- Ureasa x 500 determinaciones (Cód. 1810055) Nocivo
- Ureasa x 3000 determinaciones (Cód. 1810061)
BIBLIOGRAFIA
Xi
- Stegemann, H.; et al. - Z. Physiol. Chem. 329:241 (1962). Irritante
- Fawcett, J. K.; Scott, J. E. - Brit. J. Clin. Path. 13:156 (1960).
- Searcy, R. L. et al. - Am. J. Med. Techn. 27:255 (1961). Consultar instrucciones de uso
i
AACC Press, 4th ed., 2001. Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
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LINEA LIQUIDA
Uricostat
C enzimático AA
Para la determinación de ácido úrico en suero, plasma u orina

El ácido úrico es un metabolito de las purinas, ácidos nuclei- Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
cos y nucleoproteínas. Habitualmente la concentración de No ingerir. Evitar el contacto con la piel y los ojos. En caso
ácido úrico en suero varía de un individuo a otro de acuerdo de derrame o salpicaduras, lavar con abundante agua la
a diversos factores tales como: sexo, dieta, origen étnico, zona afectada.
constitución genética, embarazo. Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
Niveles anormales de ácido úrico en suero son índice de de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
desorden en el metabolismo de las sustancias que lo originan Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
o de inadecuada eliminación. acuerdo a la normativa local vigente.

El esquema de reacción es el siguiente: ALMACENAMIENTO
UOD Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-
ácido úrico + 2 H2O + O2 alantoína + H2O2 + CO2 10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
POD Una vez abiertos, no deben permanecer destapados y
2 H2O2 + 4-AF + 3,5-DHS quinonimina roja fuera del refrigerador durante lapsos prolongados. Evitar
contaminaciones.
La cantidad de ácido úrico se determina midiendo la absor-
Reactivo único (premezclado): en refrigerador (2-10oC) es
bancia de este pigmento.
estable 1 mes a partir de la fecha de su preparación.
UOD: uricasa
POD: peroxidasa
4-AF: 4-aminofenazona
REACTIVOS
3,5-DHS: sal sódica de 3,5-diclorohidroxibenceno sulfónico
La dificultad en obtener los valores de los controles dentro
del rango asignado (ej. Standatrol S-E 2 niveles) es indicio
REACTIVOS PROVISTOS
de deteriroro de los Reactivos. En tal caso, desechar.
S. Standard*: solución de ácido úrico 10 mg/dl.
La turbidez es indicio de deterioro de los Reactivos.
A. Reactivo A: solución conteniendo buffer Good pH 7,8 y
Desechar cuando las lecturas del Blanco sean > 0,200 D.O.
la sal sódica de 3,5 diclorohidroxibenceno sulfónico (DHS).
o las lecturas del Standard sean anormalmente bajas.
B. Reactivo B: solución conteniendo buffer Good pH 7,8,
4-aminofenazona (4-AF), uricasa (UOD), peroxidasa (POD),
MUESTRA
y ferrocianuro de potasio.
Concentraciones finales a) Recolección: se debe obtener suero o plasma de la
Buffer Good.......................................................... 50 mmol/l manera usual. Separar el coágulo lo antes posible, dentro
UOD...................................................................... ≥ 200 U/l de las dos horas posteriores a la recolección. Si la muestra
POD.................................................................... ≥ 1000 U/l es orina, utilizar preferentemente fresca.
4-AF................................................................... 0,10 mmol/l b) Aditivos: en caso de que la muestra a emplear sea
Ferrocianuro de potasio.......................................... 6 umol/l plasma, se recomienda únicamente el uso de heparina como
DHS..................................................................... 2,0 mmol/l anticoagulante para su obtención.
REACTIVOS NO PROVISTOS - Medicamentos: las sustancias fuertemente reductoras, tales
Calibrador A Plus de Wiener lab. como el ácido ascórbico (vitamina C), la Buscapina (butil
bromuro de hioscina), etc. en dosis elevadas interfieren.
INSTRUCCIONES PARA SU USO Por tal razón debe suspenderse la medicación, siempre
Standard: listo para usar. que sea posible, 24 horas antes de la toma de muestra.
Reactivos A y B: listos para usar. Estos pueden usarse - No se observan interferencias por bilirrubina hasta 10 mg/dl
separados o como Reactivo único mezclando 4 partes de (100 mg/l), triglicéridos hasta 490 mg/dl (4,9 g/l), hemoglobi-
Reactivo A + 1 parte de Reactivo B (ej. 4 ml Reactivo A + na hasta 180 mg/dl y heparina hasta 100 U/ml.
1 ml Reactivo B). Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las

drogas en el presente método. CALCULO DE LOS RESULTADOS
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: las ácido úrico (mg/l) = D x f
muestras deben ser preferentemente frescas. En caso de no 10 mg/dl(1)

procesarlas en el momento, las muestras de suero o plasma, f=
pueden conservarse 3 días a 20-25oC, 7 días a 2-10oC o 6 S

meses a -20oC sin agregado de conservantes. Las muestras (1)
En caso de usar Calibrador A plus, ver la concentración de
de orina pueden conservarse 4 días a 20-25oC a pH > 8. No
ácido úrico en el manual de instrucciones correspondiente.
refrigerar ni congelar.
D: lectura de absorbancia del Desconocido
S: lectura de absorbancia del Standard o Calibrador
- Espectrofotómetro o fotocolorímetro. Ejemplo:
- Material volumétrico adecuado. D = 0,134
- Tubos o cubetas espectrofotométricas de caras paralelas. S = 0,284
- Baño de agua a 37oC. Acido úrico en el Standard = 10 mg/dl
- Reloj o timer. 10 mg/dl
f = = 35,21 mg/dl
CONDICIONES DE REACCION 0,284
- Longitud de onda: 505 nm en espectrofotómetro o en foto- Acido úrico en la muestra = 0,134 x 35,21 mg/dl = 4,72 mg/dl
colorímetro con filtro verde (490-530 nm).
- Temperatura de reacción: 37oC o 18-25oC METODO DE CONTROL DE CALIDAD
- Tiempo de reacción: 5 minutos a 37oC o 20 minutos a 18-25oC Procesar 2 niveles de un material de control de calidad
- Volumen de muestra: 20 ul (Standatrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas
- Volumen final de la reacción: 1,02 ml de ácido úrico, con cada determinación.
Los volúmenes de Muestra y de Reactivo pueden disminuirse
o aumentarse proporcionalmente (Ej: 50 ul de Muestra + 2,5 ml VALORES DE REFERENCIA
de Reactivo único o 10 ul + 500 ul). Se analizaron con Uricostat enzimático AA líquida, 120
muestras de individuos de ambos sexos, con edades com-
prendidas entre 20 y 45 años, provenientes de la ciudad
PROCEDIMIENTO de Rosario (Argentina), sin síntomas de gota, nefropatía
I- TECNICA CON REACTIVOS SEPARADOS gotosa, nefrolitiasis por uratos o cualquier otra enfermedad
En tres tubos o cubetas espectrofotométricas marca- aparente. Se encontró que el 95% de los resultados cubrieron
das B (Blanco), S (Standard o Calibrador) y D (Des- los siguientes rangos:
conocido), colocar: Hombres: 2,5-6,0 mg/dl
Mujeres: 2,0-5,0 mg/dl
B S D
Standard o Calibrador - 20 ul -
de referencia:
Muestra - - 20 ul Suero o plasma
Reactivo A 800 ul 800 ul 800 ul Hombres: 3,5-7,2 mg/dl
Orina
Mezclar suavemente e incubar 5 minutos en baño de agua
Orina: 250 a 750 mg/24 horas
a 37oC o 20 minutos a temperatura ambiente (18-25oC).
Retirar, enfriar y leer en espectrofotómetro a 505 nm o en Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios
fotocolorímetro con filtro verde (490-530 nm), llevando el intervalos o valores de referencia, teniendo en cuenta la
aparato a cero con el Blanco. edad, sexo, hábitos alimenticios y demás factores.
II- TECNICA CON REACTIVO UNICO
Proceder como en la Técnica I pero utilizando 1 ml
Acido úrico (mg/dl) x 0,059 = Acido úrico (mmol/l)
de Reactivo único preparado en proporción 4+1 de
Acido úrico (mg/24 hs) x 0,0059 = Acido úrico (mmol/24 hs)
acuerdo a lo indicado en Instrucciones para su uso.
III- TECNICA EN ORINA LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
Utilizar la misma técnica (I o II) diluyendo la orina 1/10 Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
con agua o solución fisiológica. Para el cálculo de los
resultados, multiplicar por el factor de dilución utilizado. PERFORMANCE
Los ensayos fueron realizados en analizador Express Plus(*)
Si se usa el procedimiento manual, se debe validar que se
ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL obtenga una performance similar a la siguiente:
El color de reacción final es estable 30 minutos, por lo que a) Reproducibilidad: se evaluó de acuerdo al documento
la absorbancia debe ser leída dentro de ese lapso. EP5-A del CLSI (ex NCCLS), obteniéndose lo siguiente:
(*)
Precisión intraensayo SÍMBOLOS
Nivel D.S. C.V. Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
3,39 mg/dl ± 0,075 mg/dl 2,21 % reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
5,36 mg/dl ± 0,071 mg/dl 1,32 %
C
Precisión interensayo
Nivel D.S. C.V. por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios
3,39 mg/dl ± 0,097 mg/dl 2,86 %
5,36 mg/dl ± 0,102 mg/dl 1,90 % P Representante autorizado en la Comunidad Europea
b) Sensibilidad: basada en una lectura mínima del instru-
mento de 0,001 D.O., el cambio mínimo de concentración V Uso diagnóstico "in vitro"
detectable en esas condiciones para 0,001 D.O. será aproxi-
madamente de 0,03 mg/dl. X Contenido suficiente para <n> ensayos
c) Linealidad: los estudios se realizaron siguiendo las indi-
caciones contenidas en el documento EP-6P del CLSI (ex H Fecha de caducidad
NCCLS). La reacción es lineal hasta 20 mg/dl. Para valores
superiores, repetir la determinación empleando la mitad del l Límite de temperatura (conservar a)
volumen de muestras y multiplicar el resultado final por 2.
d) Correlación:  No congelar
- Suero y plasma: se determinó el valor de ácido úrico en
F Riesgo biológico
100 muestras, utilizando Uricostat enzimático AA líquida
y Uricostat enzimático AA de Wiener lab. Se obtuvo el Volumen después de la reconstitución
siguiente coeficiente de correlación con ambas muestras:
r = 0,9971, pendiente b = 1,0167, intersección a = - 0,2225 Cont. Contenido
- Técnica manual vs automática: se determinó el valor de
ácido úrico en 30 muestras utilizando Uricostat enzimático g Número de lote
AA líquida con ambos procedimientos, manual y automático.
El rango de concentración de ácido úrico en las muestras M Elaborado por:
estaba entre 1,7 y 18,2 mg/dl. Se obtuvo el siguiente coefi- Xn
ciente de correlación entre ambos métodos: Nocivo
r = 0,9971, pendiente b = 0,9893, intersección a = 0,2792
PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS Xi
Consultar las instrucciones de programación en el Manual del Irritante
Usuario del analizador en uso. Para la calibración, utilizar un ca-
librador con base de suero (Calibrador A plus de Wiener lab.). i Consultar instrucciones de uso

- 225 ml (3 x 60 ml Reactivo A + 3 x 15 ml Reactivo B),
sin Standard (Cód. 1009320) b Control
sin Standard (Cód. 1009635) b Control Positivo
con Standard (Cód. 1840107)
c Control Negativo

sin Standard (Cód. 1009277)
- 500 ml ((4 x 100 ml Reactivo A + 1 x 100 ml Reactivo B),

con Standard (Cód. 1840110)
BIBLIOGRAFIA
- I. F. C. C. - Clin. Chim. Acta 87/3:459 F (1978).
- NCCLS document "Evaluation of the Linearity of Quantita-
tive Analytical Methods", EP6-P (1986). M Wiener Laboratorios S.A.I.C.
- NCCLS document "Evaluation of Precision Performance", Riobamba 2944
EP5-A (1999). http://www.wiener-lab.com.ar
Bioquímica
Wiener lab.
864127522 / 01 p. 3/9 UR120903
Uricostat
enzimático AA
C Para la determinación de ácido úrico en suero, plasma u orina

El ácido úrico es un metabolito de las purinas, ácidos nu- ALMACENAMIENTO
cleicos y nucleoproteínas. Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-
Habitualmente la concentración de ácido úrico en suero 10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
varía de un individuo a otro de acuerdo a diversos factores No mantener a temperaturas elevadas durante lapsos
tales como: sexo, dieta, origen étnico, constitución genética, prolongados.
embarazo. Reactivo de Trabajo: en refrigerador (2-10oC) es estable 1
Niveles anormales de ácido úrico en suero son índice de mes a partir de la fecha de su preparación.
desorden en el metabolismo de las sustancias que lo originan
o de defectos en su eliminación. INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
REACTIVOS
FUNDAMENTOS DEL METODO Durante el uso, el Reactivo de Trabajo puede desarrollar un
El esquema de reacción es el siguiente: ligero color rosado que no afecta el funcionamiento siempre
UOD que se procese un Blanco con cada lote de determinaciones
ácido úrico + 2 H2O + O2 alantoína + H2O2 + CO2 y un Standard periódicamente. Desechar cuando las lecturas
del Blanco sean superiores a 0,160 D.O. o las lecturas del
POD Standard sean anormalmente bajas.
2 H2O2 + 4-AF + 3,5-DHS quinonimina roja
MUESTRA
REACTIVOS PROVISTOS
S. Standard: solución de ácido úrico 10 mg/dl.
a) Recolección: se debe obtener suero o plasma de la
A. Reactivo A: viales conteniendo uricasa (UOD), peroxida-
manera usual. Separar el coágulo lo antes posible, dentro
sa (POD), 4-aminofenazona (4-AF) y ferrocianuro de potasio.
de las dos horas posteriores a la recolección. Si la muestra
B. Reactivo B: solución de diclorohidroxibenceno sulfónico
es orina, utilizar preferentemente fresca.
(DHS) en buffer fosfatos pH 7,4.
b) Sustancias interferentes conocidas:
Concentraciones finales - Medicamentos: las sustancias fuertemente reductoras, tales
UOD...................................................................... ≥ 100 U/l como el ácido ascórbico (vitamina C), la Buscapina (butil
POD...................................................................... ≥ 600 U/l bromuro de hioscina), etc. en dosis elevadas interfieren.
4-AF................................................................... 0,10 mmol/l Por tal razón debe suspenderse la medicación, siempre que
Ferrocianuro de potasio.......................................... 6 umol/l sea posible, 24 hs antes de la toma de muestra.
DHS..................................................................... 2,0 mmol/l - No se observan interferencias por bilirrubina hasta 120 mg/l,
triglicéridos hasta 840 mg/dl ni hemoglobina hasta 180 mg/dl.
c) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: las
INSTRUCCIONES PARA SU USO muestras deben ser preferentemente frescas. En caso de no
Standard: listo para usar. procesarlas en el momento, las muestras de suero o plasma,
Reactivo de Trabajo: disolver el contenido de un vial de pueden conservarse 3 días a 20-25oC, 7 días a 2-10oC o 6
Reactivo A en un frasco de Reactivo B. Enjuagar varias veces meses a -20oC sin agregado de conservantes. Las muestras
el vial con Reactivo B. Mezclar hasta disolución completa. de orina pueden conservarse 4 días a 20-25oC a pH > 8. No
Homogeneizar y fechar. refrigerar ni congelar.
PRECAUCIONES MATERIAL REQUERIDO (no provisto)

Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro". - Espectrofotómetro o fotocolorímetro.
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales - Material volumétrico adecuado.
de trabajo en el laboratorio de química clínica. - Tubos o cubetas espectrofotométricas de caras paralelas.
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de - Baño de agua a 37oC.
acuerdo a la normativa local vigente. - Reloj o timer.
871010022 / 00 p. 1/9
CONDICIONES DE REACCION Suero o plasma
- Longitud de onda: 505 nm en espectrofotómetro o en Hombres: 3,5-7,2 mg/dl
fotocolorímetro con filtro verde (490-530 nm). Mujeres: 2,6-6,0 mg/dl
- Temperatura de reacción: 37oC o 18-25oC Orina
- Tiempo de reacción: 5 minutos a 37oC o 20 minutos a 250 a 750 mg/24 horas
18-25oC Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios
- Volumen de muestra: 20 ul intervalos o valores de referencia, teniendo en cuenta la
- Volumen de Reactivo de Trabajo: 1 ml edad, sexo, hábitos alimenticios y demás factores.
- Volumen final de la reacción: 1,02 ml
Los volúmenes de Muestra y de Reactivo pueden disminuirse CONVERSION DE UNIDADES AL SISTEMA SI
o aumentarse proporcionalmente (Ej: 50 ul de Muestra + 2,5 ml Acido úrico (mg/dl) x 0,059 = Acido úrico (mmol/l)
de Reactivo de Trabajo o 100 ul + 5 ml). Acido úrico (mg/24 hs) x 0,0059 = Acido úrico (mmol/24 hs)

PROCEDIMIENTO Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
En tres tubos o cubetas espectrofotométricas mar- Otras causas de resultados erróneos son:
cadas B (Blanco), S (Standard) y D (Desconocido), Contaminaciones: los reductores disminuyen la respuesta
colocar: de color, mientras que los oxidantes colorean el Reactivo
B S D aumentando los Blancos.
Standard - 20 ul -
enzimáticos.
Muestra - - 20 ul
Reactivo de Trabajo 1 ml 1 ml 1 ml PERFORMANCE
Mezclar suavemente e incubar 5 minutos en baño de agua Ex-press Plus(*).
a 37oC o 20 minutos a temperatura ambiente (18-25oC). a) Reproducibilidad: se obtuvieron los siguientes datos:
Retirar, enfriar y leer en espectrofotómetro a 505 nm o en
fotocolorímetro con filtro verde (490-530 nm), llevando el Precisión intraensayo (n = 20)
aparato a cero con el Blanco. Nivel D.S. C.V.
5,4 mg/dl ± 0,094 mg/dl 1,75 %
TECNICA EN ORINA 9,6 mg/dl ± 0,170 mg/dl 1,78 %
Utilizar la misma técnica diluyendo la orina 1/10 con agua
o solución fisiológica. Para el cálculo de los resultados, Precisión interensayo (n = 30)
multiplicar por el factor de dilución utilizado. Nivel D.S. C.V.
5,61 mg/dl ± 0,146 mg/dl 2,61 %
9,69 mg/dl ± 0,232 mg/dl 2,39 %
El color de reacción final es estable 30 minutos, por lo que b) Recuperación: agregando cantidades conocidas de ácido
la absorbancia debe ser leída dentro de ese lapso. úrico a distintos sueros, se obtuvo una recuperación entre
97 y 101%, para un nivel de uricemia de 10 mg/dl.
CALCULO DE LOS RESULTADOS c) Sensibilidad: el mínimo límite de detección es 0,040 mg/dl
y la sensibilidad analítica es de 0,473 mg/dl.
10 mg/dl d) Linealidad: la reacción es lineal hasta 20 mg/dl. Para va-
ácido úrico (mg/dl) = D x f donde f = lores superiores, repetir la determinación empleando la mitad
S del volumen de muestras y multiplicar el resultado final por 2.
e) Correlación: se determinó el valor de ácido úrico en 107
METODO DE CONTROL DE CALIDAD muestras, utilizando Uricostat enzimático AA de Wiener
Procesar 2 niveles de un material de control de calidad lab. y otro kit comercial basado en el mismo principio, obte-
(Standatrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas niéndose el siguiente coeficiente de correlación:
de ácido úrico, con cada determinación. r = 0,9961; pendiente b = 1,0321; intersección a = - 0,0427
VALORES DE REFERENCIA PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS

