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LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA
ASIGNATURA: MICROBIOLOGIA
ESTUDIANTES:
QUINTO “A”
ESMERALDAS – ECUADOR
LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA
MEDIDAS DE SEGUEIDAD
NIVEL DE BIOSEGURIDAD
CONCEPTO:
Es la disciplina que se ocupa de la prevención y control del riesgo biológico al que están expuestas,
directa o indirectamente las personas, los animales y las plantas como consecuencia de accidentes
o negligencias, en los laboratorios de microbiología, clínicos, etc. Así como en la industria
biotecnológica y el trabajo con organismo transgénicos.
INTRODUCCION
Los profesionales y técnicos de la salud que laboran en unidades hospitalarias, policlínicos, etc. o
en centros de investigaciones biométricas, están expuestos, por la naturaleza de su trabajo, a
diversos riesgos profesionales, que pueden clasificarse según su origen en:
Riesgos físicos
Riesgos químicos
Originados por el manejo con sustancias inflamables, corrosivas, toxicas, cancerígenas, etc.
Riesgos biológicos
Los accidentes imprevistos y el deficiente desempeño del personal ocupacionalmente expuesto, son
las principales causas del daño individual que bajo determinadas circunstancias, puede extenderse
al entorno hospitalario o a la comunidad, ocasionando diversos grados de afectaciones médicas,
veterinarias o fitosanitarias con el consiguiente perjuicio económico o ecológico.
r
PRINCIPIOS BASICOS
Los principios básicos, regidos por las normas de bioseguridad para la prevención y control del riesgo
biológico son los siguientes:
Para dar cumplimiento a estos principios se establece en el reglamento un código práctico, con las
indicaciones y regulaciones a cumplimentar por el personal de laboratorio, que serán expuestas
resumidamente a continuación.
a) Regulaciones básicas
- aplicar rigurosamente las medidas de asepsias y antisepsia en todas las ocasiones en que la acción
a realizar así lo requiera.
- los instrumentos de siembre de platino o nicron, se deben esterilizar a la llama del mechero, antes
y después de su uso. A los efectos de evitar salpicaduras del material residual empleado, el
instrumento debe introducirse gradualmente en la llama del mechero hasta ponerse al rojo vivo
-los frotis coloreados, asi como los portaobjetos, cubreobjetos y pipetas utilizadas se depositaran
en recipientes apropiados que contengan solución desinfectante.
- los procederes técnicos han de realizar de manera que se evite en lo posible la formación de
acrosoles siendo las causas mas frecuentes las siguientes:
- flameos de instrumentos de siembra contaminadas con productos biológicos infecciosos,
-pipeteo energético
- la caída brusca de las placas o tubos de cultivos, aun cuando no llegaran a romperse.
Los tubos de ensayo que contengan cultivos, deben mantenerse siempre en posición vertical en una
gradilla. Nunca dejarlos en posición horizontal, ya que el agua de condensación puede arrastrar los
gérmenes del cultivo, humedecer los tapones de algodón y contaminar la mesa de trabajo.
Los cultivos en placas deben mantenerse con la tapa hacia abajo en el interior de la incubadora o
sobre la mesa de trabajo
- Mantener el laboratorio escrupulosamente limpio, retirando del mismo material que no tenga
relacion con el trabajo.
-Las superficies de las mesetas se descontaminaran al menos una vez al dia y en caso de
derramamiento de sustancia potencialmente peligrosas de inmediato
- En las zonas de trabajo del laboratorio, no comer, beber, fumar, guardar alimentos ni aplicar
cosméticos, realizando estas actividades solamente en las áreas autorizadas
- Lavarse las mano después de haber manipulado pacientes, material contaminadas, o animales y
al retirarse del laboratorio.
- Utilizar bata sanitaria u otras prendas apropiadas cuando la envergadura del trabajo asi lo requiera,
como batones, botas, naso bucos, etc.
