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Tema: ESTRUCTURA BACTERIANA

Docente: MSc. Vania Mallqui Brito

2017-II
II
I
ESTRUCTURA BACTERIANA
 Tamaño: 0,5 - 3µ.
 Morfología:
a. Microscópica
b. Macroscópica
ESTRUCTURA BACTERIANA
Elementos obligatorios:
 Pared celular
 Membrana citoplasmática
 Citoplasma
 Ribosomas
 Nucleoide

Elementos facultativos:
 Cápsula y glucocaliz
 Flagelos
 Pili
 Endosporas
 Inclusiones citoplasmáticas
 Plásmidos.
ESTRUCTURA BACTERIANA
1. Nucleoide
ADN doble cadena.
Plásmidos (ADN extracromosómicos).
2. Estructuras citoplasmáticas.
3. Envoltura celular:
a. Membrana celular.
b. Pared celular.
4. Cápsula y glucocáliz.
5. Flagelos.
6. Pilosidades (fimbrias).
7. Endosporas.
NUCLEOIDE
 Dos cadenas helicoidales asociado a proteínas. Haploides.
 Una molécula circular única y continua, algunas bacterias han
demostrado poseer más de un cromosoma ej. Vibrio cholerae y
Brucella melliltensis.

ESTRUCTURAS CITOPLASMATICAS
 Carece de mitocondrias y cloroplastos.
 Cuerpos inclusión (Eº o reservorios), ej. PHB ácido poli – β-
hidroxibutírico y glucógeno como fuentes de carbono.
 Magnetosomas (hierro magnetita).
 Vesícula de gas, MO acuáticos.
 Homólogos actina, funciones diversas, localizar proteínas en
célula.
 Homólogos diferentes actina y singulares citoesqueleto bacteriano,
determinan forma, división celular y agregación de cromosomas.
ENVOLTURA CELULAR
Membrana celular
Pared celular
Membrana Celular:
a. Estructura:
- Unidad de membrana.
- Fosfolípidos, ausencia de esteroles (excepto micoplasma).
- 200 tipos proteínas.
b. Función:
- Permeabilidad selectiva y transporte de solutos.
- Transporte de electrones y fosforilación oxidativa (aerobios).
- Excreción de exoenzimas hidrolíticas.
- Transporte de enzimas y moléculas que participan biosíntesis
ADN, polímeros pared celular y lípidos de membrana.
- Portar receptores y otras proteínas quimiotácticas y otros
sistemas sensoriales de transducción.
Membrana Celular
Membrana Celular - Funciones
1. Permeabilidad de transporte
Favor gradiente
Difusión simple Sin gasto ATP
a. T. pasivo Difusión facilitada O2, CO2, H2O

Transporte acoplado con iones


b. T. activo Transporte ABC

c. Translocación de grupo
d. Procesos especiales de transporte
2. Transporte de electrones y fosforilación oxidativa.
3. Excreción de exoenzimas hidrolíticas y patogenia de las
proteínas.
4. Funciones de biosíntesis: lípidos transportadores pared celular.
5. Sistemas quimiotácticos: sustancias atracción o repulsión.
Barrera hidrófoba impermeable a moléculas hidrofílicas.
Transporta nutrientes al interior y desechos al exterior.
Transporte acoplado con iones
• Gradiente iónico preestablecido:
Na y protones.
• Común aerobios.
• Los uniportadores transportan
sustrato independiente ion
acoplado.
• Los simportadores transporte
simultáneo de dos sustratos en
misma dirección por un solo
transportador ej. H+.
• Los antiportadores transporte
simultáneo de dos compuesto de
carga similar en dirección
opuesta por un transportador ej.
Na, H+.
Transporte ABC

• BGN transporte por proteínas de unión espacio periplasmático.


• BGP las proteínas de unión se encuentran fijas superficie externa de
la membrana.
• ATP abre poros membrana movimiento unidireccional hacia interior
(40% E. coli utiliza este mecanismo).
Translocación de grupo
• Metabolismo vectorial (carbohidratos).
• Fosforilación durante el transporte.