En adultos normales, con ingesta normal de proteínas, se Para las instrucciones de programación debe consultarse
observan los siguientes rangos de valores: el Manual del Usuario del Analizador en uso. Para la cali-
bración, se puede utilizar Calibrador A plus de Wiener lab.
Hombres: 2,5-6,0 mg/dl
PRESENTACION
En la literatura (Tietz, N.W.) se menciona el siguiente rango - 2 x 50 ml (Cód. 1840106).
de referencia: - 4 x 50 ml (Cód. 1840105).
(*)
- Chu, S.Y. - Can. J. Med. Technol. 40/5:154 (1978). Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
- Day, J.H. - La Prensa Médica Argentina Vol. 58 Nº 15:786 reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
(1971).
- Donadon, V.; Barbieri, E.; Menin, A.; Canterin, A. - LAB Vol. Este producto cumple con los requerimientos previstos
III Nº 4:473 (1976).
- International Federation of Clinical Chemistry - Clin. Chim. C por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios
Acta 87/3:459 F (1978).
- Henry, R. J. - Clinical Chemistry, Principles and Technics; Contenido suficiente para <n> ensayos
Harper & Row, publisher; 1964.
X
- Tietz Fundamentals of clinical chemistry - Burtis, C., Ash- H Fecha de caducidad
 No congelar
F Riesgo biológico
Cont. Contenido
g Número de lote
Elaborado por:
M
Xn
Nocivo
Xi
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
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Uricostat
enzimático
Para la determinación de ácido úrico en suero o plasma
SIGNIFICACION CLINICA y 0,8 partes de Reactivo C. Mezclar por inversión, sin agitar,
El ácido úrico es un metabolito de las purinas, ácidos nuclei- evitando la formación de espuma. Rotular y fechar.
cos y nucleoproteínas. Habitualmente la concentración de Pueden prepararse distintas cantidades respetando las
ácido úrico en suero varía de un individuo a otro de acuerdo proporciones establecidas.
a diversos factores tales como: sexo, dieta, origen étnico, Es importante respetar el orden de agregado de los reactivos
constitución genética, embarazo. y asegurar una perfecta homogeneización de los mismos, a
Niveles anormales de ácido úrico en suero son índice de fin de que el Reactivo B no deteriore el Reactivo de Trabajo.
desorden en el metabolismo de las sustancias que lo originan
o de defectos en su eliminación. PRECAUCIONES
Los reactivos son para uso "in vitro".
FUNDAMENTOS DEL METODO Reactivo B: irritante. R36/38: irrita los ojos y la piel. S26/28:
El esquema reaccional es el siguiente: en caso de contacto con ojos y piel, lávense inmediatamente
UOD
ácido úrico + 2 H2O + O2 alantoína + H2O2 + CO2 usar guantes adecuados y protección para los ojos/la cara.
POD de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
H2O2 + 4-AF + clorofenol quinona coloreada + H2O Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
REACTIVOS PROVISTOS
A. Reactivo A: frasco conteniendo más de 100 U de pe- ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
roxidasa (POD), 12,5 mmol de buffer fosfatos para pH 7,3 y ALMACENAMIENTO
3 mmol de 4-aminofenazona. Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10oC)
B. Reactivo B: solución de clorofenol 24 mmol/l. hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No man-
C. Reactivo C: solución de uricasa (UOD) mayor o igual tener a temperaturas elevadas durante lapsos prolongados.
a 3 kU/l. Reactivo A reconstituido: es estable 3 meses a tempera-
S. Standard: solución de ácido úrico 10 mg/dl. tura ambiente (menor de 25oC) o 10 meses en refrigerador
Concentraciones finales (2-10oC) a partir de la fecha de su reconstitución. A bajas
UOD......................................................................... ≥ 26 U/l temperaturas este reactivo puede cristalizar. En este caso,
POD....................................................................... ≥ 200 U/l antes de usar, redisolver completamente a temperatura
fosfatos......................................................................25 mM ambiente y homogeneizar. La disolución puede acelerarse
4-AF.............................................................................6 mM colocando el frasco en baño de 37oC unos minutos.
clorofenol..................................................................2,4 mM Reactivo de Trabajo: en frasco de vidrio color caramelo y en
pH...........................................................................7,3 ± 0,1 refrigerador (2-10oC) es estable 30 días a partir de la fecha
de su preparación. A temperatura ambiente es estable 5 días.
Agua destilada. Ver LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO. INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
REACTIVOS
INSTRUCCIONES PARA SU USO Durante el uso, el Reactivo de Trabajo puede desarrollar un
Standard: listo para usar. ligero color rosado que no afecta su funcionamiento siempre
Reactivo A; preparación: agregar 50 ml de agua destilada, que se procese un Blanco con cada lote de determinaciones
homogeneizando inmediatamente por inversión para permitir y un Standard periódicamente. Desechar cuando las lecturas
la disolución. Rotular y fechar. Antes de usar, mezclar por del Blanco sean superiores a 0,160 D.O. o las lecturas del
inversión, sin agitar. Standard sean anormalmente bajas.
Reactivo B: listo para usar.
Reactivo C: lista para usar. MUESTRA
Reactivo de Trabajo: de acuerdo al volumen de trabajo, Suero o plasma heparinizado
colocar en una probeta 80 partes de agua destilada, 10 a) Recolección: obtener suero de la manera usual. Separar
partes de Reactivo A reconstituido, 10 partes de Reactivo B el coágulo dentro de las dos horas posteriores a la obtención.
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b) Aditivos: en caso de emplear plasma, usar solamente ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL
heparina como anticoagulante. El color de reacción final es estable 45 minutos, por lo que la
c) Sustancias interferentes conocidas: absorbancia debe ser leída dentro de ese lapso.
- Los sueros ictéricos o con hemólisis visible o intensa pro-
ducen resultados erróneos por lo que no deben ser usados. CALCULO DE LOS RESULTADOS
- El fluoruro inhibe la uricasa. 10 mg/dl
- Medicamentos: sustancias fuertemente reductoras, como ácido úrico (mg/dl) = D x f donde f =
ácido ascórbico (vitamina C), buscapina (butil bromuro de S
hioscina), etc., suministrados en dosis elevadas interfieren
en la reacción consumiendo H2O2. Por tal razón siempre METODO DE CONTROL DE CALIDAD
que sea posible, debe suspenderse la medicación al pa- Procesar 2 niveles de un material de control de calidad
ciente 24 horas antes de la toma de muestra. Caso con- (Standatrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas
trario, pueden obtenerse valores falsamente disminuidos. de ácido úrico, con cada determinación.
hiperlipemia o hemólisis ligera. VALORES DE REFERENCIA
Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las En adultos normales, con ingesta normal de proteínas, se
drogas en el presente método. observan los siguientes rangos de valores:
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: em- Hombres: 2,5 - 6,0 mg/dl
plear suero fresco. En caso de no efectuarse el ensayo en Mujeres: 2,0 - 5,0 mg/dl
el momento, el suero puede conservarse hasta 3 días en el
congelador (sin agregado de conservadores). Los niveles de ácido úrico varían de acuerdo a la edad, el
sexo y las diferentes dietas; incluso se ha observado una
MATERIAL REQUERIDO (no provisto) variación estacional. Se recomienda por lo tanto, que cada
- Espectrofotómetro o fotocolorímetro. laboratorio establezca sus propios intervalos o valores de
- Tubos o cubetas espectrofotométricas de caras paralelas. referencia, teniendo en cuenta estos factores.
- Baño de agua a 37oC (opcional). CONVERSION DE UNIDADES
- Reloj o timer. Acido úrico (mg/dl) x 0,059 = Acido úrico (mmol/l)

- Longitud de onda: 505 nm en espectrofotómetro o en Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
fotocolorímetro con filtro verde (490-530 nm) Los reductores disminuyen la respuesta de color, mientras
- Temperatura de reacción: 37oC o temperatura ambiente que los oxidantes colorean el Reactivo aumentando los
(18-25oC) Blancos. Dichos agentes son frecuentemente encontrados
- Tiempo de reacción: 15 minutos a 37oC o 30 minutos a en el agua destilada empleada para preparar el Reactivo
temperatura ambiente (18-25oC) de Trabajo, por lo que se recomienda controlar la calidad
- Volumen de muestra: 50 ul de la misma.
- Volumen de Reactivo de Trabajo: 2,5 ml Los detergentes, metales pesados y cianuros son inhibidores
- Volumen final de reacción: 2,55 ml enzimáticos.
Volúmenes de Muestra y de Reactivo pueden disminuirse o
aumentarse proporcionalmente. (Ej.: 20 ul de Muestra + 1 ml PERFORMANCE
de Reactivo de Trabajo o 100 ul + 5 ml). a) Reproducibilidad: procesando replicados de las mismas
muestras en un mismo día, se obtuvo:
Nivel D.S. C.V.
PROCEDIMIENTO 4,56 mg/dl ± 0, 103 mg/dl 2,26 %
En tres tubos o cubetas espectrofotométricas marcadas 9,70 mgd/l ± 0,131 mg/dl 1,35 %
B (Blanco), S (Standard) y D (Desconocido), colocar:
b) Recuperación: agregando cantidades conocidas de ácido
B S D úrico a distintos sueros, se obtuvo una recuperación entre 97
Standard - 50 ul - y 101%, para un nivel de uricemia de 10 mg/dl.
c) Límite de detección: depende del fotómetro empleado.
Muestra - - 50 ul En espectrofotómetros, el Standard de 10 mg/dl proporciona
Reactivo de Trabajo 2,5 ml 2,5 ml 2,5 ml una lectura de aproximadamente 0,190 D.O., lo que signi-
fica que el cambio mínimo de concentración detectable en
Mezclar suavemente e incubar 15 minutos en baño de agua
esas condiciones para 0,001 D.O. será aproximadamente
a 37oC o 30 minutos a temperatura ambiente (18-25oC).
de 0,05 mg/dl.
Retirar, enfriar y leer en espectrofotómetro a 505 nm o en
d) Linealidad: la reacción es lineal hasta 20 mg/dl. Para va-
fotocolorímetro con filtro verde (490-530 nm), llevando el
lores superiores, repetir la determinación empleando la mitad
del volumen de muestra y multiplicar el resultado final por 2.
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PRESENTACION SÍMBOLOS
- 500 ml (Cód. 1840101) Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
BIBLIOGRAFIA
- Chu, S.Y. - Can. J. Med. Technol. 40/5:154 (1978). Este producto cumple con los requerimientos previstos
- Day, J.H. - La Prensa Médica Argentina 58/15:786 (1971).
- Donadon, V.; Barbieri, E.; Canterin, A. - LAB III/ 4:473 C por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios
(1976).
- Lauriat, F. - Pharm. Biol. 11/108:163 (1977).
- Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests", Contenido suficiente para <n> ensayos
X
 No congelar
F Riesgo biológico
Cont. Contenido
g Número de lote
Elaborado por:
M
Xn
Nocivo
Xi
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
871000022 / 00 p. 3/9 UR120607
Urine Strip
C 10, 10 AA, 11, 11 AA
Tiras reactivas para la detección de urobilinógeno, glucosa,
cetonas, bilirrubina, proteínas, nitrito, pH, sangre, densidad,
leucocitos y ácido ascórbico en orina
FUNDAMENTOS DEL METODO Leucocitos: esta prueba revela la presencia de esterasas

La muestra reacciona con los reactivos desecados unidos granulocitarias. Las esterasas escinden un derivado del
a una fase sólida que se encuentra adherida a un soporte éster pirazol aminoácido para liberar un derivado de hi-
plástico. Se proveen reactivos para la detección de urobi- droxipirazol que luego con la sal de diazonio determina un
linógeno, glucosa, cetonas, bilirrubina, proteínas, nitrito, producto violeta.
pH, sangre, densidad, leucocitos y ácido ascórbico (ver Acido ascórbico: esta prueba está basada en el efecto
Presentaciones). Los principios químicos de cada prueba reductor del ácido ascórbico. Comprende un compuesto
son los siguientes: aromático coloreado en su estado oxidado, que se decolora
Urobilinógeno: la prueba está basada en la reacción de cuando es reducido por el ácido ascórbico. El color cambia
unión de una sal de diazonio con el urobilinógeno urinario en del verde intenso al amarillo verdoso.
un medio ácido. El color vira del rosa pálido al rosa intenso.
Glucosa: reacción enzimática secuencial donde la glucosa REACTIVOS PROVISTOS
oxidasa cataliza la oxidación de la glucosa dando ácido glu- Tiras conteniendo reactivos desecados para la determina-
cónico y peróxido de hidrógeno. Luego, la peroxidasa cataliza ción de algunas o todas las siguientes sustancias en orina,
la reacción del peróxido de hidrógeno con ioduro de potasio, dependiendo de la presentación (10, 10 AA, 11, 11 AA):
formándose productos coloreados que van desde celeste urobilinógeno, glucosa, cetonas (ácido acetoacético), bili-
verdoso, pasando por marrón verdoso intermedio, a marrón. rrubina, proteínas, nitrito, pH, sangre, densidad, leucocitos
Cetonas: se basa en la reacción de ácido acetoacético de la y ácido ascórbico. La composición de cada zona reactiva se
orina con nitroprusiato. El color resultante va desde tostado, detalla para 100 tiras:
cuando no hay reacción, a distintos tonos de púrpura para
Urobilinógeno 4-Metoxibencenodiazonio 2,5 mg
reacciones positivas.
URO Ácido cítrico 30,0 mg
Bilirrubina: se basa en la unión de la bilirrubina con la sal
de diazonio del 2,4-diclorofenilo en un medio fuertemente Glucosa Glucosa oxidasa 4,51 unidades
ácido. El color cambia de tostado suave a tostado intenso. GLU Peroxidasa 1,86 unidades
Proteínas: basada en el cambio de color del indicador, azul Ioduro de potasio 10,0 mg
de tetrabromofenol, en presencia de proteínas. Una reacción Cetonas Nitroprusiato de sodio 20,0 mg
positiva está indicada por un cambio de color del amarillo KET Sulfato de magnesio 246,5 mg
verdoso al verde, y luego al verde intenso.
Bilirrubina 2,4-Diclorofenildiazonio 3,0 mg
Nitrito: esta prueba está basada en la reacción de ácido
BIL Ácido oxálico 30,0 mg
p-arsanílico y nitrito, derivado del nitrato de la dieta en pre-
sencia de bacterias de la orina, para formar un compuesto Proteínas Azul de tetrabromofenol 0,3 mg
de diazonio. Este compuesto reacciona con N-(1-naftil) PRO Ácido cítrico 110,0 mg
etilendiamina en un medio ácido. El color resultante es rosa. Citrato trisódico 46,0 mg
Cualquier tonalidad rosada es considerada positiva. Nitrito Ácido p-arsanílico 5,0 mg
pH: esta prueba está basada en indicadores dobles (rojo NIT N-(naftil)-etilendiamina 0,6 mg
de metilo y azul de bromotimol) los cuales dan un amplio
pH Rojo de metilo 0,04 mg
espectro de colores cubriendo el rango de pH urinario
Azul de bromotimol 0,5 mg
completo. Los colores varían desde ocre, pasando por
verdoso-amarillento, a verde azulado. Sangre Hidroperóxido 4,0 mg
Sangre: esta prueba está basada en la actividad de pseudo- BLO 3,3',5,5'-Tetrametilbencidina 3,7 mg
peroxidasa de la hemoglobina, la cual cataliza la reacción de Densidad Azul de bromotimol 1,2 mg
3,3',5,5'-tetrametilbencidina con hidroperóxido orgánico tam- SG Polielectrolito 12,0 mg
ponado. El color resultante varía desde verdoso-amarillento,
pasando por verde azulado, hasta azul oscuro. Leucocitos Derivado de éster
Densidad: basado en el cambio de pKa. En presencia de los LEU pirazol aminoácido 1,0 mg
cationes urinarios, se liberan protones de un polielectrolito Sal de diazonio 0,7 mg
produciéndose un cambio de color en el indicador azul de Acido ascórbico 2,6-Diclorofenol 1,6 mg
bromotimol desde azul a amarillo. AA indofenol
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en la tira puede ocasionar resultados erróneos. Retirar
Las tiras reactivas se proveen listas para usar.
el exceso de orina escurriendo contra el borde del reci-
piente, sin permitir que éste toque las áreas reactivas.
PRECAUCIONES
Una cantidad excesiva de orina puede ser removida
Las tiras reactivas para orina Urine strip son para uso
tocando sobre un papel absorbente con el extremo de
diagnóstico "in vitro" y están destinadas al uso profesional.
la tira reactiva.
Siempre que se manipulen muestras de sangre o de fluidos
5- Todas las áreas reactivas excepto la correspondiente
corporales deberán observarse las precauciones universales
a leucocitos, deben ser observadas dentro de los 60 a 90
recomendadas por los Centros de Control de Enfermedades.
segundos para la discriminación entre positivos y nega-
Estas precauciones incluyen el uso de guantes.
tivos. Leucocitos debe leerse entre 90 y 120 segundos.
6- Comparar los resultados cuidadosamente con la carta
de colores que se encuentra en el envase, manteniendo
la tira en posición horizontal, utilizando buena ilumina-
ción. Para obtener óptimos resultados debe respetarse
ALMACENAMIENTO
el tiempo de lectura. Los cambios de color observados
Los Reactivos Provistos son estables a temperatura ambiente
sólo en las esquinas de las zonas reactivas o luego de
(< 30oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en el envase.
transcurridos los 2 minutos de reacción no tienen validez
Las tiras reactivas se proveen envasadas en un recipiente
diagnóstica.
con desecante. No exponer las tiras a factores ambientales
específicos como humedad, calor y luz ya que las mismas
son altamente sensibles a estos factores. Luego de extraer
una tira, tapar el envase para evitar la humectación del
Los resultados se obtienen directamente por comparación
reactivo. No quitar el desecante del envase. Transferir las
con la carta de colores impresa en el rótulo del envase.
tiras a otro recipiente puede ocasionar el deterioro de las
mismas o volverlas no reactivas.
CONTROL DE CALIDAD
Los resultados obtenidos con las tiras reactivas pueden ser
confirmados utilizando muestras control positivas o negativas.
REACTIVOS
Cambio de colores u oscurecimiento de las zonas reactivas
de la tira pueden ser indicio de deterioro de los reactivos.
- Este método ha sido desarrollado para "screening". Tanto
En tal caso desechar.
los resultados positivos, como los negativos pero sospe-
chosos y los que no resulten coincidentes con el estado
MUESTRA
clínico del paciente deben ser corroborados por métodos
Orina
confirmatorios.
Recolección: obtener orina de la manera usual. Realizar la
- Los efectos de drogas u otros metabolitos sobre las pruebas
prueba tan pronto como sea posible luego de la recolección.
individuales no son conocidos en todos los casos. Por este
Si no puede ser realizada dentro de la hora posterior a la
motivo se recomienda que en caso de duda, la prueba sea
recolección, refrigerar inmediatamente. Antes de realizar el
repetida en ausencia de la medicación.
ensayo, llevar la muestra a temperatura ambiente y homo-
- El correcto lavado del material del recipiente de muestra
geneizar sin centrifugar.
es muy importante. Así, por ejemplo, restos de hipoclorito
pueden afectar la sensibilidad de algunas determinaciones.
Urobilinógeno: no puede demostrarse por este método la
PROCEDIMIENTO
ausencia completa de urobilinógeno. Orinas normales dan
Este procedimiento DEBE SER SEGUIDO EXACTAMEN-
habitualmente colores levemente rosados. Concentraciones
TE para lograr resultados confiables. Las tiras sin utilizar
de formol mayores a 0,2% pueden dar resultados falsamente
deberán conservarse en el envase original. No tocar el
negativos. Concentraciones de nitrito superiores a 2,5 mg/dl
área de lectura de la tira. El área de trabajo debe estar
negativizan la reacción.
limpia, libre de detergentes u otros contaminantes.
Glucosa: la reactividad de la prueba es menor con el aumento
1- Confirmar que el producto esté dentro de su vida útil de pH de la orina. También puede variar con la temperatura.
y que la temperatura del mismo y de las muestras sea El ácido ascórbico en concentraciones ≥ 25 mg/dl ocasionan
superior a 20oC. falsos negativos y los cuerpos cetónicos en concentracio-
2- Retirar la tira del envase y volver a tapar inmediata- nes > 40 mg/dl disminuyen la sensibilidad de la reacción.
mente. Orinas conteniendo levodopa o dipirona pueden dar falsos
3- Observar la tira y verificar que se encuentra en con- negativos.
diciones. (Ver INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETE- Cetonas: pueden aparecer resultados falsamente positivos
RIORO DE LOS REACTIVOS). con orinas altamente pigmentadas o aquellas que contengan
4- Sumergir la tira completamente por no más de 1 se- grandes cantidades de levodopa.
gundo en muestra de orina fresca. Un exceso de orina Bilirrubina: dado que la bilirrubina es fotosensible, la expo-
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sición de la misma a la luz puede ocasionar falsos negativos. biliar. La aparición de vestigios de bilirrubina es suficiente
Pueden obtenerse resultados falsamente positivos cuando evidencia como para justificar un ensayo posterior.
se administran, para diagnóstico o como componentes de
Proteínas: las muestras de orina normal habitualmente con-
medicamentos, colorantes que se excretan por orina.
tienen algunas proteínas (0-4 mg/dl). Por lo tanto sólo niveles
Proteínas: orinas alcalinas (pH 9) pueden dar resultados
persistentemente elevados de proteínas urinarias indican
falsamente elevados. La interpretación de los resultados
una enfermedad del riñón o el tracto urinario. Los resultados
también se dificulta en orinas turbias.
persistentes de proteínas en trazas o cantidades mayores,
Nitrito: cualquier tonalidad rosada uniforme debe ser
indican una proteinuria significativa, resultando necesarios
considerada resultado positivo, sin embargo puntos rosas
análisis adicionales. La proteinuria patológica habitualmente
o color rosado en las esquinas no debe ser interpretado
da resultados por encima de 30 mg/dl y es persistente.
como positivo. El desarrollo de color no es proporcional a
la cantidad de bacterias presentes. La prueba de nitrito sólo Nitritos: cualquier grado de coloración rosa luego de 30 se-
detecta bacterias reductoras de nitrato, por lo que un resul- gundos indica bacteriuria clínicamente significativa, debida ge-
tado negativo no descarta completamente la contaminación neralmente a infección de los riñones, uréteres, vejiga o uretra.
de la orina. La prueba se negativiza con concentraciones de pH: la orina normal es ligeramente ácida con un pH de 6, sien-
ácido ascórbico mayores o iguales a 50 mg/dl. Pueden obte- do el rango habitual de 5 a 8. Es un importante indicador de
nerse resultados falsamente positivos cuando se administran
factores renales gastrointestinales, respiratorios y metabólicos.
medicamentos con colorantes que se excretan por orina.
pH: el crecimiento bacteriano en la orina determina un Sangre: la aparición de hemoglobina en orina indica enfer-
aumento real del pH, por liberación de amoníaco a partir medad renal o de las vías urinarias. La prueba es altamente
de la urea. La coloración de la orina puede interferir con la sensible para hemoglobina y para eritrocitos intactos, por
determinación. lo que complementa el examen visual.
Sangre: en ocasiones se observan falsos positivos cuando Densidad: las orinas ocasionales normales de adultos tienen
existe bacteriuria. El ácido ascórbico o las proteínas pueden en promedio una densidad de 1.003 a 1.040. Orinas de 24
reducir la sensibilidad de la prueba de sangre. Oxidantes horas de adultos normales, con dieta equilibrada y consumo
fuertes como los hipocloritos pueden producir resultados normal de líquidos tienen en promedio densidades entre 1.016
falsamente positivos. La orina de mujeres en período mens- y 1.022. Esta prueba detecta valores entre 1.000 y 1.030.
trual puede producir falsos positivos.
Densidad: pueden obtenerse lecturas altas de densidad en pre- Leucocitos: normalmente no existen leucocitos detectables
sencia de cantidades moderadas de proteínas (100-700 mg/dl). La en orina. La aparición de trazas en una orina aislada es de
bacteriuria aumenta el amoníaco, que tampona el medio e impide significación clínica cuestionable. Si en cambio se observan
que el parche de densidad muestre el color correspondiente a la resultados positivos debe realizarse un estudio posterior
densidad real, por lo que se determinan densidades falsamente del paciente. En orinas de mujeres es posible encontrar
disminuidas. leucocitos ocasionalmente debido a contaminación vaginal.
Leucocitos: el formol puede producir falsos positivos. Las Acido ascórbico: la presencia de altas concentraciones de
proteínas disminuyen la sensibilidad de la determinación en ácido ascórbico en orina de individuos que ingieren vitamina
concentración superior a 500 mg/dl. C de rutina, puede interferir con las pruebas de glucosa,
Acido ascórbico: pueden obtenerse resultados falsos sangre, bilirrubina y nitritos. Si se detecta ácido ascórbico,
positivos con otros agentes reductores. la prueba debe repetirse por lo menos 24 horas después de
la última dosis ingerida de vitamina C.
VALORES ESPERADOS
Urobilinógeno: en esta prueba, el rango normal de urobi- PERFORMANCE
linógeno es 0,1 a 1,0 mg/dl. Si los resultados exceden la a) Estudio de correlación: la performance del producto se basa
concentración de 2,0 mg/dl, el paciente y/o la muestra de en ensayos clínicos y estudios de laboratorio. Estudios realizados
orina requerirán un estudio posterior. en dos institutos médicos con 125 y 113 pacientes respectiva-
Glucosa: normalmente la glucosa no se detecta en orina, a mente, comparando Urine Strip Wiener lab. con un producto
pesar de que una pequeña cantidad de la misma es excre- similar, mostraron los siguientes resultados de correlación:
tada por el riñón normal. Esta prueba detecta aproximada-
mente 100 mg/dl. Esta concentración en orina detectada en Concordancia de resultados
forma recurrente, puede ser considerada anormal. Negativos Positivos
Cetonas: los cuerpos cetónicos no deben ser detectados en Hemoglobina 98% 93%
orinas normales, empleando este reactivo. Pueden aparecer Bilirrubina 95% 95%
cuerpos cetónicos en orina en la presencia de vómitos, dia- Urobilinógeno 96% 100%
rrea, disturbios digestivos, embarazo o ejercicio físico intenso. Cetonas 93% 100%
Glucosa 100% 98%
Bilirrubina: la bilirrubina no es detectable en orina en
Proteínas 98% 93%
individuos sanos aún por los métodos más sensibles. Una
Nitritos 100% 100%
elevación en los niveles es indicativa de enfermedad y es el
Leucocitos 96% 95%
signo más temprano de enfermedad celular y/u obstrucción
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En cuanto a pH y densidad, se encontró que, en promedio, SIMBOLOS
sus resultados coincidieron en un mismo valor. Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
Las correlaciones que no llegan al 100% pueden deberse reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
a una interpretación subjetiva del operador respecto de la
diferencia entre la imagen de negativo y la de trazas.
C
La capacidad para discernir perfectamente una variación por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios
mínima de color, como positiva o negativa, está influencia- para el diagnóstico "in vitro"
da por la percepción del operador así como la iluminación
y la presencia o ausencia de inhibidores frecuentemente P Representante autorizado en la Comunidad Europea
presentes en orina como ácido ascórbico, cambios de pH
y densidad.
b) Sensibilidad: X Contenido suficiente para <n> ensayos