- Emplear guantes quirúrgicos en todo trabajo que entrañe contacto con sangre, material infeccioso
o animales infectados. Los guantes se deben retirar asépticamente y ser esterilizados en autoclave.
-Siempre que sea necesario, proteger los ojos y la cara de salpicaduras e impactos mediante gafas
de seguridad, viseras, pantalla facial u otros dispositivos de protección. Cuando la naturaleza del
trabajo a realizar así lo requiera recurrir al empleo de campañas químicas, gabinetes, o cabinas de
seguridad.
EL DISEÑO ADECUADO DE LOS LABORATORIOS
2.) Las paredes, en especial la parte inferior, el piso y el techo, deben ser lisos, sin grietas o ralladuras
donde se pueda acumular la suciedad y el polvo que dificulten su limpieza y desinsectación
3.) casi todas las salas o cubículos del laboratorio dispondrán de mesetas, generalmente empotradas
en las paredes o instaladas en el centro del local.
Las mesetas deben ser construidas con acero inoxidable u otro material similar
4-)Las ventanas tienen que estar a unos 30 cm, mínimos, por encima de la altura de las mesas para
evitar la exposición directa del aire y el polvo procedente del exterior.
5-)El laboratorio dispondrá de instalaciones de: agua, electricidad, aire y gas. El grado de iluminación
y ventilación se debe adecuar a las normas establecidas para locales cerrados o abiertos, atendiendo
a la cantidad de personas previstas, que estarían presentes en un turno de trabajo.
Caracteres estructurales
- cuarto de siembra
La sala de recepción y archivo, debe estar a la entrada de la edificación y el resto de las secciones
de trabajo, se ubicaran estratégicamente en el interior del laboratorio, de menor a mayor nivel de
contaminación (áreas bio limpias o bio sucias) con esta estrategia, los pacientes, familiares y
visitantes no tendrá acceso a las áreas de riesgo, siendo limitado para el resto del personal del
laboratorio y otros visitantes, no relacionados con la actividad que se realiza en esas secciones de
trabajo, todo lo cual esta encaminado a reducir la probabilidad de posibles propagaciones de
agentes patógenos por todo el laboratorio y la comunidad
En esta sección, un personal de oficina entrenado, recepciona las ordenes de análisis entregadas
por los propios pacientes o enviadas desde las salas de la unidad hospitalaria, en caso de pacientes
encamados, o procedentes de otras unidades de salud vinculadas al centro, donde se procederá a
asentar en el libro de registro de entrada, el número, que consecutivamente le corresponde a esa
solicitud, la fecha de registro, los datos del paciente(nombre y dos apellidos y numero de historia
clínica)la procedencia (consulta externa sala donde se encuentra hospitalizado o unidad de salud
que hace la solicitud), y el tipo de investigación que se indica.
Todas y cada tipo de investigación y llevan un control estadístico establecido por los programas de
enfermedades de trasmisión
En este local, el laboratorista dispondrá de los recursos necesario (guantes, hisopos estériles,
instrumentos de siembra, mechero, etc.) para la toma de las diferentes muestras (exudado,
faríngeo, óptico, conjuntival, etc.) debiendo contar con la privacidad requerida y las condiciones
necesarias, para la toma del exudado vaginal, uretral, etc. Tales como parabanes, camillas
ginecológicas, etc.)
Sala principal de trabajo esta sala puede contar de uno o varios cubículos, constituyendo cada uno
de ellos, una sección de trabajo independiente, en la que se realizan determinadas investigaciones,
por ejemplo: uro cultivo, coprocultivo, misceláneas, tuberculosis, parasitología, serología, etc. en
algunas unidades, particularmente, centros municipales o provinciales, pueden existir otras
secciones especializadas para la investigación de lepra, leptospirosis, etc. cada sección contara con
los recursos necesarios para la realización de esas investigaciones específicas, tales como :
preparación y cultivo de las muestra, tinciones, observaciones microscópicas, pruebas de
identificación, etc. estas secciones de trabajo deben estar climatizados.
