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RECUENTO DE COLONIAS EN PLACA

Es un método muy utilizado cuando se necesita determinar el tamaño de la población


microbiana de una muestra. El recuento de microorganismos, en este caso, se basa en que
cada uno desarrollará una colonia visible. Pero debido a que una muestra no es totalmente
homogénea con respecto a su composición microbiológica, es posible que una colonia se
origine de un microorganismo o de cientos de ellos, dando en este último caso un recuento
menor del real. También es posible que muchas de las bacterias presentes en la muestra no
puedan crecer en las condiciones elegidas (pH, temperatura, medio de cultivo, tiempo, etc.).
En este caso el recuento también será inferior al real. Lo que sí se sabe es que cada colonia
observada se formó a partir de por lo menos un microorganismo. Esta es una condición
necesaria y suficiente. Entonces la colonia es considera una unidad formadora de colonia (ufc)
a los efectos de los cálculos. Se admite, por lo tanto, que, en los métodos de recuento de
microorganismos vivos, son inevitables los errores. Especialmente cuando se examinan
muestras pequeñas, es posible cometer grandes errores.

Detección de presencia de Salmonella:

Luego de homogenizar 25 g de muestra en 225 ml de agua peptonada, se incuba por 12 horas


a 37º C. Pasado este tiempo, se adiciona 0.1 ml de la solución al 1-2 test y se incuba por un
periodo aproximado de 14 a 30 horas.

Los resultados son expresados a través de presencia o ausencia de Salmonella.

Recuento de Staphyloccocus Aureus:

Luego de realizadas las diluciones pertinentes, procedemos a la inoculación por esparcimiento


de 0.1 ml para cada medio de cultivo Baird Parker con yema de huevo adicionada (debido a
que este microrganismo genera polisacáridos los cuales provendrán a partir de la yema), de
acuerdo con la Norma ISO 6888-1: 1999.

A partir de esto, incubamos las placas en posición invertida (debido a que esa posición
favorece el crecimiento de la bacteria) a 37º C durante 48 horas.

Luego del periodo de incubación, solo se seleccionan las placas que tienen un numero contable
de colonias y se procede a realizar el conteo microbiológico. En las colonias típicas de
Staphyloccocus (negras) se comprobó la presencia o ausencia de coagulasa a través de
inoculación en plasma de conejo.

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