- Urobilinógeno: 0,1-1 mg/dl, por lo que aún en orinas
normales puede observarse una ligera coloración rosada. H Fecha de caducidad
- Glucosa: 100 mg/dl. La determinación es específica para
glucosa. l Límite de temperatura (conservar a)
- Cetonas: 5 mg/dl de acetoacetato.
- Bilirrubina: 0,5 mg/dl.  No congelar
- Proteínas: 15-30 mg/dl de proteínas en orina. Se observa
F Riesgo biológico
mayor sensibilidad para albúmina que para gamma-glo-
bulinas, proteínas de Bence Jones y mucoproteínas. Volumen después de la reconstitución
- Nitrito: 0,05-0,15 mg/dl en orinas con concentraciones de
ácido ascórbico menores a 25 mg/dl. Cont. Contenido
- pH: se produce cambio de color entre pH 5 y 9. Los cambios
pueden ser leídos de a 1 unidad. g Número de lote
- Sangre: 0,015 mg/dl de hemoglobina o 5-10 eritrocitos
intactos/ul. M Elaborado por:
- Densidad: esta prueba permite la detección de densidad de Xn
Nocivo
orina de 1.000, 1.005, 1.010, 1.015, 1.020, 1.025 y 1.030.
- Leucocitos: 10-25 leucocitos/ul en orinas con concentra-
ción de proteínas menor o igual a 500 mg/dl.
- Acido ascórbico: 5 mg/dl. Xi
Irritante
PRESENTACION
Tubos conteniendo 100 tiras reactivas para las siguientes i Consultar instrucciones de uso
determinaciones:
Calibr. Calibrador
- Urine Strip 10: urobilinógeno, glucosa, cetonas, bilirrubina,
proteínas, nitrito, pH, sangre, densidad y leucocitos. b Control
- Urine Strip 10 AA: urobilinógeno, glucosa, cetonas, bilirru-
bina, proteínas, nitrito, pH, sangre, densidad y leucocitos b Control Positivo
(con área de compensación para lector automático).
- Urine Strip 11: urobilinógeno, glucosa, cetonas, bilirrubina, c Control Negativo
proteínas, nitrito, pH, sangre, densidad, leucocitos y ácido
ascórbico. h Número de catálogo
- Urine Strip 11 AA: urobilinógeno, glucosa, cetonas, bili-
rrubina, proteínas, nitrito, pH, sangre, densidad, leucocitos
y ácido ascórbico (con área de compensación para lector
automático).
BIBLIOGRAFIA
- Free, A.H. and Free, H.M. - Urinalysis, Clinical discipline of
Clinical Science - CRC, Crit. Rev. Clin. Lab. Sci. 3/4:481,
1972.
- Graff, L. - A Handbook of Routine Urinalysis. Philadelphia,
J. B. Lippincott Co., 1983. M Wiener Laboratorios S.A.I.C.
Riobamba 2944
- Jurgeris, E. - Spot Test Analysis N.Y. John Wiley & Sons., 1985. 2000 - Rosario - Argentina
- Kark, R. et al. - A primer of urinalysis, 2nd ed. N.Y., Harper
and Row; 1963.
Bioquímica
Wiener lab.
864115500 / 03 p. 4/8 UR101022
V.D.R.L. test
C Suspensión antigénica estabilizada para realizar la
prueba VDRL modificada (USR) de detección de sífilis

La sífilis es una enfermedad venérea causada por el Tre- Los Reactivos Provistos son para uso "in vitro".
ponema pallidum, que invade las mucosas intactas o la piel Todas las muestras de pacientes deben manipularse como
en áreas de abrasiones. El contacto sexual es la forma más si fueran capaces de transmitir infección.
común de transmisión. El Control positivo ha sido examinado para antígeno de su-
La detección y tratamiento de la enfermedad en sus estadios perficie de hepatitis B (HBsAg), virus de la hepatitis C (HCV)
tempranos es fundamental a fin de evitar complicaciones gra- y virus de inmunodeficiencia humana (HIV), encontrándose
ves como sífilis cardiovascular, neurosífilis y sífilis congénita. no reactivo. Sin embargo, debe ser empleado como si se
El diagnóstico de esta enfermedad sufre la carencia de tratara de material infectivo.
un método para cultivar el microorganismo en medios de Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
laboratorio y la dificultad para detectarlo en estadios de la de trabajo en el laboratorio de química clínica.
enfermedad en los que no se observan lesiones epidérmicas. Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
Sin embargo, desde el comienzo de la infección aparecen en acuerdo a la normativa local vigente.
el suero del individuo infectado ciertas sustancias denomi-
nadas "reaginas", que reaccionan con antígenos de cardio- MATERIAL REQUERIDO
lipina, lecitina y colesterol. Estas reaginas junto a los signos 1- Provisto
clínicos son por lo tanto los procedimientos más rápidos y - 1 gotero
útiles disponibles para diagnóstico de sífilis. 2- No Provisto
- Agitador rotativo ajustable a 180 rpm.
FUNDAMENTOS DEL METODO - Placa de vidrio transparente con sectores de 14 mm de
Las "reaginas", presentes en individuos infectados por T. pa- diámetro cada uno.
llidum se detectan en suero por la reacción con un antígeno - Micropipetas para medir los volúmenes indicados.
cardiolipínico purificado y estabilizado. Si la muestra contiene - Microscopio
reagina, ésta se unirá al antígeno produciendo una floculación
visible en microscopio. Las reacciones inespecíficas se evitan MUESTRA
con el empleo de antígeno altamente purificado y el agregado Suero o líquido cefalorraquídeo (LCR)
de cloruro de colina característica de la técnica USR (Unheated a) Recolección: obtener de la manera usual. No inactivar.
Serum Reagin) en la que no es necesario inactivar la muestra. b) Aditivos: no se requieren.
c) Sustancias interferentes conocidas: hemólisis o hiper-
REACTIVOS PROVISTOS lipemia pueden ocasionar resultados erróneos.
A. Reactivo A: suspensión acuosa de antígeno de cardioli- d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: en
pina y lecitina purificados, en buffer fosfatos con cloruro de caso de no procesarse de inmediato los sueros pueden
colina y EDTA de acuerdo a las indicaciones de la O.M.S. conservarse hasta una semana en refrigerador (2-10oC).
Control Positivo: dilución de suero inactivado, reactivo.
REACTIVOS NO PROVISTOS PROCEDIMIENTO

- Solución fisiológica (para la prueba semicuantitativa). Tanto los reactivos como la muestra deben estar a tem-
- Solución de cloruro de sodio 10 g/dl (para la técnica en peratura ambiente antes de realizar la prueba.
líquido cefalorraquídeo) I- PRUEBA CUALITATIVA EN SUERO
En cada uno de los sectores delimitados de la placa
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE colocar:
ALMACENAMIENTO
Muestra o Control Positivo 50 ul
ta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No congelar. Con gotero provisto colocar:
Reactivo A 1 gota
Agitar horizontalmente la placa a 180 rpm durante 4
Reactivo A: listo para usar. Agitar previo a la ejecución de la
minutos. Observar inmediatamente en microscopio con
prueba.
poco aumento (60 a 100 X).
Control Positivo: listo para usar.
871030000 / 01 p. 1/3
PRESENTACION
II- PRUEBA SEMICUANTITATIVA EN SUERO - 1 x 5,5 ml (Cód. 1853152).
Preparar diluciones de la muestra 1:2, 1:4, 1:8, 1:16
y 1:32 con solución fisiológica y realizar para cada BIBLIOGRAFIA
dilución la prueba como se describe en I. - Zinsser Microbiología, Joklik W., Willett H. y Amos D., 17o
III- PRUEBA CUALITATIVA PARA LCR - Manual of Tests for Syphilis, cap. 8 - American Public Health
Dilluir el Reactivo A 1:2 con solución de cloruro de sodio Association, Washington, D.C 20005, 1990.
10 g/dl. Emplear dentro de las 2 horas de preparación. - Podestá, D.; Svetaz. M.J.; Ricomi, R.; Capriotti, G.; Rojkín,
En cada sector delimitado de la placa colocar: L.; Lorenzo, L.; "Evaluación de tres reactivos para detección
Muestra o Control Positivo 50 ul de sífilis" - VIII Congreso Argentino de Bioquímica, 54º
Triduo Bioquímico Científico Anual 1990 - Revista A.B.A.
Con aguja calibre 6 agregar.
54/3, 1990.
Reactivo A diluido 1 gota (10 ul)
Mezclar bien y agitar horizontalmente la placa durante
8 minutos a 180 rpm. Leer los resultados en microsco-
pio con poco aumento (60 a 100 X).

Reactivo: presencia de floculación.
No reactivo: ausencia completa de floculación.
Prueba semicuantitativa: el título estará dado por la in-
versa de la última dilución que se observe reactiva. Leer
atentamente las LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO.

Para controlar la calidad del sistema procesar un control
positivo (suero seguramente reactivo) o el Control Posi-
tivo provisto y un control negativo (suero seguramente
no reactivo) utilizándolos de la misma forma que las
muestras.

Resultados falsamente positivos pueden ser observados en
individuos con cuadros patológicos diversos como hepatitis,
influenza, brucelosis, lepra, malaria, asma, tuberculosis,
cáncer, diabetes y enfermedades autoinmunes. Estos casos
no son muy comunes y generalmente presentan reacciones
con títulos bajos y una historia clínica que no coincide con
las características de sífilis.
Es imprescindible por estos motivos ante toda prueba cuali-
tativa reactiva realizar la prueba semicuantitativa.
Resultados falsamente negativos pueden observarse cuando
se presenta el fenómeno de prozona. Por este motivo se re-
comienda repetir la prueba en suero diluido 1:5 con solución
fisiológica para verificar el resultado. Si en estas condiciones
se observa floculación la muestra es reactiva.
A pesar de las ventajas de este método, sus resultados al
igual que los de cualquier prueba serológica, sólo constituyen
un dato auxiliar de diagnóstico que debe corroborarse con
la historia clínica del paciente.
PERFORMANCE
Sobre 2140 muestras de un servicio hospitalario, ensayadas
usando V.D.R.L. test e inmunofluorescencia como método
de referencia, se observó una concordancia superior al 96%.
871030000 / 01 p. 2/3
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
Disp. Nº: 1068/91 - 7585/97 -
6895/00 - 1195/13 - 4793/14 2000 Rosario - Argentina
871030000 / 01 p. 3/3 UR140722
V.D.R.L. test
SIGNIFICACION CLINICA Control Positivo: listo para usar.

La sífilis es una enfermedad venérea causada por el Tre- Control Negativo: listo para usar.
ponema pallidum, que invade las mucosas intactas o la piel
en áreas de abrasiones. El contacto sexual es la forma más PRECAUCIONES
común de transmisión. Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
La detección y tratamiento de la enfermedad en sus estadios Todas las muestras de pacientes deben manipularse como
tempranos es fundamental a fin de evitar complicaciones gra- si fueran capaces de transmitir infección.
ves como sífilis cardiovascular, neurosífilis y sífilis congénita. Los sueros controles han sido examinados para antígeno
El diagnóstico de esta enfermedad sufre la carencia de de superficie de hepatitis B (HBsAg), virus de la hepatitis C
un método para cultivar el microorganismo en medios de (HCV) y virus de inmunodeficiencia humana (HIV), encon-
laboratorio y la dificultad para detectarlo en estadios de la trándose no reactivos. Sin embargo, deben ser empleados
enfermedad en los que no se observan lesiones epidérmicas. como si se tratara de material infectivo.
Sin embargo, desde el comienzo de la infección aparecen Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
en el suero del individuo infectado ciertas sustancias de- de trabajo en el laboratorio de química clínica.
nominadas "reaginas", que reaccionan con antígenos de Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
cardiolipina, lecitina y colesterol. Estas reaginas junto a acuerdo a la normativa local vigente.
los signos clínicos son por lo tanto los procedimientos más
rápidos y útiles disponibles para diagnóstico de sífilis. MATERIAL REQUERIDO
1- Provisto
FUNDAMENTOS DEL METODO - 1 gotero
Las "reaginas", presentes en individuos infectados por T. 2- No Provisto
pallidum se detectan en suero por la reacción con un antí- - Agitador rotativo ajustable a 180 rpm.
geno cardiolipínico purificado y estabilizado. Si la muestra - Placa de vidrio transparente con sectores de 14 mm de
contiene reagina, ésta se unirá al antígeno produciendo una diámetro cada uno.
floculación visible en microscopio. - Micropipetas para medir los volúmenes indicados.
Las reacciones inespecíficas se evitan con el empleo de - Microscopio
antígeno altamente purificado y el agregado de cloruro de
colina característica de la técnica USR (Unheated Serum MUESTRA
Reagin) en la que no es necesario inactivar la muestra. Suero, plasma o líquido cefalorraquídeo (LCR)
a) Recolección: obtener de la manera usual. No inactivar.
REACTIVOS PROVISTOS b) Aditivos: no se requieren para suero o LCR. Si la prueba
A. Reactivo A: suspensión acuosa de antígeno de cardioli- se realiza con plasma, éste puede obtenerse empleando
pina y lecitina purificados, en buffer fosfatos con cloruro de heparina, EDTA u oxalato de sodio como anticoagulantes.
colina y EDTA de acuerdo a las indicaciones de la O.M.S. c) Sustancias interferentes conocidas: hemólisis o hiper-
Control Positivo: dilución de suero inactivado, reactivo. lipemia pueden ocasionar resultados erróneos.
Control Negativo: dilución de suero inactivado, no reactivo. d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: en
caso de no procesarse de inmediato los sueros pueden
REACTIVOS NO PROVISTOS conservarse hasta una semana en refrigerador (2-10oC).
- Solución fisiológica (para la prueba semicuantitativa). El plasma puede emplearse hasta 24 horas luego de la
- Solución de cloruro de sodio 10 g/dl (para la técnica en extracción.
líquido cefalorraquídeo).
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE PROCEDIMIENTO

ALMACENAMIENTO Tanto los reactivos como la muestra deben estar a tem-
Reactivos Provistos: estables en refrigerador (2-10oC) has- peratura ambiente antes de realizar la prueba.
I- PRUEBA CUALITATIVA EN SUERO O PLASMA
INSTRUCCIONES PARA SU USO En cada uno de los sectores marcados de la placa colocar:
Reactivo A: listo para usar. Agitar antes de realizar la prueba.
871040000 / 00 p. 1/3
Muestra o Controles 50 ul la historia clínica del paciente.
Con gotero provisto colocar:
PERFORMANCE
Reactivo A 1 gota
Agitar horizontalmente la placa a 180 rpm durante 4 usando V.D.R.L. test e inmunofluorescencia como método
minutos. Observar inmediatamente en microscopio de referencia, se observó una concordancia superior al 96%.
con poco aumento (60 a 100 X).
PRESENTACION
II- PRUEBA SEMICUANTITATIVA EN SUERO O PLASMA
Preparar diluciones de la muestra 1:2, 1:4, 1:8, 1:16
y 1:32 con solución fisiológica y realizar para cada
dilución la prueba como se describe en I.
BIBLIOGRAFIA
III- PRUEBA CUALITATIVA PARA LCR - Zinsser Microbiología, Joklik W., Willett H. y Amos D., 17o
Diluir el Reactivo A 1:2 con solución de cloruro de sodio edición Editorial Médica Panamericana, 1983.
10 g/dl. Emplear dentro de las 2 horas de preparación. - Manual of Tests for Syphilis, cap. 8 - American Public Health
En cada sector delimitado de la placa colocar: Association, Washington, D.C 20005, 1990.
Muestra o Controles 50 ul - Podestá, D.; Svetaz. M.J.; Ricomi, R.; Capriotti, G.; Rojkín,
L.; Lorenzo, L.; "Evaluación de tres reactivos para detección
Con aguja calibre 6 agregar: de sífilis" - VIII Congreso Argentino de Bioquímica, 54º
Reactivo A diluido 1 gota Triduo Bioquímico Científico Anual 1990 - Revista A.B.A.
(10 ul) 54/3, 1990.
8 minutos a 180 rpm. Leer los resultados en micros-
copio con poco aumento (60 a 100 X).


Para controlar la calidad del sistema procesar los Controles
provistos o un Control Positivo (suero seguramente reacti-
vo) y un Control Negativo (suero seguramente no reactivo)
utilizándolos de la misma forma que las muestras.

Resultados falsamente negativos pueden observarse cuan-
se recomienda repetir la prueba en suero diluido 1:5 con
solución fisiológica para verificar el resultado. Si en estas
condiciones se observa floculación la muestra es reactiva.
871040000 / 00 p. 2/3
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
Disp. Nº: 1068/91 - 7585/97 -
6895/00 - 1195/13 2000 Rosario - Argentina
871040000 / 00 p. 3/3 UR110720
V.D.R.L. test

La sífilis es una enfermedad venérea causada por el Tre- El Reactivo A es para uso diagnóstico "in vitro".
ponema pallidum, que invade las mucosas intactas o la piel Todas las muestras de pacientes deben manipularse como
en áreas de abrasiones. El contacto sexual es la forma más si fueran capaces de transmitir infección.
común de transmisión. Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
La detección y tratamiento de la enfermedad en sus estadios de trabajo en el laboratorio de química clínica.
tempranos es fundamental a fin de evitar complicaciones gra- Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
ves como sífilis cardiovascular, neurosífilis y sífilis congénita. acuerdo a la normativa local vigente.
El diagnóstico de esta enfermedad sufre la carencia de
un método para cultivar el microorganismo en medios de MATERIAL REQUERIDO
laboratorio y la dificultad para detectarlo en estadios de la 1- Provisto
enfermedad en los que no se observan lesiones epidérmicas. - 1 gotero
Sin embargo, desde el comienzo de la infección aparecen
en el suero del individuo infectado ciertas sustancias de- 2- No Provisto
nominadas "reaginas", que reaccionan con antígenos de - Agitador rotativo ajustable a 180 rpm.
cardiolipina, lecitina y colesterol. Estas reaginas junto a - Placa de vidrio transparente con sectores de 14 mm de
los signos clínicos son por lo tanto los procedimientos más diámetro.
rápidos y útiles disponibles para diagnóstico de sífilis. - Micropipetas para medir los volúmenes indicados.
- Microscopio
Las "reaginas", presentes en individuos infectados por T. pa- MUESTRA
llidum se detectan en suero por la reacción con un antígeno Suero o líquido cefalorraquídeo (LCR)
cardiolipínico purificado y estabilizado. Si la muestra contiene a) Recolección: obtener de la manera usual. No inactivar.
reagina, ésta se unirá al antígeno produciendo una flocu- b) Aditivos: no se requieren.
lación visible en microscopio. Las reacciones inespecíficas c) Sustancias interferentes conocidas: hemólisis o hiper-
se evitan con el empleo de antígeno altamente purificado y lipemia pueden ocasionar resultados erróneos.
el agregado de cloruro de colina característica de la técnica d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: en
USR (Unheated Serum Reagin) en la que no es necesario caso de no procesarse de inmediato los sueros pueden
inactivar la muestra. conservarse hasta una semana en refrigerador (2-10oC).
REACTIVOS PROVISTOS
A. Reactivo A: suspensión acuosa de antígeno de cardioli- PROCEDIMIENTO
pina y lecitina purificados, en buffer fosfatos con cloruro de Tanto los reactivos como la muestra deben estar a tem-
colina y EDTA de acuerdo a las indicaciones de la O.M.S. peratura ambiente antes de realizar la prueba.
I- PRUEBA CUALITATIVA EN SUERO
REACTIVOS NO PROVISTOS En cada uno de los sectores delimitados de la placa colocar:
- Solución fisiológica (para la prueba semicuantitativa).
- Solución de cloruro de sodio 10 g/dl (para la técnica en Muestra 50 ul
líquido cefalorraquídeo).
Con gotero provisto colocar:
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE Reactivo A 1 gota
ALMACENAMIENTO Agitar horizontalmente la placa a 180 rpm durante 4
Reactivo A: estable en refrigerador (2-10oC) hasta la fecha minutos. Observar inmediatamente en microscopio con
de vencimiento indicada en la caja. No congelar. poco aumento (60 a 100 X).
INSTRUCCIONES PARA SU USO II- PRUEBA SEMICUANTITATIVA EN SUERO
Reactivo A: listo para usar. Agitar previo a la ejecución de Preparar diluciones de la muestra 1:2, 1:4, 1:8, 1:16 y 1:32
la prueba.
871020000 / 01 p. 1/6
BIBLIOGRAFIA
con solución fisiológica y realizar para cada dilución la
- Zinsser Microbiología, Joklik W., Willett H. y Amos D., 17o
prueba como se describe en I.
III- PRUEBA CUALITATIVA PARA LCR - Manual of Tests for Syphilis, cap. 8 - American Public Health
Diluir el Reactivo A 1:2 con solución de cloruro de sodio Association, Washington, D.C 20005, 1990.
10 g/dl. Emplear dentro de las 2 horas de preparación. - Podestá, D.; Svetaz. M.J.; Ricomi, R.; Capriotti, G.; Rojkín,
En cada sector delimitado de la placa colocar: L.; Lorenzo, L.; "Evaluación de tres reactivos para detección
de sífilis" - VIII Congreso Argentino de Bioquímica, 54º
Muestra 50 ul Triduo Bioquímico Científico Anual 1990 - Revista A.B.A.
Con aguja calibre 6 agregar: 54/3, 1990.
Reactivo A diluido 1 gota (10 ul)
8 minutos a 180 rpm. Leer los resultados en micros-
copio con poco aumento (60 a 100 X).