CUARTO DE SIEMBRA
Generalmente los laboratorios pequeños que disponen de una sala principal es un único local tienen
anexado un pequeño cubículo que es donde radica el cuarto de siembra. Este cuarto está provisto
de mesetas y de todos los materiales e instrumentos para la realización de siembras, resiembras y
de aquellas actividades que requieran de una estricta asepsia, así como de una lámpara de luz
ultravioleta para la esterilización del medio ambiente, o la superficie del inmueble y el mobiliario.
Este local estará equipado con balanzas, baño de Maria, potenciómetro, refrigerador, etc., asi como
de la cristalería y otros accesorios para estos fines.
Este local se destina para la realización de diversas actividades, entre las que se encuentran las
siguientes, limpieza y desinfección de la cristalería y otros materiales.
El diseño inicial de un laboratorio tiene tres etapas sencillas: La ubicación, el dimensionado del
laboratorio y la distribución interior de las diversas áreas. Sin embargo, en cada una de estas tres
etapas siempre debe de estar presente la tipología del laboratorio, realizar cada una de las tres
etapas sin considerar la tipología del laboratorio puede llevar a diseñar un laboratorio que, en el
futuro, tendrá graves problemas de confortabilidad laboral, de seguridad tanto interna, para las
personas presentes en el laboratorio, como para la seguridad en el exterior del laboratorio. La
ubicación de un laboratorio es la primera etapa a considerar, junto con la tipología del laboratorio.
Se ha de considerar si el laboratorio es una empresa propia o es una entidad o departamento dentro
de otra empresa (Guardiana et al., 1994). Si es el laboratorio es una empresa propia se ha de pensar
en si la ubicación ha de ser en una zona industrial o en un área urbana, pues las condiciones de
seguridad serán muy diferentes en cada caso. Así, no es lo mismo ubicar un laboratorio biológico en
una zona urbana que en una zona industrial. También es diferente las condiciones de seguridad de
un laboratorio en un edificio independiente que en un edificio donde, además del laboratorio, hay
oficinas, viviendas particulares, etc. En cuyo caso las condiciones de seguridad para proteger a estas
han de ser tenidas en consideración durante la etapa de diseño. Los laboratorios que forman parte
de una empresa, como pueden ser los laboratorios de control, por ejemplo, su ubicación debe
hacerse en función de parámetros asociados a la eficiencia y eficacia de su actividad. Así, su
ubicación también ha de tener en cuenta la distancia a los puntos de control existentes en los
procesos productivos, de las características de vida asociadas a las muestras a analizar, etc. Cuando
son laboratorios de investigación y desarrollo, dentro de una empresa, la ubicación ha de tener en
cuenta las condiciones asociadas a la seguridad de la información y conocimiento que se genera en
dicho laboratorio.
La etapa de dimensionado del laboratorio va seguida de la etapa de distribución de su interior. Esta
etapa que puede parecer sencilla, no lo es si la asociamos con el tipo de laboratorio y por ello
adquiere gran relevancia, sobre todo, en aquellos laboratorios en donde la contaminación de las
personas que trabajan en el puede ser un aspecto de seguridad relevante. En estos casos, la
distribución de las zonas de vestuarios, aseos, duchas y zonas de descontaminación, con respecto a
la zona de trabajo debe de ser prioritaria en la etapa de diseño. El conocimiento del tipo de
laboratorio va a obligar al diseñador a pensar en la adecuada distribución de las diferentes áreas de
trabajo. Si es un laboratorio de control, ya sea de calidad o de procesos productivos, su diseño puede
ser fácil si se puede visitar otro laboratorio de similar actividad. Sin embargo, un laboratorio
dedicado a la investigación siempre va a ser un laboratorio en constante evolución con rediseños de
espacio y con entrada de nuevos equipos. Por lo que un acertado diseño inicial y una generosidad
de espacios van a permitir que el laboratorio vaya adaptándose a los nuevos requerimientos sin ver
mermado un diseño ergonómico inicial, haciendo de él un espacio apto para realizar un trabajo
seguro
Una última etapa en el diseño de un laboratorio debe de tener en consideración, de forma conjunta,
tanto la ubicación como las necesidades espaciales para mobiliario y equipamiento, además de los
requerimientos espaciales y de seguridad en el trabajo. Por ello, el replanteamiento inicial del
problema de diseño, ahora que se conocen las necesidades de cada etapa, puede ayudar a
contemplar el laboratorio como una entidad global y poder dar forma final al diseño.