Procesos especiales de transporte


• El Fe nutriente esencial para la mayoría de MOs.
• Secretan sideróforos, quelación Fe y transporte a complejos
solubles.

 Pseudomona aeruginosa
 Escherichia coli
 Bacillus subtilis
 Yersinia pestis
 Vibrio cholerae
2. Transporte de electrones y fosforilación oxidativa
• Citrocromos, enzimas y componentes cadena respiratoria incluyen
deshidrogenasas ubican MC análogo funcional M. mitocondrial.
3. Excreción de exoenzimas hidrolíticas y patogenia de las
proteínas.
• BGP secretan directamente.
• BGN atraviezan ME.
• 6 vías secreción proteínas.
• Vía I y IV BGP Y BGN.
• Vía II, III, V y VI solo BGN
• Vía II y V proteínas asociadas Sec D, ATPasa, chaperona.
• I y III proteínas secretan directamente.
• II, proteínas tat atraviezan ME.
• III sistema dependiente de contacto, activa contacto hospedador
inyectando proteína tóxica.
• IV secreta toxinas polipeptídicas o complejos proteínas – ADN
entre bacterias o eucariota y bacteria.
Excreción de exoenzimas hidrolíticas
ENVOLTURA CELULAR
Pared Celular: Peptidoglucanos
BGP: - Ácido teicoico, lipoteicoico y teicurónico.
- Polisacáridos.

BGN: - Membrana externa.


- Lipopolisacáridos (LPS).
- Lipoproteínas.
- Espacio periplásmico.

P.C. BAR: Ceras (hidrocarbonos ramificados complejos),


llamado Ac. Micólico, hidrófoba confiere
resistencia a detergentes y ácidos.

Micoplasmas: No tienen pared celular.


Péptidoglucanos
 Mureína; formado por: N-
acetilglucosamina (NAG) y
ácido N-acetilmurámico
(NAM), enlaces β (1 - 4); corta
cadena de 4 aminoácidos se
une, a los restos de NAM.
 Se pueden establecer enlaces
peptídicos.
 aa poco frecuentes, D-alanina o
D-glutámico (las proteínas
siempre están constituidas por
L-aminoácidos) o el ácido
diaminopimélico (DAP).
BGP  Ác. Teicoico polialcoholes
(glicerofosfatos). Carga
negativa superficie celular.