Para controlar la calidad del sistema procesar un Control
Positivo (suero seguramente reactivo) y un Control Negativo
(suero seguramente no reactivo) utilizándolos de la misma
forma que las muestras.

Resultados falsamente negativos pueden observarse cuan-
se recomienda repetir la prueba en suero diluido 1:5 con
solución fisiológica para verificar el resultado. Si en estas
condiciones se observa floculación la muestra es reactiva.
la historia clínica del paciente.
PERFORMANCE
usando V.D.R.L. test e inmunofluorescencia como método
de referencia, se observó una concordancia superior al 96%.
PRESENTACION
Equipo para 250 determinaciones (Cód 1853151).
871020000 / 01 p. 2/6
Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
Disp. Nº: 1068/91 - 7585/97 -
6895/00 - 1195/13 - 4793/14 2000 Rosario - Argentina
871020000 / 01 p. 3/6 UR140722
WL Check
C Chagas
Para la detección de anticuerpos contra el Trypanosoma
cruzi en suero, plasma y sangre entera
SIGNIFICACION CLINICA una zona de control "C" de color amarillo que cambia a color
La enfermedad de Chagas (tripanosomiasis americana) rosa-rojo púrpura tras el paso de la muestra. La ausencia de
es una infección parasitaria producida por el Trypanosoma esta línea invalida los resultados.
cruzi. El diagnóstico de laboratorio depende del estadio
en el cual se encuentre la enfermedad. Durante la fase MATERIAL PROVISTO
aguda, el diagnóstico se efectúa directamente mediante la A. Reactivo A: cassette plástico compuesto por una mem-
comprobación de los parásitos en sangre o por métodos brana de nitrocelulosa sensibilizada con antígenos recom-
inmunológicos que detecten anticuerpos tipo IgM. Durante binantes específicos de Trypanosoma cruzi y conjugado de
la fase crónica, se pueden utilizar métodos inmunológicos antígenos recombinantes.
como: hemaglutinación, inmunofluorescencia, ensayo inmu- B. Reactivo B: buffer fosfato de sodio 50 mM, azida sódica
noenzimático o Western blot. Dado que ninguno de estos 0,90 g/L, agente tensioactivo, pH = 8,0.
tests reúne, individualmente, las condiciones óptimas de
sensibilidad y especificidad, se recomienda el uso en paralelo INSTRUCCIONES PARA SU USO
de al menos dos tests serológicos distintos para confirmar El material provisto es listo para usar.
la infección por T. cruzi.
En los últimos años, se han desarrollados pruebas rápidas MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
inmunocromatográficas basadas en antígenos recombinan- - Micropipeta para medir los volúmenes indicados.
tes. Por su simpleza y rapidez, estas pruebas constituyen - Dispositivo de 40 uL descartable para toma de sangre
una herramienta complementaria de gran utilidad, tanto para entera capilar (sólo provisto en algunas presentaciones).
ensayos epidemiológicos de campo como para el diagnóstico - Tips descartables.
clínico, facilitando de esta manera la detección precoz de - Reloj alarma o cronómetro.
la infección. - Material para extracción de muestra.
WL Check Chagas es una prueba rápida basada en una - Lanceta para toma de sangre entera capilar.
combinación especial de antígenos recombinantes capaces - Guantes descartables, guardapolvo, protección ocular.
de detectar la presencia de anticuerpos anti-Trypanosoma - Contenedor para el descarte de residuos biológicos.
cruzi en suero, plasma y sangre entera. - Hipoclorito de sodio.
FUNDAMENTOS DEL METODO PRECAUCIONES

WL Check Chagas es un ensayo inmunocromatográfico - Leer el manual de instrucciones de manera completa
"in vitro" para la detección cualitativa de anticuerpos contra antes de realizar el ensayo y seguir las instrucciones
Trypanosoma cruzi en suero, plasma y sangre entera. La cuidadosamente.
prueba consta de un cassette plástico que contiene: - No utilizar la prueba si el envase está dañado.
- una membrana de nitrocelulosa sensibilizada, en la zona de - No utilizar los reactivos después de la fecha de vencimiento
prueba "T", con antígenos recombinantes específicos de los indicada en el envase.
estadios epimastigote y tripomastigote de T. cruzi. - Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
- un parche impregnado con antígenos recombinantes es- - Esta prueba proporciona un resultado cualitativo y visual.
pecíficos de T. cruzi conjugados a oro coloidal. Es necesaria una buena fuente de luz para la visualización
La muestra y el buffer se agregan en el pocillo de muestra de los resultados.
"S" solubilizando y mezclándose con el conjugado de antí- - No mezclar reactivos de diferentes lotes.
genos recombinantes. Seguidamente, esta mezcla migra por - No utilizar reactivos de otro origen.
capilaridad a través de la membrana de nitrocelulosa. Si la - No tocar la membrana de nitrocelulosa con los dedos.
muestra es reactiva, los anticuerpos anti-T. cruzi presentes, - Seguir las prácticas de seguridad biológica al utilizar
formarán un complejo con los antígenos conjugados a oro muestras y reactivos:
coloidal. Este complejo se unirá posteriormente a los antíge- . Manipular todas las muestras de pacientes como poten-
nos inmovilizados en la zona de prueba "T" de la membrana cialmente infecciosas.
de nitrocelulosa, formando así una línea de color rosa-rojo . Utilizar guantes, guardapolvo y protección ocular.
púrpura. La ausencia de dicha línea indica un resultado . No pipetear con la boca.
negativo. Como control de procedimiento, la prueba incluye . Limpiar y desinfectar las salpicaduras de muestra o reac-
864104000 / 00 p. 1/10
tivos usando hipoclorito sódico (concentración final 5%) 6- Mantener el dedo por debajo de la altura del codo y pre-
u otro desinfectante adecuado. Para inactivar el material sionar suavemente la base del dedo a intervalos regulares.
empleado autoclavar durante 1 hora a 121oC. 7- Absorber la primera gota de sangre con una gasa estéril
- Evitar la formación de burbujas en el pocillo de muestra "S" y descartar en un recipiente adecuado. De esta manera
tanto al colocar la muestra como el Reactivo B. se asegura la eliminación del líquido tisular de la muestra,
- Durante la realización de la prueba, colocar el cassette evitando así resultados erróneos.
sobre una superficie limpia, plana y sin vibraciones. 8- Tomar la muestra de sangre con el dispositivo descartable
- No agitar el cassette durante la realización del ensayo. provisto. Para ello:
- El cassette es descartable, no reutilizar. Desechar en 8a- Sostener el dispositivo en forma vertical y con un ligero
recipientes destinados a residuos con riesgo biológico. ángulo de inclinación respecto a la superficie de la piel.
- El Reactivo B posee azida sódica en bajas concentraciones Presionar el bulbo superior.
como conservante. 8b- Tomar la muestra de sangre hasta llenar el vástago,
- Los reactivos y las muestras deben ser descartados de para lo cual se debe soltar el bulbo superior suavemente
acuerdo a la normativa local vigente. evitando así la formación de burbujas.
8c- Agitar el dispositivo suavemente y con cuidado de no
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE salpicar. El exceso de muestra debe quedar retenido en
ALMACENAMIENTO el fondo del bulbo inferior. Es muy importante tomar esta
El kit es estable entre 2 y 30oC hasta la fecha de vencimiento precaución para evitar dispensar un exceso de sangre.
indicada en la caja. No congelar. En caso de almacenar 8d- Presionar el bulbo superior y descargar los 40 uL
refrigerado, asegurarse que el sobre alcance temperatura de muestra contenidos en el vástago sobre el pocillo de
ambiente antes de ser utilizado, de lo contrario se favorecerá muestra "S".
la humectación del contenido. bulbo superior
El cassette debe permanecer en su sobre original sellado.
No abrir el envoltorio hasta el momento de usar.
MUESTRA
Suero, plasma y sangre entera obtenida por punción venosa bulbo inferior
o punción capilar.
a) Recolección: recoger las muestras asépticamente y de
manera tal de evitar hemólisis. vástago
- Suero: obtener el suero de la manera usual. Separar el
coágulo dentro de las dos horas posteriores a la obtención.
Puede utilizarse suero obtenido en tubos con acelerador b) Estabilidad y almacenamiento:
y gel separador. - Suero y plasma: conservar entre 2 y 10oC. En caso de no
- Plasma: utilizar plasma recogido con EDTA, citrato o realizar la prueba dentro de los 3 días conservar la muestra
heparina. a -20oC. No es recomendable realizar múltiples ciclos de
- Sangre entera (punción venosa): utilizar sangre recogida congelamiento y descongelamiento. Esto puede generar
con EDTA, citrato o heparina. resultados erróneos. En caso de utilizar muestras conge-
- Sangre entera (punción capilar): utilizar sangre recogida ladas, éstas deben ser homogeneizadas y centrifugadas
con el dispositivo de 40 uL descartable (sólo provisto en antes de usar.
algunas presentaciones). Realizar la prueba inmediata- - Sangre (punción venosa): puede almacenarse hasta 3 días
mente. En caso de utilizar otro dispositivo, es responsabi- entre 2 y 10oC. No congelar.
lidad del usuario validar el dispositivo de toma de sangre - Sangre (punción capilar): utilizar inmediatamente. No
entera capilar. congelar.
Obtención de sangre entera capilar c) Sustancias Interferentes: no se ha observado interfe-
1- Recoger la muestra de la punta del dedo mayor o anular. rencia por:
De ser necesario calentar la mano del paciente para aumen- . Hemólisis: hasta 1,1 g/dL de hemoglobina.
tar el flujo sanguíneo. Para ello utilizar una toalla caliente y . Lipemia: hasta 1500 mg/dL de triglicéridos.
húmeda o agua caliente (< 42oC). . Bilirrubina: hasta 30 mg/dL.
2- Limpiar el dedo con solución acuosa de isopropanol al . Ácido ascórbico: hasta 50 mg/dL.
70% v/v y dejar que seque. Restos de isopropanol pueden d) Transporte: si las muestras deben ser transportadas,
causar la hemólisis de la muestra. embalar de acuerdo a las especificaciones legales relativas
3- Colocar la mano con la palma hacia arriba y sostener el al envío de material infeccioso.
dedo del paciente firmemente.
4- Utilizar una lanceta nueva para cada paciente. Colocar
la lanceta en forma perpendicular a la superficie de la piel. PROCEDIMIENTO
Punzar con firmeza la punta del dedo, sobre la falange distal. 1- Los reactivos y las muestras deben estar a temperatura
5- Desechar la lanceta en un contenedor adecuado para ambiente (18 a 30oC) antes de utilizar.
objetos punzantes y con riesgo biológico.
864104000 / 00 p. 2/10
Resultado Inválido: la ausencia de la línea de color rosa-
2- Extraer el cassette de su sobre sellado inmediatamente
rojo púrpura en la zona de control "C" invalida el resultado,
antes de utilizar.
aunque esté o no presente la línea de color rosa-rojo púrpura
3- Colocar el cassette sobre una superficie limpia, plana
en la zona de prueba "T". Un resultado inválido general-
y sin vibraciones.
mente indica un error en la realización del procedimiento o
4- Agregar la muestra sobre el pocillo de muestra "S".
un problema con la muestra. Con determinadas muestras
PARA SUERO - PLASMA - SANGRE ENTERA
pueden aparecer dificultades como migración incompleta,
. Colocar 40 uL con micropipeta automática*.
muestra muy viscosa o presencia de fibrina. En cualquier
. Esperar 10 a 15 segundos hasta que se absorba la muestra.
caso, revisar el procedimiento, centrifugar nuevamente la
. Agregar 3 gotas (100 uL) de Reactivo B en el pocillo
muestra y repetir el ensayo utilizando un nuevo cassette.
de muestra "S".
. Iniciar el cronómetro.
LIMITACIONES DEL METODO
Nota: * En caso de utilizar sangre entera capilar usar el
- WL Check Chagas es una prueba para el diagnóstico de
dispositivo de 40 uL descartable (sólo provisto en algunas
la infección por T. cruzi. Cualquier resultado obtenido con
presentaciones).
esta prueba debe ser confirmado por otros métodos y co-
5- En cualquiera de los casos, leer los resultados entre
tejado con los datos clínicos del paciente antes de realizar
los 25 y 35 minutos. No leer pasado los 35 minutos ya
el diagnóstico definitivo.
que pueden obtenerse resultados erróneos. Algunas
- Un resultado reactivo por WL Check Chagas indica la
muestras positivas reaccionan inmediatamente mientras
presencia de anticuerpos anti-T. cruzi. Este resultado debe
que otras lo hacen más lentamente dentro del tiempo de
ser verificado por otra técnica. Tener en cuenta el criterio
lectura indicado. Debido a características particulares
recomendado por el Instituto Fatala Chabén, según el cual
de algunas muestras, el color de fondo de la membrana
el inmunodiagnóstico de la infección deberá hacerse con un
puede quedar ligeramente rosado sin afectar la interpre-
mínimo de 2 de los siguientes métodos: inmunofluorescencia
tación de los resultados.
indirecta, hemaglutinación indirecta y ELISA, debidamente
validados por el Centro Nacional de Referencia.
- Un resultado negativo no excluye la posibilidad de infección
CRITERIOS DE VALIDACION DE LA PRUEBA
por T. cruzi. Se puede obtener un resultado falso negativo
- El cassette cuenta con una línea de color amarillo en la
en muestras con niveles bajos de anticuerpos anti-T. cruzi
zona de control "C" que permite identificar la determinación
o en estadios tempranos de la infección. Por estas razones
WL Check Chagas.
se debe tener cuidado al interpretar un resultado negativo,
- Al realizar el ensayo la línea de color amarillo debe cambiar
especialmente en pacientes con presencia de síntomas
a color rosa-rojo púrpura. Este cambio de color confirma
clínicos y factores de riesgo.
que se ha agregado el volumen adecuado de muestra,
- Pueden obtenerse resultados falsos positivos en las si-
que su migración fue apropiada y que la realización del
guientes situaciones: enfermedades autoinmunes, tubercu-
procedimiento fue correcta.
losis, lupus eritematoso sistémico, embarazo, vacunación
contra hepatitis B y otras inmunizaciones, hemodiálisis,
enfermedad hepática, otras parasitosis como Leishmania-
POSITIVO NEGATIVO INVALIDO sis y otras enfermedades infecciosas diferentes a Chagas
(HIV, HTLV, hepatitis C, hepatitis B, sífilis, etc).
- Pueden obtenerse resultados erróneos con muestras de
suero o plasma con aspecto turbio debido a contaminación
C C C C C bacteriana o por haber sido sometidas a varios ciclos de
T T T T T congelación y descongelación.
- La utilización de muestras inactivadas por calor puede
proporcionar resultados incorrectos.
S S S S S - No utilizar pooles de muestras o muestras diluidas.
- Ver sustancias interferentes en MUESTRA.
Resultado Positivo (2 líneas): se observan 2 líneas de color PERFORMANCE

rosa-rojo púrpura, una en la zona de prueba "T" y otra en la a) Sensibilidad
zona de control "C". La intensidad de color de la línea "T" Sensibilidad Clínica en Paneles de Performance
dependerá de la muestra en estudio. Cualquier color rosado En un estudio realizado sobre diferentes paneles comerciales
visible, aunque sea muy tenue debe ser interpretado como internacionales, se obtuvieron los siguientes resultados:
positivo. El resultado es positivo aunque las intensidades - PMT 202 (Anti-T. cruzi Performance Panel, Sera Care Life
del color de las líneas "T" y "C" sean diferentes. Sciences, USA - BBI Diagnostics): se detectaron 13 de las
Resultado Negativo (1 línea): se observa solamente una 14 muestras reactivas.
línea de color rojo-rosa púrpura en la zona de control "C". - PP 0407 (Panel de Performance anti-T. cruzi, Q Panel,
No aparece línea de color en la zona de prueba "T". Brasil): se detectaron 16 de las 16 muestras reactivas.
864104000 / 00 p. 3/10
- PP 0508 (Panel de Performance anti-T. cruzi, Q Panel, se evaluaron en forma paralela, suero y plasma del mismo
Brasil): se detectaron 16 de las 16 muestras reactivas. paciente. Para 17 de estas 200 muestras también se evaluó
- PP 0409 (Panel de Performance anti-T. cruzi, Q Panel, sangre entera obtenida por punción capilar. Con todos los
Brasil): se detectaron 16 de las 16 muestras reactivas. tipos de muestras se tuvieron resultados negativos.
En otro estudio realizado sobre 313 muestras de banco de
Sensibilidad con Controles Internacionales
sangre, la especificidad obtenida fue de 98,08% con un IC95%
- VIROTROL® Chagas - Bio-Rad: se obtuvo resultado
= 96,40% - 99,76%.
reactivo.
También se estudió la posible aparición de reactividades
- ACCURUN® 190 Control Positivo de anticuerpos anti-
cruzadas ensayando muestras provenientes de 257 in-
Trypanosoma cruzi (Chagas) - Sera Care Life Sciences:
dividuos con diferentes condiciones clínicas que pueden
se obtuvo resultado reactivo.
ser causantes de reacciones inespecíficas para el ensayo
Sensibilidad clínica en Paneles de muestras reactivas anti-T. cruzi WL Check Chagas. Estas condiciones incluyen mujeres
En un estudio realizado sobre un panel de 326 muestras embarazadas, pacientes hemodializados, pacientes con
reactivas por ELISA y hemaglutinación indirecta (HAI), la enfermedades autoinmunes o enfermedades infecciosas
sensibilidad obtenida fue de 93,87% con un IC95% = 91,11% diferentes a Chagas (HIV, HTLV, hepatitis C, hepatitis B,
- 96,62%. sífilis, otras). Para esta población la especificidad fue de
En otro estudio realizado sobre 83 muestras reactivas de 98,44% con un IC95% = 96,73% - 100,0%. En este muestreo
niños provenientes de región endémica para la infección se incluyeron 12 plasmas de pacientes con Leishmaniasis
por T. cruzi, se encontraron reactivas 78 muestras. cutánea y 12 con Leishmaniasis mucocutánea. WL Check
Un estudio realizado en un Centro de Referencia para el Chagas no presentó reacciones cruzadas por Leishmaniasis
Diagnóstico de Chagas analizó un panel de 72 muestras en ninguna de las muestras evaluadas.
reactivas obteniéndose una sensibilidad de 98,61% con un c) Precisión
IC95% = 92,51% - 99,96%.
Otro estudio evaluó, en paralelo, 106 muestras reactivas de
recomendado por el CLSI (ex NCCLS). Los ensayos fueron
plasma y sangre entera obtenidas del mismo paciente. En el
realizados con 4 muestras positivas con diferentes niveles
caso de los plasmas se detectaron 106 muestras, mientras que
de reactividad y con 1 muestra negativa. Se realizaron 2
en el caso de la sangre entera resultaron reactivas 97 muestras.
ensayos diarios evaluando cada muestra por duplicado por el
b) Especificidad transcurso de 20 días. Los resultados fueron leídos a los 25
En un estudio realizado sobre 1419 muestras de sueros, minutos en forma visual por 3 operarios independientes y de
plasmas y sangres enteras provenientes de tres centros de forma instrumental, utilizando un lector inmunocromatográfico.
salud diferentes, se encontró una especificidad de 97,89% Las muestras positivas y negativas fueron identificadas
con un IC95% = 97,10% - 98,67%. Para 200 de estas muestras correctamente en el 100% de los casos.
Línea T Línea C
Interpretación
Media Intraensayo Total Media Intraensayo Total
instrumental
(DO) S CV S CV (DO) S CV S CV
Muestra positiva 1 0,590 0,068 11,61% 0,067 11,38% 0,833 0,076 9,18% 0,079 9,45%
Muestra negativa (-) NC NC NC NC 0,812 0,061 7,47% 0,078 9,64%
N = 80; (-) = no reactivo por lectura visual; NC = No Corresponde
PRESENTACION Helds J, editores. Buenos Aires - Argentina. http://www.