TECNICA ESTERIL
Para que técnicos de laboratorio de Microbiología obtener resultados de calidad, deben utilizar
técnicas estériles adecuadas. Muchas pruebas que los técnicos usan son muy sensibles y pueden
detectar bacterias ambientales si entran en contacto con la máquina de prueba o los medios de
comunicación. Por lo tanto, una característica fundamental del proceso de laboratorio es tener
técnicos de laboratorio esterilizar todas las herramientas y ejercer gran precaución para evitar la
introducción de microbios contaminantes en el sistema.
EQUIPO TECNICO
NORMALIZACION
Para asegurar que los resultados son confiables e interpretativo, laboratorios de Microbiología
conservan protocolos precisos. Estos protocolos especifican cómo técnicos deben realizar una
prueba determinada. Técnicos también meticulosamente registran datos y detalles sobre
experimentaciones en los cuadernos de laboratorio. Tener protocolos y mantener cuadernos de
laboratorio son parte del procedimiento operativo estándar para los técnicos de laboratorio
FUNCION
Laboratorios de Microbiología tienen diversas funciones, pero todas giran en torno a estudiar
microbios. Laboratorios de Microbiología especializados proporcionan también ayuda en el ámbito
de la salud pública mediante el estudio de resistencia a los antimicrobianos y los microbios con
potencial para convertirse en agentes del terror. Algunos laboratorios de Microbiología ayudar a
desarrollar nuevas herramientas y métodos para el estudio de microbios.
TABLA DE SIMBOLOS DE RIESGO Y SEGURIDAD
Peligro: Estos productos provocan casi siempre lesiones graves o incluso la muerte, sea por
inhalación como por ingestión o por contacto con la piel. Precauciones: Evitar absolutamente todo
contacto con el cuerpo. Ejemplos: Trióxido de arsénico, cloruro mercúrico.
SUSTANCIAS NOCIVAS
SUSTANCIAS CORROSIVAS
SUSTANCIAS IRRITANTES
Peligro: Los productos que llevan este símbolo pueden irritar la piel, ojos y
vías respiratorias. Precauciones: No respirar vapores de estos productos y
evitar el contacto con la piel y los ojos. Ejemplos: Amoníaco.
SUSTANCIAS EXPLOSIVAS
SUSTANCIAS COMBURENTES
Tienen forma triangular y el pictograma negro sobre fondo amarillo. Las que con mayor
frecuencia se utilizan son:
o Riesgo eléctrico. Esta señal debe situarse en todos los armarios y
cuadros eléctricos del laboratorio.
De forma redonda con pictograma negro sobre fondo blanco. Presentan el borde del contorno
y una banda transversal descendente de izquierda a derecha de color rojo, formando ésta con
la horizontal un ángulo de 45º.
o Prohibición de fumar y de encender fuego. Siempre
que en el laboratorio se utilicen materiales inflamables
deberá emplazarse la señal que indica expresamente la
citada prohibición.
Otras señales
En función de las características del local y teniendo en cuenta sus riesgos específicos,
los laboratorios de biotecnología y de tipo biológico deben exhibir aquellas señales que
avisen de la existencia de tales riesgos.
Conviene recordar también la obligatoriedad de señalizar las salidas de emergencia y
elementos de primeros auxilios (botiquín, duchas de emergencia, lavaojos, etc.).