 Ác. Teicurónicos polímeros


similares incluyen
carbohidratos en lugar de ac.
Fosfórico, se sintetizan
cuando hay limitación de
fósforo.
1. M.E:
BGN  Hoja externa LPS.
 Porinas (difusión pasiva).
2. LPS:
• Unidades repetidas Ag. O.
• Core
• Lípido A
• Tóxicos animales
«endotoxinas».
• Ag O especificidad
antigénica.
3. Lipoproteínas:
 Unen M. E con
peptidoglicano.
4. Espacio periplásmico:
 Proteínas fijadoras
superficie.
CÁPSULA Y GLUCOCALIZ
• Crecen en ambientes naturales.
• Bacillus anthracis es peptídica.
• No es vital, si se relaciona con virulencia. Streptococcus
pneumoniae y Haemophilus influenzae tipo b. La cápsula protege
de fagocitosis, implica producción de anticuerpos que se unan
específicamente a la cápsula facilitando la opsonización y la
fagocitosis.
• Capacidad antigénica producción de vacunas que estimulan la
formación de anticuerpos específicos. Ej. las vacunas: anti
neumocócica, anti Haemophilus influenzae tipo b y anti
meningocócica A, B y C.
• Ags. son útiles en clasificación e identificación de diferentes
bacterias, ej: Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae,
Neisseria meningitidis, etc.
FLAGELOS
• «Flagelina», helicoidales delgados y rígidos, responsables
movilidad, factor virulencia.
• El antígeno flagelar recibe el nombre de antígeno H. Las bacterias
flageladas reaccionan con antisueros específicos para flagelos,
provocando una aglutinación típica.
PILOSIDADES (fimbrias)
• «Pilinas». No vitales.
• Adherencia a receptores específicos y superficiales.
• Ej, cepas de Neisseria gonorrohoeae, se adhieren al epitelio uretral
del hombre o cérvix uterino de la mujer. E. coli capaces de causar
infección urinaria. E. coli enteropatógena permiten adherirse epitelio
intestinal, producir diarrea.
• Pilis sexuales, más largo y menor cantidad (conjugación).Una vez
unidas las bacterias los pilis sexuales se retraen, permitiendo que las
células se unan y pase el ADN de la donadora a la receptora.
ENDOSPORAS
• Se desarrollan dentro células vegetativas.
• Formadores esporas: Bacillus y Clostridium.
• Resistentes calor, desecación, radiación UV, ácidos, desinfectantes.
• Importancia en microbiología alimentaria, industrial y médica.
• La resistencia al calor se produce por: estabilización del ADN por
dipicolinato cálcico y proteínas solubles en ácido, deshidratación
del protoplasto y mayor estabilidad de las proteínas celulares en
bacterias adaptadas a crecer a Tº elevadas, etc.
• La esporogénesis inicia cuando hay escasos nutrientes.
• El factor específico que regula la iniciación de la esporulación es el
trifosfato de guanosina (GTP).
• La transformación de esporas inactivas en células vegetativas es
casi tan compleja como la esporulación. Se producen tres fases:
activación, germinación y crecimiento.
Esquema del proceso de esporulación
Preparación de muestras para microscopía
 Observación en fresco (SS).
 Morfología por tinción.
 Antes de teñir, hay que fijar.
 Antes de fijar hay que extender.
 Fijación método físico.
TINCIONES
Solución acuosa o alcohólica
Simples (mordiente).

Tinción de Gram.
Diferenciales Tinción de ácido –alcohol resistencia.

Tinción negativa de cápsulas.


Especiales Tinción de esporas.
Tinción de flagelos.

Tinción
1884 Hans Christian Gram.
de Gram
 Bacterias Gram-positivas y Gram-negativas.
 Tinción primaria, mordiente, decolora con alcohol-acetona y
colorante de contraste.
Tinción de ácido-alcohol resistencia
Identificar Mycobacterium y Actinocycetes; alto contenido lípidos y
ác. Micólicos.
PC, ceras.
Fucsina fenicada (mordiente) en calor facilita penetración y
retención del colorante.
BAAR retienen el color rojo, el carbolfucsina es soluble en ceras de
PC. Colorante de contraste azul de metileno.
Mycobacterium tuberculosis (Ziehl-Neelsen)
Tinción negativa de cápsulas
 Virulencia.
 Tinción complicada por la solubilidad de la cápsula.
 Solución coloidal (tinta china o nigrosina) y safranina.
 Las cápsulas no toman el colorante biológico y aparecen como un
halo que rodea a cada célula teñida “tinción negativa” (células
sin teñir).
Tinción de esporas
 Son refráctiles.
 Tinción Schaeffer-Fulton, colorante primario verde de malaquita
en calor penetra pared endospora; colorante de contraste safranina.
 Endosporas color verde dentro de células rojas – rosadas.
Tinción de flagelos
 Motilidad.
 Tinción mordiente y carbolfucsina para engrosar el diámetro
flagelos.
 Número y disposición flagelos para identificar.

Bacillus cereus. Flagelos. CDC


Precauciones
 Los métodos de tinción son de gran utilidad, pero deben usarse
siempre con precaución, pueden conducir a errores.

 Las moléculas de colorante forman en ocasiones precipitados o


agregados que parecen estructuras celulares auténticas, tales
estructuras se denominan artefactos deben tomarse
precauciones para tener la seguridad de que no nos estamos
equivocando al creer que un artefacto es una estructura
realmente existente.
¡Gracias!