- 25 determinaciones (Cód. 1690011) who.int/tdr/publications/publications/pdf/swg_chagas.pdf.
- Centers for Disease Control and Prevention - Chagas
BIBLIOGRAFIA Disease. http://www.cdc.gov/chagas.
- Ministerio de Salud y Acción Social, Instituto Nacional - Evaluation of Precision Performance of Clinical Chemis-
de Parasitología "Doctor Mario Fatala Chabén". Normas try Devices; Approved Guideline. EP5-A, Vol. 19, Nº 2,
para el diagnóstico de la infección chagásica - Resolución NCCLS.
ministerial 523/97, 1998. - Interference testing in Clinical Chemistry. Approved Guide-
- WHO. Control of Chagas disease. Ginebra: WHO Press, 2002. line. EP7-A, Vol. 22, Nº 27, CLSI (ex NCCLS).
- OMS. Reporte sobre la enfermedad de Chagas. Grupo de - User Protocol for Evaluation of Qualitative Test Performan-
trabajo científico 17-20 de abril de 2005. Guhl F, Lazdins- ce; Approved Guideline. EP12-A, Vol. 22, Nº 14, NCCLS.
864104000 / 00 p. 4/10
- Evaluation of Stability of "in vitro" Diagnostic Reagents. SIMBOLOS
Approved Guideline. EP-25A, Vol. 29, Nº 20, CLSI (ex Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
NCCLS). reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
- Procedures and Devices for the Collection of Diagnostic
Capillary Blood Specimens; Approved Standard, 5ª Edición.
C
H4-A5, Vol. 24, Nº 21, CLSI (ex NCCLS). por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios

 No congelar
F Riesgo biológico
Cont. Contenido
g Número de lote
M Elaborado por:
Xn
Nocivo
Xi
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
Cert.: 7832/12 2000 Rosario - Argentina
864104000 / 00 p. 5/10 UR101124
WL Check
HIV 1+2
Para la detección de anticuerpos anti-HIV-1, anti-HIV-1
grupo O y anti-HIV-2 en suero, plasma y sangre entera
SIGNIFICACION CLINICA La muestra y el buffer se agregan en el pocillo de muestra

Los virus de la inmunodeficiencia humana (HIV-1 y HIV-2) "S" solubilizando y mezclándose con el conjugado de an-
son los agentes causales del Síndrome de la Inmunodefi- tígenos recombinantes. Seguidamente, esta mezcla migra
ciencia Adquirida (SIDA). Estos retrovirus son transmitidos por capilaridad a través de la membrana de nitrocelulosa.
por la exposición a ciertos fluidos corporales infectados, Si la muestra es reactiva, los anticuerpos anti HIV-1 y HIV-2
principalmente secreciones genitales y sangre o productos presentes, formarán un complejo con los antígenos conju-
contaminados derivados de la sangre y por pasaje a través gados a oro coloidal. Este complejo se unirá posteriormente
de la placenta. En individuos infectados con estos virus apa- a los antígenos inmovilizados en la zona de prueba "T" de
recen anticuerpos como respuesta del sistema inmunitario la membrana de nitrocelulosa, formando así una línea de
a la invasión viral. La detección de dichos anticuerpos es color rosa-rojo púrpura. La ausencia de dicha línea indica
utilizada como herramienta de diagnóstico. un resultado negativo. Como control de procedimiento, la
Los Centros para el Control y la Prevención de Enferme- prueba incluye una zona de control "C" de color celeste que
dades de EE.UU. (CDC), en su iniciativa "Advancing HIV cambia a color rosa-rojo púrpura tras el paso de la muestra.
Prevention" (AHP) destacan la importancia de la utilización La ausencia de esta línea invalida los resultados.
de pruebas rápidas de detección del HIV para facilitar el
acceso al diagnóstico precoz en zonas de alta prevalencia, REACTIVOS PROVISTOS
en individuos de alto riesgo o en zonas donde otros métodos A. Reactivo A: cassette plástico compuesto por una
de diagnóstico como ELISA, Western Blot o amplificación membrana de nitrocelulosa sensibilizada con antígenos
de ácidos nucleicos no estén disponibles. También son de recombinantes específicos para HIV-1 y HIV-2 y conjugado
gran utilidad en el momento del parto, especialmente para de antígenos recombinantes. Listo para usar.
el diagnóstico de mujeres que no hayan sido controladas B. Reactivo B: buffer borato de sodio 15 mM, azida 0,95 g/L,
durante el embarazo. agente tensioactivo, pH = 9,1. Listo para usar.
Por otra parte, estas pruebas rápidas constituyen una
herramienta diagnóstica que puede desempeñar un papel MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
importante en campañas de prevención y diagnóstico en - Micropipeta automática para medir los volúmenes indi-
entornos clínicos y no clínicos, facilitando de esta manera, cados.
la detección precoz de la infección. - Dispositivo de 20 uL descartable para toma de sangre
entera capilar (sólo provisto en algunas presentaciones)
FIN Y USO - Tips descartables.
WL Check HIV 1+2 es una prueba rápida que detecta - Reloj alarma o cronómetro.
conjuntamente la presencia de anticuerpos anti-HIV-1, anti- - Material para extracción de muestra.
HIV-1 grupo O y anti-HIV-2, destinada a diagnóstico clínico - Guantes descartables, guardapolvo, protección ocular.
o estudios de campo. No está destinada como prueba de - Contenedor para el descarte de residuos biológicos.
tamizaje de anticuerpos anti-HIV 1 y 2 para donantes de - Hipoclorito de sodio.
sangre y derivados.
PRECAUCIONES
FUNDAMENTOS DEL METODO - Leer el manual de instrucciones de manera completa
WL Check HIV 1+2 es un ensayo inmunocromatográfico antes de realizar el ensayo y seguir las instrucciones
"in vitro", de lectura visual, para la detección cualitativa de cuidadosamente.
anticuerpos contra los virus HIV-1 y HIV-2 en suero, plasma - No realizar la prueba si el envase está dañado.
y sangre entera. La prueba consta de un cassette plástico - No utilizar los reactivos después de la fecha de vencimiento
que contiene: indicada en el envase.
- una membrana de nitrocelulosa sensibilizada con antíge- - Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
nos recombinantes para HIV-1 (gp41) y HIV-2 (gp36) en - Esta prueba proporciona un resultado cualitativo y visual.
la zona de prueba "T". Es necesaria una buena fuente de luz para la lectura de
- un parche impregnado con antígenos recombinantes los resultados.
específicos para HIV-1 (gp41) y HIV-2 (gp36) conjugados - No mezclar reactivos de diferentes lotes.
a oro coloidal. - No utilizar reactivos de otro origen.
802001100 / 01 p. 1/6
- No tocar la membrana de nitrocelulosa con los dedos. No es recomendable realizar múltiples ciclos de congela-
- Seguir las prácticas de seguridad biológica al utilizar miento y descongelamiento. Esto puede generar resultados
muestras y reactivos: erróneos. En caso de usar muestras congeladas, éstas
. Manipular todas las muestras de pacientes como poten- deben ser homogeneizadas y centrifugadas antes de usar.
cialmente infecciosas. - Sangre (punción venosa): puede almacenarse hasta 3 días
. Utilizar guantes, guardapolvo y protección ocular. entre 2-10ºC. No congelar.
. No pipetear con la boca. - Sangre (punción capilar): utilizar inmediatamente. No
. No comer, beber, fumar, utilizar maquillaje ni manejar congelar.
lentes de contacto en los lugares donde se trabaje con c) Sustancias Interferentes: en sueros y plasmas enrique-
estos materiales. cidos, no se ha observado interferencia por:
. Limpiar y desinfectar las salpicaduras de muestra o reac- - Hemólisis: hasta 1,1 g/dL de hemoglobina.
tivos usando hipoclorito sódico (concentración final 5%) - Lipemia: hasta un equivalente de triglicéridos de 1500 mg/dL,
u otro desinfectante adecuado. Para inactivar el material tras enriquecer con Intralipid®.
empleado autoclavar durante 1 hora a 121oC. - Bilirrubina: hasta 30 mg/dL.
- Evitar la formación de burbujas en el pocillo de muestra "S" - Acido ascórbico: hasta 50 mg/dL.
tanto al colocar la muestra como el Reactivo B. Al dispensar d) Transporte: si las muestras deben ser transportadas,
el Reactivo B descartar cualquier gota con burbuja. embalar de acuerdo a las especificaciones legales relativas
- Durante la realización de la prueba, colocar el cassette al envío de material infeccioso.
sobre una superficie limpia, plana y sin vibraciones.
- No agitar el cassette durante la realización del ensayo.
- El cassette y el dispositivo para toma de sangre entera capi- PROCEDIMIENTO
lar, son descartables. No reutilizar. Desechar en recipientes 1- Los reactivos y las muestras deben estar a temperatura
destinados a residuos con riesgo biológico. ambiente (18-30oC) antes de utilizar.
- El Reactivo B posee azida sódica en bajas concentraciones 2- Extraer el cassette de su sobre sellado inmediatamente
como conservante. antes de utilizar.
- Los reactivos y las muestras deben ser descartados de 3- Colocar el cassette sobre una superficie limpia, plana
acuerdo a la normativa vigente. y sin vibraciones.
4- Agregar la muestra sobre la superficie absorbente del
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE pocillo de muestra "S".
ALMACENAMIENTO PARA SUERO O PLASMA
El kit es estable a 2-30oC hasta la fecha de vencimiento - Colocar 10 uL con micropipeta automática.
indicada en la caja. No congelar. En caso de almacenar - Esperar 10-15 seg. hasta que se absorba la muestra.
refrigerado, asegurarse que el sobre alcance temperatura - Agregar 3 gotas (100 uL) de Reactivo B en el pocillo
ambiente antes de ser utilizado, de lo contrario se favorecerá de muestra "S".
la humectación del contenido. - Iniciar el cronómetro.
El cassette debe permanecer en su sobre original sellado. PARA SANGRE ENTERA
No abrir el envoltorio hasta el momento de usar. - Colocar 20 uL con micropipeta automática.*
- Esperar 10-15 seg. hasta que se absorba la muestra.
MUESTRA - Agregar 3 gotas (100 uL) de Reactivo B en el pocillo
Suero, plasma y sangre entera obtenida por punción venosa de muestra "S".
o punción capilar - Iniciar el cronómetro.
a) Recolección: recoger las muestras asépticamente y de Nota: *en caso de utilizar sangre entera capilar, usar el
manera tal de evitar hemólisis. dispositivo de 20 uL descartable (sólo provisto en algunas
- Suero: obtenido de sangre entera sin anticoagulantes. presentaciones)
Separar el suero del coágulo inmediatamente para evitar 5- En cualquiera de los casos, leer los resultados entre los 20
hemólisis. Puede utilizarse suero obtenido en tubos con y 30 minutos. No leer pasado los 30 minutos ya que pueden
acelerador y gel separador. obtenerse resultados erróneos. Algunas muestras positivas
- Plasma: utilizar plasma recogido con EDTA, citrato o heparina. reaccionan inmediatamente mientras que otras lo hacen
- Sangre entera (punción venosa): utilizar sangre recogida más lentamente dentro del tiempo de lectura indicado. De-
con EDTA, citrato o heparina. bido a características particulares de algunas muestras, el
- Sangre entera (punción capilar): utilizar sangre recogida color de fondo de la membrana puede quedar ligeramente
con el dispositivo descartable (sólo provisto en algunas pre- rosado sin afectar la interpretación de los resultados.
sentaciones). Realizar la prueba inmediatamente. En caso
de utilizar otro dispositivo, es responsabilidad del usuario
validar el dispositivo de toma de sangre entera capilar. CRITERIOS DE VALIDACION DE LA PRUEBA
b) Estabilidad y almacenamiento: - El cassette cuenta con una línea de color celeste en la zona
- Suero y plasma: conservar a 2-10oC. En caso de no realizar de control "C" que permite identificar la determinación WL
la prueba dentro de los 5 días conservar la muestra a -20oC. Check HIV 1+2 e indica que los componentes de la prueba
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están presentes y activos. Resultado Positivo (2 líneas): se observan 2 líneas de color
- Al realizar el ensayo la línea de color celeste debe cambiar rosa-rojo púrpura, una en la zona de prueba "T" y otra en la
a color rosa-rojo púrpura. Este cambio de color confirma zona de control "C". La intensidad de color de la línea "T"
que se ha agregado el volumen adecuado de muestra, dependerá de la muestra en estudio. Cualquier color rosado
que su migración fue apropiada y que la realización del visible, aunque sea muy tenue debe ser interpretado como
procedimiento fue correcta. positivo. El resultado es positivo aunque las intensidades del
- Es responsabilidad del usuario efectuar el Control de Cali- color de las líneas "T" y "C" sean diferentes.
dad del equipo de acuerdo a las normas locales vigentes. Resultado Negativo (1 línea): se observa solamente una
línea de color rojo-rosa púrpura en la zona de control "C".
INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS No aparece línea de color en la zona de prueba "T".
POSITIVO NEGATIVO INVALIDO rojo púrpura en la zona de control "C" invalida el resultado,
en la zona de prueba "T". Un resultado inválido general-
C C C C C mente indica un error en la realización del procedimiento o
T T T T T un problema con la muestra. Con determinadas muestras
S S S S S caso, revisar el procedimiento, centrifugar nuevamente la
Algoritmo de interpretación
Muestra original
Resultado Positivo por Resultado Negativo por
WL Check HIV 1+2 WL Check HIV 1+2
Uno o ambos duplicados Positivos Ambos duplicados Negativos
por WL Check HIV 1+2 por WL Check HIV 1+2
POSITIVO NEGATIVO
Realizar otra prueba NEGATIVO

(ej.: ELISA) y confirmar
por Western Blot
Nota: tener en cuenta las normativas específicas de cada país para el diagnóstico de infección por HIV
LIMITACIONES DEL METODO ELISA) y confirmadas por Western Blot. El diagnóstico

- WL Check HIV 1+2 es una prueba complementaria en puede ser establecido solamente luego de interpretar los
el diagnóstico del HIV. Cualquier resultado obtenido con resultados junto con los datos clínicos del paciente.
esta prueba debe ser cotejado con los datos clínicos del - Para un resultado positivo, la intensidad de color de la línea
paciente antes de realizar el diagnóstico definitivo. "T" no necesariamente se correlaciona con la concentra-
- Un resultado negativo no excluye la posibilidad de infección ción de anticuerpos anti-HIV específicos en la muestra.
por HIV. Se puede obtener un resultado falso negativo en - Pueden obtenerse resultados falsos positivos en las si-
las siguientes circunstancias: guientes situaciones: enfermedades autoinmunes, tubercu-
. Niveles bajos de anticuerpos anti-HIV en estadios tempra- losis, lupus eritematoso sistémico, embarazo, vacunación
nos de la infección. contra hepatitis B y otras inmunizaciones, hemodiálisis,
. Infección con una variante del virus que no se detecta con enfermedad hepática y otras enfermedades.
esta prueba. - WL Check HIV 1+2 ha sido diseñado para la detección
Por estas razones se debe tener cuidado al interpretar un de anticuerpos contra HIV-1 y HIV-2 en suero, plasma y
resultado negativo, especialmente en pacientes con presencia sangre entera humana. No utilizar otros fluidos biológicos
de síntomas clínicos y factores de riesgo. En este caso se reco- como saliva, líquido cefalorraquídeo u orina.
mienda analizar una nueva muestra obtenida con posterioridad. - Pueden obtenerse resultados erróneos con muestras de
- Muestras positivas por WL Check HIV 1+2 indican la suero o plasma con aspecto turbio debido a contaminación
presencia de anticuerpos anti-HIV-1 y anti-HIV-2. Estas bacteriana o por haber sido sometidas a varios ciclos de
muestras deben ser repetidas utilizando otro método (como congelación y descongelación.
802001100 / 01 p. 3/6
PRB 919-S 0, 9, 11 9 9
proporcionar resultados incorrectos.
0, 2, 8, 10, 26, 33,
- No utilizar pooles de muestras o muestras diluidas. PRB 924-X 33 35 (Indet)
35, 40
PRB 925-Y 0, 10, 18, 22, 44, 49 44 44 (Indet)
PERFORMANCE 0, 4, 14, 18, 21, 25,
PRB 929-AD 25 25 (Indet)
a) Sensibilidad 28
Sensibilidad Clínica en Paneles de Performance PRB 930-AE 0, 3, 7, 10 7 10 (Indet)
En un estudio realizado sobre diferentes paneles comerciales PRB 944-AT 0, 2, 7, 9, 14, 16 14 14 (Indet)
PRB 947-AW 0, 9, 11, 20 9 9 (Indet)
- PRB 108 (Anti-HIV 1 Low Titer Performance Panel, Sera
Care Life Sciences, USA - BBI Diagnostics): se detectaron PRB 949-AY 0, 6, 9, 18, 20 20 20 (Indet)
13 de las 14 muestras reactivas. PRB 951-BA 0, 2, 8, 11, 15, 19 19
Negativo hasta
- PRB 109 (Anti-HIV 1 Low Titer Performance Panel, Sera 19 días
Care Life Sciences, USA - BBI Diagnostics): se detectaron PRB 952-BB 0, 7, 10, 14, 17, 21 17 14 (Indet)
15 de las 19 muestras reactivas. Negativo hasta
- PRB 204 (Anti-HIV 1 Mixed Titer Performance Panel, Sera PRB 953-BC 0, 3, 7, 10 10
10 días
Care Life Sciences, USA - BBI Diagnostics): se detectaron 0, 2, 20, 22, 30, 35, Negativo hasta
23 de las 23 muestras reactivas. PRB 966 48
37, 44, 48, 51 51 días
- WWRB303 (Worldwide HIV Performance Panel, Sera Care
Life Sciences, USA - BBI Diagnostics): se detectaron 13 de Indet: indeterminadas
las 14 muestras reactivas para HIV-1 grupo M (subtipos A, Sensibilidad Clínica en Paneles de muestras reactivas
B, C, D, F y G), HIV-1 grupo O y HIV-2. En un estudio de 68 muestras reactivas, incluidas 4 muestras
- WWRB350 (Worldwide HIV Performance Panel, Sera Care HIV-1 grupo O, provenientes de una institución hospitalaria,
Life Sciences, USA - BBI Diagnostics): se detectaron 18 de se detectaron las 68 muestras.
las 18 muestras reactivas para HIV-1 grupo M (subtipos A, En otro estudio se suplementaron 30 sangres enteras con
CRF02_AG, B, C, D, CRF01_AE, F, G y H). 30 sueros positivos para HIV y se evaluaron en paralelo las
- PRB 601 (HIV-1 Incidence/Prevalence Panel, Sera Care sangres enteras suplementadas y los respectivos sueros.
Life Sciences, USA - BBI Diagnostics): se detectaron 15 Se detectaron la totalidad de las muestras (sangres enteras
de las 15 muestras reactivas para HIV-1 correspondientes y sueros).
a infecciones recientes y de larga duración. En otro estudio se evaluaron, en paralelo, 15 muestras
- PRZ 204 (Anti-HIV-1/2 Combo Performance Panel, Sera reactivas de suero y plasma obtenidas del mismo paciente y
Care Life Sciences, USA - BBI Diagnostics): se detectaron para 10 de estas muestras también se evaluó sangre entera
14 de las 14 muestras reactivas para HIV-1 y HIV-2. obtenida por punción capilar. Con todos los tipos de muestras
- PRZ 205 (Anti-HIV-1/2 Combo Performance Panel, Sera se tuvieron resultados positivos.
Care Life Sciences, USA - BBI Diagnostics): se detectaron
14 de las 14 muestras reactivas para HIV-1 y HIV-2. b) Especificidad
- PRZ 207 (Anti-HIV-1/2 Combo Performance Panel, Sera En un estudio realizado sobre 1122 muestras de sueros,
Care Life Sciences, USA - BBI Diagnostics): se detectaron plasmas y sangres enteras provenientes de tres centros de
14 de las 14 muestras reactivas para HIV-1 y HIV-2. salud diferentes, se encontró una especificidad de 99,91%
- PP 0508 (Panel de Performance para HIV, Q Panel, Brasil): con un IC95% = 99,49% - 99,98%.
se detectaron 16 de las 16 muestras reactivas. En otro estudio realizado sobre 417 muestras de banco de
- PP 0409 (Panel de Performance para HIV, Q Panel, Brasil): sangre, la especificidad obtenida fue de 99,76% con un
se detectaron 16 de las 16 muestras reactivas. IC95% = 98,65% - 99,96%. Para 100 muestras de las 417 se
evaluaron, en forma paralela, muestras de suero y plasma
Sensibilidad Clínica en Paneles de Seroconversión
del mismo paciente y para 40 de estas 100 muestras también
se evaluó sangre entera obtenida por punción capilar. Con
internacionales de seroconversión (Sera Care Life Scien-
todos los tipos de muestras se tuvieron resultados negativos.
ces, USA - BBI Diagnostics), se obtuvieron los siguientes
En otro estudio de 393 muestras de sueros y plasmas de tres
resultados:
centros de salud diferentes, se encontró una especificidad
Tiempo (días) en el cual de 99,24% con un IC95% = 97,78% - 99,74%.
Nombre Dias desde el la muestra es reactiva También se estudió la posible aparición de reactividades cru-
del panel primer sangrado WL Check Western Blot zadas ensayando muestras provenientes de 440 individuos
HIV 1+2 (datos Sera Care) con diferentes condiciones clínicas que pueden ser causan-
PRB 904-D 0, 21, 49, 92, 99 92 92 tes de reacciones inespecíficas para el ensayo WL Check
PRB 912-L 0, 9, 14, 16, 28, 30 0 9 HIV 1+2. Estas condiciones incluyen mujeres embarazadas,
pacientes hemodializados, pacientes con enfermedades
PRB 916-P 0, 4, 9, 15, 30, 35 30 30
autoinmunes o enfermedades infecciosas diferentes a HIV
802001100 / 01 p. 4/6
(Chagas, HTLV, Hepatitis C, Hepatitis B, Sífilis, otras). Para realizados con 4 muestras positivas con diferentes niveles
esta población la especificidad fue de 98,18% con un IC95% de reactividad y con 1 muestra negativa. Se realizaron 2
= 96,45% - 99,08%. ensayos diarios evaluando cada muestra por duplicado por el
transcurso de 20 días. Los resultados fueron leídos a los 20
c) Precisión minutos en un lector inmunocromatográfico y en forma visual.
Se evaluó la precisión del test siguiendo el protocolo EP5-A Las muestras positivas siempre dieron un resultado reactivo
recomendado por el CLSI (ex NCCLS). Los ensayos fueron y la muestra negativa siempre dio un resultado no reactivo.
Línea T Línea C
Muestra positiva 4
0,049 0,017 35,79% 0,017 35,36% 0,679 0,075 11,11% 0,085 12,59%
(en dilución)
N = 80; (-) = no reactivo por lectura visual; NC = no corresponde
PRESENTACION www.cdc.gov/mmwr/preview/mmwrhtml/mm5215a1.htm)
25 determinaciones (Cód. 1690319) - Centers for Disease Control and Prevention: Notice to
Readers: Protocols for Confirmation of Reactive Rapid
BIBLIOGRAFIA HIV Tests. MMWR 2004, 53:221-222 (http://www.cdc.gov/
- Centro Nacional de referencia para el SIDA (http://www. mmwr/preview/mmwrhtml/mm5310a7.htm)
cnrsida.org.ar) - Evaluation of Precision Performance of Clinical Chemistry
- Centers for Disease Control and Prevention: Rapid HIV Tes- Devices; Approved Guideline. EP5-A, Vol. 19, Nº 2, NCCLS.
ting (http://www.cdc.gov/hiv/topics/testing/rapid/index.htm) - User Protocol for Evaluation of Qualitative Test Performan-
- Greenwald JL, Burstein GR, Pincus J, Branson B. - A rapid ce; Approved Guideline. EP12-A, Vol. 22, Nº 14, NCCLS.
review of rapid HIV antibody tests. - Curr. Infect. Dis. Rep. - Procedures and Devices for the Collection of Diagnostic
8/2:125 (2006). Capillary Blood Specimens; Approved Standard, 5ª Edición.
- Centers for Disease Control and Prevention: Advancing H4-A5, Vol. 24, Nº 21, CLSI (ex NCCLS).
HIV Prevention: New Strategies for a Changing Epidemic, - Evaluation of Stability of In Vitro Diagnostic Reagents. Ap-
United States, 2003. MMWR 2003, 52:329–332. (http:// proved Guideline. EP-25A, Vol. 29, Nº 20, CLSI (ex NCCLS).
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Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
802001100 / 01 p. 6/6 UR120705
WL Check
HIV 1+2
Para la detección de anticuerpos anti-HIV-1, anti-HIV-1
grupo O y anti-HIV-2 en suero, plasma y sangre entera
SIGNIFICACION CLINICA presentes, formarán un complejo con los antígenos conju-