Por último, otra señalización no menos importante es aquella que permite identificar las
tuberías por el color con que están pintadas, en función del fluido por ellas transportado, a
saber:
Agua Verde
Aire Azul
Gas Amarillo
Vacío Gris
Comburentes Irritantes
Inflamables Mutágenos
Nocivos
Para facilitar al usuario la identificación de estas sustancias, el Reglamento ha previsto la obligatoriedad de poner en
el etiquetado unos símbolos (pictogramas) dibujados en negro sobre fondo amarillo-naranja, que representan la
peligrosidad de cada tipo de productos.
Acompañando a los símbolos, se incluyen las indicaciones de peligro pertinentes, así como la mención de los riesgos
específicos en forma de frases "R" y de consejos de prudencia o frases "S".
Funciónes de un laboratorio de microbiología
El laboratorio de microbiología cumple con dos funciones importantes:
aerosoles.
- Los derrames y accidentes deben ser informados inmediatamente al Supervisor y al Jefe del
Laboratorio y hacerse constar por escrito.
- Nadie podrá trabajar en el área de tuberculosis con una prueba de Mantoux negativa.
- Está rigurosamente prohibido pipetear con la boca. Se realizará pipeteo automático con
material adecuado y cada trabajador será instruido para manejarlo debidamente.
- Nunca se debe volver a poner la capucha a las agujas y éstas no deben ser torcidas ni
separadas de la jeringa.
- Las agujas y jeringas usadas, así como los bisturís, deben ser desechados sólo en
contenedores especiales destinados a este propósito.
CRISTALERIA UTILIZADA
Erlenmeyer. - son recipientes de forma cónica y fondo plano, se caracterizan por tener un
diámetro 3 o 5 veces mayor en su porción inferior con respecto a su porción superior, pueden
emplearse para la preparación de diferentes reactivos, están diseñados para la preparación de
compuestos que requieren ser sometidos al calor. Los más empleados son de 100, 250, 300,
500 y 1000ml.
Vidrio reloj. - tiene forma circular y cóncava de aspecto transparentes, se utiliza para
efectuar pesadas de productos sólidos con excepción de aquellos que son higroscópicos.
Láminas portaobjetos. - son planas delgadas y lisas, de aspecto transparente, miden 7.5cm
de largo por 2.5 cm de ancho, se utilizan para colocar muestras que serán observadas al
microscopio.
Láminas excavadas. - son similares a las láminas de portaobjetos ordinarios con la
diferencia que se utilizan para ver si la bacteria en estudio es móvil o no.
Láminas cubre objetos. - son empleadas para cubrir la muestra o las preparaciones que han
sido colocadas previamente en la lámina portaobjeto.
CRISTALERÍA DE MEDICIÓN. -
Pipetas. - Son tubos de vidrio rectos, de longitud y grosor variable, tiene su extremo inferior
ligeramente cónico, están graduadas entre 1, 2, 5, y 10 ml. Se utilizan para medir y o transferir
volúmenes exactos de líquidos.
Probetas. - son recipientes cilíndricos y alargado de vidrio, de diámetro y tamaño variable
con una base de fondo plano, los más utilizados en laboratorio de microbiología están
comprendidos en el rango de 50 y 1000ml, presenta un pico para verter fácilmente el líquido,
tienen marcada su capacidad volumétrica y la temperatura que puede soportar y una escala
graduada.
Beaker. - son recipientes transparentes e incoloros que sirven para medir volúmenes más
pequeños.
Matraces. - son frascos de vidrio incoloro y transparentes que tiene una porción superior en
forma de un tubo fino y cilíndrico y alargado, la parte inferior piriforme con fondo plano, lo
que permite colocarlos en forma vertical. Se emplea para preparar disoluciones que requieren
exactitud.
MATERIALES DE PORCELANA
Cápsulas.- se utilizan regularmente como recipientes de disoluciones que van a ser sometidas
a una medición de PH o para colocar medios de cultivos que se pretenden pesar.
MATERIALES DE PORCELANA
Cápsulas.- se utilizan regularmente como recipientes de disoluciones que van a ser sometidas
a una medición de PH o para colocar medios de cultivos que se pretenden pesar.