Los virus de la inmunodeficiencia humana (HIV-1 y HIV-2) gados a oro coloidal. Este complejo se unirá posteriormente
son los agentes causales del Síndrome de la Inmunodefi- a los antígenos inmovilizados en la zona de prueba “T” de
ciencia Adquirida (SIDA). Estos retrovirus son transmitidos la membrana de nitrocelulosa, formando así una línea de
por la exposición a ciertos fluidos corporales infectados, color rosa-rojo púrpura. La ausencia de dicha línea indica
principalmente secreciones genitales y sangre o productos un resultado negativo. Como control de procedimiento, la
contaminados derivados de la sangre y por pasaje a través prueba incluye una zona de control “C” de color celeste que
de la placenta. En individuos infectados con estos virus apa- cambia a color rosa-rojo púrpura tras el paso de la muestra.
recen anticuerpos como respuesta del sistema inmunitario La ausencia de esta línea invalida los resultados.
a la invasión viral. La detección de dichos anticuerpos es
utilizada como herramienta de diagnóstico. MATERIAL PROVISTO
Los Centros para el Control y la Prevención de Enferme- A. Reactivo A: cassette plástico compuesto por una
dades de EE.UU. (CDC), en su iniciativa “Advancing HIV membrana de nitrocelulosa sensibilizada con antígenos
Prevention” (AHP) destacan la importancia de la utilización recombinantes específicos para HIV-1 y HIV-2 y conjugado
de pruebas rápidas de detección del HIV para facilitar el de antígenos recombinantes. Listo para usar.
acceso al diagnóstico precoz en zonas de alta prevalencia, B. Reactivo B: buffer borato de sodio 15 mM, azida 0,95 g/L,
en individuos de alto riesgo o en zonas donde otros métodos agente tensioactivo, pH = 9,1. Listo para usar.
de diagnóstico como ELISA, Western Blot o amplificación
de ácidos nucleicos no estén disponibles. También son de INSTRUCCIONES PARA SU USO
gran utilidad en el momento del parto, especialmente para El material provisto es listo para usar.
el diagnóstico de mujeres que no hayan sido controladas
durante el embarazo. MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
Por otra parte, estas pruebas rápidas constituyen una - Micropipeta automática para medir los volúmenes indicados.
herramienta diagnóstica que puede desempeñar un papel - Dispositivo de 20 uL descartable para toma de sangre
importante en campañas de prevención y diagnóstico en entera capilar (sólo provista en algunas presentaciones).
entornos clínicos y no clínicos, facilitando de esta manera, - Tips descartables.
la detección precoz de la infección. - Reloj alarma o cronómetro.
WL Check HIV 1+2 es una prueba rápida que detecta con- - Material para extracción de muestra.
juntamente la presencia de anticuerpos anti-HIV-1, anti-HIV-1 - Guantes descartables, guardapolvo, protección ocular.
grupo O y anti-HIV-2. - Contenedor para el descarte de residuos biológicos.
- Hipoclorito de sodio.
WL Check HIV 1+2 es un ensayo inmunocromatográfico PRECAUCIONES
"in vitro", de lectura visual, para la detección cualitativa de - Leer el manual de instrucciones de manera completa
anticuerpos contra los virus HIV-1 y HIV-2 en suero, plasma antes de realizar el ensayo y seguir las instrucciones
y sangre entera. La prueba consta de un cassette plástico cuidadosamente.
que contiene: - No realizar la prueba si el envase está dañado.
- una membrana de nitrocelulosa sensibilizada con antíge- - No utilizar los reactivos después de la fecha de vencimiento
nos recombinantes para HIV-1 (gp41) y HIV-2 (gp36) en indicada en el envase.
la zona de prueba “T”. - Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
- un parche impregnado con antígenos recombinantes - Esta prueba proporciona un resultado cualitativo y visual.
específicos para HIV-1 (gp41) y HIV-2 (gp36) conjugados Es necesaria una buena fuente de luz para la lectura de
a oro coloidal. los resultados.
La muestra y el buffer se agregan en el pocillo de muestra - No mezclar reactivos de diferentes lotes.
“S” solubilizando y mezclándose con el conjugado de antí- - No utilizar reactivos de otro origen.
genos recombinantes. Seguidamente, esta mezcla migra - No tocar la membrana de nitrocelulosa con los dedos.
por capilaridad a través de la membrana de nitrocelulosa. - Seguir las prácticas de seguridad biológica al utilizar
Si la muestra es reactiva, los anticuerpos anti HIV-1 y HIV-2 muestras y reactivos:
864103000 / 00 p. 1/12
 Manipular todas las muestras de pacientes como poten- erróneos. En caso de usar muestras congeladas, éstas
cialmente infecciosas. deben ser homogeneizadas y centrifugadas antes de usar.
 Utilizar guantes, guardapolvo y protección ocular. - Sangre (punción venosa): puede almacenarse hasta 3 días
 No pipetear con la boca. a 2-10oC. No congelar.
 No comer, beber, fumar, utilizar maquillaje ni manejar - Sangre (punción capilar): utilizar inmediatamente. No
lentes de contacto en los lugares donde se trabaje con congelar.
estos materiales. c) Sustancias Interferentes: en sueros y plasmas enrique-
 Limpiar y desinfectar las salpicaduras de muestra o reac- cidos, no se ha observado interferencia por:
tivos usando hipoclorito sódico (concentración final 5%)  Hemólisis: hasta 1,1 g/dL de hemoglobina.
u otro desinfectante adecuado. Para inactivar el material  Lipemia: hasta un equivalente de triglicéridos de 1500 mg/dL,
empleado autoclavar durante 1 hora a 121oC. tras enriquecer con Intralipid®.
- Evitar la formación de burbujas en el pocillo de muestra “S”  Bilirrubina: hasta 30 mg/dL.
tanto al colocar la muestra como el Reactivo B. Al dispensar  Ácido ascórbico: hasta 50 mg/dL.
el Reactivo B descartar cualquier gota con burbuja. d) Transporte: si las muestras deben ser transportadas,
- Durante la realización de la prueba, colocar el cassette embalar de acuerdo a las especificaciones legales relativas
sobre una superficie limpia, plana y sin vibraciones. al envío de material infeccioso.
- No agitar el cassette durante la realización del ensayo.
- El cassette y el dispositivo son descartables, no reutilizar.
Desechar en recipientes destinados a residuos con riesgo PROCEDIMIENTO
biológico. 1- Los reactivos y las muestras deben estar a temperatura
- El Reactivo B posee azida sódica en bajas concentraciones ambiente (18-30oC) antes de utilizar.
como conservante. 2- Extraer el cassette de su sobre sellado inmediatamente
- Los reactivos y las muestras deben ser descartados de antes de utilizar.
acuerdo a la normativa vigente. 3- Colocar el cassette sobre una superficie limpia, plana
y sin vibraciones.
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE 4- Agregar la muestra sobre la superficie absorbente del
ALMACENAMIENTO pocillo de muestra “S”.
El kit es estable a 2-30oC hasta la fecha de vencimiento PARA SUERO O PLASMA
indicada en la caja. No congelar. En caso de almacenar - Colocar 10 uL con micropipeta automática.
refrigerado, asegurarse que el sobre alcance temperatura - Esperar 10 a 15 segundos hasta que se absorba la
ambiente antes de ser utilizado, de lo contrario se favorecerá muestra.
la humectación del contenido. - Agregar 3 gotas (100 uL) de Reactivo B en el pocillo
El cassette debe permanecer en su sobre original sellado. de muestra “S”.
No abrir el envoltorio hasta el momento de usar. - Iniciar el cronómetro.
PARA SANGRE ENTERA
MUESTRA - Colocar 20 uL con micropipeta automática.*
Suero, plasma y sangre entera obtenida por punción venosa - Esperar 10 a 15 segundos hasta que se absorba la
o punción capilar muestra.
a) Recolección: recoger las muestras asépticamente y de - Agregar 3 gotas (100 uL) de Reactivo B en el pocillo
manera tal de evitar hemólisis. de muestra “S”.
- Suero: obtenido de sangre entera sin anticoagulantes. - Iniciar el cronómetro.
Separar el suero del coágulo inmediatamente para evitar Nota: *en caso de utilizar sangre entera capilar usar el
hemólisis. Puede utilizarse suero obtenido en tubos con dispositivo de 20 uL descartable (sólo provisto en algunas
acelerador y gel separador. presentaciones).
- Plasma: utilizar plasma recogido con EDTA, citrato o 5- En cualquiera de los casos, leer los resultados entre los
heparina. 20 y 30 minutos. No leer pasado los 30 minutos ya que
- Sangre entera (punción venosa): utilizar sangre recogida pueden obtenerse resultados erróneos. Algunas muestras
con EDTA, citrato o heparina. positivas reaccionan inmediatamente mientras que otras
- Sangre entera (punción capilar): utilizar sangre recogida lo hacen más lentamente dentro del tiempo de lectura
con el dispositivo descartable (sólo provisto en algunas pre- indicado. Debido a características particulares de algu-
sentaciones). Realizar la prueba inmediatamente. En caso nas muestras, el color de fondo de la membrana puede
de utilizar otro dispositivo, es responsabilidad del usuario quedar ligeramente rosado sin afectar la interpretación
validar el dispositivo de toma de sangre entera capilar. de los resultados.
b) Estabilidad y almacenamiento:
- Suero y plasma: conservar a 2-10oC. En caso de no realizar
la prueba dentro de los 5 días conservar la muestra a -20oC. CRITERIOS DE VALIDACION DE LA PRUEBA
No es recomendable realizar múltiples ciclos de congela- - El cassette cuenta con una línea de color celeste en la zona
miento y descongelamiento. Esto puede generar resultados de control “C” que permite identificar la determinación WL
864103000 / 00 p. 2/12
Check HIV 1+2 e indica que los componentes de la prueba Resultado Positivo (2 líneas): se observan 2 líneas de color
están presentes y activos. rosa-rojo púrpura, una en la zona de prueba “T” y otra en
- Al realizar el ensayo la línea de color celeste debe cambiar la zona de control “C”. La intensidad de color de la línea “T”
a color rosa-rojo púrpura. Este cambio de color confirma dependerá de la muestra en estudio. Cualquier color rosado
que se ha agregado el volumen adecuado de muestra, visible, aunque sea muy tenue debe ser interpretado como
que su migración fue apropiada y que la realización del positivo. El resultado es positivo aunque las intensidades del
procedimiento fue correcta. color de las líneas “T” y “C” sean diferentes.
- Es responsabilidad del usuario efectuar el Control de Cali-
Resultado Negativo (1 línea): se observa solamente una
dad del equipo de acuerdo a las normas locales vigentes.
línea de color rojo-rosa púrpura en la zona de control “C”. No
INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS aparece línea de color en la zona de prueba “T”.
POSITIVO NEGATIVO INVALIDO rojo púrpura en la zona de control “C” invalida el resultado,
en la zona de prueba “T”. Un resultado inválido general-
mente indica un error en la realización del procedimiento o
C C C C C
T T T T T un problema con la muestra. Con determinadas muestras
S S S S S caso, revisar el procedimiento, centrifugar nuevamente la
Algoritmo de interpretación
Muestra original
Resultado Positivo por Resultado Negativo por
WL Check HIV 1+2 WL Check HIV 1+2
Uno o ambos duplicados Positivos Ambos duplicados Negativos
por WL Check HIV 1+2 por WL Check HIV 1+2
POSITIVO NEGATIVO
Realizar otra prueba NEGATIVO
(ej.: ELISA) y confirmar
por Western Blot
Nota: tener en cuenta las normativas específicas de cada país para el diagnóstico de infección por HIV
LIMITACIONES DEL METODO muestras deben ser repetidas utilizando otro método (como
- WL Check HIV 1+2 es una prueba complementaria en ELISA) y confirmadas por Western Blot. El diagnóstico
el diagnóstico del HIV. Cualquier resultado obtenido con puede ser establecido solamente luego de interpretar los
esta prueba debe ser cotejado con los datos clínicos del resultados junto con los datos clínicos del paciente.
paciente antes de realizar el diagnóstico definitivo. - Para un resultado positivo, la intensidad de color de la línea
- Un resultado negativo no excluye la posibilidad de infección “T” no necesariamente se correlaciona con la concentra-
por HIV. Se puede obtener un resultado falso negativo en ción de anticuerpos anti-HIV específicos en la muestra.
las siguientes circunstancias: - Pueden obtenerse resultados falsos positivos en las si-
. Niveles bajos de anticuerpos anti-HIV en estadios tem- guientes situaciones: enfermedades autoinmunes, tubercu-
pranos de la infección. losis, lupus eritematoso sistémico, embarazo, vacunación
. Infección con una variante del virus que no se detecta contra hepatitis B y otras inmunizaciones, hemodiálisis,
con esta prueba. enfermedad hepática y otras enfermedades.
Por estas razones se debe tener cuidado al interpretar un - WL Check HIV 1+2 ha sido diseñado para la detección
resultado negativo, especialmente en pacientes con pre- de anticuerpos contra HIV-1 y HIV-2 en suero, plasma y
sencia de síntomas clínicos y factores de riesgo. En este sangre entera humana. No utilizar otros fluidos biológicos
caso se recomienda analizar una nueva muestra obtenida como saliva, líquido cefalorraquídeo u orina.
con posterioridad. - Pueden obtenerse resultados erróneos con muestras de
- Muestras positivas por WL Check HIV 1+2 indican la suero o plasma con aspecto turbio debido a contaminación
presencia de anticuerpos anti-HIV-1 y anti-HIV-2. Estas bacteriana o por haber sido sometidas a varios ciclos de
864103000 / 00 p. 3/12
congelación y descongelación. PRB 919-S 0, 9, 11 9 9
0, 2, 8, 10, 26, 33,
proporcionar resultados incorrectos. PRB 924-X
35, 40
33 35 (Indet)
- No utilizar pooles de muestras o muestras diluidas.
PRB 925-Y 0, 10, 18, 22, 44, 49 44 44 (Indet)
0, 4, 14, 18, 21, 25,
PRB 929-AD 25 25 (Indet)
PERFORMANCE 28
a) Sensibilidad PRB 930-AE 0, 3, 7, 10 7 10 (Indet)
Sensibilidad Clínica en Paneles de Performance PRB 944-AT 0, 2, 7, 9, 14, 16 14 14 (Indet)
PRB 947-AW 0, 9, 11, 20 9 9 (Indet)
- PRB 108 (Anti-HIV 1 Low Titer Performance Panel, Sera PRB 949-AY 0, 6, 9, 18, 20 20 20 (Indet)
Care Life Sciences, USA - BBI Diagnostics): se detectaron PRB 951-BA 0, 2, 8, 11, 15, 19 19
Negativo hasta
13 de las 14 muestras reactivas. 19 días
- PRB 109 (Anti-HIV 1 Low Titer Performance Panel, Sera PRB 952-BB 0, 7, 10, 14, 17, 21 17 14 (Indet)
Care Life Sciences, USA - BBI Diagnostics): se detectaron Negativo hasta
15 de las 19 muestras reactivas. PRB 953-BC 0, 3, 7, 10 10
10 días
- PRB 204 (Anti-HIV 1 Mixed Titer Performance Panel, Sera 0, 2, 20, 22, 30, 35, Negativo hasta
Care Life Sciences, USA - BBI Diagnostics): se detectaron PRB 966 48
37, 44, 48, 51 51 días
23 de las 23 muestras reactivas.
- WWRB303 (Worldwide HIV Performance Panel, Sera Care Indet: indeterminadas
Life Sciences, USA - BBI Diagnostics): se detectaron 13 de Sensibilidad Clínica en Paneles de muestras reactivas
las 14 muestras reactivas para HIV-1 grupo M (subtipos A, En un estudio de 68 muestras reactivas, incluídas 4 muestras
B, C, D, F y G), HIV-1 grupo O y HIV-2. HIV-1 grupo O, provenientes de una institución hospitalaria,
- WWRB350 (Worldwide HIV Performance Panel, Sera Care se detectaron las 68 muestras.
Life Sciences, USA - BBI Diagnostics): se detectaron 18 de En otro estudio se suplementaron 30 sangres enteras con
las 18 muestras reactivas para HIV-1 grupo M (subtipos A, 30 sueros positivos para HIV y se evaluaron en paralelo las
CRF02_AG, B, C, D, CRF01_AE, F, G y H). sangres enteras suplementadas y los respectivos sueros.
- PRB 601 (HIV-1 Incidence/Prevalence Panel, Sera Care Se detectaron la totalidad de las muestras (sangres enteras
Life Sciences, USA - BBI Diagnostics): se detectaron 15 y sueros).
de las 15 muestras reactivas para HIV-1 correspondientes En otro estudio se evaluaron, en paralelo, 15 muestras
a infecciones recientes y de larga duración. reactivas de suero y plasma obtenidas del mismo paciente y
- PRZ 204 (Anti-HIV-1/2 Combo Performance Panel, Sera para 10 de estas muestras también se evaluó sangre entera
Care Life Sciences, USA - BBI Diagnostics): se detectaron obtenida por punción capilar. Con todos los tipos de muestras
14 de las 14 muestras reactivas para HIV-1 y HIV-2. se tuvieron resultados positivos.
- PRZ 205 (Anti-HIV-1/2 Combo Performance Panel, Sera
Care Life Sciences, USA - BBI Diagnostics): se detectaron b) Especificidad
14 de las 14 muestras reactivas para HIV-1 y HIV-2. En un estudio realizado sobre 1122 muestras de sueros,
- PRZ 207 (Anti-HIV-1/2 Combo Performance Panel, Sera plasmas y sangres enteras provenientes de tres centros de
Care Life Sciences, USA - BBI Diagnostics): se detectaron salud diferentes, se encontró una especificidad de 99,91%
14 de las 14 muestras reactivas para HIV-1 y HIV-2. con un IC95% = 99,49% - 99,98%.
- PP 0508 (Panel de Performance para HIV, Q Panel, Brasil): En otro estudio realizado sobre 417 muestras de banco de
se detectaron 16 de las 16 muestras reactivas. sangre, la especificidad obtenida fue de 99,76% con un
- PP 0409 (Panel de Performance para HIV, Q Panel, Brasil): IC95% = 98,65% - 99,96%. Para 100 muestras de las 417 se
se detectaron 16 de las 16 muestras reactivas. evaluaron, en forma paralela, muestras de suero y plasma
del mismo paciente y para 40 de estas 100 muestras también
Sensibilidad Clínica en Paneles de Seroconversión se evaluó sangre entera obtenida por punción capilar. Con
En un estudio realizado sobre diferentes paneles comerciales todos los tipos de muestras se tuvieron resultados negativos.
internacionales de seroconversión (Sera Care Life Scien- En otro estudio de 393 muestras de sueros y plasmas de tres
ces, USA - BBI Diagnostics), se obtuvieron los siguientes centros de salud diferentes, se encontró una especificidad
resultados: de 99,24% con un IC95% = 97,78% - 99,74%.
Tiempo (días) en el cual También se estudió la posible aparición de reactividades cru-
Nombre Dias desde el la muestra es reactiva zadas ensayando muestras provenientes de 440 individuos
del panel primer sangrado WL Check Western Blot con diferentes condiciones clínicas que pueden ser causan-
HIV 1+2 (datos Sera Care) tes de reacciones inespecíficas para el ensayo WL Check
PRB 904-D 0, 21, 49, 92, 99 92 92 HIV 1+2. Estas condiciones incluyen mujeres embarazadas,
pacientes hemodializados, pacientes con enfermedades
PRB 912-L 0, 9, 14, 16, 28, 30 0 9
autoinmunes o enfermedades infecciosas diferentes a HIV
PRB 916-P 0, 4, 9, 15, 30, 35 30 30 (Chagas, HTLV, Hepatitis C, Hepatitis B, Sífilis, otras). Para
864103000 / 00 p. 4/12
esta población la especificidad fue de 98,18% con un IC95% de reactividad y con 1 muestra negativa. Se realizaron 2
= 96,45% - 99,08%. ensayos diarios evaluando cada muestra por duplicado
por el transcurso de 20 días. Los resultados fueron leídos
c) Precisión a los 20 minutos en un lector inmunocromatográfico y en
Se evaluó la precisión del test siguiendo el protocolo EP5-A forma visual. Las muestras positivas siempre dieron un
recomendado por el CLSI (ex NCCLS). Los ensayos fueron resultado reactivo y la muestra negativa siempre dio un
realizados con 4 muestras positivas con diferentes niveles resultado no reactivo.
Línea T Línea C
Muestra positiva 4
0,049 0,017 35,79% 0,017 35,36% 0,679 0,075 11,11% 0,085 12,59%
(en dilución)
N = 80; (-) = no reactivo por lectura visual; NC = no corresponde
PRESENTACION www.cdc.gov/mmwr/preview/mmwrhtml/mm5215a1.htm)
- 25 determinaciones (Cód. 1690019) - Centers for Disease Control and Prevention: Notice to
- 25 determinaciones c/disp. descartables (Cód. 1690020) Readers: Protocols for Confirmation of Reactive Rapid
HIV Tests. MMWR 2004, 53:221-222 (http://www.cdc.gov/
BIBLIOGRAFIA mmwr/preview/mmwrhtml/mm5310a7.htm)
- Centro Nacional de referencia para el SIDA (http://www. - Evaluation of Precision Performance of Clinical Chemistry
cnrsida.org.ar) Devices; Approved Guideline. EP5-A, Vol. 19, Nº 2, NCCLS.
- Centers for Disease Control and Prevention: Rapid HIV Tes- - User Protocol for Evaluation of Qualitative Test Performan-
ting (http://www.cdc.gov/hiv/topics/testing/rapid/index.htm) ce; Approved Guideline. EP12-A, Vol. 22, Nº 14, NCCLS.
- Greenwald JL, Burstein GR, Pincus J, Branson B. - A rapid - Procedures and Devices for the Collection of Diagnostic
review of rapid HIV antibody tests. - Curr. Infect. Dis. Rep. Capillary Blood Specimens; Approved Standard, 5ª Edición.
8/2:125 (2006). H4-A5, Vol. 24, Nº 21, CLSI (ex NCCLS).
- Centers for Disease Control and Prevention: Advancing - Evaluation of Stability of In Vitro Diagnostic Reagents.
HIV Prevention: New Strategies for a Changing Epidemic, Approved Guideline. EP-25A, Vol. 29, Nº 20, CLSI (ex
United States, 2003. MMWR 2003, 52:329–332. (http:// NCCLS).
864103000 / 00 p. 5/12
Disp. Desc.
Dispositivos descartables



 No congelar
F Riesgo biológico
Cont. Contenido
g Número de lote
M Elaborado por:
Nocivo
Xn
Xi
Irritante
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
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WL 19 Con
C Para control de calidad en analizadores hematológicos
AA
APLICACIONES
WL 19 Con AA está diseñado para ser utilizado en el control PROCEDIMIENTO
de calidad de los parámetros hematológicos determinados 1- Verificar que el analizador esté correctamente preparado,
en los analizadores automáticos. según lo indicado en el manual de instrucciones del mismo.
Consultar la tabla de valores asignados, debido a que los 2- Retirar el vial del refrigerador dejando que tome tempe-
mismos son lote específico. ratura ambiente (15-30oC) 15 minutos antes de mezclar.
No emplear agitador mecánico.
REACTIVOS PROVISTOS 3- Girar el vial entre las palmas de las manos en posición
Control: suspensión conteniendo tres niveles diferentes de horizontal e invertida durante 20 a 30 segundos. Ocasio-
eritrocitos humanos, componentes plaquetarios artificiales y nalmente invertir el vial. Mezclar sin agitar.
leucocitos artificiales con conservantes apropiados. 4- Repetir el paso 3 hasta obtener una suspensión com-
pleta. Los viales almacenados por tiempos prolongados,
INSTRUCCIONES PARA SU USO requieren un mezclado más extenso.
Control: listo para usar. 5- Invertir suavemente el vial 8-10 veces.
Antes de realizar el ensayo, invertir suavemente el frasco 6- Asegurarse de que el contenido del vial esté completa-
varias veces asegurándose que el contenido esté comple- mente en suspensión. En caso de no ser así, repetir los
tamente en suspensión. No agitar. pasos de 3 a 5 hasta lograr suspensión total.
7- Aspirar la muestra y limpiar el material residual de
PRECAUCIONES las ranuras de la rosca del vial y del interior de la tapa.
El reactivo es para uso diagnóstico "in vitro". 8- Después de usarlo, tapar inmediatamente. No man-
El Control ha sido preparado a partir de material no reac- tener a temperatura ambiente por más de 30 minutos.
tivo para antígeno de superficie de Hepatitis B (HBsAg), Conservar refrigerado (2-10oC).
anticuerpos contra virus de la Hepatitis C (HCV) y de la
Inmunodeficiencia Humana (HIV). Sin embargo, el Control
y todas las muestras deben manipularse como si se tratara VALORES ESPERADOS
de material infectivo. Verificar que el nº de lote en la caja, concuerde con el nº de
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales lote en el manual de instrucciones. Los valores son asignados
de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos. en instrumentos apropiadamente mantenidos y calibrados,
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de utilizando los reactivos recomendados por el fabricante.
acuerdo a la normativa local vigente. Cada laboratorio debe establecer sus propios valores y
rangos aceptables y verificar periódicamente el valor medio.
ALMACENAMIENTO LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
El Control es estable en refrigerador (2-10oC) hasta la fecha No puede realizarse un análisis diferencial manual de leu-
de vencimiento indicada en la caja. No congelar. cocitos con este producto.
Una vez abierto, es estable 14 días en refrigerador (2-10oC). La mezcla incompleta del vial, previa al uso, invalida el
Mantener el frasco bien cerrado y refrigerado después de su resultado de la muestra y el material remanente del vial.
uso. Evitar contaminaciones. No utilizar después de la fecha de vencimiento.
Pueden contribuir a la variación intra-laboratorial: diferencias
INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS de reactivos, mantenimiento del instrumento, técnica de
REACTIVOS funcionamiento y calibración.
En los viales de Control no homogeneizados el sobrenadante
es rojizo, levemente turbio. Una vez homogeneizado, el color PRESENTACION
normal es rojo a rojo oscuro. Cualquier variación en los ca- Control 3 niveles:
racteres organolépticos (como sobrenadante rojo oscuro) o - 3 x 3 ml (Cód. 1474518)
la obtención de resultados inaceptables, pueden ser indicio Control Nivel 2:
de deterioro del mismo. En tal caso, desechar. - 1 x 3 ml (Cód. 1474519)
867022600 / 28B085 p. 1/6

VALORES ASIGNADOS
WL 19 Con AA 3 niveles
WIENER LAB COUNTER 19 WIENER LAB COUNTER 19 CP
PARAMETRO
NIVEL 1 NIVEL 2 NIVEL 3 NIVEL 1 NIVEL 2 NIVEL 3
WBC (x 109/L) 2.1 ± 0.5 7.9 ± 1.0 20.6 ± 2.5 2.0 ± 0.5 8.1 ± 1.0 21.3 ± 2.5
LYMPH # (x 109/L) 1.2 ± 0.3 2.2 ± 0.7 2.5 ± 1.3 1.2 ± 0.3 2.2 ± 0.7 2.7 ± 1.4
MID # (x 109/L) 0.2 ± 0.2 0.6 ± 0.6 1.3 ± 1.1 0.2 ± 0.2 0.6 ± 0.6 1.3 ± 1.1
GRAN # (x 109/L) 0.7 ± 0.3 5.1 ± 0.7 16.8 ± 1.7 0.6 ± 0.3 5.2 ± 0.7 17.4 ± 1.8
LYMPH % (%) 56.0 ± 12.0 28.0 ± 8.0 12.3 ± 6.0 58.0 ± 12.0 27.5 ± 8.0 12.5 ± 6.0
MID % (%) 11.7 ± 8.0 8.0 ± 7.0 6.3 ± 5.0 11.0 ± 9.0 8.0 ± 7.0 6.0 ± 5.0
GRAN % (%) 32.3 ± 9.0 64.0 ± 8.0 81.4 ± 8.0 31.0 ± 10.0 64.5 ± 8.0 81.5 ± 8.0
HGB (g/dL) 6.2 ± 0.6 13.8 ± 0.9 18.9 ± 1.3 6.2 ± 0.6 13.7 ± 0.9 19.1 ± 1.3
RBC (x 1012/L) 2.54 ± 0.18 4.74 ± 0.24 5.88 ± 0.30 2.47 ± 0.18 4.72 ± 0.24 5.85 ± 0.30
HCT (%) 19.1 ± 1.5 41.2 ± 2.0 56.2 ± 2.4 18.6 ± 1.5 40.8 ± 2.0 56.2 ± 2.4
MCV (fL) 75.0 ± 5.0 87.0 ± 5.0 95.5 ± 5.0 75.5 ± 5.0 86.5 ± 5.0 96.0 ± 5.0
MCH (pg) 24.4 ± 2.7 29.1 ± 2.5 32.1 ± 2.5 25.1 ± 2.7 29.0 ± 2.5 32.6 ± 2.5
MCHC (g/dL) 32.5 ± 3.0 33.5 ± 3.0 33.7 ± 3.0 33.2 ± 3.0 33.6 ± 3.0 34.0 ± 3.0
RDW-CV (%) 16.0 ± 3.0 15.2 ± 3.0 14.0 ± 3.0 14.0 ± 3.0 13.5 ± 3.0 12.5 ± 3.0
RDW-SD (fL) 35.7 ± 6.0 38.5 ± 6.0 40.0 ± 8.0 36.4 ± 6.0 40.0 ± 6.0 40.0 ± 8.0
PLT (x 109/L) 68 ± 20 252 ± 40 510 ± 60 64 ± 20 252 ± 40 505 ± 60
MPV (fL) 8.5 ± 3.0 8.0 ± 3.0 7.8 ± 3.0 8.3 ± 3.0 8.2 ± 3.0 8.1 ± 3.0
WL 19 Con AA nivel 2
NIVEL 2 PARAMETROS
GRAN: Granulocitos
PARAMETRO WIENER LAB WIENER LAB HCT: Hematocrito
COUNTER 19 COUNTER 19 CP HGB: Hemoglobina
WBC (x 109/L) 7.9 ± 1.0 8.1 ± 1.0 LYMPH: Linfocitos
LYMPH # (x 109/L) 2.2 ± 0.7 2.2 ± 0.7 MCH: Hemoglobina corpuscular media
MCHC: Concentración de hemoglobina corpuscular media
MID # (x 109/L) 0.6 ± 0.6 0.6 ± 0.6
MCV: Volumen corpuscular medio
GRAN # (x 109/L) 5.1 ± 0.7 5.2 ± 0.7 MID: Células de tamaño medio
LYMPH % (%) 28.0 ± 8.0 27.5 ± 8.0 MPV: Volumen plaquetario medio
MID % (%) 8.0 ± 7.0 8.0 ± 7.0 PLT: Plaquetas
GRAN % (%) 64.0 ± 8.0 64.5 ± 8.0 RBC: Glóbulos rojos
RDW: Amplitud de distribución eritrocitaria
HGB (g/dL) 13.8 ± 0.9 13.7 ± 0.9
WBC: Leucocitos
RBC (x 1012/L) 4.74 ± 0.24 4.72 ± 0.24
HCT (%) 41.2 ± 2.0 40.8 ± 2.0
MCV (fL) 87.0 ± 5.0 86.5 ± 5.0
MCH (pg) 29.1 ± 2.5 29.0 ± 2.5
MCHC (g/dL) 33.5 ± 3.0 33.6 ± 3.0
RDW-CV (%) 15.2 ± 3.0 13.5 ± 3.0
RDW-SD (fL) 38.5 ± 6.0 40.0 ± 6.0
PLT (x 109/L) 252 ± 40 252 ± 40
MPV (fL) 8.0 ± 3.0 8.2 ± 3.0
867022600 / 28B085 p. 2/6

Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
867022600 / 28B085 p. 3/6 UR150720
WL 19 Con
AA
APLICACIONES
867022600 / 29B115 p. 1/6

VALORES ASIGNADOS
PARAMETRO
WBC (x 109/L) 2.1 ± 0.5 8.3 ± 1.0 21.1 ± 2.5 2.1 ± 0.5 8.4 ± 1.0 21.4 ± 2.5
LYMPH # (x 109/L) 1.2 ± 0.3 2.2 ± 0.7 2.7 ± 1.3 1.2 ± 0.3 2.4 ± 0.7 2.8 ± 1.3
MID # (x 109/L) 0.2 ± 0.2 0.7 ± 0.6 1.4 ± 1.1 0.2 ± 0.2 0.7 ± 0.7 1.3 ± 1.1
GRAN # (x 109/L) 0.7 ± 0.3 5.4 ± 0.7 17.0 ± 1.7 0.7 ± 0.3 5.4 ± 0.7 17.3 ± 1.8
LYMPH % (%) 56.0 ± 12.0 27.0 ± 8.0 13.0 ± 6.0 55.5 ± 12.0 28.0 ± 8.0 13.0 ± 6.0
MID % (%) 11.0 ± 8.0 8.5 ± 7.0 6.5 ± 5.0 11.0 ± 9.0 8.0 ± 7.0 6.0 ± 5.0
GRAN % (%) 33.0 ± 9.0 64.5 ± 8.0 80.5 ± 8.0 33.5 ± 10.0 64.0 ± 8.0 81.0 ± 8.0
HGB (g/dL) 5.9 ± 0.6 13.6 ± 0.9 19.1 ± 1.3 5.9 ± 0.6 13.7 ± 0.9 19.2 ± 1.3
RBC (x 1012/L) 2.45 ± 0.18 4.66 ± 0.24 5.92 ± 0.30 2.42 ± 0.18 4.63 ± 0.24 5.85 ± 0.30
HCT (%) 18.4 ± 1.5 41.0 ± 2.0 56.5 ± 2.4 17.9 ± 1.5 41.0 ± 2.0 56.5 ± 2.4
MCV (fL) 75.0 ± 5.0 88.0 ± 5.0 95.5 ± 5.0 74.0 ± 5.0 88.5 ± 5.0 96.5 ± 5.0
MCH (pg) 24.1 ± 2.7 29.2 ± 2.5 32.3 ± 2.5 24.4 ± 2.7 29.6 ± 2.5 32.8 ± 2.5
MCHC (g/dL) 32.1 ± 3.0 33.2 ± 3.0 33.8 ± 3.0 32.9 ± 3.0 33.4 ± 3.0 34.0 ± 3.0
RDW-CV (%) 16.0 ± 3.0 15.5 ± 3.0 15.0 ± 3.0 14.5 ± 3.0 13.5 ± 3.0 13.0 ± 3.0
RDW-SD (fL) 35.5 ± 6.0 39.0 ± 6.0 41.0 ± 8.0 36.5 ± 6.0 39.5 ± 6.0 41.0 ± 8.0
PLT (x 109/L) 70 ± 20 252 ± 40 535 ± 60 67 ± 20 250 ± 40 527 ± 60
MPV (fL) 8.8 ± 3.0 8.2 ± 3.0 7.7 ± 3.0 8.4 ± 3.0 8.2 ± 3.0 8.0 ± 3.0
NIVEL 2 PARAMETROS
GRAN: Granulocitos
MID # (x 109/L) 0.7 ± 0.6 0.7 ± 0.7
HGB (g/dL) 13.6 ± 0.9 13.7 ± 0.9
WBC: Leucocitos
RBC (x 1012/L) 4.66 ± 0.24 4.63 ± 0.24
HCT (%) 41.0 ± 2.0 41.0 ± 2.0
MCV (fL) 88.0 ± 5.0 88.5 ± 5.0
MCH (pg) 29.2 ± 2.5 29.6 ± 2.5
MCHC (g/dL) 33.2 ± 3.0 33.4 ± 3.0
RDW-CV (%) 15.5 ± 3.0 13.5 ± 3.0
RDW-SD (fL) 39.0 ± 6.0 39.5 ± 6.0
PLT (x 109/L) 252 ± 40 250 ± 40
MPV (fL) 8.2 ± 3.0 8.2 ± 3.0
867022600 / 29B115 p. 2/6

Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
867022600 / 29B115 p. 3/6 UR151026
WL 19 Con
AA
APLICACIONES
867022600 / 30B0216 p. 1/6

VALORES ASIGNADOS
PARAMETRO
WBC (x 109/L) 2.0 ± 0.5 7.7 ± 1.0 20.6 ± 2.5 2.0 ± 0.5 7.9 ± 1.0 20.9 ± 2.5
LYMPH # (x 109/L) 1.1 ± 0.3 2.2 ± 0.7 2.7 ± 1.3 1.1 ± 0.3 2.3 ± 0.7 2.7 ± 1.3
MID # (x 109/L) 0.3 ± 0.2 0.7 ± 0.6 1.2 ± 1.0 0.3 ± 0.2 0.6 ± 0.6 1.1 ± 1.0
GRAN # (x 109/L) 0.6 ± 0.2 4.8 ± 0.7 16.7 ± 1.7 0.7 ± 0.3 4.9 ± 0.7 17.0 ± 1.7
LYMPH % (%) 53.0 ± 12.0 29.0 ± 8.0 13.0 ± 6.0 53.0 ± 12.0 29.5 ± 8.0 13.0 ± 6.0
MID % (%) 15.0 ± 8.0 9.0 ± 7.0 6.0 ± 5.0 14.0 ± 9.0 8.0 ± 7.0 5.5 ± 5.0
GRAN % (%) 32.0 ± 9.0 62.0 ± 8.0 81.0 ± 8.0 33.0 ± 10.0 62.5 ± 8.0 81.5 ± 8.0
HGB (g/dL) 6.1 ± 0.6 13.8 ± 0.9 18.7 ± 1.3 6.1 ± 0.6 13.8 ± 0.9 18.8 ± 1.3
RBC (x 1012/L) 2.56 ± 0.18 4.65 ± 0.24 5.74 ± 0.30 2.52 ± 0.18 4.62 ± 0.24 5.73 ± 0.30
HCT (%) 18.8 ± 1.5 41.2 ± 2.0 54.8 ± 2.4 18.6 ± 1.5 40.9 ± 2.0 55.0 ± 2.4
MCV (fL) 73.5 ± 5.0 88.5 ± 5.0 95.5 ± 5.0 74.0 ± 5.0 88.5 ± 5.0 96.0 ± 5.0
MCH (pg) 23.8 ± 2.7 29.7 ± 2.5 32.6 ± 2.5 24.2 ± 2.7 29.9 ± 2.5 32.8 ± 2.5
MCHC (g/dL) 32.4 ± 3.0 33.5 ± 3.0 34.1 ± 3.0 32.7 ± 3.0 33.8 ± 3.0 34.2 ± 3.0
RDW-CV (%) 16.5 ± 3.0 15.5 ± 3.0 15.0 ± 3.0 14.5 ± 3.0 13.5 ± 3.0 13.0 ± 3.0
RDW-SD (fL) 35.0 ± 6.0 39.5 ± 6.0 40.0 ± 8.0 35.0 ± 6.0 40.0 ± 6.0 41.0 ± 8.0
PLT (x 109/L) 76 ± 20 246 ± 40 495 ± 60 70 ± 20 242 ± 40 485 ± 60
MPV (fL) 8.2 ± 3.0 8.2 ± 3.0 8.0 ± 3.0 7.9 ± 3.0 8.2 ± 3.0 7.9 ± 3.0
NIVEL 2 PARAMETROS
GRAN: Granulocitos
MID # (x 109/L) 0.7 ± 0.6 0.6 ± 0.6
HGB (g/dL) 13.8 ± 0.9 13.8 ± 0.9
WBC: Leucocitos
RBC (x 1012/L) 4.65 ± 0.24 4.62 ± 0.24
HCT (%) 41.2 ± 2.0 40.9 ± 2.0
MCV (fL) 88.5 ± 5.0 88.5 ± 5.0
MCH (pg) 29.7 ± 2.5 29.9 ± 2.5
MCHC (g/dL) 33.5 ± 3.0 33.8 ± 3.0
RDW-CV (%) 15.5 ± 3.0 13.5 ± 3.0
RDW-SD (fL) 39.5 ± 6.0 40.0 ± 6.0
PLT (x 109/L) 246 ± 40 242 ± 40
MPV (fL) 8.2 ± 3.0 8.2 ± 3.0
867022600 / 30B0216 p. 2/6

Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
867022600 / 30B0216 p. 3/6 UR160118
WL 19 Con
AA
APLICACIONES
867022600 / 31B0516 p. 1/6