Morteros. - se utilizan para triturar compuestos sólidos con ayuda del mazo.
HORNO PASTEUR:
Emplea altas temperaturas (160-180)°C durante un tiempo prolongado entre dos a tres horas,
se usa para esterilizar vidrio y metales, actúa desnaturalizando las proteínas y
secundariamente oxidando los compuestos celulares.
ESTUFA O INCUBADORA.- es una cámara de temperatura controlada para cultivos de
microorganismos, se utiliza para facilitar el desarrollo de los microorganismos a su
temperatura óptima de crecimiento generalmente (35-37)
REFRIGERADORAS:
En microbiología, los científicos utilizan refrigeradores para crear un entorno para replicar
células y para llevar a cabo experimentos en algunas de éstas para determinar cómo es que
las afectas las bacterias u otros microorganismos. Se utilizan para el almacenamiento de las
células para su uso posterior, evitar el crecimiento excesivo o reducir la actividad celular
CENTRÍFUGA
Aparato que aplica sobre los tubos una fuerza centrífuga lo que permite la separación de los
distintos componentes de la muestra mediante la precipitación de los distintos componentes
de la muestra mediante la precipitación en el fondo de los tubos de las partículas en
suspensión.
BAÑO MARÍA
Es un método empleado en el laboratorio para conferir temperatura uniforme a una sustancia
líquida o sólida o para calentarla lentamente, sumergiendo el recipiente que la contiene en
otro mayor con agua que se lleva en ebullición, el concepto fundamental de baño implica el
calentamiento indirecto o por convección térmica.
BALANZA DIGITAL
Se emplean para medir el peso o la masa de una sustancia, se pueden medir los reactivos, las
muestras.
BALANZA DIGITAL
Se emplean para medir el peso o la masa de una sustancia, se pueden medir los reactivos, las
muestras.
BALANZA DIGITAL
Se emplean para medir el peso o la masa de una sustancia, se pueden medir los reactivos, las
muestras.
ESTERILIZADOR:
Se utiliza para esterilizar por medio de calor seco materiales como, vidrio, porcelana y
materiales metálicos.
OZONO
Es un generador de ozono para desinfección y esterilización de agua, envases, utensilios,
alimentos, en espacios cerrador puede purificar el, esterilizar y oxigenar el de ese espacio.
CAMARA DE NEUBAUER
Es un instrumento utilizado para realizar el recuento de células en un medio líquido que puede
ser un cultivo celular, sangre, orina, liquido cefalorraquídeo
Se introduce el líquido a contar, al que generalmente se ha sometido a una dilución previa
con un diluyente, por capilaridad entre la cámara y el cubre cámara, puesto que tiene dos
zonas permite hacer dos recuentos.
La pureza de los reactivos es fundamental para la exactitud que se obtiene en cualquier análisis. En
el laboratorio se dispone de distintos tipos de reactivos (sólidos, líquidos o disoluciones preparadas)
tal y como se comercializan.
Sólidos
Líquidos
Disoluciones preparadas
CLASIFICACIÓN
• Reactivos para análisis (PA): Son aquellos cuyo contenido en impurezas no rebasa el número
mínimo de sustancias determinables por el método que se utilice.
• Reactivos purísimos: Son reactivos con un mayor grado de pureza que los reactivos “para
análisis”.
• Reactivos especiales: Son reactivos con calidades específicas para algunas técnicas analíticas,
como cromatografía líquida (HPLC), espectrofotometría (UV).
Hay reactivos que tienen características y usos específicos como los reactivos (calidad patrón
primario), que se emplean en las técnicas volumétricas, o los patrones de referencia.
DIAGNOSTICADORES
CATEGORÍA III
LINKOGRAFIA
https://www.slideshare.net/Tachi2893/laboratorio-de-microbiologia
http://campus.usal.es/~micromed/Practicas_odontologia/unidades/labv/LabMicro/practica1.ht
ml
http://www.chlaep.org.uy/pdf/normas_de_bioseguridad.pdf