VALORES ASIGNADOS
PARAMETRO
WBC (x 109/L) 1.9 ± 0.5 8.4 ± 1.0 21.2 ± 2.5 2.0 ± 0.5 8.6 ± 1.0 21.6 ± 2.5
LYMPH # (x 109/L) 1.1 ± 0.3 2.2 ± 0.7 2.8 ± 1.3 1.2 ± 0.3 2.3 ± 0.7 2.8 ± 1.3
MID # (x 109/L) 0.2 ± 0.2 0.8 ± 0.6 1.5 ± 1.1 0.2 ± 0.2 0.8 ± 0.7 1.4 ± 1.1
GRAN # (x 109/L) 0.6 ± 0.2 5.4 ± 0.7 17.0 ± 1.7 0.6 ± 0.2 5.5 ± 0.7 17.4 ± 1.8
LYMPH % (%) 57.0 ± 12.0 26.5 ± 8.0 13.0 ± 6.0 58.0 ± 12.0 27.0 ± 8.0 13.0 ± 6.0
MID % (%) 11.0 ± 9.0 9.5 ± 7.0 7.0 ± 5.0 10.0 ± 8.0 9.0 ± 7.0 6.5 ± 5.0
GRAN % (%) 32.0 ± 10.0 64.0 ± 8.0 80.0 ± 8.0 32.0 ± 10.0 64.0 ± 8.0 80.5 ± 8.0
HGB (g/dL) 6.2 ± 0.6 13.5 ± 0.9 19.1 ± 1.3 6.2 ± 0.6 13.6 ± 0.9 19.2 ± 1.3
RBC (x 1012/L) 2.46 ± 0.18 4.64 ± 0.24 5.88 ± 0.30 2.43 ± 0.18 4.63 ± 0.24 5.89 ± 0.30
HCT (%) 18.9 ± 1.5 40.6 ± 2.0 56.2 ± 2.4 18.6 ± 1.5 40.0 ± 2.0 56.2 ± 2.4
MCV (fL) 77.0 ± 5.0 87.5 ± 5.0 95.5 ± 5.0 76.5 ± 5.0 86.5 ± 5.0 95.5 ± 5.0
MCH (pg) 25.2 ± 2.7 29.1 ± 2.5 32.5 ± 2.5 25.5 ± 2.7 29.4 ± 2.5 32.6 ± 2.5
MCHC (g/dL) 32.7 ± 3.0 33.3 ± 3.0 34.0 ± 3.0 33.4 ± 3.0 34.0 ± 3.0 34.1 ± 3.0
RDW-CV (%) 16.5 ± 3.0 15.5 ± 3.0 14.0 ± 3.0 15.0 ± 3.0 14.0 ± 3.0 13.0 ± 3.0
RDW-SD (fL) 37.0 ± 6.0 39.0 ± 6.0 39.0 ± 8.0 37.0 ± 6.0 39.0 ± 6.0 40.0 ± 8.0
PLT (x 109/L) 68 ± 20 252 ± 40 510 ± 60 70 ± 20 257 ± 40 520 ± 60
MPV (fL) 8.5 ± 3.0 8.5 ± 3.0 8.2 ± 3.0 8.2 ± 3.0 8.5 ± 3.0 8.1 ± 3.0
NIVEL 2 PARAMETROS
GRAN: Granulocitos
MID # (x 109/L) 0.8 ± 0.6 0.8 ± 0.7
HGB (g/dL) 13.5 ± 0.9 13.6 ± 0.9
WBC: Leucocitos
RBC (x 1012/L) 4.64 ± 0.24 4.63 ± 0.24
HCT (%) 40.6 ± 2.0 40.0 ± 2.0
MCV (fL) 87.5 ± 5.0 86.5 ± 5.0
MCH (pg) 29.1 ± 2.5 29.4 ± 2.5
MCHC (g/dL) 33.3 ± 3.0 34.0 ± 3.0
RDW-CV (%) 15.5 ± 3.0 14.0 ± 3.0
RDW-SD (fL) 39.0 ± 6.0 39.0 ± 6.0
PLT (x 109/L) 252 ± 40 257 ± 40
MPV (fL) 8.5 ± 3.0 8.5 ± 3.0
867022600 / 31B0516 p. 2/6

Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
867022600 / 31B0516 p. 3/6 UR160328
WL 19 Con
AA
APLICACIONES
867022600 / 28B085 p. 1/6

VALORES ASIGNADOS
PARAMETRO
WBC (x 109/L) 2.1 ± 0.5 7.9 ± 1.0 20.6 ± 2.5 2.0 ± 0.5 8.1 ± 1.0 21.3 ± 2.5
LYMPH # (x 109/L) 1.2 ± 0.3 2.2 ± 0.7 2.5 ± 1.3 1.2 ± 0.3 2.2 ± 0.7 2.7 ± 1.4
MID # (x 109/L) 0.2 ± 0.2 0.6 ± 0.6 1.3 ± 1.1 0.2 ± 0.2 0.6 ± 0.6 1.3 ± 1.1
GRAN # (x 109/L) 0.7 ± 0.3 5.1 ± 0.7 16.8 ± 1.7 0.6 ± 0.3 5.2 ± 0.7 17.4 ± 1.8
LYMPH % (%) 56.0 ± 12.0 28.0 ± 8.0 12.3 ± 6.0 58.0 ± 12.0 27.5 ± 8.0 12.5 ± 6.0
MID % (%) 11.7 ± 8.0 8.0 ± 7.0 6.3 ± 5.0 11.0 ± 9.0 8.0 ± 7.0 6.0 ± 5.0
GRAN % (%) 32.3 ± 9.0 64.0 ± 8.0 81.4 ± 8.0 31.0 ± 10.0 64.5 ± 8.0 81.5 ± 8.0
HGB (g/dL) 6.2 ± 0.6 13.8 ± 0.9 18.9 ± 1.3 6.2 ± 0.6 13.7 ± 0.9 19.1 ± 1.3
RBC (x 1012/L) 2.54 ± 0.18 4.74 ± 0.24 5.88 ± 0.30 2.47 ± 0.18 4.72 ± 0.24 5.85 ± 0.30
HCT (%) 19.1 ± 1.5 41.2 ± 2.0 56.2 ± 2.4 18.6 ± 1.5 40.8 ± 2.0 56.2 ± 2.4
MCV (fL) 75.0 ± 5.0 87.0 ± 5.0 95.5 ± 5.0 75.5 ± 5.0 86.5 ± 5.0 96.0 ± 5.0
MCH (pg) 24.4 ± 2.7 29.1 ± 2.5 32.1 ± 2.5 25.1 ± 2.7 29.0 ± 2.5 32.6 ± 2.5
MCHC (g/dL) 32.5 ± 3.0 33.5 ± 3.0 33.7 ± 3.0 33.2 ± 3.0 33.6 ± 3.0 34.0 ± 3.0
RDW-CV (%) 16.0 ± 3.0 15.2 ± 3.0 14.0 ± 3.0 14.0 ± 3.0 13.5 ± 3.0 12.5 ± 3.0
RDW-SD (fL) 35.7 ± 6.0 38.5 ± 6.0 40.0 ± 8.0 36.4 ± 6.0 40.0 ± 6.0 40.0 ± 8.0
PLT (x 109/L) 68 ± 20 252 ± 40 510 ± 60 64 ± 20 252 ± 40 505 ± 60
MPV (fL) 8.5 ± 3.0 8.0 ± 3.0 7.8 ± 3.0 8.3 ± 3.0 8.2 ± 3.0 8.1 ± 3.0
NIVEL 2 PARAMETROS
GRAN: Granulocitos
MID # (x 109/L) 0.6 ± 0.6 0.6 ± 0.6
HGB (g/dL) 13.8 ± 0.9 13.7 ± 0.9
WBC: Leucocitos
RBC (x 1012/L) 4.74 ± 0.24 4.72 ± 0.24
HCT (%) 41.2 ± 2.0 40.8 ± 2.0
MCV (fL) 87.0 ± 5.0 86.5 ± 5.0
MCH (pg) 29.1 ± 2.5 29.0 ± 2.5
MCHC (g/dL) 33.5 ± 3.0 33.6 ± 3.0
RDW-CV (%) 15.2 ± 3.0 13.5 ± 3.0
RDW-SD (fL) 38.5 ± 6.0 40.0 ± 6.0
PLT (x 109/L) 252 ± 40 252 ± 40
MPV (fL) 8.0 ± 3.0 8.2 ± 3.0
867022600 / 28B085 p. 2/6

Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
867022600 / 28B085 p. 3/6 UR150720
WL 19 Con
AA
APLICACIONES
867022600 / 29B115 p. 1/6

VALORES ASIGNADOS
PARAMETRO
WBC (x 109/L) 2.1 ± 0.5 8.3 ± 1.0 21.1 ± 2.5 2.1 ± 0.5 8.4 ± 1.0 21.4 ± 2.5
LYMPH # (x 109/L) 1.2 ± 0.3 2.2 ± 0.7 2.7 ± 1.3 1.2 ± 0.3 2.4 ± 0.7 2.8 ± 1.3
MID # (x 109/L) 0.2 ± 0.2 0.7 ± 0.6 1.4 ± 1.1 0.2 ± 0.2 0.7 ± 0.7 1.3 ± 1.1
GRAN # (x 109/L) 0.7 ± 0.3 5.4 ± 0.7 17.0 ± 1.7 0.7 ± 0.3 5.4 ± 0.7 17.3 ± 1.8
LYMPH % (%) 56.0 ± 12.0 27.0 ± 8.0 13.0 ± 6.0 55.5 ± 12.0 28.0 ± 8.0 13.0 ± 6.0
MID % (%) 11.0 ± 8.0 8.5 ± 7.0 6.5 ± 5.0 11.0 ± 9.0 8.0 ± 7.0 6.0 ± 5.0
GRAN % (%) 33.0 ± 9.0 64.5 ± 8.0 80.5 ± 8.0 33.5 ± 10.0 64.0 ± 8.0 81.0 ± 8.0
HGB (g/dL) 5.9 ± 0.6 13.6 ± 0.9 19.1 ± 1.3 5.9 ± 0.6 13.7 ± 0.9 19.2 ± 1.3
RBC (x 1012/L) 2.45 ± 0.18 4.66 ± 0.24 5.92 ± 0.30 2.42 ± 0.18 4.63 ± 0.24 5.85 ± 0.30
HCT (%) 18.4 ± 1.5 41.0 ± 2.0 56.5 ± 2.4 17.9 ± 1.5 41.0 ± 2.0 56.5 ± 2.4
MCV (fL) 75.0 ± 5.0 88.0 ± 5.0 95.5 ± 5.0 74.0 ± 5.0 88.5 ± 5.0 96.5 ± 5.0
MCH (pg) 24.1 ± 2.7 29.2 ± 2.5 32.3 ± 2.5 24.4 ± 2.7 29.6 ± 2.5 32.8 ± 2.5
MCHC (g/dL) 32.1 ± 3.0 33.2 ± 3.0 33.8 ± 3.0 32.9 ± 3.0 33.4 ± 3.0 34.0 ± 3.0
RDW-CV (%) 16.0 ± 3.0 15.5 ± 3.0 15.0 ± 3.0 14.5 ± 3.0 13.5 ± 3.0 13.0 ± 3.0
RDW-SD (fL) 35.5 ± 6.0 39.0 ± 6.0 41.0 ± 8.0 36.5 ± 6.0 39.5 ± 6.0 41.0 ± 8.0
PLT (x 109/L) 70 ± 20 252 ± 40 535 ± 60 67 ± 20 250 ± 40 527 ± 60
MPV (fL) 8.8 ± 3.0 8.2 ± 3.0 7.7 ± 3.0 8.4 ± 3.0 8.2 ± 3.0 8.0 ± 3.0
NIVEL 2 PARAMETROS
GRAN: Granulocitos
MID # (x 109/L) 0.7 ± 0.6 0.7 ± 0.7
HGB (g/dL) 13.6 ± 0.9 13.7 ± 0.9
WBC: Leucocitos
RBC (x 1012/L) 4.66 ± 0.24 4.63 ± 0.24
HCT (%) 41.0 ± 2.0 41.0 ± 2.0
MCV (fL) 88.0 ± 5.0 88.5 ± 5.0
MCH (pg) 29.2 ± 2.5 29.6 ± 2.5
MCHC (g/dL) 33.2 ± 3.0 33.4 ± 3.0
RDW-CV (%) 15.5 ± 3.0 13.5 ± 3.0
RDW-SD (fL) 39.0 ± 6.0 39.5 ± 6.0
PLT (x 109/L) 252 ± 40 250 ± 40
MPV (fL) 8.2 ± 3.0 8.2 ± 3.0
867022600 / 29B115 p. 2/6

Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
867022600 / 29B115 p. 3/6 UR151026
WL 19 Con
AA
APLICACIONES
867022600 / 30B0216 p. 1/6

VALORES ASIGNADOS
PARAMETRO
WBC (x 109/L) 2.0 ± 0.5 7.7 ± 1.0 20.6 ± 2.5 2.0 ± 0.5 7.9 ± 1.0 20.9 ± 2.5
LYMPH # (x 109/L) 1.1 ± 0.3 2.2 ± 0.7 2.7 ± 1.3 1.1 ± 0.3 2.3 ± 0.7 2.7 ± 1.3
MID # (x 109/L) 0.3 ± 0.2 0.7 ± 0.6 1.2 ± 1.0 0.3 ± 0.2 0.6 ± 0.6 1.1 ± 1.0
GRAN # (x 109/L) 0.6 ± 0.2 4.8 ± 0.7 16.7 ± 1.7 0.7 ± 0.3 4.9 ± 0.7 17.0 ± 1.7
LYMPH % (%) 53.0 ± 12.0 29.0 ± 8.0 13.0 ± 6.0 53.0 ± 12.0 29.5 ± 8.0 13.0 ± 6.0
MID % (%) 15.0 ± 8.0 9.0 ± 7.0 6.0 ± 5.0 14.0 ± 9.0 8.0 ± 7.0 5.5 ± 5.0
GRAN % (%) 32.0 ± 9.0 62.0 ± 8.0 81.0 ± 8.0 33.0 ± 10.0 62.5 ± 8.0 81.5 ± 8.0
HGB (g/dL) 6.1 ± 0.6 13.8 ± 0.9 18.7 ± 1.3 6.1 ± 0.6 13.8 ± 0.9 18.8 ± 1.3
RBC (x 1012/L) 2.56 ± 0.18 4.65 ± 0.24 5.74 ± 0.30 2.52 ± 0.18 4.62 ± 0.24 5.73 ± 0.30
HCT (%) 18.8 ± 1.5 41.2 ± 2.0 54.8 ± 2.4 18.6 ± 1.5 40.9 ± 2.0 55.0 ± 2.4
MCV (fL) 73.5 ± 5.0 88.5 ± 5.0 95.5 ± 5.0 74.0 ± 5.0 88.5 ± 5.0 96.0 ± 5.0
MCH (pg) 23.8 ± 2.7 29.7 ± 2.5 32.6 ± 2.5 24.2 ± 2.7 29.9 ± 2.5 32.8 ± 2.5
MCHC (g/dL) 32.4 ± 3.0 33.5 ± 3.0 34.1 ± 3.0 32.7 ± 3.0 33.8 ± 3.0 34.2 ± 3.0
RDW-CV (%) 16.5 ± 3.0 15.5 ± 3.0 15.0 ± 3.0 14.5 ± 3.0 13.5 ± 3.0 13.0 ± 3.0
RDW-SD (fL) 35.0 ± 6.0 39.5 ± 6.0 40.0 ± 8.0 35.0 ± 6.0 40.0 ± 6.0 41.0 ± 8.0
PLT (x 109/L) 76 ± 20 246 ± 40 495 ± 60 70 ± 20 242 ± 40 485 ± 60
MPV (fL) 8.2 ± 3.0 8.2 ± 3.0 8.0 ± 3.0 7.9 ± 3.0 8.2 ± 3.0 7.9 ± 3.0
NIVEL 2 PARAMETROS
GRAN: Granulocitos
MID # (x 109/L) 0.7 ± 0.6 0.6 ± 0.6
HGB (g/dL) 13.8 ± 0.9 13.8 ± 0.9
WBC: Leucocitos
RBC (x 1012/L) 4.65 ± 0.24 4.62 ± 0.24
HCT (%) 41.2 ± 2.0 40.9 ± 2.0
MCV (fL) 88.5 ± 5.0 88.5 ± 5.0
MCH (pg) 29.7 ± 2.5 29.9 ± 2.5
MCHC (g/dL) 33.5 ± 3.0 33.8 ± 3.0
RDW-CV (%) 15.5 ± 3.0 13.5 ± 3.0
RDW-SD (fL) 39.5 ± 6.0 40.0 ± 6.0
PLT (x 109/L) 246 ± 40 242 ± 40
MPV (fL) 8.2 ± 3.0 8.2 ± 3.0
867022600 / 30B0216 p. 2/6

Símbolos
C
M Elaborado por:
P
Xn

Europea Nocivo


Xi
Irritante
 No congelar
Calibr. Calibrador
b Control
F Riesgo biológico

b Control Positivo

Riobamba 2944
Wiener lab.
Bioquímica
867022600 / 30B0216 p. 3/6 UR160118
WL 19 E-Z Cleanser
C Para el lavado en analizadores hematológicos diferenciales
AA
WL 19 E-Z Cleanser AA es una solución enzimática de lim- Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
pieza para uso en analizadores hematológicos diferenciales reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
Wiener lab. Counter 19 y Wiener lab. Counter 19 CP.
C
WL 19 E-Z Cleanser AA: solución conteniendo 3,0-10 g/l de
enzima proteolítica, 3,0-5,0 g/l de cloruro de sodio y 1,0-4,0 g/l P Representante autorizado en la Comunidad Europea
de buffer fosfatos.
INSTRUCCIONES PARA SU USO Contenido suficiente para <n> ensayos

X
Para su uso, seguir las instrucciones indicadas en el manual
de operaciones del analizador. H Fecha de caducidad
PRECAUCIONES l Límite de temperatura (conservar a)

El Reactivo Provisto es para uso diagnóstico "in vitro".
No inhalar ni ingerir. En caso de inhalación o ingestión,  No congelar
consultar al médico.
R36/38: irrita los ojos y la piel. S26/28: en caso de contacto F Riesgo biológico
con la piel y los ojos, lávense inmediatamente con abundante
agua y acúdase a un médico. Volumen después de la reconstitución
Cont. Contenido
M Elaborado por:
Xn
WL 19 E-Z Cleanser AA: estable en refrigerador (2-10oC)
hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. Corrosivo / Caústico
Con el tiempo el reactivo puede desarrollar enturbiamiento
o cambio en su coloración que no afecta su funcionamiento. Xi
Irritante
Se recomienda mantener el envase cerrado y refrigerado
cuando no esté en uso. Descartar envases abiertos trans- i Consultar instrucciones de uso
curridos 60 días.
Calibr. Calibrador
PRESENTACION
- 100 ml (Cód. 1474513) b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
867022560 / 02 p. 1/2 UR091002
WL 19 Probe Cleanser
C Para el lavado en analizadores hematológicos diferenciales
AA
WL 19 Probe Cleanser AA es una solución alcalina de lim- Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
pieza para uso en analizadores hematológicos diferenciales reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
Wiener lab. Counter 19 y Wiener lab. Counter 19 CP.
C
WL 19 Probe Cleanser AA: solución conteniendo hipoclorito
de sodio < 100 g/l e hidróxido de sodio < 100 g/l. P Representante autorizado en la Comunidad Europea
Para su uso, seguir las instrucciones indicadas en el manual Contenido suficiente para <n> ensayos
X
de operaciones del analizador.
PRECAUCIONES
El Reactivo Provisto es para uso diagnóstico "in vitro". l Límite de temperatura (conservar a)
No inhalar ni ingerir. En caso de inhalación o ingestión,
consultar al médico.  No congelar
El reactivo es irritante. R36/38: irrita los ojos y la piel. S26/28:
en caso de contacto con la piel y los ojos, lávense inmedia- F Riesgo biológico
tamente con abundante agua y acúdase a un médico.
Cont. Contenido

ALMACENAMIENTO
Xn
WL 19 Probe Cleanser AA: estable a temperatura entre Nocivo
2-30oC hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
Se recomienda mantener el envase cerrado cuando no esté Corrosivo / Caústico
en uso. Descartar envases abiertos transcurridos 60 días.
Xi
Irritante
PRESENTACION
- frasco x 20 ml (Cód. 1474514) i Consultar instrucciones de uso
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo

Riobamba 2944
Bioquímica
Wiener lab.
867022550 / 01 p. 1/2 UR080811

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LINEA TURBITEST AA

SIGNIFICACION CLINICA si fueran capaces de transmitir infección.

REACTIVOS NO PROVISTOS CONDICIONES DE REACCION

METODO DE CONTROL DE CALIDAD

P Representante autorizado en la Comunidad

V Uso diagnóstico "in vitro"

X Contenido suficiente para <n> ensayos

i Consultar instrucciones de uso

l Límite de temperatura (conservar a)

Volumen después de la reconstitución

Cont. Contenido c Control Negativo

g Número de lote h Número de catálogo

M Wiener Laboratorios S.A.I.C.

SIGNIFICACION CLINICA MUESTRA

METODO DE CONTROL DE CALIDAD

LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO

P Representante autorizado en la Comunidad

V Uso diagnóstico "in vitro"

X Contenido suficiente para <n> ensayos

i Consultar instrucciones de uso

l Límite de temperatura (conservar a)

Volumen después de la reconstitución

Cont. Contenido c Control Negativo

g Número de lote h Número de catálogo

M Wiener Laboratorios S.A.I.C.

ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE M Elaborado por:

M Wiener Laboratorios S.A.I.C.

SIGNIFICACION CLINICA triglicéridos hasta 25 g/l ni hemoglobina hasta 1 g/dl.

REACTIVOS NO PROVISTOS CONDICIONES DE REACCION

ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE Reactivo A 800 ul

MUESTRA Reactivo B 120 ul

CONVERSION DE UNIDADES AL SISTEMA SI

LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO

P Representante autorizado en la Comunidad

V Uso diagnóstico "in vitro"

X Contenido suficiente para <n> ensayos

i Consultar instrucciones de uso

l Límite de temperatura (conservar a)

Volumen después de la reconstitución

Cont. Contenido c Control Negativo

g Número de lote h Número de catálogo

M Wiener Laboratorios S.A.I.C.

SIGNIFICACION CLINICA MUESTRA

FUNDAMENTOS DEL METODO CONDICIONES DE REACCION

METODO DE CONTROL DE CALIDAD PRESENTACION

Precisión total (n = 20)

P Representante autorizado en la Comunidad

V Uso diagnóstico "in vitro"

X Contenido suficiente para <n> ensayos

i Consultar instrucciones de uso

l Límite de temperatura (conservar a)

Volumen después de la reconstitución

Cont. Contenido c Control Negativo

g Número de lote h Número de catálogo

M Wiener Laboratorios S.A.I.C.

RE­AC­TI­VOS NO PRO­VIS­TOS PRE­SEN­TA­CION

INS­TRUC­CIO­NES PA­RA SU USO BI­BLIO­GRA­FIA

IN­DI­CIOS DE INES­TA­BI­LI­DAD O DE­TE­RIO­RO DE LOS

MA­TE­RIAL RE­QUE­RI­DO (no pro­vis­to)

P Representante autorizado en la Comunidad

V Uso diagnóstico "in vitro"

X Contenido suficiente para <n> ensayos

i Consultar instrucciones de uso

REACTIVOS NO PROVISTOS PRESENTACION

INSTRUCCIONES PARA SU USO BIBLIOGRAFIA

INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS

MATERIAL REQUERIDO (no provisto)

SIGNIFICACION CLINICA INSTRUCCIONES PARA SU USO

CALCULO DE LOS RESULTADOS BIBLIOGRAFIA

SIGNIFICACION CLINICA ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE